ENERGETIC BIOCHIMIC

Energetic biochimic = domeniu din biochimie ce se ocup cu studiul transformrilor

energetice care nsoesc reaciile biochimice.
Diversele activit i pe care le desf oar organismele vii (contracia muscular, transportul
ionilor i moleculelor prin membrane mpotriva gradientelor de concentraie, biosinteza moleculelor
complexe din precursori simpli, etc. necesit energie. !a urmare, toate organismele au capacitatea
s dob"ndeasc energie din mediul ncon#urtor i s foloseasc aceast energie n mod eficient
pentru a desf ura procesele respective. $mul este un organism chemotrofic% capteaz energie din
mediu sub forma compu ilor organici din componen a nutrien ilor (glucoz, acizi gra i, aminoacizi&
vom considera aceste molecule organice ca fiind 'combustibili( biologici sau metabolici.
Energetica biochimic utilizeaz c"teva concepte de baz din domeniul termodinamicii i
respect legile termodinamicii. )o iunea de sistem termodinamic aplicat la domeniul biochimiei se
refer la sistemul reactant * alctuit din participan ii la o reac ie biochimic (reactani +i produ+i,
solventul +i mediul local. ,ransformrile energetice care au loc ntr*un asemenea sistem pot fi
descrise cu a#utorul a trei tipuri de energie%
* energia liber Gibbs (G - fiecare compus implicat ntr*o reacie chimic conine o
anumit cantitate de energie potenial (potenial chimic, care permite transformarea acelui compus
ntr*un altul, n cadrul reaciei chimice, legat de tipul +i numrul legturilor sale chimice
(msurat n cal.mol sau /.mol& 0 cal = 1,02 /&
* ental!ia (H - este coninutul de cldur al sistemului care reacioneaz (cal.mol sau
/.mol&
* entro!ia (" - msoar gradul de dezordine (sau caracterul aleatoriu al unui sistem
(/.mol34.
5entru un sistem biologic care funcioneaz la temperatur +i presiune constant (n
particular un sistem reactant biochimic, energia capabil s efectueze travaliu, altfel spus energia
care sus ine desf urarea reac iei biochimice este energia liber G. 6unc ion"nd la temperatur
constant, organismul viu nu poate utiliza cldura pentru a efectua un travaliu (nu este o ma in
termic. Din acest punct de vedere, putem considera energia liber 7 ca o energie de calitate
(superioar(, iar cldura o energie de calitate (inferioar(& energia liber se poate transforma n
cldur, dar cldura nu poate fi transformat n energie liber.
8ntr*un sistem biochimic, modificrile celor 9 tipuri de energie sunt relaionate cantitativ
prin ecuaia%
7 = : - , 3 ;
8n cazul unei reacii chimice # $ B (< = reactant, = = produs, este diferena dintre
energia produ+ilor +i energia reactanilor. 7 poate avea valoare%
* negativ (7
=
> 7
<
, reacia are loc cu pierdere de energie liber i se nume te exergonic&
* pozitiv (7
=
? 7
<
, reac ia are loc cu c"+tig de energie liber +i se nume te endergonic&
* zero (7
=
= 7
<
, sistemul este la echilibru.
!onsiderm un sistem reactant < @ = ! @ D.
Dac 7 este diferit de zero, reacia decurge spontan de la compu+ii cu energie liber mai
mare spre compu+ii cu energie liber mai mic, p"n n momentul n care se atinge echilibrul
reac%iei% rata formrii produ+ilor este egal cu rata transformrii produ+ilor n reactani, astfel nc"t
nu mai are loc nici o transformare net n acel sistem. 8n general, numai o parte din energia liber
coninut n reactani poate fi utilizat pentru a realiza transformarea chimic n produ+i, restul este
disipat sub form de cldur sau pierdut sub forma unei cre+teri a entropiei.
Aeacia de mai sus este caracterizat de o constant &e echilibru%
4
eB
= C!D
eB
CDD
eB
.C<D
eB
C=D
eB
(parantezele ptrate reprezint concentraii molare
0
4
eB
reflect compoziia amestecului de reacie a#uns la echilibru, care este aceeai indiferent
de concentraiile iniiale ale reactanilor +i produ+ilor (deci 4
eB
are o valoare fix pentru o reacie
dat.
Exist dou forme ale varia iei energiei libere% 7 i 7E.
F G este &iferen a &e energie liber real , caracteristic pentru condi iile reale din celula
vie (presiune, temperatur, p: i, mai ales, concentra ii reale ale participan ilor la reac ie. 7 a
reac iei directe (< G = este egal ca mrime i opus ca semn cu cea a reac iei inverse (< H =.
!unoa terea valorii lui 7 este util din dou puncte de vedere%
* semnul lui 7 este predictiv pentru sensul de desf urare al unei reac ii < = n
condi iile reale din celula vie&
* mrimea lui 7 arat c"t de departe de echilibru este sistemul reactant n momentul ini ial
i, deci, cuantific tendin a de atingere a echilibrului (aceasta din urm reprezint o for motrice
care (pune n mi care( reac ia biochimic.
;unt posibile trei situa ii%
dac 7 este negati' (reac ie exergonic, reacia are loc spontan de la < ctre = cu pierdere
de energie liber& dac 7 are valoare mare, reacia are, practic, caracter ireversibil (o cantitate
mare de energie liber este dega#at sub form de cldur, iar cldura nu poate fi utilizat pentru a
permite desf+urarea reaciei n sens invers&
dac 7 = (, reacia este la echilibru&
dac 7 este !o)iti', reac ia poate avea loc de la < ctre = (n sensul endergonic numai n
condi iile n care exist un aport de energie liber dintr*o alt surs& altfel, sensul spontan al unei
asemenea reac ii este de la = ctre < (sensul exergonic.
!u alte cuvinte, o reac ie decurge spontan ntotdeauna n sensul exergonic.
F G* este &iferen%a &e energie liber stan&ar&, caracteristic pentru condiii standard
(temperatura de IJE!, p: = K, reactanii +i produ+ii prezeni ntr*o concentraie iniial de 0L.
7 poate fi calculat cunosc"nd valoarea lui 7E i concentra iile participan ilor la reac ie,
conform ecua iei lui Gibbs %
G + G* , RT ln -C.-/.0-#.-B.
(A * constanta gazelor = 0,M2K cal.mol34, = temperatura absolut, C<D, C=D, C!D +i CDD sunt
concentraiile reale din celul n momentul respectiv.
7 a unei reacii care decurge spontan spre echilibru este ntotdeauna negativ (reacia
poate avea loc numai n sensul exergonic +i variabil (datorit modificrii continue a
concentraiilor reactanilor, pe msur ce reacia se desf+oar% 7 devine din ce n ce mai puin
negativ pe msur ce reacia are loc +i este zero n punctul de echilibru, indic"nd faptul c nu se
mai poate produce o transformare net n acea reacie.
Deci c"nd reacia a atins echilibrul, 7 = N +i atunci%
7E = - A, ln C!D
eB
CDD
eB
.C<D
eB
C=D
eB
= - A, ln 4
eB
< adar, valoarea lui 7E pentru o anumit reac ie poate fi calculat cunosc"nd valoarea
constantei de echilibru a acelei reac ii. 4
eB
fiind o constant, rezult c +i 7E este o constant a
crei valoare este caracteristic pentru fiecare reacie dat.
De i valoarea lui 7E indic sensul de desf urare al unei reac ii numai n condi ii standard,
care n ma#oritatea cazurilor sunt diferite de cele reale din celula vie, cunoa terea valorii sale este
util deoarece permite compararea diverselor reacii biochimice n privina variaiei energiei libere.
4eB ln 4eB 7E ;ensul spontan al reaciei
? 0 ? N > N spre dreapta (< G =
0 N N la echilibru (< =
I
> 0 > N ? N spre st"nga (< H =
O reac%ie cu G* 1 ( !oate a'ea loc 2n sensul &irect (s!re &rea!ta &ac G 3 (, acest
lucru fiind posibil dac termenul 'A, ln C5rodu+iD.CAeactaniD( este negativ +i are o valoare absolut
mai mare dec"t 7E. < a se nt"mpl n celul atunci c"nd% (a produsul de reacie este ndeprtat
imediat pe msur ce se formeaz, prin anga#area ntr*o alt reacie, sau (b are loc aportul continuu
al unor cantit i mari de reactant provenit din s"nge sau dintr*o alt reacie. <mbele situaii menin
raportul C5D.CAD mult sub 0, astfel nc"t termenul A, ln C5D.CAD are o valoare negativ mare.
Caracterul a&iti' al 'alorilor G !entru reac ii succesi'e4
8n cazul a dou reac ii succesive, valorile lui 7 se nsumeaz%
(0 < G = 7E
0
(I = G ! 7E
I
Aeac ia global% < G ! 7E
total
= 7E
0
@

7E
I
<cest principiu explic modul n care o reac ie nefavorabil termodinamic ( endergonic,
av"nd o diferen de energie liber 7
en
poate avea loc n sensul direct prin cu!lare cu o reacie
exergonic (av"nd 7
ex
, cu condi ia ca O 7
ex
O ? 7
en
, astfel nc"t 7E
total
s fie > N& o reac ie nu
poate avea loc n mod independent n sensul endergonic. Dou reacii sunt 'cuplate( dac energia
liber dega#at n reacia exergonic susine desf+urarea reaciei endergonice& cuplarea celor dou
reac ii se realizeaz printr*un intermediar chimic comun.
Ex. * formarea glucozo*P*fosfatului%
(0 7lucoz @ 5i G glucoz*P*fosfat @ :
I
$ (7E
0
= 9,9 Qcal.mol * reacia endergonic
(I <,5 @ :
I
$ G <D5 @ 5i (7E
I
= R K,9 Qcal.mol * reacia exergonic
*****************************************************************************************************
Aeac ia global% 7lucoz @ <,5 G glucoz*P*fosfat @ <D5 ( 7E

total = R 1 Qcal.mol
!ele dou reac ii mprt esc intermediarul comun 5i (fosfat anorganic. Aeac ia global
este exergonic& energia stocat n <,5 este utilizat pentru a sus ine sinteza glucozo*P*fosfatului.
Din punct de vedere chimic, calea pe care are loc formarea 7*P*5 (prin transferul gruprii fosfat din
<,5 pe glucoz, neav"nd loc o hidroliz a <,5 este diferit de reaciile 0 +i I, dar rezultatul net
este acela+i ca +i suma celor dou reacii.
5entru o cale metabolic ce cuprinde mai multe reacii succesive, fiecare av"nd o anumit
valoare a lui 7%
diferena de energie liber pentru ntreaga cale este 7
total
= 7
0
@ 7
I
@ 7
9
@ 7
1
@ ..... (datorit
caracterului aditiv al varia iei energiei libere pentru reaciile succesive. Dac 7
total
> N, calea
metabolic este exergonic n ansamblu +i are loc n sensul figurat mai sus, chiar dac unele reacii
individuale au 7 ? N.
Bioenergetic versus cinetic4
* 7 are o valoare predictiv pentru (fezabilitatea( energetic a unei reac ii chimice& nu
ofer nici o informa ie despre viteza reac iei. =ioenergetica se ocup doar cu starea ini ial i cea
final a componen ilor reac iei, nu cu mecanismul reac iei sau durata necesar pentru atingerea
echilibrului.
* Siteza unei reac ii depinde de mrimea energiei de activare, precum i de cantitatea i
eficien a enzimelor disponibile pentru a cataliza reac ia respectiv n celul& aceste aspecte apar in
domeniului cineticii biochimice.
9
TR#N"5ER67 ENERGIEI 7IBERE 8N C6R"67 9ROCE"E7OR MET#BO7ICE
!elulele organismului uman +i obin energia liber prin catabolismul combustibililor
biologici con inu i n nutrienii ingera i (glucide, lipide, proteine i n depozitele tisulare (de
glicogen, trigliceride, proteine. !atabolismul reprezint una din laturile metabolismului i cuprinde
reacii de degradare (rupere de legturi covalente, care sunt exergonice.
#nabolismul, cea de a doua latur a metabolismului (sinteza moleculelor complexe din
precursori simpli, cuprinde reacii de sintez (formare de legturi covalente, care sunt
endergonice, deci se desf oar cu consum de energie liber.
!um este posibil ca energia liber dega#at n procesele catabolice s poate fi utilizat
(transferat n procesele anabolice, astfel nc"t ea s nu se piard sub form de cldurT !u alte
cuvinte, cum se poate realiza cuplarea unui proces exergonic cu unul endergonicT
$ modalitate important este aceea de a sintetiza un com!us cu !oten%ial energetic ri&icat
n procesul exergonic +i de a*l utiliza n procesul endergonic, realiz"nd astfel un transfer de energie
liber de la calea exergonic la calea endergonic.
Lolecula care #oac un rol central n transferul energiei libere de la procesele exergonice la
cele endergonice este #T9 (adenozin trifosfat.
Im!licarea #T9 ca &onor &e energie liber4
Lolecula <,5 conine dou legturi cu potenial energetic ridicat% legtura dintre gruparea
fosfat +i gruparea fosfat +i legtura dintre fosfatul +i fosfatul (ambele sunt legturi de tip
anhidrid acid fosforic. 5otenialul energetic ridicat este obiectivat prin existena unui 7E cu
valoare negativ mare pentru reacia de hidroliz n <D5 +i 5i (ruperea legturii dintre 5 +i
5, 7E = R K,9 Qcal.mol +i pentru reacia de hidroliz n <L5 +i 55i (ruperea legturii dintre 5 +i
5, 7E = R 0N,M Qcal.mol.
8n procesele biochimice, <,5 este donor de energie liber n reaciile de sintez (n care are
loc formarea de noi legturi covalente, catalizate de enzime din clasa ligazelor.
Donarea energiei din <,5 nu are loc prin hidroliza ATP la <D5 +i 5i sau <L5 +i 55i, de+i
d.p.d.v. strict chimic a+a pare a fi (hidroliza <,5 nu realizeaz nimic dec"t eliberare de cldur, care
nu poate fi transformat n energie liber pentru a permite desf+urarea reaciei de sintez.
1
Donarea energiei din <,5 implic participarea covalent a ATP n reacia chimic, cu
scindarea sa n <D5 +i 5i (fosfat anorganic sau n <L5 +i 55i (pirofosfat anorganic, parcurg"ndu*
se dou etape%
* mai nt"i, gruparea fosfat sau AMP din <,5 este transferat pe o molecul substrat (U (sau
pe un rest aminoacidic dintr*o enzim, devenind ata+at covalent +i cresc"nd coninutul de energie
liber al moleculei respective&
* ntr*o a doua etap, gruparea 5i sau <L5 este dezlocuit de ctre cel de al doilea substrat
(V. 8n felul acesta, o parte din energia legturii fosfoanhidridice din ATP este transferat i
conservat n noua legtur covalent format ntre i !.
(0 U @ V @ <,5 G URV @ <D5 @ 5i sau (I U @ V @ <,5 G URV @ <L5 @ 55i
U @ <,5 G UW9 @ <D5 U @ <,5 G UW#M9 @ 55i
UW9 @ V G URV @ 5i UW#M9 @ V G URV @ <L5
8n reacia (I, pirofosfatul anorganic (55i este hidrolizat la I5i sub aciunea pirofosfatazei
anorganice (enzim prezent n toate celulele, ntr*o reacie exergonic. 8ndeprtarea 55i din
mediu face ca echilibrul reaciei de sintez s fie +i mai mult deplasat spre dreapta.
Xi ali compu+i au potenial energetic ridicat (valori negative mari pentru 7E la hidroliz.
!ompu+ii fosforilai din organism pot fi mprii n dou grupe, n funcie de 7E pentru reacia de
hidroliz%
* compu+i 'nalt energetici( (conin legturi de tip (macroergic(, simbolizate prin 'W( * au
7E la fel de negativ sau mai negativ dec"t <,5*ul (la scindarea n <D5 +i 5i% R K,9 Qcal.mol&
* compu+i 'cu energie "oas( (conin legturi de tip (microergic( * au 7E mai puin
negativ dec"t aceast valoare.
F Com!u:ii 2nalt energetici au un poten ial ridicat de transfer de grupare chimic * pot
transfera o grupare fosfat (sau acil pe un alt compus%
Y <,5 i al i nucleozid trifosfa i * 7,5, Z,5, !,5 (I legturi tip anhidrid acid fosforic

Y 6osfoenolpiruvat Y 0,9*Difosfoglicerat Y <cil*!o<
(legtur enol*fosfat (legtur anhidridic (legtur tiol*esteric
tip carboxil*fosfat


Y !reatin*fosfat (legtur )*fosfat, tip fosfo*guanidin
* ATP este un donor universal de energie, pentru diverse procese biochimice i fiziologice&
* #TP este utilizat n procesul de sintez a glucidelor&
* $TP este folosit n sinteza lipidelor complexe&
* %TP furnizeaz energie n procesul de sintez a proteinelor&
J
* fosfoenolpiruvat i &,'(difosfoglicerat sunt intermediari ai glicolizei (cale de degradare a
glucozei cu scopul de a genera energie&
* acil($oA reprezint forma activ a acizilor gra i, sub care ace tia particip at"t la procesul
de degradare c"t i la sinteza diverselor clase de lipide.
8n general, compu ii fosforila i macroergici nu reprezint forme de stocare pe termen lung a
energiei& ei sunt forme tranzitorii de depozitare a energiei, av"nd rolul de a transporta energia dintr*
un punct n altul, de la un sistem enzimatic la altul, n cursul def urrii proceselor biologice i
chimice din celul. <,5*ul are un turnover rapid (viteza de degradare i resintez este mare.
Excep ie face creatin(fosfatul, care reprezint o form de stocare a energiei n mu chiul
scheletic ( i miocard, utilizabil n condi iile cre terii substan iale a necesarului energetic n cursul
efortului fizic sus inut.
F Com!u:i cu energie ;oas%

Y Esteri fosforici (ex. glucoz*P*fosfat, fructoz*P*fosfat, glicerol*fosfat
#T9 are o poziie intermediar n ceea ce prive+te valoarea 7E la hidroliz (tabelul 0& n
consecin%
<,5 poate fi sintetizat prin transferul, pe <D5, a unei grupri fosfat de la compu+ii nalt
energetici care au 7E mai negativ dec"t R K,9 Qcal.mol, conform ecuaiei generale%
8n cursul catabolismului nutrienilor (n vederea disponibilizrii energiei libere coninute n
moleculele lor au loc 9 asemenea reacii generatoare de <,5 (vor fi expuse ulterior& la acestea se
adaug reac ia de sintez a <,5 prin transferul unui fosfat nalt energetic din creatin*fosfat, care are
loc n mu chi.
<,5 poate dona un fosfat nalt energetic unor compu+i (cum sunt glucoza, fructoza,
glicerolul, etc, transform"ndu*i n specii fosforilate mai reactive (mbogite n energie liber +i
favoriz"nd, astfel, metabolizarea ulterioar a acestora& asemenea reacii sunt catalizate de )inaze%
Deci <,5*ul poate transporta energia liber ntre cele dou categorii de compu+i biochimici
(nalt energetici +i cu energie #oas G serve+te ca *moneda+ energetic universal n celulele vii.
Tabel <= Salorile 7E la hidroliz pentru unii compu+i cu importan biochimic.
Com!u:i chimici
G* (Qcal.mol
8nalt energetici
6osfoenolpiruvat R 01,2
0,9*Difosfoglicerat R 00,2
!reatin fosfat R 0N,9
<,5 (G <L5 @ 55i R 0N,M
<cil*!o< R K,J
<D5 (G <L5 @ 5i R K,2
>#T9 (G #/9 , 9i ? @AB
Cu energie ;oas
55i (G I5i R 1,P
<L5 (G adenozin @ 5i R 9,1
7lucoz*0*fosfat R J
P
6ructoz*P*fosfat R 9,2
7lucoz*P*fosfat R 9,9
7licerol*9*fosfat R I,I
RE#CCII /E ODI/O*RE/6CERE
Energia liber con inut n moleculele combustibililor metabolici este disponibilizat n
urma degradrii acestora pe diverse ci catabolice, n mod particular n reac iile de oxidare . Lulte
procese catabolice au natur oxidativ, deoarece atomii de ! din moleculele cu rol de combustibil
sunt ntr*o stare redus. Transferul de electroni

(e
R
n reacii de oxido*reducere este responsabil,
direct sau indirect, de ma#oritatea energiei libere dega#ate n cursul proceselor catabolice.
6ie reacia de oxido*reducere%
<
red
@ =
ox
<
ox
@ =
red
(ex% 6e
I@
@ !u
I@
6e
9@
@ !u
@

donorul de e
R
(<
red
este agentul reductor G pierz"nd e
R
, el se oxideaz&
acceptorul de e
R
(=
ox
este agentul oxidant G c"+tig"nd e
R
, el se reduce.
Aeacia de mai sus poate fi scris sub forma a dou #umti de reacie%
<
red
G <
ox
@ n e
R
=
ox
@ n e
R
G =
red
<
red
.<
ox
+i =
red
.=
ox
formeaz dou cupluri oxido*reductoare. 6iecare cuplu oxido*reductor
este caracterizat de !oten%ialul re&oE (E, care este o msur a afinitii pentru electroni (a
disponibilit ii de a accepta electroni.
8ntr*o reacie de oxido*reducere, e
R
se deplaseaz de la cuplul donor de e
,
(cu afinitate mai
mic pentru e
R
, E mai mic spre cuplul acceptor de e
,
(cu afinitate mai mare pentru e
R
, E mai mare.
5otenialul redox n condiiile reale existente n celul (E poate fi calculat conform ecua%iei
lui Nernst%
E = EE @ (A,.n6 ln C$xD.CAedD
unde EE este potenialul redox standard, n * numrul de e
R
transferai, 6 * constanta 6arada[ =
MP,12N /.S3mol, C$xD +i CAedD * concentraia formei oxidate, respectiv concentraia formei reduse a
cuplului oxido*reductor.
K
8n cursul proceselor catabolice, oxidrile sunt, n ma#oritatea cazurilor, &ehi&rogenri
catalizate de dehidrogenaze (-., enzime din clasa oxido*reductazelor%
<:
I
@ = < @ =:
I
8n reaciile de dehidrogenare se transfer, de la o molecul donoare la o molecul
acceptoare, I echivaleni reductori (termenul de 'echivalent reductor( se refer la un electron, un
atom de hidrogen sau un ion hidrid :%
R
, care particip la o reacie de oxido*reducere.
8n cadrul cilor metabolice de degradare a combustibililor biologici, n reaciile de
dehidrogenare catalizate enzimatic, electronii de la multiple substrate diferite sunt canalizai spre
c"teva tipuri de trans!ortori &e e
?
uni'ersali% coenzimele piridinice +i cele flavinice.
F Dehidrogenaze dependente de coen)imele nicotinami&ice (sau piridinice, provenite din
vitamina 55 sau nicotinamida catalizeaz reacii de tipul%
<:
I
@ )<D(5
@
< @ )<D(5: @ :
@
N#/
,
:i N#/9
,
accept un ion hidrid (:%
R
* un atom de hidrogen cu un electron
suplimentar de la un substrat care cedeaz doi atomi de hidrogen, un proton fiind eliberat n mediu%
)<D(5
@
@ Ie
R
@ I:
@
G )<D(5: @ :
@
)<D
@
)<D:
La#oritatea dehidrogenazelor care acioneaz n catabolism sunt specifice pentru )<D
@
ca
acceptor de e
R
& unele sunt localizate n citosol, altele n citoplasm, iar altele au izoenzime
mitocondriale +i citosolice.
F Dehidrogenaze dependente de coen)imele fla'inice (provenite din vitamina =
I
sau
riboflavina fac parte din categoria flavoproteinelor +i catalizeaz reacii de tipul%
<:
I
@ 6L).6<D < @ 6L):
I
.6<D:
I
5MN +i 5#/ accept doi atomi de . de la substrat%
6L).6<D @ Ie
R
@ I:
@
G 6L):
I
.6<D:
I
6<D 6<D:
=
6<D:
I
!oenzimele flavinice, spre deosebire de cele nicotinamidice, sunt legate ferm de apoenzim,
de aceea se mai numesc grupri prostetice. EE (potenialul de reducere standard pentru coenzima
legat de apoenzim are o valoare particular pentru acea flavoprotein, depinz"nd de proteina cu
care coenzima este asociat, aceast valoare fiind de multe ori diferit de valoarea EE pentru flavina
liber.
!oenzimele flavinice pot accepta de la substrat un singur atom de : (transform"ndu*se n
forma parial redus 6<D:
=
sau I atomi de : (transform"ndu*se n forma complet redus 6<D:
I
.
2
!a urmare, flavoproteinele pot servi ca intermediari ntre reaciile n care sunt cedai I e
R
+i reaciile
n care este acceptat un singur e
R
.
Prin reducerea celor dou tipuri de coenzime n procesele catabolice, are loc conservarea
unei mari pri a energiei libere dega"ate prin oxidarea combustibililor metabolici/
5O"5ORI7#RE# ODI/#TIF (9O
Aeprezint punctul culminant al metabolismului generator de energie% toate cile de
degradare oxidativ a glucidelor, lipidelor +i aminoacizilor converg spre aceast etap final, n care
energia eliberat n procesele de oxidare este utilizat pentru sinteza ATP.
Energia liber dega#at n cursul proceselor catabolice (n reaciile de dehidrogenare este
conservat temporar n molecula coenzimelor reduse )<D: +i 6<D:
I
& prin oxidarea ulterioar a
acestora (transferul electronilor la oxigen, energia conservat devine disponibil pentru a susine
sinteza <,5 din <D5 +i 5i.
5$ are dou componente%
componenta exergonic% lanul transportorilor de electroni (lan%ul res!irator, \A, care
transfer echivalenii reductori de la )<D: +i 6<D:
I
p"n la oxigen&
componenta endergonic% sinte)a #T9 prin fosforilarea <D5*ului, sub aciunea <,5
sintazei.
;ediul 5$ este mitocon&ria. <cest organit celular are dou membrane care ncon#oar
matricea mitocondrial%
Membrana eEtern este permeabil pentru molecule mici +i ioni, care trec liber prin canale
proteice transmembranare.
Membrana intern este impermeabil pentru ma#oritatea moleculelor mici hidrosolubile +i
a ionilor& moleculele care o pot strbate o fac cu a#utorul unor transportori specifici. <ceast
membran conine componentele 01 +i ATP sintaza.
Matricea mitocondrial conine enzimele care intervin n toate cile de degradare oxidativ
a substratelor energogene, cu excepia glicolizei.
5$ implic reducerea $
I
la :
I
$ cu electronii cedai de ctre )<D: +i 6<D:
I
, care la
r"ndul lor au colectat ace+ti e
R
din cile catabolice. Dac transferul de e
R
de la )<D: sau 6<D:
I
la
$
I
s*ar face direct, s*ar dega#a o cantitate extrem de mare de cldur& ca urmare, acest transfer se
realizeaz n mai multe etape, prin intermediul unor transportori de e
R
care acioneaz secvenial +i
M
care constituie lan%ul res!irator (acesta fiind calea final comun prin care electronii provenii de
la diver+i combustibili biologici sunt transferai pe oxigen.
Com!onentele 7R cuprind%
F 6biGuinona (coen)ima H este o benzoBuinon liposolubil cu o caten lateral
izoprenoid lung. 5oate accepta 0 : (devenind radical semiBuinonic
=
]:, forma parial redus sau
I : (devenind ubiBuinol ]:
I
, forma complet redus G ca +i flavoproteinele, poate aciona la
#onciunea dintre un donor de I e
R
+i un acceptor de 0 e
R
. <v"nd o molecul mic +i hidrofob, este
u+or difuzibil prin bistratul lipidic al membranei mitocondriale interne.
F 9roteinele cu 5e*" conin fier nu n componena hemului, ci n asociere cu atomi de sulf
anorganic sau cu sulf aparin"nd unor resturi de ![s din partea proteic. Sariaz de la structuri
simple cu un singur atom de 6e coordinat la 1 grupri -;: ale ![s, p"n la centri cu 6e*; mai
complec+i, cu I sau 1 atomi de 6e. ,oate proteinele cu 6e*; particip la transferuri de 0 e
R
.

F Citocromii sunt hemoproteine, de 9 tipuri (a, b, c cu spectre de absorbie diferite n
vizibil. :emul din cit a +i b este legat ferm, dar necovalent de partea proteic, pe c"nd cel din cit c
este legat covalent prin intermediul unor resturi de ![s. EE (potenialul de reducere standard al
atomului de 6e hemic al unui citocrom depinde de asocierea cu o anumit parte proteic, fiind
diferit pentru fiecare citocrom. !itocromii tip a, b +i c
0
sunt proteine integrale din membrana
mitocondrial intern& excepie face cit c, care este o protein solubil ce se asociaz cu faa extern
a membranei mitocondriale interne. !itocromii pot accepta.ceda un singur electron%
cit (6e
9@
@ 0 e
R
cit (6e
I@


2forma oxidat3 2forma redus3
!omponentele lan ului respirator sunt a+ezate n ordinea creterii potenialului redox 243/
0N
,ransportorii de e
R
din \A sunt organizai n I com!leEe su!ramoleculare integrate n
membrana mitocondrial intern. !omplexele ^ +i ^^ catalizeaz transferul de e
R
ctre coenzima ],
de la doi donori de e
R
diferii% )<D:, respectiv succinat.
Com!leEul I ()<D: dehidrogenaza
!on ine o flavoprotein cu 5MN +i mai mul i centri cu 6e*;. !atalizeaz transferul unui ion
hidrid (:%
@
de la )<D: +i al unui proton din matrice, la coenzima ], conform ecuaiei generale%
)<D: @ :
@
@ !o] G )<D
@
@ !o]:
I
Electronii curg de la )<D: G 6L) G centrii cu 6e*; G coenzima ].
Com!leEul II (succinat dehidrogenaza
Este o enzim legat de membrana mitocondrial intern. !onine centri cu 6e*; +i 5#/
legat ferm. !atalizeaz transferul a I atomi de : de la succinat la coenzima ], prin oxidare
succinatul transform"ndu*se n fumarat (succinatul este un intermediar dintr*o cale metabolic
degradativ numit ciclul 5rebs, care va fi descris ulterior.
6luxul e
R
prin complexul ^^ este de la succinat (substratul enzimei G 6<D G centrii cu 6e*
; G situsul de legare al coenzimei ]. Ecuaia reaciei catalizate de ctre complexul ^^ este%
;uccinat @ !o] G fumarat @ !o]:
I
8n afar de succinat, mai exist i alte substrate care sunt oxidate de ctre dehidrogenaze
mitocondriale i care +i trimit e
R
n \A la nivelul coenzimei ], dar nu prin intermediul complexului
^^%
* acil($oA dehidrogenaza este o flavoprotein care intervine n degradarea acizilor gra i& ea
catalizeaz transferul e
R
de la acil*!o< la 6<D*ul din componena enzimei, apoi electronii sunt
transfera i la E,6 (electron transferring flavoprotein, iar de aici la E,6%ubiBuinon oxidoreductaza,
care i transfer n cele din urm pe coenzima ]&
* glicerol('(fosfat dehidrogenaza este o flavoprotein localizat pe faa extern a membranei
mitocondriale interne, care canalizeaz e
R
din glicerol*9 fosfat spre coenzima ]& aceast enzim are
rol important n transferul echivalenilor reductori de la )<D: citosolic n lan ul respirator.
!o]:
I
(coenzima ] care a fost redus sub ac iunea complexului ^ sau a complexului ^^
difuzeaz n membrana mitocondrial intern pn la complexul ^^^, unde va fi oxidat. 6iind
capabil s accepte +i s cedeze 0 sau I electroni, coenzima ] are o poziie intermediar ntre un
donor de I e
R
(6A-., prin intermediul complexului ^ +i succinat, prin intermediul complexului ^^
+i un acceptor de 0 e
R
(citocromul b din componena complexului ^^^.
Com!leEul III (citocrom c reductaza
00
!onine citocromii b +i c
0
+i proteine cu 6e*;.
,ransfer e
R
de la coenzima ] redus la citocromul c, conform ecuaiei%
!o]:
I
@ I cit c (6e
9@
G !o] @ I cit c (6e
I@
@ I :
@
Aezultatul net al activitii complexului ^^^% !o]:
I
este reoxidat +i I molecule de cit c sunt
reduse.
Citocromul c
Este o protein solubil din spaiul intermembranar, asociat cu faa extern a membranei
mitocondriale interne. <ccept 0 e
R
de la complexul ^^^, dup care se deplaseaz spre complexul ^S
pentru a*i ceda electronul.
Com!leEul IF (citocrom c oxidaza
,ransport e
R
de la citocromul c la oxigenul molecular, reduc"ndu*l la :
I
$. !onine
citocromii a +i a
9
(asociai, precum +i ioni de cupru% !u
<
(!u complexat cu o grupare R;:
aparin"nd cisteinei, form"nd un centru !u*; asemntor centrilor 6e*; +i !u
=
(asociat cu cit a
9
.
,ransferul de e
R
prin complexul ^S este de la cit c G !u
<
G hemul a G hemul a
9
G !u
=
G
$
I
. 5entru fiecare I e
R
pasai prin complex, I :
@
din matrice sunt utilizai pentru a transforma _$
I
n :
I
$. Ecuaia reaciei catalizate de complexul ^S%
I cit c (6e
I@
@ I :
@
@ _ $
I
G I cit c (6e
9@
@ :
I
$
F ,ransferul global al electronilor prin lanul respirator%
Energia &ega;at !rin transferul e
?
!rin 7R este conser'at eficient 2n gra&ient &e
!rotoni4
,ransferul a I e
R
de la )<D: prin lanul respirator p"n la $
I
poate fi scris astfel%
)<D: @ :
@
@ _$
I
G )<D
@
@ :
I
$
Aeacia este puternic exergonic% 7E = R JI,P Qcal.mol.
5entru oxidarea succinatului% succinat @ _$
I
G fumarat @ :
I
$, 7E = R 9J,2 Qcal.mol.
Lare parte din energia liber dega#at prin transferul e
R
la oxigen este utilizat pentru a
pompa .
7
n afara matricei mitocondriale (din matrice spre spaiul intermembranar. 5entru fiecare
pereche de e
R
transferai la $
I
, 1 :
@
sunt pompai de ctre complexul ^, 1 :
@
de ctre complexul ^^^
+i I :
@
de ctre complexul ^S (deci complexele ^, ^^^ +i ^S #oac rol de pompe de .
7
.
8n felul acesta se creeaz un gra&ient al !rotonilor% concentraie mai mare de :
@
pe faa
extern a membranei mitocondriale interne +i concentraie mai mic n matrice. <cest gradient are
dou componente%
* gradient electric% exteriorul membranei mitocondriale interne este mai pozitiv fa de
interiorul su&
0I
* gradient chimic% pe faa extern a membranei mitocondriale interne, p:*ul este mai acid n
comparaie cu faa sa matriceal.
8n acest gradient este stocat o energie electro*chimic, ce reprezint o conservare temporar
a unei mari pri a energiei eliberate prin transferul e
R
p"n la oxigen (aprox. MN`. Energia stocat
astfel se nume+te for% !roton*motoare% atunci c"nd :
@
curg spontan n sensul gradientului lor
electrochimic, energia stocat n acest gradient devine disponibil pentru a efectua travaliu%
susinerea sintezei <,5 din <D5 +i 5i.
"inte)a #T9
<re loc la nivelul complexului S% #T9 sinta)a sau com!leEul 5
o
*5
<
. <cest complex are
dou componente (domenii funcionale%
5
o
este integrat n membrana mitocondrial intern& este alctuit din 9 tipuri de
subuniti (a, b +i c n proporiile ab
I
c
0N
. <re un canal (por central pentru :
@
prin care protonii curg
n sensul gradientului de concentraie, din spaiul intermembranar spre matrice.
5
<
este localizat pe faa intern a membranei mitocondriale interne (proemin spre
matrice +i este asociat cu 6
o
. Este alctuit din M subuniti%
3

3
. ;ubunitile
+i alterneaz, fiind dispuse ca feliile de portocal. 6iecare din cele trei subuniti conine un
centru catalitic pentru sinteza <,5. ;ubunitatea formeaz un ax central care trece prin 6
0
+i este
asociat cu 6
o
.
a 6
0
izolat de 6
o
catalizeaz hidroliza ATP (<,5 @ :
I
$ G <D5 @ 5i, 7E = R K,9
Qcal.mol, motiv pentru care a fost denumit iniial '6
0
<,5*aza(.
b 6
0
integrat n membrana mitocondrial intern, asociat cu 6
o
, catalizeaz sinteza ATP%
<D5 @ 5i G <,5 @ :
I
$. Aeacia fiind puternic endergonic (7E = K,9 Qcal.mol, poate avea loc
doar n condiiile n care at"t <,5 c"t +i :
I
$ sunt ndeprtate eficient din mediul de reacie, astfel
nc"t concentraia lor s fie meninut la valori mult mai mici dec"t concentraia <D5 +i 5i (n felul
acesta 7 real poate fi negativ. <ceste condiii sunt create n centrii catalitici ai ATP sintazei%
* mediul hidrofob menine concentraia moleculelor de :
I
$ la o valoare redus&
* <,5 este ndeprtat printr*un mecanism rotativ mobilizat de curentul de protoni care trec
din spaiul intermembranar spre matricea mitocondrial (n sensul gradientului de concentraie,
prin porul existent n componenta 6
o
.
09
J Mecanism &e catali) rota%ional la nivelul ATP sintazei, propus de ctre 9aul BoKer%
!ei 9 centri catalitici ai subunitilor se pot gsi n 9 conformaii diferite% *<,5 (cu
afinitate mare pentru <,5, *<D5 (cu afinitate mare pentru <D5 +i *empt[ (cu afinitate foarte
mic pentru <,5 +i <D5. 6iecare centru catalitic trece succesiv prin fiecare din cele trei stri% mai
nt"i *<D5 (leag <D5 +i 5i G are loc sinteza <,5, n acela+i timp centrul catalitic trec"nd la
conformaia *<,5 G n final, subunitatea trece la conformaia *empt[, cu afinitate foarte mic
pentru <,5, care va fi eliberat de pe suprafaa enzimei. <poi ncepe o nou rund de cataliz.
<ceste modificri conformaionale ciclice sunt determinate de pasa#ul :
@
prin porul 6
o
% acest
curent de :
@
determin rotaia cilindului format din subunitile c +i a subunitii ata+ate. <ceasta
din urm trece prin centrul sferoidului
3

3
. !u fiecare rotaie de 0INE, vine n contact cu o
subunitate diferit, iar contactul foreaz acea subunitate s treac n conformaia *empt[,
determin"nd eliberarea <,5.

8n conclu)ie4
* prin transferul e
R
de la )<D: sau succinat la $
I
, prin lanul respirator, se dega# o anumit
cantitate de energie liber G aceasta este utilizat la pomparea de :
@
n afara matricei
mitocondriale de ctre complexele ^, ^^^ +i ^S G se creeaz un gradient de :
@
&
* energia electro*chimic ce este coninut n gradientul de :
@
reprezint o for% !roton*
motoare% aceasta permite sinteza <,5 la nivelul componentei 6
0
a <,5 sintazei, pe msur ce :
@
curg pasiv (n sensul gradientului lor electrochimic napoi n matrice prin porul de la nivelul 6
o
.
5entru ca fora proton*motoare s poat fi folosit la sinteza <,5, este absolut necesar ca
membrana mitocondrial intern s fie impermeabil pentru .
7
, astfel nc"t gradientul de :
@
s se
menin +i protonii acumulai n spaiul intermembranar s se poat ntoarce n matrice numai prin
porul 6
o
.
J <cest model pentru sinteza <,5 se nume+te mo&elul chemiosmotic +i a fost propus de
ctre 9eter Mitchell% termenul 'chemiosmotic( descrie o reacie enzimatic ce implic, simultan, o
reacie chimic +i un proces de transport.
<D5 @ 5i @ n:
@
ext
G <,5 @ :
I
$ @ n:
@
int
(:
@
ext
sunt protonii de pe faa extern a membranei mitocondriale interne& :
@
int
sunt protonii a#un+i
pe faa intern a membranei mitocondriale interne.
01
J Ra!ortul 90O = numrul de molecule de <,5 sintetizate pentru _$
I
redus la :
I
$, sau
pentru fiecare I e
R
transferai n \A%
* experimental s*a constatat c numrul de :
@
necesari pentru sinteza unei molecule de <,5
este 1&
* atunci c"nd N#/H este oxidat n \A, sunt pompai 0N :
@
la nivelul complexelor ^, ^^^ +i ^S
(1 @ 1 @ I G raportul 5.$ este 0N%1 = I,J (prin rotun#ire se va considera ca fiind B&
reacia de oxidare a )<D: cuplat cu sinteza <,5 este%
)<D: @ :
@
@ _$
I
@ 9<D5 @ 95i G )<D
@
@ B#T9 @ 1:
I
$
* atunci c"nd succinatul este oxidat n \A, sunt pompai P :
@
la nivelul complexelor ^^^ +i
^S (1 @ I G raportul 5.$ este P%1 = 0,J (prin rotun#ire se va considera ca fiind L&
reacia de oxidare a succinatului cuplat cu sinteza <,5 este%
succinat @ _$
I
@ I<D5 @ I5i G fumarat @ L#T9 @ 9:
I
$
!ele I procese * lan%ul res!irator :i fosforilarea #/9 * sunt cu!late n mod
obligatoriu% nici unul nu poate avea loc fr cellalt.
Inhibitorii !asa;ului electronilor de la )<D: sau succinat p"n la $
I
blocheaz sinteza
ATP%
5entru ca transferul de e
R
prin \A s dega#e energie liber, care apoi s poat fi utilizat la
sinteza <,5, este necesar ca e
R
s a#ung p"n la acceptorul final ($
I
, astfel nc"t componentele \A
s se reoxideze +i s fie apte de a transfera noi e
R
. =locarea \A la un anumit nivel face ca
transportorii situai nainte de bloca# s rm"n n stare redus, incapabili de a mai transporta noi e
R
spre oxigen& n consecin, nceteaz dega#area de energie liber G sinteza <,5 devine imposibil.
* amital (un barbituric +i rotenona (produs din plante utilizat ca insecticid inhib fluxul e
R
de la complexul ^ la coenzima ]&
* malonatul (similitudine structural cu succinatul inhib competitiv complexul ^^ (succinat
dehidrogenaza&
* antimicina A (un antibiotic toxic inhib \A ntre cit b +i cit c
0
(n cadrul complexului ^^^&
* cianurile +i monoxidul de carbon inhib citocrom oxidaza (complexul ^S.
Inhibarea sinte)ei &e #T9 blocheaz transferul e
,
la 8
9
%
Dac sinteza <,5 nu poate avea loc sau fluxul :
@
spre matrice (prin componenta 6
o
este
blocat, :
@
pompai nu se mai pot ntoarce n matrice. 5e de alt parte, ei continu s fie expulzai
prin activitatea \A, ceea ce duce la crearea unui gradient de :
@
foarte mare. \a un moment dat,
energia eliberat prin transferul e
R
de la )<D: la $
I
devine mai mic dec"t energia necesar
pomprii protonilor. 8n acest moment, transferul e
R

nu mai poate continua, trebuie s se opreasc.
* oligomicina este un antibiotic toxic care inhib <,5 sintaza (componenta 6
o
G inhib at"t
sinteza <,5 c"t +i transferul e
R
la $
I
.
0J
/ecu!larea lan%ului res!irator &e fosforilarea #/9 poate fi realizat%
* 9,:(dinitrofenolul este un decuplant chimic% acid slab cu molecul hidrofob, care poate
strbate membrana mitocondrial intern. ^ntr n matrice n form protonat +i elibereaz un :
@
G
se ntoarce n spaiul intermembranar n form deprotonat& aici capteaz un proton G traverseaz
din nou membrana +i elibereaz protonul n matrice +.a.m.d.& n felul acesta, D)5 permeabilizeaz
membrana mitocondrial intern pentru .
7
, disip"nd astfel gradientul de protoni transmembranar
(este un protonofor.
* ionofori ca valinomicina permit ionilor anorganici s treac prin membrana mitocondrial
intern, disip"nd componenta electric a gradientului electro*chimic.
8n urma decuplrii celor dou procese, transferul de e
R
n \A continu, dar energia eliberat
n cursul acestui proces nu mai poate fi utilizat pentru sinteza <,5 G este disipat sub form de
cldur.
/ecu!lan i fi)iologici % n esutul adipos brun, bogat reprezentat la animalele hibernante,
prezent i la nou nscu i, exist o protein numit termogenina (Z!50 * uncoupling protein 0%
aceasta formeaz un canal n membrana mitocondrial intern, care permite transferul protonilor din
spa iul intermembranar spre matrice. 8n felul acesta, gradientul de protoni format prin activitatea
lan ului respirator este disipat i <,5 sintaza este scurt*circuitat, energia dega#at n lan ul
respirator fiind transformat n cldur. < adar termogenina are rol n termogenez.
Reglarea fosforilrii oEi&ati'e * &e ctre ne'oile energetice celulare4
Aata respiraiei (consumul de oxigen, sau altfel spus viteza transportului electronilor prin
lan ul respirator n mitocondrie este reglat riguros& n general este limitat de disponibilitatea de
A-P ca substrat pentru fosforilare, av"nd n vedere cuplarea dintre cele dou procese (n prezena
<D5, rata consumului de $
I
este semnificativ mai mare dec"t n absena <D5.
!oncentraia intracelular a <D5 este o msur a statusului energetic al celulei.
atunci c"nd consumul de ATP crete (pentru diverse procese ce au loc cu consum de
energie, acesta este scindat n <D5 +i 5i G rezervele de <,5 scad iar concentra%ia #/9 cre:te
(aceasta semnific faptul c rezervele energetice ale celulei trebuie refcute G cresc"nd cantitatea
de <D5 disponibil pentru procesul de fosforilare, rata respiraiei va cre+te G aceasta va determina
regenerarea <,5&
atunci c"nd consumul de ATP este redus, n celul se menin concentraii ridicate de <,5
(ceea ce semnific satisfacerea necesitilor energetice G n aceste condiii, concentra%ia #/9
este sc)ut G scz"nd cantitatea de <D5 disponibil pentru fosforilare, rata respiraiei va scdea.
Aeglarea ratei respira iei are loc sincronizat cu reglarea vitezei cilor metabolice de
degradare a combustibililor biologici, care duc la sintez de <,5. <cestea sunt, n general,
controlate feedbacQ de nivelul <,5% o cre tere a concentra iei <,5 (ca urmare a utilizrii sale
reduse determin scderea vitezei cilor degradative, n timp ce cre terea utilizrii <,5 duce la
scderea nivelului su i cre terea nivelului <D5 sau <L5, av"nd ca efect cre terea vitezei cilor de
oxidare a combustibililor.
;e poate vorbi, astfel, de homeosta)ia #T94 aceasta se refer la capacitatea celulelor de a
men ine niveluri constante de <,5 n ciuda fluctua iilor mari n rata utilizrii sale. <,5*ul se
formeaz at"t de rapid pe c"t este utilizat n activitile celulare consumatoare energie.
0P