METABOLISM PROTIDIC

Definiie:
Proteine sunt componente eseniale ale materiei vii, structuri macromoleculare
compuse din aminoacizi.
Functiile proteinelor:
1. Funcia nutritiv si plastic (intervin n meninerea bilanului azotat si dezvoltarea
somatica armonioas in faza de crestere)
2. Funcia coloid osmotic ( albuminele exercit 80% din presiunea osmotic a
plasmei )
3. Funcia de meninere a volemiei si TA
4. Funcia de transport ( ioni, medicamente, hormoni, colorani, etc)
5. Funcia de meninere a echilibrului acido-bazic, prin caracterul de tampon a
proteinelor
6. Funcia de aprare (gamma globuline)
7. Rol important n hemostaz i coagulare
8. Rol in sinteza hormonilor, hemoglobinei, n gliconeogenez i lipidogeneza
1.Determinri cantitative ale proteinelor din probele biologice
1.1.Reacia biuretului
Indicaii: determinarea catitativ a proteinelor serice.
Principiul metodei: Compuii care conin legturi peptidice, reacioneaz n mediu
alcalin cu ionul de cupru, realiznd compui colorai n concentraie proporional cu
cantitatea de reactant.
1.2.Metoda refractometric (met. fizic)
Indicaii: determinarea catitativ a proteinelor serice.
Principiul metodei: Proteinele modific indicele de refracie a mediului n care se
gsesc, fenomenul fiind proporional n amplitudine cu concentraia acestora n proba de
analizat.
1.3. Metoda spectrofotometric (met. fizic)
Indicaii: determinarea catitativ a proteinelor serice.
Principiul metodei: Aminoacizii aromatici (tirozina, triptofanul i mai puin fenilalanina) din moleculele proteice absorb specific radiaia cu lungimea de und de 280 nm
(ultraviolet).
1.4. Metoda Lowry
Indicaii: determinarea cantitativ a proteinelor serice.
Principiul metodei: Metoda se bazeaz pe reducerea reactivului fosfo-molibdenowolframic de ctre tirozina i triptofanul prrezente n proteine.

Interpretarea rezultatelor:
Dozarea in ansamblu a proteinelor plasmatice: proteinemia:
Valori normale :
6,5 8,5g/100ml
albumine (4-5g%)
globuline (2,5-3g%)
.
raportul albumine/globuline = 1-1,5.
Variatii patologice:
Hipoproteinemii- scaderea proteinlor plasmatice cu pastrarea raportului
dintre diversele fractiuni:
o in carente de aport
o tulburari de absorbtie
o perturbari ale sintezei: hepatopatii cronice, ciroze
o pierderi renale: sindrom nefrotic
o pierderi intestinale: sprue
Hiperproteinemii: relativ rare, cresteri ale proteinelor plasmatice fara
modificarea raportului fractiunilor constituente
o hemoconcentratie.
Disproteinemie modificari de ordin cantitativ si/sau calitativ ale
proteinelor plasmatice , care intereseaza una sau mai multe fractiuni
plasmatice se evideniaz cu ajutorul
1.5.Reacia Esbach:
Indicaii: determinarea catitativ a proteinelor din urin i lichid de puncie.
Principiul metodei: Proteinele sunt precipitate cantitativ n mediu acid, iar precipitatul
sedimentat este cantitativ proporional cu coninutul proteic al probei.
1.6.Reacia Rivalta
Indicaii: determinarea calitativ a proteinelor din lichidul de puncie.
Principiul metodei:
Pictura de exudat care cade la fundul unui cilindru cu acid acetic glacial (3%),
provoac o tulburare care seamn cu o dir de fum de igar.
Pictura de transudat nu provoac tulburarea lichidului, sau aceast tulburare este
nensemnat i nu apare dintr-odat.
1.7. Determinarea calitativ a proteinelor din LCR: Reacia Pandy
Principiul metodei: Creterea concentraiei proteinelor n LCR face ca la contactul
acestuia cu o soluie saturat de fenol s apar o opalescen.

Tehnica de lucru: Pe o sticl de ceas se aplic o pictur de LCR peste 1 ml reactiv

Pandy (sol. Saturat de fenol). Dac lichidul este patologic, apare o tulburare care se
intensific treptat i se noteaz astfel:
+/- opalescent (poate fi ntlnit i la pacieni sntoi)
+ slab pozitiv
++ tulburare uoar
+++ tulburare intens
++++ aspect lptos (reacie foarte intens pozitiv)
Interpretarea rezultatului:
Meningite acute i cronice
Tumori cerebrale
Abces cerebral
Polineuropatie
Scleroz multipl
Staz cerebral
2. Metode de analiz calitativ a proteinelor:
2.1.Electroforeza
Principiul metodei: la un pH alcalin proteinele se incarc cu sarcini negative si
migreaz spre anod.
Migrarea este influenat de:
ncrctura electric
marimea si forma particulei
pH-ul solventului
temperatura mediului
vascozitatea mediului
suportul in care decurge electroforeza: hrtie, gel agar agar, amidon, acetat de
celuloz .
Fraciunile proteice evideniate dup migrarea n cmp electrostatic:
Albuminele:
- Valori normale: 60% din proteinele totale
Hipoalbuminemiile:
a) prin afectarea sintezei toate afeciunile ce merg cu lezarea
celulei hepatice se asociaz cu o scdere mai mult sau mai puin
accentuat a albuminemiei ;
b) catabolism crescut ( de cele mai multe ori insoite de scderea
sintezei) hepatite acute, hepatite cronice,ciroze, leucoze acute,
diabet, neoplazii, subnutriie sau denutriie, dispepsii la sugari;
c)prin pierderi pe cale renal (nefroza lipoidic, sindroame nefrotice,
tumori renale, amiloidoza), intoxicaii cronice, dup hemoragii

masive, supuraii, arsuri, pierderi intestinale ( enterite ac si cr,

steatoree, sprue, fistule intestinale)
Hiperalbuminemiile: sunt foarte rare; apar in limfoleucozele cr, faza
iniial a inaniiei, agama- sau hipogamaglobulinemii.
Serumglobulinele aproximativ 40% din totalul proteinelor.
Printr-un mecanism de reglare invers, cresterea unei fractiuni a proteinelor
plasmatice, determin scaderea corespunztoare a celorlalte fraciuni si invers.
Disproteinemiile: Cele mai frecvente sunt scderea serumalbuminelor i
cresterea globulinelor, modificri denumite de majoritatea autorilor ca
disproteinemii sau disglobulinemii.Exist patru subfraciuni globulinice:
1, 2, si .Disproteinemiile interesnd globulinele sunt foarte des
intlnite, creterile pot fi globale sau intereseaz doar anumite fraciuni.
Hiperglobuliniile sunt de tip reactiv, determinate de boli infecioase acute
sau cronice i de tip compensator, cnd sinteza albuminelor este
deficitar (hepatopatii).
Hipoglobulinemiile consecina diminurii sintezei prin deficit de factori
alimentari, sau dup iradieri, radioterapie, boli congenitale sau dobndite
(agama sau hipogamaglobulinemie), pierderi consecutive unor arsuri
grave
1 globulinele: v.n. 6%
o Scad in etilism cronic i icter hemolitic.
o Cresc in afeciuni inflamatorii ac sau cr(poliartrita reumatoid),
stress, neoplazii, sindrom nefrotic, caexie, malnutriie,TBC
pulmonar, amiloidoz.
2 globulinele: v.n. 9%,
o Scad in ictere hemolitice i etilism cronic .
o Cresc n afeciuni inflamatorii, dnd indicaii asupra intensitii,
extinderii si gravitii procesului inflamator, boli infecioase, RAA,
IM. In poliartrita reumatoid i neoplazii cresc 1 si2.
globulinele: v.n. 12%
o Cresc de obicei concomitent cu sau globulinele n mononucleoza
infecioas, difterie, hepatite toxice, sindrom nefrotic, hiperlipemii
eseniale, i n afeciuni mai rare ca plasmocitomul cu IgA i
macroglobulinemia Waldenstrm.
globulinele 15-18%
o Cresc ntr-un numr mare de disproteinemii, fiind cel mai frecvent
sindrom ntlnit; fraciunea crete ntr-un numr mare de infecii
bacteriene, virotice, parazitare, boli de colagen( LED, periarterita
nodoas, sclerodermii etc), boli hepatobiliare, macroglobulinemie
Waldenstrm, mielom multiplu

2.2. Imunoelectroforeza
Imunelectroforeza metod analitic de evideniere a conponentelor unui amestec
proteic antigenic, cu ajutorul creia constituenii antigenici pot fi definii prin
mobilitatea lor electroforetic i prin specificitatea lor antigenic. Fractiunile proteice
evideniate sunt imunglobulinele, respectiv gamaglobulinele.
Valorile normale ( prin metoda Grabar si Williams metoda imunochimic de
electroforez , avnd ca suport gelul de agar) sunt:
IgG 12-14g%o (75% din totalul
IgA 2-4g%o
imunglobulinelor)
IgM 1g%o.
IgG au origine limfoplasmocitar , se gsesc in cantiti mult superioare celorlalte
fraciuni i constituie suportul principalilor anticorpi din organism.
IgA au aceeasi origine i sunt secretate prin sucuri digestive i lacrimi
IgM - predomin n lichidele intravasculare i conin in special anticorpi neinfeciosi
( antiRh, aglutinine la rece etc).
2.3. Imunodifuziunea radial (Mancini)
Principiul metodei: ntr-un mediu de agar sau agaroz, n care s-au ncorporat
anticorpi, specifici antigenul difuzeaz radiar, formnd n urma reaciei cu anticorpul un
precipitat sub form de cerc.
Interpretarea rezultatului:
-Se pot utiliza imunoseruri monovalente sau polivalente.
-Suprafaa cercului va fi comparat cu cercul martor.
-Suprafaa final a cercului de precipitare este direct proporional cu concentraia
antigenului i invers proporional cu greutatea sa molecular, cu concentraia
anticorpilor i nlimea gelului de pe imunoplac.
2.4. Proteinuria. Analize cantitative i calitative
Definiie: Proteinuria reprezint eliminarea urinar de proteine.
Proba cu acid sulfosalicilic:
Principiul metodei: Proteinele prezente n urin formeaz cu acidul sulfosalicilic un
precipitat alb. Dac proteinele persist la fierbere, ele pot fi albumine, globuline sau
proteine Bence-Jones. Dac la fierbere precipitatul se dizolv i dispare, este vorba de
proteine Bence-Jones.
Analize cantitative: Identificarea exact i dozarea fraciunilor proteice n urin se face
prin tehnici de electroforez i imunoelectroforez.

Interpretarea rezultatului:
n condiii fiziologice proteinuria nu depete 100 mg/ 24 de ore, cantitate ce scap
metodelor uzuale de identificare. Acesta este motivul pentru care se spune c proteinuria
este absent n condiii fiziologice.
Clasificarea proteinuriilor n funcie de cantitate:
Proteinurii uoare: sub 1g/24 ore
o proteinuria de efort
o proteinuria febril
o proteinuria postmedicamentoas
Proteinurii medii: 1-3g/24 ore
o proteinuria ortostatic
o ateroscleroz
o HTA
o insuficien cardiac congestiv
o pielonefrit
Proteinurii: peste 3g/24 ore
o HTA malign
o nefroangioscleroz diabetic
o sindrom nefrotic
o colegenoze
o mielom multiplu
Clasificarea etiologic a proteinuriilor:
Proteinurii prerenale:
o exces plasmatic de proteine normale: hemoglobinurii
o apariia de proteine anormale: proteine Bence-Jones
Proteinurii renale
o proteinurii intermitente (funcionale): de effort, ortostatic, posprandial, de
staz
o proteinurii permanente (organice):afeciuni renale, diabet, amiloidoz,
lupus
Proteinurii postrenale:
o proteine derivate din rinichi:pielonefrit
o proteine rezultate din distrugerea membranei bazale i/sau a tubulocitelor:
calculoza renal, rinichi polichistic, tuberculoz renal, neoplasm
2.5. Fibrinogenul plasmatic
-Valori normale: 2-4,5g/l

-Hiperfibrinogenemii afectiuni cardiace (coronare, infarct), renale, dupa radioterapie,

neoplasme, coagulopatii.
-Hipofibrinogenemii congenitale ( a sau hipofibrinogenemie), sau sinteza hepatica
deficitara (in hepatite, ciroze, intoxicatii), in boli infectioase grave, neoplasme digestive,
si in stadiile tardive ale cirozei atrofice prin activarea fibrinolizei.
Valori normale ale fractiunilor proteice : albumina 4-5g/100ml, globuline 2,5- 3 g/100ml