1

1
Catedra
Biologie molecular i
Genetic uman
biologiemoleculara.usmf.md
acces: bmgu
2
Tema 1
Macromoleculele = biopolimerii
Tipuri
Structur
Biogenez
Proprieti
Funcii
Localizare
Interaciuni
Functiile biopolimerilor
ADN detine, pastreaza, transmite si
realizeaza IG pentru sinteza proteinelor >
structura si proprietatile organismului uman;
ARN asigura realizarea IG, sinteza
proteinelor
Proteine - substratul molecular al tuturor
structurilor, functiilor si proprietatilor celulei >
organismului.
3
2
Localizarea macromoleculelor n
celulele umane
ADN
O Localizat in nucleu, mitocondrii;
O Sintetizat in nucleu, mitocondrii prin replicarea
ADNului mostenit.
ARN
O Localizat in nucleu, mitocondrii, ribozomi,
citoplasma;
O Sintetizat in nucleu, mitocondrii prin transcriptia
ADNului
Proteine
O Localizate in toate componentele celulare si
matricea extracelulara;
O Sintetizate pe ribozomii liberi, REr, mitocondriei
prin translatia ARNm.
5
Structura macromoleculelor
Structura primar
O lan de mai muli monomeri
unii prin legturi covalente
Structura secundar
O Plicaturarea lanului polimeric
legturi de hidrogen
Structura teriar
O Configuraia tridimensional funcional
legturi de hidrogen, ionice, electrostatice
Structura cuaternar, supramolecular
O Combinaia mai multor polimeri
O legturi de hidrogen, ionice, electrostatice
dN
N
a.a.
dN
dN
dN
dN dN
dN
dN
N
N
N
N
N
N
N
a.a.
a.a.
a.a. a.a.
a.a.
a.a.
a.a.
dezoxiribonucleotid
ribonucleotid
aminoacid
MONOMER POLIMER
Caten ADN
Caten ARN
Caten polipeptid =
protein
3
7
Acizii nucleici
ADN
O molecule bicatenare;
O deine informaia genetic codificat
O Despre sinteza proteinelor
ARN molecule monocatenare:
O ARNm
copia genelor structurale*(gene codificatoare de proteine)
matria pentru sinteza proteinelor
O ARNt
transport aminoacizi
translatori ai codului genetic*(ordinea nucleotidelor determina ordinea aminoacizilor)
O ARNr
component al ribozomilor
controlul translaiei si sintezei proteinei
O microARN reglarea expresiei IG
8
9
ADN
acid dezoxiribonucleic
Monomeri
Structura
O Primar
O Secundar
O Teriar
Localizare
Proprieti
Funcii
Biogeneza
Particularitile ADN uman
Studiul ADN
4
Monomeri ADN:
O 4 tipuri de dezoxiribonucleotide
(dNTP dNMP)
dATP sau dAMP
dGTP sau dGMP
dCTP sau dCMP
dTTP sau dTMP
Momomerul ADN
N
P P P
3
C
C
C
C
C
O
2
4
5
1

dNTP
dNMP
N baza azotat
-Pu Adenina
Guanina
-Py Timina
Citozina
12
5
Monomer nucleotidele (dNMP)
Structura primar:
catena polinucleotidic
nucleotide unite prin legaturi
fosfodiesterice (fd)
Structura secundar:
bicatenar 2 catene
polinuleotidice
antiparalele
complementare
5'
5'
3'
3'
fd
fd
fd
14
Structura ADN
I catena polinucleotidic
II dublul helix = dou catene
Complementare
antiparalele
spiralizate unite prin legturi de hidrogen
III DNP = dezoxiribonucleoproteid
15
6
16
James Watson i Francis Crick
alturi de modelul structurii
secundare a ADN.
Rosalind Franklin Maurice Wilkins
17
Complementaritatea ADN asigur:
stabilitatea moleculei ADN;
mecanismul replicrii;
mecanismul transcripiei;
mecanismul recombinrii;
mecanismul reparrii leziunilor ADN
18
Conformaia spaial a moleculelor de ADN liniar
Tip Lungimea spirei Baze/tur nclinarea fa
de ax
A 24,6 ~11 +19
B 33,2 ~10 -1,2
Z 45,6 ~ 12 -9
7
Proprietile ADN
Replicare
O dublarea IG pentru transmiterea IG
Reparaie
O Identificarea, nlturarea greelilor pentru prevenirea acumularii
mutatiilor, pastrarea IG
Denaturare
O ruperea legturilor de H dintre catene pentru accesul la IG
Renaturare
O refacerea dublului helix, pastrarea IG
Heterogenitate
O varietatea secv. Nucleotidice (> de 30000 gene diferite)
Polimorfism
O variatii individuale ale secventelor de ADN
Flexibilitate
O ABZ (trecerea de la o forma functionala la alta)
Fragilitate
O sensibilitate la factori mutageni
Hibridizare
O molecule de diferit origine formeaz noi molecule
Migrare n cmpul electric (ADN are )
20
Replicarea
= dublarea ADN
= dublarea IG
= transmiterea IG
21
Funciile ADN
Deine IG codificat:
O succesiunea b.a. n ADN determin succesiunea
aminoacizilor n protein
Pstreaz IG:
O de aciunea nucleazelor
O de citirea neautorizat
O de mutaii
Transmite IG prin dublare=replicare:
1ADN replicare 2ADN
Realizeaz IG
ADN transcripie ARN translaie protein
8
22
Localizarea ADN
n nucleu 95 - 98%
O molecule mari liniare de ADN
O asociate cu proteine histone
O sub form de cromatin cromozomi
n mitocondrii 2-5%
O molecule mici inelare
23
Particularitile ADN uman
ADN nuclear (nucleul celulei somatice, diploid)
cu o lungime de ~ 6,4x10
9
p.n.; 7 picograme
fragmentat n 46 de molecule;
asociat cu proteine histone;
extrem de eterogen:
secvene codificatoare i necodificatoare;
secvene repetitive i unice;
secvene active transcripional i inactive;
secvene stabile i instabile mutaional;
conine ~ 30000 perechi de gene;
se replic numai n perioada S a ciclului celular;
50% este de origine matern i 50% de origine patern.
Important:
AND nuclear conine secvene codante = gene:
O Gene structurale p/u proteine (ARNm) ~ 30 000
O Gene preARNr ~ 250 copii
O Gene ARNr 5S ~ 2000 copii
O Gene ARNt ~ 1300 copii
O Gene p/u microARN
AND nuclear conine secvene necodante
O Secv. reglatoare
O Secv. spaiatori
O Secv. satelit (cen, t)
O Secv. minisatelit (markeri crs)
O Secv. microsatelit (markeri individuali)
9
25
26
ADN mitocondrial
Are o lungime de 16,6 kb
Este inelar
Numrul moleculelor este variabil (2-10)
Conine 37 de gene
Genele sunt dispuse compact
Se replic n dependen de metabolismul celular
Este de origine matern
Particularitile ADN uman
27
Particularitile genomului uman
Genomul nuclear
n=3,2 Gb / 2n=6,4 Gb
(~ 30000 gene/perechi)
Genomul mitocondrial
16,6 kb
37 de gene
ADN genic
25%
ADN extragenic
75%
ADN
codant
10%
ADN
necodant
90%
Secvene unice
sau n numr
mic de copii
60%
Secvene
moderat sau
nalt repetitive
40%
10
28
Genomul nuclear
SECVENE OBLIGATORII SECVENE FACULTATIVE
-Gene structurale
(codificatoare de proteine)
-Gene pentru ARNt, ARNr;
-Palindromi;
- ADN satelit (c,t)
Elemente mobile
Pseudogene
ADN viral
29
Secvenele necodificatoare ale genomului uman
SINEs transpozoni; situsuri de iniiere a replicrii
LINEs retrotranspozoni; situsuri de mperechere
corect a crs n timpul meiozei I
ADN minisatelit markeri genetici ai crs
ADN satelit rol structural, formeaz regiunile de
heterocromatin constitutiv (c, t, h, s)
ADN microsatelit markeri genetici individuali
SINEs (Short interspersed elements) 11%
LINEs (Long interspersed elements) 16%
30
Stabilirea structurii genelor normale i
mutante
Depistarea mutaiilor
Diagnosticul bolilor genice
Analiza polimorfismului individual
Studiul ADN pentru:
11
31
ARN
acid ribonucleic
Monomeri
O NTP (ATP, GTP, CTP, UTP);
O NMP (AMP, GMP, CMP, UMP);
Structura primar catena polinucleotidic;
Structura secundar bucle;
Structura teriar RNP (ARN+proteine)
32
33
12
ARNm ARNr
ARNt ARNm
!!! Toate tipurile de ARN sunt transcrise de pe ADN
!!! ARN - este complementar unei catene de ADN
- este identic cu cealalt caten
Transcripie
Processing
Gena structurala
Gena ARNr Gena ARNt
Insulina
Miozina
Gena structurala
ARNm ARNr
ARNt
Transcripie
Processing
1
2 3
ADN
ARN precursor
ARNt
ARNr ARNm
ARNr + proteine
ribozomale =
ribozomi
Copia codului genetic
despre structura proteinei
Matri pentru sinteza
proteinei n timpul
translaiei
Sediul sintezei
proteinelor
Transport
aminoacizi spre
ribozomi
Transleaz
codul genetic
din ARNm
transcripie
processing
preARNm
preARNr
preARNt
ARNhn
f
u
n
c

i
e
f
u
n
c

i
e
13
ARNm ARN mesager (informaional,
matricial)
Molecule monocatenare, heterogene
Se obin prin transcrierea genei structurale i
processing-ului pre-ARNm
Conine copia inf. despre un polipeptid i
servete ca matri p/u sinteza polipeptidului
Molecule monocatenare;
Forma 3 bucle funcionale (anticodon, D,
);
Se sintetizeaz prin transcripia genelor
ARNt,
Conin nucleotide cu baze azotate obinuite
i minore (timina, pseudouracil,
dihidrouridina)
Asigur transportarea aminoacizilor spre
locul
de sintez a proteinelor
Reprezint translatori ai codului genetic
n celul se conin 61 tipuri
ARNt
Structura
secundar a
ARNr 5S
14
ARNr ARN ribozomal
Molecule monocatenare
ARNr se sintetizeaz prin transcripia genelor
ARNr, n regiunea nucleolului
Intr n componena ribozomilor
O ARNr 18S + 33 proteine = 40S
O ARNr 5S + 5,8S + 28S + 49 proteine = 60S
Asigur interaciunea dintre subunitile
ribozomale, ribozom-ARNm, ribozom-ARNt.
41
ARNr
Tipul celulelor Coeficientul de sedimentare
Procariote
5S
16S
23S
Eucariote,
nucleu
5S
5,8S
18S
28S
Eucariote, mitocondrii
12S
16S
42
microARN
ARNsn
O ARN-primer
O ARN-telomerazic
O ARN din componena spliceosomei
ARNsc
O Ribozime
O ARN de interferen
15
Structura proteinelor
Monomeri 20 tipuri de aminoacizi
Primar lanul polipeptidic de
aminoacizi (ordinea a-a controlat de codul
genetic ADN)
Secundar a-spirale i b-structuri
Teriar globular
Cuaternar - mai multe polipeptide formeaz
o protein complex
!!! pot forma complexe cu alte proteine sau alte
molecule (AN, glucide, lipide)
Formarea polipeptidului
Structura proteinelor
16
Proprietile majore ale
proteinelor
Heterogenitate;
Pot fi bazice, acide sau neutre;
Interacioneaz specific cu alte molecule;
Catalizatori eficieni;
Adaptabilitate
Denaturare renaturare
....
!!! Substratul moilecular al tuturor structurilor,
fuciilor i nsuirilor organisnului viu
Functii ale proteinelor
Clasa Functia Exemple
Proteine
dinamice
enzime Proteaze, lipaze,
nucleaze,
polimeraze....
transport Hb, transferina
contractia musculara actina, miozina
semnale, hormoni insulina, STH
protectie Ig, IFN
reglarea exprimarii
genelor
factori de
transcripie
Proteine
structurale
matricea tisulara elastina,colagen
17
Structura primar a ribonucleazei A (RNase A)
Structura secundar a ribonucleazei A (RNase A)
Tranzitii conformationale ale hexokinazei
Proteina poate avea 1 sau
mai multe domenii funcionale
Domeniu - regiune compacta
de 100-400 AA care determin
o funcie
Configuraia domeniului
corespunde configuraiei mol
cu care interaconeaz
Factorii de mediu
t
o
, pH, P, h, cofactori, etc.
Structura chimic
primar
Configuraia spaial
Conformaia (forma moleculei)
Proprietile moleculei
Funciile moleculei
` `
Relaia: structur mediu funcie
18
Expresia IG
ADNARNm Protein Caracter
5-ATTGCAAGATTACCATGT-3 Catena codogen (netranscris)
3-TAACGTTCTAATGGTACA-5 Catena anticodogen (transcris)
Transcripie
5-AUUGCAAGAUUACCAUGU-3 ARNm
Translaie
Leu Ala Arg Leu Pro Cys polipeptid
Caracter fenotipic normal
Expresia IG
ADN
mut
ARNm
mut
Protein
an
Caracter
an
5-ATTACAAGATTACCATGT-3 mutaie G
4
A
3-TAATGTTCTAATGGTACA-5
Transcripie
5-AUUACAAGAUUACCAUGU-3 ARNm
mut
Translaie
Leu Thr Arg Leu Pro Cys polipeptid
an
Caracter fenotipic patologic
Calitatea ADN
Calitatea sau cantitatea
proteinelor celulare i
extracelulare
Calitatea i longevitatea vieii
Cunoaterea --- cheia
succesului medicului sec XXI