1

Elemente de
Toxicologie Medico-Legal


Motivaie
In ultimii ani s-a observat o cretere enorm a interesului public pentru metodele i
disciplinele criminalistice stimulat mai ales de rezolvarea unor cazuri penale spectaculoase.
Publicul consider n general c medicii legiti sunt n fruntea luptei mpotriva urgiilor lumii
moderne, cum ar fi terorismul internaional i traficul de droguri. Aceast lucrare de
toxicologie medico-legal sau judiciar este consacrat, n principal analizei celor mai
importante clase de droguri i otrvuri.
Prin urmare, aici sunt tratate probleme reale i relativ recente ale toxicologiei medico-
legale, cum ar fi analiza markerilor pentru alcool, toxicologia remediilor din plante i
farmacogenomica aplicat n toxicologia medico-legal. Nu au fost uitate domeniile de interes
mai puin recente, cum ar fi conducerea automobilelor i medicamentele, analiza unor
substane neconvenionale, analiza cazurilor de dopaj i asigurarea calitii n analiza
toxicologic. Un accent deosebit a fost pus pe screening-ul toxicologic.
Scopul acestei lucrri este, de aceea, de a prezenta critic informaiile la zi referitoare la
metodele de separare i analiz aplicate n diferite discipline ale tiinei criminalistice. O carte
nu poate i nu ar trebui s nlocuiasc lucrrile tiinifice, n ceea ce privete profunzimea i
clarificarea unei probleme specifice. Aceast carte a fost scris nu numai pentru criminaliti,
ci i pentru publicul larg interesat de problemele medico-legale i, de asemenea, pentru ali
colegi interesai, n special de aspectele de analiz a unor substane sau materiale toxice sau
cu caracter de drog. Lucrarea ar trebui, totui, s prezinte problemele toxicologice relevante,
n evoluia lor, importana potenial a domeniului i perspectivele de viitor.
Studenii de la cursurile de masterat n criminalistic vor aprecia probabil aceast
introducere n domeniul toxicologiei criminalistice i vor folosi lucrarea drept trambulin
pentru realizarea unor cercetri de masterat i, n coninuare, de doctorat.
Structura general a acestui volum corespunde celor mai importante discipline
criminalistice care aplic diferite metode de separare, i anume, toxicologia, chimia i
serohematologia judiciar. Capitolele dedicate toxicologiei medico-legale sunt axate pe
anumite clase de droguri ilicite i terapeutice i pe alte substane de interes criminalistic. De
asemenea, unele probleme specifice toxicologiei medico-legale, cum ar fi medicamentele i
conducerea autovehicolelor, controlul antidoping, asigurarea calitii n analiza criminalistic,
separrile chirale i strategia general de analiz sunt discutate separat. n partea consacrat
chimiei medico-legale, cele mai importante probleme sunt analiza explozivilor i a
acceleratorilor de incendiu.
Procedurile analitice de screening sunt printre strategiile de baz ale toxicologiei
criminalistice i sunt prezentate n detaliu n lucrare i se refer la cele mai importante

2
metode cromatografice, cum ar fi GC, GC-MS, HPLC, LC-MS, CE i LC-ICPMS. n plus, n
fiecare capitol sunt tratate anumite clase de droguri, iar metodele preliminare (n principal
imunoteste) sunt prezentate mpreun cu metodele separare. In practica medico-legal, este
imposibil s se separe metodele preliminare cum ar fi imunotestele de cele foarte sigure i
confirmative cum sunt tehnicile cromatografice.
Experiena mea n domeniul toxicologiei se adreseaz doar unor clase de substane,
cum ar fi cianurile i pesticidele, iar dintre metode, am folosit tehnici spectrofotometrice, de
fluorescen, spectrometrice de mas, etc. De aceea, am consultat literatura de specialitate,
ceea ce doresc s fac i masteranzii de la cursurile de criminalistic i am apelat la experiena
unor colegi mai pricepui dect mine, n primul rnd colegilor de la Facultatea de Medicin i
Farmacie Gr. T. Popa Iai, crora le mulumesc i pe aceast cale.
Mulumesc celor care m-au ajutat n elaborarea i redactarea acestei lucrri, n special
colegilor profesori (cu care am avut discuii legate de modul de abordare i publicarea
anterioar a unor lucrri pregtitoare) dr. Ion Sandu, dr. Ionel Mangalagiu, dr. Romeo Olariu,
dr. Andrei Sandu, dr. Gabriel Olteanu, dr. Robert Gradinau. De asemenea, am fost ajutat la
redactarea materialului de ctre colegele de la laboratorul de toxicologie i biochimie i
anume domnioarele drd. Adriana Adochiei i Laura Hbescu, precum i de doamna Olga
Pintilie, crora le port recunotin pentru efortul fcut.
Lucrarea a fost realizat cu sprijin financiar din Fondul Social European prin
Programul Operaional Sectorial pentru Dezvoltarea Resurselor Umane 2007 2013,
Promovarea cercetrii tiinifice din domeniul criminalisticii n activitatea judiciar, Cod
Contract: POSDRU/86/1.2/S/62307, Beneficiar: Academia de Poliie Alexandru Ioan Cuza,
Bucureti (AAIC), Partener: Universitatea Alexandru Ioan Cuza, Iai (UAIC).
Imi permit s exprim mulumiri pentru fondurile primite i utilizate n acest scop, dar
s felicit i totodat s le mulumesc domnilor profesori Gabriel Olteanu i Ion Sandu pentru
realizarea i buna coordonare a acestui proiect.



Iai, 2011 Prof. dr. Gabi Drochioiu,
Facultatea de Chimie,
Universitatea Al. I. Cuza Iai











3
Cuprins
Introducere n toxicologia judiciar.
Prezentarea domeniului. Doze toxice i stabilirea nocivitii
Istoria toxicologiei judiciare.
Investigarea decesului de ctre toxicologi.
Materiale de analiz: snge, urin, alte fluide, materiale vegetale, prafuri i droguri.
Otrvirea accidental. Moartea prin supradoz de droguri. Sinuciderea cu otrav
Crima prin otrvire. Investigaia toxicologic a otrvirilor. Pregtirea probei judiciare pentru
analiza fizico-chimic. Pregtirea probei pentru analiz. Detecia i clasificarea.
Otrvirea cu metale. Gaze toxice. Otrvuri nevolatile. Diverse otrviri.
Studiul coninutului stomacal. Prelevarea de probe de la cadavre
Metabolizarea otrvurilor n corp. Absorbia distribuia i eliminarea
Absorbia alcoolului, distribuia i eliminarea.
Analiza toxicologic. Tehnici i strategii de sampling a probelor judiciare. Analiza fizico-
chimic. Metode de analiz n toxicologie. Electroforeza. Cromatografia n strat subire.
Cromatografia de lichide de nalt performan. Cromatografia de gaze. Spectroscopia.
Tehnici imunologice. Aplicaii.
Interpretarea datelor toxicologice. Surse de eroare. Estimarea erorilor n analizele
toxicologice. Incertitudini aferente msurtorilor analitice Caracterizarea msurtorilor i a
rezultatelor. Interpretarea unui buletin de analiz fizico-chimic.
Studii de caz. Teste de culoare. Tehnici de microdifuziune.
Metodologia de lucru n toxicologia judiciar. Principalii compui investigai: alcoolul,
otrvurile i drogurile.
Mrturia toxicologului n instana de judecat. Concluziile cursului
Determinarea spectrofotometric a cianurilor din snge i alte fluide biologice.
Determinarea alcoolemiei.
Aplicaii FTIR n toxicologia judiciar.
Analiza drogurilor i amestecurilor complexe de droguri prin GC-MS.
Analiza urmelor de snge folosind metoda cu luminol.
Prelevarea amprentelor i analiza toxicologic unor materiale aflate la locul crimei (fire pr,
saliv, alte materiale biologice).
Analiza contaminanilor prin tehnici de spectrofluorescen. Identificarea surselor cu potenial
toxic.
Analiza electroforetic a vegetalelor n caz de furt de produse agricole.

4
Studiul metaboliilor din sisteme biologice.
Probleme teoretice speciale n toxicologia judiciar

Abrevieri
6-AM 6-Acetilmorfin
ACN Acetonitril
APCI Ionizare la presiune atmosferic (Atmospheric pressure chemical ionization)
CE Electroforez capilar
CE-MS Electroforez capilar- spectrometrie de mas
CI Ionizare chimic
CID Disociere indus de coliziune (Collision-induced dissociation)
CSF Fluid cerebrospinal
DAM Diacetilmorfine
DEA Dietilamin
DHC Dihidrocodeine
DMOA Dimetiloctilamin
EMIT Enzyme multiplied immunoassay technique
EIA Enzim-imunodeterminare
ESI Ionizare cu electropulverizare (Electrospray ionization)
FAB Fast atom bombardment
FID Flame ionization detector
FPIA Fluorescence polarization immunoassay
FITC Fluorescein isotiocianat
GC Gas cromatografie
HPLC Cromatografie de lichid de nalt performan (High-performance liquid
(chromatography)
IDS International Diagnostic Systems Corporation
LCMS Lichid cromatografie cuplat cu mas spectrometrie
LOD Limit de detecie
LOQ Limit cuantificare
LSD Dietilamida acidullui lisergic
M6G Morfin-6-glucuronida
MDMA 3,4-Metilenedioximetamfetamin
MEKC Cromatografie capilar prin electrocinetic micelar
MeOH Metanol
PTFE Politetrafluoroetilen
POD Peroxidaz
RIA Radioimunodeterminare (Radioimmunoassay)
RP Faz invers (Reversed phase)
SFE Supercritical fluid extraction
SPE Extracie n faz solid

5
SPME Microextracie n faz solid
TEA Trietilenamin
TFA Acid trifluoroacetic
TLC Cromatografie n strat subire (Thin-layer chromatography)
TMCS Trimetilclorosilan
TMS Trimetilsilil
TSP Ionizare prin termospray
QTOF Quadrupole-time-of flight



































6


TOXICOLOGIA MEDICO-LEGAL SAU JUDICIAR

(Forensic Toxicology)


Cap. I. Introducere n toxicologia judiciar. Prezentarea domeniului. Istoria toxicologiei
judiciare. Investigarea decesului de ctre toxicologi. Probele de analiz.

Cuprinsul capitolului:
1. Introducere n toxicologia judiciar
2. Prezentarea domeniului. Dozele toxice i stabilirea nocivitii
3. Istoria toxicologiei medico-legale
4. Otrvirea i cercetarea criminalistic
5. Studii de caz i probe
6. Interpretarea rezultatelor
7. Laboratoarele de medicin legal
8. Materialele examinate de toxicologul criminalist
9. Analiza de urme
10. Bibliografie selectiv


1. Introducere n toxicologia judiciar
Toxicologia medico-legal sau judiciar are drept obiect de activitate punerea n eviden a
toxicilor i metaboliilor lor n organe, lichide biologice, corpuri delicte. Toxicologul
analizeaz fluidele biologice i esuturile victimelor presupuse a fi fost otrvite accidental sau
intenionat. Acesta are rolul de a dovedi crimele prin otrvire, stabilirea sinuciderilor i, mai
recent, urmrete activitatea laboratoarelor clandestine de sintez a unor droguri. Toxicologia
medico-legal reprezint aplicarea toxicologiei i a unor tiine nrudite, cum ar fi chimia
analitic, farmacologia i chimia medical la investigarea decesului, otrvirii accidentale sau
intenionate sau la depistarea drogurilor. Important este investigaia toxicologic, utilizarea
metodelor i tehnicilor de lucru pentru obinerea i interpretarea rezultatelor i, mai puin,
aspectul legal. Toxicologul judiciar este interesat de studiul urmelor de la scena unei crime,
dovezile fizico-chimice, existena pulberilor, a urmelor i a oricrei substane chimice. Acesta
determin ce substane chimice sunt prezente, n ce concentraie i care este efectul probabil
asupra unei persoane. Deoarece determinarea unei substane ingerate este complicat de
procesele de metabolizare i diluare n corp, este necesar s se studieze metabolizarea
substanelor toxice n corp. Astfel, n cadrul cercetrilor criminalistice (mai precis de

7
toxicologie medico-legal) se preleveaz i se analizeaz probe de urin, snge, pr, fluide
orale, etc.
Recent, toxicologia ca tiin a cptat amploare, incluznd o gam larg de direcii de
lucru, inclusiv evaluarea implicaiilor i riscurilor utilizrii produselor farmaceutice, a
pesticidelor i a aditivilor alimentari, precum i studii de otrvire profesional, expunerea la
poluarea mediului, efectele radiaiei, i n mod regretabil, rzboiul biologic i chimic. Cu toate
acestea, toxicologul criminalist este cel care a deinut titlul de toxicolog pentru cea mai lung
perioad de timp. Toxicologul criminalist este preocupat, n primul rnd, de detectarea i
cuantificarea otrvurilor n esuturile i fluidele organismului obinute la autopsie sau
ocazional, n snge, urin sau coninut gastric, obinute de la o persoan vie. Odat ce analiza
este complet, toxicologul criminalist interpreteaz rezultatele din punct de vedere fiziologic
i / sau al efectelor comportamentale ale otrvii asupra persoanei de la care s-a prelevat proba.
n cazul esuturilor colectate la autopsie, rezultatele analitice pot dezvlui faptul c victima a
murit prin otrvire. n organismele vii, prezena unui medicament sau drog ntr-o prob de
snge sau urin poate explica coma, convulsiile sau un comportament neobinuit.
Lucrarea de fa i propune s aduc n faa cititorilor cele mai importante descoperiri
n domeniul amintit, s prezinte modul de folosire a tehnicilor de lucru n criminalistic i
sdescrie modul de folosire a rezultatelor n instana de judecat. Sunt descrise pe larg
majoritatea metodele utilizate, cu referire deosebit asupra celor utilizate la depistarea i
determinarea cantitativ a drogurilor, alcoolului, otrvurilor, medicamentelor toxice n doze
mari. Totui, din gama destul de vast a metodelor fizico-chimice pe care criminalistica le are
la ndemn, n cadrul lucrrii vor fi menionate doar aspectele relevante, incluznd i
exemple de aplicaii privind exploatarea metodelor moderne de analiz GC-MS i FT-IR. Se
dau informaii asupra modalitilor actuale folosite n asigurarea controlului i calitii
msurtorilor toxicologice cu aplicaii n criminalistic.
Progresele tehnologiei tiinifice utilizate de ctre laboratoarele criminalistice moderne
i a criminalitii necesit cunotine n domeniile tiinei naturale, de biologie, chimie, fizic
i matematic. Aceste laboratoare, de obicei, necesit o diplom n una sau mai multe dintre
aceste domenii pentru angajare la nivelul de baz. Multe persoane cu masterat i doctorat de
sunt serologi, toxicologi i utilizatori de microscop. A crescut numrul colegiilor i
universitilor care acord diplome universitare i postuniversitare n domeniul tiinei
criminalistice, inclusiv a toxicologiei medico-legale. Criminalistul din laborator are o carier
interesant, plin de realizri i acesta poate fi un absolvent de facultate care s-a specializat n
una sau mai multe dintre tiinele naturale.

2. Prezentarea domeniului. Dozele toxice i stabilirea nocivitii
Toxicologia judiciar se ocup cu detectarea substanelor toxice i a drogurilor n esuturile i
fluidele corpului. Toxicologul analizeaz fluidele biologice i esuturile victimelor care se
presupune c au fost otrvite accidental sau intenionat.
Cunoaterea proprietilor otrvurilor este necesar pentru a nelege mecanismele de
aciune toxic care conduc la leziuni biochimice sau la alterri histologice i pentru stabilirea
metodologiei de analiz. De asemenea, izolarea, identificarea i dozarea toxicilor sunt

8
necesare att pentru scopuri criminalistice, n caz de deces, dar i pentru supravegherea
mediului (aer, ap, alimente), ct i pentru stabilirea circuitului toxicilor n organism.
Combaterea simptomelor de otrvire presupune tratarea lor, precum i elaborarea de
msuri profilactice i stabilirea concentraiilor maxime admisibile. Otrvurile pot fi produse i
de plante (alcaloizi, glicozizi), de animale (ptomaine, veninuri), de mucegaiuri (micotoxine),
etc.
Toxicologul, spre deosebire de chimistul criminalist, se ocup n primul rnd de
materialele biologice i poate detecta otrvuri n snge, urina, lichidul cefalorahidian,
coninutului gastric, bil, i esuturi.
n trecut, omul a cunoscut intuitiv sau prin observaie proprietile toxice ale unor
substane de origine mineral, vegetal sau animal. Aceste cunotine au fost aplicate mai
trziu, dup ce omul a nceput s ucid animale, la fabricarea sgeilor otrvite (curara).
Totodat, omul a utilizat antidoturi mpotriva otrvurilor de origine vegetal i animal
(veninuri).

2.1 Noiunea de otrav
Noiunea de toxic deriv din grecescul toxikon (otrav), care, dup Dioscoride (sec. I d. H.)
deriv de la toxon(arc) i se refer la sgeile otrvite. Se mai afirm c toxikon provine
de la egipteanul tako (distrugere, moarte). Dup Pliniu (sec. I d.H.), termenul toxicus
deriv de la taxus, o specie de conifer ale crui fructe erau folosite la nveninarea sgeilor
i despre care se tie astzi c i datoresc toxicitatea alcaloidului taxin. Cuvntul otrav
provine de la verbul slav otraviti (a mhni, a tulbura sntatea sufleteasc). Termenul de
otrav se refer numai la toxicul folosit n scop criminal. De asemenea, exist noiunea de
venin, derivat de la venenum (otrav); n accepiunea modern, prin venin se nelege curent
toxina elaborat de unele specii de animale. Noiunea de toxin se refer la substanele
organice produse de organismele animale sau vegetale, capabile s genereze intoxicaii. n
cadrul toxicologiei intr numai micotoxinele, nu i toxinele bacteriene i helmintice.
Prin toxic, Galenus (sec. II d.H.) nelegea orice lucru care poate altera organismul
nostru. n sec. VIII Jabir ibn Hayyan (Geber) ar fi artat c otrvurile i manifest aciunea
nu numai prin natura lor, ci i prin locul i timpul utilizrii, forma otrvii, caracteristicile
individuale ale omului. Paracelsus (1493-1541) introduce noiunea de doz. Orice substan
care, atunci cnd este luat n cantitate suficient, cauzeaz probleme de sntate sau moartea
poate fi considerat otrav. Expresia cheie n aceast definiie este "cantitate suficient".
Paracelsus a observat nc n sec. al 16-lea c "Toate substanele sunt otrvuri; nu este nici
una care s nu fie o otrav. Doza potrivit face diferena dintre o otrav i un remediu.
Cantiti mici de arsenic, cianur i alte otrvuri pot fi ingerate fr a manifesta toxicitate
aparent.
In edictul dat de Ludovic al XIV-lea n 1682, referitor la afacerea otrvurilor, se
arta c: Tot ceea ce provoac o moarte rapid sau afecteaz un timp sntatea omului,
indiferent dac este vorba de un corp simplu sau compus, trebuie privit ca o otrav adevrat.
Dup Ogier (1853-1913), toxicul sau otrava este orice substan a crei prezen n
organism nu este nici normal, nici obinuit. Fabre i Truhaut consider c toxic este

9
substana care, dup ptrunderea n organism n doz relativ ridicat (unic sau repetat la
intervale scurte) sau n doze mici (repetate timp ndelungat) determin, imediat sau dup o
perioad de laten, n mod trector sau persistent, alterarea uneia sau mai multor funcii ale
organismului, putnd duce la moarte.
O concepie asemntoare ntlnim i unii autori arabi: Tot ceea ce se absoarbe
scrie Al-Biruni (973-1048) n Cartea drogurilor se mparte n alimente i otrvuri, iar ntre
cele dou categorii se situeaz medicamentele ele sunt vtmtoare n comparaie cu
alimentele i curative n comparaie cu otrvurile, iar aciunea lor curativ se manifest numai
atunci cnd sunt utilizate de un medic priceput i scrupulos. De aceea, ntre ele i alimente
exist aa-numitele alimente medicamentoase, iar ntre ele i otrvuri, aa-numitele
medicamente toxice. Relaia medicament-otrav este definit succint de Gerolamo
Mercuriali (1530-1606): Otrava este un medicament mortal.

2.2 Grupe de otrvuri
n investigarea unei otrviri, este necesar mai nti izolarea i identificarea otrvii de ctre
toxicolog. Astfel, toxicologii criminaliti clasific otrvurile pe grupe, n funcie de metoda
utilizat pentru a izola substanele din esuturile sau fluidele corpului.

Grupa I: Gaze. Majoritatea gazelor de importan toxicologic nu sunt detectabile n probele
prelevate pentru autopsie. Cu toate acestea, unele pot fi izolate din esutul pulmonar sau din
snge prin procesele de aerare. De obicei, probe de aer sunt colectate de la locul faptei.

Grupa II: Vapori de otrvuri volatile. Compuii din aceast grup sunt izolai prin distilare cu
vapori. Proba (snge, urin sau omogenatul tisular) se aciduleaz cu acid clorhidric sau se
alcalinizeaz cu oxid de magneziu solid. Un flux de abur este trecut peste eantion i
otrvurile volatile sunt ndeprtate prin distilare ntr-un distilat apos. Otrvurile distilabile
dintr-un mediu acid includ tetraclorura de carbon, cloroform, etanol, cianuri, metanol, fenoli,
nitrobenzeni i fosfor galben. Otrvurile distilabile dintr-un mediu alcalin includ
amfetaminele, anilina, meperidina, metadona i nicotina.

Grupa III: Otrvuri metalice. Metalele sunt izolate din esut prin distrugerea tuturor
compuilor organici coninui n esut. esutul poate fi distrus de cldura excesiv (incinerare
uscat) sau prin fierbere cu acizi concentrai sau ageni oxidani puternici (incinerare umed).
Pentru a identifica anumite otrvuri metalice rmase n cenu pot fi folosite diverse metode.

Grupa IV: Otrvuri organice nonvolatile. Acest grup conine cele mai multe dintre
medicamentele de interes pentru toxicologi astzi. Compuii din aceast grup sunt de obicei
prezeni n esuturi numai n cantiti foarte mici. Unele medicamente (de exemplu,
barbituricele) pot fi extrase direct din omogenatele tisulare, cu ajutorul solvenilor organici.
Cu toate acestea, muli compui sunt adesea separai de cea mai mare parte a esutului
matrice, prin prepararea unui filtrat de esut fr proteine. Acest filtrat este apoi supus la

10
extragerea selectiv cu solveni organici, n diferite condiii de aciditate. Folosind aceste
tehnici, drogurile sunt clasificate n cinci subgrupuri.

1. Acizi tari (de exemplu, clorotiazide, salicilai)
2. Acizilor slabi (de exemplu, acetaminofen, barbiturice)
3. Neutre (de exemplu, meprobamate, metaprylon)
4. Baze (de exemplu, codein, fenotiazine, stricnin, chinin)
5. Amfoterice (de exemplu, hidromorfon, morfin)

Grupa V: Otrvuri diverse. Aceast grup include toate otrvurile neclasificate n ultimele
patru grupe. Substanele incluse n aceast grup sunt anioni anorganici (de exemplu, brom),
ioni organici foarte uor solubili n ap (de exemplu, curara, fluoroacetat, paraquat) i
compui organici insolubili n ap sau alcool. n general, trebuie folosite tehnici specifice
pentru izolarea i identificarea acestor compui din probele biologice. n efectuarea unei
analize, toxicologul are la dispoziie toate tehnicile moderne de chimie analitic. n cazul n
care otrava care a provocat moartea este cunoscut, poate fi efectuat o anumit analiz; cu
toate acestea, n cazul n care agentul nu este cunoscut, sau este suspectat prezena mai
multor otrvuri, toxicologul trebuie s efectueze mai nti o serie de analize, pentru a
determina care sunt substanele toxice prezente i apoi pentru a stabili prin analiz cantitativ,
cantitatea din fiecare substan toxic prezent n diferite probe. Dei numeroase metode
chimice sunt disponibile toxicologului, doar o parte dintre procedurile cele mai comune sunt
discutate. Toate aceste metode pot fi aplicate la analiza calitativ (identificarea) i cantitativ
(concentraie).

2.3 Otrav i medicament
Multe dintre medicamentele utilizate n prezent au un potenial toxic. Asemnarea dintre toxic
i medicament a fost observat nc din antichitate. Grecii foloseau termenul de pharmakon
cu sensul att de medicament, ct i de otrav. Explicaia acestui comportament comun nu
poate fi dat dac ne meninem n graniele biologiei moleculare actuale. ntr-o viziune
structural-fenomenologic (Drgnescu, 1990), fiinele vii sunt considerate ca fenomene care
se manifest pe structuri materiale i, de aceea, ele cuprind mai mult dect un singur nivel de
organizare (structurare), cel molecular. Plantele manifest un nivel de organizare biostructural
care, mpreun cu nivelul molecular coexistent, formeaz materia biosic (Macovschi, 1968,
1972). Nivelul de organizare biostructural confera plantelor i vieuitoarelor n general
nsuirea de viu. Animalele mai prezint un altreilea nivel de structurare, cel psihostructural,
suportul pe care se manifest n lumea nconjurtoare emoiile, sentimentele i tririle
specifice animalelor dar i omului (Papacostea, 1979). Omul este posesorul unui al patrulea
nivel, caracteristic autocontienei i gndirii abstracte (Macovschi, 1979). Aceste nivuri se
afl ntr-o anumit armonie ntre ele ntr-un corp sntos, indiferent dac acesta este o plant,
un animal sau un om. Perturbarea echilibrului dintre nivelurile de structurare specifice lumii
nconjurtoare poate conduce la starea de boal, iar n cazul intoxicaiilor, perturbarea
echilibrului dintre niveluri poate fi provocat de o substan strin corpului. Alte substane

11
permit reechilibrarea organismului viu. Att medicamentele, ct i toxicii sunt capabili s
modifice acest echilibru. Deplasarea echilibrului, care se poate face ntr-un sens sau altul,
poate determina vindecarea unei boli, o stare toxic sau chiar moartea organismului n cauz.
Substanele proprii corpului, n general, nu afecteaz acest echilibru, iar alimentele, n doze
normale, sunt transformate n substane proprii fr efecte toxice.

2.4 Tipuri de otrvuri. Intoxicaii i otrviri
Otrvurile pot fi de origine mineral, vegetal sau sintetic. Dup constituie chimic sunt
toxici anorganici, organici etc., iar dup comportarea analitic pot fi otrvuri sau toxici
gazoi, volatili, minerali, organici nevolatili, acizi, baze, oxidani etc.
Comportare fiziopatologic i separ ca toxici cu aciune asupra sistemului nervos
central, sistemului nervos vegetativ, aparatului respirator, sistemului cardiovascular, sngelui
i organelor hematopoietice.
Otrvurile au multiple proveniene: toxici industriali, medicamente, plante toxice, pesticide,
detergeni, materiale plastice, aditivi alimentari, toxine (zoo- i fitotoxine), substane toxice de
lupt etc.
Otrvirea sau intoxicarea este un rspuns al organismului fa de agresiunea toxic i
depinde, n primul rnd, de o proprietate caracteristic a substanei toxicitatea.
n raport cu originea factorilor care determin intoxicaiile, acestea se clasific n:
Intoxicaile pot fi endogene (intoxicaii alimentare) sau exogene, provocate de toxicii
ptruni n organism pe diferite ci; acestea fac obiectul toxicologiei. n clasa intoxicaiilor
exogene se disting:
Intoxicaiile intenionate (voluntare): crime, sinucideri, toxicomanii;
Intoxicaiile accidentale: accidentele propriu-zise, medicamentoase, profesionale,
alimentare.
Crimele prin otrvire, n continu scdere, utilizeaz pesticide organofosforice,
digitalice, taliu etc.
Sinuciderile prin otrvire, n numr din ce n ce mai mare, se realizeaz prin
medicamente (opiacee, psihotrope), apoi prin pesticide, monoxid de carbon, gaze naturale,
alcaloizi, sod caustic etc.
Toxicomania (gr. toxicon = otrav + mania = nebunie) este starea de intoxicaie,
periodic sau cronic, determinat de consumarea repetat a unui drog, natural sau sintetic.
Caracteristicile sale sunt dorina de nenvins sau necesitatea de a continua consumarea
drogului i de a-l procura cu orice pre; tendina de a mri progresiv dozele, dependena de
ordin psihic i, n general, dependena fizic fa de efectele drogului, cu apariia sindromului
de abstinen la suprimarea lui, efecte nocive asupra individului, familiei i societii.
Doparea nu este o intoxicaie propriu-zis, ci reprezint ntrebuinarea mijloacelor i
substanelor naturale sau sintetice ( n special psihoanaleptice) capabile s mreasc
performanele, n vederea unei competiii fizice sau intelectuale. n mod obinuit, senzaia de
oboseal dup un efort prelungit oblig subiectul s-i ntrerup activitatea. Substanele
dopante nltur n mod artificial senzaia de oboseal i, implicit, elimin semnalul de alarm
indicnd nevoia de odihn. Oboseala este ns numai mascat, necesitnd administrarea unei

12
noi doze de substan dopant. Doparea aduce prejudicii eticii sportive, precum i integritii
fizice i psihice a sportivilor.
Intoxicaiile accidentale propriu-zise se datoreaz neateniei, netiinei sau
imprudenei i sunt legate de pstrarea i folosirea improprie a pesticidelor, medicamentelor,
substanelor chimice de uz casnic (sod caustic, detergeni, produse petroliere etc.), de
defeciuni de tiraj ale sobelor (gaze naturale, crbune), de gazele de eapament ale
automobilelor (n garaje).
Intoxicaiile medicamentoase au loc prin:
Eroarea medicului, prin prescrierea unor cantiti de substan activ care
depete dozele maxime terapeutice, a medicamentelor coninnd un principiu activ comun
(efect cumulativ) sau sediu comun de aciune (efect sinergic), a principiilor active care, prin
asociere, conduc la efecte toxice sau la potenare exagerat etc
Eroarea farmacistului, prin nedescifrarea corect a reetei, nesemnalrii erorii din
reet, confuzie de substane, eliberarea unui preparat neomogen etc.
Eroarea bolnavului prin supradozare, automedicaie, polipragmazie, confuzie de
medicament sau de cale de administrare etc
Intoxicaiile profesionale au loc n industria chimic, extractiv, agricultur, ateliere
meteugreti etc. Aceste intoxicaii sunt produse de compuii unor metale i nemetale,
pesticide, solveni organici, cancerigeni etc. Acest tip de intoxicaii face obiectul
criminalisticii numai n caz de deces.
n funcie de timpul instalrii intoxicaiei se cunosc:
- Intoxicaia acut, toxicul fiind absorbit n doz relativ mare i unic sau n doze mai
mici i repetate la intervale scurte, iar manifestrile toxice apar pe neateptate, sunt violente i
pot fi urmate de moarte. Dup timpul de apariie i violena manifestrilor toxice, se disting:
intoxicaia supraacut, acut i subacut;
- Intoxicaia cronic numit i intoxicaia pe termen lung reprezint totalitatea
efectelor toxice produse prin administrarea repetat a unui toxic n aceeai doz, pe o perioad
mai mare parte din viaa omului. Leziunile biochimice i morfofuncionale apar lent, dar
continuu. Intoxicaia pe termen lung prin absorbie repetat de doze mici are loc n cazul
toxicilor cumulativi (metanol, digitalice, metale grele, fluor, derivai de arsen etc.) prin
cumularea dozelor sau prin cumularea efectelor, n cazul substanelor cancerigene.
Intoxicaia pe termen lung poate fi cauzat de o doz unic. Toxicitatea n form
agravat se manifest, de pild i la cteva sptmni dup ingerarea unei doze unice de
Paraquat. La fel se comport unele insecticide organofosforice cu aciune neurotrop
ntrziat, nitrozaminele cancerigene etc.
Intoxicaia acut reprezint totalitatea efectelor toxice produse prin administrarea unui
toxic ntr-o singur doz, putnd provoca moartea a 50% din animalele dintr-un lot n decurs
de 24-48 ore (sau pn la 15 zile pentru toxicii cu efect ntrziat).
Aprecierea toxicitii acute pe baz de DL
50
are dezavantajul c nu ine seama de masa
molecular, deoarece trebuie s se ia n considerare numrul de molecule implicate n
mecanismele fiziopatologice. S-a introdus, de aceea, noiunea de potenial de toxicitate, pT =

13
log [T]. Valoarea T se calculeaz dup valoarea DL
50
i.p. la oareci i reprezint concentraia
molar toxic a substanei, exprimat n moli/kg.
Concentraia letal n atmosfer (CL) exprim toxicitatea acut a substanelor care
ptrund pe cale respiratorie i are aceeai semnificaie ca i DL. Exprimarea sa se face astfel:
masa/volum (g/v);
volum/volum (v/v), ca procente de volum (% vol.), pri/milion (ppm), pri pe
bilion (ppb; 1 ppm = 1000 ppb).
Concentraiile maxime admise (CMA) sunt caracteristice fiecrei substane din mediul
industrial sau comunal, pentru a evita apariia manifestrilor toxice. Ele reprezint
concentraiile medii ale substanelor din aer, care, cu excepia cazurilor de hipersensibilitate,
nu provoac, la nici unul din muncitorii expui n mod continuu nici un semn sau simptom de
boal sau de condiie fizic rea, putnd fi pus n eviden prin cele mai sensibile teste
acceptate pe scar internaional.

2.5 Doze toxice i doze letale
Doza toxic se refer la cantitatea de substan capabil s determine efecte toxice. Aceasta
reprezint cantitatea din substan care, introdus n organism, provoac un efect toxic
determinat. De asemenea, la medicamente se disting doze terapeutice, toxice i letale.
Modul de exprimare a dozei variaz: doz/kg mas corporal; doz/mas corporal
global; doz/unitate de suprafa corporal; concentraie molar; unitate biologic etc. Pentru
substanele care au ptruns n organism pe cale oral se face distincie ntre doza ingerat i
doza absorbit.
Doza letal (DL) exprim toxicitatea acut a substanelor care ptrund oral sau
parenteral. Se exprim n mg/kg corp i se stabilete experimental pe loturi de animale. DL
este urmat de un indice de la 1 la 100 exprimnd procentul de letalitate ntr-un timp dat.
DL
5
(DLM) este doza letal minim, DL
50
(DML), doza medie letal, DL
75
este doza fatal,
iar DL
100
, doza maxim letal sau doza letal absolut. DL
o
, doza maxim tolerat (cnd se
produc efecte toxice, dar nu letale) nu este o doz letal.
n mod curent, pentru exprimarea toxicitii acute a unei substane se folosete
noiunea DL
50
(mg/kg corp), deoarece la aceast doz diferenele de reactivitate individual
sunt mai reduse.
Aprecierea toxicitii acute pe baz de DL
50
are dezavantajul c nu ine seama de masa
molecular, cu alte cuvinte trebuie s se ia n considerare numrul de molecule implicate n
mecanismele fiziopatologice. S-a introdus, de aceea, noiunea de potenial de toxicitate, pT =
log [T]. Valoarea T se calculeaz dup valoarea DL
50
i.p. la oareci i reprezint concentraia
molar toxic a substanei, exprimat n moli/kg.
Substanele toxice se clasific i se compar astfel n raport cu DL
50
(vezi scara
toxicitii).
Concentraia letal n atmosfer (CL) exprim toxicitatea acut a substanelor care
ptrund pe cale respiratorie i are aceeai semnificaie ca i DL. Exprimarea sa se face astfel:
masa/volum (g/v);

14
volum/volum (v/v), ca procente de volum (% vol.), pri/milion (ppm), pri pe
bilion (ppb; 1 ppm = 1000 ppb).


Scara toxicitii (dup Hodge i Steaner)
Calea de administrare
Grupa
toxici-
tii
Gradul
toxici-tii
DL
50

cutanat
iepuri,
mg/kg
DL
50
(doz
unic) oral
obolan,
mg/kg
Inhalare de
vapori (4 ore)
mortalitate 30-
60% (obolan)
ppm
Doza letal
probabil
la om (g)
Substane

1
Extrem de
toxic
<5 <1 <10 <0,065 Alcaloizi
2
Foarte
toxic
5-43 1-50 10-100 4
Organofosforice,
organomercurice,
As
2
O
3
, DNOC
3
Moderat
toxic
44-340 50-500 100-1000 31 Metale grele
4 Slab toxic 350-2810 500-5000 1000-10000 570
Aditivi alimentari,
Fe, Ni
5
Practic
netoxice
2820-
22590
5000-
15000
10000-100000 1100
Arome alimentare,
NaCl, acizi organici
6
Relativ
fr
toxicitate
>22600 >15000 >100000 >1100 Substane alimentare

Concentraiile maxime admise (CMA) sunt caracteristice fiecrei substane din mediul
industrial sau comunal, pentru a evita apariia manifestrilor toxice. Ele reprezint
concentraiile medii ale substanelor din aer, care, cu excepia cazurilor de hipersensibilitate,
nu provoac, la nici unul din subiecii expui n mod continuu nici un semn sau simptom de
boal sau de condiie fizic rea, putnd fi pus n eviden prin cele mai sensibile teste
acceptate pe scar internaional.
n raport cu natura efectului toxic, substanele se mpart n mai multe grupe, mai
importante fiind urmtoarele dou:
- substane ale cror efecte principale se traduc prin fenomene de iritaie, sensibilizare
sau intoxicaie acut, aprute imediat sau dup o faz de laten, n urma unei expuneri de
scurt durat la concentraii curente (oxizi de azot, formaldehid, halogeni, mercaptani etc.).
n acest caz CMA sunt denumite valori plafon, care nu trebuie depite nici chiar timp de 10-
15 minute;
- substane ale cror efecte principale se datoresc cumulrii lor, n urma expunerii
repetate la concentraii curente (metale grele, solveni organici etc.). n acest caz, trebuie
considerate drept CMA valorile medii integrate n raport cu timpul, corespunznd noiunii de
praguri care nu pot fi depite. Ca urmare, aceste concentraii pot fi depite n timp i spaiu,

15
ns este obligatoriu ca, nsumate, s se compenseze i astfel s nu depeasc CMA. De
pild, pentru plumb, expunerea timp de o or la concentraii de opt ori mai mari dect
concentraia medie admis nu prezint risc de intoxicaie dac n celelalte apte ore de munc
plumbul este absent; dimpotriv, pentru solvenii liposolubili cu aciune narcotic
(dicloretilen, CS
2
etc.), valoarea medie admis nu poate fi dect foarte puin depit, pe o
perioad extrem de scurt.
Pentru amestecul de toxici exist dou modaliti de exprimare a CMA, n raport cu
modul de dozare:
- dac toxicii se dozeaz global, CMA se exprim n toxicul cel mai agresiv. De
exemplu, la amestecul de HCl, H
2
SO
4
i HNO
3
, rezultatul se exprim n mg H
2
SO
4
/m
3
de aer
(CMA = 1,5 mg/m
3
) fa de ceilali doi (CMA = 10 mg/m
3
).
- dac toxicii se dozeaz individual, CMA se consider global depit chiar atunci
cnd concentraiile individuale (C
1
, C
2
, C
3
) sunt mai mici dect CMA respective (CMA
1
,
CMA
2
, CMA
3
), ns suma rapoartelor este egal sau mai mare dect unitatea:
C
1
/CMA
1
+ C
2
/CMA
2
+ ..+ C
n
/CMA
n
1
De exemplu, la un amestec de aceton, alcool izopropilic, cloroform i alcool amilic,
CMA global este depit de 1,5 ori, dei concentraiile fiecrui toxic n parte sunt inferioare
CMA respective:
300/1500 + 240/600 + 80/200 + 125/250 = 1,5 > 1
Cnd suma rapoartelor este inferioar unitii, nu exist efect aditiv.
Se consider c au efect sinergic de tip aditiv substanele toxice care au ca int a
agresivitii lor acelai organ sau sistem al organismului ori care au acelai mecanism de
aciune. n aceste locuri de munc aprecierea riscului, respectiv a nivelului noxelor n aer n
raport cu concentraiile admisibile, se va face aplicnd urmtoarea formul:

C
1
/CMA
1
+ C
2
/CMA
2
+ + C
n
/CMA
n
< 1
(C
1
, C
2
, C
n
= concentraiile determinate n aer pentru fiecare nox)
(CMA
1
, CMA
2
, CMA
n
= concentraiile maxime admise pentru noxele respective).
n Romnia, normele de protecia muncii stabilesc urmtoarele:
- concentraia maxim admis este concentraia noxelor din zona de munc ce nu
trebuie depit n nici un moment al zilei;
- concentraia medie este concentraia noxelor rezultat dintr-un numr de determinri
reprezentative pentru locul de munc ales i care nu trebuie depit pe durata unui schimb de
lucru;
- n cazul medicamentelor se determin indicele terapeutic (IT) sau factorul relativ de
securitate, prin raportarea dozei letale (DL
50
) la doza medie eficace (DE
50
) (cantitatea de
substan capabil s determine efect terapeutic la 50% din subiecii folosii n experiment).
Dac IT 10, utilizarea substanei n terapeutic nu prezint pericol la doze uzuale; pentru IT
< 10 securitatea tratamentului este sczut.




16
3. Istoria toxicologiei medico-legale
Printre primele cri referitoare la antidoturi se cunosc Theriaca i Alexipharmaca, scrise de
Nicandru din Colofan (sec. II . H.). Maimonide, filozof i medic evreu, a scris n sec. XII, un
Tratat despre otrvuri i antidoturile lor.
Din secolul al XVIII-lea dateaz primele lucrri cu scop medico-legal despre otrvuri.
Se cunosc astfel lucrri precum Asupra otrvirilor cu arsen; cercetarea i determinarea lui
pentru justiie, elaborat de Hahnemann n 1786 i Proprietile otrvurilor, un capitol din
primul tratat de medicin judiciar scris de Fodr (1798). Bazele toxicologiei ca tiin au
fost puse de Orfila (1787-1853) prin tratatul su Toxicologia general (1814).
Cu excepia cazului n care cel care s-a otrvit a fost prins n flagrant, n Evul Mediu
nu exista nici o modalitate de a stabili c victima a murit otravit. La nceputul secolului al
XVIII-lea, un medic olandez, Hermann Boerhoave, a emis ipoteza c ar putea produce diferite
parfumuri otrvitoare. Apoi, Boerhave a fost primul care a sugerat o metod chimic ce
dovedete prezena unei otrvi. n Evului Mediu, asasinii profesioniti i-au vndut serviciile
att membrilor familiei regale ct i populaiei. Cele mai frecvente otrvuri au fost de origine
vegetal (cum ar fi cucuta, aconite, belladonna) i metalele toxice (sruri de arsenic i
mercur). n timpul Renaterii franceze i italiene, asasinatul politic prin otrvire a fost ridicat
la rangul de art de ctre Papa Alexandru al VI-lea i Cesare Borgia.
Primul succes n izolarea unei otrvi de tip alcaloidic a fost obinut n anul 1850 de
ctre Jean Servials Stas, un chimist belgian, folosind o soluie de acid acetic n alcool etilic
pentru a extrage nicotina din esuturile lui Gustave Fougnie, care fusese ucis. Modificat de
chimistul german, Otto Friedrich, metoda Stas-Otto, folosit i astzi, a fost rapid aplicat la
izolarea a numeroase otrvuri alcaloidice, inclusiv colchicina, coniina, morfina, narcotina i
stricnina.
Importante contribuii la dezvoltarea toxicologiei au adus Marsh care, n 1836, a
elaborat o tehnic pentru decelarea arsenului i Orfila care a artat c toxicul trebuie cutat n
diferite esuturi i organe. nainte de aceasta (1839), cercetrile se fceau numai n stomac,
intestine i vomismente.
Utilizarea de ctre criminali a arsenicului alb (trioxid de arsen) a devenit att de larg
rspndit n rndul populaiei din Europa medieval nct otrava a dobndit numele de
"pudr de motenire". Avnd n vedere aceast popularitate, este de mirare c prima izolare
chimic i identificare a unei otravi n esuturile i fluidele organismului a avut n vedere
arsenicul.
n 1775, Karl Wilhelm Scheele, un celebru chimist suedez, a descoperit c arsenicul
alb a fost convertit la acid arsenos cu ap de clor. Adaosul de zinc metalic a redus acidul
arsenos la un gaz otravitor, arsine (AsH
3
). La nclzire uoar, gazul degajat conduce la
depunerea arsenicului metalic pe suprafaa unui vas rece. n 1821, Sevillas a utilizat
descompunerea AsH
3
n scopul detectrii unor cantiti mici de arsenic n coninutul
stomacului i urin, n cazuri de intoxicaii. n 1836, James M. Marsh, un chimist de la British
Royal Arsenal din Woolwich, s-a folosit de acest gaz (arsine) pentru a dezvolta prima metod
fiabil de determinare a otrvii absorbite n esuturile i fluidele corpului, cum ar fi ficatul,
rinichii i sngele.

17
Cercetrile au fost dezvoltate n secolul trecut n direcia distrugerii materiei organice,
izolrii i identificrii toxicilor din produsele biologice. S-au remarcat Fresenius, Babo,
Stokes, Stas, Otto, Dragendorff, Tardieu, Roussin, Ogier etc. n secolul nostru, Kohn-Abrest,
Fabre, Truhaut, Boudne, Jaulmes, Le Moan, Stepanov, vaicova, Clarke, Curry, Sunshine,
Mller, Heindrycks, t. Minovici, Ioanid, Galea i alii au elaborat metode valoroase de
toxicologie analitic.
n anii 1800 am asistat la dezvoltarea toxicologiei medico-legale ca disciplin
tiinific. n 1814, Mathieiv J. B. Orfila (1787-1853), "printele toxicologiei", publicat de
Trait des Poisons - prima abordare sistemic a studiului naturii fiziologice i chimice a
otrvurilor. Rolul lui Orfila ca martor expert n studierea multor crime celebre, n special prin
aplicarea testului Marsh pentru arsenic n procesul otrvitorului Marie Lafarge, a strnit att
interesul popular ct i tiinific n noua tiin. Ca decan al Facultii de Medicin de la
Universitatea din Paris, Orfila a instruit muli studeni n toxicologie medico-legal.
Primul succes n izolarea unei otrvi de tip alcaloid a fost obinut n 1850 de ctre Jean
Servials Stas, un chimist belgian, folosind o soluie de acid acetic n alcool etilic pentru a
extrage nicotina din esuturile lui Gustave Fougnie, care fusese ucis. Modificat de chimistul
german, Otto Friedrich, metoda Stas-Otto a fost rapid aplicat la izolarea a numeroase
otrvuri alcaloidice, inclusiv colchicina, conin, morfina, narcotina i stricnina; metoda este
folosit i astzi.
n a doua jumtate a secolului al XIX-lea, toxicologii europeni au fost n avangarda
dezvoltrii i aplicrii tiinelor criminaliste. Procedurile au fost dezvoltate pentru a izola i a
detecta alcaloizi, metale grele, i otrvuri volatile.
Tot n secolul trecut s-au descoperit i cercetat compui de importan toxicologic i
criminalistic: Sertrner (morfina, 1805), Pelletier i Caventou (mai muli alcaloizi, 1817-
1820), Selmi i Gauthier (ptomaine, 1870-1872), Ogier (glicozizi cadaverici, 1891) etc. n
secolul XX s-a dezvoltat biologia molecular care i-a pus amprenta i asupra studiilor de
toxicologie medico-legal. n 1948, Druckrey, cercetnd dimetilaminoazobenzenul, descoper
c exist un efect toxic independent de doz, cu alte cuvinte unii compui nu prezint doz
minim nenociv. Dup 1960 s-a stabilit i faptul c nocivitatea se poate manifesta, n unele
cazuri, la descendeni, chiar dac nu se evideniaz la organismul-receptor (Cotru, 1993).
ncepnd cu anul 1958, cnd, pentru prima dat, Eugen Macovschi a demonstrat
existena biostructurii, purttoarea nsuirilor viului, s-a pus cu totul altfel problema
interaciunii toxic-organism viu. Astfel, toxicul acioneaz att asupra materiei moleculare
incluse n biostructur i coexistent cu aceasta, ct i direct asupra biostructurii pe care o
destram parial sau total provocnd procese morbide reversibile sau ireversibile. Cu alte
cuvinte, este depit concepia strict molecular asupra viului, dei concepia biostructural
rmne tributar viziunii materialiste asupra realitii. Moartea organismului are loc, potrivit
acestei concepii, n trepte, iar mecanismul aciunii toxicului implic n mai mare msur
intervenia organismului vtmat. Cercetrile efectuate cu azid de sodiu i dinitrofenol, de
pild, au artat c organismele tratate cu aceste substane reacioneaz la aciunea toxicilor
prin eliberarea unei pri din apa inclus n biostructur, precum i a unora din componenii
si moleculari.

18
n America, Rudolph A. Witthaus, profesor de chimie la Universitatea Cornell
Medical School, a avut multe contribuii n toxicologie i a atras atenia asupra noii tiine
prin efectuarea de analize pentru New York City, n mai multe cazuri celebre de otrvire:
crimele Helen Potts de ctre Carlyle Harris i Annie Sutherland de ctre Dr. Robert W.
Buchanan, ambii au utilizat morfin. n 1911, Tracy C. Becker i profesorul Witthaus a editat
o lucrare n patru volume pe tema jurisprudenei medicale, Medicin Legal i Toxicologie,
primul manual standard de medicin legal publicat n SUA. n 1918, oraul New York s-a
realizat un sistem de examinare medical, i numirea lui Dr. Alexandru O. Gettler ca
toxicolog a marcat nceputul toxicologiei medico-legale moderne n America. Dei Dr. Gettler
a avut multe contribuii n aceast tiin, probabil cea mai mare realizare a sa a fost formarea
i orientarea pe care a dat-o viitorilor lideri n toxicologie medico-legal. Muli dintre asociaii
lui au continuat aceast direcie n cadrul laboratoarelor de medicin-legal i sistemelor de
examinare medical n marile centre urbane din ntreaga ar.
n anul 1949 a fost nfiinat Academia American de tiine Medico-Legale, n
scopul de a sprijini n continuare practica tuturor fazelor de medicin legal n SUA. Membrii
seciei de toxicologie reprezint n marea lor majoritate toxicologi criminaliti care lucreaz n
birourile de investigaii ale procuraturii. O serie de alte organizaii de criminalistic
internaionale, naionale i locale, cum ar fi Societatea Toxicologilor Criminaliti i Asociaia
Toxicologilor din California, ofera posibilitatea schimbrilor de experien tiinific
referitoare la tehnici analitice i rapoarte de caz, care implic medicamente noi sau rar
utilizate i otrvuri. Asociaia Internaional a Toxicologilor Criminaliti, fondat n 1963, cu
peste 750 de membri din 45 de ri, permite cooperarea la nivel mondial n rezolvarea
problemelor tehnice cu care se confrunt toxicologul.
n 1975, a fost constituit Consiliul American de Toxicologie Criminalistic, n scopul
de a examina i certifica toxicologii criminaliti. Unul dintre obiectivele sale declarate este
"de a crea un sistem judiciar valabil, i unul public, un sistem practic i echitabil pentru
identificarea cu uurin a acelor persoane care practic toxicologia medico-legal i care
posed calificrile i competenele necesare".
n general, aceste persoane autorizate de ctre Consiliu trebuie s fi obinut titlul de
doctor, s aib cel puin 3 ani de experien profesional full-time, i s promoveze un
examen scris. n prezent, doar circa 200 de toxicologi sunt certificai de ctre acest Consiliu.
n ara noastr, primul toxicolog criminalist este considerat farmacistul i medicul C.
Hepites care a avut, ncepnd cu anul 1833, un laborator de analize chimico-legale la Brila.
Dup 1890 toxicologia a fost reprezentat de Mina Minovici, farmacist i medic,
ntemeietorul Institutului de Medicin Legal din Bucureti. Fratele su, tefan Minovici, dei
chimist, a reorganizat nvmntului farmaceutic i a ntemeiat Facultatea de Farmacie din
Bucureti (1923); a elaborat, printre altele, i un manual de toxicologie (1912). Printre
colaboratorii i urmaii si au fost Bacovescu, Vintilescu, Deleanu, Ionescu-Matiu. n
Transilvania, medicul, chimistul i farmacistul J. Orient a publicat numeroase lucrri de
toxicologie. La Iai a activat n domeniul toxicologiei judiciare dr. Cotru.

19
La Bucureti, N. I. Ioanid public n 1965 un manual de referin n domeniu:
Toxicologie. La Cluj activeaz prof. V. Galea, autor a numeroase lucrri de toxicologie
teoretic i practic.

4. Otrvirea i cercetarea criminalistic
n general, cazurile de crim cu otrav sunt comise doar n cadrul unei familii sau ntr-un grup
de aproapiai. n astfel de cazuri, asasinul folosete, n general, unele otrvuri care nu pot trezi
suspiciuni datorit culorii, mirosului sau gustului acestora. Uneori se semnaleaz i omorul
sau tentativa de omor prin folosirea de gaze toxice, de exemplu, cu monoxid de carbon.
Confirmarea cazului de moarte prin otrvire se realizeaz prin colaborare ntre
medicul legist i toxicolog. Rareori cercetarea la faa locului aduce dovezi fizice care indic
faptul c moartea a fost cauzat de ingestia unor substane otrvitoare. Stabilirea cauzei
decesului revine personalului medical calificat, medicului legist sau anatomopatologului, dar
succesul sau eecul n a ajunge la o concluzie corect depinde frecvent de eforturile
combinate ale anatomo-patologului i toxicologului criminalist. Otrvirea, ca i cauz a
decesului, nu poate fi dovedit fr a analiz toxicologic care s demonstreze prezena
otrvii n esuturile sau fluidele corporale ale decedatului. Cele mai multe droguri i otravuri
nu produc leziuni caracteristice sau vizibile n esuturile corpului, iar prezena lor poate fi
demonstrat doar prin metode chimice de izolare i identificare. n cazul n care analizele
toxicologice sunt evitate, moartea poate fi atribuit otrvirii fr o dovad cert sau o moarte
prin otrvire poate fi n mod eronat atribuit altor cauze.
Grania dintre substanele otrvitoare i cele netoxice este greu de determinat. Unele
substane prezente n produsele alimentare pot cauza moartea prin otrvire, atunci cnd sunt
luate n cantiti mari. Astfel, exist un caz n care consumul de 13 de grame de sare de mas
a provocat moartea a unui adult.
Probele fizice aflate la locul crimei i examinarea sumar a decedatului pot indica
uneori un caz de otrvire. Patologul poate recunoate efectele anumitor otrvuri la autopsie.
Acizii tari i bazele pot provoca arsuri extinse n jurul gurii sau pe suprafaa corpului, cu
distrugerea sever a esuturilor interne. Dovezi, cum ar fi droguri, narcotice, marcaje pe corp
sau prezena acizilor sau a substanelor caustice pot conduce la ipoteza otrvirii. De asemenea,
arsurile n jurul gurii i pe fa pot fi rezultatul consumului de acizi sau substane chimice
caustice, cum ar fi acidul clorhidric, acidul sulfuric sau a leiei. Mirosurile de amoniac sau
migdale amare pot indica anumite otrvuri. De pild, n intoxicaia cu cianur, faa este de
culoare roiatic.
Anumite medicamente, cum ar fi alcaloizii din opiu i nicotina pot cauza contracia
pupilelor, n timp ce altele, cum ar fi atropina (belladonna) produc dilatarea.
Stricnina provoac convulsii, colurile gurii fiind ridicate, iar faa este rigidizat ntr-
un rnjet, n timp ce braele i picioarele sunt trase mpreun, pe cnd partea din spate este
puternic ndoit napoi datorit contraciei muchilor.
Dac moartea a survenit prin otravire subacut sau cronic cu arsenic, fecalele vor
avea o consisten moale i, de multe ori, conin snge. O excreie mrit se gsete, de

20
obicei,
n etapele trzii ale intoxicaiei cu clorur mercuric sau cu sruri de plumb.
Diferite materiale colorate aflate n vom pot indica tipul de otrvire. Astfel, culoarea
maro asemntoare cu zaul de cafea indic o otrvire cu baze tari, cum ar fi de hidroxidul de
sodiu sau potasiu; galbenul conduce la acid azotic i acizii cromului; albastru-verde la sulfat
de cupru; negru, la acid sulfuric, iar culoare verde-maro sugereaz nghiirea de acid
clorhidric. O vom cu miros ascuit indic o otrvire cu amoniac sau cu acid acetic.
Intr-un caz de deces prin otrvire, numai o anchet la faa locului i audierea
martorilor ar putea decide dac a fost un caz de crim, sinucidere sau accident. Autopsia poate
stabili numai tipul i cantitatea de otrav utilizat.
Cele mai cunoscute substane otrvitoare sunt:
- Otrvurile lichide i gazoase. Cele mai cunoscute sunt monoxidul de carbon, acidul
cianhidric, freonul, metanolul, toluenul, benzenul, gazolina i cloroformul.
- Metalele grele i alte otrvuri anorganice. Compuii i srurile de antimoniu,
arsenicul, bariul, cromul, plumbul, mercurul, taliul, precum i acizii i bazele anorganice
puternice, cum ar fi acidul clorhidric, acidul azotic, acidul sulfuric, hidroxidul de sodiu,
hidroxidul de potasiu i amoniacul.
- Drogurile ilicite, medicamentele aflate n regim special i buturile spirtoase. Unele
medicamente pot fi gsite n asociere cu altele asemenea sau cu alcool. Grupa de astfel de
substane cuprinde alcoolul etilic, barbituricele, heroina, opiaceele sintetice, cum ar fi
metadona, fenciclidin (phencyclidine, PCP), tranchilizantele minore, cum ar fi Valium,
Librium, meprobamatul sau medicamentele cu regim special, atunci cnd sunt luate n exces.
- Unele otrvuri animale i vegetale: atropin, cocaina, nicotina, scopolamina,
stricnina i veninul de arpe.
- Otrvuri bacteriene i intoxicaii alimentare (botulism).

4.1 Otrvirea accidental
Cele mai multe intoxicaii accidentale au loc n cas. Copiii pot avea acces i chiar ingera
medicamente, detergeni, pesticide i detergeni de uz casnic. Intoxicaia accidental la aduli
este de obicei rezultatul etichetrii greite sau depozitrii unei substane toxice ntr-un alt
recipient dect cel original. De cte ori nu, un recipient necorespunztor este o veche sticl de
whisky! Arsenicul, buruienile otrvitoare, stricnina, cianurile, soluiile de curare, i
numeroase alte otrvuri letale au fost cu nerabdare i din greeal bute din ulcioare de cidru
i sticle de whisky vechi. Este cunoscut cazul n care un flacon deschis de cianur, aflat lng
o cutie de zahr pe o mas de lucru la subsol, a fost folosit pentru a ndulci o ultim ceac de
cafea.
Intoxicaiile accidentale pot aprea n industrie, ca urmare a neglijenei sau unor
ntmplri nefericite, care expun lucrtorii la substane toxice. n timp ce posibilitatea de
otrvire accidental n industrie este mare, standardele de siguran i reglementrile i
disponibilitatea serviciilor medicale de urgen din prezent mpiedic industria s constituie
sursa a multe intoxicaii fatale.


21
4.2. Decese cauzate de abuzul de droguri
Drogurile sunt folosite n scopul schimbrii strii sufleteti sau inducerii unei stri de euforie
reprezint sursa a numeroase intoxicaii. Abuzul de droguri poate implica utilizarea de droguri
ilegale, cum ar fi heroina sau phencyclidina; consumul de droguri interzise sau controlate,
cum ar fi cocaina, barbituricele i amfetamina sau utilizarea de produse chimice n alt mod
dect cel prescris, deci contrar destinaiei lor - cum ar fi inhalarea de solveni i produse
volatile. Dat fiind c dezvoltarea i glorificare a "culturii drogurilor" la mijlocul anilor 1960,
decesele datorate de consumul de droguri ilicite sunt cele mai frecvente intoxicaii fatale
investigate de ctre toxicologi, n special n zonele urbane mari.
Tabelul urmtor prezint drogurile cel mai frecvent ntlnite n investigaiile de deces;
de remarcat incidena ridicat a cocainei, alcoolului, heroinei i morfinei. ntr-un sens mai
larg, abuzul de droguri poate include, de asemenea, utilizarea excesiv a substanelor legale,
cum ar fi alcoolul i medicamentele pe baz de prescripie. Consumul de alcool este cea mai
mare problem a drogurilor n SUA. Alcoolul joac un rol semnificativ n decesele violente.
Din cele 40.000 de decese datorate accidentelor de main care au loc anual n SUA, 50%
implic oferi consumatori de alcool, i 60% din pietonii ucii au concentraii semnificative
de alcool din snge.

Droguri frecvent ntlnite n cazurile cercetate medical, 1991
a
Nr. crt. Denumire drog Numr de menionri Procent
b
din total cazuri
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
Cocain
Alcool-n combinaie
Heroin/Morfin
Codein
Diazepam
Amitriptilin
Metadon
Nortriptilin
d-Proxpoxifen
Difenhidramin
3020
2436
2333
783
587
437
430
379
325
241
45.75
36.90
35.30
11.86
8.89
6.62
6.51
5.74
4.92
3.65
a
Drug Abuse Warning Network, National Institute on Drug Abuse date din 27 orae
b
Procent din total cazuri poate depi 100%, deoarece un caz poate implica mai mult de un
drog

Dintre adulii din mediul urban care au fost internai ntr-un spital, cu un os fracturat,
50% i-au fracturat osul n timpul sau dup consumul de alcool. Un nivel ridicat de alcool n
snge se gsete la autopsie, n 35% din cazurile persoanelor care s-au sinucis i n 50% din
toate victimele crimelor. De asemenea, muli oameni mor n fiecare an din cauze patologice,
multe direct atribuite alcoolului sau complicaiilor altor cauze patologice, agravate de
consumul de alcool. Alcoolul este o otrav cu autolimitare: de obicei, oamenii i pierd
contiina nainte de a ingera o doz letal. Prin urmare, decesele prin supradozare, din cauza

22
ingestiei de cantiti excesive de alcool sunt mai puin frecvente. Cu toate acestea, numeroase
decese accidentale apar din ingestia simultan de medicamente puternice i alcool.

4.3 Sinuciderea cu otrav
Metoda obinuit de deces prin otrvire este sinuciderea. n general, de dou ori mai muli
brbai dect femei svresc cu succes o sinucidere. Cu toate acestea, de dou ori
ca multe femei dect brbai ncearc s se sinucid cu otrav. Cel mai comun mijloc de
sinucidere este monoxidul de carbon, un gaz generat de arderea incomplet a compuilor cu
carbon. Gazele de eapament de la automobile conin o concentraie ridicat de monoxid de
carbon. O metod obinuit folosit de ctre cei care se sinucid cu monoxid de carbon este
lsarea unui motor de main pornit ntr-un garaj nchis.
n timp ce arsenicul, cianura i alte otrvuri bine cunoscute pot fi uneori utilizate ca
ageni de sinucidere, cele mai multe decese rezult ca urmare a consumului de medicamente.
Persoanele care sufer de depresie i alte tulburri emoionale, de obicei, au la dispoziie
medicamente puternice i, dac sunt luate n exces, pentru a combate simptome ale
tulburrilor psihologice aceste droguri sunt letale. Astzi, cele mai multe sinucideri prin
otrvire implic ingerarea mai multor medicamente, de obicei trei pn la apte medicamente
diferite sunt ingerate odat. Prin analiza coninutului gastric i al intestinului, a urinei, a
sngelui, a organelor principale ale corpului, toxicologul poate determina cantitatea minim a
otrav ingerat. n sinucideri, rezultatele acestor analize demonstreaz c a fost ingerat o
cantitate masiv; aceasta nseamn, dincolo de orice ndoial, c rposatul nu ar fi putut lua
accidental o astfel de doz.

4.4 Otrvirea criminal
Otrvirile accidentale i sinuciderile sunt comune astzi; crima prin otrvire este rar.
Concluzia c o persoan a murit ca urmare a otrvirii de ctre un criminal este de multe ori cel
mai dificil tip de investigaie pentru oamenii legii i experii medicali. n general, dovada de
otrvire se obine din cunoaterea simptomelor manifestate de rposat nainte de moarte,
examinarea postmortem a corpului de ctre anatomopatolog, i izolarea i identificarea otrvii
de ctre toxicolog. Pentru urmrirea cu succes a unui suspect, oamenii legii trebuie s
stabileasc c fptaul a avut acces la o surs de otrav, c suspectul a fost contient de
efectele letale ale otrvii i c suspectul a avut posibilitatea de a administra otrava rposatului.
n cazul n care victima a fost consultat, nainte de moarte, de ctre un medic,
medicul nu consider otrvirea ca o cauz a necazului pacientului. Numai n cazul n ocupaia
pacientului l aduce n contact cu substane toxice (lucreaz ntr-o rafinrie, mediu chimic sau
n topitorii; lucreaz la o ferm i utilizeaz pesticide i erbicide) va medicul suspecta o
intoxicaie chimic. Crima prin otrvire apare cel mai frecvent n cadrul familiei, acas, iar
medicul va suspecta rareori un so supravieuitor, soia, fiul sau fiica de otrvire a unui alt
membru al familiei. De asemenea, exist rareori un simptom de otrvire care nu poate fi la fel
de bine cauzate de boala.

23
Vrsturile, diareea, colapsul rapid i pulsul slab, adic toate simptomele otrvirii cu
arsenic pot fi, de asemenea, i cauza unui ulcer gastric perforat sau a unei inflamaii a
pancreasului sau apendicelui. De asemenea, convulsiile cauzate att de stricnin ct i de
tetanos. Pupilele contractate i narcoza pot fi cauzate de stupefiante sau de leziuni cerebrale.
Cu toate acestea, exist circumstane care fac un diagnostic de otrvire aproape sigur.
Debutul i evoluia simptomelor ctre o moarte rapid, imediat dupa servirea mesei
sau dup consumarea unui pahar indic intoxicaii acute, deoarece intoxicaia alimentar
bacterien are un debut ntrziat al simptomelor.
Otrvurile metalice pot provoca deteriorarea sever a tractului gastro-intestinal, ficatul
i rinichii. Fosforul, hidrocarburile clorurate i ciupercile otrvitoare cauzeaz degenerarea
sever a ficatului. Cu toate acestea, cele mai multe otrvuri nu produc modificri observabile
n esuturi, prin urmare, n multe cazuri de otrvire, evaluarea corpului de ctre
anatomopatolog stabilete dac moartea s-a datorat unor cauze naturale sau unor leziuni
traumatice i c nu exist nici o dovad pentru cauza de deces, cu excepia unei posibile
otrviri. n majoritatea cazurilor, analiza toxicologic aduce dovezi pentru crima prin otrvire.

4.5 Dovezi circumstaniale de otrvire
Ancheta toxicologic ale unei mori prin otrvire poate fi mprit n trei etape:
1. Obinerea studiilor de caz i a probelor (dovezilor) adecvate;
2. Analizele toxicologice;
3. Interpretarea rezultatelor analizelor.
Stabilirea cauzei de deces drept otrvire se poate face numai prin autopsie i analiz
chimic. ntr-un numr de cazuri de intoxicaii, aspectul persoanei decedate sau circumstane
speciale n legtur cu moartea poate conduce la aflarea cauzei de deces.
Trebuie, de asemenea, cutate, n primul rnd, la locul incidentului otrvurile
reziduale, sub form de comprimate, pulbere, sau reziduuri n flacoanele de medicamente. De
asemenea, se vor cuta ambalajele, prafurile, cutiile aruncate i alte recipiente (tuburi, fiole,
flacoane). Toate indicile trebuie recuperate i ambalate separat, ntr-un tub sau plic. Atunci
cnd persoana decedat se gsete n pat, trebuie examinat foarte atent lenjeria de pat
deoarece poate conine otrav sub form de pulbere, dar i alte substane deversate, greu de
detectat.
n cazurile n care moartea nu se datoreaz otrvirii, toxicologul criminalist poate
oferi, de cele mai multe ori, dovezi incontestabile cu privire la mprejurrile n care a avut loc
un deces. Comportamentul de conducere haotic a victimelor accidentelor auto este adesea
explicat prin prezena alcoolului n snge sau esuturi. Medicamentele psihoactive, cele care
afecteaz comportamentul, joac adesea un rol semnificativ n mprejurri asociate cu moartea
subit sau violent. Detectarea alcoolului, a narcoticelor, a halucinogenelor sau a altor
medicamente pot susine depoziiile martorilor cu privire la comportamentul agresiv,
incoerent, sau iraional al rposatului n momentul unui incident fatal. n schimb, rezultatele
toxicologice negative pot spulbera suspiciunea consumului de droguri a rposatului.
Concluziile negative sunt, de asemenea, semnificative la persoanele care sunt n mod regulat
sub tratament pentru a controla condiiile patologice. n cazul epilepticilor, concentraiile

24
sczute sau negative de droguri pot indica faptul c rposatul nu i-a luat medicamentele n
modul prescris i ca urmare, au suferit un atac de apoplexie fatal.

4.6 Metode de analiz criminalistic a opioidelor
Utilizarea unor metode de separare pentru izolarea, identificarea i analiza cantitativ a
opiaceelor naturale i sintetice prezint un larg interes pentru criminaliti (Bogusz, 2008).
Strict vorbind, termenul de opiaceu se refer la produsele derivate din opiu de mac. Atenia
criminalitilor se concentreaz pe derivai de morfin i opiacee sintetice sau semisintetice, cu
aciune agonal (agonistic) la receptorii opioizi OP1 (d), OP2 (k) sau OP3 (m). Pentru
aciunea opiaceelor asupra receptorilor opioizi pot fi consultate i alte lucrri (Kilpatrick &
Smith, 2005; Dhawan et al., 1996). Aici ne intereseaz mai ales aplicaiile analizei medico-
legale, dedicat n principal probelor biologice. Aceste aplicaii cuprind metodele de detectare
a opiaceelor n probele non-biologice i biologice; izolarea de opioide din matrici biologice
diferite; analiza constituienilor opiului de mac n materiale vegetale i n fluidele
organismului; separarea i detectarea heroinei i metaboliilor sau a congenerilor si n
preparate ilicite de droguri sau medicamente, precum i n fluidele organismului; analiza
morfinei i a altor opiacee naturale i sintetice n fluidele organismului i n organe. In acest
scop sunt necesare tehnici de separare relevante: cromatografia n strat subire (TLC), gaz-
cromatografia (GC), cromatografia de lichid de nalt performan (HPLC) i electroforeza
capilar (CE), combinate cu diferite metode de detecie.
Testele preliminare trebuie s prezinte o specificitate larg de grup i, eventual,
o sensibilitate ridicat, n timp ce specificitatea absolut nu este necesar. O identificare fr
echivoc i determinarea cantitativ sunt de obicei efectuate n etapa de confirmare a analizei.
Deoarece un rezultat negativ la un test preliminar este de obicei decisiv, nu se iau n
considerare rezultatele fals negative.

4.7 Metode preliminare utilizate la depistarea drogurilor n strad
Dispozitivele de testare folosite curent sunt simple i robuste i se bazeaz de regul pe reacii
de culoare bine-cunoscute. Testele preliminare se execut, de obicei, de ctre poliiti sau
vamei. Sarcina principal a acestor teste este selecia probelor sau a materialelor suspecte
pentru examinarea lor ulterioar cu metode confirmatorii. Narcopouchs

, de pild, reprezint
un kit de teste de culoare pentru detectarea opiaceelor, amfetaminei, cocainei, barbituricelor,
canabinoizilor i a dietilamidei acidului lisergic (LSD) n probe colectate pe strad (ODV Inc,
Paris, ME, SUA). Acest test folosete reacii de culoare cu mai muli reactivi, cum ar fi
reactivii Marquis, Meyer, Mecke, Ehrlich, Fast Blue B i Koppanyi. Intreaga procedur se
realizeaz n cutii de plastic prin care se poate vedea reacia de culoare. Kit-ul Herosols

(Mistral Detection Ltd., Jerusalem, Israel) const dintr-un reactiv pentru pulverizare i hrtia
special de testare. Astfel, pielea suspectului este tears/tamponat cu o bucic de hrtie, pe
care este apoi pulverizat Herosol. O culoare violet indic prezena heroinei. Un test similar
pentru heroin, numit Detect Now
TM
este oferit de Test Medical Symptoms@Home, Inc. i a
fost comercializat prin intermediul internetului ca un test simplu pentru prinii care doresc s

25
verifice dac copiii lor consum droguri. NIK

(Public Safety Inc., Armor Holding,

Jacksonville, FL, USA) reprezint un alt kit ce cuprinde fiole pentru principalele clase de
droguri printre care opiacee/amfetamine, heroin/opiu. Drug Wipe i Drug Wipe II (Securetec
AG, Germany) sunt concepute ca teste imunochimice pentru detectarea drogurilor pe
suprafee diferite, de exemplu, n bagaje, paapoarte, valut, i, de asemenea, pe piele, pe
limb sau n transpiraie. Limita de detecie pentru opiacee este de 25 ng de echivalent
morfin. Cu un cititor portabil se poate efectua determinarea cantitativ colorimetric.

4.8 Metode folosite pentru fluidele biologice
Metodele preliminare utilizate pentru fluide biologice pot fi mprite n teste on-site i teste
de laborator. Totui, testele preliminare pot fi folosite nu doar n scopuri judiciare sau
preventive, de exemplu, n scanarea angajailor, dar i ca o procedur de diagnosticare n
intoxicaii acute suspecte. n testele on site (la faa locului) aplicate ntr-o secie de urgen,
confirmarea analizelor nu este ntotdeauna de maxim importan. Rezultatul pozitiv al unui
test preliminar de opiacee ntr-un caz de supradoz cu heroin reprezint un indiciu
pentru administrarea unui antagonist al opiaceelor, de exemplu, naloxon, n loc s se atepte
rezultatele analizei confirmatorii. Aceast practic nu se limiteaz numai la domeniul sntii
publice; distribuirea de naloxon pentru administrare acas dependenilor de ctre
membrii familiei este o nou abordare n combaterea efectelor drogurilor, care este testat n
SUA, Germania i Regatul Unit (Sporer, 2003).

Teste pe teren
Aceste teste sunt utilizate pe scar larg pentru grupuri sociale foarte diferite, incluznd
oferii de automobile, criminalii din pucrii, militarii, sportivii, angajaii din industria
petrolier, etc. Se pot testa astfel i indivizii din zonele ndeprtate. Cel mai important aspect
este posibilitatea de a folosi de eantionare non-invazive. Din acest motiv, testele pe saliv
sau transpiraie au devenit deosebit de atractive n locul celor pe urin sau snge (Jenkins &
Goldberger, 2002).
S-a realizat o astfel de evaluare utiliznd cinci dispozitive de testare a drogurilor pe
teren, i anume, AccuSign, Rapid Drug Screen, TesT-Cup-5, TesTstik i Triage. Au fost
colectate i testate patru sute de probelor de urin, iar rezultatele pozitive au fost confirmate
folosind cromatografia de gaz cuplat cu spectrometria de mas (GC-MS), pentru morfin i
codeina sau prin lichid cromatografie-spectrometrie de mas (LC-MS), pentru hidrocodona i
hidromorfon (Crouch et al. [5] ). A fost observat numai un rezultat fals-negativ. Rata de
rezultate fals-pozitive a fost sub 0,25% pentru toate dispozitivele de testare utilizate.
Gronholm i Lillsunde [6] au evaluat opt dispozitivele de teren pentru depistarea de opiacee i
alte droguri n urin i prin analiza fluidelor orale. Rezultatele testelor pot fi vzute n tabelul
urmtor.
Un alt sistem pentru analiza drogurilor la faa locului, ORALscreen System, a dat
rezultate concordante cu cele din laborator chiar dup 2-3 zile de la consumul de droguri
(Barrett et al. [9]).

26

Teste pentru detecia pe teren a opiaceelor n fluidele corpului (dup Bogusz, 2008).
Dispozitivul
de testare
Productor Calibrare
Limita de
detecie
(ng/ml)
Materialul
biologic
analizat
AccuSign
Instant-View
TM
Morphine
ONTRAK TesTcup
ONTRAK TesTStik
Rapid Drug Screen
Syva RapidTest
Triage DOA
Cozart RapiScan
www.pbmc.com
www.alcopro.com

www.rochediagnostics.com
www.rochediagnostics.com
www.bioscaninc.com
www.dadebehring.com
www.biosite.com
www.cozart.co.uk
Morfin
Morfin

Morfin
Morfin
Morfin
Morfin
Morfin
Morfin
300
300

300
300
300
300
300
10
Urin
Urin

Urin
Urin
Urin
Urin
Urin
Saliv

Testele de laborator
Testele de laborator sunt utilizate n situaiile n care numrul de probe examinate este destul
de ridicat, de exemplu, n screening-ul de droguri n cazul angajailor sau a personalului
militar. Aceste teste sunt de regul bazate pe principiul testelor imunologice i se refer nu
numai la opiacee, dar i la ali compui, cum ar fi amfetaminele, cocaina, benzodiazepinele,
barbituricele, canabinoizii i metadona. Toate kit-urile detecteaz o gam larg de opiacee,
inclusiv cu morfina i glucuronoconjugaii si, codeina, opiaceele semisintetice, cum ar fi
dihydrocodeine (DHC) sau hidrocodona. Excepie face metoda CEDIA

6-AM (dezvoltat de
Microgenics, Fremont, CA, USA), care este selectiv pentru 6-monoacetylmorphine
(metabolitul primar al heroinei). George i Parmar [10] au analizat 1100 probe de urin cu
CEDIA 6-AM i nu au reuit s confirme 21 din 282 de probe pozitive, care au fost
identificate cu ajutorul GC-MS. Performana testului CEDIA 6-AM de la Microgenics a
fost, de asemenea, evaluat (Holler et al. [11]) pe un total de 37713 probe de urin de la de
membri serviciului militar activ. Trei soldai au fost depistai pozitiv, la o limit 10 ng/ml, iar
una dintre cele trei probe a fost confirmat pozitiv i prin GC-MS, n timp ce celelalte dou
eantioane nu au fost confirmate la limita de detecie (LOD) de 2,1 ng/ml. n plus, 87 probe
de urin uman cunoscute pentru coninutul lor de 6-AM (prin GC-MS) au fost re-analizate cu
ajutorul testului CEDIA 6-AM cnd s-au obinut rezultate pozitive.
Unele teste preliminare au fost adaptate pentru probele postmortem. Astfel, a fost
aplicat testul ELISA pentru screening n cazul abuzului de droguri utiliznd pentru analiz
omogenatele tisulare i sngele colectate postmortem (Moore et al. [17]).Testul pentru
morfin a fost foarte specific pentru morfina liber, dar mai puin sensibil dect screening-ul
celorlalte opiacee. Acesta din urm a fost recomandat pentru screening-ul specimenelor
postmortem. Cnd s-a evaluat testul ELISA comercial pentru screening-ul opiaceelor i
benzodiazepinei n probe de snge postmortem, n raport cu tehnica GC-MS, s-a gsit o
sensibilitate de 95% i o specificitate de 92% fa de GC-MS (Kemp et al. [18]). Limita de
detecie a fost 20 g/l echivalent morfin.

27
Utilizarea la scar larg i importana testului antidrog a creat o pia ilegal pentru
proceduri i produse care promit s ''bat'' testele. n afar de diluarea urinei prin consum
excesiv de alcool sau substituirea probelor, mai muli productori ofer diferite kit-uri (seturi)
i reactivi, care pot fi adugate n urin, pentru a evita detectarea drogurilor. Ca o
contramsur la falsificare, pot fi aplicate urmtoarele etape: msurarea temperaturii, greutii
specifice, pH-ului i coninutului de creatinin n urin, precum i utilizarea de teste chimice
specifice pentru depistarea adaosurilor de compui chimici. Cody i colaboratorii si [21,22] a
examinat influena falsificatorului Stealth asupra detectabilitii morfinei sau codeinei n
probele de urin. Stealth conine peroxidaz i peroxid i este considerat de productor ca
nedetectabil prin teste de depistare a falsificrii. S-a demonstrat c probele cu concentraii
sczute de morfin i codein (2,5 g / l urin) dau un rspuns negativ att la examinarea
imunochimic i prin GC-MS, n timp ce parametrii tipici ai urinei au rmas neschimbai.
Microgenics a dezvoltat un test special numit Sample Check care detecteaz orice interferen
posibil cu testul CEDIA n caz de alterarea eantionului. Acest test nlocuiete un grup
complex de teste de alterare.

5. Studii de caz i probe
Astzi, sunt uor accesibili publicului mii de compui care sunt letali dac sunt ingerai,
injectai sau inhalai. Toxicologul are doar o cantitate limitat de materiale pe care s
efectueze analizele; prin urmare, este imperios necesar ca, nainte de a ncepe analizele s
obin ct mai multe informaii posibil cu privire la mprejurrile cazului.
nainte de nceperea analizei, toxicologul trebuie s ia n considerare mai muli factori:
cantitatea de prob disponibil, natura otrvii cutate i posibila biotransformare a otrvii.
Pentru c lucreaz cu o cantitate limitat de prob, toxicologul trebuie s elaboreze o metod
analitic, ce va permite detectarea unui numr ct mai mare de compui.
Toxicologul trebuie s in cont de vrst, sex, greutate, istoricul medical i ocupaia
rposatului, precum i de orice tratamente au fost administrate nainte de moarte, constatrile
preliminare ale autopsiei, medicamentele care au fost la ndemna rposatului, precum i
intervalul de timp dintre debutul simptomelor i moarte. ntr-un an, laboratorul de toxicologie
afiliat cabinetului unui medic legist va efectua analize asupra esuturilor pentru diverse
otrvuri, cum ar fi diverse medicamente (analgezice, antidepresive, hipnotice, tranchilizante),
consumului de droguri (halucinogene, narcotice, stimulente), produse comerciale (antigel,
produse de aerosoli, insecticide, rodenticide, plante toxice), i gaze (monoxid de carbon,
cianur).
Evident, posibila identificare a otrvii nainte de analiz ar ajuta foarte mult.
Colectarea probelor pentru analizele toxicologice este de obicei efectuat de ctre patolog la
autopsie. Sunt necesare mostre din numeroase fluide ale corpului i organe, deoarece
drogurile i otrvurile au afiniti diferite pentru esuturile organismului (a se vedea tabelul
urmtor). Drogurile i otrvurile nu sunt distribuite uniform n tot organismul, iar toxicologul,
de obicei, analizeaz mai nti organele care sunt predispuse a avea cele mai mari concentraii
de droguri (vezi figura urmtoare). Pentru analiza toxicologic detaliat este necesar o

28
cantitate mare din fiecare mostr, deoarece o procedur prin care se extrage i se identific un
compus sau clas de compui poate fi ineficient n extragerea sau identificarea altora.

















n colectarea probelor, patologul eticheteaz fiecare recipient cu data i ora autopsiei,
numele rposatului, numrul probei i semntura patologului. Toxicologul, la primirea
probelor, d patologului o dovad scris i depoziteaz probele ntr-un frigider ncuiat pn la
momentul analizei. Aceast procedur ofer un traseu adecvat probelor, care permit
toxicologului s introduc rezultatele sale n orice procedur juridic decurge din cazul
analizat.

Probele colectate la autopsie pentru analize toxicologice

Proba Cantitate Toxicul urmrit
esut adipos
Bil
Snge
Creier
Rinichi
Ficat
Plmn
Coninut stomacal i intestinal
Urin
Umoare vitroas
200 g
ct este disponibil
15 ml
500 g
un organ ntreg
500 g
un organ ntreg
ct este disponibil
ct este disponibil
ct este disponibil
Insecticide, Tiopental
Codein, Morfin
Clcooli, monoxid de carbon
Otrvuri volatile
Metale grele
Cei mai muli toxici
Metadon, gaze, inhalante
Toi toxicii luai oral
Cei mai muli toxici
Digoxin, electrolii, glucoz

Probele ar trebui s fie colectate nainte de mblsmare, deoarece acest proces poate
distruge sau dilua otrvurile prezente i poate face imposibil detectarea acestora. De

Distributia cocainei in caz de injectie fatala cu cocaina
(dupa Poklis et al. 1985)
0
5
10
15
20
25
30
S
a
n
g
e
B
i
l
a
C
r
e
i
e
r
I
n
i
m
a
R
i
n
i
c
h
i
F
i
c
a
t
P
l
a
m
a
n
i
S
p
l
i
n
a
M
u
s
c
h
i
T
e
s
u
t

a
d
i
p
o
s
C
o
r
p

v
i
t
r
o
s
C
o
c
a
i
n
a
,

m
g
/
k
g

29
exemplu, cianura este distrus de procesul de mblsmare. nvers, alcoolul metilic sau cel
etilic poate fi o component a unui fluid mblsmare, dnd astfel o indicaie fals despre ceea
ce a but rposatul nainte de moarte.
Se prezint o schem de izolare a otrvurilor cnd compusul cutat nu este cunoscut.


















Schema de izolare a otrvurilor din probele aduse la laborator

n cazurile care implic administrarea oral a unei otrvi, este analizat n primul rnd
coninutul gastro-intestinal, deoarece cantiti mari de otrav rezidual neabsorbit pot fi
prezente. n continuare poate fi analizat urina, deoarece rinichii sunt organe principale de
excreie pentru cele mai multe otrvuri i concentraii mari de substane toxice sunt adesea
prezente n urin. Dup absorbia de la nivelul tractului gastro-intestinal, drogurile sau
otrvurile sunt primele transportate la ficat, nainte de a intra n circulaia general sistemic,
i prin urmare, prima analiz a unui organ intern este realizat asupra ficatului. Dac o anumit
otrav este suspect sau cunoscut a fi implicat ntr-o moarte, toxicologul alege pentru
primele analize aceste esuturi i fluide n care otrava se afl concentrat.
Biotransformarea sau metabolizarea sunt termeni echivaleni folosii pentru a indica
procesul de conversie al unei substane chimice strine n organism, la un produs chimic
diferit din punct de vedere structural. Noul compus este numit metabolit. Biotransformarea
unui medicament sau a unei otrvi, de obicei, dar nu ntotdeauna, conduce la formarea unei
substane inactive punct de vedere fiziologic, care este mai uor de eliminat din organism
dect compusul de plecare.

Acidifiere,
extracie
cu solvent
organic
Prob tocat de esut
Acidifiere & distilare cu vapori Alcalinizare & extract organic
Extract organic Extract apos
Extragere
cu acid
Extract organic Extr. apos
Evapo-
rare
Reziduu
conine
droguri
neutre
TLC, GLC,
HPLC,
GC/MS
Alcalinizare,
extracie
cu solvent
organic
Organic Apos
Se arunc
Reziduu
conine
droguri
bazice
Organic Apos
Se arunc
Reziduu
conine
droguri
acide
TLC, GLC,
HPLC,
GC/MS
Distilat
Test pentru
Compui
volatili
Teste de
culoare,
GLC
Reziduu
Teste pt
metale,
Spectroscopie
Acidifiere,
extracie
cu solvent
organic
Prob tocat de esut
Acidifiere & distilare cu vapori Alcalinizare & extract organic
Extract organic Extract apos
Extragere
cu acid
Extract organic Extr. apos
Evapo-
rare
Reziduu
conine
droguri
neutre
TLC, GLC,
HPLC,
GC/MS
Alcalinizare,
extracie
cu solvent
organic
Organic Apos
Se arunc
Reziduu
conine
droguri
bazice
Organic Apos
Se arunc
Reziduu
conine
droguri
acide
TLC, GLC,
HPLC,
GC/MS
Distilat
Test pentru
Compui
volatili
Teste de
culoare,
GLC
Reziduu
Teste pt
metale,
Spectroscopie

30
C
O
O
N
C
O
OCH
3
CH
3
C
O
O
NH
C
O
OCH
3
Cocaina Norcocaina
OH
N
C
O
OCH
3
H
3
C
Esterul metilic al ecgoninei
C
O
O
N
C
O
OH
CH
3
Benzoilecgonina
Metabolizarea cocainei in corp


Figura de mai sus prezint biotransformarea cocainei. Metaboliii pot fi fiziologic
activi sau inactivi i netoxici, mai puin toxici sau mai toxic dect compusul de plecare.
Cocaina ilustreaz acest proces prin transformarea la norcocain, care este fiziologic activ, n
timp ce benzoilecgonina i metilecgonina nu au nici o aciune fiziologic. Astfel, toxicologul
trebuie neleag aceste reacii de biotransformare. n unele cazuri, metaboliii sunt singurele
dovezi c un medicament sau o otrav a fost administrat. Dovezi ale consumului de heroin
sau cocain sunt date de prezena metaboliilor respectivi, morfin i benzoilecgonina.
Toxicologul trebuie s fie contient de modificrile chimice obinuite care apar n
timpul descompunerii unui corp. Autopsia sau analiza toxicologic ar trebui s fie nceput
ct mai curnd posibil dup moarte, nainte ca procesele naturale de descompunere s distrug
o otrav prezent iniial la momentul morii ori s produc substane sau compui chimici cu
proprieti fizice similare cu cele ale otrvurilor frecvent ntlnite. De exemplu, n timpul
descompunerii, fenilalanin, un aminoacid prezent n mod normal n organism, este
transformat n feniletilamin, care are proprieti chimice i fizice foarte asemntoare cu
amfetamina. Coninutul de alcool etilic i cianur din snge poate fi sczut sau crescut n
funcie de gradul de putrefacie i activitatea microbian. Cu toate acestea, multe otrvuri,
cum ar fi arsenicul, barbituricele, mercurul i stricnina, pot fi detectabile nc muli ani dup
moarte.
Un caz neobinuit de analiz post mortem a unei intoxicate cu heroin a artat
concentraii mari de morfin, codein 6-monoacetylmorphine (6-MAM) i cofein (Joynt &
Mikhael, 1985). Femeia nghiise mai multe prezervative cu o pulbere alb care s-a golit
coninutul lor n stomac dup ce s-au spart, apoi scurgerile au ajuns n peritoneu printr-o
ruptur in peretele stomacului. Concentraiile sanguine au fost: morfin, 120 mg / L; codeina,
1,7 mg / L; i cafein, 400 mg / L.

31
Fenacetina este un analgezic utilizat cu precdere ca analgezic i antipiretic. Un studiu
epidemiologic a aratat c.folosirea excesiv, pe termen lung a fenacetinei este asociat cu
creterea riscului de cancer al tractului urinar. Efectul carcinogen al fenacetinei a fost observat
i n testele fcute pe animale. Fenacetina devine un metabolit mutagen prin hidroxilare la
atomul de azot, cu formare de N-hidroxi-fenacetin ce produce cancer al tractului urinar.

NHCOCH
3
OCH
2
CH
3 OH
NHCOCH
3
OCH
2
CH
3
N
O H
COCH
3
NCOCH
3
O
fenacetina
acetaminofen
deetilare
N-hidril-fenacetina metabolit hepatotoxic-cauzeaza
necroza celulei hepatice
(metabolit mutagenic-carcinogen
al tractului urinar)


6. Interpretarea rezultatelor
Odat ce analiza probelor este finalizat, toxicologul trebuie s interpreteze concluziile asupra
efectelor fiziologice ale substanelor toxice gsite, n funcie de concentraia determinat i
dac acestea au putut provoca moartea victimei. Conteaz calea de administrare, indiferent
dac toxicul prezent este sau nu n concentraie suficient pentru a provoca moartea sau
modifica comportamentul victimei astfel nct s contribuie la moartea sa. Evaluarea
rezultatelor analitice din punct de vedere fiziologic este de multe ori problema cea mai dificil
cu care se confrunt toxicologul criminalist.
La determinarea modului de administrare, toxicologul ia n considerare rezultatele
analizei diferitelor probe. Ca regul general, cele mai mari concentraii de toxic vor fi gsite
la locul faptei. Prin urmare, prezena unor cantiti mari de droguri sau otrvuri n tractul
gastro-intestinal i ficat indic administrarea oral, n timp ce concentraii mai mari n
plmni, n comparaie cu alte organe viscerale indic inhalare. Concentraii mari de toxic n
esuturile din jurul unui loc de injectare vor indica efectuarea recent a unei injecii
intramusculare. Injectarea intravenoas introduce un medicament sau drog direct n circulaia
sistemic, evitnd astfel efectul iniial de concentrare n ficat. O examinare a concentraiei

32
relative a medicamentelor (Fortral) n mai multe esuturi poate indica mai degrab o injecie
intravenoas, dect o administrare pe cale oral (vezi figura urmtoare).















Distribuia medicamentului opioid Fortral n diferite organe.

Prezena unui material toxic n tractul gastro-intestinal, indiferent de cantitate, nu
reprezint o dovad suficient pentru a stabili dac acest toxic este cauza decesului.
Toxicologul trebuie s demonstreze c absorbia de toxicului a avut loc i c a fost transportat
prin intermediul circulaiei generale ctre organul n cauz, unde aceasta a avut un efect fatal.
Acest lucru este stabilit prin analiza sngelui i a esuturilor. O excepie de la regul este dat
de substanele chimice puternic corozive, care i exercit efectele nocive direct asupra
esuturilor, prin distrugerea acestora, provocnd astfel hemoragie i oc. Exemple relevante ar
fi acizii clorhidric i sulfuric concentrai, leia i fenolul. Rezultatele analizei de urin sunt
adesea nesemnificative n determinarea efectelor fiziologice ale unui agent toxic. n general,
aceste rezultate stabilesc numai dac nainte de colectarea probei toxicul a fost prezent n
organism. Corelarea valorilor obinute n analiza urinei cu efectele fiziologice este
nesemnificativ, din cauza diverilor factori care influeneaz viteza de excreie a anumitor
compui i a volumului de urin.
Efectele fiziologice ale celor mai multe droguri i otrvuri se coreleaz cu concentraia
acestora n snge i stabilesc dac absorbia a avut loc. Prin urmare, concentraiile sanguine
sunt adesea cei mai buni indicatori de toxicitate; n consecin, sngele este una din cele mai
valoroase probe pentru toxicolog. Pentru a interpreta corect concentraiile din snge sau din
esuturi, toxicologul trebuie s ia n considerare toi factorii care influeneaz obinerea unei
concentraii date a toxicului ntr-o prob. Interpretarea valorilor analizei sngelui sau esutului
poate fi mprit n trei categorii: (1) normal sau terapeutic, (2) toxic i (3) letal. O valoare
normal este atunci cnd concentraia unei substane gsite la majoritatea populaiei i care nu
are niciun efect toxic asupra organismului. De exemplu, cianura este de obicei, uor de
identificat ca produs chimic extrem de otrvitor, cu toate acestea, cantitile nensemnate de
cianur sunt generate n urma ingestiei anumitor alimente. De asemenea, cantiti mici de
cianur sunt generate i absorbite n timpul fumatului.
F
o
r
t
r
a
l
,

m
g
/
k
g

c
o
r
p
C
r
e
i
e
r
F
i
c
a
t
R
i
n
i
c
h
i
F
o
r
t
r
a
l
,

m
g
/
k
g

c
o
r
p
C
r
e
i
e
r
F
i
c
a
t
R
i
n
i
c
h
i

33
Prin urmare, cantiti mici de cianur sunt prezente n mod normal n organism, iar
concentraiile sczute sunt tolerate fr a fi toxice. Multe metale grele i metaloide, cum ar fi
plumbul, mercurul i arsenul, care nu sunt eseniale pentru funcionarea normal a corpului,
sunt prezente la majoritatea populaiei, datorit contaminrii din mediu. O valoare terapeutic
este acea concentraie a unui compus care produce efecte terapeutice - cantitatea de
medicament necesar i suficient pentru a trata o afeciune medical, dar nu suficient pentru
a provoca toxicitate. O valoare toxic este acea concentraie a unui compus care este asociat
cu efectele nocive, care pot pune sau nu viaa n pericol. O valoare letal este acea
concentraie a unui toxic care are ca efect sau reprezint chiar cauza decesului i este stabilit
n mod constant drept cauza morii, n cazuri bine documentate i investigate.
n anumite cazuri, toxicologul poate face diferena ntre o intoxicaie acut i o
intoxicaie cronic. De exemplu, prul este proba preferat pentru diagnosticul de expunere
cronic la arsenic. Analiza secvenial a unor seciuni de pr poate indica modelul de
expunere la arsenic. Arsenicul care circul prin snge este depus n foliculul pilos, unde este
prins de keratin i transportat pn n foliculul de pr n cretere. Celulele germinative ale
prului sunt n echilibru relativ strns cu arsenic circulant. Deoarece concentraiile de arsenic
din snge cresc sau scad, la fel se ntmpl i cu cantitatea de arsenic depus n firele de pr
cretere. Prul crete cu aproximativ 0.4 - 0.5 mm / zi sau 12,5 mm pe lun. Prin urmare,
analiza unor segmente de 1.0 cm sau mai mici ofer un model lunar de expunere. Coninutul
normal de arsenic de pr variaz n funcie de factori nutriionali, de mediu i fiziologici. Cu
toate acestea, limita maxim la persoane care nu sunt expuse la arsenic este de aproximativ 5
ppm. Odat ce un individ este ndeprtat de sursa de expunere la arsenic, valorile acestuia n
pr revin la normal n cteva sptmni.



















Distribuia arsenicului n pr n caz de otrvire criminal.

0 3 5 8 10 20 14 17
100
50
36 22 24 27 30 33
Saptamni pna la moarte
A
r
s
e
n
i
c
,

p
p
m
0 3 5 8 10 20 14 17
100
50
36 22 24 27 30 33 0 3 5 8 10 20 14 17
100
50
36 22 24 27 30 33
Saptamni pna la moarte
A
r
s
e
n
i
c
,

p
p
m

34
Profilul arsenicului n prul victimei unei crime, prezentat n figura de mai sus, indic
otravirea cronic cu arsenic. Ucigaul a pregtit mesele victimei din ultimele 2 luni din viaa
sa. Victima a fost n spital, din a treia pn n a cincea lun nainte de moarte, iar cu ucigaul
nainte i dup aceast dat.
Factorii care pot influena rspunsul unui individ la o concentraie toxic dat sunt
vrsta, sexul, greutatea corporal, maturitatea, starea de nutriie, aspectele genetice i
imunologice. De asemenea, existena unei boli sau afectarea unui anumit organ, dar i
activitatea sistemului nervos central (depresie, stres, etc) trebuie luate n considerare. Un
factor suplimentar care complic adesea interpretarea este fenomenul farmacologic de
"toleran". Tolerana este o stare de receptivitate sczut la un toxic ca rezultat al expunerii
nainte de aceasta, o perioad lung de timp, la un compus asemntor. Exist o serie de
mecanisme fiziologice pentru dezvoltarea toleranei. Adaptarea celular este ns cea mai
problematic pentru toxicolog.
Adaptarea celular este o form de toleran n care sunt necesare concentraii tot mai
mari n snge sau esuturi dintr-un medicament pentru a obine rspunsul farmacologic dorit.
De pild, persoanele dependente de narcotice pot lua n mod regulat doze de metadon, care
pentru ei nu produc deprimarea sistemului nervos central, n timp ce aceeai doz, poate
provoca moartea cuiva care nu primete n mod regulat opiacee. Factorii care influeneaz
concentraia din snge sau esut dat dup administrarea unui toxic sunt legai att de natura
compusului, ct i de structura biologic a individului. Compoziia chimic i caracteristicile
fizice ale unui material modific adesea toxicitatea sa. De exemplu, srurile sau clorhidraii
anumitor metale sunt mult mai solubile n tractul gastro-intestinal i, prin urmare, absorbite
mai rapid dect sulfurile lor. n general, cu ct se absoarbe mai repede un compus, cu att este
mai mare concentraia sa n snge. Preparatele farmaceutice pot fi formulate n aa fel nct, n
urma ingestiei orale, medicamentul s fie absorbit fie rapid fie extrem de lent. Factorii
biologici ce afecteaz n primul rnd concentraia n snge a unui toxic sunt legarea sa de
proteinele din esuturi i viteza sa de biotransformare. Viteza de biotransformare a unei
substane este controlat genetic i este adesea supus unor variaii individuale semnificative.
n cazul n care mai multe persoane primesc aceeai doz de drog sau medicament raportat la
greutatea corporal, concentraia acestuia n snge poate varia foarte mult de la o persoan la
alta din cauza diferenelor dintre vitezele lor de biotransformare a respectivelor substane. De
pild, Rasputin a fost otrvit cu cianur de potasiu, ns a rezistat dozei administrate n cafea.
Ucigaii si au recurs la mpucarea acestuia. Datorit sntaii sale excepionale au fost
necesare mai multe gloane pentru a-l rpune. In ceea ce privete cianura utilizat, unii
toxicologi consider c administrarea sa n cafea ar fi determinat o reacie a ionului cian cu
gruparea carbonil din molecula zahrului, cu formarea unei cianhidrine mai puin toxice.
Toxicii sunt eliminai din organism pe diferite ci. Gazele, cum ar fi monoxidul de
carbon, sunt eliminate prin plmni o dat cu aerul expirat. Altele, cum ar fi metalele toxice,
DDT i morfina, sunt eliminate n principal prin bil i, apoi, fecale. Cu toate c acestea sunt
cele mai importante ci de excreie, multe otrvuri sunt eliminate n toate secreiile
organismului (transpiraie, lapte i lacrimi). Calea principal de ndeprtare a celor mai muli
toxici este eliminarea prin urin. Viteza de eliminare a toxicilor prin urin afecteaz foarte

35
mult cantitatea prezent n snge sau esuturi la un moment dat. Cu toate acestea, excreia
urinar este foarte variabil i depinde de volumul i aciditatea urinei.
Teoretic, prin schimbarea aciditii urinii cu numai o unitate de pH, este posibil s se
produc o modificare de zece ori a vitezei de eliminare a medicamentelor slab acide sau
alcaline. Numai dup trecerea n revist a istoricului de caz, lund n considerare toi factorii
de toxicitate mai sus menionai, precum i distribuia i biotransformarea i compararea
rezultatelor analitice cu cazuri similare raportate n literatura de specialitate sau n cazuri
similare din propria sa experien, toxicologul poate trece la interpretarea final a unui caz.

7. Laboratoarele de medicin legal
Laboratoarele de medicin legal sau criminalistice se ocup cu examinarea dovezilor de la
locul faptei (care sunt legate de crim, victime i suspeci). Constatrile tiinifice de laborator
sunt coroborate cu alte devezi pentru pregtirea urmririi penale i realizarea procedurilor
juridice sau a procesului penal. Progresele n tehnologia tiinific a condus la realizarea
laboratoarelor de criminalistic moderne ce necesit cunotine n domeniile tiinei naturale
cum ar fi biologia, chimia, fizica, i matematica. Angajarea n aceste laboratoare necesit, de
obicei, o diplom n una sau mai multe din aceste domenii de activitate. Multe persoane cu
masterat i doctorat sunt serologi, toxicologi i specialiti n microscopie. A crescut numrul
de colegii i universiti care acord grade universitare i postuniversitare n domeniul
criminalisticii, inclusiv n toxicologia medico-legal. Laboratoarele de criminalistic ofer o
carier interesant i plin de realizri n domeniul tiinei criminalistice unui absolvent de
facultate specializat n una sau mai multe tiine naturale.
Dovezi fizice examinate n laboratoare pot fi utilizate n cadrul anchetelor
criminalistice n urmtoarele domenii semnificative, cum ar fi 1) definirea elementului crimei
(aduce dovada c o infraciune a fost comis, cum ar fi identificarea i cuantificare a unui
medicament sau substan controlat sau determinarea cantitii de alcool n snge a unei
persoane suspectate de conducere n stare de ebrietate); 2) furnizarea cilor de investigaie
pentru realizarea unui caz (exemplu, identificarea unei substane n urina unei victime violat
i care a fost drogat cu -hidroxibutirat); 3) legarea de scena crimei a suspectului sau
victimei (studiul dovezilor fizice, cum ar fi de pr, snge, sperm i amprentele digitale); 4)
infirmarea unui alibi sau a unei declaraii prin studiul probelor care difereniaz o sinucidere
de o crim (declaraia ucigaului poate fi contrazis de reproducerea unor elemente din actul
crimei n laborator); 5) identificarea suspectului, prin compararea amprentelor sau profilare
ADN-ului i nu numai; 6) inducerea declaraiei de mrturisire a suspectului (cum ar fi
identificarea otrvii n casa ucigaului i a victimei, dovada de cumprare sau procurare a
otrvii); 7) exonerarea unui nevinovat (dac nu se gsesc fluidele sale la locul faptei).
Laboratoarele de medicin legal sau de criminalistic variaz n dimensiune i dotare.
In SUA, de pild, funcioneaz laboratoarele de medicin legal n diferite regiuni ale rii cu
specialiti diferite. Laborator FBI, n Washington, DC, este cel mai recunoscut laborator de
acest gen. Drug Enforcement Administration (DEA) are laboratoare pentru analiza drogurilor
i medicamentelor ilicite, iar Biroul ATF (alcool, tutun, arme de foc) ajut anchetele penale
care implic incendii i explozii, precum i cele legate de arme de foc, alcool i tutun. Armata

36
SUA dispune de un laborator de criminalistic n Georgia, precum i altele n Frankfurt,
Germania i Japonia. Multe agenii implicate n aplicarea legii se bazeaz pe laboratoare
similare la nivel local sau de stat. Birourile medicilor legiti au, de obicei, anexe cu instalaii
de laborator.

7.1 Seciuni tipice ale laboratorului criminalistic
Laboratoarele de medicin legal ofer servicii multidisciplinare care sunt mprite n
seciuni bazate pe tipurile de probe fizice examinate. Unele dintre seciuni au nevoie de
echipamente specializate i instrumente sau instruirea personalului, n timp ce alte seciuni pot
avea instrumente n comun. Criminalitii se pot roti pe seciunile laboratorului n funcie de
formarea lor, experien i calificare. n funcie de mrimea i volumul de munc al unei
seciuni anumite, unele dintre seciuni pot fi combinate sau subdivizate.
Laboratoarele medico-legale sunt, de asemenea, meninute la colegii i universiti,
precum i n sectorul privat. Laboratoarele de medicin legal poate fi full service sau se
specializeze n una sau mai multe zone. De exemplu, laboratorul FBI i cele mai multe
laboratoare de stat sunt considerate operaiuni de full-service, n timp ce multe laboratoare
examinator medical de birou se concentreze asupra toxicologiei medico-legale sau analiza
tesuturile organismului si fluide pentru droguri, otrvuri, i alte substane toxice. Privat
laboratoarele medico-legale, cum ar fi National servicii medicale, Inc, n Willow Grove,
Pennsylvania, ofera servicii n toxicologie medico-legal i criminalistic. Unele dintre
laboratoare private de specialitate medico-legale sunt complet ntr-un domeniu al tiinei
criminalistice. McCrone Institutul de Cercetare n Chicago, Illinois, efectueaz analiza
microscopic de pulberi n suspensie, i Cellmark Diagnostics n Germantown, Maryland,
ofer o analiz ADN a sngelui i a altor materiale corpului. Dac criminalistice de laborator
sau crim exist n sectorul public sau privat, ar trebui s demonstreze un nivel ridicat de
control al calitii i reproductibilitatea rezultatelor prin participarea la testarea orb de probe.
Laborator de certificare sau acreditare este disponibil prin intermediul unor organizaii
precum Asociaia de Crime Directorilor de laborator (ACLD).

7.2 Toxicologie i identificarea drogurilor
Secia de laborator destinat toxicologiei i identificrii drogurilor utilizeaz tehnici moderne
de chimie criminalistic i de instrumentale pentru a izola, a identifica, de multe ori a
cuantifica alcoolul, drogurile, otrvurile i alte materiale toxice. Materialele prezentate pentru
analiz pot consta din cantiti mari de droguri ilicite cum ar fi marihuana, heroina, LSD,
cocain care trebuie s fie cntrite cu precizie, analizate i de multe ori quantificate pentru a
se stabili gradul de abatere de la lege. Alte materiale lichide, solide sau gazoase pot fi trimise
pentru analiz pentru a determina prezena oricrui element toxic sau otrvitor. Multe
laboratoare de criminalistic analizeaz snge pentru alcool i / sau coninut de droguri. In
cazurile de conducere n stare de ebrietate sau sub influena unor droguri sau medicamente,
din care a rezultat moartea respectivei persoane, se efectueaz determinarea alcoolului i

37
drogurilor din esuturile organismului i fluidelor sale pentru determinarea cauzei de deces n
legtur cu medicul legist.

7.3 Serologia
Serologia medico-legal se ocup cu analiza, identificarea i individualizarea fluidelor i
esuturilor corporale, secreiilor i excreiilor. Sngele, sperma, saliva sunt tipurile cele mai
frecvent ntlnite de probe, dar ocazional probe cum ar fi transpiraia, urina, coninutul gastric,
i fecalele pot fi examinate n scop de caracterizare. Dovezi fizice de acest tip sunt, de obicei,
trimise la laborator n form de pete uscate pe haine sau alte materiale recuperate de la locul
faptei, de la victim sau suspect. Eantioanele de control formate din zone curate de pe
suprafaa din care au fost obinute petele suspecte trebuie s fie incluse n analize. Probele
standard cunoscute constnd din sngele victimei i/sau suspectului sunt, de asemenea,
utilizate n scopuri comparative.

8. Materialele examinate de toxicologul criminalist
8.1 Colectarea probelor
Calitatea de probelor fizice depinde de buna observare, documentare, de colectare,
conservarea, ambalarea acestora la locul crimei, precum i a celor ce provin de la victim i
suspect. Acest lucru solicit calificare i meticulozitate de la anchetatori i patologi la locul
crimei, precum i utilizarea metodelor tiinifice sofisticate n laborator. Acest lucru este
realizat prin instruirea corespunztoare i experien de anchetatori scena crimei i patologi
medico-legale, precum i oameni de tiin medico-legal sau criminaliti angajate n
domeniul examinrii tiinifice a probelor fizice n laborator.
Este necesar s se cunoasc poziia probelor fizice de la scena crimei nainte de
colectare i de ambalare. Aceasta se realizeaz de obicei prin fotografie, note scrise i
diagrame. Colectarea probelor fizice impune o atenie deosebit asupra tipului de dovezi
ntlnite i ambalarea lor corespunztoare. Dovezile nu trebuie s se modifice, denatureze sau
s fie contaminate nainte de analiz. Elementele colectate trebuie marcate cu un numr
secvenial, n funcie de locul unde au fost descoperite, notnd ora i data i parafarea acestor
informaii de ctre persoana care a colectat probele. Materiale cu risc biologic, cum ar fi
sngele i fluidele corpului, ar trebui plasate n containere marcate n mod clar. Laboratoarele
criminalistice au protocoale de colectare a probelor i ambalare care trebuie respectate cu
strictee. De exemplu, materialele ptate de snge, cum ar fi hainele sau lenjeria de pat ar
trebui s fie bine uscate la aer, nainte de ambalare. Aceasta evit activitatea bacterian care ar
putea mpiedica analizele ulterioare. Sunt necesare containere speciale pentru colectarea de
particulele sub form de urm, din prob, pentru a evita pierderea i contaminarea. O bun
comunicare ntre laborator i tehnicienii de la scena crimei este esenial ca s se asigure c
procedurile corespunztoare sunt respectate.




38
8.2 Tipuri de dovezi fizice
Dovezile fizice pot exista n aproape orice form sau dimensiune, n funcie de natura i
mediul nconjurtor al evenimentului penal. Acesta poate exista la locul crimei sau a fost
transferat ntre victim i agresor, precum i n orice alt loc, n funcie de activitile
persoanelor implicate. Examinarea i analiza probelor fizice de ctre criminalist presupune
identificarea fizic sau chimic a materialelor cu cel mai nalt grad de certitudine tiinific
posibil cu tehnologia actual. De exemplu, identificarea i determinarea cantitii de
substan prezent n probe reprezint obiective ale analizei alcoolului i drogurilor ilicite. Se
stabilesc elementele infraciunii n cazurile de conducere a automobilului n stare de ebrietate
sau n cele care implic deinerea sau vnzarea de substane cu regim special.
Uneori se compar probe extrem de diferite ntre ele pentru a se realiza contextul unei
infraciuni sau crime. Astfel, de pild, tabloul unui jaf n care un grup de indivizi au lovit un
paznic de noapte i au sustras apoi cereale dintr-o magazie poate fi redat att de declaraia
respectivului paznic, de urmele lsate de infractori pe teren, de analiza cromatografic a
seminelor de cereale pentru a stabili dac cele sustrase sunt identice cu cele din magazie, etc.
O astfel de comparaie implic potrivire fizic fragmentelor de obiecte gsite la faa locului
sau n curtea infractorilor, stabilirea tipului de autoturism implicat, existena urmelor de sticl
sau haine, toate sub forma unui joc puzzle. Unele probe sub form de urm, cum ar fi firele de
pr i fibrele, necesit un studiu comparativ microscopic. Un exemplu de suficien n actul de
justiie l constituie rezolvarea unui caz numai pe baza mrturiei fptuitorului. Este o
greeal imens aceast atitudine, deoarece un individ poate lua asupra sa fapta altei persoane
(so-soie, mam-fiu, etc.), iar alte persoane pot fi obligate la mrturie mincinoas. De aceea,
refacerea ntregului tablou pe baz de dovezi tiinifice poate conduce la un act de justiie
corect. Criminalistul poate s prezinte i probabilitatea c dovada adus de el este corect i
incrimineaz infractorul sau criminalul. Astfel, analiza ADN-ului conduce la o identificare a
suspectului cu o probabilitate mai mare de 99,99%.

8.3 Tipurilor comune de dovezi fizice
Fluidele din organism, cum ar fi sngele, sperma, saliva, sub form lichid sau uscat sunt
adesea prezente pe esturi, haine sau alte obiecte. Aceste materiale biologice sunt frecvent
colectate pe crpe sau tampoane sterile de la locul crimei sau de la persoanele implicate
pentru identificri prin tehnici serologice sau profil ADN. Identificarea unor tipuri de snge la
locul unei crime violente i pe hainele victimelor i suspecilor permite lmurirea
evenimentului. Alte excreii ale corpului, cum ar fi urina, transpiraia i fecalele pot fi
identificate n diferite pete sau materiale.
Identificarea de snge sau material seminal pe uscat, materiale colorate i
individualizare ulterioare, precum i fa de persoanele cunoscute pentru includerea sau
excluderea sunt funciile majore ale serologist. Se procedeaz la identificarea sngelui cu un
test chimic ce utilizeaz anumite metale i peroxidaze de plante pentru a indica posibila
prezen de snge. Alte teste pentru snge includ fenolftaleina, care produce o culoare
luminoas de culoare roz, n prezena sngelui i verde leucomalachite, care produce o culoare

39
albastru-verde n prezena acestuia. Luminolul este un alt tip de test prezumtiv pentru snge,
care este frecvent utilizat la locul crimei pentru a localiza urmele de snge n zonele care au
fost splate sau de snge nu este altfel vizibil cu ochiul liber. n aceste cazuri, luminolul se
pulverizeaz pe suprafeele cu posibile urme de snge i se observ n ntuneric o
luminiscen chimic alb-albastruie care poate indica prezena sngelui.
Acest tip de luminescen poate fi fotografiat pentru a fi inclus ca dovad n actul de
justiie. Daca testul este negativ, se consider c sngele nu este prezent n eantion. Dac
testele sunt pozitive, se trece la confirmare i identificarea speciilor (origine uman i
animal). Acest lucru este realizat cu anticorpi specifici, care vor reaciona cu materialul
suspect. Proceduri serologice convenionale pentru individualizarea sngelui, precum i a
materialului seminal includ caracterizarea proteinelor polimorfe i a markerilor genetici.
Aceste proceduri sunt mai rar utilizate de cnd cu apariia tehnicilor ADN.
esuturile organismului pot fi prelevate pentru analize toxicologice din organele
recoltate la autopsie, mpreun cu snge, urin i coninutul stomacal.
Drogurile i substanele cu regim special sunt recoltate sau confiscate pentru
identificare i cntrire; acestea pot fi materii prime vegetale, pulberi, tablete, capsule sau alte
preparate.



Unele dintre capsulele i tabletele confiscate conin LSD (dietilamida acidului lisergic.

Materialele explozive i lichidele inflamabile, materialul solid sau resturile arse pentru
identificarea de accelerants i reziduuri explozive sunt de interes criminalistic general, mai
puin interesnd toxicologul. Acelai lucru se poate afirma despre armele de foc, proiectilele
sau gloanele gsite la locul unei crime, etc. Se pot colecta probe de sticl, acestea putnd fi
importante pentru nelegerea direciei unui glonte. Pentru toxicolog ns pot fi interesante
firele de pr colectate de la scena crimei, victim sau suspect pentru determinarea
identificarea speciilor (animale sau umane), ras, i partea corpului de origine. Dac este
uman, caracteristicile morfologice ale prul pot fi utilizate pentru a include sau exclude un
suspect. De asemenea, este posibil s se determine dac prul a fost zdrobit, tiat, ars, scos cu
fora sau czut n mod natural. In firul de pr pot fi identificate metalele grele, arsenul etc.
Dac numrul firelor este foarte mic, atunci determinrile toxicologice sunt mai dificil de
realizat.

40
Uleiurile i produsele cosmetice transportate de la obiecte la persoane fizice posed
compoziii unice ce pot fi folosite pentru comparaie i identificare. Toxicologul poate utiliza
astfel de date pentru precizarea persoanei la care s-au descoperit droguri sau otrvuri.
Solurile i mineralele, lemnul, vegetaia i altele pot permite identificarea i stabilirea
sursei sau locaiei posibile care poate fi asociat cu un suspect sau victim.

9. Analiza de urme
Principalul instrument pentru analiza urmelor este microscopul. Un stereo microscop de
putere medie care mrete, de obicei, n intervalul 40-50 este utilizat pentru scanarea i
sortarea multe tipuri de dovezi fizice, cum ar fi hainele i pentru colectarea de urme materiale.
Microscopul cu mrire de pn la 1000 este utilizat pentru analiza i compararea firelor de
pr, fibreloe, solului, produselor cosmetice, particulelor de praf i de reziduuri, precum i o
gam larg de pulberi n suspensie. Un microscop cu lumin polarizat este utilizat pentru
observarea proprietilor optice i morfologia materialelor. Un microscop de comparaie este
utilizat pentru vizualizarea side-by-side a probelor, cel mai frecvent firele de pr i fibre.
Acesta reprezint de fapt dou microscoape conectate printr-o prism cunoscut ca punte de
comparaie. Acest lucru permite mprirea cmpului vizual al fiecrui microscop ntr-un
semicerc, astfel nct cele dou eantioane pot fi vizualizate simultan.
Analiza de urme a probelor poate permite identificarea vopselelor, sticlelor, uleiurilor
i o serie de compui organici folosind teste microchimice i instrumentale. Exemple de
instrumente utilizate n acest sens sunt GC-MS i tehnicile de analiz organic elementar,
inclusiv IR, difractie de raze X i fluorescen, spectrofotofluorometrie i microscopie
electronica de baleiaj (SEM). Microscopul electronic de baleiaj cu o rezoluie bun i mrire
de pn la 100.000 este, de asemenea, utilizat pentru examinarea probelor de particule din
mpucare, recuperate din minile persoanelor suspectate de folosire recent a unei arme sau
de a se fi aflat n imediata apropiere a descrcrii unei arme de foc.

10. Bibliografie selectiv
1. Poklis, A. Forensic toxicology. In Introduction to forensic sciences. 2
nd
Ed., (W. G.
Eckert,Editor) CRC Press, Boca Raton New York London Tokyo, 1997, pp. 116-141.
2. Cravey, R. H., Baselt, R. C. Introduction to Forensic Toxicology. Biomedical Publications,
Davis, CA, 1981.
3. Ellenhorn, M. J., Barcelous, D. G. Medical toxicology, diagnosis and treatment of human
poisonin., Elsevier Science Publishing, New York, 1988.
4. Eckert, W. G., James, S. H. The role of the forensic laboratory. In Introduction to forensic
sciences. 2
nd
Ed., (W. G. Eckert, Editor) CRC Press, Boca Raton New York London
Tokyo, 1997, pp. 43-65.
5. R. C. Baselt and R. H. Cravey, Disposition of toxic drugs and chemicals in man. Yearbook
Medical Publishers, 3rd ed., Chicago, IL, 1990.
6. Clarkes isolation and identification of drugs in pharmaceuticals, body fluids and post-
mortem material. 2nd ed., A. C. Moffat, Senior Ed., Pharmaceutical Press, London,

41
England, 1986.
7. Curry, A. S. Poison Detection In Human Organs, 4th ed., Charles Thomas Publisher,
Springfield, IL, 1988.
8. Joynt, B. P., Mikhael, N. Z. Sudden death of a heroin body packer. J. Anal. Toxicol.,
9, 238-240, 1985.






































42


TOXICOLOGIA MEDICO-LEGAL SAU JUDICIAR

Cap. II. Analiza toxicologic. Metode de extragere a toxicilor. Tehnici i strategii de
sampling a probelor judiciare. Analiza fizico-chimic. Metode de analiz n toxicologie.
Electroforeza. Cromatografia n strat subire. Cromatografia de lichide de nalt
performan. Cromatografia de gaze. Spectroscopia. Tehnici imunologice. Aplicaii.

1. Analiza toxicologic
n investigarea unei otrviri, pentru toxicolog este necesar mai nti izolarea i identificarea
otrvii. Prin urmare, toxicologii criminaliti clasific otrvurile pe grupe, n funcie de metoda
utilizat pentru a izola substanele din esuturile sau fluidele corpului.
nainte de a ncepe analiza, toxicologul trebuie s ia n considerare mai muli factori:
cantitatea de prob disponibil, natura otrvii cutate i posibila biotransformare a otrvii.
Pentru c lucreaz cu o cantitate limitat de prob, toxicologul trebuie s elaboreze o metod
analitic, ce va permite detectarea numr ct mai mare de compui.

2. Metode de extracie a toxicilor
Izolarea substanelor toxice i a drogurilor din diferite produse se realizeaz prin extragerea
lor cu solveni organici, dup metode generale sau speciale. Unele dintre substanele
otrvitoare nicotina, acidul picric pot fi izolate i prin antrenare cu vapori de ap, operaie
care este de obicei urmat de extragerea distilatului cu solveni organici. Extragerea cu
solveni se bazeaz pe principiul dup care solubilitatea substanelor este invers proporional
cu masa molecular. Toi toxicii organici, indiferent de complexitatea moleculei lor, posed o
mas molecular incomparabil mai mic fa de macromoleculele proprii organismului. Se
urmrete n general ca solventul s extrag toxicul nealterat, precipitnd n acelai timp
proteinele. Pentru a mri eficiena extractiv a solventului se pot adauga acizi sau baze.
Metodele de extracie pot fi clasificate n funcie de i) solventul folosit (majoritatea toxicilor
se extrag cu alcool acidulat, dar exist i extracia selectiv (cu solveni specifici otrvii
respective); ii) eficiena extragerii (extracie prin echilibrare; extracie exahustiv).
In procedeul de extracia general cu alcooli acidulai (elaborat de Stas n 1850 i ameliorat
de Otto, apoi Ogier) se pot separa grupele de toxici conform schemei de mai jos. n prezent se
utilizeaz metoda Stas-Otto, modificat de Ogier i Kohn-Abrest. Metoda Stas se bazeaz pe
solubilitatea n ap, alcool sau amestec hidroalcoolic, a srurilor alcaloizilor cu acid tartric sau
oxalic i a insolubilitii lor n solveni organici. Aceste sruri sunt descompuse cu bicarbonat
de sodiu, cnd alcaloizii trec n forma bazic, insolubili n ap, dar extractibili cu solveni
organici.
Otto a ameliorat metoda iniial prin extragere cu eter din lichidul apos acid a toxicilor
cu caracter acid i neutru. n acest mod sunt extrai acizi organici, glicozizi, derivai

43
barbiturici, metilxantinele, sulfamidele, pesticidele, lactone, anhidride, compui neutri,
precum i o serie de impuriti.
Deoarece n variantele anterioare se obineau reziduuri impurificate cu proteine, lipide,
colorani, rezine, Ogier a recurs la purificarea iniial a filtratului hidroalcoolic acid prin
tratarea acestuia cu alcool concentrat agent precipitant al impuritilor menionate (Metoda
Stas - Otto Ogier).

2.1 Izolarea opiaceelor din probele biologice
Extracia cu solvent. Extracia cu solvent a fost utilizat de decenii pe scar larg pentru
izolarea de opioide din probele nebiologice, plante i umane. Recent, a fost descris
microextracia n faz lichid (LPME) de Rasmussen i colaboratorii, precum i de grupul
Ugland.
Metoda Stas Otto, modificat de Ogier i Kohn-Abrest
Astfel, materialul biologic prezentat la analiz se mparte n dou pri: pe prima poriune se
realizeaz reaciile preliminare, iar cea de a doua se divide n trei poriuni (A, B, C), n care se
determin otrvurile, medicamentele i drogurile. In poriunea A- toxicii volatili i minerali,
n poriunea B- toxicii organici, iar n poriunea C este utilizat pentru cercetri
complementare.
Concret, materialul biologic de analizat (50-500 g) n funcie de natura acestuia, se
omogenizeaz prin pulverizare, solubilizare sau suspendarea acestuia ntr-o cantitate mic de
ap. n cazul coninutului stomacal, acesta este triturat n mojar cu puin ap cald. Se
adaug la proba omogenizat un volum dublu de alcool de 95 i acid tartric n prporie de
1% fa de cantitatea de prob, astfel nct pH-ul s fie acid (pH = 4-5; vezi schema). Nu se
folosesc acizi minerali, deoarece acetia impurific produsul de analizat cu albuminai
solubili i determin hidroliza unor alcaloizi (cocain, atropin).
Se macereaz 6-12 ore pe o baie de ap la 50, 3-6 ore la 70 C sau 1-2 zile la
temperatura camerei. Dac produsul de analizat conine ap, cum este cazul organelor, masa
macerat are o concentraie alcoolic final de aproximativ 70, din cauza ieirii apei din
produs. Se stoarce amestecul prin tifon i se filtreaz.
Filtratul este distilat sub presiune redus sau este evaporat pe baie de ap la o
temperatur sub 40, pn la consistena siropoas, apoi se rcete (Proca & Butnaru, 1995).
Proba se trateaz, agitnd continuu, cu 3-4 ori volumul su cu alcool de 95, se las s se
aglomereze precipitatele floconoase proteice, apoi se filtreaz. Filtratul este splat cu alcool,
care se adaug la filtrat. Filtratul este din nou distilat, apoi tratat cu alcool de 95 i filtrat.
Purificarea prin tratare cu alcool este repetat de 3-4 ori. La final, se folosete alcool absolut.
Purificarea este complet atunci cnd la adugare de alcool absolut nu se mai observ
formare de flocoane proteice.
Lichidul obinut se concentreaz pe baie de ap pn la consisten siropoas apoi se
dilueaz cu ap la 50 ml. Se obine astfel un lichid apos ceconine majoritatea toxicilor sub
form de tartrai (alcaloizi) sau sub form liber (glicozizi, barbiturice, acizi organici etc.).
Toxicii sunt extrai din lichidul apos acid, n mediul acid sau alcalin, dup natura toxicului,

44
cu eter acid sau cloroform. n lipsa indicaiilor asupra naturii toxicului se procedeaz la
extracii succesive att n mediul acid, ct i n mediul alcalin. Dac lichidul apos respectiv
este uor opalescent, din cauza impuritilor lipidice, acesta nu trebuie filtrat, pentru a nu se
antrena i o parte din toxicii fixai prin adsorbie pe microprecipitat.

Organe-25 g+ 50 ml alcool etilic 95
o
+ 0,25 g acid tartric
( pH=4-5)
Macerare pe B.M. la 70
o
C 2-3 ore
Filtrare (prin tifon, apoi hrtie de filtru)
Lichid hidroalcoolic acid
evaporare pr B.M pentru ndeprtarea alcoolului
Lichid apos R acid -srurile alcaloizilor
-toxici organici acizi si neutri
- impuritti: proteine, lipide, coloranti, rezine, etc.
Purificare
prin tratri succesive (3-4ori) cu alcool etilic 95 (50ml) -filtrare, evaporare. Ultima dat
se foloseste alcoolul etilic absolut.
Lichid apos R acid - debarasat de impuritti
extractie cu eter etilic (de 2 ori cu 30:50ml)
Solutie apoas acid A
extractie cu cloroform (de 2 ori cu 30:50ml)
Solutie apoas
Acid B
alcalinizare la pH 8-9 cu
bicarbonat de sodiu 10%

extractie cu eter
extract cloroformic acid
-fenacetin
-fenilbutazon
-cafein
-meprobamat
Extract eteric acid
-acizi organici (ac.salicili, picric, oxalic,
acetic, benzoic).
-derivati barbiturici
-glucozizicardiotonici
-sulfamide
-lactone : a.cantaridina
b.santonina
-pesticide: HCH, DDT, ANTU, paration
-veratrina
-colchicina
-glutetimid
-picrtoxin
partial
Solutie apoas
alcalin
extractie cu cloroform
extract cloroformic alcalin
-alcaloizi de baz:
-morfin, codein, dionin, papavrin
-stricnin, brucina
-chinina, chinidin
-atropin
-ezerina
-nicotina
-colchicina
-fenazona, aminofenazona
-tranchilizante
-antidepresive
-anestezice locale de sintez
-antihistaminice
-antipaludice
-teofilina, si alte substante cu caracter alcalin
Observatii: - Pentru ndeprtarea lipidelor se poate face o
extractie cu eter de petrol (de 2 ori cu 30:50ml) a lichidului
apos R acid.
n extractul de eter de petrol se poate identifica:
acidul salicilic, glutetimida, insecticide, organoclorurate
Extract eteric alcalin
-cocain
-pilocarpin
-izoniazid


Metoda Stas Otto Ogier

Extracia eteric acid se realizeaz astfel: se aduce cantitativ lichidul apos acid ntr-
o plnie de separare, se verifica dac pH-ul este acid i se adaug 30 ml eter de petrol. Se

45
repet extragerea de 3 ori. In acest fel se elimin restul de impuriti din produs. Extractul de
eter de petrol poate conine insecticide organoclorurate, acid salicilic sau glutetimid,. Se
evapor extractele neunite de eter de petrol pe cteva sticle de ceas i se identific aceste
substane. Lichidul apos acid rmas este extras n continuare cu eter etilic, iar operaia se
repet de 3 ori cu cte 20, 30 i 50 ml. La agitare pentru separarea straturilor trebuie s se
evite formarea emulsiilor. In cazul n care acestea s-au format, se sparg prin centrifugare,
filtrare pe sulfat de sodiu anhidru sau adugare de eter de petrol (sau alcool amilic).
Extractul eteric poate conine derivai barbiturici; glucozizi cardiotonici; lactone i
derivai; acizi organici; metilxantine, colchicin i veratrin, pesticide, etc. Extractele reunite
de eter etilic sunt evaporate pe sticle de ceas. Evaporarea se poate face sub aciunea unui
usctor de pr (n curent de aer cald), la o surs de raze infraroii sau pe o baie de ap. Dac
reziduurile nu sunt pure, se purific prin recristalizare din ap sau solveni adecvai sau prin
microsublimare. Pe aceste reziduuri se realizez reaciile preliminare i reaciile de
identificare a toxicilor respectivi.
Extracia eteric alcalin. Lichidul apos acid provenit de la extracia acid cu eter
etilic este adus la pH 8 cu bicarbonat de sodiu 10% sau cu amoniac 10% i extras de trei ori
cu eter etilic. Extractul eteric alcalin poate conine alcaloizii baz (cu excepia morfinei i a
unei pri din stricnin), alte substane organice, naturale sau de sintez. Eterul alcalin este
evaporat pe sticle de ceas. Dac reziduurile nu sunt pure, se dizolv n HCl 0,1 N i se extrag
cu eter, pentru a ndeprta impuritile. Soluia apoas rmas este alcalinizat cu bicarbonat
sodiu i extras din nou cu eter, urmat de evaporare pe sticle de ceas.
Extracia cloroformic alcalin. Lichidul apos alcalin rezidual poate conine
morfin, teobromin i teofilina i o parte din stricnin. Pentru a le separa din lichidul apos
alcalin, se face nc o extracie cu cloroform, dup care extractul se evapor pe sticle de ceas,
i se concentreaz.
Extracia prin echilibrare se bazeaz pe agitarea materialului biologic de analizat cu o
cantitate anumit de solvent, cnd se realizeaz un echilibru de repartiie a toxicului ntre
produsul de analizat i solvent. Din lichidul de extracie, ajuns la echilibru, se determin
toxicul.
Extracia exhaustiv se bazeaz pe epuizarea produsului de analizat cu solvent mereu
proaspt, operaia repetndu-se pn la extragerea complet. Se pot folosi urmtoarele
procedee: extracie cu solvent care recircul (n aparat Soxhlet) sau extracie cu solvent care
se rennoiete (n plnia de separare).
Exist i alte tehnici de izolare, cum ar fi metoda Florence: toxicii sunt dizolvai n
ap prin tratare cu acid tricloracetic 20% care precipit proteinele. Filtratul apos acid este
epuizat n continuare cu solveni organici n mediu acid i n final alcalinizat. Metoda este
rapid i uor de executat, dar are dezavantajul absorbiei pariale a toxicilor cutai pe
coagul, precum i a alterrii unor glicozizi i alcaloizi datorit aciditii ridicate. In metoda
proteolizei (Fabre), materialul biologic este supus degradrii enzimatice cu tripsin, cnd
proteinele sunt solubilizate. Lichidul obinut este n continuare extras cu solveni organici.
Produsul acidulat poate fi supus electrolizei (metoda electrodializei propus deDhr-
Fabre). In acest fel sunt separai i ionii minerali, alturi de cei organici. Metoda este

46
aplicabil la extragerea barbituricilor i alcaloizilor, ns uneori poate produce degradarea
toxicului.
Precipitarea substanei organice se poate realiza i prin tratare cu tungstat (wolframat)
de sodiu i apoi nclzire(metoda cu wolframat de sodiu propus deValov), urmat de filtrare
i extragere cu solveni organici. Metoda este aplicabil la substanele cu caracter acid sau
neutru.
In metoda cu sulfat de amoniu (Nicolls), produsul de analizat este acidulat cu HCl,
apoi saturat cu sulfat de amoniu i nclzit la 90. Filtratul rcit este extras pn la epuizare
cu solveni organici. Metoda se preteaz la orice material: organe, snge, urin, alimente,
buturi.
Se mai poate folosi i metoda digestiei acide, n care materialul de analizat acidulat cu
HCl este nclzit pe baie de ap timp de o or, cnd precipit proteinele. Filtratul este extras
cu solveni organici. Metoda este eficient pentru fenotiazine, chinin, morfin, etc., ce pot fi
uor separate din complexul toxic-protein. Nu se poate folosi la atropin, aconitin,
cocain, benzodiazepine, paracetamol, deoarece i degradeaz.
Lichidele biologice acidulate sau alcalinizate pot fi tratate cu sulfat de sodiu anhidru
pn obinerea unei mase pulverulente, care se epuizeaz cu solveni organici (metoda
Griffon-Le Breton cu sulfat de sodiu anhidru). Metoda este rapid i util la extragerea
barbituricilor i a unor alcaloizi.

3. Teste i determinri
3.1 Testul de culoare
Un test de culoare este o procedur chimic n care substana de testat reacioneaz cu un
reactiv care produce o schimbare acestuia, producnd astfel o culoare observabil sau
schimbarea culorii. Testele de culoare pot fi folosite pentru a determina prezena anumitor
compui sau a unei clase generale de compui. Procedurile sunt, de obicei, rapide i uor de
realizat. Cel mai folositor dintre testele de culoare n toxicologie este depistarea rapid a
probelor de urin, deoarece urina poate fi analizat n mod direct, fr proceduri de extracie
consumatoare de timp. Un exemplu de test de culoare este "testul lui Trinder " pentru
detectarea salicilailor n snge sau urin. Un reactiv de azotat de fier i clorur de mercur se
amestec cu 1 ml de snge sau urin; n cazul n care sunt prezeni salicilaii se observ o
culoare violet.
Ca i n toate celelalte teste toxicologice, prezena de salicilai trebuie s fie
confirmat i de o alt metod de analiz. Se observ un test Trinder pozitiv pentru acidul
salicilic (un metabolit al aspirinei), salicilamidei i salicilatului de metil. Un test fals-pozitiv,
care conduce la obinerea unei culori atunci cnd nu este prezent salicilatul, poate fi observat
la urina pacienilor cu diabet zaharat excreting acid acetoacetic i la pacienii tratai cu doze
mari de medicamente terapeutice fenotiazinice. toxicolog trebuie s fie contieni de limitrile
de el efectueaz teste i, n special sursele de reacii fals-pozitive.



47
3.2 Testul de microdifuziune
Analiza microdifuziune este utilizat pentru izolarea rapid i detectarea de otrvuri volatile.
Un aparat simplu microdifuziune const dintr-un vas de porelan mic cu dou compartimente
separate, un interior bine inconjurat de un exterior bine formate ntre periferie a peretelui de
compartimentul interior i peretele superior din afara vasului. bine exterior este celula proba,
la care o cantitate mic, 1-5 ml, de snge, urin, esut sau omogenatul se adaug. Pentru
interior si un "absorbant", se adaug. absorbant este un reactiv sau solvent, n special
substane volatile care se va dizolva imediat. Dup eantion i absorbant se adaug la celula
corespunztoare, vasul este sigilat cu un material izolant vscoase i acoper cu o plac de
sticl rodat. Daca este permis s stea la temperatura camerei sau usor incalzite, otrava
volatile va difuza din eantion n atmosfer a vasului i s fie prinse de soluia absorbant, care
adesea este un reactiv de culoare.
Pe msur ce otrava este eliberat din eantion, toxicologul poate observa formarea
unei coloraii sau schimbarea culorii din vasul din interior absorbant. Numeroase otrvuri
volatile i gaze pot fi detectate prin tehnici de microdifuzie; acestea includ acetaldehid,
monoxid de carbon, cianur etanol, fluor, hidrocarburi halogenate i metanol.

3.3 Teste fiziologice
Identificarea unor substane, n special a celor active n concentraii de ordinul
microgramelor, dificil i chiar imposibil prin metode uzuale, se realizeaz cu ajutorul
testelor fiziologice. n acest scop, reziduul de la evaporarea solventului este administrat la
animale sau organe izolate, urmrindu-se efectele fiziologice caracteristice (midriaz,
convulsii etc.)

3.4 Cromatografia
Cromatografia este o tehnica de separare. componente ale unui amestec de prob sunt
distribuite ntre dou faze, dintre care una este staionar n timp ce a doua, faza mobil,
percoleaz printr-o matrice sau pe suprafaa fazei fixe. Componentele unui amestec prezint
diferite grade de afinitate pentru fiecare faz, iar cnd acestea sunt transportate de faza
mobil, are loc o migrare difereniat. Unele componente sunt reinute pe faza staionar mai
mult dect altele, producndu-se o separare a compuilor din acel amestec.
Unele medicamente ca antihipertensive, colinergice, insulina etc., sunt extrase din
snge i urin direct prin cromatografia produsului acidulat cu ajutorul unei coloane cu rini
schimbtoare de ioni.
Dintre diferite forme de cromatografie - pe hrtie, pe coloan, n strat subire, n faz
gazoas - cromatografie pe stat subire (CSS) este deosebit de util prin rapiditatea,
sensibilitatea, capacitatea de separare a componentelor dintr-un amestec. Se folosesc diferite
suporturi. n funcie de grupa de substane de analizat se utilizeaz diferite amastecuri de
solveni pentru migrare, care asigur obinerea unor Rf ct mai difereniate. Pentru o mai
bun separare a compuilor apropiai structural, se recomand uneori C.S.S. bidimensional.
Relevarea (identificarea componentelor izolate) se realizeaz prin examinarea plcii n

48
lumin U.V. i/sau prin pulverizarea cu diferii reactivi, indicai pentru fiecare substan sau
grupe de substane.
Gaz-cromatografia este o metod aplicabil n special pentru separarea amestecurilor
i depistarea ulterioar prin detectarea conductibilitii termice, detectarea ionizrii (n
flacr, captur de electroni, ionizare de argon). Metoda are o mare sensibilitate i
specificitate, ns necesit o aparatur complex.
Reinerea unei componente de ctre faza staionar depinde de mai muli factori,
inclusiv natura chimic i fizic a fazelor fixe i mobile, precum i de condiiile
experimentale, cum ar fi temperatura sau presiunea. De aceea, substanele folosite drept
standarde de referin se cromatografiaz n aceleai condiii ca substanele necunoscute.
Aceti compui sunt identificai provizoriu prin compararea factorului lor de retenie n faz
staionar cu acela al standardelor de referin. n continuare, dup cromatografie, identitatea
compuii respectivi trebuie identificai i prin alte metode de analiz, cum ar fi spectrometria
de mas. Din multele tipuri de analize cromatografice, trei sunt mai frecvent aplicate de
toxicologi. Acestea sunt cromatografia n strat subire (TLC), cromatografie de gaz-lichid
(GLC) i cromatografia lichid de nalt performan (HPLC).

3.5 Cromatografie n strat subire
n TLC, faza staionar este un "strat subire" a unui gel absorbant, de obicei silice (bioxid de
siliciu), care se intinde pe un suport solid, cum ar fi o plac de sticl. Extractele concentrate
din probele prelevate, mpreun cu mostrele (standardele) de droguri sunt aplicate sub form
de serie de puncte de-a lungul parii de jos a plcii cromatografice i lsate s se usuce.

















Tehnica TLC: Plac din aluminiu cu silicagel pe care migreaz diverse
substane ce sunt identificate apoi prin Rf (factorul de retenie).

Linia de start
(cu creionul)
Spoturi
de amestec
Standard
Compus identificat
Frontul solventului
(cu creionul)
Spot de standard
Ali compui
Linia de start
(cu creionul)
Spoturi
de amestec
Standard
Compus identificat
Frontul solventului
(cu creionul)
Spot de standard
Ali compui

49
Placa este apoi plasat ntr-un vas cromatografic nchis (de form paralelipipedic), n
care stratul absorbant de silicagel sau oxid de aluminiu de pe sticl intr n contact cu faza
mobil (soluia de developare) sub punctele de substane aplicate.
Pentru identificarea unei substane se folosete un standard, adic substana cutat, de
exemplu un drog (heroin, LSD, cocain) sau un medicament, care se spoteaz pe linia de
start (de exemplu n poziia 4 din figura de mai jos). Proba de analizat (de pild urin, extract
din firul de pr, etc) se spoteaz n celelalte poziii pe linia de start. Dup migrarea
solventului, care poate fi o soluie ce conine solveni diferii (ap: alcool butilic: acid acetic;
ap: aceton: amoniac, etc.) pe plac pn n apropierea marginii de sus a plcii de silicagel
depus pe aluminiu, se traseaz cu creionul, ca i n cazul liniei de start, locul unde a ajuns
solventul (frontul solventului, Fs). Se usuc placa la aer sau prin suflare cu aer cald de la un
usctor de pr, se developeaz substanele de pe plac cu un reactiv potrivit, se usuc din nou
pentru a obine pete stabile i se msoar factorul de retenie, Rf. Se pot vizualiza substanele
de pe plac prin iluminarea acesteia cu lumin ultraviolet, dac placa are adugat o
substan fluorescent. In acest caz se marcheaz substanele cu un creion. Rf este de regul o
caracteristic a unei substane ntr-un amestec de developare anumit. Totui, este bine s se
introduc i un standard. Rf se calculeaz astfel: se mparte distana parcurs de o anumit
substan de la linia de start la distana parcurs de frontul solventului de la linia de start.
De exemplu, n extractele de urin pentru depistarea drogurilor, toxicologul spray-iaz
cromatograma cu ninhidrin care produce o culoare roie sau roz cu amine primare, cum ar fi
amfetamin sau efedrin. Apoi, el poate aplica etanol n acid sulfuric, care produce o serie de
pete viu colorate n roz, portocaliu, albastru sau verzi dac sunt prezente tranchilizante
fenotiazinice i metabolii ai acestora. Placa poate fi n continuare pulverizat cu iodoplatinat,
care reacioneaz cu toate baze azotate.
Exist numeroi reactivi pentru TLC, dar toxicologul trebuie s fie ghidat de natura
chimic a compuilor pe care dorete s-i identifice. n cazul n care un compus din extract
migreaz la aceeai distan i reacioneaz la spray-urile aplicate n acelai mod ca drogul de
referin, toxicologul va ncerca identificarea compusului printr-un alt test chimic.
Au fost gsite urmtoarele valori pentru factorul de retenie, R
F
: Acid acetilsalicilic,
01; Nicotinamin, 04; Paracetamol, 05; Fenobarbital, 05; Morfin, 07; Barbital 11;
Acetilprocain, 18; Chinin, 20; Fenacetin, 22; Fenazon, 31; Codein, 33; Procain, 35;
Cafein, 38; 6MAM, 39; Stricnin, 44; Papaverin, 55; Heroin, 58; Acetilcodein, 61;
Aminofenazon, 64; Noscapin, 70; Lidocain, 71; Metacualon, 73; Cocain, 80, n system
toluendietilamin (85:15).

3.6 Cromatografia de gaz-lichid
n GLC, faza mobil este un gaz purttor inert (de exemplu, heliu, azot), care curge printr-o
coloan umplut cu un suport solid acoperit cu faz lichid staionar sau peste un strat lichid
aflat pe pereii coloanelor capilare nguste. Mai multe tipuri de materiale lichide sunt folosite
n aceast tehnic i se folosesc n funcie de natura compui sau grupe de compui care
trebuie separai i identificai. Probele extrase sunt vaporizat i transporatate de gaz prin
coloan. Deoarece compuii sunt eluai de pe coloan, acetia sunt transportai de gaz la un

50
detector, care produce un semnal electric care este amplificat i afisat pe un nregistrator.
Migrarea unui compus prin coloan este exprimat prin timpul de retenie (Rt), care este definit
ca intervalul de timp scurs ntre injectarea probei i detectarea compusului. Timpul de retenie
ofer o ncercare de identificare a compusului, iar intensitatea semnalui la nregistrator poate
fi folosit pentru determinarea cantitativ a compusului prezent n prob. Un compus de
referin se cromatografiaz n aceleai condiii ca i compuii cutai, care produce un
semnal (vrf, peak) la acelai timp. nlimea semnalului i aria dsa sunt direct proporionale
cu concentraia drogurilor prezente Cromatografia de gaz este deosebit de adecvat pentru
analiza substanelor volatile, cum ar fi alcoolii.


















3.7 Cromatografia de lichid de nalt performan
n HPLC, faza mobil este un lichid care curge printr-o coloan umplut cu faza staionar
solid, sub presiune continu. Sunt folosite umeroase tipuri de materiale staionare, iar
toxicologul poate folosi aproape orice fel de amestecuri de solveni sau numeroase amestecuri
apoase ca faza lichid. Se pot imagina proceduri specifice pentru separarea compuilor care
nu sunt uor de separat prin alte metode cromatografice. Metoda este adecvat n special
pentru compuii sensibili la cldur, care se pot descompune atunci cnd se volatilizeaz n
GLC. Ca i n cazul GLC, medicamente eluate sunt identificate prin Rt lor, iar semnalele la
detector sunt proporionale cu concentraia de droguri prezente n eantion.

4. Determinarea concentraiei otrvurilor sau drogurilor
Msurarea concentraiei unei substane (medicament, drog, otrav, etc.) se realizeaz prin
mai multe metode, cum ar fi spectrofotometria de ultraviolet sau vizibil, cromatografie,
metode, electrochimice, spectrometria de absorbtie atomica (AAS) n special pentru
Cromatograma de gaz a unui amestec de alcooli:
A Metanol; B Aceton; C Etanol; D Izopropanol; E Butanol.
Cromatograma de gaz a unui amestec de alcooli:
A Metanol; B Aceton; C Etanol; D Izopropanol; E Butanol.

51
determinarea metalelor grele, titrri volumetrice, gravimetrie, etc. In cercetarea
criminalistic predomin metodele spectrofotometrice i cele cromatografice, ns
toxicologul poate folosi orice alt metod care este validat tiinific i dac poate face
dovada c rezultatele acesteia sunt statistic validate. Totui, n caz de litigiu se prefer
determinrile efectuate de laboratoare autorizate i care folosesc metode standardizate.
Aceste laboratoare, precum i analitii care lucreaz n ele sunt periodic verificate, cu probe
de analiz pentru testare.

4.1 Spectroscopia
Spectroscopia se refer la absorbia sau producerea de energie radiant. Absorbia radiaiei
este o caracteristic a tuturor moleculelor, cu toate acestea, dar lungimea de und a radiaiei
absorbite poate varia de la raze X prin ultraviolete, vizibile i infra-rou pn la frecvenele
microundelor i undelor radio. Interaciunea unui compus chimic cu radiaia depinde de
structura molecular i lungimea de und a radiaiei. Absorbia radiaiei de ctre un compus n
raport cu lungimea de und a radiaiei reprezint un spectru de absorbie i este o
caracteristic a compusului. Specificitatea spectrului este legat de regiunea de absorbie. De
exemplu, numeroi compui chimici au spectre n ultraviolet identice (200-350 nm), n timp
ce spectrul de infra-rou (2.8 25 m) este extrem de specific, fiind amprenta compusului
dat. De asemenea, exist o relaie direct ntre intensitatea absorbiei energiei radiante i
cantitatea de material absorbant prezent. Acest lucru se aplic la absorbia oricrei forme de
energie radiant, de la raze X la undele radio. Prin alegerea experimental lungimea de und a
absorbiei maxime, poate fi determinat concentraia unui compus dintr-un eantion.










Diverse tipuri de spectrofotometre utilizate n laboratoarele de toxicologie medico-legal

Spectrofotometrul este folosit pentru a msura absorbia de energie radiant i const
dintr-o surs de radiaie, o celul pentru prob prin care trece radiaia i un detector pentru
msurarea absorbiei radiaiei. lungimi de und mai aplic la analiza toxicologice sunt
ultraviolete, vizibile, i infra-rou. instrumentele comerciale utilizate pentru msurarea
absorbiei de aceste forme de lumina poate varia de la simple colorimetre, utilizat pentru a
msura de absorbie n spectrul vizibil, pentru a spectrofotometre extrem de sofisticat care
utilizeaz lumina monocromatica si electronice sensibile pentru a detecta, amplifica, i
niveluri sczute record de radiatii. n timp ce diverse forme de analiz spectroscopice pot fi

52
aplicate pentru a analiza toxicologie medico-legale, numai spectrofotometria n ultraviolet va
fi discutat aici.
Absorbia radiaiei ultraviolete (UV) poate duce la tranziiile electronice n moleculele
organice, provocnd promovarea electronilor de pe orbitalele cu energie minim (starea
fundamental) pe orbite de mare energie. Lungimea de und a maximului de absorbie va
depinde de gruprile chimice prezente n molecul, de natura solventului n care compusul
este dizolvat, de pH-ul i temperatura soluiei. Soluiile apoase i alcoolice sunt cele mai
utilizate de toxicologi.
Trasarea grafic a absorbanei unui compus n raport cu lungimea de und (210-350
nm) reprezint spectrul de absorbie n ultraviolet. Majoritatea medicamentelor de interes
toxicologice absorb lumina din regiunea ultraviolet. Spectrul UV este caracteristic unui
compus, n condiii experimentale i poate fi utilizat pentru identificarea prezenei unui
anumit medicament. Cu toate acestea, identificarea nu este univoc deoarece numeroi
compusi pot prezenta acelai spectrul UV. De exemplu, amfetamina, efedrina,
metamfetamina, feniletilamina, propoxifenul i multe alte medicamente posed maxime de
absorbie n UV, n soluie acid la 263, 257 i 252 nm. Se prefer acum separarea compuilor
prin HPLC i apoi nregistrarea spectrului UV pe msur ce drogurile izolate elueaz de pe
coloan. Concentraia medicamentului poate fi determinat prin compararea intensitii
absorbiei la lungimea de und unde absorbia este maxim cu concentraii de standarde de
droguri pure analizate n aceleai condiii experimentale.

Spectrofotometria de absorbie n UV, Vis i IR
n domeniul vizibil, valoarea absorbiei luminii este apreciat prin intermediul extinciei,
care este definit pentru soluii, prin intermediul legii LambertBeer dup ecuaia:
E= C1
Relaia arat c extincia, deci absorbia luminii este funcie de lungimea de und
(prin intermediul lui ), de concentraia C i de grosimea stratului absorbant 1. Pentru a
studia E
1
= f(c), trebuie ca () i 1 s se menin constante. Aceasta se realizeaz practic,
innd =
max
(valoarea lungimii de und coresponztoare maximului de absorbie i
lucrnd n cuve de grosime constant. n aceste condiii, pentru o serie de soluii de
concentraie C
1
...C
n
se vor determina extinciile E
1
...E
n
. Reprezentarea grafic trebuie s fie
de regul o dreapt. Se spune c legea LambertBeer se verific n domeniul de concentraie
C
1
C
n
, iar dreapta obinut se numete curb de etalonare. Ea se folosete pentru
determinarea oricrei concentraii necunoscute C
x
.
n domeniul vizibil de reacii, absorb numai substanele colorate ele vor absorbi din
spectrul luminii din vizibil (400 800 nm) radiaia complementar culorii ce o prezint.
Substanele incolore nu absorb n vizibil. Pentru a putea studia dependena E = f(c) i pentru
aceast categorie de substane, se efectueaz o reacie de culoare prin tratarea substanei
incolore cu un reactiv de culoare. Sistemul obinut va absorbi n vizibil i concentraia se va
putea determina cantitativ n acest domeniu.
Concentraia probei de analizat se poate calcula prin metoda grafic sau metoda
matematic.

53
Metoda grafic: se traseaz curba etalon, reprezentnd pe abscis concentraia, iar pe
ordonat extincia i cunoscndu-se extincia probei necunoscute se poate calcula
concentraia.
Metoda matematic: se calculeaz factorul de pant pentru fiecare eprubet din scara
etalon dup relaia:
F
p
= C / E n care: C = concentraia n g.
E = extincia n nm.
Apoi se calculeaz factorul de pant mediu ca media artimetic a factorilor de pant din
scar5a etalon, iar concentraia probei necunoscute c
x
este dat de relaia:
x p x
E F C = n care :
p
=

factorul de pant mediu;
E
x
= extincia probei de analizat
Determinarea spectrelor de absorbie n U.V. (200-400 nm) i I.R. (800-10
6
nm)
constituie o cale rapid de depistare i chiar dozare a majoritii toxicilor organici nevolatili,
fie singuri, fie n amestec.
La determinrile n U.V., pe lng forma spectrului punctele de absorbie maxim i
minim- are importan analitic i coeficientul de extincie specific, E(1%, 1 cm); trebuie
de asemenea respectate condiiile de pH, solvent, concentraie, temperatur etc.
Spectrofotometria n infrarou poate fi aplicat la determinarea substanelor solide,
lichide sau gazoase. Substanele solide sunt incluse n discuri de halogenuri alcaline; se
pulverizeaz ntr-un mojar de agat sau ntr-un vibrator cu bile, 1 mg substan de cercetat i
250 mg halogenur, apoi se comprim sub form de disc. Includerea se poate face n ulei de
parafin sau hidrocarburi halogenate. Substanele lichide sau solvite n solveni
(cloroform,sulfur de carbon, teraclour de carbon) sunt aplicate sub form de film pe
materialul transparent fixat n faa aparatului. Substanele gazoase sunt determinate fie direct
n spectrofotometrul n I.R, fie dup o prealabil separare prin gazocromatografie.

4.2 Spectrometria de mas
n spectrometria de mas, un compus este bombardat cu un fascicul de electroni care produce
fragmentarea moleculei cu formare de fragmente ionizate pozitiv i cu mase moleculare
diferite. Dintr-o molecul dat se obin numai anumite fragmente i masele acestora formeaz
un spectru caracteristic acelei substane. Acest lucru este posibil deoarece molecula ncrcat
electric nu are toate legturile identice i cele mai slabe se vor rupe mai uor. Fragmentele
ncarcate electric sunt separate i detectate n funcie de masele lor atomice. Spectrul de mas
indic proporia fiecrui fragment (abundena relativ) la un raport mas-supra-sarcin
specific. n condiii experimentale, fragmentarea moleculelor complexe conduce la un spectru
caracteristic datorit faptului c fragmentarea este extrem de specific i permite adesea o
identificare fr echivoc. Un model tipic de fragmentarea triazolam, un medicament hipnotic
folosit pentru tratarea insomniei.




54
5. Aplicaii
5.1 Cromatografia de gaz
Cromatografia de gaz (GC-FID) a putut fi de folos la determinarea of constituienilor i
metaboliilor heroinei. Neumann a derivatizat probele de heroin aduse de pe strad cu N-
metil-N-trimetilsililtrifluoroacetamid (MSTFA). Astfel s-au separate foarte bine compuii
din aceste probe. Neumann a prezentat date despre tendina de falsificare a heroinei (cu
cafein, paracetamol, procain, fenobarbital), nc din anii 1986-1992.
Kaa a artat c heroina i schimb profilul prin falsificare (n Danemarca, 1981-
1992). La fel cum a artat Neumann n Germania. 6-AM idin drogurile ilicite poate proveni
nu numai din descopunerea heroinei dar i din acetilarea parial a morfinei. Probele care
conin numai 6-AM, fr urme de heroin, nu pot fi clasificate heroin. Din cele 649
impuriti detectate prin GC-MS, au fost selectate 18 ce pot fi aplicate la stabilirea
provenienei probelor de heroin. Profilul european al impuritilor din heroin a fost studiat
de Stromberg i colaboratorii, care au stability c se poate realize i un profil prin
cromatografia de gaz.
GC-MS i HP-TLC ws-au utilizat la determinarea heroinei, morphinei, 6-AM,
i acetilcodeinei. Pentru a identifica provenienele trebuie probe din mai multe regiuni ale
globului ca referin.. Pe de alt parte i analiza unor solveni folosii la fabricarea drogurilor
poate lmuri proveniena acestora.

5.2 Cromatografia de lichid
Lurie au folosit metode HPLC pentru studiul heroinei pure i falsificate. S-au utilizat coloane
cu octadecilsilice (ODS) i detecie DAD cu mai multe lungimi de und. Adugarea
dodecilsulfatului de sodiula faza mobil a permis o mai bun separare a heroinei din strad.
Johnston i King au applicat HPLC pentru a stabili ara de origine a heroinei. S-au analizat
urmtorii componeni: heroin, 6-AM, acetilcodein, noscapin, papaverin, cafein,
metacvualon, paracetamol i fenobarbital. Metoda a fost folosit pe 505 probe din Turcia,
Pakistan, India i Asia de Sud-Est i a dat o probabilitate de 83% de identificares. Dams i
colaboratorii au aplicat LC-MS pentru stabilirea profilului mostrelor de heroin.
Separarea cromatografic a fost realizat pe coloan monolit de silicagel cu gradient de
acetonitril (ACN)ap la o vitez de curgere de 5 ml/min Timpul de analiz a fost de 5 min.
Limita de detecie a variat ntre 0.25 i 1 ng pe coloan. Reddy i colab. au determinat
compoziia n aminoacizi a opiului Indian stabilind astfel proveniana acestuia. Aminoacizii
liberi i totali au fost determinaiprin HPLC cu derivatizare post-coloan cu o-ftalaldehid

Spectrometria de mas, utilizat pentru determinarea masei moleculare, compoziia
substanei, are la baz analizarea moleculei prin ionizare i observarea comportamentului n
cmpul electric sau magnetic.

GS/MS (Gas Chromatography/Mass Spectometry), tehnic hibrid utilizat la compuii
organici volatili. Compuii sunt separai pe coloana cromatografic, apoi sunt introdui prin

55
intermediul unei interfee speciale n camera de ionizare a spectrometrului de mas. Compuii
sunt ionizai (fie prin impact electronic sau prin ionizare chimic) apoi accelerai printr-un
cmp electromagnetic controlat. Timpul de trecere precum i voltajul aplicat exact la
momentul de impact sunt unice pentru compuii de aceeai mas. n acest fel, timpul de
retenie i masa sunt msurate pentru fiecare compus n parte.

5.3 Electroforeza capilar
Tagliaro i Smith, precum i Heeren i Thormann au trecut n revist utilizarea electroforezei
capilare n criminalistic, iclusiv la analiza drogurilor de tipul heroinei. Probele au provenit
din diferite regiuni ale globului. Materialul adsorbant a fost format din ciclodextrin,
dimetilciclodextrin putnd fi aplicat la un numr mare de droguri acide sau neutre.
Anostos i alii au folosit capilare din ticl fuzibil pentru a determina carbohidraii din
heroin.

Morfina
Codeina
Papaverina
Heroina
Morfina
Codeina
Papaverina
Heroina


Exemple de cromatograme (LC-ESI-MS) pentru heroina din probele stradale (dup Adams).


5.4 Tehnologia ICP-MS (plasma cuplat inductiv-spectrometria de masa)


56
ICP-MS este un tip de spectrometrie de mas, deosebit de sensibil pentru determinarea
concentraiei foarte mici a numeroaselor metale i nemetale, la nivel de 1-10 pari per trilion
(ppt). Domeniile sale de aplicaie sunt toxicologia medicala i legala, patologia n general
(disfuncii metabolice, hepatice i renale, direct sau indirect asociate dezechilibrului ionilor
metalici). Spre deosebire de spectrometria de absorbie atomic (AAS), ICP-MS are permite
detecia simultan a elementelor de interes. Principiul metodei ICP-MS const n combinarea
plasmei cuplate inductiv, ca metoda de ionizare, cu spectrometria de mas, o metoda de
separare i detecie a ionilor. Deoarece uneori este necesar s se determine nu numai
cantitatea total dintr-un anumit element, ci i forma sa chimic. Aceasta are un impact
semnificativ asupra biodisponibilitatii, mobilitii i toxicitii acelui element. Combinat cu
diverse tehnici de separare cromatografic (cum ar fi cromatografia in gaz sau lichid), metoda
ICP-MS este o metod puternic i versatil pentru analiza speciilor elementare, inclusiv a
speciilor izotopice.
Pe lang probele clasice de sol, ap, hran, actualmente o gam larg de probe
biologice, att solide, ct i lichide pot fi analizate prin ICP-MS: snge, urin, plasm, ser,
fluide interstiiale, organe interne, dinte, pr, oase i chiar celule.
Echipamentele folosite current sunt: un spectrometru de mas ICP MS (de ex.
ULTRAMASS 700), un mineralizator cu microunde MARS pentru dizolvarea, hidroliza,
extracia i digestia probelor, precum i o hot (ni) chimic (FUME HOOD), pentru
manevrarea substanelor i preparatelor chimice periculoase.

5.5 Folosirea unei combinaii de metode
Huizer a identificat componenii opilui brut, a morfinei purificate i a heroinei ilicite folosind
TLC, HPLC i GC. Izolarea morfinei din opiu se face cu var sau cu ammoniac care pot fi
determinai n morfina brut. In timpul acetilrii se formeaz, de asemenea, impuriti ce pot
fi determinate i care atest sursa acestui drog.
HPLC a indicat compoziia unor probe de heroin, n timp ce prin cromotografia
capilar s-au evideniat diferenele dintre sorturi.
Bora i alii au determinat elementele constitutive ale heroinei prin ICP-OES i AAS. S-a
determinat astfel sursa de provenien a probelor.
Prin calorimetrie diferenial de scanning s-au degradat probele de heroin cu formare
de 6-AM care a fost apoi msurat prin HPLC-UV. Aproximativ 41% din diacetilmorpfin i
100% cafein au fost recuperate dup volatilizare.
Fehn i Megges au determinat 6-AM n urin prine GC-MS metabolit al
heroinei.Uzual 6-AM este extras cu solveni i apoi se determin cu GC-MS. HPLC cu faz
invers i cu detecie electrochimic sau UV s-a folosit mult la determinare 6-AM, derivate de
heroin la detecia acesteia n urin, dup separare prin extracie cu solveni. Cromatografia de
lichid poate detecta 17 alcaloizi din opiu prin msurarea absorbanei la 280 nm. Detecia
limit a fost de 0,1 mg/L.
Electroforeza capilar a fost utilizat de Taylor pentru separarea heroinei, 6-AM,
morfinei, codeinei, etc. Urina se filtreaz, aciduleaz la pH 23 i centrifugheaz TLimita de
detecia este de 0.2 - 0.5 mg/L pentru morfin cu detecie UV.

57
Gazcromatografia poate fi aplicat la snge pentru detecia metaboliilor
heroinei.(Schuberth i Schuberth). Prin GC-MS s-a determinat 6-AM, morfin i codein.
Probele de snge au fost precipitate cu methanol, s-a realizat extracia pe cartu C18
i s-a realizat derivatizarea cu PFPA. Musshoff i Daldrup au modificat metoda
Folosind acetonitril (CAN) pentru a precipita sngele i au modificat SPE. Probele de snge
au fost hidrolizate n mediu acid pentru msurarea opioidelor



















Gazcromatogram capilar a unei probe de heroin (model didactic).

5.6 Metadona
Metadona se poate detecta prin imunoteste utilizate pe urin. S-au gsit anticorpi specifici fa
de metadon (Chikhi-Chorfi i colab.). Un procedeu ELISA poate fi folosit current n
determinarea acestei substane n urin sau saliv. Determinrile sunt concordante cu cele prin
GC-MS. In plasma uman dar i n alte fluide s-a determinat prin gazcromatografie sau prin
HPLC-DAD.

5.7 Ceto-opioidele
Opioidele de semisintez utilizate current ca analgezice i antitusive sunt prezente pe pia i
pot fi folosite ca droguri putnd da dependen (hidrocodona, hidromorfona, oxicodona sau
oximorfona). Aestea se determin prin metodele uzuale, cromatografice sau GC-MS.
Imunotestele sunt importante pentru depistarea drogurilor opioide. Popular este i
metoda TLC pentru materialele vegetale, urin i alte fluide ale corpului. Extracia se face cu
solveni potrivii, urmat de analiza drogurilor prin numeroase metode analitice.

Timp (min)
30 min
I
n
t
e
n
s
i
t
a
t
e
a
s
e
m
n
a
l
u
l
u
i
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
Timp (min)
30 min
I
n
t
e
n
s
i
t
a
t
e
a
s
e
m
n
a
l
u
l
u
i
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13

58
Cap. III Analiza firului de pr

1. Introducere

Urina a devenit proba cea mai acceptat pentru detectarea consumului de droguri.
Popularitatea utilizrii acestui material pentru depistarea drogurilor se leag de faptul c, spre
deosebire de snge, prelevarea probei de urin nu are nevoie de supraveghere medical. Cu
toate acestea, pentru a se asigura c proba de urin este autentic, ea este adesea necesar s se
respecte subiectul productoare de specimen. Aceast nclcare a vieii private poate cauza
jena la unii indivizi i ca rezultat rezistenta la participarea la un program de testare de droguri.
Deoarece majoritatea consumului de droguri sunt eliminate din organism n termen de
dou la trei zile dup utilizare, urin. Analiza este, de asemenea, limitat n capacitatea sa de a
detecta expunerea la medicament. n cazul n care se tie c un ecran de droguri va fi necesare
pe o anumit zi, ca o condiie de angajare, de exemplu, abstinenta cteva zile "nainte de urina
fiind colectate vor duce la utilizatorul de droguri merge nedetectate. Este din cauza acestor
probleme asociate cu analiza urinei ca exemplarele alternative au fost investigate pentru
potenialul lor de indicatori fiabili ai expunerii la medicament. Pn n prezent, matricea cele
mai promitoare pentru detectarea consumului de droguri pare a fi de pr.

2. Consideraii generale despre pr

Acesta a fost cunoscut de zeci de ani, care urma a metalelor n organism se acumuleaz n pr
i pot fi detectate sptmni sau chiar luni dup expunerea iniial. Numeroase articole au fost
publicate descriu detectare de metale grele n pr, i o parte din aceast activitate vor fi
discutate mai trziu de la un istoric perspectiv. Investigaiile mai recente s-au concentrat pe
utilizarea de pr ca un eantion de detectare a farmaceutice i consumului de droguri.
pregtirea probei i tehnici analitice au fost dezvoltate i rafinate pentru a permite o analiz
pentru o serie de medicamente n ct mai puin cteva miligrame de pr. n teorie, analiza de
pr consumului de droguri, ofera mai multe avantaje fa de utilizarea a corpului fluide.
Un eantion de par pot fi colectate fr a fi nevoie de faciliti speciale sau echipamente, sau
medical personal instruit.
Colectarea unei probe mici de pr este relativ non-invaziv i, spre deosebire de urin,
acest eantion nu poate fi uor modificat prin diluare sau utilizarea altor medicamente nainte
de test.









59

















Figure 5.1 Acumularea de droguri n urin i n pr ca o funcie de timp
(Baumgartner et al., 1989)

Stabilitatea de droguri n pr matrice a fost ilustrat ntr-un caz, srbtorit n care
cocain i metaboliii si, benzoylecgonine i ester metilic ecgonine, au fost gsite n probe de
pr de la vechi rozatoare peruvian frunze de coca datnd de la AD 100 (Springfield et al,
1993).
Odat colectate, proba de pr nu are nevoie de cerine speciale de pstrare i ocup
mult mai puin spaiu de stocare de probe de urina. Deoarece parul creste la aproximativ 1
cm / lun, proba ofer o nregistrare pe termen lung de droguri utilizare, chiar si cu parul
relativ scurt, care deine mai multe sptmni sau chiar luni de informaii (Figura 5.1).
Abstinena de la utilizarea de droguri pentru cteva zile, nu se va evita, prin urmare, de
detectare. n general, este recomandat ca firele de pr 5-10 fi folosite pentru analiz, dei
publicaii recente descrie utilizarea de ct de puin 5-10 mg de pr i barb, chiar achii au
fost folosite cu succes. Majoritatea lucrtorilor au descris vrful, sau coroana, a capului ca
fiind proba cea mai uniform a pr pentru analiz, dei par din alte zone ale corpului a fost
folosit. n timp ce trage de par va avea ca rezultat n eantion mai reprezentativ, acest lucru
este evident, dureros pentru subiect i majoritatea mostrelor sunt colectate de tiere. Ar trebui
subliniat faptul c prul trebuie s fie tiat ct mai aproape de scalp este posibil, n scopul de a
a obine creterea economic cea mai recent.
Modelul, n general, propuse pentru a explica ncorporarea de medicamente n pr este
una n care medicamentele intra parul prin difuziune pasiv din sange in celule n cretere de
la baza foliculului pilos (Figura 5.2). Pr uman creste in cicluri, cunoscut sub numele de
anagen, catagen si telogen faze (Bost, 1993). Anagen este faza de crestere, o durat de doi la
trei ani, iar rata de cretere este n general, 0.3-0.4 mm / zi sau 0.9 - 1.2 cm / luna. n timpul
Timp (luni de zile)
C
a
n
t
i
t
a
t
e
a
d
e

d
r
o
g
d
e
t
e
r
m
i
n
a
t

luni de zile chiar ani

Analiza n prul de pe cap
Analiza n prul din barb
Analiza n urin
Timp (luni de zile)
C
a
n
t
i
t
a
t
e
a
d
e

d
r
o
g
d
e
t
e
r
m
i
n
a
t

luni de zile chiar ani

Analiza n prul de pe cap
Analiza n prul din barb
Analiza n urin

60
acestei faze, alimentarea cu snge capilar n jurul folicul furnizeaz nutrieni i ofer, de
asemenea, orice materiale strine care ar putea fi n snge, cum ar fi droguri sau metale.
Aceste urme compui deveni ncorporat n firul de par i sunt transportate pe toata lungimea
ei ca parul creste. faza catagen este o tranziie ntre activ creterii economice i o faz de
odihn. rdcina firului de pr devine keratinizate, formnd un capt club, i ncepe s se
despart de bec sau papila foliculului de par. parul apoi se duce ntr-o faz de cretere nu-
cunoscut sub numele de telogen. Acest lucru dureaz dou-trei luni nainte de cretere a
firului de par un nou ncepe s apar n papilei dermice. Aa cum se creste, parul vechi vor fi
forat s ias. ai multe descoperiri recente, totui, sugereaz c drogurile pot intra de pr de la
multe site-uri prin diferite mecanisme i momente diferite ale cresterii firului de par.
Henderson (1993) propune un model mai complex de ncorporare de droguri n pr:

Plex
cutanat
Derm
Plex papilar
Papile dermale
Folicul din pr
Glande
sebacee
Epiderm
Axul de pr
Start
cornos
Gland
sudoripar
Canal
gland
sudoripar
Gland
apocrin
Plex
cutanat
Derm
Plex papilar
Papile dermale
Folicul din pr
Glande
sebacee
Epiderm
Axul de pr
Start
cornos
Gland
sudoripar
Canal
gland
sudoripar
Gland
apocrin


Figure 5.2 Diagrama foliculului de pr (Harkey, 1993)

timpul de formare a arborelui
n timpul difuzie din snge la folicul activ n cretere
dup formarea prin secretii ale glandelor sebacee i apocrine
dup ce prul a reieit din piele, din mediul extern.
Ptsch et al. (1997) au propus un concept biochimice pentru ncorporarea endogen de
droguri molecule care ajut s explice unele dintre contradiciile aparente i inconsecvene n
pr de droguri de cercetare. Acest model se bazeaz pe principiile biologice de transport prin

61
membranele celulare i biotransformare, i consider c efectul de afinitate melanina de
droguri.
Ptsch i Moeller (1996), n studierea adoptarea de Rodamin B n pr, au artat
penetrare s fie mult mai mare de soluie apoas dect din metanol / etanol solvent. Ei au
propus c Rodamin B este un model potrivit pentru studierea adoptarea de droguri de baz
din mediul extern. Efectul tratamentului cosmetic cu privire la interpretarea de droguri
endogene a fost studiat de ctre Skopp et Al. (1997). Ei au ajuns la concluzia c istoria
cosmetice a unui eantion de pr ar trebui s fie luate n considerare, dar c efectul
de tratamente cosmetice, cum ar fi albit sau perming pe untul endogen-exogene a fost mic.
Drogurile pot fi transferate la parul de la mai multe compartimente de corp situat n esuturile
nconjurtoare foliculului pilos. Aceste mecanisme ar putea fi, de asemenea, de consumul de
droguri specifice, crescnd probabilitatea de detectare a anumitor medicamente n timp ce alii
mai greu de detectat. O mai precis nelegere de ncorporare de droguri n prul este critic
pentru interpretare.
Criticii de analiz de pr pentru medicamente susin c exist prea multe ntrebri fr
rspuns n ceea ce privete fiabilitatea tehnicii pentru a fi acceptat ca o metod de rutin
pentru testarea de droguri. Dei aceast tehnic este n faz incipient i sub rezerva o anumit
sum de critici, utilizarea de pr ca un eantion de examinare toxicologic medico-legal nu
este deloc nou. detectare de metale grele otrvuri i contaminani din mediul nconjurtor n
pr uman a fost bine documentate de mai muli ani.
nainte de a discuta meritele relative ale analizei pr de droguri, poate ar trebui s ne
examineze ceea ce a fost deja stabilite cu privire la depunerea de metale grele n aceast
prob. Multe dintre aspecte, cum ar fi vrsta, sexul, starea boal i contaminare, care pot avea
o influen asupra ncorporarea de medicamente n pr, au fost deja considerate ca fiind
influeneaz ncorporarea metale grele n acest specimen.

3. Studii supra metalelor grele
Utilizarea probelor de pr matern ca mijloc de estimare a expunerii ftului la metalele toxice a
fost descris de ctre Marsh et al. (1981) ntr-un studiu pe 84 mame irakiene i pe copiii lor,
care au fost expui la metilmercur n timpul sarcinii. Metilmercurul a fost ingerat ca fungicid,
iar concentraiile maxime ale mercurului n prul matern par a fi legate de frecvena
simptomelor de toxicitate la mame n timpul sarcinii i la efectele neurologice la sugari. O
relaia doz-rspuns ntre snge i esuturi acumularea de pr de cobalt a fost demonstrat, de
asemenea la obolani (Nation et al, 1983.).
obolanii aduli hrnii cu raii zilnice de clorur de cobalt au fost testai pentru
efectele comportamentale i aceste efecte au fost corelate cu nivelurile de cobalt determinate
prin spectrofotometrie de absorbie atomic. Analizele au relevat un efect doz-rspuns n
ceea ce privete acumularea de cobalt n snge, pr i diferite esuturi. Un studiu ulterior a
comparat concentraiile n pr i efectele comportamentale ale nichelului la obolani (Nation
et al, 1985).. obolanii masculi aduli au fost hrnii cu 0, 10 sau 20 mg Ni / kg corp prin
intermediul unei raii alimentare zilnice de 10 g.

62
In urmtoarele 14 zile de expunere, animalele au fost instruite 61 de zile pentru a
apsa o prghie pentru alimente n timp ce continu s primeasc doze zilnice de nichel.
obolanii tratai cu 20 mg / kg Ni au apsat-o la o rat semnificativ mai mic dect martorii
netratai. Analiza spectrofotometric de absorbie atomic a scos la iveal o relaie doz-
rspuns la nichel n rinichi, dar analizele altor probe, inclusiv n pr nu au prezentat acumulri
difereniale ale acestui agent. O lips similar de coresponden ntre snge i nivelurile de pr
pentru plumb a fost raportat de Grandjean (1984). O femeie care a fost otrvit cu doze
frecvente de nitrat de plumb, pe cale oral, pe parcursul unei perioade lungi de timp nu a fost
diagnosticat ca atare pn la aproximativ cinci luni de la primele simptome care i-au aprut.
Totui, analiza prului fcut la dou date diferite a fost folosit ca prob n instan.
Concentraiile n pr sufer schimbri rapide i s-au normalizat la scurt timp dup
tratament chelator. Aceast constatare sugereaz c nivelul de plumb n pr poate reflecta un
nivel de absorbie curent, mai degrab dect de coninut de plumb n sngele total, care, n
acest caz, se modific mult mai lent. Alte dovezi despre lipsa de corelare ntre concentraiile
de plumb n snge i pr au fost gsite ntr-un studiu cu pr al lucrtorilor expui la un nivel
ridicat de plumb din aer. n ciuda nivelurilor extrem de ridicate de plumb din snge i
intoxicaiei sever cu plumb, concentraiile de plumb n pr au fost relativ sczute.
Prul s-a dovedit a fi nepotrivit pentru determinarea aluminiului cu scopul de a
estima funcia renal (de-Wolff, 1985). Mai multe boli legate de dializ pot fi atribuite unei
creteri n corp a aluminiului. Determinarea acestui metal n eantioanele clinice este, prin
urmare, de mare ajutor n diagnosticul, tratamentul i prevenirea intoxicaiei cu aluminiu.S-a
artat c exist multe capcane n estimarea de aluminiu n fluidele biologice. Se recomand ca
aceste teste de performan s fie limitat la laboratoare specializate. Lipsa de corelaie ntre
expunerea i concentraiile de aluminiu l-au determinat pe de-Wolff s constate c parul pare
a nu fi de nici un folos pentru evaluarea ncrcrii corpului cu aluminiu n fiecare pacient n
parte.
Dei prul i cile urinare au prezentat concentraii de zinc sczute la copii dup o
infecie respiratorie, analiza prului pentru zinc, nu poate fi de ncredere pentru diagnosticarea
unor astfel de condiii, din cauza variabilitii excesive ntre indivizi (van Wouwe et al.,
1986). Singura observaie care ar putea fi fcut a fost c, n comparaie cu martorii, zincul
din pr a fost sczut n mod semnificativ dup infecie respiratorie.
Interaciunea dintre diferii compui n corpul subiectului poate influena ncorporarea
unui medicament n prul. Preocupri similare pe interaciunea dintre metalele toxice dietetice
n urme au fost investigate la obolani (Elsenhans et al, 1987). Expunerea la metalele toxice i
eseniale este considerat a fi reflectat de concentraiile corespunztoare n metal n esuturi.
Cu toate acestea, aceti compui se pot influena reciproc n ceea ce privete pstrarea lor n
organism. Pentru a testa aceast ipotez, s-au alimentat obolanii cu un regim alimentar care
conine 20 ppm fiecare din cele patru metale toxice (arsenic, cadmiu, nichel i plumb) i
cantiti adecvate de metale eseniale timp de dou sptmni. Dieta de baz a fost
suplimentat cu concentraii crescnde din metale toxice (pn la 90 ppm arsenic, 180 ppm
cadmiu, nichel 365 ppm, i plumb 394 ppm). Arsenicul, cadmiul, nichelul, plumbul, cuprul,

63
fierul, manganul i zincul au fost determinate prin spectroscopie de emisie atomic n ficat,
rinichi, intestin, creier, muchi, oase, piele, snge i pr.
O relaie liniar ntre alimentaie i concentrarea n esuturi a fost observat pentru
arsenic i nichel n rinichi, cadmiu n ficat, i pentru plumb n oase. n alte esuturi a fost
observat o saturaie. n timp ce interaciunile cadmiu-fier au fost comune n cele mai multe
din esuturi, alte interaciuni au fost detectate doar n esuturile specifice, de exemplu: arsenic-
cupru n rinichi, cadmiu-zinc n ficat, i mangan-arsenic, cadmiu-mangan sau cupru-nichel n
intestin. Creteri de plumb i cadmiu renale, intestinale i o scdere n os a plumbului de ctre
alimentarea cu arsenic, au fost interaciunile cele mai pronunate dintre metalele toxice.
Rezultatele au demonstrat c organele potenial int pentru evaluarea expunerii la
metale trebuie s fie atent analizate pentru a studia interaciunile metal-metal. Este posibil ca
interaciuni similare dintre elementele din diet i / sau produsele farmaceutice cu
medicamentele s influeneze absorbia i acumularea acestora din urm n prul unui individ.
O asemenea interaciune ar fi un factor suplimentar de luat n considerare n interpretarea
concentraii de droguri n pr.
Un obiectiv principal al acestei cercetri este de a asigura calitatea n testarea prului,
i, n acest scop, s-au dezvoltat testele de control al calitii inter-laboratoare (Kintz i
Cirimele, 1997; Sachs, 1997). Rezultatele acestor teste indic faptul c nc trebuie mult s fie
fcut pentru a mbunti fiabilitatea i coerena metodelor de testare i protocoalele. Poate c
n anii care vin este posibil s se adopte un mod mai puin abordare prudent i mai pozitiv la
utilizarea de pr ca un mijloc de analiz a drogurilor.

Bibliografie
Bost, R.O. (1993) Hair analysisperspectives and limits of a proposed forensic method of
proof: a review. Forens. Sci. Int., 63, 3142.
de-Wolff, F.A. (1985) Toxicological aspects of aluminum poisoning in clinical nephrology.
Clin.Nephrol., 24, S9-S14.
Eckert, .W. G. (1997) Introduction to forensic sciences, 2
nd
ed. CRC Press Boca Raton New
York London Tokyo.
Elsenhans, B., Schmolke, G., Kolb, K., Stokes, J., Forth, W. (1987) Metal-metal interactions
among dietary toxic and essential trace metals in the rat. Ecotoxicol. Environ.
Safety,14, 275287.
Grandjean, P. (1984) Lead poisoning: hair analysis shows the calendar of events. Human
Toxicol., 3, 223228.
Henderson, G.L. (1993) Mechanisms of drug incorporation into hair. Forens. Sci. Int., 63, 19
29.
Kintz, P., Cirimele, V. (1997) Interlaboratory comparison of quantitative determination of
amphetamine and related compounds in hair samples. Forens. Sci. Int., 84, 151156.
Nation, J.R., Bourgeois, A.E., Clark, D.E., Hare, M.F. (1983) The effects of chronic cobalt
exposure on behavioral metallothionein levels in the adult rat. Neurobehav. Toxicol.
Teratol., 5, 915.
Ptsch, L., Moeller, M.R. (1996) On pathways for small molecules into and out of human hair
fibers. J. Forens. Sci., 41, 121125.

64
Robertson, J. (1999) Forensic examination of hair. Taylor & Francis, London.
Springfield, A.C., Cartmell, L.W., Auferheide, A.C., Buikstra, J. Ho, J. (1993) Cocaine and
metabolites in the hair of ancient Peruvian coca leaf chewers. Forens. Sci. Int., 63,
269275.
van Wouwe, J.P., deE-Wolff, F.A., van Gelderen, H.H. (1986) Zinc in hair and urine of
paediatric patients. Clin. Chim. Acta, 155, 7782.





































65
Cap. IV. Otrvuri nevolatile. Otrvirea cu metale

Exist cinci grupe analitice de otrvuri sau toxici: toxici gazoi; toxici volatili; toxici
minerali; toxici organici nevolatili; toxici speciali (dup Ogier). Grupa a IV-a analitic
conine toxicii organici nevolatili extractibili cu solveni organici n mediul acid, neutru sau
alcalin. Aceast grup nglobeaz majoritatea (90%) compui naturali (vegetali sau animali)
i sintetici. In aceast grup gsim substane cu caracter acid (acizi organici, derivai
barbiturici, sulfamide, lactone, anhidride); heterozizi; metilxantine; medicamente de sintez;
alcaloizi; pesticide; aditivi alimentari; detergeni; toxine vegetale i animale.
Separarea acestor substane n stare pur din diferite produse se realizeaz prin
extragerea cu solveni organici, dup metode generale sau speciale. Unele dintre substane,
cum ar fi nicotina, acidul picric, etc., pot fi izolate i prin antrenare cu vapori de ap, operaie
care este de obicei urmat de extragerea distilatului cu solveni organici.

Otrvirea cu metalele grele

Oamenii pot veni n contact cu metalele grele n munca industrial, industria
farmaceutic sau agricultur. Copiii pot fi otrviti, jucandu-se cu solul contaminat. Intoxicaia
cu plumb la aduli a fost descoperit la utilizarea glazurii pe baz de plumb de pe vasele de
ceramic folosite pentru alimente. Exist i contaminarea cu remedii pe baza de plante.
Arsenul i taliul au fost amestecate cu alimente sau buturi pentru sinucidere sau pentru a-i
otrvi pe alii.
Urmtoarele nou elemente sunt toxice: aluminiu, antimoniu, arsen, bismuth,
cadmiu, plumb, mercur, nickel, staniu. Pentru determinarea concentraiei lor se poate folosi
firul de pr deoarece acesta acumuleaz metalele grele. Totui, literature arat c nu toate
metalele grele se acumuleaz la fel n pr. Toxicitatea metalelor grele sau otrvirea apare
atunci cnd organismul acumuleaz o cantitate excesiv dintr-un metal greu, cum ar fi mercur,
plumb, arsen, cadmiu, nichel sau aluminiu, expunnd astfel individul mbolnvire grav sau
moarte.
Aceste metale grele nu joac n corpul uman niciun rol biologic cunoscut, spre
deosebire de unele microelemente, cum ar fi seleniu, care este un antioxidant eficient, de fier,
care este necesar celulelor sanguine sau de cupru, care este o parte integrant a multor enzime.
Din moment ce aceste metale nu sunt utile organismului, i pentru c organismul are
posibilitatea de a le stoca, aceste metale grele se pot acumula n esuturi n timp si pot
provoca probleme grave de sntate.
Dac apar simptome de otrvire cu metale grele, trebuie testat corpul cu metode
analitice cum ar fi prin microanaliz colorimetric sau prin spectrofotometrie de absorbie
atomica. In cazul determinrii unui anumit grad de toxicitate, se recurge la o ndeprtare a
metalului greu prin tratament cu chelatori sau se adreseaz unui medic.
Totui, o serie de simptome de intoxicare cu plumb sau mercur se pot intalni i n
alte circumstane care nu au nimic n comune cu toxicitatea caracteristic metalelor grele.

66
Aceste simptome generale includ o combinaie de oboseal prelungit i confuzie mental sau
lips de concentrare.
Aadar doar oboseala sau problemele de concentrare mental nu sunt suficiente
pentru a suspecta otrvirea cu grele metale.
Unele dintre metalele grele toxice, cum ar fi plumb, mercur, aluminiu, sunt
suspectate n orice scdere notabil n abilitile motorii i echilibrului. Totui, dac corpul
devine mai greoi i dezechilibrat, i aceat stare dureaza un timp, poate fi exclus intoxicaia
cu metale grele.
Problemele de echilibru i/sau scderea abilitatilor motorii sunt mai rare dect
oboseala sau starea de confuzie mental i pot indica alte afeciuni medicale n afar de
intoxicaia cu metale grele. De aceea, trebuie depistate simptomele specifice de intoxicaie cu
metale grele.
Simptomele generale a intoxicaiei cu metalele grele. Otrvirea cu metale grele
poate pune viaa n pericol, deci este foarte important sa se fac teste medicale dac exist
simptome severe de toxicitate cu metale grele, cum ar fi afectarea capacitii de a merge,
grea sever sau alte simptome importante.
Trebuie gsite metalele prezente n corp i determinat concentraia lor pentru a
stabili cel mai bun curs de aciune pentru detoxifierea de metale grele din sistem.
Deoarece primele simptome de toxicitate cu metale grele pot fi, de asemenea,
simptome ale altor afeciuni, este vital s se fac teste adecvate, timpuriu, nainte ca
simptomele s se agraveze. Analiza prului poate arta exact substanele nocive i, apoi, poate
fi pus n aplicare detoxifierea adecvata de metale grele.
Multi oameni au devenit alertai de toxicitatea mercurului. Ins i argintul coloidal
este toxic, dei este un antiseptic i a fost folosit inca din antichitate pentru a inhiba bacteriile
din apa de but. n cazul n care otrvete germenii, va otrvi i omul. Fierul formeaz cei mai
distructivi radicali liberi i este astfel este foarte dunator pentru via.
Deoarece toate metalele sunt toxice, corpurile noastre necesit mecanisme speciale
de transport i manipulare pentru a le mpiedica s ne otrveasc. Acest lucru se aplic i la
mineralele eseniale, cum ar fi fierul, zincul i cromul sau neeseniale i metaloizi, cum ar fi
cadmiul i compuii cu arsen.

Intoxicaia cu metale grele
Intoxicatia cu metale grele reprezint acumularea toxic de metale grele n esuturile
moi ale corpului. Cel mai frecvent implicate n intoxicaii accidentale i otrviri sunt
plumbul, mercurul, arsenul i cadmiul. Mai recent, taliul a atras atenia n mass-media drept
otrav utilizat n cazuri de crim din anii 90. Unele metale grele, cum ar fi zincul, cuprul,
cromul, fierul i manganul, sunt necesare organismului n cantiti mici, dar aceleai elemente
pot fi toxice n cantiti mai mari.
Metalele grele pot intra n organism prin alimente, ap, aer sau prin absorbie prin
piele. Odat ajuns n organism, concureaz i nlocuiesc mineralele esentiale, cum ar fi zinc,
cupru, magneziu i calciu, i interfer cu funciile organelor. O form de otrvire cu mercur,
frecvent n Statele Unite, este auto-injectarea mercurului sub piele. Unii boxeri injecteaz ei

67
nii mercur, n credina c le crte masa muscular. Mercurul metalic, de asemenea, este
utilizat n medicina popular sau n ritualuri religioase n diferite culturi. Aceste practici cresc
riscul de otrvire cu mercur a copiilor din aceste grupuri etnice sau subculturi.

Cauze i simptome
Simptomele variaz, n funcie de natura i cantitatea de metale grele ingerate.
Pacienii se pot plnge de grea, vrsturi, diaree, dureri de stomac, dureri de cap, transpiraii
i un gust metalic n gur. n funcie de metal, pot fi linii albastre-negre n esuturile moi. n
cazurile severe, pacienii prezint afeciuni evidente cognitive, motorii i incompetene
lingvistice. Expresia nebun la cap vine de la otrvirea cu mercur rspndit n secolul al 17-
lea in Frana, printre confecionerii de plrii care mbibau pielea de animale ntr-o soluie de
azotat de mercur pentru a-i nmuia prul.

Diagnostic
Intoxicatia cu metale grele poate fi detectat utilizand teste de snge i urin, analize
de pr i esuturi, sau raze x. Diagnosticul este adesea trecute cu vederea, cu toate acestea,
deoarece multe dintre simptomele precoce de intoxicatii cu metale grele sunt nespecifice.
Medicul ar trebui s ia o istorie amnunit a pacientului cu ocuparetiaa pacientului.
n copilrie, nivelul de plumb din snge de peste 80 ug/dL indica, n general,
intoxicatie cu plumb, cu toate acestea, nivelurile semnificativ mai reduse (> 30 ug / dl) pot
provoca retardare mentala si alte probleme cognitive si comportamentale la copiii afectai.
Centrele pentru Controlul si Prevenirea Bolilor consider c un nivel de plumb din
sange de 10 ug / dl sau mai mare la copii este un motiv de ngrijorare. La aduli, simptomele
otrvirii cu plumb, de obicei, sunt observate atunci cand nivelul de plumb din snge depeste
80 ug / dl pentru un numr de sptmni.
Nivelul de mercur in sange nu trebuie s depeasc 3.6 ug / dL, in timp ce nivelul
din urina nu trebuie s depeasc 15 ug / dl. Simptomele de otrvire cu mercur pot fi vzute
atunci cnd nivelul de mercur depete 20 ug / dl n snge i de 60 ug / dL n urin. Nivelul
de mercur in par poate fi folosite pentru a masura gradul de severitate al expunerii cronice la
mercur.
Deoarece arsenul este rapid eliminat din snge, nivelul de arsen din snge nu poate fi
foarte util n diagnostic.
Arsenul n urin (msurat ntr-o colecie de 24 de ore urmat de 48 de ore fara a
manca fructe de mare) pot depi 50 ug / dl la persoanele cu otravirea cu arsen.
Daca se suspecteaza o intoxicaiei acut cu arsen sau taliu, o analiza de raze x poate
dezvlui aceste substane la nivelul abdomenului (deoarece ambele metale sunt opace la
razele X). Arsenul poate fi, de asemenea, detectate n pr i unghii de luni de zile ca urmare a
expunerii.
Toxicitatea cadmiului este n general, indicata atunci cand nivelul creatininei din
urin depete 10 ug / dl si nivelurile sanguine depesc 5 ug/dl.
Intoxicaia cu taliu cauzeaza adesea caderea parului (alopecie), amoreal, i o
senzaie de arsur la nivelul pielii, precum i grea, vrsturi i ameeli. 15-20 mg de taliu per

68
kilogram de greutate corporal este fatala la om, cu toate acestea, cantitati mici pot provoca
leziuni severe la nivelul sistemului nervos.

Tratament
Atunci cnd este suspectat intoxicatia cu metale grele, este important s se nceap
un tratament ct mai curnd posibil pentru a minimiza daunele pe termen lung a sistemului
nervos al pacientului si ale tractului digestiv. Intoxicatia cu metale grele este considerat o
urgen medical, iar pacientul ar trebui s fie luat ntr-o camer de spital de urgenta.
Tratamentul pentru cele mai multe intoxicatii cu metale grele este tratament chelator.
Un agent de chelare specific metalului n cauz este administrat fie oral, intramuscular, sau
intravenos. Cei mai frecventi trei ageni de chelare sunt edetat disodic de calciu, dimercaprol
(BAL), i penicilamin. Agentul de chelare nconjoar i se leag de metal in tesuturile
organismului, formnd un complex, acest complex este apoi eliberat din esut s cltoreasc
n fluxul sanguin.
Complexul este filtrat din sange prin rinichi i excretat n urin. Acest proces poate
fi de lung durat i dureros, i de obicei necesita spitalizare. Tratamentului de chelare este
eficace in tratarea intoxicaiilor cu plumb, mercur i arsen, dar nu este util n tratarea otrvirii
cu cadmiu. Pn n prezent, nici un tratament a fost dovedit eficient pentru otravirea cu
cadmiu. Otrvirea cu taliu este tratat cu o combinatie de albastru de Prusia (hexacianoferat de
potasiu feric) i un diuretic, deoarece aproximativ 35% din aceasta se excret n urin, cu
toate acestea, n cazul n care tratamentul nu este nceput n termen de 72 de ore de la otrvire,
leziunea sistemului nervos a pacientului poate fi permanent.
n cazurile ingestiei acute de mercur, arsen sau taliu, pot fi induse vrsturi.
Crbunele activat poate fi administrat n cazuri de intoxicaii cu taliu. Splarea stomacului
(lavaj gastric) poate fi, de asemenea, util. Pacientul poate solicita, de asemenea tratament,
cum ar fi lichide intravenoase pentru complicatii ale otravirii, precum oc, anemie, si
insuficienta renala.
Pacienii care au luat arsen, taliu, sau mercur ntr-o tentativ de sinucidere vor fi
vzuti de un psihiatru, ca parte a tratamentului de urgen.

Prognostic
Procesul de chelare poate ntrerupe doar efectele ce pot apare n continuare a
otrvirii, el nu poate inversa leziunile neurologice deja suferite.

Prevenirea
Deoarece arsenul i taliul au fost utilizate n mod obinuit n otrvuri pentru obolani
i insecte la un moment dat, multe ri au ncercat s reduc rata de intoxicaii accidentale prin
interzicerea utilizrii de metale grele n produsele de control a duntorilor. Taliul a fost
interzis n Statele Unite, ca otrav pentru roztoare n 1984. Ca rezultat, aproape toate cazurile
recente de otrvire cu arsen i taliului n Statele Unite ale Americii au fost n mod deliberat,
mai degrab dect accidental.

69
Deoarece expunerea la metale grele este de multe ori un risc profesional, i ar trebui
s fie furnizate i purtat la locul de munc mbrcminte de protecie si protectie respiratorie.
mbrcmintea de protecie ar trebui s fie apoi lasata la locul de munc i sa nu fie purtate
acas, n cazul n care ar putea transporta praf toxic pentru membrii familiei. Industriile sunt
ndemnate s reduc sau s o nlocuiasc metale grele n procesele lor ori de cte ori este
posibil. Expunerea la surse de plumb din mediu, inclusiv vopsele pe baz de plumb, programe
sanitare, de evacuare de vehicule, i a solului contaminat, ar trebui s fie reduse sau eliminate.

Metale grele i cancerul
Metalele pot deteriora ADN-ul direct i indirect, i asta nseamn un risc crescut de
cancer (noi numim acest lucru genotoxicitate). Exist, de asemenea, ci non-genotoxice
posibile, din cauza iritaiei sau imuno-toxicitate. Destul de sigur, un numr de metale sunt
cunoscute a fi cancerigene.
Acestea sunt: arsenul i compui ai arsenului; beriliu i compui ai beriliului; cadmiu
i compui de cadmiului; Compui de nichel i crom hexavalent.
inta uzual sunt plmnii, dei arsenul are o asociaie unica, cu cancerul de piele
care a fost recunoscut de muli ani.
Este un fapt c implanturi metalice n organism (ca, de exemplu, n fixarea osului
sau plcilor) pot fi asociate cu cancerele adiacente, cauzate de iritare a esuturilor. Regretatul
Patrick Stortebecker la Institutul Karolinska din Stockholm, de asemenea, a subliniat i
frecvena cu care cancerul la maxilar a fost gasit in asociere cu umpluturi amalgam de metal.
Asta este deranjant, deoarece acest tip special de "proteze" tinde s fie foarte lung i foarte
frecvent, ntr-adevr.
O dezvoltare major n stomatologie este implantul de titan, pentru a inlocui dintii
pierduti. Dar este un act de credin s presupunem c titanul este inert.

Alte metale toxice
Prezena de metale toxice din sistemul nostru este foarte importanta pentru c ele
sunt capabile de a provoca probleme grave de sntate pentru ca interfera cu functionarea
biologica normala. Dei acestea pot fi gsite n concentraii mari n organism, o serie dintre
aceste metale grele (aluminiu, beriliu, cadmiu, plumb i mercur) nu au nici o funcie biologic
cunoscuta. Altele (arsen, cupru, fier si nichel) sunt considerate a fi eseniale in concentratii
mici, dar sunt toxice la concentratii ridicate. n general vorbind, metale grele perturba
functiile metabolice n dou moduri de baz:
n primul rnd, ele se acumuleaza si, prin urmare, perturba functia organelor vitale si
glandelor, cum ar fi inima, creier, rinichi, oase, ficat, etc.
n al doilea rnd, ele inlocuiesc mineralele vitale nutriionale de unde acestea ar
trebui s fie n organism, pentru a oferi funcia biologic. De exemplu, enzimele sunt
catalizatori practic pentru orice reacie biochimic, n toate procesele vieii pentru sustinerea
metabolismului. Dar, n locul calciului din enzim, poate fi plumb sau cadmiu. Metalele
toxice nu pot ndeplini acelai rol ca mineralele nutritive, prin urmare, prezena lor devine
extrem de perturbatoare pentru activitatea enzimei.

70
Din cauza impactului lor la un astfel de nivel fundamental, metalele grele pot fi
factori de cauzalitate n orice problem de sntate. n cazul n care locul de munc sau a unor
circumstane de via v expunei la metale grele, v-ar face bine sa reduceti sau sa eliminati
expunerea ct mai mult posibil. Fii contieni de faptul c exist multe modaliti ca aceste
toxine sa poata fi absorbite n corpul dumneavoastr - prin produse alimentare i buturi,
expunerea pielii, sau prin aerul pe care il respirati. Deci, ori de cte ori este posibil, purtai
mnui, utilizeazati aparate de protecie pentru respiraie, i asigurai-v c obineti o
ventilatie de aer proaspt.

Surse de metale grele
Prezena de metale toxice din sistemul nostru este foarte importanta pentru c ele
sunt capabile de a provoca probleme grave de sntate pentru ca interfera cu functionarea
biologica normala. Dei acestea pot fi gsite n concentraii mari n organism, o serie dintre
aceste metale grele (aluminiu, beriliu, cadmiu, plumb i mercur) nu au nici o funcie biologic
cunoscuta. Altele (arsen, cupru, fier si nichel) sunt considerate a fi eseniale in concentratii
mici, dar sunt toxice la concentratii ridicate. n general vorbind, metale grele perturba
functiile metabolice n dou moduri de baz: n primul rnd, ele se acumuleaza si, prin
urmare, perturba functia organelor vitale si glandelor, cum ar fi inima, creier, rinichi, oase,
ficat, etc. n al doilea rnd, ele inlocuiesc mineralele vitale nutriionale de unde acestea ar
trebui s fie n organism, pentru a oferi funcia biologic. De exemplu, enzimele sunt
catalizatori practic pentru orice reacie biochimic, n toate procesele vieii pentru sustinerea
metabolismului. Dar, n locul calciului din enzim, poate fi plumb sau cadmiu. Metalele
toxice nu pot ndeplini acelai rol ca mineralele nutritive, prin urmare, prezena lor devine
extrem de perturbatoare pentru activitatea enzimei.
n cazul n care locul de munc sau a unor circumstane de via v expunei la
metale grele, v-ar face bine sa reduceti sau sa eliminati expunerea ct mai mult posibil. Fii
contieni de faptul c exist multe modaliti ca aceste toxine sa poata fi absorbite n corpul
dumneavoastr - prin produse alimentare i buturi, expunerea pielii, sau prin aerul pe care il
respirati. Deci, ori de cte ori este posibil, purtai mnui, utilizeazati aparate de protecie
pentru respiraie, i asigurai-v c obineti o ventilatie de aer proaspt.
Aluminiu. (cuvinte cheie ce denot rolul aluminiului: alaun, folie de aluminiu, hrana
pentru animale, antiacide, aspirina, auto, praf de copt, bere, fin albita, cutii de conserve,
ceramica, brnz, filtre de igar, aditivi de culoare, materiale de constructii, vase, cosmetice,
amalgamele dentare, deodorante, ap potabil, ageni de uscare, praf, cabluri izolate, compui
medicamentosi, produse lactate, spray nazal, pesticide, poluare, sare, apa de la robinet, fumul
de tutun, pasta de dinti, apa tratat, praf de vanilie. Cu alte cuvinte este un metal omniprezent.
Efecte: ALS, boala Alzheimer, anemia, pierderea poftei de mncare, probleme de
comportament, carii, raceli, colita, confuzie, constipaie, demen, gur uscat, piele uscat,
pierderea de energie, transpiratie excesiva, flatulen, dureri de cap, arsuri la stomac,
hiperactivitate, inhibarea sistemelor enzimatice, disfunctii renale, reducerea functiei
imunitara, dizabilitati de invatare, spasme musculare la picioare, disfuncie hepatic, pierderi
de memorie, tulburri neuromusculare, amoreal, osteoporoza, paralizie, boala Parkinson,

71
ulcer peptic, psihoz, reducerea activitatii intestinale, senilitate, probleme ale pielii, dureri de
splin, dureri de stomac i dureri musculare slabe.

Arsen: materialele de constructii tratate la foc cu arsen, arderea crbunelui, spray-uri
de insecte, pesticide, soluri (bogate in arsen), fructe de mare din apele de coast, n special
scoici, stridii i crevei.
Efecte: Dureri abdominale, anorexie, unghii casante, diaree, grea, vrsturi,
anemie cronica, senzaie de arsur n gur / esofag / stomac / intestin, confuzie, convulsii,
dermatit, somnolen, inhibarea enzimelor, miros de usturoi a respiratiei / scaun, cderea
prului, dureri de cap , hiper-pigmentare a pielii i a unghiilor, risc crescut de cancer de ficat /
pulmonar / de piele, febr sczuta, mucoase n nas i gt, dureri musculare / spasme /
nervozitate, slbiciune, infecii ale tractului respirator, dificultate de nghiire, gust dulce
metalic, strngere de gt.
Beriliu arderea crbunelui, in fabricaie, produse de uz casnic, praf industrial.
Efecte: tulburri ale metabolismului calciului i vitaminei D, epuizarea magneziului,
cancer pulmonar, infecii pulmonare, rahitism, disfuncie de organe vitale.
Cadmiu: contaminani industriali din aer, baterii, bomboane, ceramica, fumul de
tigara, cola, intoxicaie congenitala, rafinrii de cupru, aliaje de cupru, aliaje dentare, ap
potabil, galvanizare, ngrminte, produse alimentare din sol contaminat, fungicide,
incinerarea de anvelope / cauciuc / plastic, cafea instant, acoperisuri de fier, rinichi, ficat,
marijuana, carne procesata, lapte evaporat, ulei de motor, stridii, vopsea, pesticide, tevi
zincate, alimentele procesate, cereale rafinate / cereale din fin, cauciuc, covor suport din
cauciuc, produse de mare (cod, eglefin, stridii, ton), canalizare, argint rafinat, topitorii, apa
moale, suduri (inclusiv n cutii de alimente), tutun, masina ambulanta de bauturi racoritoare,
unelte, lmpi cu vapori, ap (ora, dedurizat, bine), metal de sudur.
Efecte: alcoolism, alopecie, anemie, artrita (osteo i reumatoid), boal osoas,
dureri osoase n mijlocul de oase, cancer, boli cardiovasculare, carii, hemoragie cerebral,
ciroza, diabet zaharat, tulburri digestive, emfizem, inima marita, simptome asemntoare
gripei, insuficien de cretere, dureri de cap, colesterol ridicat, comportament hiperkinetic,
hipertensiune, hipoglicemie, impotenta, inflamare, infertilitate, boli de rinichi, tulburri de
nvare, leziuni hepatice, boli pulmonare, migrene, leziuni ale nervilor din celule,
osteoporoza, disfuncii de prostata, tulburri de reproducere, schizofrenie.
Cadmiul i compuii si (oxid, clorur, sulfit sau sulfur de cadmiu) determin
apariia de sarcoame locale la obolani. Expunerile profesionale la cadmiu (mai ales oxidul de
cadmiu) cresc riscul apariiei cancerului de prostat la om.
Cupru: pastile pentru controlul naterilor, intoxicaii congenitale, vase de cupru,
DIU cu cupru, evi de cupru, aliaje dentare, fungicide, maini de ghea, emisiile industriale,
insecticide, piscine, ap, sudri, avocado, bere, fin de oase, ciocolata, ulei de porumb, crabi,
gelatin, cereale, carne de miel, ficat, homar, margarina, lapte, ciuperci, nuci, carne de organe,
stridii, biban, seminte, crustacee, soia, germeni de gru, drojdie de bere
Efecte: acnee, insuficien suprarenal, alergii, alopecie, anemie, anorexie, anxietate,
artrit (osteo & reumatoid), autism, cancer, frisoane, fibroza chistica, depresie, diabet,

72
tulburari digestive, gur uscat, disinsulinism, dominarea estrogenului, oboseal, temeri,
fracturi, ciuperc, atac de cord, hipertensiune arterial, nivel ridicat de colesterol, boala
Hodgkin, hiperactivitate, hipertensiune, hipertiroidism, acid sczut clorhidric, hipoglicemie,
infecii, inflamaii, insomnie, pierderea de fier, icter, tulburri renale, scderea libidoului,
limfom, boal mintal, migrene, modificri ale dispoziiei, scleroz multipl, infarct
miocardic, grea, nervozitate, osteoporoza, disfunctii pancreatice, atacuri de panic, paranoia,
fobii, PMS, schizofrenie, senilitate, disfuncii sexuale, balbaiala, carii, accident vascular
cerebral, caderea dintilor , toxemia de sarcin, infecii ale tractului urinar, infecii cu fungi.
Fier: ap potabil, vase de fier, evi de fier, sudura,. alimente: melasa, fina de oase,
tre, arpagic, scoici, inima, rinichi, legume cu frunze, legume, ficat, carne, melas, nuci,
carne de organe, stridii, patrunjel, vin rou, alimentele rafinate, crustacee, soia, germeni de
grau , cereale integrale.
Efecte: amenoree, furie, artrit reumatoid, malformaii congenitale, sngerarea
gingiilor, cancer, constipaie, diabet, ameeli, probleme emoionale, oboseal, dureri de cap,
dureri de inim, insuficien cardiac, hepatit, hipertensiune arterial, ostilitate,
hiperactivitate, infecii, insomnie, iritabilitate, dureri articulare, boli hepatice, pierderea de
greutate, probleme mentale, gust metalic n gur, miastenia gravis, grea, dureri ale
pancreasului, boala Parkinson, mbtrnirea prematur, schizofrenie, scorbut, dificulti de
respiraie, ncpnare.
Plumb: frasin, gaze de esapament, baterie de fabricaie, fin de oase, conserve din
fructe i suc, baterii auto, fumul de tigar, arderea crbunelui, cerneluri colorate, intoxicaii
congenitale, cosmetice, tacmuri, galvanizare, praf de uz casnic, din producia sticlei, vopsele
de pr, emisiile industriale, evi de plumb, geamuri de faian ceramic lustruite cu plumb,
ficat, rimel, metal lustruit, lapte, ziare, carne de organe, vopsea, creioane, pesticide, produse
aproape de drumuri, chituri, apa de ploaie, pvc containere, rafinrii, topitorii, ninsoare, cutii
de conserve cu plumb de etanare sau lipit (cum ar fi sucuri, legume), tutun, past de dini,
jucrii, ap, vin.
Efecte: dureri abdominale, insuficien suprarenal, alergii, anemie, anorexie,
anxietate, artrit (reumatoid i osteo), deficitul de atenie, autism, dureri de spate, tulburri
de comportament, orbire, boli cardiovasculare, distrugerea cartilajului, pierderea coordonrii,
pierderea de concentrare, constipaie , convulsii, surditate, depresie, dislexie, instabilitate
emoional, encefalit, epilepsie, oboseala, gut, halucinaii, dureri de cap, ostilitate,
hiperactivitate, hipertensiune arterial, hipotiroidie, impoten, supresia sistemului imunitar,
scdere de IQ, indigestie, infertilitate, insomnie, iritabilitate, dureri articulare, tulburri renale,
dificulti de nvare, disfuncie hepatic, pierderi de memorie (pe termen lung), probleme
menstruale, modificri ale dispoziiei, dureri musculare, slbiciune muscular, distrofie
muscular, scleroz multipl, mielopatie (patologia mduvii spinrii), nefrit, grea,
comaruri, senzaie de amoreal, boala Parkinson, neuropatii periferice, psihoz, disfuncie
psihomotorie, disfuncie renal, nelinite, retard, schizofrenie, convulsii, sterilitate, nscui
mori, pentru sugari sindrom de moarte brusc, furnicturi, carii dentare, vertij, scdere n
greutate neintenionat.

73
Mercur: adezivi, filtre de aer conditionat, antiseptice, fabricarea bateriilor, pudre de
corp, termometre sparte, arderea de ziare i materiale de construcie, loiuni calomel, cereale,
intoxicaii congenitale, cosmetice, amalgamele dentare, diuretice, emolieni pentru esturi,
fetru, cear de podea, fungicide, germicides, cereale, deeuri industriale, insecticide, laxative,
cherestea, fabricarea hrtiei i a clorului, medicamente, mercurochrome, vopsele, produse din
hrtie, pesticide, fotogravura, ap poluat, unguent pentru psoriazis, produse de mare (n
special tonul i petele-spad), eliminare prin canalizare, creme pentru iluminat pielea, soluie
pentru lentile de contact moi, supozitoare, tbcirea pielii, tatuajul, apa (contaminat),
conservarea lemnului.
Efecte: disfuncia suprarenalelor, alergie, alopecie, anorexie, anxietate, malformaii
congenitale, inroire, leziuni cerebrale, cataract, paralizie cerebral, coordonare srac /
micri sacadate, surditate, depresie, dermatit, descurajare, ameeli, somnolen, eczeme,
tulburri emoionale, exces de saliv, oboseal, sngerare i durere, dureri de cap (tip band),
pierderea auzului, hiperactivitate, hipotiroidism, uitare, disfuncii ale sistemului imunitar,
insomnie, iritabilitate, dureri articulare, leziuni renale, pierderea auto-controlului, pierderi de
memorie, retard mintal, gust metalic, migrene, nervozitate, degenerarea fibrelor nervoase,
amoreal, dureri la nivelul membrelor, erupii cutanate, schizofrenie, retinit, timiditate,
tulburri de vorbire, tendine sinucigae, furnicturi, tremurturi (pleoape, buze, limb,
degete, extremiti), pierderea vederii, slbiciune.
Nichel: unt, ngrminte, prelucrarea produselor alimentare, arderea uleiului de
combustibil, grsimi i uleiuri hidrogenate, imitaii de fric, deeuri industriale, margarin,
testarea dispozitivelor nucleare, stridii, vase din oel inoxidabil, ceai, fumul de tutun, semine
i cereale nerafinate, scurtarea legumelor.
Efecte: anorexie, disfuncie renal, apatie, perturbarea metabolismului hormonilor i
cel lipidic febr, hemoragii, dureri de cap, atac de cord, cancer intestinal, scderea tensiunii
arteriale, tremurturi musculare, grea, cancer oral, probleme ale pielii, vrsturi.
Nichelul i compuii si (oxid, carbonat) induc sarcoame la oarece, obolan i
hamster.
Protecia prin alte metale: Prezena unui metal secund poate de fapt s protejeze de
toxicitate. Astfel, de exemplu, magneziu n studii pe animale poate preveni toxicitatea
cadmiului, care induce tumori testiculare. Zincul blocheaz cancerul pulmonar cauzat de
inhalarea continu de cadmiu. Att magneziu ct i manganul au fost eficiente n prevenirea
tumorilor formate la locul de injectare cu nichel la obolani.
De fapt, magneziu are o mare varietate de efecte benefice mpotriva factorilor de risc
de carcinogenez de metale. Avem un alt motiv c magneziul este unul dintre cele mai
importante elemente nutritive i de sntate. Se menioneaz c seleniul este un protecor vital
mpotriva mercurului i are, de asemenea, un puternic efect anti-cancer. n cazul n care
consumul zilnic este de 100 de micrograme sau mai mult, riscul de cancer scade dramatic din
toate cauzele.




74
Chelatarea
Chelatorii de tipul DMPS, DMSA, KELMER i EDTA pot lega metalele grele toxice. n
cazul n care situaia este grav, de exemplu, suprancrcarea cu plumb sau cupru, se
administreaz i.v. acid etildietilamino-tetraacetic (EDTA), ntr-o serie de infuzii la 3 ore
interval.
Din pcate, acest tratament este inadecvat pentru toxicitatea dat de mercur. Exist
trei strategii eficiente pentru mercur, fiecare cu argumente pro i contra: 6 - 10 perfuzii i.v. din
DMPS, 3 mgms pe kg de greutate corporal. Acestea necesit experien calificat, dar fcut
n mod corespunztor i la doza corect, nu au practic nici un efect secundar. Riscul teoretic
este faptul c DMPS traverseaz bariera hemato-encefalic i poate duce mercur n esuturi
neurologice, n cazul cel mai nedorit. Efectele secundare pot fi neplcute i acest lucru pare a
fi metoda cea mai puin recomandabil.
DMSA oral, 30 mg per kg greutate corporal. Durata depinde de rspuns, dar n
aproximativ de 6 - 10 sptmni. Efectele secundare pot fi neplcute, dar pot fi ameliorate
prin reducerea dozei. n general, copiii tolereaz mult mai bine decat adultii DMSA.
Exist controverse c dac EDTA elimin mercurul. Pentru tot felul de motive
tiinifice, care au de a face cu valena i ncrctura electric, acesta nu ar trebui s
funcioneze bine. Dar Dr. Gary Gordon cere: prin urin recent i testarea esuturilor, n care
se poate observa c fost excretat dup regimul de chelare oral (care include, desigur, mult
mai mult dect simpla EDTA). Terapia auto-administrat nu este recomandat. Dar Chlorella
este un atractor mare de metale grele, este sigur i din belug, mai puin usturoiul i
coriandru.
O dat ce sursa de contaminare este eliminat, dac corpul are o bun capacitate de
de-toxifiere, metale grele vor disprea treptat i lent din esuturi, printr-un proces numit
leiere sau, mai exact, de epurare.

Crima prin otrvire cu metale grele
S-au raportat numeroase cazuri de sinucidere prin nghiire de mercur de la
termometre. Dureri atroce durau i o sptmn, iar prognosticul era nefavorabil. De
asemenea, au fost semnalate crime comise cu ajutorul clorurii mercurice. Toxicitatea
mercurului de la vaccinri care conin thimerosal:

Thimerosal, structura

Aceasta este una dintre problemele de actualitate privind toxicitatea mercurului. Este
problema care ctig teren n mod constant n opinia public n legtur cu autismul i
vaccinrile. Un fapt puin cunoscut nainte de campaniile de sensibilizare a opiniei publice:
vaccinuri conin mercur drept conservant (timerosal). n 1999, la Centrul pentru Controlul si
Prevenirea Bolilor (CDC) s-a solicitat eliminarea mercurului din vaccinuri. Paradoxal, CDC
continu s recomande n pojar, oreion i rubeol.

75
Copiii mici sunt deosebit de sensibili la toxicitatea mercurului i statisticile au artat
c de la introducerea de thimerosal n vaccinuri n 1990 a existat o cretere de 10 ori a
incidenei autismului. Muli prini spun, de asemenea, c debutul de autist la copiii lor este n
termen de zile de la vaccinare. Surprinzator, 40% dintre prinii copiilor cu autism spun c
vaccinurile cauzeaz boli.
Efectul mercurului asupra sistemului nervos central este bine documentat. Expuneri
excesive prenatale duc la funcii ntrziate de dezvoltare, inclusiv mersul pe jos, dezvoltarea
vorbirii este amnat i este afectat auzul.
Simptomele de otrvire cu mercur: dureri abdominale, gastroenterit, grea,
salivaie excesiv, slaba coordonare, pierderea poftei de mncare i pierderea n greutate,
anurie (producia de urin se oprete), i nefrita (boala de rinichi). Pe termen lung, expunerea
la substante toxice poate duce, de asemenea, la infertilitate la barbati si femei. Toxicitatea
afecteaz, de asemenea, rezultatul sarcinii i, de asemenea, a fost legat cu boli
cardiovasculare. ntr-un studiu de peste 2000 de oameni, ridicat de mercur coninut de pr a
fost legat cu un risc crescut pentru boli de inima si accident vascular cerebral.
n tineri, mercur toxicitate, de obicei, duce la dificulti de nvare din copilrie (a se vedea
mai sus discuia asupra autismului).

Cercetri privind efectul otrvitor al metalelor
Plumbul
Plumbul este un element care se gsete n mod natural n scoara terestr, utilizat de
oameni nc de la nceputurile civilizaiei. Ca urmare a activitilor umane, plumbul a fost larg
rspndit n mediu, regsindu-se n aer, ap, sol, plante, animale, alimente i diverse
construcii.
Otrvirile cu plumb de proporii epidemice au fost raportate pe toat durata mileniului
trecut, un exemplu constituind oraul Devon n 1738 prin cidrul contaminat cu Pb.
n natur plumbul se gsete mai ales sub form de sulfuri, dar i sub form de
carbonai, sulfai i cromai. n zonele rurale necontaminate concentraia plumbului n sol este
mai mic de 50 mg/kg. Ca urmare a polurii antropogene concentraia acestuia n sol poate
atinge 1000 mg/kg sol. Sursele de contaminare ale solului sunt utilizarea deeurilor ca
fertilizani, emisiile industriale i auto.
Transferul sol-plant este relativ sczut, iar transferul de la rdcini n alte organe ale
plantei este limitat. Concentraia mare de plumb n plante este n majoritatea cazurilor rezultatul
contaminrii solului sau prin depunerea de praf pe legumele cu frunze.
Nivelul plumbului n apa de but i n apele de adncime n majoritatea rilor europene
este sub 20/L. Concentraii mai mari pot fi observate n zone cu ap moale i n cazul utilzrii
evilor din plumb. Apa potabil care conine carbonai acizi de calciu i magneziu i sulfai
solubilizeaz plumbul cnd este fierbinte sau cnd a stat n evi mai mult timp. Fierberea apei nu
va ndeprta plumbul, dar ndeprtarea apei care staioneaz pe evi prin lsarea apei s curg
cteva minute nainte de utilizare i utilizarea apei reci pentru but reduce expunerea.

76
Concentraia plumbului n apa mrilor este mai mic dect n apele dulci fiind ntre
0,003-0,4g/L. Plumbul se gsete sub diferite forme n apa marin i apa dulce, iar majoritatea
plumbului gsit n peti este legat de proteine.
Limita admis n prezent este de 50 g/L ap i va fi progresiv redus la 10 g/L.
Alimentele pot fi contaminate cu plumb i n timpul produciei, procesrii i ambalrii.
n timpul produciei, n afar de aportul de plumb din mediul poluat (sol, ap, aer), mai
ales n zonele industrializate i cu circulaie intens a autovehiculelor, acest metal mai poate
ajunge n produsele vegetale prin aplicarea de pesticide pe baz de plumb, cum este arseniatul de
plumb.
Toxicitatea plumbului. Toxicitatea plumbului depinde de numeroi factori, cum ar fi
vrsta, nutriia, starea fiziologic, doza, mrimea particulelor, forma sub care se gsete
(organic sau anorganic), calea de ptrundere.
Majoritatea animalelor de ferm tolereaz aproximativ 30 mg Pb/kg hran, cu excepia
oilor, care se pare c tolereaz doar 10 mg Pb /kg hran.
Plumbul anorganic poate ptrunde n organism pe cale oral, respiratorie sau dermic.
Studiile pe animale au artat c plumbul este bine absorbit pe cale transdermic.
Rata i proporia absorbiei gastrointestinale a plumbului ingerat sunt influenate de
starea fiziologic a individului expus i caracterele fizico-chimice ale plumbului ingerat.
Absorbia poate fi influenat i de cantitatea de plumb ingerat.
Aportul calciului prin raie pare s influeneze i el absorbia plumbului. A fost
observat o corelaie invers ntre aportul de calciu i concentraia plumbului n snge la copii,
dar i la aduli. n studiile experimentale pe obolani s-a demonstrat depleia crescut a calciului
din raie n caren de vitamina D.
Perioada de njumtire a plumbului n snge este de aproximativ 30 de zile. Plumbul
se gsete aproape n exclusivitate n hematii (99%). Cea mai mare parte a plumbului
din hematii este legat de proteinele din celul i mai puin de membrana eritrocitar.
Aproximativ 40-75% din plumbul din plasm este legat de proteinele plasmatice, dintre care
albuminele par s fie principalii liganzi. Plumbul se mai poate lega i de globuline. Plumbul din
ser care nu este legat de proteine se gsete mai ales sub form de compleci cu compui
sulfhidril cu greutate molecular mic i cu ali liganzi.
La aduli, aproximativ 94% din plumb se gsete n oase. La copii acest procent este de
doar 73%. Concentraia plumbului din oase crete cu vrsta, ceea ce indic un turnover relativ
lent al plumbului n osul adult. Acest depozit mare de plumb n osul adult poate surveni pentru
meninerea nivelului sangvin de plumb mult timp dup ce expunerea a ncetat.
Plumbul nu este distribuit uniform n oase, ci se acumuleaz n acele regiuni ale osului,
n care procesul de calcifiere este mai activ la momentul expunerii. La copii, plumbul este
depozitat pe osul la trabecular, iar la aduli, att n osul trabecular, ct i cel cortical. Dei la
maturitate majoritatea plumbului din organism este depozitat n oase i dini, plumbul din
regiunile corticale ale oaselor este parial labil i este eliberat n fluxul sanguin i esuturile moi
prin difuzie i resorbie. Gestaia, alptarea, osteoporoz postmenopauzal determin creterea
nivelelor sanguine ale plumbului, ca rezultat al mobilizrii acestuia din depozitele osoase.

77
Metabolismul plumbului anorganic const n formarea unor compleci cu o mare
varietate de liganzi proteici i neproteici. Fiind un cation divalent, capacitatea mare de legare a
acestuia la proteinele sulfhidril creeaz interferene cu enzime i proteine structurale. Cea mai
cunoscut este interferena cu calea de sintez a hemului i scderea subsecvent a rezervelor de
hem din organism sunt unele din principalele cauze ale patologiei determinate de plumb. Cnd
nivelul plumbemiei depete 20 de g/dl, activitatea ALAD este inhibat n proporie de 50 %.
Totui activitatea ALAD poate fi blocat i n porfirie, ciroz hepatic i alcoolism. n plus
nivelele ALAD nu pot fi utilizate pentru diagnosticarea gradului de toxicitate al plumbului,
deoarece corelaia dintre plumbemie i ALAD nu este liniar. Inhibiia ALAD previne
concentrarea acidului aminolevulinic n profobilinogen, inhibnd ncorporarea fierului n inelul
protoporfirinic.

acid aminolevulinic Protofibilinogen

Ca o consecin a acestor modificri n activitatea enzimelor se constat anemie i
oboseal. n plus, crete nivelul circulator al ALA, ceea ce duce la scderea eliberrii GABA n
sistemul nervos central, ceea ce poate explica tulburrile comportamentale observate n
intoxicaia cu plumb.
Plumbul inhib i 5- pirimidin- nucleotidaza din eritrocite ceea ce determin acumularea
de pirimidinnucleotide n eritrocite sau reticulocite i distrucia subsecvent a acestor celule.
Plumbul anorganic sau plumbul alchil este activ metabolizat n ficat prin dealchilare
oxidativ catalizat de citocromul P
450
, rezultnd trietil- i trimetil-plumb, metabolii puternic
neurotoxici.
Indiferent de calea de ptrundere, plumbul absorbit este eliminat n primul rnd prin
urin i fecale. Mecanismul eliminrii prin fecale a plumbului absorbit nu este bine neles;
totui, cile de eliminare pot include secreia n bil, sucul gastric i saliv, reprezentnd
aproximativ o treime din excreia total a plumbului absorbit. Alte ci de eliminare sunt
reprezentate de transpiraie, lapte, pr i unghii. n cazul animalelor, eliminarea prin lapte i ou
este mic i devine semnificativ numai la aport mare.
Toxicitatea plumbului. Plumbul este un toxic cumulativ, care produce numeroase
efecte toxice, dar n special n sistemul hematopoetic, sistemul nervos i n rinichi.
Simptomele iniiale, timpurii ale intoxicaiei acute cu plumb, ntlnite la muncitorii
expui profesional sau la indivizi expui la nivele ridicate de plumb, sunt cele gastrointestinale i

78
anume colica de plumb. Aceasta este caracterizat de combinaia urmtoarelor simptome: dureri
abdominale, constipaie, crampe, vom, grea, anorexie i scderi n greutate.
Expunerea la plumb determin anemie microcitar i hipocrom i uoar anemie
hemolitic. Aceasta este determinat att de inhibarea sintezei hemului, ct i de scurtarea
duratei de via a eritrocitelor. Plumbul interfer cu sinteza hemului prin alterarea activitii
dehidrazei acidului delta-aminolevulinic (ALAD) i a ferochelatazei. Ca o consecin a acestor
modificri, biosinteza hemului este sczut i activitatea enzimei corespunztoare, delta-
aminolevulin sintetaza (ALAS), care este inhibat prin feedback de ctre hem, este ulterior
crescut.
Rezultatele finale ale acestor modificri n activitatea enzimelor sunt creterea
porfirinelor urinare, coproporfirinelor i a acidului delta-aminolevulinic, creterea nivelului
sanguin i plasmatic al ALA i creterea protoporfirinelor eritrocitare.
Modificrile hematologice asociate plumbului sunt considerate reversibile.
Efectul plumbului asupra sistemului nervos. Avnd n vedere posibila expunere nc
din stadiul prenatal prin placent i apoi prin lapte sau apa utilizat pentru refacerea laptelui
praf, simptomele neurotoxice pot fi observate nc de la vrste mici. Deoarece plumbul
afecteaz procesele de dezvoltare nervoas ntreruperea acestor procese poate conduce la
alterri permanente ale funciei cerbrale.
Una dintre cauzele majore ale efectelor neurotoxice ale plumbului este faptul c este n
competiie cu calciul sau mimeaz aciunea acestuia. La concentraii picomolare, plumbul este n
competiie cu calciul pentru situsurile de legare din cerebel ale fosfochinazei C. Acest proces
afecteaz intrarea n celule a calciului i funcionarea neuronilor, alternd structura
mitocondrial, ceea ce duce la inhibarea respiraiei celulare, alterarea reaciilor bazate pe calciu
i transmiterea influxului nervos. Aceasta conduce la creterea eliberrii spontane a
neurotransmitorilor i inhibarea eliberrii controlate stimulate a acestora. Acest tip de toxicitate
afecteaz n principal sistemul nervos n dezvoltare a fetusului, cruia i lipsesc proteinele care
leag plumbul din astrogliile mature, care, n mod normal, chelateaz i elimin plumbul.
Plumbul este toxic pentru astrocitele imature i interfereaz cu formarea mielinei, ambele
procese fiind implicate n formarea barierei hematoencefalice. Cnd aceast barier este lezat,
n SNC ptrund proteine moleculare ca albuminele, determinnd edem, presiune intracranial
crescut i encefalopatie.
Simptomele timpurii ale neurotoxicitii plumbului, att la copii, ct i la aduli, includ
iritabilitatea, durerea de cap, perioad de atenie sczut, pierderea memoriei i atenuarea strii
cognitive. Pe msur ce expunerea continu, se constat simptome de impulsivitate, inabilitate de
a urma anumite direcii, dorin de joac sczut, IQ sczut i atenie sczut, dizabiliti de
citire i putere de concentrare la examene sczut. Astfel de simptome au fost constatate la
nivele sangvine ale plumbului ntre 10 35 g/dl.
Cel mai grav efect la aduli este encefalopatia, care prezint ca simptome iniiale
slbiciunea, iritabilitatea, perioad de atenie redus, durerile de cap, tremurul muscular,
pierderea memoriei i halucinaii. Aceste stri se pot nruti, ajungndu-se la delir, convulsii,
paralizie, com i moarte. Astfel de simptome pot fi ntlnite la concentraii ale plumbului
cuprinse ntre 50 300 g/dl.

79
Efecte musculo-scheletice. La persoanele expuse la cantiti mari de plumb, fie
profesional, fie ca urmare a consumului de whisky contaminat cu plumb se constat
slbiciune muscular, crampe i dureri articulare.
ntr-un studiu realizat de Campbell i colab. n 2004 n ceea ce privete expunerea la
plumb i densitatea osoas, la copii s-a constatat, contrar ateptrilor, c indivizii cu expunere
cumulativ mare au prezentat densitate osoas mai mare dect n expunere mai mic. Autorii
studiului au emis ipoteza c plumbul accelereaz maturarea osoas prin inhibarea proteinelor
care reduc rata de maturare a condrocitelor n formarea endocondral osoas. Un vrf sczut al
densitii minerale osoase atins n faza de adult tnr poate predispune la osteoporoz mai trziu.
Studiile realizate pe animale n ceea ce privete expunerea oral la plumb i creterea
oaselor i metabolizarea la animale indic faptul c aportul oral de plumb tulbur creterea
osoas i remodelarea, fapt indicat de densitatea osoas sczut i coninutul n calciu al osului,
scderea volumului trabecular osos, activitatea de resorbie crescut i morfologie alterat a
creterii lamelare. S-a mai constatat c plumbul ntrzie mineralizarea dinilor, rezultnd un
smal mai puin dur i rat de erupie sczut a dinilor.
Efecte renale. Nefrotoxicitatea plumbului este caracterizat prin nefropatii tubulare
proximale, glomerulare, scleroze i fibroze interstiiale. La oamenii expui la exces de plumb
s-a constatat proteinurie, transport deficitar al anionilor organici i ai glucozei i rat de
filtrare glomerular sczut.
Estimri recente ale aportului de plumb bazate pe date din diferite ri europene indic
valori cuprinse ntre 0,001-0,008 mg/kg greutate corporal/sptmn pentru aduli i pn la
0,019 mg/kg pentru copii. Contribuia fiecrui tip de aliment la aportul de plumb a fost calculat
de autoritile australiene. Dei aceasta pare s nu corespund cu raia european, calculul arat
c laptele contribuie cu 16% n raia copiilor, iar carnea cu aproximativ 5-7% din contaminarea
raiei adulilor.
Limitele admise sunt reglementate de organismele abilitate din fiecare ar. Astfel,
pentru aer, EPA (Environmental Protection Agency,SUA) recomand maxim 1,5 g/m
3
pentru
plumb i compuii si, iar pentru ap 0,015 mg Pb/l.
FDA recomand ca aditivii alimentari s nu conin concentraii mai mari de 10 ppm
Pb, iar apa de but mbuteliat 0,005 mg/l. Limita permis de expunere profesional este de 0,05
mg/m
3
.
Arsenul
Arsenul este dificil de caracterizat n particular ca un singur element deoarece chimia
lui este att de complex i sunt muli compui diferii ai arsenului. Arsenul poate fi trivalent
sau pentavalent i este larg rspndit n natur. Cei mai comuni compui trivaleni ai arsenului
sunt trioxidul de arsen, arsenitul de sodiu i tricloritul de arsen. Compuii anorganici
pentavalenti sunt pentaoxidul de arsen, acid arsenic i arsenaii precum arsenatul de plumb
sau arsenatul de calciu.
Arsenul este ndeosebi transportat n mediu prin ap i prin aer prin intermediul
contaminrii industriale i poate varia ntre cteva nanograme i cteva zeci dintr-un microgram
pe metru cub. Acesta se leag covalent cu majoritatea nemetalelor (n special cu oxigenul i
sulful), dar i cu metalele (de exemplu cu calciul i plumbul).

80
Intoxicaiile cu arsen pot avea urmtoarele posibile surse:
1.Surse naturale: soluri care conin minereuri cu arsen i ape de adncime (n special
cele din apropierea zonelor cu activitate geotermal). Arsenul este prezent n toate tipurile de
soluri, nivelul mediu fiind de 5-6 mg/kg, acesta putnd ns varia considerabil. Concentraii
variabile ale arsenului pot fi ntlnite n ruri, lacuri i apa de but. Valori foarte ridicate au fost
gsite n apele de adncime cu activitate termal i cu arsen n roci. Nivelul mediu al arsenului n
apele de but i n cele de adncime n Germania este de sub 10 g/l. Concentraiile arsenului n
apele marine sunt, n general ntre 1 i 8 g/l.
2. Produse comerciale: conservani ai lemnului, insecticide, erbicide, fungicide, vopsele
i pigmeni.
3. Alimente: vin (struguri stropii cu pesticide pe baz de arsen), tutun, peti i fructe de
mare (n special bivalve i peti care triesc i se hrnesc cu sediment, alge marine) i produse de
origine animal provenite de la animale intoxicate cu arsen. Coninutul de arsen al plantelor este
determinat de expunerea la arsen via sol, ap, aer, fertilizani i alte produse chimice, originea
geologic a solului i specie, partea din plant i vrsta acesteia. Concentraiile pot diferi, iar
plantele care cresc pe terenurile bogate n arsen pot acumula concentraii mult mai mari.
Majoritatea produselor vegetale conin mai puin de 0,3 mg/kg i rareori depesc 1 mg/kg
substan uscat, n timp ce algele marine pot avea concentraii foarte mari de arsen organic (40-
50 mg/kg substan uscat). Pe baza datelor limitate existente pn n prezent, s-a estimat c
procentul de arsen anorganic este de 75% n carne i produse lactate i 65% n cereale.
4. Procese industriale: purificarea gazelor industriale (ndeprtarea sulfului), arderea
combustibililor fosili, arderea lemnului tratat cu conservani pe baz de arsen, producerea de
electronice (componente pentru aparate cu microunde, lasere, diode, celule fotoelectrice,
semiconductori), sticlrie i ceramic, aliaje cu plumb.
5. Terapie: antiparazitare, medicamente (pentru tratarea leucemiei, psoriazisului i
astmului). Unii compui organici ai arsenului (de exemplu acidul arsalanic) au fost utilizai ca i
aditivi furajeri pentru controlul unor boli i mbuntirea creterii greutii corporale la porci i
psri n concentraii de 100 mg/kg furaj, dar utilizarea lor n Europa a fost interzis, nu ns i n
alte ri de pe alte componente.
Toxicitatea arsenului. Toxicitatea compuilor cu arsen este diferit la mamifere, n
funcie de valen, form (anorganic sau organic), starea fizic (gaz, soluie sau pulbere) i
factori ca solubilitatea, mrimea particulelor, rata de absorbie i eliminare i prezena
impuritilor. Arsenul anorganic este n general mai toxic dect cel organic. Totui studiile pe
animale au artat c metil i fenil arsenaii pot produce efecte asupra sntii similare cu cele
produse de arsenul anorganic. Toxicitatea arsenului trivalent este de cteva ori mai mare dect
a arsenului pentavalent, datorit aportului celular mai mare. Arsenul metalic este considerat n
general netoxic, datorit insolubilitii sale n ap i fluidele corpului. Rumegtoarele prezint
semne de toxicitate doar la expunere de 200-300 mg arsen anorganic/kg raie. Porcii hrnii cu
100 mg arsen din acid arsalanic/kg raie prezint apetit redus. Ginile outoare i reduc
consumul de furaje cu pn la 20% cnd sunt hrnite cu o raie care conine 44 mg arsen din
acid 3-nitro-4-fenilarsenic/kg raie. Greutatea oului a fost redus cnd n raie a fost introdus
arsenul sub form de trioxid de arsen, 15 mg/kg raie. Efectele toxice la peti dup expunerea

81
prin raie la concentraii de arsenat ntre 32-160 mg/kg raie includ niveluri crescute ale
metalotioneinelor hepatice, alterri histopatologice ale ficatului i vezicii urinare i rat redus
de cretere. Dimpotriv nu a fost observat nici un efect toxic la petii expui la concentraii de
10 ori mai mari de arsen organic.
Toxicocinetica. Aportul oral zilnic de arsen anorganic a fost estimat ntre 1-20 g iar
de arsen sub toate formele de 40 g. Dintre alimente carnea, petele, fructele de mare, orezul
i ciupercile conin concentraiile cele mai mari de arsen. Petele, fructele de mare i algele
conin arsen sub form de arsenobetain i arsenocolin, produse adesea menionate ca pete
arsenic. Acest arsen prezint toxicitate redus pentru om i este rapid excretat prin urin.
Vinul fcut din struguri stropii cu pesticide pe baz de arsen poate conine cantiti
apreciabile de arsen.
Compuii arsenului ce ptrund n corp pe cale oral sunt absorbii la nivelul tractului
gastrointestinal. Absorbia depinde de forma fizic a compusului, solubilitate, pH-ul gastric,
motilitatea gastrointestinal i biotransformrile microbiene din intestin. Absorbia formelor
solubile la om variaz ntre 60-90%.
Forma arsenului care predomin n aer este cea de trioxid de arsen i n funcie de
mrimea particulelor absorbia va avea loc fie pn n tractul respirator inferior fie pn n cile
respiratorii superioare unde vor rmne particulele pn vor fi nghiite de clearance-ul
mucociliar.
Dup absorbia din plmni sau tractul gastrointestinal, arsenul se acumuleaz iniial n
ficat, splin, rinichi, plmni i tractul gastrointestinal. Dup 2-4 sptmni dup ce expunerea
nceteaz majoritatea arsenului rmas n organism este regsit n esuturile bogate n cheratin ca
prul, pielea i unghiile. La om a fost semnalat i transferul placentar.
Metabolizarea. In vivo au loc reacii de oxido-reducere rezultnd interconversia
arsenului pentavalent i trivalent, ngreunnd distincia dintre aceste dou categorii de
compui arsenici anorganici. O parte din arsenul trivalent este metilat, mai ales n ficat, la
acid metilarsenic i acid dimetilarsenic. Acest proces reprezint principalul mecanism de
detoxifiere al organismului deoarece produii care rezult sunt mai uor de excretat i mai
puin toxici. La doze mari de arsen ns eficiena acestui proces scade deoarece se ajunge la
depirea capacitii de metilare a ficatului iar arsenul ajunge s fie reinut de ctre esuturile
moi. Acest lucru poate fi mbuntit i anume prin tratarea cu cantiti mici de arsen pe o
perioad lung de timp se mrete eficiena metilrii la aplicarea subsecvent a unei cantiti
mari de arsen. Aceasta a fost studiat pe culturi celulare i arat c procesul de metilare este
unul inductibil. Arsenul din petele arsenic nu este metabolizat in vivo, ci este rapid
excretat nemodificat prin urin.
Eliminarea. Studiile arat c 6 pn la 9 procente din As administrat oral este
eliminat prin fecale, indicnd absorbia aproape complet din tractul gastrointestinal. Excreia
arsenului absorbit este n principal prin urin. Viaa biologic a arsenului anorganic ingerat
este de aproape 10 ore i 50 pn la 80 procente excretat n aproape 3 zile. Acesta are o
predilecie pentru piele i este excretat prin descuamarea pielii i prin transpiraie n special n
perioadele de transpiraie abundent. Se concentreaz de asemenea n unghii i pr. Arsenul n
unghii produce linii Mee (benzi albe transversale pe unghii) aprnd aproape dup 6

82
sptmni dup apariia simptomelor toxicitii. Timpul expunerii poate fi estimat prin
msurarea distanei de la linie pn la baza unghiei i rata creterii unghiei care este de
aproape 0,3 cm pe lun sau 0,1 mm pe zi.
Transferul placentar a fost artat la hamsterii injectai intravenos cu doze mari de
arsenat de sodiu i studiile nivelelor de arsen din esut la fetui i nou nscui din Japonia arat c
totalul cantitii de arsen din ft tinde s creasc n timpul gestaiei indicnd transfer placentar.
Toxicitatea arsenului prezint dou mecanisme prin care afecteaz respiraia celular.
Astfel ntr-un prim mecanism arsenul se leag la gruprile sulfhidril blocnd enzimele
sulfhidrice. Ca rezultat, sunt inhibate cile oxidrii piruvat i succinat i ciclul acidului
tricarboxilic, mpiedicnd gluconeogeneza i reducnd fosforilarea oxidativ. De acest efect este
rspunztor arsenul trivalent.
Cel de-al doilea mecanism implic substituirea arsenului pentavalent cu fosforul n
multe reacii biochimice. nlocuirea anionului stabil de fosfor n fosfat cu anionul arsen
pentavalent mai puin stabil duce la hidroliza rapid a legturilor bogate n energie n compui ca
ATP. Aceasta duce la pierderea legturilor nalt energetice fosfat, decuplnd fosforilarea
oxidativ.
Arsenul gazos, spre deosebire de celelalte forme, produce un sindrom hemolitic. Dup
inhalare, arsenul se fixeaz pe hematii producnd leziuni celulare-membranare ireversibile. n
doze mici, arsenul este un hemolitic puternic, determinnd hemoliz intravascular dependent
de doz. n doze mari, arsenul produce citotoxicitate direct multipl.
Dup ingerare i absorbie, arsenul produce rni celulelor din sistemul nervos, vaselor
de snge, ficatului, rinichilor i altor esuturi.
Efecte celulare. Este cunoscut de civa ani faptul c arsenul sub forma compuilor
trivaleni reprezint principala form toxic i compuii pentavaleni au un efect foarte mic
asupra activitii enzimelor. La expunerea la arsen s-a descoperit c sunt alterate un numr de
proteine coninnd grupaea sulfhidril i un numr de sisteme enzimatice. Unele dintre acestea
pot fi refcute prin adugare de monotioli cum ar fi glutationul; enzimele care conin dou
gripri tiolice pot fi refcute cu ajutorul ditiolilor cum ar fi 2,3-dimercaptopropanol dar nu i
monotioli.
Arsenul afecteaz enzimele mitocondriale i mpiedic respiraia esuturilor care pare s
fie legat de toxicitatea celular a arsenului. Mitocondria acumuleaz arsen i respiraia mediat
de NAD este n mod special sensibil la arsen. Mitchell a propus c arsenul inhib funciile
legate de energie ale mitocondriei n dou moduri: competiia cu fosfat n timpul fosforilrii
oxidative i inhibiia reducerii energetice a NAD.
La nivelul tractului gastrointestinal, leziunile produse de arsen determin creterea
permeabilitii capilarelor, ducnd la pierderea de fluid i hipotensiune. Inflamarea i necroza
progresiv a mucoasei i submucoasei stomacului i intestinuli pot duce la perforarea peretelui
intestinal i cu manifestri de gastroenterit hemoragic.
Efecte renale i hepatice. Intoxicaia cu arsen poate duce, de asemenea i la toxicitate
hepatic, incluznd hepatit toxic i niveluri ridicate ale enzimelor hepatice. Din necropsiile
copiilor japonezi intoxicai cu lapte contaminat cu arsen au fost relevate necroze hepatice

83
hemoragice i degenerescen gras a ficatului. Aportul cronic de arsen poate duce la
hipertensiune portal cirotic.
Toxicitatea sistemic produs n intoxicaia acut cu arsen poate fi nsoit de necroza
tubular acut i insuficien renal acut. Cauzele rnilor pot fi ocul hipotensiv, rnirile
hemoglobinurice sau mioglobinurice tubulare sau efectele directe ale arsenului asupra celulelor
tubulilor. Afeciunile glomerulare pot determina proteinurie.
Intoxicaia acut poate determina fisuri capilare difuze, care conduc la vasodilataie
generalizat, transudaii ale plasmei, hipotensiune i oc.
Ingestia cronic a arsenului prin apa de but a condus la modificri vasculare periferice
pronunate. Evidenele epidemiologice au indicat c expunerea cronic la arsen este asociat cu
spasmul vascular i insuficien vascular periferic.
Intoxicaia acut cu arsen este legat i de toxicitatea neurologic manifestat prin
neuropatie periferic, implicnd nervii senzitivi i motori. Efectele senzoriale, ca disestezia
dureroas, apar devreme i pot predomina n intoxicaia moderat, n timp ce n intoxicaia mai
sever apare slbiciunea progresiv i paraliziile. Nervii cranieni sunt rar afectai, chiar i n
intoxicaiile acute.
Neuropatia este datorat distruciilor axonilor neuronali. Recuperarea dup neuropatiile
induse la expunerea cronic la arsen este, n general, lent, durnd uneori ani, fr s se produc
recuperarea complet. Studiile realizate asupra copiilor japonezi care au consumat cronic lapte
contaminat cu arsen, au relevat o inciden crescut a pierderii auzului, retardare mental,
epilepsie i alte afeciuni ale creierului.
Expunerea oamenilor la arsen determin i apariia afeciunilor dermatologice, cele mai
frecvente fiind hiperpigmentarea, hipercheratoza i cancerul de piele. Petele hiperpigmentate pot
s apar pe tot corpul, dar apar mai ales pe pleoape, tmple, axile, gt i regiunea inghinal. n
cazurile severe, pigmentaiile se extind pe piept, spate i abdomen. Modificrile pigmentare au
fost observate la oamenii expui cronic la mai mult de 400 ppb arsen prin apa de but.
Hipercheratoza arsenioas apare mai frecvent pe palme i tlpi.
Att intoxicaia acut ct i cea cronic cu arsen pot afecta sistemul hematopoetic. Se
poate produce supresarea mduvei osoase cu pancitopenie.
Anemia i leucocitopenia sunt frecvente n intoxicaia cronic cu arsen .
Pielea este organul critic al toxicitii arsenului i o varietate de leziuni ale pielii au fost
asociate cu intoxicaia cu arsen. Cancerul de piele datorat expunerii la arsen a fost prima dat
raportat de un terapeut englez, Sir Jonathan Hutchinson la persoanele cu o ndelungat ingerare a
soluiei Fowler.
Simptomatologie. Simptomele apar de obicei la o or dup ingestie, dar pot ntrzia
cteva ore. Mirosul aliaceu al respiraiei i al fecalelor, pot s apar la pacienii cu intoxicaii
grave. n intoxicaia cu arsen predominante sunt efectele gastrointestinale, ntre care voma,
durerile abdominale i diareea apoas sau hemoragic, sunt cele mai frecvente. Printre
efectele gastrointestinale se ntlnesc i inflamaia, formarea de vezicule i eventual
desprinderi ale mucoaselor din gur, faringe i esofag. Acestea sunt rezultatul aciunii unui
metabolit arsenios asupra vaselor de snge, determinnd vasodilataie i permeabilitate
capilar crescut. Afectat n intoxicaia acut este i sistemul nervos central, unde simptomele

84
care apar sunt dureri de cap, stare de disconfort, somnolen i confuzie. Simptomele pot
progresa i includ slbiciunea muscular i spasme, hipotermia, letargia, delirul, coma i
convulsiile.
Afeciunile renale se manifest sub form de proteinurie, hematurie, glucozurie, cilindri
urinari i, n intoxicaiile severe, necroze tubulare.
Manifestrile cardiovasculare includ ocul, cianoza i aritmiile cardiace, datorate
aciunii toxice directe i tulburrilor electrolitice. Afeciunile hepatice pot fi manifestate prin
niveluri enzimatice ridicate i icter, iar afectarea esuturilor hemato-formatoare poate determina
anemie, leococitopenie i trombocitopenie.
Moartea survine, de obicei, dup 1-3 zile de la debutul simptomelor, adesea ca rezultat
al insuficienei circulatorii i renale. Pacienii care supravieuiesc prezint parestezii dureroase,
furnicturi i amoreli n mini i picioare, slbiciune muscular i spasme.
Hiperpigmentarea i hipercheratoza sunt semne tipice ale intoxicaiei cu arsen. Alte
semne ale intoxicaiei cronice cu arsen cuprind edeme subcutanate ale feei, pleoapelor i
gleznelor, stomatite, striaii albe pe unghii i uneori cderea unghiilor sau prului. Uneori
papulele hipercheratozice sufer transformri maligne. La fel de frecvente sunt ns i
simptomele neurologice. Printre ele se afl i neuropatia periferic ce se manifest prin
parestezie, durere, anestezie, pareze i ataxie. Pot debuta adesea cu simptome senzitive n
extremitile inferioare i progresa la slbiciune muscular i, eventual, paralizii i atrofie
muscular. Se poate produce i encefalopatia, nu att de comun ns, manifestat prin tulburri
de vedere i tulburri mentale, foarte asemntoare cu cele ntlnite n deficiena de tiamin.




Efecte cele mai tardive ale aportului cronic de arsen sunt cancerul de piele, de pulmoni
i de vezic urinar.
Expertiza produselor alimentare i msuri pentru protecia consumatorului
n cazul sacrificrilor de necesitate ale animalelor intoxicate cu arsen se confisc
organele, tubul digestiv, capul i mamela, indiferent dac sunt sau nu corespunztoare
organoleptic. Carnea va fi supus examenului toxicologic de laborator, iar cea care depete
limitele maxime admise i prezint modificri organoleptice se confisc. Animalele de talie mic
intoxicate cu arsen se vor exclude de la consum.
La animalele mari nu se permite consumul ndelungat deoarece exist riscul acumulrii
lente de arsen i declanarea intoxicaiilor la om.
Laptele provenit de la vacile intoxicate, cu evoluie subacut sau cronic trebuie retras
din consum uman cel puin 20 de zile, deoarece laptele este o cale de eliminare important pentru
arsen. Atunci cnd conine doar urme neglijabile de arsen, laptele se dirijeaz spre fabricarea
Tiamina

85
untului. Oule se vor supune de asemenea analizelor de laborator, excluzndu-se din consum
cele care depesc limitele maxime admise.

Mercurul
Niciun alt metal nu ilustreaz mai bine diversitatea efectelor cauzate de diferitele forme
biochimice. La baza caracteristicilor toxicologice sunt 3 forme ale mercurului: elemental,
anorganic i organic. Sursa major de mercur provine din degazarea natural a crustei
pmntului. Mercurul metalic din atmosfer reprezint principala cale din transportul global
al mercurului.
Toxicocinetica. Toxicitatea diverselor forme sau sruri ale mercurului este dat de
mercurul cationic pe cnd solubilitatea, biotranformarea i distribuia n esuturi sunt
influenate de starea de valen i de componenta anionic. Mercurul metalic sau elemental
volatilizeaz la temperaturi ambientale i majoritatea expunerilor de la oameni se fac prin
inhalare. Vaporii de mercur difuzeaz de-a lungul membranei alveolare i este liposolubil
nct are o afinitate pentru celulele roii i pentru sistemul nervos central. Mercurul metalic
poate fi inghiit dintr-un termometru spart i este absorbit foarte lent de tractul gastrointestinal
i este deseori considerat a nu avea vreo consecin toxic.
Srurile de mercur anorganic pot fi divalente (mercurice) i monovalente (mercuroase).
Absorbia gastrointestinal a srurilor de mercur anorganic din hran reprezint mai puin de
15% la oareci i aproximativ 7% ntr-un studiu la oameni voluntari pe cnd absorbia
metilmercurului este de ordinul a 90-95%. Distribuia ntre celulele roii i plasm difer de
asemenea.
Rinichii conin cea mai mare concentraie de mercur ca urmare a expunerii la srurile
anorganice ale mercurului i mercur vapori, pe cnd mercurul organic are o afinitate deosebit
pentru creier, n special pentru cortexul posterior. Cu toate acestea mercurul sub form de vapori
are o mai mare predilecie pentru sistemul nervos central dect are mercurul anorganic dar mai
mic dect mercurul organic.
Excreia mercurului din organism se face prin intermediul urinei sau fecalelor, n funcie
de specia de mercur, doz i timpul de expunere. Expunerea la vapori de mercur este urmat de
eliminarea unei pri mici prin expiraie, dar excreia reprezint partea major i este
predominant iniial dup expunerea la mercur anorganic. Excreia renal crete cu timpul.
Aproximativ 90% din metilmercur este excretat dup expunerea acut sau cronic i nu se
modific cu timpul.
Toate formele mercurului traverseaz placenta ajungnd la ft. Preluarea mercurului de
ctre ft la obolani probabil datorit liposolubilitii este de 10-40 de ori mai mare dect
absorbia sa dup expunerea la srurile anorganice. Concentraia mercurului n fetus, dup
expunerea la compuii alchil mercurici este de 2 ori mai mare fa de cea gsit n esutul
matern, iar nivelul de metilmercurului n celulele roii fetale este cu 30% mai mare dect n
celulele roii materne. Gradientul fetal-matern pozitiv i concentraia crescut a mercurului n
celulele roii ale ftului mresc toxicitatea fetal la mercur n special dup expunereala alchil
mercur. Cu toate c laptele matern poate conine doar 5% din concentraia mercurului a sngelui
matern expunerea neonatal la mercur poate fi mrit prin alptare.

86
Transformarea metabolic i excreia
Mercurul elemental este oxidat la mercur divalent dup absorbia la esuturi n
organism, mediat de catalaze. Vaporii de mercur inhalai i absorbii de celulele roii sunt
transformai n mercur divalent dar o poriune este de asemenea transportat ca mercur metalic la
mai multe esuturi distale, n mod particular creierul unde se pot produce biotransformri.
Similar o fraciune din mercurul metalic absorbit poate fi transportat prin placent pn la ft.
Mercurul oxidat divalent este apoi acumulat de aceste esuturi.
Alchilmercurul este de asemenea supus biotranformrii la compui mercurici divaleni
n esuturi prin clivarea legturii carbon-mercur. Nu este nici o dovad a formrii nici unei forme
organice a mercurului de ctre esuturile mamare. Compuii aromatici sunt convertii la mercur
anorganic mai rapid dect cel mai scurt lan al compuilor alchil. n situaiile n care mercurul
organic este mai rapid absorbit dect cel anorganic, crescnd rata biotransformrii va scdea rata
de excreie. Fenil i metoxietil mercurul sunt excretate cam cu aceeai vitez ca i cel anorganic
pe cnd excreia metil mercurului este mai lent.
Metabolismul celular
n interiorul celulelor, mercurul se poate lega de diferite sisteme enzimatice printre care
i cele ale microzomilor i ale mitocondriei producnd afectarea nespecific a celulelor i chiar
moartea lor. Are o afinitate particular pentru liganzii ce conin grupri sulfhidril. n celulele din
ficat metil mercurul formeaz compui compleci solubili cu cisteina i glutationul care sunt
secretate n bil i reabsorbite din tractul gastrointestinal.
Vaporii de mercur
Inhalarea vaporilor de mercur poate produce o bronit acut i coroziv, iar dac nu
produce moartea poate fi asociat cu simptome ale efectelor asupra sistemului nervos central
cum ar fi tremurul sau excitabilitatea crescut.
Efectele majore ce apar la expunerea cronic la vaporii de mercur sunt la nivelul
sistemului nervos central. Semnele sunt nonspecifice i au fost denumite sindromul astenic
vegetativ sau micromercurialism. Identificarea sindromului necesit simptome neuroastenice
i trei sau mai multe dintre urmtoarele diagnosticri clinice: tremur, mrirea tiroidei, puls labil,
tahicardie, gingivit, schimbri hematologice sau excreia mrit a mercurului n urin. O dat cu
expunerea crescut, simptomele devin caracteristice ncepnd cu tremurul intenionat al
muchilor care ndeplinesc funciile motorii, cum ar fi degetele, pleoapele i buze i pot ajunge la
un tremur generalizat al ntregului corp i spasme cronice violente ale extremitilor. Acestea
sunt nsoite de schimbri de personalitate i comportament, cu pierderi de memorie i chiar delir
sau halucinaii. O alt caracteristic a toxicitii mercurului este salivarea sever i gingivit.
Triada excitabilitii crescute, tremurul i gingivita a fost recunoscut istoric ca
manifestarea major a otrvirii cu mercur prin inhalarea vaporilor i expunerea la nitratul de
mercur din industria blnurilor i plriilor.
Mercurul mercuric
Clorura mercuric (HgCl
2
) este cea mai cunoscut sare a mercurului anorganic i
numele su sugereaz efectul su aparent toxicologic la ingerarea n concentraii mai mari de
10%. Efectele ingerrii acestei sri sunt: ulceraii corozive, sngerri i necroza tractului
gastrointestinal. Acestea sunt nsoite de obicei de oc i colapsul circulator. Dac pacientul

87
supravieuiete daunelor gastrointestinale, blocajul renal apare n 24 de ore datorit necrozei
epiteliului tubular proximal. Regenerarea celulelor de aliniere tubulare poate fi posibil dac
pacientul poate fi meninut n via de dializ.
Injectarea clorurii mercurice produce necroza epiteliului rinichiului. Schimbrile
celulare includ fragmentarea i ntreruperea plasmei membranare i anexelor sale, vezicularea i
ntreruperea reticulului endoplasmatic i a altor membrane citoplasmatice, disocierea
polizomilor. Aceste schimbri sunt comune necrozei celulelor renale datorate diverselor cauze.
Dei expunerea la o doz mare de clorur mercuric este direct toxic pentru celulele
renale tubulare, expunerea cronic la doze sczute la srurile mercurice pot induce o boal
imunologic glomerular. Persoanele expuse pot dezvolta o proteinurie care este reversibil dup
ce muncitorii sunt ndeprtai de locul n care a avut loc expunerea. Studiile experimentale au
artat c patogeneza neuropatiei cronice cauzat de mercur are 2 faze: o faz de nceput
caracterizat de o membran antisubsolic glomerulonefrit urmat de un complex
glomerulonefritic imun superimpus. Nefrita glomerular de nceput poate progresa la oameni
pn la un complex nefritic interstiial imun.
Compuii mercuroi
Compuii mercuroi ai mercurului sunt mai puin corozivi i mai puin toxici dect
srurile, probabil din cauza solubilitii mai sczute. Calomelul (Hg
2
Cl
2
), o pudr coninnd
clorur mercuroas, are o istorie lung de utilizare n medicin. Probabil cea mai notabil
utilizare a fost pudra pentru creterea dinilor la copii i este cunoscut a fi responsabil de
acrodinie i boala roz. Aceasta este cel mai probabil un rspuns de hipersensibilitate la srurile
de mercur, n piele producnd vasodilataie, hipercheratoz sau hipersecreia glandelor
sudoripare. Copiii dezvolt febr, o urticarie roz, umflarea splinei i hipercheratoz i umflarea
degetelor. Efectele sunt independente de doz i se cred a fi reacii de hipersensibilitate.
Mercurul organic
Metilmercurul este forma cea mai important n termeni de toxicitate, iar efectele din
expunerea din mediul nconjurtor i multe efecte produse de lanurile scurte de alchil sunt unice
n termeni de toxicitate a mercurului dar sunt nespecifice n aceea c pot fi gsite n alte stri ale
bolilor. Majoritatea lucrurilor care sunt cunoscute despre toxicitatea mercurului metilic este din
studiile epidemiologice ale populaiei expuse.
Dou epidemii majore ale otrvirii cu metilmercur s-au petrecut n Japonia n Golful
Minamata i n Niigata. Amndou au fost cauzate de eliberarea industrial a compuilor
mercurici n Golful Minamata i n rul Agano urmat de acumularea mercurului de petii
comestibili. Nivelul mediu al mercurului total n petii prini n Golful Minamata n timpul
epidemiei a fost de aproximativ 11 mg/kg greutate proaspt i mai puin de 10 mg/kg n petii
din rul Agano. Cea mai mare epidemie de otrvire cu mercur metilic a fost nregistrat n Iraq n
iarna anilor 1971-1972 rezultnd n internarea a peste 6000 de pacieni i a peste 500 de mori n
spitale. Expunerea la metilmercur a fost datorat pinii coninnd gru importat mbrcat cu
fungicide ce conineau metilmercur. Coninutul de metilmercur din probele de fin a fost 0,1
mg/kg.
Din studiile acestor epidemii au fost obinute date n legtur cu manifestrile clinice,
patologia organelor i nivele de expunere. Majoritatea manifestrilor clinice sunt legate de

88
sistemul nervos constnd n ataxie, dizartrie i surzenie aprnd n aceast ordine. Principalele
trsturi patologice ale toxicitii mercurului metilic includ degenerarea i necroza neuronilor n
arii focale ale cortexului cerebral, n special n ariile vizuale ale cortexului occipital i n stratul
granular al cerebelului. Studiile experimentale ale mercurului organic i a celui anorganic arat
degenerarea a celulelor ganglionare primare senzoriale. Distribuia particular a leziunilor n
sistemul nervos central se crede a reflecta tendina mercurului de a deteriora celulele nervoase
mici din cerebel i cortexul vizual.
Alchil mercurul
Standardul pentru expunerea la mercurul alchilic la locul de munc este de 0,01 mg/m
3
.
Nivelele de mercur din pr pot fi corelate cu severitatea simptomelor clinice. Cazurile uoare
presupun amoreala extremitilor, tremurturi uoare i o uoar ataxie. Cazurile moderate
prezint dificulti de auz, paralizie parial i cazurile severe o combinaie de paralizie total,
pierderea vederii, pierderea auzului, pierderea vorbirii i com. Persoanele fr niciun simptom
pot avea nivelele de mercur din pr pn la 300 mg/kg, cele afectate moderat pot avea ntre 120
i 600 mg/kg iar cele sever afectate au ntre 400 i 1600 mg/kg.
Nu este neles n totalitate de ce expunerea la mercurul metilic are efecte att de
selective asupra cerebelului i cortexului vizual. Concentraia de mercur din aceste zone ale
creierului nu este foarte diferit de aceea din celelalte zone ale creierului care nu sunt afectate de
mercurul metilic. Mercurul metilic inhib sinteza proteinelor nainte de instalarea semnelor
otrvirii i s-a artat c refacerea sintezei proteinelor nu are loc n celulele granulare ca n
celelalte celule nervoase.
Expertiza produselor alimentare
n produsele i subprodusele de origine animal provenite de la animale intoxicate sau
tratate cu compui ai mercurului, reziduurile presist mult timp, astfel c sacrificarea animalelor
se recomand s se realizeze dup 9-10 luni de la remisie sau dup ncetarea aplicrii
tratamentului. n cazul intoxicaiilor, pericol pot prezenta i laptele i oule, acestea fiind ci de
eliminare pentru mercur.
Deoarece metil mercurul din pete i produse din pete reprezint pn la 85% din
aportul total de mercur prin raie, pentru a asigura protecia consumatorilor au fost stabilite
nivele maxime admise pentru mercur n pete. Limita maxim admis pentru mercur n petii
nerpitori este de 0,5 mg/kg, n timp ce petii rpitori pot conine pn la 1 mg/kg. Limita fixat
de Comisia European pentru Furaje este de 0,1 mg/kg pentru toate animalele, cu excepia
animalelor de companie, n raia crora se tolereaz pn la 0,4 mg/kg.
Pentru apa de but, limita maxim este de 1 g/l.
Pentru muncitorii expui profesional, OSHA (Occupational Safety and Health
Administration) a mpus o limit de 1,2 ppb mercur organic n aerul din ncpere (echivalent cu
0,01 mg/m
3
) i 6,1 ppb (0,05 mg/m
3
) pentru mercurul anorganic pentru a proteja muncitorul pe
durata a 8 ore de munc,
Deoarece metilmercurul se gsete mai ales n esutul muscular al petelui legat de
proteine, ndeprtarea pielii i a grsimii nu reduce semnificativ concentraia mercurului din
muchi. Gtitul, de asemenea, nu ndeprteaz mercurul din muchi ci, dimpotriv, deoarece

89
umiditatea scade dup gtit, concentraia mercurului ajunge s fie chiar mai mare dect n petele
proaspt.
Pentru a reduce contaminarea mediului, n special a ecosistemelor acvatice, apele
reziduale care se tie c pot conine mercur se supun unor tratamente speciale pentru a-l
ndeprta. Se utilizeaz materiale absorbante cum sunt crbunele din lemn, crbunele activat de
cocos, chitosam, zgur granulat de la oelrii pentru a ndeprta mercurul ionic i unele
bioreactoare, care sunt eficiente n proporie de 97%. Pentru a scdea toxicitatea apelor
reziduale, n special de la fabricile de sod, au fost utilizate i bacterii rezistente la mercur.
Algele albastre-verzi acumuleaz cantiti substaniale de mercur din mediu, n timp ce tulpinile
rezistente de bacterii volatilizeaz peste 90% din mercur organic i anorganic. Tulpinile de
Streptomyces termofile pot stimula reducerea concentraiei mercurului anorganic din ap.

Nichelul
Nichelul este un metal de culoare alb-argintie, ductil i rezistent la coroziune. A fost descoperit
n 1751 n Suedia de Axel Fredik Cronstedt. Este folosit ca aliaj n oelul inoxidabil i n
monede. Este de asemenea folosit i pentru placarea metalic a bateriilor, dar i pe post de
catalizator n procesele chimice.
Nichelul poate fi gsit n aproape toate alimentele. Cele mai mici concentraii se gsesc
de obicei n produsele animale i lapte. Cerealele i fructele conin concentraii intermediare din
acest metal iar cele mai mari nivele se gsesc de exemplu n cacao. Majoritatea coninutului de
nichel din diet provine probabil din contaminarea din timpul procesrii i preparrii.
nclzitoarele electrice pentru ap pot constitui o surs considerabil de nichel n diet. Studii din
Danemarca i Suedia au artat c nclzitoarele placate cu Ni sau cu elemente din oel inoxidabil
pot da apei fierbini pn la 1 mg Ni/l.
Absorbia Ni din alimente se estimeaz a fi n proporie de 0,7 % pe cnd Ni din buturi
este absorbit mult mai eficient, mai ales dac este ingerat pe stomacul gol.
Efectele toxice sunt datorate n principal expunerii ocupaionale sau accidentale i nu
prin alimente. Nichelul este un carcinogen al tractului respirator pentru muncitorii din industria
rafinrii nichelului. Alte consecine serioase pe termen lung nu sunt aa de evidente, dar sunt
severe i acute i cteodat pot fi fatale la expunerea nicheltetracarbonil. Dermatita alergic este
comun la persoanele din populaia general. Totui, deficiena nichelului altereaz
metabolismul glucozei i scade tolerana la glucoz. Din studiile fcute pe obolani s-a dovedit
c nichelul poate fi un metal esenial de urme pentru mamifere.
Toxicodinamie
Nichelul este numai slab absorbit de tractul gastrointestinal. Este transportat n plasm
fiind legat de albumina seric i muli ali liganzi organici, aminoacizi sau polipeptide. Excreia
prin urin este aproape complet n 4-5 zile. Aportul de nichel din diet la adulii din Statele
Unite ale Americii a fost estimat la 300 pn la 600 g/zi. ntr-un studiu mai recent a
coninutului de nichel din mncarea pregtit n buctriile universitilor i ale spitalelor s-a
gsit un aport de nichel a fi de 165 g/zi sau 65-85 g/1000 de calorii.
Nichelul administrat parenteral la animale este rapid distribuit la rinichi, plmni, piele,
glanda pituitar. Distribuia intracelular i legarea nichelului nu este bine cunoscut. Liganzii

90
ultrafiltrani par a fi de mare importan n transportul n ser i n bil, n excreia urinar ct i n
legarea intracelular.
Se cunoate de peste 40 de ani faptul c expunerea ocupaional la nichel provoac
apariia cancerului nazal sau pulmonar. Studiile epidemiologice din 1958 au artat c muncitorii
ce se ocupau cu rafinarea nichelului n Anglia au avut o cretere de 5 ori a riscului de cancer
pulmonar i de 150 de ori a cancerului nazal n comparaie cu ceilali oameni. Mai recent a fost
raportat creterea cazurilor de cancer pulmonar la muncitorii din diferite ri. Un numr de 6
cazuri de cancer renal au fost raportate printre muncitorii canadieni i norvegieni.
Studiile experimentale pe animale au artat c sulfura de nichel (Ni
3
S
2
) produce tumori
locale i in vitro, iar testarea celulelor mamare demonstreaz c Ni
3
S
2
i NiSO
4
crete
transformarea celulelor mamare.
Otrvirea cu nicheltetracarbonil
Nichelul metalic se combin cu monoxidul de carbon pentru a forma nicheltetracarbonil
[Ni(CO)
4
] care se descompune la nichel pur i monoxid de carbon la nclzirea la 200 C.
Aceast reacie reprezint o metod eficient de rafinare a nichelului. Cu toate acestea
nicheltetracarbonilul este foarte toxic i au fost raportate foarte multe cazuri de toxicitate acut.
Boala ncepe cu durere de cap, stri de vom, dureri n piept urmate de tuse, cianoz, simptome
gastrointestinale. Simptomele pot fi nsoite de febr i leucocitoz, iar cazurile mai severe
progreseaz la pneumonie, cedarea aparatului respirator i eventual edem cerebral i moarte.
Autopsiile arat c plmnii dein cantitatea cea mai mare de nichel spre deosebire de rinichi,
ficat sau creier.
Indicatori ai toxicitii nichelului
Nivelele de nichel din snge imediat dup expunerea la carbonil de nichel ofer o
informaie n ceea ce privete severitatea expunerii i o indicaie asupra terapiei chelante.
Dietilditiocarbamatul de sodiu este medicamentul preferat dar i ali ageni chelani precum d-
penicilamina i trietilentetraamina ofer un grad de protecie mpotriva efectelor clinice.

Cadmiul
Cadmiul este un metal moale, ductil, alb-argintiu foarte toxic care este prezent n cantiti
mici n mediul nconjurtor, incluznd alimentele, apa i solul i n majoritatea substraturilor
biologice dei nu are nici un rol biologic cunoscut. Din acestea cile primare de expunere sunt
prin alimentaie i contact dermal dup expunere ocupaional susinut.
Solul se contamineaz prin depunerea particulelor de cadmiu din atmosfer. Cadmiul
din sol poate fi clasificat n 3 categorii distincte n ceea ce privesc efectele asupra sntii
omului. Acestea cuprind solurile neagricole, solurile agricole i cderile de pmnt controlate.
Cadmiul din cderile de pmnt controlate este practic imobil i este puin probabil s aib vreun
efect asupra sntii omului sau a mediului. Cadmiul din solurile neagricole nu va afecta
sntatea omului deoarece nu intr direct n lanul trofic, sau poate s ajung indirect prin
transferul spre terenurile agricole via transportul prin ap sau prin aer. n solurile agricole,
cadmiul este, de asemenea, relativ imobil n condiii normale, dar poate deveni mai mobil n
anumite condiii de cretere a aciditii solului sau de cretere a concentraiei prin utilizarea de
ngrminte chimice, naturale sau a nmolurilor. Factorii principali care infleneaz speciaia,

91
adsorbia i distribuia cadmiului n sol sunt pH-ul, coninutul de materie organic, coninutul de
oxid metalic hidratat.
Datorit presiunii sale de vapori relativ sczute i a volatilitii termice mari i n special
datorit eliberrii de sruri de cadmiu acvosolubile n apa rezidual industrial, concentraiile de
cadmiu din mediul nconjurtor sunt n continu cretere i prezint un risc considerabil pentru
sntatea public. Metalul se gsete n concentraii mai mari n anumite plante de exemplu n
frunzele de tutun i se acumuleaz esutul moale al animalelor, ajungnd la nivele potenial
toxice. Aportul alimentar i fumatul sunt astfel principalele surse ale expunerii umane la cadmiu.
Faptul c din populaia general, fumtorii sunt n special n pericol a fost demonstrat prin nivele
semnificativ de ridicate de cadmiu msurate n snge i fluide seminale n comparaie cu valorile
corespondente gsite la nefumtori. O igar conine ntre 0,5-2 g Cd aproximativ 10% din
coninut fiind inhalat atunci cnd se fumeaz o igar.
Toxicitatea cadmiului
DL
50
dup injectarea unui compus solubil al cadmiului este ntre 2,5-25 mg/kg. DL
50

oral este de 10-20 de ori mai mare dect cea prin administrare parenteral. Doza letal estimat
este ntre 350-8900 mg, corespunztoare la doze ntre 20-130 mg/kg pentru un adult de 70 kg.
Toxicocinetica
Absorbia pe cale respiratorie. Expunerea pe aceast cale se realizeaz prin inhalarea
particulelor de cadmiu. Proporia de cadmiu absorbit este influenat de mrimea particulelor, de
solubilitatea i forma chimic a acestuia. Din totalul inhalat, se estimeaz c se absoarbe 10-
50%, iar din acesta pn la 90% n partea inferioar a plmnului.
Absoria pe cale oral. Cadmiul ingerat este slab absorbit i totodat absorbit n
proporii diferite dependent de speciaia acestuia, specia de animal, doza i frecvena
administrrii, statusul nutriional i interaciunile cu diveri nutrieni. Absorbia acestui metal
crete n cazul deficienei de fier i calciu i scade n prezena zincului i crete i cu
coadministrarea de cupru.
Cadmiul legat de metalotioneine n alimente este absorbit de oareci n proporie mai
mic dect sub form ionic. Totodat absorbia este mai accentuat la tineri i mai mare la
femele dect la masculi.
Distribuia. Cadmiul nu sufer conversii metabolice, dar ionul de cadmiu se poate lega
la grupri anionice, n special grupri sulfhidril, n proteine i alte molecule.
Dup absorbie, cadmiul este transportat de snge, fixat pe eritrocite sau legat de
proteine cu mas molecular mare. Cadmiul este preluat de celulele hepatice unde se leag la
metalotioneine. Legat astfel n ficat, el este eliberat lent n plasm. Datorit dimensiunilor mici
ale complexului cadmiu-metalotionein, acesta trece liber prin glomer n tubulul renal. Cadmiul
legat de metalotionein este preluat eficient n tubul proximal prin pinocitoz. n celulele
tubulare renale, vacuolele pinocitare sunt lizate de lizozomi, care degradeaz metalotioneina,
elibernd astfel cadmiul. Metalul se combin apoi cu nou-sintetizatele metalotioneine produse de
celulele tubulare i se acumuleaz n rinichi pentru zeci de ani. Studiile au artat c expunerea la
nivele sczute de cadmiu induce producerea de metalotioneine, permind depozitarea n
proporie mai mare n ficat i rinichi, reducnd astfel toxicitatea acut a metalului.

92
Eliminarea. Mare parte din cadmiul ingerat este eliminat nemodificat prin fecale, iar cel
absorbit este eliminat din organism mai ales prin urin, dar i prin bil,saliv i transpiraie.
Proporia de cadmiu eliminat zilnic prin urin este totui foarte mic, reprezentnd doar 0,005-
0,01% din totalul din corp. La subiecii expui profesional la cadmiu excreia urinar este de
2g/g creatinin.
Simptomele clinice ale toxicitii cadmiului includ, n general, manifestri hepatice i
renale, anemie, piele solzoas. Exist dovezi i n ceea ce privete interferena cadmiului n
formarea oaselor creterea resorbiei osoase in vivo i scderea acumulrii osteoblastice a
calciului in vitro.
Metalul a fost asociat i cu neoplasm malign la oameni, iar carcenogenitatea indus de
cadmiu poate fi n principal datorat deteriorrii oxidative a ADN-ului.
Principalele efecte constatate ca urmare a expunerii omului la cadmiu sunt urmtoarele:
Efecte renale. Numeroase studii au artat c rinichii sunt principala int a toxicitii
cadmiului. Metalul lezeaz att glomerulul, ct i tubulul renal proximal. Leziunile glomerulare
sunt caracterizate prin pierderi ale proteinelor mari prin urin, aminoacidourie, glucozurie i
hipercalciurie.
Efectele adverse asupra tubulului proximal sunt caracterizate prin creteri ale nivelurilor
urinare a numeroase proteine tubulare. Proteinele tubulare sunt proteine mici, care se gsesc n
plasm i care nu sunt filtrate de glomerul, trecnd astfel n tubulul renal. Creterea
concentraiilor urinare ale proteinelor tubulare, cum sunt microglobulina
2
, microglobulina
1
,
proteina legat de retinol i N-acetil--glucoza-minidaza indic leziuni ale tubului proximal.
n jurul vrstei de 50 de ani, concentraia acestui metal n rinichi atinge maximul, dup
care ncepe s scad. Scderea se poate datora rspunsului funciei tubulare alterate cu vrsta.
Disfuncia renal asociat cu expunerea ridicat la cadmiu se reflect, de asemenea, prin
reducerea nivelului cadmiului n rinichi i concentraii ridicate ale acestuia n urin. n ambele
circumstane, abilitatea rinichilor de a depozita cadmiul poate fi compromis.
La muncitorii expui la cadmiu, n special cei care prezint proteinurie, s-a constatat
inciden crescut de pietre la rinichi. Acest efect poate fi secundar creterii excreiei de calciu,
atunci cnd sunt prezente leziuni tubulare substaniale.
Efecte neurotoxice. Cadmiul este cunoscut c altereaz concentraia
neurotransmitorilor din creier i poate inhiba intrarea calciului n neuroni. Efectele neurologice
constau n activitate motorie redus, slbiciune i atrofie muscular, comportament agresivi
alterri ale nivelurilor dopaminei, 5-hidroxitriptaminei, dehidrogenazei succinice i
monoaminooxidazei din creier . Expunerea cronic poate conduce la neuropatii periferice.


Dopamina Dopamina 5-hidroxitriptamina

93

Efecte cardiovasculare i hematologice. S-a concluzionat c dovezile de toxicitate
cardiovascular rezultate n urma expunerii orale sunt neconcludente la om, iar intensitatea
oricrui efect al cadmiului asupra presiunii sangvine este mic n comparaie cu ali determinani
ai hipertensiunii. Creteri ale tensiunii alteriale au fost observate la animale expuse la doze de
0,008-1,6 mg Cd/kg/zi i 0,01-1,7 mg Cd/kg/zi dup o expunere intermediar, respectiv cronic.
Mecanismele prin care cadmiul afecteaz presiunea sangvin au fost studiate de Perry i
Koop (1983). La doze care produc hipertensiune a fost detectat activitatea crescut a reninei
circulatorii i, att expunerea parenteral ct i cea oral cronic, a determinat creterea reinerii
de sodiu.
Expunerea oral reduce absorbia gastrointestinal a fierului, ceea ce poate conduce la
anemie dac aportul de fier prin raie este redus. n studiile pe animale, s-a constatat c
suplimentarea raiilor cu fier sau acid ascorbic poate preveni anemia.



Administrarea parenteral a cadmiului produce distrugerea eritrocitelor, dar nu sunt
indicaii asupra faptului c ar afecta sinteza de hemoglobin.
Efecte asupra gonadelor, reproductive i de dezvoltare. n urma expunerilor acute i
subacute la cadmiu au fost observate efecte testiculare, constnd n necroz i atrofii ale
epiteliului tubulilor seminiferi, greutate crescut a testiculelor i scderea numrului i motilitii
spermatozoizilor (castrare chimic). Aceste efecte apar la doze de 5,8 mg Cd/kg/zi i mai mari.
Efectele testiculare ale cadmiului pot fi datorate interferenei acestuia cu complexele zinc-
proteine, care controleaz transcripia ADN, ducnd ulterior la apoptoz. Doze similare la femei
induc hemoragii i necroze ovariene.
Cele mai frecvente efecte ale expunerii la acest metal sunt reducerea greutii fetale sau
a nou-nscutului la natere i alterri ale comportamentului locomotor. n timp ce cadmiul a
produs i toxicitate matern, efectele asupra produilor de concepie nu par neaprat a fi datorate
acesteia.
Efecte mutagene i teratogene. Genotoxicitatea cadmiului a fost studiat att la oameni,
ct i la animale i in vitro. n timp ce genotoxicitatea a fost observat n unele studii pe oameni
expui la cadmiu i n unele teste in vitro, concluziile sunt confuze i contradictorii. Studiile de
genotoxicitate nu asigur dovezi complete c efectele genotoxice se datoreaz mai ales aciunii
cadmiului; genotoxicitatea pare s fie doar unul dintre mecanismele de aciune care contribuie la
toxicitatea cadmiului.
Teratogenitatea cadmiului a fost trecut n revist de Ferm i Layton, 1981 i Ferm i
Hanlon, 1983. S-a constatat c folosirea produilor de concepie cu doze mici de cadmiu

Acid ascorbic

94
protejeaz mpotriva unor doze ulterioare de cadmiu, la un nivel la care ar fi probabil teratogen,
probabil prin inducerea sintezei de metalotioneine. Protecia este asigurat de co-administrarea
zincului sau seleniului. Deficiena matern n zinc, singur, poate produce malformaii
congenitale, iar administrarea de cadmiu animalelor zinc deficiente ar crete incidena
malformaiilor.
Efecte asupra imunitii. S-a observat c efectele imunologice induse de cadmiu sunt
diverse n studiile pe animale, n unele cazuri constatndu-se supresie, iar n altele stimularea
rspunsului imun. Cadmiul s-a observat c supreseaz imunitatea umoral i este citotoxic pentru
limfocitele splenice. De asemenea, cadmiul a determinat mortalitate crescut n leucemiile
induse viral, sugernd c imunosupresarea este un posibil mecanism de aciune n ceea ce privesc
efectele tumorigene ale acestuia. Pe de alt parte, administrarea cadmiului a determinat rezisten
crescut la infeciile virale i imunitate mediat-celular crescut.
Efecte cancerigene. Studiile epidemiologice ale aciunii cancerigene ale cadmiului au
fost realizate mai ales n cazurile de expunere prin inhalare la locul de munc, costatndu-se
creterea procentului de cancer pulmonar i de prostat printre astfel de muncitori.
Efecte asupra metabolismului calciului i oaselor. Cel mai cunoscut eveniment cu
privire la toxicitatea cadmiului asupra omului este probabil boala itai-itai. ntr-un district al
Japoniei dup cel de-al doilea rzboi mondial i pn pe la nceputul anilor 1970, s-a descoperit
c muli oameni sufereau din cauza unei boli care provoca durere i suferin i chiar i moarte.
S-a descoperit a fi rezultatul polurii apei rurilor cu reziduri coninnd Cd ce proveneau din
activitile de minerit. Apele poluate au fost folosite pentru irigare terenurilor cu plantaii de
orez, rezultnd orez contaminat cu Cd. Consumatorii, n special femeile sufereau din cauza
decalcifierii scheletului, boala itai-itai fiind caracterizat prin producerea unor fracturi multiple i
distorsiuni ale oaselor scheletice lungi, dureri mari i leziuni renale. Cteva mecanisme toxice
pot contribui la boala itai-itai, incluznd disrupii n metabolismul vitaminei D, eliminare
crescut a calciului prin urin i interferene cu metabolismul calciului i fosfatului. Este
interesant de menionat c efectele scheletice nu sunt observate la muncitorii cu proteinurie
datorat expunerii la cadmiu. Alte studii vaste n Europa au legat expunerea la cadmiu cu
excreia urinar crescut de calciu i activitate seric crescut a fosfatazei alcaline la femei i la
brbai. Prin distrugerea dentinei se ajunge la carii dentare.
Din produsele de origine vegetal s-a ncercat ndeprtarea metalului prin splare cu
ap, caz n care se ndeprteaz doar dac metalul este depus pe suprafa sub form de pulberi.
Din uleiul vegetal, Ivanov i colaboratorii au ncercat s aplice diverse metode pentru a
demetaliza produsele. S-a constatat c, o dat cu creterea gradului de esterificare a
poliuronidelor utilizate, eficiena demetalizrii scade. Prin tratarea uleiurilor cu acid pectinic,
gradul demetalizrii a fost i mai mare. Prin tratarea uleiurilor cu soluii apoase de acid pectinic,
s-a constatat c gradul de ndeprtare a ionilor metalici crete o dat cu scderea concentraiei
acizilor pectinici n soluia apoas.
Din sursa de ap, cadmiul poate fi ndeprtat eficient prin tratare cu var i coagulare cu
sulfat feric, prin acest proces fiind ndeprtat peste 90% din concentraia iniial de cadmiu.
Limite maxime admise: aer se accept maximum 5 ng Cd/m
3
.

95
OSHA (Occupational Safety and Health Administration) limiteaz concentraia
cadmiului n aerul de la locul de munc la 100 g/m
3
sub form de fum sau vapori i 200 g/m
3

sub form de pulberi. FDA (Food and Drug Administration) limiteaz proporia de cadmiu din
coloranii alimentari la 15 ppm.
Pentru apa de but EPA a limitat cantitatea la 5 g/l. Coninutul maxim admis de
cadmiu din furajele de origine nimal sau vegetal este ntre 1-2 mg/kg la o umiditate de 12%.

Cromul
Cromul este un metal dur, lucios i rezistent la coroziune ce a fost descoperit n 1797 n Frana
de Nicolas-Louis Vauquelin. Acesta este abundent n scoara terestr i apare n stri de oxidare
de la Cr
2+
pn la Cr
6+
, dar numai formele trivalente i hexavalente prezint importan
biologic. Principala surs de crom provine din minereul de crom. Cromitul metalurgic este de
obicei transformat n aliaj ferocromic sau alte aliaje pe baz de crom ce conin cobalt sau nichel.
Srurile de crom se folosesc pentru obinerea de pigmeni sau ca anticorozive n diferite sisteme.
Cromul din aer provine din surse industriale, n special din producia aliajului
ferocromic, rafinarea mineurului i din procese chimice. n zonele rurale, cromul se gsete de
obicei n aer n concentraii mai mici de 0,1 ng/m
3
i n concentraii de la 0,01 la 0,03 g/m
3
n
oraele industriale. Particule din fabrici bazate pe arderea crbunilor pot conine de la 2,3 pn la
31 ppm. O alt surs important de crom atmosferic o reprezint fabricile productoare de
ciment. Cromul precipit i se depune pe cmpuri sau n ape. Cromul n alimente se gsete ntr-
o concentraie foarte mic iar aportul zilnic de Cr se estimeaz a fi mai mic de 100 g. Prezena
cromului n alimente se poate datora contaminrii n diversele etape ale produciei.
Cromul trivalent este forma cea mai ntlnit form a cromului din natur. Nu exist
dovezi cum c cromul trivalent s-ar transforma n crom hexavalent n sistemele biologice. Totui
cromul hexavalent trece uor prin menbranele celulelor i este redus intracelulr la crom trivalent.
Cr
3+
joac un rol important n metabolismul zahrului i funcioneaz prin intermediul insulinei
meninnd tolerana normal pentru glucoz. n prezena unei cantiti optime de crom activ
biologic este nevoie de mai puin insulin. Cromul este absorbit de organism n proporie de
0,5%. Cromul hexavalent este mult mai toxic i poate da natere, de exemplu, la alergii sau
eczeme de contact i poate fi de asemenea i carcinogen.
Concentraii mari de crom se gsesc de obicei n ARN dar rolul su este necunoscut.
Cantiti sub form de urme de Cr
3+
sunt eseniale pentru metabolismul carbohidrailor la
mamifere. Are de asemenea un rol n activitile periferice ale insulinei prin formarea unui
complex ternar cu receptorii insulinei, facilitnd ataarea insulinei de aceste situsuri.
Deficiena de crom la oameni poate aprea la copiii ce sufer de malnutriie protein-
caloric i la persoanele n vrst cu tolerana pentru glucoz afectat, dar acest lucru nu este
foarte bine documentat. Consumarea prelungit a unei diete sintetice fr suplimentare cu crom
poate conduce la afectarea metabolismului glucozei i posibile efecte asupra creterii i asupra
metabolismului lipidelor i a proteinelor.




96
Toxicitatea cromului
Intoxicarea cu crom are loc de obicei datorit expunerii accidentale i ncercrilor
ocazionale de a folosi cromul pe post de agent pentru sinucideri. Efectul acut major al cromului
ingerat este necroza renal tubular acut.
Expunerea la cromul folosit n industria pigmenilor de exemplu, poate produce cancer
la nivelul tractului respirator. La nceputul anilor 1936 autoritile germane ce se ocupau cu
sntatea public au gsit cancer pulmonar printre muncitorii expui la praful de crom. Cel mai
mare risc de cancer este atribuit expunerii la cromul hexavalent solubil n acizi i insolubil n ap
ce apare n procesele de coacere i rafinare. Cromul hexavalent este coroziv i produce ulceraii
cronice i perforaii ale septului nazal. Provoac de asemenea ulceraii cronice i aupra altor
suprafee ale pielii, ceea ce este independent de reaciile de hipersensibilitate ale pielii. Reacii
alergice ale pielii datorate cromului au loc foarte uor i sunt independente de doz. Dei
compuii cromului covalent sunt considerabil mai puini toxici i nu sunt nici iritani, nici
corozivi, muncitorii din industrie sunt expui la ambele forme. Nu este clar nc dac cromul
provoac i n alte zone cancer dect la nivelul tractului respirator.
Studiile pe animale sprijin faptul c cei mai posibili carcinogeni sunt compuii
cromului hexavalent puin solubili. n schimb studiile in vitro pe sisteme bacteriene nu arat c
ar fi vreo diferen ntre compuii solubili i cei mai puin solubili. Srurile cromului trivalent nu
au sau au foarte puin activitate mutagenic asupra sistemelor bacteriale. Din moment ce este
preferat absorbia cromului hexavalent de ctre celule iar forma trivalent este cea metabolic
activ i se leag cu acizii nucleici n interiorul celulei, s-a sugerat c agentul cauzal n
mutageneza cromului este cromul trivalent legat de materialul genetic dup reducerea formei
sale hexavalente.

Cuprul
Cuprul a fost cunoscut, minerit i utilizat de oameni din cele mai vechi timpuri, fiind probabil
al doilea, dup fier, n ceea ce privete utilitatea lui pentru oameni. Se utilizeaz intens pentru
fabricarea evilor pentru ap, n special pentru uz casnic. Cuprul este utilizat i n producerea
cablurilor electrice i a aliajelor cum sunt alama i bronzul. Este de asemenea utilizat n
galvanizare la fotografii, acoperiuri, catalizator n industria chimic i pentru ndeprtarea
mercaptanilor i rafinarea petrolului. Cuprul este utilzat intens i n diverse formulri de
pesticide. De exemplu, sulfatul de cupru este utilizat ca fungicid i bactericid pentru
prevenirea bolilor la fructe, legume i culturile cerealiere i ca ierbicid, muloscocid i pentru
controlul dezvoltrii creveilor n orezrii.
Dup absorbia n fungi sau bacterii, ionii de cupru se vor lega la diferite grupe
chimice (imidazol, fosfat, hidroxil) prezente n numeroase proteine i vor tulbura funcionarea
acestora. Ionul toxic de cupru este absorbit de sporul germinativ al fungului, astfel c, pentru
a obine rezultate optime, cuprul trebuie reaplicat pe msur ce plantele cresc, pentru a
menine protecia i pentru a preveni apariia bolilor. Este utilizat i pentru conservarea
lemnului i pentru tratarea apei de but i a celei din bazine.
n sol cuprul se gsete n jur de 70 ppm, iar n apa de mare ntre 0,001-0,02 ppm. n
apa de but, concentraia cuprului este variabil, cu medii ntre 60-150 g/l, concentraii care

97
cresc n special n cazul apei cu pH sczut i duritate mic i care ajunge la consumator prin
evile de cupru. Acestea ns nu sunt singurele variabile care influeneaz dizolvarea cuprului
n ap potasiul, sodiul, hidrogenul, sulfatul, oxigenul dizolvat, clorul, nitratul i
conductivitatea apei influennd gradul de solvire al cuprului n ap. Deoarece perioada de
timp ct st apa n conducte este de asemenea important, cele mai relevante date privind
aportul de cupru prin ap sunt furnizate de concentraia cuprului n apa consumat.
Cuprul este disponibil i n majoritatea alimentelor naturale. Unii specialiti afirm
chiar c aportul mediu este mai ridicat dect nevoile zilnice i c toxicitatea acestuia a devenit
chiar o problem. Alimente cu coninut ridicat de cupru sunt cerealele, n special grul i
hrica, creveii i fructele de mare, ficatul i alte organe interne, fasolea i mazrea uscat,
nucile, alunele, soia, fructele uscate, cacaoa, piperul negru i drojdia. Stridiile conin cantiti
mari de Cu, de aproximativ cinci ori mai mult dect alte alimente. n alimentele procesate sau
pstrate n vase cu aliaje din cupru, concentraia acestuia este mare, cuprul fiind solvit, n
special n alimentele acide.
Cuprul este esenial n alimentaia mamiferelor, fiind necesar n numeroase reacii
enzimatice. Este esenial n pentru utilizarea normal a fierului, datorit necesitii feroxidazei
(ceruloplasminei) pentru transportul fierului. Deficiena cuprului (sub 2 mg/zi) duce la
anemie, rezultat prin incapacitatea reticulocitelor de a obine fier de la transferine i de a
sintetiza hemul din fier i protoporfirine la o rat normal. Clinic se traduce prin anemie
hipocrom, microcitar, refractar la fier i prin susceptibilitate la infecii. Deficiena este
uneori nsoit de anomalii osoase. Alte sisteme enzimatice care necesit cupru includ
monoaminooxidazele, necesare pentru pigmentare, controlul neurotransmitorilor i a
neuropeptidelor; liziloxidaza, esenial pentru meninerea esuturilor de legtur din pulmoni,
oase i a elastinei din sistemul cardiovascular, citocrom c oxidaza, implicat n metabolismul
oxidativ, funcionarea creierului, sinteza hemului i a fosfolipidelor i superoxid dismutaza,
necesar pentru distrugerea radicalilor superoxid.
Exist i cteva boli genetice care afecteaz utilizarea cuprului, acestea fiind
sindromul Menke, boala Wilson i aceruloplasminemia. Anomaliile genetice asociate
primelor dou boli au fost identificate a fi defecte ale ATP-azelor de tip P.
Aceruloplasminemia este o tulburare autosomal recesiv determinat de modificrile n gena
ceruloplasminei, care afecteaz abilitatea ceruloplasminei de a lega cuprul.
Ca urmare, n sindromul Menke, absorbia intestinal a cuprului este foarte sczut,
ceea ce duce la acumularea acesteia n mucoasa intestinal i, adesea, la moarte. n sindromul
Wilson tulburrile de metabolizare a cuprului conduc la concentraii mici de cupru n ser i n
pr, dar nivele ridicate n ficat i creier.
Toxicitatea cuprului
Toxicitatea cuprului este dependent de specie, tipul de compus, calea de ptrundere
n organism i raportul cu alte microelemente din raie. Cei mai toxici compui sunt srurile
mai solubile. DL
50
pentru obolani sunt ntre 30 i 472 mg/kg. Rspunsuri toxice la oameni au
fost observate la doze de 11 mg/kg. Ingestia sulfatului de cupru este adesea netoxic, deoarece
se declaneaz automat voma, ca urmare a efectului iritant asupra tractului gastrointestinal.
Moartea se poate produce la ingestia a ctorva grame de sulfat de cupru.

98

Toxicocinetica
Cile de ptrundere a cuprului n organism sunt calea oral, cu apa i alimentele
contaminate n urma tratamentelor la care au fost supuse sau ca urmare a pstrrii n vase de
cupru, calea respiratorie i dermic, n special n special n cazul muncitorilor expui
profesional.
Dup ptrunderea pe cale, cea mai mare parte a cuprului este absorbit la nivelul
stomacului i duodenului. Concentraia maxim a cuprului n snge a fost observat n
intervalul 1-3 ore dup ingestie. Eficiena absorbiei este ntre 15-97%. Absorbia cuprului se
realizeaz att prin mecanisme active, ct i pasive. La aport sczut i moderat de cupru,
acesta este absorbit prin mecanisme de transport active saturabile, iar la aport ridicat este
absorbit prin difuzie pasiv.
Factorii care pot interfera cu absorbia cuprului includ competiia pentru situsurile de
legare cu zincul, interaciunile cu molibdenul, manganul i sulfaii, chelatarea cu fitaii i
inhibarea cu acidul ascorbic.
Cuprul absorbit din tractul gastrointestinal este transportat rapid n snge i depozitat
n ficat, legat de metalotioneine, din care este eliberat i ncorporat n ceruloplasmine, un
transportor specific pentru cupru. Cu
2+
care rmne n snge este legat la albumine sau
aminoacizi sau la eritrocite. Aproximativ 80% din cuprul absorbit este legat de
metalotioneinele din ficat, iar restul este ncorporat n citocrom c oxidaza sau este sechestrat
de ctre lizozomi.
Cuprul, sub form de Cu
2+
, atunci cnd intr n hepatocite este iniial redus i
complexat de ctre glutation nainte de legarea la metalotioneine. Alternativ, cuprul care intr
n celule poate fi exportat de ctre cupru-ATP-translocaza.
Distribuia cuprului este influenat de sex, vrst i de nivelul su din raie. Creierul
i ficatul prezint concentraia cea mai mare (aproximativ o treime din cantitatea total din
organism), concentraii mai mici fiind gsite n inim, splin, rinichi i snge.
Nivelul cuprului din eritrocite este foarte stabil, n timp ce concentraiile plasmatice
prezint fluctuaii mari, n legtur cu sinteza i eliberarea ceruplasmei. Nivelul plasmatic al
cuprului n timpul sarcinii poate fi de dou ori mai mare dect nainte, datorit sintezei
crescute de ceruloplasmine. Sursa cuprului suplimentar este ficatul. Estrogenii par a fi agenii
stimulatori de eliberare a cuprului din ficat.
Principala cale de eliminare a cuprului este calea biliar i apoi fecalele. Alte ci
minore sunt saliva, transpiraia i laptele. Timpul de njumtire a cuprului n organism este
foarte scurt, astfel nct acesta nu are tendina de acumulare.
La oameni, toxicitatea acut este de obicei corelat cu ingestia accidental;
simptomele includ gust metalic n gur, grea, vom, durere epigastric, diaree, icter.
n cazuri grave, fecalele i saliva sunt verzi-albastre. n fazele terminale, anemia,
hipotensiunea i coma preced moartea.
Indivizii cu deficien de glucuzo-6-fosfat-dehidrogenaza pot prezenta risc crescut n
ceea ce privete efectele hematologice ale cuprului.

99
Efectele gastrointestinale ale cuprului au fost investigate n mai multe studii, care au
pus n eviden o corelaie ntre concentraia cuprului i incidena simptomelor
gastrointestinale, n timp ce ali indicatori ai homeostaziei cuprului, cum sunt nivelurile serice
i cele ceruloplasminice i statutul ficatului nu s-au modificat semnificativ.
Riscul de aport prin raie de peste 5 mg Cu/zi pare s fie mic. Se tie doar c
viticultorii care aplic sulfat de cupru dezvolt boli de ficat dup 3-15 ani de expunere la
astfel de soluii, indivizii mai expui, n afar de cei cu deficit de glucuzo-6-fosfat-
dehidrogenaz, fiind cei cu boala Wilson, care duce la absorie i depozitare excesiv de
cupru.
Cuprul nu produce genotoxicitate, iar studiile efectuate n ceea ce privesc efectele
reproductive i de dezvoltare nu au evideniat vreo corelaie ntre prezena cuprului i astfel
de efecte. La doze mari s-a constatat moarte fetal i numr mic de nou nscui la oarece.
Tratamentul cu chelatori
Tratamentului de chelare implic utilizarea de compui chimici injectat n fluxul de
snge, musculare sau luate de gura pentru a lega metale, care sunt prezente n concentraii
toxice astfel nct s poat fi eliminat (de obicei n urin) din organism.
Tratamentului de chelare este indicat medical atunci cnd niveluri toxice de metale
grele, cum ar fi de fier, arsenic, plumb, mercur i sunt prezente. n timp ce fierul este un metal
vital alte metale (arsenic, plumb, mercur i) nu sunt cerute de organism.
Toxicitatea plumbului apare cel mai frecvent cu copii mai mici expusi la case vechi
cu praf vopsea cu plumb sau chips-uri. Expunerea profesional (sudori de lipit,, topitorii,
baterie regenerare) este, de asemenea, un risc. Screening-ul de plumb pentru copii a devenit
acum o parte standard a vizita un medic pentru copii n statele membre pot.
Toxicitatea mercurului apare aproape ntotdeauna la locul de munc, inclusiv a
lucrtorilor dentari, producatorii de baterii / termometre, tbcrie i din fructe de mare
contaminate.
Intoxicaia cu arsen apare, de obicei la expunerea la insecticide, erbicide, otrvuri
pentru roztoare, medicamente veterinare antiparazitare sau la otrvire intenionat.
Alte metale grele sunt menionate doar n trecere, deoarece expunerea la unele toxice
este extrem de puin frecvent: cadmiu, aluminiu, mangan, cobalt, zinc, nichel, cupru i
magneziu.
Toxicitatea metalelor grele poate provoca o gam larg de probleme, inclusiv leziuni
grave la organele corpului i a creierului.
Ageni de chelare:
Desfuroxamine: utilizat pentru toxicitatea fierului, administrat pe cale intravenoas.
Dimercaprol (BAL): agent pentru plumb, arsenic i mercur, administrat
intramuscular.
DMSA: un analog al Dimercaprolului care poate fi administrat la intoxicare cu
plumb i arsenic.
D-penicilamina: pe cale oral.
Chelatori utilizai pentru plumb, arsenic, mercur sunt mai puin costisitori, dar nu la fel de
eficieni ca DMSA.

100
Versante calciu disodic (CaNa2-EDTA): poate fi folosit n conjuncie cu BAL n
toxicitate plumb. Nu a folosit niciodat singur n tratarea toxicitate chelai de plumb, deoarece
numai extracelular, duce nu intracelulare.
Diagnosticul de toxicitate cu metale grele este grav i trebuie s fie fcut de un medic
pe baza simptomelor clinice n legtur cu testele de laborator. Agenii de chelare sunt i ei cu
potenial toxic i nu ar trebui s fie utilizai dect dac este absolut necesar.
Toi agenii de chelare au att efecte minore dar i efecte secundare care pun viaa n
pericol. Acetia trebuie utilizai sub supravegherea unui medic ntr-un spital.
CaNa
2
-EDTA este cel mai frecvent utilizat agent de chelare folosit de medici alte utilizri
dect intoxicaii cu metale grele dovedite. Dei CaNa
2
-EDTA a fost unul dintre agenii folosii
pentru prima dat, nu mai este tratamentul cel mai indicat pentru toxicitatea dat de metale
grele.
Dup ce EDTA a fost gsit un chelator eficace n ndeprtarea metalelor toxice din
snge, unii oameni de tiin au postulat c arterele ntrite ar putea beneficia de un astfel de
tratament pentru eliminarea calciului de pe perei. Clarke, Clarke i Mosher au considerat c
ar putea beneficia de tratamentul cu EDTA pacienii cu ateroscleroz i au raportat c
pacienii cu boli vasculare periferice ocluzive au spus c s-au simit mai bine dup tratamentul
cu EDTA.
n 1960, dimpotriv, Meltzer i colaboratorii au raportat c pacieni cu angin
pectoral nu au avut nicio mbuntire care ar putea fi atribuit tratamentului de chelare cu
EDTA. Cu toate acestea, n urmtoarele dou luni, cei mai muli pacieni au inceput s
prezinte raportare o ameliorare a simptomelor lor. Determinat de aceste rezultate, Kitchell i
colaboratorii au studiat efectele chelatrii la 28 pacieni.
Ei au descoperit c, dei 25 din cei 38 de pacieni au avut mbuntiri n anghin i
jumtate au prezentat mbuntiri n electrocardiograme cteva luni dup tratament, aceste
efecte nu au fost de durat. La momentul raportului, 12 din cei 38 au murit i doar 15 au
raportat c se simt mai bine. Kitchell a concluzionat c chelatizarea cu EDTA, nu este un
instrument util clinic n tratamentul bolii coronariene.
Tratamentul de chelare pare a fi eficient impotriva aterosclerozei, bolii coronariene,
i n boli vasculare periferice. Beneficiile sale ar trebui sunt multiple i includ cresterea
circulatiei sanguine colaterale; scderea vscozitii sngelui; mbuntirea funciei
membranelor celulare; scderea presiunii arteriale; scderea concentraiei de radicali liberi,
inhibarea procesului de imbatranire; inversarea aterosclerozei, diminuarea simptomelor n
angin; reducerea cangrenelor, mbuntirea culorii pielii, vindecarea ulcerului diabetic.
Sunt preri c chelarea este eficace mpotriva artritei, sclerozei multiple, bolii
Parkinson, psoriazisului, bolii Alzheimer, precum i n problemelor de vedere, auz, miros,
coordonare muscular i poten sexual.
Exist n prezent nevoia de a dizolva depozitele de calciu din plci, care blocheaz i
infund arterele. Nu exist absolut nici un agent cunoscut care s "dizolve" plcile
aterosclerotice i care determin rigidizarea arterelor. Aceste pci sunt foarte complexe i
constau n ngroarea peretelui muscular al arterei i depunerea de calciu i de colesterol.
Companiile farmaceutice i medicii ar dori s-l foloseasc.

101
n plus, CaNa
2
-EDTA este eficient numai n chelarea metalelor grele extracelulare
(dizolvate n snge i n alte fluide ale corpului din afara celulelor).
Diverse studii au fost citate de ctre suporterii tratamentului de chelare pentru ateroscleroz,
ns niciunul dintre acestea nu a fost demonstrat n studiile clinice.
Tratamentul de chelatare ar trebui s fie folosit numai pentru toxicitate metalelor
grele diagnosticat de un medic recunoscut. Nu are loc o inversare sau prevenirea
aterosclerozei, anginei pectorale, hipertensiunii arteriale, circulaiei proaste sau a altor boli
cardiovasculare.
CaNa
2
-EDTA poate interfera cu alte metale eseniale din snge, cum ar fi fier, zinc,
cupru i magneziu pentru a provoca efecte adverse asupra sntii n timp.
Toxicitatea metalelor grele este ns destul de rar i necesit n mod normal o expunere
specific i unii factori de risc. Marea majoritate a oamenilor nu vin n contact semnificativ cu
metale grele toxice.

Bibliografie
Arena, J. M. (1971) Treatment of mercury poisoning. Mod. Treat., 8, 619-625.
Augustine, J. R. (1956) Mercury bichloride (corrosive sublimate) poisoning. Can. Med.
Assoc. J., 74, 371-372.
Graeme KA, Pollack, C.V. Jr. (1998) Heavy metal toxicity. I: arsen and mercury. J Med
Emerg. 16, 45-56.
Marsha, D. (1996) Heavy metals. in: Emergency Medicine-A Comprehensive Review, 4th
ed., Tintinalli, JE., Ruiz, E., and RL. Krome editors, pp.833-841
Montuschi E. (1953) Mercuric chloride poisoning treated with dimercaprol. Br. Med. J.,
5;2(4835):545.
Thomas, F. (1953) Criminal poisoning by administration of a douche of corrosive sublimate.
Ann. Med. Leg. Criminal. Police Sci. Toxicol., 33, 123-129.

















102

Cap. V Metabolizarea otrvurilor n corp

Metabolizarea presupune conversia enzimatic a otrvurilor n metabolii care sunt substane
cu caracter mai polar, fiind astfel mai uor de excretat i, uneori, mai puin toxici.
La organismele terestre ns, biotransformarea este indispensabil, deoarece substanele
liposolubile sunt reabsorbite la nivelul tubular renal i, de aceea, fr intervenia
metabolizrii, eliminarea lor ar fi de ordinul zilelor i chiar anilor (pentru eliminarea
etanolului ar fi necesare 24 de zile). Organismele acvatice nu posed sisteme metabolizante
pentru xenobiotice, deoarece ele excret compuii liposolubili direct n ap prin toat
suprafaa corporal.
Metabolizarea se datoreaz funciei vitale a organismelor de a se proteja de compuii
strini, care ptrund separat sau odat cu substanele nutritive (Voicu i Olinescu, 1977) i are
loc, de regul, n dou faze:
n prima faz, un compus, activ sau inactiv biologic, este transformat prin reacii de
oxidare, reducere sau hidroliz, ntr-un alt compus, activ sau inactiv;
n faza a doua, compusul iniial mpreun cu produsul su de transformare sufer reacii
de conjugare pentru a forma un compus inactiv biologic. Astfel, benzenul trece, n prima faz,
prin oxidare direct sau prin intermediul unor reacii de epoxidare, n fenol, di- i trifenoli, iar
acetia sufer, n faza a doua, o conjugare, n principal cu acidul glucuronic i cu ionul sulfat.
Unele produse se metabolizeaz complet n prima faz, cum ar fi etanolul, n timp ce altele
trec direct n faza a doua (fenolul).
Prin metabolizare, polaritatea compusului crete n general. Compusul iniial, de obicei
liposolubil, devine polar n faza I i mai polar n faza a II-a, cnd este puternic acid
(majoritatea metaboliilor) sau alcalin (piridina). Fiind polari, aceti ultimi metabolii strbat
mai greu barierele membranare lipoidice, iar reabsorbia tubular este redus. Se creaz astfel
impresia c biotransformarea are rolul de a mri polaritatea i, indirect, de a reduce toxicitatea
xenobioticelor.
Eterul etilic i acidul ftalic sunt eliminai nemodificai, iar unele substane nepolare,
cum ar fi HCH, insecticidele clorurate nu sunt uor metabolizate i nici excretate fiind
depozitate n esuturile grase din organism.
Faptul c o singur otrav poate fi metabolizat la un numr imens de produi sugereaz
c organismul nu-l recunoate i c aceasta interfer doar cu sistemele de metabolizare pe care
corpul le utilizeaz de regul pentru transformarea unor compui exogeni n compuii proprii.
Cu substanele pe care corpul le recunoate, de exemplu proteinele, aminoacizii, grsimile etc.
lucrurile stau cu totul altfel: cile metabolice sunt precise i transformarea lor se petrece de
fiecare dat la fel. Exogenul perturb buna funcionare a organismului sau doar a unor esuturi
i organe i, prin aceasta, intr n reacie chimic sau de alt natur (fiziologic, mecanic
etc.) cu componentele corpului. n cazul n care obiectul sau compusul introdus n corp nu
afecteaz n nici un fel structura i funciile organismului, acesta din urm se comport pasiv
(proteze din argint sau material plastic implantate n corp).

103
Reaciile din faza I constau din introducerea n molecul a gruprilor chimice cu
polaritate crescut: -OH, -NH
2
, -COOH, -SH. Cea mai frecvent dintre reaciile acestei faze
este oxidarea, ns pentru unele xenobiotice reducerea este singura cale de metabolizare, n
timp ce altele se degradeaz prin hidroliz.

Reacii de oxidare
Sediul metabolizrii poate fi orice esut sau organ, ns sediul principal este ficatul.
Enzimele de metabolizare exist ns i n organele i esuturile care faciliteaz intrarea i
ieirea din organism (piele, rinichi, plmn, intestin), precum i n alte esuturi (ochi, plasm
etc.). Sediul metabolizrii nu corespunde totdeauna cu sediul principal al aciunii toxice.

Reacia Exemplu Formula general
Hidroxilarea
aromatic
Benzenul fenoli Ar-X HO-Ar-X
Hidroxilarea catenei
alifatice
Fenazona 3-hidroxi-
fenazona
R-(CH
2
)
n
-CH
3
R-(CH
2
)-CH
2
OH
N-oxidarea
Trimetilamina
trimetilamino-N-oxid
R
3
NR
3
NO
S-oxidarea
Clorpromazina S-
oxidul clorpromazinei
S
OH
R' R S R R'
S R' R
O

O-dezalchilarea Codeina morfin
R-O-CH
3
R-O-CH
2
OH
R-OH + HCHO
N-dezalchilarea Morfina normorfin
R-NH-CH
3
R-NH-CH
2
OH
R-NH
2
+ HCHO
S-dezalchilarea
Metiltiopurina
tiopurin
R-S-CH
3
R-S-CH
2
OH
R-SH + HCHO
Dezaminarea
oxidativ
Amfetamina
fenilaceton
H
C
R
R'
NH2 C
R
R' NH
2
OH
C
R
R'
NH
3
O
+

Desulfurarea Parationul paraoxon
R
R '
P
S
X
R
R '
P
O
X

Epoxidarea Aldrinul dieldrin
R - CH = CH - R'
R - CH - CH - R'
O

Oxidarea cu
deschiderea ciclului
Nicotina acid - (3
piridil)
meti-amnobutiric
R'
N R
CH
3
R'
NH R
COOH


Astfel, metanolul se metabolizeaz n primul rnd n ficat, dar efectul toxic se exercit
la nivelul retinei, SNC, rinichiului; hidroxilarea 2-naftilaminei are loc n ficat, dar efectul
cancerigen apare n vezica urinar; plumbtetraetilul este transformat n plumbtrietil n ficat,
dar metabolitul este toxic n special pentru SNC; n cazul dimetilnitrozaminei, sediul
metabolizrii ficatul corespunde cu sediul principal al aciunii toxice. In organismul uman

104
i n cel animal exist dou tipuri de enzime: enzime biochimice (parametabolice) i enzime
xenobiotice (xenometabolice).
Primele, cele biochimice, catalizeaz biotransformarea substanelor endogene, precum
i metaboliii acestora care prezint asemnri structurale cu substanele endogene, deoarece,
odat metabolizate i ajunse la locul de aciune a enzimelor, acestea nu le mai pot diferenia
de substratele lor normale i le metabolizeaz pe aceeai cale. Enzime ca:
alcooldehidrogenaza, aldehiddehidrogenaza, DOPA-decarboxilaza, monoaminooxidaza,
colinesterazele nespecifice plasmatice, guanaza, nucleotidazele, xantinoxidaza degradeaz
deopotriv substratele naturale i pe cele strine, dar similare ca structur.
Enzimele xenobiotice catalizeaz biotransformarea majoritii otrvurilor i
substanelor chimice industriale, poluanilor, medicamentelor, cancerigenilor, aditivilor
alimentari, care nu prezint, ca atare sau ca metabolii, asemnri structurale cu substratele
normale. Aceste enzime au sediul n microzomi i catalizeaz n special reacii de oxidare.
nc din anul 1955, Axelrod a demonstrat existena unui sistem de enzime care folosesc
NADPH (nicotinamid redus) i oxigen molecular, numite oxidaze cu funcii mixte
microzomiale (Microsomal Mixed Function Oxydases) sau OFMM. n microzomi pe lng
aceste enzime, se mai gsesc i unele reductaze i hidrolaze.
Exist i substane metabolizate att pe cile normale, ct i pe cele caracteristice
xenobioticelor. De exemplu, etanolul se oxideaz n citoplasm prin intermediul
alcooldehidrogenazei (enzim biochimic), iar n microzomi prin intermediul unui sistem
enzimatic asemntor.
Enzimele biochimice se mai deosebesc de OFMM prin localizarea, numrul,
specificitatea i activitatea lor.
Enzimele de oxidoreducere biochimic au sediul n special n mitocondrii, enzimele de
hidroliz n lizozomi, citoplasm, plasm sangvin, iar OFMM se gsesc aproape exclusiv n
microzomi.
Enzimele biochimice sunt diversificate i n cantitate suficient pentru a satisface
metabolizarea substratelor endo- i exogene; numrul OFMM este mic sau chiar redus la un
sistem unic i universal de oxidaze.
Enzimele OFMM sunt lipsite de specificitate, deoarece metabolizeaz numeroase
substraturi cu structuri diferite, n timp ce enzimele biochimice sunt specifice.
Enzimele biochimice sunt n stare activ, pe cnd OFMM se activeaz sub efectul
direct al xenobioticelor, putnd metaboliza atunci compusul care le-a activat, precum i ali
compui metabolizai pe aceeai cale. Proprietatea se numete inducie enzimatic.
Inducia enzimatic determin creterea nivelului enzimelor implicate n
metabolizarea unei otrvi sau xenobiotic dup administrarea cronic a unui medicament sau
toxic. Astfel, datorit nespecificitii marcate, administrarea unui medicament induce o
metabolizarea crescut a altor substane (Voicu i Olinescu, 1977). De pild, nicotina mrete
activitatea enzimelor care metabolizeaz o serie de medicamente i chiar metabolismul
nicotinei este mai intens la fumtori fa de nefumtori, probabil datorit efectului inductor al
hidrocarburilor policiclice din igar.


105
Reacii de reducere
Reacia Exemplu
Aldehide alcool primar
Cetone alcool secundar
Saturarea dublei legturi
Nitroderivat nitrozoderivat
hidroxilamin amin
Azoderivat hidrazoderivat
amin

Acid hidroxamic amid
Disulfur sulfhidrol
As
5+
As
3+

R-CHO R-CH
2
OH
R-CO-R

R-CHOH-R

R-CH=CH-R

R-CH
2
-CH
2
-R

R-NO
2
R-NO R-NHOH R-
NH
2

R-N=N-R

R-NH-NH-R


R-NH
2
+ R

-NH
2
R-CO-NHOH R-CO-NH
2

R-S-S-R

R-SH + R

-SH
R-AsO(OH)
2
R-As=O

Metabolizarea microzomial include oxidri, reduceri i hidrolize.
Oxidarea este realizat de oxidazele cu funcii mixte microzomiale (OFMM), un
sistem enzimatic component al membranelor reticulului endoplasmatic neted (REN). Acest
sistem este constituit din dou hemoproteine (citocromul P
450
i citocromul b
5
), dou
flavoproteine (NADPH-citocrom P
450
-reductaza i NADH-citocrom b
5
-reductaza), o
fosfolipid (fosfatidilcolina). n reacie sunt necesari: oxigenul molecular (O
2
),
nicotinamidadenin-dinucleotidfosfatul, forma redus (NADPH) iar uneori i
nicotinamidadenin-dinucleotidul, forma redus (NADH):
R-H + O
2
+ 2H
+
+ 2e
-
R-OH + H
2
O

Reacii de hidroliz
Reacia Formula general Exemplu
Dezesterificare
Dezamidare
R-COO-R

R-COOH + R

-OH
R-CONH-R

R-COOH + R

-NH
2

Atropina acid tropic +tropanol
Lidocaina etilenglicocol + xilin

Att disocierea moleculei de oxigen ct i desfacerea legturii R-H din substrat reclam
un aport crescut de energie de activare i, de aceea, organismul realizeaz aceast oxidare n
opt etape:
1. Citocromul P
450
(notat aici cu Fe
3+
) se unete cu substratul nepolar, R-H;
2. Fierul heminic Fe
3+
se reduce la Fe
2+
prin transferul unui electron de la NADPH, prin
intermediul NADPH-citocrom P
450
-reductazei;
3. Oxigenul molecular formeaz un complex ternar, (RH)Fe
2+
(O
2
);
4. Un al doilea electron se transfer de la NADPH (prin intermediul NADPH-reductazei) ori
de la NADPH sau NADH (prin intermediul citocromului b
5
) cu formarea unui anion
peroxidic;
5. Anionul peroxidic leag hidrogenul, cu formare de ap i a complexului RH(Fe-O)
3+
;

106
6. Hidrogenul din substratul R-H se transfer pe oxigen, cu formarea radicalului intermediar
(R
o
)(Fe-OH)
3+
;
7. Radicalul substratului se recombin cu oxidrilul din complex, cu formarea produsului de
hidroxilare, R-OH;
8. Produsul R-OH regenereaz forma oxidat a citocromului P-450 i ciclul se nchide.
Hidroperoxizii, X-OOH, precum i unii oxidani puternici unteaz acest ciclu.


















Etapele activrii oxigenului n ciclul citocromului P
450

n reaciile de hidroxilare microzomial (dup Cotru, 1993).

Hidroxilarea toxicilor se face n microzomii hepatici prin labilizarea moleculelor
acestora datorit introducerii gruprilor adiionale, mai ales a grupei HO. Citocromul P
450

constituie locul activitii oxigenului, funcionnd ca o monooxigenaz n oxidarea unor
substane diverse (hidrocarburi policiclice, medicamente, steroizi, colesterol, acizi grai, , etc.
Superoxid dismutaza catalizeaz descompunerea superoxidului printr-o reacie de
disproporionare n oxigen i peroxid de hidrogen:
2O
2

+ 2H
+
H
2
O
2
+ O
2

Aceasta inhib reacia de hidroxilare sau demetilare ale unor toxice, iar adugarea unui
sistem generator de superoxid (xantin + xantin oxidaz) stimuleaz hidroxilarea unor toxice
de ctre sistemul enzimatic microzomial.
Se fac n continuare cercetri pentru a lmuri implicarea ramurii peroxidante din
sistemul enzimatic microzomial. Exist un vast material experimental n favoarea peroxidrii
lipidelor microzomiale n anumite condiii n cursul metabolizrii medicamentelor. Vitezele
reaciilor de peroxidare a lipidelor microzomiale i de hidroxilare a medicamentelor sunt
invers proporionale, datorit probabil competiiei pentru O
2
necesar ambelor procese. n
Fe
3+
(RH)Fe
3+
(RH)Fe
2+
(RH)Fe
2+
(O
2
)
(RH)Fe
3+
(O
-
)
2
(RH)Fe
3+
(O )
2
RH(Fe O)
3+
(R)(Fe OH)
3+
(ROH)Fe
3+
H
2
O
H
+
RH
1
2
3
4
5
6
7
8
e
-
O
2
e
-
ROH
2-
2
XOH
XOOH
Fe
3+
(RH)Fe
3+
(RH)Fe
2+
(RH)Fe
2+
(O
2
)
(RH)Fe
3+
(O
-
)
2
(RH)Fe
3+
(O )
2
RH(Fe O)
3+
(R)(Fe OH)
3+
(ROH)Fe
3+
H
2
O
H
+
RH
1
2
3
4
5
6
7
8
e
-
O
2
e
-
ROH
2-
2
XOH
XOOH

107
ambele procese se dezvolt forme reactive ale O
2
cum sunt O
2

i
1
O
2
(Auclair i Lecomte,
1978).
Sistemul oxidazic cu funcii multiple este responsabil de procesul de detoxifiere
hepatic, care ncepe prin introducerea unor grupri polare n structura substratului lipofil
pentru a-l face mai hidrosolubil. Sistemul enzimatic microzomial cuprinde de asemenea un
numr de reacii oxidative ca hidroxilri, O i N-dealchilri, sulfoxidri etc. (Voicu i
Olinescu, 1977). Reacia principal de hidroxilare a unui substrat AH se datorete contactului
direct cu citocromul P
450
care este redus cu ajutorul unui flux de electroni primit de la
NADPH prin intermediul celorlali transportori.
Peroxidarea este competitiv cu desaturarea i cu N- i O-dealchilarea (OBrien,
1978). Bidlack i Hochstein (1975) menioneaz nsuirile de peroxidaz ale hemoproteinelor
din sistem (citocromii P
450
i b
5
), ct i condiiile n care apare peroxidarea lipidelor
microzomiale: Fe
3+
liber, dar mai ales complexat cu ADP sau pirofosfat.
In vivo se poate realiza peroxidarea lipidelor microzomiale din ficat. Mecanismul cel
mai probabil se bazeaz pe structura hemoproteinic a componenilor sistemului microzomial
i capacitii acestora de a aciona ca peroxidaze. Producerea unor specii reactive, fie prin
activarea O
2
(
1
O
2
), sau prin peroxizi (H
2
O
2
sau lipidici), este sigur datorit
chemiluminiscenei ce nsoete hidroxilarea microzomial in vitro. Dup OBrien, O
2
i
citocromul P
450
sunt componentele ambelor procese i acestea pot realiza hidroxilarea unor
medicamente. Ramura peroxidant, dei este mai simpl deoarece nu necesit prezena
celorlali citocromi, produce totui distrugerea citocromului P
450
. O dovad suplimentar a
posibilitii peroxidrii lipidelor microzomiale este adus de amplificarea acestui proces de
radiaiile ionizante (Wills i Daves, 1972).
















Schema probabil a hidroxilrii datorit capacitii peroxidazice a citocromilor P
450
i b
5


NADPH Citocrom C reductaza CitocromP
450
(peroxidaza)
Citocromb
5
(peroxidaza)
Citocromb
5
(reductaza)
NADH
ROOH
ROH + H
2
O
ROH
ADP-Fe
3+
ADP-Fe
2+
O
2
ADP-Fe
2+
Lipide
Lipide-OOH
.O
2
ROOH
RH
NADPH Citocrom C reductaza CitocromP
450
(peroxidaza)
Citocromb
5
(peroxidaza)
Citocromb
5
(reductaza)
NADH
ROOH
ROH + H
2
O
ROH
ADP-Fe
3+
ADP-Fe
2+
O
2
O
2
ADP-Fe
2+
Lipide
Lipide-OOH
.O
2
ROOH
RH

108
Peroxizii organici pot substitui NADPH i O
2
n unele hidroxilri modificnd biosinteza
hepatic a unor compui cum ar fi acizii biliari. Modificri minore ale membranelor
microzomiale, aa cum se produc in intoxicri cronice cu solveni organici sau metale grele,
pot crea condiii pentru creterea ponderii ramurii peroxidante a sistemului de transport
electronic microzomial.
Peroxidarea lipidelor constituie un proces firesc al crui rol crete odat cu creterea
concentraiei toxicilor sau medicamentelor supuse metabolizrii. De aceea, n procesul
detoxifierii crete semnificativ concentraia lipidelor peroxidate (Olinescu,1982).
In cazul metabolizrii otrvurilor i, n general, a substanelor exogene, are loc
peroxidarea lipidelor. Cel puin n ficat, aceasta reprezint un fenomen fiziologic controlat de
sistemele protectoare, care n anumite limite nu duce la pierderea de acizi grai polinesaturai.
Pe baza acestei observaii, peroxidarea lipidelor n ficat ar fi un rspuns nespecific la o
agresiune chimic, explicnd astfel apariia peroxizilor lipidici i a produilor de
descompunere (dialdehida malonic, etanul) n urma intoxicrii cu substane cu cu caracter
lipofil ce sunt metabolizate prin sistemul hidroxilant microzomal dependent de NADPH.
Astfel, peroxizii lipidici i produii lor de descompunere au fost detectai n urma intoxicrii
cu CCl
4
, etanol, bromtriclormetan sau paraquat. O dovad suplimentar a implicrii
peroxidrii n instalarea unei hepatotoxiciti este efectul protector al glutationului,
dietilditiocarbamatului i cistaminei (erban i colab., 1979), compui ce conin grupri SH
libere, cu aciune antioxidant. Pe de alt parte, n urma administrrii unor substane
hepatotoxice se observ scderea coninutului de grupri SH.
Intoxicarea cu DDT (p,p-diclordifeniltricloretan) i alte insecticide clorurate nrudite
produce o stimulare a enzimelor metabolizante din microzomi, la un nivel redus de absorbie.
La o concentraie mai nalt a toxicului, se instaleaz o intoxicaie de tipul observat n cazul
CCl
4
(Olinescu, 1982).
Concentraii crescute de peroxizi ai lipidelor n snge i ficat au fost gsite dup
iradierea experimental a obolanilor (Olinescu i colab., 1984).
Reaciile enzimatice de hidroxilare sunt n general de forma :
RH + O
2
+ XH
2
ROH + H
2
O + X,
n care RH reprezint substratul, iar XH
2
un donor de electroni, respectiv NADPH
2
(Voicu, Olinescu, 1977).
Reducerea este realizat de reductaze (nitro- i azo-) NADH- sau NADPH-
dependente, microzomiale.
Oxidoreducerile microzomiale se realizeaz sub influena dioxigenazelor, care
ncorporeaz ambii atomi de oxigen n substrat,
O
2
+ substrat SubstratO
2
a oxigenazelor, care reduc O
2
, fie la H
2
O
2
sau la dou molecule de H
2
O, fr ncorporarea O
2

n substrat:
O
2
+ 2H
+
(4H
+
) + 2e

H
2
O
2
(2H
2
O)
sau a monooxidazelor, care ncorporeaz un atom de oxigen n substrat i reduc cellalt
oxigen la ap:
O
2
+ substrat + DonorH
2
SubstratOH + H
2
O + Donor

109
Hidroliza are loc sub aciunea esterazelor i amidazelor microzomiale.
Metabolizarea non-microzomial include, de asemenea, oxidri (oxidarea alcoolilor
primari, a aldehidelor alifatice i aromatice, dezaminarea oxidativ a aminelor aromatice i
aril-substituite), precum i reduceri (disulfuri, N-oxizi, S-oxizi) i hidrolize (esteri, amide),
ns enzimele sunt localizate n mitocondrii, citoplasm, plasm sangvin.
Implicaiile toxicologice ale metabolizrii otrvurilor i medicamentelor n faza I:
metaboliii sunt mai polari, dar nu neaprat mai puin toxici i nu se poate defini
biotransformarea ca detoxifiere;
apariia metaboliilor mai toxici explic faptul c unele xenobiotice sunt inactive in
vitro, dar active in vivo (Parationul, Schradanul, glucozizii cianogenetici, cloralhidratul,
fenacetina, etc.);
apariia metaboliilor cu activitate diferit de a compusului iniial este caracteristic
unor xenobiotice (ex. primidona, trece parial n fenobarbital cu proprieti sedative, alturi de
cele anticonvulsivante);
activarea enzimelor microzomiale, respectiv inhibarea, sub aciunea xenobioticelor
administrate concomitent sau anterior d natere la fenomenul de inducie, respectiv de
inhibiie enzimatic.
Reaciile din faza a II-a reprezint conjugri: glucuronoconjugarea, sulfoconjugarea,
acetilarea, glicocolconjugarea, glutaminconjugarea, metilarea, mercaptarea i sulfurizarea.

Reacii de conjugare
Reacia
Compuii
iniiali
Compuii finali Ex.*)

Enzima
Activ.
cu**

Glucurono-
conjugarea

Derivai
hidroxilici,
tiolici,
carboxilici,
aminici
O-gluconoride
de tip eter
S-gluconoride de
tip tioeter
O- gluconoride
de tip ester
N- gluconoride

6/1

Gluconoril-
transferaza

UTP
Sulfo-
conjugarea
Derivai
hidroxilici,
tiolici, aminici
Esteri sulfurici,
tiosulfurici,
sulfamai
6/2 Sulfo-
transferaza
ATP

Acetilarea
Amine
aromatice,
sulfonamide,
hidrazine, acid p-
aminobenzoic

Derivai N-
acetilai

6/3

N-acetil-
transferaza

CoA

Glicocol-
conjugarea
Derivai
carboxilici
(COOH fixat
direct pe ciclul
aromatic sau prin

Derivai ai aril-
glicocolului

6/4

Glicocol-N-
acilaza

CoA

110

*) Exemple n tabelul urmtor; ** Activare cu

Una dintre cele mai importante reacii este glucuronoconjugarea, deoarece acidul
glucuronic, glucuronil-transferaza i nucleotidul de activare se gsesc n majoritatea
esuturilor (ficat, rinichi, intestin) i, de asemenea, datorit varietii de grupri (-OH, -SH, -
NH
2
) pe care acidul glucuronic poate fi transferat. Glucuronil-transferaza este localizat n
microzomi. Sulfoconjugarea se realizeaz asupra acelorai grupri ca glucuronoconjugarea,
prin transferul sulfatului provenit n special din aminoacizi sulfurai. Sulftransferaza se
gsete n citoplasm, ndeosebi n ficat i intestin. Acetilarea are loc n ficat i n celulele
sistemului reticulo-endotelial. Conjugarea cu glicocolul se realizeaz n ficat. Metilarea, cu
sediul n ficat i rinichi, spoliaz organismul de grupri metil procurate de la metionin i de
la bazele xantinice. Mercaptarea are sediul n rinichi, iar metaboliii rezultai sunt uneori mai
toxici, ns mai rapid de eliminat. Sulfurizarea reprezint o real detoxifiere, deoarece
toxicitatea sulfocianurii fa de cianur este foarte slab, ns eficiena reaciei este redus, din
cauza cantitilor limitate de rodanaz disponibil.
Conjugarea are loc cu consum de energie, de aceea este necesar o activare prealabil. Aceste
reacii presupun fie activarea agentului de conjugare, fie activarea toxicului.
n urma reaciilor de conjugare rezult compui hidrosolubili, mai puin toxici dect
metabolitul din prima faz. Astfel, benzenul, se transform n prima faz n fenol, toxic, iar
acesta, n faza a doua trece n acid fenilglucuronic, mai puin toxic i mai hidrosolubil.
Un numr mic de xenobiotice pot lua parte la reacii de sintez denumite sinteze
letale din care rezult compui toxici. Biotransformarea este influenat de factori endogeni
i exogeni: specie, ras, vrst, sex, stri patologice, starea de nutriie, bioritmul, factorii de
mediu, interaciunile cu alte xenobiotice sau cu factorii nutritivi.
intermediul unei
catene laterale)
Glutamin-
conjugarea
Unii acizi aril-
acetici
Derivai ai fenil-
acetil-glutaminei
6/5 CoA

Metilarea
Derivai N-
heterociclici,
amine aromatice
endogene, fenoli,
tioli, As (Se, Te)

Derivai N, O, S-
metilai

6/6
Metil-
transferaza
ATP
Mercaptare
(cistein sau
glutation-
conjugare)
Hidrocarburi
aromatice,
derivai
halogenai
aromatici
Acizi aril-
mercapturici
6/7 Cistein-
(glutation)-
transferaza

Sulfurizare Acid cianhidric,
cianuri, nitrili
Sulfocianuri
(tiocianai)
6/8 Rodanaza
(tiosulfat:
cianuri-sulf-
transferaza


111
Biotransformarea reprezint calea major de debarasare a organismului de toxici.
Sistemele enzimatice pot fi ns depite, avnd drept consecin spolierea organismului n
grupri acetil, metil, sulfat, tiol, etc. necesare reaciilor din faza a II-a; creterea cerinei de
NADPH implicat n OFMM, cu consecine nefavorabile asupra unor metabolisme.


Eliminarea toxicilor din corp
Nocivitatea unui toxic este cu att mai mare cu ct eliminarea sa este mai lent. In
principal, eliminarea se realizeaz pe cale renal, digestiv, pulmonar i
transcutanat.
Calea renal este cea mai important modalitate de eliminare a toxicilor din
corp. Pe aceast cale se elimin toxicii cu mase moleculare sub 400.
Eliminarea renal se realizeaz prin trei mecanisme: filtrarea glomerular,
secreia activ i reabsorbia tubular. Viteza eliminrii depinde de:
debitul urinar, dependent de parametrii interni i externi;
rata de fixare a proteinelor plasmatice (legarea ntr-un procent mai ridicat a
toxicului conduce la eliminarea sa mai lent);
pH-ul urinar: o parte din toxicul filtrat glomerular poate fi reabsorbit
tubular, n funcie de caracteristicile fizico-chimice. Compuii liposolubili se reabsorb
pn la metabolizare complet n compui hidrosolubili, eliminabili renal; electroliii
slabi se elimin n raport cu pH-ul urinei tubulare (pH-ul alcalin favorizeaz
eliminarea compusului acid ionizat, deoarece reabsorbia tubular este mpiedicat, iar
pH-ul acid favorizeaz eliminarea compusului bazic); electroliii tari se elimin rapid,
indiferent de pH-ul urinar deoarece sunt complet disociai.
inducia (sau inhibiia) enzimatic modific ritmul excreiei;
vrsta i integritatea funciei renale: la vrstnici i tarai renal eliminarea
toxicului este redus;
interaciuni: toxicii care se elimin prin secreia activ tubular pot intra n
competiie pentru mecanismele de transport.
Calea digestiv (prin sucuri digestive i bil) este caracteristic pentru toxicii
cu mase moleculare de 400-500. Rolul ficatului este important n eliminarea toxicilor
din organism, dar efectul su este contracarat de reabsorbia toxicului de intestin prin
circuitul enterohepatic. De aceea, se elimin prin tubul digestiv (fecale) acei toxici
care sunt concentrai n bil, dar nu sunt reabsorbii din intestin.
Calea pulmonar este caracteristic gazelor i substanelor volatile care strbat
membrana alveolocapilar i, ajungnd la alveole, sunt evacuate prin expiraie.
Alte ci de eliminare: prin tegumente, fanere, glande sudoripare se elimin
metale grele, arsen, halogenuri, unele substane volatile; prin glanda mamar se
elimin o serie de medicamente i toxici.




112







Reaciile de conjugare
1. Glucuronoconjugarea:
R - OH
(R - SH)
+
HO
HO
O
H
H
H OH
COOH
OH
H
H
(RS)RO
HO
O
H
H
H OH
COOH
OH
H
H
O (sau S) - glucuronid de tip eter(tioeter) Acid D-glucuronic
Ar - COOH + HO
O
- H
2
O
Ar - COO
O
O - glucuronid de tip ester
Ar - NH
2
+
O
- H
2
O
Ar - NH
O
N - glucuronid


2. Sulfoconjugarea:
C
6
H
5
OH(SH)
Sulfat
activat
C
6
H
5
O SO
3
H
(S)
Fenilsulfat (feniltiosulfat)
C
6
H
5
-NH
2
Sulfat
activat
C
6
H
5
-NH-SO
3
H
Sulfamat

3. Acetilarea
H
2
N-C
6
H
4
-SO
2
NH
2
+ CH
3
-COSCoA
HS CoS
CH
3
CONH-C
6
H
4
-SO
2
NH
2
Sulfanilamida Acetil-CoA
N-4-acetilsulfanilamida

4. Glicocolconjugarea:
C
6
H
5
-CO~SCoA + H
2
N-CH
2
-COOH
HS-CoA
C
6
H
5
-CO-HN-CH
2
-COOH
Benzoil-CoA
Glicocol
Acid hipuric

5.Glutamincojugarea:
C
6
H
5
-CH
2
CO~SCoA + H
2
N-CH-(CH
2
)
2
-CONH
2
Fenil-acetil-CoA
COOH
HS-CoA
C
6
H
5
-CH
2
COHN-CH-(CH
2
)
2
-CONH
2
Fenil-acetil-glutamina
COOH
Glutamina



113
CH
3
N N
(+)
Metil
activat
Piridina
N-metil-piridiu
N
N
H
N
N
CH
3
Nornicotina Nicotina
HO
HO
CH CH
2
NH CH
3
OH
Metil
activat
CH CH
2
NH CH
3
H
3
C
HO
O
OH
Adrenalina
Metnefrina
Metil
activat
C
2
H
5
SH C
2
H
5
CH
3
S
Etilmercaptan Etilmercaptan metilat
6. Metilarea:
X
_
Metil
activat

7. Mercaptarea:
Ar-H + HS-CH
2
-CH(NH
2
)-COOH
2H
Ar-S-CH
2
-CH(NH
2
)-COOH
cisteina
Arilcisteina (acid mercapturic)
Ar-X + HOOC-CH-CH
2
-CH
2
-CO-NH-CH-CO-NH-CH
2
-COOH
NH
2
CH
2
-SH
HX
NH
2
CH
2
-S-Ar
HOOC-CH-CH
2
-CH
2
-CO-NH-CH-CO-NH-CH
2
-COOH
Glutation
Aril-glutation





















114


Cap. VI Aciunea toxicilor asupra organismului: Toxicodinamia

Efectele nocive ale otrvurilor i drogurilor se resimt la nivel de esut, organ, aparat i sistem.
Totalitatea proceselor biochimice i fizico-chimice care au loc n cadrul interaciunii toxic-
organism constituie aciunea toxicodinamic.
Toxicii provoac modificri rapide i adesea reversibile care au loc la nivel celular i
subcelular, observabile prin microscopie optic i electronic. Modificrile patologice din
esuturi sunt precedate de modificri n biochimia lor.
n toate leziunile biochimice, la baza procesului se afl (i) o reacie molecular.
Interaciunea toxic-organism a fost explicat prin impactul ntre toxic i/sau metabolii i
anumite molecule ale organismului. Situsul primar de aciune toxic s-ar afla aadar la nivel
molecular. Mai mult, numai anumite grupri din molecul (-COOH, -NH
2
, -OH, -SH) ar fi
reactive, iar restul moleculei doar moduleaz reacia, nct majoritatea reaciilor au loc la
nivel submolecular.

1. Aciunea toxicilor la nivel de esut, organ, aparat, sistem

Sistemul nervos poate fi afectat de toxici n toate sectoarele sale: central, periferic, vegetativ,
prin aciune direct (la nivelul centrilor nervoi, al sistemelor neuroefectoare i al sistemelor
aferente neuroacceptoare) i indirect (ca urmare a hipoxiei, hipercapniei, modificrilor
hidroelectrolitice i acidobazice, colapsului vascular). Principalele tulburri neurologice i
psihice din intoxicaiile acute sunt:
Coma toxic apare n intoxicaiile acute, n special medicamentoase i prezint
variaii simptomatice n funcie de toxic;
Convulsiile sunt consecina hiperexcitabilitii zonelor motorii din scoar sau a
unor centri nervoi motori i medulari;
Tulburrile motorii (pareze, paralizii) i senzitive (neuromialgii, anestezii,
parestezii) au diferite substraturi;
Midriaza, mioza, rigiditatea pupilar pot aprea direct, generate de toxicprin
stimuleni vegetativi, ca i prin blocarea sistemelor enzimatice vegetative sau prin stri
hipoxice;
Delirul, cu sau fr halucinaii, apare n intoxicaii acute cu febr sau cu insuficien
renal acut, cu tulburri circulatorii i anemie grav;
Cefaleea, insomnia, somnolena, apatia, anxietatea, iritabilitatea sunt tulburri
neuropsihice.
Leziunile histopatologice la nivelul sistemului nervos central mbrac diferite forme,
n raport cu specificul toxicului. n intoxicaiile acute i n unele cronice (ex. saturnism) se
observ degenerescen mielinic a nervilor periferici.

115
Sistemul cardiovascular este afectat de toxici, direct sau indirect, prin aciune asupra
principalelor verigi ale circulaiei: contractibilitatea miocardului, frecvena cardiac, volumul
sangvin circulant, vasomotricitatea.
Tulburrile de contractibilitate survin prin aciune direct asupra miocardului sau
printr-un regim circulator coronarian inadecvat sau ca urmare a hipoxiei;
Tulburrile de ritm apar prin aciune asupra sistemului nervos periferic, ca i asupra
fasciculelor excitoconductoare ale miocardului;
Scderea volumului sangvin circulant are loc, n principal, prin creterea
permeabilitii capilare cu extravazare de plasm n esuturi, caviti seroase, lumen
gastrointestinal;
Alterrile vasomotricitii sunt vasodilataia (prin deprimarea SNC) i
vasoconstricia.
Dintre manifestrile clinice ale tulburrilor cardiovasculare din intoxicaiile acute,
insuficiena circulatorie acut periferic (ocul toxic sau colapsul toxic) i stopul cardiac sunt
modalitile cele mai frecvente de letalitate.
Aparatul respirator poate fi afectat pe urmtoarele ci:
Inflamaia acut a mucoasei tractului respirator care poate conduce la asfixie, prin
lips de aer;
Alterarea permeabilitii membranei alveolocapilare, urmat, imediat sau tardiv, de
edem pulmonar acut toxic;
Excitarea sau deprimarea centrilor respiratori poate conduce la stop respirator;
Blocarea hemoglobinei circulante (cazul CO) sau a respiraiei celulare (cazul CN

)
conduce la asfixie prin incapacitatea de fixare a oxigenului pe hemoglobin, respectiv prin
anoxie tisular;
Paralizia muchilor respiratori determin asfixie.
Ficatul poate fi lezat prin aciune toxic direct asupra hepatocitului sau prin aciune
trofopatic, cnd se produce carena n unii factori indispensabili hepatocitului. Se pot
produce hepatopatii i prin hipersensibilitate individual sau prin imaturitate hepatic
(perioada neonatal) sau prin deficit enzimatic. Toate formele de hepatopatii implic scderea
circulaiei intrahepatice.
Toxicii liposolubili afecteaz predominant hepatocitele, iar toxicii hidrosolubili,
celulele tubulorenale.
Leziunile hepatice intereseaz att parenchimul (hepatocitele), ct i mezenchimul.
Iniial se produce degenerescena hepatocitelor, urmat de inflamarea mezenchimului.
Aceasta din urm nu are loc dac lezarea hepatocitelor este fie uoar i reversibil, fie
masiv, cu evoluie rapid fatal. Leziunile parenchimatoase sunt de tip necroz, steatoz
(ncrcare gras) i colestaz, iar leziunea mezenchimului const n scleroz.
n funcie de durata i intensitatea expunerii la toxic, precum i cu sensibilitatea
individual, afectarea ficatului se exprim prin: atrofie galben acut (hepatonecroz ntins,
ireversibil), hepatit acut (hepatonecroz limitat cu regenerare n timp), hepatit subacut
sau cronic (hepatonecroz progresiv, cu reparaie mezenchimal), ciroz (scleroz ntins,
cu sfrit letal).

116
Rinichiul este afectat de acei toxici i/sau metabolii care se elimin n principal la
acest nivel. Lezarea se produce prin mecanism direct sau alergic sau ca o consecin a
hipoxiei din starea de oc:
Nefropatia acut tubular toxic se produce prin aciunea nefrotoxic direct.
Poriunea cea mai sensibil este tubul contort proximal unde au loc concentrarea i
reabsorbia afectarea exprimndu-se prin procese degenerative de diferite grade. Leziunile
nefrotice se nsoesc, cnd intoxicaia este grav, de leziuni determinate de ischemie (deficit
circulator local). Tabloul clinic este de insuficien renal acut toxic;
Rinichiul n stare de oc este consecina aciunii toxice indirecte, cnd n cadrul
ocului toxic, alturi de alte organe i sisteme, este afectat i rinichiul, datorit anoxiei
ischemice, cu instalarea oliguriei (anuriei). Dac ischemia este prelungit, diureza nu este
reluat dup nlturarea strii de oc a intoxicatului i apare sindromul de insuficien renal
acut toxic;
Nefropatia cronic, profesional sau medicamentoas, poate fi primar sau secundar
cronic cnd rezult din evoluia unei nefropatii acute.
Aparatul digestiv este afectat de majoritatea toxicilor introdui pe cale oral. Acetia
acioneaz fie direct pe diferite structuri, fie indirect, prin intermediul sistemului nervos
central sau vegetativ sau al unor reacii imunoalergice. Leziunile organice sau funcionale sunt
exprimate prin diferite manifestri.
Sngele i mduva hematogen pot fi atacate de toxici care provoac hemopatii induse
prin atacarea mduvei hematogene (hemopatii mielotoxice sau imunopatogene), hemopatii
induse prin atacarea elementelor sngelui circulant, hemopatii induse prin combinarea
ambelor mecanisme, aciunea prevalnd fie pe mduv, fie pe elementele sngelui.
Tulburrile hidroelectrolitice i de echilibru acido-bazic pot fi deosebit de grave n
intoxicaiile severe i se realizeaz prin urmtoarele mecanisme: vrsturi i diaree;
hipersudoraie i hipersecreie glADNular; scderea (abolirea) funciei renale; ntreruperea
aportului oral sau aport exagerat parenteral; formarea de exces de acizi prin metabolizarea
toxicului; aport de acizi i baze exogene (intoxicaii acute cu acizi i baze, unde crete sau
scade pH-ul sangvin).
Aciunea toxic direct este caracteristic unui numr limitat de toxici care determin
inflamaia sau necroza esutului cu care vin n contact: tegumentele (substane vezicante, acizi
i baze tari), conjunctivele bulbare (substane lacrimogene), mucoasele tractului respirator
(gaze iritante), mucoasele bucal, esofagian i gastric (substane iritante, caustice, corozive
etc.).

2. Aciunea toxicilor la nivel celular

Membrana celular (fig. 2) regleaz ptrunderea i eliminarea substanelor spre interior i spre
exterior, meninnd constant compoziia mediului intern. Toxicul poate influena fluxul ionic
prin membran prin micorarea canalelor ionice, cnd se produce stabilizarea membranei i
blocarea conducerii nervoase prin ntreruperea fluxului ionic (cazul cocainei). Deoarece

117
exist canale separate pentru Na
+
i pentru K
+
, unii toxici(tetrodoxina) blocheaz fluxul de
sodiu, alii (clorura de tetraetilamoniu), fluxul de potasiu;
De asemenea, unii toxici (DDT, alcaloizii din veratrum) favorizeaz lrgirea canalelor
ionice, cnd se produce labilizarea membranei. Totodat, printr-o aciune anti-ATP-azic
(ouabain) se produce inhibarea pompei cationice.
Nucleul este afectat de toxici prin:
inhibarea precursorilor acizilor nucleici;
ncorporarea n acizii nucleici;
legarea covalent cu acizii nucleici;
formarea complecilor reversibili cu ADN;
interferarea cu ADN- i ARN-polimeraza.
Inhibarea precursorilor acizilor nucleici este realizat de antagonitii acidului folic i
de antimetaboliii bazelor purinice (adenina, guanina, hipoxantina, xantina) sau pirimidinice
(uracilul, citozina, timina), care, dei analogi chimici ai acestor baze, formeaz compui
inutilizabili de ctre celul . Astfel, 6-tiopurina, analog chimic al hipoxantinei, mpiedic
intrarea acesteia n celul, deoarece hipoxantina formeaz acid inozinic, n timp ce 6-tiopurina
sintetizeaz acid tioinozinic, respins de celul. Asemntor reacioneaz i 5-fluorouracilul,
analog chimic al uracilului.
6-Tioguanina, inhib biosinteza acizilor nucleici, dar se poate ncorpora n acetia n
locul bazelor naturale.
Legtura covalent cu acizii nucleici se refer la substanele antitumorale i la
cancerigeni.
Compleci reversibili cu ADN pot forma LSD i unele antibiotice (antracilina,
rubidomicina) care afecteaz replicarea i transcrierea; legturile fiind electrostatice,
modificarea pH-ului mediului determin desfacerea complecilor.
Interferena cu ADN- i ARN-polimeraza este cazul sarcomicinei care inhib ADN-
polimeraza, blocndu-I gruprile SH, sau al rifamicinei i rifampicinei, care inhib ARN-
polimeraza la microorganisme nu ns la mamifere fapt pe care se bazeaz utilizarea lor
clinic.
Mitocondriile sunt sediul lanului respirator (transportor de electroni) i al cuplrii
acestui proces cu fosforilarea oxidativ, avnd ca rezultat sinteza de ATP. Transportul
electronilor este de asemenea cuplat cu ciclul Krebs. Aciunea toxicilor poate avea loc la
urmtoarele nivele:
Ciclul Krebs este blocat de diferii toxici (inhibitori) la oricare din secvenele sale;
astfel, acidul fluoracetic realizeaz sinteza letal unele fenotiazine inhib dehidrogenazele
NAD-dependente, cu oprirea ciclului la nivelele respective;
Lanul respirator este blocat prin inhibarea flavinnucleotidelor (barbiturice, unele
fenotiazine), a citocromilor (CN

, H
2
S, actinomicin), a enzimei Q (dicumarinice) etc.;
Sinteza ATP este micorat de unele xenobiotice (CCl
4
, tetracicline, digitalice); ali
toxici mpiedic fosforilarea oxidativ prin aciune mixt asupra lanului respirator i a
sintezei ATP; decuplarea transportului de electroni cu fosforilarea oxidativ este modul de
aciune al dinitrofenolilor;

118
Modificarea permeabilitii membranei mitocondriale are loc prin diferite
mecanisme (de pild, prin interaciune cu SH);
Influena sintezei proteinelor mitocondriale are loc prin inhibare (actinomicina D
blocheaz ARN-polimeraza) sau prin activare (hormonul tiroidian stimuleaz captarea unor
aminoacizi).
Reticulul endoplasmatic este format din membrane de separare aranjate ntr-un sistem
de canalicule care ating nucleul i nconjoar mitocondriile. Unele poriuni ale reticului
endoplasmatic sunt netede (REN), n timp ce altele poart granule de ribozomi (reticul
endoplasmatic rugos, RER). Principalele mecanisme de aciune a toxicilor asupra reticulului
endoplasmatic sunt:
Modificarea structurii reticulului prin scderea sintezei lipoproteinelor, consecin a
scderii sintezei ATP n mitocondrii. Astfel, tetraciclinele determin steatoz hepatic cu
vacuolizarea reticulului endoplasmatic i creterea cantitii de membrane netede (REN),
concomitent cu scderea cantitii de membrane rugoase (RER);
Hipertrofia reticulului prin stimularea activitii OFMM ca urmare a induciei
enzimatice;
Inhibiia direct a enzimelor (novobiocina inhib glucuronil-transferaza hepatic, cu
eliberare de bilirubin i apariia hepatitei toxice);
Ribozomii sunt granulele dispuse de-a lungul reticulului endoplasmatic i reprezint
locul de sintez a proteinelor dup modelul dat de ARN-mesager. Sinteza proteic poate fi
afectat de unii toxici. Astfel, purotonina, un antitumoral asemntor structural cu poriunea
din ARN de transfer (t-ARN) la care se fixeaz aminoacizii activai (aminoacil-t-ARN).
Puromicina poate forma o legtur peptidic cu un aminoacid anterior legat de lanul peptidic
(prin gruparea NH
2
), ns mpiedic legarea aminoacidului urmtor, oprind creterea lanului
peptidic.
Lizozomii, cu rol n activitatea digestiv a celulei, pot fi afectai de toxici prin
urmtoarele mecanisme:
Afectarea permeabilitii membranelor: lizozomii conin enzime hidrolitice cu pH
optim acid care, n mod obinuit, sunt separate de substratele lor din citoplasm prin
membrana fosfolipidic a lizozomilor. n final se produce dereglarea organitelor (mitocondrii
i reticul endoplasmatic), urmat de citoliz.
Principala cauz a modificrii permeabilitii membranare este anoxia, iar aceasta este
consecina dereglrii respiraiei celulare i a producerii de energie. Modificarea permeabilitii
membranare este produs de hepatotoxici (CCl
4
), sulfat de streptomicin, digitalice, DNOC
etc.

3. Aciunea toxicilor la nivel molecular

O mare parte din efectele toxice sunt consecina inhibiiei enzimatice. Aceasta poate fi:
Competitiv, cnd inhibitorii, fiind analogi chimici ai substratului, intr n
competiie cu acesta pentru ocuparea centrilor activi ai enzimei, formnd complexul inhibitor-

119
enzim. Cu ct concentraia substratului este mai mare, cu att capacitatea inhibitorului de a
forma complexul cu enzima este mai mic;
Necompetitiv, cnd inhibitorii nu au structur analog substratului, deci nu
concureaz pentru centrii activi enzimatici, iar concentraia substratului nu influeneaz
efectul inhibitorilor. Exist inhibitori necompetitivi reversibili, care induc doar o ncetinire a
reaciei enzimatice, i inhibitori necompetitivi repetitivi ireversibili, care determin
inactivarea enzimei.
Un tip aparte de competiie enzimatic este competiia alosteric, cu rol important n
reglarea activitii enzimatice. Numeroase enzime posed doi centri capabili s fixeze
substanele: un centru izosteric (activ) care leag substratul i compuii nrudii structural,
realiznd cataliza; un centru alosteric, care leag compuii diferii structural de substrat, cu rol
de inhibitori sau activatori. Fixarea unui inhibitor de exemplu citratul din ciclul Krebs pe
centrul alosteric al fosfokinazei determin modificri conformaionale ale enzimei la
nivelul centrului activ, sczndu-I afinitatea fa de substrat cu limitarea, n exemplul dat, a
glicolizei (fig. 5).
Principalele mecanisme din interaciunea toxic-enzim sunt:
Denaturarea protein-enzimei (apoenzimei), prin acizi i baze tari, fenol,
formaldehid, metale grele;
Blocarea gruprilor reactivate ale apoenzimei (-SH, -OH, -NH
2
, -COOH); de
exemplu, gruprile SH sunt blocate de ageni oxidani (fericianur), compui de arsen,
metale grele (Pb, Hg), ageni alchilani (iodacetat, iodamid);
Modificarea conformaional a enzimei: anumii toxici ngusteaz, de exemplu, la
alcooldehidrogenaz, calea de acces a etanolului spre centrul activ;
Competiia cu gruparea prostetic: CN

complexeaz Fe
3+
din citocromoxidaz;
Competiia cu coenzima: acidul piridin-3-sulfonic i acetil-3-piridina acioneaz ca
antimetabolii ai nicotinamidei din compoziia coenzimelor NAD i NADP;
Complexarea metalului activator: fluorul complexeaz Mg din enolaz; sulfura de
carbon, disulfiramul, ditiocarbamaii complexeaz Cu din citocromoxidaz,
aldehiddehidrogenaz, monoaminooxidaz, tirozinaz i Zn din anhidrida carbonic, lactic
dehidrogenaz, alcooldehidrogenaz; chelatanii (ex. srurile acidului edetic EDTA)
spoliaz organismul de unele metale bivalente;
Competiia cu substratul;
Sustragerea substratului (H
3
AsO
3
reacioneaz cu gliceraldehida cu formare de acid
fosfoarsengliceric, i priveaz etapa urmtoare a glicolizei de acidul difosfogliceric, substratul
normal).
Sinteza letal este procesul prin care o substan exogen netoxic este transformat n
organism ntr-una toxic. Este cazul fluoracetatului care in vitro nu este toxic pentru enzimele
ciclului Krebs; in vivo, din fluoracetat activ i oxaloacetat se sintetizeaz fluorcitrat. Acesta
inhib aconitaza (enzima din etapa citrat-oxaloacetat), blocnd ciclul Krebs. Ca urmare a
leziunii biochimice la acest nivel, organismul este privat de energie, iar citratul se acumuleaz
n esuturi, legnd Ca
2+
, spoliind organismul de acest element.

120
Unii antimetabolii, fiind analogi chimici ai metabolitului normal, acioneaz prin
nlocuirea acestuia, determinnd fie oprirea reaciei, fie formarea unui nou metabolit care
ncetinete sau oprete reacia urmtoare din lanul metabolic. De pild, sulfanilamida se
substituie n bacterii acidului p-aminobenzoic, mpiedicnd sinteza acidului folic; dicumarolul
se substituie vitaminei K, determinnd hemoragii; acidul piridin-3-sulfonic nlocuiete
nicotinamida din NAD i NADP i de asemenea, careneaz organismul n nicotinamid;
etionina, analog metioninei, induce o leziune biochimic prin formarea S-adenozil-etioninei n
locul S-adenozil-metioninei, cu implicaii n procesul de metilare i n sinteza proteic; 6-
tiopurina i 5-fluorouracilul interfer cu bazele normale ale acizilor nucleici, realiznd o
ncorporare letal etc.
Efecte nocive asupra acizilor nucleici. Bazele azotate conin perechi de electroni
neparticipani i pot accepta structuri electrofile. Cancerigenii sunt substane cu structur
foarte variat, ns majoritatea lor sunt reactani electrofili. Alii, hidrocarburi policiclice
condensate, nitrozamine, amine aromatice policiclice, sunt de fapt precancerigeni i necesit o
prealabil activare metabolic cnd se formeaz precursori cancerigeni i n final metabolitul
ultim, cancerigen, puternic electrofil. Acesta se poate detoxica prin metabolizare sau se poate
fixa covalent pe ADN, macromolecula int, sau pe alte molecule proteice. Ali cancerigeni
determin perturbri n proprietile ADN fr intervenia legturii covalente, prin simpl
intercalare n dubla elice a acestuia.
Interaciunea xenobiotic-receptor. Receptorii farmacologici sunt formaiuni
infrastructurale ale celulei, avnd proprietatea de a lega, mai mult sau mai puin specific,
anumite molecule endogene i exogene (medicamente i toxici). Majoritatea receptorilor sunt
poriuni ale membranei. Alii se gsesc n citoplasm sau n subuniti ale unei molecule de
enzim.
Inhibitorul (toxic, chimioterapic) are afinitate pentru receptor cu care poate forma un
complex.
Interferena n neurotransmisie poate avea loc prin diferite mecanisme i la diverse
nivele ale sistemului nervos, datorit: agenilor blocani ai receptorilor colinergici sau
adrenergici la sinapsele interneuronale sau la jonciunile neuroefectoare; unor inhibitori ai
sintezei i eliberrii neurotransmitorilor; unor substituieni ai neurotransmitorilor, cu
aciune proprie colinergic sau adrenergic.
Efecte toxice asupra transportului, difuzrii i utilizrii oxigenului, ca i asupra
stocrii energiei:
blocarea transportului de oxigen: CO intr n competiie cu O
2
pentru Hb i
formeaz carboxihemoglobina, blocnd transportul de oxigen la esuturi. Nitriii nitro- i
aminoderivaii aromatici, precum i alte methemoglobinizante transform Hb (Fe
2+
) n MetHb
(Fe
3+
) care nu transport oxigenul. Totui, mici cantiti de MetHb sunt reduse la Hb n
hematii. Dac MetHb este n cantitate mare sau n deficit de glucozo-6-fosfat-dehidrogenaz,
reducerea spontan nu se mai realizeaz. Sulfonamidele n prezena methemoglobinizantelor
transform Hb n sulfhemoglobin, netransportoare de oxigen. Derivaii de hidrazin lezeaz
membrana eritrocitar cu eliberarea Hb din eritrocit (hemoliz), iar hemoglobina plasmatic
nu transport oxigenul;

121
mpiedicarea difuzrii oxigenului: unii anestezici (eter, halotan) i solveni organici
nepoleri se acumuleaz n lipidele membranare i mpiedic difuzarea oxigenului i glucozei
n interiorul celulei. Neuronul este deosebit de sensibil la lipsa acestor substane;
mpiedicarea utilizrii oxigenului: cianurile complexeaz Fe
3+
din citocromoxidaz;
tranferul de electroni pe lanul mitocondrial poate fi blocat la diferite nivele; acidul fluoracetic
blocheaz ciclul Krebs la nivelul aconitazei;
risipirea energiei sub form de cldur: dinitrofenolul i dinitroortocrezolul produc
decuplarea fosforilrii oxidative, cnd oxigenul este bine utilizat, ns energia nu se
acumuleaz n fosfaii macroergici (ATP) putnd fi apoi utilizat de celule, ci se pierde sub
form de cldur.
Antagonismul ntre ioni: Cd
2+
este antagonistul Zn
2+
i Cu
2+
, probabil prin competiie
pentru situsurile de transport.
Inducerea reaciilor de sensibilizare: unii toxici (izocianai, formaldehid, anhidrid
ftalic etc.) i medicamente (antibiotice, sulfamide, antipiretice-analgezice, etc.) induc
sensibilizare datorit proprietii de a juca rol de hapten. Aceasta se unete n organism cu o
macromolecul, realiznd antigene care determin, ca rspuns, sintez de anticorpi.

4. Factorii determinani ai toxicitii
Factori dependeni de substan. Toxicitatea unei substane depinde de doza, structura
chimic, puritatea, modul de administrare i interaciunile sale cu ali compui.
Structura chimic. Gruprile chimice confer caracterul hidro- sau liposolubil i, deci,
i tipul de aciune biologic. Gruprile toxofore: =C=, =S, NO
2
, N=C<, CN, P<,
asemntoare gruprilor cromofore din colorani, sunt responsabile de toxicitate, iar gruprile
autotoxe (halogeni, oxizi inferiori, NH
2
, >C=C<, C
6
H
5
, C
6
H
4
, CH
2
), asemntoare
grupelor auxocrome, intensific aciunea toxic.

5. Proprietile fizico-chimice ale toxicilor
Starea de agregare influeneaz ptrunderea toxicilor n organism; toxicii gazoi acioneaz
rapid i intens cnd ptrund pe cale respiratorie.
Masa molecular mare i gradul mic de dispersie influeneaz negativ viteza de
absorbie.
Forma amorf asigur o dizolvare i o absorbie mai rapid dect forma cristalin
pentru aceeai substan (ex. morfin, stricnin i novocain). n unele cazuri, substanele sunt
active numai n form amorf, deoarece hidroliza la nivel gastrointestinal nu afecteaz forma
cristalin, nct substana nu poate fi absorbit(de ex. stearatul i palmitatul de cloramfenicol).
Polimorfismul are implicaii n cinetica toxicilor, deoarece structura cristalin imprim
stabilitate sau instabilitate termodinamic formei respective. Forma cristalin stabil prezint
solubilitate redus, punct de topire crescut i stabilitate chimic crescut, ntrziind absorbia.
Volatilitatea crescut mrete riscul intoxicrii.
Hidro- i liposolubilitatea, ca i raportul lipo/hidrosolubilitate influeneaz cinetica
absorbiei. O substan insolubil nu poate fi absorbit. Dizolvarea este condiionat, n
primul rnd de lipofilie (dependent de gruprile chimice) deoarece membrana de traversat

122
este lipoidic, iar molecula trebuie s se dizolve n ea. n plus, dup depirea membranei,
molecula difuzeaz n apa protoplasmatic, apoi n apa extracelular, nct trebuie s posede o
anumit hidrofilie. De aceea, moleculele cu un coeficient mediu de repartiie lipide/ap
(coeficient Owerton-Meyer) sunt cel mai bine absorbite.
n cazul ptrunderii pe cale respiratorie, cnd hidrosolubilitatea este mare
(coeficient lipide/ap mic) alcoolul organismul are o capacitate de absorbie mare.
Saturarea organismului i eliminarea pulmonar au loc lent, ceea ce conduce la intoxicaii n
timp, prin acumulare. Din contra, atunci cnd hidrosolubilitatea este mic (coeficient
lipide/ap mare) benzenul saturarea organismului i eliminarea pulmonar au loc rapid,
producndu-se intoxicaii acute.
n cazul ptrunderii transcutanate, riscul intoxicaiei depinde deopotriv de
liposolubilitate i de hidrosolubilitate. De aceea, substanele cu coeficient lipide/ap mediu
eterul prezint un risc cutanat crescut.
Calea digestiv, este aplicabil att substanelor hidrosolubile ct i celor
liposolubile. Absorbia substanelor disociabile este influenat de pH-ul segmentului digestiv
respectiv.
Ionizare, pH-pK: acizii slabi (barbituric, salicilic), neionizabili n mediu acid, sunt
absorbii n stomac, pe cnd bazele slabe (alcaloizi, amfetamin, imipramin), puternic
ionizate n mediu acid, sunt absorbite n duoden, al crui mediu este alcalin.
Puritatea i concentraia. Impuritile pot influena aciunea toxic. Conservarea
necorespunztoare este capabil s modifice toxicitatea (acizii pstrai n recipiente de plumb,
dizolv metalul devenind toxici). Perioada de recoltare, aria geografic, condiiile
meteorologice influeneaz coninutul n principii active al plantelor. Operaiile de splare,
fierbere, etc., pot micora toxicitatea ciupercilor. Concentraia din produs determin, de
regul, creterea toxicitii; n unele cazuri ns, concentraiile mari micoreaz
permeabilitatea mucoasei reducnd apreciabil absorbia toxicului la acel nivel (ex. HCl conc.).
Calea i viteza de administrare. Calea de administrare influeneaz intensitatea
aciunii toxice, perioada de laten pn la apariia efectului toxic, precum i durata aciunii
toxice. Toxicitatea este influenat, de asemenea, de viteza de administrare a toxicului.
Interaciuni. Dou sau mai multe xenobiotice interacioneaz ntre ele sau cu anumii
constitueni ai alimentelor.
Efectul interaciunii poate fi: sinergic, cnd cele dou substane au acelai sens de
aciune. Dac suma efectelor este egal sau mai mic dect efectele celor dou substane
considerate separat (ex. bromuri alcaline) se obine sumare sau adiie. Dac suma lor este mai
mare, efectul reprezint o potenare (barbiturice

+ etanol, morfin + amfetamin).
Indiferent, cnd aciunea celor dou substane se desfoar independent una de alta,
fr a interaciona ntre ele.
Antagonic, cnd aciunea celor dou substane are sens contrar, rezultnd un efect
global micorat, nul sau inversat (de pild, anticolinergice + morfin, antiparkinsoniene +
fenotiazine etc.).
Competiia pentru proteinele plasmatice (n timpul transportului sau depozitrii) are
loc pentru centrii oferii de proteine, ntre dou substane, ambele cu afinitate pentru acestea.

123
Substanele cu afinitatea cea mai mare (cu caracter acid, ca fenilbutazona, acidul tricloracetic
sau bazic, ca imipramina, difenilhidantoina) ocup locul celeilalte substane. Aceasta,
mpiedicat s se fixeze,rmas liber, se echilibreaz la locul aciunii la un nivel mai ridicat,
rezultnd potenare. Astfel, warfarina se fixeaz pe proteinele plasmatice n proporie de 97%,
rmnnd liber numai 3%; dac o substan competitiv deplaseaz din fraciunea fixat nc
3%, concentraia formei libere se dubleaz, crescnd n mod periculos cantitatea de
protrombin la subiecii tratai cronic cu anticoagulante. Alt dezavantaj al deplasrii
competitive este ncrcarea ficatului (care metabolizeaz fraciunea rmas liber) i a
rinichiului (care o filtreaz glomerular). Dei dezechilibrul determinat de competiia pentru
proteinele plasmatice este doar tranzitoriu, totui, n cazul potenrii, efectele inhibiiei
pariale a fixrii pe proteine pot fi deosebit de grave;
Competiia pentru receptorii tisulari (sau centrii activi) determin modificri n
structura teriar a proteinei (cu reducerea numrului centrilor de fixare) dac unele substane,
mpiedicate s se fixeze pe proteina specific, se fixeaz pe ali centri.
Distribuia substanelor n cele trei compartimente hidrice poate suferi modificri.
Modificarea pH-ului (rezultat al proceselor metabolice sau al aciunii xenobioticelor) nu este
uniform n compartimentele extra- i intracelular. Ca urmare, datorit difuziei neionice, se
produce o trecere selectiv a xenobioticelor dintr-un compartiment ntr-altul. Astfel, substana
se acumuleaz n compartimentul cu pH mai alcalin i invers. Au loc modificri ale
concentraiei plasmatice i tisulare ale xenobioticelor, fr ca aceste modificri s se
repercuteze asupra absorbiei sau eliminrii (de exemplu, fenobarbitalul, cu aciune
intracelular, pierde din activitatea sa n prezena bicarbonatului de sodiu, realiznd o
concentraie plasmatic mai mare).
Inducia enzimatic reprezint accelerarea metabolizrii xenobioticelor ca urmare a
stimulrii sintezei i activitii enzimelor microzomiale. Inducia are loc n cazul hipnoticelor,
sedativelor, narcoticelor, stimulanilor SNC, analgezicelor-antipireticelor, etanolului, unor
pesticide, substanelor cancerigene etc.
Inhibiia enzimatic este fenomenul invers induciei i este observat la iproniazid,
catron, nialamin, cloramfenicol, compui organofosforici, ozon, tetraclorur de carbon.
Eliminarea este accelerat sau ntrziat prin:
Competiie pentru folosirea aceleai ci (penicilina i probenecidul folosesc, ambele,
transportul activ tubular, rezultnd ntrzierea eliminrii penicilinei, cu prelungirea activitii
sale);
Alcalinizarea sau acidifierea urinei (alcalinizareantrzie eliminarea penicilinei, cu
prelungirea activitii sale);
Alcalinizarea sau acidifierea urinei (alcalinizanii ionizeaz barbituricii, sulfamidele,
salicilaii, mpiedicndu-le reabsorbia i accelerndu-le eliminare; dimpotriv, acidifianii
grbesc eliminarea amfetaminei, imipraminei, antipirinei, bazelor purinice).
Faza toxicodinamic: interaciunile pot avea loc i n aceeai faz, la nivelul unor
receptori. Astfel, nalorfina intr n competiie cu morfina la nivelul receptorilor celulari;
alcoolul i barbituricele se poteneaz pentru c acioneaz la acelai nivel; diureticele
determin scderea ionilor de potasiu, potennd aciunea curarizantelor etc.

124
Pericolul asocierii xenobioticelor const n: posibilitatea creterii toxicitii
substanelor nocive; intensificarea activitii i toxicitii unor medicamente (n special cu
margine ngust de siguran); anularea efectului farmacologic, uneori cu rezultat fatal, ca n
cazul coagulantelor.

6. Factorii dependeni de organism
Exist diferene calitative i cantitative n efectul toxic ntre speciile animale, ca i ntre
animal i om: talidomida este teratogen la om i iepure, dar nu la hamster; toxicitatea
alfanaftilureei este de peste 500 de ori mai mare la maimu dect la obolan.
Sexul. S-a constatat o mai mare frecven i intensitate a reaciilor adverse i a
toxicitii la unele medicamente i toxici, la femeie de brbat. Au fost incriminai factori
psihosomatici, metabolici (metabolizarea ar fi mai lent la femeie), hormonali (la animal,
diferena de toxicitate ntre sexe a fost observat numai dup pubertate sau dup castrare).
Vrsta. Fetusul i nou-nscutul prezint o sensibilitate deosebit la numeroase
medicamente, n funcie de mecanismele de aciune ale acestora. Vrstnicii manifest o
frecven crescut a accidentelor terapeutice, datorit mai multor factori.
Graviditatea. Placenta este permeabil pentru unele xenobiotice sau poate interveni
direct n biotransformarea lor. Majoritatea xenobioticelor cu M<1000 traverseaz placenta
prin transfer activ sau pasiv i se regsesc n sngele fetusului. Transferul este maxim ntre
sptmna a 6-a i a 20-a de gestaie.
Masa i suprafaa corporal. S-a constatat la animal c exemplarele cu mas
corporal mic necesit, proporional, o cantitate mai mare de substan pentru a rspunde n
acelai mod ca animalele cu mas corporal mare (din aceeai specie).
Starea psihic. Substanele biologic active acioneaz sinergic cu nivelul stresului.
Strile patologice. Afeciunile renale scad eliminarea substanelor excretabile
preponderent pe cale urinar (antibiotice, digitalice), crescndu-le semiviaa plasmatic; dac
dozele nu sunt reduse, pot aprea efecte toxice. Afeciunile hepatice determin ncetinirea sau
insuficiena metabolizrii medicamentelor, rezultnd acumularea lor (2-metilaminofluorenul
formeaz derivatul N-hidroxi, cancerigen, ntr-o rat mai mare la animalele tarate hepatic).
Factorii genetici. Pn n prezent evideniat mai multe enzimopatii, corelate cu
absorbia unor xenobiotice, de ex.:
Alcooldehidrogenaza (ADH) este principala enzim care metabolizeaz etanolul; s-a
decelat la om existena izoenzimelor i a polimorfismului ADH, ceea ce explc, cel puin
parial, sensibilitatea rasial i individual la efectele etanolului;
Monooxidaza transform benzantracenul (precancerigen) n epoxid (cancerigen); ntr-
un lot reprezentativ s-a gsit c 10 din subieci manifestau activitate monooxidazic puternic,
fiind deci expui la cancer pulmonar datorat acestei hidrocarburi policiclice existente n mediu
(fum deigar, pulbere de asfalt );
Glucozo-6-fosfat dehidrogenaza (G-6-PD) intervine n metabolizarea glucozei pe cale
pentozic; deficitul n aceast enzim afecteaz 3% din populaia globului, dar deficitul
rmne inaparent pn la administrarea unor substane oxidante (antimalarice, sulfamide,
sulfone, analgezice-antipiretice), cnd calea pentozic este suprasolicitat i, deoarece

125
desfurarea reaciilor pe aceast cale este dej deficitar (prin lipsa sa G-6-PD), apar
hemoliz i methemoglobinemie, cu manifestrile clinice corespunztoare.
Bioritmul. n raport cu cu durata bioritmurilor fa de durata zilei, acestea se clasific
n ultradiene (peste 24 ore), ciecadiene (aprox. 24 ore) i infradiene (sub 24 ore). Ritmurile
ultradiene se mpart, la rndul lor, n sptmnale, lunare, anuale.
Factorii dependeni de mediu. Alimentaia, condiiile de confort, temperatura,
presiunea atmosferic, zgomotul, radiaiile ionizante, poluanii din mediu, fumatul etc. au, de
asemenea, efecte certe asupra toxicitii.

7. Combaterea efectelor toxice
Profilaxia intoxicaiilor. Prin aplicarea msurilor tehnico-organizatorice i igieno-sanitare de
profilaxie colectiv i individual se poate reduce numrul i gravitatea intoxicaiilor
profesionale:
Acestea prevd nlocuirea, acolo unde este posibil, a substanelor toxice i/sau
modificarea proceselor tehnologice nocive;
Legiferarea manipulrii substanelor nocive;
Educaia sanitar i instructajele periodice de protecia muncii;
Folosirea tehnologiilor de fabricare n instalaii ermetice i etane, a ventilaiei
adecvate (natural i mecanic), a semnalizatoarelor de alarm la depirea CMA etc.;
Supravegherea medical a muncitorilor prin: examen medical la angajare i
depistarea unor predispoziii la intoxicaii;
Examinarea toxicologic prin determinri ale toxicilor din atmosfera de lucru, ale
toxicilor i metaboliilor din lichidele biologice, ale indicatorilor biologici modificai sub
aciunea toxicilor; scopul final este stabilirea msurilor necesare pentru scderea
concentraiilor toxicilor sub limita admis;
Izolarea muncitorilor de mediul toxic (cnd trebuie lucrat ntr-un astfel de mediu)
prin profilaxie individual: echipament de protecie i masc, aplicarea de unguiente de
protecie, respectarea igienei individuale etc.
Tratamentul intoxicaiilor acute. Imediat dup evacuarea din mediul toxic, dac
intoxicatul prezint respiraie anormal, culoare neobinuit a tegumentelor (roie deschis,
albastr, cianotic), tulburri psihice, se trece, chiar la locul accidentului i n timpul
transportului ctre o unitate sanitar, la aplicarea msurilor de prim ajutor, i anume:
Eliberarea cilor respiratorii superioare se face prin desfacerea mbrcmintei de la
gt, ndeprtarea eventualilor corpi strini din gur (proteze), tergerea cavitii bucale,
aspirarea mucozitilor. Pentru pstrarea cilor aeriene libere se menine gura intoxicatului
ntredeschis pe tot timpul transportului, iar la intoxicatul incontient se asigur poziia de
decubit lateral cu ajutorul unei pturi fcute sul, ceea ce permite scurgerea lichidelor de
secreie i previne inhalarea de mucoziti etc.
Respiraia artificial se aplic dac respiraia nu revine la normal i se practic prin
prin procedeele gur la gur sau gur la nas (nu se aplic n intoxicaiile cu HCN, CN

,
gaze toxice, compui organofosforici). Intoxicatul va fi plasat n poziie de decubit dorsal,
ntins pe un plan orizontal dur, cu capul n hiperextensie (cu ajutorul unui sul aezat sub cap).

126
Oxigenoterapia, aplicat att n cursul respiraiei spontane, ct i artificiale, se practic
de obicei prin sond nazofaringian (n intoxicaia cu CO este indicat oxigenoterapia
hiperbar)

8. ndeprtarea toxicilor neabsorbii
Provocarea de vrsturi se aplic n lipsa posibilitii efecturii splturii gastrice. Se
administreaz intoxicatului 300 ml ap (o cantitate mai mare ar determina forarea pilorului i
trecerea toxicului n duoden), apoi de declaneaz reflexul de vom prin excitarea mecanic a
fundului gtului. Dup evacuarea coninutului gastric se repet operaia de ccccteva ori, cu
noi cantiti de cte 300 ml ap, pn la o cantitate total de 3-4 litri ap. Metoda este
contraindicat la intoxicaii comatoi, cardiaci, vrstnici hipertensivi i aterosclerotici,
emfizematoi, gravide i parial contraindicat la ingerarea de corozivi i caustici concentrai
i n mari cantiti, sau de distilate petroliere i detergeni, precum i la subiecii la care
toxicul ingerat a provocat covulsii.
Provocarea vrsturilor se poate realiza prin aplicare de vomitive ca sirop de ipeca sau
apomorfin.
Spltura gastric realizeaz ndeprtarea toxicilor neabsorbii din stomac. Dac
intoxicatul este contient se practic spltura cu ap, suspensie de crbune activat, cu sau
fr antidot, prin sonda Faucher introdus n stomac pe cale faringo-esofagian. Dac
intoxicatul este comatos, sonda se introduce pe cale nazal, iar calea aerian este intubat cu o
sond prevzut cu un balona obturator, pentru a evita aspirarea coninutului gastric n cile
aeriene i asfixierea intoxicatului. Poriunile de lichid de spltur se pstreaz pentru analize
toxicologice i chimico-legale.
Purgativul de obicei sulfatul de sodiu este administrat dup golirea stomacului
prin vrstur sau spltur (n acest caz purgativul este introdus prin sond).
Splarea tegumentelor are rolul mpiedicrii absorbiei toxicului transcutanat. Dup ce
se ndeprteaz rapid mbrcmintea, se spal tegumentele cu ap i spun (15 minute), de
preferin sub du.
Splarea sacului conjunctival se realizeaz cu ap n jet la presiune mic, timp de 5-
10 minute, meninnd pleoapele ndeprtate de globul ocular.

9. Administrarea antidoturilor
Antidoturile sunt substane capabile s inactiveze toxicii prin fenomene fizice sau reacii
chimice (antidoturi chimice sau antidoturi propriu-zise) sau s antagonizeze efectele toxicilor
(antidoturi fiziologice sau antagoniti).
Printre nsuirile antidoturilor sunt: aciunea specific asupra unui complex funcional
celular; o activitate ridicat; nu determin efecte adverse; nu elibereaz, prin biotransformare,
metabolii toxici; posed un efect antidotic persistent pentru o perioad de timp cunoscut.
Numrul antidoturilor cu aceste caliti este restrns, astfel nct numai 2% din intoxicaiile
acute beneficiaz de tratament antidotic.

127
Antidoturile se administreaz pe cale oral (nainte, o dat cu, sau dup spltura
gastric) pentru inactivarea toxicilor neabsorbii din tubul digestiv, sau pe cale oral ori
parenteral pentru inactivarea toxicilor deja absorbii.
Antidoturile care inactiveaz toxicii din tubul digestiv acioneaz prin:
Absorbie: crbunele activat adsoarbe unii toxici organici i anorganici. Adsorbia este
micorat sau mpiedicat de alimentele din stomac care astup porii particolelor de crbune,
dar nu este practic influenat de pH-ul mediului. Eficacitatea este maxim la 30 minute dup
ingerarea toxicului, dar antidotul este util i mai trziu, cnd toxicul a trecut de pilor.
Oxidoreducere:permanganatul de potasiu, n prezent rar folosit, este eficient n
intoxicaia cu morfin, atropin, cocain, barbiturice etc. Activitatea antidotic este accentuat
de mediul alcalin i limitat de causticitatea pentru mucoasa gastric.
Formare de compui insolubili (puin solubili): albuul de ou i laptele, precipit ca
albuminai unii alcaloizi i sruri de metale grele; scad efectele substanelor corozive i
caustice. Sunt contraindicate n intoxicaia cu toxici liposolubili (paration, solveni organici
etc.). Acidul tanic este rar folosit datorit hepatoxicitii sale; precipit alcaloizii, glicozizii,
srurile metalice. Srurile solubile de calciu (lactat, gluconat, clorur) precipit acidul oxalic,
acidul fluorhidric, fluorurile, ca sruri insolubile de calciu. Oxidul de magneziu precipit
anhidrida arsenioas, arseniii, ca sruri de magneziu insolubile i este indicat, de asemenea,
n intocsicaia cu acizi. Sulfatul de magneziu precipit srurile de bariu i de plumb, dnd
combinaii insolubile. Clorura de sodiu precipit azotatul de argint.
Formaree de compui solubili netoxici: unele substane antiacide, ca oxidul de
magneziu, sunt indicate la ngerarea de acizi; nu se recomADN administrarea per os de
bicarbonat de sodiu i carbonat de sodiu, deoarece n contact cu acizii degaj CO
2
, provocnd
distensie gastric soldat uneori cu perforaia peretelui stomacal deja lezat. Unele substane
antialcaline, cum ar fi soluia 1% de CH
3
COOH, se recomADN uneori la ngerarea bazelor
caustice; este ns mai eficace administrarea, chiar la locul accidentului, de ap potabil,
repetat, i provocare de vrsturi, deoarece mai trziu n intoxicaiile severe actul deglutiiei
nu mai este posibil. Soluia de spun este antidot pentru detergenii cationici, dnd compui
inactivi (dup care se provoac vrsturi).
Chelatorii capabili s stabileasc legturi cu cationii metalici prin electronii
neparticipani (de la N, -O, -SH) formeaz chelai ciclici, stabili, solubili, netoxici.
Stabilitatea crete cu cifra de coordinare a metalului. Utilizarea chelatorilor ca antidot este
limitat de : competiia ntre metalul toxic i metalele indispensabile organismului pentru
acelai chelator (spoliere de metale); competiia ntre chelatorul antidot i chelatorii naturali
(compui cu grupri SH, ca enzime, tioaminoacizi etc.) pentru acelai metal (ineficiena
antidotului).
Principalii chelatori cu rol de antidot sunt:
Srurile acidului etilendiaminotetraacetic (EDTA) (acid edetic) i compuii nrudii
sunt antidoturi n intoxicaii cu numeroase metale.
EDTACaNa
2
(Edetamin) este antidot n intoxicaia cu Pb, precum i cu alte metale
(Ni, Cr, Fe, Cu, Mn, Cd, Co), dar puin eficace n cazul Hg. Are loc un schimb ionic ntre
calciu i acel metal toxic cu mai mare afinitate pentru complexon dect Ca. Se formeaz

128
complexonai (chelai interni) tridimensionali, cu stabilitate diferit, n funcie de constanta
lor de disociere.
EDTANa
2
este recomADNat n intoxicaia cu digitalice, deoarece complexeaz
Ca
2+
(crescut n acest tip de intoxicaie).
EDTACo
2
(Kelocyanor) este antidot n intoxicaia cu CN

, pe care-l fixeaz n
dou trepte, ntruct EDTACo
2
se disociaz n dou trepte:
EDTACo
2
[EDTACo]
2
+ Co
2+
EDTA
4
+ 2Co
2+

Co
2+
+ 6CN

[Co(CN)
6
]
4

Deoarece Kelocyanor se administreaz n doz mai mare dect este necesar pentru
fixarea CN

, rmne un exces de Co
2+
; din aceast cauz se administreaz, la 15 minute dup
Kelocyanor, EDTACaNa
2
care fixeaz excesul de Co
2+
. Kelocyanor manifest toxicitate la
nivel cardiovascular atunci cnd, din eroare, este administrat unui subiect neintoxicat cu CN

.
La supradozare apar efecte toxice.

COONaNaOOC
H
2
C CH
2
Ca
N-CH
2
-CH
2
-N
COO
H
2
C
OOC
CH
2
CH
2
CH
2
CH
2
CH
2
CH
2
EDTA-CaNa
2
COO OOC
H
2
C CH
2
Co
N-CH
2
-CH
2
-N
COO
H
2
C
OOC
CH
2
EDTA-Co
2
Co
N-CH
2
N CH
2
COO
N-CH
2
COO
COONa
CH
2
COONa
Co
DCTA-CaNa
2
CH
2
N-CH
2
COO
N-CH
2
COO
COONa
CH
2
COONa
Co
DTPA-CaNa
2
OOC Na
Sruri ale EDTA i compuilor nrudii.
COONaNaOOC
H
2
C CH
2
Ca
N-CH
2
-CH
2
-N
COO
H
2
C
OOC
CH
2
CH
2
CH
2
CH
2
CH
2
CH
2
EDTA-CaNa
2
COO OOC
H
2
C CH
2
Co
N-CH
2
-CH
2
-N
COO
H
2
C
OOC
CH
2
EDTA-Co
2
Co
N-CH
2
N CH
2
COO
N-CH
2
COO
COONa
CH
2
COONa
Co
DCTA-CaNa
2
CH
2
N-CH
2
COO
N-CH
2
COO
COONa
CH
2
COONa
Co
DTPA-CaNa
2
OOC Na
Sruri ale EDTA i compuilor nrudii.


DCTACaNa
2
(diaminociclohexantetraacetatul de sodiu i calciu) este folosit n
intoxicaia cu Cd, pentru c formeaz chelai mai puin toxici dect EDTACaNa
2
.
DTPACaNa
3
(dietilentriaminopentaacetatul de sodiu i calciu) este recomADNat
n intoxicaia cu radioelemente din seria lantanidelor, ca i cu unele metale grele (Pb, Fe, Mn).
D-Penicilamina (, dimetilcisteina) (fig. 5) este antidot n intoxicaia cu metale
grele, n special cu Hg (mineral i organic).







COOH
H
3
C
CH NH
2
H
3
C
C SH
D - Penicilamina
COOH
H
3
C
CH NH
2
H
3
C
C
S
D Penicilamina
mercuric
Hg/2
D - Penicilamina
COOH
H
3
C
CH NH
2
H
3
C
C SH
D - Penicilamina
COOH
H
3
C
CH NH
2
H
3
C
C
S
D Penicilamina
mercuric
Hg/2
D - Penicilamina

129
De asemenea, este indicat n tratamentul bolii Wilson (o degenerare hepatolenticular
prin depunere intracelular de Cu n ficat, consecin a unui deficit n ceruloplasmin). Este
contraindicat n intoxicaia cu Cd (formeaz chelai nefrotoxici). Toxicitatea D-penicilaminei
fiind redus, permite un tratament ndelungat, dar s-au semnalat i unele reacii adverse.
Ditiocarb (dietilditiocarbamatul de sodiu), (C
2
H
5
)
2
NC(S)Sna este recomandat n
special n intoxicaia cu nichel tetracarbonil.
Desferioxamina (Desferal) (fig. 6)este recomADNat n intoxicaia cu fier i n
hemocromatoz. Fierul este eliminat prin legare covalent la nivelul resturilor hidroxamice,
rezultnd un complex ferioxamic eliminabil renal. Desferal nu scoate Fe
2+
din hemoglobin,
citocromi etc. i nici nu spoliaz organismul n alte microelemente.





Antidoturi cu grupri SH (care nu formeaz legturi coordinative):
Dimercaptopropanolul (DMP) a fost utilizat pentru prima dat (1941) ca antidot al
levizitei (se mai numete BAL, de la cuvintele British Anti-Lewisite). Este utilizat ca antidot
n intoxicaiile acute cu As i Hg (mineral), ns este mai puin eficient n intoxicaiile cu Cd,
Pb, Fe, Se, V, ca i n cazul leziunilor hepatorenale grave.
DMP leag metalul n stare ionic din combinaiile organice sau fixat pe SH din
enzime (proteine) (fig. 12). Acesta are dezavantajul spolierii organismului de unele metale
utile (Cu, Zn, Ca, Mg) i inactivarea insulinei, citocromoxidazei etc. datorit aciunii
reductoare a gruprilor SH.
Dimercaptosuccinatul de sodiu, este recomADNat n intoxicaia cu HgCl
2
i a fost
ncercat i n intoxicaia cu Pb (1978). Este mai puin toxic dect DMP i nu spoliaz
organismul de microelemente.
Thiola (2-mercapto-propionilglicocolul), este indicat n intoxicaia cu compuii Hg.

Reactivatorii colinesterazei de tip aldoximic au fost introdui n terapeutic n 1955
de Wilson. n prezent se folosesc:
Pralidoxima (PAM-2) (metiliodura de piridilaldoxim) i obidoxima (toxogonin)
(Cotru, 1993). Substanele organofosforice insecticide, substane toxice de lupt etc.
blocheaz centrul activ al acetilcolinesterazei (AchE), mpiedicnd accesul la enzim al
substratului su natural, acetilcolina; aceasta se acumuleaz la nivelul sinapselor, conducnd
la fenomene toxice. Reactivarea AchE are loc spontan, dar lent prin hidroliz.
NaOOC CH CH COONa
SH SH
CH
3
-CH-CO-NH-CH
2
-COOH
SH
Desferioxamina (Desferal)
H
2
N-(CH
2
)
5
-N-C-(CH
2
)
2
-C-N-(CH
2
)
5
-N-C-(CH
2
)
2
-C-N-(CH
2
)
5
-N-C-CH
3
HO
O
O O
O
HO
H HO
H O
Desferioxamina (Desferal)
H
2
N-(CH
2
)
5
-N-C-(CH
2
)
2
-C-N-(CH
2
)
5
-N-C-(CH
2
)
2
-C-N-(CH
2
)
5
-N-C-CH
3
HO
O
O O
O
HO
H HO
H O

130
Mecanismul acestei reactivri este urmtorul: blocarea AchE de ctre substanele
organofosforice const din fosforilarea sa, prin stabilirea unei legturi covalente ntre P i O
din hidroxilul serinei (component a centrului esterazic al AchE). Aldoxima se plaseaz cu
azotul cuaternar n dreptul centrului anionic al AchE; hidrogenul de pe gruparea oxim reface
centrul esterazic al AchE (:NHO) iar restul fosforic se leag de aldoxim, elibernd
enzima (v. insecticide organofosforice).
Acest proces are loc dac tratamentul este aplicat imediat, cnd enzima este reactivat
(tnr). Dac tratamentul este tardiv, enzima este nereactivabil (mbtrnit), rmnnd
definitiv blocat. Se presupune c aldoxima reacioneaz, n afara acestui mecanism de
reactivare, i prin facilitarea transmisiei neuromusculare pre- i postsinaptice, ceea ce
contribuie la revenirea la normal a transmisiei blocat de ctre organofosforice.
Toxigoninul, dei are n structur doi radicali amoniu cuaternar, poate strbate bariera
hematoencefalic, permind reactivarea acetilcolinesterazei din SNC.
Antidoturile fiziologice (antagonitii) sunt:
Atropina este folosit n intoxicaia cu substane organofosforice, n care caz combate
efectele muscarinice declanate de acumularea de acetilcolin, ns nu acioneaz asupra
blocrii periferice a transmisiei neuromusculare din aceast intoxicaie. Administrarea de
atropin trebuie efectuat urgent, chiar la locul accidentului, i n doze mari; pericolul
supradozrii este mai mic dect cel al subdozrii, iar dozele mici de atropin pericliteaz viaa
intoxicatului.
Fizostigmina (eserina), o amin teriar, combate aciunea substanelor anticolinergice
(colinolitice), fiind un inhibitor reversibil al colinesterazei. Asemntor acioneaz i aminele
cuaternare neostigmina (prostigmin), miostin) i piridostigmina.
Nalorfina, levalorfanul i naloxanul combat efectele toxice majore ale analgezicelor
narcotice de tip morfinic, acionnd competitiv asupra acelorai receptori i crescnd
sensibilitatea centrului respirator fa de bioxidul de carbon. Aceti antagoniti nu sunt
recomADNai n intoxicaia cu alte deprimante ale SNC.
Vitaminele utilizate ca antidoturi sunt:
Acizii folic i folinic sunt antidoturi n intoxicaia cu citostatice (aminopterin,
metotrexat). Acidul folic se reduce, succesiv, la acizii di- i tetrahidrofolic sub aciunea
reductazelor specifice. Acidul tetrahidrofolic trece, prin formilare, n acid folinic, care ia parte
la sinteza bazelor purinice i pirimidinice necesare formrii acizilor nucleici. Citostaticele
acioneaz ca antimetabolii ai acidului folic, inhibnd reductaza acidului dihidrofolic, deci
blocnd sinteza acidului folinic, respectiv a acizilor nucleici. Administrarea acizilor folic i
folinic restabilete aceast sintez.
Fitomendiona (vitamina K
1
) este antidotul specific pentru anticoagulantele orale
derivai de cumarin i indantion. Vitamina K
1
are rol de coenzim n sinteza complexului
protrombinic, implicat n coagulare. Anticoagulantele orale acioneaz ca antimetabolii ai
vitaminei K
1
, nct intoxicaia cu aceste medicamente conduce la blocarea sintezei
complexului protrombinic, exprimat prin hemoragii. Administrarea de vitamin K
1

determin creterea sintezei complexului protrombinic.

131
Hidroxicobalamina (vitamina B
12a
) este indicat n intoxicaia cu cianuri, deoarece are
mare afinitate pentru CN

, dislocuindu-l din ciancitocromoxidaz. Hidroxilul fixat pe Co din

vitamina B
12a
este nlocuit cu CN

, rezultnd ciancobalamina (vitamina B

12
). Aciunea
antidotic a vitaminei B
12a
este sinergic cu a tiosulfatului.
Piridoxina (vitamina B
6
) este antidot fiziologic n intoxicaia cu izoniazid, care se
nsoete de scderea piridoxemiei.
Antidoturile cu aciune indirect sunt:
Nitritul de sodiu (sau amil) este antidot pentru CN

. Nitritul produce methemoglobin

care, avnd mai mare afinitate pentru citocromoxidaz dect ionul cian, l deplaseaz i
formeaz cianmethemoglobin, elibernd astfel citocromoxidaza.
Tiosulfatul de sodiu este antidot pentru CN

, ns prin alt mecanism dect nitritul. n

mod normal CN

se detoxific sub aciunea rodanazei. Administrarea tiosulfatului, substratul

necesar enzimei, accelereaz ritmul de formare a SCN

.
Albastrul de metilen este antidot pentru methemoglobinizante. Acestea transform o
parte de Hb (Fe
2+
) n MetHb (Fe
3+
) incapabil de a transporta oxigenul. Albastrul de metilen
funcioneaz ca un sistem redox: el se reduce la derivatul leucometilen, care reduce apoi
MetHb la Hb. Derivatul leucometilen se reface, oxidndu-se prin intermediul sistemului
diaforazic, avnd drept coenzime pe NADH i NADPH. n acest mod se activeaz
concomitent ciclul pentozic, dependent de aceste coenzime.
Alte sisteme redox utilizate ca antidoturi pentru methemoglobinizante sunt tionina i
acidul ascorbic.
Etanolul este antidot pentru metanol i etilenglicol. Metabolizarea are loc sub aciunea
alcooldehidrogenazei (ADH), iar aceeai enzim catalizeaz i metabolizarea etanolului,
pentru care posed ns mai mare afinitate dect pentru ceilali alcooli. Prin administrare de
etanol n intoxicaiile cu metanol i etilenglicol, metabolizarea acestora este blocat, cci
ADH este saturat de etanol.
Clorura de sodiu este antidot pentru Br

. Fiind mai hidrosolubil dect Cl

, ionul de
brom l nlocuiete pe acesta din mediile biologice, rezultnd fenomene toxice. Administrarea
de ser fiziologic concomitent cu salidiuretice determin o diurez forat salin, cnd se
elimin att NaCl ct i NaBr, debarasnd astfel organismul de Br

.
Oxigenul hiperbar (2-3 atm) este antidot pentru CO, combtnd hipoxia determinat
de acesta. Aciunea antidotic se bazeaz pe competiia ntre CO i O
2
pentru hemoglobin,
mioglobin i citocromi. Administrarea de O
2
100%, sub presiune, determin creterea
cantitii de O
2
solvit n plasm, cu reducerea hipoxiei i accelerarea procesului de
descompunere a carboxihemoglobinei n hemoglobin i CO.
Citocromul C este recomandat i n intoxicaia cu monoxid de carbon, deoarece
ntrerupe lanul reaciilor care conduc la hipoxie tisular.
Pseudocolinesteraza exogen sau plasma joac rol de tampon fiziologic n intoxicaia
cu organofosforice, suplinind colinesteraza plasmatic inhibat de toxic.
Favorizarea eliminrii toxicilor absorbii. Diureza forat se recomand n cazul
toxicilor ce se elimin, de regul, pe cale renal.

132
Tratamentul symptomatic. Msurile de asigurare a funciilor vitale constituie adesea
primul act din ansamblul msurilor terapeutice de urgen.



Cap. VII Otrvirea cu pesticide

Pesticidele sunt substane utilizate pentru protejarea chimic a plantelor mpotriva
duntorilor i pentru asigurarea strii de sntate n cadrul bolilor transmisibile prin insecte
sau ali duntori. n funcie cu aciunea lor principal, pesticidele se pot mpri n zece
categorii: fungicide i bactericide; insecticide; acaricide; produse cu aciune mixt;
nematocide i sterilizani ai solului; rodenticide, moluscocide, repeleni; erbicide; defoliani i
desicani; regulatori de cretere; produse auxiliare.
Dup gradul lor de toxicitate, exprimat prin DL
50
mg/kg, oral, la obolan, pesticidele
se clasific n: grupa I, extrem de toxice (sub 50 mg/kg), grupa II, toxice (50-200 mg/kg),
grupa III, moderat toxice (200-1000 mg/kg) i grupa IV, puin toxice (peste 1000 mg/kg).
Otrvirea cu insecticide se poate produce neintenionat prin confuzie, n majoritatea
cazurilor victimele orind s consume buturi alcoolice sau s bea ap au nghiit insecticid din
flacoane neetichetate i depozitate necorespunztor. Sunt i cazuri de otrvire intenionat,
crim sau sinucidere. In Evul Mediu se utiliza frecvent trioxidul de arsen (oricioaica), utilizat
ca rodenticid. Controversat este cazul Mdlinei Manole care a decedat dup ingerare de
furadan, un pesticid carbamic.

1. Insecticide
Otrvirea poate fi produs i de insecticide diverse. Distrugerea insectelor se poate realiza cu
substane minerale, care sunt compui ai As, Pb, F, Se, HCN, H
2
S, PH
3
, AsH
3
, CS
2
, precum i
compui organici din diferite clase.

7.1 Insecticide organoclorurate
Insecticidele organoclorurate sunt derivai halogenai ai difeniletanului (DDT) i
ciclohexanului (HCH), derivai halogenai policiclici (Aldrin, Dieldrin, Clordan, Heptaclor) i
terpenici (Toxafen, Camfen policlorurat ). Insecticidele organoclorurate sunt pulberi cristaline
albe, inodore sau cu miros specific, insolubile n ap, solubile n solveni organici i lipide.
Sunt utilizate sub form de pulberi i soluii.
Toxicocinetic. Insecticidele organoclorurate ptrund n organism pe cale respiratorie,
transcutanat, digestiv. Fiind liposolubile, se localizeaz n esutul adipos, ficat, mduva
osoas, creier. Se depoziteaz n esutul adipos al omului, de unde se mobilizeaz prin
pierdere ponderal brusc, cu apariia intoxicaiilor. Dup biotransformare, acestea se elimin
urinar lent. Sunt toxici cumulativi.
Toxicodinamie. Insecticidele organoclorurate sunt neurotoxici. Iniial provoac
excitaie la nivelul SNC, cu tulburri motorii, apoi deprimani, cu afectarea centrilor
respiratori. DDT, Lindan, Aldrin i Dieldrin provoac tulburri cardiovasculare, n timp ce

133
Clordan, Aldrin, Dieldrin, Heptaclor sunt hepatotoxici. Acestea prezint un anumit potenial
cancerigen. Au o mare stabilitatea i, de aceea, las reziduuri n produsele alimentare sau se
acumuleaz n grsimea i carnea animalelor de unde trec la om, pentru a se acumula n
lipide. Dozele letale sunt: 20 g DDT, Clordan, 7-15 g Lindan, 7 g Toxafen, 3-5 g Aldrin,
Dieldrin, Heptaclor.














Diverse insecticide organoclorurate

Simptomatologie. n cazul otrvirii cu insecticide organoclorurate, apar, iniial, semne
de iritaie gastric (greuri, vrsturi, diaree), urmate de excitaie nervoas, apoi deprimare
(parestezii, tremurturi, cefalee, ataxie, confuzie, convulsii i moarte prin insuficien
respiratorie). Poate apare i fibrilaie ventricular cu moarte subit. n cazul Lindan-ului s-a
semnalat i scderea acuitii vizuale pn la orbire. La derivaii policiclici, fazele de excitaie
alterneaz cu cele de deprimare. Simptomatologia poate fi mascat de solvenii organici n
care aceti compui sunt dizolvai.
Primul ajutor. n lipsa convulsiilor se aplic spltur gastric i purgativ salin. Se
administreaz anticonvulsivante. Sunt contraindicate: purgativele uleioase, laptele, grasimile,
precum i adrenalina (risc de fibrilaie). La contaminarea tegumentelor, se spal acestea cu
ap i spun.
Analiza toxicologic. In caz de deces, se extrag cu solveni organici compuii organo-
clorurai i se separ i identific prin GC-MS. Din produsele alimentare se extrag cu aceton,
benzen, diclormetan. Identificarea se realizeaz prin reaciile pentru ionul de clorur (dup
saponificare) sau prin reaciile specifice fiecrui compus organoclorurat n parte. Dozarea se
bazeaz pe nitrare, declorinare i dozarea C
6
H
6
, n cazul HCH, precum i pe gaz-
cromatografie.

7.2 Insecticide organofosforice
Majoritatea insecticidelor organofosforice sunt substane lichide, incolore sau glbui, cu
tensiune mare de vapori. Unele dintre ele posed grupri hidrofile i sunt solubile n ap,
C
CCl
3
H
CH
Cl
Cl
Cl
Cl Cl
DDT (diclordifenil-tricloretan)
Cl
Cl
Cl
H
H
H
H
H
H
HCH (hexaclorciclohexan)
Cl
Cl
Cl
Cl
Cl
Cl
Cl
Cl
C
H
Aldrin
(hexaclor-hexahidro-endo-
exo-dimetan-naftalen)
C
H
Cl
Cl
Cl
Cl
Cl
C
H
O
Dieldrin
(hexaclor-epoxi-octohidro-
endo-exo-dimetan-naftalen)
Cl
Cl
Cl
Cl
Cl
Cl
C
Cl
Cl
Cl
Cl
Cl
Cl
C
Cl
Cl
Clordan
(octoclor-tetrahidro-endo-metan-indan)
Heptaclor
(heptaclor-tetrahidro-endo-metan-indan)
C
CCl
3
H
CH
Cl
Cl
Cl
Cl Cl
DDT (diclordifenil-tricloretan)
Cl
Cl
Cl
H
H
H
H
H
H
HCH (hexaclorciclohexan)
Cl
Cl
Cl
Cl
Cl
Cl
Cl
Cl
C
H
Aldrin
(hexaclor-hexahidro-endo-
exo-dimetan-naftalen)
C
H
Cl
Cl
Cl
Cl
Cl
C
H
O
Dieldrin
(hexaclor-epoxi-octohidro-
endo-exo-dimetan-naftalen)
Cl
Cl
Cl
Cl
Cl
Cl
C
Cl
Cl
Cl
Cl
Cl
Cl
C
Cl
Cl
Clordan
(octoclor-tetrahidro-endo-metan-indan)
Heptaclor
(heptaclor-tetrahidro-endo-metan-indan)

134
celelalte sunt insolubile. Sunt instabile chimic i se descompun n prezena apei, luminii i
oxigenului. Au remanen redus.
Toxicocinetic. Insecticidele organofosforice ptrund n organism pe cale respiratorie,
transcutanat i digestiv. Se absorb rapid i se distribuie n ficat, rinichi, plmni i mai puin
n muchi, miocard, creier, fr a se acumula. Biotransformarea se realizeaz prin desulfurare
oxidativ (Parationul trece n paraoxon, iar acesta se hidrolizeaz n dietilfosfat i p-
nitrofenol), hidroliz cu detoxifiere (Dipterex), N-demetilare (Rogor) sau N-dezalchilare
(OMPA). Sistox sufer desulfurare oxidativ, ambii izomeri formeaz sulfoxizi i sulfone, mai
toxici dect produii iniiali.
Toxicodinamie. Insecticidele organofosforice i manifest aciunea toxic prin
inhibarea acetilcolinesterazei (AchE), dup ptrundere n fanta sinaptic. n prima etap are
loc orientarea spaial: acetilcolina se plaseazcu polul su pozitiv (azot cuaternar) n dreptul
centrului anionic al AchE i cu polul negativ (gruparea electrofil C = O) n dreptul centrului
esterazic al AchE (constituit din azotul histidinei i hidroxilul serinei). ntr-o a doua etap, se
realizeaz apropierea i adsorbia de suprafa, deoarece ncrctura electric este de semn
contrar; la centrul anionic se manifest fore van der Waals cu azotul cuaternar, iar la centrul
esterazic, o legtur covalent ntre C (din C = O) i O (din OH al serinei). n etapa final, H
de la N histidinic trece pe oxigenul alcoolic, rezultnd colina care, fiind slab legat la centrul
anionic, se desprinde din complex. Radicalul acetil legat covalent reacioneaz cu apa
refcnd centrul esterazic i formare de acid acetic.
Viteza de hidroliz a acetilcolinei este foarte mare: 210
15
molecule pe secund.
Inhibarea AchE de ctre insecticidele organofosforice are loc n mod similar. Gruparea
fosforic se plaseaz n dreptul centrului esterazic al AchE. Centrul anionic nu intr n reacie.



















H
5
C
2
H
5
C
2
C
2
H
5
O
P
O
O O NO
2
H
3
C
H
3
C
O
P
O
O O
H
5
C
2
H
5
C
2
O
P
O O NO
2
CH = CCl
2
S
H
3
C
H
3
C
O
P
O O NO
2
S
H
5
C
2
O
P
O
O
O
H
5
C
2
H
5
C
2
O
P
O O
O
P
O
H
5
C
2
H
5
C
2
O
P
O
O
Paraoxon
(p-Nitrofenil, dietilfosfat)
S
(CH
2
)
2
S C
2
H
5
H
5
C
2
H
5
C
2
O
P
O O
O
(CH
2
)
2
S C
2
H
5
H
3
C
H
3
C
S
Diclorvos
Paration
Metilparation
S
CH COO C
2
H
5
CH
2
COO C
2
H
5
Malation
O
P
O
H
3
C
H
3
C
S
S CH
2
CONHCH
3
Rogor
H
3
C
H
3
C
O
P
O
O CH CCl
3
Dipterex
OH
TEPP
N
P
O
O
N
N
P
O
N (H
3
C)
2
(H
3
C)
2
(CH
3
)
2
(CH
3
)
2
(Diclorvinil,dimetilfosfat)
(p-Nitrofenil,dietilfosfat)
(p-Nitrofenil,dimetiltiofosfat)
+
Sistax
(Ditiofosfat de dimetil,
1,2-dicarboxietil)
(Ditiofosfat de dimetil
N-metil-carbamoil-metil)
(Triclor,1-hidroxietilfosfat de dimetil)
(Tetraetil pirofosfat)
OMPA (Schradan)
(Octametil-tetraamida acidului pirofosforic)
H
5
C
2
H
5
C
2
C
2
H
5
O
P
O
O O NO
2
H
3
C
H
3
C
O
P
O
O O
H
5
C
2
H
5
C
2
O
P
O O NO
2
CH = CCl
2
S
H
3
C
H
3
C
O
P
O O NO
2
S
H
5
C
2
O
P
O
O
O
H
5
C
2
H
5
C
2
O
P
O O
O
P
O
H
5
C
2
H
5
C
2
O
P
O
O
Paraoxon
(p-Nitrofenil, dietilfosfat)
S
(CH
2
)
2
S C
2
H
5
H
5
C
2
H
5
C
2
O
P
O O
O
(CH
2
)
2
S C
2
H
5
H
3
C
H
3
C
S
Diclorvos
Paration
Metilparation
S
CH COO C
2
H
5
CH
2
COO C
2
H
5
Malation
O
P
O
H
3
C
H
3
C
S
S CH
2
CONHCH
3
Rogor
H
3
C
H
3
C
O
P
O
O CH CCl
3
Dipterex
OH
TEPP
N
P
O
O
N
N
P
O
N (H
3
C)
2
(H
3
C)
2
(CH
3
)
2
(CH
3
)
2
(Diclorvinil,dimetilfosfat)
(p-Nitrofenil,dietilfosfat)
(p-Nitrofenil,dimetiltiofosfat)
+
Sistax
(Ditiofosfat de dimetil,
1,2-dicarboxietil)
(Ditiofosfat de dimetil
N-metil-carbamoil-metil)
(Triclor,1-hidroxietilfosfat de dimetil)
(Tetraetil pirofosfat)
OMPA (Schradan)
(Octametil-tetraamida acidului pirofosforic)

135

Insecticide organofosforice reprezentative

Dup formarea complexului AchEIOP, H de la N histidinic trece pe un radical al
insecticidului care se elimin, iar radicalul fosforic legat covalent blocheaz AchE,
mpiedicnd accesul substratului natural, acetilcolina. Aceasta se acumuleaz la nivelul
sinapselor, cu stimularea, apoi inhibarea transmisiei sinaptice. Spre deosebire de hidroliza
rapid a acetilcolinei, hidroliza spontan a insecticidelor organofosforice cu eliberarea
acidului fosforic i regenerarea enzimei are loc extrem de lent, realiznd inhibiia
cvasiireversibil a AchE.
Aceste substane manifest i aciune toxic direct asupra miocardului, exprimat
prin tulburri de ritm i conducere aprute la cteva zile dup intoxicare, cnd starea
bolnavului se ameliorease i valorile colinesterazei plasmatice erau n cretere. Aceste
insecticide, TEPP, Paraoxon, Paration, Diclorvos, OMPA, Metilparation, Sistox (izomerul
tiolo este mai toxic dect cel tiono) sunt foarte toxice. Pe de alt parte, Rogor, Dipterex sunt
moderat toxice, iar Clortion i Malation slab toxice. Dozele letale (oral) sunt de 100 mg
pentru Paration i 150 mg Metilparation.
Simptomatologie. n caz de otrvire se constat: mioz, hipersecreie glandular
generalizat, hipersecreie bronic, tulburri digestive, hipotensiune, bradicardie, colaps,
anxietate, somnolen, convulsii i com. De asemenea, pot apare fibrilaii musculare,
convulsii tetanice i, n cazuri grave, paralizia muchilor respiratori.
Intoxicaia cronic se exprim prin tulburri neuropsihice (oboseal, anxietate,
iritabilitate, parestezii, tremor,cefalee), digestive, opresiune toracic, mioz, transpiraii.
Primul ajutor. Se administreaz atropin i reactivatori ai colinesterazei (PAM i
Toxogonin). Atropina se injecteaz imediat i.v. n doz de 1-5 mg, apoi cte 1-5 mg i.v. sau
i.m. la intervale de 5, 10, 20, 30 minute, pn la apariia semnelor de atropinizare (uscciunea
gurii, midriaz, tahicardie). n urmtoarele zile se administraz s.c. 1 mg atropin la 4-6 ore.
Concomitent, se administreaz Toxogonin 1-6 fiole i.m. Dup primele doze de antidoturi se
efectueaz spltura gastric cu suspensie de crbune activat n soluie de NaHCO
3
5%,
urmat de administrare de Na
2
SO
4
. Se trateaz convulsiile. n intoxicaia prin contact se
ndeprteaz mbrcmintea i se spal tegumentele cu ap i spun, 15 minute. Sunt
contraindicate: administrarea de lapte, purgativ uleios, medicamente deprimante ale
respiraiei.
Analiza toxicologic. Insecticidele organofosforice se separ din mediile biologice
prin metodele Stas-Otto-Ogier sau Florence (pentru snge). Cele volatile se izoleaz prin
antrenare cu vapori de ap. Se pot extrage i cu solveni organici din mediu acid. Pentru
identificare, se face hidroliz n mediu acid i oxidare; se determin P prin formare de albastru
de molibden. Se pot identifica i doza cromatografic i spectrofotometric n U.V. i I.R.





136






















Metabolizarea unor insecticide organofosforice

Pentru diagnostic i evoluia intoxicaiei se determin activitatea colinesterazei. Identificarea
i dozarea Parationului se bazeaz pe reducerea NO
2
la NH
2
, apoi formarea azoderivatului sau
indofenolului.









Unele insecticide carbamice

Insecticidele carbamice sunt inhibitori ai colinesterazei, ns, spre deosebire de
insecticidele organofosforice, ptrunderea n SNC este minim, inhibarea este de scurt
durat, iar reactivarea enzimei are loc spontan. Doza letal pentru cel mai toxic compus
carbamic (Izolan) este de 6 g.
H
5
C
2
H
5
C
2
O
P
O
O O NO
2
H
5
C
2
H
5
C
2
O
P
O O
O
P
O
S(O)
(CH
2
)
2
S C
2
H
5
H
3
C
H
3
C
S
S
CH COO C
2
H
5
CH
2
COOH
O
P
O
H
3
C
H
3
C
S
S CH
2
CONH
2
H
3
C
H
3
C
O
P
O
O CH CCl
3
OH
N
P
O
O
N
N
P
O
N (H
3
C)
2
(H
3
C)
2
CH
2
(CH
3
)
2
H
5
C
2
H
5
C
2
O
P
HO
O
NO
2 OH
O
+
H
3
C
H
3
C
O
P
O
O
CH
2
CCl
3
OH
H
3
C
H
3
C
O
P
O
O
CH CCl
2
O
+
OH
+ H
2
O
HCl
H
5
C
2
H
5
C
2
O
P
O O
S(O)
(CH
2
)
2
S C
2
H
5
O
O
O
O
P
O
H
3
C
H
3
C
S
S
CH COOH
CH
2
COOH
CH
3
OH
H
5
C
2
H
5
C
2
O
P
O
O O NO
2
H
5
C
2
H
5
C
2
O
P
O O
O
P
O
S(O)
(CH
2
)
2
S C
2
H
5
H
3
C
H
3
C
S
S
CH COO C
2
H
5
CH
2
COOH
O
P
O
H
3
C
H
3
C
S
S CH
2
CONH
2
H
3
C
H
3
C
O
P
O
O CH CCl
3
OH
N
P
O
O
N
N
P
O
N (H
3
C)
2
(H
3
C)
2
CH
2
(CH
3
)
2
H
5
C
2
H
5
C
2
O
P
HO
O
NO
2 OH
O
+
H
3
C
H
3
C
O
P
O
O
CH
2
CCl
3
OH
H
3
C
H
3
C
O
P
O
O
CH CCl
2
O
+
OH
+ H
2
O
HCl
H
5
C
2
H
5
C
2
O
P
O O
S(O)
(CH
2
)
2
S C
2
H
5
O
O
O
O
P
O
H
3
C
H
3
C
S
S
CH COOH
CH
2
COOH
CH
3
OH
O C
O
NHCH
3
Carbaril
(metilcarbamat de alfa-naftil)
H
3
C
N
N
CH(CH
3
)
2
O C
O
N(CH
3
)
2
Izolan
(dimetilcarbamat de izopropil-metilpirazol)
O C
O
NHCH
3
Carbaril
(metilcarbamat de alfa-naftil)
H
3
C
N
N
CH(CH
3
)
2
O C
O
N(CH
3
)
2
Izolan
(dimetilcarbamat de izopropil-metilpirazol)

137

































Mecanismul de toxicitate al insecticidelor organofosforice
prin inhibarea acetilcolinesterazei







O
P
O
OR RO
O
2
Acetilcolina
(H
3
C)
3
N CH
2
CH
2
O
C
O
CH
3
+
Centru
anionic
Centru
esterazic
N....H
..
O
Histidina
Serina
Acetilcolinesteraza (AchE)
(H
3
C)
3
N CH
2
CH
2
O
C
O
CH
3
+
N H
O
+
Complex AchE - acetilcolina
Insecticid organofosforic (IOP)
(H
3
C)
3
N CH
2
CH
2
OH
C
O
CH
3
N
..
O
HO C
CH
3
+
AchE acetilata
O
N....H
..
O
AchE reactivata
H
2
O
N....H
..
O
AchE
N C
6
H
4
O
P
O
OR RO
O
2
N H O
Complex AchE - IOP
N C
6
H
4
+
OH
P
O
OR RO
O
2
N
..
O
AchE fosforilata
N C
6
H
4
N....H O
H
2
O
AchE reactivata
HO
P
O
OR RO
..
O
P
O
OR RO
O
2
Acetilcolina
(H
3
C)
3
N CH
2
CH
2
O
C
O
CH
3
+
Centru
anionic
Centru
esterazic
N....H
..
O
Histidina
Serina
Acetilcolinesteraza (AchE)
(H
3
C)
3
N CH
2
CH
2
O
C
O
CH
3
+
N H
O
+
Complex AchE - acetilcolina
Insecticid organofosforic (IOP)
(H
3
C)
3
N CH
2
CH
2
OH
C
O
CH
3
N
..
O
HO C
CH
3
+
AchE acetilata
O
N....H
..
O
AchE reactivata
H
2
O
N....H
..
O
AchE
N C
6
H
4
O
P
O
OR RO
O
2
N H O
Complex AchE - IOP
N C
6
H
4
+
OH
P
O
OR RO
O
2
N
..
O
AchE fosforilata
N C
6
H
4
N....H O
H
2
O
AchE reactivata
HO
P
O
OR RO
..

138
7.3 Rodenticide

Pentru distrugerea roztoarelor i a altor vertebrate duntoare se utilizeaz substane vegetale
(Scilla maritima), minerale(fosforul alb, fosfuri de zinc sau aluminiu, derivai de arsen, sruri
de bariu sau taliu) i organice (stricnin, veratrin, produi de sintez).















Exemple de rodenticide utilizate pentru uciderea roztoarelor

Derivaii de tiouree sunt slab toxici la om. La ingerarea unei mari cantiti de
substan poate surveni moartea prin insuficien respiratorie sau cardiovascular. n
intoxicaia acut se recomand administrarea Na
2
S
2
O
3
soluie 10%, 10 ml i.v.
Anticoagulantele de sintez (Warfarin, Cumaclor, Pival, Nidan) se comport ca
antimetabolii ai vitaminei K; urmare a blocrii sintezei complexului protrombinic, scade
protrombina cu apariia hemoragiilor. Antidotul este vitamina K
1
(fitomenadiona), 50-100 mg
i.v., lent, n primele 24 ore.
Fluoroacetatul de sodiu, FCH
2
COONa, determin, prin sintez letal, formarea de
acid fluorhidric, cu manifestri toxice determinate de inhibarea ciclului Krebs i spolierea
organismului de Ca
2+
. Antidotul este glicerolmonoacetatul (Monoacetin), donor de acetat.
Analiza toxicologic. ANTU se extrage cu CHCl
3
, se hidrolizeaz alcalin i se identific
naftilamina rezultat prin reacia Griesz. Warfarina se extrage cu CHCl
3
n mediu acid, se
nitreaz, se reduce NO
2
la NH
2
, se diazoteaz i se cupleaz. Fluoroacetatul se identific,
dup hidroliz alcalin, prin F

rezultat.






HN C
S
NH
2
ANTU
(alfa-naftiltiouree)
Cl
(Cl)
NaS C
NH
2
N-N = N
Promurit
(p-clor-fenildiazotiouree)
Clorpromurit
(3,4-diclor-fenildiazotiouree)
OH
CH
O
C
6
H
4
Cl
CH
2
C CH
3
O
O
Cumaclor
3-(alfa-clorfenil-beta-acetiletil)-
-4-hidroxicumarina
OH
CH
O
C
6
H
5
CH
2
C
CH
3
O
O
Warfarina
3-(alfa-fenil-beta-acetiletil)-
-4-hidroxicumarina
O
O
O
CO-C(CH
3
)
3
Pival
(2-pivaloil-1,3-indandiona)
O
O
Nidan
(2-naftil-1,3-indandiona)
HN C
S
NH
2
ANTU
(alfa-naftiltiouree)
Cl
(Cl)
NaS C
NH
2
N-N = N
Promurit
(p-clor-fenildiazotiouree)
Clorpromurit
(3,4-diclor-fenildiazotiouree)
OH
CH
O
C
6
H
4
Cl
CH
2
C CH
3
O
O
Cumaclor
3-(alfa-clorfenil-beta-acetiletil)-
-4-hidroxicumarina
OH
CH
O
C
6
H
5
CH
2
C
CH
3
O
O
Warfarina
3-(alfa-fenil-beta-acetiletil)-
-4-hidroxicumarina
O
O
O
CO-C(CH
3
)
3
Pival
(2-pivaloil-1,3-indandiona)
O
O
Nidan
(2-naftil-1,3-indandiona)

139
7.4 Erbicidele
Sunt substane minerale (NaClO
3
, CaCN
2
, CuSO
4
, NH
2
SO
2
ONH
4
, Na
2
B
4
O
7
, NaBO
2
) i
organice utilizate la distrugerea buruienilor, fr afectarea plantelor utile.
Ariloxiacizii (Diclordon, Agroxon, Triclordon) interfer n metabolismul glucidelor,
cu manifestri la nivelul sistemului nervos, miocardului, ficatului i rinichilor. Sunt toxici
cumulativi. Doza letal este de 6 g.
n intoxicaia acut se recomand spltura gastric i tratament simptomatic.
Derivaii ureici provoac intoxicaii acute (tulburri digestive, neurologice i hepatorenale) i
cronice (cefalee, astenie, dermatoze, agranulocitoz). Cel mai toxic reprezentant al clasei este
tioureea, care prezint i proprieti abortive.



















Erbicide utilizate n agricultur la distrugerea buruienilor

Derivaii ftalici (Alanap; doza letal= 1 g) determin leziuni corozive pe tractul
gastrointestinal, cu simptomatologie i tratament ca la acizii corozivi.
Diazinele i triazinele (Simazin, Atrazin, Propazin) sunt lipsite de toxicitate i nu sunt iritante.
Paraquatul (metilsulfat de 1,1,4,4 dipiridiniu) acioneaz toxic prin legare de acizii nucleici
i mucozaharidele intercelulare.

HN C
O
Alanap
(N-naftilamida acidului ftalic)
COOH N
N
N
Cl
NHR
2
R
1
HN
Simazin: R
1
= C
2
H
5
R
2
= C
2
H
5
Atrazin: C
2
H
5
CH(CH
3
)
2
Propazin: CH(CH
3
)
2
CH(CH
3
)
2
O-CH
2
-COOH
Cl
Cl
Diclordon (2,4 D)
(acid 2,4 diclorfenoxiacetic)
O-CH
2
-COOH
CH
3
Cl
Agroxon
(acid 2 metil, 4 clorfenoxiacetic)
O-CH
2
-COOH
Cl
Cl
Triclordon (2,4,5 D)
(acid 2,4,5 triclorfenoxiacetic)
Cl
N
N
+
+
H
3
C
CH
3
.
2CH
3
SO
4
Paraquat
HN C
O
Alanap
(N-naftilamida acidului ftalic)
COOH N
N
N
Cl
NHR
2
R
1
HN
Simazin: R
1
= C
2
H
5
R
2
= C
2
H
5
Atrazin: C
2
H
5
CH(CH
3
)
2
Propazin: CH(CH
3
)
2
CH(CH
3
)
2
O-CH
2
-COOH
Cl
Cl
Diclordon (2,4 D)
(acid 2,4 diclorfenoxiacetic)
O-CH
2
-COOH
CH
3
Cl
Agroxon
(acid 2 metil, 4 clorfenoxiacetic)
O-CH
2
-COOH
Cl
Cl
Triclordon (2,4,5 D)
(acid 2,4,5 triclorfenoxiacetic)
Cl
N
N
+
+
H
3
C
CH
3
.
2CH
3
SO
4
Paraquat

140
7.5 Insecticidele dinitrofenolice
Dinitrofenolii (DNOC, Dibutox, Dinex) sunt toxici celulari, decuplani ai fosforilrii
oxidative, cu scderea formrii de ATP. Ca urmare, energia nu mai este stocat, ci risipit sub
form de cldur, consumul de oxigen este mrit, iar mitocondriile miocardului, muchilor
scheletici, ficatului, rinichilor, sunt lipsite de energia stocat de obicei n ATP. Doza letal
este de 1-3 g; pot determina intoxicaii grave prin acumulare.

Primul ajutor const din spltur gastric cu NaHCO
3
soluie 5% i purgativ salin,
combaterea hipertermiei (bi reci), combaterea convulsiilor, oxigenoterapie, aport de lichide.

7.6 Toxicologie de laborator

Determinarea parationului


NO
2
O P
O
O
S
C
2
H
5
C
2
H
5



Izolare. Parationulse izoleaz din mediul acid cu solveni organici. Fiind volatili,
poate fi izolat i prin antrenare cu vapori de ap.
Izolare din urin: se aciduleaz 25-50 ml urin cu acid clorhidric 10% i se extrag de
minimum 2 ori cu volume egale de eter etilic. Extractele organice reunite sunt filtrate printr-
un filtru uscat. Filtratul este evaporat la sec pe baia de ap.
Izolare din snge: se trateaz 5-10 ml snge cu 5-10 ml acid tricloracetic 20%. Se
filtreaz, iar filtratul se extrage de minimum 2 ori cu cte 20 ml eter etilic. Extractele eterice
reunite sunt filtrate printr-un filtru uscat. Filtratul este evaporat la sec pe baia de ap la
50C.
Izolare din coninut stomacal: se tritureaz 5-10 ml coninut stomacal cu sulfat de
sodiu anhidru, pn la obinerea unei mase pulverulente. Se extrage masa cu o cantitate
dubl de eter de petrol. Extractul este evaporat la sec.
Izolare din organe: se extrag 20 g organe prin metoda Stas-Otto-Ogier. Parationul i
p-nitrofenolul (principalul su metabolit) se regsesc n eterul acid.
OH
OH OH
O
2
N
O
2
N O
2
N
NO
2
NO
2
NO
2
CH
3
CH-CH
2
-CH
3
CH
3
C
6
H
11
DNOC
Dibutox Dineb
(dinitro-ortocrezol)
(dinitro-o-sec.butilfenol)
(dinitro-o-ciclohexilfenol)

141
Izolare din produse alimentare sau corpuri delicte: se extrage o cantitate din produsul
de analizat cu un volum egal de alcool etilic, ntr-un borcan cu dop rodat, timp de 20 minute.
Se decanteaz i se filtreaz extractul alcoolic ntr-un balon cotat de un anumit volum i se
completeaz la semn cu alcool etilic.
Identificare. Teste preliminare:
Din coninut stomacal:
1. Se nclzete pe baia de ap o cantitate de coninut stomacal cu un volum dublu de alcool
etilic absolut. Se filtreaz pe sulfat de sodiu anhidru i se evapor filtratul la sec. Se trateaz
reziduul cu 1-2 ml hidroxid de sodiu 20% i se fierbe cteva minute. Prin hidroliz se
elibereaz p-nitrofenolul, care n mediul alcalin, prezint o coloraie galben, p-nitrofenolat
de sodiu, iar la acidulare, coloraia dispare p-nitrofenol.
2. Se concentreaz, prin evaporare pe baia de ap, o cantitate de coninut stomacal pn la
1/4 din volumul su. Se trateaz cu 1 ml perhidrol i se nclzete din nou. Dup distrugerea,
pe aceast cale, a substanelor organice care ar deranja reacia, se alcalinizeaz cu hidroxid
de sodiu 20% i se fierbe cteva minute, cnd apare o coloraie galben.
Din snge i urin: se deproteinizeaz 2-5 ml snge sau 5-10 ml urin cu acid
tricloracetic 20%. Se filtreaz, se alcalinizeaz filtratul cu hidroxid de sodiu 20% i se fierbe
cteva minute, cnd apare coloraia galben.
Reacii de culoare
1. Reacia Averell-Norris: reziduul se trateaz cu 2 ml acid tricloracetic 10%. Se trece ntr-o
eprubet i se adaug 1-2 granule de zinc amalgamat. Se nclzete 5-10 minute pe baia de
ap la fierbere. Se filtreaz, se rcete, se adaug 0,2 ml nitrit de sodiu 0,1%. Se agit i se
las n repaus 15 minute. Se adaug 0,2 ml N-naftiletilen-diamin (NKD) 0,1%, cnd apare o
coloraie violet.
2. Reacia de formare a derivailor chinoniminici:
2.1. Reziduul se trateaz cu 2 ml hidroxid de sodiu 5% i 0,5 g aliaj Dewarda (10 p. Cu, 9p.
Al, 1p. Zn, reductor n mediul alcalin, prin hidrogenul n stare nscnd pe care-l degaj),
cnd se formeaz prin reducerea p-nitrofenolului. Se adaug dup 15 minute, 0,5 ml
ortocrezol 1% n alcool i 1-2 ml ap oxigenat. Se obine, prin cuplarea p-nitrofenolului cu
o- crezolul, un derivat chinonimic de culoare albastr.
2.2. Reziduul se trateaz cu 2 ml hidroxid de sodiu 5%. Se adaug cteva cristale de ditionit
de sodiu, Na
2
S
2
O
2
. Dup cteva minute se distruge excesul de ditionit cu acid clorhidric
10%, apoi se adaug 1 ml alfa-naftol 1% n alcool, sau 1 ml oxin (8-hidroxichinolin) 1%
n alcool i 1 ml perhidrol. Se alcalinizeaz la pH = 8-9 cu hidroxid de sodiu 10%. Se obine,
prin cuplare p-nitrofenolului cu alfa-naftol sau oxina, un derivat chinoniminic de culoare
albastr.
2.3. Reacia de formare a p-nitrofenolatului de sodiu: se trateaz reziduul cu cteva picturi
de perhidrol i 3-5 ml hidroxid de sodiu 20%. Se nclzete, pe baia de ap, la fierbere , 15
minute. Prin hidroliz n mediul alcalin se formeaz p-nitrofenolatul de sodiu de culoare
galben.
Soluia se decoloreaz prin acidulare.
3. Cromatografie pe strat subire

142
Suportul: plci cu silicagel G activate 20-30 minute la 110 C .
Spotarea: reziduul se reia cu 0,2-0,3 ml aceton.
Martori: paration, malation n 0,2-0,3 ml aceton.
Sistemul de developare: eter de petrol: aceton (75 : 5).
Revelarea: - expunerea plcii n lumin Wood spoturi galbene
pulverizare cu:
a. soluie de iod 0,1 N ce conine 3% azid de sodiu. se obin spoturi albe pe fond galben;
b. expunere 10 minute la vapori de brom. Se pulverizeaz cu o soluie de clorur feric 0,1%
n etanol 80. Se usuc i dup 15 minute se pulverizeaz cu soluie de acid sulfosalicilic 1%
n etanol 80. Se obin spoturi albe pe suport violet.
Dozarea cu azoderivat. Metoda Averell-Norris. Gruparea nitro din paration este
redus la gruparea amino. Aceasta se diazoteaz, iar clorura de diazoniu se cupleaz cu N-
naftil-etilendiamin, rezultnd un azoderivat violet, colorimetrabil. Sensibilitatea metodei
este de 0,1 mg paration/m
3
aer.

NO
2
O P
O
O
S
C
2
H
5
C
2
H
5
6H(Zn +HCl)
-2H
2
O
NH
2
HO
NaNO
2
, 2HCl
-2H
2
O, NaCl
N HO N Cl
H
N (CH
2
)
2
NH
2
-HCl
HO N N NH
(CH
2
)
2
NH
2


Reactivi:
1. alcool etilic 96; 2. Acid clorhidric N; 3. Zinc pulbere; 4. Sulfat de cupru 2%; 5. Nitrat de
sodiu 0,1% (soluia se conserv maximum o sptmn la frigide); 6. Sulfamat de amoniu
5% ) soluia se conserv maximum dou sptmni la frigider); 7. N-naftiletilendiamin 1%.
8. Soluie standard stoc. Se cntrete ntr-un balon cotat de 100 ml care conine 10 ml
alcool etilic. (A g). Se adaug 3 picturi de paration i se recntrete balonul (B g). Se
completeaz la semn cu alcool etilic. Coninutul n paration va fi: mg paration/ml = 10(B-A).
9. Soluie standard de lucru. Se dilueaz soluia standard stoc cu alcool etilic, astfel ca 1 ml =
40 micrograme paration.
Recoltarea probelor. ntr-o alonj de recoltat pulberi se aeaz, n ordine, ncepnd de
la captul su ngust, urmtoarele: un tampon de vat un strat de 0,5 g pulbere celuloz care

143
se trateaz pn la uniformizarea stratului; un strat format dintr-un amestec de 0,5 g i 0,1 g
pulbere de zinc, de asemenea tasat uor, un al doilea tampon de vat pentru meninerea
poziiei stratului de pulbere de celuloz i zinc. Alonja astfel pregtit se conecteaz la o
pomp de vid i se aspir, cu un debit de 5 litri/minut, un volum de aer care s conin, n
medie, 20 g paration (100-200 litri aer).
Modul de lucru. Se monteaz alonja cu proba recoltat ntr-un stativ, cu ajutorul unei
cleme, n poziie vertical. Se prepar un amestec din 10 ml alcool etilic, 10 ml acid
clorhidric N i 2 picturi sulfat de cupru 2%. Se adaug acest amestec peste stratul de
pulbere de celuloz, culegndu-se 10 ml eluant ntr-o eprubet gradat de 30 ml. n aceeai
eprubet se adaug: 1 ml nitrit de sodiu 0,1% se agit i se las n repaus 15 minute; 1 ml
sulfamat de amoniu 5% ; se agit i se las n repaus 15 minute; se dizolv 1 ml naftilamin
i se completeaz cu ap distilat la 15 ml.
Se citete extincia dup 15 minute, la spectrofotometru, la = 550 nm, n cuva de 1
cm, fa de amestec alcoolic: HCl N (1 : 1).
Curba de etalonare se ntocmete ntre 0 i 20 g, procednd astfel: ntr-un balon
Erlenmayer de 100 ml se aduc 10 ml soluie standard n lucru, apoi 2 picturi sulfat de cupru
i maximum 100 mg pulbere de zinc. Se agit 5 minute i se filtreaz pe hrtie de filtru. Se
spal precipitatul de pe filtru cu un amestec, n volume egale de HCl 1N i alcool etilic,
colectnd peste filtrat, pn la obinerea a 40 ml soluie. Aceast soluie conine parationul
redus, 1 ml = 10 g paration. Din soluie se iau n 5 eprubete de cte 30 ml: 0,5; 1,0: 1,5; 2,0
ml. Se completeaz la 10 ml cu amestec de alcool etilic: HCl N. n continuare, se adaug
nitrit 0,1%, sulfat 5% i naftilamin 1% ca la probe i n aceleai condiii i se citesc
absorbanele.
Valoarea extinciei pentru prob se raporteaz la curba etalon, obinndu-se
concentraia "C" a parationului, n g, n prob.
Calcul: Rezultatele se exprim n mg paration la m
3
aer:
n care:
C = concentraia parationului, n g;
V = volumul de aer recoltat, n litri.
Observaii:
1. Metoda nu este specific, purtnd interfera o serie de nitro- i aminoderivai aromatici,
prezeni ca impuriti alturi de paration,
2. Etaloanele se pot prepara i dintr-o soluie de p-nitrofenol cu concentraiea exprimat n
paration.
Normele republicane aflate n vigoare prevd pentru paration CMA de 0,15 mg/mc aer.
Pentru produsele biologice, corpuri delicte.
Modul de lucru: Reziduul obinut prin extracie cu solveni organic se dizolv n
civa mililitri etanol de 96 i de trece cantitativ ntr-un balon cotat de 10 ml. Se iau ntr-o
eprubet 2 ml din soluia alcoolic i se adaug 2 ml acid clorhidric 10%, 0,2 g zinc pulbere,
o pictur sulfat de cupru 2%. Se las 10 minute, agitnd periodic. Se pregtete un filtru
umectat cu amestec alcool etilic : acid clorhidric N (1 : 1) i se filtreaz coninutul eprubetei,
culegndu-se filtratul ntr-o eprubet gradat de 10 ml. Se spal filtratul cu 1 ml amestec

144
alcool : HCl (1 : 1) care se colecteaz tot n eprubet. Se adaug n eprubet: 0,1 ml nitrit
0,1% se agit i se las n repaus 15 minute, 1 ml sulfamat, se agit i se las n repaus 15
minute, 0,5 ml NKD 1%, se agit i se aduce la 10 ml amestec alcool : HCl 1 N (1 : 1). Se
citete extincia dup 15 minute, la spectrofotometru, la = 550 nm n cuva de 1 cm, fa de
un martor al reactivilor.
Curba de etalonare se ntocmete ntre 10 i 50 g paration, prin puncte din 10 n 10, n
condiiile descrise mai sus.
Valoarea extinciei pentru probe se raporteaz la curba etalon, apoi se nmulete cu 5
deoarece s-a lucrat cu 1/5 din prob obinndu-se concentraia C a parationului, n g, n
prob.

Concentraia probei necunoscute se poate calcula i cu ajutorul factorul pant.

Eprubeta
Reactivi(ml) 1 2 3 4 5 (M)
Standard de lucru 0.25 0.50 0.75 1.0 1.25 -
Conc. g 10 20 30 40 50 -
Etanol 96 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0
Acid clorhidric 10 % 2.0
Zinc pulbere 0,2g
Sulfat de cupru 2% 1 pictur
10 minute repaus.Filtrare
Nitrit de sodiu 0.1-agitare, 15 minute repaus
Sulfat de amoniu 1,0 se agit 15 minute repaus
NED 1%
Amestec alcool: acid clorhidric (1:1) 0.5 agitare
Absorbana = 500nm

Calcul
Rezulatele se exprim nmg paration la 100 ml (g) snge sau organe i la 1000ml urin sau
coninut stomacal :
mg paration/100ml(g)snge,organe = C / loA
mg paration/100ml(g)urin,coninut stomacal = C / A
n care: C= concentraia parationuli, n g
A =masa (volumul) de produs luat n lucru, n g/ml

Metoda spectroscopic (formarea unui derivat chinoniminic). Parationul este
hidrolizat la p-nitrofenol. Acesta este redus cu ditionit sau aliaj Deward, la p-aminofenol. p-
Aminofenolul este cuplat cu alfa naftol sau oxin, n mediu alcalin, cu formarea unui
derivat chinoniminic de culoare albastr. Sensibilitatea este de 1 g/ml.


145
NO
2
O P
O
O
S
C
2
H
5
C
2
H
5
NO
2
HO
H
2
O
P
OC
2
H
5
OC
2
H
5
OH S
3Na
2
S
2
O
4,
4H
2
O
-6NaHSO
3
NH
2
HO
OH
-H
2
O
OH O N
3Na
2
S
2
O
4
+ HCl
2H
2
S
2
O
4
+ 4 NaCl
2 SO
2
+ S + 2H
2
O
NaHSO
3
+ HCl SO
2
+ H
2
O + NaCl


Reactivi: 1.Hidroxid de potasiu 10%; 2. Acid clorhidric 10%; 3. Ditionit de sodiu
(hidrosulfit de sodiu); 4.Eter etilic; 5. Sulfat de sodiu; 6. Alfa naftol 1% n 5%.

7. Soluii standard de lucru 1 ml = 100 g. Soluie standard de lucru se prepar cu p-
nitrofenol dar cu concentraia exprimat n paration.
Modul de lucru: Reziduul obinut de la extragerea cu solveni organici este dizolvat n
10 ml hidroxid de potasiu 10%. Se nclzete 15 minute pe baia de ap la fierbere, se rcete
i se aduce cantitativ (prin reluri cu ap distilat) ntr-o plnie de separare. Se aciduleaz cu
HCl 10% i se extrage de 3 ori cu cte 20 ml eter etilic. Fazele eterice reunite se filtreaz pe
sulfat de sodiu anhidru ntr-o capsul. Se evapor sub ni la temperatura laboratorului.
Reziduul se aduce cantitativ cu mici poriuni de hidroxid de potasiu 10% (2 ml) ntr-o
eprubet gradat (10 ml), se adaug un vrf de spatul de ditionit de sodiu, se agit i se
fierbe 10 minute. Se rcete proba i se adaug 1 ml acid clorhidric 10% (pentru distrugerea
excesului de ditionit sodiu), se agit i se las 5 minute n repaus. Se adaug 1 ml hidroxid
de potasiu 10% i 1 ml alfa naftol 1% n hidroxid de potasiu 5%. Se aduce cu ap distilat la
5 ml. Se citete extincia dup 15 minute la spectrofotometru, = 610 nm, n cuva de 1 cm,
fa de un martor al reactivilor.
Curba de etalonare se ntocmete ntre 20 i 100 g paration, prin puncte din 20 n 20
n condiiile descrise mai sus.





146
Eprubeta
Reactivi(ml) 1 2 3 4 5
6(M)
Standard de lucru 100 mg
paration/ml
0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 -
Conc.g 20 40 60 80 100 -
KOH 10% 1.8 1.6 1.4 1.2 1.0 2.0
Ditionit de sodiu un vrf de spatul
Acid clorhidric 10% 1.0-agitare, 5 minute repaus
Hidroxid de potasiu 10% 1.0-agitare
Alfa naftol 1% n KOH 5 % 1.0-agitare 15minute repaus
Absorbana =610nm

Valoarea extinciei pentru probe se raporteaz la curba etalon, obinndu-se concentraia C a
parationului, n g, n prob.
Cuplarea se poate face n aceleai condiii i cu oxin (8 hidroxchinolin) 0,1% n alcool.
Reducerea p-nitrofenolului la p-aminofenol n mediul alcalin poate fi fcut i cu aliaj
Deward.
Scara etalon n acest caz este efectuat astfel:
Eprubeta
Reactivi(ml) 1 2 3 4 5 6(M)
Standard de lucru 100 mg paration/ml 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 -
Conc.g 20 40 60 80 100 -
KOH 10% 4.8 4.6 4.4 4.2 4.0 5.0
Aliaj Deward un vrf de spatul, 20 minute repaus, se agit.
Filtrare
Alfa naftol 1% n KOH 5 % 1.0-agitare 15minute repaus
Extincia =610nm

Interpretarea rezultatelor
Doza letal de paration, la om, se nscrie ntre 20 i 100mg. ptrunderea n ochi a 0,5
ml paration poate fi fatal. n mai multe cazuri de intoxicaie sever s-au gsit valori urinare
de p-nitrofenoli de 1,6 mg/litru pn la 11,6 mg/litru. n 19 cazuri fatale s-au decelat
urmtoarele valori medii i extreme de paration: 9 (0,5 34) mg /100 ml snge; 10 (0,4 76)
mg/litru urin; 11 (0,1 - -120) mg/kg ficat.







147
Determinarea malationului


P
O
O
S S
CH
3
CH
3
H
C
H
2
C
COOC
2
H
5
COOC
2
H
5


Izolare: Malationul se izoleaz din mediu acid cu solveni organici (eter etilic,
cloroform) dup tehnicile indicate de paration, din: produse biologice, produse alimentare,
corpuri delicte.
Dozare: Metoda spectrofotometric (formarea complexului hidroxamat Fe
3+
)
Malationul, coninnd gruparea carbonil, reacioneaz cu hidroxilamina n mediul
alcalin, cu formare de hidroxamai, care dau un complex rou cu clorura feric, de tip
Hantzsch, de forma, colorimetrabil:

C R
HN
O
O
3
Fe


Sensibilitatea metodei este de 10 g/ml. Metoda este comun esterilor acetici.
Reactivi: 1. Alcool etilic 95; 2. Hidroxilamin clorhidric 20% (se poate conserva
maximum dou sptmni la frigider, ns este preferabil s se prepare extemporaneu); 3.
Hidroxid de sodiu 20%; 4.Acid clorhidric 50% (v/v); 5. Clorur feric 12%. Se dizolv 12 g
FeCl
3
. 6H
2
O n 100 ml HCl 0,1N; 6. soluie standard stoc. Se aduc 0,5 g malation la 100 ml
cu alcool etilic, 1 ml = 5 mg; 7. Soluie standard de lucru. Se dilueaz soluia standard stoc
cu alcool etilic n proporie de 1 : 50. 1 ml = 100 g malation.

Eprubeta
Reactivi(ml) 1 2 3 4 5 6(M)
Standard de lucru 100 mg malation/ml 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 -
Conc.g 20 40 60 80 100 -
Alcool etilic 95 4.8 4.6 4.4 4.2 4.0 5.0
Hidroxilamin 20% 2.0
Hidroxid de sodiu 20% 2.0-agitare, 5 minute repaus
Acid clorhidric 50% 2.5
Clorur feric 15% 1.0-agitare
Ap distilat ad 15
Absorbana =500 nm


148
Modul de lucru: Reziduul de la extragerea cu eter (cloroform) este adus ntr-o
eorubet gradat de 20 ml cu alcool etilic 95. Se aduag 2 ml hidroxilamin 20%. Se las n
repaus 5 minute i se adaug 2,5 ml acid clorhidric 50% i 1 ml clorur feric 12% apoi cu
ap distilat 15 ml. Se citete extincia probei la spectrofotometru, la = 500 nm, n cuva de
1 cm, fa de un martor al reactivilor.
Curba de etalonare se ntocmete ntre 20 i 100 g malation prin puncte din 20 n 20
n condiiile descrise mai sus.
Valorile extinciei pentru probe se raporteaz la curba etalon, obinndu-se
concentraia C a malionitului, n g, n prob.
Calculul:
rezultatele se exprim n mg malation/100 mg (g) sau mg malation/100 ml (g) produs de
analizat; mg malation/100ml(g) produs analizat = C / 10A; mg malation/100 ml (g) produs
analizat = C / A, n care:
C = concentraia malationului, n g
A = volumul (masa) de produs luat n lucru, n mg (g).
Metoda spectrofotometric (formarea dimetilditiofosfatului de Cu
+
Prin hidrolizarea malationului n mediul alcalin rezult dimetilditiofosfatul de sodiu
care formeaz cu Cu
+
, dimetilditiofosfat de cupru de culoare galben extractibil n
tetraclorur de carbon. Sensibilitatea metodei este de 10g/ml.

P
O
O
S S
CH
3
CH
3
H
C
H
2
C
COOC
2
H
5
COOC
2
H
5
6NaOH
- 2NaOOC C
H
C
H
COONa
-4 C
2
H
5
OH
-H
2
O
P
O
O
S S
CH
3
CH
3
Na
CuSO
4
-Na
2
SO
4
P
O
O
S S
CH
3
CH
3
Cu S P
O
O
S
CH
3
CH
3
2 2


Reactivi: 1.Hidroxid de sodiu 6 N; 2.Clorur feric 0,2%; Se dizolv 0,2 g clorur
feric n civa mililitri ap, se adug 10 ml acid clorhidric concentrat i se completeaz la
100ml cu ap; 3. Fenoftalin1% n alcool; 4. Acid clorhidric 5N; 6. Tetraclorur de carbon;
7. Soluie standard (v. metoda precedent).
Modul de lucru: Reziduul de la extragerea cu solveni organici este tratat cu 1 ml
hidroxid de sodiu 6 N i 25 ml clorur feric 0,2%. Se agit i se las n repaus 5 minute,
apoi se neutralizeaz cu acid clorhidric n prezena de fenolftalein. Se aduce cantitativ ntr-
o plnie de separare, se adaug 2 ml sulfat de cupru 1% i se extrage de dou ori cu cte 5 ml
tetraclorur de carbon. Extractele organice reunite se configureaz. Se citete absorbana la
spectrofotometru, = 470 nm, n cuva de un cm, fa de tetraclorura de carbon.
Curba de etalonare se ntocmete ntre 20 i 100 g malation, prin puncte din 20 n
20, n condiiile descrise n scara etalon.

149
Eprubeta
Reactivi(ml) 1 2 3 4 5 6(M)
Standard de lucru 100 mg malation/ml 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 -
Conc.g 20 40 60 80 100 -
Hidroxid de sodiu 6 N 1.0
Clorur feric 0.2% 25.0 se agit, repaus 5minute
Hidroxid de sodiu 20% 2.0-agitare, 5 minute repaus
Neutralizarea cu acid clorhidric 5N n prezen de fenoftalein 1 % n alcool
Sulfat de cupru 1% 2.0
Tetraclorur de carbon 5.0 se extrage de 2 ori
Se centrifugheaz extractele reunite

Se citete extincia la Spekol, = 470 nm, n cuva de 1 cm, fa de tertraclorura de carbon.
Valoarea absorbanei pentru probe se raporteaz la curba de etalon, obinndu-se
concentraia C a malationului, n g, n prob.
Interpretare rezultatelor: Doza letal medie a malationului la om, este de 60 grame.
Ingerarea a 14 g a determinat, la adult, simptome de intoxicaie sever. n 4 cazuri fatale prin
ingerare de 25 70 g malation, n scop de sinucidere, s-au decelat urmtoarele valori medii
i extreme: 815 (100-18807) mg/ml snge; 1215 (200 1700) mg/kg ficat.

Determinarea activitii colinesterazice
Testul cu albastru de brom timol a. Se impregneaz o band de hrtie de filtru, n
soluie de acetilcolin 0,01 M, apoi n soluie de albastru de brom timol 0,1% n alcool. Se
spoteaz 1 - 2 picturi de ser de analizat, proaspt. Se apreciaz activitatea colinesterazic
dup timpul de modificare a culorii spotului, astfel: activitatea normal, 7 - 18 minute;
activitatea sczut, 35 - 150 minute.
b. Testul cu acid 5,5-ditio-bis-2-nitrobenzoic.
n coninut stomacal: n dou eprubete, M i P, de introduc:
Eprubeta/ reactivi M P
Soluie de acid ditio-bis-nitrobenzoic (ml) 3 3
Iodur de acetilin 5% (ml) 0.1 0.1
Ap distilat (ml) 0.2 -
Coninut stomacal filtrat (ml) - 0.2


Se las n repaus 2 minute. Absena unei diferene de culoare ntre cele dou eprubete indic
prezena compuilor organofosforici sau altor inhibitori i colinesterazei.
Soluie de acid 5,5-ditiobis-2-nitrobenzoic: se dizolv 10 mg acid 5,5'-ditio-bis-2-
nitobenzoic n 100 ml tampon fosfat pH = 7,4.
n snge: n dou eprubete M i P se introduc:

150
Eprubeta/ reactivi M P
Soluie de acid ditio-bis-nitrobenzoic(ml) 3 3
Iodur de acetilon 5% (ml) 0.1 0.1
Ser normal (microlitri) 20 -
Ser de cercetat (microlitri) - 20

Se las n repaus 2 minute. Absena diferenei de culoare ntrecele dou eprubete indic
prezena compuilor organofosforici sau a altor inhibitori ai colinesterazei.
Dozare: Metoda spectrofotometric. Colinesteraza seric (pseudocolinesteraza,
BuCnE,EC 3.1.1.B) elibereaz prin hidroliza butirilcolinei, tiocolina, care reacioneaz cu
DTNB (acid 5,5-ditiobis-2-nitrobenzoic) dnd un compus colorat galben cu maximum de
absorbie la 412 nm (
mM
= 13,6).
Serul de analizat: Se dilueaz 1/11, pipetnd ntr-un tub de hemoliz 0,2 ml NaCl
0,9% i 0,02 ml aer (se folosete micropipeta destinat dozrii hemoglobinei). Serul de
analizat poate fi pstrat nediluat minimum o sptmn la 4.
Tehnica de lucru:
Pentru fiecare determinare se pregtesc 2 tuburi de hemoliz n care se pipeteaz:
M P
Substrat(ml) 0.20 0.20
Ser diluat 1/11(ml) - 0.02
Incubare 10 minute la 25, apoi se pipeteaz
Reactiv de culoare(ml) 2.0 2.0
Ser diluat 1/11(ml) 0.02 -

Se citete absorbana probei la 412 nm fa de martor, la un interval de maximum 15 minute
de la adugarea ultimului reactiv.
Calculul activitii:
1. Unitatea (U) de activitate enzimatic este corespunztoare cantitii de enzim care
hidrolizeaz 1 mol butirilcolin n timp de 1 minut la temperatura de 25. Activitatea seric
se exprim n U/L.
U/L colinestereaz = 8978 x E
412
. Valorile normale pentru condiiile descrise mai sus sunt
cuprinse ntre 3000 8000 U/L ser.
Valoare diagnostic: BuChE scade n insuficienele hepatice, intoxicaii cu
organofosforice i n denutriie proteic grav. Creteri se ntlnesc n sindromul nevrotic,
diabet, hiperlipemie.
Sunt adecvate spectrofotometre de ori ce tip sau colorimetre cu filtru la 405 nm.
Pentru determinri la un numr mare de subieci se recolteaz 0,02 ml snge din pulpa
degetului i se introduc imediat n 1 ml ap distilat. Se spal pipeta de mai multe ori prin

151
aspirare i refulare. Pentru determinri se folosesc 0,02 ml snge diluat 1/51, timpul de
incubare fiind prelungit la 40 minute. Se recomand ca determinrile s fie efectuate n
aceiai zi. U/L colinesterez = 10 . 410 x
412
. Valorile normale pentru snge integrat sunt
cuprinse ntre 1600 i 4400 U/L.

Determinarea warfarinei


O
OH
O
H
C
C
6
H
5
H
2
C CO CH
3


Izolare: Warfarina (etilhidroxicumarina) se izoleaz prin extracie cu solveni
organici din mediu acid.
Izolare din produse biologice: 5 g esut, 5 ml snge sau 10 ml urin se trateaz cu
puin nisip purificat, cu o cantitate dubl de sulfat de sodiu anhidru i 0,5 g acid tartric, pn
se obine o mas solid. Amestecul se aduce cantitativ ntr-un Erlenmeyer i se extrage cu 20
ml aceton sau dicloretan prin agitare timp de 20 minute. Se filtreaz ntr-o capsul, splnd
filtratul cu aceton, iar fazele organice se evapor la sec pe o baie de ap. Reziduul se
folosete pentru reacii identificare.
Identificare:
1. Reziduul se dizolv n 1-2 ml tampon fosfat pH = 8, apoi se adaug 0,5 ml soluie 4-
aminoantipiridin 1% i 0,5 ml soluie fericianur de potasiu 3% cnd rezult o coloraie
roie.
2. Reziduul se dizolv n 1 ml hidroxid de sodiu 10%, se nclzete pe baie de ap timp de 1-
2 minute. Dup rcire, se trateaz cu 2-3 picturi doluie Lugol pn la culoarea galben,
apoi excesul de iod se distruge cu hidroxid de sodiu 10%. n prezena warfarinei se formeaz
iodoform cu miros caracteristic.
3. Reziduul se trateaz cu 1- 2 ml amestec sulfonitric i se ine pe baie de ap la fierbere,
timp de 15 minute. Dup rcire se alcalinizeaz cu hidroxid de sodiu 20%, cnd apare o
coloraie galben datorit formrii nitroderivatului Warfarinei (reacia Meltzer).
4. Reziduul reluat cu 12 ml reactiv Liebermann (10 g nitrat de potasiu n 100 ml acid
sulfuric concentrat) d o coloraie portocalie.
Cromatografie n strat subire. Reziduul dizolvat n 0,2 0,5 ml cloroform sau etanol
se spoteaz pe o plac cromatografic, n paralel cu un martor. Sistemul de migrare este
format din eter de petrol anhidru: anhidrid acetic: cloroform: etanol (10:5:7:1). Revelarea
se face cu un amestec de soluie de ferocianur de potasiu (2 volume) i clorur feric 1% (1
volum). Ambele soluii se prepar n etanol 50%, iar amestecul se face extemporaneu.

152
Dozare. Metoda spectrofotometric: Warfarina se nitraz la nucleul benzenic, apoi se
reduce, se diazoteaz i se cupleaz cu NKD obinndu-se un azoderivat de culoare violet ce
se spectrofotometreaz la 550 nm, fa de un martor.
O
OH
H
C
O
CO CH
3
C
6
H
5
HNO
3 ,
H
2
SO
4
O
OH
H
C
O
H
2
C
NO
2
CO CH
3
6H
Zn , HCl
O
OH
H
C
O
H
2
C
NH
2
CO CH
3
NaNO
2
HCl
O
OH
H
C
O
H
2
C
N
CO CH
3
N
Cl
HN (CH
2
)
2
NH
2
O
OH
H
C
O
H
2
C
N
CO CH
3
N
H
N (CH
2
)
2
NH
2



Reactivi: 1. Amestec sulfonitric (acid sulfuric concentrat: acid azotic fumans, 1 : 1); 2.
Eter etilic; 3. acid clorhidric 10%; 4. Zinc pulbere; 5. Nitrat de sodiu 0,1%; 6. Uree 10%; 7.
N-naftiletilendiamin (NKD) 1%; 8. Soluie standard de lucru, se cntrete 0,1000 g
warfarin i se aduce la 200 ml cu diclor etan sau aceton (1 ml = 500 g warfarin).
Modul de lucru: se trateaz reziduul cu 5 ml amestec sulfonitric i se ine pe baie de
ap la 60 - 80c timp de 15 minute, dup care se dilueaz cu 20 ml ap. Se tranzvazeaz
cantitativ ntr-o plnie de separare i se extrage de dou ori cu 20 ml eter etilic. Extractele
eterice reunite se filtreaz printr-un filtru uscat i se evapor la sec pe baie de ap. Reziduul
se dizolv n 10 ml acid clorhidric 10%, se adaug 0,2 g zinc pulbere i se nclzete pe baie
de ap la fierbere. Se las n repaus15 minute, apoi se filtreaz ntr-un balon cotat de 25 ml
aducndu-se cu ap distilat la semn. Se iau 5 ml soluie i se adaug 0,2 ml nitrat de sodiu
0,1%, dup 10 minute se adaug 2 ml uree 10%. Se agit i dup 10 minute se adaug 1 ml
NKD 1%. Se obine o coloraie roz-roie care se spectrofotometreaz dup 10 minute la 550
nm n cuva de 1 cm, fa de un martor.
n paralel se lucreaz o curb de etalonare cu concentraii prinse ntre 25 i 250 g
warfarin. Valoarea extinciei probei se raporteaz la curba de etalonare i se nmulete cu 5
(deoarece s-a lucrat cu 1/5 din prob) obinndu-se concentraia C n g de warfarin pe
prob.
Calculul: Rezultatele se exprim n mg warfarin pe 100 g produs biologic.


153
CAP. VIII. OTRVURI FOARTE PUTERNICE

8.1 ACIDUL CIANHIDRIC
Acidul cianhidric, HCN, este un lichid incolor n stare pur care, la 26
o
C, se transform ntr-
un gaz incolor, cu miros uor de migdale amare. Este uor solubil n ap i miscibil n orice
proporie cu majoritatea solvenilor organici.Are un miros specific de migdale amare care este
perceput la o concentraie de 1g/l aer, n funcie de sensibilitatea personal. Este folosit n
silozuri pentru combaterea roztoarelor i insectelor. Ca gaz de lupt nu mai este utilizat
deoarece se disperseaz rapid n atmosfer. Poate fi uor obinut din srurile sale prin tratare
cu acizi tari, deoarece acidul cianhidric este un acid slab ce poate fi uor deslocuit din acestea.
Ferocianura de potasiu este inofensiv i se utilizeaz n agricultur i n alte domenii fr
niciun risc. In prezena acidului sulfuric ce poate fi procurat uor de la bateriile de automobil,
aceasta elibereaz acid cianhidric, volatil i otrvitor. Srurile sale, cianura de sodiu (mai rar
folosit n tehnic datorit higroscopicitii sale) i cianura de potasiu (utilizat la extracia
aurului, galvanoplastie, etc.) sunt otrvitoare provocnd moartea unui om adult n cantiti de
100-200 mg.
Toxicocinetic. Acidul cianhidric se absoarbe repede pe cale respiratorie (sub form
de gaz), transcutanat (mai lent) i digestiv. Cianurile alcaline ptrund prin ingerare i
transcutanat (aciune coroziv asupra tegumentelor care favorizeaz ptrunderea). Se
distribuie n toate esuturile, dar nu se acumuleaz. Metabolizarea major (80%) se realizeaz
prin detoxicare la sulfocianur, SCN

, cu toxicitate redus, sub aciunea rodanazei (tiosulfat:

cianuri-sulftransferaza). Se consider c sulful provine din aminoacizii sulfurai, iar cedarea
sulfului se realizeaz prin intermediul tiosulfatului; de asemenea c rodanaza are o grupare
disulfur activ:


Eficiena reaciei de detoxifiere este limitat de cantitatea redus de rodanaz din
organism. Cile secundare de metabolizare (20%) includ: reacia cu cisteina; oxidarea la
HCNO, apoi la CO
2
; hidroliza la HCOOH; formarea de ciancobalamin. O mic cantitate se
elimin ca atare pe cale respiratorie.
Toxicodinamie. Toxicitatea acidului cianhidric se datorete capacitii ionului CN

de
a inhiba un numr mare de enzime tisulare, n special a citocromoxidazei, mpiedicnd astfel
utilizarea oxigenului molecular de ctre celule n procesul respiraiei celulare. ntr-o prima
faz a lanului respirator are loc transferul hidrogenului i a ionilor de hidrogen, H
+
, de la
substrat, iar n faza a doua, are loc transferul electronilor (e

) cu ajutorul citocromilor, ntr-o

ordine dependent de potenialul lor redox. Intervine nti citocromul b, apoi citocromii c i,
n final, citocromoxidaza (cit.a + cit.a
3
), cnd oxigenul activat(1/2 O
2
2
) se unete cu 2 H
+

pentru a forma ap. Ionul cian inhib citocromoxidaza prin blocarea Fe
3+
, ntrerupnd lanul
respirator i deci mpiedicnd utilizarea oxigenului de ctre celule, ceea ce conduce la asfixie
E
S
S
+
E
S
S
E
S
S
S
2
O
3
2-
CN
-
S SO
3
2-
SCN
-
+ + SO
3
2-

154
celular. Sngele rmne saturat cu oxigen, ceea ce explic culoarea roie-viinie a pielii n
intoxicaia acut fatal cu HCN. Complexul cian-citocromoxidaz disociaz pe msur ce
ionul CN

este detoxicat la SCN

. Ionul cian se combin i cu hemoglobina, dar n proporii

foarte mici, lipsite de importan toxicologic. Acesta reacioneaz cu MetHb cu formare de
CNMetHb (cianmethemoglobin); MetHb are afinitate mai mare pentru CN

dect
ciancromoxidaza, iar CNMetHb este mai puin toxic dect CN

. Dac doza nu este fatal,

ionul CN

este eliberat progresiv de ctre citocromoxidaz sau methemoglobin i

transformat n tiocianat, compus netoxic care se elimin prin urin.



















Doza letal (ingerare) este 100 mg pentru HCN i 200 mg pentru NaCN i KCN. O
concentraie de peste 270 mg/m
3
este mortal.
Expunerea la concentraii mari de vapori (peste 300 mg/m
3
) de HCN provoac
intoxicaia supraacut cu evoluie mortal n cteva minute. Intoxicatul prezint ameeli,
palpitaii i dispnee, urmate de com, convulsii, stop respirator i stop cardiac. Expunerea la
concentraii mari, ntre 150 i 300 mg/m
3
, provoac intoxicaia acut, curabil. Primele semne
constau n gust amar, senzaie de sufocare, ameeli, dureri intense de cap, slbiciune
muscular i stare confuzional, la care se adaug hipersalivaie, grea, vrsturi i dispnee.
Aceast simptomatologie dispare dac victima prsete locul accidentului.
Expunerea la concentraii mici de HCN (25-65 mg/m
3
) provoac cefalee, vrsturi,
tulburri de echilibru i uneori confuzie mintal. Fenomenele dispar n cteva ore dup ce
bolnavul a prsit mediul poluat.
Inhalarea n doze subletale (sub 20 mg/m
3
) este curabil numai dac intoxicatul a fost
scos imediat din mediul toxic i dac tratamentul s-a aplicat ct mai repede posibil, chiar la
locul accidentului.
CN
-
SCN
-
Excreie
Cisteina
Rezerva de CN
-
Ciancobalamina
Acid 2-imino-4-
tiazolin-carbonic
Excreie urinar CO
2
HCN
expiraie
HCNO HCOOH Metabolit C
1
Toxicocinetic: metabolizarea ionului cian (dup Goodman si Gilman)
Excreie urinar
CN
-
SCN
-
Excreie
Cisteina
Rezerva de CN
-
Ciancobalamina
Acid 2-imino-4-
tiazolin-carbonic
Excreie urinar CO
2
HCN
expiraie
HCNO HCOOH Metabolit C
1
Toxicocinetic: metabolizarea ionului cian (dup Goodman si Gilman)
Excreie urinar

155
Primul ajutor:
intervenia de prim ajutor comport extrem urgen;
accidentatul va fi scos imediat din zona contaminat i dus ntr-o ncpere cald i
bine ventilat;
ndeprtarea hainelor i decontaminarea tegumentelor cu ap i spun;
inhalarea imediat de nitrit de amil 1 fiol (pe compres); operaia se repet din 5 n
5 minute, cel mult 20 minute;
se va evita asfixierea prin cderea limbii, resturi alimentare etc;
n caz de stop respirator se face respiraie artificial cu oxigen pur (este
contraindicat respiraia gur la gur), concomitent cu inhalarea de nitrit de amil 1 fiol (pe
compres), care se repet din 5 n 5 minute, cel mult 20-25 minute;
n intoxicaia prin ingestie se va proceda astfel:
inhalarea imediat de nitrit de amil o fiol (pe compres); operaia se repet din 5 n
5 minute, cel mult 25 minute;
spltur gastric cu KMnO
4
1/5000, H
2
O
2
3% i Na
2
S
2
O
3
1%;
cnd spltura gastric nu este posibil, se recomand ingerarea de cantiti mari din
aceleai soluii, urmat de provocarea de vrsturi;
administrarea de purgative saline;
oxigenoterapie;
se va anuna medicul care va conduce mai departe tratamentul necesar.
Analiza toxicologic folosete:
hrtie indicator bazat pe reacia de formare a ferocianurii ferice albastre;
detectare cu tuburi indicatoare Drger;
dozare argenimetric. Se recolteaz aerul ntr-un vas absorbant care conine o
soluie de AgNO
3
N/20 acidulat cu HNO
3
, efectundu-se apoi dozarea gravimetric sau
volumetric prin metoda Volhardt;
dozarea colorimetric a izopurpurinei formate prin captarea acidului cianhidric ntr-
o soluie de acid picric i alcalinizare cu Na
2
CO
3
. Compararea se face cu o scar etalon
artificial de bicromat de potasiu,;
metoda bazat pe transformarea n bromcian i apoi aldehid glutaconic, urmat
de cuplarea cu acid barbituric i spectrofotometrare;
reacia Schnbein hrtia mbibat cu soluie de CuSO
4
i tinctur de guaiac se
coloreaz n albastru;
reacia Castaldi hrtia mbibat cu soluie de acetat cupric i benzidin se
coloreaz n albastru;
din medii biologice (corpuri delicte) se izoleaz prin distilare n mediu de acid
tartric; se capteaz distilatul n NaOH i se identific CN

prin reacia Liebig (formarea

tiocianatului feric) i prin reacia Chelle (formarea albastrului de Prusia).
Cteva cazuri de otrvire. Cianura determin hipoxie intracelular datorit legrii
reversibile de citocrom oxidaza mitocondrial. Semnele i simptomele intoxicaiei cu cianur
apar de obicei n mai puin de 1 minut dup inhalare i n cteva minute dup ingestie.
Manifestrile precoce includ anxietate, dureri de cap, ameeal, incapacitatea de concentrare

156
i midriaz (Hamel, 2011). Dac hipoxia progreseaz, scade nivelul de contiin, apar
convulsii i com. Pielea poate arata normal sau uor cenuie, iar saturaia cu oxigen arterial
poate fi normal. Tratamentul n Statele Unite l reprezint antidotul pentru cianur cu
hidroxicobalamin. Hidroxicobalamina detoxific cianura prin legare cu aceasta i excretare
prin urin a ciancobalaminei netoxice. Pentru c reacioneaz cu cianura fr s formeze
methemoglobin, hidroxicobalamina poate fi utilizat pentru a trata pacienii, fr a
compromite capacitatea de transport a oxigenului de ctre hemoglobin.
Un brbat n vrst din Sri Lanka a fost njectat cu o sering n abdomen n timp ce
doarmea. Acesta a dezvoltat progresiv insuficien respiratorie i com i a murit o or mai
trziu (Abeyasinghe et al. 2011). Constatrile la autopsie i analizele de laborator au
confirmat moartea ca fiind cauzat de intoxicaia cu cianur. Astfel cianura poate fi o metod
de asasinare, cu o moarte rapid cu insuficien respiratorie progresiv, dup injectarea unei
substane. In suicidare, accident i crim este frecvent intoxicaia cu cianur prin ingestie, nu
prin injectare.
Au mai fost studiate 17 sinucideri cu cianur n New York ntr-un interval de zece ani
(Gill et al. 2004). Au predominat oamenii de tiin, bijutieri i lucrtorii n metal.
Paisprezece din cele 17 victime au fost brbai. S-a folosit un test de culoare pentru screening-
ul pentru cianur cu confirmare i determinare cantitativ prin cromatografia de gaz.
A fost prezentat un caz de sinucidere mai puin obinuit prin ingerarea oral de
cianur de potasiu i inhalare de HCN (Musshoff et al. 2011). Un comerciant de 48 de ani a
fost gsit mort n maina sa. Un miros penetrant de migdale amare a fost observat la
deschiderea uilor. Un aragaz de camping i o oal de gtit care conineau cantiti mari de
cristale albastre inchis au fost gsite n zona picioarelor n main. O pulbere alb a fost gsit
pe degete i n jurul gurii. n plus, s-au gsit flacoane care conineau tipuri ferocianur de
potasiu i diferii acizi, mpreun cu informaii de pe internet, despre ferocianur i cianur de
potasiu.
La autopsie s-au observat hemoragii i eroziuni ale mucoasei tractului respirator,
esofagului i stomacului. Concentraiile de cianur au fost 0,2 mg / l n coninutul stomacal,
0,96 mg / kg n esutul cerebral, 2.79 mg / kg n plmni i 5,3 mg / l n snge. Acest caz se
refer la o persoan care nu a fost familiarizat cu substane chimice, dar care a putut obine
informaii profesionale prin intermediul internetului, pentru o sinucidere complex.
Antidoturi. Compuii care conin grupri carbonilice pot reaciona uor cu cianurile
(Moore et al. 1986). Acidul piruvic, un acid alfa-cetocarboxilic, are efecte antagonice fa de
cianur. Se sugereaz c mecanismul su de aciune se bazeaz pe capacitatea sa de a
reaciona cu cianuri. Acidul alfa-ketoglutaric, de asemenea, un acid alfa-cetocarboxilic, a fost
evaluat pentru capacitatea sa de a contracara efectele letale de cianur (Bhattacharya et al.,
2001.). Acesta a crescut valoarea DL
50
pentru cianur (6,7 mg / kg) de cinci ori, o valoare
statistic echivalent cu cea constatat la soareci pretratai cu tiosulfat de sodiu i nitrit de
sodiu. Amestecul de acid alfa-cetoglutaric i tiosulfat de sodiu a crescut valoarea DL
50
a
cianurii la 101 mg / kg. Adaosul de nitrit de sodiu la acidul alfa-cetoglutaric i tiosulfat de
sodiu a crescut valoarea DL
50
a cianurii la 119 mg / kg. Spre deosebire de nitrit de sodiu, nu
induce formarea de methemoglobin. Reiese din aceste studii c administrarea de acid alfa

157
NH
2
NH
2
NH
2
NH
2
NH NH
ketoglutaric i tiosulfat de sodiu conduce la mai puine decese fr formarea de
methemoglobin care este periculoas.
Au fost propuse o serie de promedicamente bazate pe 3-mercaptopiruvat ca substrat
pentru enzima 3-mercaptopyruvate/cyanide (3-MPST) sulfurtransferaz, care convertete
cianura la tiocianat netoxic (Nagasawa et al. 2007). Aceste promedicamente, care sunt foarte
eficiente antidoturi pentru cianur, sunt unice fiind luate pe cale oral, dar pot fi administrate
pn la o or nainte de cianur ca agent profilactic, putnd fi administrate i parenteral.

Toxicologia analitic a acidului cianhidric

Izolare. HCH se izoleaz din aer n soluii absorbante, iar din produse biologice i alte
produse, prin distilare n mediu slab acid.
Identificare. Depistarea mirosului de migdale amare, procedeul nu este recomandat,
fiind riscant. Identificarea se face din aer, coninut stomacal, organe, snge. Se execut cu
ajutorul hrtiilor indicatoare; n cazul organelor (coninut stomacal), hrtiile se suspend pe
capacul recipientelor n care se gsesc produsele, avnd grij s nu vin n contact cu
acestea.
Reacia Schnbein: hrtia mbibat cu sulfat de cupru 0,05%, apoi cu guaiac 4% n
alcool, se coloreaz n albastru n prezena acidului cianhidric. Reacia se bazeaz pe
proprietatea acidului cianhidric de a mri potenialul oxidant al cuprului, care singur nu
oxideaz guaiacul, dar n prezena acidului cianhidric l oxideaz la ozonid guiaconic,
dup reaciile:
CuSO
4
+ 2 HCN = Cu(CN)
2
+ H
2
SO
4
2 Cu(CN)
2
+ H
2
O = Cu(CN)
2
+ 2 HCH + [O]
Reacia este sensibil (1/300000), aproape instantanee, dar nespecific, fiind dat i de
substanele oxidate (clor, ozon, etc.).
Reacia Castaldi: hrtia mbibat n acetat de cupru 0,28% i apoi n acetat de
benzidin 0,5%, se coloreaz n albastru n prezena acidului cianhidric. Reacia se bazeaz
pe o dismutaie cu formare de oxigen n stare nscnd, care oxideaz benzidina la produsul
merichinoic, albastru:
Cu(CH
3
-COO)
2
+ 2 HCN = Cu(CN)
2
+ 2CH
3
-COOH
2 Cu(CN)
2
+ H
2
O = Cu
2
(CN)
2
+ 2 HCH + [O]


2 + 2 CH
3
-COOH +[O]



+ CH
3
-COOH + H
2
O




158

Reacia este sensibil, dar nespecific.
Reacia Guignard: hrtia tratat cu acid picric 1%, uscat, apoi cu Na
2
CO
3
5% i
uscat la temperatura camere se nroete prin formarea izopropanolului n prezena acidului
cianhidric. Reacia este specific, sensibil, dar se desfoar lent.
Reacia Chelle Regnier se bazeaz pe oinerea albastrului de Prusia (albastru de
Berlin). La 5 ml distilat se adaug o pictur soluie fenoftalein, apoi se aciduleaz cu
H
2
SO
4
0,1 N i se realcalinizeaz net cu borax, pn la apariia culorii roz (dac culoarea
dispare, se mai adaug borax); se adug cteva picturi de FeSO
4
2%, apoi se aciduleaz
uor cu 4 5 picturi HCl conc. Apare o coloraie albastr datorit formrii ferocianurii
ferice. Reaciile care au loc sunt:
2 NaCN + FeSO
4
= Fe (CN)
2
+ Na
2
SO
4
Fe (CN)
2
+

4 NaCN = Na
4
[Fe(CN)
6
]
6 FeSO
4
+ 3/2 O
2
+ 3 H
2
O = Fe(SO
4
)
3
+ 2 Fe(OH)
3

3 Na
4
[Fe(CN)
6
] + 2 Fe(SO
4
)
3
+ Fe
4
[Fe(CN)
6
]
3
+ 6 Na
2
SO
4
Sensibilitatea reaciei este de 1/ 100000. Pentru a mri sensibilitatea, se adaug o pictur de
BaCl
2
, cnd se formeaz BaSO
4
, care se depune i antreneaz colorantul albastu de Prusia
(de Berlin). Reacia s-ar putea executa i cu FeCl
3
, ns excesul de FeCl
3
confer soluiei o
culoare galben, care mascheaz culoarea verzuie a concentraiilor mici de albastru de
Berlin.
Reacia Liebig de formare a sulfocianurii ferice, se realizeaz nclzind la fierbere
soluia de analizat cu cteva picturi de polisulfur de amoniu 10%, cnd se formeaz
sulfocianura de amoniu. Se aciduleaz cu acid clorhidric pentru distrugerea excesului de
polisulfur, se filtreaz i se trateaz cu FeCl
3
1% (soluie proaspt preparat), cnd apare o
coloraie roie datorit sulfocianurii ferice.
Reacia este specific:
CN
-
+ (NH
4
)
2
S
2
SCN
-

+ (NH
4
)
2
S
3SCN
-
+ Fe
3+
Fe(SCN)
3

Reacia cu azotat de argint: se trateaz soluia de analizat cu cteva picturi de
AgNO
3
1%, cnd se formeaz un precipitat alb, insolubil n acid azotic, solubil n cianur
alcalin. n exces de azotat de argint apare un precipitat alb de diciano argintat de argint:
KCN + AgNO
3
= AgCN + HNO
3
AgCN + KCN = K[Ag(CN)
2
]
K[Ag(CN)
2
] + AgNO
3
= Ag[Ag(CN)
2
] + KHO
3

Reacia Dnigs se realizeaz cu azotat de argint i iodur de potasiu: ionul CN
-
formeaz cu AgNO
3
, AgCN solubil n amoniac, iar excesul de AgNO
3
reacioneaz cu KI
dnd AgI galben, insolubil n amoniac.
KCN + AgNO
3
= AgCN + HNO
3

AgCN + 2 HN
3
= [Ag (NH
3
)
2
] CN
KI + AgNO
3
=

AgI + KNO
3

Reacia de formare a bromurii (clorurii) de cianogen: ionul CN
-
formeaz cu apa de
brom (clor), bromur (clorur) de cianogen. Aceasta se combin cu nucleul piridinic,

159
deschizndu-l, cu formare de aldehid glutaconic, care se cupleaz cu diamine aromatice
(de exemplu: benzdina), obinndu-se baza Schiff, roie (tehnica Truhaut) sau cu antipirina
dimetilic, dnd culoare albastr (tehnica Epstein).
Dozarea spectrofotometric a acidului cianhidric din aer.
Metoda Chelle Regnier. Principiu metodei se bazeaz pe reacia ionului de cianur cu
sulfatul feros cu formare de ferocianur de potasiu care, tratat cu o sare feric, formeaz
albastru de Berlin, colorimetrabil.
Reactivi: 1. Soluie absorbant NaOH, 0,1 N; 2. Soluie alcoolic de fenoftalein 1%;
3. Acid sulfuric 0,1 N; 4. Soluie saturat de borax: se dizolv prin nclzire 5 g borax n 100
ml ap distilat; 5. Soluie sulfat feros 2% (cu cteva picturi de clorur feric 2%); 6. Acid
clorhidric concentrat. 7. Standard: se dizolv 0,1 g KCN n 100 ml NaOH 0,1 N. Se titreaz
argentimetric sau iodometric i se stabilete concentraia n CN
-
: 10 ml soluie standard stoc
se trateaz cu 5 ml iodur de potasiu 20% i se titreaz cu azotat de argint 0,01 N pn la
apariia unei opalescenei alb glbui dat de iodura de argint.
1 ml AgNO
3
0,01 N corespunde la 0,25 mg CN
-
8. Standard de lucru: Se dilueaz cu NaOH 0,1 N o parte alicot din standardul stoc, astfel
nct soluia s conin 100 g CN
-
/ml. Soluia se prepar extemporaneu.
Recoltarea probelor. Se aspir aerul prin dou vase spltoare, coninnd fiecare 10
ml NaOH 0,1 N. Se recolteaz 40 50 l aer cu viteza de 25 litri/or.
Modul de lucru. Se iau cte 5 ml soluie absorbant din fiecare vas spltor, se
trateaz cu o pictur fenoftalein 1% cnd apare o culoare roie viinie, apoi se adaug 5
ml acid sulfuric 0,1 N cnd soluia se decoloreaz (la nevoie se adaug 2 -3 picturi n plus).
Se realcalinizeaz net cu 2 ml soluie saturat de borax, cnd apare o culoare roz viinie, se
agit i se las 5 -10 minute n repaus. Se adaug 1 ml sulfat feros 2% cnd se formeaz un
precipitat galben verzui, apoi se adaug 6 picturi acid clorhidric concentrat, se agit pn
la dizolvarea precipitatului i apariia unei coloraii bleualbastru. Dup 10 minute se
msoar extincia la spectrofotometru la = 720 nm, n cuva de 1 cm n compensaie cu
proba martor.
Curba de standardizare se face ntre 70 i 150 g ion CN
-
, prin puncte din 20 n 20, n
condiiile descrise mai sus.
Cu extinciile obinute se construiete, curba standard sau se calculeaz cu factorul de
pant. Valorile extinciilor pentru probe se raporteaz la curba standard, apoi se nmulesc cu
2 ( pentru c s-a lucrat cu din soluia absorbant), obinndu-se concentraia C a CN
-
n
g .
Calcul
Rezultatele se exprim n mg CN

/ m
3
aer.
mg/m
3
= C / V n care:
C= concentraia CN
-
, n g
V= volumul de aer recoltat n litri.




160
Eprubeta
Reactivi(ml) 1 2 3 4 5 6
Standard de lucru (100 g CN
-
/ ml) 0.7 0.9 1.1 1.3 1.5 -
Concentraie, g 70 90 110 130 150 -
NaOH 0.1% 4.3 4.1 3.9 3.7 3.5 5.0
Fenolftalein 1% sol. alcoolic 1 pictur
H
2
SO
4
0.1 N 2.0 agitare, 5-10repaus
FeSO
4
2 % 1.0 agitare
HCl 6 picturi, agitare, 10 repaus
=720nm

Metoda colorimetric pentru sulfocianur
Metoda Liebig se bazeaz pe determinarea sulfocianurilor din snge (aer) i urin; ionul
SCH
-
apare prin metabolizarea HCN sau n procesul de putrefacie. n mod fiziologic se
produc sulfocianuri n organism, nct la persoanele normale se gsesc urmtoarele condiii:
- n ser: la nefumtori pn la 2 mg sulfocianur/100ml;
la fumtori pn la 3 mg sulfocianuri/100 ml;
- n urin: la nefumtori pn la 15 mg sulfocianuri/litru;
la fumtori pn la 26 mg sulfocianuri/litru.
Se consider ca indice de expunere la compui ai cianului nivele sanguine peste 8 mg/100 ml
i eliminri urinare peste 30 mg/litru.
Cnd se urmrete CN
-
n produse cadaverice este necesar transformarea HSCN n HCN
prin oxidare cu acid cronic i separare prin distilare a HCN (matoda Chelle). Astfel, HSCN
formeaz complexul Fe(SCN)
3
(reacia Liebig).
Reactivi
1. Acid triclor acetic 1%;
2. Nitrat feric 5%; se dizolv 12,5 g nitrat feric n 250 ml acid azotic 1 N.
3. Standard: sulfocianur (tiocianat) de potasiu 0,1% (aproximativ 1 ml = 1 mg).
4. Standard de lucru: se titreaz soluia stoc cu AgNO
3
0,1 N i se calculeaz concentraia
exact de KSCN. Se dilueaz cu ap astfel, nct s se obin o soluie 1 ml = 25 g KSCN.
Se prepar extemporaneu din soluia stoc care se titreaz n aceeai zi.

Recoltarea probelor
Se recolteaz snge prin puncie venoas, se centrifugheaz timp de 5 minute la 3000
turaii/minut Se colecteaz urin n vas curat. Este indicat s se cerceteze sulfocianurile n
aer i n urin ct mai curnd dup expunerea probabil (pn la 24 ore).
Modul de lucru. Se pipeteaz 2 ml aer i se adaug 2 ml acid tricloracetic 10%, se
agit i dup 10 minute se filtreaz. Se pipeteaz 5 ml urin i se adaug 5 ml acid triclor
acetic 10%, se agit, dup 5 minute se filtreaz. La 2 ml filtrat (corespunznd la 1 ml ser sau
urin) se adaug 3 ml nitrat feric i se agit. n paralel se face un martor al reactivilor, cu 2

161
ml ap i 3 ml nitrat feric 5% i un martor alurinei cu 2 ml filtrat de urin i 3 ml ap
(aceasta se face pentru fiecare prob de urin). Dup 10 minute se citete extincia probelor
de ser, la spectrofotometru Spekol la = 470 nm, n cuva de 1 cm, n compensaie cu
martorul reactivilor, obinndu-se extincia E
S
.
Pentru urin se msoar att extincia probelor (E
U
), ct i extincia martorului urinei
(E
0
), fa de martorul reacivilor, n condiiile descrise mai sus (conform schemei).

Curba de standardizare se face ntre 10 i 50 g KSCN, prin puncte din 10 n 10, msurnd
extinciile fa de martorul reactivilor. Cu extinciile obinute se calculeaz factorul de pant
(A).

Eprubeta
Reactivi(ml) 1 2 3 4 5 6(M)
Standard de lucru (25 g SCN
-
/ ml) 0.4 0.8 1.2 1.6 2.0 -
Conc.g 10 20 30 40 50 -
Ap distilat 1.6 1.2 0.8 0.4 - 2.0
Fe(NO
3
)
3
5 % n HNO
3
1 N 3.0 agitare 10 repaus


Calculul
- pentru ser: E
S
. A = C
S
, n g KSCN.;
- pentru urin: (E
U
E
0
) . A = C
U
, g KSCN.
Rezultatele se exprim n mg sulfocianur (KSCN) la 100 ml ser sau la litru urin. ntruct
proba luat n lucru reprezint 1 ml ser sau urin, rezultatele sunt:
mg sulfocianur/100 ml ser = C
S
. 0,1
mg sulfocianur/litru urin = C
U

n cazul mai multor determinri, cnd se lucreaz n serie, pentru a nu se mai face
pentru fiecare prob i un martor al urinei, se procedeaz astfel: se lucreaz probele, se
citete extincia E
P
i api se adaug n fiecare prob 1 2 picturi Hg(NO
3
)
2
, i soluie
saturat i se citete E
U
.
5SCN
-
+ Fe
3+
Fe(SCN)
3
Fe(SCN)
3
+ Hg(NO
3
)
2
Hg(SCN)
2
+ Fe
3+
+ 2 NO
3
-
+ SCN
-

Eprubeta
Reactiv (ml) Proba Martorul urinei Martorul reactivilor
Filtrat de urin 2.0 2.0 -
Fe(NO)
3
5 % n HNO
3
1N 3.0 - 3.0
Ap distilat - 3.0 2.0
Agitare, repaus 10 =470 nm
E
u
E
0

162
Subiectul examinat nu va lua medicament coninnd salicilai (aspirin
antinevralgice,etc.) cu cel puin 48 ore nainte de determinare, ntruct acetea dau aceeai
coloraie cu sarea feric.

Determinri curente
Cromatografia capilar cu detector cu captur de electroni a fost folosit la determinarea
acidului cianhidric din fumul de igar (Xu et al. 2006). Lindsay i OHare (2006) determin
amperometric acidul cianhidric din snge.


Bibliografie specific
Abeyasinghe, N. L., Perera, H. J. M., Weerasinghe, D. S. K. Case report - Death by
subcutaneous injection of cyanide in Sri Lanka. J. Forensic Legal Med., 18, 182-183,
2011.
Bhattacharya, R., Kumar, D., Sugendran, K., Pant, S. C., Tulsawani, R. K., Vijayaraghavan,
R. Acute toxicity studies of -Ketoglutarate: a promising antidote for cyanide
poisoning. J. Appl. Toxicol., 21, 495 499, 2001.
Drochioiu, G., Arsene, C., Murariu, M., Oniscu, C. Analysis of cyanogens with resorcinol and
picrate. Food and Chemical Toxicology, 46, 35403545, 2008.
Drochioiu, G., Mangalagiu, I., Avram, E., Popa, K., Dirtu, A. C., and Druta, I. Cyanide
reaction with ninhydrin: Evaluation of interference and mechanisms. Analytical
Sciences, 20, 1443 1447, 2004.
Drochioiu, G. Highly selective and sensitive reaction of cyanide with 2,2-dihydroxy-1,3-
indanedione. Analytical and Bioanalytical Chemistry, 372(5-6) 744 747, 2002;
Drochioiu, G. Fast and highly selective determination of cyanide with 2,2-dihydroxy-1,3-
indanedione. Talanta, 56(6) 1163 1165, 2002;
Drochioiu, G., Mangalagiu, I., Tataru, V. Specific spectrophotometric determination of
hydrocyanic acid in the environment. Analyst, 125, 939-941, 2000.
Drochioiu, G., Popa, K., Humelnicu, D., Murariu, M., Sandu, I., Cecal, A. Comparison of
various sensitive and selective spectrophotometric assays of environmental cyanide.
Toxicol. Environ.Chem., 90, 221-235, 2008;
Drochioiu, G., Oniscu, C., unel, V., Popa, K., Cozma, D. Cyanide assay based on its novel
reaction with resorcinol and picric acid. Eur. J. Min. Proc. Environ. Prot., 3(3) 291-
296, 2003;
Drochioiu, G., Mangalagiu, I. Assay of cyanide in biological materials using 2,2-dihydroxy-
1,3- indanedione. Pakistan J. Appl. Sci., 2(6) 658 660, 2002;
Drochioiu, G., Mangalagiu, I., Popa, K., Avram, Ecaterina, Molnar, Ramona, and Druta, I.
Novel reactions of cyanide with 2,2-dihydroxy-1,3-indanedione. Rev. Roum. Chim.,
50(1), 53 59, 2005
Drochioiu, G., unel, V., Grebinian, D., Vlahovici, A., Saiz, V., Murariu, M. Dosage des
ions cyanure totaux par linhibition de lactivit catalasique. Rev. Roum. Chim., 49(2)
121-125, 2004;

163
Drochioiu, G., Pui, A.,Dnac, R., Bsu, C., Murariu M. Improved spectrophotometric assay of
cyanide with picric acid. Rev. Roum. Chim., 48(8) 601-606, 2003;
Gill, J. R., Marker, E., Stajic, M. Suicide by cyanide: 17 deaths. J. Forensic Sci., 49, 826-828,
2004.
Hamel, J. A review of acute cyanide poisoning with a treatment update. Critical Care Nurse,
31, 72-82, 2011.
Lindsay, A. E., OHare, D. The development of an electrochemical sensor for the
determination of cyanide in physiological solutions. Anal. Chim. Acta, 558 , 158-163,
2006 .
Mihaescu, I. M., Drochioiu, G. Cyanide reaction with ninhydrin: the effect of pH changes and
UV-Vis radiation upon the analytical results. Rev. Roum. Chim., 54(10) 841-845,
2009.
Moore, S. J., Norris, J. C., Ho, I. K., Hume, A. S. The efficacy of alpha-ketoglutaric acid in
the antagonism of cyanide intoxication. Toxicol. Appl. Pharmacol., 82, 40-44, 1986.
Musshoff, F., Kirschbaum, K. M., Madea, B.An uncommon case of a suicide with inhalation
of hydrogen cyanide. Forensic Sci. Intern., 204, E4-E7,
DOI: 10.1016/j.forsciint.2010.05.012, 2011.
Nagasawa, H. T., Goon, D.J., Crankshaw, D. L., Vince, R., Patterson, S. E. Novel, orally
effective cyanide antidotes. J. Med. Chem., 50, 6462-64624, 2007.
Xu, J., Tong, H., Yan, X. Y., Du, S., Yao, Z., Liu, S. Sensitive determination of cyanide in
cigarette smoke by capillary GC with a microECD. Chromatographia, 64, 609-612,
2006.





















164
Cap. IX. Droguri i alcaloizi

Coninutul cursului
9.1 Identificarea drogurilor i alcaloizilor
9.2 Identificarea cocainei
9.3 Heroina
9.4 Metadona
9.5 Determinarea papaverinei
9.6 Determinarea nicotinei


Drogurile au fost consumate de vraci, amani, iniiai pentru a intra n planurile superioare
ale existenei, dup cum au afirmat acetia. Acestea pot ns fi folosite de laici, care,
necunoscndu-le valoarea adevrat i abuznd utilizarea lor ajung la epuizarea corpului,
degradarea sa i chiar la moarte. O carte interesant despre toxicologia medico-legal a
drogurilor a fost scris de mai muli specialiti sub redacia Castiglioni, S., Zuccato, E.,
Fanelli, R n 2011. Aceasta cuprinde ntre altele, metabolismul i excreia drogurilor folosite
de oameni (Manuela Melis, Sara Castiglioni, i Ettore Zuccato). Dintre droguri este studiat
intens cocaina i metaboliii si (Alexander L.N. van Nuijs, Lieven Bervoets, Philippe G.
Jorens, Ronny Blust, Hugo Neels i Adrian Covaci). Pentru depistarea drogurilor autorii
recomand spectrometria de mas i spectrometria de mas cuplat cu lichid-cromatografia
(Flix Herndez, Juan V. Sancho, and Lubertus Bijlsma). Prezena drogurilor n apa de but
sau n particolele de praf este, de asemenea discutat.

9.1 Identificarea drogurilor i alcaloizilor
Dei n prezent sunt identificai uor prin separare prin diverse metode cromatografice i
msurarea maseorlor lor moleculare i a fragmentelor acestora n spectrometrele de mas,
identificarea alcaloizilor se face i cu reactivi generali care dau precipitate sau produi
colorai cu cantiti mici de alcaloid. In primul caz se utilizeaz baza de date existent n
memoria computerului ce deservete instrumentul. Reacia de identificare cu reactivi
generali se execut pe o soluie clorhidrat sau sulfat de alcaloid, astfel: reziduul rmas pe
sticla de ceas dup evaporarea eterului (cloroformului, dicloretanului etc.) alcalin este reluat
cu cteva picturi de acid clorhidric diluat sau acid sulfuric diluat i se evapor la sec pe baie
de ap. Reziduul, care reprezint alcaloidul salifiat, se solv n 3-4 picturi din reactivul
general. n prezena alcloizilor , poate aprea opalescen, un precipitat sau zone colorate.
Reaciile generale ale alcaloizilor trebuie s fie executate pe reziduuri de alcaloizi
lipsite de impuriti proteice, care interfer reacia, dnd i ele precipitate cu reactivi generali
ai alcaloizilor. Reactivii generali ai alcaloizilor se mpart n: A.- reactivi de precipitare i B.-
reactivi speciali de culoare.
Reactivii de precipitare formeaz patru grupe: 1. ioduri duble; 2. cloruri ale metalelor
grele i sruri duble; 3. heteropoliacizi; 4. pseudoacizi, acizi organici i ali compui
organici.

165
Ioduri duble. Reactivul Bourchardat (Wagner) este o soluie de iod- iodurat, KII
2
: 2
g de iod, 2 g iodur de potasiu se solv n ap distilat 100 ml. Reactivul Bourchardat d
precipitate colorate cu toi alcaloizii salifiai, cu excepia cafeinei. Precipitatele sunt solubile
n exces de iodur de potasiu i n alcool. Reactivul se pstreaz indefinit n sticle brune,
bine nchise.
Reactiv Drangendorff este iodobismutat de potasiu, K(BiI
4
)H
2
O: 5 g subnitrat de
bismut se dizolv n 40 ml ap distilat la care se adaug 10 ml acid clorhidric concentrat,
dup care se adaug 100 ml iodur de potasiu 40%. Reactivul este stabil numai n mediu acid
i precipit prin diluare cu ap, precipitatul redizolvndu-se prin acidulare. In timp
elibereaz iod, care se extrage prin agitare cu cloroform.
Reactivul Drangendorff d cu clorhidraii alcaloizilor precipitate amorfe, roii-
portocalii, parial solubile prin nclzire i care reprecipit la rece. Complecii formai sunt
solubili n cloroform, aceton, acetat de etil, ciclohexanon etc., soluiile putnd fi folosite la
determinri colorimetrice.
Reactivul Marm (iodocadmiat de potasiu K
2
(CdI
4
) : 5 g iodur de cadmiu se dizolv
ntr-o soluie cald de 10 g iodur de potasiu n 30 g ap, apoi se completeaz cu ap distilat
la 110 ml. Acest reactiv formeaz cu alcaloizii precipitate albe sau glbui, solubile n exces
de reactiv. Cafeina nu precipit, iar atropina nu precipit dect n soluii destul de
concentrate.
Reactivul Mayer (iodomercuriat de potasiu, K
2
HgI
4
): 13,52 g clorur mercuric, 48,8
g iodur de potasiu se dizolv n 1000 ml ap distilat. Reactivul Mayer d cu alcaloizii
precipitate albe pn la galben deschis, amorfe sau cristaline.
Reactivul Walzer (iodomercuriat de potasiu): la soluia de iodur de potasiu 10% se
adaug iodur de mercur solid, pn la saturare. Acest reactiv este mai sensibil dect
reactivul Mayer.
Cloruri ale metalelor grele i sruri duble. Clorura de aur (soluie apoas de diferite
concentraii: 5%, 10%, 30%, 40%) d precipitate de cloroaurai cu alcaloizii cu formula Au
Cl
3
HClAlc. de culoare galben sau alb. Clorur de platin (soluie apoas 5%) d
precipitate de cloroplatinat de alcaloizi, cu formula PtCl
4
2HClAlc. Clorura de mercur
(soluie apoas 5%) formeaz cloromercurai ai alcaloizilor, care sunt precipitate albe. Sarea
lui Reinecke [Cr(NH
3
)
2
(SCN)
4
NH
4
] H
2
O (4 g n 100 ml ap distilat) d precipitate cu
soluii clorhidrice de alcaloizi. Heteropoliacizii dau precipitate cu alcaloizii; datorit masei
lor moleculare mari se obin precipitate abundente, care pot fi folosite i pentru dozarea
gravimetric a alcaloizilor. Aceast metod este ns greoaie i nu se mai folosete. Se
prefer metodele instrumentale moderne.
Rectivul Scheibler (acid fosfotungstic): se dizolv 4 g wolframat de sodiu n 20 ml
ap, apoi se adaug 1 g acid fosforic 50% . Reactivul d precipitate albe cu alcaloizii.
Mai sunt i ali reactivi care au fost folosii n trecut, cu ar fi reactivul Schultze (acid
fosfoantimonic, 3 g corur de stibiu, 9 g fosfat acid de sodiu se dizolv n 100 ml ap
distilat) care formeaz precipitate albe cu alcaloizii nsau reactivul Sonnenschein (acid
fosfomolibdenic).

166
De asemenea, reactivul Hager (o soluie saturat de acid picric) formeaz precipitate
galbene cu alcaloizii, uor solubile la cald, care reprecipit la rece. Unele cristale au forme
caracteristice ce pot fi observate i la microscop. Ionescu Matiu a propus o varinat a acestui
reactic ce permite obinerea mai uoar a cristalelor caracteristice: la soluia saturat de acid
picric n alcool de 95 se adaug glicerin n proporie de 5%.

Reaciile alcaloizilor cu formare de precipitate (dup Banciu)

ALCALOIDUL REACTIV
HAGER
REACTIV
MAYER
REACTIV
DRAGENDORFF
REACTV
BOUCHARDAT
Aconitina precipit
numai n
soluie
concentat
precipitat alb
n soluii
diluate
precipitat galben
(1 : 40000(x)
precipitat brun
Atropina precipitat
galben numai
n soluii
concentrate
(1:7000) galben-rocat, trece
n galben intens
(1:01000)
brun-rocat
(1:3000)
Cafeina precipit
numai n
soluii
concentrate
nu precipit nu precipit precipitat brun
numai n soluii
concentrate
Chinina precipitat
amorf
(1:40000)
precipitat alb
(1:125000)
precipitat rou
(1:50000)
rou brun

Cocaina precipitat
galben
(1 : 1000)
(1 : 140000) - precipitat brun
(1 : 50000)
Codeina precipitat
galben
(1 : 225)
(1 : 50000) precipitat rou
(1:30000)
precipitat brun
(1:60000)
Colchicina precipit
numai n
soluii
concentrate
precipit
numai n
soluii
concentrate
(1:3000) precipitat brun
(1:25000)
Fizostigmina precipit
numai n
soluii
concentrate
precipitat alb
(1: 5000)
precipit precipitat brun
rocat
(1:25000)
Morfina nu precipit (1:2500) rou - galben
(1:5000)
brun - rocat
(1:25000)
Nicotina Precipitat
galben numai
n soluii
precipitat alb
(1:2500)
precipitat rou, trece
n alb-cenuiu (1 :
40000)
precipitat brun -
rocat
(1:50000)

167
concentrate
Papaverina precipitat
galben
(1 : 500)
precipitat alb
(1:15000)
Precipitat rou-
portocaliu
(1 : 10000)
precipitat rou-
nchis
(1 : 50000)
Pilocarpina precipit precipit precipit precipit
Stricnina precipitat
galben
(1 : 20000)
precipitat alb
(1:15000)
precipitat galben
intens
(1 : 25000)
Precipitat brun-
rocat
(1:50000)
Teobromina nu precipit nu precipit - precipitat brun
numai n soluii
concentrate
(x) = cifrele din parantez reprezint gradul de sensibilitate a reaciei.

Un alt reactiv (rectivul Knorr, acid picrolonic: 1-p-nitrofenil, 3-metil 4-nitro 5-
pirazolon 2% n alcool) d cu alcaloizii, precipitate galbene sau roii, care se descompun la
cald.






De asemenea, taninul formeaz precipitate de tanai de alcaloizi. Specificitatea
reactivului este redus, deoarece taninul d precipitate i cu ali produi (substane proteice).
Complexul tanin-alcaloid este descompus de oxidul de plumb.
Soluia apoas saturat de acid stifnic (2,4,6-trinitrorezorcin) formeaz precipitate cu
alcloizii.
B. Dup stabilirea prezenei alcaloizilor cu ajutorul reactivilor generali, se poate trece
la caracterizarea unui alcaloid sau a unei grupe de alcaloizi prin culoarea obinut la tratarea
cu reactivi speciali. Reaciile se realizeaz cu alcaloizii nesalifiai i sunt cu att mai nete, cu
ct reziduul este mai purificat; aceasta, deoarece cei mai muli reactivi speciali sunt preparai
cu acid sulfuric concentrat care carbonizeaz impuritile, astfel nct coloraia reactiv-
alcaloid este interferat sau chiar mascat. Reactivii speciali de culoare a alcaloizilor de
mpart n 3 grupe: acizi concentrai; amestec de acizi; amestec de acizi cu diferite sruri.
De pild, amestecul de acizi cu diferite sruri poate fi reactivul Frhde (acidul
sulfomolibdenic): 0,5 g, molibdat de amoniu 0,1 g(molibdat de sodiu) se dizolv n 10 ml
acid sulfuric concentrat. (Se prepar extemporaneu); reactivu Mandelin (sulfovanadat): 1g
vanadat de amoniu se dizolv n 200 ml de acid sulfuric concentrat; reactiv Lafon
(sulfoselenit): 1 g selenit de amoniu se dizolv n 20 ml acid sulfuric concentrat; reactivul
Marke (sulfoselenit): 1 g selenit de sodiu se dizolv n 20 ml acid sulfuric concentrat;
reactivul Marquis (sulfoformolat): 1 ml formol 40% se amestec cu 30 ml acid sulfuric
concentrat (se prepar extemporaneu); reactiv Wasicki (PABA n acid sulfuric concentrat): 2
C H
3
C
HN
C
C
NO
2
N
O
C
6
H
4
NO
2
OH
O
2
N NO
2
OH
NO
2

168
g p-dimetilaminobenzaldehida se dizolv n 6 ml acid sulfuric concentrat i 3 ml ap
distilat.

Reaciile alcaloizilor cu acizii concentrai cu formare de produse colorate

REACTIVI DE CULOARE
ALCALOID H
2
SO
4
HNO
3
Reactiv Erdmann
Atropina - - -
Brucina - rou- trece n galben -
Chinina fr culoare trece
n
glbui i la cald n
brun
- -
Cocaina - - -
Codeina La cald albastru-
violet
galben-verzui la cald albastru
Colcichicina galben violet,trece n brun rocat: cu NaOH
trece n portocaliu
albastru,cu KOH
trece n rou
Heroina - galben, la cald trece n rou galben, verde pal,
albastru
Dionina - galben verzui orange
Morfina la cald purpuriu rou orange trece n galben
rocat
rou trece n
brun nchis
Nicotina - - n timp galben apoi
rou
Papaverina la cald violet-
albastru
glbui, trece n rou -
ntunecat
albastru-verzui
Pilocarpin - Galben -
Stricnin Fr culoare,cu
KOH
trece n galben
La cald trece n galben -
Picrotoxin Galben pal - -

Reaciile obinute de alcaloizi cu acidul sulfuric concentrat, acidul azotic concentrat i
reactiv Erdman, precum i reaciile de culoare cu aceti reactivi sunt redate n tabelele
prezentate.









169
Reacii de culoare ale alcaloizilor cu reactivi speciali

REACTIVI DE CULOARE
Alcaloid R.Frhde R.Mandelin R.Marquis R.Lafon R.Wasiky
Atropina -
Rou,trece in
galben
Maroniu,la
cald verde
-
Rou
cireiu,
violet
Brucina
Rou-brun-
galben
Rou -
Galben,
rou
-
Chinina - - -
La cald brun
(strlucitor)

-
Cocaina - - -
n timp, rou, la
cald
portocaliu

-
Codeina
Galben
murdar,
la cald
albastru
Verzui, trece
n albastru
Rou -carmin
trece n
albastru-
violaceu
Verde
smarald
Rou

Colchicina
Galben
trece n
galben
verzui
Albastru-
verzui
trece n brun
Galben citrin
Galben itrin, la
cald galben-
brun

-
Heroina Purpuriu Verde
Violet
rocat,la
cald trece n
albastru-
violaceu
Verde

-
Dionina
Verde, trece
n
albastru
Galben trece
lacald n verde
Albastru,violet
murdar
Verde -
Morfina
Violet,trece
n
verde apoi
n
galben-
brun
Rocat, trece n
albastru-
violaceu
Rou-
carmin,trece
n violet-
albastru
Albastru,
verzui, la cald
trece n brun
Rou
Nicotina
n timp alb-
roscat
- - Galben -

Papaverina
Verde,
albastru,
la cald rou
viiniu
Verde,
albstrui,
albastru
Rou trece n
orange
Verzui,
albastru,
la cald violet

-

Pilocarpina
-
Galben,verde,
albastru
n timp glbui,
apoi rou
- -
Stricnina - Violet,albastru n timp,la cald - -

170

9.2 Determinarea cocainei
Cocaina (benzoilmetilecgonine) este un alcaloid derivat de la tropan este obinut din frunzele
plantei coca. Este un stimulent al sistemului nervos central, un inhibitor al apetitului i un
anestezic local. Este un inhibitor al reabsorbiei serotoninei, noradrenalinei i dopaminei,
care mediaz funcionalitatea acestor neurotransmitori fiind un ligand exogen al
catecolaminei. Cocaina produce dependen


N H
3
C
C O
O
CH
3
O C C
6
H
5
O


Calea de administrare. Unii utilizatori freac praful de-a lungul liniei gingivale sau pe
un filtru de igar, care este apoi fumat i care amorete gingiile i dinii (fumuri de cacao).
O alt metod este depunerea pe o hrtie, rulare i nghiire (paraut sau bomba de zpad).
Frunzele de coca sunt de obicei amestecate cu o substan alcalin (cum ar fi varul) i
introduse ntr-un tampon, care este reinut n gur ntre gingie i obraz. Sucurile sunt
absorbite lent de mucoasa din interiorul obrazului i prin tractul gastro-intestinal atunci cnd
este nghiit.
Insuflarea pe nas este metoda cea mai comun de ingestie a pudrei de cocain n
lumea occidental. Totui, injectarea drogului ofer cele mai nalte concentraii n snge i n
cel mai scurt timp.
Mecanismul de aciune al cocainei. Farmacodinamia se refer la aciunea toxicului
asupra organelor i celulelor corpului. Aciunea cocainei implic relaia sa cu
neurotransmitori (este inhibat absorbia monoaminelor serotonin, dopamin,
noradrenalina). Se blochez proteina transportator de dopamina. Cocaina se leag strns de
transportatorul de dopamina cu formarea unui complex care blocheaza funcia
transportatorului i, astfel, dopamina se acumuleaz n fanta sinaptic. Expunerea prelungita
la cocain poate contribui la tulburri depresive
Cocaina este metabolizat, n principal n ficat, iar aproximativ 1% este excretat sub
form nemodificat n urin. Metabolismul este dominat de hidroliza esteric, astfel nct
metaboliii eliminai sunt benzoilecgonin, principalul metabolit, i ali metabolii n cantitati
mai mici, cum ar fi ester metilic al ecgoninei i ecgonina. Metabolii de importan minor
sunt norcocaina, p-hidroxicocaina, m-hidroxicocaina, p-hidroxibenzoilecgonina i m-
hidroxibenzoilecgonina.
trece n rou brun-verzui

Picrotoxina
-
Galben-
violaceu
- - Rou-violet

171
Identificare. Cocaina i metaboliii si pot fi determinai n snge, plasm sau urin
pentru a monitoriza abuzul sau confirma un diagnostic de otrvire cu moarte subit sau trafic
ori alt nclcare a legii. Cele mai multe imunodo-teste de screening din comer pentru
cocain reacioneaz cu metaboliii principali ai cocainei, ns tehnicile cromatografice pot
distinge clar i msura separat fiecare dintre aceste substane. Atunci cnd se interpreteaz
rezultatele unui test, este bine s se ia n considerare antecedentele utilizrii cocainei de ctre
individul, deoarece la un utilizator cronic se poate dezvolta toleran la doze care ar fi toxice
pentru un neconsumator. Concentraia metaboliilor n corpul su este ridicat.
Izolare din organe. Se extrage din soluie apoase alcaline, cu evitarea hidrolizei.
Macerarea se realizeaz la rece; operaia de extragere se execut se conduce rapid, se
execut la temperatura laboratorului sau la un curent de aer; din hidroliz rezult metanol,
care se poate identifica.
Izolare din vom, coninut stomacal, lichide biologice: se extrage cu eter (cloroform)
din produsul alcalinizat la pH = 8 cu bicarbonat.
Izolare de pe mucoasa nazal (la cocainomani): se prelev mucozitile cu ajutorul
unui tampon de vat, care apoi este extras cu eter (cloroform).
Identificare. Cocaina d precipitate cu reactivi generali de precipitare ai alcaloizilor.
Reziduul tratat cu 2-3 picturi reactiv Hager formeaz un precipitat galben (sensibilitatea 1:
1000). Reziduul tratat cu 2-3 picturi reactiv Bouchardat formeaz un precipitat brun (1 :
50000). Reziduul tratat cu 2-3 picturi reactiv Mayer formeaz un precipitat alb-glbui. Dac
este dizolvat n 1-2 picturi de acid sulfuric 10% i tratat cu 2 ml soluie permanganat de
potasiu 3,5% apare un precipitat violet, care, la microscop, se prezint sub form de cristale
rectangulare, unele ntreptrunse.
Reziduul se poate dizolva n puin ap acidulat, se adaug cteva picturi
bicarbonat de potasiu 55 i 2-3 picturi acid clorhidric 10%. n prezena cocainei se obine
un precipitat galben.
Reacia Pesez (variant a reaciei Vitali): reziduul se trateaz cu 2-3 picturi de acid
azotic concentrat i 10-15 picturi acid sulfuric concentrat. Se solubilizeaz cu ajutorul unei
baghete i se nclzete 10-15 minute pe baia de ap. Se rcete i se adaug 1 ml de ap,
cnd apare culoare galben strlucitoare. Se transvazeaz ntr-o eprubet i se adaug 1 ml
aceton. Se rcete i se agit puternic cu 5 ml hidroxid de sodiu 50%. Faza apoas rmne
galben, iar la zona de contact cu acetona apare un inel albastru-violaceu, care prin agitare,
care prin agitare, difuzeaz n toat masa acetonic. Culoarea albastr trece n violet, i n
final n rou nchis.
Reacia Ferreira de Silva: se nitreaz reziduul cu cteva picturi de acid azotic
concentrat i se evapor la sec. Reziduul cald este tratat cu cteva picturi de potasiu 10% n
alcool. se dezvolt un miros de benzoat de etil, sau dac alcaloidul este n cantitate mare, o
coloraie roie purpurie.
Reacia Guerbert: reziduul se trateaz cu 0,5 ml acid sulfuric concentrat i cteva
cristale de iodat de potasiu. Se nclzete pe baia de ap pn ncep s se formeze vapori albi
de trioxid de sulf. n acest moment apare o culoare brun, care vireaz treptat n verde oliv,
albastru- violet.

172
Reziduul tratat cu acid sulfuric concentrat i nclzit pe B.M. i diluat cu 2 ml ap d
un miros de benzoat de etil.
Cromatografie pe strat subire:
a. Faza staionar: plci silicagel G Merck, activitate la 110, o or.
b. Faza mobil: cloroform: metanol (9 : 1), amoniac concentrat : metanol (1,5 : 100)
c. Proba de analizat: extract cloroformic bazic.
d. Martor: cocain n cloroform.
e. Revelare: plcile se usuc n atmosfer i se stropesc cu reactiv iodoplatinat acidulat (Rf =
0,60).
Test fiziologic. Cocaina aplicat pe vrful limbii determin anestezie. Instilat n
ochiul de pisic sau iepure, provoac midreaz (cellalt ochi servete drept martor).

9.3 Heroina
Heroina sau diacetilmorfina este un drog opioid sintetizat din morfin, care este un derivat al
opiului din mac. Este convertit metabolic la morfin n corp. Forma cristalin, alb,
considerat heroin pur este clorhidratul diacetilmorfinei. Aproximativ 87% din producia
mondial de opium i derivai ai acestuia, inclusiv heroin , pare a fi produs n Afganistan.
Exist 50 milioane de consumatori regulai de heroin, cocain i droguri sintetice.
Heroina este prescris ca analgezic puternic n UK i se administreaz subcutanat,
intramuscular sau intravenoas. Utilizarea sa include tratamentul durerii acute, cum ar fi n
traume fizice severe, infarct miocardic, durere post-chirurgical i dureri cronice, inclusiv n
stadiu terminal al cancerului.
Heroina este folosit ca drog de agrement pentru relaxare i euforia intens produs.
Totui, tolerana se dezvolt rapid, iar utilizatorii au nevoie de mai mult drog pentru a obine
aceleai efecte.


Utilizarea intravenoas a heroinei cu seringi nesterile sau alte echipamente aferente
pot conduce la contractarea unor ageni patogeni, cum ar fi HIV i hepatit. De asemenea,
exist riscul de a contracta endocardit bacterian sau fungic i scleroz venoas, abcese, etc.
Dependena fizica poate rezulta din utilizarea prelungit a tuturor opioidelor, care
conduce la sevraj. Scderea funciei renale poate fi asociat cu unele infecii ale subiecilor.
Principalii metabolii ai heroinei, 6-MAM, morfina, morfin-3-glucuronidul i morfin-
6-glucuronidul pot fi determinai n snge, plasm sau urin pentru a monitoriza abuzul,

173
confirma un diagnostic de otrvire sau investiga o moarte suspect. Ca i n cazul cocainei
sunt eficiente tehnicile imunologice de screening. Totui, tehnicile cromatografice pot
distinge i determina fiecare din aceste substane.
Heroina produce dependen i constipaie. Cu toate acestea, este considerat a fi unul
din drogurile cele mai nocive mai ales dac sunt consumate intravenos.
Izolare. Heroina se izoleaz din produii de analizat prin extracie cu cloroform din
mediu alcalin.
Identificare. Reziduul obinut prin evaporarea extractului cloroformic se trateaz ci 1-
2 picturi clorur mercuric 5% cnd apare un precipitat sub form de dendrite. De
asemenea, reziduul reluat cu 2-3 picturi reactiv Marcquis de dezvolt o coloraie viinie.
Acesta, reluat cu 2-3 picturi reactiv Mandelin dezvolt o coloraie albastr-cenuie, iar cu
reactivul Vitali se obine o coloraie verde - mslinie.
Soluia apoas de heroin se nclzete cu clorhidrat de hidroxilamin n mediu
alcalin cnd se formeaz acid hidroxamic. Dup neutralizare, se trateaz cu clorur feric 1%
cnd apare roz violacee, colorimetrabil (reacia Waxmuth).
Intoxicaia cu preparat din opiu se difereniaz de acea cu morfin, prin identificarea
acidului meconic, prezent n opiu n concentraie de 5-10%. Acidul meconic se extrage prin
metoda Stas n mediu acid, cu eter. Pentru purificare, reziduul de la evaporarea eterului acid
se reia cu ap i se epuizeaz de cteva ori cu benzen n care acidul meconic este insolubil.
Se separ prin centrifugare cele dou faze. Reziduul fazei apoase este reluat cu eter care
extrage acidul meconic. Soluia eteric tratat cu cteva picturi de clorur feric 1% d o
coloraie roie. Culoarea este stabil n timp i n prezena acidului clorhidric cea ce
difereniaz acidul maconic de sulfocianuri i acetai.

9.4 Metadona
Metadona este folosit n tratamentul dependenei de opiacee. Este un analgezic care a fost
produs n Germania in 1937. Dei seamn din punct de vedere chimic cu morfina sau
heroina, metadonaacioneaz asupra acelorai receptori opioizi ca i aceste medicamente i
are efecte similare. Metadona este, de asemenea, utilizat n calmarea durerii cronice severe,
avnd o lung actiune, efecte extrem de puternice i costuri foarte sczute.

CH
3
CH
2
C
O
C
C
6
H
5
CH
2
C
6
H
5
CH
CH
3
NCH
3
2


Doze mai mari de metadon pot bloca efectele euforice date de heroin, morfin i
alte droguri similare.

174
Reacia de precipitare. Reactivul Hager reziduul se reia cu 2-3 picturi reactiv
Hager cnd se formeaz un precipitat galben; se adaug 5 ml eter i se agit, precipitatul se
dizolv (deosebire de petidin). Reziduul reluat cu clorur mercuric 5% formeaz un
precipitat alb sub form de rozet (sensibilitate 1 : 3000).
Reacii de culoare. Reziduul reluat cu 2-3 picturi reactiv Mandelin dezvolt o
coloraie verde care trece n albastru.

9.5 Determinarea papaverinei
Papaverina este un medicament alcaloidic din opiu cu aciune antispasmic, utilizat n
principal n tratamentul spasmului visceral (n special cel care implic inima i creierul) i,
ocazional, n tratamentul disfunciei erectile. Dei este gsit n opiul din mac, papaverina
difer att prin structur, ct i prin aciune farmacologic de analgezicele opioide (morfin).

Mecanismul de actiune presupune o inhibare a enzimei fosfodiesteraza cauzeaz
cresterea nivelului AMP ciclic este semnificativ. Se poate modifica, de asemenea respiraiei
mitocondriale.
S-a demonstrat c papaverina este un inhibitor selectiv fosfodiesterazei pentru subtipul
PDE10A ce se gsete n principal n striatum din creier. Cnd se administreaz cronic la
soareci, ea produce deficite motorii i cognitive i anxietate crescut, [13] [14], chiar dac nu
toate studiile susin acest punct de vedere.
Izolare. Papavelina, narcotina i narceina se izoleaz din soluia apoas alcalin sau
acid cu cloroform. Identificarea se realizeaz prin reacii de precipitare (papaverina,
noscapina i narcina dau precipitate cu reactivii generali de precipitare ai alcloizilor pe o
soluie de clorhidrat sau sulfat de alcaloid). Astfel, reziduul rmas pe sticla de ceas dup
evaporarea solventului este reluat cu cteva picturi de acid clorhidric sau sulfuric 10% i se
evapor la sec pe baia de ap. Reziduul care reprezint alcloidul salifiat este tratat cu
reactivii generali de precipitare ai alcaloizilor. Reziduul tratat cu 1-2 picturi reactiv Hager
d un precipitat galben (sensibilitatea 1 : 500). Dac este tratat cu 1-2 picturi reactiv
Bouchardat se obine un precipitat rou nchis. Reziduul tratat cu 1-2 picturi reactiv Mayer
formeaz un precipitat alb. Reziduul tratat cu 1-2 picturi reactiv Drangendorff d un
precipitat rou portocaliu. Reziduul tratat cu 1-2 picturi reactiv Marm d un precipitat alb,
sub form de rouet. Dac ns este reluat cu clorur de zinc 5% formeaz un precipitat sub
form de buchet.
Reziduul tratat cu 2-3 picturi reactiv Erdmann d o coloraie albastr-verde, care
trece n rou nchis. Prin reacie cu 2-3 picturi acid sulfuric concentrat prezint la nclzire o

175
coloraie violet (deosebire de morfin). Reziduul tratat cu 2-3 picturi reactiv Frhde d o
coloraie verde ce trece n albastr, iar la nclzire n roie viinie.
Reziduul de papaverin dizolvat la cald n anhidrid acetic i tratat cu cteva picturi
de acid sulfuric concentrat formeaz o culoraie verde-galben, fluorescent n ultraviolet.

9.6 Determinarea nicotinei

N
N
CH
3


Izolare. Nicotina se izoleaz prin metoda Stas-Otto-Ogier sau prin antrenare cu
vapori de ap. Urina alcalinizat la pH 11-12 cu hidroxid de sodiu 10% este supus
antrenrii cu vapori. Se culege distilatul n puin acid clorhidric 0,1 N. n aceste condiii nu
sunt antrenai compuii cu structur similar prezeni n mod normal n organism (amida
acidului nicotinic).
Urina alcalinizat la pH 11-12 cu hidroxid de sodiu 10% se extrage cu 10 ml
cloroform de 2-3 ori. Extractele cloroformice reunite se trateaz cu 1-2 picturi acid
clorhidric 0,1 N i se evapor la 40-50C pe baie de ap.
Izolare din tutun: se macereaz tutunul ntr-o soluie alcalin timp de 30 minute. Se
filtreaz i se extrage cu cloroform. Se repet extragerea de 2-3 ori. Extractele cloroformice
reunite sunt evaporate. Se reia reziduul cu acid acetic 1% sau cu o soluie foarte diluat de
etanol.
Identificare. Nicotina d precipitate cu reactivii generali de precipitare ai alcaloizilor.
Reziduul tratat cu 2-3 picturi din reactivii Bouchardat i Dragendorff formeaz un precipitat
brun-rocat, rou, iar, cu reactivul Sonnenschein un precipitat galben-portocaliu. n soluii
mai concentrate se obine cu reactivul Hager, picrat de nicotin, precipitat galben sub form
de cristale cu p.t. 217C.
Reacii de culoare:
a. Reacia Knig: se neutralizeaz cu 5 ml soluie de analizat cu acid acetic 10% sau
acid clorhidric 10%. Se adaug 1 ml soluie bromcian, proaspt preparat i se menine 2
minute pe baia de ap la 80 C. Se adaug 3 ml soluie acetat de benzidin 1% i 2 ml HCl
20%. Apare o coloraie galben - portocalie, colorimetrabil. Sensibilitatea reaciei este de
cteva micrograme. Bromcianul se prepar adugnd peste apa saturat cu brom, o soluie de
cianur de potasiu 10% pn la decolorare. Pentru a elimina riscul legat de manipularea
cianurii de potasiu, se poate utiliza , n loc de bromcian, bromtiocian, preparat din tiocianat
de potasiu, n loc de cianur de potasiu.
b. Reacia cu p-dimetilaminobenzaldehid; se trateaz soluia de nicotin cu 1-2 ml
soluie de p-dimetilaminobenzaldehid 10% n acid clorhidric concentrat, cnd apare o
coloraie violet.

176
Reacii microcristalografice
a. Reacia Roussin: se trateaz reziduul dizolvat n eter cu o soluie eteric de iod 2-3
%. Se prepar un lichid uleios rou-brun, din care, dup cteva ore, apar cristale aciculare
roii rubinii, transparente, de iod-nicotin. Hiosciamina, d, n aceleai condiii, cristale
brun nchis.
b. Reacia Dragendorff: peste o pictur de alcaloid baz se adaug o pictur de
reactiv Dragendorff , cnd se formeaz cristalele roii nchis pn la negru, cu aspect de:
"psri n zbor" vizibile la microscop. Sensibilitatea reaciei este de 1 g.
Cromatografie n strat subire:
Se execut ca la cocain. Rf. = 0, 57
Test fiziologic: Prin injectarea clorhidratului de nicotin n sacul limfatic al broatei,
se obine "poziia nicotinic" specific, variind n raport cu doza administrat.







Cap. X. Problema alcoolilor

Metaboliii alcoolilor au grade diferite de toxicitate, iar viteza mic de metabolizare
asociat cu o eliminare lent sporete toxicitatea n cazul metaboliilor toxici.
Diferenele dintre gradele de toxicitate ale alcoolilor sunt nete: etilenglicolul este un
toxic puternic, n timp ce glicerina este absorbit n doze nalte fr efecte nocive; metanolul
este o otrav puternic, n timp ce etanolul este utilizat curent pentru a obine o stare euforic.
Structura chimic poate explica numai parial aceast comportare. Metaboliii pot explica n
mare msur toxicitatea alcoolilor. Mai greu se explic efectul lor direct asupra organismului,
efectul euforic al etanolului, de pild, imediat dup introducerea n corp.

Alcoolul metilic, CH
3
OH
Metanolul este un lichid volatil, inflamabil, cu miros i gust asemntor etanolului, dar
mai puternic i mai iritant. Este miscibil cu apa i majoritatea solvenilor organici.
Toxicocinetic. Metanolul ptrunde pe cale digestiv, respiratorie i, mai rar,
transcutanat. Se distribuie, datorit hidrosolubilitii, n toate esuturile i, n special, n
lichidele oculare care conin 99,7% ap. n ficat, sub aciunea alcooldehidrogenazei (ADH) i
mai puin a catalazei, se oxideaz la formaldehid, iar aceasta trece n acid formic, ambii
metabolii hidrosolubili; apar i mici cantiti de formiat de metil, liposolubil. Toi metaboliii
sunt mai toxici dect metanolul. O oxidare la formaldehid are loc i n retin (n conuri i
bastonae) unde este prezent ADH. Eliminarea are loc prin expiraie (metanol) i prin urin
(metabolii i mici cantiti de metanol).

177
Eliminarea metanolului din organism se produce n proporie de 25-75% sub form
nemodificat n aerul expirat, 3-10% n urin ca atare. Din total, 3% se regsete n urin sub
form de acid formic.
Metabolizarea i eliminarea sunt lente, astfel nct metanolul se comport ca un toxic
cumulativ. Alcoolul etilic este utilizat drept antidot n intoxicaia cu alcool metilic i etilen
glicol. Rolul de antidot al alcoolului etilic n intoxicaia cu metanol se explic prin competiia
pentru alcool dehidrogenaz: etanolul se metabolizeaz de 4-5 ori mai rapid, nct metanolul
rmne nemetabolizat, i devine astfel mai puin toxic. Metanolul se comport ca un toxic
cumulativ cu eliminare foarte lent, ceea ce l difereniaz de etanol. De asemenea, etanolul,
avnd o tensiune superficial mai mare, deplaseaz metanolul de pe suprafaa celulelor,
favorizndu-i eliminarea.
Toxicodinamie. Toxicitatea metanolului se datoreaz metaboliilor si care produc
acidoz, anoxie celular i dereglri metabolice. Acidoza este provocat mai ales de acidul
formic. Anoxia tisular este consecina inhibrii respiraiei celulare prin complexarea, de ctre
acidul formic, a fierului din enzimele oxido-reductoare. Retina este de asemenea afectat,
deoarece este sensibil la anoxie, iar ptrunderea metanolului la acest nivel i metabolizarea
local conduce la metabolii toxici n concentraie mare. Totodat, ptrunderea formiatului de
metil liposolubil afecteaz i nervul optic. Ca urmare, apar leziuni degenerative n celulele
ganglionare ale retinei i n nervul optic, precum i tulburri circulatorii n coroide. Se mai
nregistreaz tulburri nervoase, hepatice, renale, pulmonare i miocardice, multe dintre
acestea datorndu-se hipoxiei. Totodat, sunt dereglate unele procese biochimice datorit
blocrii gruprilor NH
2
enzimatice de ctre HCHO. Doza letal este de 30 ml alcool metilic.
Simptomatologie. n intoxicaia acut prin ingerare apar, dup o perioad de laten,
tulburri digestive, respiratorii, neuropsihice (agitaie, delir, convulsii), cardiovasculare, apoi
com i moarte. Dac victima supravieuiete, se instaleaz tulburrile oculare (midriaz,
fotofobie, scderea acuitii vizuale, dureri n globii oculari), urmate brusc sau treptat de
orbire temporar sau definitiv. Tulburrile oculare apar ca urmare a acidozei, deoarece se
accentueaz odat cu aceasta. Intoxicaia acut prin inhalare se manifest prin iritaia
conjunctivelor i mucoaselor respiratorii, tulburri nervoase i oculare (orbirea definitiv este
mai puin frecvent). In aer, cocentraia maxim admisibil este de 150 mg/m
3
. n intoxicaia
cronic apar fenomene iritative, nervoase (cefalee, tremor), digestive, vizuale (reducerea
cmpului vizual).
Primul ajutor. n intoxicaia prin ingerare se practic spltur gastric cu soluie de
NaHCO
3
5%, purgativ salin i tratament antidotic cu etanol, iniial 50 g, apoi cte 10 g pe or.
n intoxicaia prin inhalare se recurge la oxigenoterapie i/sau respiraie artificial.
Toxicologie analitic. Metanolul se cerceteaz din aer (recoltare n ap distilat) i
medii biologice, corpuri delicte (distilare n mediu acid). Identificarea se realizeaz prin
reducerea K
2
Cr
2
O
7
n H
2
SO
4
concentrat (Cr
3+
, verde) sau prin oxidarea CH
3
OH la HCHO i
determinarea acesteia cu fenilhidrazin sau acid cromotropic n mediu de acid sulfuric. Se mai
utilizeaz tuburi detectoare Drger cu indicativul 100/a.



178
Etanolul, CH
3
CH
2
OH
Toxicocinetic. Etanolul este imediat absorbit i distribuit n toate esuturile, fr
acumulare. Se elimin prin expiraie (3-7%) i urin (2-4%), restul este metabolizat n ficat,
succesiv la acetaldehid, acid acetic i bioxid de carbon. Oxidarea la acetaldehid se
realizeaz, la cantiti mici de alcool, sub aciunea alcooldehidrogenazei (ADH); la cantiti
mai mari de etanol, intervin sistemul microzomial de oxidare (MEOS i oxidaze cu funcii
mixte microzomiale) i catalaza (CAT sau peroxidaze). Datorit coninutului constant de
ADH din ficat, oxidarea etanolului are loc cu o vitez aproape constant de 8 g etanol/or.










Toxicodinamie. Etanolul are un efect deprimant asupra SNC. Aceast aciune ncepe
cu scoara cerebral i se continu pn la bulb. Inhibarea centrilor superiori, cu funcii de
coordonare i control, antreneaz i relaxarea centrilor inferiori, fapt ce explic efectul aparent
stimulator al buturilor alcoolice.
Etanolul acioneaz toxic prin molecula netransformat, prin acetaldehid i prin
creterea raportului NADH/NAD
+
.









Acetaldehida este n majoritate transformat n acetat. Cantiti infime reacioneaz cu
catecolaminele i cataboliii lor formnd compui tetrahidropapaverolinici cu gruprile SH
din glutationul redus i coenzima A, sczndu-le activitatea, i cu NH
2
din proteine i
enzime, degradndu-le structural i funcional.
Oxidarea etanolului i a acetaldehidei sub aciunea ADH, respectiv ALDH, necesit
prezena NAD
+
, care trece n NADH. n cazul metabolizrii unor mici cantiti de alcool
etilic, reoxidarea NADH n citoplasm are loc pe seama compuilor n form oxidat, acidul
piruvic i fosfodihidroxiacetona. Deoarece aceti compui sunt n cantiti limitate, reoxidarea
NADH n prezena unor mai mari cantiti de alcool nu se mai face total n citoplasm, ci se
CH
3
-CH
2
OH
ADH
CH
3
-CHO CH
3
-COO
Sinteze
Biotransformarea etanolului
NAD
+
NADH
ALDH
NAD
+
NADH
CoA-SH
ATP AMP + P
CH
3
-CO~SCoA
TCA
ADH = alcooldehidrogenaza; ALDH = aldehiddehidrogenaza; CoA-SH = coenzima A; NAD
+
NADH = nicotin- ,
adenindinucleotid oxidat si redus; AMP = adenozinmonofosfat; ATP = adenozintrifosfat; P = fosfat anorganic;
TCA = ciclul acizilor tricarboxilici (ciclul Krebs)
amid
CH
3
-CH
2
OH
ADH (citosol)
CH
3
-CHO
Oxidarea etanolului la acetaldehid
NAD
+
NADH
NADP
+
NADPH
+
+
+
+
+ + H
+
CH
3
-CH
2
OH
CH
3
-CH
2
OH H
2
O
2
CAT (mitocondrie)
CH
3
-CHO 2 H
2
O
O
2
H
+
+
+
MEOS
(microzomial)
CH
3
-CHO + + 2 H
2
O

179
completeaz i n mitocondrii. Membrana mitocondrial este ns impermeabil pentru
NADH i, de aceea, celula utilizeaz sistemul malat-aspartat care realizeaz transferul H
+
de
la NADH citoplasmatic la NAD
+
intramitocondrial. Reaciile nlnuite prezentate n aceast
figur asigur oxidarea etanolului fr acumulare de NADH numai att timp ct nu este
depit capacitatea de oxidare a lanului respirator. Pentru cantiti mai mari de etanol ns,
NADH se acumuleaz n citoplasm i mitocondrii, cu creterea valorii raportului
NADH/NAD
+
. Aceast cretere conduce la perturbarea ciclului Krebs, a metabolismului
glucidic i lipidic, constituind toxicitatea biochimic determinat de consumul excesiv de
alcool, avnd drept consecin acumularea de acetat (care nu mai poate fi oxidat n ciclul
Krebs), hiperlactacidemie i hipoglicemie (prin perturbarea glicolizei i neoglicogenezei,
acumularea lipidelor n hepatocit (cu apariia steatozei).















Deoarece alcool dehidrogenaza (ADH) catalizeaz transformarea retinolului n retinal,
blocarea sa n procesul de oxidare a etanolului conduce la un deficit de retinal. Retinalul este
ns indispensabil procesului vederii i spermatogenezei, ceea ce explic amauroza etilic i
perturbarea spermatogenezei din intoxicaia etilic. Doza letal este de 4-6 g etanol pur/kg
corp.
Simptomatologie. n intoxicaia acut se remarc trei faze: faza de excitaie la o
alcoolemie de 0,5-1,5 g
o
/
oo
cu euforie, logoree, expansivitate, senzaie de cldur
(vasodilataie periferic), diminuarea capacitilor fizice i psihice; faza medico-legal (faza
de beie, alcoolemie 1,5-2,5
o
/
oo
), cu mers ebrios, disartrie, confuzie mintal, scderea
acuitii auditive i vizuale, tulburri psihice ducnd la acte agresive; faza comatoas (peste
2,5
o
/
oo
) cu midriaz, hipotermie (prin vasodilataie generalizat), com, uneori cu sfrit letal.
Alcoolemii peste 4 g
o
/
oo
(300-400 ml alcool pur) conduc rapid la com i moarte.
n intoxicaia cronic se observ manifestri neuropsihice (polinevrit, nevrit optic
retrobulbar, tulburri de comportament, insomnie, delirium tremens) i manifestri organo-
somatice (gastrite, ulcere, hepatit subacut pn la ciroz, tulburri cardiovasculare,
CH
3
-CH
2
OH
CH
3
-CHO
Oxidarea NADH la NAD
+
prin intermediul sistemului malat-aspartat
NAD
+
NADH
NAD
+
NADH
H
2
O
O
2
Malat Malat
Oxalo-
acetat
Oxalo-
acetat
MDH
MDH
Glutamat
Alfa-ceto-
glutarat
Aspartat
Glutamat
Alfa-ceto-
glutarat
Aspartat
TGO TGO
CITOPLASM MITOCONDRIE
(dup Nordmann)

180
endocrine, etc.). Alcoolismul reprezint o toxicomanie, denumit incapacitate legat de
alcool.
Primul ajutor. n primele dou ore de la ingerare, se recurge la spltur gastric cu
soluie de NaHCO
3
5%. Intoxicaii comatoi sunt spitalizai.
Toxicologie analitic. Etanolul se cerceteaz din aer, medii biologice i corpuri delicte
(distilare n mediu acid). Identificarea se realizeaz prin reacia xantogenatului sau reducerea
K
2
Cr
2
O
7
, iar dozarea, enzimatic (cu ADH, gaz-cromatografic, colorimetric sau volumetric
(prin dozarea excesului de K
2
Cr
2
O
7
rmas dup oxidarea etanolului n mediu acid).

Etilenglicolul, HO-CH
2
-CH
2
-OH
Lichid incolor, vscos, cu gust dulceag. Este relativ i miscibil cu apa, alcoolul etilic,
acetona, acidul acetic, glicerina i piridina. Este insolubil n eter etilic, CS
2
, hidrocarburi
halogenate, uleiuri i hidrocarburi aromatice. Este utilizat ca solvent i lichid antigel.
Concentraia maxim admisibil este de 274 mg/m
3
aer.
Toxicocinetic. Ptrunderea etilenglicolului n organism se face pe cale digestiv i
numai accidental respiratorie. Se distribuie n toate esuturile. Se elimin 40 % nemodificat pe
cale renal, iar 60% se biotransform oxidativ, iniial la aldehid glicolic sub aciunea
alcooldehidrogenazei (ADH) cu vitez mic (ceea ce explic efectul antidotic al etanolului, ca
i la metanol) apoi parial la acid oxalic, trecnd prin acid glioxilic.










Acidul oxalic formeaz cu calciul oxalat de calciu care obtureaz tubii renali i
afecteaz miocardul i alte organe.
Toxicodinamie. Toxicitatea etilenglicolului se datoreaz metaboliilor si, care sunt
mai toxici, i anume acidul glioxilic i acidul oxalic. Etilenglicolul conduce la edem cerebral.
Doza letal la adult este 100 g.
Leziunea principal este necroza tubular acut, iar pe plan metabolic, acidoza
metabolic. Intoxicaia acut determinat de ingerarea etilenglicolului debuteaz prin tulburri
digestive, apoi neuropsihice (de la euforie pn la com convulsiv), acidoz, manifestri
cardiovasculare (tulburri de ritm, insuficien acut cardiovascular) i insuficien renal
acut, adesea fatal.
Analiza toxicologic:
folosind metode gaz-cromatografice, spectrofotometrie n UV i vizibil;
HOCH
2
-CH
2
OH
ADH
HOCH
2
-CHO
HOCH
2
-COOH
CO
2
HOOC-COOH
HCOOH
OHC-COOH OHC-CHO
Etilenglicol Aldehid glicolic
Acid glicolic
Aldehid glioxilic Acid glioxilic
Acid formic
Acid oxalic
(Calea major)
(Calea minor)
Biotransformarea etilenglicolului

181
prin oxidare cu acid periodic la formaldehid i determinarea acesteia cu
fenilhidrazin sau acid cromotropic.

Determinarea cantitativ a alcoolilor
Izolare. Alcooli se izoleaz di aer prin reinere n soluii adecvate din aer, iar din
produse biologice i alte produse prin distilare, antrenare cu aer cald sau microdifuzie n
celule Conway sau celule Menzicescu.
Alcoolul metilic. Reacia Kolthoff Denigs: la 2 ml soluie de analizat se adaug 1
ml acid fosforic 25% i 0,5 ml KMnO
4
2%. Dup 10 minute se distruge excesul de KMnO
4

cu perhidrol 12% (v/v) sau sulfit de sau sulfit de sodiu 15% adugat cu pictura pn la
decolorarea soluiei, evitnd excesul de perhidrol sau sulfit. n lichid se identific
formaldehida (v. formaldehida).

5CH
3
OH + 2KMnO
4
+ 4H
3
PO
4
= 5HCHO + 2MnHPO
4
+ 2KH
2
PO
4
+ 8H
2
O
2KMnO
4
+ 5Na
2
SO
3
+ 4 H
3
PO
4
= 5Na
2
SO
4
+ 2MnHPO
4
+ 2KH
2
PO
4
+3H
2
O

n cazul prezenei concomitente a formaldehidei, aceasta se ndeprteazastfel: se trateaz 10
ml soluie de analizat cu 5 ml AgNO
4
10% i 5 ml NaOH 30%. Se nclzete cu refrigerent
ascendent timp de 30 minute i se distil. Formaldehida se oxideaz la acid formic, care nu
distil. Formaldehida se oxideaz la acid formic, care nu distil i concomitent, Ag
2
O se
reduce la Ag metalic (oglind de argint):

AgNO
3
+ NaOH = AgOH + NaNO
3

2AgOH= Ag
2
O + H
2
O
HCHO + Ag
2
O = HCOOH + 2 Ag

n cazul indentificrii metanolului n snge se produce astfel: se trateaz 2 ml snge cu 2 ml
acid triclor acetic 20%, se centrifugheaz i peste 1 ml supernatant se adaug 0,2 ml KMnO
4

1% i 0,1 ml acid fosforic 85%. Se agit 1 minut, se reduce excesul de KMnO
4
cu cteeva
cristale de bisulfit de sodiu. Se adaug 1 ml acid cromotropic 1% n acid sulfuric concentrat
i apoi cu grij, 1 ml acid sulfuric concentrat. La zona de contact a fazelor se observ un inel
violet, iar la agitare, coloraia difuzeaz. n absena metanolului, apare o coloraie brun
deschis.

2. Reacii de esterificare
a. Se nclzete 1 ml soluie de analizat cu 0,1 g acid salicilic i 1 ml acid sulfuric concentrat
: se dezvolt un miros specific de salicilat de metil, C
6
H
4
(OH)COOCH
3
;
b. Se adaug la 2ml soluie de analizat, 2-3 picturi de clorur de bemzil (sau cteva cristale
de acid benzoic) i 0,5 ml H
2
SO
4
conc. Se neutralizeaz cu NaOH 20% cnd se dezvolt un
miros specific de benzoat de metil, C
6
H
5
COOCH
3
.

182
Metoda spectrofotometric cu acid cromotropic pentru metanol. Metanol este oxidat
la formaldehid. Aceasta este tratat cu acid cromotropic (acid 1,8-dihidroxinaftalen, 3,6-
disulfonic) n mediu acid, cnd se obine un compus violet, colorimetrabil:
OH
OH
SO
3
H
SO
3
H
OH
OH
SO
3
H
SO
3
H
CH
HO
SO
3
H
SO
3
H
O
OH
OH
SO
3
H
SO
3
H
CH
2
HO
SO
3
H
SO
3
H
OH




HCHO + 2 ? H
2
O + +[O] ?





Sensibilitatea reaciei este de 1g/ml.

Reactivi: 1. Soluie absorbant: ap distilat; 2. Permanganat de potasiu, soluie 2%;
3. Acid fosforic 50%; 4. Sulfit de sodiu, soluie saturat; 5. acid cromotropic, soluie 5%
proaspt preparat. n momentul ntrebuinrii, se diluiaz 5 ml la 100 ml acid sulfuric 15N.
6. Acid sulfuric 9M. 7. Soluie etalon de metanol: se cntrete un balon cotat de 50 ml
coninnd cca. 15 ml ap, se introduc 4-5 picturi metanol pur si se recntrete, diferena
reprezint cantitatea de metanol. Se aduce la semn cu ap. Se prepar soluia etalon, astfel ca
soluia s conin 1 ml = 0,1 mg = 100 g.
Recoltarea probelor. Se apir minimum 1litru aer, cu un debit de 0,2 litri/minut
printr-un microabsorbitor coninnd 2 ml ap distilat.
n afar de microabsorbitoarele destinate recoltrii de probe, se prevd nc dou, cu cte 2
ml ap distilat, care se transport n teren fr a aspirara aer prin ele, constituind probele
martor.
Modul de lucru. Se transvazeaz cantitativ coninutul microabsorbitorului ntr-o
eprubet gradat de 10 ml. Se adaug 1 ml permanganat de potasiu i 0,5 ml acid fosforic. Se
las mpreun 15 minute, se decoloreaz excesul de permanganat cu sufit, evitnd excesul,
apoi se adaug 5 ml acidcromotropic, agitnd i rcind la robinet. Se aduce proba n baia de
ap la fierbere, meninnd-o 30 minute. Se rcete i se completeaz la 10 ml cu acid sulfuric
9 M. n paralel se prelucreaz i probele martor.
Se msoar extincia probelor la spectrofotometru la = 580 nm, n cuva de 1 cm, fa de
martor.
Curba de etalonare se ntocmete ntre 20 i 100 g, prin puncte din 20 n 20, n codiiile
descrise mai sus. Valorile extinciilor pentru probe se raporteaz la curba etalon, obinndu-
se concentraia C a metanolului, n g, n prob.

Eprubeta
Reactivi(ml) 1 2 3 4 5 6
Standard de lucru(100 g / ml) 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 -
KMnO
4
20% 20 40 60 80 100 -

183
H
3
PO
4
5 % 1.8 1.6 1.4 1.2 1.0 2.0
Na
2
SO
3
sol. saturat 1.0 se agit
Acid cromotroforic 5.0 se mentin eprubetele 30 n BM n
fierbere, se rcesc imediat
H
2
SO
4
9 M pn la 10 ml

Calcul
Rezulatele exprimate n mg metanol/m
3
aer:
mg, metanol /m
3
aer = C/V
n care:
C = concentraia metanolului n g;
V = volumul de aer recoltat, n litri.
Normele republicane n vigoare prevd pentru alcoolul metilic CMA = 100mg/m
3
aer.

Alcoolul etilic
1. Reacia Leben: se alcalinizeaz 2 ml soluie de analizat cu NaOH 1% sau Na
2
CO
3
10%, se
nclzete uor i se adaug soluii Lugol (4 g iod i 4 g KI la 100 ml ap) pn la apariia
culorii galbene-portocalie. Se distruge excesul de iod cu NaOH 10% sau Na
2
CO
3
10% cnd
apare opalescen i miros de iodoform, caracteristic, sau chiar precipitat galben cu forme
caracteristice la microscop (la concentraii mai mari de etanol):
C
2
H
5
OH + I
2
+2 NaOH = CH
3
CHO + 2 NaI +2 H
2
O
CH
3
CHO + 3 I
2
+ 3NaOH = CI
3
CHO + 3 NaI + 3 H
2
O
CI
3
CHO + NaOH = CHI
3
+ HCOONa
Reacia este sensibil, dar nespecific, fiind dat de aceton i metiletilceton, precum i de
acetaldehid. Diferenierea cetonelor de etanol i acetaldehid se realizeaz, dac soluia de
analizat este alcalinizazt cu amoniac n loc de NaOH, dup care se adaug soluie Lugol. n
prezena etanolului i acetaldehidei apare un precipitat cenuiu-negru de iodur de azot, pe
cnd acetona, n aceleai condiii, dezvolt miros de iodoform.
2.Reacia xantogenailor: la 2 ml soluie de analizat se adaug o granul de KOH de agit i
se nclzete uor, se aciduleaz slab cu acid acetic !%, se adaug cteva picturi de sulfur
de carbon i 2-5 picturi sulfat de cupru 5%. Se formeaz iniial un precipitat negru de
xantogenat cupric, care trece prin dismutaie n xantogenat cupros, galben.
3. Reducerea bicromatului: se trateaz 2 ml soluie de analizat cu cteva picturi K
2
Cr
2
O
7

5% i 1 ml H
2
SO
4
conc., cnd se dezvolt o culoare verde (Cr
3+
), iar etanolul se oxideaz, n
funcie de condiiile de reacie, la acetaldehid sau acid acetic:
- la rece:
3 CH
3
CH
2
OH + K
2
Cr
2
O
7
+ 4 H
2
SO
4
= 3 CH
3
CHO + Cr
2
(SO
4
)
3
+ K
2
SO
4
+ 7 H
2
O
- la cald:
3 CH
3
CH
2
OH + 2 K
2
Cr
2
O
7
+ 8 H
2
SO
4
= 3 CH
3
COOH + 2 Cr
2
(SO
4
)
3
+ 2 K
2
SO
4
+ 11 H
2
O
Reacia este specific, fiind dat de toi alcoolii, ca alte substane organice i substane
reductoare.


184
Dozare din aeru expirat, snge, urin, organe.
1. Metoda rapid pentru etanol, din aerul expirat.
Se folosesc, fie tuburi umplute cu silicagel impregnat cu bicromat de potasiu sau anhidrid
cromic i acid sulfuric- cnd se modific culoarea de la galben (Cr
6+
) la verde (Cr
3+
),
concomitent cu oxidarea etanolului la acetaldehid - fie aparte speciale, de tipul Acootest,
Breathanalyser etc., bazate pe reacii chimice sau msurtori fizice (de exemplu, absorbie n
I.R.).
2. Metoda iodometric (oficial) pentru etanol din produse biologice (metoda Cordebard)
Etanolul, izolat din produsul biologic prin distilare, este oxidat, la rece, pn la acid
acetic, cu bicromat de potasiu, n mediu de acid acetic. Excesul de bicromat este titrat
iodometric, n prezena amidonului sau a alcoolului polivinilic ca indicator:
3C
2
H
5
OH + 2K
2
Cr
2
O
7
+ 16HNO
3
= 3CH
3
COOH + 4KNO
3
+ Cr(NO
3
)
3
+ 11H
2
O
K
2
Cr
2
O
7
+ 6 KI + 14 HNO
3
= 2 Cr(NO
3
)
3
+ 8 HNO
3
+ 2 I
2
+7 H
2
O
I
2
+ Na
2
S
2
O
3
= 2 NaI + Na
2
S
4
O
6

Reactivi
1. acid picric, soluie saturat. De aduc ntr-o capsul 20 g acid picric, se adaug 1000 ml ap
i se nclzete amestecul la uoar fierbere, timp de 10-15 minute, apoi se rcete i se
filtreaz.
2. Acid succinic sau acid tartric, soluie 5%;
2. Acid azotic d = 1,42 8lipsit de substane reductoare).
3. Iodur de potasiu, soluie 2% proaspt preparat. Se pstreaz n sticle brune cu dop rodat.
5. Bicromat de potasiu, soluie N/6,9 (0,144 N). Se cntresc exact 7,1065 g bicromat de
potasiu pulverizat, n prealabil uscat la 125-150C i se dizolv n 1000 ml ap distilat.
Soluia se conserv la ntuneric. Din aceast soluie, 3 ml corespund 10 ml bicarbonat de
potasiu N/23 (0,0435 N) i oxideaz 5 mg etanol.
6. Tiosulfat de sodiu, soluie N/23 (0,0435 N). Se dizolv n 11 g Na
2
S
2
O
3
. H
2
O n ap
distilat proaspt fiart i rcit, ntr-un balon cotat de 1000 ml, se adaug 0,10 g carbonat de
sodiu anhidru i se completeaz la semn cu ap. Dup cteva zile se determin titrul, care se
verific apoi sptmnal. Stabilitatea titrului se face astfel se iau 3 ml bicromat N/6,9, exact
msurai, se adaug 5 ml ap distilat, 4 ml HNO
3
i 20 ml KI 2%. Se astup flaconul i
dup 2-3 minute, se titreaz iodul pus n libertate cu tiosulfat N/23 (indicator amidon sau
alcool polivinilic). Factorul se calculeaz dup formula:
F
tiosulfat
= 10 / n
n care:
10 = ml bicromat N/23, corespunznd la 3 ml bicromat N/6,9 :
n = ml tiosulfat N/23, folosii n titrare.
7. Indicator amidon 15 sau alcool polivinilic 10% (se dizolva 10 g alcool polivinilic, lipsit de
substane reductoare, n 100 mlap fierbinte; se continu nclzirea, agitnd, pn la
dizolvarea complet, (soluia se pstreaz n flacoane bine nchise, la rece).
Modul de lucru a. Izolare
Snge: se aduc 5 ml snge recoltat pe anticoagulante, exact msurai, ntr-un balon de
distilare de 300ml, se adaug 20 ml ap, 25 ml acid picric (sau 45 ml acid succinic) i puin

185
piatr ponce. Se agit uor i se adapteaz la coloan de distilare Vigreux, care se continu
cu un refrigerent descendent, prevzut cu o alonj. Captul alonjei se introduce ntr-un balon
cotat de 25 ml, n care se gsesc 2-3 ml ap distilat. Se distil pn aproape de semnul
balonului, apoi se completeaz cu ap la semn. Distilarea dureaz aproximativ 25 minute.
Urin: se aduc 5 ml urin exact msurai ntr-un ntr-un balon de distilare de 300 ml i se
continu ca la snge.
Organe: se cntrete repede o cantitate de organe (n funcie de natura organului) se
mojareaz cu nisip purificat i se trece n balonul de distilare, relund de cteva ori cu ap, se
adaug acid picric i se continu cala snge.
b. Dozare (metoda Cordebard modificat de Banciu i Droc):
ntr-un Erlenmeyer de 100 ml cu dop rodat, se iau 5 ml distilat(n cazul sngelui i al urinei,
corespunde la 1 ml produs), se adaug 3 ml bicromat N/6,9 (msurai cu microbiureta) i 4
ml HNO
3
conc. Se acoper balonul, se las n repaus 15 minute exact, se adaug 20 mlKI
2%. Dup 2 minute se titreaz iodul pus n libertate de excesul de bicromat, cu tiosulfat
N/23, n prezena soluiei de amidon sau de alcool polivinilic ( ultimul vireaz la rou la
incolor).
Calcul
1 ml bicromat N/23 = 0,0005 g etanol
g etanol/1000 ml snge (urin) = (10 n) x 0.5 = 10 n / 2
n care:
10 = ml ml bicromat N/23 (la care corespund 3 ml bicromat N/6,9 i care oxideaz 5 mg
etanol);
N = ml tiosulfat N/23 folosii la filtrare.
Observaii
1. Dac distilatul conine mai mult etanol dect ar putea oxida bicromatul, se ia in lucru un
alicot ??? mai mic.
2. Reactivii utilizai trebuie s fie p.a sau chimic pur s nu conin substane reductoare.
3. n cazul sngelui, rezultatele sunt corecte numai dac sngele nu a fost purificat. n cazul
sngelui coagulat, se lucreaz pe ser i rezultatul final se mparte cu 1,2 ; deoarece etanolul
este repartizat n cantitate mai mic n ser dect n sngele total.
4. n condiiile metodei, metanolul, aflat eventual n produsul biologic, este oxidat la rece
numai n proporie de aproximativ 15%. Depistarea metanolului n snge se face dup
tehnica indicat la metanol (v. Metanolul).
5. Se recomand ca dozarea s se execute pe dou probe paralele.
6. Din cauza scderii, n timp, a concentraiei de etanol, se recomand s se adauge 0,15% la
rezultatul analizei, pentru fiecare or de ntrziere. aceast corecie se face, neinnd seama
de primele dou ore i pe o perioad care s nu depeasc 5-6 ore (adic 7-8 ore) de la
recoltrea sngelui. Peste aceast limit, sigurana calcului este mai redus.

Bibliografie
G. Drochioiu, I. Mangalagiu, I. Dru, Elemente de teorie i practic toxicologic. Edit.
Demiurg, Iai, 2001.

186
M. Cotru, Implicaii ale consumului de etanol n industria chimic. M.I.Ch., Iai, 1983.
M. Proca, E. Butnaru, L. Agoroaei Lucrri practice de toxicologie. Universitatea de
medicin i farmacie Gr. T. Popa Iai, Centrul de multiplicare UMF, Iai, 1996.








































187
Cap. XI. Otrvirea cu medicamente

Spectrul efectelor exercitate de medicamente cuprinde efecte benefice i efecte nedorite n
raport cu circumstanele n care sunt utilizate. Efectele toxice decurg fie din aciunea
farmacologic primar (care reprezint baza indicaiei terapeutice) - exagerat n situaia dat
- fie din aciuni fr legtur cu aceasta, incluznd aici citotoxicitatea direct i perturbri ale
proceselor metabolice.
Excreia, n special prin rinichi, este o modalitate de epurare, valabil pentru multe
medicamente. Ea intereseaz n general molecule purttoare de sarcini electrice depline sau
pariale, care nu sunt liposolubile.
Medicamentele, cu excepia celor macromoleculare (sau n form legat de proteinele
plasmatice), se filtreaz glomerular. Moleculele liposolubile se absorb tubular, rmnnd n
organism, cele neliposolubile sunt reinute n urin i se elimin. Unele medicamente fac de
asemenea obiectul secreiei tubulare, care implic mecanisme transportoare specifice.
Medicamentele care sunt epurate total sau n mare parte prin excreie renal - de
exemplu antibioticele aminoglicozidice de felul gentamicinei, majoritatea curarizantelor,
digoxina - trebuie administrate n doze mici sau evitate (dup caz) n insuficiena renal.
Vrsta naintat, care presupune un grad de insuficien renal funcional, oblig de
asemenea la pruden n dozare.
Eliminarea renal poate fi obiectul unor interaciuni semnificative clinic. Astfel,
alcalinizarea urinii prin bicarbonat de sodiu crete proporia formei ionizate de salicilai (care
au molecula acid) n urin; aceasta micoreaz reabsorbia tubular, mrind eliminarea
renal, fenomen util n intoxicaia acut cu acid acetilsalicilic. Un alt exemplu este
probenecidul, un medicament cu molecula acid, care intr n competiie cu benzilpenicilina,
de asemenea cu molecula acid, pentru transportul specific ce intervine n secreia tubular;
de aceea probenecidul scade eliminarea urinar a penicilinei i poate fi utilizat pentru
creterea nivelului plasmatic de antibiotic.

Parametrii farmacocinetici
Micorarea i dispoziia medicamentelor n organism poate fi cuantificat. Concentraia
plasmatic este un parametru global, fiind o rezultant a tuturor etapelor circulaiei n
organism. Biodisponibilitatea definete absorbia la care se pot aduga alte fenomene, ce
intervin eventual ntre absorbie i ajungerea n circulaie. Distribuia n organism se msoar
prin volumul aparent de distribuie. Indicele care msoar procesul de epurare-metabolizare,
excreia - este clearance-ul. Timpul de njumtire este un parametru complex, care rezult
din distribuie i epurare.

Aciunea medicamentelor la nivel molecular i celular
Aciunea primar a medicamentelor se exercit asupra moleculelor i reprezint mecanismul
de aciune. Farmacoreceptorii sunt macromolecule proteice capabile s lege specific
substane active cu molecula relativ mic, formnd cu acestea complexe, care comand
anumite efecte biologice. Multe medicamente folosesc drept receptori macromolecule, care n

188
mod obinuit sunt acionate specific de molecule fiziologice - neurotransmitorii autacoizi,
hormoni i ali compui activi proprii organismului.
Receptorii recunosc specific semnalul chimic reprezentat de anumite molecule. Aceasta
se datorete existenei la suprafaa macromoleculei a unui sediu de legare complementar
chimic, electric i /sau ca organizare spaial cu molecula medicamentoas (sau endogen).
Capacitatea de a se fixa specific de anumii receptori este denumit afinitate. Formarea
complexului medicament-receptor se realizeaz prin stabilirea unor legturi ntre molecula de
medicament i sediul de legare. Legturile sunt de regul labile i constau n legturi ionice,
puni de hidrogen, fore van der Waals. Medicamentul se leag i se desface de receptori cu
repeziciune i de repetate ori. Mai rar legarea este stabil i puternic (legturi covalente) ceea
ce determin un efect prelungit, deseori cu caracter toxic.
Cuplul medicament-receptor iniiaz intrarea n funcie a unor mecanisme amplificatoare
- reacii enzimatice secveniale n cascad, aciuni progresiv mai ample sau mai ndelungate
pentru fiecare treapt, transformri de energie. Aa se explic consecinele funcionale majore
ale unor aciuni primare foarte modeste cantitativ.
O alt categorie de medicamente antagoniste - au afinitate, dar fixarea de receptori este
imperfect i nu poate declana fenomenele responsabile de activitatea biologic. Asemenea
substane sunt denumite antagoniste deoarece mpiedic fixarea de receptori, respectiv
aciunea substanelor agoniste. Antagonismul are obinuit caracter competitiv, cele dou
categorii de substane, agoniste i antagoniste, intrnd n competiie pentru sediul de legare de
pe macromolecula receptoare.
Curba concentraiei de medicament (sau doz) - efect este hiperbolic cu convexitatea n
sus. nscrierea semilogaritmic realizeaz o curb sigmoid. Centrul de simetrie din poriunea
mijlocie a curbei definete doza care produce 50% din efectul maximal. Atunci cnd substana
se cupleaz cu toi receptorii disponibili i i acioneaz efectul este maximal. Eficacitatea
maxim indic intensitatea de aciune a unui medicament, figurat prin nlimea curbei
proiectat pe ordonat. Potena, care exprim domeniul dozelor eficace, este figurat prin
proiecia curbei pe ordonat.
Receptorii pot fi ncadrai n patru superfamilii n funcie de organizarea lor structural i
de sistemele cu care sunt conectai. Receptorii pot fi situai n membrana celular sau
intracelular. Receptorii membranari sunt proteine integrale nglobate n membrana celular,
cu o extremitate care proemin n exterior i alta n interior. Receptorii intracelulari sunt
proteine specifice situate n citoplasma i n cromatina nuclear.
O prim categorie de receptori este reprezentat de recetorii-canal ionic. Acetia sunt
formai dintr-o protein, care include sau mrginete un canal membranar ionic, astfel
receptorii colinergici nicotinici include un canal pentru ionii de sodiu i potasiu, iar receptorii
GABA
A
include un canal pentru ionii de clor. Acionarea unor asemenea structuri
macromoleculare determin deschiderea (sau nchiderea) canalului respectiv, cu modificarea
ncrcrii electrice membranare, respectiv depolarizare i fenomene de excitaie sau
hiperpolarizare i inhibiie.
O a doua categorie de receptori membranari sunt receptorii-enzime. Ei constau n
proteine transmembranare, care au un sediu de legare pe suprafaa extracelular i activitatea

189
enzimatic n poriunea dinspre interiorul celulei. Acionarea acestor receptori determin
modificarea direct a activitii enzimatice corespunztoare, cu consecine metabolice i
funcionale. Insulina i anumii factori trofici activeaz receptori cu funcie protein-kinazic.
A treia categorie de receptori, de asemenea membranari, mai compleci, sunt receptorii
cuplai cu proteine G sau receptorii n serpentin. Ei cuprind o protein prevzut cu un sediu
de legare, cuplat cu o alt protein denumit protein G i, prin aceasta, cu o enzim
membranar important. Prima protein, cu funcie receptoare propriu-zis este cudat,
traversnd de apte ori membrana celular; agonistul se fixeaz pe suprafaa extern.
Modificarea conformaional, care urmeaz activrii proteinei receptoare, se transmite la o
protein G, a crei funcie este dependent de GTP.Au fost descrise cteva tipuri de protein
G, notate cu diferite litere mici: Gs, Gi (s i i de la stimulant, respectiv inhibitor), Gq, Go.
Proteina G este cuplat pozitiv (stimulator) sau negativ (inhibitor) cu o anumit enzim
membranar capabil s pun n funcie metabolii majori pentru economia metabolic
celular denumii mesageri secunzi (mesagerii primi ai informaiei sunt reprezentai de
moleculele care acioneaz receptorii).
Principalele enzime membranare, care pun n funcie mesageri secunzi, sunt adenilat ciclaza i
fosfolipaza C. Adenilat ciclaza catalizeaz transformarea ATP n AMP
c
(adenozin monofosfat
ciclic). Adenilatul ciclic, un mesager secund, activeaz protein kinaze specifice, cu
declanarea unor procese de fosforilare i activare enzimatic secvenial. Fosfolipaza C este
o enzim membranar care desface, din fosfatidilinozitol, inozitol trifosfat (ITP) i diacil
gliceroli (DAG). Aceti metabolii reprezint un sistem mesager secund. ITP stimuleaz
eliberarea de ioni de calciu din depozitele celulare; calciul cuplat cu calmodulina (o protein
specific) activeaz anumite protein kinaze, cu fosforilri n lan consecutive. DAG mpreun
cu ionii de calciu activeaz protein kinaza C, o alt enzim fosforilant. Catecolaminele,
acetilcolina, serotonina, opioizii i datoresc parte din efectele modificrii sistemelor
mesagere secunde reprezentate de adenilatul ciclic i de ITP DAG / Ca
2+
, ca urmare a
activrii anumitor receptori specifici.
Receptorii aparinnd unei a patra categorii, au o component citoplasmatic i o alta la
nivelul cromatinei nucleare, de unde denumirea de receptori nucleari. Moleculele care
acioneaz la nivelul acestor receptori (steroizi hormonali, vitamina D, hormoni tiroidieni)
sunt solubile n grsimi i ptrund cu uurin n celulele int. Ajunse n citoplasm se
fixeaz de o macromolecul receptoare complex. Prin pierderea consecutiv a unor proteine
asociate acestei macromolecule se formeaz un complex activ, care ajunge n nucleu unde se
fixeaz de ADN la nivelul unui situs specific. Ca urmare sunt reglate pozitiv sau negativ
anumite gene alturate, receptorii nucleari avnd funcie de factori de trascripie. Modificarea
sintezei unor proteine enzimatice sau de alt natur este responsabil de efectul final.
Timpul n care se evideniaz efectele acionrii receptorilor depinde de felul acestora. n
cazul modificrii directe a canalelor membranare sau a funciei unei enzime efectul apare
foarte repede. Pentru receptorii cuplai cu proteine G efectele se instaleaz ceva mai lent,
deoarece implic sisteme mesagere secunde i secvene metabolice multiple. Efectele
acionrii receptorilor nucleari se dezvolt dup o perioad de laten, deoarece ele presupun
modificarea sintezei unor proteine.

190

Aciunile medicamentelor asupra canalelor membranare i mecanismelor transportoare
Canalele membranare sunt pori apoi inclui n proteine membranare sau mrginii cu
acestea. Canalele permit trecerea prin difuziune controlat a ionilor de sodiu, calciu, potasiu,
clor, conform gradientului de concentraie. De asemenea, pot fi traversate de anumite
molecule hidrosolubile de dimensiuni mici. Trecerea pasiv a ionilor de sodiu i a celor de
calciu determin depolarizare, respectiv genereaz potenialul post-sinaptic excitator i
potenialul de aciune, cu excitaie consecutiv. Efluxul ionilor de potasiu i influxul ionilor
de clor determin hiperpolarizare, respectiv potenial postsinaptic inhibitor.
Diferii compui endogeni, medicamente, toxice, acioneaz asupra canalelor
membranare, astfel, acetil colina deschide canalele pentru Na
+
i K
+
de la nivelul plcii
motorii, ca urmare a acionrii receptorilor colinergici nicotinici; consecutiv, este stimulat
musculatura striat. GABA acioneaz receptorii GABA
A
i deschide canalele pentru Cl
-
la
nivelul unor neuroni din SNC, cu inhibiie consecutiv; benzodiazepinele favorizeaz acest
fenomen, ceea ce explic efectul tranchilizant. Blocantele canalelor calciului i datoresc
efectele farmacologice blocrii canalelor calciului de tip L (voltaj-dependente).Unele
antiepileptice, unele antiaritmice, amiloridul (un diuretic) blocheaz canale ale sodiului..
Mecanismele transportoare specifice sunt o alt modalitate, care asigur trecerea prin
membrane a ionilor i altor molecule. Din aceast categorie fac parte pompele ionice, care
funcioneaz specific pentru anumii ioni, transportndu-i cu consum de energie mpotriva
gradientului de concentraie. Pompa de sodiu / potasiu i pompa de calciu sunt ATP-aze
specifice sensibile la ionii respectivi, care menin concentraia fiziologic a acestora.
Glicozidele cardiace, de exemplu modific funcia acestor pompe la nivelul miocardului.
Pompa protonic asigur secreia ionilor de hidrogen de ctre celulele parietale din mucoasa
gastric, respectiv formarea acidului clorhidric. Omeprazolul blocheaz aceast pomp i
mpiedic secreia acid.
Trebuie spus ca teorii mai noi consider aceste pompe drept o ficiune i c biostructura
celular ar permite sau nu ptrunderea medicamentelor n celul.
Aciunile medicamentelor la nivelul unor organite celulare
Anumite molecule endogene i medicamente i datoresc efectele aciunii la nivelul
nucleului celular. Astfel glucocorticoizii, steroizii sexuali, vitamina D acioneaz asupra unor
receptori nucleari, funcionnd ca factori de transcripie. Unele anticanceroase i datoresc
citotoxicitatea afectrii directe a ADN sau mpiedicrii sintezei de novo a acestora.
Ribozomii, sediu al sintezei proteice, pot suferi influene medicamentoase. Anumite
antibiotice, de exemplu, interfereaz funcia ribozomilor bacterieni.
Formaiunile veziculare sau granulare de depozit din anumite celule (cele din terminaiile
presinaptice, care conin neurotransmitori, cele din mastocit, macrofage, bazofile, care
conin anumite autacoide) pot fi influenate medicamentos. Astfel, efedrina i amfetamina
elibereaz noradrenalina din terminaiile adrenergice, avnd efecte simpatomimetice,
guanetidina mpiedic eliberarea noradrenalinei, provocnd bloc presinaptic, toxina botulinic
paralizeaz terminaiile colinergice, deoarece mpiedic eliberarea acetilcolinei.

191
Cromoglicatul disodic i ketotifenul mpiedic degranularea mastocitelor, cu consecine
antialergice.

Aciunea medicamentelor la nivelul unor sisteme de reglare
Medicamentele i pot datora efectul modificrii contolului nervos, umoral sau hormonal
a funciei structurii efectoare.
Sinapsa ca loc de aciune a medicamentelor
Sinapsele sunt deosebit de sensibile la influene chimice, datorit existenei
neurotransmitorilor. Toate etapele dispoziiei biochimice i fiziologice a
neurotransmitorilor sunt susceptibile la influene medicamentoase: sinteza
neurotransmitorilor, depozitarea acestora n formaiuni veziculare sau granulare
presinaptice, eliberarea n fanta sinaptic de ctre impulsul nervos, acionarea receptorilor
specifici situai ndeosebi postsinaptic, inactivarea neurotransmitorilor prin metabolizare
i/sau captare tisular.
Se pot da numeroase exemple de medicamente a cror efecte se datoresc interferrii
dispoziiei neurotransmitorilor. Astel levodopa favorizeaz sinteza dopaminei n sistemul
nervos central, ceea ce este avantajos n Parkinson, boal caracterizat prin deficit de
dopamin n anumite formaiuni din creier. Medicamente stimulante ale terminaiilor
adrenergice, de felul efedrinei, elibereaz noradrenalina, dup cum guanetidina mpiedic
eliberarea acestui neurotransmitor; consecutiv prima crete presiunea arterial, pe cnd cea
de a doua o scade. Multe medicamente acioneaz sau blocheaz receptori specifici ai
neurotransmitorilor. Pilocarpina i alte parasimpatomimetice stimuleaz receptorii
colinergici muscarinici, iar atropina i celelalte parasimpatolitice i blocheaz. Salbutamolul
este un stimulant beta
2
-adrenergic, pe cnd propanololul blocheaz receptorii beta-
adrenergici.Suxametoniul este un curarizant agonist la nivelul receptorilor colinergici
nicotinici de pe placa motorie, iar tubocurarina blocheaz aceti receptori. Neurolepticele i
datoresc efectele nervos centrale blocrii unor receptori ai dopaminei sau ai serotoninei n
creier. Benzodiazepinele au proprieti tranchilizante ca urmare a facilitrii aciunii GABA
asupra receptorilor GABA
A
.Unele antidepresive acioneaz prin mpiedicarea recaptrii
noradrenalinei i serotoninei n anumite sinapse din creier, dup cum alte antidepresive
acioneaz prin blocarea MAO, respectiv mpiedicarea inactivrii metabolice a acestor
neurotransmitori n sinapsele centrale.

Aciunile medicamentelor asupra aparatelor efectoare
Funcia aparatelor efectoare poate fi influenat medicamentos prin modificarea
contolului vegetativ i umoral-hormonal al acestora i prin aciune direct asupra celulelor
componente - celule musculare, celule glandulare.
Bronhodilataia, de exemplu, care este util la astmatici, poate fi produs prin stimulante
beta
2
-adrenergice, prin anticolinergice, ca i prin bronhodilatatoare musculotrope de felul
teofilinei. Secreia gastric de acid clorhidric poate fi inhibat prin antihistaminice blocante
ale receptorilor protonilor, prin anticolinergice i prin omeprazol, care acioneaz direct

192
asupra celulelor parietale, blocnd pompa protonic responsabil de secreia ionilor de
hidrogen.

Efectele medicamentelor asupra organismului ca un ntreg
Efectele globale ale medicametelor evideniate asupra organismului n ansamblu sunt
rezultanta aciunii primare i a tuturor reaciilor i contrareaciilor, care urmeaz acesteia.
Intervin reglri de tip retroaferent, fenomene compensatorii, reflexe i reacii umorale-
hormonale, care imprim o mare complexitate manifestrilor integrate ale organismului.
O serie de variabile care in de individ - factori fizici, factori fiziopatologici, variabilitatea
biologic i de medicament, pot influena efectele farmacologice.

Farmacotoxicologia
Farmacotoxicologia are drept obiect studiul efectelor duntoare ale medicamentelor.
Intoxicaiile medicamentoase
Supradozarea medicamentelor produce intoxicaii acute sau cronice. Toxicitatea se
evalueaz experimental i se cuantific prin stabilirea dozei care intoxic sau ucide 50% din
animalele testate, definind astfel DT
50
, respectiv DL
50
.
Intoxicaiile acute medicamentoase ocup un loc important n patologia uman. Printre
medicamentele incriminate curent n asemenea intoxicaii sunt benzodiazepinele,
barbituricele, antidepresivele, neurolepticele i ndeosebi, diverse asociaii medicamentoase,
incluznd deprimante ale sistemului nervos central.
Tratamentul intoxicaiilor acute const n msuri nespecifice, care urmresc, pe de o
parte micorarea cantitii toxice din organism, pe de alta tratamentul simptomatic i
susinerea funciilor vitale. Pentru ndeprtarea toxicului, dup caz, se fac splturi, se
provoac vom, se administreaz purgative i /sau diuretice, la nevoie se dace dializa.
Tratamentul simptomatic se adreseaz unor manifestri suprtoare sau duntoare - stare
de excitaie, convulsii, sedare excesiv mergnd pn la com, vom, colici, diaree.
Susinerea funciilor vitale, mai ales respiraia i circulaia presupune, de regul, ngrijirea
intensiv ntr-un serviciu de reanimare. n unele cazuri este posibil i necesar tratamentul
specific antidotic. Antidoturile sunt substane capabile s combat n mod electiv
fenomenele toxice produse de anumite medicamente. Ele acioneaz fie prin mecanism
farmacologic - aciuni contrarii la nivelul unor sisteme fiziologice sau antagonism
competitiv la nivelul unor receptori specifici, fie prin mecanisme chimice, de exemplu
inactivarea unor metale toxice prin chelare. Dintre antidoturile mai cunoscute sunt: nalorfina
n intoxicaia cu morfina i alte opioide, atropina i obidoxima n intoxicaia cu
anticolinesterazice, fitomenadiona n intoxicaia cu anticoagulante cumarinice.
Intoxicaiile cronice apar n condiiile administrrii repetate de doze mari i se datoresc
acumulrii de cantiti toxice de medicament.





193
Dependena
Dependena medicamentoas, adicia sau toxicomania este o stare de intoxicaie cronic
caracterizat prin necesitatea constrngtoare de folosire a unor substane medicamentoase
sau toxice. Ea se caracterizeaz sub forma ei complet, prin patru trsturi definitorii:
-dependena psihic, adic necesitatea de ordin psihologic de a folosi un anumit
medicament sau toxic;
-tolerana, adic diminuarea progresiv a efectului la repetarea administrrii, respectiv
necesitatea creterii dozei pentru a obine efectul scontat;
-dependena fizic, care const n necesitatea de a continua folosirea substanei respective
pentru a evita tulburrile, uneori grave, care apar la ntreruperea administrrii i sunt
cunoscute sub denumirea de sindrom de abstinen;
-psihotoxicitatea.
Substanele capabile s provoace dependen au, de cele mai multe ori, aciuni
psihofarmacologice: euforizant, linititoare, stimulant psihomotorie, halucinogen.
Principalele substane cu potenial de dependen sunt: morfina, heroina i alte opioide,
amfetaminele, cocaina, alcoolul etilic, barbituricele i alte hipnotice, benzodiazepinele i alte
tranchilizante, canabinoidele (marijuana, hai) i, n msur mai mic, nicotina (tutunul) i
cafeina (cafeaua).
Dependena psihic este favorizat de beneficiul therapeutic: calmarea durerii, nlturarea
anxietii, de efectele psihice proprii substanei respective i de fenomenul de condiionare a
administrrii.O anumit reactivitate individual determinat genetic, ca i intervenia unor
factori de ordin social pot motiva, de asemenea, dependena. Morfina, heroina, alcoolul,
barbituricele, benzodiazepinele, cocaina, amfetamina au potenial mare de dependen
psihic; pentru canabinoide, tutun i cafea potenialul este relativ mic.
Administrarea repetat a unor medicamente sau toxice poate dezvolta tolerana i
dependena fizic. Procesul este favorizat de prezena continu a unei concentraii mari de
substan activ la nivelul esuturilor. Fenomenul prezint specificitate chimic i /sau
farmacodinamic. Tolerana i dependena sunt ncruciate, pentru diferitele opioide de tip
morfinic sau pentru alcool, barbiturice i n parte pentru benzodiazepinele tranchilizante.
Tolerana apare mai ales pentru efectele centrale cu caracter subiectiv, mai puin pentru
cele periferice. Doza letal este modificat diferit n funcie de categoria de substane, crete
mult pentru opioide, este puin sau total modificat pentru alcool, barbiturice i
benzodiazepine. Dup oprirea administrrii, sensibilitatea normal revine n cteva zile. Ca
mecanism, tolerana are obinuit o semnificaie farmacodinamic, se dezvolt progresiv
procese adaptative de sens contrar interveniei medicamentului sau toxicului respectiv. Uneori
contribuie i interferene de ordin farmacocinetic, ndeosebi creterea procesului de inactivare
metabolic, de exemplu prin autoinducia enzimatic produs de barbiturice.
Bolnavul care a folosit repetat morfin sau alte opioide asemntoare, barbiturice,
benzodiazepine, buturi alcoolice, prezint la ntreruperea administrrii un sindrom
characteristic, sindromul de abstinen, care marcheaz dependena fizic, oblignd la
continuarea administrrii. Sindromul de abstinen difer pentru diversele categorii de
substane capabile de a dezvolta dependen; se descriu de exemplu un sindrom de abstinen

194
propriu opioidelor, altul de tip alcool-barbiturice. Majoritatea simptomelor corespund unor
efecte inverse celor produse de medicamentele sau toxicele respective. Aceasta sugereaz c
n cursul administrrii repetate se dezvolt fenomene adaptative contrare, care ramn fr
contrapondere la ntreruperea administrrii. Sindromul de abstinen este mai grav n cazul
substanelor cu aciune intens i de durat relativ scurt, cum sunt morfina sau heroina.
Antagonitii specifici, de exemplu naloxona n cazul morfinei, administrai la persoanele
dependente declaneaz repede un sindrom de abstinen sever, datorit mpiedicrii aciunii
caracteristice a drogului respectiv.
Dintre substanele cu potenial mare de toleran i dependen fizic sunt morfina,
barbituricele, benzodiazepinele i alcoolul; potenialul este mic pentru amfetamine,
canabinoide, tutun i cafea.
Psihotoxicitatea, cea de a patra caracteristic a dependenei, se manifest prin tulburari de
comportament, uneori cu caracter psihotic. Acestea apar n condiiile folosirii ndelungate i
abuzive de doze mari de barbiturice i alcool, amfetamine, cocain.
Tratamentul dependenei este foarte dificil datorit ntreptrunderii celor trei factori
etiopatogenici: medicament psihotrop, teren psihic, condiii sociale favorizante. Sunt
necesare, n primul rnd, msuri profilactice: aciuni educative, folosirea judicioas a
medicamentelor cu risc, reglementri riguroase privind asemenea substane (cunoscute n
legislaia noastr sub denumirea de ,,stupefiante). Tratamentul curativ se face n condiii de
spitalizare, sub supraveghere. Pot fi utile, dup caz: medicamente psihotrope, care nltur
fenomenele psihice favorizante ale dependenei, substane care atenueaz sindromul de
dependen (de exemplu metadona pentru morfin sau heroin), substane care provoac
aversiune (cum este disulfiramul n cazul intoxicaiei alcoolice).

Studii toxicologice
Intoxicaiile acute reprezint la ora actual o veritabil problem de sntate datorit
indicilor de morbiditate i mortalitate n continu cretere peste tot n lume. n SUA, n 2004,
intoxicaia medicamentoas a reprezentat a doua cauz dup accidentele de trafic. n Frana,
dup autori diferii, s-a constatat c mortalitatea imputabil unui accident terapeutic poate
varia de la 1% la 14%, punndu-se problema caracterului evitabil al evenimentului. Evaluarea
real este extrem de dificil datorit metodologiilor specifice a sistemelor de nregistrare a
maladiilor care difer n funcie de zona geografic.
Includerea medicamentului ntre cauzele etiologice devine tot mai pregnant deoarece
exist dou traiectorii distincte de abordare: 1) efectele imputabile direct agentului
farmacoterapic; 2) elementele secundare modului de utilizare a substanei medicamentoase.
n faa unei intoxicaii asistarea victimei presupune urmtorii pai:
a) stabilirea diagnosticului; b) evaluarea gravitii; c) instituirea terapiei complexe
simptomatice, evacuatorii / decontaminante, antidotice; d) determinarea necesitii msurilor
preventive.
Pentru a putea afirma diagnosticul de intoxicaie sunt necesare datele anamnestice
coroborate cu tabloul clinic, investigaiile de laborator, inclusiv analiza toxicologic, iar n

195
unele cazuri diverse teste diagnostice i terapeutice. Ideal ar fi ca toate aceste elemente s fie
n concordan cu toxicul / medicamentul i cu doza ingerat.
Intoxicaiile din tentativele criminale: apanajul organismelor specializate de anchet n
care unitatea medical este o verig foarte important.
Simptomatologia este, n general, extrem de variat depinznd direct de natura toxicului /
medicamentului i poate afecta toate aparatele i sistemele organismului uman. Investigaiile
biologice, prin anomaliile decelate, pot avea o real importan diagnostic permind
suspicionarea unei anumite clase de substane, fiind o reflectare direct a efectelor toxice,
uneori foarte utile att n plan evaluativ ct i terapeutic.
Analiza toxicologic are cert un mare impact diagnostic, prognostic, terapeutic i medico-
legal. Ea trebuie focalizat de clinician pe baza datelor tabloului clinic. n urgen, analiza
toxicologic cantitativ este indispensabil atunci cnd condiioneaz strategia terapeutic:
administrarea antidotului, a chelatorului, a dozelor repetitive de crbune activat, instituirea
epurrii extrarenale (de exemplu: intoxicaia cu paracetamol, salicilai, digitalice, fenobarbital,
litiu, fier, metanol, etilenglicol, metale). n practic exist 4 situaii:
1. Intoxicaie cert cu substan cunoscut i simptomatologie concordant cu toxicul i doza;
2. Intoxicaie cert cu substan cunoscut dar cu tablou clinic neconcordant cu toxicul i
doza;
3. Intoxicaie sigur dup context dar cu toxic necunoscut;
4. Simptomatologie evocatoare pentru o posibil etiologie toxic n absena contextului i a
altor date.
Evaluarea gravitii este o etap fundamental pentru c ea determin strategia terapeutic
i de supraveghere. Sunt implicai numeroi factori: toxicul i mecanismul su de aciune,
criteriile clinice i paraclinice, tipul de intoxicaie, elemente de vulnerabilitate individual,
asocierea diverselor substane (de exemplu, medicamente psihotrope cu etanol) i prezena co-
morbiditilor.
Din punct de vedere terapeutic, n mod clasic, exist 4 piloni: tratamentul simptomatic,
evacuator, epurator i antidotic. Preluarea unui caz de intoxicaie acut comport cu prioritate
aplicarea terapiei simptomatice pentru c se realizeaz monitorizarea parametrilor vitali,
precum i a bilanului clinico-biologic iniial cu aplicarea n cazul etiologiilor incerte a
testelor diagnostico-terapeutice (de exemplu, glucoz, Flumazenil, Naloxon).
Intoxicaiile medicamentoase reprezint o problematic extrem de complex, avnd implicaii
multiple de ordin medical, socio-economic i etico-moral, care datorit extinderii alarmate a
cazurilor, necesit o atenie amplificat din partea tuturor celor angajai n actul terapeutic.
Incidena intoxicaiilor n populaia general este dificil de estimat datorit urmtoarelor
cauze: majoritatea intoxicaiilor se produc la domiciliu, gravitatea lor nu impune ntotdeauna
prezentarea i internarea ntr-o secie specializat, manifestrile clinice sunt atribuite altor boli
sau sunt dificil de difereniat de alte afeciuni prezente la acelai pacient. Intoxicaiile
reprezint 5-10 % din cauzele internrilor n seciile de terapie intensiv.
Cile de ptrundere a toxicelor n organism sunt: ingestie (75-80%), percutan, ocular,
inhalator (fiecare cu aproximativ 5%), parenteral (sub 1%). Cazurile acute reprezint 90% din
totalul intoxicaiilor, cele accidentale fiind prezente n aceeai proporie.

196
Medicamentele sunt implicate n aproximativ 55% din intoxicaiile acute severe la adult
i n 50% din cele pediatrice grave. Intoxicaiile accidentale medicamentoase sunt rezultatul
autoadministrrii i autodozrii neinformate a medicamentelor, erorilor n prescrierea acestora
de ctre medic, n dozarea lor de ctre asistente, prini, vrstnici, n prepararea i eliberarea
medicamentelor de ctre farmaciti. Cele mai frecvente cauze de intoxicaii intenionate sunt
consumul abuziv de alcool sau droguri i tentativele de suicid. La adult, cel mai frecvent sunt
incriminate (n ordine descresctoare a frecvenei) n cazurile acute grave asocierile
polimedicamentoase, etanolul, drogurile de abuz, anxioliticele, monoxidul de carbon,
asocierea alcool-medicamente, barbituricele, compuii organofosforici, benzodiazepinele,
ciupercile necomestibile i antidepresivele, iar la copil substanele caustice, benzodiazepinele,
distonocalmul, etanolul, antidepresivele triciclice, barbituricele, derivaii de petrol, ciupercile
necomestibile, drogurile de abuz, paracetamolul. Intoxicaiile copilului difer de cele ale
adolescentului i adultului prin: caracterul mai frecvent accidental, depistarea mai precoce,
toxicitatea mai mare la copil a aceleiai substane, cantitile ingerate de obicei mai mici, lipsa
frecvent a condiiilor patologice supraadugate, rspuns favorabil la tratament i capacitate
de recuperare mai mare. Mortalitatea este semnificativ mai mic la copii (0,5-2 %) fa de
aduli (aproximativ 5%). Medicamentele care determin cel mai frecvent mortalitate n
intoxicaiile acute sunt: analgezicele, antidepresivele, agenii cardiovasculari,
sedative/hipnotice/antipsihotice, anticonvulsivantele, antiastmaticele, antihistaminicele,
medicamentele coninnd fier (mai ales la copii).

Toxicologia analitic a medicamentelor
In concentraie mare, medicamentele sunt toxici organici nevolatili extrai de regul n
mediu acid. Derivaii acidului salicilic se izoleaz din mediul acid cu solveni organici.
n terapeutic se utilizeaz: salicilatul de sodiu, salicilatul de metil (Saliform), acidul
acetilsalicilic (Aspirina), salicilamida (Salizol).
COONa
OH
salicilat de sodiu
OH
COOCH
3
salicilat de metil
COOH
OCOCH
3
acid acetilsalicilic
CONH
2
OH
salicilamida

Salicilatul de sodiu, salicilamida i acidul acetilsalicilic sunt pulberi albe cristaline, cu
gust uor acid. Salicilatul de sodiu este uor solubil n ap, acidul acetilsalicilic este greu
solubil n ap (1%), dar solubil n solveni organici. Salicilamida este solubil n ap la
fierbere i n solveni organici. Salicilatul de metil este un lichid uleios, incolor, cu miros
aromatic, insolubil n ap, solubil n alcool.

Etiologia otrvirii. Intoxicaiile acute au loc cel mai frecvent cu aspirin. ntrebuinarea
ndelungat i abuziv a derivailor salicilici poate genera fenomene de intoxicaie cronic.
Intoxicaiile voluntare (sinucideri) se produc cu aspirin, cu mare frecven, n
Europa i America i cu salicilat de metil n unele regiuni din Africa i Asia.

197
Intoxicaiile accidentale propriu-zise, survin la copii, reprezentnd pn la 15% din
intoxicaiile medicamenoase n unele ri i se produc mai ales cu aspirin efervescent.
La copil, accidentele terapeutice sunt mai frecvente i mai grave i se explic prin
particularitile morfo-funcionale ale rinichiului la copil, care determin o eliminare mai
lent i mai labil. Totodat, chiar doze normale de aspirin pot provoca salicilemii crescute
la febrili i deshidratai, din cauza scderii fluxului sanguin i a pH-ului urinar, cu ncetinirea
eliminrii renale.
Derivaii salicilici sunt absorbii pe toate cile. Pe cale digestiv, absorbia are loc n
stomac i n primul segment din intestinul subire, cnd salicilaii se gsesc sub form
neionizat, liposolubil, putnd strbate membranele celulare. n intestin, salicilaii sunt
ionizai la pH alcalin, iar reabsorbia este mpiedicat. n acest mod se explic frecvena
redus a eroziunilor mucoasei intestinale, precum i mai buna tolerare a aspirinei tamponate.
n snge, ionul salicilat circul sub form liber i sub form legat de proteinele
plasmatice, ambele forme fiind n echilibru dinamic.
Dup absorbie, ionul salicilat este distribuit rapid n toate esuturile i lichidele
organismului, traversnd i bariera placentar. Hidroliza derivailor salicilici, cu excepia
salicilamidei care nu sufer hidroliz, are loc n plasm i ficat. Ionul salicilic este responsabil
de majoritatea aciunilor farmacologice, totui unele efecte ale aspirinei se datoresc capacitii
sale de a acetila proteinele.
Acidul salicilic se metabolizeaz prin: conjugare la COOH cu acidul glucuronic i cu
glicocolul i la OH cu acidul glucuronic i ntr-o mai mic msur, oxidare la nucleu cu
formare de acid gentizic.
COOH
OH
acid salicilic
CONHCH
2
COOH
OH
acid saliciluric
(acid 2-hidroxihipu

acid gentizuric



198
Salicilamida este conjugat cu acidul glucuronic i n mici cantiti oxidat la nucleu,
similar acidului salicilic.
Eliminarea renal este relativ lent i are loc prin filtrare glomerular i reabsorbie
tubular a ionului salicilat i prin secreie tubular a derivailor conjugai. Eliminarea este
favorizat de alcalinizarea urinei datorit reducerii reabsorbiei tubulare; alcalinizarea, are i
avantajul creterii eliminrii fraciunii libere, difuzibile a salicilailor.

Mecanismul de aciune
Aciunea antipiretic-analgezic, antiinflamatoare-antireumatic a derivailor salicilici i
recomand n algii de diferite origini, stri febrile, reumatism articular (acut i cronic), stri
inflamatorii diverse.
Aciunea analgezic a medicamentelor de tip aspirin se explic prin deprimarea SNC, cu
ridicarea pragului de percepere a durerii, fr a afecta cortexul i a modifica psihismul, ca
analgezicele de tip morfin.
Aciunea antipiretic se realizeaz prin influenarea centrului termoregulator, rezultnd o
pierdere crescut a temperaturii corporale prin vasodilataie cutanat i stabilindu-se un
echilibru ntre producerea i pierderea cldurii echilibru dereglat n strile febrile.
Aciunea antiinflamatoare, se realizeaz n mare msur prin inhibarea prostaglandinelor
i congenerilor acestora; acelai mecanism st la baza capacitii de antiagregant plachetar al
aspirinei datorit creia este utilizat n tratamentul i prevenirea bolilor tromboembolice.
a) Prostaglandine, prostacicline, tromboxani
Prostaglandinele (PG) sunt compui biologici activi, care conin un ciclopentan i provin
din acizii polinesaturai cu 3, 4, 5 duble legturi i 20 de atomi de carbon, ca acidul
arahidonic.






Dup natura acidului gras polinesaturat, PG se divid n seriile 1, 2, 3, seria 2 provenind de
la acidul arahidonic, precursorul PG cel mai abundent la om. Dup structura ciclului pentanic,
PG se divid n seriile A, B, C, D, E, F numite i prostaglandine primare.
Acid arahidonic
PGE
2

199
Acizii grai polinesaturai rezult prin scindarea fosfolipidelor din membranele celulare
sub aciunea fosfolipazei A
2
activat de hormoni vasoactivi ca kinina. Prostaglandinele s
formeaz prin conversia acestor acizi grai polinesaturai, cu apariia intermediar a
endoperoxizilor ciclici (-OOH n C
15
) sub aciunea ciclooxigenazei (prostaglandin
sintetazei).
Capacitatea esuturilor de a converti acizii grai nesaturai n PG variaz ntre 1% i 75%,
dar ciclooxigenaza (PG sintetaza) este prezent n toate esuturile.
Prostaglandinele nu sunt depozitate n esuturi, ci sunt eliberate imediat dup sintetizare,
ca rspuns la diferii stimuli.
Degradarea enzimatic a PG se realizeaz rapid prin patru modaliti, cea mai important
fiind oxidarea la ceton n C
15
sub aciunea prostaglandin-15 hidroxi-dehidrogenazei
(PGDH), cu formare de compui cu slab activitate biologic.
Printre inhibitorii sintezei PG se nscriu i agenii antiinflamatori nesteroizici de tip
aspirin. Ei inhib eliberarea PG din diverse esuturi, ca urmare a blocrii sintezei prin
inhibarea ciclooxigenazei (PG sintetazei).
Proprietatea de a inhiba aceast enzim este oarecum specific agenilor antiinflamatori
de tip aspirin, deoarece enzima nu este inhibat nici de corticoizii puternic antiinflamatori,
nici de iyomeri ai acidului salicilic lipsii de efect terapeutic. Inhibiia determinat de
aspirineste de tip competitiv ireversibil, n interreacia cu centrul catalitic al enzimei
intrnd n prima etap gruparea acetil, iar n etapa urmtoare, salicilatul eliberat prin
metabolizarea aspirinei.
Doza toxic de derivai salicilici prezint mari variaii individuale. Doze de 3 g/zi pot
determina fenomene toxice, n timp ce doze de 10 g/zi pot fi bine suportate. Doza toxic este
considerat 15 20 g aspirin la adult i 0,15 g/kg la copil. Doza letal de aspirin este
apreciat la 20 30 g, dar se citeaz cazuri care au supravieuit dup ingerarea a 60 g i chiar
130 g aspirin. Salicilatul de metil este cel mai toxic dintre derivaii salicilici: 4 ml (4,7 g) pot
determina moartea unui copil.
Printre reaciile adverse se nscriu manifestrile:
- digestive: greuri, vrsturi, anorexie, iritaia mucoasei gastrointestinale cu producerea
hemoragiilor digestive prin mecanisme diferite;
- neuropsihice i neurosenzoriale: euforie, bun dispoziie, agitaie psihomotorie,
cefalee, tremurturi, datorate excitrii cortexului i a centrilor subcorticali, prin efect direct
determinat de concentrarea salicilatului n celula nervoas i prin efect indirect, urmare a
epuizrii rezervelor de glucoz din esutul cerebral: hipoacuzie, zgomote n urechi, datorate
congestiei i hemoragiei la nivelul aparatului cochlear i a timpanului; reducerea cmpului
vizual, viziune colorat, consecinele vasoconstriciei vaselor retiniene;
- alergice: erupii cutanate, edeme, febr, n general benigne. La un numr restrns de
persoane, pot aprea, la cteva minute dup ingerarea unei singure pastile de aspirin,
fenomene de intoleran (hipersensibilitate) ca rinit cu secreie apoas abundent, edem
angioneurotic, urticarie, hipotensiune, colaps vasomotor.
Alte reacii adverse constau n perturbare de:

200
- Metabolisme: interferarea n metabolismul energetic cu decuplarea fosforilrii
oxidative i scderea sintezei compuilor macroergici (ATP) cu multiple consecine, ca:
alterarea permeabilitii membranare dependent de cantitatea de energie; scderea sintezei
glutaminei, glicogenului care necesit ATP; creterea compensatorie a glicolizei aerobe, a
crei energie oxidativ, transformat n energie caloric, se pierde prin tegumente. Derivaii
salicilici perturb i metabolismul glucidic, prin scderea cantitii de glicogen hepatic i
muscular; inhibarea neoglucogenezei hepatice i creterea folosirii glucozei n esuturile
periferice, determin hipoglicemie.
- Coagulare: scderea hemostazei plachetare, prin inhibarea PG sintetazei, determin
interzicerea aspirinei i medicamentelor similare la pacienii cu afeciuni hepatice grave,
hipoprotrombinemie, deficien n vitamina K, hmofilie, deoarece pot rezulta hemoragii. Din
acelai motiv, tratamentul cu aspirin trebuie oprit cu o sptmn naintea unei intervenii
chirurgicale. De asemenea, trebuie inut seama de faptul c utilizarea aspirinei n timpul
tratamentelor de lung durat cu anticoagulani orali poate declana sngerri ale mucoasei
gastrointestinale.

Simptomatologie
Intoxicaia acut cu aspirin i salicilat de sodiu se manifest prin:
- Tulburri digestive: vrsturi, arsuri epigastrice, diaree, melen;
- Modificarea echilibrului acido bazic: n faza iniial a intoxicaiei, salicilatul
stimuleaz centrii respiratori bulbari, determinnd hiperventilaie i polipnee cu alcaloz
respiratorie prin eliminare crescut de CO
2
, la care se adaug alcaloz metabolic provocat
de vrsturi. Pentru compensarea alcalozei, rinichiul elimin mari cantiti de bicarbonai de
sodiu i potasiu. n intoxicaia grav, salicilatul deprim centrii respiratori bulbari, provocnd
hiperventilaie cu acidoz respiratorie prin retenie de CO
2
, la care se adaug acidoz
metabolic determinat de acumularea de acizi organici (datorit inhibrii dehidrogenazelor
din ciclul Krebs) i de acizi fosforici i sulfuric (datorit insuficienei renale). Ionul solicitat
nu contribuie prin el nsui la acidoz, deoarece concentraia sa ionic este slab chiar la doze
toxice. n cazul salicilatului de metil, metanolul eliberat prin hidroliz nu contribuie la
agravarea acidozei, deoarece este n cantitate mic. n schimb, prin blocarea oxidrilor
celulare de ctre metanol, aprarea organismului mpotriva acidozei din intoxicaia salicilic
este sczut.
- Tulburri hidroelectrolitice (evideniate prin ionogram) : deshidratare extracelular
(pierdere de ap prin hiperventilaie, hipersudoraie, eliminare renal crescut) ;
hipernatriemie; hipopotasemie ( prin eliminarea K
+
n urin sub form de bicarbonai i prin
scderea reabsorbiei sale, datorit alterrii renale).
- Tulburri vegetative: vasodilataie cutanat cu transpiraii i hipertermie;
- Tulburri neurosenzitive: cefalee, ameeli, surditate trectoare, scderea acuitii
vizuale, fotofobie, agitaie, delir, uneori halucinaii vizuale i auditive, com cu midriaz sau
mioz.
Pot aprea complicaii: insuficien renal acut, edem pulmonar acut, hemoragii
digestive. Moartea poate surveni prin colaps cardiovascular.

201
Intoxicaia cu salicilat de metil, survenit n special la copii, nu difer mult de intoxicaia
cu aspirin. Caracteristice sunt tulburrile nervoase, hiperpneea, hiperpirexia.
n intoxicaia cu acid salicilic, predomin manifestrile digestive, datorate aciunii iritante
locale a acidului salicilic.

Determinarea salicilailor i derivailor si
Izolare. Produsul de analizat care conine derivai ai acidului salicilic se aciduleaz cu acid
clorhidric 10% i apoi se extrage de dou ori cu cte 10 ml de eter etilic. Extractele eterice
reunite se filtreaz pe Na
2
SO
4
anhidru, se evapor la sec. Reziduul se reia cu ap distilat i se
fac reacii de identificare pentru acidul salicilic.
Salicilatul de metil poate fi izolat prin antrenare cu vapori de ap.
Izolare din lichide gastrice (spltur stomacal, coninut stomacal).
25 ml lichid gastric se aciduleaz cu acid tartric la pH 4-5 i se extrage de dou ori cu 15 ml
eter etilic conform metodei Stas-Otto-Ogier. Extractele eterice reunite se filtreaz pe Na
2
SO
4

anh., i se pun la evaporare pe sticle de ceas pentru reaciile de identificare.
Izolare din urin. Se aciduleaz 25 ml urin cu 1 ml acid sulfuric 10% (pH 2-3) i se
extrag de 2 ori cu 15 ml eter etilic. Extractele eterice reunite se filtreaz pe sulfat de sodiu
anh. i se evapor la sec pentru identificare.
Izolare din corpuri delicte (resturi de medicamente). Produsul de analizat se
pulverizeaz sau se suspend n ap, dup care se aciduleaz cu acid clorhidric 10% pn la
pH 4-5 i se extrag de 2 ori cu 15 ml eter etilic sau dicloretan. Extractele eterice reunite sunt
filtrate pe sulfat de sodiu anh. i se evapor la sec, pentru identificare.
Izolarea din snge (plasm). 10 ml snge (2 ml plasm) se aciduleaz cu 0,5 ml acid
clorhidric 20% i se extrage de 2 ori cu 15 ml dicloretan. Extractul organic filtrat pe sulfat de
sodiu anh. se evapor la sec pentru identificare. Pentru punerea n eviden a ionului salicilic
se poate face o prealabil hidroliz alcalin.
Identificare.Teste preliminare:
Urina: 1. La 1 ml urin se adaug 3 picturi clorur feric 5% (proaspt preparat) cnd
apare o coloraie violet n prezena ionului salicilic.
2. La 1 ml urin se adaug 5 ml Reactiv Trinder, o coloraie violet indic prezena
ionului salicilic. Reacia este foarte sensibil.
Urin i snge: 0,5 ml urin sau plasm se trateaz cu 4,5 ml soluie azotat feric 0,55% n
acid azotic 0,04N. Apariia unei coloraii violete proporional cu concentraia soluiei indic
prezena ionului salicilic.
Reacii de culoare:
1. Soluia de analizat tratat cu Fe Cl
3
5% (proaspt preparat) d o coloraie violet, n
mediu acid, care nu dispare la adugare de alcool etilic.
Reacia se poate executa i pe hrtie de filtru.

202

OH
COOH
+FeCl
3
COO
OH
3
Fe + 3HCl


2. Soluia de analizat tratat cu ap de brom, formeaz un precipitat alb de tribrom derivat.
3. La nclzirea pe B.M. a reziduului de acid salicilic conc. se formeaz salicilat de metil cu
miros caracteristic.

OH
COOH
CH
3
OH
COOCH
3
OH
-H
2
O


4. Reacia Jasisseu: se dizolv reziduul la cald cu 2-3 ml de ap distilat, se adaug 3-4
picturi nitrit de sodiu 10% , 2 picturi acid acetic glacial i o pictur sulfat de cupru 10%.
Se fierbe 2 minute, cnd apare o coloraie roie n prezena aspirinei sau a acidului salicilic.
5. Reacia cu reactiv Trinder se poate efectua direct n urin sau pe reziduu.
La 1 ml urin (eventual diluat 1/5) se adaug 5 ml reactiv Trinder cnd apare o coloraie
violet. Fenotiazinele interfer ns numai la concentraii mari.
Cromatografie n strat subire. Reziduul se dizolv n cteva picturi aceton i se
spoteaz pe o plac cromatografic activat. Se poate face spotarea direct cu urin. Ca
sistem de migrare se folosete: acid acetic glacial: benzen: eter etilic: metanol (1,8:12:6:0,1)
sau amoniac conc. : n-butanol : ap (3,3 : 10 : 6,6).
Revelarea se face prin pulverizare cu soluie clorur feric 5% (proaspt preparat).
Se obin spoturi colorate n violet i R
f
diferite n funcie de compusul prezent n prob
(acidul acetilsalicilic, ct i metaboliii si, acidul salicilic i acidul gentizic).
Dozarea spectrofotometric (Metoda Manuelle).Ionul salicilat formeaz cu ionul feric
un complex de culoare violet clorimetrabil la = 540 nm.
3
OH
COOH
OH
COO
Fe
3
Fe
3+
- 3H
+

Reactiv Trinder: 20 g clorur mercuric se aduc ntr-un pahar Berzelius cu 425 ml ap i se
nclzete pn la dizolvare. Dup rcire se adaug 20 g azotat feric cristalizat cu 9 molecule
de ap i 60 ml acid clorhidric normal. n final se completeaz cu ap distilat pn la 500
ml. Se pstreaz timp ndelungat n sticle brune. Clorura mercuric adugat are rolul de a
precipita proteinele, care se separ prin centrifugare sau filtrare. Reactivul poate fi folosit i
pe snge.

203
Soluia etalon stoc: se cntresc 0,2320 g salicilat de sodiu i se dizolv n 100 ml ap
distilat (1 ml = 2 mg acid salicilic).
Soluia etalon de lucru: se dilueaz 20 ml soluie stoc I la 100 ml, cu ap distilat (1
ml = 400 g). Se adaug cteva picturi de cloroform pentru conservare.
Modul de lucru. La 1 ml urin (eventual diluat) sau 1 ml 1 c.r. se adaug 5 ml reactiv
Trinder, se agit puternic, se centrifugheaz. Se citete extincia supernatantului, la un
spectrofotometru, = 540 nm n cuva de 1 cm fa de o prob de referin fr salicilat.
Curba de etalonare este cuprins ntr 100 i 400 g/prob. Se calculeaz factorul de
pant mediu i apoi concentraia probei n g.
Scara etalon:

Calcul
Rezultatele se exprim n mg /100 ml snge sau mg /litru urin.
mg acid salicilic mg /100 ml snge = C/10
mg acid salicilic /1000 ml urin = C
n care "C" este concentraia n g de acid salicilic.

Interpretarea rezultatelor. n intoxicaiile acute cantitatea de acid salicilic gsit n
snge variaz ntre 20 i 100 mg%. Cantiti mai mari de 100 mg% arat o intoxicaie
salicilic foarte grav. n intoxicaii, cantitile de acid salicilic prezente n urin variaz
ntre 1-4 mg/ml funcie de diurez i tratament. n tratamente, salicilemia este de 5-20 mg%;
n intoxicaii acute uoare 25 - 50 mg%, iar n formele grave 50 - 100 mg%. Concentraia
letal este de 160 mg%.
Dozarea acidului salicilic n lichide gastrice. n cazul ingerrii de acid acetilsalicilic,
reacia cu reactiv Trinder este negativ sau slab pozitiv fr o hidroliz prealabil n mediul
alcalin.
Se iau n lucru 10 ml lichid gastric se adaug 10 ml ap distilat i 1 ml hidroxid de sodiu
40% . Se nclzete pe sit 5 minute. Se rcete la curent de ap rece dup care se ia 1 ml
hidrolizat, se adaug 4 ml ap distilat i se aduce la pH 5 cu acid clorhidric 10 %. Se agit
i se continu apoi lucrul ca la urin.



Reactivul
Eprubeta
1 2 3 4 5 6 (M)
soluie etalon
(1 ml =400 g)
conc. g
Ap distilat
Reactiv Trinder


0,2 0,4 0,6 0,8 1,0 -
80 160 240 320 400 -
0,8 0,6 0,4 0,2 - 1,0
5,0
Agitare: 10
'
repaus
= 540 nm

204
Medicamente derivate de la anilin
Substanele care conin un nucleu benzenic au, n principiu, activitate antipiretic. Deosebit de
activ este anilina ns toxicitatea sa, conferit de grupa NH
2
, o exclude din terapeutic.
Acetanilida (antifebrina), C
6
H
5
-NHCOCH
3
, cel mai vechi analgezic-antipiretic (1886) a fost
de asemenea abandonat din cauza toxicitii.
Derivaii de anilin analgezici-antipiretici sunt fenacetina (acetofenetidina) i paracetamolul
(acetaminofenul).

NHCOCH
3
OC
2
H
5
f enacetina
NHCOCH
3
OH
paracetamol


Fenacetina i paracetamolul sunt pulberi albe, cristaline, inodore, insipide sau cu gust uor
amar (paracetamolul). Sunt puin solubile n ap, solubile n alcool i cloroform.
Etiologia intoxicaiilor. Intoxicaia acut se datoreaz absorbiei masive n scop de
sinucidere sau prin confuzie. Intoxicaia cronic este urmarea absorbiei zilnice i ndelungate
a produsului sau a formelor sale medicamentoase.
Derivaii de anilin sunt absorbii rapid i complet din tractul gastrointestinal, apoi
distribuii uniform n toate esuturile. Fenacetina este metabolizat prin dezetilare la
paracetamol i mai puin, prin dezacetilare, urmat de 2-hidroxilare la p-fenetidin, respectiv
2-hidroxifenetidin i de asemenea, prin hidroxilare la nucleu, cu formare de
hidroxifenacetin. Toi metaboliii sunt conjugai cu acid glucuronic sau sulfuric.
Conjugarea paracetamolului cu glutationul este cantitativ nensemnat, ns asigur
inactivarea intermediarului reactiv, toxic, de tip chinonimin, produs prin N-hidroxilare. n
doze excesive de paracetamol, are loc depleia rezervelor de glutation, astfel nct
intermediarul toxic nu mai este inactivat prin conjugare, ci formeaz legturi covalente cu
constituienii hepatocitului, rezultnd alterarea acestuia.
Inductorii enzimatici de tip fenobarbital intensific activitatea oxidazelor cu funcii mixte
microzomiale, crescnd procentul de metabolit toxic i mrind hepatotoxicitatea
paracetamolului.
Fenacetina este analgezic, antipiretic i sedativ, iar paracetamolul are aciune
antipiretic superioar fenacetinei. Paracetamolul este antiinflamator, dar numai n doze
superioare celor necesare pentru analgezice. Aciunea antiinflamatorie redus, lipsa de iritare
gastric i neinfluenarea timpului de sngerare corespund cu slaba capacitate de a inhiba
prostaglandinele.


205

NH
2
OC
2
H
5
OH
2-hidroxi-f enetidina
NH
2
OC
2
H
5
p-f enitidina
NHCOCH
3
OC
2
H
5
f enacetina
NHCOCH
3
OH
OC
2
H
5
OH
NHCOCH
3
paracetamol
2 sau N-hidroxi-
f enacetina
conjugare
cu acid glucuronic (60%),
acid sulf uric (20-30%),
cisteina si glutation (5%)

Reaciile adverse mai frecvente sunt urmtoarele:
Alergice: erupii cutanate, hipertermie, n general benigne i trectoare, cu excepia
dermatitei exfoliative; subiecii hipersensibili la salicilai manifest alergie i la derivaii de
anilin;
-Neuropsihice: euforie, impresie de ameliorare a oboselii i a cefaleei, fapt pentru care
reparatele cu fenacetin sunt adesea ingerate fr o indicaie terapeutic expres i care
constituie un pericol prin mascarea surmenajului renal;
-Renale: tratamentul ndelungat (reumatism) poate determina nefropatia prin abuz de
analgezice. Leziunea primar este o necroz papilar urmat de nefrit cronic interstiial;

NHCOCH
3
OH
paracetamol
N
OH
COCH
3
HO
paracetamol
N-hidroxilat
oxidaze cu functii
mixte microzomiale
N
O
COCH
3
conjugare cu
glutationul
cu formare de
acid
mercapturic
legaturi
covalente cu
constituientii
celularu
N-acetil-p-benzo-
chinonimina


-Methemoglobinizante i hemolitice: fenacetina determin apariia methemoglobinei (MetHb),
sulfhemoglobinei, cianozei, anemiei hemolitice numai la doze mari. n administrare cronic,
nu apar astfel de manifestri deoarece MetHb nu se cumuleaz, ci trece n hemoglobin prin
mecanismele normale ale organismului. ntruct o doz unic de 2 g fenacetin la adult
transform numai 1-3% din Hb total n MetHb, methemoglobinemie determinat de doze

206
terapeutice de fenacetin sau paracetamol nu se exprim clinic. n intoxicaia acut sau n
abuzul cronic, methemoglobinemia poate contribui la toxicitatea general.
-Hepatice: dup o doz unic de 10-15 g de paracetamol (25 g este doza letal), apare necroz
centrolobular urmat de fibroz, dar fr ciroz; cauza este metabolitul reactiv care, n cazul
depirii capacitii de conjugare cu grupri SH formeaz legturi covalente cu constituenii
hepatocitului. Fenacetina nu este hepatotoxic, dei principalul su metabolit este
paracetamolul, deoarece cantitatea acestuia nu depete capacitatea de inactivare a sistemelor
de conjugare. Acest mecanism de producere a hepatotoxicitii a determinat cercetri pentru
gsirea unui antidot n intoxicaia cu paracetamol i s-a ajuns la concluzia c:
-cisteamina (-mercaptoetilamina) previne instalarea leziunilor hepatocelulare dac
este aplicat n doze adecvate i destul de curnd dup intoxicaie (10 ore). Cisteamina ar
aciona prin inhibarea oxidrii microzomiale - deci oprirea formrii metabolitului toxic -,prin
detoxicarea metabolitului nociv datorit gruprilor sale SH libere sau ca precursor al
glutationului. Cisteamina nu este ns lipsit de oarecare toxicitate;
-N- acetilcisteina este mai eficace i mai puin toxic dect cisteamina. Aciunea sa se
bazeaz pe hidroliza rapid la cistein. Trebuie ns ca administrarea s fie precoce (n
primele 16 ore de la intoxicaie), iar n cursul tratamentului s nu se administreze adsorbani
(crbune activ) i purgativ, deoarece acetia inactiveaz antidotul.
Simptomatologie. Dei paracetamolul este principalul metabolit al fenacetinei,
manifestrile din intoxocaiile cu cele dou medicamente sunt diferite. Intoxicaia acut cu
fenacetin se caracterizeaz prin tulburri: nervoase: ameeli, vjituri n urechi, hipotermie,
somnolen, com profund; circulatorii: hipotensiune, puls mic, tahicardie;
methemoglobinizante i hemolitice: cianoz, modificri sanguine.
Nefropatia fenacetinic apare numai n intoxicaia cronic, dup tratament ndelungat cu o
cantitate total de peste 5-6 kg fenacetin. Intoxicaia acut cu paracetamol se desfoar n
trei etape: n prima etap apar greuri, vrsturi, transpiraii, stare de ru general, somnolen;
n etapa a doua (24-36 ore de la ingerare), fenomenele din prima etap dispar; n etapa a treia
(36-48 ore), se instaleaz hepatita toxic (hepatomegalie, dureri, icter), urmate de forme grave
de com hepatic i moarte; n cazuri rare apare insuficiena renal i insuficien miocardic.
n intoxicaia acut cu fenacetin, se realizeaz: spltur gastric cu suspensie de crbune
activat, urmat de purgativ; diurez osmotic forat; tratarea methemoglobinemiei,
hipotermiei, hipoxiei, ocului.
n intoxicaia cu paracetamol, se recurge la: spltur gastric (ct mai precoce) cu
suspensie de crbune activat sau colestiramin; eventual, unul dintre antidoturile recent
experimentate (N-acetilcistein, cisteamin); tratament simptomatic.

Toxicologie analitic a medicamentelor derivate de anilin
Izolare. Fenacetina se izoleaz din mediu uor acid sau alcalin iar paracetamolul din
mediu acid, cu solveni organici. Izolare din urin, snge: se aciduleaz la pH 5-6 cu acid
acetic 5%, 20 ml urin (2 ml ser) i se extrag de dou ori cu cte 50 ml eter (cloroform).
Extractele organice reunite sunt repartizate n trei capsule i evaporate la sec pe baie de ap.

207
Reziduul dintr-o capsul este tratat cu 2 ml HCl 20% i hidrolizat pe B.M. la fierbere, apoi se
adaug 10 ml ap i se filtreaz.
Identificare. Reacii de culoare:
1. Reacia cu H
2
SO
4
i acetaldehid: reziduul din capsul este tratat cu 1 ml H
2
SO
4
i 4-5
picturi acetaldehid, cnd apare o culoare roie.
2. Reacia indofenolului: la 2 ml filtrat, se adaug o pictur de fenol 1% i 2-3 picturi
soluie de hipobromit, cnd apare o culoare roie-nchis, care n mediul alcalin trece n
albastru.
3. Reacia de diazotare i cuplare: la 2 ml filtrat se adaug 0,5 ml HCl 10%, 0,1 ml NaNO
2

1%, se agit, se las n repaus 10 minute, se adaug 2 ml uree 10%, se agit i dup 10
minute, se adaug 0,2 ml NED 0,1%, cnd apare o culoare violet.
4. Reacia cu FeCl
3
: 10 ml urin se trateaz cu 1 ml FeCl
3
1% (proaspt preparat), cnd se
obine o culoare roie virnd n brun.
Dozare. Metoda colorimetric (reacia indofenolului): dup hidroliz acid, din fenacetin i
metabolitul su urinar N-acetilparaaminofenol, rezult paraaminofenol, care n prezena
fenolului i a hipobromitului formeaz indofenol
Reactivi: HCl 4 N; NaOH 0,2 N; Fenol soluie apoas 1% proaspt preparat; Soluie apoas
de hipobromit de sodiu: se amestec 3 ml ap de brom saturat cu 20 ml soluie Na
2
CO
3
;
Soluie etalon: se cntresc 0,1 g fenacetin i se aduc cu ap la 200 ml (1 ml = 0,5 mg).
Modul de lucru: ntr-o eprubet gradat se iau 1 ml urin, 1 ml ap distilat i 4 ml HCl 4 N.
Se fierbe pe baie de ap la 100
0
C timp de 45 minute. Se rcete i se aduce la 10 ml cu ap
distilat. Din aceast soluie-hidrolizat de urin- se ia 1 ml, se adaug 8 ml NaOH 0,2 N, 1 ml
fenol 1% i 1 ml soluie hipobromit. Se las la ntuneric 30 minute, apoi se citete extincia n
cuv de 1 cm la =630 nm fa de o prob oarb. n condiii identice se execut o scar etalon
cu concentraii cuprinse ntre 100-500 g/prob (0,2-1 ml soluie etalon completat la 1 ml cu
ap distilat).

Determinarea meprobamatului
Izolare. Meprobamatului se izoleaz din soluie apoas acid cu solveni organici(eter,
diclormetan, cloroform). Se mai poate izola i din mediu neutru i alcalin la pH = 10.
Izolare din mediu acid cu eter. Se aciduleaz 20 ml urin (lichide gastrice), ntr-o plnie de
separare, cu acid clorhidric concentrat pn la pH = 4 i extrage de dou ori cu cte 2o ml
eter. Extractele eterice reunite sunt splate cu 20 ml ap distilat, filtrate pe sulfat de sodiu
anhidru i evaporate la sec.
Izolarea din mediu acid cu diclormetan sau cloroform. 10 ml urin (2 ml ser) se aciduleaz la
pH 4 cu acid clorhidric concentrat i se extrage ntr-o plnie de separare cu 20.30 ml
diclormetan (agitnd 10-15 minute). Se separ faza organic, se spal de dou ori cu cte 15
ml ap distilat. Faza organic este filtrat pe sulfat de sosiu anhidru i se evapor la sec.
Izolarea din mediul alcalin cu diclormetan sau cloroform. 10ml urin (2 ml ser) se
alcalinizeaz la pH 10 cu amoniac 10% se extrage de dou ori cu cte 20 ml cloroform.
Extractele reunite se spal cu 20 ml ap distilat, se filtreaz pe sulfat de sodiu anhidru i se
evapor la sec.

208
Identificare. 1. Reacii de culoare i fluorescen prin reacia Nadeau- Sobolewski: se
trateaz reziduul cu 0,3 ml ap distilat, cu civa cristale de hidrochinon i 3 ml acid
sulfuric concentrat, cnd apare n maxim 5 minute, prin expunere n lumin U.V. (366 nm), o
fluorescen roz-oranj. n cazul extractului din lichidul gastric este obligatorie meninerea
soluiei timp de 15 minute pe baie de ap la100 C.
Reacia cu acid sulfuric: se nclzete reziduul pe baia de ap cu acid sulfuric concentrat,
timp de 10 minute, cnd prin expunere n lumina UV (366 nm) se observ o fluorescen alb -
verzuie, caracteristic.
Reacia Hyndrickx: se reia reziduul cu 1,5 ml aceton, la care se adug imediat 0,1 ml acid
sulfuric concentrat. Se agit cu o baghet pentru a uura dizolvarea i omogenizarea. Se
adaug 0,1 ml furfurol 1% n aceton (preparat extemporaneu) i se imprim capsulei o
uoar micare de rotaie. Se las n repaus cteva minute cnd apare pe pereii capsulei i
deasupra fazei lichide, un inel discontinuu, intens colorat violet. Nu se iau n considerare
inelele verzi, brune sau cenuii.
Identificare din forme farmaceutice: pulverizeaz comprimatul i se trituraz cu 5 ml alcool.
Se filtreaz; 2 ml filtrat se evapor la sec ntr-o capsul de sticl. Se rcete. Se adaug 2 ml
para-di-meti-benzaldehid 10% n acid sulfuric concentrat (preparat extemporaneu). Se
omogenizeaz cnd apare o culoare galben. Se menine capsula 3 minute pe baia de ap la
fierbere, cnd apare culoarea vireaz la rou. Se rcete n ap cu ghea i se adug cu
pictura, 2 ml ap distilat rcit la ghea cnd culoarea tece n albastru violet.
Cromatografie n strat subire.Faza staionar: silicagel G Merck. Faza mobil: a. ciclohexan:
etanol (8 : 2 v/v); b. cloroform: metanol (9 : 1 v/v); c. metanol : amoniac 12 N (9 : 1 v/v); d.
n butanol : amoniac (9 : 1 ).
Proba de analizat : reziduul se dizolv n 0, 2 0,5 ml metanol. Martorul: meprobamat de
metanol.
Revelarea: uscarea cromatoplcii 15 minute la 70 C i pulverizarea cu furfurol 1% n
aceton (preparat extemporaneu) apoi cu acid sulfuric 4 % n aceton. Apar spoturi violete,
ns n reacie interfer fenotiazinele.
Pulverizarea cu hidrochinon 2% n acid sulfuric concentrat i uscare 20 30 minute 70 C,
apoi expunere la UV cnd apar spoturi fluorescente, roz.













209
Determinarea medicamentelor pe baz de para-aminofenol

HN CO CH
3
O C
2
H
5
Fenacetina
HN CO CH
3
OH
Paracetamolul



Izolare. Fenacetina se izoleaz din mediuu uor acid sau alcalin, iar paracetamolul din mediu
acid , cu solveni organici (eter etilic, diclor etan i cloroform).
1. Izolare din urin i snge: se aciduleaz 20 ml urin (2 ml ser) cu acid acetic 5% la pH 5-6
i se extrag de dou ori cu cte 50 ml cloroform (eter). Extractele organice reunite sunt
repartizate n capsule i evaporate la sec. Reziduul obinut este tratat cu 2 ml acid clorhidric
20% i hidrolizat pe baia de ap, la fierbere, timp de 15 minute. se adaug 10 ml ap i se
filtreaz. Identificarea se execut att reziduu, ct i pe filtrat sau direct pe urin.
B. Identificare
1. Reacii de culoare
- Fenacetina
a. Test preliminar: se adaug la 2 ml urin acidulat cu acid clorhidric 10%, 3 picturi nitrat
de sodiu 1% i 3 picturi soluie alfa-naftol 1% n hidroxid de sodiu 10% (preparat
proaspt). n prezena paracetamolului- metabolit al fenacetinei se dezvolt o culoare roie.
b. Reacia cu clorur feric: se adaug la 2 ml filtrat o pictur de fenol 1% i 2-3 picturi de
hipoclorit de sodiu 5% sau cloramin B 4%, cnd apare o culoare roie- violet, care n
mediu alcalin trece n albastru.
d. Reacia cu acid sulfuric i acetaldehid: se trateaz reziduul cu 1 ml acid sulfuric
concentrat i 4-5 picturi acetaldehid cnd se dezvolt o culoare roie.
c. Reacia indofenolului: se adaug la 2ml filtrat o pictur de fenol 1% i 2-3 picturi de
picturi de hipoclorit de sodiu 5% sau cloramin B 4%, cnd apare o culoare roie-violet,
care n mediu alcalin trece n albastru.
d. Reacia cu acid sulfuric i acetaldehid: se trateaz reziduul cu 1 ml acid sulfuric
concentrat i 4-5 picturi acetaldehid cnd se dezvolt o culoare roie.
e. Reacia de diazotare i cuplare: se adaug la 2ml filtrat, 0,5 ml acid clorhidric 10% i 0,1
ml nitrat de sodiu 1%. Se agit i se las n repaus 10 minute, dup care se adaug 2 ml uree
10%, se agit i dup 10 minute se adaug 0,2ml N-naftiletilendiamin (NKD) 0,1% cnd
apare oculoare violet. Reacia se preteaz i pentru dozare.

210
f. Reacia cu bicromat: se trateaz 1 ml filtrat cu 2-3 picturi bicromat de potasiu 5%, cnd se
dezvolt o culoare roi ribinie. n aceleai condiii, acetaldehida d o culoare galben, care
vireaz n verde.
- Paracetamol
a. Reziduul reluat cu 2-3 picturi clorur feric 1% d o culoare verde-albastr.
b. Reziduul tratat cu acid clorhidric 10% pentru hidroliz acid, d la adugare de bicromat
5% o culoare violet ce nu trece n rubiniu (reacia de difereniere de fenacetine).
c. Reziduul tratat cu 1-2 picturi acid sulfuric concentrat i 1-2 picturi alcooletilic, degaj la
fierbere, un miros specific de acetat de etil.
d. Reziduul tratat cu reactiv Liebermann (0,6 g azotit de potasiu 10 ml acid sulfuric conc.) se
obine o culoare galben.
2. Identificarea din corp delict (resturi de medicamente)
Se fierbe 0,1 g substan cu 1 ml acid clorhidric concentrat timp de 3 minute. Se dilueaz la
10 ml cu ap, se rcete, se filtreaz i se adaug o pictur bicromat de potasiu 0,1 N. n
prezena fenacetinei apare o culoare violet, care trece n rou-rubiniu, iar n prezena
paracetamolului, se dezvolt lent o culoare violet care nu vireaz n rou.
3. Cromatografia n strat subire (tehnica Bologh)
La 25 ml urin se adaug 10 g clorur de sodiu (pentru obinerea extragerii) i se aduce cu
hidroxid de sodiu 10% la pH 9. Se extrage de 3 ori cu cte 30 ml eter cu adaus de 1,5%
alcoolizoamilic. Fazele eterice se evapor la sec. Se reia reziduul cu 1 ml etanol. Se spoteaz
10 g din soluia etanolic, alturi de martori soluii etenolice de fenacetin, paracetamol,
p-fenetidin. Sistemul de migrare folositeste: cloroform : benzen : aceton (65 : 10 : 25).
Revelarea se ealizeaz prin: expunere 10 minute la vapori de iod, apoi pulverizarea cu iodur
de potasiu soluie 10% n amidon, cnd apare spoturi albastre violet; pulverizare cu soluie
clorur feric fericianur de poasiu (3 g : 0,15 g dizolvate n 30 ml ap), cnd apar spoturi
albastre violet pe fond albastru deschis. Rf-urile sunt: 0,81fenacetin; 0,41 paracetamol;
0,91 p-fenetidin.
Pentru diferenierea fenacetinei de fenazon, aminofenazon, acetanilid, se folosete
unsistem de migrare; aceton : cloroform (1 : 9). Relevarea se realizeaz prin pulverizarea cu
clorur feric 5% n aceton; dup nclzire uoar, apar spoturi roii-violet pe fond galben.
C. Dozarea
Metoda spectrofotometric (reacia indofenolului)
Principiu:
Dup hidroliz acid, din fenacetin i paracetamol (metabolitul su urinar) rezult p-
aminofenol, care n prezena fenoluluii a hipocloritului, formeaz indofenolul de culoare
albastr ce se spectrofotometreaz la = 550 nm n cuva de 1 cm fa de martor.

HO NH
2 + OH
2NaClO
-2NaCl
-2H
2
O
HO N O




211
Reactivi:
1. Acid clorhidric 4 N
2. Hidroxid de sodiu 0,2 N
3. Fenol soluie apoas 1 % (proaspt preparat)
4. Soluie apoas de hipoclorit de sodiu (se amestec 3 ml ap de clor saturat cu 20 ml
soluie carbonat de sodiu (2,2 g carbonat de sodiu anhidru la 20 ml ap).
5. Soluie standard: se aduc 0,1 g fenacetin la 200 ml cu ap .
1 ml = 500 g fenacetin.

Modul de lucru
ntr-o eprubet gradat se iau: 1 ml urin, 1 ml ap i 4 ml acid clorhidric 4 N. De fierbe pe
baia de ap la 100C timp de 45 minute i se aduce cu ap la 100 ml. Din aceast soluie
hidrolizat de urin se ia 1 ml, se adaug 8 ml hidroxid de sodiu 0,2N, 1 ml fenol 1% i 1 ml
hipoclorit. Se las la ntuneric 30 minute. Se citete extincia la spectrofotometru, la = 630
nm, n cuva de 1 cm, fa de un martor.

Curba de etalonare se ntocmete ntre 100 i 500 g/prob.

Eprubeta
Reactivi(ml) 1 2 3 4 5 6(M)
Standard de lucru 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 -
500 g/fencetin/ml 100 200 300 400 500 -
Ap distilat 0.8 0.6 0.4 0.2 - 1.0
Acid clorhidric 4N 4.0
Se fierbe 45 pe BM. Se rcesc
Hidroxid de sodiu 0.2N 1.0-agitare
Fenol 1% 1.0-agitare
Hiploclorit de sodiu 1.0-agitare, 30 minute la ntuneric
Extincia =630nm

Valoarea extinciei pentru prob se raporteaz la curba etalon, apoi se nmulete cu 10
(deoarece s-a lucrat cu 1/10 din prob) obinndu-se concentraia C a fenacetinei n g/prob.
Calcul
Rezultatele se exprim n mg fenacetin/litru urin.
mg fenacetin/litru urin = C
n care:
C = concentraia fenacetinei, n g.







212
Bibliografie
Cotru, M. Toxicologie-principii generale, Ed. Junimea, Iai, 1978.
Cotru, M. Toxicologia substanelor organice, Bucureti, Ed. Ministerul Industriei Chimice,
1985.
Cotru, M., Proca, M. Toxicologie analitic, Bucureti, Ed. Medical, 1988.
Cotru, M., Popa, L., Stan, T., Preda, N. Toxicologie, Bucureti, Ed. Didactic i pedagogic,
1991.
Dnil, G., Cotru, M., Nechifor, M. Ghid de date toxicologice, Bucureti, Ed. Medical,
1984.
Drochioiu, G., Mangalagiu, I., Dru, I. Elemente de teorie i practic toxicologic, Iai, Ed.
Demiurg, 2001.
Drochioiu, G., Mangalagiu I., Dru I. Biochimie general, Iai, Ed. Demiurg, 2002.
Gofi, E., Ionic, F. Toxicologia medicamentului, Craiova, Ed. Medical Universitar, 2007.
Ionescu, D., Drgan, S., Dehelean, C. Elemente de toxicologie a medicamentului, Timioara,
Ed. Mirton, 2007.
Stroescu, V. Farmacologie, Bucureti, Ed. Big All, 1999.
Voicu, V. Toxicologie clinic, Bucureti, Ed. Albatros, 1997.


























213
Cap. XII Probleme speciale: otrviri diverse

Sulfura de carbon, CS
2

Sulfura de carbon este o substan volatil (p.f. 46
o
C), incolor, cu miros eterat Este
inflamabil, exploziv, insolubil n ap, miscibil n solveni organici.
Toxicocinetic. Sulfura de carbon ptrunde n corp pe cale respiratorie i, uneori,
transcutanat i digestiv. Din cantitatea inhalat, marea majoritate se elimin respirator, restul
este vehiculat de hematii i distribuit n esuturile grase. Majoritatea sulfurii de carbon
absorbite este metabolizat la compui organici i anorganici cu sulf.
Toxicodinamie. Aceast substan acioneaz asupra sistemului nervos i a
metabolismului. Sulfura de carbon acioneaz ca antimetabolit al piridoxaminei, cu formare
de compui ditiocarbamici, ceea ce explic deficiena n vitamina B
6
n intoxicaiile cu aceast
substan (fig. 15). Carena n vitamina B
6
determin scderea formrii acidului nicotinic din
triptofan, sinteza fiind deviat spre derivai xanturenici. Acidul nicotinic este un component al
coenzimelor NAD i NADP, astfel nct sunt perturbate respiraia celular, glicoliza, sinteza
acizilor grai, dependente de aceste coenzime. Sulfura de carbon reacioneaz cu gruprile
NH
2
proteice, rezultnd derivai ditiocarbamici i tiazolidone, chelateaz Zn, Mn, Cu, Mg,
Co, inhibnd enzimele crora aceste metale le servesc drept cofacturi, cu dereglarea
consecutiv a unor metabolisme. Doza letala este de 10 ml, iar doza toxic prin inhalare 2-3
mg/l.
Simptomatologie. n intoxicaia acut se produce beia sulfocarbonic i apar
manifestri neuropsihice (agitaie, halucinaii, delir), apoi stupoare, com i moarte.
Intoxicaia subacut prezint cefalee, oboseal, urmate de psihoz maniaco-depresiv
(impulsivitate, accese de furie, insomnie, halucinaii, depresiune). Intoxicaia cronic se
manifest prinsindrom astenovegetativ urmat de lezarea organic a SNC cu manifestri de tip
encefalopatie toxic i/sau polinevrit senzitivo-motorie; uneori este afectat nervul optic. Mai
apar simptome digestive, endocrine (suprarenale, gonade), vasculare (ateroscleroz cerebral
i renal).
Contactul pielii cu sulfura de carbon poate provoca iritaii i uneori chiar forme de
leziuni eczematoase.
Primul ajutor const n splatur gastric cu suspensie de crbune i purgativ salin, iar
la inhalare i contact, decontaminare prin splare cu ap i oxigenoterapie i/sau respiraie
artificial.
Toxicologie analitic. Sulfura de carbon se recolteaz din aer n soluii alcoolice de
amine secundare. Din medii biologice, se antreneaz cu vapori de ap sau cu un curent de aer
i fixare n soluie alcoolic de amine secundare. Identificarea se realizeaz prin formarea
xantogenatului cupros galben, sau prin reacia cu amine secundare (formare de ditiocarbamat
cupric galben), care se preteaz i la dozare. La persoanele expuse, se cerceteaz
dietilditiocarbamaii, metabolii ai CS
2
prin testul iodazidei (acest compus catalizeaz reacia
de reducere a iodului de ctre azida de sodiu).
Se mai pot utiliza tuburi Drger special calibrate pentru CS
2
.


214















Detergenii

Detergenii sunt substane tensioactive ce conin n molecul un fragment hidrofil i unul
hidrofob. Interes toxicologic major prezint detergenii cationici (DL
50
= 0,05 0,50 g/kg),
urmai de detergenii anionici (DL
50
= 2 7 g/kg), n timp ce detergenii neionici sunt practic
netoxici (DL
50
= 50 g/kg).
Detergenii cationici pot determina colaps (aciune ganglioplegic) i paralizie
respiratorie (aciune curarizant). Fiind substane tensioactive, detergenii faciliteaz absorbia
digestiv sau cutanat a substanelor insolubile, favoriznd producerea efectelor toxice
(cancerigene) ale acestora. Primul ajutor const n spltur gastric i purgativ salin.
Antidotul pentru detergenii cationici const ntr-o soluie de spun, 5 g n 20 ml ap, apoi
provocare de vrsturi.
In laboratoarele de chimie, biochimie, biologie i toxicologie se lucreaz curent cu
lauril sulfat de sodiu, SDS, care poate provoca intoxicaii grave i chiar deces.

Anilina, C
6
H
5
NH
2


Anilina este un lichid incolor, uleios, care devine galben pn la brun la aer i la lumin. Are
un miros puternic, caracteristic. Este puin solubil n ap, dar solubil n solveni organici.
Concentraia maxima admisibil este de 5 mg/m
3
aer.
Toxicocinetic. Anilina ptrunde n organism respirator, transcutanat i digestiv. Dup
absorbie, se distribuie n esuturile lipoide. Se metabolizeaz prin oxidare la
fenilhidroxilamin, care se izomerizeaz parial la p-aminofenol, excretat urinar ca sulfo- i
glucuronoconjugat. Faptul c biotransformarea anilinei conduce la metabolii comuni cu ai
nitrobenzenului explic efectele toxice asemntoare ale celor dou substane. O fraciune din
anilin se N-acetileaz.
+
Efecte toxice ale sulfurii de carbon (inhibarea
piridoxaminei si reactia cu grupele NH
2
proteice)
S
C
S
HO-H
2
C
N
OH
CH
3
CH
2
NH
2
S
C SH
HO-H
2
C
N
OH
CH
3
CH
2
NH
Piridoxamina
Ditiocarbamat
S
C
S
+
R CH NH
2
C=O
OH
S C
R CH NH
C=O
OH SH
S
C
R CH NH
O=C
O
S
H
2
+
Efecte toxice ale sulfurii de carbon (inhibarea
piridoxaminei si reactia cu grupele NH
2
proteice)
S
C
S
HO-H
2
C
N
OH
CH
3
CH
2
NH
2
S
C SH
HO-H
2
C
N
OH
CH
3
CH
2
NH
Piridoxamina
Ditiocarbamat
S
C
S
+
R CH NH
2
C=O
OH
S C
R CH NH
C=O
OH SH
S
C
R CH NH
O=C
O
S
H
2

215
Toxicodinamie. Anilina se caracterizeaz prin aciune methemoglobinizant,
hemolitic i neurotoxic. Se admite i o aciune cancerigen la nivelul vezicii urinare, care
ns s-ar datora n special impuritilor (benzidina i -naftilamina). Local, anilina este iritant
i necrozant: doza letal este de 1-2 g.
Simptomatologie. n otrvire se observ aceleai manifestri ca la nitrobenzen:
cianoz i consecinele hipoxiei (cefalee, greuri, vrsturi, confuzie, vertije, dezorientare,
somnolen, stupoare, com). n plus apare iritaia cilor urinare i a vezicii. n cazurile grave
intervin tulburri cardiovasculare, insuficien renal acut i moarte prin stare de oc.
Intoxicaia cronic se exprim prin tulburri neurovegetative i afectare hepato-renal.
Primul ajutor. La ingerare se aplic spltur gastric cu soluie de KMnO
4
1/10000,
apoi purgativ salin; n rest, msurile indicate la nitrobenzen. Profilaxia presupune msurile
generale de protecie.
Toxicologie analitic. Anilina se determin din aer (recoltare n HCl diluat sau H
2
SO
4

0,01 N) i medii biologice
(distilare sau antrenare cu vapori de ap n mediu alcalin i extragere cu solveni organici).
Identificarea se face prin reacia Hoffmann (ca izonitril), reacia moveinei (cu hipoclorit),
reacia Jacquemin (cu fenol i hipoclorit) sau prin reacia de diazotare i cuplare. Se dozeaz
prin reacia Jacquemin. De asemenea, se poate folosi metoda spectrofotometric cu cloramin
T i fenol cnd se obine o coloraie albastr a crei intensitate este proporional cu cantitatea
de anilin din prob. Pentru dozare, se mai face apel la metoda titrimetric cu soluie bromat-
bromur.

Nitrobenzenul, C
6
H
5
NO
2

Nitrobenzenul este un lichid uleios, d = 1,2, glbui, cu miros de migdale amare, volatil (p.f.
211
o
C), puin solubil n ap, solubil n solveni organici. Concentraia maxim admisibil este
de 5 mg/m
3
aer.
Toxicocinetic. Nitrobenzenul ptrunde n organism respirator, transcutanat i, rareori,
digestiv. Este metabolizat la nitrozobenzen, fenilhidroxilamin i anilin sub aciunea
reductazelor NADH- i NADPH-dependente microzomiale, hidroxilare la nucleu conducnd
la compui fenolici in echilibru cu p-chinonmonooxima i p-chinonimina.
Din cantitatea absorbuit, 50% se elimin pulmonar nemodificat, 25% urinar ca p-aminofenol
i p-nitrofenol, ambii sulfo-i glucuronoconjugai.
Toxicodinamie. Principalele aciuni toxice ale nitrobenzenului i metaboliilor si
sunt:
Aciunea methemoglobinizant (methemoglobina se obine prin oxidarea Fe
2+
din
hemoglobin la Fe
3+
). n mod normal, n organism exist un echilibru ntre MetHb existent
n concentraie de 2 % raportat la Hb total) i Hb. Reconversia MetHb la Hb necesit donori
de electroni, prin care Fe
3+
trece n Fe
2+
:

MetHb
Hb
+e
e

216




Aceti donori sunt :
Glicoliza
Ciclul oxidativ pentozic
NADH
NAD
+
NADPH
NADP
+
G-SH
G-S-S-G
Diaforaza MetHb-reductaza (II)
+e
MetHb
Hb
(Fe
3+
) (Fe
2+
)
e
Actiune
direct
Actiune prin
metaboliti
Substante oxidante
(medicamente sau toxice)
Echilibrul methemoglobin-hemoglobin
Glicoliza
Ciclul oxidativ pentozic
NADH
NAD
+
NADPH
NADP
+
G-SH
G-S-S-G
Diaforaza MetHb-reductaza (II)
+e
MetHb
Hb
(Fe
3+
) (Fe
2+
)
e
Actiune
direct
Actiune prin
metaboliti
Substante oxidante
(medicamente sau toxice)
Echilibrul methemoglobin-hemoglobin



NADP (format n cursul glicolizei) trece un e

pe MetHb prin intermediul acceptorului

diaforaza;
NADPH (format n cursul oxidrii glucozei pe calea untului pentozic) trece un e

pe MetHb prin intermediul acceptorului MetHb-reductaza;
Glutationul redus (G-SH) transform H
2
O
2
(prezent n mici cantiti n hematii) n H
2
O;
altfel, H
2
O
2
n exces ar oxida Hb la MetHb.









217

























n prezena oxidanilor, acestea desprind un e

i trec Fe
2+
n Fe
3+
cu o vitez care
depete capacitatea de reducere a donorilor de electroni; ca urmare, apare
methemoglobinemia. Hb este transportor de oxigen, deoarece formeaz cu acesta HbFe
2+
O
2

(oxiferohemoglobin). Dimpotriv, MetHb nu este transportor de oxigen, deoarece formeaz
HbFe
3+
OH (hidroxiferihemoglobina) unde a treia valen a fierului este blocat cu gruparea
OH i, n consecin, apar hipoxemie i hipoxie.
Aciunea hemolitic: la methemoglobinemie masiv se produce liza hematiilor, cu
eliberarea Hb n stroma globular i trecerea ei n plasm. Hb plasmatic nu transport
oxigenul i este nefrotoxic (precipit n tubiirenali). Datorit afinitii pentru proteine,
fenilhidroxilamina (i, posibil, i ali intermediari din biotransformarea nitrobenzenului)
degradeaz ireversibil Hb prin desprinderea hemului, denaturarea globinei (prin reacie cu
gruprile SH i S-S) i ncorporeaz un atom de sulf n ciclurile pirolice ale hemului; apar
sulfhemoglobina i verdoglobina.
Aciunea neurotoxic (deprimarea SNC) se datoretenitrobenzenului (liposolubil) i
anoxiei determinate de methemoglobinemie.
Biotransformarea nitrobenzenului (dup Bedeleanu si Kory)
NO
2
NO
NHOH NH
2
Nitrobenzen Nitrozobenzen
Fenilhidroxil-
amin?
Anilin?
NO
2
NO NH
2
OH
OH
OH
p- nitrofenol p- nitrozofenol p-aminofenol
NHOH
O
O
NH
Reducere
p-chinonmonooxima
p-chinonimina
Oxidare

218
Aciunea cardiotoxic se manifest asupra fibrei miocardice i a sistemului de
conducere i se explic prin afinitatea fenilhidroxilaminei pentru proteinele tisulare, ca i prin
anoxie.
Aciunea hepatotoxic se explic prin afinitatea metaboliilor nitrobenzenului pentru
proteinele tisulare.
Aciunea iritant i sensibilizant prin delipidare, rezultnd dermatoze i aciune
indirect alergic (prin metaboliii cu afinitate pentru proteine) asupra tegumentelor i
mucoaselor respiratorii, determinnd reacii alergice cutanate i respiratorii. Doza letal la
ingerare este de 1-2 g.
Simptomatologie. Intoxicaia acut se exprim clinic prin cianoz datorit
methemoglobinemiei. Dac MetHb depete 15%, se remarc cianoza extremitilor. La 15-
40% MetHb intervine anoxia (cefalee, ameeli, dispnee). Peste 40% MetHb apar anxietate,
astenie, greuri, tahicardie, tulburri audio-vizuale i de echilibru. Peste 75% MetHb se
instaleaz depresiunea central, cu deces practic inevitabil. Tardiv, dac victima
supravieuiete, se manifest consecinele hemolizei (nefropatie tubulo-renal, icter hemolitic,
anemie hemolitic). La ingerare apar i tulburri digestive. Contactul cutanat dertermin
dermatoze. Intoxicaia cronic se manifest prin tegumente palide, sindrom astenovegetativ,
tulburri digestive, afectare hepatorenal.
Primul ajutor const n spltur gastric cu suspensie de crbune, urmat de purgativ
salin. La inhalare, se face apel la splare abundent cu ap i oxigenoterapie. Se administreaz
albastru de metilen.
Toxicologie analitic. Nitrobenzenul se cerceteaz din aer sau medii biologice
(antrenare cu vapori de ap n mediu de acid tartric i extragere cu eter, apoi reducere cu Zn i
HCl la anilin, eliberarea anilinei-baz prin alcalinizarea mediului i identificarea/dozarea
acesteia.
Nitrobenzenul se mai poate determina polarografic i spectrofotometric, prin reacia de
formare a unui azoderivat de culoare portocalie, folosind ca reactiv de cuplare N-(1-
naftiletilendiamina)-hidrocloric..
Din urin, se extrage metabolitul conjugat cu eter, dup hidroliz.
Methemoglobina se determin prin dozarea ei pe baza absorbiei caracteristice la 630
nm, apoi se transform MetHb n cianmethemoglobin (CNMetHb) i se msoar absorbia
acesteia de asemenea la 630 nm. n paralel se dozeaz Hb total prin tratare cu fericianur i
apoi transformare n CNMetHb.










219

Cap. XIII. Toxicologul ca martor expert

Toxicologul criminalist este adesea chemat s depun mrturie n instan cu privire la
constatrile sale analitice i la interpretarea lor. Dei puini toxicologi au o diplom medical,
acetia stabiliesc frecvent n instan efectele drogurilor sau a otrvurilor asupra organismului
uman. Cnd este ntrebat cu privire la constatrile sale analitice, toxicologul trebuie s arate n
primul rnd c el a pstrat toate probele analizate. Acesta trebuie s declare n scris c toate
probele au fost recoltate de la victima la care se face referire n proces i c probele au fost
stocate nainte, n timpul i dup analiz ntr-un mod care a mpiedicat persoane neautorizate
s le manipuleze fraudulos.
Toxicologul trebuie s fie bine familiarizat cu principiile, procedurile i limitele
testelor pe care le realizeaz. Interpretarea lui trebuie s reflecte cunoaterea literaturii de
specialitate, precum i propria sa experien cu cazuri similare. Dei poate c nu este de acord
cu ali experi n domeniu, toate concluziile sale trebuie s se bazeze pe cunotine tiinifice
sau medicale solide. Ca i n cazul tuturor martorilor experi, toxicologul criminalist trebuie s
prezinte toate dovezile cu onestitate i integritate. Dac el nu cunoate rspunsul corect la o
ntrebare, acesta trebuie s rspund c nu tie.
Prezentarea de dovezi fizice n instan de ctre un expert este testul final de valabilitate a
probelor. Concluziile trase de expert trebuie s ndeplineasc standardele riguroase ale
dovezilor tiinifice i s reziste la o examinare ncruciat a avocatului la proces. Dovezile
fizice i concluziile tiinifice trebuie explicate juriului ntr-un mod uor de neles pentru a se
putea ajunge la un verdict ntr-un caz anume. De aceea, expertul criminalist trebuie s
cntreasc imparial toate datele acumulate i, dac este convins sau nu de vinovia
inculpatului, s prezinte doar fapte i concluzii valide n instan. Altfel, probele sale pot fi
puse la ndoial, iar valoarea sa ca expert va scade.

Inducerea mrturiei la un suspect
n multe cazuri, prezintarea de informaii faptice bazate pe probe fizice unui individ bnuit de
crim, cum ar fi sngele victimei identificat pe hainele sale sau amprente gsite pe o arm, l
va determina s recunoasc implicarea ntr-o crim. Acelai lucru se poate ntmpla dac
asupra sa au fost gsite droguri sau substane toxice interzise. In principiu, foarte muli
infractori regret faptele, doresc s se despovreze de zbuciumul sufletesc, mai ales dac sunt
la prima abatere. Teama de pedeaps sau de necunoscut i poate determina s-i amne
mturia. De aceea, dovedirea acestora este foarte important i pentru simplificarea procesului
de justiie. Pe de alt parte, unele persoane care nu au comis fapte penale recunosc vinovii
nchipuite pentru a scpa de teama unei pedepse mai mari. In acest caz este meritul
criminalitilor de a-i exonera de vin aducnd dovezi clare ale nevinoviei acestor persoane
i ndreptnd ancheta ctre adevraii fptai.
Pot fi gsite dovezile fizice c o persoan nu a comis o crim. Un exemplu de acest tip de
dovezi ar fi prezena ADN-ului in lichidul seminal din probe vaginale la o victim a unui
violul, care nu se potrivete suspect.

220
Documentare i valorificarea datelor

Calitatea dovezilor fizice aduse n instana de judecat depinde de buna observare,
documentare, de colectare, conservarea, ambalarea i de prelevarea probelor la locul crimei,
precum i de la victim i suspect. Acest lucru edepinde de calificarea i meticulozitatea de
anchetatorilor locul crimei, a detectivilor i patologilor implicai n caz, precum i de calitatea
metodelor tiinifice utilizate de ctre toxicologii medico-legali. Acest lucru este realizat prin
instruirea corespunztoare i experiena anchetatorilor i examinarea tiinific a probelor
fizice n laborator. Pstrarea dovezilor fizice trebuie s se menin pe parcursul ntregului
proces, inclusiv analiza i stocarea ulterioar. Acest lucru este necesar pentru a asigura
admisibilitatea probelor fizice n cadrul procedurilor judiciare i la procesul de acuzat. Mai
mult, probele fizice pot fi solicitate pentru contraexpertiz i, dac nu sunt corect conservate,
etichetate, ambalate, pot conduce la alte concluzii.
Este necesar s se menin relaia dintre dovezile fizice nainte de colectare i de
ambalare de la locul crimei. Astfel, se realizeaz fotografii, note scrise, i diagrame care arat
unde erau obiectele incriminate. Suspectul consumator de droguri poate prezenta urme de
injecii, poate avea contuzii etc. Ambalajele trebuie s fie corespunztoare i etichetate, iar
toxicologul s nu introduc accidental alte elemente la locul faptei. Trebuie luate msuri
pentru a nu modifica, denatura sau contamina dovezile nainte de analiz. Elementele
colectate ar trebui marcate cu un numr secvenial, raportat la locul specifice n care a fost
descoperit notnd ora i data i parafat de ctre persoana colectarea probelor. Materiale cu risc
biologic, cum ar fi sngele i fluidele corpului, ar trebui plasate n containere marcate n mod
clar. Protocoalele de colectare a probelor i de ambalare ar trebui respectate cu strictee. De
exemplu, materialele ptate de snge ar trebui uscate bine la aer, nainte de ambalare. Aceasta
evit activitate bacterian care ar putea mpiedica analize ulterioare. Containere speciale sunt
necesare pentru colectarea de urmelor de prob pentru a evita pierderea i contaminarea. O
bun comunicare ntre laborator i tehnicienii de la scena crimei este esenial pentru a se
asigura c procedurile standard sunt respectate.

Probleme teoretice speciale n toxicologia judiciar

n mod normal, n cadrul biologiei moleculare actuale, se studiaz numai aciunea toxicilor la
nivel molecular, la fel cum se studiaz substanele chimice din natur fr a le raporta la
legturile acestora cu mediul nconjurtor. Toxicii prezint ns efecte i asupra structurilor
supramoleculare i a nivelurilor superioare celui molecular. Structura energetic a corpului
viu poate fi afectat prin simpla prezen a unei substane, aa cum, de pild, este afectat un
aparat electronic atunci cnd introducem obiecte metalice n acesta; nu conteaz compoziia i
reacia chimic a componentelor sale cu circuitele electrice, ci doar modificarea configuraiei
circuitelor.
Substanele strine corpului prezint structuri i proprieti diferite i sunt transformate
n corp n substane proprii acestuia, prin efortul organismului. Pentru a le degrada i
transforma n substane proprii au loc reacii care restabilesc armonia dintre elementele

221
constitutive ale corpului. Dac se realizeaz acest lucru, are loc vindecarea. Dar, pentru a le
degrada, organismul trebuie s le cunoasc. n general, toate substanele, chiar i cele
alimentare obinuite, luate n cantitate prea mare devin toxice, deoarece organismul nu este
capabil sa le digere, s le transforme.
Pentru degradarea i asimilarea produilor rezultai, corpul face un efort care-l fortific
aa cum se ntresc muchii ca urmare al unui efort gradat continuu. Dac solicitrile depesc
posibilitile organismului, acesta, dimpotriv, slbete. Aceste substane se comport atunci
ca toxici.
Dac substanele chimice utilizate curent ajung n corp, acestea pot fi mai uor sau mai
greu de degradat, n funcie de asemnarea lor cu substanele naturale cunoscute. De anumite
substane organice, corpul nu se poate debarasa i acestea se depoziteaz, precum DDT n
grsimi, afectndu-le funciile lor specifice. In corp, apar astfel structuri strine care perturb
structural organismul (Bott, 1976).
Dup o concepie cibernetic, toate organismele vii se afl n echilibru nestabil cu
mediul nconjurtor. Organismul viu reprezint o entitate de sine stttoare, relativ
independent fa de mediul extern care prezint procese coordonate pentru a-i conserva
identitatea, structura proprie i funciile specifice. De aceea, o substan strin corpului
intervine n echilibrul organismului n mod pasiv, provocnd reacia acestuia, sau activ prin
reacia sa cu componentele moleculare ale acestuia.
Distingem astfel: a) substane benefice echilibrului organismului, cum ar fi apa pur,
aminoacizii eseniali, unele vitamine, etc.; b) substane i produse utilizate ca alimente i care
au un caracter relativ nociv numai n cantitate mare; c) medicamente, care, n doze ponderale,
readuc la normal echilibrul perturbat. ntre acestea se afl i remediile homeopatice care
reprezint soluii cu concentraii infinitezimale, unele chiar dincolo de limitele numrului lui
Avogadro, capabile s ofere corpului bolnav informaia de care are nevoie pentru
autoechilibrare; d) substane toxice, factori care au tendina de a rupe echilibrul dintre individ
(sau descendena sa) i mediul nconjurtor acetia putnd avea o natur fizic, chimic sau
chiar psihic.
Toxicul i poate manifesta aciunea n mod direct prin reacia sa cu unele componente
ale corpului (cianurile reacioneaz cu ionii Fe
3+
din citocromoxidaza pe care o inactiveaz)
sau indirect, prin produii si de degradare (formaldehida i acidul formic provenii din
metanol sunt, la rndul lor, toxici).
De asemenea, unii toxici cu aciune lent, cum ar fi substanele cancerigene,
suprasolicit organismul, pn la epuizare energetic ntr-un proces de ndeprtare al acestora
sau a produselor lor de degradare. n acest caz, toxicii se manifest pasiv, iar organismul
uman sau animal acioneaz nespecific asupra lor, n timp ce acetia perturb funciile
organelor i esuturilor prin prezena lor sau prin produsele lor de degradare i compuii lor cu
moleculele existente n organism.
Otrvirea reprezint ansamblul de semne i simptome constituind o stare patologic
care se instaleaz dup ptrunderea unei otrvi n organism. Ca urmare se produce
dereglarea, alterarea sau chiar abolirea unor funcii vitale, uneori cu sfrit letal. Hans Selye

222
(1984) constat n cazul tuturor agresiunilor, inclusiv a intoxicaiilor, o reacie stereotip din
partea organismului afectat. A numit-o sindrom general de adaptare, deoarece aceasta
permite corpului s rspund activ factorilor din mediul extern. Sindromul general de
adaptare cuprinde mai multe faze, i anume: o faz de alarm, o faz de adaptare i, n fine,
una de epuizare, n care caz sistemele de protecie ale corpului sunt depite. n oricare din
aceste etape de rspuns la agresiunea toxicului, n funcie de intensitatea acestuia, animalul
sau omul pot muri. Toxicii cu aciune moderat, dar de lung durat determin o a patra faz a
sindromului general de adaptare: faza canceroas.



































223
Bibliografie general

Aderjan, R., Hofmann, S., Schmitt, G., Skopp, G. (1995) J. Anal. Toxicol., 19, 163.
Aderjan, R., Skopp, G. (1998) Ther. Drug Monit., 20, 561.
Allen, D.L., Scott, K.S. , Oliver, J.S. (1999) J. Anal. Toxicol., 23, 16.
Al-Amri, A.M., Smith, R.M., El-Haj, B.M., Jumaa, M.H. (2004) Forensic Sci. Int., 140, 175.
Al-Amri, A.M., Smith, R.M., El-Haj, B.M. (2005) Anal. Bioanal. Chem, 382, 830.
Amass, L., Bickel, W.K. (1997) J. Anal. Toxicol., 21, 406.
Amass, L., Kamien, J.B., Mikulich, S.K., (2000) Drug Alcohol Depend., 58, 143.
Andraus, M. H., Siquera, M. E. (1997) J. Chromatogr. B, 704, 143.
Anostos, N., Barrett, N.W., Lewis, S.W., Pearson, J.R., Kirkbridge, K.P. (2005) J. Forensic
Sci., 50, 1039.
Armbruster, D.A., Scharzhoff, R.H., Hubster, E.C., Liserio, M.K. (1993) Clin. Chem., 39,
2137.
Bagheri, H., Es-haghi A., Rouini, M.R. (2005) J. Chromatogr. B, 818, 147.
Backer, R.C., Monforte, J.R., Poklis, A. (2005) J. Anal. Toxicol., 29, 675.
Balikova, M., Maresova, V. (1998) Forensic Sci. Int., 94, 201.
Balikova, M., Maresova, V., Habrdova, V. (2001) J. Chromatogr. B, 752, 179.
Barnes, A.J., Kim, I., Schepers, R., Moolchan, E.T., Wilson, L., Cooper, G., Reid, C.H.,
Hand, C., Huestis, M. A. (2003) J. Anal. Toxicol, 27, 402.
Barrett, C., Good C., Moore, C. (2001) Forensic Sci. Int., 122, 163.
Baselt, R.C. (2000) Disposition of toxic drugs and chemicals in man, (5th ed). Chemical
Toxicology Institute, Foster City, California, pp. 353356.
Bermejo, A.M., Seara, R., Dos Santos Lucas, A.C., Tabernero, M.J. , Fernandez, P., Marsili,
R. (2000) J. Anal. Toxicol., 24, 66.
Besacier, F., Chaudron-Thozet, H., Rousseau-Tsangaris, M., Girard, J., Lamotte, A. (1997)
Forensic Sci. Int., 85, 113.
Blanchet, M., Bru, G., Guerret, M., Bromet-Petit, M., Bromet, N. (1999) J. Chromatogr. A,
854, 93108.
Bogusz, M. J., Maier, R. D., Erkens, M., Kohls, U. (2001) J. Anal. Toxicol., 25, 431.
Bogusz, M. J. (2008) Opioids: methods of forensic analysis. In Forensic Science, Vol. 6:
Handbook of analytical separation, M. J. Bogusz Edit.. 2
nd
Ed., Elsevier Sci. Publ.,
Amsterdam, Boston, Heidelberg, London, New York, Oxford, Paris, San Diego, San
Francisco, Singapore, Sydney, Tokyo, pp.3-117.
Bogusz, M.J. (2000) Opioid agonists, in: M.J. Bogusz (Ed.) R.M. Smith (Series Ed.),
Forensic Science, Handbook of Analytical Separations, Vol. 2. Elsevier Sciences,
Amsterdam, 365.
Bogusz, M.J. (1997) J. Anal. Toxicol., 21, 246.
Bogusz, M.J., Maier, R.D., Driessen, S. (1997) J. Anal. Toxicol., 21, 346.
Bogusz, M.J., Maier, R.D., Erkens, M., Driessen, S. (1997) J. Chromatogr. B, 703, 115.
Bogusz, M.J., Maier, R.D., Krger, K.D., Kohls, U. (1998) J. Anal. Toxicol., 22, 549.
Bogusz, M.J. (2000) J. Chromatogr. B, 748, 3.

224
Bouquillon, A.I., Freeman, D., Moulin, D.E. (1992) J. Chromatogr., 577, 354.
Bourel, B., Fleurisse, L., Hedouin, V., Cailliez, J.C., Creusy, C., Gosset, D., Goff, M.L.,
(2001) J. Forensic Sci., 46, 596.
Bourel, B., Tournel, G., Hedouin, V., Goff, M.L., Gosset, D. (2001) J. Forensic Sci., 46, 600.
Campobasso, C.P., Gherardi, M., Caligara, M., Sironi, L., Introna, F. (2004) Int. J. Legal
Med., 118, 210.
Bora, T., Merdivan, M., Hamamci, C. (2002) J. Forensic Sci., 47, 959.
Brenneisen, R., Hasler, F., Wursch, D. (2002) J. Anal. Toxicol., 26, 561.
Brenneisen, R., Hasler, F. (2002) J. Forensic Sci., 47, 885.
Brooks, K.E., Smiths, N.B. (1996) J. Anal. Toxicol., 20, 269.
Broussard, L.A., Presley, L.C., Pittman, T., Clouette, R., Wimbish, G.H. (1997) Clin. Chem.,
43, 1029.
Bttcher, M., Beck, O. (2005) J. Anal. Toxicol., 29, 769.
Brewer, W.E., Galipo, R.C., Sellers, K.W. , Morgan, S.L. (2001) Anal. Chem., 73, 2371
Buchan, B., Walsh, J.M., Leaverton, P.E. (1998) J. Forensic Sci., 43, 395.
Cailleux, A., Le Bouil, A., Auger, B., Bonsergent, G., Turcant, A., Allain, P. (1999) J. Anal.
Toxicol., 23, 620624.
Cartier, J., Gueniat, O., Cole, M.D. (1997) Sci. Justice, 37, 175.
Casella, G., Wu, A.H.B., Shaw, B.R., Hill, D.W. (1997) J. Anal. Toxicol., 21, 376.
Castiglioni, S., Zuccato, E., Fanelli, R. (eds.) (2011) Mass spectrometric analysis of illicit
drugs in the environment. Wiley-Interscience Series on Mass Spectrometry.
Ceccato, A., Klinkenberg, R., Hubert, P., Streel, B., (2003) J. Pharm. Biomed. Anal., 32, 619.
Cengiz, S., Ulukan, ., Ates, I., Tugcu, H. (2006) Forensic Sci. Int., 156, 91.
Cheever, M.L., Armendariz, G.A., Moody, D.E. (1999) J. Anal. Toxicol., 23, 500.
Chen, X.H., Hommerson, A.L.C., Zweipfenning, P.G.M., Franke, J.P., Harmen-Boverhof,
C.W., Ensing, K. , de Zeeuw, R.A. (1993) J. Forensic Sci., 38, 668.
Chikhi-Chorfi, N., Galons, H., Pham-Huy, C., Thevenin, M., Warnet, J.M., Claude, J.R.,
(2001) Chirality, 13, 187.
Cirimele, V., Kintz, P., Majdalani, R., Mangin, P. (1995) J. Chromatogr. B, 673, 173.
Cirimele, V., Kintz, P., Lohner, S., Ludes, B. (2003) J. Anal. Toxicol., 27, 103.
Cirimele, V., Etienne, S., Villain, M., Ludes, B., Kintz, P. (2004) Forensic Sci. Int., 143, 153.
Cody, J.T., Valtier, S. (2001) J. Anal. Toxicol., 25, 466.
Cody, J.T., Valtier, S., Kuhlman, J. (2001) J. Anal. Toxicol., 25, 572.
Concheiro, M., de Castro, A., Quintela, O., Lopez-Rivadulla, M., Cruz, A. (2006) J.
Chromatogr. B, 832, 81.
Cone, E.J., Darwin, W.D. (1992) J. Chromatogr., 580, 43.
Cone, E.J., Dickerson, S., Paul, B.D., Mitchell, J.M. (1992) J. Anal. Toxicol., 16, 72.
Cone, E.J., Holicky, B.A., Grant, T.M., Darwin, W.D., Goldberger, B.A. (1993) J. Anal.
Toxicol., 17, 327.
Cone, E.J., Presley, L., Lehrer, M., Seiter, W., Smith, M., Kardos, K.W., Fritch, D.,
Salamone, S., Niedbala, R.S. (2002) J. Anal. Toxicol., 26, 541.
Cooper, G., Wilson, L., Reid, C., Baldwin, D., Spiehler, C.H. (2005) J. Forensic Sci., 50, 928.

225
Cotru, M. (1993) Toxicologie, Edit. did i ped., Bucureti.
Couper, F.J., Chopra, K., Pierre-Louis, M.L. (2005) Forensic Sci. Int., 153, 71.
Crouch, D.J., Hersch, R.K., Cook, R.F., Frank, J.F., Walsh, J.M. (2002) J. Anal. Toxicol.,
26,493.
Dams, R., Benijst, T., Gunther, W., Lambert, W., De Leenheer, A. (2002) Anal. Chem., 74,
3206.
Dams, R., Benijst, T., Lambert, W.E., Massart, D.L., De Leenheer, A.P. (2001) Forensic Sci.
Int., 123, 81.
Dams, R., Benijst, T., Lambert, W.E., De Leenheer, A.P. (2002) J. Chromatogr. B, 773, 53.
Debrabandere, L., Van Bouven, M., Daenens, P. (1995) J. Forensic sci., 40, 250.
Debrabandere, L., Van Boven, M., Daenens, P. (1992) J. Forensic Sci., 37, 82.
De la Torre, R., Segura, J., de Zeeuw, R., Williams, J. (1997) Ann. Clin. Biochem., 34, 339.
De Zeeuw, R.A., Wijsbeek J., Franke, J.P. (2000) J. Anal. Toxicol., 24, 97.
Dienes-Nagy, A., Rivier, L., Giroud, G., Augsburger, M., Mangin, P. (1999) J. Chromatogr.
A, 854, 109.
Dietzen, D.J., Koening, J., Turk, J. (1995) J. Anal. Toxicol., 19, 299.
Dole, V.P. (1995) In: A. Tagliamonte, L. Maremmani (Eds.), Methadone maintenance.
Comes of age, drug addiction and related clinical problems, Springer Verlag,
HeidelbergWienNew York, 4563.
Dhawan, B. N., Cesselin, F., Raghubir, R., Reisine, T., Bradley, P. B., Porthogese, P. S.,
Hamon, M. (1996) Classification of opioid receptors. Pharmacol. Rev., 48, 567-592.
Drochioiu, G., Mangalagiu, I., Dru, I. (1999) Toxicologie, Tao Edit., Suceava.
Drochioiu,G., Oniscu, C., Gradinaru, R., Murariu, M. (2004) The biostructural theory
versus the chemiosmotic theory. Roum. Biotechnol. Lett., 9, 1579-1586.
Drochioiu, G. (2006) Eugen Macovschis concept of biostructure and its current development.
In Life and mind. In search of the physical basis. (S. Savva ed.) Trafford Publ.,
Canada, USA, Ireland & UK, pp. 43-60.
Dos Santos Lucas, A.C., Bermejo, A., Fernandez, P., Tabernero, M.J. (2000) J. Anal.
Toxicol., 24, 93.
Eckert W. G. (1997) Introduction to Forensic Sciences. 2nd Ed. CRC Press Boca Raton New
York, London, Tokyo.
Edinboro, L.E., Backer, R.C., Poklis, A. (2005) J. Anal. Toxicol., 29, 704.
Edwards, S.E., Smith, M.T. (2005) J. Chromatogr. B, 814, 241.
ElSohly, M., Feng, S., Murphy, T.P. (2001) J. Anal. Toxicol., 25, 40.
Etter, M.L., George, S., Graybiel, K., Eichhorst, J., Lehotay, D.C. (2005) Clin. Biochem., 38,
1095.
Esseiva, P., Anglada, F., Dujourdy, L., Taroni, F., Margot, P., Du Pasquier, E., Dawson, M.,
El-Haj, B.M., Al-Amri, A.M., Ali, H.S., (2004) Forensic Sci. Int., 145, 41.
Fater, Z., Samu, Z., Szatmary, M., Nyiredy, S., (1997) Acta Pharm. Hung., 67, 211.
Fenton, J., Mummert, J., Childers, M. (1994) J. Anal. Toxicol., 18, 159.
Fernandez, P., Vasquez, C., Morales, L., Bermejo, A.M. (2005) J. Appl. Toxicol., 25, 200.
Fisher, B. A. J. (2004) Techniques of crime scene investigation / Barry A.J. Fisher ; 7th ed.,

226
CRC Press Boca Raton London New York Washington, D.C.
Fryirs, B., Dawson, M., Mather, L.E. (1997) J. Chromatogr. B, 693, 51.
Fucci, N., De Giovanni, N., Chiarotti, M. (2003) Forensic Sci. Int., 134, 40.
Fuller, D.C., Anderson, W.H. (1992) J. Anal. Toxicol., 16, 315.
Gaulier, J.M., Marquet, P., Lacassie, E., Dupuy, J.L., Lachatre, G. (2000) J. Forensic Sci.,
45, 226.
Geier, A., Bergemann, D., von Meyer, L. (1996) Int. J. Legal Med., 109, 80.
Gelencser, A., Kiss, G., Krivacsy, Z., Varga-Puchony, Z., Hlavay, J. (1995) J. Chromatogr. A,
693, 217.
George, S., Parmar, S. (2002) J. Anal. Toxicol., 26, 233.
George, S., Parmar, S., Meadway, C., Braithwaite, R.A. (2000) Ann. Clin. Biochem., 37,
350.
Gerostamoulos, J., Crump, K., McIntyre, I., Drummer, O.H. (1993) J. Chromatogr., 617, 152.
Goldberger, B.A., Cone, E.J., Grant, T.M., Caplan, Y.H., Levine, B.S., Smialek, J.E. (1994) J.
Anal. Toxicol., 18, 22.
Grimm, D., Pauly, E., Poschl, J., Linderkamp, O., Skopp, G. (2005) Ther. Drug Monit., 27,
526.
Gronholm, M., Lillsunde, P. (2001) Forensic Sci. Int., 121, 37.
Guillot, J.G., Lefebvre, M., Weber, J.P. (1997) J. Anal. Toxicol., 21, 127.
Guiochon, G. (1999) Int. Lab., 29, 13C.
Gunnar, T., Ariniemi, K., Lillsunde, P., (2005) J. Mass Spectrom., 40, 739.
Gygi, S.P., Wilkins, D.G., Rollins, D.E. (1995) J. Anal. Toxicol., 19, 387.
Hackett, P.L., Dusci, L.J., Kenneth, K.F., Chiswell, G.M. (2002) Therap. Drug Monit., 24,
652.
Hadidi, K.A., Oliver, J.S. (1998) Int. J. Med. Leg., 111, 165.
Hanisch, H., Meyer, L.V. (1993) J. Anal. Toxicol., 17, 48.
Hartley, C.E., Green, M., Quinn, M., Levene, M.I. (1993) Biomed. Chromatogr., 7, 34.
He, H., Shay, S.D., Caraco, Y., Wood, M., Wood, A.J. (1998) J. Chromatogr. B, 708, 185.
Hedouin, V., Bourel, B., Becart, A., Tournel, G., Devaux, M., Goff, M.L., Gosset, D. (2001)
J. Forensic Sci., 46, 12.
Hedouin, V., Bourel, B., Martin-Bouyer, L., Becart, A., Tournel, G., Devaux, M., Gosset, D.
(1999) J. Forensic Sci., 44, 351.
Heinemann, A., Ribbat, J., Pschel, K., Iwersen, S., Schmoldt, A. (1998) Rechtsmedizin, 8,
55.
Hernandez, A.F., Pla, A., Moliz, J., Gil, F., Gonzalvo, M.C., Villanueva, E. (1992) J.
Forensic Sci., 37, 1276.
Ho, T.S., Pedersen-Bjergaard, S., Rasmussen, K.E. (2002) J. Chromatogr. A, 963, 3.
Ho, T.S., Pedersen-Bjergaard, S., Rasmussen, K.E. (2002) Analyst, 127, 608.
Hofmann, U., Fromm, M.F., Sohnson, S., Mikus, G. (1995) J. Chromatogr. B., 663, 59.
Hoja, H., Marquet, P., Verneuil, B., Lofti, H., Dupuy, J.L., Lachatre, G. (1997) J. Anal.
Toxicol., 21, 160.
Holler, J.M., Bosy, T.Z., Klette, K.L., Wiegand, R., Jemionek, J., Jacobs, A. (2004) J. Anal.

227
Toxicol., 28, 489.
Huang, W., Andollo W., Hearn, W.L. (1992) J. Anal. Toxicol., 16, 307.
Hufschmid, E., Theurillat, R., Wilder-Smith, C.H., Thormann, W. (1996) J. Chromatogr. B,
678, 43.
Huynh, N.H., Tyrefors, N., Ekman, L., Johansson, M. (2005) J. Pharm. Biomed. Anal., 37,
1095.
Jain, R., Ray, R., Tripathi, B.M., Singh, C. (1996) Indian J. Pharmacol., 28, 220.
Jenkins, A.J., Keenan, R.M., Heningfield, J.E., Cone, E.J. (1994) J. Anal. Toxicol., 18, 317.
Jenkins, A. J., Goldberger, B. A. (2002) On-site drug testing. Humana Press, Totowa, New
Jersey.
Johnston, A., King, L.A. (1998) Forensic Sci. Int., 95, 47.
Jones, J., Tomlinson, K., Moore, C. (2002) J. Anal. Toxicol., 26, 171.
Kaa, E. (1994) Forensic Sci. Int., 64, 171.
Katagi, M., Nishikawa, M., Tatsuno, M., Miki, A., Tsushihashi, H. (2001) J. Chromatogr. B,
751, 177.
Kaushik, R., LaCourse, W.R. (2006) Anal. Chim. Acta, 556, 255.
Kemp, P., Sneed, G., Kupiec, T., Spiehler, V. (2002) J. Anal. Toxicol., 26, 504.
Kerrigan, S., Phillips, W.H. (2001) Clin. Chem., 47, 540.
Kerrigan, S., Honey, D., Baker, G. (2004) J. Anal. Toxicol., 28, 529.
Kharash, E.D. (2003) J. Chromatogr. B, 796, 95.
Kilpatrick, G. J., Smith, T. W. (2005) Morphine-6-glucuronide: actions and mechanisms.
Med. Res. Reviews, 25, 521-544.
Kintz, P., Samyn, N. (2000) Unconventional samples and alternative matrices. in: M.J.
Bogusz (Ed.), R.M. Smith (Series Ed.), Forensic science, handbook of analytical
separations, Vol. 2. Elsevier Sciences, Amsterdam, 459488.
Kintz, P. (1993) J. Anal. Toxicol., 17, 443.
Kintz, P., Tracqui, A., Mangin, P. (1994) J. Forensic Sci. Soc., 34, 95.
Kintz, P., Cirimele, V., Edel, Y., Jamey, C., Mangin, P. (1994) J. Forensic Sci., 39, 1497.
Kintz, P., Marquet, P. (2002) (Eds.), Buprenorphine therapy of opiate addiction. Humana
Press, Totowa, USA.
Kintz, P., Villain, M., Dumestre, V., Cirimele, V. (2005) Forensic Sci. Int., 153, 153.
Kintz, P., Villain, M., Dumestre-Toulet, V., Capolaghi, B., Cirimele, V. (2005) Ther. Drug
Monit., 27, 741.
Kirkwood, L.C., Nation, R.L., Somogyi, A.A. (1997) J. Chromatogr. B, 701, 129.
Klous, M.G., Rook, E.J., Hillebrand, M.J.X., van den Brink, W., van Ree, J., Beijnen, J.
(2005) J. Anal. Toxicol., 29, 564
Koch, D.E., Isaza, R., Carpenter, J.W., Hunter, R.P. (2004) J. Pharm. Biomed. Anal., 34, 577.
Krenn, L., Glantschnig, S., Sorgner, U. (1998) Chromatographia, 47, 21.
Kollias-Baker, C., Sams, R. (2002) J. Anal. Toxicol., 26, 81.
Kronstrand, R., Selden, T.G., Josefsson, M. (2003) J. Anal. Toxicol., 27, 464.
Kuhlman, J.J., Magluilo Jr., J., Cone, E.J., Levine, B. (1996) J. Anal. Toxicol., 20, 229.
Kuhlenbeck, D.L., Eichold, T.H., Hoke, S.H., Baker, T.R., Mensen, R., Wehmeyer, K.R.

228
(2005) Eur. J. Mass Spectrom., 11, 199.
Lafolie, P., Beck, O., Lin, Z., Albertioni, F., Boreus, L. (1996) J. Anal. Toxicol., 20, 541.
Le, N.L., Reiter, A.E., Tomlinson, K., Jones, J., Moore, C. (2005) J. Anal. Toxicol., 29, 54.
Lewis, R.J., Johnson, R.D., Hattrup, R.A. (2005) J. Chromatogr. B, 822, 137.
Lin, Z., Lafolie, P., Beck, O. (1994) J. Anal. Toxicol., 18, 129.
Lisi, A.M., Kazlauskas, R., Trout, G.J. (1997) J. Chromatogr. B, 692, 67
Lord, H, Pawliszyn, J. (2000) J. Chromatogr. A, 885 153.
Low, A.S., Taylor, R.B. (1995) J. Chromatogr. B, 663, 225.
Lurie, I.S., Anex, D.S., Fintschenko, Y., Choi, W.Y. (2001) J. Chromatogr. A, 924, 421.
Lurie, I.S., Hays, P.A., Garcia, A.E., Panicker, S. (2004) J. Chromatogr. A, 1034, 227.
Lurie, I.S., Hays, P.A., Parker, K. (2004) Electrophoresis, 25, 1580.
Lurie, I.S., Panicker, S., Hays, P.A., Garcia, A.D., Geer, B.L. (2003) J. Chromatogr. A, 984,
109.
McLachlan-Troup, N., Taylor, G.W., Trathen, B.C. (2001) Addict. Biol., 6, 223.
Meadway, C., George, S., Braithwaite, R. (1998) Forensic Sci. Int., 96, 29.
Meadway, C., George, S., Braithwaite, R. (2002) Forensic Sci. Int., 127, 136.
Meatherall, R. (2005) J. Anal. Toxicol., 29, 301.
Meneely, K.D. (1992) J. Forensic Sci., 37, 1158.
Moeller, M.R., Hammer, K., Engel, O. (2004) Forensic Sci. Int., 143, 183.
Moeller, M.R., Mueller, C. (1995) Forensic Sci. Int., 70, 125.Moody, D.E., Slawson, M.H.,
Strain, E.C., Laycock, J.D., Spanbauer, A.C., Foltz, R.L. (2002) Anal. Biochem., 306,
31.
Mohammed, S.S., Butschkau, M., Derendorf, H. (1993) J. Liquid Chromatogr., 16, 2325.
Montgomery, D., Plate, C., Alder, S.C., Jones, M., Jones, J., Christensen, R.D. (2006) J.
Perinatol., 26, 11.
Moore, K., Werner, C., Zannelli, R.M., Levine, B., Smith, M.L. (1999) Forensic Sci. Int.,
106, 93.
Moore, L., Wicks, J., Spiehler, V., Holgate, R. (2001) J. Anal. Toxicol., 25, 520.
Murphy, C.M., Huestis, M.A. (2005) J. Mass Spectrom., 40, 70.
Murphy, C.M., Huestis, M. (2005) J. Mass Spectrom., 40, 1412.
Musshoff, F., Daldrup, T. (1993) Int. J. Leg. Med., 106, 107.
Musshoff, F., Trafkowski, J., Madea, B. (2004) J. Chromatogr. B, 811, 47.
Myors, R.B., Crisp, P.T., Skopec, S.V., Wells, R.J. (2001) Analyst, 126, 679.
Myung, S.W., Kim, S., Park, J.H., Kim, M., Lee, J.C., Kim, T.J. (1999) Analyst, 124, 1283.
Neumann, H. (1994) Forensic Sci. Int., 69, 7.
Naidong, W., Lee, J.W., Jiang, X., Wehlin, M., Hulse, J.D., Lin, P.P. (1999) J. Chromatogr.
B, 735, 255.
Newman, R.G. (1995) In: A. Tagliamonte, L. Maremmani (Eds.), The pharmacological
rational for methadone treatment of narcotic addiction, drug addiction and related
clinical problems, Springer Verlag, Heidelberg-Wien-New York, 109136.
ONeal, C.L., Poklis, A. (1997) J. Anal. Toxicol., 21, 427.
ONeal, C.L., Poklis, A. (1998) Forensic Sci. Int., 95, 1.

229
Palleschi, L., Lucentini, L., Ferretti, E., Anastasi, F., Amoroso, M., Draisci, G. (2003) J.
Pharm. Biomed.Anal., 32, 329.
Papadoyannis, I., Zotou, A., Samanidou, V., Theodoridis G., Zougrou, F. (1993) J. Liq.
Chromatogr., 16, 3017.
Paradis, C., Dufresne, C., Bolon, M., Boulieu, R. (2002) Ther. Drug Monit., 24, 768.
Pelders, M.G., Ros, J.J.W. (1996) J. Forensic Sci., 41, 209.
Penson, R.T., Joel, S.P., Bakhshi, K., Clark, S.J., Langford, R.M., Slevin, M.L. (2000) Clin.
Pharmacol. Ther., 68, 667.
Pichini, S., Altieri, I., Pellegrini, M., Zuccaro, P., Pacifici, R. (1999) Mass Spectrom. Rev., 18,
119.
Pichini, S., Altieri, I., Pellegrini, M., Pacifici, R., Zuccaro, P. (1999) J. Liq. Chromatogr. Rel.
Technol., 22, 873.
Polettini, A., Huestis, M.A. (2001) J. Chromatogr. B, 754, 447.
Proca, M., Butnaru, E., Agoroaei, L. (1996) Lucrri practice de toxicologie. Universitatea de
medicin i farmacie Gr. T. Popa Iai, Centrul de multiplicare UMF, Iai.
Radcliffe, C., Maguire, K., Lockwood, B. (2000) J. Biochem. Biophys. Methods, 43, 261.
Rasmussen, K.E., Pedersen-Bjergaard, S., Krogh, M., Ugl, H.G., Grnhaug, T. (2000) J.
Chromatogr.A, 873, 3.
Reddy, M.M.K., Ghosh, P., Rasool, S.N., Sarin, R.K., Sashidhar, R.B. (2005) J.
Chromatogr. A, 1088, 158.
Robertson, J. (1999) Forensic examination of hair. Taylor & Francis, London.
Rohrig, T.P., Moore, C. (2003) J. Anal. Toxicol., 27, 449.
Rook, E.J., Hillebrand, M.J.X., Rosing, H., van Ree, J.M., Beijnen, J.H. (2005) J.
Chromatogr. B, 824, 213.
Rop, P.P., Fornaris, M., Salmon, T., Burle, J., Bresson, M. (1997) J. Anal. Toxicol., 21, 232.
Roux, C., Doble, P. (2005) Talanta, 67, 360.
Rothsteyn, Y., Weingarten, B. (1996) Ther. Drug Monit., 18, 179.
Sachs, H., Denk, R., Raff, I. (1993) Int. J. Legal Med., 105, 247.
Samyn, N., De Boeck, G., Verstraete, A. (2002) J. Forensic Sci., 47, 1380.
Schanzle, G., Li, S., Mikus, G., Hofmann, U. (1999) J. Chromatogr. B, 721, 55.
Scheurer, J., Moore, C.M. (1992) J. Anal. Toxicol., 16, 264.
Schmidt, N., Sittl, R., Brune, K., Geisslinger, G. (1993) Pharm. Res., 10, 441.
Schtz, H., Erdmann, F., Risse, M., Weiler, G. (2002) Arzneimittelforschung, 52, 716.
Scott, K.S., Oliver, J.S. (1999) Med. Sci. Law., 39, 77.
Seno, H., Hattori, H., Kurono, S., Yamada, T., Kumazawa, T., Ishii, A., Suzuki, O. (1995) J.
Chromatogr. B, 673, 189.
Sibley, A. (1996) Forensic Sci. Int., 77, 159.
Sharma, S.P., Purkait, B.C., Lahiri, S.C. (2005) Forensic Sci. Int., 152, 235.
Stromberg, L., Lundberg, L., Neumann, H., Bobon, B., Huizer, H., van der Stelt, N.W.
(2000) Forensic Sci. Int., 114, 67.
Shou, W.Z., Chen, Y.L., Eerkes, A., Tang, Y.Q., Magis, L., Jiang, X., Naidong, W. (2002)
Rapid Commun. Mass Spectrom., 16, 1613.

230
Skopp, G., Ganssmann, B., Cone, E.J., Aderjan, R. (1997) J. Anal. Toxicol., 21, 105.
Skopp, G., Klinder, K., Potsch, L., Zimmer, G., Lutz, R., Aderjan, R., Mattern, R. (1998)
Forensic Sci. Int., 95, 99.
Slawson, M.H., Crouch, D.J., Andrenyak, D.M., Rollins, D.E., Lu, J.K., Bailey, P.L. (1999)
J. Anal. Toxicol., 23, 468.
Smith, M.L., Shimomura, E.T., Summers, J., Paul, B.D., Nichols, D., Shippee, R., Jenkins,
A.J., Darwin, W.D., Cone, E.J. (2000) J. Anal. Toxicol., 24, 522.
Spiehler, V.R., DeCicco, L., McCutcheon, J.R., Kupiec, T., Kemp, P. (2004) J. Forensic Sci.,
40, 621.
Sporer, K. A. (2003) Strategies for preventing heroin overdose. Brit. Med. J., 326, 442-444.
Sporkert, F., Pragst, F. (2000) J. Chromatogr. B, 746, 255.
Staerk, U., Kulpmann, W.R. (2000) J. Chromatogr. B, 745, 399.
Staub, C. (1997) Forensic Sci. Int., 84, 295.
Svensson, J.O., Yue, Q.Y., Swe, J. (1995) J. Chromatogr. B, 674, 49.
Tagliaro, F., Smith, F.P. (1996) Trends Anal. Chem., 15, 513.
Tagliaro, F., Turina, S., Smith, F.P. (1996) Forensic Sci. Int., 77, 211.
Taylor, R.B., Low, A.S., Reid, R.G. (1996) J. Chromatogr. B, 675, 213.
Tharp, A.M., Winecker, R.E., Winston, D.C. (2004) Am. J. Forensic Med. Pathol., 25, 178.
Theodoridis, G., Papadoyannis, I., Tsoukali-Papadopoulou, H., Vasilikiotis, G. (1995) J. Liq.
Chromatogr., 18, 1973.
Thevis, M., Opfermann, G., Schnzer, W. (2003) J. Anal. Toxicol., 27, 53.
Thevis, M., Geyer, H., Bahr, D., Schanzer, W. (2005) Eur. J. Mass Spectrom., 11, 419.
Thurman, E.M., Mills, M.S. (1998) Solid phase extraction: principles and practice, John
Wiley & Sons, New York.
Tracqui, A., Kintz, P., Mangin, P. (1997) J. Forensic Sci., 42, 111.Trenerry, V.C., Wells, R.J.,
Robertson, J. (1995) J. Chromatogr. A, 718, 217.
Tyrefors, N., Hyllbrant, B., Ekman, L., Johansson, M., Langstrm, L. (1996) J. Chromatogr.
A, 729, 279.
Ugland, H.G., Krogh, M., Rasmussen, K.E. (2000) J. Chromatogr. A, 749, 85.
Van Thuyne, W., Van Eenoo, P., Delbeke, F.T. (2003) J. Chromatogr. B, 785, 254.
Walsh, S.L., Preston, K.L., Bigelow, G.E., Stitzer, M.L. (1995) J. Pharmacol. Exp. Ther.,
274, 361.
Wang, W.L., Darwin, W.D., Cone, E.J. (1994) J. Chromatogr. B, 660, 279.
Wasels, R., Belleville, F. (1994) J. Chromatogr. A, 674, 225.
Vidal-Trecan, G., Vareson, I., Nabet, N., Boisonnas, A. (2003) Drug Alcohol Depend., 69,
175.
Vinner, E., Vignau, J., Thibault, D., Codaccioni, X., Brassart, C., Humbert, L., LHermitte,
M. (2003) Forensic Sci. Int., 133, 57.
Wennig, R., Moeller, M., Haguenoer, J.M., Marocchi, A., Zoppi, F., Smith, B.L., de la Torre,
R., Carstensen, C.A., Goerlach-Graw, A., Schaeffler, J., Leibberger, R. (1998) J. Anal.
Toxicol., 22, 148.
Wey, A.B., Thormann, W. (2001) J. Chromatogr. A, 916, 225.

231
Wey, A.B., Caslavska, J., Thormann, W. (2000) J. Chromatogr. A, 895, 133.Whittington, D.,
Wey, A.B., Thormann, W. (2002) J. Chromatogr. B, 770, 191.
Wilkins, D., Rollins, D.E., Seaman, J., Haughey, H., Krueger, G., Foltz, R.L. (1995) J. Anal.
Toxicol., 19, 269.
Wright, A.W., Nocente, M.L., Smith, M.T. (1998) Life Sci., 63, 401.
Wu, W.S., Tsai, J.L. (1999) Biomed. Chromatogr., 13, 216.
Zezulak, M., Snyder, J.J., Needleman, S.B. (1993) J. Forensic Sci., 38, 1275.
Zuccaro, P., Ricciarello, R., Pichini, S., Pacifici, R., Altieri, I., Pellegrini, M., DAscenzo, G.
(1997) J. Anal. Toxicol., 21, 268.