DIAGNOSTICUL INFECTIILOR PRODUSE DE MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS

Produsul patologic
n tuberculoza pulmonar sput, aspirat bronsic, lichid pleural, spltur gastric
n tuberculoza renal urina (toat cantitatea de urin emis dimineaa)
n tuberculoza genital secreie vaginal, cervical, sperm, secreie prostatic
n tuberculoza articular, osoas lichid sinovial, puroi
n tuberculoza ganglionar material din puncie ganglionar, puroi
n meningita tuberculoas LCR
n tuberculoza miliar se recomand i hemocultura
Rcoltara!
n suspiciunea de tuberculoz pulmonar ! recoltarea a trei probe de sput succesive,
obinute dimineaa
Prlucrara produslor patologic!
eliminarea sau reducerea numeric a celorlalte microganisme n produsele cu "lor de
asociaie, prin decontaminarea acestora#
eliberarea m$cobacteriilor a"late intracelular sau cuprinse n mase de mucus este necesar
n special pentru sput ( "luidi"icarea sputei)#
concentrarea produselor paucibacilare, n vederea e%aminrii microscopice&
E"a#$ #icroscopic!
"rotiu colorat %i&l'Nls$
bacili lungi si subiri, usor ncurbai, , imobili, nesporulai, nencapsulai, rosii (acido!
alcolorezisteni), "ondul preparatului "iind albastru
prezena celulelor epiteliale i a macro"agelor de la nivelul tractului respirator, a
leucocitelor! reacia in"lamatorie
I(olar
pe mediul Lo'enstein!(ensen ! se toarn n tuburi n pant, iar dup nsm)nare tuburile
se para"ineaz pentru a mpiedica deshidratarea pe perioada incubrii
incubare la *+,C, -!./0 C12 n prima sptm)n, p)n la 3/ de zile
Id$ti)icar
caractr d cultur*
Crstr ugo$ic* ( 4& 5uberculosis, 4& a"ricanum)
creste n 2!6 sptm)ni
colonii de tip R, neregulate, uscate, conopidi"orme, culoare alb!glbuie
Cr+tr disgo$ic*( 4& 7ovis), colonii mici, de tip 8, alb!glbui, care apar dup 9!:
sptm)ni
M,co-actriil sapro)it' cr+tr rapid* . dup *!+ zile "ormeaz colonii mici, de tip
8, rareori de tip R sau cu aspect intermediar
Id$ti)icara -ioc&i#ic* !
testul catalazei la 6:
/
C,
testul producerii de niacin,
reducerea nitratului,
hidroliza 5'een :/
susceptibilitatea la ;<8 ( acidul p!amino!salicilic)
tolerana la =aCl -0&
<lte metode de identi"icare> metoda ;CR
a$ti-iogra#a
<ntibiogramele pe mediu solid, indi"erent de metod, presupun compararea dezvoltrii
bacililor inoculai pe un mediu martor "r antibiotice cu cea pe medii cu antibiotice
incluse&
Antibiograma direct se realizeaz prin nsm)narea unui inocul omogenizat i
decontaminat din produsul patologic bogat n bacili& Rezultatele !n 9 sptmni i
populaia de bacili testat este reprezentativ pentru situaia in vivo
Antibiograma indirect ! testarea unui inocul standardizat din cultura obinut n
prealabil& Rezultatele ! dup ./ sptm)ni#e"icient pentru produsele srace n
bacili#standardizarea este mai bun& ?%ist mai multe metode> metoda concentraiilor
absolute, metoda proporiilor, metoda raportului rezistenelor
Diag$osticul srologic ! determinarea anticorpilor de tip @g A i @g < anti!4( ?L@8<)
I$tradr#orac/ia la tu-rculoproti$ 0 IDR la PPD1
se inoculeaz intradermic tuberculin puri"icat (;;B, 2 uniti)
citirea reaciei se "ace dup +2h
este o @BR alergic>
<nergicii ( @BR C 3mm) se consider nein"ectai&
<lergicii ( D ./ mm n absena cicatricei vaccinale i D .- mm n prezena cicatricei
vaccinale ) sunt controlai radiologic&
induraii locale&
- reacia se interpreteaz n "uncie de mrimea si intensitatea induraiei
Diag$osticul d la-orator i$ si)ilis
Produsul patologic!
serozitatea din sancru
celule lezionale obtinute prin raclaE viguros al leziunii
A2E"a#$ #icroscopic!
5reponemele nu se coloreaz n coloraiile uzuale
La e%aminarea n c)mp ntunecat ! treponemele apar albe, re"ringente, strlucitoare
;reparate colorate prin impregnare argentica! treponemele apar colorate in negru!brun pe
"ond galben
@muno"luorescenta directa! treponeme "luorescente cu mor"ologie tipica
B2Diag$ostic srologic!
indicat din si"ilisul secundar
unicele metode de diagnostic de laborator in si"ilisul latent si tertiar
e%ista doua tipuri de teste serologice>
a& care "olosesc antigenul cardiolipina ( non!treponemice) > FBRL, R;R!carbon
<vantaEe>
! rapide si simple
! FBRL ! util pentru LCR
! Gtile ce indicator de rein"ectie
BezavantaEe>
! apar la .!9 saptamani dupa aparitia sancrului
! dau rezultate "als pozitive in boli virale, parazitare ( malarie), lepra, autoimune ( L?8,
tiroidita), sarcina, hepatite cronice, neoplasme in stadiu avansat
! rezultate "als negative in pana la 9/0 din cazuri in si"ilisul primar si 2-0 din cazuri in
si"ilisul secundar
b& care "olosesc antigene treponemice speci"ice> 5;H<, I5<!abs& ( "luorescent
treponemal antibod$ absorption), ?L@8<, teste rapide imunocromatogra"ice, 5;;<
( 5reponema pallidum particle agglutination)
<vantaEe>
! sunt "olosite ca teste de con"irmare, ori de cate ori FBRL sau R;R sunt pozitive
! 5;H< si I5<!abs sunt "oarte sensibile si reprezinta testele de electie
BezavantaEe>
! Reactii incrucisate cu treponematozele non!veneriene ( pinta, pianul ), boli tropicale
! =u pot "i "olosite in testarea LCR
! =u pot "i "olosite in monitorizarea raspunsului la tratament sau aprecierea rein"ectiei
PCR ( reactia de ampli"icare a genomului) este disponibila in anumite centre specializare&
I$ si)ilisul co$g$ital
La mam se e"ectueaza teste serologice > FBRL sau R;R si 5;H< sau I5<!abs&
La copil se e"ectueaz
! testele serologice > FBRL sau R;R si 5;H< sau I5<!abs&
! ?%amenul LCR pentru prezenta treponemelor si a anticorpilor ( FBRL sau R;R)&
DIAGNOSTICUL INFEC3IILOR PRODUSE DE BACTERII ANAEROBE
7acteriile anaerobe sunt bacterii hipersensibile la aciunea o%igenului&
4aEoritatea anaerobilor nu posed enzimele clasice citocromi, catalaze i perio%idaza
sunt bacterii comensale ale tubului digestiv i ale pielii
<naerobii se mpart n 2 mari grupe>
! anaerobi sporulai
! anaerobi nesporulati
Diag$osticul d la-orator al i$)c/iilor cu -actrii a$aro- $sporulat
includ coci i bacili Aram pozitivi, coci i bacili Aram negativi
prezente pe tegumente i pe mucoasele tractului respirator superior, bucal, vaginal i
digestiv "c)nd parte din microbiota indigen a acestor regiuni
in condiii de alterare a capacitii antiin"ecioase a gazdei, unele specii pot cauza in"ecii
@n"eciile de la nivelul plgilor i mucoaselor lezate pot evolua cu stare bacteriemic i
septicemic
Cele mai "recvente specii nt)lnite n septicemii aparin genurilor 7acteroides i
Iusobacterium
Diag$osticul -actriologic
Produsl patologic
puroi,
sput,
secreie gingivala
aspect caracteristic> culoare gris murdar, uneori ocolatie, cu miros "etid sau putrid
transportate la laborator ntr!un interval de timp c)t mai scurt n containere anaerobe&
E"a#$ul #icroscopic dirct
"rotiuri colorate gram
! cocii gram pozitivi au un aspect alungit, asemntor coccobacililor , dispui n perechi,
grupuri mici sau n lanuri
!cocii gram negativi ! izolai, grupai c)te doi av)nd talie mic
!bacilii gram negativi !polimor"i
!bacilii gram pozitivi rami"icai
Cultura
n condiii strict anaerobe ( mediu lichid sau mediu solid 8chedler)
incubarea se "ace n termostat la *+
o
C, n recipiente speciale
Id$ti)icara speciilor se "ace pe baza caracterelor mor"otinctoriale, de cultur, biochimice&
S$si-ilitata la a$ti-iotic
sunt n general sensibile la beta!lactamine, cloram"enicol, clindamicin, tetracicline i
metronidazol
antibiograma este necesar n toate cazurile clinice severe&
Diag$osticul d la-orator al i$)c/iilor cu -actrii a$aro- sporulat
CLOSTRIDIUM BOTULINUM
E"a#$ #icroscopic!
bacili Aram pozitivi, lungi, cu capete rotunEite, sporulai, #o-ili
sporul este oval, terminal sau subterminal, de"ormant&
Patog$itat !
8porii contamineaz alimentele> legume, carne
n alimentele conservate sau n mezeluri are loc germinarea ( anaerobioz, pstrare la
temperatura camerei) i producerea de to%in to%ina botulinic
?ste o neuroto%in cu : serotipuri!serotipurile <, 7, ?, I provoac botulismul la om
5o%ina este termolabil i poate "i distrus prin "ierbere 2/ minute&
CLOSTRIDIUM TETANII
E"a#$ #icroscopic >
bacili Aram pozitivi, lungi i groi , cu capete rotunEite, sporulai, #o-ili
8porul este subterminal, de"ormant&
Id$ti)icar -ioc&i#ica si $(i#atica!
produc di)rit $(i# protolitic! peptidaze, gelatinaz&
=u "ermenteaz glucidele&
;roduce hemolizin&
Patog$itata ! determinat de to%ina sa
5o%ina tetanic este o e%oto%in, cu dou componente
5etanolizina hemolizin
tetanospasmina "i%at la nivelul receptorilor gangliozidici de la nivelul neuronilor 8=C,
blocheaz eliberarea inhibitorilor mediatorilor chimici, cu contractur muscular&
Diag$osticul d la-orator >
nsm)narea produsului patologic ( ca atare sau inactivat la :/
/
C */ min), pe geloz
s)nge, n anaerobioz, 9!- zile
8e observ producerea "enomenului de migrare i hemoliza