CROMOPROTEINELE

CURSUL 4

CROMOPROTEINELE
DEFINIIE

sunt structuri proteice

specializate alctuite
dintr-o component
proteic i o
component prostetic
numit hem

CROMOPROTEINELE
STRUCTURA I ROLUL HEMULUI

este format din 4 nuclee pirolice legate ntre

ele prin puni metilenice
n centrul su se gsete un ion de fier
bivalent (Fe2+), meninut prin intermediul a 2
legturi coordinative i 2 legturi covalente cu
atomii de azot din inelul porfirinic
Fe2+ mai poate forma 2 legturi suplimentare,
una deasupra i cealalt sub planul inelului
porfirinic

CROMOPROTEINELE
STRUCTURA I ROLUL HEMULUI

rolul hemului este determinat de mediul generat de

structura tridimensional a proteinei:
n structura citocromilor, rolul hemului este de a
transporta electroni
n structura catalazei, rolul hemului este de
participare n centrul activ al enzimei, conducnd
la descompunerea apei oxigenate
n structura mioglobinei i hemoglobinei, rolul
hemului este de a lega reversibil moleculele de
oxigen

CROMOPROTEINELE
MIOGLOBINA, HEMOGLOBINA

CROMOPROTEINELE
MIOGLOBINA
este format dintr-o caten polipeptidic i o
component prostetic HEM
catena polipeptidic conine 153 de resturi de
aminioacizi avnd o aranjare globular compact
prezena resturilor de prolin determin prin
radicalul su plierea catenei i formarea a 8
segmente peptidice

F
D

A
G
H

CROMOPROTEINELE
MIOGLOBINA

aminoacizii cu radicali nepolari se vor orienta ctre

interiorul moleculei de mioglobin datorit hidrofobicitii
lor
excepie fac 2 resturi de histidin prin intermediul crora
se fixeaz hemul

aminoacizii cu radicali polari ncrcai electric se vor

orienta ctre exteriorul proteinei, predominnd la
suprafa i determinnd solubilitatea n ap a acesteia

aminoacizii cu radicali polari nencrcai electric se vor

aranja la interior sau exterior, n funcie de posibilitile
sterice ale catenei polipeptidice

CROMOPROTEINELE
MIOGLOBINA

componenta prostetic, hemul, se gsete ntr-o fisur a

proteinei aflat la distan de mediul hidrofil (punga
hidrofob), de care se asociaz prin legturi necovalente

n centrul hemului se gsete un Fe2+

Fe2+ din hem formeaz:

2 legturi covalente 2 dintre atomii de N
2 legturi coordinative cu ceilali 2 atomi de N
1 legtur coordinativ cu un rest imidazolic al His (His F8)
1 legtur coordinativ cu His E7 (histidina distal) prin
intermediul unei molecule de O2

CROMOPROTEINELE
MIOGLOBINA

CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINA

CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINA

este format din 4 catene polipeptidice, 2 de tip

(141 aa) i 2 de tip (146 aa), fiecare dintre
acestea avnd cte un hem

catenele polipeptidice de tip au o aranjare rigid

fa de cele , conducnd la formarea celor 2
dimeri

dimerii 11 i 22 i pot modifica poziia reciproc

n procesele de oxigenare/deoxigenare

CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINA

cele 4 catene polipeptidice sunt asociate prin

legturi necovalente ntr-o structur cuaternar, cu
o geometrie aproximativ tetraedric

oxigenarea Hb ncepe la nivelul protomerului ,

ceea ce determin deplasarea Fe2+ din poziia
exterioar planului hemului ntr-o poziie coplanar

deplasarea Fe2+ este urmat de deplasarea restului

de His F8, ce va conduce la ruperea unor legturi
stabilizatoare a structurii tensionate a Hb

CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINA

CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINA

Starea tensionat a Hb

Starea relaxat a Hb

CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINA

CROMOPROTEINELE
CURBA DE OXIGENARE A MIOGLOBINEI I

HEMOGLOBINEI

din punct de vedere funcional, Mb i Hb fixeaz O2

la nivelul hemului

Mb fixeaz o singur molecul de O2

Hb are structur tetrameric i fixeaz patru

molecule de O2

diferena dintre Mb i Hb se reflect n aspectul

hiperbolic al curbei de oxigenare a Mb fa de cel
sigmoidian n cazul oxigenrii Hb

CROMOPROTEINELE
CURBA DE OXIGENARE A MIOGLOBINEI I

HEMOGLOBINEI
ntr-o soluie de Mb
deoxigenat, respectiv Hb
deoxigenat, se introduce
O2 la presiuni ce cresc
treptat, de la 0 la 100
mmHg
se obine o curb hiperbol
pentru Mb
se obine o curb sigmoid
pentru Hb
presiunile de semisaturare
(P50) sunt net diferite:
1 mmHg pentru Mb i
26 mmHg pentru Hb

CROMOPROTEINELE
CURBA DE OXIGENARE A MIOGLOBINEI I

HEMOGLOBINEI

Hb deoxigenat este n stare tensionat:

structural, aceast stare se caracterizeaz printr-un

numr de interaciuni intercatenare (Asp--Arg+) i
intracatenare (Asp--His+)
Fe2+ din fiecare subunitate este situat n afara
planului protoporfirinei IX (la o distan de 0.6 A),
ca urmare a legrii lui de histidina proximal
acceptarea O2 de ctre Hb deoxi se face prin
creterea presiunii O2 la nivelul protomerilor
Hb deoxi are afinitate foarte redus pentru O2

CROMOPROTEINELE
CURBA DE OXIGENARE A MIOGLOBINEI I

HEMOGLOBINEI

Hb oxigenat este n stare relaxat:

oxigenarea protomerului este urmat de deplasarea

Fe2+ din poziia exterioar planului porfirinic ntr-o poziie
coplanar
Fe2+ ajunge n poziia optim formrii unei legturi
coordinative cu O2, prin intermediul cruia se va lega de
His distal
cum legtura Fe2+ cu His proximal nu se rupe n urma
legrii O2, prin intermediul acestui aminoacid, se vor
produce modificri n structura teriar i cuaternar a Hb,
ceea ce constituie tranziia ntre starea T n starea R a
hemoglobinei

CROMOPROTEINELE
CURBA DE OXIGENARE A MIOGLOBINEI I
HEMOGLOBINEI

oxigenarea protomerilor va fi urmat de a celor ,

fapt datorat eliberrii restului de valin din punga de
oxigenare
Hb oxi are afinitate mare pentru O2
afinitatea mare pentru O2 a strii relaxate a Hb este
exprimat prin fixare rapid a acestuia la celelalte
subuniti
n apropierea presiunii de 100 mmHg, capacitatea
de de fixare a O2 diminu ca urmare a saturrii

CROMOPROTEINELE
CURBA DE OXIGENARE A MIOGLOBINEI I

HEMOGLOBINEI
n plmni, presiunea parial a O2 nu variaz ntre
0 i 100 mmHg (pO2 plmni = 100 mmHg)
din aceste condiii deriv necesitatea desfurrii n
plamn doar a ultimei poriuni a curbei de
oxigenare a Hb, explicnd uurina de oxigenare a
Hb
disocierea O2 de Hb se face dup aceeai curb
dar parcurs n sens invers
presiunea parial a O2 n esuturi este de 30
mmHg, ceea ce favorizeaz deoxigenarea Hb oxi
pn cnd mai este oxigenat n proporie de 5060%
Hb va prelua n plmni restul de 40-50% O2, ceea
ce favorizeaz suplimentar oxigenarea

CROMOPROTEINELE
EFECTUL

BOHR

Christian Bohr a constatat c Hb oxi cedeaz mai

uor O2 dac pH-ul este mai sczut dect cel
fiziologic

ecuaia chimic de oxigenare a Hb:

Hb(O2)nHx + O2 Hb(O2)n+1 +xH+

prin oxigenarea Hb deoxi, se rup legturile ionice

intracatenare (Asp-- His+) i sunt eliberate resturile
de His+

unele dintre resturile His+ vor putea elibera protonii

asociai lor (His146 de la captul C-terminal al
protomerilor sunt implicai n efectul Bohr)

CROMOPROTEINELE
EFECTUL

BOHR

la nivelul capilarelor alveolelor pulmonare

reacia chimic este deplasat spre dreapta

Hb(O2)nHx + O2 Hb(O2)n+1 +xH+

H+ eliberai prin deprotonarea resturilor de His+ vor

fi tamponai cu HCO3- ,component al tamponului
sanguin, formnd H2CO3
H2CO3 sub aciunea anhidrazei carbonice va fi
descompus n ap i CO2, acesta din urm se
elimin prin expiraie

CROMOPROTEINELE
EFECTUL

BOHR

la nivelul capilarelor esutului muscular

reacia chimic este deplasat spre stnga

Hb(O2)nHx + O2 Hb(O2)n+1 +xH+

n urma metabolismului celular se obin

compui cu caracter acid, care vor determina
scderea pH-ului local, favorizndu-se
deoxigenarea Hb oxi

CROMOPROTEINELE
EFECTUL

BOHR

la nivelul capilarelor esutului muscular

80% din CO2 rezultat la nivelul muscular

reacioneaz cu H2O, sub aciunea anhidrazei
carbonice, formnd H2CO3

ionul bicarbonat rezultat prin descompunerea

H2CO3 la acest nivel, va intra n rezerva alcalin a
sngelui

15% din CO2 rezultat la nivel muscular este

transportat la plmn sub form de
carbaminhemoglobin

CROMOPROTEINELE
2,3 BIFOSFOGLICERAT EFECTOR ALOSTERIC

2,3 BPG este un ester bifosforic esenial n

exercitarea funciei de transport a O2 de ctre Hb

se formeaz printr-o deviere a 1,3 BPG din calea

glicolitic desfurat n eritrocit

25% din cantitatea de glucoz angajat n glicoliz

va intra n aceast bucl, nsoindu-se cu "risip"
energetic

CROMOPROTEINELE
2,3 BIFOSFOGLICERAT EFECTOR ALOSTERIC
ADP + Pi
NAD+

NADH + H+

1,3
BPG

glucoza

3 PG

pyr

lactat

untul
Rappapor-Luebering

H20
PO

CROMOPROTEINELE
2,3 BIFOSFOGLICERAT EFECTOR ALOSTERIC

2,3 BPG se intercaleaz n zona central a Hb

tensionate ca urmare a atraciilor electrostatice
ntre gruprile sale ncrcate negativ i gruprile
amino protonate ale lanurilor i

n acest mod, starea Hb tensionate este

consolidat suplimentar, crescnd dificultatea
oxigenrii sale (curba de oxigenare a Hb se
deplaseaz la dreapta)

CROMOPROTEINELE
2,3 BIFOSFOGLICERAT EFECTOR ALOSTERIC

dup fixarea primei molecule de O2 la nivelul

subunitii , modificrile conformaionale aprute
fac imposibile rmnerea 2,3 BPG-ului n zona
central a Hb, care se micoreaz

2,3 BPG reduce afinitatea Hb pentru O2, astfel

favorizeaz deoxigenarea Hb oxi

n lipsa 2,3 BPG, curba de oxigenare a Hb este nu

numai deplasat spre stnga dar i pierde n mare
msur aspectul sigmoidian, tinznd spre cel
hiperbolic (aspectul curbei de oxigenare al Mb)

CROMOPROTEINELE
2,3 BIFOSFOGLICERAT EFECTOR ALOSTERIC
La nivelul esuturilor periferice, are loc deoxigenarea Hb
nsoit de intercalarea 2,3 BPG n zona central.

O2

O2
La nivel pulmonar, are loc oxigenarea Hb nsoit de
scoaterea 2,3 BPG din zona central a acesteia.

CROMOPROTEINELE
2,3 BIFOSFOGLICERAT IMPORTAN BIOLOGIC

creterea concentraiei de 2,3 BPG apare ca

urmare a prezenei hipoxiei cronice (exp.:
emfizem pulmonar obstructiv sau la altitudini
nalte), precum i n contextul anemiilor cronice,
cnd numrul redus de hematii nu poate asigura
necesarul de oxigen al organismului

asigur transferul oxigenului din circulaia

matern ctre eritrocitele ftului

CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINA FETAL

Hb F este un tetramer format din 2 catene

polipeptidice , identice cu cele din Hb A, i 2
catene polipeptidice (22)

Hb F prezint afinitate pentru oxigen mult mai mare

comparativ cu Hb A, aspect explicat prin faptul c
Hb F leag slab 2,3 BPG

lanurile polipeptidice din Hb F nu conin

aminoacizi cu radical ncrcat electric pozitiv
responsabili de ataarea Hb F

CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINA FETAL

afinitatea crescut
pentru oxigen a Hb F
faciliteaz transferul
oxigenului din circulaia
matern,
transplacentar, ctre
eritrocitele ftului

CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINA FETAL

n primele sptmni de la concepie, sacul vitelin

sintetizeaz o hemoglobin embrionar (Hb Gower
1), alctuit din 2 catene polipeptidice zeta () i 2
catene polipeptidice epsilon () (22)

dup alte cteva sptmni, ncepe s se

sintetizeze Hb F, pentru ca n ultimele luni ale vieii
embrionare aceasta s reprezinte aprox. 60% din
hemoglobina eritrocitar total

n jurul lunii a opta de sarcin, mduva

hematopoietic ncepe sinteza Hb A, care ulterior
va nlocui progresiv Hb F

Catene
polipeptidic

Procent din
hemoglobina
total

Hb A

22

90%

Hb F

22

<2%

Hb A2

22

2-5%

Hb A1c

22 glucoz

3-9%

HEMOGLOBINELE NORMALE ALE ADULTULUI

Tip de
hemoglobin

lanurile din
aceste tipuri
de
hemoglobine
sunt identice

CROMOPROTEINELE
DERIVAII HEMOGLOBINEI
Oxihemoglobina

Carbaminhemoglobina

HbO2, Hb(O2)2, Hb(O2)3

i Hb(O2)4

ecuaia chimic:
Hb(O2)n+O2Hb(O2)n+1
n= 0, 1, 2, 3.

15% din cantitatea total

de CO2 din snge
reacioneaz cu gruprile
amino ale resturilor de
valin - aminoacidul Nterminal al celor 4
protomeri ai Hb A

R-NH2+CO2R-NHCOOH

CROMOPROTEINELE
DERIVAII HEMOGLOBINEI
Carboxihemoglobina

afinitatea Hb pentru
CO este de 200 de ori
mai mare dect pentru
O2

intoxicaia cu CO poate
fi tratat prin creterea
pO2 n aerul inspirat,
astfel ndeprtndu-se
CO de pe Hb A

Methemoglobina
dac Fe2+ este oxidat la
Fe3+, hemul se numete
hemin iar met-Hb
rezultat nu se mai poate
oxigena
ageni oxidani:
fericianurile, peroxizii,
chinonele
n eritrocitul normal metHb reprezint cca 1 % din
cantitatea total de Hb

CROMOPROTEINELE
DERIVAII HEMOGLOBINEI
Methemoglobina

nivelul redus al met-Hb este meninut datorit

prezenei n eritrocit unei enzimei: methemoglobin
reductaza, care catalizeaz reducerea Fe3+ + e
Fe2+ i astfel conversia met-Hb n Hb

CROMOPROTEINELE
DERIVAII HEMOGLOBINEI
Ageni oxidani

met-Hb reductaza
redus

NADP+

met-Hb reductaza
oxidat

NADPH H+

Calea pentozofosfailor

CROMOPROTEINELE
DERIVAII HEMOGLOBINEI
Glicohemoglobina

gruprile -NH2 ale resturilor de valin de la capetele

N-terminale din componena protomerilor b din Hb A
reacioneaz neenzimatic cu glucoza liber din snge
formnd baze Schiff

nivelul Hb A1c depinde de nivelul glucozei i durata

meninerii la valori ridicate a concentraiei acesteia

CROMOPROTEINELE
DERIVAII HEMOGLOBINEI
Glicohemoglobina

un indicator al hiperglicemiilor cronice este

reprezentat de proteinele glicozilate: hemoglobina,
albumina, fructozamina

hemoglobina este preferat altor proteine pentru c

t1/2 este lung, aproximativ durata de via a
hematiilor 120 zile

albumina are t1/2 de 20 zile

CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINOPATIILE
definiie sunt afeciuni genetice determinate
de sinteza unor tipuri de hemoglobin care nu
mai prezint funcie biologic (hemoglobine
patologice), precum i de sinteza unor cantiti
insuficiente de Hb datorat deficienei sintezei
globinei
clasificare:
o hemoglobinopatii prin deficit calitativ
o hemoglobinopatii prin deficit cantitativ

CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINOPATIILE
hemoglobinopatia

S denumit i anemie
falciform, siclemie sau drepanocitoz

afeciune ereditar determinat de o mutaie

punctiform la nivelul genei responsabile de sinteza
lanurilor ale Hb (mutaie pe suprafaa moleculei Hb)

este o afeciune cu transmitere autozomal recesiv,

devenind manifest clinic la persoanele care au
motenit 2 gene mutante (cte o gen de la fiecare
genitor)

Mutaie punctiform n
secvena ADN
Mutaie cu sens greit

.GAG

-GAG-

aa1-aa2-aa3-aa4aa5-Glu-aa7.aan

.GTG

Secvena ARN

-GUG-

aa1-aa2-aa3-aa4aa5-Val- aa7.aan

CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINOPATIILE

hemoglobinopatia S denumit i anemie falciform,

siclemie sau drepanocitoz

rezultatul mutaiei este sinteza unei hemoglobine

anormale, n care un rest de Val (aminoacid cu
radical nepolar) nlocuiete restului de Glu6
(aminoacid cu radical polar ncrcat electric
negativ)

Hb S conine 2 lanuri i 2 lanuri s (22s)

Hb S determin apariia fenomenului de siclizare

CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINOPATIILE

hemoglobinopatia S denumit i anemie falciform,

siclemie sau drepanocitoz

nlocuirea unui aminoacid polar cu unul nepolar

determin rearanjarea spaial a lanului , care are
ca rezultat apariia unei protuberane pe suprafaa
lanului

aceast protuberan ptrunde ntr-o concavitate

complementar situat pe lanul a altei molecule
de Hb, astfel deoxi-Hb S sufer un proces de
polimerizare

CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINOPATIILE

Imagine prelucrat folosid imagini preluate de pe site-ul

Wikipedia (Free encyclopedia)

CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINOPATIILE

hemoglobinopatia S denumit i anemie falciform,

siclemie sau drepanocitoz

polimerizarea deoxi-Hb S determin apariia unei

reele de polimeri fibroi, care rigidizeaz i
distorsioneaz eritrocitele

eritrocitele iau un aspect falciform caracteristic

(celule n form de secer)

eritrocitele nu se mai pot deplasa cu uurin prin

vasele mici i rmn blocate n lumenul capilar
determinnd obstrucia vaselor sanguine mici

CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINOPATIILE

hemoglobinopatia Hammersmith

afeciune ereditar determinat de o mutaie

punctiform la nivelul genei responsabile de sinteza
lanurilor ale Hb (mutaie n interiorul moleculei de
Hb)

rezultatul mutaiei este sinteza unei hemoglobine

anormale, n care un restul de Phe42 a lanului
este nlocuit cu un rest de Ser

produii degradrii lanurile globinei mutante sunt

insolubili, i vor polimeriza formnd corpusculii
Heinz

CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINOPATIILE
o

hemoglobinopatia
Boston

rezultatul mutaiei
genice este nlocuirea
restului de His58 a
lanului cu un rest de
Tyr
cele 2 nlocuirile
determin meninerea
fierului n stare de
oxidat (Fe3+), astfel Hb
i pierde capacitatea de
transport al oxigenului

hemoglobinopatia
Saskatoon

rezultatul mutaiei genice

este nlocuirea restului
de His63 a lanului cu
un rest de Tyr
heterozigoii sunt
asimptomatici, cu
excepia prezenei
cianozei
starea de homozigot
este incompatibil cu
viaa

CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINOPATIILE

Talasemiile clasificare
talasemiile
talasemiile
apar prin mutaii de
apar prin mutaii
tip deleie care produc punctiforme care afecteaz
scderea sintezei
ARNm funcional, astfel
lanurilor
sinteza lanurilor este
redus sau absent
sinteza lanurilor i
este pstrat
sinteza lanurilor este
pstrat n limite normale

CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINOPATIILE

talasemiile

sunt afeciuni determinate de sinteza redus sau

absent a lanurilor globinice

genomul uman conine 4 copii ale genei globinice;

deleia lor determin diferite grade de deficite
cantitative ale sintezei lanurilor

cte o pereche de gene se gsete pe fiecare

cromozom 16

CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINOPATIILE
1. forma
heterozigot

este afectat numai una dintre gene

stare de purttor silenios
nu prezint manifestare clinic

2. forma
homozigot
dubl sau
heterozigot
dubl

talasemia minor
stare de purttor care transmite boala

3. hemoglobinopatia H

4. forma
homozigot

sunt afectate 3 gene

Hb H este format din 4 lanuri (4)
Hb Bart (4)
forme uoare i moderate de anemie
hemolitic

toate cele 4 gene sunt nefuncionale

anemie sever incompatibil cu viaa

CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINOPATIILE

talasemiile
sunt afeciuni determinate de sinteza redus sau
absent a lanurilor globinice

genomul uman conine numai 2 copii ale genei

globinice

cte o gen pe fiecare cromozom 11

lanurile se sintetizeaz n limite normale dar

aceste nu pot forma tetrameri stabili, precipitnduse i determinnd moartea prematur celular

CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINOPATIILE

talasemia
minor

este deficitar o singur gen

se sintetizeaz n cantiti reduse
lanuri
manifestrile clinice apar stric dup
natere
de obicei nu necesit tratament de
specialitate

talasemia
major
(anemia
Cooley)

ambele gene sunt deficitare

nou-nscui , aparent sntoi la
natere, pot dezvolta anemie sever
n primii 2 ani de via
necesit transfuzii regulate
transplantul de MO poate fi o an
pentru aceti pacieni