CENTRUL NATIONAL DE GRIPA

INCDMI CANTACUZINO

GHIDURI OMS
TESTE DE LABORATOR RECOMANDATE PENTRU IDENTIFICAREA
VIRUSULUI GRIPAL AVIAR A/H5 IN PROBELE DE LA OAMENI
Informatii generale
Gripa aviara inalt patogena (HPAI) determinata de unele subtipuri de virus
gripal A in populatiile animale, in special gaini ,reprezinta un continuu risc global
pentru sanatatea publica umana .Infectia directa umana cu un virus gripal aviar
A/H5N1 a fost prima data identificata in timpul focarului din 1997 din Hong-Kong.
Ulterior infectii umane cu tulpini aviare apartinind subtipurilor H9 si H7 au fost
evidentiate in plus. Focarul recent de A/H5N1 la oameni si aparenta endemicitate a
acestui subtip la pasarile domestice din Asia de sud-est impune o atentie crescuta
pentru necesitatea capacitatii de diagnostic rapid a infectiilor gripale atipice.
Indentificarea de laborator a infectiilor umane cu virus gripal tip A este in mod
obisnuit efectuata prin detectia directa a antigenului, izolarea in cultura celulara , sau
detectia ARN ului gripal specific prin RT-PCR .
Aceste recomandari sunt destinate laboratoarelor care primesc solicitari de
testare a probelor de la pacienti cu boli compatibile cu gripa, in situatiile cand sunt
evidente clinice si epidemiologice de infectii gripale A. Procedurile de laborator
prezentate mai jos nu contin toata informatia necesara efectuarii testelor: detalii in
plus ar putea fi obtinute de la referintele citate , de la grupul tehnic de lucru sau de la
Laboratoarele OMS de Referinta H5 .
Proba optima pentru detectia virusului gripal tip A este un aspirat nazofaringian
obtinut in primele trei zile de la debutul simptomelor , desi tampoanele nazofaringiene si alte probe pot fi deasemeni folosite . Toate manipularile probelor si
testarile de laborator ar trebui sa fie efectuate dupa ghidurile standard de
biosecuritate.
Strategia pentru testarea initiala de laborator a fiecarei probe ar trebui sa
diagnosticheze rapid infectia cu virus gripal tip A si sa excluda alte infectii virale
respiratorii comune. Rezultatele ar trebui sa fie ideal disponibile in 24 ore .
Proceduri pentru diagnosticul gripei
Testele disponibile pentru diagnosticul infectiilor cu virus gripal tip A includ:
1.Detectia rapida a antigenului. Rezultatele pot fi obtinute in 15-30 minute.
. teste langa pacient pentru gripa . Aceste teste sunt disponibile in comert.

. test de imunofluorescenta . Folosita pe scara larga , este o metoda sensibila de

diagnostic al infectiilor cu virusuri gripale de tip A si de tip B si a altor 5 virusuri
respiratorii cu importanta clinica .
. test imunoenzimatic . Pentru nucleoproteina (NP) virusului gripal de tip A .
2.Cultura virala. Furnizeaza rezultate in 2-10 zile . Metoda poate fi folosita la
detectarea virusurilor respiratorii cu importanta clinica. Culturile pozitive pentru
gripa pot sau nu prezenta efecte citopatice , dar este necesara identificarea virusului
gripal in celulele culturii prin imunofluorescenta sau in supernatantul culturii prin
hemaglutinoinhibare .
3.PCR si Real time PCR . Seturile de primeri specifici pentru gena hemaglutininei
(HA ) a virusurilor gripale A/H3, A/H1 si B circulante curent au devenit mai larg
folosite . Rezultatele pot fi disponibile in putine ore fie din tampoane clinice sau
culturi celulare infectate. In plus mai multe Centre Colaborative OMS au preparat
reactivi PCR si RT-PCR pentru tulpini umane / aviare atipice.
Orice proba cu un rezultat pozitiv folosind determinarile de mai sus pentru
virusul gripal de tip A si suspectate de infectie gripala aviara ar trebui sa fie in plus
testate si verificate de catre un laborator H5 desemnat de OMS . Laboratoarele care
nu au capacitatea de a efectua proceduri de identificare specifica a subtipului de virus
gripal A sunt solicitate sa :
1. trimita probele sau izolatele virale la un Centru National de Gripa sau la un
Laborator de Referinta H5 al OMS pentru identificare sau caracterizare
suplimentara .
2. sa informeze Biroul OMS din tara respectiva sau Biroul Regional OMS sau
OMS Geneva Programul Global pt. Gripa ca probele sau izolatele virale au fost
trimise la alte laboratoare pentru identificare ulterioara sau caracterizare
suplimentara.

GHID PENTRU TRIMITEREA LA TIMP A VIRUSURILOR GRIPALE/

PROBELOR CU POTENTIAL DE A CAUZA PANDEMII DE GRIPA UMANA
Obiective
Obiectivul trimiterii la timp a virusurilor gripale/probelor cu potential de a
determina o pandemie de gripa este pregatirea si raspunsul la o pandemie de gripa
prin:
. Monitorizarea si mai buna cunoastere a evolutiei virusurilor gripale si a
semnificatiei lor pentru sanatatea publica prin caracterizarea moderna antigenica si
genetica efectuata de Laboratoarele de Referinta desemnate de OMS
. Selectarea si prepararea tulpinilor prototip de vaccin pandemic
. Prepararea/actualizarea la zi a reactivilor OMS de diagnostic si adaptarea
testelor de diagnostic recomandate de OMS
. Efectuarea altor investigatii importante de sanatate publica legate de aceste
virusuri
Selectarea si trimiterea virusurilor/probelor
Virusurile/probele enumarate mai jos ar trebui trimise prin Programul Global
pentru gripa al OMS:
. Toate virusurile care care nu pot fi tipate/subtipate prin reactivii de diagnostic
adusi la zi cel mai recent actualizate de catre OMS
. Toate virusurile de la cazurile umane infectate cu gripa animala si virusuri
selectate de la animale din zonele afectate de focare de gripa animala ;si
Virusurile gripale animale recente izolate cu istoric de a cauza infectii si boala
la om.
Virusurile/probele ar trebui trimise urgent la Laboratoarele de Referinta ale
OMS. Transportul ar trebui sa respecte cerintele relevante privind transportul in
conditii siguranta a substantelor infectioase si a probelor de diagnostic. Trebuie sa se
furnizeze informatii clinice si epidemiologice de baza asupra cazurilor.
Principii privind trimiterea virusurilor gripale/probelor prin Progamul
Global pentru Gripa al OMS
1. Laboratoarele de Referinta desemnate de OMS vor raporta imediat rezultatele
analizelor virusurilor/probelor la laboratoarele de origine si la Programul Global
OMS pentru Gripa.
2. Programul Global OMS pentru Gripa al OMS va folosi informatiile din analiza
virusurilor/probelor la selectarea tulpinilor vaccinului pandemic, pentru

prepararea/adaptarea reactivilor de diagnostic ai OMS si pentru rezolvarea altor

necesitati de sanatate publica globala.
3. Laboratoarele de Referinta desemnate de OMS vor cere permisiunea tarilor/
laboratoarelor de origine pentru a fi co-autor si/sau pentru a publica rezultatele
obtinute analizele virusurilor/probelor relevante.
4. Nu va exista o distributie ulterioara a virusurilor/probelor in afara retelei
Laboratoarelor OMS de Referinta, fara permisiunea tarii/laboratorului de origine.