Biochimie - Curs 8

Metabolismul aminoacizilor cuprinde o serie de reacii de degradare sau sintez

prin care aminoacizii constituie precusorii polipeptidelor sau altor compui.
Marea majoritate a aminoacizilor din celul sunt ncorporai n proteine, compui
macromoleculari care sunt permanent sintetizai sau degradai. Excesul de
aminoacizi este convertit n ali metabolii care constituie la rndul lor precursori
pentru glucoz, acizi grai respective corpi cetonici.
Degradarea proteinelor
Componenii din celul sunt continuu converi. Proteinele au timpi de via de la
cteva minute la sptmni. n multe cazuri proteinele sunt sintetizate n celul din
aminoacizi i pot fi degradate n acetia. Prin aceste procese sunt satisfcute
urmtoarele funcii:
- Pstratea nutrienilor sub form proteic i desfacerea acestora n funcie de
necesitile metabolice (procesele din esutul muscular);
- Eliminarea proteinelor anormale a cror acumulare poate influena n mod
negativ celula;
- Reglarea metabolismului celular prin eliminarea excesului de enzime sau
proteinelor care controleaz diversele ci metabolice. De remarcat este
faptul c enzimele care sunt degradate mai rapid ocup locuri strategice n
cile metabolice. Rata de degradare a proteinelor n celul variaz n funcie
de starea nutriional sau hormonal. De exemplu, n condiiile n care
concentraia nutrienilor este redus, celula crete rata de degradarea a
proteinelor n scopul mririi concetraiei de nutrieni folosii n procesele
metabolice.
Degradarea la nivelul lizozomilor
Lizozomii conin n jur de 50 de enzime hidrolitice, incluznd o serie de
proteaze (catepsine). n lizozomi valoarea pH-ului este meninut la valoarea de 5
astfel nct enzimele (proteolitice) s-i poat satisface activitile catalitice.
Lizozomii degradeaz substanele pe care celula le preia prin endocitoz
(mecanism fiziologic de ptrundere sau captare n celul a unor substane din
mediul ambiant, care nu pot ajunge intracelular direct, prin difuziune (transport
pasiv sau activ). De asemenea, ei recicleaz componenii intracelulari care sunt
inclui n vacuole, vezicule care fuzioneaz cu lizozomii. n celulele nfometate,
lizozomii import i degradeaz numai proteinele care au o anumit secven

semnal (tetrapeptida KFERQ). Aceste proteine deriv din esuturi (ficat sau rinichi)
care se atrofiaz ca rspuns la lipsa nutrienilor.
Ubichitina
Degradarea proteinelor n celulele eucariote decurge ntr-o manier dependent
de ATP. Ubichitina este o protein monomeric larg raspndit.
Proteinele sunt marcate pentru degradare prin legarea lor covalent la
ubichitin. Acest proces decurge n trei etape:
- n prima reacie, dependent de ATP,
la gruparea carboxilic terminal a
ubichitinei se formeaz o legtur
tioesteric cu enzima E1;
- n cea de-a doua etap ubichitina este
transferat pe alte enzime (E2) care
prezint grupri tiolice (-SH);
- n ultima etap ubichitin protein
ligaza (E3) transfer ubichitina
activat cu E2 pe un rest de lizin
(gruparea -NH2 din poziia ).
Pentru ca o protein s fie eficient
degradat aceasta la aceasta trebuie s se
lege cel puin 4 resturi de ubichitin (pna
la 50 de resturi). Dup grefarea primului
rest de ubichitin pe proteina ce urmeaz a
fi degradat are loc grafarea altor resturi de
ubichitin pe primul rest (n partea Nterminal a lanului ubichitinei grefate
iniial) prin formarea unor legturi amidice
cu resturile de lizin.
Proteinele ubichitinilate pot fi degradate proteolitic printr-un proces dependent
de ATP de ctre un complex multiproteic
numit proteazom 26 S. Acest complex are
forma unui cilindru gurit (proteazomul 20
S) care este acoperit de o parte i de alta de

un capac (19S).
Dezaminarea aminoacizilor
Aminoacizii liberi deriv din procesele de degradare a proteinelor celulare sau
rezult prin digestia proteinelor din diet. Proteaza din sucul gastric, pepsina,
alturi de enzimele pancreatice (tripsina, chimotripsina sau elastaza) i de endosau exopeptidaze degradeaz lanurile polipeptidice la oligopetide i aminoacizi.
Aceste substane sunt absorbite la nivelul mucoasei intestinale i transportate prin
fluxul sanguin la alte esuturi.
Degradarea suplimentar a aminoacizilor are loc intracelular. O variant este
aceea a degradrii n care gruparea amino este ndeprtat, rezult amoniac care
apoi este convertit n uree compus care poate fi eliminat mai uor.
A. Transaminarea
Majoritatea aminoacizilor sunt dezaminai prin transaminare, reacia prin
care transfer gruparea lor amino la un cetoacid.
Aminotransferazele sunt enzime care catalizeaz reacia unui -aminoacid
cu un -cetoacid, conducnd la formarea unui aminoacid diferit i unui cetoacid
diferit.

Aspartat-aminotransferaza (L-aspartat: -cetoglutarat- aminotransferaza sau

glutamat-oxaloacetat-trasaminaza, TGO) catalizeaza reactia L-aspartatului cu cetoglutarat.
Mamiferele conin dou forme ale aspartat aminotrasferazei. Astfel, la nivelul
ficatului se ntlnesc dou forme ale izoenzimelor TGO: o form citozolic i una
mitocondrial, ambele fiind purificate i studiate intensiv. TGO este ntalnit n
mai multe esuturi: miocard, ficat, muchii scheletici, rinichi, pancreas, esut
cerebral, splin, fiind astfel un indicator mai puin specific al funciei hepatice.
Enzima bacterian (purificat din E.coli) n cantiti suficiente n scopul
cristalizrii i implicit determinrii mecanismului de aciune. n absena
substratului enzima se afla sub forma unui aduct (baza Schiff intre Lys258 si
piridoxal fosfat sau vitamina B6-cofactor), compus care absoarbe la 430 nm. Dup

legarea L-aspartatului se formeaz un nou intermediar aldiminic, care absoarbe la

aceeai lungime de und. Gruparea -amino din Lys258, este eliberat din cofactor
i actioneaz ca o baz pentru deprotonarea atomului de hidrogen din poziia .
Analog, transaminarea L-alaninei are loc sub aciunea alanin-aminotransferazei
(L-alanin--cetoglutarat- aminotransferaza sau glutamat-piruvat transaminaza,
TGP).TGP este o enzim ce se gsete n ficat, dar n cantiti mici se mai poate
regsi n rinichi, inim i muchi. n condiii normale, nivelul de TGP din snge
este sczut. Atunci cnd ficatul este afectat, enzimele TGP sunt eliberate n sistemul
sangvin, n general nainte ca alte simptome evidente s apar, precum icterul
(nglbenirea ochilor i a tegumentelor).

B. Dezaminarea oxidativ
n cazul transaminrii nu are loc o dezaminare complet a aminoacizilor.
Glutamatul este dezaminat oxidativ de ctre glutamat dehidrogenaza (GDH)
conducnd la amoniac i cetoglutarat, compus care ulterior poate fi folosit n
reaciile de transaminare.
Glutamat dehidrogenaza este o enzim mitocondrial care poate avea drept
cofactor NAD+ sau NADP. Enzima este inhibat de GTP sau NADH i activat de
ctre ADP sau NAD+. Produsul acestei reacii (cetoglutaratul) este un intermediar
i ca atare stimuleaz producerea ATP-ului prin intermediul fosforilrii oxidative.
Exist dou tipuri de flavoproteine cu activitate dehidrogenazic. Laminoacid
oxidaza este localizat n reticulul endoplasmatic, iar Daminoacid oxidaza se afl
n microzomii celulelor hepatice. Cofactorii acestor oxidaze (FADH2 i FMNH2)
reacioneaz direct cu oxigenul molecular, genernd H2O2 care este la rndul su
descompus n ap i oxigen sub influena catalazei. Acest proces enzimatic are loc
n peroxizomii celulelor hepatice.

Decarboxilarea aminoacizilor
Procesul este catalizat de enzime numite decarboxilazele, proteine care conin
n calitate de coenzim piridoxal fosfat (fosfopiridoxal).

Piridoxal fosfat
Aminele formate prin decarboxilare posed importante proprieti farmacodinamice (histamina, tiramina) i fiziologice.
Histidina sufer o reacie de decarboxilare, conducnd la histamine care este un
vasodilatator puternic n esutul animal. Histamina este eliberat n cantiti
apreciabile ca rspuns la reaciile alergice. Aceast amin stimuleaz i secreia
acid din stomac. Exist i antagoniti ai histamine (cimetidin, Tagamet) care sunt
folosii la tratarea ulcerelor duodenale.

Serotonina este un neurotransmitor care rezult n urma a dou etape pornind de

la triptofan. Cea de-a dou etap este o reacie de decarboxilare

Prin decarboxilarea acidului glutamic

rezult -amino-butiratul (GABA). GABA
acioneaz la nivelul membranei postsinaptice, determinnd hiperpolarizarea i
poteniale inhibitoare prin creterea
conductanei pentru Cl-. De asemenea
particip n mecanismele inhibitoare
medulare. Analogii acidulului gammaaminobutiric, datorit proprietilor lor
inhibitorii, pot fi utilizai n anumite
tratamente ale epilepsiei.

Serin decarboxilaza, o enzim care se gsete n extractele vegetale (frunze

de spanac), catalizeaz reacia de decarboxilare a serinei la etanol amin, compus
care este un intremediar n sinteza glicero-fosfolipidelor.

n procesul de putrefacie se formeaz

numeroase amine, numite ptomaine (cadaverina, putresceina), prin decarboxilarea aminoacizilor de ctre microorganisme. Procesele de
intoxicare n cazul consumului unor alimente
alterate se explic prin prezena acestor amine
toxice. De asemenea prezena aminelor
biogene permite controlul biosintezei proteinelor din ribozomi, stabilizarea membranelor
celulare, controlul pH-ului celulelor i proliferarea celulelor.