MINISTERUL EDUCATIEI AL REPUBLICII MOLDOVA

Universitatea Tehnic a Moldovei

Catedra

Microelectronica si dispozitive semiconductoare

Lucare practica Nr4

la Biofizica tema

Fenomene osmotice celulare

A efectuat:

st.gr.ISBM 091 Cocalea Victor

A verificat:

lector superior Cojocaru Ion

2012

Scopul lucrrii : prezentarea aspectelor teoretice privind presiunea osmotic, studiul dispozitivelor pentru determinarea presiunii osmotice, evidenierea fenomenelor celulare, dependente de osmolaritatea mediului, evaluarea dimensiunilor celulare, familiarizarea cu importana osmozei n practica medical.

Consideraii teoretice : Membranele care permit trecerea moleculelor de solvent, ns nu permit trecerea moleculelor substanei dizolvate (solvitului) se numesc semipermiabile. Admitem c o astfel de membran separ dou compartimente cu soluii de concentraii diferite. Datorit micrilor de agitaie termic va avea loc difuzia solventului din compartimentul cu soluia mai diluat ctre cel cu soluia mai concentrat. Acest tip de difuzie se numete osmoz. Considernd cazul n care membrana semipermeabil separ solventul pur de soluie, solventul tinde s se deplaseze spre soluie. Presiunea necesar pentru a mpedica transportul solventului ctre soluie poart denumirea de presiune osmotic a soluiei. Osmoza reprezint un fenomen de difuzie selectiv, ca urmare a existenei unei membrane selective. Prin urmare pentru a msura presiunea osmotic a unei soluii e necesar s punem soluia n contact cu solventul pur printr-o membran semipermeabil i s aplicm o presiune asupra soluiei pentru a mpedica osmoza. Organismele vii conin ap n proporii de 50-90 % din greutatea lor total. n ap se afl dizolvate diferite substane, alctuind o anumit soluie. Membranele celulelor vii, fiind semipermeabile i selective las s treac apa i diferite substane n funcie de necesitile metabolice. Chiar n cazul concentraiilor mici, presiunea osmotic poate primi valori eseniale. n diverse celule de provinien vegetal valorile ei pot fi de 5-20 atmosfere, asigurnd ptrunderea apei din sol la nlimi mari. Aciunea presiunii osmotice o simt nottorii, cnd deschid ochii sub ap (mai ales n ap dulce), presiunea intraocular se mrete din cauza ptrunderii apei prin cornee. Legitile la care se supune presiunea osmotic n mare msur confirm c ea este similar presiunii gazelor perfecte. Legea concentraiei Presiunea osmotic Pos a unei soluii diluate la temperatura constant este direct proporional cu concentraia molar CM ;

Pos KT C M
unde KT este o constant care se exprim prin N m / mol ; - Legea temperaturii Presiunea osmotic Pos a unei soluii diluate la concentraie constant este direct proporional cu temperatura absolut T :

Pos K CT
unde K C este o constant care se exprim n N m-2/ K ; Legea lui Vant Hoff Presiunea osmotic nu depinde nici de natura solventului, nici de natura substanei dizolvate, depinznd numai de numrul de particule ( molecule sau ioni ) n unitatea de volum :

PosV RT
unde V este volumul ocupat de soluie , R constanta universal a gazelor , T temperatura absolut , numrul de moli a substanei . Din aceast relaie obinem :

Pos

RT C M RT V

unde CM este concentraia molar. Pentru un amestec de soluii se confirm legea lui Dalton conform creia presiunea osmotic total este egal cu suma presiunilor osmotice a fiecrei soluii n parte, innd cont c fiecare substan dizolvat i are presiunea osmotic proprie, ca i cum s-ar afla singur n ntrega cantitate de solvent. La temperaturi i concentraii molare egale, presiunea osmotic a dou soluii diferite, care au acelai solvent, este aceiai. Aceste soluii se numesc izotonice. Mediul cu presiunea osmotic mai mic, n raport cu un alt mediu, se numete hipoton, iar cu presiunea osmotic mai mare este hiperton. Soluiile aduse n contact, prin intermediul unei membrane semipermeabile, dau natere unui flux de solvent, orientat ntotdeauna spre mediul hipertonic. Pentru prima dat fenomenul de osmoz a fost observat de Noilet n 1748. Studiul amnunit i aparine lui Dutrochet. Dispozitvele de determinare a presiunii osmotice : Dispozitivele utilizate pentru evidenierea i msurarea presiunii osmotice se numesc osmometre , n figura de mai jos este reprezentat osmometrul Dutrochet, confecionat dintr-un vas de sticl, aj crui fund este nlocuit cu o membran semipermeabil(vezic urinar de porc sau celofan) . n partea superioar vasul se prelungete cu un tub cu diametrul mic, situat pe un cadran gradat n milimetri. n osmometrul se introduce o soluie de zahr pn la nivelul inferior al tubului vertical i se scufund ntr un vas cu ap distilat, care trebuie s fie la acelai nivel cu al soluiei din interior. Lichidul din vasul interior va urca ncet n tubul capilar. nlimea maxim a coloanei deternin presiunea osmotic a soluiei. Deplasarea solventului ctre soluie nceteaz cnd presiunea hidrostatic, aprut n urma denivelrii cu << h >>, este egal cu presiunea osmotic a soluiei.

Pos gh
Exist i o serie de metode indirecte de msurare a presiunii osmotice, bazate pe procedee de determinare a concentraiei molare a soluiilor, dup care se calculeaz presiunea osmotic. n biologie cea mai utilizat metod este crioscopia (concentraia molar se determin dup punctul de solidificare al soluiei). Coborrea punctului de solidificare al unei soluii este proporional cu numrul de molecule dizolvate n unitate de voluma a ei.

t t0 t1 KC M
unde t0 - temperatura de congelare a solventului pur ; t1 - temperatura de congelare a soluiei. K constanta caracterisitic solventului. Aceasta reprezint legea lui Rault. De unde presiunea osmotic este proporional cu valoarea concentraiei :

Pos

RT t K

Fig.1

osmometrul Dutrochet

Modul de lucru : - n cele 3 vase Petri se toarn cte 20 ml respectiv ap distilat, soluie NaCl izotonic i soluie NaCl hipertonic. n fiecare vas Petri se pun cteva frunzulie de alg. Se las astfel 30 de min , dup care se examineaz la microscop cte o frunzuli din fiecare mediu. - pentru a fi examinat la microscop frunza de Elodeea canadienis, aceast nu necesit secionare, deoarece sunt transparente. - la acest subpunct al lucrrii vom urmri doar aspectul morfologic al celuleor vegetale din cele trei medii, urmnd s msurm diametrele lor. - principiul metodei const n compararea obiectului de msurat prin suprapunerea peste imaginea sa microscopic a unei scri gradate etalonate n prealabil. - micrometrul obiectiv este o lam de sticl n centrul creia se afl un segment de 1 mm divizat n 100 pri egale (preul unei diviziuni este de 0.01 mm). - micrometrul ocular este un disc de sticl, pe care sunt trasate diviziuni echidistante sub form de reea. - se noteaz cte diviziuni ale micrometrului obiectiv corespund unui ptrat al micrometrului ocular, iar cunoscnd valoarea unei diviziuni a micrometrului obiectiv (0.01 mm), se determin ci microni reprezint latura unui ptrat al micrometrului ocular. - micrometrul obiectiv se nlocuiete cu o lam, pe care se afl fragmentul de frunz din mediul izotonic. Peste 10 celule se noteaz respectiv cte ptrate din reeaua ocularului se suprapun pe diametrul longitudional i transversal al fiecreia. - se procedeaz la fel pentru acelai numr de celule cu fragmente de frunze din mediile hipotonic i hipertonic. - cunoscnd dimensiunile unui ptrat al micrometrului ocular se transfer n m valorile pentru diametrul longitudinal i transversal al celulei msurate. - rezultatele experimentale se introduc n tabelul de mai jos .

Tabelul 1 Nr. Celulelor Mediul hipotonic Diametrul Diametrul longitudional transversal (m) (m) 1 11.25 3 2 10.5 2.75 3 8.5 2.75 4 9.5 3 5 9 3.25 Valorile 9.75 2.95 medii Mediul hipertonic Diametrul Diametrul longitudional transversal (m) (m) 0.27 0.35 0.65 0.57 0.87 0.9 1.025 1.17 1.45 1.37 0.853 0.872

Importana osmozei n medicin : Presiunea osmotic este factorul important, care asigur meninerea volumului i n consecin arhitectura celular , integritatea morfologic i funcional a celulelor. Osmoza intervine n schimbul de substane dintre organisme i mediul ambiant, dintre celule i mediul extracelular. Determinarea punctului crioscopic poate da informaie despre concentraia molecular a serului sangvin sau a altor lichide biologice. Calculul presiunii osmotice permite studiul funcionrii diferitor lichide biologice n stare normal i patologic, se poate urmri anumite aspecte ale metabolismului hidro-electrolitic, a funciei renale. Trecerea unei substane ntre compartimente vascular i intracelular are loc sub influena diferenei de presiune pe ambele pri ale peretelui capilar. Volumul celulei variaz n dependen de concentraia mediului extracelular. Aceast variaie ofer un model pentru studiul fenomenelor de permeabilitate a membranelor celulare. Concluzie : Prin urmare la aceast lucrare de laborator am luat cunotiin despre noiunea de osmoz . am determinat n mod experimental la microscopul electronic dimensiunile celulare a algei Elodeea canadienis, folosind dou soluii diferite, una este hipertonic i alta hipotonic, iar n consecin am observat fenomenele celulare dependente de osmolaritatea mediului, att turgescena ct i plasmoliza celulei vegetale.