Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
INDICAII METODICE
privind unificarea metodelor de recoltare, transportare
i pregtire a probelor de produse alimentare
pentru examenul sanitaro-microbiologic
Indicaii metodice Nr. 06.3.3.60
Chiinu - 2004
Indicaiile metodice au fost elaborate de Centrul Naional tiinifico-Practic de Medicin Preventiv i Universitatea de Stat de
Medicin i Farmacie Nicolae Testemianu
Autori: Svetlana Prudnicionoc, Ala Halacu, Olga Cote, Alexei Chirlici.
1.
n indicaiile metodice prezente snt expuse cerinele normative privind recoltarea, transportarea i pstrarea probelor de
produse alimentare, snt generalizate i unificate metodele i procedeele de pregtire a probelor de produse alimentare pentru
cercetrile microbiologice. Metodele propuse snt oficiale i pot fi folosite n activitatea practic a laboratoarelor acreditate.
Refereni:
Radu Cojocaru eful laboratorului, secia Epidemiologia bolilor
convenionale i extrem de periculoase, Centrul Naional
tiinifico-Practic de Medicin Preventiv, doctor n medicin
Gheorghe Ostrofe- eful caterdei igien general, Universitatea de Stat de
Medicin i Farmacie Nicolae Testemianu, doctor habilitat n
medicin, profesor universitar
Examinat i aprobat spre editare de Consiliulul de Experi al Ministerului Sntii al Republicii Moldova la 02.02.2004, procesverbal nr. 14.
Cuprins
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
7.1
7.1.1
7.1.2
7.1.3
7.1.4
7.2
7.3
7.4
7.5
7.6
7.7
7.8
7.9
7.10
8.
9.
Domeniul de aplicare...
Cerine generale privind recoltarea probelor de produse alimentare...
Transportul probelor n laborator.
Recepionarea i depozitarea probelor n laborator.....
Recoltarea cantitii msurate a probei de analizat pentru investigare
Depozitarea i decontaminarea mostrelor de laborator...
Pregtirea probelor diferitor grupe de produse alimentare pentru examenul sanitaromicrobiologic........
Laptele i produsele lactate..
Produse lactate lichide, semilichide i sub form de past......
Produse lactate sub form de praf
Unt, ngheat...
Cacaval, brnz, produse din brnz, produse sub form de past.
Carnea i produsele din carne..
Petele i produsele din pete..
Produse congelate
Condimente, mirodenii i amestecuri de mirodenii, produse uscate cu
adaos de condimente i mirodenii
Maionez, sosuri emulsionate, sosuri gate reci...
Aditivii alimentari i condimentele (soluii, emulsii, prafuri).
Buturi rcoritoare, ape minerale, sucuri din legume i fructe, bere,
siropuri.
Zahrul i produsele de cofetrie.
Conservele...
Reactivele i soluiile reactivelor
Mijloace de msurare, echipament de laborator, reactive, materiale i
instalaii auxiliare.
Anexa 1 Cantitile optimale ale diferitor tipuri de produse alimentare, necesare pentru
examenul sanitaro-microbiologic..
Anexa 2 Noiuni i definiii...
Bibliografie .
4
4
5
5
7
7
8
8
8
10
10
11
11
12
13
14
14
15
16
17
17
19
21
23
29
30
APROB
Medic - ef sanitar de Stat
al Republicii Moldova
I. Bahnarel
IM Nr. 06.3.3.60
22 aprilie 2004
INDICAII METODICE
privind unificarea metodelor de recoltare, transportare
i pregtire a probelor de produse alimentare
pentru examenul sanitaro-microbiologic
1.Domeniul de aplicare
Prezentul document este elaborat pentru controlul produselor alimentare i stabilete metodele de recoltare, transport,
pstrare, rebutare i pregtire a probelor produselor alimentare pentru examenul sanitaro-microbiologic n laboratoarele
Serviciului Sanitaro-Epidemiologic de Stat, laboratoarele instituiilor medicale, laboratoarele departamentale i laboratoarele
tiinifice.
Metodele snt adaptate pentru condiiile de lucru a laboratoarelor, ce corespund cerinelor 1.2.731-99 oo
o oor III-IV r oro r i dein permis de lucru cu microorganismele din
grupa a III-IV de patogenitate, conform cerinelor stabilite.
2.Cerine generale privind recoltarea probelor de produse alimentare
Recoltarea probelor se efectueaz de o persoan special instruit privind tehnica de recoltare a probelor pentru analiza
sanitaro-microbiologic, mputernicit de prile interesate. Persoana dat acioneaz de sine stttor, fr o intervenie strin.
Specialistul responsabil de recoltarea probelor poate primi ajutor de la alte persoane interesate, ns responsabilitatea se asum.
Manipulrile efectuate n timpul recoltarii probelor de persoana instruit i asistenii si, trebuie s exclud contaminarea probei
sau a lotului n ntregime.
n momentul recoltarii probelor pot fi prezeni specialitii interesai.
Recoltarea probelor trebuie efectuat n corespundere cu cerinele standardelor specifice, elaborate pentru grupa de
produse examinat, folosind instrumente sterile. Pentru aceasta laboratorul trebuie s dispun de un set de instrumente, prevzut
pentru diferite grupe de produse (p. 9.24), fabricat din materiale, rezistente la temperaturi nalte.
n lipsa standardelor specifice, recoltarea se efectueaz conform GOST 26668-85 sau la acordul prilor interesate.
Cantitile optimale al diferitor tipuri de produse, necesare pentru examenul sanitaro-microbiologic, este prezentat n anexa 1.
Sticlria, instrumentele i materialele, care n timpul recoltrii au fost n contact cu produsul alimentar, se sterilizeaz
prin una din metodele urmtoare:
- n autoclave cu vapori saturai sub presiune timp de 30 min la temperatura de (1211)0;
- n sterilizatoare cu aer cald - cu circularea forat a aerului la temperatura de 170-1750 timp de 60 min; fr circularea
forat a aerului la temperatura de 160-1650 timp de 120 min, la 180-1850 timp de15 min.
Este important, ca laboratorul s primeasc probe care sunt cu adevrat reprezentative pentru produs i care nu au suferit
deteriorri sau modificri n timpul transportului sau depozitrii.
3. Transportul probelor n laborator
La transportarea probelor n laborator este necesar de a asigura depozitarea lor n condiii n care s se previn orice
modificare a numrului de microorganisme prezente n ele. Este preferabil s se ia toate msurile pentru ca transportul s fie ct
mai rapid.
Transportul probelor este necesar de a fi efectuat de un autotransport special n lzi compartimentate cu ageni frigorifici
sau n geni frigorifice, care snt supuse prelucrrii nainte de fiecare recoltare a probelor. O atenie special trebuie acordat
respectrii regimului de temperatur prevzut pentru transportarea produselor alimentare enumerate mai jos:
- produsele neperisabile (incl. conserve) temperatura mediului nconjurtor;
- produsele perisabile, inclusiv proaspete i refrigerate ntre 0 i +40C;
- produsele congelate sau puternic congelate sub minus 180C;
- produsele pasteurizate i similare - ntre 0 i +40C;
- mostrele produselor neperisabile alterate - ntre 0 i +40C;.
AVERTIZARE: produsele alimentare perisabile (de exemplu: subprodusele, petele proaspt) trebuie pstrate la temperaturi ntre 0
i +20C.
n timpul transportrii nu se permite congelarea probelor recoltate, n deosebi n anotimpul de iarn.
Produsele alimentare alterate se transport n ambalaje nchise, pentru a fi protejate mpotriva unei posibile scurgeri
de coninut.
4. Recepionarea i depozitarea probelor n laborator
Probele recoltate trebuie primite n laborator n form codificat din cabinetul de recepie sau de ctre persoana, care a
efectuat recoltarea lor (atunci cnd lipsete cabinetul de recepie).
Personalul din laborator trebuie s verifice la recepionare starea probelor. Dac starea lor este nesatisfctoare sau
probele nu corespund cerinelor reglamentate (umezirea dopurilor, deteriorarea ambalajului, nerespectarea termenelor i
condiiilor de transportare, nerespectarea regulilor de recoltare, necorespunderea cantitii materialului recoltat, necorespunderea
etichetei indicate pe ambalaj i buletinul de analiz, etc.), laboratorul este obligat s rebuteze probele date, nregistrndu-le n
registrul de rebutare (forma de eviden 394/e), cu ntiinarea persoanei care a efectuat recoltarea. n situaii excepionale,
investigarea acestor probe se permite, ns n procesul-verbal trebuie argumentat rezultatul obinut.
Buletinul de analiz trebuie s cuprind toate datele de identificare despre mostra (proba) dat:
- numrul probei;
- denumirea i numrul exemplarelor (cantitatea),
- numrul i volumul lotului;
- ambalajul, eticheta (data fabricrii sau termenul de valabilitate a produsului);
- codul / locul recoltrii (la necesitate)
- data i timpul recoltrii;
- documentele normative (DN) conform crora a fost efectuat recoltarea;
scopul cercetrii*;
- motivul investigaiei (supraveghere sanitar curent, conform indicaiilor epidemiologice, certificare igienic);
- funcia, numele, semntura persoanei care a recoltat proba.
Toate etapele cercetrii se documenteaz conform formelor de eviden aprobate astfel, nct s poat fi urmrite pn la
redactarea buletinului de analiz (rezultatul investigaiei).
n registrele de lucru trebuie s fie nscrise urmtoarele date:
- data i timpul intrrii probei n laborator;
- numrul de nregistrare;
- denumirea i caracteristica produsului (ambalajul, data fabricrii sau termenul de valabilitate, ara productoare, cantitatea);
- codul sau numele i adresa solicitantului/ denumirea ntreprinderii/;
- numele i prenumele persoanei care a transportat proba.
Odat primite n laborator probele trebuiesc investigate imediat (maximum 4h), din momentul recoltrii. Dac probele nu pot
fi examinate imediat, acestea se pstreaz n condiii optime, prevenind orice modificare a numrului de microorganisme prezente
(pentru majoritatea produselor temperatura de pstrare constituie 2-60C).
O atenie deosebit trebuie acordat temperaturii de pstrare i termenelor limit de examinare pentru urmtoarele produse:
- produsele stabile microbiologic (neperisabile) n timp ct mai scurt, pn la expirarea termenelor de pstrare;
- produsele proaspete i proaspt refrigerate timp de 24 h dup intrarea n
laborator, la necesitatea pstrrii unui timp mai ndelungat probele snt congelate
la temperaturi sub minus 180C, fapt ce se nregistreaz n procesul-verbal al investigaiilor, deoarece pentru unele alimente
congelarea produce modificri ale
componenei microflorei;
____________________________________________________________________________
*La efectuarea cercetrilor n scopul supravegherii sanitaro-epidemiologice curente se indic volumul cercetrilor (indicii calitii
i inofensivitii) pentru produsul dat; la efectuarea cercetrilor n scopul certificrii igienice - documentul normativ (i punctul),
care normeaz indicii calitii i inofensivitii pentru produsul certificat (SanPiN, GOST etc.).
- produsele pasteurizate i produsele similare - ct de repede posibil, pn la expirarea termenelor de valabilitate;
- probele produselor neperisabile alterate ct de repede posibil, dar nu mai trziu de 48 h.
5. Recoltarea cantitii msurate a probei de analizat
pentru investigaii
n vederea evitrii contaminrii mediului nconjurtor i cantitii msurate din proba de analizat*, pentru efectuarea
examenului microbiologic snt prevzute ncperi speciale sau boxe aseptice. n lipsa acestora, produsele la care bnuim c gradul
ncrcturii microbiene poate fi mai mic (exemplu: produsele pasteurizate sau felurile de bucate gata), trebuie examinate
ntotdeauna primele, urmate de alt produs cunoscut ca avnd un grad de contaminare mai nalt.
Protecia mediului nconjurtor are o deosebit importan, n timpul cntririi i prelucrrii probelor de produse
pulverulente cu un grad ridicat de contaminare. Aceast procedur urmeaz a fi efectuat n box.
Prelevarea cantitilor msurate din proba de analizat se efectueaz astfel, nct s se evite orice risc de contaminare.
Pentru aceasta se i-au n vedere urmtoarele msuri de precauie:
- lucrul se efectueaz neaprat n preajma flcrii lampei de spirt;
- n cazul produselor ambalate, exteriorul ambalajului n locul deschiderii se cur cu alcool de 70%, dac e posibil se
flambeaz;
- orice instrument folosit la deschiderea ambalajelor (cuit, foarfece, etc.), trebuie s fie steril;
- orice instrument folosit la recoltarea cantitii msurate din proba de analizat (lingur, penset, pipet .a.), trebuie s fie
steril;
- pachetul de plastic, vasul sau alte recipiente cu cantitatea msurat din proba de analizat se marcheaz (numrul de
nregistrare) grijuliu pentru identificarea mostrei iniiale (probei).
6. Depozitarea i decontaminarea mostrelor de laborator
Mostrele de laborator trebuie pstrate pn la obinerea rezultatelor sau cu excepia cazurilor speciale mai mult, dac este
necesar. Mostrele se ambaleaz n recipiente sterile sau pungi din plastic i se pstreaz la temperatura de depozitare a produsului
dat. Produsele proaspete refrigerate se pstreaz n condiii de congelare.
Mostrele de laborator la finalizarea investigaiilor, nainte de a se arunca, se decontamineaz.
*cantitatea msural din proba de analizat cantitatea (volimul) probei prevzute pentru omogenizare, pregtirea diluiilor iniiale
sau nsmnarea prin metoda ncorporrii n mediile nutritive
7.1.4. Cacaval, brnz, produse din brnz, produse sub form de past
Metoda este util pentru toate tipurile de cacaval, brnzeturi i produse sub form de past.
7.1.4.1. Pregtirea probei
Proba examinat n cantitate de 10 g se tritureaz ntr-un mojar steril, pn la omogenizare complet.
7.1.4.2. Pregtirea diluiei iniiale.
Peste cantitatea msurat din produsul analizat (10 g) se adaug 90 m3 lichid diluant conform p.p. 8.1-8.4, p. 8.5 (pentru
cacaval), nclzit pn la (452), conform metodelor descrise n continuare n p. 7.1.4.2.1.- 7.1.4.2.2
7.1.4.2.1. Metoda este util pentru produsele sub form de past.
10 g recoltate din proba adus se omogenizeaz cu ajutorul pistilului ntr-un mojar steril cu 10-15 m3 diluent, nclzit pn la (45
2). Suspensia se trece ntr-un recipient steril. Cu lichidul diluant rmas se cltete pistilul i mojarul, care apoi se adaug n
recipientul cu proba.
nainte de nsmnare proba se agit intens prin rotirea ei de 25 ori timp de 10 sec apoi se las n repaos 10-15 min pentru
eliminarea bulelor de aer.
7.1.4.2.2. Metoda se utilizeaz n cazul produselor fragile i frmiciose.
Peste 10 g din produsul analizat, ntr-un recipient (p. 9.26) sau ntr-o pung din material plastic (p. 9.9), se adaug 90 m3
lichid diluant. Se pune n funcie omogenizatorul rotativ, pe o durat n care numrul total de turaii s fie cuprins ntre 15000
20000 timp de 2,5 min. Omogenizatorul de tip stomacher se las s funcioneze timp de 1-2 min n funcie de natura produsului.
Dup aceasta suspensia se trece ntr-un recipient gol, unde pentru prelucrarea ulterioar se agit intens prin rotirea ei de 25 de ori
timp de 10 sec, meninndu-se timp de 10-15 min pentru eliminarea bulelor de aer.
Astfel, 1 m3 suspensie corespunde la 0,1 g produs (diluia 1:10).
7.3.2.2 n lipsa aparatului pentru omogenizare se permite pregtirea suspensiei prin triturarea a 10 g produs n mojar steril
cu 2-3 g nisip steril, adugnd treptat 90 m3 lichid diluant. Particulele mari se las s se depun, dac este necesar, timp de max.
15 min, apoi cu o nou pipet se prelev suspensia, pentru nsmnarea n mediile nutritive uzuale.
Astfel, 1 m3 suspensie corespunde la 0,1 g produs (diluia 1:10).
7.3.3. Diluii decimale succesive
Pregtirea conform p. 7.1.1.3.
7.4 Produsele congelate
Metoda este util pentru carne, pete, produse de cofetrie i patiserie, legume, fructe, preparate culinare congelate, ghea
alimentar.
7.4.1. Pregtirea probei
Probele se elibereaz (la necesitate) de ambalaj, apoi se trec ntr-un recipient steril, unde se vor pstra pentru decongelare la
temperatura de +50 timp de cca 1012 h sau la temperatura camerei - 2-3 h. La cercetarea produselor, alctuite din mai multe
componente, este necesar ca proba examinat s cuprind toate prile componente ale produsului.
7.4.2. Pregtirea diluiei iniiale
Peste 20 g din produsul examinat, pregtite conform p. 7.4.1. se adaug 180 m3 lichid diluant, nclzit pn la (45 2)
(p.p. 8.1-8.3) cu omogenizare ulterioar, conform metodelor descrise n continuare n p.p. 7.4.2.1.7.4.2.2.
7.4.2.1 Metoda este utilizat pentru probele produselor cu consisten solid, precum i probelor, care conin diferite adaosuri.
7.4.2.1.1. 20 g din produsul cercetat n limita posibilitilor se omogenizeaz ntr-un mojar steril cu 20 m3 lichid diluant, nclzit
pn la temperatura de (+45 2). Suspensia obinut se trece ntr-un recipiemt steril. Cu lichidul de diluare rmas se cltete
pistilul i mojarul, care apoi se adaug n recipientul cu proba. nainte de nsmnare, proba se agit intens prin micri de rotaie
de 25 ori, timp de 10 sec i se menine n repaos pentru eliminarea bulelor de aer.
7.4.2.1.2. 20 g din proba examinat se transfer ntr-un omogenizator cu 180 m3 lichid diluant, nclzit pn la (45 2).
Agitarea se efectuaz pn la obinerea unei suspensii uniforme a probei examinate (perioada de omogenizare la utilizarea
omogenizatorului rotativ constituind - 1500020000 turaii/min - 2,5 min, la utilizarea stomacherului - 2 min). Prin urmare,
suspenzia obinut se trece ntr-un recipient steril. Pentru prelucrarea ulterioar aceasta se agit intens prin rotirea ei de 25 ori,
timp de 10 sec, meninndu-se 10-15 min pentru eliminarea bulelor de aer.
7.4.2.2. Metoda este utilizat pentru probele produselor cu consistena omogen (lichide i sub form de past)
20 g din proba examinat, pregtit conform p. 7.4.1. se trece ntr-un recipient unde se agit cu 180 m3 lichid diluant, nclzit
pn la temperatura de (+452)0.
Astfel, 1 m3 de suspensie corespunde la 0,1 g produs (diluia 1:10).
7.4.3. Diluiile decimale succesive
Pregtirea conform p. 7.1.1.3.
7.5. Condimente, mirodenii i amestecuri din mirodenii, produse uscate cu adaos de condimente i mirodenii.
Metoda este util pentru toate felurile de condimente i mirodenii, amestecuri din ele i produse uscate n care snt adugate
acestea (concentrate de sup, bulion).
7.5.1. Pregtirea probei
Proba se agit intens. n cazul, cnd ambalajul este prea plin, atunci coninutul lui se trece ntr-un recipient mai mare, unde
poate fi amestecat. La necesitate proba se frmieaz.
7.5.2. Pregtirea diluiei iniiale
10 g din proba cercetat, pregtit conform p. 7.5.1. se trece ntr-un recipient steril unde se agit cu 90 m3 lichid diluant.
Dac, produsul examinat conine grsimi, lichidul diluant se adaug nclzit pn la (+45 2). Praful se nmoaie cu precauie i
se agit timp de 3-5 min prin micri uoare de rotaie pn la dizolvare i se menine n repaos nu mai mult de 15 min pentru
eliminarea bulelor de aer.
Astfel, 1 m3 suspensie corespunde la 0,1 g produs (diluia 1:10).
7.5.3. Diluiile decimale succesive
Pregtirea conform p. 7.1.1.3.
7.10. Conservele
Tehnica nsmnrii este util pentru toate tipurile de conserve din carne, pete, legume, fructe, conserve mixte din carne
i pete cu legume i fructe, cu excepia conservelor din lapte.
7.10.1 Pregtirea probei
Not: Pregtirea i nsmnarea n laborator a conservelor pentru controlul sterilitii industriale, se efectueaz n
box, cu respectarea cerinelor de asepsie. Personalul, care efectueaz nsmnrile, terbuie s fie echipat cu haine de
protecie sterile. Materialele i utilajul de laborator (perforatorul, vesela de laborator etc.) utilizate la efectuarea
nsmnrilor, trebuie s garanteze respectarea condiiilor sterile de nsmnare. n timpul efecturii investigaiilor se
testeaz calitatea aerului.
Pregtirea preventiv a probelor (controlul aspectului exterior, nregistrarea, prelucrarea sanitar) se efectuaz conform
GOST 26669-85; determinarea etanitii conservelor conform GOST 8756.18-70; incubarea conform GOST 10444.0-75,
GOST 26669-85.
Incubrii snt supuse conservele nchise ermetic, fr defecte ale ambalajului, prevzute pentru:
- determinarea sterilitii sau sterilitii industriale,
- determinarea numrului total de germeni prin metoda numrrii pe plac,
- decelarea agenilor de alterare n produse,
- decelarea n produse a microflorei patogene i toxigene,
- examinarea aspectului exterior al conservelor conform indicatorilor stabilii, care pot influiena estimrea microbiologic a
calitii produsului.
Incubrii nu snt supuse:
conservele, prevzute pentru determinarea toxinei botulinice (GOST 10444.7-86),
concervele cu bombaj i alte conserve cu semne de alterare microbian,
conservele n tar neermetic.
7.10.1.1. La determinarea sterilitii sau sterilitii industriale:
- depistarea activitii vitale a microorganismelor mezofile aerobe i facultativ anaerobe, microorganismelor anaerobe se
efectueaz, conform (GOST 30425-97), determinarea numrului total de germeni prin numrarea lor pe plc conform GOST
10444.15-94.
conservele cu -ul de 4,4 se incubeaz la (37 0,5)0:
conservele cu -ul pn la 4,4 se incubeaz la (30 0,5)0:
5 zile - conservele n ambalaj cu capacitatea pn la 1 dm3
7-10 zile conservele n ambalaj cu capacitatea mai mare de 1dm3 .
la depistarea activitii vitale a microorganismelor termofile aerobe i facultativ anaerobe, microorganismelor termofile
anaerobe (GOST 30425-97), conservele se incubeaz 3 zile la temperatura de (55 0,5)0.
7.10.1.2. La decelarea agenilor de alterare, microorganismelor patogene i toxigene: conservele se incubeaz la temperatura,
reglamentat pentru incubarea nsmnrilor corespunztor tipului sau grupei de microorganisme examinate:
S.aureus (GOST 10444.2-94), B.cereus (GOST 10444.8-88), C. erfringens (GOST 10444.9-88), microorganisme acidolactice
(GOST 10444.11-89), levuri i mucegaiuri (GOST 10444.12-88)
-5 zile - conservele n ambalaj cu capacitatea pn la 1 dm3
-7 zile - conservele n ambalaj cu capacitatea mai mare de 1dm3.
C.botulinum i toxinele botulinice (GOST 10444.7-86)
-14 zile conservele n ambalaje cu capacitate diferit.
7.10.1.3. Pentru determinarea aspectului exterior al conservelor, conform indicilor, care acioneaz la estimarea microbiologic a
calitii, conservele se incubeaz:
la depistarea alterrii, provocate de microorganismele mezofile i microorganismele termofile, conform p. 7.10.1.1.
nainte de a deschide conservele (cu excepia celor bombate), produsul se agit prin ntoarcerea ambalajului de cca 10 ori.
Deschiderea conservelor se efectueaz conform GOST 26669-85 p. 2.5.1., 2.5.4., 2.5.5.
Probele conservelor, prevzute pentru nsmnarea n mediile nutritive uzuale, se prelev conform GOST 26669 p. 2.6.1.2..8., 2.6.12 i GOST 30425-97 p. 7.3
-
7.10.2 Pregtirea probelor produselor constituite din faza solid sau solid i lichid pentru analiza sterilitii industriale.
La 10 g produs analizat se adaug 10 cm3 soluie de diluare, conform p.p. 8.1-8.3 i se omogenizeaz conform p. 7.10.2.1.
sau 7.10.2.2.
7.10.2.1. La utilizarea omogenizatorului rotativ, numrul total de turaii trebuie s fie cuprins ntre 15000-20000, cu o
perioad de omogenizare de 2,5 minute. La utilizarea stomacherului durata procesului de agitare constituie 2 minute.
7.10.2.2 n lipsa aparatului pentru omogenizare, se prevede pregtirea suspensiei prin triturarea a 10 g produs ntr-un mojar
steril, cu 2-3 g nisip steril, peste care treptat se adug 10 cm3 lichid de diluare. Suspensia obinut corespunde diluiei 1:2 (diluia
iniial).
Astfel, 2 cm3 suspensie obinut corespunde la 1 g produs, 10 cm3 suspensie - 5 g produs.
Pentru nsmnarea pe mediile nutritive uzuale, suspensia meninut max.15 minute la temperatura camerei, se prelev cu
o pipet steril gradat.
Not: Probele produselor lichide, care pot fi examinate fr diluri, se supun doar omogenizrii.
7.10.3 Diluiile decimale succesive
n corespundere cu specificul examenului de laborator (pentru nsmnrile prin metoda incorporrii n plac) este necesar
pregtirea diluiilor decimale succesive. Pentru aceasta, 2 cm3 suspensie (1 g. produs) din diluia de pornire conform p. 7.10.2 se
trece n 8 cm3 lichid de diluare, ce va corespunde diluiei 1:10 (0,1 g aliment). Acest procedeu se efectueaz astfel, nct pipeta s
fie totalmente descrcat, evitnd orice contact cu pereii eprubetei i lichidul diluant. Coninutul eprubetei se omogenizeaz prin
una din metodele descrise n p. 7.1.1.3. Pentru a obine diluia 1:100 (0,01 g. produs), este necesar ca 1 cm 3 din diluia 1:10 s fie
adugat n 9 cm3 lichid diluant. Pentru fiecare diluie se folosete o alt pipet steril.
8. Reactivele i soluiile reactivelor
Reactivele folosite pentru analiza microbiologic terbuie s fie pure pentru analiz (PPA) sau chimic pure (CP).
Apa utilizat trebuie s fie distilat sau de calitate echivalent, care s nu conin substane favorabile inhibrii sau
influienrii creterii microorganismelor n condiiile analizei. Calitatea apei se apreciaz conform rezistenei specifice, care nu
trebuie s fie mai mic de 300000 Om/cm.
Pentru diluare poate fi folosit una din soluiile enumerate mai jos:
- soluie fiziologic peptonat (p. 8.1),
- ap peptonat de 0,1% (p.8.2),
- soluie fiziologic (p. 8.3),
- soluie tampon fosfat (p. 8.4),
- soluie citrat de sodiu (p. 8.5),
Soluia de diluare se repartizeaz n recipiente (eprubete, flacoane) de capacitate potrivit, n asemenea cntiti, nct, dup
sterilizare, volumul lor s fie mai mare de 9 ori dect cantitatea (volumul) probei pentru analiz ( 2%). Temperatura lichidului
diluant nainte de utilizare, n lipsa indicaiilor specifice trebuie s fie n limitele de 10 - 200C.
8.1 Soluie fiziologic peptonat
Ingrediente:
- 8,5 g clorur de sodiu (Nl),
- 1,0 g pepton sau tripton n aceia cantitate,
- 1000 cm3 ap distilat.
Prile componente se dizolv n 200 cm3 ap distilat, dup care se completeaz cu ap distilat pn la 1000 cm3. Se ajusteaz
-ul la 7,0 0,1 la 25C, se repartizeaz cte 10 cm3 n eprubete i cte 100 cm3 n baloane, dup care diluantul se autoclaveaz
20 min la (121 1).
Soluia se pstreaz la ntuneric la temperatura de (4 2), maximum 30 zile de la preparare n condiii, ce exclud deshidratarea.
9.21 Perforator.
9.22 Dopuri conice din cauciuc.
9.23 Pepton fermentativ uscat, conform GOST- ului 13805-76.
9.24 Utilaje de prelevare a probelor: lingur pentru ngheat, lingur pentru
smntn, lingur pentru bucate gata, sond pentru unt, sond pentru brnz,
sond pentru cacaval, sond pentru produse friabile, furculi, cu, cuit,
etc.
9.25 -metru cu corecia pH-ului, conform GOST 9245-79.
9.26 Omogenizator rotativ cu recipiente de sticl sau de metal, prevzute de
preferin cu capace rezistente la condiiile de sterilizare.
9.27 Alcool etilic tehnic rectificat, conform GOST 18300-87.
9.28 Etuv, care permite meninerea temperaturii ntre 50 0 - 2000, cu precizia
de 20.
9.29 Sterilizator medical cu vapori, conform GOST 19569-89.
9.30 Frigidere i congelatoare uzuale electrice, conform GOST 26678-85.
9.31 Citrat de sodiu, conform GOST 22280-76.
9.32 Suporturi metalice sau din plastic.
9.33 Spatule metalice sau din porelan, 15-20cm.
9.34 Ap distilat, conform GOST 6709-72.
Se permite utilizarea altor mijloace de msurare cu caracteristici metrologice i utilaje cu caracteristici tehnice identice
sau mai avansate, precum i reactive cu caliti nu mai joase dect cele sus-menionate.
Anexa 1
Cantitile optimale ale diferitor tipuri de produse alimentare, necesare
pentru examenul sanitaro-microbiologic*
Tipul produsului
2
Produse obinute la prelucrarea cerealelor
-fin, crupe, fulgi i produse
n ambalaj de consum:
GOST 26972-86
secundare obinute la prelucrarea
- pn la 1000 g - o unitate, dar nu mai puin de
produselor cerealiere,
100 g
- mai mare de 1000 g - nu mai puin de
200 g.
-paste finoase.
n ambalaj de transport:
- n saci proba unificat 200 g,
- n mijloace speciale de transport 5
probe unificate cu masa de 200 g, fiecare.
Produse obinute la prelucrarea uleiurulor vegetale
-margarin,
n ambalaj de consum:
GOST 9225-84
-grsimi penru culinrie, produse de - o unitate, dar nu mai puin de 100g
GOST 26668-85
cofetrie i panificaie,
-maionez,
n ambalaj de transport:
- pn la 1000 g, dar nu mai puin de
GOST 30004.2-93
100 g,
GOST 7269-79
GOST 7702.2.0-95
-crenvurti, crnciori,
-produse fr membran (pateuri,
rcituri), becon srat,
-pulpe,
-unc din carne de pasre,
3 exemplare
GOST 20235.0-74
GOST 9792-73
GOST 9958-81
1
-produse culinare i semipreparate
din carne tocat (prjoale, niel,
chifle din carne umplute cu crupe,
rulade, biftecuri).
2
Din selecie - 3 exemplare
GOST 26668-85
n ambalaj de consum:
- nu mai puin de o unitate (cu masa nu mai mic
de 100 g ),
n ambalaj de transport:
- pn la 1000 g (cm3) sau nu mai puin de
100 g.
3 uniti- n ambalaj pn la 1000 cm3,
1unitate n ambalaj mai mare de 1000 cm3.
GOST 30364.0-96
GOST 30364.2-96
-ou,
- jelatina alimentar
n ambalaj de consum:
- nu mai puin de o unitate (cu masa nu mai
mic de 100 g );.
n ambalaj de transport:
- pn la 1000 g, sau nu mai puin de 100 g
3
GOST 4288-76
GOST 8756.0-70
RM a.1990
GOST 26668-85
GOST 11293-89
GOST 7631-85
GOST 26668-85
GOST 8756.0-70
GOST 7631-85
n ambalaj de consum:
- nu mai puin de o unitate.
GOST 26668-85
GOST 7631-85
2
proba medie de la 0,14 pn la 0.45 kg, n
dependen de lotul examinat i scopul cercetrii.
3
GOST 7631-85
n ambalaj de consum:
- nu mai puin de o unitate (cu masa
nu mai mic de 100 g )
n ambalaj de transport:
- pn la 1000 g, sau nu mai puin de 100 g.
GOST 26668-85
GOST 7631-85
GOST 13928-84
GOST 9225-84
din seleciune:
-n ambalaj de consum cte o unitate (cu masa nu
mai mic de 100 g )
-n ambalaj de transport nu mai mult de 500cm3
(g).
din seleciune:
-n ambalaj de consum - o unitate (cu masa nu mai
mic de 100 g ),
- n ambalaj de transport proba unificat cu masa
de 100 g, din producia cu adaosuri 150 g.
GOST 26809-86
GOST 9225-84
GOST 26809-86
din seleciune:
n ambalaj de consum o unitate, ns nu mai puin
de 100 g,
n ambalaj de transprot prob unificat cu masa
de 300 g;
5 uniti din lot n ambalaj de consum.
din seleciune
-n ambalaj de consum cte o unitate, ns nu mai
puin de 50 g;
-n ambalaj de transport nu mai puin de 50 g din
proba unuficat.
n ambalaj de transport:
nu mai puin de 200 cm3;
n ambalaj de consum:
- cu masa pn la 200 cm3 3 uniti,
- cu masa mai mare de 200 cm3 - 1 unitate din
fiecare lot.
- nu mai puin de 100 cm3.
GOST 26809-86
GOST 9225-84
2
Legume, fructe:
n ambalaj de consum:
- nu mai puin de o unitate ( cu masa nu mai mic
de 100 g).
n ambalaj de transport:
- pn la1000 g, dar nu mai puin de 100 g.
n ambalaj de consum:
- nu mai puin de o unitate (cu masa nu mai mic
de 100 g).
maiele
1
-legume congelate sau refrigerate,
cartofi, bostnoase, fructe,
pomuoare, ciuperci, nuci (ntregi,
tiate, frmiate i produsele
obinute la prelucrarea lor)
-legume uscate cu umeditate
intermediar, cartofi, nuci, fructe,
pomuoare (ntregi,
GOST 26809-86
GOST 9225-84
GOST 26809-86
GOST 9225-84
GOST 26809-86
GOST 9225-84
RM 3928-85
42-123-4423-87
GOST 26668-85
GOST 26668-85
-concentrate alimentare,
-felurile I i II, inclusiv pentru
pregtire rapid
-concentrate alimentare,
-dulciuri, deserturi,
-polufabricate din paste finoase,
-dejunuri deshidratate,
-fulgi de porumb i gru,
-sosuri culinare sub form de praf.
-cafea, buturi din cafea,
-cicoare uscat pentru export,
- ceai
1
-condimente i mirodenii
(piper negru boabe, piper
mirositor, piper rou rnit, chimen,
badian, nucuoare, scorioar etc.)
- bucate pentru prnz conservate, cu
ntrebuinare special.
- colorani alimentari naturali.
- ap mineral potabil de
mas, curativ i de mas
natural,
- ap potabil ambalat.
- buturi nealcoolice (buturi din
mal, buturi obinute prin
fermentare, buturi obinute din
materia prim a cerealelor),
siropuri;
- concentrate de must, concentrate
i extracte de alaun.
n ambalaj de transport:
- pn la1000 g, dar nu mai puin de 100 g.
- nu mai puin de 500 g,
- extracte 300 cm3.
GOST 8756.0-70
GOST 8756.0-70
GOST 8756.0-70
RM din29.06.88
GOST 26668-85
GOST 26668-85
n ambalaj de consum:
- nu mai puin de o unitate (cu masa nu mai mic de
100 g).
n ambalaj de transport:
- pn la1000 g (cm3) sau nu mai puin de 100 g.
GOST 26668-85
2
n ambalaj de consum:
- nu mai puin de o unitate (cu masa nu mai
mic de 100 g).
n ambalaj de transport:
- pn la1000 g sau nu mai puin de 100 g.
3 unit - cu masa pn la 1000 cm3,
1 unit - cu masa mai mare de 1000 cm3.
n ambalaj de consum:
- nu mai puin de o unitate (cu masa nu mai
mic de 100 g).
n ambalaj de transport:
- pn la1000 g, dar nu mai puin de 100 g.
n ambalaj de consum:
- nu mai puin de o unitate (cu masa nu mai mic
de 100 g).
n ambalaj de transport:
- pn la1000 g n dependen de volumul lotului,
dar nu mai puin de 100 g.
Ap mineral, buturi nealcoolice, bere, vin.
-produse finite - de la 2 pn la 18 unit. n
dependen de volumul lotului.
-din fiecare cistern - nu mai puin de 200 cm3.
3
GOST 26668-85
n ambalaj de consum:
- 2 uniti din lotul selectat.
n ambalaj de transport:
- pn la 500-1000 cm3
GOST 28188-89
GOST 6687.0-86
10-06-140-87
GOST28538-90
GOST 1513.0-77
GOST 8756.0-70
GOST 26668-85
GOST 7698-93
GOST 26668-85
GOST 23268.0-91
- bere
- vin, materiale pentru prepararea
vinului.
- caramele, bomboane glazurate i
neglazurate, fondantele, griliaj,
praline, bomboane de maripan,
fructe i pomuoare confiate, iris;
- bomboane, dulciuri orientale de
felul bomboanelor n cutii.
- halva, pastil (marmelad din
fructe), zefir, marmelad, jeleuri.
- gum de mestecat.
GOST 12786-80
GOST 14137-74
Produse de cofetrie
n ambalaj de transport:
- probe unificate n volum nu mai mic de 600 g.
GOST 5904-82
n ambalaj de consum:
- 2 cutii cu masa net pn la 400 g.
- o cutie cu masa net mai mare de 400 g.
- probe unificate cu masa nu mai mic de 400 g.
GOST 5904-82
- nu mai puin de 50 g
GOST 5904-82
GOST 5904-82
1
2
- buturi din cacao, cacao-praf
- probe unificate cu masa nu mai mic de 300 g.
pentru producere, praf de ciocolat.
- ciocolat i produse din ciocolat, - cu masa mai mare de 100 g.-1 baton de ciocolat,
- cu masa de la 50 pn la 100 g-3 batoane,
- cu masa pn la 50 g.- 6 batoane.
3
GOST 5904-82
n ambalaj de consum:
nu mai puin de o unitate cu masa nu mai mic
de 300 g..
n ambalaj de transport:
- pn la1000 g sau nu mai puin de 300 g.
GOST 5904-82
GOST 26668-85
RM 4.2.762-99
- prjituri n asortiment.
n ambalaj de consum:
- nu mai puin de o unitate cu masa nu mai mic de
300 g.
n ambalaj de transport:
- cu masa pn la 50 g - nu mai puin de 10 buc.
- cu masa de 50-60 g - nu mai puin de 6 buc.
- cu masa de 65-75 g - nu mai puin de 5 buc.
- cu masa de 80-90 g - nu mai puin de 4 buc.
- cu masa de 100-120 - nu mai puin de 3 buc.
GOST 5904-82
GOST 26668-85
GOST 5904-82
RM 4.2.762-99
GOST 5904-82
- ambalate:
o unitate cu masa net mai mare de 400 g, 2 uniti
cu masa net pn la 400 g incl.
- la cntar: pn la 1000 g, dar nu mai puin de 400
g.
GOST 5904-82
- zahr-praf, zahr-rafinat.
GOST 12569-85
Unitate de producie - cantitatea produciei n ambalaj de transport sau de consum stabilit n ordinea reglamentat (masa net a
produciei n butoi, lad, sticl, borcan, brichet, pahar, etc.).
Seleciune totalitatea unitilor de producie, recoltate din lot pentru examinare.
Volumul seleciunei numrul unitilor de producie n ambalaj de consum sau de transport, care alctuiesc selecia.
Ambalaj de consum - ambalajul, care ajunge la consumator cu produsul i nu prezint o unitate de transport de sine stttoare
(sticl, borcan, pachet, cutie, pahar, brichet, pergament, foi de metal pentru ambalarea produselor etc.)
Ambalaj de transport - ambalajul, care nsui formeaz unitatea de transport (bidon, lad, butoi, cistern, etc.)
Tara - elementul ambalajului, reprezentat prin o confecionare n care este
repartizat producia (borcan, pahar, lad, etc.).
Proba unitar proba, prelevat concomitent dintr-o anumit parte a produsului, repartizat n tar de transport (probele
produselor din bidon, cistern, din monolitul de unt n lad sau brichetului de unt etc.)
Proba unificat - proba, alctuit din o serie de probe, prelevate din mai multe puncte, ntroduse n unul i acela vas.
Proba o cantitate anumit de produs, prelevat pentru analiz.