5.

Reglarea sintezei, expresiei i activitii canalelor

ionice
5.1 Sinteza
La fel ca petru oricare alt protein celular, sinteza canalelor ionice
urmeaz dogma central a geneticii, respectiv succesiunea:
DNA

transcriptie , procescare posttranscriptionala

mRNA

translatie , procesare

posttrans
lationala
proteina

Transcripia genelor codificante de canale ionice este reglat de o serie

de factori transcripionali, promotori i/sau represori, ceea ce permite
variaia subseturilor de canale i a densitii lor de suprafa n funcie
de diferenierea celulei respective. Un exemplu studiat n detaliu sunt
receptorii nicotinici de ACh, pentru care s-au descris factori reglatori
miogeni din familia MyoD (proteine de tip basic helix-loop-helix
bHLH), care activeaz expresia n muchii scheletici, i factorul
represor REST (NRSF), care reprim expresia n celule non-neuronale.
n plus, o serie de semnale particip la reglarea fin a transcripiei.
Unul dintre ele, secretat presinaptic, este proteina de semnalizare
extracelular aria/neuregulin, care stimuleaz un receptor de tip
tirozinkinaz, erbB, la nivelul membranei musculare. Astfel se explic
de ce mRNAul NAChR este sintetizat numai de nucleii din zona plcii
motorii, i nu pe toat lungimea unei fibre musculare. Aceeai
localizare se regsete i pentru acetilcolinesteraz, molecula de
adeziune NCAM, i kinaza MuSK. n mioblatii embrionari, transcripia
NAChR se accelereaz iniial pe msur ce acetia fuzioneaz, formnd
miotuburi, ns dup apariia inervaiei i a activitii musculare
procesul este ncetinit. ntreruperea transmisiei neuromusculare duce
la reluarea sintezei i la supraexprimarea receptorului, fenomen
denumit hipersensibilitate de denevrare. Ea poate fi stopat prin
reinervare sau prin activarea electric a muchiului, de aceea se
presupune c factorii reglatori sunt cei din familia MyoD, dezactivai

prin fosforilare de ctre PKC, sub aciunea influxului de Ca 2+ din timpul

activitii musculare.

Structura genei subunitii 1 a NAChR conine 9 exoni mprtiai pe o

lungime de 17 kbp. Regiunea promotoare conine o secven TATA la
26 bp n amonte de semnalul de start, i o secven CAAT la 72 bp n
amonte. Aceste secvene ancoreaz complexul de transcripie pol II. n
plus, regiunea promotoare proximal conine un situs pentru factorul
transcripional Sp1, pentru factorul reglator negativ GBF, i dou
secvene E pentru membrii familiei MyoD. Secvenele E se gsesc n
regiunea promotoare a tuturor subunitilor NAChR din muchii
scheletici (1, 1, , , i ), dar nu i a subunitilor neuronale, care
sunt frecvent de tip 35(4)3.

Fig. 5.1 A, secvena genei subunitii 1 a receptorului nicotinic de ACh uman,

cu evidenierea exonilor. B, structura promotorului proximal al 1nAChR la pui,
ce include secvenele de legare a pol II, secvenele E pentru MyoD, situsurile
Sp1 i GBF. C, un cluster de trei gene pentru subuniti ale NAChR neuronal pe
cromozomul 15 uman.

Procesarea posttranscripional const n ndeprtarea intronilor i

refuzionarea exonilor, proces numit splicing. Pentru canalele ionice are
loc frecvent un splicing alternativ, n care pot fi nlturate diferite pri
din exoni sau chiar exoni ntregi. Deoarece diferitele variante de
splicing se ntlnesc n regiuni diferite ale sistemului nervos central, se
poate deduce c splicingul alternativ este controlat de anumii factori.
Un alt tip de procesare posttranscripional se numete RNA editing: o
adenozin este convertit n inozin de adenozin-deaminaz. De
exemplu, n receptorii de glutamat, codonul CAG = glutamin (Q)
devine CIG = arginin (R). ntruct situsul Q/R este n zona filtrului de
selectivitate, canalele editate au o permeabilitate sczut pentru Ca2+.
5.2 Traficul de membran
Canalele ionice urmeaz calea proteinelor de export, fiind sintetizate
de ribozomii ataai reticulului endoplasmic rugos (RER). Ulterior sufer
o serie de prelucrri n drumul spre cisternele aparatului Golgi, de unde
sunt secretate n vezicule de exocitoz. O caracteristic a proteinelor
de export este prezena n secvena mRNA a unei leading signal
sequence

(LSS)

reprezentnd

15-30

reziduuri

hidrofobe,

care

interacioneaz cu o particul de recunoatere a semnalului, particul

care se leag de ribozom i stopeaz elongarea lanului peptidic pn
la ataarea de RER. n continuare LSS n elongare este ncorporat nt-o
protein-por de transport numit translocon, prin care lanul ajunge n
lumenul RER. Aici are loc procesul de pliere (folding), formarea de puni
disulfidice i glicozilarea iniial, cu ajutorul proteinelor numite
chaperoni i a disulfidizomerazei. Glicozilarea se face pe o cale
inhibat de tunicamicin, i continu n aparatul Golgi, simultan cu
lipidarea acizilor grai. ntruct viteza medie de elongare este de 3-5
reziduuri/s la 37 C, o subunitate NAChR (460 reziduuri) este

translatat n 2 min, iar o subunitate 1 a unui canal de Ca2+ voltagegated (2000 reziduuri) n 10 min.
n cazul proteinelor integrale (transmembranare), inclusiv canalele
ionice, anumite regiuni hidrofobe transmembranare sunt interpretate
de translocon ca secvene ancor, de oprire a transferului. Transportul
lanului polipeptidic este blocat i n continuare secvena este
sintetizat ca o bucl intracitoplasmatic, pn la urmtoarea regiune
hidrofob. De exemplu, pentru subunitile NAChR, segmentul M1
reprezint

un

astfel

de

semnal.

diferen

important

ntre

subunitile canalelor pentamerice ligand-gated i ale celor tetramerice

voltage-gated este absena la cele din urm a secvenei leader (LSS),
deoarece captul lor N-terminal este situat intracelular.
Pentru receptorul nicotinic, modificrile posttranslaionale pot fi
urmrite prin marcare cu

35

S-metionin. n timpul translaiei secvena

leader este detaat i asparagina 141 este N-glicozilat. Aceast

form reacioneaz cu un anticorp mpotriva receptorului denaturat,
dar nu i cu -bungarotoxina. Legarea acestei toxine survine 15 min.
mai trziu, i coincide cu formarea punilor disulfidice pe subunitatea
pliat de calnexin. Dac N-glicozilarea este inhibat de tunicamicin,
reacia nu mai are loc. Asamblarea subunitilor ncepe n paralel cu
translaia, segmentul M1 fiind considerat principalul semnal de
asamblare. Dup formarea dimerilor sau trimerilor, calnexina se
detaeaz de complex.
Canalele tetramerice au propriile semnale de asamblare. Astfel, pe
regiunea N-terminal a canalelor Kv (canale de K + voltage-gated)
exist domeniul T1 (reziduurile 83-196) care funcioneaz ca semnal
de tetramerizare. Este interesant c diferenele n T1 ntre diferitele
clase

(de

exemplu

ntre

Kv1

Kv2)

mpiedic

formarea

de

heterotetrameri. Realizarea unei gene himerice, care s preia T1 din

alt clas, reface capacitatea de heterotetramerizare.

Anumite regiuni din secvena canalelor determin clusterizarea i

traficarea lor. Multe canale au subuniti suplimentare cu rol funcional.
De exemplu, canalele KATP conin 4 subuniti KIR6 i 4 subuniti SUR
(sulphonylureea receptor). Coexpresia SUR faciliteaz glicozilarea i
crete numrul de canale care ajung n membrana celular de 500 ori.
Tetramerul KIR6 conine o mic secven C-terminal (RKR) ce previne
scoaterea sa din RER. Astfel de secvene, numite semnale de traficare,
sunt KKXX citoplasmatic C-terminal sau KDEL luminal. Subunitile SUR
mascheaz semnalele RKR i deblocheaz traficarea. Similar, canalele
CFTR

(cystic

fibrosis

transmembrane

regulator),

aparinnd

superfamiliei de transportori ABC (ATP-binding cassette), ajut traficul

de membran al canalelor epiteliale de Na+ (ENaC) i al altor proteine.

Fig.
5.2
Interaciunea
tetramerului format din
KIR6 cu subunitile SUR
duce
la
mascarea
secvenelor
RKR
de
retenie
n
reticulul
endoplasmic (marcate cu R
n
imagine)
i
la
exprimarea canalelor KATP
pe membrana celulei.

Membranele celulare prezint compartimente funcionale distincte,

delimitate cu ajutorul citoscheletului asociat membranei. Interaciunile
cu aceast structur ajut la clusterizarea i imobilizarea canalelor. De
exemplu, localizarea postsinaptic a receptorilor nicotinici se face cu
ajutorul rapsinei, o protein citoplasmatic de 43 KD, iar a receptorilor
de glycin i GABAA prin gephyrin. Aceste proteine au fost identificate
deoarece rmn ataate de receptori la purificarea lor. O alt protein
de ancorare, care menine canalele de Na + voltage-gated la baza
plicilor sarcolemei, prin legare de citoscheletul de spectrin, este
ankirina G. Agregarea receptorilor nicotinici pe placa motorie este
reglat de agrin, secretat de terminaiile nervoase motorii. Agrina se
leag la nivelul laminei bazale a jonciunii neuromusculare, de unde

activeaz tirozinkinaza MuSK, ce activeaz un influx de Ca 2+, activarea

tirozinkinazelor legate de src ce fosforileaz subunitile NAChR.

Fig. 5.3 Proteine care contribuie la formarea domeniilor membranare la nivelul

plcii motorii. ARIA/neuregulin activeaz sinteza de canale i proteine asociate
prin tirozinkinaza ErbB. Agrina activeaz tirozinkinaza MuSK ce duce la
agregarea nAChR la suprafa, unde sunt meninui prin rapsyn. Canalele de
Na+ legate de citoscheletul de spectrin prin ankyrin se aglomereaz n pliurile
membranei.

Un alt mecanism de clusterizare, ntlnit la sinapsele glutamatergice,

sunt proteinele cu domenii PDZ multiple. PDZ este un acronim compus
din numele a trei reprezentani ce conin astfel de domenii: PSD-95,
Drosophila discs large protein, Zonula occludens protein 1. De
exemplu,

PSD-95

(postsynaptic

density

protein

95

KD,

guanilatkinaz din familia MAGUK membrane-associated guanylate

kinase) conine 3 domenii PDZ. Palmitoilarea captului ei N-terminal o
dirijeaz spre membrana celular, unde domeniile PDZ ataeaz

capetele C-terminale a dou tipuri de receptori NMDA, Kv1, K IR2, nitric

oxid-sintaza neuronal (nNOS), o isoform de Ca2+-ATPaz, neurolignina

Fig. 5.4 Agregarea receptorilor NMDA. Subunitile NR2 se leag de PSD-95,

ataat de membran prin grupri palmitoil. Captul C terminal prezint
domenii cu activitate SH3 (S) i guanilat kinaz (GK). O serie de proteine
interacionez cu PSD-95, printre care GKAP (guanylate kinase associated
protein), nNOS (nitric oxid sintaza neuronal), Fyn (o tirozinkinaz), etc.

o protein citoscheletal, etc. Un alt exemplu, GRIP (glutamate

receptor interacting protein), cu apte domenii PDZ, leag receptori
non-NMDA i alte proteine. CIPP (channel-interacting PDZ-domain
protein) leag ASIC3 (acid-sensing ion channel) n neuronii senzitivi din
ganglionii spinali.
O interrelaie complex apare n fenomenul de potenare de lung
durat (LTP): influxul de Ca2+ prin receptorii NMDA stimuleaz nNOS, ce
duce la activarea indirect a receptorilor metabotropi de glutamat
(mGluRs), i la clusterizarea lor n vecintatea receptorilor NMDA prin
interaciunea GKAP (guanylate kinase associated protein) cu Shank,

care se leag de Homer, care se leag de mGluRs. Astfel, receptorii

metabotropi pot fi stimulai optimal de glutamatul eliberat n fanta
sinaptic, i pot iniia eliberarea de Ca 2+ din depozitele intracelulare
prin activarea receptorilor de inozitoltrifosfat (IP3Rs).
Traficul vezicular al canalelor ionice se face pe calea RER cisternele
Golgi cis, medii i trans, apoi secreia de vezicule ce fuzioneaz cu
membrana

fie

spontan

fie

urma

activrii

printr-un

semnal.

Membrana este recirculat n compartimentul citoplasmatic prin

endocitoza invaginrilor de membran acoperite cu clathrin. De aici
proteinele pot relua traficul sau pot fi degradate enzimatic n lizozomi
de proteaze i glicozidaze. Pe tot acest traseu proteinele de export sunt
sortate n permanen n funcie de stadiul de maturare i nglobate n
domenii lipidice lipid rafts (Simons & Ikonen 2000) bogate n
sfingolipide, colesterol i caveolin (proteina ce duce la formarea
caveolelor, formaiuni de membran descrise electronomicroscopic de
GE Palade i E Yamada n anii 50), unde sunt ancorate prin
glicofosfoinozitide (ancore GPI), palmitoilare sau diacilare. Un exemplu
de sortare i transport diferenial n domenii de membran funcionale

Fig. 5.5 Dou ci distincte de trafic vezicular la nivelul celulelor MDCK (a) i
fibroblastelor (b). Calea lipid rafts i anexinelor (rou) pentru domeniul apical al
celulelor MDCK, i calea cu semnale de sortare intracitoplasmatice, de
exemplu sistemul NSF-SNAP-SNARE-Rab (albastru), pentru domeniul
bazolateral (din Simons & Ikonen 1997).

sunt circuitele post-Golgi din linia celular MDCK (Madin-Darby canine

kidney, provenite din tubul contort proximal). Mecanismul de sortare
pentru domeniul apical utilizeaz lipid rafts i, posibil, anexine
specifice, iar cel pentru domeniul bazolateral semnale de sortare din
cozile citoplasmatice i proteine de acoperire, precum sistemul NSFSNAP-SNARE-Rab. Glicoproteinele de membran ale virusului gripal i
virusului stomatitei veziculoase (VSV) circul mpreun din RER n
Golgi, dar aici sunt sortate diferit: proteinele gripale ajung pe
membrana apical, iar proteinele VSV pe cea bazolateral. O sortare i
mai complex trebuie s aib loc n neuroni, unde exist multiple
domenii funcionale: noduri, juxtanoduri, paranoduri, internoduri,
terminaii nemielinzate, vezicule sinaptice i zone active. Transportul
axonal rapid al veziculelor (3 m/s sau 10 mm/h) are loc de-a lungul
microtubulilor, cu consum de ATP (dealtfel, acesta este mecanismul
general de transport vezicular n celule). Exist i un transport axonal
retrograd al veziculelor, cu un motor de dynein, utilizat de anumite
virusuri neurotrope.
5.3 Fosforilarea/defosforilarea (cile mesagerilor secunzi)
n afara reglrii densitii de canale prin trafic vezicular, activitatea
canalelor funcionale poate fi modulat de o serie de semnale
extracelulare ce acioneaz pe diverse ci, bine cunoscute n prezent.
Conceptul de mesageri secunzi intracelulari a fost dezvoltat de Earl
Sutherland n anii 70, pornind de la ncercarea de a explica modul n
care glucagonul sau epinefrina stimuleaz glicogenoliza hepatic.
Aceast serie de cercetri a dus la descrierea primei cascade de
semnalizare intracelular, calea cAMP.
Receptorii cii sunt proteine integrale cu 7 -helixuri transmembranare,
derivate, se pare, din bacteriorhodopsin, numite generic receptori
metabotropi (mRs), pentru a le deosebi de canalele ionice activate

direct de liganzi, numite receptori ionotropi. ntre helixurile 5 i 6 exist

o bucl intracelular care intracioneaz cu subunitatea a proteinelor
G.

Interaciunea

ligandului

cu

receptorul

induce

modificare

conformaional care se transmite acestei bucle, detand-o de

proteina G. O activare prelungit a receptorului metabotrop duce la
fosforilarea buclei 5-6 de ctre o kinaz-receptor, n urma creia are loc
cuplarea cu arestina, urmat de ndeprtarea receptorului prin
endocitoza mediat de clathrin.

Fig. 5.6 Dou dintre cele mai cunoscute ci de semnalizare intracelular. n

stnga, calea cAMP - PKA, cu dou sisteme de proteine G, activatoare sau
inhibitoare ale adenilatciclazei. n dreapta, calea PIP 2, scindat de fosfolipaza C
n IP3 (citoplasmatic) i DAG (legat de membran). DAG i Ca 2+ eliberat din
reticulul endoplasmic sub aciunea IP 3 contribuie mpreun la activarea PKC.

Proteinele G (GTP-binding regulatory proteins) au o arhitectur

trimeric (subunitile , , i ) cu reglare allosteric. Subunitile i
sunt ancorate de stratul intern al membranei prin cozi hidrofobe
legate covalent, ceea ce le permite o difuzie lateral rapid.
Sunbunitatea prezint un situs de legare a GDP a crui conformaie
este

stabilizat

de

interaciunea

cu

bucla

5-6

receptorilor

metabotropi. La activarea receptorului, aceast bucl se detaeaz de

subunitatea , inducnd scderea afinitii situsului pentru GDP. Ca
urmare, GDP se detaeaz i este nlocuit de GTP. Aceast schimbare
duce i la detaarea subunitii de complexul . Subunitatea
activat, devenit mobil, continu difuzia lateral pe suprafaa
intern a membranei pn cnd ntlnete o protein efectoare, de
exemplu adenilatciclaza (AC), de care se leag. Aceast interaciune
activeaz AC, care ncepe s converteasc ATP n cAMP, mesagerul
secund intracelular al cii. Aceast etap reprezint evident o
amplificare a semnalului. Dup un timp se produce hidroliza GTP n
GDP, ceea ce scade afinitatea subunitii G pentru AC i o determin

Fig. 5.7 Semnalizare direct prin proteine G. La nivelul celulelor pace-maker din
miocard, activarea receptorilor muscarinici de ctre ACh duce la detaarea
subunitilor G, care prin difuzie lateral rapid activeaz GIRK. Efectul apare
n patchuri cell-attached la aplicarea ACh n pipet, dar nu i n soluia din baie.

s i reia poziia iniial, cuplat cu receptorul metabotrop i

subunitile . Detaarea G de AC poate fi indus i de un factor
regulator numit RGS (regulator of G-protein signalling). Exist o
diversitate de proteine G implicate n diferite ci de semnalizare. La
mamifere au fost identificate cel puin 15 gene pentru subunitatea G,
care interacioneaz cu peste 1500 receptori diferii. Cele mai
cunoscute subfamilii sunt Gs (stimulator), Gi (inhibitor), Gq i G12. Prin
cuplarea cu receptori diferii, Gs i Gi exercit efecte antagonice
asupra AC.
Un caz particular de semnalizare prin proteine G se ntlnete la nivelul
celulelor pace-maker din miocard, unde canalele de K + activate de ACh
(K(ACh), numite i GIRK) sunt stimulate direct de interaciunea cu
subunitile G, dup eliberarea lor prin activarea receptorului
muscarinic de ACh i difuzia lateral pe membran. Activarea K(ACh)
duce

la

hiperpolarizarea

membranei

scderea

frecvenei

de

descrcare a celulelor pace-maker, ceea ce explic scderea frecvenei

cardiace prin stimularea vagal sau administrarea de ageni colinergici.
n continuarea cii cAMP survine o nou etap de amplificare,
declanat de interaciunea acestuia cu protein-kinaza A (PKA). PKA
este constituit din 4 subuniti, dou subuniti catalitice (C) i dou
subuniti reglatoare (R). Subunitile C se leag de subunitile R pe
dou secvene psudosubstrat. Pe proteinele int ele se leag pe
secvena Arg/Lys-Arg/Lys-X-Thr/Ser, unde X este un reziduu oarecare i
fosforileaz threonina sau serina. Secvena pseudosubstrat de pe
subunitile R este asemntoare, dar i lipsete Thr sau Ser. Fiecare
subunitate R prezint dou situsuri de legare a cAMP. Cnd aceast

reacie are loc, subunitile C se detaeaz i ncep s fosforileze

proteinele int, printre care i diferite canale ionice, ceea ce duce la
activarea sau inhibiia lor. Activitatea PKA este oarecum localizat prin
legarea ei de proteine aparinnd citoscheletului asociat membranei,
numite AKAPs (A kinase attachment proteins). Exist dou modaliti
de limitare a efectelor cAMP. Prima este deciclizarea sa cu ajutorul
enzimei fosfodiesteraz (PD). n plus, proteinele activate prin fosforilare
pot fi readuse n starea iniial prin aciunea protein-fosfatazelor (de
exemplu fosfataza 1, care este activat de PKA, autolimitnd calea).
Fosfataza 1 este inhibat de inhibitorul 1, activ n forma fosforilat.
Defosforilarea sa are loc sub aciunea calcineurinei, o serin/threonin
fosfataz activat de Ca2+ intracelular.
Exist multiple modaliti de activare a cii cAMP:
-

toxina holeric activeaz subunitatea Gs

forskolina activeaz AC

cofeina, teofilina sau analogul lor sintetic IBMX inhib PD

acidul okadaic inhib fosfataza 1, etc.

O a doua cale major de semnalizare intracelular este calea

fosfatidilinozitoldifosfatului (PIP2). Activarea receptorilor metabotropi
transmite semnalul prin subunitatea Gq care activeaz fosfolipaza C
(PLC). Aceasta scindeaz PIP2 n inozitoltrifosfat (IP3), care difuzeaz n
citoplasm, i diacilglicerol (DAG) care rmne n membran. IP3
activeaz receptorii IP3 din reticulul endoplasmic (ei sunt canale ionice
de tip homotetramer cu 2TM/subunitate), ducnd la eliberarea de Ca 2+
din depozite n citoplasm. DAG fixeaz proteinkinaza C (PKC) i
contribuie la activarea ei. Exist 9 isoforme de PKC, unele majore,
activate de Ca2+ intracelular (, 1, 2, ), altele minore, activabile n
absena Ca2+ (, , ). Astfel, pentru isoformele majore semnalul IP 3 se
combin cu semnalul DAG. PKC activat rmne ataat de membran
prin DAG i fosforileaz proteinele int, ntre care i canale ionice.

Creterea Ca2+ intracelular duce i la activarea altei proteinkinaze,

proteinkinaza

Ca2+/CaM-dependent.

Calmodulina

(CaM)

este

protein cu 4 situsuri de legare a Ca 2+, care dup activare se leag de

PK Ca2+/CaM-dependent i o activeaz la rndul ei. Att ea ct i PKC
au o subunitate reglatoare i una catalitic situate pe acelai lan
polipeptidic, i nu pe subuniti diferite ca n cazul PKA.
Alt cale de semnalizare intra-, dar mai ales intercelular, este cea a
derivailor acidului arahidonic (eicosatetraenoic). Acidul arahidonic
este eliberat din PIP2, prin scindarea sa de ctre fosfolipaza A2 (PLA2),
activat de subunitatea G?, eliberat prin cuplarea receptorului
metabotrop cu ligandul (de exemplu histamina). Acidul arahidonic este
metabolizat pe trei ci, ducnd la sinteza de compui activi liposolubili,
ce difuzeaz n celulele nvecinate, acionnd ca hormoni locali
(autacoide):
-

pe calea ciclooxigenazei, enzim inhibat de antiinflamatoarele

nesteroidiene NSAID (non-steroid antiinflamatory drugs aspirina
i compuii nrudii), cu sinteza de prostaglandine i tromboxani

pe calea 5-lipooxigenazei, cu sinteza de leukotriene (derivai ai

acidului 5-hidroxieicosatetraenoic 5 HPETE)

pe calea 12-lipooxigenazei, cu sinteza de compui activi derivai ai

acidului 12-hidroxieicosatetraenoic 12 HPETE.

Semnalele transmise de factorii de cretere (epitelial EGF, nervos

NGF, fibroblastic FGF, dervat din creier BDNF, insulina, etc.) sunt
transmise prin receptorii de tip tirozinkinaz (TyrKR). Acetia au un
situs extracelular pentru ligand, un singur -helix TM, i un situs
catalitic intracelular. Dup interaciunea cu ligandul, TyrK dimerizeaz
i se autoactiveaz prin fosforilarea ncruciat a unor reziduuri Tyr din
subdomeniul catalitic.
Un exemplu de aciune a TyrKR este participarea lor la inactivarea
proteinkinazei

Src,

care

reprezint

un

integrator

de

semnale

intracelulare. Src este compus din 3 domenii: SH 3 (N terminal), SH2, i

TyrK (C terminal), plus un linker i coada C-terminal. Situsul activ al
SH2 interacioneaz cu coada C-terminal i o imobilizeaz cnd
tirozina sa este fosforilat de TyrKR. Defosforilarea acestei tirozine
elibereaz coada C i reprezint un semnal de activare. Un al doilea
semnal este dat de interaciunea SH 3 cu o protein activatoare numit
Nef, bogat n reziduuri de prolin, ce elibereaz linkerul. La ntrunirea
ambelor condiii, o tirozin din situsul activ al subunitii TyrK se
fosforileaz i subunitatea devine catalitic activ, fosforilnd la rndul
ei alte proteine-int.
O categorie de receptori asemntoare structural sunt receptorii
guanililciclaz (GCR) care dup activare produc cGMP. Bine cunoscui n
aceast categorie sunt receptorii pentru peptidul natriuretic atrial
(PNA). Unele guanililciclaze solubile sunt activate de un mesager
secund retrograd, oxidul nitric (NO), produs din L-arginin sub aciunea
NO-sintazelor (NOS). Un exemplu este stimularea nNOS din neuronii
CA3 hipocampici sub aciunea receptorilor NMDA, discutat anterior.
Trebuie remarcat faptul c efectele mesagerilor secunzi nu sunt strict
localizate, ci sunt multiple, ducnd la o serie de aciuni diferite care
concureaz la realizarea efectului final: modularea ratei de descrcare
a potenialelor de aciune, a transmiterii sinaptice, a diferenierii
celulare, etc.
Referine
Anzai N, Deval E, Schaefer L, Friend V, Lazdunski M, Lingueglia E. 2002.
The multivalent PDZ domain-containing protein CIPP is a partner
of acid-sensing ion channel 3 in sensory neurons. J Biol Chem
277(19):16655-61.
Bergstrm S, Danielsson H, Klenberg D, Samuelsson B. 1962. The
enzymatic conversion of essential fatty acids into prostaglandins.
J Biol Chem 239:PC4006-PC4008.
Berridge MJ. 1993. Cell signalling. A tale of two messengers. Nature
365(6445):388-9.

Bessereau JL, Laudenbach V, Le Poupon C, Changeux JP. 1998.

Nonmyogenic factors bind nicotinic acetylcholine receptor
promoter elements required for response to denervation. J Biol
Chem 273(21):12786-93.
Colledge M, Froehner SC. 1998. Signals mediating ion channel
clustering at the neuromuscular junction. Curr Opin Neurobiol
8(3):357-363.
Dong H, O'Brien RJ, Fung ET, Lanahan AA, Worley PF, Huganir RL. 1997.
GRIP: a synaptic PDZ domain-containing protein that interacts
with AMPA receptors. Nature 386(6622):279-84.
Duclert A, Changeux JP. 1995. Acetylcholine receptor gene expression
at the developing neuromuscular junction. Physiol Rev 75(2):33968.
Fiedler K, Lafont F, Parton RG, Simons K. 1995. Annexin XIIIb: a novel
epithelial specific annexin is implicated in vesicular traffic to the
apical plasma membrane. J Cell Biol 128(6):1043-53.
Frydman J. 2001. Folding of newly translated proteins in vivo: the role
of molecular chaperones. Annu Rev Biochem 70:603-47.
Jessell TM, Siegel RE, Fischbach GD. 1979. Induction of acetylcholine
receptors on cultured skeletal muscle by a factor extracted from
brain and spinal cord. Proc Natl Acad Sci U S A 76(10):5397-401.
Johnson AE, van Waes MA. 1999. The translocon: a dynamic gateway at
the ER membrane. Annu Rev Cell Dev Biol 15:799-842.
Kordeli E, Ludosky MA, Deprette C, Frappier T, Cartaud J. 1998.
AnkyrinG is associated with the postsynaptic membrane and the
sarcoplasmic reticulum in the skeletal muscle fiber. J Cell Sci
111(Pt 15):2197-207.
Kornau HC, Schenker LT, Kennedy MB, Seeburg PH. 1995. Domain
interaction between NMDA receptor subunits and the
postsynaptic density protein PSD-95. Science 269(5231):173740.
Li M, Jan YN, Jan LY. 1992. Specification of subunit assembly by the
hydrophilic amino-terminal domain of the Shaker potassium
channel. Science 257(5074):1225-30.
Moncada S, Palmer RM, Higgs EA. 1991. Nitric oxide: physiology,
pathophysiology, and pharmacology. Pharmacol Rev 43:109-142.
Noda M, Furutani Y, Takahashi H, Toyosato M, Tanabe T, Shimizu S,
Kikyotani S, Kayano T, Hirose T, Inayama S and others. 1983.
Cloning and sequence analysis of calf cDNA and human genomic
DNA encoding alpha-subunit precursor of muscle acetylcholine
receptor. Nature 305(5937):818-23.
Parton RG. 1996. Caveolae and caveolins. Curr Opin Cell Biol 8(4):5428.
Pfaffinger PJ, Martin JM, Hunter DD, Nathanson NM, Hille B. 1985. GTPbinding proteins couple cardiac muscarinic receptors to a K
channel. Nature 317(6037):536-8.

Seeburg PH, Higuchi M, Sprengel R. 1998. RNA editing of brain

glutamate receptor channels: mechanism and physiology. Brain
Res Brain Res Rev 26(2-3):217-29.
Sheng M, Pak DT. 2000. Ligand-gated ion channel interactions with
cytoskeletal and signaling proteins. Annu Rev Physiol 62:755-78.
Simons K, Ikonen E. 1997. Functional rafts in cell membranes. Nature
387(6633):569-72.
Sutherland EW. 1972. Studies on the mechanism of hormone action.
Science 177(47):401-8.
Yun K, Wold B. 1996. Skeletal muscle determination and differentiation:
story of a core regulatory network and its context. Curr Opin Cell
Biol 8(6):877-89.
Zerangue N, Schwappach B, Jan YN, Jan LY. 1999. A new ER trafficking
signal regulates the subunit stoichiometry of plasma membrane
K(ATP) channels. Neuron 22(3):537-48.