EXAMENUL BIOCHIMIC AL URINEI

Introducere
Urina este un lichid biologic, produs al excreie renale, cu o compoziie
complex, alctuit din ap, substane minerale, substane organice. etc.
Compoziia urinei depinde de o serie de factori cum sunt: aportul exogen
(alimentaie), metabolismul intermediar, starea de funcionare a unor organe (rinichi,
ficat), medicaie etc. Urina excretat n condiii de funcionare normal (fiziologic) a
organismului are o compoziie i caracteristici fizico!chimice bine determinate,
acestea modific"ndu!se, mai mult sau mai puin profund, odat cu modificarea
factorilor menionai. #e aceea un examen de laborator al urinei poate furniza
clinicianului date utile pri$ind at"t explorarea metabolismului intermediar c"t i a
funciei di$erselor organe.
%entru ca rezultatele examenelor de laborator s reflecte fidel starea de
funcionare a organismului, la colectarea urinei din care urmeaz s se efectueze
determinrile trebuie s se in seama de anumite prescripii.
Colectarea i conservarea urinei
Colectarea urinei se face n $ase de sticl, bine splate i acoperite, iar
pentru examenul bacteriologic trebuie s fie sterile. Uneori este necesar utilizarea
unor recipiente nchise la culoare deoarece unele substane pe care $rem s le
determinm (ca de exemplu, bilirubina, porfirinele) sunt sensibile la lumin, iar
expunerea lor conduce la rezultate false.
Colectarea urinei se face diferit, n funcie de produsul pe care $rem s l
determin i de testul utilizat:
Urin !i"p de colectare !este e#ectuate !este neindicate
Urina spontan
recoltat din
&etul mi&lociu
%rima urin de
diminea
! examen bacteriologic
! examen cu stripuri
! testul pentru punerea
n e$iden a nitriilor
(doar pentru urina
recoltat n recipient
steril)
! examinarea
microscopic a
sedimentului urinar
! determinarea semi!
calitati$ a proteinelor
urinare
! alte determinri
biochimice calitati$e
! determinarea
cantitati$ tuturor
compuilor
biochimici (pentru
toate situaiile n
care folosim urina
spontan).
' dou urin de
diminea
! examen cu stripuri
! determinarea semi!
calitati$ a proteinelor
i glucozei urinare
! testul pentru
punerea n
e$iden a nitriilor
Urina spontan,
recoltat n oricare
moment al zilei
! determinarea semi!
calitati$ a glucozei
urinare postprandial
! examen
bacteriologic
! examinarea
microscopic a
sedimentului urinar
Urin !i"p de colectare !este e#ectuate !este neindicate
Urin recoltat
prin puncie
suprapubian
! ! examen bacteriologic ! determinarea
cantitati$ tuturor
compuilor
biochimici.
Urina colectat
pe anumite
inter$ale de timp
%erioad de timp
bine determinat,
de obicei () ore
(sau * ore pentru
unele determinri)
! determinarea
cantitati$ tuturor
compuilor biochimici
(() ore).
! sedimentul minutat
'ddis!+amburger (*
ore)
! examen
bacteriologic
! examinarea
microscopic a
sedimentului urinar
%entru urina de () ore colectarea ncepe la ora , dimineaa dup ce s!a
aruncat urina emis la aceast or. %oriunile urinate n continuare n cursul zilei i a
nopii se colecteaz mpreun, numai urina emis a doua zi dimineaa la ora , se
colecteaz separat.
Conservarea urinei. %entru ca urina s nu se altereze n timpul colectrii este
necesar conser$area ei. -e poate face fie prin congelare imediat sub !(./C, prin
depozitare la frigider ()!,
.
C), fie prin adugarea unor substane conser$ante, dar
care s nu afecteze componentele urinei.
$artea experi"ental
Exa"enul su"ar al urinei
0xamenul sumar al urinei cuprinde:
examenul macroscopic
examenul biochimic
examenul microscopic al sedimentului urinar.
%& Exa"enul "acroscopic al urinei'
a( )olu"ul
1u intr n analiza sumarului de urin, ci doar la determinrile ce se
efectueaz cantitati$ pe urina de () de ore, dar din moti$e didactice l $om trata n
acest capitol.
Cantitatea de urin emis n () de ore, denumit diurez, se colecteaz ntr!
un $as de sticl acoperit cu un capac i se msoar cu un cilindru gradat.
2n condiii normale, diureza la brbai este de 34.. ml (3(.. !3,.. ml) iar la
femei 3(.. ml (3...!3)..) dintre care *5) sunt eliminate n cursul zilei i numai 35)
n cursul nopii (raport diurn 5 nictemeral *53). 6a copii diureza crete cu $"rsta.
#iureza n clinostatis" este mai mare dec"t n ortostatis", funcia normal
se poate adapta la eliminarea unui $olum foarte mic ((4 ml5or) sau foarte mare
(3(.. ml5or) de urin, dup necesitile de moment.
2n condiii fiziologice volu"ul urinei din () de ore depinde de ingestia de
lichide, alimentaie i temperatur, precum i de masa corporal i de factorii
emoionali (starea psihic).
%roduii finali azotai, ingestia de cafea, ceai i buturi alcoolice (n special
berea) au efect diuretic, cresc"nd $olumul urinei emise n () ore.
7odificrile patologice ale diurezei se refer la:
! $olumul de urina eliminat n () de ore: poliurie, oligurie, anurie.
! ritmul eliminrii n () de ore: nicturie, opsiurie.
$oliuria nseamn producerea unei cantiti de urin ce depete ( litri n ()
de ore. -e nt"lnete n:
* condiii #i+iolo,ice' frig, umezeal, emoii, consum excesi$ de lichide sau produse
$egetale bogate n ap, consum excesi$ de cafea8 n poliuriile fiziologice raportul
nictemeral rm"ne nemodificat8
* condiii patolo,ice' hipertiroidie, administrare de diuretice n insuficiena cardiac
sau edeme renale, dup crize dureroase (angor pectoris, colic renal), dup crize
de epilepsie, diabet zaharat, diabet insipid, glomerulonefrit, pielite, pielonefrite
acute sau cronice, scleroz primar sau secundar, rinichi polichistic, 9:C renal,
hipertrofie de prostat etc8 nicturia este caracteristic poliuriilor de cauz renal.
Oli,uria nseamn producerea unei cantiti de urin mai mic de un litru n
() de ore. -e nt"lnete n:
* condiii #i+iolo,ice' ingestia de cantiti mici de lichide, pierdere excesi$ de ap
prin transpiraie8
* condiii patolo,ice' insuficien cardiac, deshidratri prin $rsturi, diaree i
hemoragii, oc, colaps, afeciuni hepatice, hipotiroidie, stri febrile, tulburri ner$oase
reflexe, glomerulonefrite difuze, glomerulonefrite cronice, nefrite interstiiale,
nefropatii tubulare toxice, litiaz renal, tumori ale micului bazin, cuduri ureterale prin
rinichi mobil etc.
Anuria nseamn incapacitatea complet a rinichiului de a produce urin (se
elimin totui o cantitate mai mic dec"t 34. ml urin n () de ore). 'nuria apare n
toate afeciunile n care se produce oligurie, dac aciunea factorilor cauzali este mai
intens sau de durat mai lung.
-( Aspectul
'spectul urinei normale $ariaz n funcie de timpul trecut de la emisiune, de
temperatura mediului ambiant, de tehnicile de conser$are.
6a emisiune, urina normal este limpede, transparent.
6a o examinare fcut dup c"te$a ore, apare o suspensie sau un depozit
floconos (nubecula) compus din celule descuamate ale cilor urinare, iar la femei i
din celule $aginale descuamate.
2n cazul urinelor alcaline sau neutre, aspectul imediat dup emisiune poate fi
tulbure, datorit fosfailor alcalino!pm"ntoi.
;inut la temperatur prea sczut, urina se tulbur datorit cristalizrii
acidului uric i a uratului acid de sodiu.
Conser$at defectuos, urina formeaz depozite de carbonat de calciu i fosfat
amoniaco!magnezian.
%entru a diferenia modificrile patologice ale aspectului urinei de modificrile
ce depind de factorii mai sus amintii, se folosesc urmtoarele modaliti:
! nclzire uoar pentru dizol$area cristalelor de acid uric i urat acid de sodiu (4 ml
urin ntr!o eprubet nclzit la flacr)8
! acidifiere cu acid acetic pentru dizol$area depozitelor de carbonat de calciu, fosfat
amoniacomagnezian, fosfai alcalinopm"ntoi (4 ml urin peste care se pipeteaz
un ml acid acetic 3.<).
7odificri patologice ale aspectului urinei se nt"lnesc n afeciuni renale ale
cilor excretoare renale i sunt datorate prezenei elementelor figurate ale s"ngelui
(hematii, leucocite), mucusului i diferiilor cilindri. 'naliza unei urini tulburi (cu
excepia determinrii aciditii), se execut numai dup ce urina a fost limpezit prin
sedimentare.
0xist i afeciuni renale (insuficiena renal cronic) n care urina este foarte
limpede, ca apa, transparent i fr sediment datorit poliuriei.
c( Culoarea
Culoarea urinei este dat de substanele colorate pe care le conine. #intre
acestea unele apar ca produi normali sau patologi ai metabolismului intermediar
(pigmeni urinari, cromogeni, etc.), iar altele sunt de pro$enien alimentar (de
exemplu coloraie roie dup consum de sfecl i $arz roie) sau medicamentoas.
2n mod fiziologic, urina prezint modificri i anume:
! urina nocturn este mai nchis la culoare fa de urina diurn8
! urina acid: este mai nchis la culoare fa de urina alcalin8
! urina ce conine "edica"ente sau produi de con&ugare ai acestora poate fi:
! $erde albastr n cazul albastrului de metilen8
! brun p"n la neagr n cazul fenolului, rezorcinei, salolului, pirogalolului,
taninului8
! roie n cazul piramidonului, aspirinei.
-chimbri ale coloraiei urinei pot fi atribuite i diferitelor afeciuni renale sau
extrarenale:
! urina galben!portocalie, n boli febrile acute sau dup transpiraii acute8
! urina galben palid, n diabet insipid, scleroz renal, insuficien renal cu poliurie,
dup ageni diuretici8
! urina roie, n hematurie (-ulion de ca"e), hemoglobinurie, porfirie8
! urina cenuie, n methemoglobinemii, sarcom8
! urina brun n sindroame icterice:
! urina $erde!roiatic, p"n la $erde!neagr n nefrite acute hemoragice, sindroame
icterice forme gra$e8
! urina neagr, n alcaptonurie.
d( Mirosul
Urina normal are un miros fad, miros de migdale amare, datorit acizilor
$olatili sau substanelor urinoide.
Urina normal poate a$ea miros modificat i anume:
! accentuat, n urinele concentrate8
! de $iolete, dup administrare de medicamente cu esen de terebentin8
! dezagreabil, dup aport exogen de sparanghel, usturoi, hrean.
7odificrile patologice ale mirosului urinei pot fi:
! miros amoniacal n boli infecioase sau tumorale renale i ale cilor excretoare
renale8
! miros putrid n infecii cu flor anaerob8
! miros de mere acre n diabet, $rsturi acetonemice ale copiilor.
.& Exa"enul -ioc/i"ic al urinei
0xamenul biochimic se efectueaz n prezent cu a&utorul stripurilor urinare
(numite i bandelete reacti$e). 'cestea analizeaz semicantitati$ unii produi
prezeni n urin: urobilinogenul, bilirubina, corpii cetonici, acidul ascorbic (unele
dintre ele), glucoza, proteinele, hematiile, nitriii, leucocitele precum i p+!ul i
densitatea urinar
:anda de test conine mai multe zone distincte, fiecare corespunztoare unui
anumit parametru de testat. =ntroducerea benzii n urin $a produce sau nu
modificarea coloraiei n fiecare zon. 7odificrile $or fi comparate cu o scar etalon,
li$rat odat cu testul, n care se face corelaia ntre concentraia parametrului
analizat i modificarea de coloraie obinut.
Un strip este alctuit din ) straturi suprapuse: o folie protectoare de n>lon, o
h"rtie impregnat cu reacti$ul corespunztor, o h"rtie de filtru absorbant i un
suport de plastic.
Indicaiile utili+rii stripurlor urinare:
* -oli renale i de tract uro,enital& 2n acest caz, se urmresc modificrile de
culoare la ni$elul bandeleltelor reacti$e n special a urmtorilor parametrii: p+,
leucocite, nitrii, proteine, hematii, densitate urinar. =mportana efecturii unui
examen sumar de urin de rutin reiese din faptul c bolile renale i de tract
urogenital rm"n adesea asimptomatice o perioad lung de timp conduc"nd
adesea la alterri ire$ersibile. #e exemplu, insuficiena renal reprezint stadiul
terminal al di$erselor nefropatii primare i secundare iar singura posibilitate de
tratament a acesteia este reprezentat de dializ sau de transplantul renal. 2n plus,
are repercusiuni negati$e asupra altor organe i sisteme, ndeosebi asupra
sistemului cardio$ascular.
* -oli "eta-olice 01n special dia-etul +a/arat(. -e urmresc glucoza i
corpii cetonici urinari i nu numai acestea deoarece, n timp, diabetul zaharat se
complic cu di$erse forme de nefropatie.
* -oli /epatice i ane"ii /e"olitice& 2n acest caz important este
determinarea urobilinogenului i a bilirubinei. 2n multe boli hepatice simptomatologia
apare doar n stadii a$ansate iar un diagnostic precoce conduce la instituirea
imediat a tratamentului, e$it"nd complicaiile ce pot aprea ulterior.
! monitorizarea unor tratamente cu schimbarea, la ne$oie, a strategiei
terapeutice.
! medicina general cu scopul efecturii de screening!uri pentru depistarea
bolilor aflate ntr!un stadiu incipient asimptomatic.
Mod de lucru
-e utilizeaz urina proaspt necentrifugat, de obicei prima urin de
diminea. Urina se colecteaz ntr!un $as de preferin steril (dac recipientul nu
este steril, nu se interpreteaz nitriii). :andeleta se imerseaz timp de dou secunde
n urin n aa fel nc"t toat suprafaa s fie acoperit. -e ndeprteaz excesul de
lichid lipind marginea benzii de marginea $asului cu urin, apoi se pune banda n
poziie orizontal. -e compar zonele reacti$e de pe band cu cele corespunztoare
de pe scala etalon ntr!un inter$al de ?. de secunde (pentru leucocite inter$alul de
?.!3(. de secunde). 1u se $or depi dou minute pentru compararea rezultatelor.
$ara"etrii deter"inai cu a2utorul stripurilor urinare
a( 3ensitatea urinar
$rincipiu
9estul determin concentraia ionic a urinei baz"ndu!se pe eliberarea
protonilor care, n prezena cationilor formeaz un complex. @eacia produce
schimbarea culorii indicatorului (albastru de brom!timol). Constituenii neionici ai
urinei, cum ar fi glucoza sau ureea nu sunt determinai. #e aceea, o cretere a
Aolie protectoare de n>lon
+"rtie impregnat cu reacti$
+"rtie absorbant
-uport de plastic
densitii datorit concentraiei glucozei B 3... mg5dl (B 4? mmol56) nu este
determinat prin acest test.
EGTAH
4
* + K EGTAH
3
K + H
+
+
Anionul albastru de brom - timol +H
(colorat n albastru)
Albastru de brom timol
(colorat n galben)
+

(C D 0tilenglicol E bis (F!aminoetileter) E 1,1G!tetraacetic acid)
4urse de eroare'
- prezena proteinelor (3..!4.. mg5dl) conduce la rezultate fals crescute.
'celai fenomen are loc i n cazul urinei cetoacidozice.
- la un p+ de H sau mai mare, $alorile sunt mai mari cu .,..4 g5ml
4e"ni#icaii clinice
#ensitatea urinei normale, numit nor"ostenurie, $ariaz ntre 3,.34!3,.(4
g5cm
*
. 2n condiii de hidratare sau de deshidratare a organismului, limitele sunt mai
largi, $ariind ntre 3,...!3,.*. g5cm
*
. 2n condiii fiziologice densitatea urinei $ariaz
in$ers proporional cu cantitatea emis i direct proporional cu cantitatea de
substane pe care le conine i cu intensitatea culorii.
Ialorile mai mici de 3,.3. g5ml au o semnificaie analitic deoarece n acest
caz leucocitele i hematiile sufer o liz rapid. 'a se explic rezultatele negati$e
obinute la citirea sedimentului urinar dar cu rezultate poziti$e pe strip.
2n cazul alterrii funciei de concentrare a rinichiului, sau a eliminrii anormale
a unor metabolii, corelaia dintre densitate i diurez se pierde. %atologic se remarc
urmtoarele situaii:
* Hiperstenurie, densitate peste 3,.(4, apare n diabet, proteinurie, urinei
concentrate sur$enite n urma unui regim de sete, transpiraii abundente, stri febrile
etc.
* Hipostenurie, densitate sub 3,.34, apare n diabet insipid, aport excesi$ de apa
sau alimente bogate n ap (fructe).
* l+ostenurie, densitile tuturor emisiunilor din () de ore sunt egale i cuprinse n
&urul $alorii de 3,..( (densitatea ultrafiltratului plasmatic glomerular). 'pare n caz de
insuficient renal gra$ do$edind incapacitatea de diluare sau concentrare a
rinichiului.
-( pH*ul&
$rincipiu
Jona reacti$ conine un amestec de trei indicatori: rou metil, albastru de
brom!timol i fenolftalein. 2n limita de p+ de 4!K se obine o culoare care $ariaz
gradat de la portocaliu!galben!$erde p"n la albastru.
Br
Br
OH
O
SO
3
-
O
-
galben
albastru Albastru de brom-timol
Br
Br
OH
O
SO
3
-
-H
+
+H
+
O
O
OH
R
R
incolor
rosu
Fenolftaleina
O
-
Na
+
O
O
O
-
Na
+
R
R
+2NaOH
-H
2
O
N
N
H
COOH
N
+
N(CH
3

2
rosu
galben
rosu metil
urina acida! "ortocalie
urina alcalina! #erde
N
COOH
N(CH
3

2
-H
+
+H
+
4urse de eroare
- n cazul probelor de urin care staioneaz timp ndelungat nainte de a fi
lucrate, p+!ul poate $ira spre alcalin ca rezultat al creterii bacteriene.
4e"ni#icaii clinice
2n mod normal, urina are o reacie acid. p+!ul urinei este determinat n cea
mai mare msur, de proporia de fosfai bibazici (alcalini) i monobazici (acizi) aflai
n urin. #up cum se tie, rinichiul este irigat de s"nge, care are un p+ de
aproximati$ H,) i formeaz urina cu un p+ acid. 'ceast $ariaie de p+ se
realizeaz, n parte, prin modificarea proporiei dintre fosfaii acizi i alcalini.
@aportul acestora n plasm (p+ D H,)) este:
$
%

H&O Na
&O NaH
' 2
' 2
=
iar n urin (p+ D ),4!4,4) se in$erseaz:
%
$

H&O Na
&O NaH
' 2
' 2
=
2n cazurile n care urina atinge aciditatea maxim, raportul este egal cu 4.:3.
%rin acest mecanism sunt cruate o mare cantitate de baze fixe ale
organismului (n special 1a
L
, dar i M
L
, 7g
(L
i Ca
(L
).
p+!ul urinar $ariaz ntre 4,, i H,) n cursul zilei8 urina de diminea are un
p+ de 4!?.
2n condiii fiziologice, p+!ul urinar $ariaz n funcie de alimentaie. 2ntr!o
alimentaie strict carnal, urina este acid, cu un p+ cuprins ntre 4,( ! 4,*, n timp ce
ntr!o alimentaie exclusi$ $egetarian, urina este alcalin, cu un p+ cuprins ntre H,.
! H,4. 2n cazul unei alimentaii mixte, reacia urinei este slab acid. 9rebuie reinut
faptul c, dup administrarea de bicarbonai sau tratament cu ape minerale, urina
are o reacie alcalin.
Ca i $olumul urinei, $aloarea p+!ului este supus unui ritm nictemeral. Urina
cea mai acid se elimin spre miezul nopii i cea mai puin acid (uneori alcalin)
dimineaa. %rin pstrare timp mai ndelungat, urina poate de$eni alcalin cci prin
contaminare cu germeni microbieni are loc descompunerea ureei (sub aciunea
ureazei) n amoniac.
Ialorile p+!ului care depesc $aloarea H au o importan analitic deoarece,
n acest caz, eritrocitele i leucocitele sufer o liz rapid ceea ce explic rezultatele
negati$e obinute la sedimentul urinar n condiiile unor rezultate poziti$e pe strip.
2n mod patologic semnalm persistena $alorilor p+!ului acid sau alcalin
independent de alimentaie.
)alori sc+ute ale p+!ului urinar (urinei acide) se nt"lnesc n:
! inaniie
! di$erse intoxicaii
! insuficien renal
! cetoacidoz diabetic
)alori crescute ale p+!ului urinar (urinei alcaline) se nt"lnesc n:
! $rsturi abundente de diferite etiologii8
! infecii ale cilor urinare (uretrite, cistite, pielite, pielonefrite).
! hipopotasemii se$ere
! di$erse intoxicaii
! febr de di$erse etiologii
c( Leucocitele
$rincipiu
6eucocitele excretate n urin sunt aproape exclusi$ granulocite ce prezint o
acti$itate esterazic detectat prin reacia de pe strip. Jona reacti$ conine un ester
indoxilic care este cli$at de ctre esteraza granulocitar. =ndoxilul liber reacioneaz
apoi cu o sare de diazoniu form"nd un deri$at diazo colorat $iolet.
'cest test detecteaz acti$itatea esterazei granulocitare i histiocitare
(histiocitele sunt de asemenea produse n urma unui proces inflamator iar la
examinarea microscopic nu se pot diferenia de leucocite pe preparate nati$e
necolorate). Ca urmare, sunt detectate nu numai celulele intacte ci i cele lizate.
N
H
O
O
NH
SO
2
(ster indo)ilic
(stera*a leucocitara
+ndo)il
Sare de dia*oniu
,eri#at a*o (#iolet
N
H
O
OH
NH
SO
2
HO
+
+ndo)il
N
H
OH
+
N N
+
R
2
R
%
-
N
H
OH
N
R
2
N
R
%
4urse de eroare
- dac urina este intens colorat, aceast coloraie poate masca culoarea
obinut n urma reaciei de pe strip
- excreia de proteine peste 4.. mg5dl i a glucozei peste ( g5dl poate bloca
colorarea zonei reacti$e zonei reacti$e. 'celeai efecte le au i unele
medicamente administrate n doze mari (gentamicina, cefalexinul).
- unele medicamente pot da reacii fals poziti$e: meropenemul, imipenemul,
acidul cla$ulanic.
4e"ni#icaii clinice'
6eucocituria reprezint un indicator important al proceselor inflamatorii renale
i ale tractului urinar: infecii bacteriene (cistite, uretrite, pielonefrite acute i cronice),
infecii abacteriene cauzate de $irusuri i le$uri, infecii parazitare, glomerulopatii,
intoxicaii. #e asemenea, prezena leucocitelor n urin poate fi cauzat i de o
contaminare cu secreii din cile genitale, dar n marea ma&oritate a cazurilor,
poziti$area testului pentru leucocite semnific prezena unei infecii bacteriene de
tract urinar.
Uneori, n cazul inflamaiilor cronice, se obser$ o puternic reacie
leucocitar n absena bacteriilor, cunoscut sub numele de Nleucociturie
abacterianO. 'ceast situaie este obser$at adesea ca simptom unic n
pielonefritele cronice, tuberculoz, di$erse tumori.
d( Nitriii
$rincipiu
1itriii sunt detectai pe baza principiului testului Priess: orice nitrat prezent n
urin e transformat prin reducere de ctre bacterii ntr!un nitrit:
Nitrat 5 reducere -acterian 5 Nitrit
'mina aromatic a sulfanilamidei reacioneaz cu nitritul n prezena unui
tampon acid form"nd o sare de diazoniu care se cupleaz cu *!hidroxi!3,(,*,)!
tetrahidrobenzo!(h)!chinolin form"nd un deri$at azo de culoare roie. =ntensitatea
culorii este direct proporional cu concentraia nitriilor dar fr nici o legtur cu
se$eritatea infeciei.
H
2
N NH
3
+
NO
2
-
N
+
N
SO
2
H
+
H
2
N SO
2
N
+
N
H
2
N SO
2
N
H
OH
H
N
+
N
H
2
N SO
2
N
H
OH
+ + 2H
2
O
+
Sulfanilamida
Nitrat Sare de dia*oniu
Sare de dia*oniu
Com"onent de cu"lare
,eri#at a*o (rosu
4urse de eroare
- rezultatele fals poziti$e se datoreaz: poliuriei care spal cile urinare,
alimentaiei parenterale, dietei carnale, timpului ndelungat scurs p"n la
efectuarea testului (peste ) ore), utilizarea de recipiente nesterile (n aceast
situaie nu se interpreteaz testul pentru nitrii).
- rezultatele fals negati$e se datoreaz: contaminrii bacteriene a urinei,
tratament cu substane ce conin fenazopiroclor.
4e"ni#icaii clinice
@eacia pentru nitrii este specific pentru prezena bacteriuriei8 reacia este
independent de p+. Un singur test negati$ nu exclude o infecie de tract urinar
deoarece numrul bacteriilor i coninutul de nitrai poate $aria. 'bsena culorii la teste
repetate nu exclude o infecie deoarece nu toate microorganismele formeaz nitrii.
2n mod normal, urina nu conine nitrii. 'dministrarea de tratamente ce au n
componena lor nitrii nu se concretizeaz prin excreia de nitrii. Qrice nitrit excretat
urinar este de natur exclusi$ bacterian.
2n prezena unui tratament antibiotic sau a chimioterapiei, metabolismul
enzimatic i populaia microbian sunt inhibate, deci $om a$ea un test negati$. #in
aceast cauz, orice tratament antimicrobian trebuie ntrerupt cu cel puin * zile
nainte de efectuarea testului.
e( $roteinele 0al-u"inele(
$rincipiu
@eacia se bazeaz pe aa numita Neroare proteic a indicatorilor de p+O.
Jona reacti$ conine un amestec tampon i un indicator care i schimb culoarea
de la galben la $erde n prezena proteinelor, independent de p+.
&roteine
Br
Br
Br
Br
OH
O O
-
SO
3
-
Cl
Cl Cl
Cl
-H
+
Br
Br
Br
Br
O
SO
3
-
Cl
Cl Cl
Cl
galben
3-3./$-$.tetraclorofenol-
3/'/$/0-tetrabromsulfonftaleina
(forma neutra
#erde
Anionul acestui com"us
4urse de eroare
! rezultate fals poziti$e sunt obinute n urmtoarele condiii: administrare de
poli$inilpirolidona (un substitut de s"nge), prezena unor reziduuri de dezinfectani ce
conin grupri cuaternare de amoniu sau clorhexidin, medicaie ce conine
fenazopiridin
! medicamente ca i chinina, chinidina, clorochina, sulfonamidele, penicilina
nu interacioneaz cu reacia de pe strip.
4e"ni#icaii clinice
=ndicatorul este foarte sensibil la albuminele cu mas molecular mic
excretate n cazul afectrii renale. -ensibilitatea la alte proteine este sczut
(proteina :ence!Rones, S!globuline, peptone, mucoproteine)
Urina normal conine cantiti extrem de mici de proteine (4.!3.. mg5() ore
sau 3.!*. mg5dl pentru prima urin de diminea), ce nu pot fi e$ideniate prin
reaciile de recunoatere obinuite. 2n mod patologic urina poate conine ns
cantiti mai mari sau mai mici de substane proteice: ele constituie aa numita
proteinurie.
$roteinuria este frec$ent un semn de boal renal dar este nespecific.
%rezena ei nu demonstreaz o nefropatie dar nici absena ei nu o exclude.
#epistarea unei proteinurii necesit un diagnostic diferenial.
Proteinuria benign. 6a unele persoane sntoase, fr afectare renal se
poate obser$a uneori o proteinurie ce apare mai frec$ent n &urul $"rstei de *. ani.
Cauzele cele mai incriminate sunt: stresul fizic i emoional, ortostatismul prelungit,
lordoza. %roteinuriile asociate hipotermiei, supranclzirii organismului, sarcinii sau
folosirii medicamentelor $asoconstrictoare sunt, de asemenea, considerate benigne.
Proteinuria extrarenal. %roteinele pot aprea n urin n ma&oritatea situaiilor
cu tablou acut, cum ar fi: colicile, crizele epileptice, infarctele, accidentul $ascular
cerebral, traumatisme craniene, postoperator. 'ceste proteinurii dispar imediat ce
cauza extrarenal a fost eliminat.
Proteinuria de cauz renal. Q cretere a permeabilitii capilarelor
glomerulare datorit modificrilor patologice de la acest ni$el conduce la dez$oltarea
proteinuriei renale. 'ceast proteinurie este persistent i este obser$at pe tot
parcursul zilei i a nopii. Cele mai pronunate proteinurii sunt obser$ate n nefroze.
2n glomerulonefrite excreia proteic este de obicei situat n &urul $alorii de (..!*..
mg5dl i nsoit de alte c"te$a simptome, fiind acompaniat aproape constant de
microhematurie.
%roteinuria de origine tubular se datoreaz leziunilor celulelor tubulare i5sau
tulburrilor de absorbie tubular a proteinelor din filtratul glomerular. 'cest tip de
proteinurie se nt"lnete n cazul pielonefritelor, nefritelor, chistelor renale, rinichiului
polichistic.
0xcreia intermitent de proteine apare adesea n pielonefritele cronice.
Proteinuria postrenal nsoete procesele inflamatorii de la ni$elul $ezicii
urinare, prostatei i hemoragiile tractului urinar.
#( 6luco+a
$rincipiu
9estul de punere n e$iden a glucozei se bazeaz pe reacia specific cu
glucozoxidaz!peroxidaz n care #!glucoza este oxidat enzimatic de ctre oxigenul
atmosferic la T!#!gluconolacton. 'pa oxigenat rezultat este utilizat ntr!o reacie
de culoare. 'stfel sub aciunea peroxidazei apa oxigenat de descompune n ap i
oxigen atomic care oxideaz tetrametilbenzidina la un deri$at colorat n $erde!
albastru.
OH
O
CH
2
OH
OH
OH
HO
+O
2
&O,
H
2
O
2
H
H
O
CH
2
OH
OH
OH
HO
H
O
1luco*a
1luconolactona
NH
2
H
2
N
H
2
O
2 ,eri#at colorat #erde-albastru H
2
O
3/3-/$/$--tetrametilben*idina
1O,
+
+ +
4urse de eroare
- datorit reaciei enzimatice, interferentul ma&or, $itamina C, a fost eliminat.
- testul este independent de p+ i de prezena corpilor cetonici.
- rezultate fals poziti$e pot aprea la utilizarea dezinfectanilor care conin ap
oxigenat
4e"ni#icaii clinice
Urina normal conine o cantitate foarte mic de glucide (*4.!4.. mg5() ore
sau 34 mg5dl n urina de diminea), cantitate neidentificabil prin metodele uzuale.
#eterminarea glucozei n urin are o $aloare diagnostic mare pentru
depistarea diabetului zaharat c"t i pentru posibilitatea de autocontrol a acesteia de
ctre pacieni. %e de alt parte, absena glicozuriei nu exclude o alterare a
metabolismului glucidic, n particular, nu exclude un diabet zaharat. #e asemenea,
glicozuria poate fi cauzat i de ali factori.
Plicozuria apare atunci c"nd reabsorbia tubular (tubul proximal) la ni$el
renal a glucozei este depit, la o $aloare a glicemiei de peste34.!3,. mg5dl (prag
renal de eliminare a glucozei).
Glicozuria din diabetul zaharat. 7a&oritatea pacienilor diabetici prezint
glicozurie, dependent de se$eritatea bolii i de integritatea funciei renale.
#eterminarea glicozuriei postprandial este mai eficient pentru depistarea diabetului
dec"t cea efectuat folosind prima urin de diminea.
Glicozuria renal (diabetul renal) reprezint o tulburare congenital benign
caracterizat prin prezena unei glicozurii, constante sau intermitente, n timp ce
glicemia are $alori normale sau sczute. 2n aceast situaie, reabsorbia tubular a
glucozei este limitat, fapt care duce la pierderea de glucoz prin urin.
,( Corpii cetonici
$rincipiu
#epistarea corpilor cetonici se bazeaz pe principiul reaciei 6egal. 'cidul
acetoacetic i acetona reacioneaz cu nitroprusiatul de sodiu i glicina n mediu
alcalin conduc"nd la un compus $iolet. @eacia este specific doar pentru cei doi
corpi cetonici8 acidul F!hidroxibutiric nu reacioneaz.
Na
2
2Fe(CN
$
NO3 + CH
3
- C - R Na
3
2Fe(CN
$
N 4 CH - C - R3 + H
2
O
Nitro"rusiat de sodiu
Cor" cetonic
Com"le) colorat #iolet
O
O
OH
4e"ni#icaii clinice
Corpii cetonici (acidul acetoacetic, acidul F!hidroxibutiric i acetona) sunt
prezeni n urin atunci c"nd exist o degradare a acizilor grai datorit unui aport
insuficient de energie sub form de glucoz. %redominana lipolizei conduce la
creterea ni$elului acizilor grai liberi n ser urmat de degradarea lor la ni$el hepatic
p"n la acetil!Coenzima ', form sub care pot fi utilizai n continuare n alte procese
metabolice. 'cest exces $a fi con$ertit n acid acetoacetic ce $a fi transformat parial
n acid F!hidroxibutiric i doar o mic parte n aceton.
Cetonuria din dia-etul +a/arat& %rezena corpilor cetonici n urin este
semnalat atunci c"nd diabetul zaharat este decompensat. -tarea comatoas i
precomatoas sunt ntotdeauna acompaniate de cetoacidoz, cu excepia comei
hiperosmolare. #eficitul relati$ sau absolut de insulin determin reducerea utilizrii
glucozei de ctre esutul adipos i celula muscular, a$"nd ca rezultat intensificarea
lipolizei. Corpii cetonici rezultai mpreun cu alte modificri fiziopatologice
(deshidratare, pierdere de electrolii) au ca i consecin instalarea comei.
Cetonuria de cau+ nedia-etic& 0xist i alte situaii n care apar corpii
cetonici n urin: inaniie, $rsturi incoercibile la copii mici, febr n special atunci
c"nd nsoete o boal infecioas, $rsturile din primele luni de sarcin, boli
metabolice congenitale.
/( Uro-ilino,enul
$rincipiu
Aluoroboratul de p!metoxibenzendiazoniu, o sare de diazoniu stabil,
formeaz un compus azo de culoare roie n prezena urobilinogenului n mediu acid.
N
+
N
Sare de dia*oniu
O H
3
C
BF
'
-
+ 5robilinogen
6ediu acid
Com"us a*o (rosu
4urse de eroare'
- rezultate fals negati$e se nt"lnesc n urmtoarele condiii: timpul ndelungat
scurs de la recoltare p"n la efectuarea testului i expunerea probei la lumin
determin oxidarea urobilinogenului8 terapia cu hexametilentetramin,
conser$area probei de urin cu formol.
- rezultatele fals poziti$e se pot datora medicaiei care coloreaz urina n rou
sau prezint o culoare roie n mediu acid.
- testul este specific, nefiind supus interferenelor care apar n cazul reaciei
0hrlich
4e"ni#icaii clinice
Urobilinogenul se formeaz prin reducerea de ctre bacteriile intestinale a
bilirubinei care este secretat n intestin prin bil. 'cesta aste reabsorbit i a&unge la
ficat dar o mic parte se excret prin urin.
Suprancrcarea capacitii funcionale hepatice. C"nd sunt prezente cantiti
mari de bilirubin, i de asemenea i urobilinogen, ca rezultat al degradrii excesi$e
a hemoglobinei, capacitatea funcional hepatic poate fi depit, chiar dac ficatul
prelucreaz de (!* ori mai mult urobilinogen dec"t n mod normal. Urobilinogenul
neprelucrat a&unge n torentul sang$in i n final este excretat renal. Cauzele
suprancrcrii capacitii funcionale hepatice sunt: anemii hemolitice, anemie
pernicioas, hemoliz intra$ascular ca i consecin a unor intoxicaii, boli
infecioare sau accidente transfuzionale, policitemie.
Alterarea capacitii funcionale hepatice. :olile hepatice au drept consecin
alterarea capacitii funcionale a ficatului. Urobilinogenul ce intr prin $ena port nu
este complet metabolizat i se elimin ca atare la ni$el renal. 'ceast alterare se
nt"lnete n urmtoarele situaii: hepatite $irale, hepatite cronice, ciroz hepatic,
intoxicaii cu lezarea parenchimului hepatic, tumori hepatice.
Scurtcircuitul hepatic. 2n unele situaii patologice (de exemplu, n ciroza
hepatic cu hipertensiune portal, tromboz de $en port, ocluzia $enei hepatice)
fluxul sang$in la ni$elul $enei porte este redus iar o parte din urobilinogen trece direct
n s"nge fiind excretat renal.
Absena urobilinogenului din urin. Urobilinogenul este absent n urin n
situaia produciei insuficient de bil de ctre celulele hepatice, alterarea capacitii
de secreie a bilei n intestin i absena reducerii bilirubinei la ni$el intestinal. Cauze:
obstrucia complet a ductului biliar comun n absena infeciei de tract biliar,
stoparea complet a produciei de bil de ctre ficat (hepatite $irale se$ere, intoxicaii
cu afectare hepatic se$er), absena florei intestinale (fiziologic la nou!nscui i
nt"lnit rar dup un tratament antibioterapic intensi$).
i( Biliru-ina
$rincipiu
@eacia se bazeaz pe cuplarea bilirubinei cu o sare stabil de diazoniu ((,?!
diclorobenzendiazoniu difluoroborat) n mediu acid cu formarea unui deri$at azo de
culoare $iolet.
N
+
N
Sare de dia*oniu
BF
'
-
+ Bilirubina
6ediu acid
Com"us a*o (#iolet
Cl
Cl
4urse de eroare
- sensibilitatea este alterat de cantiti mari de acid ascorbic sau nitriii din
urin.
- rezultate fals negati$e se nt"lnesc n urmtoarele condiii: timpul ndelungat
scurs de la recoltare p"n la efectuarea testului i expunerea probei la lumin
determin oxidarea bilirubinei.
- rezultatele fals poziti$e se pot datora medicaiei care coloreaz urina n rou
sau prezint o culoare roie n mediu acid (de exemplu, fenazopiridina).
4e"ni#icaii clinice
Ca rezultat al con&ugrii (esterificrii) cu acid glucuronic, bilirubina de$ine
hidrosolubil i astfel susceptibil de a fi excretat renal. Biliru-ina pre+ent 1n
urin este 1ntotdeauna -iliru-in con2u,at 0direct(&
2n toate procesele patologice n care a$em o cretere a concentraiei
bilirubinei con&ugate n plasm, a$em i ni$ele considerabile ale bilirubinei urinare.
:ilirubina con&ugat este prezent n cantiti mari n plasm n urmtoarele situaii:
creterea presiunii intracanaliculare datorit obstruciei intra! sau extrahepatice,
inflamaie sau fibroz periportal, necroz hepatic.
2( He"atiile 0eritrocitele(
$rincipiu'
9estul se bazeaz pe acti$itatea de tip peroxidazic al hemoglobinei i
mioglobinei care catalizeaz oxidarea unei substane indicator (*,*G,4,4G!
tetrametilbenzidin) de ctre un hidroperoxid organic ((,4!dimetilhexan!(,4!
hidroperoxid) conduc"nd la un compus $erde!albastru.
0xist dou scale pentru determinarea hemoglobinei i a eritrocitelor libere.
-ensibilitatea testului este de 4 eritrocite5Ul ceea ce corespunde la .,.34 mg
hemoglobin5dl urin. 'ceast sensibilitate mare este dat de adugarea unui
acti$ator n amestecul de reacie.
NH
2
H
2
N
3/3-/$/$--tetrametilben*idina
+
OOH
OOH
OH
OH
Com"us #erde-albastru
Hemoglobina
2/$-dimetil7e)an
2/$-di7idro"ero)id
+
+
4urse de eroare
- prezena $itaminei C nu interfer cu reacia de pe strip.
- o concentraie a nitriilor de peste (,( mmol56 (3. mg5dl) ($alori foarte rar
nt"lnite n infeciile de tract urinar) scade sensibilitatea reaciei.
- nu se recomand conser$area urinei cu formol deoarece conduce la rezultate
fals negati$e
- rezultate fals poziti$e se pot obine dac urina conine urme de detergeni
oxidani
- proteinuria peste 4 g56 (4.. mg5dl) poate atenua reacia de culoare a
hemoglobinei.
4e"ni#icaii clinice
+ematuria, excreia eritrocitelor n urin, este nt"lnit n multe situaii
patologice i din acest moti$ este necesar clarificarea originii s"ngerrii. 2n aceast
situaie, cele mai multe date sunt oferite de examinarea morfologiei hematiilor din
sedimentul urinar.
Cau+ele /e"aturiei'
- calculii renali. %rezena lor pro$oac dureri colicati$e renale acute nsoite
adesea de hematurie.
- tumori ale tractului urinar. 7icrohematuria de cauz neprecizat ca
manifestare unic de boal este adesea de origine tumoral, deoarece
ma&oritatea tumorilor sunt asimptomatice o perioad lung de timp.
- glomerulonefritele. 2n acest caz hematuria adesea microscopic, este nsoit
de proteinurie i hipertensiune arterial. #ismorfismul eritrocitar are, n acest
caz, un rol diagnostic important.
- pielonefritele n care hematuria este prezent doar la o treime din pacieni.
Metode clasice utili+ate la exa"enul -ioc/i"ic al urinei
Unele laboratoare utilizeaz nc unele metode de determinare a c"tor$a
parametrii biochimici ai urinei
a( 3ensitatea urinar
#ensitatea urinei se determin cu urodensi"etrul folosind un eantion din
urina colectat n () de ore. Urodensimetrul este un densimetru etalonat pentru
determinarea densitii de lichide cuprinse ntre 3,...!3,.?. g5cm
*
la 34/C. #e
aceea, n cazul n care determinarea densitii urinei se face la alt temperatur i
urina conine glucoz este necesar corectarea ei. Corectarea se face folosind
tabelul :uchardat.
Mod de lucru
2ntr!un cilindru gradat de 4. ml se aduc aproximati$ ). ml urin e$it"nd
formarea spumei8 dac spuma totui s!a format, ea se ndeprteaz cu o h"rtie de
filtru. -e cufund apoi urodensimetrul n cilindrul cu urin, iar c"nd acesta nu mai
oscileaz se citete densitatea corespunztoare di$iziunii de pe ti&a aflat la
suprafaa urinei, a$"nd gri& ca urodensimetrul s nu fie lipit de pereii cilindrului.
-( pH*ul urinar
#eterminarea p+!ului cu h"rtie indicator
@eacti$i:
! pachete cu benzi de h"rtie i o scala de culori corespunztoare.
Mod de lucru
-e introduce n urina proaspt emis, timp de 3!( secunde o band de h"rtie
indicator uni$ersal. #up *. de secunde se stabilete $aloarea p+!ului compar"nd
culoarea h"rtiei cu cea a scalei de culori care nsoete pachetul.
c( $roteinele
Recunoaterea ,lo-al a proteinelor din urin
'pariia proteinelor n urin se e$ideniaz prin precipitarea lor sub aciunea
unor ageni de precipitare ca: acidul sulfosalicilic, picric, acetic etc. 7ai folosit este
primul pentru c:
! este foarte sensibil, reuind s deceleze cele mai fine urme de proteine prezente8
! precipit toate tipurile de proteine, cu excepia peptonelor8
! reacia are loc la rece.
$ro-a cu acid sul#osalicilic
$rincipiu
2n prezena proteinelor existente n urin, acidul sulfosalicilic determin
apariia unei turbiditi sau chiar a unui precipitat, n funcie de proteinurie.
Reactivi
'cid sulfosalicilic (.<.
Mod de lucru
2ntr!o eprubet se msoar aproximati$ * ml urin, centrifugat, peste care se
toarn (!* picturi de acid sulfosalicilic. -e agit i se urmrete apariia turbiditii
pe un fond negru, n comparaie cu o eprubet care conine numai urin.
Re+ultat
- urina rm"ne limpede: lipsesc proteinele n urin, rezultat negati$ (!)8
- urina prezint opalescen uoar D urme de proteine (V):
- opalescen e$ident D poziti$ (L)8
- opalescen intens D poziti$ (LL)8
- precipitat uor D intens poziti$ (LLL):
- precipitat granular sau cazeinos abundent D intens poziti$ (LLLL).
Cau+e de eroare
Unele medicamente, aflate n urin, pot da cu acidul sulfosalicilic o
opalescen mai mult sau mai puin intens.
Recunoaterea al-u"inelor ter"osolu-ile 0Bence*7ones(
Mod de lucru
2ntr!o eprubet se nclzesc 3. ml urin la temperatura de ?./C. %rezena
albuminei termosolubile se manifest prin apariia unui coagul sau a unei tulbureli,
care dispare dac ridicm temperatura. 1atura chimic a albuminelor tip :ence!
Rones este diferit.
3eter"inarea proteinelor din urin 0Metoda Es-ac/(
Reactivi
@eacti$ de precipitare: 3. grame acid picric i (. grame acid citric se dizol$
n ap i se aduc la un $olum final de 3... ml.
Mod de lucru
2n albuminometrul 0sbach se toarn urina filtrat p"n la semnul U i reacti$
p"n la semnul @. -e amestec i se las n repaus () de ore, dup care se citete
nlimea precipitatului depus. Pradaiile albuminometrului indic direct grame de
proteine53... ml urin. #ac urina are o densitate mai mare de 3,..,, se $a dilua cu
apa de dou ori, iar pentru densitatea de 3,.(. se $a dilua de * ori. @ezultatele
obinute se nmulesc cu diluia.
2n unele cazuri, albumina precipitat nu se depune la fundul tubului. 0a
rm"ne n suspensie. 2n aceste cazuri a$em de!a face cu albumina neretractibil
descris de :ouchardat.
d( 6lucidele
Recunoaterea ,lucidelor reductoare
9oate glucidele eliminate au proprieti reductoare fa de anumii reacti$i care
conin sruri de cupru, argint sau bismut, datorit prezenei n molecula lor a unei
funciuni carbonilice libere. 0xcepie face zaharoza, care are funciunile carbonilice
blocate, dar prin hidroliz elibereaz produi cu aciune reductoare. @educerea
reacti$ilor poate fi dat i de alte substane cu caracter reductor coninute n urina,
moti$ pentru care este normal s se indice existena corpilor reductori.
Metoda Bot,er*N8lander
$rincipiu
'zotatul bazic de bismut, n mediu alcalin, la cald este redus de ctre un
glucid reductor la bismut metalic de culoare neagr:
C+
(
Q+
*+
(
Q L
C+
(
Q+
(:i(Q+)
*
L
(:i
*
(
+ Q
C
C
Q+ +
)
)
L *
( C
Q+ +
)
)
CQQ+
:i(Q+)
(
1Q
*
L 1aQ+
3../C
:i(Q+)
*
L 1a1Q
*
Reactivi
3. @eacti$ 1>lander:
- +idroxid de sodiu 3.. g8
- -are -eignette (tartrat dublu de sodiu i potasiu) ). g8
- 'zotat bazic de bismut (. g,
- 'p distilat ad. 3... ml.
Mod de lucru
-e msoar ntr!o eprubet un ml urin i o pictur de reacti$ 1>lander. -e
menine eprubeta, n baia de ap la fierbere, timp 4 minute. 'pariia unui precipitat negru
indic un rezultat poziti$. %ot aprea rezultate fals poziti$e datorit apariiei unui
precipitat negru de sulfur de bismut produs de aminoacizi cu sulf din albuminele
urinare. 2n aceste cazuri se repet proba cu un reacti$ cu sulfat de cupru (:enedict).
Reacia este sensi-il i are valoare dia,nostic deose-it c9nd re+ultatul este
ne,ativ.
Metoda Benedict 0se"icantitativ(
$rincipiu
7onozaharidele, n mediu alcalin, la cald, reduc srurile cuprice complexate la
oxidul cupros rou!crmiziu. Complexarea ionilor de cupru n mediu alcalin (pentru
a mpiedica formarea hidroxidului cupric) se face cu citrat de sodiu.
Reactivi
@eacti$ :enedict:
- Citrat de sodiu 3H* g
- Carbonat de sodiu anhidru 3.. g
- -ulfat de cupru 3H,* g
- 'p distilat ad 3... ml
Mod de lucru
2ntr!o eprubet se msoar: un ml reacti$ :enedict i o pictur urin. -e
menine eprubeta n baia de ap la fierbere, timp de 4 minute.
Re+ultat
7odul n care este interpretat reacia este redat n tabelul urmtor:
Culoarea Citirea reaciei
Concentraia ,lucidului
0,:%;;; "l(
1eschimbat negati$ .
Ierde fr precipitat L .,(!.,*
Ierde cu precipitat L .,4
Ierde msliniu LL 3,.
%ortocaliu LLL 3,4
@ou!crmiziu LLLL peste (,.
#eoarece reacia de reducere este dat i de alte glucide n afar de glucoz,
pentru a stabili exact natura glucidului identificat, se utilizeaz reacia cu
fenilhidrazin sau o reacie enzimatic.
e( Corpi cetonici
Reacii de recunoatere
6a recunoaterea lor se folosesc reaciile de culoare pe care acidul
acetilacetic i acetona le dau cu: nitroprusiatul de sodiu, aldehida salicilic, clorura
feric. @edm n continuare c"te$a modaliti de recunoatere a corpilor cetonici
bazate pe reacia de culoare cu nitroprusiatul de sodiu.
Reacia Le,al*I"-ert
$rincipiu
Corpii cetonici menionai reacioneaz cu reacti$ul 6egal!=mbert n prezena
amoniacului, d"nd natere unui produs de culoare $iolet.
Reactivi
3. @eacti$ 6egal!=mbert (nitroprusiat de sodiu 4 g, acid acetic glacial 4. ml,
completare cu ap distilat la 3.. m=). -e conser$ n sticle brune.
(. 'moniac concentrat (4<.
Mod de lucru
2ntr!o eprubet se aduc (!* ml urin filtrat i )!? picturi de reacti$ 6egal!
=mbert i se omogenizeaz. %e pereii eprubetei se prelinge circa un ml de amoniac
(4<, n aa fel ca acesta s formeze un strat superior, apoi se las n repaus 34
minute.
Urina normal nu d nici o reacie. 2n prezena corpilor cetonici apare un inel
$iolet la limita de contact al celor dou straturi de lichide.
Reactivi su- #or"a solid
#eoarece reacti$ul 6egal!=mbert, aflat sub form de soluie, se altereaz cu
timpul, poate fi nlocuit cu reacti$i n stare solid care, sub form de pulbere sau de
pastile, sunt mai stabili.
a& Reactivul su- #or" de pul-ere& -e obine prin amestecarea urmtoarelor
substane n proporiile indicate (nitroprusiat .,4 g, sulfat de amoniu 3.,. g, carbonat
de sodiu anhidru 3.,. g)
Mod de lucru
%e o plac de porelan se pune un $"rf de spatul de pulbere peste care se
adaug (!* picturi de urin i se amestec cu o baghet sau cu colul unei lame de
microscop. #ac urina conine corpi cetonici apare o culoare $iolet mai mult sau
mai puin intens. 2n absena corpilor cetonici culoarea $iolet nu apare.
-& Reactiv su- #or" de pastil& -e gsete n comer, sub denumirea de
WacetotestW, nsoit de modul de lucru, care fiind foarte simplu, poate fi efectuat chiar
de ctre bolna$ul neinternat n spital.
Mod de lucru
2ntr!o eprubet se introduc aproximati$ 4 ml de urin proaspt peste care se
adaug pastila i se ateapt c"te$a minute. %rezena corpilor cetonici face ca
pastila s se coloreze n $iolet, cu nuane i intensiti de culoare dependente de
cantitatea de corpi cetonici.
Cau+e de eroare
6a concentraii mari i creatinina d, n aceleai condiii, culoare $iolet.
I"portana dia,nostic a reaciei
2n mod curent, n strile de acidocetoz, eliminarea corpilor cetonici n urin
crete apreciabil. 'ceast situaie se nt"lnete n afeciuni care cresc cetogeneza
hepatic sau scad utilizarea corpilor cetonici n esuturile extrahepatice (esut
muscular, rinichi) i anume: efort muscular intens, inaniie sau regim alimentar
dezechilibrat (bogat n lipide i proteine, srac n glucide)8 tulburri gastrointestinale
acute sau cronice, n special la copii (dispepsie acut, toxicoz)8 $rsturi accentuate
de sarcin, diabet zaharat.
#( Uro-ilino,enul
2n urina normal, urobilinogenul se afl n cantiti mici dar decelabile8 lipsete
sau apare crescut n stri patologice.
Recunoaterea uro-ilino,enului cu reactiv E/rlic/
$rincipiu
Urobilinogenul se condenseaz cu p!dimetilaminobenzaldehida n mediu acid
d"nd natere unui produs de culoare roie.
Reactiv E/rlic/
-e dizol$ ( g p!dimetilaminobenzaldehida n 3.. ml acid clorhidric (. <.
Mod de lucru
2ntr!o eprubet se aduc aproximati$ ( ml urin proaspt (dar rece) i 3!(
picturi de reacti$ 0hrlich8 dac nu apare imediat o coloraie roie se nclzete la
flacr sau n baia de ap.
Re+ultate'
Uro-ilino,enul nor"al: coloraia roie nu apare dec"t prin nclzire.
Uro-ilino,enul crescut' coloraia roie apare chiar la rece (temperatura camerei).
Urobilinogen absent: coloraia roie nu apare nici la cald.
Urobilinogenul are $alori crescute n icterul hemolitic i parenchimatos
(hepatic), tumori maligne hepatice, steatoza hepatic, abces hepatic i lipsete n
icterele mecanice (prin obstrucie).
,( $i,"enii san,uini din urin pot fi reprezentai de hemoglobina liber i
cea coninut n eritrocite. 2n primul caz, n sedimentul urinar nu sunt prezente
hematii, n cel de!al doilea caz, n sedimentul urinar apar structuri hematice.
Reacii de recunoatere
@ecunoaterea pigmenilor sanguini se poate face spectroscopic sau prin
reacii chimice. -pectral, hemoglobina se recunoate prin benzile caracteristice pe
care le prezint, iar chimic prin acti$itatea sa pseudoperoxidazic, ce o exercit
asupra apei oxigenate. 7etoda descris mai &os mai are aplicabilitate practic doar
pentru examenul scaunului pentru decelarea hemoragiilor oculte
Metoda Adler
$rincipiu
+emoglobina descompune +
(
.
(
cu eliberare de oxigen atomic, care oxideaz
benzidina la un compus de tip chinoidinic. 'cesta, condens"ndu!se cu o nou
molecul de benzidin, formeaz albastrul de benzidin.
Reactivi
- benzidin pur8
- acid acetic glacial:
- ap oxigenat * g53.. ml (3( ml perhidrol53.. ml).
Mod de lucru
2ntr!o eprubet se introduc c"te$a cristale de benzidin, 4!3. picturi de acid
acetic glacial i se agit p"n la dizol$are complet. 'poi se adaug 3!( ml urin,
c"te$a picturi de ap oxigenat i se agit pentru omogenizare. 2n prezena
pigmenilor sanguini apare o culoare $erde care trece n albastru.
<& Exa"enul "icroscopic al sedi"entului urinar
Mod de lucru:
- 2ntr!o eprubet de centrifug se introduc aproximati$ 3. ml de urin care se
centrifugeaz 3. minute la (... rotaii5minut.
- se arunc supernatantul i se efectueaz un preparat nati$ (ntre lam i
lamel)
- pe o lam H? x (? mm se pune o pictur din sedimentul urinar
- se acoper cu o lamel (. x (. mm
- se examineaz la microscop cu obiecti$ul (.X i apoi cu ).X. Qcularele
recomandate sunt cele de 3.X
Clasi#icarea sedi"entului urinar:
sedimentul urinar organizat
sedimentul urinar neorganizat
a( 4edi"entul urinar or,ani+at cuprinde:
%( Celulele sedi"entului urinar
Leucocitele sunt cele mai frec$ent nt"lnite elemente de sediment.
7a&oritatea sunt reprezentate de granulocitele neutrofile8 mai rar, se nt"lnesc i alte
tipuri de leucocite:eozinofile, monocite, macrofage, limfocite, histiocite.
Ialori normale: Y 4 celule5c"mp de putere mare (obiecti$ ).X)
6eucocitele se prezint n urin sub form de globule sferice granulate, cu un
nucleu de form i mrime diferit. %e preparatele necolorate nu se poate face
distincia ntre diferitele tipuri de leucocite dar pot fi identificate cu coloraii specifice.
1u exist ntotdeauna o concordan ntre numrul de leucocite5c"mp i
gra$itatea leziunilor inflamatorii.
He"atiile. 2n sedimentul proaspt hematiile apar ca nite discuri biconca$e,
cu diametrul mediu n &ur de ? Um8 n urinile concentrate hematiile ncep s se
ratatineze.
Ialori normale: Y 4 celule5c"mp de putere mare (obiecti$ ).X)
2n funcie de aspectul morfologic al hematiilor, putem diferenia o s"ngerare de
origine glomerular de una neglomerular.
! dac a$em de!a face cu o s"ngerare neglomerular, hematiile $or fi eumorfe
! dac s"ngerarea este glomerular hematiile eumorfe $or de$eni dismorfe.
'ceste modificri apar prin re$ersibilitatea sau ire$ersibilitatea rspunsului fa de
$arietatea influenelor p+!ului urinar, hipertonicitii medularei renale sau prezena
acizilor grai, lizolecitinei, acizilor biliari i e$entual a barbituricelor i salicilailor.
Celulele epiteliale ale cilor urinare sunt de obicei absente sau rare ntr!un
sediment normal. 'spectul acestor celule difer mult de cel al esutului de origine.
#atorit pierderii legturilor tisulare, ele adopt o form rotund i prezint diferite
tipuri de transformri degenerati$e deoarece celulele moarte nu pot rezista atacului
osmotic al urinei. 2n funcie de originea lor, exist * tipuri de celule epiteliale
3. Celulele scuamoase care de obicei nu pro$in din tractul urinar ci de la ni$elul
tractului genital, i rareori sunt semnificati$e .
(. Celulele tubulare renale pro$in de la ni$elul tubilor renali i apar n afeciunile
care intereseaz parenchimul renal.
*. Celulele tranziionale (uroteliale) pro$in de la ni$elul uroteliului care cptuete
tractul urinar de la bazinet p"n la prima poriune a uretrei8 apar n urin
atunci c"nd a$em de!a face cu un proces inflamator urotelial.
.( Cilindrii urinari sunt formaiuni cilindrice bine conturate, cu capetele
rotunde sau rupte care se formeaz la ni$elul tubului contort distal i colector.
%roteinele sang$ine care trec prin membrana glomerular lezat se coaguleaz i se
muleaz pe tubii uriniferi. %roteina 9amm!+orsfall (o glicoprotein secretat de ctre
braul gros ascendent al ansei +enle) reprezint substana fundamental a cilindrilor.
9ipuri de cilindri urinari:
3. Cilindrii hialini sunt formai n absena celulelor n lumenul tubilor i conin
numai protein 9amm!+orsfall, ceea ce la confer un indice de refracie sczut.
'ceti cilindrii nu indic o afectare renal atunci c"nd sunt prezeni n numr mic.
(. Cilindri granuloi au suprafaa acoperit cu granulaii care au forme i
mrimi diferite. 'ceti cilindri sunt considerai o form de degenerare a cilindrilor
celulari.
*. Cilindri ceroi se numesc astfel deoarece au un aspect asemntor cu
ceara topit. 2n condiiile unui flux urinar sczut, un cilindru $a rm"ne mai mult timp
n interiorul tubilor, lu"nd un aspect ceros. %rezena acestora indic ntotdeauna o
afectare tubular de natur cronic, i, spre deosebire de cilindri hialini i granuloi,
au ntotdeauna o semnificaie patologic.
). Cilindri celulari apar la pacienii ce prezint o scdere a perfuziei renale i
indic ntotdeauna o afectare tubular acut, dar nu indic extinderea sau
re$ersibilitatea acestei afectri.
-( 4edi"entul urinar neor,ani+at cuprinde:
%( Cristalele& Urina este un mediu complex care influeneaz procesul de
cristalizare, aceeai substan put"nd cristaliza n diferite forme dependent de
compoziia urinii. -tudiul cristalelor se efectueaz at"t n microscopie obinuit c"t i
n lumin polarizat. Cristalele se exprim sub form de: rare, prezente, frec$ente,
semnal"ndu!se de asemenea prezena de macrocristalelor sau a microcristalelor.
%rincipalele cristale nt"lnite n sedinmentul urinar sunt:
3. Cristalele de acid uric. 2n microscopia optic obinuit cristalele de acid uric
se prezint sub form de NbutoiaO sau Nlm"ieO a$"nd o culoare galben!brun8 n
microscopia cu lumin polarizat aceste cristale sunt intens birefringente a$"nd o
palet larg de culori, de la albastru!$erzui la rou sau galben, n funcie de grosimea
lor.
(. Cristalele de oxalat de calciu sunt slab birefringente i se prezint sub dou
forme: dihidrat sau Nplic de scrisoareO i monohidrat sau Ntrunchi de copacO,
*. Cristalele de fosfat amoniaco!magnezian apar adesea n urinile $echi i
conser$ate necorespunztor datorit fermentaiei amoniacale bacteriene. %rezena
lui n urina proaspt de dimineaa semnific o infecie urinar. 0ste birefringent i
are un aspect de Ncapac de sicriuO.
.( Bacteriile i levurile& %rezena lor semnific o infecie urinar i n
ma&oritatea cazurilor sunt nsoite i de o reacie leucocitar.
Buletin de anali+
@ezultatele examenului sumar de urin se nscriu ntr!un Buletin de anali+
ca n modelul alturat. Un buletin de analiz care d relaii normale pri$ind examenul
sumar de urin se prezint astfel:
3ensitate&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& %=;%> ,:"l
pH&&&&&&&&&&&&&&&&& &&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& >
Nitrii&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& a-sent
$roteine&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& a-sent
6luco+a&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& a-sent
Corpi cetonici&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& a-sent
Uro-ilino,en&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& nor"al
Biliru-in&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& a-sent
-ediment: 3!( hematii5c"mp, 3!( leucocite5c"mp, rare epitelii plate de tip scuamos.