MBTRNIREA CELULAR

Generaliti
O definiie biologic a mbtrnirii este aceea a unor schimbri structurale i
funcionale ce survin ntr-un organism odat cu depirea perioadelor de dezvoltare i
maturitate, n aa numita perioad a postmaturitii. Aceasta se caracterizeaz printr-o
vulnerabilitate n cretere la solicitrile mediului, cauzat i nsoit de un declin al
funciilor fiziologice i adaptative ale organismului ce se doresc la rndul lor
modificrilor moleculare i morfologice de la nivel celular.
Viaa marii majoriti a populaiilor celulare din organismul uman poate fi
mprit n patru faze: funcionarea normal, mbtrnirea (senescena), agonia i
moartea celular.
Dintre modificrile morfologice i biochimice caracteristice celulelor
senescente amintim: scderea volumului celular, modificri nucleare (retractarea i
condensarea nucleilor ce apar intens colorai cu detaliile de structur disprute picnoz nuclear), carioliza (dispariia nucleului), cariorexis (fragmentarea
nucleului), anormaliti cromozomiale, reducerea ratei transcripiei, translaiei i
degradrii proteice, scderea bazofiliei citoplasmei cu acumulare de pigmeni i lipide
urmat de vacuolizarea ei, creterea numrului i mrimii lizozomilor, acumularea
unor forme alterate ale priteinelor structurale ce conduce la perturbarea funciilor
celulare (ex: acumularea de ADN-polimeraz modificat este parial responsabil de
limitarea capacitii proliferative a fibroblatilor senesceni), supraexprimarea n
celulele senescente a genei WAF-1 numit i sdi-1 (inhibitorul sintezei de ADN
caracteristic celulelor senescente), a crui produs, proteina Cip -1 este un puternic
inhibitor al kinazelor dependente de cicline ce acioneaz n faza G1 a ciclului celular
element esenial ce cauzeaz perturbarea homeostaziei proliferative celulare,
scderea sensibilitii la o mare varietate de factori de cretere i hormoni datorat fie
reducerii odat cu vrsta a numrului de receptori celulari fie alterrii cilor de
transducie a semnalului.
Dou evenimente importante sunt n general legate de senescen: diminuarea
potenialului proliferativ i scderea masei celulare. Aceast rarefiere celular
progresiv afecteaz majoritatea organelor fiind evident n special la nivelul pielii,
muchilor, rinichilor, creierului i sngelui, fiind nsoit i de o cretere a
concentraiei de ADN n plasma persoanelor n vrst. Astzi este unanim acceptat c
aceast scdere a masei celulare la organismele senescente este probabil de natur
apoptotic. Recentele progrese fcute n nelegerea bazelor biologice ale senescenei
au condus la ipoteza c mecanismele de inducie ale apoptozei (moartea celular
programat) sunt activate de anumite modificri fiziopatologice caracteristice
mbtrnirii celulare. Legtura dintre apoptoz i mbtrnire este totui nc intuitiv
i incomplet explorat.
Moartea celular se produce instantaneu deci se pot observa numai modificri
post-mortem (celule cu form sferic, retractarea pseudopodelor, colorarea difuz a
nucleului i citoplasmei cu ajutorul coloranilor vitali, dispariia mitocondriilor,
cariorexis i carioliz nuclear), ce se datoreaz eliberrii enzimelor lizozomale i
constituie semnul cert al morii organismului.

Cauzele senescenei celulare

Studiile realizate n aceast direcie au stabilit implicarea n acest mecanism
complex a dou categorii principale de factori:
1. extrinseci (influena mediului i a stilului de via)
2. intrinseci (procese primare de mbtrnire determinate genetic)
n funcie de aceste dou categorii de factori, au aprut o serie de teorii privind
cauzele mbtrnirii celulare clasificate n diverse moduri.
n general este vorba de teoriile pasive care consider c mbtrnirea ar fi
consecina acumulrii pasive de erori la nivelul constituenilor celulari (ADN, ARN,
proteine i lipide) ce se datoreaz unor agresiuni din mediu, la care se adaug
mecanisme imperfecte de reparare; i de teoriile active care consider mbtrnirea
celular ca un fenomen activ programat genetic. Aceste dou teorii n realitate se
gsesc ntr-o strns interdependen (de ex: prezena proteinelor alterate n interiorul
celulelor poate conduce la modificarea expresiei genetice).
Teoriile pasive difer ntre ele n ceea ce privete tipurile de macromolecule
modificate care determin mbtrnirea celular ct i mecanismele ce conduc la
apariia acestor modificri macromoleculare. Teoriile bazate pe acumularea pasiv de
erori se concentreaz pe: mutaii somatice, proteine imperfecte, lipide distruse sau
combinaii de macromolecule alterate. Principalele teorii pasive sunt:
1.Rata de supravieuire, o prim teorie pasiv privind mbtrnirea celular
propus iniial de Pearl se bazeaz pe corelaia strns dintre rata metabolic i rata
mbtrnirii la diferite specii de animale. Folosirea de combustibil este un proces
biologic de baz esenial vieii, dar care poate avea i consecine nefaste. S-a
demonstrat c rata metabolic este n relaie invers cu durata vieii deci este o
component a mbtrnirii, de exemplu atunci cnd rata metabolic a unor animale
este redus experimental, durata lor de via crete.
2. Mutaii somatice
Este cunoscut faptul c numrul anomaliilor cromozomiale crete n celulele
senescente datorndu-se fie diminurii eficacitii mecanismelor celulare de reparare
a ADN-ului, fie acumulrii cu vrsta a unui numr mare de ageni distructivi.
3. Acumularea de reziduuri
Se refer n special la acumularea odat cu avansarea n vrst a lipofuscinei n
lizozomii secundari ai celulelor postmitotice. Lipofuscina provine din glicozilarea
non-enzimatic a proteinelor cu rat de supravieuire mare ct i a ADN-ului. Aceast
glicozilare a ADN-ului numit de Ross i colab., reacie de glicare, depinde de
posibilitatea de ntlnire dintre moleculele de glucoz circulante i gruprile amino
libere de la captul N-terminal al lanurilor polipeptidice sau lanurilor laterale de
lizin. Aceste reacii sunt mult mai frecvente n spaiile extracelulare i esuturile
conjunctive deoarece glucoza circul liber prin aceste spaii n timp ce n interiorul
celulelor nivelul ei este mult mai atent controlat iar proteinele acestor zone (colagen,
fibronectin i elastin) au durata de via relativ lung.
4. Legturi ncruciate
Aceast teorie se refer la existena unui proces progresiv cu vrsta de legare
ncruciat a unor macromolecule intra i extracelulare. Intensificarea acestui
fenomen, caracteristic celulelor senescente, poate fi generat de unii ageni oxidani,

radicali liberi produi prin reacia proteinelor glicate cu oxigenul, etc. Totodat,
creterea odat cu vrsta a numrului de legturi ncruciate a colagenului cu alte
macromolecule ar putea explica scderea elasticitii esuturilor organismelor
senescente.
5. Radicalii liberi constituie s explice o serie de fenomene caracteristice
mbtrnirii celulare. Ar putea prea surprinztor faptul c acetia figureaz printre
posibilii factori ce conduc la mbtrnirea celular, tiut fiind faptul c radicalii liberi
oxigenai au prin definiie o durat de via scurt iar fenomenele de mbtrnire
celular implic o evoluie de ani de zile. Totui efectele toxice ale radicalilor liberi
asupra acizilor nucleici, proteinelor i lipidelor sunt bine cunoscute. n realitate
aciunea lor asupra unei proteine este foarte scurt i supus legii hazardului.
Dintre efectele citotoxice ale radicalilor liberi, amintim: oxidarea lipidelor i
anume a acizilor grai nesaturai aparinnd fosfolipidelor membranare ce conduce
la alterri ale structurii plasmalemei, ale fluiditii, deci la perturbarea funciilor
acesteia; alcoolii, aldehidele i hidrocarburile volatile, produi finali ai
peroxidrii inhib sinteza proteic, pot modifica permeabilitatea vascular i
activitatea chemotactic; oxidarea proteinelor crete hidrofobicitatea i sensibilitatea
acestora la proteoliz; n ceea ce privete efectul radicalilor liberi asupra acizilor
nucleici, cele mai susceptibile componentele ADN-lui la aciunea acestora sunt
timina i citozina urmate de adenin i guanin i de dezoxiriboz.
In mod normal organismul dispune de sisteme naturale de protecie
mpotriva radicalilor liberi, cele mai importante fiind localizate intracelular. Exist
un sistem primar de aprare numit i de prevenire ce diminua rata de iniiere a
reaciilor radicalilor liberi prin descreterea concentraiilor i un sistem secundar ce
stopeaz efectele lor toxice chiar din stadiile incipiente. Din sistemul primar de
aprare fac parte o serie de enzime cum ar fi superoxid dismutazele, catalaza,
glutation-peroxidaza, glutation-reductaza, etc., unele proteine ct i unele
molecule mici rspndite n sistemele biologice care pot elimina radicalii liberi pe
ci neenzimatice (ex. vitamina C, acidul uric, taurina i hipotaurina, glutationul,
etc.) Sistemul secundar de aprare cuprinde enzime cum ar fi multe glutationtransferaze ce au o activitate tip peroxidaz dependent de glutation i care
reprezint sisteme de aprare mpotriva peroxidrii lipidelor, diferite oxidoreductaze ct i alte enzime proteolitice. Enzimele nucleare pentru repararea
ADN-lui sunt considerate un sistem de aprare important mpotriva agresiunii
radicalilor liberi: ex. ADN-polimeraza 1, ADN-ligaza, etc. Alturi de aceste enzime
din sistemul secundar de aprare mpotriva radicalilor liberi, mai fac parte i alte
molecule cum ar f vitamina E, principalul antioxidant lipidic solubil prezent n
toate plasmalemele ce protejeaz mpotriva peroxidrii lipidelor, (3-carotenul i
bilirubina. Datorit localizrii predominant intracelulare a acestor sisteme,
radicalii liberi formai n spaiul extracelular n special n esutul conjunctiv, au o
durat de via mult mai lung i o posibilitate mult mai mare de a exercita efecte
toxice.
6. "Catastrofa erorii"
Una din cele mai cunoscute i mai studiate dintre teoriile erorii privind
mbtrnirea celular a fost elaborat de Orgel n urm cu 30 de ani. O "eroare

catastrofal" exponenial a fost propus ca o inevitabil consecin a doi factori ce

privesc transcripia i translaia:
1) Transferul
informaiei
ADN-ARN-protein nu
se
realizeaz
cu
acuratee;
2) Implicarea proteinelor n acest transfer de informaie;
Cu vrsta, se acumuleaz erori n transcripie i translaie care au ca rezultat
sinteza unor proteine modificate care la rndul lor vor perturba transfeail
informaional: enzime ca ARN-polimeraza, aminoacil-ARNt-sintetaza, proteine
ribozomale, etc. Se realizeaz astfel o cascad de erori a cror rat depete
capacitatea reparatorie a celulei i care va conduce la o adevrat "catastrofa".
Una din afirmaiile acestei teorii legat de nivelul crescut al proteinelor
modificate n celulele senescente este real i unanim acceptat i astzi. Se
consider totui c aceast teorie nu este corect n totalitate deoarece creterea
numrului proteinelor modificate n celulele senescente este rezultatul unor
modificri post-translaional mai curnd dect al unor erori de translaie.
7. Degradarea proteinelor alterate
Degradarea proteinelor n organismele senescente este mult redus n
special n esuturi cum ar fi muchiul cardiac, muchii scheletici, ficat i creier.
O serie de ci lizozomale ale proteolizei diminua odat cu naintarea n vrst dar
natura exact a acestui defect nu a fost nc identificat. Anumite caracteristici ale
celulelor senescente pot fi explicate ca fiind o consecin secundar a diminurii
proteolizei lizozomale. De exemplu, acumularea proteinelor modificate n celulele
senescente poate fi explicat prin reducerea turnoverului proteinelor.
B. Teorii care consider mbtrnirea celular un proces activ, programat
genetic.
1. O modalitate de programare este restricia codonilor. Strehler i colab. au
avansat ideea c una din cile prin care organismele dirijeaz sinteza anumitor
proteine n anumite stadii ale dezvoltrii este aceea de a utiliza codoni diferii pentru
codificarea aceluiai aminoacid n diferite gene. Dac utilizarea codonilor se
schimb n diferite stadii ale dezvoltrii timpurii i numrul codonilor posibili
este finit, mbtrnirea ar fi rezultatul reducerii translaiei anumitor gene eseniale.
2. Inactivarea copierii multiple a secvenelor ADN. Medvedev a sugerat c
diminuarea capacitii proliferative celulare ar putea fi rezultatul inactivrii secveniale
a genelor repetitive. Conform acestei teorii, cnd o copie a unei gene este
modificat sau inactivat selectiv, alte copii pot fi activate pn cnd ultima
copie a genei respective este utilizat.
n acest punct, mbtrnirea celular s-ar datora absenei unui produs genic
important.
Multe proteine sunt codificate de gene unice (per genom haploid) i deci
generalitatea acestui mecanism pare ndoielnic.
3. Scurtarea telomerelor. Conform teoriei propus de Olovnikov, celulele nu
i replic complet cromozomii n timpul diviziunii celulare i deci secvenele ADN
replicate tardiv se pot pierde.

Deoarece la captul unitilor replicative sunt localizate anumite secvene de

ADN repetitiv neeseniale, rezult c genele eseniale nu se pierd dect dup un
numr de diviziuni celulare.
Ipoteza scurtrii telomerelor este un foarte bun exemplu al faptului c teoriile
pasive i cele active de mbtrnire celular sunt oarecum legate. Scurtarea
telomerelor poate fi un eveniment programat sau unul legat de exprimarea n
celulele senescente a unei telomeraze diferite sau de declinul activitii telomerazei
odat cu vrsta, datorat, de exemplu, reducerii ratei turnoverului urmat de
acumularea unor modificri posttranslaionale.
4. O teorie simpl a senescenei celulare programate presupune activarea unei
anumite gene (sau anumitor gene) dup un anumit numr de diviziuni celulare.
Aceast gen codific o protein ce inhib intrarea n faza S a ciclului celular (gene
cu aciune ntrziat).
Disfunciile unor posibili inhibitori ai proliferrii celulare, ale cror rezultate
sunt apariia tumorilor la specia uman, au condus i la identificarea acestora.
Unul dintre ei este p53 ce ar trebui s fie supraexprimat n celulele senescente,
ceea ce nu s-a constatat deocamdat.
Un alt aspect important este cel legat de proteina Rb - unul din principalii
inhibitori ai derulrii ciclului celular. In mod normal, celulele tinere fosforileaz
aceast protein la trecerea din faza G\ n faza S; n schimb, celulele senescente au
nivele similare de protein Rb dar nu realizeaz fosforilarea acestei proteine,
meninnd-o nefosforilat.