MUTATIILE CA SURSE ALE VARIABILITATII GENETICE

In cadrul unei populaii i chiar n cadrul unei familii se constat neidentiti biologice n plan anatomic, fiziologic i comportamental i exist diferene de expresie fenotipic ntre indivizi. Deci structura genetic a unei persoane este, nerepetabil, ceea ce i asigur unicitatea biologic. Diversitatea apare n legatur cu existena unor genotipuri individuale distincte, situaie care se numete variabilitate genetic sau este datorat influenelor exogene, situaie care se numete variabilitate nongenetic. Variabilitatea, adic starea de neasemnare, diferena calitativ i cantitativ ntre indivizi. xist variaii definite! determinate de factorii de mediu, variaii nedefinite! determinate de o mutaie genetic si variaii continue! determinate de un ansamblu poligenic. Variabilitatea genetic este determinat, pe de o parte, prin recombinare genetic i pe de alt parte, prin mutaii. Variabilitatea genetic determinat prin recombinarea genetic consta n realizarea unor combinaii genetice noi prin rearan"area sau redistribuia materialului genetic care provine de la genitori. In procesul recombinrii pot fi implicate uniti genetice diferite, adic genomul, cromosomul sau gena, astfel nc#t vom avea recombinare genomic, cromosomial i genic. $ecombinarea genomic se produce n momentul fecundrii. Variabilitatea genetic se realizeaz prin recombinarea genomic, dar numai cu condiia esenial ca genomurile care se ncrucieaz s fie c#t mai diferite. In cursul formrii gameilor, se produc fenomene genetice specifice diviziunii meiotice. %ot avea loc & tipuri de recombinare' o recombinare intercromosomial, n care sunt implicai cromosomi omologi ntregi i o recombinare intracromosomiala, la care particip segmente din cromosomii omologi. (a baza variabilitaii pot sta configuraii genetice nou!realizate prin schimburi reciproce de segmente din cromatide ntre cromosomii omologi si are loc n profaza meiozei primare.

* +eioza reprezint un tip particular de diviziune celular, n urma creia dintr!o celul diploid &n, dup & diviziuni succesive, rezult celule haploide, cu n, cu numr redus la "umtate de cromosomi,. Intre & cromosomi omologi pot avea loc schimburi de material genetic n momentul n care acetia se ncrucieaz i poart denumirea de crossing!over, adic ruperea cromatidelor n anumite puncte, urmat de realipirea fragmentelor rezultate ntr!o configuraie genetic nou. +utaiile - alt posibilitate de realizare a variabilitii este reprezentat de mutaii. +utaiile constituie, alturi de fenomenul recombinrii, o inepuizabil surs de variabilitate. %rin mutaie se nelege o modificare nenatural adic anormal i ereditar a materialului genetic, deci alterri ale mesa"ului genetic. +utaia poate fi definit i ca fenomenul prin care se produc modificri n materialul genetic, modificri ce nu sunt provocate de recombinarea genetic. le pot aprea n mod spontan i sunt denumite mutaii naturale, sau pot fi induse experimental, fiind vorba de mutaii artificiale. +utaiile pot fi definite i ca ,, modificri discontinue cu efect genetic,, dup .+a.r, )/01. +odificarea zestrei ereditare survine brusc, ca raspuns la aciunea unor factori endogeni sau exogeni. +utaiile se produc relativ rar, sunt neobinuite i imprevizibile i sunt stabile n timp. +utaia conduce la apariia unor proprietai noi privind structura i funcia materialului genetic, are ca i consecin apariia unor caractere noi, ceea ce nseamn c detectarea defectului genetic se realizeaz indirect, prin constatarea efectului fenotipic produs. +utaia poate produce o schimbare detectabila a fenotipului unei celule sau individ. 2elula sau organismul cu genotipul modificat, ca urmare a unei mutaii a tipului normal, se numete mutant. -rganismul mutant se definete numai prin raport cu tipul normal din care a deviat, care se numete slbatic.

&

+utaiile care apar ntr!o celul somatic se pot transmite prin mitoz celulelor fiice, deci pot constitui punctul de pornire pentru formarea unei linie celulare anormale care are posibilitatea de a putea modifica structura i funcia unor esuturi sau a unor organe. +utaiile aprute n celulele somatice nu se transmit prin gamei generaiilor urmtoare, ceea ce nseamn c toate celulele individului care se dezvolt din zigotul mutant vor fi, la r#ndul lor, purttoare ale mutaiei. In funcie de mrimea materilului genetic interesat 3 gen, cromosom, genom 3 se pot descrie 1 tipuri de mutaii, corespunztoare fiecrei uniti genetice interesate dup $ieger, )/40' ! ! ! mutaii genice ce pot interesa ntreaga gen, mai mult nucleotide sau unul singur ! perechea de nucleotide este cea mai mic unitate de mutaie! 5 mutaii cromosomice sunt modificri structurale ale cromosomilor ce constau n pierderea, c#tigul sau rearan"area unor segmente din cromosom5 mutaii gemomice sunt modificri ale numrului diploid 60 de cromosomi ntregi, afect#nd fie )!& perechi cromosomi 3aneuploidie, fie toi cromosomii, prin adugarea a )!&!1 seturi haploide 3poliploidie.

2elulele somatice sau diploide au un set dublu de cromosomi, numrul exact de cromozomi umani sunt &n 7 60, iar celulele gametice! sexuale sau haploide au un singur set de cromosomi n 7&1. Dup modelul de exprimare fenotipic, mutaiile pot fi clasificate n'dominante, codominante, semidominante i recesive. - alt clasificare a mutaiilor se bazeaz pe tipul de celul afectat' ! mutaii somatice! descendenii celulei mutante vor forma o clon, o linie celular anormal5 ! mutaii germinale 3 se produc gamei anormali care, dup fecundare, transmit mutaia la generaia urmtoare, rezult#nd un individ n care toate celulele vor fi mutante.

In funcie de locul unde sunt plasate, mutaiile pot fi clasificate n' mutaii autosomale, care sunt plasate pe autosomi si mutaii heterozomale, ce sunt plasate pe heterozomi. De asemenea, exist i mutaii extranucleare ale genelor din citoplasm. - alt categorie o constituie mutaiile letale i semiletale care afecteaz gene de importan ma"or n organism, prin a cror blocare se induce moartea individului nainte de maturitatea sexual. 2ercetri mai noi au artat c cea mai mic unitate mutaional este perechea de nucleotide n macromolecula de 8D9, *8D9!ul deintorul informaiei ereditare, principala component a cromosomului!corpi colorai, formaiuni intracelulare i se pot observa n timpul diviziunii celulare,, acestea fiind denumite mutaii punctiforme. Dac prin mutaie gena normal a tipului slbatic se transform ntr!o alel diferit, atunci este vorba de o mutaie direct, n timp ce prin mutaie de reversie aceast gen se transform n tipul iniial. Dac mutaiile afecteaz celulele liniei germinale, atunci ele pot fi transmise ereditar prin gamei la noua generaie. 2a urmare, indivizii descendeni vor fi afectai de mutaia respectiv n ce privete celulele germinale si celulele somatice. :recvena mutaiilor naturale este foarte variat, n funcie de condiiile de mediu i de genele afectate. In funcie de nivelul la care se produce accidentul genetic exista mutaii genice si anomalii cromosomiale. xista patru tipuri de mutaii genice'substituia, inversia sau deleia, inseria, alungirea lanului. +utaiile genice +utaiile genice se prezint ca modificri ale structurii i funciei genei. le constau ntr!o schimbare 3modificare survenit n secvena normal a nucleotidelor care intr n alctuirea genei. ;ena poate fi definit modern ca fiind un segment polinucleotidic al moleculei de 8D9 care deine, sub form codificat, informaia genetic necesar sintezei unei proteine cu structur i funcie specific. %entru c sunt la nivel genic, mutaiile nu se pot evidenia prin tehnici citogenetice, pentru c ele nu afecteaz morfologia cromosomului. <tabilirea modului lor de transmitere este posibil n urma studiilor familiare, iar motenirea genelor mutante se realizeaz conform legilor mendeliene. 6

(egile lui +endel ;r. +endel a demonstrat in )=0> c la urmai nu se produce nici un amestec al caracterelor parentale5 unele nu se exprim n prima generaie filial dar pot aprea neschimbate ulterior. %entru a explica aceste fenomene, +endel a presupus c fiecare caracter este determinat de o pereche de factori ereditari, care n momentul formrii gameilor se separ, segreg, distribuindu!se la nt#mplare n celulele sexuale. +endel a observat c, transmiterea caraterelor ereditare este un proces statistic ce poate fi descris n termeni de probabilitate i a formulat legile care guverneaz acest proces i care stau la baza geneticii ca tiin. %rima lege a lui +endel sau legea segregrii sau legea dis"unciei caracterelor parentale sau legea puritii gameilor, a fost stabilit i poate fi demonstrat prin urmrirea rezultatelor ncrucirilor ntre indivizi care difer printr!un singur caracter! monohibridare. In monohibridare, persoanele se deosebesc printr!un singur caracter, sau printr!un cuplu de caractere alternante sau contrastante. (egea segregrii se explic prin dinamica cromosomilor omologi n meioza primar i se separ i merg n celule distincte i c aciunea genei independent de originea sa matern sau patern. 8 doua lege a lui +endel sau legea asortrii independente sau legea liberei combinaii a factorilor ereditari sau legea segregrii independente a perechilor de caractere, poate fi demonstrat prin ncruciri ntre organisme diferite ntre ele prin dou cupluri de caractere!dihibridare sau mai multe. le se transmit independent unul de altul5 xplicaia ereditatea primului caracter nu influeneaza ereditatea celui de al doilea.

acestui fenomen rezid n faptul c genele ce determin aceste caractere sunt nenlanuite, situate pe cromosomi omologi diferii i independente una fa de alta, ele se pot combina liber ntre ele d#nd genotipuri i fenotipuri noi. (egea a doua a lui +endel afirm faptul c genele ce alctuiesc diferite perechi de alele, se asorteaz se combin independent una de alta, atunci c#nd se formeaz celulele germinale. (a baza acestei legi st fenomenul de asortare independent a cromosomilor din perechi de omologi ce are loc n cursul anafazei meiozei primare! recombinare cromosomatic.

>

9umrul tipurilor de gamei formai de fiecare sex este egal cu numrul categoriilor fenotipice indicate. $eprezentarea fenotipic a genei arat proprietatea de dominan sau de recesivitate a genei respective. 2ele mai frecvente sunt mutaiile recesive. 2aracterele tipului normal, slbatic, sunt condiionate n mod obinuit de gene dominante. 2auzele apariiei unor modificri n zestrea genetic a organismului nu pot fi precizate ntotdeauna i se numesc mutaii spontane i au o frecven relativ redus n populaia uman. <unt numeroi factori din mediul exogen sau endogen care pot altera structura sau calitatea materialului genetic i se numesc mutaii induse. :actorii mutageni pot fi factori fizici ca radiaiile ionizante, factori chimici ca !urile din alimente sau factori biologici ca virusurile 3gripei i rubeola. - condiie favorizant este considerat i v#rsta naintat a prinilor. +utaiile genice recesive se exprim fenotipic la homozigoi, dar nu i la heterozigoti. <e apreciaz c fiecare organism uman deine circa >! = gene recesive cu potenial defavorabil. In condiiile constituirii genotipului homozigot, afeciunea se va manifesta. +utaiile genice pot interesa genele de structur sau genele implicate n reglare5 n primul caz se modific structura, n al doilea caz se schimb ritmul. 2a rezultat al mutaiilor genice se produc forme alternative ale genei, numite alele. +utaile genice pot apare spontan, n absena unor cauze determinabile, sau pot fi induse de o serie de ageni fizici, chimici, sau biologici din mediu si sunt numii ageni mutageni. a. +ecanismele de producere ale mutaiilor n genele de structur. +odificri n structura nucleotidic a genei, pot fi produse prin urmtoarele mecanisme! dup ?.+.$obert' ! ! ! ! alterri ale secvenei nucleotidice, prin nlocuire deleie, inserie de nucleotide5 recombinri intragenice i 2- inegal5 reversie5 duplicaii i hiperduplicaii. *substituie,, inversie,

<e nelege prin substituie nlocuirea unei baze cu alt baz n lanul de 8D9. <ubstituia unui singur nucleotid copiere datorit fenomenului de tautonomie care permite nperecherea neobinuit, prin alt nucleotid, fie de acelai tip *purinic sau pirimidinic, fie de un tip diferit de cel iniial, este cea mai frecvent posibilitate de modificare genetic. <ubstituiile sunt de doua feluri' tranziie 3 nlocuirea unei purine cu o alt purin sau a unei pirimidine cu o alt pirimidin ! si transversie 3 nlocuirea unei purine cu o pirimidin. :recvena lor este inegal. mult mai des dec#t ultimele. In urma unei substituiri rezult dou feluri de codoni'unii sunt similari celor trei codoni non!sens i mutaiile se numesc non!sens, alii codific alt aminoacid, mutaiile av#nd sens fals. +utaiile prin substituie sunt relativ frecvente. <ubstituia duce la modificarea unui singur codon *sens sau non sens,. <chimbarea unui codon sens va determina unul din urmatoarele efecte' ! ! ! schimbarea aminoacidului codificat de codonul iniial, normal prin alt aminoacid, codificat de codonul substituit5 oprirea sintezei proteinei, n cazul n care noul codon format prin substituie este un codon non sens sau stop5 pstrarea structurii iniiale, normale a proteinei deoarece codonul rezultat prin substituie este ,sinonim, cu cel modificat5 Inversia unui nucleotid prin alt nucleotid va duce la modificarea unui codon i lectura sa n sens invers. 2onsecinele inversiei sunt aceleai ca i la substituie. %rin deleie se inelege lipsa a una sau mai multe perechi de nucleotide din molecula de 8D9.. 9atura anomaliei produse va depinde de numarul de perechi de nucleotide implicat n deleie. Deci prin deletie se pierde material genetic. +utaia odat aprut se transmite generaiilor urmtoare. Inseria sau adiia nseamn introducerea unui nucleotid n mesa"ul unei gene, din punctul de inserie lectura codonilor se va face decalat, fals, realiz#ndu!se o protein cu secven anormal. Dup datele lui Vogel! )/4&, care a studiat frecvena transversiilor i tranziiilor n hemoglobinele anormale umane, primele apar substituia se poate produce printr!o eroare de

$eversia sau mutaia supresiva, este o mutaie care intereseaz o alt mutant, determin#nd revenirea la fenotipul normal!slbatic. $eversia adevarat transform codonul mutant n normal iar reversia numit supresiv produce o a doua mutaie, diferit cu poziie de prima dar care cori"eaz efectul ei. Duplicaii i hiperduplicaii sunt catenele polipeptidice alfa, beta, gama, delta, care se gsesc n hemoglobinele normale. b. +utaii n genele de reglare <inteza proteinelor codificate de genele de structur este reglat prin intervenia unor gene operatoare i reglatoare. +utaiile n gena operatoare pot determina fie blocarea, fie activarea continu a transcripiei. 8ceste mutaii determin, prin oprirea transcripiei, deficiena concomitemt a mai multor enzime, controlate de genele incluse n acelai operon. +utaiile n genele reglatoare duc la schimbarea tipului sau ritmului de sintez proteic. c. -riginea mutaiilor genice la om +utaiile genice pot fi spontane sau induse. %rimul tip, mutaiile spontane este determinat de factori necunoscui, imposibil de definit sau obiectivat de observator. 8l doilea tip, mutaiile induse sunt produse prin aciunea unor factori cunoscui cum ar fi, fizici, chimici, biologici. +utaiile spontane! ar putea fi determinate de radioactivitatea naturala ca, razele cosmice, radioactivitatea terestr permanent, iradierea intern. Dup :rezel, )/4) mutaiile spontane ar reprezenta ),>@ din totalul mutaiilor nregistrate la om. xist evident variaii regionale! geografice determinate de soluri cu radioactivitate sporit sau de altitudine nalt, deci cantitate mai mare de raze cosmice. (ogic ar fi ca frecvena unor afeciuni ereditare s difere de la o localitate la alta, n corelaie cu valoarea iradierii locale. %#n n prezent, aceast deducie n!a fost verificat prin cercetrile efectuate, dar bunul sim ne arat c efectul iradierii naturale trebuie s fie minim, cci altfel n cursul istoriei unele regiuni cu iradiere crescut ar fi devenit AcelebreB, prin abundena patologiei congenitale i genetice.

- problem n studiu rm#ne creterea radioactivitii ambiante, determinat eventual de activiti umane ca cele din centralele nucleare, extracie de minereu radioactiv, explozii nucleare. 8ceast problema se face cu doze mici care genereaz o cretere slab dar real a frecvenei bolilor dominante *Dutrillaux, )/4>,. +utaiile induse sunt determinate de factori! ageni mutageni care au capacitatea de a produce mutaii cu o frecven superioar mutaiilor spontane. :actorii mutageni la om sunt fizici cum ar fi radiaii ionizante, chimici cum ar fi agenii alchilani, biologici probabil virusuri. fectul mutagen al iradierii experimentale a fost demonstrat n )/&4 de C.?.+uller ce a luat premiul 9obel n )/60 la Drosophila. concluzii' ! ! ! numarul de mutaii induse este direct proporional cu doza de iradiere aplicat5 radiaiile ionizante produc mutaii chiar n doze mici, cci nu exist un prag la aciunea lor mutagen5 efectul radiaiilor este cumulativ, indiferent de distribuia lor n timp, ceea ce conteaz este doza total primit, totui s!a observat c iradierea cronic are efect de &! 1 ori mai mic ca iradierea acut. -mul este expus iradierii artificiale n aciunile de radiodiagnostic, n industria nuclear sau n urma diferitelor accidente. -rice procedur radiodiagnostic sau terapeitic este teoretic mutagen. importante. In evaluarea riscului genetic la diferite radiaii trebuie s se in cont de ,doza de dublare, adic valoarea de iradiere dincolo de care proporia mutaiilor spontane se dubleaz. ste obligatoriu s asigurm o protecie perfect a individului i mediului fa de radiaii i s evitm orice iradiere excesiv. fectul mutagen al substanelor chimice a fost descoperit n timpul celui de!al doilea rzboi mondial, de o echip de geneticieni englezi care au demonstrat aciunea mutagen a iperitei. *substan toxic cu aspect de lichid uleios, folosit ca arm chimica n primul rzboi mondial n oraul Dpres,. %ractic, lucrul este valabil pentru iradierile l a studiat si a stabilit urmatoarele

De atunci numrul cercetrilor ca i al substanelor chimice cunoscute a crescut enorm. In fiecare an se sintetizeaz 1E EEE de substane noi, din care cel puin )> sunt sigur mutagene. 2.+aximilian n )/4> spunea c ,omul este expus n prezent la aciunea a circa "umtate de milion de substane chimice si trin ntr!un mediu mutagenB. Din fericire, la om nu s!au putut demonstra efecte certe mutagene dec#t pentru un numr mic de substane. <ubstanele chimice mutagene pot fi grupate n dou categorii' ! ! substane ce interfereaz sinteza 8D95 substane ce altereaz structura 8D9.

<unt unele substane mutagene a cror actiune nu a putut fi stabilit. In prezent s#ntem ,narmai, cu o metodologie adecvat pentru testarea prealabil a efectului posibil mutagen al oricrui produs nou sintetizat de industria chimic. 8pariia mutaiilor genice la om poate fi influenat de v#rsta prinilor. 2u c#t prinii sunt mai n v#rst cu at#t riscul de a acumula mutaii i a le transmite copiilor este mare. d. :recvena sau rata mutaiilor :recvena medie cu care se produce un eveniment mutaional particular, per celul sau individ i per generaie se numete rat de mutaie si a fost scris de $ieger n )/40. a se apreciaz prin diferite metode fenotipice directe i indirecte, demografice bazate pe numrul subiecilor cu mutaie, depistai ntr!o anumit zon i perioad de timp. :recvena indivizilor cu mutaie ntr!o populaie este diferit de cea de la natere, deoarece exprim echilibru dintre rata mutaiei genei i eficiena seleciei ce acioneaz pentru eliminarea ei. e. 2onsecinele mutaiilor genice fectul primar al mutaiilor genice l reprezint modificarea secvenei aminoacizilor n moleculele polipeptidice sintetizate pe baza informaiei acestor gene. particular n molecula polipeptidice. fectul biologic al acestei modificri depinde de tipul de aminoacid substituit i de locul su

)E

fectul primar este urmat de o mulime de efecte secundare. Dup valoarea adaptativ i consecinele mutaiilor genice asupra structurii i funciei organismelor ele se pot mpari n mai multe grupe' ! ! mutaii neutre 3 care produc polimorfismul biologic intraspecific, exemplificat prin grupele sanguine, serice5 mutaii deviante *defavorabile, care antreneaza un handicap mai mult sau mai puin sever i creeaz fie o veritabil AboalB fie numai o predispoziie la boal, unele din ele sunt ,mutaii letale sau subletaleB deoarece influeneaz decisiv viabilitatea i reproducerea individului5 ! mutaii evoluante cu valoare adaptativ mai mare ca normalul, ele ,produc indiviziB mai bine adaptai, mai rezistenti la mediu, deci mai fecunzi. fectul mutaiilor genice depinde i de tipul de celul afectat, germinal sau somatic. +utaiile germinale se trensmit prin gamei la descendeni , cele somatice nu se transmit la urmai dar determin apariia unor clone anormale, n cazul n care aceste clone persist, nu sunt eliminate de organism i evolueaz, vor modifica structura i funcia unui esut sau organ. %rin mutaii somatice se neleg toate modificrile transmisibile care apar n genomul celulelor somatice. le pot fi genice sau cromozomale. 2a exemplu de mutaii somatice pot fi menionate, zonele albstrui din iris la persoanele cu ochi cprui sau bruni, apariia de hematii 8 sau F la persoane cu grupa sanguin 8F! prin incapacitatea sintezei ambelor antigene. +utaiile somatice prin clonele anormale pe care le produc i secundar prin modificrile morfo!funcionale ale organelor, au fost implicate n geneza cancerului i accelerarea procesului de mbatr#nire al organismului uman.

))

FIF(I-;$8:I

). 2ovic, +, Fiologie i genetic medical, ed. D%, Fucureti, )/=), &. 2, +aximiliam, ;enetic uman, ed. <tiinific i )/=&, 1. $aicu, %, ;enetica general i uman, ed. D%, Fucureti, )//4, 6. :riman,(, 9ote de curs, Gniv.8ndrei <aguna, 2onstana, &EE>. nciclopedic, Fucureti,

)&

2G%$I9< +utaiile ca surs a variabilitii genetice .................................................................). ).+utaiile...................................................................................................................&. &.+utaiile genice........................................................................................................6. 1.(egile lui +endel.....................................................................................................>. a. +ecanismele de producere ale mutaiilor n genele de structur....................0. b. +utaii n genele de reglare.............................................................................=. c. -riginea mutaiilor genice...............................................................................=. d. :recvena sau rata mutaiilor..........................................................................)E. e. 2onsecinele mutaiilor genice.......................................................................)E. 6.Fibliografie.............................................................................................................)&.

)1

)6