Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Drochioiu Elemente de Toxicologie Judiciara Iasi 2013 PDF
Drochioiu Elemente de Toxicologie Judiciara Iasi 2013 PDF
Toxicologie Medico-Legal
Motivaie
In ultimii ani s-a observat o cretere enorm a interesului public pentru metodele i
disciplinele criminalistice stimulat mai ales de rezolvarea unor cazuri penale spectaculoase.
Publicul consider n general c medicii legiti sunt n fruntea luptei mpotriva urgiilor lumii
moderne, cum ar fi terorismul internaional i traficul de droguri. Aceast lucrare de
toxicologie medico-legal sau judiciar este consacrat, n principal analizei celor mai
importante clase de droguri i otrvuri.
Prin urmare, aici sunt tratate probleme reale i relativ recente ale toxicologiei medicolegale, cum ar fi analiza markerilor pentru alcool, toxicologia remediilor din plante i
farmacogenomica aplicat n toxicologia medico-legal. Nu au fost uitate domeniile de interes
mai puin recente, cum ar fi conducerea automobilelor i medicamentele, analiza unor
substane neconvenionale, analiza cazurilor de dopaj i asigurarea calitii n analiza
toxicologic. Un accent deosebit a fost pus pe screening-ul toxicologic.
Scopul acestei lucrri este, de aceea, de a prezenta critic informaiile la zi referitoare la
metodele de separare i analiz aplicate n diferite discipline ale tiinei criminalistice. O carte
nu poate i nu ar trebui s nlocuiasc lucrrile tiinifice, n ceea ce privete profunzimea i
clarificarea unei probleme specifice. Aceast carte a fost scris nu numai pentru criminaliti,
ci i pentru publicul larg interesat de problemele medico-legale i, de asemenea, pentru ali
colegi interesai, n special de aspectele de analiz a unor substane sau materiale toxice sau
cu caracter de drog. Lucrarea ar trebui, totui, s prezinte problemele toxicologice relevante,
n evoluia lor, importana potenial a domeniului i perspectivele de viitor.
Studenii de la cursurile de masterat n criminalistic vor aprecia probabil aceast
introducere n domeniul toxicologiei criminalistice i vor folosi lucrarea drept trambulin
pentru realizarea unor cercetri de masterat i, n coninuare, de doctorat.
Structura general a acestui volum corespunde celor mai importante discipline
criminalistice care aplic diferite metode de separare, i anume, toxicologia, chimia i
serohematologia judiciar. Capitolele dedicate toxicologiei medico-legale sunt axate pe
anumite clase de droguri ilicite i terapeutice i pe alte substane de interes criminalistic. De
asemenea, unele probleme specifice toxicologiei medico-legale, cum ar fi medicamentele i
conducerea autovehicolelor, controlul antidoping, asigurarea calitii n analiza criminalistic,
separrile chirale i strategia general de analiz sunt discutate separat. n partea consacrat
chimiei medico-legale, cele mai importante probleme sunt analiza explozivilor i a
acceleratorilor de incendiu.
Procedurile analitice de screening sunt printre strategiile de baz ale toxicologiei
criminalistice i sunt prezentate n detaliu n lucrare i se refer la cele mai importante
1
Iai, 2011
Cuprins
Introducere n toxicologia judiciar.
Prezentarea domeniului. Doze toxice i stabilirea nocivitii
Istoria toxicologiei judiciare.
Investigarea decesului de ctre toxicologi.
Materiale de analiz: snge, urin, alte fluide, materiale vegetale, prafuri i droguri.
Otrvirea accidental. Moartea prin supradoz de droguri. Sinuciderea cu otrav
Crima prin otrvire. Investigaia toxicologic a otrvirilor. Pregtirea probei judiciare pentru
analiza fizico-chimic. Pregtirea probei pentru analiz. Detecia i clasificarea.
Otrvirea cu metale. Gaze toxice. Otrvuri nevolatile. Diverse otrviri.
Studiul coninutului stomacal. Prelevarea de probe de la cadavre
Metabolizarea otrvurilor n corp. Absorbia distribuia i eliminarea
Absorbia alcoolului, distribuia i eliminarea.
Analiza toxicologic. Tehnici i strategii de sampling a probelor judiciare. Analiza fizicochimic. Metode de analiz n toxicologie. Electroforeza. Cromatografia n strat subire.
Cromatografia de lichide de nalt performan. Cromatografia de gaze. Spectroscopia.
Tehnici imunologice. Aplicaii.
Interpretarea datelor toxicologice. Surse de eroare. Estimarea erorilor n analizele
toxicologice. Incertitudini aferente msurtorilor analitice Caracterizarea msurtorilor i a
rezultatelor. Interpretarea unui buletin de analiz fizico-chimic.
Studii de caz. Teste de culoare. Tehnici de microdifuziune.
Metodologia de lucru n toxicologia judiciar. Principalii compui investigai: alcoolul,
otrvurile i drogurile.
Mrturia toxicologului n instana de judecat. Concluziile cursului
Determinarea spectrofotometric a cianurilor din snge i alte fluide biologice.
Determinarea alcoolemiei.
Aplicaii FTIR n toxicologia judiciar.
Analiza drogurilor i amestecurilor complexe de droguri prin GC-MS.
Analiza urmelor de snge folosind metoda cu luminol.
Prelevarea amprentelor i analiza toxicologic unor materiale aflate la locul crimei (fire pr,
saliv, alte materiale biologice).
Analiza contaminanilor prin tehnici de spectrofluorescen. Identificarea surselor cu potenial
toxic.
Analiza electroforetic a vegetalelor n caz de furt de produse agricole.
3
6-Acetilmorfin
Acetonitril
Ionizare la presiune atmosferic (Atmospheric pressure chemical ionization)
Electroforez capilar
Electroforez capilar- spectrometrie de mas
Ionizare chimic
Disociere indus de coliziune (Collision-induced dissociation)
Fluid cerebrospinal
Diacetilmorfine
Dietilamin
Dihidrocodeine
Dimetiloctilamin
Enzyme multiplied immunoassay technique
Enzim-imunodeterminare
Ionizare cu electropulverizare (Electrospray ionization)
Fast atom bombardment
Flame ionization detector
Fluorescence polarization immunoassay
Fluorescein isotiocianat
Gas cromatografie
Cromatografie de lichid de nalt performan (High-performance liquid
(chromatography)
International Diagnostic Systems Corporation
Lichid cromatografie cuplat cu mas spectrometrie
Limit de detecie
Limit cuantificare
Dietilamida acidullui lisergic
Morfin-6-glucuronida
3,4-Metilenedioximetamfetamin
Cromatografie capilar prin electrocinetic micelar
Metanol
Politetrafluoroetilen
Peroxidaz
Radioimunodeterminare (Radioimmunoassay)
Faz invers (Reversed phase)
Supercritical fluid extraction
Extracie n faz solid
4
SPME
TEA
TFA
TLC
TMCS
TMS
TSP
QTOF
necesare att pentru scopuri criminalistice, n caz de deces, dar i pentru supravegherea
mediului (aer, ap, alimente), ct i pentru stabilirea circuitului toxicilor n organism.
Combaterea simptomelor de otrvire presupune tratarea lor, precum i elaborarea de
msuri profilactice i stabilirea concentraiilor maxime admisibile. Otrvurile pot fi produse i
de plante (alcaloizi, glicozizi), de animale (ptomaine, veninuri), de mucegaiuri (micotoxine),
etc.
Toxicologul, spre deosebire de chimistul criminalist, se ocup n primul rnd de
materialele biologice i poate detecta otrvuri n snge, urina, lichidul cefalorahidian,
coninutului gastric, bil, i esuturi.
n trecut, omul a cunoscut intuitiv sau prin observaie proprietile toxice ale unor
substane de origine mineral, vegetal sau animal. Aceste cunotine au fost aplicate mai
trziu, dup ce omul a nceput s ucid animale, la fabricarea sgeilor otrvite (curara).
Totodat, omul a utilizat antidoturi mpotriva otrvurilor de origine vegetal i animal
(veninuri).
2.1 Noiunea de otrav
Noiunea de toxic deriv din grecescul toxikon (otrav), care, dup Dioscoride (sec. I d. H.)
deriv de la toxon(arc) i se refer la sgeile otrvite. Se mai afirm c toxikon provine
de la egipteanul tako (distrugere, moarte). Dup Pliniu (sec. I d.H.), termenul toxicus
deriv de la taxus, o specie de conifer ale crui fructe erau folosite la nveninarea sgeilor
i despre care se tie astzi c i datoresc toxicitatea alcaloidului taxin. Cuvntul otrav
provine de la verbul slav otraviti (a mhni, a tulbura sntatea sufleteasc). Termenul de
otrav se refer numai la toxicul folosit n scop criminal. De asemenea, exist noiunea de
venin, derivat de la venenum (otrav); n accepiunea modern, prin venin se nelege curent
toxina elaborat de unele specii de animale. Noiunea de toxin se refer la substanele
organice produse de organismele animale sau vegetale, capabile s genereze intoxicaii. n
cadrul toxicologiei intr numai micotoxinele, nu i toxinele bacteriene i helmintice.
Prin toxic, Galenus (sec. II d.H.) nelegea orice lucru care poate altera organismul
nostru. n sec. VIII Jabir ibn Hayyan (Geber) ar fi artat c otrvurile i manifest aciunea
nu numai prin natura lor, ci i prin locul i timpul utilizrii, forma otrvii, caracteristicile
individuale ale omului. Paracelsus (1493-1541) introduce noiunea de doz. Orice substan
care, atunci cnd este luat n cantitate suficient, cauzeaz probleme de sntate sau moartea
poate fi considerat otrav. Expresia cheie n aceast definiie este "cantitate suficient".
Paracelsus a observat nc n sec. al 16-lea c "Toate substanele sunt otrvuri; nu este nici
una care s nu fie o otrav. Doza potrivit face diferena dintre o otrav i un remediu.
Cantiti mici de arsenic, cianur i alte otrvuri pot fi ingerate fr a manifesta toxicitate
aparent.
In edictul dat de Ludovic al XIV-lea n 1682, referitor la afacerea otrvurilor, se
arta c: Tot ceea ce provoac o moarte rapid sau afecteaz un timp sntatea omului,
indiferent dac este vorba de un corp simplu sau compus, trebuie privit ca o otrav adevrat.
Dup Ogier (1853-1913), toxicul sau otrava este orice substan a crei prezen n
organism nu este nici normal, nici obinuit. Fabre i Truhaut consider c toxic este
8
substana care, dup ptrunderea n organism n doz relativ ridicat (unic sau repetat la
intervale scurte) sau n doze mici (repetate timp ndelungat) determin, imediat sau dup o
perioad de laten, n mod trector sau persistent, alterarea uneia sau mai multor funcii ale
organismului, putnd duce la moarte.
O concepie asemntoare ntlnim i unii autori arabi: Tot ceea ce se absoarbe
scrie Al-Biruni (973-1048) n Cartea drogurilor se mparte n alimente i otrvuri, iar ntre
cele dou categorii se situeaz medicamentele ele sunt vtmtoare n comparaie cu
alimentele i curative n comparaie cu otrvurile, iar aciunea lor curativ se manifest numai
atunci cnd sunt utilizate de un medic priceput i scrupulos. De aceea, ntre ele i alimente
exist aa-numitele alimente medicamentoase, iar ntre ele i otrvuri, aa-numitele
medicamente toxice. Relaia medicament-otrav este definit succint de Gerolamo
Mercuriali (1530-1606): Otrava este un medicament mortal.
2.2 Grupe de otrvuri
n investigarea unei otrviri, este necesar mai nti izolarea i identificarea otrvii de ctre
toxicolog. Astfel, toxicologii criminaliti clasific otrvurile pe grupe, n funcie de metoda
utilizat pentru a izola substanele din esuturile sau fluidele corpului.
Grupa I: Gaze. Majoritatea gazelor de importan toxicologic nu sunt detectabile n probele
prelevate pentru autopsie. Cu toate acestea, unele pot fi izolate din esutul pulmonar sau din
snge prin procesele de aerare. De obicei, probe de aer sunt colectate de la locul faptei.
Grupa II: Vapori de otrvuri volatile. Compuii din aceast grup sunt izolai prin distilare cu
vapori. Proba (snge, urin sau omogenatul tisular) se aciduleaz cu acid clorhidric sau se
alcalinizeaz cu oxid de magneziu solid. Un flux de abur este trecut peste eantion i
otrvurile volatile sunt ndeprtate prin distilare ntr-un distilat apos. Otrvurile distilabile
dintr-un mediu acid includ tetraclorura de carbon, cloroform, etanol, cianuri, metanol, fenoli,
nitrobenzeni i fosfor galben. Otrvurile distilabile dintr-un mediu alcalin includ
amfetaminele, anilina, meperidina, metadona i nicotina.
Grupa III: Otrvuri metalice. Metalele sunt izolate din esut prin distrugerea tuturor
compuilor organici coninui n esut. esutul poate fi distrus de cldura excesiv (incinerare
uscat) sau prin fierbere cu acizi concentrai sau ageni oxidani puternici (incinerare umed).
Pentru a identifica anumite otrvuri metalice rmase n cenu pot fi folosite diverse metode.
Grupa IV: Otrvuri organice nonvolatile. Acest grup conine cele mai multe dintre
medicamentele de interes pentru toxicologi astzi. Compuii din aceast grup sunt de obicei
prezeni n esuturi numai n cantiti foarte mici. Unele medicamente (de exemplu,
barbituricele) pot fi extrase direct din omogenatele tisulare, cu ajutorul solvenilor organici.
Cu toate acestea, muli compui sunt adesea separai de cea mai mare parte a esutului
matrice, prin prepararea unui filtrat de esut fr proteine. Acest filtrat este apoi supus la
9
noi doze de substan dopant. Doparea aduce prejudicii eticii sportive, precum i integritii
fizice i psihice a sportivilor.
Intoxicaiile accidentale propriu-zise se datoreaz neateniei, netiinei sau
imprudenei i sunt legate de pstrarea i folosirea improprie a pesticidelor, medicamentelor,
substanelor chimice de uz casnic (sod caustic, detergeni, produse petroliere etc.), de
defeciuni de tiraj ale sobelor (gaze naturale, crbune), de gazele de eapament ale
automobilelor (n garaje).
Intoxicaiile medicamentoase au loc prin:
Eroarea medicului, prin prescrierea unor cantiti de substan activ care
depete dozele maxime terapeutice, a medicamentelor coninnd un principiu activ comun
(efect cumulativ) sau sediu comun de aciune (efect sinergic), a principiilor active care, prin
asociere, conduc la efecte toxice sau la potenare exagerat etc
Eroarea farmacistului, prin nedescifrarea corect a reetei, nesemnalrii erorii din
reet, confuzie de substane, eliberarea unui preparat neomogen etc.
Eroarea bolnavului prin supradozare, automedicaie, polipragmazie, confuzie de
medicament sau de cale de administrare etc
Intoxicaiile profesionale au loc n industria chimic, extractiv, agricultur, ateliere
meteugreti etc. Aceste intoxicaii sunt produse de compuii unor metale i nemetale,
pesticide, solveni organici, cancerigeni etc. Acest tip de intoxicaii face obiectul
criminalisticii numai n caz de deces.
n funcie de timpul instalrii intoxicaiei se cunosc:
- Intoxicaia acut, toxicul fiind absorbit n doz relativ mare i unic sau n doze mai
mici i repetate la intervale scurte, iar manifestrile toxice apar pe neateptate, sunt violente i
pot fi urmate de moarte. Dup timpul de apariie i violena manifestrilor toxice, se disting:
intoxicaia supraacut, acut i subacut;
- Intoxicaia cronic numit i intoxicaia pe termen lung reprezint totalitatea
efectelor toxice produse prin administrarea repetat a unui toxic n aceeai doz, pe o perioad
mai mare parte din viaa omului. Leziunile biochimice i morfofuncionale apar lent, dar
continuu. Intoxicaia pe termen lung prin absorbie repetat de doze mici are loc n cazul
toxicilor cumulativi (metanol, digitalice, metale grele, fluor, derivai de arsen etc.) prin
cumularea dozelor sau prin cumularea efectelor, n cazul substanelor cancerigene.
Intoxicaia pe termen lung poate fi cauzat de o doz unic. Toxicitatea n form
agravat se manifest, de pild i la cteva sptmni dup ingerarea unei doze unice de
Paraquat. La fel se comport unele insecticide organofosforice cu aciune neurotrop
ntrziat, nitrozaminele cancerigene etc.
Intoxicaia acut reprezint totalitatea efectelor toxice produse prin administrarea unui
toxic ntr-o singur doz, putnd provoca moartea a 50% din animalele dintr-un lot n decurs
de 24-48 ore (sau pn la 15 zile pentru toxicii cu efect ntrziat).
Aprecierea toxicitii acute pe baz de DL50 are dezavantajul c nu ine seama de masa
molecular, deoarece trebuie s se ia n considerare numrul de molecule implicate n
mecanismele fiziopatologice. S-a introdus, de aceea, noiunea de potenial de toxicitate, pT =
12
log [T]. Valoarea T se calculeaz dup valoarea DL50 i.p. la oareci i reprezint concentraia
molar toxic a substanei, exprimat n moli/kg.
Concentraia letal n atmosfer (CL) exprim toxicitatea acut a substanelor care
ptrund pe cale respiratorie i are aceeai semnificaie ca i DL. Exprimarea sa se face astfel:
masa/volum (g/v);
volum/volum (v/v), ca procente de volum (% vol.), pri/milion (ppm), pri pe
bilion (ppb; 1 ppm = 1000 ppb).
Concentraiile maxime admise (CMA) sunt caracteristice fiecrei substane din mediul
industrial sau comunal, pentru a evita apariia manifestrilor toxice. Ele reprezint
concentraiile medii ale substanelor din aer, care, cu excepia cazurilor de hipersensibilitate,
nu provoac, la nici unul din muncitorii expui n mod continuu nici un semn sau simptom de
boal sau de condiie fizic rea, putnd fi pus n eviden prin cele mai sensibile teste
acceptate pe scar internaional.
2.5 Doze toxice i doze letale
Doza toxic se refer la cantitatea de substan capabil s determine efecte toxice. Aceasta
reprezint cantitatea din substan care, introdus n organism, provoac un efect toxic
determinat. De asemenea, la medicamente se disting doze terapeutice, toxice i letale.
Modul de exprimare a dozei variaz: doz/kg mas corporal; doz/mas corporal
global; doz/unitate de suprafa corporal; concentraie molar; unitate biologic etc. Pentru
substanele care au ptruns n organism pe cale oral se face distincie ntre doza ingerat i
doza absorbit.
Doza letal (DL) exprim toxicitatea acut a substanelor care ptrund oral sau
parenteral. Se exprim n mg/kg corp i se stabilete experimental pe loturi de animale. DL
este urmat de un indice de la 1 la 100 exprimnd procentul de letalitate ntr-un timp dat.
DL5 (DLM) este doza letal minim, DL50 (DML), doza medie letal, DL75 este doza fatal,
iar DL100, doza maxim letal sau doza letal absolut. DLo , doza maxim tolerat (cnd se
produc efecte toxice, dar nu letale) nu este o doz letal.
n mod curent, pentru exprimarea toxicitii acute a unei substane se folosete
noiunea DL50 (mg/kg corp), deoarece la aceast doz diferenele de reactivitate individual
sunt mai reduse.
Aprecierea toxicitii acute pe baz de DL50 are dezavantajul c nu ine seama de masa
molecular, cu alte cuvinte trebuie s se ia n considerare numrul de molecule implicate n
mecanismele fiziopatologice. S-a introdus, de aceea, noiunea de potenial de toxicitate, pT =
log [T]. Valoarea T se calculeaz dup valoarea DL50 i.p. la oareci i reprezint concentraia
molar toxic a substanei, exprimat n moli/kg.
Substanele toxice se clasific i se compar astfel n raport cu DL50 (vezi scara
toxicitii).
Concentraia letal n atmosfer (CL) exprim toxicitatea acut a substanelor care
ptrund pe cale respiratorie i are aceeai semnificaie ca i DL. Exprimarea sa se face astfel:
masa/volum (g/v);
13
DL50 (doz
unic) oral
obolan,
mg/kg
Inhalare de
vapori (4 ore)
mortalitate 3060% (obolan)
ppm
Extrem de
toxic
<5
<1
<10
<0,065
Alcaloizi
Foarte
toxic
5-43
1-50
10-100
Organofosforice,
organomercurice,
As2O3, DNOC
Moderat
toxic
44-340
50-500
100-1000
31
Metale grele
Slab toxic
350-2810
500-5000
1000-10000
570
Aditivi alimentari,
Fe, Ni
Practic
netoxice
Relativ
fr
toxicitate
282022590
500015000
10000-100000
1100
Arome alimentare,
NaCl, acizi organici
>22600
>15000
>100000
>1100
Substane alimentare
Grupa
toxicitii
Gradul
toxici-tii
Doza letal
probabil
la om (g)
Substane
Concentraiile maxime admise (CMA) sunt caracteristice fiecrei substane din mediul
industrial sau comunal, pentru a evita apariia manifestrilor toxice. Ele reprezint
concentraiile medii ale substanelor din aer, care, cu excepia cazurilor de hipersensibilitate,
nu provoac, la nici unul din subiecii expui n mod continuu nici un semn sau simptom de
boal sau de condiie fizic rea, putnd fi pus n eviden prin cele mai sensibile teste
acceptate pe scar internaional.
n raport cu natura efectului toxic, substanele se mpart n mai multe grupe, mai
importante fiind urmtoarele dou:
- substane ale cror efecte principale se traduc prin fenomene de iritaie, sensibilizare
sau intoxicaie acut, aprute imediat sau dup o faz de laten, n urma unei expuneri de
scurt durat la concentraii curente (oxizi de azot, formaldehid, halogeni, mercaptani etc.).
n acest caz CMA sunt denumite valori plafon, care nu trebuie depite nici chiar timp de 1015 minute;
- substane ale cror efecte principale se datoresc cumulrii lor, n urma expunerii
repetate la concentraii curente (metale grele, solveni organici etc.). n acest caz, trebuie
considerate drept CMA valorile medii integrate n raport cu timpul, corespunznd noiunii de
praguri care nu pot fi depite. Ca urmare, aceste concentraii pot fi depite n timp i spaiu,
14
15
18
obicei,
n etapele trzii ale intoxicaiei cu clorur mercuric sau cu sruri de plumb.
Diferite materiale colorate aflate n vom pot indica tipul de otrvire. Astfel, culoarea
maro asemntoare cu zaul de cafea indic o otrvire cu baze tari, cum ar fi de hidroxidul de
sodiu sau potasiu; galbenul conduce la acid azotic i acizii cromului; albastru-verde la sulfat
de cupru; negru, la acid sulfuric, iar culoare verde-maro sugereaz nghiirea de acid
clorhidric. O vom cu miros ascuit indic o otrvire cu amoniac sau cu acid acetic.
Intr-un caz de deces prin otrvire, numai o anchet la faa locului i audierea
martorilor ar putea decide dac a fost un caz de crim, sinucidere sau accident. Autopsia poate
stabili numai tipul i cantitatea de otrav utilizat.
Cele mai cunoscute substane otrvitoare sunt:
- Otrvurile lichide i gazoase. Cele mai cunoscute sunt monoxidul de carbon, acidul
cianhidric, freonul, metanolul, toluenul, benzenul, gazolina i cloroformul.
- Metalele grele i alte otrvuri anorganice. Compuii i srurile de antimoniu,
arsenicul, bariul, cromul, plumbul, mercurul, taliul, precum i acizii i bazele anorganice
puternice, cum ar fi acidul clorhidric, acidul azotic, acidul sulfuric, hidroxidul de sodiu,
hidroxidul de potasiu i amoniacul.
- Drogurile ilicite, medicamentele aflate n regim special i buturile spirtoase. Unele
medicamente pot fi gsite n asociere cu altele asemenea sau cu alcool. Grupa de astfel de
substane cuprinde alcoolul etilic, barbituricele, heroina, opiaceele sintetice, cum ar fi
metadona, fenciclidin (phencyclidine, PCP), tranchilizantele minore, cum ar fi Valium,
Librium, meprobamatul sau medicamentele cu regim special, atunci cnd sunt luate n exces.
- Unele otrvuri animale i vegetale: atropin, cocaina, nicotina, scopolamina,
stricnina i veninul de arpe.
- Otrvuri bacteriene i intoxicaii alimentare (botulism).
4.1 Otrvirea accidental
Cele mai multe intoxicaii accidentale au loc n cas. Copiii pot avea acces i chiar ingera
medicamente, detergeni, pesticide i detergeni de uz casnic. Intoxicaia accidental la aduli
este de obicei rezultatul etichetrii greite sau depozitrii unei substane toxice ntr-un alt
recipient dect cel original. De cte ori nu, un recipient necorespunztor este o veche sticl de
whisky! Arsenicul, buruienile otrvitoare, stricnina, cianurile, soluiile de curare, i
numeroase alte otrvuri letale au fost cu nerabdare i din greeal bute din ulcioare de cidru
i sticle de whisky vechi. Este cunoscut cazul n care un flacon deschis de cianur, aflat lng
o cutie de zahr pe o mas de lucru la subsol, a fost folosit pentru a ndulci o ultim ceac de
cafea.
Intoxicaiile accidentale pot aprea n industrie, ca urmare a neglijenei sau unor
ntmplri nefericite, care expun lucrtorii la substane toxice. n timp ce posibilitatea de
otrvire accidental n industrie este mare, standardele de siguran i reglementrile i
disponibilitatea serviciilor medicale de urgen din prezent mpiedic industria s constituie
sursa a multe intoxicaii fatale.
20
ingestiei de cantiti excesive de alcool sunt mai puin frecvente. Cu toate acestea, numeroase
decese accidentale apar din ingestia simultan de medicamente puternice i alcool.
4.3 Sinuciderea cu otrav
Metoda obinuit de deces prin otrvire este sinuciderea. n general, de dou ori mai muli
brbai dect femei svresc cu succes o sinucidere. Cu toate acestea, de dou ori
ca multe femei dect brbai ncearc s se sinucid cu otrav. Cel mai comun mijloc de
sinucidere este monoxidul de carbon, un gaz generat de arderea incomplet a compuilor cu
carbon. Gazele de eapament de la automobile conin o concentraie ridicat de monoxid de
carbon. O metod obinuit folosit de ctre cei care se sinucid cu monoxid de carbon este
lsarea unui motor de main pornit ntr-un garaj nchis.
n timp ce arsenicul, cianura i alte otrvuri bine cunoscute pot fi uneori utilizate ca
ageni de sinucidere, cele mai multe decese rezult ca urmare a consumului de medicamente.
Persoanele care sufer de depresie i alte tulburri emoionale, de obicei, au la dispoziie
medicamente puternice i, dac sunt luate n exces, pentru a combate simptome ale
tulburrilor psihologice aceste droguri sunt letale. Astzi, cele mai multe sinucideri prin
otrvire implic ingerarea mai multor medicamente, de obicei trei pn la apte medicamente
diferite sunt ingerate odat. Prin analiza coninutului gastric i al intestinului, a urinei, a
sngelui, a organelor principale ale corpului, toxicologul poate determina cantitatea minim a
otrav ingerat. n sinucideri, rezultatele acestor analize demonstreaz c a fost ingerat o
cantitate masiv; aceasta nseamn, dincolo de orice ndoial, c rposatul nu ar fi putut lua
accidental o astfel de doz.
4.4 Otrvirea criminal
Otrvirile accidentale i sinuciderile sunt comune astzi; crima prin otrvire este rar.
Concluzia c o persoan a murit ca urmare a otrvirii de ctre un criminal este de multe ori cel
mai dificil tip de investigaie pentru oamenii legii i experii medicali. n general, dovada de
otrvire se obine din cunoaterea simptomelor manifestate de rposat nainte de moarte,
examinarea postmortem a corpului de ctre anatomopatolog, i izolarea i identificarea otrvii
de ctre toxicolog. Pentru urmrirea cu succes a unui suspect, oamenii legii trebuie s
stabileasc c fptaul a avut acces la o surs de otrav, c suspectul a fost contient de
efectele letale ale otrvii i c suspectul a avut posibilitatea de a administra otrava rposatului.
n cazul n care victima a fost consultat, nainte de moarte, de ctre un medic,
medicul nu consider otrvirea ca o cauz a necazului pacientului. Numai n cazul n ocupaia
pacientului l aduce n contact cu substane toxice (lucreaz ntr-o rafinrie, mediu chimic sau
n topitorii; lucreaz la o ferm i utilizeaz pesticide i erbicide) va medicul suspecta o
intoxicaie chimic. Crima prin otrvire apare cel mai frecvent n cadrul familiei, acas, iar
medicul va suspecta rareori un so supravieuitor, soia, fiul sau fiica de otrvire a unui alt
membru al familiei. De asemenea, exist rareori un simptom de otrvire care nu poate fi la fel
de bine cauzate de boala.
22
Vrsturile, diareea, colapsul rapid i pulsul slab, adic toate simptomele otrvirii cu
arsenic pot fi, de asemenea, i cauza unui ulcer gastric perforat sau a unei inflamaii a
pancreasului sau apendicelui. De asemenea, convulsiile cauzate att de stricnin ct i de
tetanos. Pupilele contractate i narcoza pot fi cauzate de stupefiante sau de leziuni cerebrale.
Cu toate acestea, exist circumstane care fac un diagnostic de otrvire aproape sigur.
Debutul i evoluia simptomelor ctre o moarte rapid, imediat dupa servirea mesei
sau dup consumarea unui pahar indic intoxicaii acute, deoarece intoxicaia alimentar
bacterien are un debut ntrziat al simptomelor.
Otrvurile metalice pot provoca deteriorarea sever a tractului gastro-intestinal, ficatul
i rinichii. Fosforul, hidrocarburile clorurate i ciupercile otrvitoare cauzeaz degenerarea
sever a ficatului. Cu toate acestea, cele mai multe otrvuri nu produc modificri observabile
n esuturi, prin urmare, n multe cazuri de otrvire, evaluarea corpului de ctre
anatomopatolog stabilete dac moartea s-a datorat unor cauze naturale sau unor leziuni
traumatice i c nu exist nici o dovad pentru cauza de deces, cu excepia unei posibile
otrviri. n majoritatea cazurilor, analiza toxicologic aduce dovezi pentru crima prin otrvire.
4.5 Dovezi circumstaniale de otrvire
Ancheta toxicologic ale unei mori prin otrvire poate fi mprit n trei etape:
1. Obinerea studiilor de caz i a probelor (dovezilor) adecvate;
2. Analizele toxicologice;
3. Interpretarea rezultatelor analizelor.
Stabilirea cauzei de deces drept otrvire se poate face numai prin autopsie i analiz
chimic. ntr-un numr de cazuri de intoxicaii, aspectul persoanei decedate sau circumstane
speciale n legtur cu moartea poate conduce la aflarea cauzei de deces.
Trebuie, de asemenea, cutate, n primul rnd, la locul incidentului otrvurile
reziduale, sub form de comprimate, pulbere, sau reziduuri n flacoanele de medicamente. De
asemenea, se vor cuta ambalajele, prafurile, cutiile aruncate i alte recipiente (tuburi, fiole,
flacoane). Toate indicile trebuie recuperate i ambalate separat, ntr-un tub sau plic. Atunci
cnd persoana decedat se gsete n pat, trebuie examinat foarte atent lenjeria de pat
deoarece poate conine otrav sub form de pulbere, dar i alte substane deversate, greu de
detectat.
n cazurile n care moartea nu se datoreaz otrvirii, toxicologul criminalist poate
oferi, de cele mai multe ori, dovezi incontestabile cu privire la mprejurrile n care a avut loc
un deces. Comportamentul de conducere haotic a victimelor accidentelor auto este adesea
explicat prin prezena alcoolului n snge sau esuturi. Medicamentele psihoactive, cele care
afecteaz comportamentul, joac adesea un rol semnificativ n mprejurri asociate cu moartea
subit sau violent. Detectarea alcoolului, a narcoticelor, a halucinogenelor sau a altor
medicamente pot susine depoziiile martorilor cu privire la comportamentul agresiv,
incoerent, sau iraional al rposatului n momentul unui incident fatal. n schimb, rezultatele
toxicologice negative pot spulbera suspiciunea consumului de droguri a rposatului.
Concluziile negative sunt, de asemenea, semnificative la persoanele care sunt n mod regulat
sub tratament pentru a controla condiiile patologice. n cazul epilepticilor, concentraiile
23
sczute sau negative de droguri pot indica faptul c rposatul nu i-a luat medicamentele n
modul prescris i ca urmare, au suferit un atac de apoplexie fatal.
4.6 Metode de analiz criminalistic a opioidelor
Utilizarea unor metode de separare pentru izolarea, identificarea i analiza cantitativ a
opiaceelor naturale i sintetice prezint un larg interes pentru criminaliti (Bogusz, 2008).
Strict vorbind, termenul de opiaceu se refer la produsele derivate din opiu de mac. Atenia
criminalitilor se concentreaz pe derivai de morfin i opiacee sintetice sau semisintetice, cu
aciune agonal (agonistic) la receptorii opioizi OP1 (d), OP2 (k) sau OP3 (m). Pentru
aciunea opiaceelor asupra receptorilor opioizi pot fi consultate i alte lucrri (Kilpatrick &
Smith, 2005; Dhawan et al., 1996). Aici ne intereseaz mai ales aplicaiile analizei medicolegale, dedicat n principal probelor biologice. Aceste aplicaii cuprind metodele de detectare
a opiaceelor n probele non-biologice i biologice; izolarea de opioide din matrici biologice
diferite; analiza constituienilor opiului de mac n materiale vegetale i n fluidele
organismului; separarea i detectarea heroinei i metaboliilor sau a congenerilor si n
preparate ilicite de droguri sau medicamente, precum i n fluidele organismului; analiza
morfinei i a altor opiacee naturale i sintetice n fluidele organismului i n organe. In acest
scop sunt necesare tehnici de separare relevante: cromatografia n strat subire (TLC), gazcromatografia (GC), cromatografia de lichid de nalt performan (HPLC) i electroforeza
capilar (CE), combinate cu diferite metode de detecie.
Testele preliminare trebuie s prezinte o specificitate larg de grup i, eventual,
o sensibilitate ridicat, n timp ce specificitatea absolut nu este necesar. O identificare fr
echivoc i determinarea cantitativ sunt de obicei efectuate n etapa de confirmare a analizei.
Deoarece un rezultat negativ la un test preliminar este de obicei decisiv, nu se iau n
considerare rezultatele fals negative.
4.7 Metode preliminare utilizate la depistarea drogurilor n strad
Dispozitivele de testare folosite curent sunt simple i robuste i se bazeaz de regul pe reacii
de culoare bine-cunoscute. Testele preliminare se execut, de obicei, de ctre poliiti sau
vamei. Sarcina principal a acestor teste este selecia probelor sau a materialelor suspecte
pentru examinarea lor ulterioar cu metode confirmatorii. Narcopouchs, de pild, reprezint
un kit de teste de culoare pentru detectarea opiaceelor, amfetaminei, cocainei, barbituricelor,
canabinoizilor i a dietilamidei acidului lisergic (LSD) n probe colectate pe strad (ODV Inc,
Paris, ME, SUA). Acest test folosete reacii de culoare cu mai muli reactivi, cum ar fi
reactivii Marquis, Meyer, Mecke, Ehrlich, Fast Blue B i Koppanyi. Intreaga procedur se
realizeaz n cutii de plastic prin care se poate vedea reacia de culoare. Kit-ul Herosols
(Mistral Detection Ltd., Jerusalem, Israel) const dintr-un reactiv pentru pulverizare i hrtia
special de testare. Astfel, pielea suspectului este tears/tamponat cu o bucic de hrtie, pe
care este apoi pulverizat Herosol. O culoare violet indic prezena heroinei. Un test similar
pentru heroin, numit Detect NowTM este oferit de Test Medical Symptoms@Home, Inc. i a
fost comercializat prin intermediul internetului ca un test simplu pentru prinii care doresc s
24
verifice dac copiii lor consum droguri. NIK (Public Safety Inc., Armor Holding,
Jacksonville, FL, USA) reprezint un alt kit ce cuprinde fiole pentru principalele clase de
droguri printre care opiacee/amfetamine, heroin/opiu. Drug Wipe i Drug Wipe II (Securetec
AG, Germany) sunt concepute ca teste imunochimice pentru detectarea drogurilor pe
suprafee diferite, de exemplu, n bagaje, paapoarte, valut, i, de asemenea, pe piele, pe
limb sau n transpiraie. Limita de detecie pentru opiacee este de 25 ng de echivalent
morfin. Cu un cititor portabil se poate efectua determinarea cantitativ colorimetric.
4.8 Metode folosite pentru fluidele biologice
Metodele preliminare utilizate pentru fluide biologice pot fi mprite n teste on-site i teste
de laborator. Totui, testele preliminare pot fi folosite nu doar n scopuri judiciare sau
preventive, de exemplu, n scanarea angajailor, dar i ca o procedur de diagnosticare n
intoxicaii acute suspecte. n testele on site (la faa locului) aplicate ntr-o secie de urgen,
confirmarea analizelor nu este ntotdeauna de maxim importan. Rezultatul pozitiv al unui
test preliminar de opiacee ntr-un caz de supradoz cu heroin reprezint un indiciu
pentru administrarea unui antagonist al opiaceelor, de exemplu, naloxon, n loc s se atepte
rezultatele analizei confirmatorii. Aceast practic nu se limiteaz numai la domeniul sntii
publice; distribuirea de naloxon pentru administrare acas dependenilor de ctre
membrii familiei este o nou abordare n combaterea efectelor drogurilor, care este testat n
SUA, Germania i Regatul Unit (Sporer, 2003).
Teste pe teren
Aceste teste sunt utilizate pe scar larg pentru grupuri sociale foarte diferite, incluznd
oferii de automobile, criminalii din pucrii, militarii, sportivii, angajaii din industria
petrolier, etc. Se pot testa astfel i indivizii din zonele ndeprtate. Cel mai important aspect
este posibilitatea de a folosi de eantionare non-invazive. Din acest motiv, testele pe saliv
sau transpiraie au devenit deosebit de atractive n locul celor pe urin sau snge (Jenkins &
Goldberger, 2002).
S-a realizat o astfel de evaluare utiliznd cinci dispozitive de testare a drogurilor pe
teren, i anume, AccuSign, Rapid Drug Screen, TesT-Cup-5, TesTstik i Triage. Au fost
colectate i testate patru sute de probelor de urin, iar rezultatele pozitive au fost confirmate
folosind cromatografia de gaz cuplat cu spectrometria de mas (GC-MS), pentru morfin i
codeina sau prin lichid cromatografie-spectrometrie de mas (LC-MS), pentru hidrocodona i
hidromorfon (Crouch et al. [5] ). A fost observat numai un rezultat fals-negativ. Rata de
rezultate fals-pozitive a fost sub 0,25% pentru toate dispozitivele de testare utilizate.
Gronholm i Lillsunde [6] au evaluat opt dispozitivele de teren pentru depistarea de opiacee i
alte droguri n urin i prin analiza fluidelor orale. Rezultatele testelor pot fi vzute n tabelul
urmtor.
Un alt sistem pentru analiza drogurilor la faa locului, ORALscreen System, a dat
rezultate concordante cu cele din laborator chiar dup 2-3 zile de la consumul de droguri
(Barrett et al. [9]).
25
Teste pentru detecia pe teren a opiaceelor n fluidele corpului (dup Bogusz, 2008).
Limita de Materialul
Dispozitivul
Productor
Calibrare detecie
biologic
de testare
analizat
(ng/ml)
Morfin
300
Urin
AccuSign
www.pbmc.com
TM
Instant-View
Morfin
300
Urin
www.alcopro.com
Morphine
ONTRAK TesTcup
www.rochediagnostics.com Morfin
300
Urin
ONTRAK TesTStik
www.rochediagnostics.com Morfin
300
Urin
www.bioscaninc.com
Morfin
300
Urin
Rapid Drug Screen
Syva RapidTest
www.dadebehring.com
Morfin
300
Urin
www.biosite.com
Triage DOA
Morfin
300
Urin
www.cozart.co.uk
Morfin
10
Saliv
Cozart RapiScan
Testele de laborator
Testele de laborator sunt utilizate n situaiile n care numrul de probe examinate este destul
de ridicat, de exemplu, n screening-ul de droguri n cazul angajailor sau a personalului
militar. Aceste teste sunt de regul bazate pe principiul testelor imunologice i se refer nu
numai la opiacee, dar i la ali compui, cum ar fi amfetaminele, cocaina, benzodiazepinele,
barbituricele, canabinoizii i metadona. Toate kit-urile detecteaz o gam larg de opiacee,
inclusiv cu morfina i glucuronoconjugaii si, codeina, opiaceele semisintetice, cum ar fi
dihydrocodeine (DHC) sau hidrocodona. Excepie face metoda CEDIA 6-AM (dezvoltat de
Microgenics, Fremont, CA, USA), care este selectiv pentru 6-monoacetylmorphine
(metabolitul primar al heroinei). George i Parmar [10] au analizat 1100 probe de urin cu
CEDIA 6-AM i nu au reuit s confirme 21 din 282 de probe pozitive, care au fost
identificate cu ajutorul GC-MS. Performana testului CEDIA 6-AM de la Microgenics a
fost, de asemenea, evaluat (Holler et al. [11]) pe un total de 37713 probe de urin de la de
membri serviciului militar activ. Trei soldai au fost depistai pozitiv, la o limit 10 ng/ml, iar
una dintre cele trei probe a fost confirmat pozitiv i prin GC-MS, n timp ce celelalte dou
eantioane nu au fost confirmate la limita de detecie (LOD) de 2,1 ng/ml. n plus, 87 probe
de urin uman cunoscute pentru coninutul lor de 6-AM (prin GC-MS) au fost re-analizate cu
ajutorul testului CEDIA 6-AM cnd s-au obinut rezultate pozitive.
Unele teste preliminare au fost adaptate pentru probele postmortem. Astfel, a fost
aplicat testul ELISA pentru screening n cazul abuzului de droguri utiliznd pentru analiz
omogenatele tisulare i sngele colectate postmortem (Moore et al. [17]).Testul pentru
morfin a fost foarte specific pentru morfina liber, dar mai puin sensibil dect screening-ul
celorlalte opiacee. Acesta din urm a fost recomandat pentru screening-ul specimenelor
postmortem. Cnd s-a evaluat testul ELISA comercial pentru screening-ul opiaceelor i
benzodiazepinei n probe de snge postmortem, n raport cu tehnica GC-MS, s-a gsit o
sensibilitate de 95% i o specificitate de 92% fa de GC-MS (Kemp et al. [18]). Limita de
detecie a fost 20 g/l echivalent morfin.
26
Utilizarea la scar larg i importana testului antidrog a creat o pia ilegal pentru
proceduri i produse care promit s ''bat'' testele. n afar de diluarea urinei prin consum
excesiv de alcool sau substituirea probelor, mai muli productori ofer diferite kit-uri (seturi)
i reactivi, care pot fi adugate n urin, pentru a evita detectarea drogurilor. Ca o
contramsur la falsificare, pot fi aplicate urmtoarele etape: msurarea temperaturii, greutii
specifice, pH-ului i coninutului de creatinin n urin, precum i utilizarea de teste chimice
specifice pentru depistarea adaosurilor de compui chimici. Cody i colaboratorii si [21,22] a
examinat influena falsificatorului Stealth asupra detectabilitii morfinei sau codeinei n
probele de urin. Stealth conine peroxidaz i peroxid i este considerat de productor ca
nedetectabil prin teste de depistare a falsificrii. S-a demonstrat c probele cu concentraii
sczute de morfin i codein (2,5 g / l urin) dau un rspuns negativ att la examinarea
imunochimic i prin GC-MS, n timp ce parametrii tipici ai urinei au rmas neschimbai.
Microgenics a dezvoltat un test special numit Sample Check care detecteaz orice interferen
posibil cu testul CEDIA n caz de alterarea eantionului. Acest test nlocuiete un grup
complex de teste de alterare.
5. Studii de caz i probe
Astzi, sunt uor accesibili publicului mii de compui care sunt letali dac sunt ingerai,
injectai sau inhalai. Toxicologul are doar o cantitate limitat de materiale pe care s
efectueze analizele; prin urmare, este imperios necesar ca, nainte de a ncepe analizele s
obin ct mai multe informaii posibil cu privire la mprejurrile cazului.
nainte de nceperea analizei, toxicologul trebuie s ia n considerare mai muli factori:
cantitatea de prob disponibil, natura otrvii cutate i posibila biotransformare a otrvii.
Pentru c lucreaz cu o cantitate limitat de prob, toxicologul trebuie s elaboreze o metod
analitic, ce va permite detectarea unui numr ct mai mare de compui.
Toxicologul trebuie s in cont de vrst, sex, greutate, istoricul medical i ocupaia
rposatului, precum i de orice tratamente au fost administrate nainte de moarte, constatrile
preliminare ale autopsiei, medicamentele care au fost la ndemna rposatului, precum i
intervalul de timp dintre debutul simptomelor i moarte. ntr-un an, laboratorul de toxicologie
afiliat cabinetului unui medic legist va efectua analize asupra esuturilor pentru diverse
otrvuri, cum ar fi diverse medicamente (analgezice, antidepresive, hipnotice, tranchilizante),
consumului de droguri (halucinogene, narcotice, stimulente), produse comerciale (antigel,
produse de aerosoli, insecticide, rodenticide, plante toxice), i gaze (monoxid de carbon,
cianur).
Evident, posibila identificare a otrvii nainte de analiz ar ajuta foarte mult.
Colectarea probelor pentru analizele toxicologice este de obicei efectuat de ctre patolog la
autopsie. Sunt necesare mostre din numeroase fluide ale corpului i organe, deoarece
drogurile i otrvurile au afiniti diferite pentru esuturile organismului (a se vedea tabelul
urmtor). Drogurile i otrvurile nu sunt distribuite uniform n tot organismul, iar toxicologul,
de obicei, analizeaz mai nti organele care sunt predispuse a avea cele mai mari concentraii
de droguri (vezi figura urmtoare). Pentru analiza toxicologic detaliat este necesar o
27
cantitate mare din fiecare mostr, deoarece o procedur prin care se extrage i se identific un
compus sau clas de compui poate fi ineficient n extragerea sau identificarea altora.
30
Cocaina, mg/kg
25
20
15
10
5
In
im
a
Ri
ni
ch
i
Fi
ca
Pl t
am
an
i
Sp
lin
a
M
Te us c
h
su
ta i
d
Co ipo
s
rp
vi
tro
s
er
Cr
ei
Bi
la
Sa
ng
e
Cantitate
200 g
ct este disponibil
15 ml
500 g
un organ ntreg
500 g
un organ ntreg
ct este disponibil
ct este disponibil
ct este disponibil
Toxicul urmrit
Insecticide, Tiopental
Codein, Morfin
Clcooli, monoxid de carbon
Otrvuri volatile
Metale grele
Cei mai muli toxici
Metadon, gaze, inhalante
Toi toxicii luai oral
Cei mai muli toxici
Digoxin, electrolii, glucoz
Probele ar trebui s fie colectate nainte de mblsmare, deoarece acest proces poate
distruge sau dilua otrvurile prezente i poate face imposibil detectarea acestora. De
28
exemplu, cianura este distrus de procesul de mblsmare. nvers, alcoolul metilic sau cel
etilic poate fi o component a unui fluid mblsmare, dnd astfel o indicaie fals despre ceea
ce a but rposatul nainte de moarte.
Se prezint o schem de izolare a otrvurilor cnd compusul cutat nu este cunoscut.
Prob tocat de esut
Reziduu
Extract apos
Extract organic
Acidifiere,
extracie
cu solvent
organic
Teste pt
metale,
Spectroscopie
Organic
Apos
Extragere
cu acid
Extr. apos
Se arunc
Reziduu
conine
droguri
acide
Organic
TLC, GLC,
HPLC,
GC/MS
Reziduu
conine
droguri
bazice
Extract organic
Alcalinizare,
extracie
cu solvent
organic
Apos
Se arunc
Evaporare
Reziduu
conine
droguri
neutre
TLC, GLC,
HPLC,
GC/MS
29
OCH3
O
OCH 3
N CH3
NH
Cocaina
Norcocaina
OH
O
H3C
N
O
O
C
OH
N CH 3
OCH3
NHCOCH3
deetilare
OCH2CH3
OH
fenacetina
HO
N
acetaminofen
COCH3
NCOCH3
OCH2CH3
N-hidril-fenacetina
metabolit hepatotoxic-cauzeaza
necroza celulei hepatice
(metabolit mutagenic-carcinogen
al tractului urinar)
6. Interpretarea rezultatelor
Odat ce analiza probelor este finalizat, toxicologul trebuie s interpreteze concluziile asupra
efectelor fiziologice ale substanelor toxice gsite, n funcie de concentraia determinat i
dac acestea au putut provoca moartea victimei. Conteaz calea de administrare, indiferent
dac toxicul prezent este sau nu n concentraie suficient pentru a provoca moartea sau
modifica comportamentul victimei astfel nct s contribuie la moartea sa. Evaluarea
rezultatelor analitice din punct de vedere fiziologic este de multe ori problema cea mai dificil
cu care se confrunt toxicologul criminalist.
La determinarea modului de administrare, toxicologul ia n considerare rezultatele
analizei diferitelor probe. Ca regul general, cele mai mari concentraii de toxic vor fi gsite
la locul faptei. Prin urmare, prezena unor cantiti mari de droguri sau otrvuri n tractul
gastro-intestinal i ficat indic administrarea oral, n timp ce concentraii mai mari n
plmni, n comparaie cu alte organe viscerale indic inhalare. Concentraii mari de toxic n
esuturile din jurul unui loc de injectare vor indica efectuarea recent a unei injecii
intramusculare. Injectarea intravenoas introduce un medicament sau drog direct n circulaia
sistemic, evitnd astfel efectul iniial de concentrare n ficat. O examinare a concentraiei
31
relative a medicamentelor (Fortral) n mai multe esuturi poate indica mai degrab o injecie
intravenoas, dect o administrare pe cale oral (vezi figura urmtoare).
t
ca
i
F
ier
e
r
hi
c
i
in
Prin urmare, cantiti mici de cianur sunt prezente n mod normal n organism, iar
concentraiile sczute sunt tolerate fr a fi toxice. Multe metale grele i metaloide, cum ar fi
plumbul, mercurul i arsenul, care nu sunt eseniale pentru funcionarea normal a corpului,
sunt prezente la majoritatea populaiei, datorit contaminrii din mediu. O valoare terapeutic
este acea concentraie a unui compus care produce efecte terapeutice - cantitatea de
medicament necesar i suficient pentru a trata o afeciune medical, dar nu suficient pentru
a provoca toxicitate. O valoare toxic este acea concentraie a unui compus care este asociat
cu efectele nocive, care pot pune sau nu viaa n pericol. O valoare letal este acea
concentraie a unui toxic care are ca efect sau reprezint chiar cauza decesului i este stabilit
n mod constant drept cauza morii, n cazuri bine documentate i investigate.
n anumite cazuri, toxicologul poate face diferena ntre o intoxicaie acut i o
intoxicaie cronic. De exemplu, prul este proba preferat pentru diagnosticul de expunere
cronic la arsenic. Analiza secvenial a unor seciuni de pr poate indica modelul de
expunere la arsenic. Arsenicul care circul prin snge este depus n foliculul pilos, unde este
prins de keratin i transportat pn n foliculul de pr n cretere. Celulele germinative ale
prului sunt n echilibru relativ strns cu arsenic circulant. Deoarece concentraiile de arsenic
din snge cresc sau scad, la fel se ntmpl i cu cantitatea de arsenic depus n firele de pr
cretere. Prul crete cu aproximativ 0.4 - 0.5 mm / zi sau 12,5 mm pe lun. Prin urmare,
analiza unor segmente de 1.0 cm sau mai mici ofer un model lunar de expunere. Coninutul
normal de arsenic de pr variaz n funcie de factori nutriionali, de mediu i fiziologici. Cu
toate acestea, limita maxim la persoane care nu sunt expuse la arsenic este de aproximativ 5
ppm. Odat ce un individ este ndeprtat de sursa de expunere la arsenic, valorile acestuia n
pr revin la normal n cteva sptmni.
Arsenic, ppm
100
50
10
14
17
20
22
24
27
30
33
33
36
Profilul arsenicului n prul victimei unei crime, prezentat n figura de mai sus, indic
otravirea cronic cu arsenic. Ucigaul a pregtit mesele victimei din ultimele 2 luni din viaa
sa. Victima a fost n spital, din a treia pn n a cincea lun nainte de moarte, iar cu ucigaul
nainte i dup aceast dat.
Factorii care pot influena rspunsul unui individ la o concentraie toxic dat sunt
vrsta, sexul, greutatea corporal, maturitatea, starea de nutriie, aspectele genetice i
imunologice. De asemenea, existena unei boli sau afectarea unui anumit organ, dar i
activitatea sistemului nervos central (depresie, stres, etc) trebuie luate n considerare. Un
factor suplimentar care complic adesea interpretarea este fenomenul farmacologic de
"toleran". Tolerana este o stare de receptivitate sczut la un toxic ca rezultat al expunerii
nainte de aceasta, o perioad lung de timp, la un compus asemntor. Exist o serie de
mecanisme fiziologice pentru dezvoltarea toleranei. Adaptarea celular este ns cea mai
problematic pentru toxicolog.
Adaptarea celular este o form de toleran n care sunt necesare concentraii tot mai
mari n snge sau esuturi dintr-un medicament pentru a obine rspunsul farmacologic dorit.
De pild, persoanele dependente de narcotice pot lua n mod regulat doze de metadon, care
pentru ei nu produc deprimarea sistemului nervos central, n timp ce aceeai doz, poate
provoca moartea cuiva care nu primete n mod regulat opiacee. Factorii care influeneaz
concentraia din snge sau esut dat dup administrarea unui toxic sunt legai att de natura
compusului, ct i de structura biologic a individului. Compoziia chimic i caracteristicile
fizice ale unui material modific adesea toxicitatea sa. De exemplu, srurile sau clorhidraii
anumitor metale sunt mult mai solubile n tractul gastro-intestinal i, prin urmare, absorbite
mai rapid dect sulfurile lor. n general, cu ct se absoarbe mai repede un compus, cu att este
mai mare concentraia sa n snge. Preparatele farmaceutice pot fi formulate n aa fel nct, n
urma ingestiei orale, medicamentul s fie absorbit fie rapid fie extrem de lent. Factorii
biologici ce afecteaz n primul rnd concentraia n snge a unui toxic sunt legarea sa de
proteinele din esuturi i viteza sa de biotransformare. Viteza de biotransformare a unei
substane este controlat genetic i este adesea supus unor variaii individuale semnificative.
n cazul n care mai multe persoane primesc aceeai doz de drog sau medicament raportat la
greutatea corporal, concentraia acestuia n snge poate varia foarte mult de la o persoan la
alta din cauza diferenelor dintre vitezele lor de biotransformare a respectivelor substane. De
pild, Rasputin a fost otrvit cu cianur de potasiu, ns a rezistat dozei administrate n cafea.
Ucigaii si au recurs la mpucarea acestuia. Datorit sntaii sale excepionale au fost
necesare mai multe gloane pentru a-l rpune. In ceea ce privete cianura utilizat, unii
toxicologi consider c administrarea sa n cafea ar fi determinat o reacie a ionului cian cu
gruparea carbonil din molecula zahrului, cu formarea unei cianhidrine mai puin toxice.
Toxicii sunt eliminai din organism pe diferite ci. Gazele, cum ar fi monoxidul de
carbon, sunt eliminate prin plmni o dat cu aerul expirat. Altele, cum ar fi metalele toxice,
DDT i morfina, sunt eliminate n principal prin bil i, apoi, fecale. Cu toate c acestea sunt
cele mai importante ci de excreie, multe otrvuri sunt eliminate n toate secreiile
organismului (transpiraie, lapte i lacrimi). Calea principal de ndeprtare a celor mai muli
toxici este eliminarea prin urin. Viteza de eliminare a toxicilor prin urin afecteaz foarte
34
mult cantitatea prezent n snge sau esuturi la un moment dat. Cu toate acestea, excreia
urinar este foarte variabil i depinde de volumul i aciditatea urinei.
Teoretic, prin schimbarea aciditii urinii cu numai o unitate de pH, este posibil s se
produc o modificare de zece ori a vitezei de eliminare a medicamentelor slab acide sau
alcaline. Numai dup trecerea n revist a istoricului de caz, lund n considerare toi factorii
de toxicitate mai sus menionai, precum i distribuia i biotransformarea i compararea
rezultatelor analitice cu cazuri similare raportate n literatura de specialitate sau n cazuri
similare din propria sa experien, toxicologul poate trece la interpretarea final a unui caz.
36
drogurilor din esuturile organismului i fluidelor sale pentru determinarea cauzei de deces n
legtur cu medicul legist.
7.3 Serologia
Serologia medico-legal se ocup cu analiza, identificarea i individualizarea fluidelor i
esuturilor corporale, secreiilor i excreiilor. Sngele, sperma, saliva sunt tipurile cele mai
frecvent ntlnite de probe, dar ocazional probe cum ar fi transpiraia, urina, coninutul gastric,
i fecalele pot fi examinate n scop de caracterizare. Dovezi fizice de acest tip sunt, de obicei,
trimise la laborator n form de pete uscate pe haine sau alte materiale recuperate de la locul
faptei, de la victim sau suspect. Eantioanele de control formate din zone curate de pe
suprafaa din care au fost obinute petele suspecte trebuie s fie incluse n analize. Probele
standard cunoscute constnd din sngele victimei i/sau suspectului sunt, de asemenea,
utilizate n scopuri comparative.
37
Fluidele din organism, cum ar fi sngele, sperma, saliva, sub form lichid sau uscat sunt
adesea prezente pe esturi, haine sau alte obiecte. Aceste materiale biologice sunt frecvent
colectate pe crpe sau tampoane sterile de la locul crimei sau de la persoanele implicate
pentru identificri prin tehnici serologice sau profil ADN. Identificarea unor tipuri de snge la
locul unei crime violente i pe hainele victimelor i suspecilor permite lmurirea
evenimentului. Alte excreii ale corpului, cum ar fi urina, transpiraia i fecalele pot fi
identificate n diferite pete sau materiale.
Identificarea de snge sau material seminal pe uscat, materiale colorate i
individualizare ulterioare, precum i fa de persoanele cunoscute pentru includerea sau
excluderea sunt funciile majore ale serologist. Se procedeaz la identificarea sngelui cu un
test chimic ce utilizeaz anumite metale i peroxidaze de plante pentru a indica posibila
prezen de snge. Alte teste pentru snge includ fenolftaleina, care produce o culoare
luminoas de culoare roz, n prezena sngelui i verde leucomalachite, care produce o culoare
38
albastru-verde n prezena acestuia. Luminolul este un alt tip de test prezumtiv pentru snge,
care este frecvent utilizat la locul crimei pentru a localiza urmele de snge n zonele care au
fost splate sau de snge nu este altfel vizibil cu ochiul liber. n aceste cazuri, luminolul se
pulverizeaz pe suprafeele cu posibile urme de snge i se observ n ntuneric o
luminiscen chimic alb-albastruie care poate indica prezena sngelui.
Acest tip de luminescen poate fi fotografiat pentru a fi inclus ca dovad n actul de
justiie. Daca testul este negativ, se consider c sngele nu este prezent n eantion. Dac
testele sunt pozitive, se trece la confirmare i identificarea speciilor (origine uman i
animal). Acest lucru este realizat cu anticorpi specifici, care vor reaciona cu materialul
suspect. Proceduri serologice convenionale pentru individualizarea sngelui, precum i a
materialului seminal includ caracterizarea proteinelor polimorfe i a markerilor genetici.
Aceste proceduri sunt mai rar utilizate de cnd cu apariia tehnicilor ADN.
esuturile organismului pot fi prelevate pentru analize toxicologice din organele
recoltate la autopsie, mpreun cu snge, urin i coninutul stomacal.
Drogurile i substanele cu regim special sunt recoltate sau confiscate pentru
identificare i cntrire; acestea pot fi materii prime vegetale, pulberi, tablete, capsule sau alte
preparate.
Unele dintre capsulele i tabletele confiscate conin LSD (dietilamida acidului lisergic.
Materialele explozive i lichidele inflamabile, materialul solid sau resturile arse pentru
identificarea de accelerants i reziduuri explozive sunt de interes criminalistic general, mai
puin interesnd toxicologul. Acelai lucru se poate afirma despre armele de foc, proiectilele
sau gloanele gsite la locul unei crime, etc. Se pot colecta probe de sticl, acestea putnd fi
importante pentru nelegerea direciei unui glonte. Pentru toxicolog ns pot fi interesante
firele de pr colectate de la scena crimei, victim sau suspect pentru determinarea
identificarea speciilor (animale sau umane), ras, i partea corpului de origine. Dac este
uman, caracteristicile morfologice ale prul pot fi utilizate pentru a include sau exclude un
suspect. De asemenea, este posibil s se determine dac prul a fost zdrobit, tiat, ars, scos cu
fora sau czut n mod natural. In firul de pr pot fi identificate metalele grele, arsenul etc.
Dac numrul firelor este foarte mic, atunci determinrile toxicologice sunt mai dificil de
realizat.
39
9. Analiza de urme
Principalul instrument pentru analiza urmelor este microscopul. Un stereo microscop de
putere medie care mrete, de obicei, n intervalul 40-50 este utilizat pentru scanarea i
sortarea multe tipuri de dovezi fizice, cum ar fi hainele i pentru colectarea de urme materiale.
Microscopul cu mrire de pn la 1000 este utilizat pentru analiza i compararea firelor de
pr, fibreloe, solului, produselor cosmetice, particulelor de praf i de reziduuri, precum i o
gam larg de pulberi n suspensie. Un microscop cu lumin polarizat este utilizat pentru
observarea proprietilor optice i morfologia materialelor. Un microscop de comparaie este
utilizat pentru vizualizarea side-by-side a probelor, cel mai frecvent firele de pr i fibre.
Acesta reprezint de fapt dou microscoape conectate printr-o prism cunoscut ca punte de
comparaie. Acest lucru permite mprirea cmpului vizual al fiecrui microscop ntr-un
semicerc, astfel nct cele dou eantioane pot fi vizualizate simultan.
Analiza de urme a probelor poate permite identificarea vopselelor, sticlelor, uleiurilor
i o serie de compui organici folosind teste microchimice i instrumentale. Exemple de
instrumente utilizate n acest sens sunt GC-MS i tehnicile de analiz organic elementar,
inclusiv IR, difractie de raze X i fluorescen, spectrofotofluorometrie i microscopie
electronica de baleiaj (SEM). Microscopul electronic de baleiaj cu o rezoluie bun i mrire
de pn la 100.000 este, de asemenea, utilizat pentru examinarea probelor de particule din
mpucare, recuperate din minile persoanelor suspectate de folosire recent a unei arme sau
de a se fi aflat n imediata apropiere a descrcrii unei arme de foc.
England, 1986.
7. Curry, A. S. Poison Detection In Human Organs, 4th ed., Charles Thomas Publisher,
Springfield, IL, 1988.
8. Joynt, B. P., Mikhael, N. Z. Sudden death of a heroin body packer. J. Anal. Toxicol.,
9, 238-240, 1985.
41
42
cu eter acid sau cloroform. n lipsa indicaiilor asupra naturii toxicului se procedeaz la
extracii succesive att n mediul acid, ct i n mediul alcalin. Dac lichidul apos respectiv
este uor opalescent, din cauza impuritilor lipidice, acesta nu trebuie filtrat, pentru a nu se
antrena i o parte din toxicii fixai prin adsorbie pe microprecipitat.
Organe-25 g+ 50 ml alcool etilic 95 o + 0,25 g acid tartric
( pH=4-5)
Macerare pe B.M. la 70 o C 2-3 ore
Filtrare (prin tifon, apoi hrtie de filtru)
-srurile alcaloizilor
-toxici organici acizi si neutri
- impuritti: proteine, lipide, coloranti, rezine, etc.
Purificare
prin tratri succesive (3-4ori) cu alcool etilic 95 (50ml) -filtrare, evaporare. Ultima dat
se foloseste alcoolul etilic absolut.
Solutie apoas
Acid B
alcalinizare la pH 8-9 cu
bicarbonat de sodiu 10%
extractie cu eter
Solutie apoas
alcalin
extractie cu cloroform
Extracia eteric acid se realizeaz astfel: se aduce cantitativ lichidul apos acid ntro plnie de separare, se verifica dac pH-ul este acid i se adaug 30 ml eter de petrol. Se
44
repet extragerea de 3 ori. In acest fel se elimin restul de impuriti din produs. Extractul de
eter de petrol poate conine insecticide organoclorurate, acid salicilic sau glutetimid,. Se
evapor extractele neunite de eter de petrol pe cteva sticle de ceas i se identific aceste
substane. Lichidul apos acid rmas este extras n continuare cu eter etilic, iar operaia se
repet de 3 ori cu cte 20, 30 i 50 ml. La agitare pentru separarea straturilor trebuie s se
evite formarea emulsiilor. In cazul n care acestea s-au format, se sparg prin centrifugare,
filtrare pe sulfat de sodiu anhidru sau adugare de eter de petrol (sau alcool amilic).
Extractul eteric poate conine derivai barbiturici; glucozizi cardiotonici; lactone i
derivai; acizi organici; metilxantine, colchicin i veratrin, pesticide, etc. Extractele reunite
de eter etilic sunt evaporate pe sticle de ceas. Evaporarea se poate face sub aciunea unui
usctor de pr (n curent de aer cald), la o surs de raze infraroii sau pe o baie de ap. Dac
reziduurile nu sunt pure, se purific prin recristalizare din ap sau solveni adecvai sau prin
microsublimare. Pe aceste reziduuri se realizez reaciile preliminare i reaciile de
identificare a toxicilor respectivi.
Extracia eteric alcalin. Lichidul apos acid provenit de la extracia acid cu eter
etilic este adus la pH 8 cu bicarbonat de sodiu 10% sau cu amoniac 10% i extras de trei ori
cu eter etilic. Extractul eteric alcalin poate conine alcaloizii baz (cu excepia morfinei i a
unei pri din stricnin), alte substane organice, naturale sau de sintez. Eterul alcalin este
evaporat pe sticle de ceas. Dac reziduurile nu sunt pure, se dizolv n HCl 0,1 N i se extrag
cu eter, pentru a ndeprta impuritile. Soluia apoas rmas este alcalinizat cu bicarbonat
sodiu i extras din nou cu eter, urmat de evaporare pe sticle de ceas.
Extracia cloroformic alcalin. Lichidul apos alcalin rezidual poate conine
morfin, teobromin i teofilina i o parte din stricnin. Pentru a le separa din lichidul apos
alcalin, se face nc o extracie cu cloroform, dup care extractul se evapor pe sticle de ceas,
i se concentreaz.
Extracia prin echilibrare se bazeaz pe agitarea materialului biologic de analizat cu o
cantitate anumit de solvent, cnd se realizeaz un echilibru de repartiie a toxicului ntre
produsul de analizat i solvent. Din lichidul de extracie, ajuns la echilibru, se determin
toxicul.
Extracia exhaustiv se bazeaz pe epuizarea produsului de analizat cu solvent mereu
proaspt, operaia repetndu-se pn la extragerea complet. Se pot folosi urmtoarele
procedee: extracie cu solvent care recircul (n aparat Soxhlet) sau extracie cu solvent care
se rennoiete (n plnia de separare).
Exist i alte tehnici de izolare, cum ar fi metoda Florence: toxicii sunt dizolvai n
ap prin tratare cu acid tricloracetic 20% care precipit proteinele. Filtratul apos acid este
epuizat n continuare cu solveni organici n mediu acid i n final alcalinizat. Metoda este
rapid i uor de executat, dar are dezavantajul absorbiei pariale a toxicilor cutai pe
coagul, precum i a alterrii unor glicozizi i alcaloizi datorit aciditii ridicate. In metoda
proteolizei (Fabre), materialul biologic este supus degradrii enzimatice cu tripsin, cnd
proteinele sunt solubilizate. Lichidul obinut este n continuare extras cu solveni organici.
Produsul acidulat poate fi supus electrolizei (metoda electrodializei propus deDhrFabre). In acest fel sunt separai i ionii minerali, alturi de cei organici. Metoda este
45
3. Teste i determinri
3.1 Testul de culoare
Un test de culoare este o procedur chimic n care substana de testat reacioneaz cu un
reactiv care produce o schimbare acestuia, producnd astfel o culoare observabil sau
schimbarea culorii. Testele de culoare pot fi folosite pentru a determina prezena anumitor
compui sau a unei clase generale de compui. Procedurile sunt, de obicei, rapide i uor de
realizat. Cel mai folositor dintre testele de culoare n toxicologie este depistarea rapid a
probelor de urin, deoarece urina poate fi analizat n mod direct, fr proceduri de extracie
consumatoare de timp. Un exemplu de test de culoare este "testul lui Trinder " pentru
detectarea salicilailor n snge sau urin. Un reactiv de azotat de fier i clorur de mercur se
amestec cu 1 ml de snge sau urin; n cazul n care sunt prezeni salicilaii se observ o
culoare violet.
Ca i n toate celelalte teste toxicologice, prezena de salicilai trebuie s fie
confirmat i de o alt metod de analiz. Se observ un test Trinder pozitiv pentru acidul
salicilic (un metabolit al aspirinei), salicilamidei i salicilatului de metil. Un test fals-pozitiv,
care conduce la obinerea unei culori atunci cnd nu este prezent salicilatul, poate fi observat
la urina pacienilor cu diabet zaharat excreting acid acetoacetic i la pacienii tratai cu doze
mari de medicamente terapeutice fenotiazinice. toxicolog trebuie s fie contieni de limitrile
de el efectueaz teste i, n special sursele de reacii fals-pozitive.
46
lumin U.V. i/sau prin pulverizarea cu diferii reactivi, indicai pentru fiecare substan sau
grupe de substane.
Gaz-cromatografia este o metod aplicabil n special pentru separarea amestecurilor
i depistarea ulterioar prin detectarea conductibilitii termice, detectarea ionizrii (n
flacr, captur de electroni, ionizare de argon). Metoda are o mare sensibilitate i
specificitate, ns necesit o aparatur complex.
Reinerea unei componente de ctre faza staionar depinde de mai muli factori,
inclusiv natura chimic i fizic a fazelor fixe i mobile, precum i de condiiile
experimentale, cum ar fi temperatura sau presiunea. De aceea, substanele folosite drept
standarde de referin se cromatografiaz n aceleai condiii ca substanele necunoscute.
Aceti compui sunt identificai provizoriu prin compararea factorului lor de retenie n faz
staionar cu acela al standardelor de referin. n continuare, dup cromatografie, identitatea
compuii respectivi trebuie identificai i prin alte metode de analiz, cum ar fi spectrometria
de mas. Din multele tipuri de analize cromatografice, trei sunt mai frecvent aplicate de
toxicologi. Acestea sunt cromatografia n strat subire (TLC), cromatografie de gaz-lichid
(GLC) i cromatografia lichid de nalt performan (HPLC).
Standard
Spoturi
de amestec
Compus identificat
Linia de start
(cu creionul)
Spot de standard
Placa este apoi plasat ntr-un vas cromatografic nchis (de form paralelipipedic), n
care stratul absorbant de silicagel sau oxid de aluminiu de pe sticl intr n contact cu faza
mobil (soluia de developare) sub punctele de substane aplicate.
Pentru identificarea unei substane se folosete un standard, adic substana cutat, de
exemplu un drog (heroin, LSD, cocain) sau un medicament, care se spoteaz pe linia de
start (de exemplu n poziia 4 din figura de mai jos). Proba de analizat (de pild urin, extract
din firul de pr, etc) se spoteaz n celelalte poziii pe linia de start. Dup migrarea
solventului, care poate fi o soluie ce conine solveni diferii (ap: alcool butilic: acid acetic;
ap: aceton: amoniac, etc.) pe plac pn n apropierea marginii de sus a plcii de silicagel
depus pe aluminiu, se traseaz cu creionul, ca i n cazul liniei de start, locul unde a ajuns
solventul (frontul solventului, Fs). Se usuc placa la aer sau prin suflare cu aer cald de la un
usctor de pr, se developeaz substanele de pe plac cu un reactiv potrivit, se usuc din nou
pentru a obine pete stabile i se msoar factorul de retenie, Rf. Se pot vizualiza substanele
de pe plac prin iluminarea acesteia cu lumin ultraviolet, dac placa are adugat o
substan fluorescent. In acest caz se marcheaz substanele cu un creion. Rf este de regul o
caracteristic a unei substane ntr-un amestec de developare anumit. Totui, este bine s se
introduc i un standard. Rf se calculeaz astfel: se mparte distana parcurs de o anumit
substan de la linia de start la distana parcurs de frontul solventului de la linia de start.
De exemplu, n extractele de urin pentru depistarea drogurilor, toxicologul spray-iaz
cromatograma cu ninhidrin care produce o culoare roie sau roz cu amine primare, cum ar fi
amfetamin sau efedrin. Apoi, el poate aplica etanol n acid sulfuric, care produce o serie de
pete viu colorate n roz, portocaliu, albastru sau verzi dac sunt prezente tranchilizante
fenotiazinice i metabolii ai acestora. Placa poate fi n continuare pulverizat cu iodoplatinat,
care reacioneaz cu toate baze azotate.
Exist numeroi reactivi pentru TLC, dar toxicologul trebuie s fie ghidat de natura
chimic a compuilor pe care dorete s-i identifice. n cazul n care un compus din extract
migreaz la aceeai distan i reacioneaz la spray-urile aplicate n acelai mod ca drogul de
referin, toxicologul va ncerca identificarea compusului printr-un alt test chimic.
Au fost gsite urmtoarele valori pentru factorul de retenie, RF: Acid acetilsalicilic,
01; Nicotinamin, 04; Paracetamol, 05; Fenobarbital, 05; Morfin, 07; Barbital 11;
Acetilprocain, 18; Chinin, 20; Fenacetin, 22; Fenazon, 31; Codein, 33; Procain, 35;
Cafein, 38; 6MAM, 39; Stricnin, 44; Papaverin, 55; Heroin, 58; Acetilcodein, 61;
Aminofenazon, 64; Noscapin, 70; Lidocain, 71; Metacualon, 73; Cocain, 80, n system
toluendietilamin (85:15).
detector, care produce un semnal electric care este amplificat i afisat pe un nregistrator.
Migrarea unui compus prin coloan este exprimat prin timpul de retenie (Rt), care este definit
ca intervalul de timp scurs ntre injectarea probei i detectarea compusului. Timpul de retenie
ofer o ncercare de identificare a compusului, iar intensitatea semnalui la nregistrator poate
fi folosit pentru determinarea cantitativ a compusului prezent n prob. Un compus de
referin se cromatografiaz n aceleai condiii ca i compuii cutai, care produce un
semnal (vrf, peak) la acelai timp. nlimea semnalului i aria dsa sunt direct proporionale
cu concentraia drogurilor prezente Cromatografia de gaz este deosebit de adecvat pentru
analiza substanelor volatile, cum ar fi alcoolii.
4.1 Spectroscopia
Spectroscopia se refer la absorbia sau producerea de energie radiant. Absorbia radiaiei
este o caracteristic a tuturor moleculelor, cu toate acestea, dar lungimea de und a radiaiei
absorbite poate varia de la raze X prin ultraviolete, vizibile i infra-rou pn la frecvenele
microundelor i undelor radio. Interaciunea unui compus chimic cu radiaia depinde de
structura molecular i lungimea de und a radiaiei. Absorbia radiaiei de ctre un compus n
raport cu lungimea de und a radiaiei reprezint un spectru de absorbie i este o
caracteristic a compusului. Specificitatea spectrului este legat de regiunea de absorbie. De
exemplu, numeroi compui chimici au spectre n ultraviolet identice (200-350 nm), n timp
ce spectrul de infra-rou (2.8 25 m) este extrem de specific, fiind amprenta compusului
dat. De asemenea, exist o relaie direct ntre intensitatea absorbiei energiei radiante i
cantitatea de material absorbant prezent. Acest lucru se aplic la absorbia oricrei forme de
energie radiant, de la raze X la undele radio. Prin alegerea experimental lungimea de und a
absorbiei maxime, poate fi determinat concentraia unui compus dintr-un eantion.
n care :
p= factorul
de pant mediu;
53
5. Aplicaii
5.1 Cromatografia de gaz
Cromatografia de gaz (GC-FID) a putut fi de folos la determinarea of constituienilor i
metaboliilor heroinei. Neumann a derivatizat probele de heroin aduse de pe strad cu Nmetil-N-trimetilsililtrifluoroacetamid (MSTFA). Astfel s-au separate foarte bine compuii
din aceste probe. Neumann a prezentat date despre tendina de falsificare a heroinei (cu
cafein, paracetamol, procain, fenobarbital), nc din anii 1986-1992.
Kaa a artat c heroina i schimb profilul prin falsificare (n Danemarca, 19811992). La fel cum a artat Neumann n Germania. 6-AM idin drogurile ilicite poate proveni
nu numai din descopunerea heroinei dar i din acetilarea parial a morfinei. Probele care
conin numai 6-AM, fr urme de heroin, nu pot fi clasificate heroin. Din cele 649
impuriti detectate prin GC-MS, au fost selectate 18 ce pot fi aplicate la stabilirea
provenienei probelor de heroin. Profilul european al impuritilor din heroin a fost studiat
de Stromberg i colaboratorii, care au stability c se poate realize i un profil prin
cromatografia de gaz.
GC-MS i HP-TLC ws-au utilizat la determinarea heroinei, morphinei, 6-AM,
i acetilcodeinei. Pentru a identifica provenienele trebuie probe din mai multe regiuni ale
globului ca referin.. Pe de alt parte i analiza unor solveni folosii la fabricarea drogurilor
poate lmuri proveniena acestora.
Morfina
Codeina
Papaverina
Heroina
Exemple de cromatograme (LC-ESI-MS) pentru heroina din probele stradale (dup Adams).
55
10
9
13
8
12
2
11
7
1
Timp (min)
30 min
5.6 Metadona
Metadona se poate detecta prin imunoteste utilizate pe urin. S-au gsit anticorpi specifici fa
de metadon (Chikhi-Chorfi i colab.). Un procedeu ELISA poate fi folosit current n
determinarea acestei substane n urin sau saliv. Determinrile sunt concordante cu cele prin
GC-MS. In plasma uman dar i n alte fluide s-a determinat prin gazcromatografie sau prin
HPLC-DAD.
5.7 Ceto-opioidele
Opioidele de semisintez utilizate current ca analgezice i antitusive sunt prezente pe pia i
pot fi folosite ca droguri putnd da dependen (hidrocodona, hidromorfona, oxicodona sau
oximorfona). Aestea se determin prin metodele uzuale, cromatografice sau GC-MS.
Imunotestele sunt importante pentru depistarea drogurilor opioide. Popular este i
metoda TLC pentru materialele vegetale, urin i alte fluide ale corpului. Extracia se face cu
solveni potrivii, urmat de analiza drogurilor prin numeroase metode analitice.
57
58
Analiza n urin
acestei faze, alimentarea cu snge capilar n jurul folicul furnizeaz nutrieni i ofer, de
asemenea, orice materiale strine care ar putea fi n snge, cum ar fi droguri sau metale.
Aceste urme compui deveni ncorporat n firul de par i sunt transportate pe toata lungimea
ei ca parul creste. faza catagen este o tranziie ntre activ creterii economice i o faz de
odihn. rdcina firului de pr devine keratinizate, formnd un capt club, i ncepe s se
despart de bec sau papila foliculului de par. parul apoi se duce ntr-o faz de cretere nucunoscut sub numele de telogen. Acest lucru dureaz dou-trei luni nainte de cretere a
firului de par un nou ncepe s apar n papilei dermice. Aa cum se creste, parul vechi vor fi
forat s ias. ai multe descoperiri recente, totui, sugereaz c drogurile pot intra de pr de la
multe site-uri prin diferite mecanisme i momente diferite ale cresterii firului de par.
Henderson (1993) propune un model mai complex de ncorporare de droguri n pr:
Axul de pr
Plex papilar
Start
cornos
Epiderm
Canal
gland
sudoripar
Gland
apocrin
Glande
sebacee
Gland
sudoripar
Plex
cutanat
Folicul din pr
Papile dermale
Derm
60
61
62
fierul, manganul i zincul au fost determinate prin spectroscopie de emisie atomic n ficat,
rinichi, intestin, creier, muchi, oase, piele, snge i pr.
O relaie liniar ntre alimentaie i concentrarea n esuturi a fost observat pentru
arsenic i nichel n rinichi, cadmiu n ficat, i pentru plumb n oase. n alte esuturi a fost
observat o saturaie. n timp ce interaciunile cadmiu-fier au fost comune n cele mai multe
din esuturi, alte interaciuni au fost detectate doar n esuturile specifice, de exemplu: arseniccupru n rinichi, cadmiu-zinc n ficat, i mangan-arsenic, cadmiu-mangan sau cupru-nichel n
intestin. Creteri de plumb i cadmiu renale, intestinale i o scdere n os a plumbului de ctre
alimentarea cu arsenic, au fost interaciunile cele mai pronunate dintre metalele toxice.
Rezultatele au demonstrat c organele potenial int pentru evaluarea expunerii la
metale trebuie s fie atent analizate pentru a studia interaciunile metal-metal. Este posibil ca
interaciuni similare dintre elementele din diet i / sau produsele farmaceutice cu
medicamentele s influeneze absorbia i acumularea acestora din urm n prul unui individ.
O asemenea interaciune ar fi un factor suplimentar de luat n considerare n interpretarea
concentraii de droguri n pr.
Un obiectiv principal al acestei cercetri este de a asigura calitatea n testarea prului,
i, n acest scop, s-au dezvoltat testele de control al calitii inter-laboratoare (Kintz i
Cirimele, 1997; Sachs, 1997). Rezultatele acestor teste indic faptul c nc trebuie mult s fie
fcut pentru a mbunti fiabilitatea i coerena metodelor de testare i protocoalele. Poate c
n anii care vin este posibil s se adopte un mod mai puin abordare prudent i mai pozitiv la
utilizarea de pr ca un mijloc de analiz a drogurilor.
Bibliografie
Bost, R.O. (1993) Hair analysisperspectives and limits of a proposed forensic method of
proof: a review. Forens. Sci. Int., 63, 3142.
de-Wolff, F.A. (1985) Toxicological aspects of aluminum poisoning in clinical nephrology.
Clin.Nephrol., 24, S9-S14.
Eckert, .W. G. (1997) Introduction to forensic sciences, 2nd ed. CRC Press Boca Raton New
York London Tokyo.
Elsenhans, B., Schmolke, G., Kolb, K., Stokes, J., Forth, W. (1987) Metal-metal interactions
among dietary toxic and essential trace metals in the rat. Ecotoxicol. Environ.
Safety,14, 275287.
Grandjean, P. (1984) Lead poisoning: hair analysis shows the calendar of events. Human
Toxicol., 3, 223228.
Henderson, G.L. (1993) Mechanisms of drug incorporation into hair. Forens. Sci. Int., 63, 19
29.
Kintz, P., Cirimele, V. (1997) Interlaboratory comparison of quantitative determination of
amphetamine and related compounds in hair samples. Forens. Sci. Int., 84, 151156.
Nation, J.R., Bourgeois, A.E., Clark, D.E., Hare, M.F. (1983) The effects of chronic cobalt
exposure on behavioral metallothionein levels in the adult rat. Neurobehav. Toxicol.
Teratol., 5, 915.
Ptsch, L., Moeller, M.R. (1996) On pathways for small molecules into and out of human hair
fibers. J. Forens. Sci., 41, 121125.
63
64
65
Aceste simptome generale includ o combinaie de oboseal prelungit i confuzie mental sau
lips de concentrare.
Aadar doar oboseala sau problemele de concentrare mental nu sunt suficiente
pentru a suspecta otrvirea cu grele metale.
Unele dintre metalele grele toxice, cum ar fi plumb, mercur, aluminiu, sunt
suspectate n orice scdere notabil n abilitile motorii i echilibrului. Totui, dac corpul
devine mai greoi i dezechilibrat, i aceat stare dureaza un timp, poate fi exclus intoxicaia
cu metale grele.
Problemele de echilibru i/sau scderea abilitatilor motorii sunt mai rare dect
oboseala sau starea de confuzie mental i pot indica alte afeciuni medicale n afar de
intoxicaia cu metale grele. De aceea, trebuie depistate simptomele specifice de intoxicaie cu
metale grele.
Simptomele generale a intoxicaiei cu metalele grele. Otrvirea cu metale grele
poate pune viaa n pericol, deci este foarte important sa se fac teste medicale dac exist
simptome severe de toxicitate cu metale grele, cum ar fi afectarea capacitii de a merge,
grea sever sau alte simptome importante.
Trebuie gsite metalele prezente n corp i determinat concentraia lor pentru a
stabili cel mai bun curs de aciune pentru detoxifierea de metale grele din sistem.
Deoarece primele simptome de toxicitate cu metale grele pot fi, de asemenea,
simptome ale altor afeciuni, este vital s se fac teste adecvate, timpuriu, nainte ca
simptomele s se agraveze. Analiza prului poate arta exact substanele nocive i, apoi, poate
fi pus n aplicare detoxifierea adecvata de metale grele.
Multi oameni au devenit alertai de toxicitatea mercurului. Ins i argintul coloidal
este toxic, dei este un antiseptic i a fost folosit inca din antichitate pentru a inhiba bacteriile
din apa de but. n cazul n care otrvete germenii, va otrvi i omul. Fierul formeaz cei mai
distructivi radicali liberi i este astfel este foarte dunator pentru via.
Deoarece toate metalele sunt toxice, corpurile noastre necesit mecanisme speciale
de transport i manipulare pentru a le mpiedica s ne otrveasc. Acest lucru se aplic i la
mineralele eseniale, cum ar fi fierul, zincul i cromul sau neeseniale i metaloizi, cum ar fi
cadmiul i compuii cu arsen.
nii mercur, n credina c le crte masa muscular. Mercurul metalic, de asemenea, este
utilizat n medicina popular sau n ritualuri religioase n diferite culturi. Aceste practici cresc
riscul de otrvire cu mercur a copiilor din aceste grupuri etnice sau subculturi.
Cauze i simptome
Simptomele variaz, n funcie de natura i cantitatea de metale grele ingerate.
Pacienii se pot plnge de grea, vrsturi, diaree, dureri de stomac, dureri de cap, transpiraii
i un gust metalic n gur. n funcie de metal, pot fi linii albastre-negre n esuturile moi. n
cazurile severe, pacienii prezint afeciuni evidente cognitive, motorii i incompetene
lingvistice. Expresia nebun la cap vine de la otrvirea cu mercur rspndit n secolul al 17lea in Frana, printre confecionerii de plrii care mbibau pielea de animale ntr-o soluie de
azotat de mercur pentru a-i nmuia prul.
Diagnostic
Intoxicatia cu metale grele poate fi detectat utilizand teste de snge i urin, analize
de pr i esuturi, sau raze x. Diagnosticul este adesea trecute cu vederea, cu toate acestea,
deoarece multe dintre simptomele precoce de intoxicatii cu metale grele sunt nespecifice.
Medicul ar trebui s ia o istorie amnunit a pacientului cu ocuparetiaa pacientului.
n copilrie, nivelul de plumb din snge de peste 80 ug/dL indica, n general,
intoxicatie cu plumb, cu toate acestea, nivelurile semnificativ mai reduse (> 30 ug / dl) pot
provoca retardare mentala si alte probleme cognitive si comportamentale la copiii afectai.
Centrele pentru Controlul si Prevenirea Bolilor consider c un nivel de plumb din
sange de 10 ug / dl sau mai mare la copii este un motiv de ngrijorare. La aduli, simptomele
otrvirii cu plumb, de obicei, sunt observate atunci cand nivelul de plumb din snge depeste
80 ug / dl pentru un numr de sptmni.
Nivelul de mercur in sange nu trebuie s depeasc 3.6 ug / dL, in timp ce nivelul
din urina nu trebuie s depeasc 15 ug / dl. Simptomele de otrvire cu mercur pot fi vzute
atunci cnd nivelul de mercur depete 20 ug / dl n snge i de 60 ug / dL n urin. Nivelul
de mercur in par poate fi folosite pentru a masura gradul de severitate al expunerii cronice la
mercur.
Deoarece arsenul este rapid eliminat din snge, nivelul de arsen din snge nu poate fi
foarte util n diagnostic.
Arsenul n urin (msurat ntr-o colecie de 24 de ore urmat de 48 de ore fara a
manca fructe de mare) pot depi 50 ug / dl la persoanele cu otravirea cu arsen.
Daca se suspecteaza o intoxicaiei acut cu arsen sau taliu, o analiza de raze x poate
dezvlui aceste substane la nivelul abdomenului (deoarece ambele metale sunt opace la
razele X). Arsenul poate fi, de asemenea, detectate n pr i unghii de luni de zile ca urmare a
expunerii.
Toxicitatea cadmiului este n general, indicata atunci cand nivelul creatininei din
urin depete 10 ug / dl si nivelurile sanguine depesc 5 ug/dl.
Intoxicaia cu taliu cauzeaza adesea caderea parului (alopecie), amoreal, i o
senzaie de arsur la nivelul pielii, precum i grea, vrsturi i ameeli. 15-20 mg de taliu per
67
kilogram de greutate corporal este fatala la om, cu toate acestea, cantitati mici pot provoca
leziuni severe la nivelul sistemului nervos.
Tratament
Atunci cnd este suspectat intoxicatia cu metale grele, este important s se nceap
un tratament ct mai curnd posibil pentru a minimiza daunele pe termen lung a sistemului
nervos al pacientului si ale tractului digestiv. Intoxicatia cu metale grele este considerat o
urgen medical, iar pacientul ar trebui s fie luat ntr-o camer de spital de urgenta.
Tratamentul pentru cele mai multe intoxicatii cu metale grele este tratament chelator.
Un agent de chelare specific metalului n cauz este administrat fie oral, intramuscular, sau
intravenos. Cei mai frecventi trei ageni de chelare sunt edetat disodic de calciu, dimercaprol
(BAL), i penicilamin. Agentul de chelare nconjoar i se leag de metal in tesuturile
organismului, formnd un complex, acest complex este apoi eliberat din esut s cltoreasc
n fluxul sanguin.
Complexul este filtrat din sange prin rinichi i excretat n urin. Acest proces poate
fi de lung durat i dureros, i de obicei necesita spitalizare. Tratamentului de chelare este
eficace in tratarea intoxicaiilor cu plumb, mercur i arsen, dar nu este util n tratarea otrvirii
cu cadmiu. Pn n prezent, nici un tratament a fost dovedit eficient pentru otravirea cu
cadmiu. Otrvirea cu taliu este tratat cu o combinatie de albastru de Prusia (hexacianoferat de
potasiu feric) i un diuretic, deoarece aproximativ 35% din aceasta se excret n urin, cu
toate acestea, n cazul n care tratamentul nu este nceput n termen de 72 de ore de la otrvire,
leziunea sistemului nervos a pacientului poate fi permanent.
n cazurile ingestiei acute de mercur, arsen sau taliu, pot fi induse vrsturi.
Crbunele activat poate fi administrat n cazuri de intoxicaii cu taliu. Splarea stomacului
(lavaj gastric) poate fi, de asemenea, util. Pacientul poate solicita, de asemenea tratament,
cum ar fi lichide intravenoase pentru complicatii ale otravirii, precum oc, anemie, si
insuficienta renala.
Pacienii care au luat arsen, taliu, sau mercur ntr-o tentativ de sinucidere vor fi
vzuti de un psihiatru, ca parte a tratamentului de urgen.
Prognostic
Procesul de chelare poate ntrerupe doar efectele ce pot apare n continuare a
otrvirii, el nu poate inversa leziunile neurologice deja suferite.
Prevenirea
Deoarece arsenul i taliul au fost utilizate n mod obinuit n otrvuri pentru obolani
i insecte la un moment dat, multe ri au ncercat s reduc rata de intoxicaii accidentale prin
interzicerea utilizrii de metale grele n produsele de control a duntorilor. Taliul a fost
interzis n Statele Unite, ca otrav pentru roztoare n 1984. Ca rezultat, aproape toate cazurile
recente de otrvire cu arsen i taliului n Statele Unite ale Americii au fost n mod deliberat,
mai degrab dect accidental.
68
Deoarece expunerea la metale grele este de multe ori un risc profesional, i ar trebui
s fie furnizate i purtat la locul de munc mbrcminte de protecie si protectie respiratorie.
mbrcmintea de protecie ar trebui s fie apoi lasata la locul de munc i sa nu fie purtate
acas, n cazul n care ar putea transporta praf toxic pentru membrii familiei. Industriile sunt
ndemnate s reduc sau s o nlocuiasc metale grele n procesele lor ori de cte ori este
posibil. Expunerea la surse de plumb din mediu, inclusiv vopsele pe baz de plumb, programe
sanitare, de evacuare de vehicule, i a solului contaminat, ar trebui s fie reduse sau eliminate.
Din cauza impactului lor la un astfel de nivel fundamental, metalele grele pot fi
factori de cauzalitate n orice problem de sntate. n cazul n care locul de munc sau a unor
circumstane de via v expunei la metale grele, v-ar face bine sa reduceti sau sa eliminati
expunerea ct mai mult posibil. Fii contieni de faptul c exist multe modaliti ca aceste
toxine sa poata fi absorbite n corpul dumneavoastr - prin produse alimentare i buturi,
expunerea pielii, sau prin aerul pe care il respirati. Deci, ori de cte ori este posibil, purtai
mnui, utilizeazati aparate de protecie pentru respiraie, i asigurai-v c obineti o
ventilatie de aer proaspt.
ulcer peptic, psihoz, reducerea activitatii intestinale, senilitate, probleme ale pielii, dureri de
splin, dureri de stomac i dureri musculare slabe.
72
73
Chelatarea
Chelatorii de tipul DMPS, DMSA, KELMER i EDTA pot lega metalele grele toxice. n
cazul n care situaia este grav, de exemplu, suprancrcarea cu plumb sau cupru, se
administreaz i.v. acid etildietilamino-tetraacetic (EDTA), ntr-o serie de infuzii la 3 ore
interval.
Din pcate, acest tratament este inadecvat pentru toxicitatea dat de mercur. Exist
trei strategii eficiente pentru mercur, fiecare cu argumente pro i contra: 6 - 10 perfuzii i.v. din
DMPS, 3 mgms pe kg de greutate corporal. Acestea necesit experien calificat, dar fcut
n mod corespunztor i la doza corect, nu au practic nici un efect secundar. Riscul teoretic
este faptul c DMPS traverseaz bariera hemato-encefalic i poate duce mercur n esuturi
neurologice, n cazul cel mai nedorit. Efectele secundare pot fi neplcute i acest lucru pare a
fi metoda cea mai puin recomandabil.
DMSA oral, 30 mg per kg greutate corporal. Durata depinde de rspuns, dar n
aproximativ de 6 - 10 sptmni. Efectele secundare pot fi neplcute, dar pot fi ameliorate
prin reducerea dozei. n general, copiii tolereaz mult mai bine decat adultii DMSA.
Exist controverse c dac EDTA elimin mercurul. Pentru tot felul de motive
tiinifice, care au de a face cu valena i ncrctura electric, acesta nu ar trebui s
funcioneze bine. Dar Dr. Gary Gordon cere: prin urin recent i testarea esuturilor, n care
se poate observa c fost excretat dup regimul de chelare oral (care include, desigur, mult
mai mult dect simpla EDTA). Terapia auto-administrat nu este recomandat. Dar Chlorella
este un atractor mare de metale grele, este sigur i din belug, mai puin usturoiul i
coriandru.
O dat ce sursa de contaminare este eliminat, dac corpul are o bun capacitate de
de-toxifiere, metale grele vor disprea treptat i lent din esuturi, printr-un proces numit
leiere sau, mai exact, de epurare.
Crima prin otrvire cu metale grele
S-au raportat numeroase cazuri de sinucidere prin nghiire de mercur de la
termometre. Dureri atroce durau i o sptmn, iar prognosticul era nefavorabil. De
asemenea, au fost semnalate crime comise cu ajutorul clorurii mercurice. Toxicitatea
mercurului de la vaccinri care conin thimerosal:
Thimerosal, structura
Aceasta este una dintre problemele de actualitate privind toxicitatea mercurului. Este
problema care ctig teren n mod constant n opinia public n legtur cu autismul i
vaccinrile. Un fapt puin cunoscut nainte de campaniile de sensibilizare a opiniei publice:
vaccinuri conin mercur drept conservant (timerosal). n 1999, la Centrul pentru Controlul si
Prevenirea Bolilor (CDC) s-a solicitat eliminarea mercurului din vaccinuri. Paradoxal, CDC
continu s recomande n pojar, oreion i rubeol.
74
75
Concentraia plumbului n apa mrilor este mai mic dect n apele dulci fiind ntre
0,003-0,4g/L. Plumbul se gsete sub diferite forme n apa marin i apa dulce, iar majoritatea
plumbului gsit n peti este legat de proteine.
Limita admis n prezent este de 50 g/L ap i va fi progresiv redus la 10 g/L.
Alimentele pot fi contaminate cu plumb i n timpul produciei, procesrii i ambalrii.
n timpul produciei, n afar de aportul de plumb din mediul poluat (sol, ap, aer), mai
ales n zonele industrializate i cu circulaie intens a autovehiculelor, acest metal mai poate
ajunge n produsele vegetale prin aplicarea de pesticide pe baz de plumb, cum este arseniatul de
plumb.
Toxicitatea plumbului. Toxicitatea plumbului depinde de numeroi factori, cum ar fi
vrsta, nutriia, starea fiziologic, doza, mrimea particulelor, forma sub care se gsete
(organic sau anorganic), calea de ptrundere.
Majoritatea animalelor de ferm tolereaz aproximativ 30 mg Pb/kg hran, cu excepia
oilor, care se pare c tolereaz doar 10 mg Pb /kg hran.
Plumbul anorganic poate ptrunde n organism pe cale oral, respiratorie sau dermic.
Studiile pe animale au artat c plumbul este bine absorbit pe cale transdermic.
Rata i proporia absorbiei gastrointestinale a plumbului ingerat sunt influenate de
starea fiziologic a individului expus i caracterele fizico-chimice ale plumbului ingerat.
Absorbia poate fi influenat i de cantitatea de plumb ingerat.
Aportul calciului prin raie pare s influeneze i el absorbia plumbului. A fost
observat o corelaie invers ntre aportul de calciu i concentraia plumbului n snge la copii,
dar i la aduli. n studiile experimentale pe obolani s-a demonstrat depleia crescut a calciului
din raie n caren de vitamina D.
Perioada de njumtire a plumbului n snge este de aproximativ 30 de zile. Plumbul
se gsete aproape n exclusivitate n hematii (99%). Cea mai mare parte a plumbului
din hematii este legat de proteinele din celul i mai puin de membrana eritrocitar.
Aproximativ 40-75% din plumbul din plasm este legat de proteinele plasmatice, dintre care
albuminele par s fie principalii liganzi. Plumbul se mai poate lega i de globuline. Plumbul din
ser care nu este legat de proteine se gsete mai ales sub form de compleci cu compui
sulfhidril cu greutate molecular mic i cu ali liganzi.
La aduli, aproximativ 94% din plumb se gsete n oase. La copii acest procent este de
doar 73%. Concentraia plumbului din oase crete cu vrsta, ceea ce indic un turnover relativ
lent al plumbului n osul adult. Acest depozit mare de plumb n osul adult poate surveni pentru
meninerea nivelului sangvin de plumb mult timp dup ce expunerea a ncetat.
Plumbul nu este distribuit uniform n oase, ci se acumuleaz n acele regiuni ale osului,
n care procesul de calcifiere este mai activ la momentul expunerii. La copii, plumbul este
depozitat pe osul la trabecular, iar la aduli, att n osul trabecular, ct i cel cortical. Dei la
maturitate majoritatea plumbului din organism este depozitat n oase i dini, plumbul din
regiunile corticale ale oaselor este parial labil i este eliberat n fluxul sanguin i esuturile moi
prin difuzie i resorbie. Gestaia, alptarea, osteoporoz postmenopauzal determin creterea
nivelelor sanguine ale plumbului, ca rezultat al mobilizrii acestuia din depozitele osoase.
76
acid aminolevulinic
Protofibilinogen
77
anume colica de plumb. Aceasta este caracterizat de combinaia urmtoarelor simptome: dureri
abdominale, constipaie, crampe, vom, grea, anorexie i scderi n greutate.
Expunerea la plumb determin anemie microcitar i hipocrom i uoar anemie
hemolitic. Aceasta este determinat att de inhibarea sintezei hemului, ct i de scurtarea
duratei de via a eritrocitelor. Plumbul interfer cu sinteza hemului prin alterarea activitii
dehidrazei acidului delta-aminolevulinic (ALAD) i a ferochelatazei. Ca o consecin a acestor
modificri, biosinteza hemului este sczut i activitatea enzimei corespunztoare, deltaaminolevulin sintetaza (ALAS), care este inhibat prin feedback de ctre hem, este ulterior
crescut.
Rezultatele finale ale acestor modificri n activitatea enzimelor sunt creterea
porfirinelor urinare, coproporfirinelor i a acidului delta-aminolevulinic, creterea nivelului
sanguin i plasmatic al ALA i creterea protoporfirinelor eritrocitare.
Modificrile hematologice asociate plumbului sunt considerate reversibile.
Efectul plumbului asupra sistemului nervos. Avnd n vedere posibila expunere nc
din stadiul prenatal prin placent i apoi prin lapte sau apa utilizat pentru refacerea laptelui
praf, simptomele neurotoxice pot fi observate nc de la vrste mici. Deoarece plumbul
afecteaz procesele de dezvoltare nervoas ntreruperea acestor procese poate conduce la
alterri permanente ale funciei cerbrale.
Una dintre cauzele majore ale efectelor neurotoxice ale plumbului este faptul c este n
competiie cu calciul sau mimeaz aciunea acestuia. La concentraii picomolare, plumbul este n
competiie cu calciul pentru situsurile de legare din cerebel ale fosfochinazei C. Acest proces
afecteaz intrarea n celule a calciului i funcionarea neuronilor, alternd structura
mitocondrial, ceea ce duce la inhibarea respiraiei celulare, alterarea reaciilor bazate pe calciu
i transmiterea influxului nervos. Aceasta conduce la creterea eliberrii spontane a
neurotransmitorilor i inhibarea eliberrii controlate stimulate a acestora. Acest tip de toxicitate
afecteaz n principal sistemul nervos n dezvoltare a fetusului, cruia i lipsesc proteinele care
leag plumbul din astrogliile mature, care, n mod normal, chelateaz i elimin plumbul.
Plumbul este toxic pentru astrocitele imature i interfereaz cu formarea mielinei, ambele
procese fiind implicate n formarea barierei hematoencefalice. Cnd aceast barier este lezat,
n SNC ptrund proteine moleculare ca albuminele, determinnd edem, presiune intracranial
crescut i encefalopatie.
Simptomele timpurii ale neurotoxicitii plumbului, att la copii, ct i la aduli, includ
iritabilitatea, durerea de cap, perioad de atenie sczut, pierderea memoriei i atenuarea strii
cognitive. Pe msur ce expunerea continu, se constat simptome de impulsivitate, inabilitate de
a urma anumite direcii, dorin de joac sczut, IQ sczut i atenie sczut, dizabiliti de
citire i putere de concentrare la examene sczut. Astfel de simptome au fost constatate la
nivele sangvine ale plumbului ntre 10 35 g/dl.
Cel mai grav efect la aduli este encefalopatia, care prezint ca simptome iniiale
slbiciunea, iritabilitatea, perioad de atenie redus, durerile de cap, tremurul muscular,
pierderea memoriei i halucinaii. Aceste stri se pot nruti, ajungndu-se la delir, convulsii,
paralizie, com i moarte. Astfel de simptome pot fi ntlnite la concentraii ale plumbului
cuprinse ntre 50 300 g/dl.
78
prin raie la concentraii de arsenat ntre 32-160 mg/kg raie includ niveluri crescute ale
metalotioneinelor hepatice, alterri histopatologice ale ficatului i vezicii urinare i rat redus
de cretere. Dimpotriv nu a fost observat nici un efect toxic la petii expui la concentraii de
10 ori mai mari de arsen organic.
Toxicocinetica. Aportul oral zilnic de arsen anorganic a fost estimat ntre 1-20 g iar
de arsen sub toate formele de 40 g. Dintre alimente carnea, petele, fructele de mare, orezul
i ciupercile conin concentraiile cele mai mari de arsen. Petele, fructele de mare i algele
conin arsen sub form de arsenobetain i arsenocolin, produse adesea menionate ca pete
arsenic. Acest arsen prezint toxicitate redus pentru om i este rapid excretat prin urin.
Vinul fcut din struguri stropii cu pesticide pe baz de arsen poate conine cantiti
apreciabile de arsen.
Compuii arsenului ce ptrund n corp pe cale oral sunt absorbii la nivelul tractului
gastrointestinal. Absorbia depinde de forma fizic a compusului, solubilitate, pH-ul gastric,
motilitatea gastrointestinal i biotransformrile microbiene din intestin. Absorbia formelor
solubile la om variaz ntre 60-90%.
Forma arsenului care predomin n aer este cea de trioxid de arsen i n funcie de
mrimea particulelor absorbia va avea loc fie pn n tractul respirator inferior fie pn n cile
respiratorii superioare unde vor rmne particulele pn vor fi nghiite de clearance-ul
mucociliar.
Dup absorbia din plmni sau tractul gastrointestinal, arsenul se acumuleaz iniial n
ficat, splin, rinichi, plmni i tractul gastrointestinal. Dup 2-4 sptmni dup ce expunerea
nceteaz majoritatea arsenului rmas n organism este regsit n esuturile bogate n cheratin ca
prul, pielea i unghiile. La om a fost semnalat i transferul placentar.
Metabolizarea. In vivo au loc reacii de oxido-reducere rezultnd interconversia
arsenului pentavalent i trivalent, ngreunnd distincia dintre aceste dou categorii de
compui arsenici anorganici. O parte din arsenul trivalent este metilat, mai ales n ficat, la
acid metilarsenic i acid dimetilarsenic. Acest proces reprezint principalul mecanism de
detoxifiere al organismului deoarece produii care rezult sunt mai uor de excretat i mai
puin toxici. La doze mari de arsen ns eficiena acestui proces scade deoarece se ajunge la
depirea capacitii de metilare a ficatului iar arsenul ajunge s fie reinut de ctre esuturile
moi. Acest lucru poate fi mbuntit i anume prin tratarea cu cantiti mici de arsen pe o
perioad lung de timp se mrete eficiena metilrii la aplicarea subsecvent a unei cantiti
mari de arsen. Aceasta a fost studiat pe culturi celulare i arat c procesul de metilare este
unul inductibil. Arsenul din petele arsenic nu este metabolizat in vivo, ci este rapid
excretat nemodificat prin urin.
Eliminarea. Studiile arat c 6 pn la 9 procente din As administrat oral este
eliminat prin fecale, indicnd absorbia aproape complet din tractul gastrointestinal. Excreia
arsenului absorbit este n principal prin urin. Viaa biologic a arsenului anorganic ingerat
este de aproape 10 ore i 50 pn la 80 procente excretat n aproape 3 zile. Acesta are o
predilecie pentru piele i este excretat prin descuamarea pielii i prin transpiraie n special n
perioadele de transpiraie abundent. Se concentreaz de asemenea n unghii i pr. Arsenul n
unghii produce linii Mee (benzi albe transversale pe unghii) aprnd aproape dup 6
81
sptmni dup apariia simptomelor toxicitii. Timpul expunerii poate fi estimat prin
msurarea distanei de la linie pn la baza unghiei i rata creterii unghiei care este de
aproape 0,3 cm pe lun sau 0,1 mm pe zi.
Transferul placentar a fost artat la hamsterii injectai intravenos cu doze mari de
arsenat de sodiu i studiile nivelelor de arsen din esut la fetui i nou nscui din Japonia arat c
totalul cantitii de arsen din ft tinde s creasc n timpul gestaiei indicnd transfer placentar.
Toxicitatea arsenului prezint dou mecanisme prin care afecteaz respiraia celular.
Astfel ntr-un prim mecanism arsenul se leag la gruprile sulfhidril blocnd enzimele
sulfhidrice. Ca rezultat, sunt inhibate cile oxidrii piruvat i succinat i ciclul acidului
tricarboxilic, mpiedicnd gluconeogeneza i reducnd fosforilarea oxidativ. De acest efect este
rspunztor arsenul trivalent.
Cel de-al doilea mecanism implic substituirea arsenului pentavalent cu fosforul n
multe reacii biochimice. nlocuirea anionului stabil de fosfor n fosfat cu anionul arsen
pentavalent mai puin stabil duce la hidroliza rapid a legturilor bogate n energie n compui ca
ATP. Aceasta duce la pierderea legturilor nalt energetice fosfat, decuplnd fosforilarea
oxidativ.
Arsenul gazos, spre deosebire de celelalte forme, produce un sindrom hemolitic. Dup
inhalare, arsenul se fixeaz pe hematii producnd leziuni celulare-membranare ireversibile. n
doze mici, arsenul este un hemolitic puternic, determinnd hemoliz intravascular dependent
de doz. n doze mari, arsenul produce citotoxicitate direct multipl.
Dup ingerare i absorbie, arsenul produce rni celulelor din sistemul nervos, vaselor
de snge, ficatului, rinichilor i altor esuturi.
Efecte celulare. Este cunoscut de civa ani faptul c arsenul sub forma compuilor
trivaleni reprezint principala form toxic i compuii pentavaleni au un efect foarte mic
asupra activitii enzimelor. La expunerea la arsen s-a descoperit c sunt alterate un numr de
proteine coninnd grupaea sulfhidril i un numr de sisteme enzimatice. Unele dintre acestea
pot fi refcute prin adugare de monotioli cum ar fi glutationul; enzimele care conin dou
gripri tiolice pot fi refcute cu ajutorul ditiolilor cum ar fi 2,3-dimercaptopropanol dar nu i
monotioli.
Arsenul afecteaz enzimele mitocondriale i mpiedic respiraia esuturilor care pare s
fie legat de toxicitatea celular a arsenului. Mitocondria acumuleaz arsen i respiraia mediat
de NAD este n mod special sensibil la arsen. Mitchell a propus c arsenul inhib funciile
legate de energie ale mitocondriei n dou moduri: competiia cu fosfat n timpul fosforilrii
oxidative i inhibiia reducerii energetice a NAD.
La nivelul tractului gastrointestinal, leziunile produse de arsen determin creterea
permeabilitii capilarelor, ducnd la pierderea de fluid i hipotensiune. Inflamarea i necroza
progresiv a mucoasei i submucoasei stomacului i intestinuli pot duce la perforarea peretelui
intestinal i cu manifestri de gastroenterit hemoragic.
Efecte renale i hepatice. Intoxicaia cu arsen poate duce, de asemenea i la toxicitate
hepatic, incluznd hepatit toxic i niveluri ridicate ale enzimelor hepatice. Din necropsiile
copiilor japonezi intoxicai cu lapte contaminat cu arsen au fost relevate necroze hepatice
82
care apar sunt dureri de cap, stare de disconfort, somnolen i confuzie. Simptomele pot
progresa i includ slbiciunea muscular i spasme, hipotermia, letargia, delirul, coma i
convulsiile.
Afeciunile renale se manifest sub form de proteinurie, hematurie, glucozurie, cilindri
urinari i, n intoxicaiile severe, necroze tubulare.
Manifestrile cardiovasculare includ ocul, cianoza i aritmiile cardiace, datorate
aciunii toxice directe i tulburrilor electrolitice. Afeciunile hepatice pot fi manifestate prin
niveluri enzimatice ridicate i icter, iar afectarea esuturilor hemato-formatoare poate determina
anemie, leococitopenie i trombocitopenie.
Moartea survine, de obicei, dup 1-3 zile de la debutul simptomelor, adesea ca rezultat
al insuficienei circulatorii i renale. Pacienii care supravieuiesc prezint parestezii dureroase,
furnicturi i amoreli n mini i picioare, slbiciune muscular i spasme.
Hiperpigmentarea i hipercheratoza sunt semne tipice ale intoxicaiei cu arsen. Alte
semne ale intoxicaiei cronice cu arsen cuprind edeme subcutanate ale feei, pleoapelor i
gleznelor, stomatite, striaii albe pe unghii i uneori cderea unghiilor sau prului. Uneori
papulele hipercheratozice sufer transformri maligne. La fel de frecvente sunt ns i
simptomele neurologice. Printre ele se afl i neuropatia periferic ce se manifest prin
parestezie, durere, anestezie, pareze i ataxie. Pot debuta adesea cu simptome senzitive n
extremitile inferioare i progresa la slbiciune muscular i, eventual, paralizii i atrofie
muscular. Se poate produce i encefalopatia, nu att de comun ns, manifestat prin tulburri
de vedere i tulburri mentale, foarte asemntoare cu cele ntlnite n deficiena de tiamin.
Tiamina
Efecte cele mai tardive ale aportului cronic de arsen sunt cancerul de piele, de pulmoni
i de vezic urinar.
Expertiza produselor alimentare i msuri pentru protecia consumatorului
n cazul sacrificrilor de necesitate ale animalelor intoxicate cu arsen se confisc
organele, tubul digestiv, capul i mamela, indiferent dac sunt sau nu corespunztoare
organoleptic. Carnea va fi supus examenului toxicologic de laborator, iar cea care depete
limitele maxime admise i prezint modificri organoleptice se confisc. Animalele de talie mic
intoxicate cu arsen se vor exclude de la consum.
La animalele mari nu se permite consumul ndelungat deoarece exist riscul acumulrii
lente de arsen i declanarea intoxicaiilor la om.
Laptele provenit de la vacile intoxicate, cu evoluie subacut sau cronic trebuie retras
din consum uman cel puin 20 de zile, deoarece laptele este o cale de eliminare important pentru
arsen. Atunci cnd conine doar urme neglijabile de arsen, laptele se dirijeaz spre fabricarea
84
untului. Oule se vor supune de asemenea analizelor de laborator, excluzndu-se din consum
cele care depesc limitele maxime admise.
Mercurul
Niciun alt metal nu ilustreaz mai bine diversitatea efectelor cauzate de diferitele forme
biochimice. La baza caracteristicilor toxicologice sunt 3 forme ale mercurului: elemental,
anorganic i organic. Sursa major de mercur provine din degazarea natural a crustei
pmntului. Mercurul metalic din atmosfer reprezint principala cale din transportul global
al mercurului.
Toxicocinetica. Toxicitatea diverselor forme sau sruri ale mercurului este dat de
mercurul cationic pe cnd solubilitatea, biotranformarea i distribuia n esuturi sunt
influenate de starea de valen i de componenta anionic. Mercurul metalic sau elemental
volatilizeaz la temperaturi ambientale i majoritatea expunerilor de la oameni se fac prin
inhalare. Vaporii de mercur difuzeaz de-a lungul membranei alveolare i este liposolubil
nct are o afinitate pentru celulele roii i pentru sistemul nervos central. Mercurul metalic
poate fi inghiit dintr-un termometru spart i este absorbit foarte lent de tractul gastrointestinal
i este deseori considerat a nu avea vreo consecin toxic.
Srurile de mercur anorganic pot fi divalente (mercurice) i monovalente (mercuroase).
Absorbia gastrointestinal a srurilor de mercur anorganic din hran reprezint mai puin de
15% la oareci i aproximativ 7% ntr-un studiu la oameni voluntari pe cnd absorbia
metilmercurului este de ordinul a 90-95%. Distribuia ntre celulele roii i plasm difer de
asemenea.
Rinichii conin cea mai mare concentraie de mercur ca urmare a expunerii la srurile
anorganice ale mercurului i mercur vapori, pe cnd mercurul organic are o afinitate deosebit
pentru creier, n special pentru cortexul posterior. Cu toate acestea mercurul sub form de vapori
are o mai mare predilecie pentru sistemul nervos central dect are mercurul anorganic dar mai
mic dect mercurul organic.
Excreia mercurului din organism se face prin intermediul urinei sau fecalelor, n funcie
de specia de mercur, doz i timpul de expunere. Expunerea la vapori de mercur este urmat de
eliminarea unei pri mici prin expiraie, dar excreia reprezint partea major i este
predominant iniial dup expunerea la mercur anorganic. Excreia renal crete cu timpul.
Aproximativ 90% din metilmercur este excretat dup expunerea acut sau cronic i nu se
modific cu timpul.
Toate formele mercurului traverseaz placenta ajungnd la ft. Preluarea mercurului de
ctre ft la obolani probabil datorit liposolubilitii este de 10-40 de ori mai mare dect
absorbia sa dup expunerea la srurile anorganice. Concentraia mercurului n fetus, dup
expunerea la compuii alchil mercurici este de 2 ori mai mare fa de cea gsit n esutul
matern, iar nivelul de metilmercurului n celulele roii fetale este cu 30% mai mare dect n
celulele roii materne. Gradientul fetal-matern pozitiv i concentraia crescut a mercurului n
celulele roii ale ftului mresc toxicitatea fetal la mercur n special dup expunereala alchil
mercur. Cu toate c laptele matern poate conine doar 5% din concentraia mercurului a sngelui
matern expunerea neonatal la mercur poate fi mrit prin alptare.
85
sistemul nervos constnd n ataxie, dizartrie i surzenie aprnd n aceast ordine. Principalele
trsturi patologice ale toxicitii mercurului metilic includ degenerarea i necroza neuronilor n
arii focale ale cortexului cerebral, n special n ariile vizuale ale cortexului occipital i n stratul
granular al cerebelului. Studiile experimentale ale mercurului organic i a celui anorganic arat
degenerarea a celulelor ganglionare primare senzoriale. Distribuia particular a leziunilor n
sistemul nervos central se crede a reflecta tendina mercurului de a deteriora celulele nervoase
mici din cerebel i cortexul vizual.
Alchil mercurul
Standardul pentru expunerea la mercurul alchilic la locul de munc este de 0,01 mg/m3.
Nivelele de mercur din pr pot fi corelate cu severitatea simptomelor clinice. Cazurile uoare
presupun amoreala extremitilor, tremurturi uoare i o uoar ataxie. Cazurile moderate
prezint dificulti de auz, paralizie parial i cazurile severe o combinaie de paralizie total,
pierderea vederii, pierderea auzului, pierderea vorbirii i com. Persoanele fr niciun simptom
pot avea nivelele de mercur din pr pn la 300 mg/kg, cele afectate moderat pot avea ntre 120
i 600 mg/kg iar cele sever afectate au ntre 400 i 1600 mg/kg.
Nu este neles n totalitate de ce expunerea la mercurul metilic are efecte att de
selective asupra cerebelului i cortexului vizual. Concentraia de mercur din aceste zone ale
creierului nu este foarte diferit de aceea din celelalte zone ale creierului care nu sunt afectate de
mercurul metilic. Mercurul metilic inhib sinteza proteinelor nainte de instalarea semnelor
otrvirii i s-a artat c refacerea sintezei proteinelor nu are loc n celulele granulare ca n
celelalte celule nervoase.
Expertiza produselor alimentare
n produsele i subprodusele de origine animal provenite de la animale intoxicate sau
tratate cu compui ai mercurului, reziduurile presist mult timp, astfel c sacrificarea animalelor
se recomand s se realizeze dup 9-10 luni de la remisie sau dup ncetarea aplicrii
tratamentului. n cazul intoxicaiilor, pericol pot prezenta i laptele i oule, acestea fiind ci de
eliminare pentru mercur.
Deoarece metil mercurul din pete i produse din pete reprezint pn la 85% din
aportul total de mercur prin raie, pentru a asigura protecia consumatorilor au fost stabilite
nivele maxime admise pentru mercur n pete. Limita maxim admis pentru mercur n petii
nerpitori este de 0,5 mg/kg, n timp ce petii rpitori pot conine pn la 1 mg/kg. Limita fixat
de Comisia European pentru Furaje este de 0,1 mg/kg pentru toate animalele, cu excepia
animalelor de companie, n raia crora se tolereaz pn la 0,4 mg/kg.
Pentru apa de but, limita maxim este de 1 g/l.
Pentru muncitorii expui profesional, OSHA (Occupational Safety and Health
Administration) a mpus o limit de 1,2 ppb mercur organic n aerul din ncpere (echivalent cu
0,01 mg/m3) i 6,1 ppb (0,05 mg/m3) pentru mercurul anorganic pentru a proteja muncitorul pe
durata a 8 ore de munc,
Deoarece metilmercurul se gsete mai ales n esutul muscular al petelui legat de
proteine, ndeprtarea pielii i a grsimii nu reduce semnificativ concentraia mercurului din
muchi. Gtitul, de asemenea, nu ndeprteaz mercurul din muchi ci, dimpotriv, deoarece
88
umiditatea scade dup gtit, concentraia mercurului ajunge s fie chiar mai mare dect n petele
proaspt.
Pentru a reduce contaminarea mediului, n special a ecosistemelor acvatice, apele
reziduale care se tie c pot conine mercur se supun unor tratamente speciale pentru a-l
ndeprta. Se utilizeaz materiale absorbante cum sunt crbunele din lemn, crbunele activat de
cocos, chitosam, zgur granulat de la oelrii pentru a ndeprta mercurul ionic i unele
bioreactoare, care sunt eficiente n proporie de 97%. Pentru a scdea toxicitatea apelor
reziduale, n special de la fabricile de sod, au fost utilizate i bacterii rezistente la mercur.
Algele albastre-verzi acumuleaz cantiti substaniale de mercur din mediu, n timp ce tulpinile
rezistente de bacterii volatilizeaz peste 90% din mercur organic i anorganic. Tulpinile de
Streptomyces termofile pot stimula reducerea concentraiei mercurului anorganic din ap.
Nichelul
Nichelul este un metal de culoare alb-argintie, ductil i rezistent la coroziune. A fost descoperit
n 1751 n Suedia de Axel Fredik Cronstedt. Este folosit ca aliaj n oelul inoxidabil i n
monede. Este de asemenea folosit i pentru placarea metalic a bateriilor, dar i pe post de
catalizator n procesele chimice.
Nichelul poate fi gsit n aproape toate alimentele. Cele mai mici concentraii se gsesc
de obicei n produsele animale i lapte. Cerealele i fructele conin concentraii intermediare din
acest metal iar cele mai mari nivele se gsesc de exemplu n cacao. Majoritatea coninutului de
nichel din diet provine probabil din contaminarea din timpul procesrii i preparrii.
nclzitoarele electrice pentru ap pot constitui o surs considerabil de nichel n diet. Studii din
Danemarca i Suedia au artat c nclzitoarele placate cu Ni sau cu elemente din oel inoxidabil
pot da apei fierbini pn la 1 mg Ni/l.
Absorbia Ni din alimente se estimeaz a fi n proporie de 0,7 % pe cnd Ni din buturi
este absorbit mult mai eficient, mai ales dac este ingerat pe stomacul gol.
Efectele toxice sunt datorate n principal expunerii ocupaionale sau accidentale i nu
prin alimente. Nichelul este un carcinogen al tractului respirator pentru muncitorii din industria
rafinrii nichelului. Alte consecine serioase pe termen lung nu sunt aa de evidente, dar sunt
severe i acute i cteodat pot fi fatale la expunerea nicheltetracarbonil. Dermatita alergic este
comun la persoanele din populaia general. Totui, deficiena nichelului altereaz
metabolismul glucozei i scade tolerana la glucoz. Din studiile fcute pe obolani s-a dovedit
c nichelul poate fi un metal esenial de urme pentru mamifere.
Toxicodinamie
Nichelul este numai slab absorbit de tractul gastrointestinal. Este transportat n plasm
fiind legat de albumina seric i muli ali liganzi organici, aminoacizi sau polipeptide. Excreia
prin urin este aproape complet n 4-5 zile. Aportul de nichel din diet la adulii din Statele
Unite ale Americii a fost estimat la 300 pn la 600 g/zi. ntr-un studiu mai recent a
coninutului de nichel din mncarea pregtit n buctriile universitilor i ale spitalelor s-a
gsit un aport de nichel a fi de 165 g/zi sau 65-85 g/1000 de calorii.
Nichelul administrat parenteral la animale este rapid distribuit la rinichi, plmni, piele,
glanda pituitar. Distribuia intracelular i legarea nichelului nu este bine cunoscut. Liganzii
89
adsorbia i distribuia cadmiului n sol sunt pH-ul, coninutul de materie organic, coninutul de
oxid metalic hidratat.
Datorit presiunii sale de vapori relativ sczute i a volatilitii termice mari i n special
datorit eliberrii de sruri de cadmiu acvosolubile n apa rezidual industrial, concentraiile de
cadmiu din mediul nconjurtor sunt n continu cretere i prezint un risc considerabil pentru
sntatea public. Metalul se gsete n concentraii mai mari n anumite plante de exemplu n
frunzele de tutun i se acumuleaz esutul moale al animalelor, ajungnd la nivele potenial
toxice. Aportul alimentar i fumatul sunt astfel principalele surse ale expunerii umane la cadmiu.
Faptul c din populaia general, fumtorii sunt n special n pericol a fost demonstrat prin nivele
semnificativ de ridicate de cadmiu msurate n snge i fluide seminale n comparaie cu valorile
corespondente gsite la nefumtori. O igar conine ntre 0,5-2 g Cd aproximativ 10% din
coninut fiind inhalat atunci cnd se fumeaz o igar.
Toxicitatea cadmiului
DL50 dup injectarea unui compus solubil al cadmiului este ntre 2,5-25 mg/kg. DL50
oral este de 10-20 de ori mai mare dect cea prin administrare parenteral. Doza letal estimat
este ntre 350-8900 mg, corespunztoare la doze ntre 20-130 mg/kg pentru un adult de 70 kg.
Toxicocinetica
Absorbia pe cale respiratorie. Expunerea pe aceast cale se realizeaz prin inhalarea
particulelor de cadmiu. Proporia de cadmiu absorbit este influenat de mrimea particulelor, de
solubilitatea i forma chimic a acestuia. Din totalul inhalat, se estimeaz c se absoarbe 1050%, iar din acesta pn la 90% n partea inferioar a plmnului.
Absoria pe cale oral. Cadmiul ingerat este slab absorbit i totodat absorbit n
proporii diferite dependent de speciaia acestuia, specia de animal, doza i frecvena
administrrii, statusul nutriional i interaciunile cu diveri nutrieni. Absorbia acestui metal
crete n cazul deficienei de fier i calciu i scade n prezena zincului i crete i cu
coadministrarea de cupru.
Cadmiul legat de metalotioneine n alimente este absorbit de oareci n proporie mai
mic dect sub form ionic. Totodat absorbia este mai accentuat la tineri i mai mare la
femele dect la masculi.
Distribuia. Cadmiul nu sufer conversii metabolice, dar ionul de cadmiu se poate lega
la grupri anionice, n special grupri sulfhidril, n proteine i alte molecule.
Dup absorbie, cadmiul este transportat de snge, fixat pe eritrocite sau legat de
proteine cu mas molecular mare. Cadmiul este preluat de celulele hepatice unde se leag la
metalotioneine. Legat astfel n ficat, el este eliberat lent n plasm. Datorit dimensiunilor mici
ale complexului cadmiu-metalotionein, acesta trece liber prin glomer n tubulul renal. Cadmiul
legat de metalotionein este preluat eficient n tubul proximal prin pinocitoz. n celulele
tubulare renale, vacuolele pinocitare sunt lizate de lizozomi, care degradeaz metalotioneina,
elibernd astfel cadmiul. Metalul se combin apoi cu nou-sintetizatele metalotioneine produse de
celulele tubulare i se acumuleaz n rinichi pentru zeci de ani. Studiile au artat c expunerea la
nivele sczute de cadmiu induce producerea de metalotioneine, permind depozitarea n
proporie mai mare n ficat i rinichi, reducnd astfel toxicitatea acut a metalului.
91
Eliminarea. Mare parte din cadmiul ingerat este eliminat nemodificat prin fecale, iar cel
absorbit este eliminat din organism mai ales prin urin, dar i prin bil,saliv i transpiraie.
Proporia de cadmiu eliminat zilnic prin urin este totui foarte mic, reprezentnd doar 0,0050,01% din totalul din corp. La subiecii expui profesional la cadmiu excreia urinar este de
2g/g creatinin.
Simptomele clinice ale toxicitii cadmiului includ, n general, manifestri hepatice i
renale, anemie, piele solzoas. Exist dovezi i n ceea ce privete interferena cadmiului n
formarea oaselor creterea resorbiei osoase in vivo i scderea acumulrii osteoblastice a
calciului in vitro.
Metalul a fost asociat i cu neoplasm malign la oameni, iar carcenogenitatea indus de
cadmiu poate fi n principal datorat deteriorrii oxidative a ADN-ului.
Principalele efecte constatate ca urmare a expunerii omului la cadmiu sunt urmtoarele:
Efecte renale. Numeroase studii au artat c rinichii sunt principala int a toxicitii
cadmiului. Metalul lezeaz att glomerulul, ct i tubulul renal proximal. Leziunile glomerulare
sunt caracterizate prin pierderi ale proteinelor mari prin urin, aminoacidourie, glucozurie i
hipercalciurie.
Efectele adverse asupra tubulului proximal sunt caracterizate prin creteri ale nivelurilor
urinare a numeroase proteine tubulare. Proteinele tubulare sunt proteine mici, care se gsesc n
plasm i care nu sunt filtrate de glomerul, trecnd astfel n tubulul renal. Creterea
concentraiilor urinare ale proteinelor tubulare, cum sunt microglobulina 2, microglobulina 1,
proteina legat de retinol i N-acetil--glucoza-minidaza indic leziuni ale tubului proximal.
n jurul vrstei de 50 de ani, concentraia acestui metal n rinichi atinge maximul, dup
care ncepe s scad. Scderea se poate datora rspunsului funciei tubulare alterate cu vrsta.
Disfuncia renal asociat cu expunerea ridicat la cadmiu se reflect, de asemenea, prin
reducerea nivelului cadmiului n rinichi i concentraii ridicate ale acestuia n urin. n ambele
circumstane, abilitatea rinichilor de a depozita cadmiul poate fi compromis.
La muncitorii expui la cadmiu, n special cei care prezint proteinurie, s-a constatat
inciden crescut de pietre la rinichi. Acest efect poate fi secundar creterii excreiei de calciu,
atunci cnd sunt prezente leziuni tubulare substaniale.
Efecte neurotoxice. Cadmiul este cunoscut c altereaz concentraia
neurotransmitorilor din creier i poate inhiba intrarea calciului n neuroni. Efectele neurologice
constau n activitate motorie redus, slbiciune i atrofie muscular, comportament agresivi
alterri ale nivelurilor dopaminei, 5-hidroxitriptaminei, dehidrogenazei succinice i
monoaminooxidazei din creier . Expunerea cronic poate conduce la neuropatii periferice.
Dopamina
5-hidroxitriptamina
92
Acid ascorbic
Administrarea parenteral a cadmiului produce distrugerea eritrocitelor, dar nu sunt
indicaii asupra faptului c ar afecta sinteza de hemoglobin.
Efecte asupra gonadelor, reproductive i de dezvoltare. n urma expunerilor acute i
subacute la cadmiu au fost observate efecte testiculare, constnd n necroz i atrofii ale
epiteliului tubulilor seminiferi, greutate crescut a testiculelor i scderea numrului i motilitii
spermatozoizilor (castrare chimic). Aceste efecte apar la doze de 5,8 mg Cd/kg/zi i mai mari.
Efectele testiculare ale cadmiului pot fi datorate interferenei acestuia cu complexele zincproteine, care controleaz transcripia ADN, ducnd ulterior la apoptoz. Doze similare la femei
induc hemoragii i necroze ovariene.
Cele mai frecvente efecte ale expunerii la acest metal sunt reducerea greutii fetale sau
a nou-nscutului la natere i alterri ale comportamentului locomotor. n timp ce cadmiul a
produs i toxicitate matern, efectele asupra produilor de concepie nu par neaprat a fi datorate
acesteia.
Efecte mutagene i teratogene. Genotoxicitatea cadmiului a fost studiat att la oameni,
ct i la animale i in vitro. n timp ce genotoxicitatea a fost observat n unele studii pe oameni
expui la cadmiu i n unele teste in vitro, concluziile sunt confuze i contradictorii. Studiile de
genotoxicitate nu asigur dovezi complete c efectele genotoxice se datoreaz mai ales aciunii
cadmiului; genotoxicitatea pare s fie doar unul dintre mecanismele de aciune care contribuie la
toxicitatea cadmiului.
Teratogenitatea cadmiului a fost trecut n revist de Ferm i Layton, 1981 i Ferm i
Hanlon, 1983. S-a constatat c folosirea produilor de concepie cu doze mici de cadmiu
93
protejeaz mpotriva unor doze ulterioare de cadmiu, la un nivel la care ar fi probabil teratogen,
probabil prin inducerea sintezei de metalotioneine. Protecia este asigurat de co-administrarea
zincului sau seleniului. Deficiena matern n zinc, singur, poate produce malformaii
congenitale, iar administrarea de cadmiu animalelor zinc deficiente ar crete incidena
malformaiilor.
Efecte asupra imunitii. S-a observat c efectele imunologice induse de cadmiu sunt
diverse n studiile pe animale, n unele cazuri constatndu-se supresie, iar n altele stimularea
rspunsului imun. Cadmiul s-a observat c supreseaz imunitatea umoral i este citotoxic pentru
limfocitele splenice. De asemenea, cadmiul a determinat mortalitate crescut n leucemiile
induse viral, sugernd c imunosupresarea este un posibil mecanism de aciune n ceea ce privesc
efectele tumorigene ale acestuia. Pe de alt parte, administrarea cadmiului a determinat rezisten
crescut la infeciile virale i imunitate mediat-celular crescut.
Efecte cancerigene. Studiile epidemiologice ale aciunii cancerigene ale cadmiului au
fost realizate mai ales n cazurile de expunere prin inhalare la locul de munc, costatndu-se
creterea procentului de cancer pulmonar i de prostat printre astfel de muncitori.
Efecte asupra metabolismului calciului i oaselor. Cel mai cunoscut eveniment cu
privire la toxicitatea cadmiului asupra omului este probabil boala itai-itai. ntr-un district al
Japoniei dup cel de-al doilea rzboi mondial i pn pe la nceputul anilor 1970, s-a descoperit
c muli oameni sufereau din cauza unei boli care provoca durere i suferin i chiar i moarte.
S-a descoperit a fi rezultatul polurii apei rurilor cu reziduri coninnd Cd ce proveneau din
activitile de minerit. Apele poluate au fost folosite pentru irigare terenurilor cu plantaii de
orez, rezultnd orez contaminat cu Cd. Consumatorii, n special femeile sufereau din cauza
decalcifierii scheletului, boala itai-itai fiind caracterizat prin producerea unor fracturi multiple i
distorsiuni ale oaselor scheletice lungi, dureri mari i leziuni renale. Cteva mecanisme toxice
pot contribui la boala itai-itai, incluznd disrupii n metabolismul vitaminei D, eliminare
crescut a calciului prin urin i interferene cu metabolismul calciului i fosfatului. Este
interesant de menionat c efectele scheletice nu sunt observate la muncitorii cu proteinurie
datorat expunerii la cadmiu. Alte studii vaste n Europa au legat expunerea la cadmiu cu
excreia urinar crescut de calciu i activitate seric crescut a fosfatazei alcaline la femei i la
brbai. Prin distrugerea dentinei se ajunge la carii dentare.
Din produsele de origine vegetal s-a ncercat ndeprtarea metalului prin splare cu
ap, caz n care se ndeprteaz doar dac metalul este depus pe suprafa sub form de pulberi.
Din uleiul vegetal, Ivanov i colaboratorii au ncercat s aplice diverse metode pentru a
demetaliza produsele. S-a constatat c, o dat cu creterea gradului de esterificare a
poliuronidelor utilizate, eficiena demetalizrii scade. Prin tratarea uleiurilor cu acid pectinic,
gradul demetalizrii a fost i mai mare. Prin tratarea uleiurilor cu soluii apoase de acid pectinic,
s-a constatat c gradul de ndeprtare a ionilor metalici crete o dat cu scderea concentraiei
acizilor pectinici n soluia apoas.
Din sursa de ap, cadmiul poate fi ndeprtat eficient prin tratare cu var i coagulare cu
sulfat feric, prin acest proces fiind ndeprtat peste 90% din concentraia iniial de cadmiu.
Limite maxime admise: aer se accept maximum 5 ng Cd/m3.
94
95
Toxicitatea cromului
Intoxicarea cu crom are loc de obicei datorit expunerii accidentale i ncercrilor
ocazionale de a folosi cromul pe post de agent pentru sinucideri. Efectul acut major al cromului
ingerat este necroza renal tubular acut.
Expunerea la cromul folosit n industria pigmenilor de exemplu, poate produce cancer
la nivelul tractului respirator. La nceputul anilor 1936 autoritile germane ce se ocupau cu
sntatea public au gsit cancer pulmonar printre muncitorii expui la praful de crom. Cel mai
mare risc de cancer este atribuit expunerii la cromul hexavalent solubil n acizi i insolubil n ap
ce apare n procesele de coacere i rafinare. Cromul hexavalent este coroziv i produce ulceraii
cronice i perforaii ale septului nazal. Provoac de asemenea ulceraii cronice i aupra altor
suprafee ale pielii, ceea ce este independent de reaciile de hipersensibilitate ale pielii. Reacii
alergice ale pielii datorate cromului au loc foarte uor i sunt independente de doz. Dei
compuii cromului covalent sunt considerabil mai puini toxici i nu sunt nici iritani, nici
corozivi, muncitorii din industrie sunt expui la ambele forme. Nu este clar nc dac cromul
provoac i n alte zone cancer dect la nivelul tractului respirator.
Studiile pe animale sprijin faptul c cei mai posibili carcinogeni sunt compuii
cromului hexavalent puin solubili. n schimb studiile in vitro pe sisteme bacteriene nu arat c
ar fi vreo diferen ntre compuii solubili i cei mai puin solubili. Srurile cromului trivalent nu
au sau au foarte puin activitate mutagenic asupra sistemelor bacteriale. Din moment ce este
preferat absorbia cromului hexavalent de ctre celule iar forma trivalent este cea metabolic
activ i se leag cu acizii nucleici n interiorul celulei, s-a sugerat c agentul cauzal n
mutageneza cromului este cromul trivalent legat de materialul genetic dup reducerea formei
sale hexavalente.
Cuprul
Cuprul a fost cunoscut, minerit i utilizat de oameni din cele mai vechi timpuri, fiind probabil
al doilea, dup fier, n ceea ce privete utilitatea lui pentru oameni. Se utilizeaz intens pentru
fabricarea evilor pentru ap, n special pentru uz casnic. Cuprul este utilizat i n producerea
cablurilor electrice i a aliajelor cum sunt alama i bronzul. Este de asemenea utilizat n
galvanizare la fotografii, acoperiuri, catalizator n industria chimic i pentru ndeprtarea
mercaptanilor i rafinarea petrolului. Cuprul este utilzat intens i n diverse formulri de
pesticide. De exemplu, sulfatul de cupru este utilizat ca fungicid i bactericid pentru
prevenirea bolilor la fructe, legume i culturile cerealiere i ca ierbicid, muloscocid i pentru
controlul dezvoltrii creveilor n orezrii.
Dup absorbia n fungi sau bacterii, ionii de cupru se vor lega la diferite grupe
chimice (imidazol, fosfat, hidroxil) prezente n numeroase proteine i vor tulbura funcionarea
acestora. Ionul toxic de cupru este absorbit de sporul germinativ al fungului, astfel c, pentru
a obine rezultate optime, cuprul trebuie reaplicat pe msur ce plantele cresc, pentru a
menine protecia i pentru a preveni apariia bolilor. Este utilizat i pentru conservarea
lemnului i pentru tratarea apei de but i a celei din bazine.
n sol cuprul se gsete n jur de 70 ppm, iar n apa de mare ntre 0,001-0,02 ppm. n
apa de but, concentraia cuprului este variabil, cu medii ntre 60-150 g/l, concentraii care
96
cresc n special n cazul apei cu pH sczut i duritate mic i care ajunge la consumator prin
evile de cupru. Acestea ns nu sunt singurele variabile care influeneaz dizolvarea cuprului
n ap potasiul, sodiul, hidrogenul, sulfatul, oxigenul dizolvat, clorul, nitratul i
conductivitatea apei influennd gradul de solvire al cuprului n ap. Deoarece perioada de
timp ct st apa n conducte este de asemenea important, cele mai relevante date privind
aportul de cupru prin ap sunt furnizate de concentraia cuprului n apa consumat.
Cuprul este disponibil i n majoritatea alimentelor naturale. Unii specialiti afirm
chiar c aportul mediu este mai ridicat dect nevoile zilnice i c toxicitatea acestuia a devenit
chiar o problem. Alimente cu coninut ridicat de cupru sunt cerealele, n special grul i
hrica, creveii i fructele de mare, ficatul i alte organe interne, fasolea i mazrea uscat,
nucile, alunele, soia, fructele uscate, cacaoa, piperul negru i drojdia. Stridiile conin cantiti
mari de Cu, de aproximativ cinci ori mai mult dect alte alimente. n alimentele procesate sau
pstrate n vase cu aliaje din cupru, concentraia acestuia este mare, cuprul fiind solvit, n
special n alimentele acide.
Cuprul este esenial n alimentaia mamiferelor, fiind necesar n numeroase reacii
enzimatice. Este esenial n pentru utilizarea normal a fierului, datorit necesitii feroxidazei
(ceruloplasminei) pentru transportul fierului. Deficiena cuprului (sub 2 mg/zi) duce la
anemie, rezultat prin incapacitatea reticulocitelor de a obine fier de la transferine i de a
sintetiza hemul din fier i protoporfirine la o rat normal. Clinic se traduce prin anemie
hipocrom, microcitar, refractar la fier i prin susceptibilitate la infecii. Deficiena este
uneori nsoit de anomalii osoase. Alte sisteme enzimatice care necesit cupru includ
monoaminooxidazele, necesare pentru pigmentare, controlul neurotransmitorilor i a
neuropeptidelor; liziloxidaza, esenial pentru meninerea esuturilor de legtur din pulmoni,
oase i a elastinei din sistemul cardiovascular, citocrom c oxidaza, implicat n metabolismul
oxidativ, funcionarea creierului, sinteza hemului i a fosfolipidelor i superoxid dismutaza,
necesar pentru distrugerea radicalilor superoxid.
Exist i cteva boli genetice care afecteaz utilizarea cuprului, acestea fiind
sindromul Menke, boala Wilson i aceruloplasminemia. Anomaliile genetice asociate
primelor dou boli au fost identificate a fi defecte ale ATP-azelor de tip P.
Aceruloplasminemia este o tulburare autosomal recesiv determinat de modificrile n gena
ceruloplasminei, care afecteaz abilitatea ceruloplasminei de a lega cuprul.
Ca urmare, n sindromul Menke, absorbia intestinal a cuprului este foarte sczut,
ceea ce duce la acumularea acesteia n mucoasa intestinal i, adesea, la moarte. n sindromul
Wilson tulburrile de metabolizare a cuprului conduc la concentraii mici de cupru n ser i n
pr, dar nivele ridicate n ficat i creier.
Toxicitatea cuprului
Toxicitatea cuprului este dependent de specie, tipul de compus, calea de ptrundere
n organism i raportul cu alte microelemente din raie. Cei mai toxici compui sunt srurile
mai solubile. DL50 pentru obolani sunt ntre 30 i 472 mg/kg. Rspunsuri toxice la oameni au
fost observate la doze de 11 mg/kg. Ingestia sulfatului de cupru este adesea netoxic, deoarece
se declaneaz automat voma, ca urmare a efectului iritant asupra tractului gastrointestinal.
Moartea se poate produce la ingestia a ctorva grame de sulfat de cupru.
97
Toxicocinetica
Cile de ptrundere a cuprului n organism sunt calea oral, cu apa i alimentele
contaminate n urma tratamentelor la care au fost supuse sau ca urmare a pstrrii n vase de
cupru, calea respiratorie i dermic, n special n special n cazul muncitorilor expui
profesional.
Dup ptrunderea pe cale, cea mai mare parte a cuprului este absorbit la nivelul
stomacului i duodenului. Concentraia maxim a cuprului n snge a fost observat n
intervalul 1-3 ore dup ingestie. Eficiena absorbiei este ntre 15-97%. Absorbia cuprului se
realizeaz att prin mecanisme active, ct i pasive. La aport sczut i moderat de cupru,
acesta este absorbit prin mecanisme de transport active saturabile, iar la aport ridicat este
absorbit prin difuzie pasiv.
Factorii care pot interfera cu absorbia cuprului includ competiia pentru situsurile de
legare cu zincul, interaciunile cu molibdenul, manganul i sulfaii, chelatarea cu fitaii i
inhibarea cu acidul ascorbic.
Cuprul absorbit din tractul gastrointestinal este transportat rapid n snge i depozitat
n ficat, legat de metalotioneine, din care este eliberat i ncorporat n ceruloplasmine, un
transportor specific pentru cupru. Cu2+ care rmne n snge este legat la albumine sau
aminoacizi sau la eritrocite. Aproximativ 80% din cuprul absorbit este legat de
metalotioneinele din ficat, iar restul este ncorporat n citocrom c oxidaza sau este sechestrat
de ctre lizozomi.
Cuprul, sub form de Cu2+, atunci cnd intr n hepatocite este iniial redus i
complexat de ctre glutation nainte de legarea la metalotioneine. Alternativ, cuprul care intr
n celule poate fi exportat de ctre cupru-ATP-translocaza.
Distribuia cuprului este influenat de sex, vrst i de nivelul su din raie. Creierul
i ficatul prezint concentraia cea mai mare (aproximativ o treime din cantitatea total din
organism), concentraii mai mici fiind gsite n inim, splin, rinichi i snge.
Nivelul cuprului din eritrocite este foarte stabil, n timp ce concentraiile plasmatice
prezint fluctuaii mari, n legtur cu sinteza i eliberarea ceruplasmei. Nivelul plasmatic al
cuprului n timpul sarcinii poate fi de dou ori mai mare dect nainte, datorit sintezei
crescute de ceruloplasmine. Sursa cuprului suplimentar este ficatul. Estrogenii par a fi agenii
stimulatori de eliberare a cuprului din ficat.
Principala cale de eliminare a cuprului este calea biliar i apoi fecalele. Alte ci
minore sunt saliva, transpiraia i laptele. Timpul de njumtire a cuprului n organism este
foarte scurt, astfel nct acesta nu are tendina de acumulare.
La oameni, toxicitatea acut este de obicei corelat cu ingestia accidental;
simptomele includ gust metalic n gur, grea, vom, durere epigastric, diaree, icter.
n cazuri grave, fecalele i saliva sunt verzi-albastre. n fazele terminale, anemia,
hipotensiunea i coma preced moartea.
Indivizii cu deficien de glucuzo-6-fosfat-dehidrogenaza pot prezenta risc crescut n
ceea ce privete efectele hematologice ale cuprului.
98
Efectele gastrointestinale ale cuprului au fost investigate n mai multe studii, care au
pus n eviden o corelaie ntre concentraia cuprului i incidena simptomelor
gastrointestinale, n timp ce ali indicatori ai homeostaziei cuprului, cum sunt nivelurile serice
i cele ceruloplasminice i statutul ficatului nu s-au modificat semnificativ.
Riscul de aport prin raie de peste 5 mg Cu/zi pare s fie mic. Se tie doar c
viticultorii care aplic sulfat de cupru dezvolt boli de ficat dup 3-15 ani de expunere la
astfel de soluii, indivizii mai expui, n afar de cei cu deficit de glucuzo-6-fosfatdehidrogenaz, fiind cei cu boala Wilson, care duce la absorie i depozitare excesiv de
cupru.
Cuprul nu produce genotoxicitate, iar studiile efectuate n ceea ce privesc efectele
reproductive i de dezvoltare nu au evideniat vreo corelaie ntre prezena cuprului i astfel
de efecte. La doze mari s-a constatat moarte fetal i numr mic de nou nscui la oarece.
Tratamentul cu chelatori
Tratamentului de chelare implic utilizarea de compui chimici injectat n fluxul de
snge, musculare sau luate de gura pentru a lega metale, care sunt prezente n concentraii
toxice astfel nct s poat fi eliminat (de obicei n urin) din organism.
Tratamentului de chelare este indicat medical atunci cnd niveluri toxice de metale
grele, cum ar fi de fier, arsenic, plumb, mercur i sunt prezente. n timp ce fierul este un metal
vital alte metale (arsenic, plumb, mercur i) nu sunt cerute de organism.
Toxicitatea plumbului apare cel mai frecvent cu copii mai mici expusi la case vechi
cu praf vopsea cu plumb sau chips-uri. Expunerea profesional (sudori de lipit,, topitorii,
baterie regenerare) este, de asemenea, un risc. Screening-ul de plumb pentru copii a devenit
acum o parte standard a vizita un medic pentru copii n statele membre pot.
Toxicitatea mercurului apare aproape ntotdeauna la locul de munc, inclusiv a
lucrtorilor dentari, producatorii de baterii / termometre, tbcrie i din fructe de mare
contaminate.
Intoxicaia cu arsen apare, de obicei la expunerea la insecticide, erbicide, otrvuri
pentru roztoare, medicamente veterinare antiparazitare sau la otrvire intenionat.
Alte metale grele sunt menionate doar n trecere, deoarece expunerea la unele toxice
este extrem de puin frecvent: cadmiu, aluminiu, mangan, cobalt, zinc, nichel, cupru i
magneziu.
Toxicitatea metalelor grele poate provoca o gam larg de probleme, inclusiv leziuni
grave la organele corpului i a creierului.
Ageni de chelare:
Desfuroxamine: utilizat pentru toxicitatea fierului, administrat pe cale intravenoas.
Dimercaprol (BAL): agent pentru plumb, arsenic i mercur, administrat
intramuscular.
DMSA: un analog al Dimercaprolului care poate fi administrat la intoxicare cu
plumb i arsenic.
D-penicilamina: pe cale oral.
Chelatori utilizai pentru plumb, arsenic, mercur sunt mai puin costisitori, dar nu la fel de
eficieni ca DMSA.
99
101
Exemplu
Formula general
Benzenul fenoli
Ar-X HO-Ar-X
Fenazona 3-hidroxifenazona
Trimetilamina
trimetilamino-N-oxid
S-oxidarea
O-dezalchilarea
Codeina morfin
N-dezalchilarea
Morfina normorfin
S-dezalchilarea
Metiltiopurina
tiopurin
Dezaminarea
oxidativ
Amfetamina
fenilaceton
Desulfurarea
Parationul paraoxon
Epoxidarea
Aldrinul dieldrin
Oxidarea cu
deschiderea ciclului
Nicotina acid - (3
piridil)
meti-amnobutiric
R-(CH2)n-CH3 R-(CH2)-CH2OH
R3NR3NO
R
R'
S R'
OH
S R'
O
R-O-CH3 R-O-CH2OH
R-OH + HCHO
R-NH-CH3 R-NH-CH2OH
R-NH2 + HCHO
R-S-CH3 R-S-CH2OH
R-SH + HCHO
H
C NH2
R
R'
R
R'
R
R'
NH2
R'
R - CH = CH - R'
R
R'
OH
C
C O
+
NH3
O
X
R - CH - CH - R'
O
R'
N
CH3
R'
NH
COOH
R
Astfel, metanolul se metabolizeaz n primul rnd n ficat, dar efectul toxic se exercit
la nivelul retinei, SNC, rinichiului; hidroxilarea 2-naftilaminei are loc n ficat, dar efectul
cancerigen apare n vezica urinar; plumbtetraetilul este transformat n plumbtrietil n ficat,
dar metabolitul este toxic n special pentru SNC; n cazul dimetilnitrozaminei, sediul
metabolizrii ficatul corespunde cu sediul principal al aciunii toxice. In organismul uman
103
i n cel animal exist dou tipuri de enzime: enzime biochimice (parametabolice) i enzime
xenobiotice (xenometabolice).
Primele, cele biochimice, catalizeaz biotransformarea substanelor endogene, precum
i metaboliii acestora care prezint asemnri structurale cu substanele endogene, deoarece,
odat metabolizate i ajunse la locul de aciune a enzimelor, acestea nu le mai pot diferenia
de substratele lor normale i le metabolizeaz pe aceeai cale. Enzime ca:
alcooldehidrogenaza, aldehiddehidrogenaza, DOPA-decarboxilaza, monoaminooxidaza,
colinesterazele nespecifice plasmatice, guanaza, nucleotidazele, xantinoxidaza degradeaz
deopotriv substratele naturale i pe cele strine, dar similare ca structur.
Enzimele xenobiotice catalizeaz biotransformarea majoritii otrvurilor i
substanelor chimice industriale, poluanilor, medicamentelor, cancerigenilor, aditivilor
alimentari, care nu prezint, ca atare sau ca metabolii, asemnri structurale cu substratele
normale. Aceste enzime au sediul n microzomi i catalizeaz n special reacii de oxidare.
nc din anul 1955, Axelrod a demonstrat existena unui sistem de enzime care folosesc
NADPH (nicotinamid redus) i oxigen molecular, numite oxidaze cu funcii mixte
microzomiale (Microsomal Mixed Function Oxydases) sau OFMM. n microzomi pe lng
aceste enzime, se mai gsesc i unele reductaze i hidrolaze.
Exist i substane metabolizate att pe cile normale, ct i pe cele caracteristice
xenobioticelor. De exemplu, etanolul se oxideaz n citoplasm prin intermediul
alcooldehidrogenazei (enzim biochimic), iar n microzomi prin intermediul unui sistem
enzimatic asemntor.
Enzimele biochimice se mai deosebesc de OFMM prin localizarea, numrul,
specificitatea i activitatea lor.
Enzimele de oxidoreducere biochimic au sediul n special n mitocondrii, enzimele de
hidroliz n lizozomi, citoplasm, plasm sangvin, iar OFMM se gsesc aproape exclusiv n
microzomi.
Enzimele biochimice sunt diversificate i n cantitate suficient pentru a satisface
metabolizarea substratelor endo- i exogene; numrul OFMM este mic sau chiar redus la un
sistem unic i universal de oxidaze.
Enzimele OFMM sunt lipsite de specificitate, deoarece metabolizeaz numeroase
substraturi cu structuri diferite, n timp ce enzimele biochimice sunt specifice.
Enzimele biochimice sunt n stare activ, pe cnd OFMM se activeaz sub efectul
direct al xenobioticelor, putnd metaboliza atunci compusul care le-a activat, precum i ali
compui metabolizai pe aceeai cale. Proprietatea se numete inducie enzimatic.
Inducia enzimatic determin creterea nivelului enzimelor implicate n
metabolizarea unei otrvi sau xenobiotic dup administrarea cronic a unui medicament sau
toxic. Astfel, datorit nespecificitii marcate, administrarea unui medicament induce o
metabolizarea crescut a altor substane (Voicu i Olinescu, 1977). De pild, nicotina mrete
activitatea enzimelor care metabolizeaz o serie de medicamente i chiar metabolismul
nicotinei este mai intens la fumtori fa de nefumtori, probabil datorit efectului inductor al
hidrocarburilor policiclice din igar.
104
Reacii de reducere
Reacia
Aldehide alcool primar
Cetone alcool secundar
Saturarea dublei legturi
Nitroderivat nitrozoderivat
hidroxilamin amin
Azoderivat hidrazoderivat
amin
Exemplu
R-CHO R-CH2OH
R-CO-R R-CHOH-R
R-CH=CH-R R-CH2-CH2-R
R-NO2 R-NO R-NHOH RNH2
R-N=N-R R-NH-NH-R
R-NH2 + R-NH2
R-CO-NHOH R-CO-NH2
R-S-S-R R-SH + R-SH
R-AsO(OH)2 R-As=O
Formula general
R-COO-R R-COOH + R-OH
R-CONH-R R-COOH + R-NH2
Exemplu
Atropina acid tropic +tropanol
Lidocaina etilenglicocol + xilin
Att disocierea moleculei de oxigen ct i desfacerea legturii R-H din substrat reclam
un aport crescut de energie de activare i, de aceea, organismul realizeaz aceast oxidare n
opt etape:
1. Citocromul P450 (notat aici cu Fe3+) se unete cu substratul nepolar, R-H;
2. Fierul heminic Fe3+ se reduce la Fe2+ prin transferul unui electron de la NADPH, prin
intermediul NADPH-citocrom P450-reductazei;
3. Oxigenul molecular formeaz un complex ternar, (RH)Fe2+(O2);
4. Un al doilea electron se transfer de la NADPH (prin intermediul NADPH-reductazei) ori
de la NADPH sau NADH (prin intermediul citocromului b5) cu formarea unui anion
peroxidic;
5. Anionul peroxidic leag hidrogenul, cu formare de ap i a complexului RH(Fe-O)3+;
105
RH
ROH
Fe3+
8
(ROH)Fe 3+
(RH)Fe 3+
e-
(RH)Fe 2+
(R)(Fe
OH) 3+
XOOH
(RH)Fe 2+ (O 2)
XOH
(RH)Fe 3+(O
2 )
RH(Fe O)3+
H2O
2H+
O2
3
4
2(RH)Fe 3+(O2)
e-
ambele procese se dezvolt forme reactive ale O2 cum sunt O2 i 1O2 (Auclair i Lecomte,
1978).
Sistemul oxidazic cu funcii multiple este responsabil de procesul de detoxifiere
hepatic, care ncepe prin introducerea unor grupri polare n structura substratului lipofil
pentru a-l face mai hidrosolubil. Sistemul enzimatic microzomial cuprinde de asemenea un
numr de reacii oxidative ca hidroxilri, O i N-dealchilri, sulfoxidri etc. (Voicu i
Olinescu, 1977). Reacia principal de hidroxilare a unui substrat AH se datorete contactului
direct cu citocromul P450 care este redus cu ajutorul unui flux de electroni primit de la
NADPH prin intermediul celorlali transportori.
Peroxidarea este competitiv cu desaturarea i cu N- i O-dealchilarea (OBrien,
1978). Bidlack i Hochstein (1975) menioneaz nsuirile de peroxidaz ale hemoproteinelor
din sistem (citocromii P450 i b5), ct i condiiile n care apare peroxidarea lipidelor
microzomiale: Fe3+ liber, dar mai ales complexat cu ADP sau pirofosfat.
In vivo se poate realiza peroxidarea lipidelor microzomiale din ficat. Mecanismul cel
mai probabil se bazeaz pe structura hemoproteinic a componenilor sistemului microzomial
i capacitii acestora de a aciona ca peroxidaze. Producerea unor specii reactive, fie prin
activarea O2 (1O2), sau prin peroxizi (H2O2 sau lipidici), este sigur datorit
chemiluminiscenei ce nsoete hidroxilarea microzomial in vitro. Dup OBrien, O2 i
citocromul P450 sunt componentele ambelor procese i acestea pot realiza hidroxilarea unor
medicamente. Ramura peroxidant, dei este mai simpl deoarece nu necesit prezena
celorlali citocromi, produce totui distrugerea citocromului P450. O dovad suplimentar a
posibilitii peroxidrii lipidelor microzomiale este adus de amplificarea acestui proces de
radiaiile ionizante (Wills i Daves, 1972).
NADPH
Citocrom C reductaza
3+
ADP-Fe
2+
ADP-Fe
RH
Citocrom P 450
(peroxidaza)
ROOH
ROH
ROOH
Citocrom b 5 (peroxidaza)
ROH + H2O
O2
ADP-Fe2+ .O2
Lipide
Citocrom b 5 (reductaza)
NADH
Lipide-OOH
107
Compuii
iniiali
Glucuronoconjugarea
Derivai
hidroxilici,
tiolici,
carboxilici,
aminici
Sulfoconjugarea
Derivai
hidroxilici,
tiolici, aminici
Amine
aromatice,
sulfonamide,
hidrazine, acid paminobenzoic
Derivai
carboxilici
(COOH fixat
direct pe ciclul
aromatic sau prin
Acetilarea
Glicocolconjugarea
Compuii finali
Activ.
cu**
Ex.*)
Enzima
6/1
Gluconoriltransferaza
UTP
6/2
Sulfotransferaza
ATP
Derivai Nacetilai
6/3
N-acetiltransferaza
CoA
Derivai ai arilglicocolului
6/4
Glicocol-Nacilaza
CoA
O-gluconoride
de tip eter
S-gluconoride de
tip tioeter
O- gluconoride
de tip ester
N- gluconoride
Esteri sulfurici,
tiosulfurici,
sulfamai
109
Glutaminconjugarea
Metilarea
Mercaptare
(cistein sau
glutationconjugare)
Sulfurizare
intermediul unei
catene laterale)
Unii acizi arilacetici
Derivai Nheterociclici,
amine aromatice
endogene, fenoli,
tioli, As (Se, Te)
Hidrocarburi
aromatice,
derivai
halogenai
aromatici
Acid cianhidric,
cianuri, nitrili
Derivai ai fenilacetil-glutaminei
6/5
CoA
Metiltransferaza
Derivai N, O, Smetilai
6/6
Acizi arilmercapturici
6/7
Cistein(glutation)transferaza
Sulfocianuri
(tiocianai)
6/8
Rodanaza
(tiosulfat:
cianuri-sulftransferaza
ATP
111
Reaciile de conjugare
1. Glucuronoconjugarea:
H O H
R - OH
+ HO
(R - SH) HO
H O H
COOH
OH
H
COOH
OH
(RS)RO
HO
H
H OH
Acid D-glucuronic
H
H OH
O
Ar - COOH + HO
O
Ar - COO
- H2O
O
Ar - NH2 +
Ar - NH
- H2O
N - glucuronid
2. Sulfoconjugarea:
C6H5 OH (SH)
Sulfat
activat
C6H5 O SO3H
(S)
Fenilsulfat (feniltiosulfat)
C6H5-NH2
Sulfat
activat
C6H5-NH-SO3H
Sulfamat
3. Acetilarea
H2N-C6H4-SO2NH2 + CH3-CO SCoA
Sulfanilamida
Acetil-CoA
HS CoS
CH3CONH-C6H4-SO2NH2
N-4-acetilsulfanilamida
4. Glicocolconjugarea:
C6H5-CO~SCoA + H2N-CH2-COOH
Glicocol
Benzoil-CoA
HS-CoA
C6H5-CO-HN-CH2-COOH
Acid hipuric
5.Glutamincojugarea:
C6H5-CH2CO~SCoA + H2N-CH-(CH2)2-CONH2
Fenil-acetil-CoA
COOH
HS-CoA
C6H5-CH2COHN-CH-(CH2)2-CONH2
COOH
Glutamina
Fenil-acetil-glutamina
112
6. Metilarea:
Metil
activat
N
Piridina
(+)
_
N
CH3
N-metil-piridiu
HO
CH CH2 NH CH3
HO
OH
Metil
activat
N
N
Nornicotina
Nicotina
H3C O
Metil
activat
CH3
HO
CH CH2 NH CH3
OH
Metnefrina
Adrenalina
C2H5
SH
Metil
activat
Etilmercaptan
C2H5 S CH3
Etilmercaptan metilat
7. Mercaptarea:
Ar-H + HS-CH2-CH(NH2)-COOH
cisteina
Ar-S-CH2-CH(NH2)-COOH
Arilcisteina (acid mercapturic)
2H
Ar-X + HOOC-CH-CH2-CH2-CO-NH-CH-CO-NH-CH2-COOH
NH2
Glutation
CH2-SH
HOOC-CH-CH2-CH2-CO-NH-CH-CO-NH-CH2-COOH
NH2
CH2-S-Ar
Aril-glutation
113
HX
Sistemul cardiovascular este afectat de toxici, direct sau indirect, prin aciune asupra
principalelor verigi ale circulaiei: contractibilitatea miocardului, frecvena cardiac, volumul
sangvin circulant, vasomotricitatea.
Tulburrile de contractibilitate survin prin aciune direct asupra miocardului sau
printr-un regim circulator coronarian inadecvat sau ca urmare a hipoxiei;
Tulburrile de ritm apar prin aciune asupra sistemului nervos periferic, ca i asupra
fasciculelor excitoconductoare ale miocardului;
Scderea volumului sangvin circulant are loc, n principal, prin creterea
permeabilitii capilare cu extravazare de plasm n esuturi, caviti seroase, lumen
gastrointestinal;
Alterrile vasomotricitii sunt vasodilataia (prin deprimarea SNC) i
vasoconstricia.
Dintre manifestrile clinice ale tulburrilor cardiovasculare din intoxicaiile acute,
insuficiena circulatorie acut periferic (ocul toxic sau colapsul toxic) i stopul cardiac sunt
modalitile cele mai frecvente de letalitate.
Aparatul respirator poate fi afectat pe urmtoarele ci:
Inflamaia acut a mucoasei tractului respirator care poate conduce la asfixie, prin
lips de aer;
Alterarea permeabilitii membranei alveolocapilare, urmat, imediat sau tardiv, de
edem pulmonar acut toxic;
Excitarea sau deprimarea centrilor respiratori poate conduce la stop respirator;
Blocarea hemoglobinei circulante (cazul CO) sau a respiraiei celulare (cazul CN)
conduce la asfixie prin incapacitatea de fixare a oxigenului pe hemoglobin, respectiv prin
anoxie tisular;
Paralizia muchilor respiratori determin asfixie.
Ficatul poate fi lezat prin aciune toxic direct asupra hepatocitului sau prin aciune
trofopatic, cnd se produce carena n unii factori indispensabili hepatocitului. Se pot
produce hepatopatii i prin hipersensibilitate individual sau prin imaturitate hepatic
(perioada neonatal) sau prin deficit enzimatic. Toate formele de hepatopatii implic scderea
circulaiei intrahepatice.
Toxicii liposolubili afecteaz predominant hepatocitele, iar toxicii hidrosolubili,
celulele tubulorenale.
Leziunile hepatice intereseaz att parenchimul (hepatocitele), ct i mezenchimul.
Iniial se produce degenerescena hepatocitelor, urmat de inflamarea mezenchimului.
Aceasta din urm nu are loc dac lezarea hepatocitelor este fie uoar i reversibil, fie
masiv, cu evoluie rapid fatal. Leziunile parenchimatoase sunt de tip necroz, steatoz
(ncrcare gras) i colestaz, iar leziunea mezenchimului const n scleroz.
n funcie de durata i intensitatea expunerii la toxic, precum i cu sensibilitatea
individual, afectarea ficatului se exprim prin: atrofie galben acut (hepatonecroz ntins,
ireversibil), hepatit acut (hepatonecroz limitat cu regenerare n timp), hepatit subacut
sau cronic (hepatonecroz progresiv, cu reparaie mezenchimal), ciroz (scleroz ntins,
cu sfrit letal).
115
Rinichiul este afectat de acei toxici i/sau metabolii care se elimin n principal la
acest nivel. Lezarea se produce prin mecanism direct sau alergic sau ca o consecin a
hipoxiei din starea de oc:
Nefropatia acut tubular toxic se produce prin aciunea nefrotoxic direct.
Poriunea cea mai sensibil este tubul contort proximal unde au loc concentrarea i
reabsorbia afectarea exprimndu-se prin procese degenerative de diferite grade. Leziunile
nefrotice se nsoesc, cnd intoxicaia este grav, de leziuni determinate de ischemie (deficit
circulator local). Tabloul clinic este de insuficien renal acut toxic;
Rinichiul n stare de oc este consecina aciunii toxice indirecte, cnd n cadrul
ocului toxic, alturi de alte organe i sisteme, este afectat i rinichiul, datorit anoxiei
ischemice, cu instalarea oliguriei (anuriei). Dac ischemia este prelungit, diureza nu este
reluat dup nlturarea strii de oc a intoxicatului i apare sindromul de insuficien renal
acut toxic;
Nefropatia cronic, profesional sau medicamentoas, poate fi primar sau secundar
cronic cnd rezult din evoluia unei nefropatii acute.
Aparatul digestiv este afectat de majoritatea toxicilor introdui pe cale oral. Acetia
acioneaz fie direct pe diferite structuri, fie indirect, prin intermediul sistemului nervos
central sau vegetativ sau al unor reacii imunoalergice. Leziunile organice sau funcionale sunt
exprimate prin diferite manifestri.
Sngele i mduva hematogen pot fi atacate de toxici care provoac hemopatii induse
prin atacarea mduvei hematogene (hemopatii mielotoxice sau imunopatogene), hemopatii
induse prin atacarea elementelor sngelui circulant, hemopatii induse prin combinarea
ambelor mecanisme, aciunea prevalnd fie pe mduv, fie pe elementele sngelui.
Tulburrile hidroelectrolitice i de echilibru acido-bazic pot fi deosebit de grave n
intoxicaiile severe i se realizeaz prin urmtoarele mecanisme: vrsturi i diaree;
hipersudoraie i hipersecreie glADNular; scderea (abolirea) funciei renale; ntreruperea
aportului oral sau aport exagerat parenteral; formarea de exces de acizi prin metabolizarea
toxicului; aport de acizi i baze exogene (intoxicaii acute cu acizi i baze, unde crete sau
scade pH-ul sangvin).
Aciunea toxic direct este caracteristic unui numr limitat de toxici care determin
inflamaia sau necroza esutului cu care vin n contact: tegumentele (substane vezicante, acizi
i baze tari), conjunctivele bulbare (substane lacrimogene), mucoasele tractului respirator
(gaze iritante), mucoasele bucal, esofagian i gastric (substane iritante, caustice, corozive
etc.).
exist canale separate pentru Na+ i pentru K+, unii toxici(tetrodoxina) blocheaz fluxul de
sodiu, alii (clorura de tetraetilamoniu), fluxul de potasiu;
De asemenea, unii toxici (DDT, alcaloizii din veratrum) favorizeaz lrgirea canalelor
ionice, cnd se produce labilizarea membranei. Totodat, printr-o aciune anti-ATP-azic
(ouabain) se produce inhibarea pompei cationice.
Nucleul este afectat de toxici prin:
inhibarea precursorilor acizilor nucleici;
ncorporarea n acizii nucleici;
legarea covalent cu acizii nucleici;
formarea complecilor reversibili cu ADN;
interferarea cu ADN- i ARN-polimeraza.
Inhibarea precursorilor acizilor nucleici este realizat de antagonitii acidului folic i
de antimetaboliii bazelor purinice (adenina, guanina, hipoxantina, xantina) sau pirimidinice
(uracilul, citozina, timina), care, dei analogi chimici ai acestor baze, formeaz compui
inutilizabili de ctre celul . Astfel, 6-tiopurina, analog chimic al hipoxantinei, mpiedic
intrarea acesteia n celul, deoarece hipoxantina formeaz acid inozinic, n timp ce 6-tiopurina
sintetizeaz acid tioinozinic, respins de celul. Asemntor reacioneaz i 5-fluorouracilul,
analog chimic al uracilului.
6-Tioguanina, inhib biosinteza acizilor nucleici, dar se poate ncorpora n acetia n
locul bazelor naturale.
Legtura covalent cu acizii nucleici se refer la substanele antitumorale i la
cancerigeni.
Compleci reversibili cu ADN pot forma LSD i unele antibiotice (antracilina,
rubidomicina) care afecteaz replicarea i transcrierea; legturile fiind electrostatice,
modificarea pH-ului mediului determin desfacerea complecilor.
Interferena cu ADN- i ARN-polimeraza este cazul sarcomicinei care inhib ADNpolimeraza, blocndu-I gruprile SH, sau al rifamicinei i rifampicinei, care inhib ARNpolimeraza la microorganisme nu ns la mamifere fapt pe care se bazeaz utilizarea lor
clinic.
Mitocondriile sunt sediul lanului respirator (transportor de electroni) i al cuplrii
acestui proces cu fosforilarea oxidativ, avnd ca rezultat sinteza de ATP. Transportul
electronilor este de asemenea cuplat cu ciclul Krebs. Aciunea toxicilor poate avea loc la
urmtoarele nivele:
Ciclul Krebs este blocat de diferii toxici (inhibitori) la oricare din secvenele sale;
astfel, acidul fluoracetic realizeaz sinteza letal unele fenotiazine inhib dehidrogenazele
NAD-dependente, cu oprirea ciclului la nivelele respective;
Lanul respirator este blocat prin inhibarea flavinnucleotidelor (barbiturice, unele
fenotiazine), a citocromilor (CN, H2S, actinomicin), a enzimei Q (dicumarinice) etc.;
Sinteza ATP este micorat de unele xenobiotice (CCl4, tetracicline, digitalice); ali
toxici mpiedic fosforilarea oxidativ prin aciune mixt asupra lanului respirator i a
sintezei ATP; decuplarea transportului de electroni cu fosforilarea oxidativ este modul de
aciune al dinitrofenolilor;
117
118
119
este lipoidic, iar molecula trebuie s se dizolve n ea. n plus, dup depirea membranei,
molecula difuzeaz n apa protoplasmatic, apoi n apa extracelular, nct trebuie s posede o
anumit hidrofilie. De aceea, moleculele cu un coeficient mediu de repartiie lipide/ap
(coeficient Owerton-Meyer) sunt cel mai bine absorbite.
n cazul ptrunderii pe cale respiratorie, cnd hidrosolubilitatea este mare
(coeficient lipide/ap mic) alcoolul organismul are o capacitate de absorbie mare.
Saturarea organismului i eliminarea pulmonar au loc lent, ceea ce conduce la intoxicaii n
timp, prin acumulare. Din contra, atunci cnd hidrosolubilitatea este mic (coeficient
lipide/ap mare) benzenul saturarea organismului i eliminarea pulmonar au loc rapid,
producndu-se intoxicaii acute.
n cazul ptrunderii transcutanate, riscul intoxicaiei depinde deopotriv de
liposolubilitate i de hidrosolubilitate. De aceea, substanele cu coeficient lipide/ap mediu
eterul prezint un risc cutanat crescut.
Calea digestiv, este aplicabil att substanelor hidrosolubile ct i celor
liposolubile. Absorbia substanelor disociabile este influenat de pH-ul segmentului digestiv
respectiv.
Ionizare, pH-pK: acizii slabi (barbituric, salicilic), neionizabili n mediu acid, sunt
absorbii n stomac, pe cnd bazele slabe (alcaloizi, amfetamin, imipramin), puternic
ionizate n mediu acid, sunt absorbite n duoden, al crui mediu este alcalin.
Puritatea i concentraia. Impuritile pot influena aciunea toxic. Conservarea
necorespunztoare este capabil s modifice toxicitatea (acizii pstrai n recipiente de plumb,
dizolv metalul devenind toxici). Perioada de recoltare, aria geografic, condiiile
meteorologice influeneaz coninutul n principii active al plantelor. Operaiile de splare,
fierbere, etc., pot micora toxicitatea ciupercilor. Concentraia din produs determin, de
regul, creterea toxicitii; n unele cazuri ns, concentraiile mari micoreaz
permeabilitatea mucoasei reducnd apreciabil absorbia toxicului la acel nivel (ex. HCl conc.).
Calea i viteza de administrare. Calea de administrare influeneaz intensitatea
aciunii toxice, perioada de laten pn la apariia efectului toxic, precum i durata aciunii
toxice. Toxicitatea este influenat, de asemenea, de viteza de administrare a toxicului.
Interaciuni. Dou sau mai multe xenobiotice interacioneaz ntre ele sau cu anumii
constitueni ai alimentelor.
Efectul interaciunii poate fi: sinergic, cnd cele dou substane au acelai sens de
aciune. Dac suma efectelor este egal sau mai mic dect efectele celor dou substane
considerate separat (ex. bromuri alcaline) se obine sumare sau adiie. Dac suma lor este mai
mare, efectul reprezint o potenare (barbiturice + etanol, morfin + amfetamin).
Indiferent, cnd aciunea celor dou substane se desfoar independent una de alta,
fr a interaciona ntre ele.
Antagonic, cnd aciunea celor dou substane are sens contrar, rezultnd un efect
global micorat, nul sau inversat (de pild, anticolinergice + morfin, antiparkinsoniene +
fenotiazine etc.).
Competiia pentru proteinele plasmatice (n timpul transportului sau depozitrii) are
loc pentru centrii oferii de proteine, ntre dou substane, ambele cu afinitate pentru acestea.
122
Substanele cu afinitatea cea mai mare (cu caracter acid, ca fenilbutazona, acidul tricloracetic
sau bazic, ca imipramina, difenilhidantoina) ocup locul celeilalte substane. Aceasta,
mpiedicat s se fixeze,rmas liber, se echilibreaz la locul aciunii la un nivel mai ridicat,
rezultnd potenare. Astfel, warfarina se fixeaz pe proteinele plasmatice n proporie de 97%,
rmnnd liber numai 3%; dac o substan competitiv deplaseaz din fraciunea fixat nc
3%, concentraia formei libere se dubleaz, crescnd n mod periculos cantitatea de
protrombin la subiecii tratai cronic cu anticoagulante. Alt dezavantaj al deplasrii
competitive este ncrcarea ficatului (care metabolizeaz fraciunea rmas liber) i a
rinichiului (care o filtreaz glomerular). Dei dezechilibrul determinat de competiia pentru
proteinele plasmatice este doar tranzitoriu, totui, n cazul potenrii, efectele inhibiiei
pariale a fixrii pe proteine pot fi deosebit de grave;
Competiia pentru receptorii tisulari (sau centrii activi) determin modificri n
structura teriar a proteinei (cu reducerea numrului centrilor de fixare) dac unele substane,
mpiedicate s se fixeze pe proteina specific, se fixeaz pe ali centri.
Distribuia substanelor n cele trei compartimente hidrice poate suferi modificri.
Modificarea pH-ului (rezultat al proceselor metabolice sau al aciunii xenobioticelor) nu este
uniform n compartimentele extra- i intracelular. Ca urmare, datorit difuziei neionice, se
produce o trecere selectiv a xenobioticelor dintr-un compartiment ntr-altul. Astfel, substana
se acumuleaz n compartimentul cu pH mai alcalin i invers. Au loc modificri ale
concentraiei plasmatice i tisulare ale xenobioticelor, fr ca aceste modificri s se
repercuteze asupra absorbiei sau eliminrii (de exemplu, fenobarbitalul, cu aciune
intracelular, pierde din activitatea sa n prezena bicarbonatului de sodiu, realiznd o
concentraie plasmatic mai mare).
Inducia enzimatic reprezint accelerarea metabolizrii xenobioticelor ca urmare a
stimulrii sintezei i activitii enzimelor microzomiale. Inducia are loc n cazul hipnoticelor,
sedativelor, narcoticelor, stimulanilor SNC, analgezicelor-antipireticelor, etanolului, unor
pesticide, substanelor cancerigene etc.
Inhibiia enzimatic este fenomenul invers induciei i este observat la iproniazid,
catron, nialamin, cloramfenicol, compui organofosforici, ozon, tetraclorur de carbon.
Eliminarea este accelerat sau ntrziat prin:
Competiie pentru folosirea aceleai ci (penicilina i probenecidul folosesc, ambele,
transportul activ tubular, rezultnd ntrzierea eliminrii penicilinei, cu prelungirea activitii
sale);
Alcalinizarea sau acidifierea urinei (alcalinizareantrzie eliminarea penicilinei, cu
prelungirea activitii sale);
Alcalinizarea sau acidifierea urinei (alcalinizanii ionizeaz barbituricii, sulfamidele,
salicilaii, mpiedicndu-le reabsorbia i accelerndu-le eliminare; dimpotriv, acidifianii
grbesc eliminarea amfetaminei, imipraminei, antipirinei, bazelor purinice).
Faza toxicodinamic: interaciunile pot avea loc i n aceeai faz, la nivelul unor
receptori. Astfel, nalorfina intr n competiie cu morfina la nivelul receptorilor celulari;
alcoolul i barbituricele se poteneaz pentru c acioneaz la acelai nivel; diureticele
determin scderea ionilor de potasiu, potennd aciunea curarizantelor etc.
123
desfurarea reaciilor pe aceast cale este dej deficitar (prin lipsa sa G-6-PD), apar
hemoliz i methemoglobinemie, cu manifestrile clinice corespunztoare.
Bioritmul. n raport cu cu durata bioritmurilor fa de durata zilei, acestea se clasific
n ultradiene (peste 24 ore), ciecadiene (aprox. 24 ore) i infradiene (sub 24 ore). Ritmurile
ultradiene se mpart, la rndul lor, n sptmnale, lunare, anuale.
Factorii dependeni de mediu. Alimentaia, condiiile de confort, temperatura,
presiunea atmosferic, zgomotul, radiaiile ionizante, poluanii din mediu, fumatul etc. au, de
asemenea, efecte certe asupra toxicitii.
7. Combaterea efectelor toxice
Profilaxia intoxicaiilor. Prin aplicarea msurilor tehnico-organizatorice i igieno-sanitare de
profilaxie colectiv i individual se poate reduce numrul i gravitatea intoxicaiilor
profesionale:
Acestea prevd nlocuirea, acolo unde este posibil, a substanelor toxice i/sau
modificarea proceselor tehnologice nocive;
Legiferarea manipulrii substanelor nocive;
Educaia sanitar i instructajele periodice de protecia muncii;
Folosirea tehnologiilor de fabricare n instalaii ermetice i etane, a ventilaiei
adecvate (natural i mecanic), a semnalizatoarelor de alarm la depirea CMA etc.;
Supravegherea medical a muncitorilor prin: examen medical la angajare i
depistarea unor predispoziii la intoxicaii;
Examinarea toxicologic prin determinri ale toxicilor din atmosfera de lucru, ale
toxicilor i metaboliilor din lichidele biologice, ale indicatorilor biologici modificai sub
aciunea toxicilor; scopul final este stabilirea msurilor necesare pentru scderea
concentraiilor toxicilor sub limita admis;
Izolarea muncitorilor de mediul toxic (cnd trebuie lucrat ntr-un astfel de mediu)
prin profilaxie individual: echipament de protecie i masc, aplicarea de unguiente de
protecie, respectarea igienei individuale etc.
Tratamentul intoxicaiilor acute. Imediat dup evacuarea din mediul toxic, dac
intoxicatul prezint respiraie anormal, culoare neobinuit a tegumentelor (roie deschis,
albastr, cianotic), tulburri psihice, se trece, chiar la locul accidentului i n timpul
transportului ctre o unitate sanitar, la aplicarea msurilor de prim ajutor, i anume:
Eliberarea cilor respiratorii superioare se face prin desfacerea mbrcmintei de la
gt, ndeprtarea eventualilor corpi strini din gur (proteze), tergerea cavitii bucale,
aspirarea mucozitilor. Pentru pstrarea cilor aeriene libere se menine gura intoxicatului
ntredeschis pe tot timpul transportului, iar la intoxicatul incontient se asigur poziia de
decubit lateral cu ajutorul unei pturi fcute sul, ceea ce permite scurgerea lichidelor de
secreie i previne inhalarea de mucoziti etc.
Respiraia artificial se aplic dac respiraia nu revine la normal i se practic prin
prin procedeele gur la gur sau gur la nas (nu se aplic n intoxicaiile cu HCN, CN,
gaze toxice, compui organofosforici). Intoxicatul va fi plasat n poziie de decubit dorsal,
ntins pe un plan orizontal dur, cu capul n hiperextensie (cu ajutorul unui sul aezat sub cap).
125
126
Antidoturile se administreaz pe cale oral (nainte, o dat cu, sau dup spltura
gastric) pentru inactivarea toxicilor neabsorbii din tubul digestiv, sau pe cale oral ori
parenteral pentru inactivarea toxicilor deja absorbii.
Antidoturile care inactiveaz toxicii din tubul digestiv acioneaz prin:
Absorbie: crbunele activat adsoarbe unii toxici organici i anorganici. Adsorbia este
micorat sau mpiedicat de alimentele din stomac care astup porii particolelor de crbune,
dar nu este practic influenat de pH-ul mediului. Eficacitatea este maxim la 30 minute dup
ingerarea toxicului, dar antidotul este util i mai trziu, cnd toxicul a trecut de pilor.
Oxidoreducere:permanganatul de potasiu, n prezent rar folosit, este eficient n
intoxicaia cu morfin, atropin, cocain, barbiturice etc. Activitatea antidotic este accentuat
de mediul alcalin i limitat de causticitatea pentru mucoasa gastric.
Formare de compui insolubili (puin solubili): albuul de ou i laptele, precipit ca
albuminai unii alcaloizi i sruri de metale grele; scad efectele substanelor corozive i
caustice. Sunt contraindicate n intoxicaia cu toxici liposolubili (paration, solveni organici
etc.). Acidul tanic este rar folosit datorit hepatoxicitii sale; precipit alcaloizii, glicozizii,
srurile metalice. Srurile solubile de calciu (lactat, gluconat, clorur) precipit acidul oxalic,
acidul fluorhidric, fluorurile, ca sruri insolubile de calciu. Oxidul de magneziu precipit
anhidrida arsenioas, arseniii, ca sruri de magneziu insolubile i este indicat, de asemenea,
n intocsicaia cu acizi. Sulfatul de magneziu precipit srurile de bariu i de plumb, dnd
combinaii insolubile. Clorura de sodiu precipit azotatul de argint.
Formaree de compui solubili netoxici: unele substane antiacide, ca oxidul de
magneziu, sunt indicate la ngerarea de acizi; nu se recomADN administrarea per os de
bicarbonat de sodiu i carbonat de sodiu, deoarece n contact cu acizii degaj CO2, provocnd
distensie gastric soldat uneori cu perforaia peretelui stomacal deja lezat. Unele substane
antialcaline, cum ar fi soluia 1% de CH3COOH, se recomADN uneori la ngerarea bazelor
caustice; este ns mai eficace administrarea, chiar la locul accidentului, de ap potabil,
repetat, i provocare de vrsturi, deoarece mai trziu n intoxicaiile severe actul deglutiiei
nu mai este posibil. Soluia de spun este antidot pentru detergenii cationici, dnd compui
inactivi (dup care se provoac vrsturi).
Chelatorii capabili s stabileasc legturi cu cationii metalici prin electronii
neparticipani (de la N, -O, -SH) formeaz chelai ciclici, stabili, solubili, netoxici.
Stabilitatea crete cu cifra de coordinare a metalului. Utilizarea chelatorilor ca antidot este
limitat de : competiia ntre metalul toxic i metalele indispensabile organismului pentru
acelai chelator (spoliere de metale); competiia ntre chelatorul antidot i chelatorii naturali
(compui cu grupri SH, ca enzime, tioaminoacizi etc.) pentru acelai metal (ineficiena
antidotului).
Principalii chelatori cu rol de antidot sunt:
Srurile acidului etilendiaminotetraacetic (EDTA) (acid edetic) i compuii nrudii
sunt antidoturi n intoxicaii cu numeroase metale.
EDTACaNa2 (Edetamin) este antidot n intoxicaia cu Pb, precum i cu alte metale
(Ni, Cr, Fe, Cu, Mn, Cd, Co), dar puin eficace n cazul Hg. Are loc un schimb ionic ntre
calciu i acel metal toxic cu mai mare afinitate pentru complexon dect Ca. Se formeaz
127
COO
H2C
H2C
CH2
H2C
CH2
H2C
N-CH2-CH2-N
COO
Ca
OOC
N-CH2-CH2-N
COO
Co
OOC
CH2
EDTA-Co2
COONa
COO
Co
N-CH2
CH2
OOC
CH2
EDTA-CaNa2
CH2
N-CH2
Co
COO
NaOOC CH2 N
COONa
DCTA-CaNa2
CH2
CH2 CH2 N-CH2
COONa
COO
COO
Co
COONa
DTPA-CaNa2
COOH
H3C
CH
C
NH2
SH
H3C
H3C
H3C
CH
C
NH2
S
D Penicilamina
mercuric
D - Penicilamina
D - Penicilamina
128
Hg/2
Desferioxamina (Desferal)
Antidoturi cu grupri SH (care nu formeaz legturi coordinative):
Dimercaptopropanolul (DMP) a fost utilizat pentru prima dat (1941) ca antidot al
levizitei (se mai numete BAL, de la cuvintele British Anti-Lewisite). Este utilizat ca antidot
n intoxicaiile acute cu As i Hg (mineral), ns este mai puin eficient n intoxicaiile cu Cd,
Pb, Fe, Se, V, ca i n cazul leziunilor hepatorenale grave.
DMP leag metalul n stare ionic din combinaiile organice sau fixat pe SH din
enzime (proteine) (fig. 12). Acesta are dezavantajul spolierii organismului de unele metale
utile (Cu, Zn, Ca, Mg) i inactivarea insulinei, citocromoxidazei etc. datorit aciunii
reductoare a gruprilor SH.
Dimercaptosuccinatul de sodiu, este recomADNat n intoxicaia cu HgCl2 i a fost
NaOOC CH CH COONa
SH SH
ncercat i n intoxicaia cu Pb (1978). Este mai puin toxic dect DMP i nu spoliaz
organismul de microelemente.
Thiola (2-mercapto-propionilglicocolul), este indicat n intoxicaia cu compuii Hg.
CH3-CH-CO-NH-CH2-COOH
SH
129
130
131
1. Insecticide
Otrvirea poate fi produs i de insecticide diverse. Distrugerea insectelor se poate realiza cu
substane minerale, care sunt compui ai As, Pb, F, Se, HCN, H2S, PH3, AsH3, CS2, precum i
compui organici din diferite clase.
7.1 Insecticide organoclorurate
Insecticidele organoclorurate sunt derivai halogenai ai difeniletanului (DDT) i
ciclohexanului (HCH), derivai halogenai policiclici (Aldrin, Dieldrin, Clordan, Heptaclor) i
terpenici (Toxafen, Camfen policlorurat ). Insecticidele organoclorurate sunt pulberi cristaline
albe, inodore sau cu miros specific, insolubile n ap, solubile n solveni organici i lipide.
Sunt utilizate sub form de pulberi i soluii.
Toxicocinetic. Insecticidele organoclorurate ptrund n organism pe cale respiratorie,
transcutanat, digestiv. Fiind liposolubile, se localizeaz n esutul adipos, ficat, mduva
osoas, creier. Se depoziteaz n esutul adipos al omului, de unde se mobilizeaz prin
pierdere ponderal brusc, cu apariia intoxicaiilor. Dup biotransformare, acestea se elimin
urinar lent. Sunt toxici cumulativi.
Toxicodinamie. Insecticidele organoclorurate sunt neurotoxici. Iniial provoac
excitaie la nivelul SNC, cu tulburri motorii, apoi deprimani, cu afectarea centrilor
respiratori. DDT, Lindan, Aldrin i Dieldrin provoac tulburri cardiovasculare, n timp ce
132
Clordan, Aldrin, Dieldrin, Heptaclor sunt hepatotoxici. Acestea prezint un anumit potenial
cancerigen. Au o mare stabilitatea i, de aceea, las reziduuri n produsele alimentare sau se
acumuleaz n grsimea i carnea animalelor de unde trec la om, pentru a se acumula n
lipide. Dozele letale sunt: 20 g DDT, Clordan, 7-15 g Lindan, 7 g Toxafen, 3-5 g Aldrin,
Dieldrin, Heptaclor.
Cl
CH
Cl
Cl
H
Cl
H
Cl
CCl 3
DDT (diclordifenil-tricloretan)
Cl
H
Cl
H
Cl
C
Cl
Cl
H Cl
HCH (hexaclorciclohexan)
Cl
H
Cl
Cl
Cl
Aldrin
(hexaclor-hexahidro-endoexo-dimetan-naftalen)
Cl
Cl
Cl
Cl
C
Cl
Cl
H
Cl
Cl
Cl
Dieldrin
(hexaclor-epoxi-octohidroendo-exo-dimetan-naftalen)
Cl
Cl
Cl
Cl
Cl
Cl
Cl
Cl
Clordan
(octoclor-tetrahidro-endo-metan-indan)
Cl
Cl
Cl
Heptaclor
(heptaclor-tetrahidro-endo-metan-indan)
celelalte sunt insolubile. Sunt instabile chimic i se descompun n prezena apei, luminii i
oxigenului. Au remanen redus.
Toxicocinetic. Insecticidele organofosforice ptrund n organism pe cale respiratorie,
transcutanat i digestiv. Se absorb rapid i se distribuie n ficat, rinichi, plmni i mai puin
n muchi, miocard, creier, fr a se acumula. Biotransformarea se realizeaz prin desulfurare
oxidativ (Parationul trece n paraoxon, iar acesta se hidrolizeaz n dietilfosfat i pnitrofenol), hidroliz cu detoxifiere (Dipterex), N-demetilare (Rogor) sau N-dezalchilare
(OMPA). Sistox sufer desulfurare oxidativ, ambii izomeri formeaz sulfoxizi i sulfone, mai
toxici dect produii iniiali.
Toxicodinamie. Insecticidele organofosforice i manifest aciunea toxic prin
inhibarea acetilcolinesterazei (AchE), dup ptrundere n fanta sinaptic. n prima etap are
loc orientarea spaial: acetilcolina se plaseazcu polul su pozitiv (azot cuaternar) n dreptul
centrului anionic al AchE i cu polul negativ (gruparea electrofil C = O) n dreptul centrului
esterazic al AchE (constituit din azotul histidinei i hidroxilul serinei). ntr-o a doua etap, se
realizeaz apropierea i adsorbia de suprafa, deoarece ncrctura electric este de semn
contrar; la centrul anionic se manifest fore van der Waals cu azotul cuaternar, iar la centrul
esterazic, o legtur covalent ntre C (din C = O) i O (din OH al serinei). n etapa final, H
de la N histidinic trece pe oxigenul alcoolic, rezultnd colina care, fiind slab legat la centrul
anionic, se desprinde din complex. Radicalul acetil legat covalent reacioneaz cu apa
refcnd centrul esterazic i formare de acid acetic.
Viteza de hidroliz a acetilcolinei este foarte mare: 21015 molecule pe secund.
Inhibarea AchE de ctre insecticidele organofosforice are loc n mod similar. Gruparea
fosforic se plaseaz n dreptul centrului esterazic al AchE. Centrul anionic nu intr n reacie.
H5C2 O
H3C O
H5C2 O
NO2
H3C
H5C2 O
NO2
NO2
Paration
(p-Nitrofenil,dietilfosfat)
S
O (CH2)2 S C H
2 5
H3C O
H3C
H5C2 O
H5C2 O
O
O (CH2)2 S C H
2 5
H3C O
S CH2 CONHCH3
Rogor
C2H5
O C2 H5
TEPP
(Tetraetil pirofosfat)
H5C2 O
(Ditiofosfat de dimetil
N-metil-carbamoil-metil)
P O P
Sistax
Malation
(Ditiofosfat de dimetil,
1,2-dicarboxietil)
H5C2 O
H5C2 O
Metilparation
(p-Nitrofenil,dimetiltiofosfat)
S
H3C O
P
S CH COO C2H5
H3C O
CH2 COO C2H5
H5C2 O
H5C2 O
Diclorvos
(Diclorvinil,dimetilfosfat)
S
O
O
O CH = CCl2
H3C O
Paraoxon
(p-Nitrofenil, dietilfosfat)
H3C O
(H3C)2 N
(H3C)2 N
CH CCl3
OH
Dipterex
(Triclor,1-hidroxietilfosfat de dimetil)
P O P
H3C O
N(CH3)2
N (CH3)2
O
O
OMPA (Schradan)
(Octametil-tetraamida acidului pirofosforic)
134
135
H5C2 O
H5C2 O
H3C O
NO2
H3C O
H3C O
HCl
H3C O
H3C O
H5C2 O
O (CH2)2 S C H
2 5
H5C2 O
H3C O
S(O)
OH
H3C O
S CH COO C2H5
CH2 COOH
H3C O
HO
NO2
CH2 CCl3
OH
OH
OCH CCl2
P
S(O)
O (CH2)2 S C H
2 5
O
H5C2 O
H3C O
H5C2 O
H5C2 O
+ H2O
CH CCl3
OH
H3C O
H5C2 O
S
S
CH
H3C O
H3C O
(H3C)2 N
COOH
(H3C)2 N
CH2 COOH
S CH2 CONH2
P O P
N(CH3)2
N CH3
O CH OH
2
CH(CH 3)2
NHCH3
N
H3C
Carbaril
(metilcarbamat de alfa-naftil)
O
N(CH 3 )2
Izolan
(dimetilcarbamat de izopropil-metilpirazol)
Acetilcolina
+
(H3C)3N CH2
Centru
anionic
CH2 O
+
(H3C)3N
CH3
..
N....H O Centru
Histidina
CH2
CH2 O
CH3
+
N H O
esterazic
Serina
Acetilcolinesteraza (AchE)
+
(H3C)3N CH2 CH2 OH
..
N
HO C
CH3
CH3
H2O
AchE acetilata
..
N....H O
AchE reactivata
O2 N C6H4 O
RO
O2 N C6H4 O
RO
OR
..
N....H O
+
N H
AchE
O
OR
O2 N C6H4 OH
P
RO
..
N
HO
OR
O
RO
H2O
AchE fosforilata
..
N....H O
AchE reactivata
137
O
OR
7.3 Rodenticide
Pentru distrugerea roztoarelor i a altor vertebrate duntoare se utilizeaz substane vegetale
(Scilla maritima), minerale(fosforul alb, fosfuri de zinc sau aluminiu, derivai de arsen, sruri
de bariu sau taliu) i organice (stricnin, veratrin, produi de sintez).
HN
NH2
NaS
NH2
N-N = N
Promurit
(p-clor-fenildiazotiouree)
Clorpromurit
(3,4-diclor-fenildiazotiouree)
ANTU
(alfa-naftiltiouree)
CO-C(CH 3)3
Cl
(Cl)
Pival
(2-pivaloil-1,3-indandiona)
O
OH
C6H4Cl
CH
CH2
O O C
CH3
O
Cumaclor
3-(alfa-clorfenil-beta-acetiletil)-4-hidroxicumarina
OH
C6H5
CH
CH2
O
O C
CH3
Warfarina
3-(alfa-fenil-beta-acetiletil)-4-hidroxicumarina
O
O
Nidan
(2-naftil-1,3-indandiona)
Derivaii de tiouree sunt slab toxici la om. La ingerarea unei mari cantiti de
substan poate surveni moartea prin insuficien respiratorie sau cardiovascular. n
intoxicaia acut se recomand administrarea Na2S2O3 soluie 10%, 10 ml i.v.
Anticoagulantele de sintez (Warfarin, Cumaclor, Pival, Nidan) se comport ca
antimetabolii ai vitaminei K; urmare a blocrii sintezei complexului protrombinic, scade
protrombina cu apariia hemoragiilor. Antidotul este vitamina K1 (fitomenadiona), 50-100 mg
i.v., lent, n primele 24 ore.
Fluoroacetatul de sodiu, FCH2COONa, determin, prin sintez letal, formarea de
acid fluorhidric, cu manifestri toxice determinate de inhibarea ciclului Krebs i spolierea
organismului de Ca2+. Antidotul este glicerolmonoacetatul (Monoacetin), donor de acetat.
Analiza toxicologic. ANTU se extrage cu CHCl3, se hidrolizeaz alcalin i se identific
naftilamina rezultat prin reacia Griesz. Warfarina se extrage cu CHCl3 n mediu acid, se
nitreaz, se reduce NO2 la NH2, se diazoteaz i se cupleaz. Fluoroacetatul se identific,
dup hidroliz alcalin, prin F rezultat.
138
7.4 Erbicidele
Sunt substane minerale (NaClO3, CaCN2, CuSO4, NH2SO2ONH4, Na2B4O7, NaBO2) i
organice utilizate la distrugerea buruienilor, fr afectarea plantelor utile.
Ariloxiacizii (Diclordon, Agroxon, Triclordon) interfer n metabolismul glucidelor,
cu manifestri la nivelul sistemului nervos, miocardului, ficatului i rinichilor. Sunt toxici
cumulativi. Doza letal este de 6 g.
n intoxicaia acut se recomand spltura gastric i tratament simptomatic.
Derivaii ureici provoac intoxicaii acute (tulburri digestive, neurologice i hepatorenale) i
cronice (cefalee, astenie, dermatoze, agranulocitoz). Cel mai toxic reprezentant al clasei este
tioureea, care prezint i proprieti abortive.
HN
Cl
O
N
COOH
R1HN
NHR2 Propazin:
CH(CH3)2 CH(CH3)2
Alanap
(N-naftilamida acidului ftalic)
O-CH2-COOH
O-CH2-COOH
O-CH2-COOH
Cl
CH3
Cl
Cl
Cl
Cl
Cl
Triclordon (2,4,5 D)
Agroxon
Diclordon (2,4 D)
H3C
+
N CH3 . 2CH SO
3 4
+
N
Paraquat
139
OH
O2N
CH3
O2N
OH
CH-CH2-CH3
O2N
C6H11
CH3
NO2
NO2
DNOC
(dinitro-ortocrezol)
NO2
Dibutox
Dineb
(dinitro-o-sec.butilfenol)
(dinitro-o-ciclohexilfenol)
C2H5
C2H5
NO2
Izolare. Parationulse izoleaz din mediul acid cu solveni organici. Fiind volatili,
poate fi izolat i prin antrenare cu vapori de ap.
Izolare din urin: se aciduleaz 25-50 ml urin cu acid clorhidric 10% i se extrag de
minimum 2 ori cu volume egale de eter etilic. Extractele organice reunite sunt filtrate printrun filtru uscat. Filtratul este evaporat la sec pe baia de ap.
Izolare din snge: se trateaz 5-10 ml snge cu 5-10 ml acid tricloracetic 20%. Se
filtreaz, iar filtratul se extrage de minimum 2 ori cu cte 20 ml eter etilic. Extractele eterice
reunite sunt filtrate printr-un filtru uscat. Filtratul este evaporat la sec pe baia de ap la
50C.
Izolare din coninut stomacal: se tritureaz 5-10 ml coninut stomacal cu sulfat de
sodiu anhidru, pn la obinerea unei mase pulverulente. Se extrage masa cu o cantitate
dubl de eter de petrol. Extractul este evaporat la sec.
Izolare din organe: se extrag 20 g organe prin metoda Stas-Otto-Ogier. Parationul i
p-nitrofenolul (principalul su metabolit) se regsesc n eterul acid.
140
Izolare din produse alimentare sau corpuri delicte: se extrage o cantitate din produsul
de analizat cu un volum egal de alcool etilic, ntr-un borcan cu dop rodat, timp de 20 minute.
Se decanteaz i se filtreaz extractul alcoolic ntr-un balon cotat de un anumit volum i se
completeaz la semn cu alcool etilic.
Identificare. Teste preliminare:
Din coninut stomacal:
1. Se nclzete pe baia de ap o cantitate de coninut stomacal cu un volum dublu de alcool
etilic absolut. Se filtreaz pe sulfat de sodiu anhidru i se evapor filtratul la sec. Se trateaz
reziduul cu 1-2 ml hidroxid de sodiu 20% i se fierbe cteva minute. Prin hidroliz se
elibereaz p-nitrofenolul, care n mediul alcalin, prezint o coloraie galben, p-nitrofenolat
de sodiu, iar la acidulare, coloraia dispare p-nitrofenol.
2. Se concentreaz, prin evaporare pe baia de ap, o cantitate de coninut stomacal pn la
1/4 din volumul su. Se trateaz cu 1 ml perhidrol i se nclzete din nou. Dup distrugerea,
pe aceast cale, a substanelor organice care ar deranja reacia, se alcalinizeaz cu hidroxid
de sodiu 20% i se fierbe cteva minute, cnd apare o coloraie galben.
Din snge i urin: se deproteinizeaz 2-5 ml snge sau 5-10 ml urin cu acid
tricloracetic 20%. Se filtreaz, se alcalinizeaz filtratul cu hidroxid de sodiu 20% i se fierbe
cteva minute, cnd apare coloraia galben.
Reacii de culoare
1. Reacia Averell-Norris: reziduul se trateaz cu 2 ml acid tricloracetic 10%. Se trece ntr-o
eprubet i se adaug 1-2 granule de zinc amalgamat. Se nclzete 5-10 minute pe baia de
ap la fierbere. Se filtreaz, se rcete, se adaug 0,2 ml nitrit de sodiu 0,1%. Se agit i se
las n repaus 15 minute. Se adaug 0,2 ml N-naftiletilen-diamin (NKD) 0,1%, cnd apare o
coloraie violet.
2. Reacia de formare a derivailor chinoniminici:
2.1. Reziduul se trateaz cu 2 ml hidroxid de sodiu 5% i 0,5 g aliaj Dewarda (10 p. Cu, 9p.
Al, 1p. Zn, reductor n mediul alcalin, prin hidrogenul n stare nscnd pe care-l degaj),
cnd se formeaz prin reducerea p-nitrofenolului. Se adaug dup 15 minute, 0,5 ml
ortocrezol 1% n alcool i 1-2 ml ap oxigenat. Se obine, prin cuplarea p-nitrofenolului cu
o- crezolul, un derivat chinonimic de culoare albastr.
2.2. Reziduul se trateaz cu 2 ml hidroxid de sodiu 5%. Se adaug cteva cristale de ditionit
de sodiu, Na2S2O2. Dup cteva minute se distruge excesul de ditionit cu acid clorhidric
10%, apoi se adaug 1 ml alfa-naftol 1% n alcool, sau 1 ml oxin (8-hidroxichinolin) 1%
n alcool i 1 ml perhidrol. Se alcalinizeaz la pH = 8-9 cu hidroxid de sodiu 10%. Se obine,
prin cuplare p-nitrofenolului cu alfa-naftol sau oxina, un derivat chinoniminic de culoare
albastr.
2.3. Reacia de formare a p-nitrofenolatului de sodiu: se trateaz reziduul cu cteva picturi
de perhidrol i 3-5 ml hidroxid de sodiu 20%. Se nclzete, pe baia de ap, la fierbere , 15
minute. Prin hidroliz n mediul alcalin se formeaz p-nitrofenolatul de sodiu de culoare
galben.
Soluia se decoloreaz prin acidulare.
3. Cromatografie pe strat subire
141
C2H 5
C2H 5
NO2
6H(Zn +HCl)
HO
-2H2O
NH2
H
N
NaNO2, 2HCl
HO
-2H2O, NaCl
HO
Cl
(CH2)2 NH2
-HCl
NH
(CH2)2
NH2
Reactivi:
1. alcool etilic 96; 2. Acid clorhidric N; 3. Zinc pulbere; 4. Sulfat de cupru 2%; 5. Nitrat de
sodiu 0,1% (soluia se conserv maximum o sptmn la frigide); 6. Sulfamat de amoniu
5% ) soluia se conserv maximum dou sptmni la frigider); 7. N-naftiletilendiamin 1%.
8. Soluie standard stoc. Se cntrete ntr-un balon cotat de 100 ml care conine 10 ml
alcool etilic. (A g). Se adaug 3 picturi de paration i se recntrete balonul (B g). Se
completeaz la semn cu alcool etilic. Coninutul n paration va fi: mg paration/ml = 10(B-A).
9. Soluie standard de lucru. Se dilueaz soluia standard stoc cu alcool etilic, astfel ca 1 ml =
40 micrograme paration.
Recoltarea probelor. ntr-o alonj de recoltat pulberi se aeaz, n ordine, ncepnd de
la captul su ngust, urmtoarele: un tampon de vat un strat de 0,5 g pulbere celuloz care
142
alcool : HCl (1 : 1) care se colecteaz tot n eprubet. Se adaug n eprubet: 0,1 ml nitrit
0,1% se agit i se las n repaus 15 minute, 1 ml sulfamat, se agit i se las n repaus 15
minute, 0,5 ml NKD 1%, se agit i se aduce la 10 ml amestec alcool : HCl 1 N (1 : 1). Se
citete extincia dup 15 minute, la spectrofotometru, la = 550 nm n cuva de 1 cm, fa de
un martor al reactivilor.
Curba de etalonare se ntocmete ntre 10 i 50 g paration, prin puncte din 10 n 10, n
condiiile descrise mai sus.
Valoarea extinciei pentru probe se raporteaz la curba etalon, apoi se nmulete cu 5
deoarece s-a lucrat cu 1/5 din prob obinndu-se concentraia C a parationului, n g, n
prob.
Concentraia probei necunoscute se poate calcula i cu ajutorul factorul pant.
Eprubeta
Reactivi(ml)
1
2
3
4
5
Standard de lucru
0.25
0.50
0.75
1.0
1.25
Conc. g
10
20
30
40
50
Etanol 96
2.0
2.0
2.0
2.0
2.0
Acid clorhidric 10 %
2.0
Zinc pulbere
0,2g
Sulfat de cupru 2%
1 pictur
10 minute repaus.Filtrare
Nitrit de sodiu
0.1-agitare, 15 minute repaus
Sulfat de amoniu
1,0 se agit 15 minute repaus
NED 1%
Amestec alcool: acid clorhidric (1:1)
0.5 agitare
Absorbana
= 500nm
(M)
2.0
Calcul
Rezulatele se exprim nmg paration la 100 ml (g) snge sau organe i la 1000ml urin sau
coninut stomacal :
mg paration/100ml(g)snge,organe = C / loA
mg paration/100ml(g)urin,coninut stomacal = C / A
n care: C= concentraia parationuli, n g
A =masa (volumul) de produs luat n lucru, n g/ml
Metoda spectroscopic (formarea unui derivat chinoniminic). Parationul este
hidrolizat la p-nitrofenol. Acesta este redus cu ditionit sau aliaj Deward, la p-aminofenol. pAminofenolul este cuplat cu alfa naftol sau oxin, n mediu alcalin, cu formarea unui
derivat chinoniminic de culoare albastr. Sensibilitatea este de 1 g/ml.
144
C2H5
C2H5
3Na2S2O4, 4H2O
H 2O
NO2
HO
OC2H5
NO2
-6NaHSO3
OH
OC2H5
HO
NH2
3Na2S2O4 + HCl
OH
-H2O
OH
2H2S2O4 + 4 NaCl
2 SO2 + S + 2H2O
NaHSO3 + HCl
145
Eprubeta
Reactivi(ml)
Standard de lucru 100 mg
paration/ml
Conc.g
KOH 10%
Ditionit de sodiu
Acid clorhidric 10%
Hidroxid de potasiu 10%
Alfa naftol 1% n KOH 5 %
Absorbana
1
0.2
2
0.4
3
0.6
4
0.8
5
1.0
20
40
60
80
100
1.8
1.6
1.4
1.2
1.0
un vrf de spatul
1.0-agitare, 5 minute repaus
1.0-agitare
1.0-agitare 15minute repaus
=610nm
6(M)
2.0
Interpretarea rezultatelor
Doza letal de paration, la om, se nscrie ntre 20 i 100mg. ptrunderea n ochi a 0,5
ml paration poate fi fatal. n mai multe cazuri de intoxicaie sever s-au gsit valori urinare
de p-nitrofenoli de 1,6 mg/litru pn la 11,6 mg/litru. n 19 cazuri fatale s-au decelat
urmtoarele valori medii i extreme de paration: 9 (0,5 34) mg /100 ml snge; 10 (0,4 76)
mg/litru urin; 11 (0,1 - -120) mg/kg ficat.
146
Determinarea malationului
CH3
CH3
H
C
COOC2H5
H2C
COOC2H5
Izolare: Malationul se izoleaz din mediu acid cu solveni organici (eter etilic,
cloroform) dup tehnicile indicate de paration, din: produse biologice, produse alimentare,
corpuri delicte.
Dozare: Metoda spectrofotometric (formarea complexului hidroxamat Fe3+)
Malationul, coninnd gruparea carbonil, reacioneaz cu hidroxilamina n mediul
alcalin, cu formare de hidroxamai, care dau un complex rou cu clorura feric, de tip
Hantzsch, de forma, colorimetrabil:
O
R
Fe
HN
O
3
1
0.2
20
4.8
2
0.4
40
4.6
3
0.6
60
4.4
4
0.8
80
4.2
2.0
2.0-agitare, 5 minute repaus
2.5
1.0-agitare
ad 15
=500 nm
147
5
1.0
100
4.0
6(M)
5.0
2S
CH3
CH3
CH3
CH3
6NaOH
H
C
COOC2H5
H2C
COOC2H5
- 2NaOOC
C
H
C
H
-4 C2H5OH
COONa
2S
Na
-H2O
CuSO4
-Na2SO4
CH3
CH3
Cu
CH3
CH3
Eprubeta
Reactivi(ml)
1
2
3
4
5
Standard de lucru 100 mg malation/ml
0.2
0.4
0.6
0.8
1.0
Conc.g
20
40
60
80
100
Hidroxid de sodiu 6 N
1.0
Clorur feric 0.2%
25.0 se agit, repaus 5minute
Hidroxid de sodiu 20%
2.0-agitare, 5 minute repaus
Neutralizarea cu acid clorhidric 5N n prezen de fenoftalein 1 % n alcool
Sulfat de cupru 1%
2.0
Tetraclorur de carbon
5.0 se extrage de 2 ori
Se centrifugheaz extractele reunite
6(M)
-
0.1
0.1
Ap distilat (ml)
0.2
0.2
Se las n repaus 2 minute. Absena unei diferene de culoare ntre cele dou eprubete indic
prezena compuilor organofosforici sau altor inhibitori i colinesterazei.
Soluie de acid 5,5-ditiobis-2-nitrobenzoic: se dizolv 10 mg acid 5,5'-ditio-bis-2nitobenzoic n 100 ml tampon fosfat pH = 7,4.
n snge: n dou eprubete M i P se introduc:
149
Eprubeta/ reactivi
0.1
0.1
20
20
Se las n repaus 2 minute. Absena diferenei de culoare ntrecele dou eprubete indic
prezena compuilor organofosforici sau a altor inhibitori ai colinesterazei.
Dozare: Metoda spectrofotometric. Colinesteraza seric (pseudocolinesteraza,
BuCnE,EC 3.1.1.B) elibereaz prin hidroliza butirilcolinei, tiocolina, care reacioneaz cu
DTNB (acid 5,5-ditiobis-2-nitrobenzoic) dnd un compus colorat galben cu maximum de
absorbie la 412 nm (mM= 13,6).
Serul de analizat: Se dilueaz 1/11, pipetnd ntr-un tub de hemoliz 0,2 ml NaCl
0,9% i 0,02 ml aer (se folosete micropipeta destinat dozrii hemoglobinei). Serul de
analizat poate fi pstrat nediluat minimum o sptmn la 4.
Tehnica de lucru:
Pentru fiecare determinare se pregtesc 2 tuburi de hemoliz n care se pipeteaz:
M
P
Substrat(ml)
0.20
0.20
0.02
2.0
2.0
0.02
aspirare i refulare. Pentru determinri se folosesc 0,02 ml snge diluat 1/51, timpul de
incubare fiind prelungit la 40 minute. Se recomand ca determinrile s fie efectuate n
aceiai zi. U/L colinesterez = 10 . 410 x 412. Valorile normale pentru snge integrat sunt
cuprinse ntre 1600 i 4400 U/L.
Determinarea warfarinei
OH
H2
C
H
C
CO
CH3
C6H5
O
151
OH
H
C
CO
H2C
H2C
O
HN
(CH2)2
CH3
OH
H
C
6H
CO
OH
Zn , HCl
NO2
HNO3 , H2SO4
C6H5
O
H
C
CH3
H
C
NH2
CO
NaNO2
HCl
CH3
H2C
O
N
CO
CH3
Cl
NH2
OH
H
C
H2C
O
N
CO
CH3
H
N
(CH2)2
NH2
Reactivi: 1. Amestec sulfonitric (acid sulfuric concentrat: acid azotic fumans, 1 : 1); 2.
Eter etilic; 3. acid clorhidric 10%; 4. Zinc pulbere; 5. Nitrat de sodiu 0,1%; 6. Uree 10%; 7.
N-naftiletilendiamin (NKD) 1%; 8. Soluie standard de lucru, se cntrete 0,1000 g
warfarin i se aduce la 200 ml cu diclor etan sau aceton (1 ml = 500 g warfarin).
Modul de lucru: se trateaz reziduul cu 5 ml amestec sulfonitric i se ine pe baie de
ap la 60 - 80c timp de 15 minute, dup care se dilueaz cu 20 ml ap. Se tranzvazeaz
cantitativ ntr-o plnie de separare i se extrage de dou ori cu 20 ml eter etilic. Extractele
eterice reunite se filtreaz printr-un filtru uscat i se evapor la sec pe baie de ap. Reziduul
se dizolv n 10 ml acid clorhidric 10%, se adaug 0,2 g zinc pulbere i se nclzete pe baie
de ap la fierbere. Se las n repaus15 minute, apoi se filtreaz ntr-un balon cotat de 25 ml
aducndu-se cu ap distilat la semn. Se iau 5 ml soluie i se adaug 0,2 ml nitrat de sodiu
0,1%, dup 10 minute se adaug 2 ml uree 10%. Se agit i dup 10 minute se adaug 1 ml
NKD 1%. Se obine o coloraie roz-roie care se spectrofotometreaz dup 10 minute la 550
nm n cuva de 1 cm, fa de un martor.
n paralel se lucreaz o curb de etalonare cu concentraii prinse ntre 25 i 250 g
warfarin. Valoarea extinciei probei se raporteaz la curba de etalonare i se nmulete cu 5
(deoarece s-a lucrat cu 1/5 din prob) obinndu-se concentraia C n g de warfarin pe
prob.
Calculul: Rezultatele se exprim n mg warfarin pe 100 g produs biologic.
152
2+ S2O3
2-
SO3
E
S
CN-
S
E
S
2+ SO3 + SCN-
celular. Sngele rmne saturat cu oxigen, ceea ce explic culoarea roie-viinie a pielii n
intoxicaia acut fatal cu HCN. Complexul cian-citocromoxidaz disociaz pe msur ce
ionul CN este detoxicat la SCN. Ionul cian se combin i cu hemoglobina, dar n proporii
foarte mici, lipsite de importan toxicologic. Acesta reacioneaz cu MetHb cu formare de
CNMetHb (cianmethemoglobin); MetHb are afinitate mai mare pentru CN dect
ciancromoxidaza, iar CNMetHb este mai puin toxic dect CN. Dac doza nu este fatal,
ionul CN este eliberat progresiv de ctre citocromoxidaz sau methemoglobin i
transformat n tiocianat, compus netoxic care se elimin prin urin.
CN-
Cisteina
Acid 2-imino-4tiazolin-carbonic
Excreie urinar
SCN-
Excreie
CO2
Ciancobalamina
HCOOH
Metabolit C 1
Excreie urinar
Primul ajutor:
intervenia de prim ajutor comport extrem urgen;
accidentatul va fi scos imediat din zona contaminat i dus ntr-o ncpere cald i
bine ventilat;
ndeprtarea hainelor i decontaminarea tegumentelor cu ap i spun;
inhalarea imediat de nitrit de amil 1 fiol (pe compres); operaia se repet din 5 n
5 minute, cel mult 20 minute;
se va evita asfixierea prin cderea limbii, resturi alimentare etc;
n caz de stop respirator se face respiraie artificial cu oxigen pur (este
contraindicat respiraia gur la gur), concomitent cu inhalarea de nitrit de amil 1 fiol (pe
compres), care se repet din 5 n 5 minute, cel mult 20-25 minute;
n intoxicaia prin ingestie se va proceda astfel:
inhalarea imediat de nitrit de amil o fiol (pe compres); operaia se repet din 5 n
5 minute, cel mult 25 minute;
spltur gastric cu KMnO4 1/5000, H2O2 3% i Na2S2O3 1%;
cnd spltura gastric nu este posibil, se recomand ingerarea de cantiti mari din
aceleai soluii, urmat de provocarea de vrsturi;
administrarea de purgative saline;
oxigenoterapie;
se va anuna medicul care va conduce mai departe tratamentul necesar.
Analiza toxicologic folosete:
hrtie indicator bazat pe reacia de formare a ferocianurii ferice albastre;
detectare cu tuburi indicatoare Drger;
dozare argenimetric. Se recolteaz aerul ntr-un vas absorbant care conine o
soluie de AgNO3 N/20 acidulat cu HNO3, efectundu-se apoi dozarea gravimetric sau
volumetric prin metoda Volhardt;
dozarea colorimetric a izopurpurinei formate prin captarea acidului cianhidric ntro soluie de acid picric i alcalinizare cu Na2CO3. Compararea se face cu o scar etalon
artificial de bicromat de potasiu,;
metoda bazat pe transformarea n bromcian i apoi aldehid glutaconic, urmat
de cuplarea cu acid barbituric i spectrofotometrare;
reacia Schnbein hrtia mbibat cu soluie de CuSO4 i tinctur de guaiac se
coloreaz n albastru;
reacia Castaldi hrtia mbibat cu soluie de acetat cupric i benzidin se
coloreaz n albastru;
din medii biologice (corpuri delicte) se izoleaz prin distilare n mediu de acid
tartric; se capteaz distilatul n NaOH i se identific CN prin reacia Liebig (formarea
tiocianatului feric) i prin reacia Chelle (formarea albastrului de Prusia).
Cteva cazuri de otrvire. Cianura determin hipoxie intracelular datorit legrii
reversibile de citocrom oxidaza mitocondrial. Semnele i simptomele intoxicaiei cu cianur
apar de obicei n mai puin de 1 minut dup inhalare i n cteva minute dup ingestie.
Manifestrile precoce includ anxietate, dureri de cap, ameeal, incapacitatea de concentrare
155
i midriaz (Hamel, 2011). Dac hipoxia progreseaz, scade nivelul de contiin, apar
convulsii i com. Pielea poate arata normal sau uor cenuie, iar saturaia cu oxigen arterial
poate fi normal. Tratamentul n Statele Unite l reprezint antidotul pentru cianur cu
hidroxicobalamin. Hidroxicobalamina detoxific cianura prin legare cu aceasta i excretare
prin urin a ciancobalaminei netoxice. Pentru c reacioneaz cu cianura fr s formeze
methemoglobin, hidroxicobalamina poate fi utilizat pentru a trata pacienii, fr a
compromite capacitatea de transport a oxigenului de ctre hemoglobin.
Un brbat n vrst din Sri Lanka a fost njectat cu o sering n abdomen n timp ce
doarmea. Acesta a dezvoltat progresiv insuficien respiratorie i com i a murit o or mai
trziu (Abeyasinghe et al. 2011). Constatrile la autopsie i analizele de laborator au
confirmat moartea ca fiind cauzat de intoxicaia cu cianur. Astfel cianura poate fi o metod
de asasinare, cu o moarte rapid cu insuficien respiratorie progresiv, dup injectarea unei
substane. In suicidare, accident i crim este frecvent intoxicaia cu cianur prin ingestie, nu
prin injectare.
Au mai fost studiate 17 sinucideri cu cianur n New York ntr-un interval de zece ani
(Gill et al. 2004). Au predominat oamenii de tiin, bijutieri i lucrtorii n metal.
Paisprezece din cele 17 victime au fost brbai. S-a folosit un test de culoare pentru screeningul pentru cianur cu confirmare i determinare cantitativ prin cromatografia de gaz.
A fost prezentat un caz de sinucidere mai puin obinuit prin ingerarea oral de
cianur de potasiu i inhalare de HCN (Musshoff et al. 2011). Un comerciant de 48 de ani a
fost gsit mort n maina sa. Un miros penetrant de migdale amare a fost observat la
deschiderea uilor. Un aragaz de camping i o oal de gtit care conineau cantiti mari de
cristale albastre inchis au fost gsite n zona picioarelor n main. O pulbere alb a fost gsit
pe degete i n jurul gurii. n plus, s-au gsit flacoane care conineau tipuri ferocianur de
potasiu i diferii acizi, mpreun cu informaii de pe internet, despre ferocianur i cianur de
potasiu.
La autopsie s-au observat hemoragii i eroziuni ale mucoasei tractului respirator,
esofagului i stomacului. Concentraiile de cianur au fost 0,2 mg / l n coninutul stomacal,
0,96 mg / kg n esutul cerebral, 2.79 mg / kg n plmni i 5,3 mg / l n snge. Acest caz se
refer la o persoan care nu a fost familiarizat cu substane chimice, dar care a putut obine
informaii profesionale prin intermediul internetului, pentru o sinucidere complex.
Antidoturi. Compuii care conin grupri carbonilice pot reaciona uor cu cianurile
(Moore et al. 1986). Acidul piruvic, un acid alfa-cetocarboxilic, are efecte antagonice fa de
cianur. Se sugereaz c mecanismul su de aciune se bazeaz pe capacitatea sa de a
reaciona cu cianuri. Acidul alfa-ketoglutaric, de asemenea, un acid alfa-cetocarboxilic, a fost
evaluat pentru capacitatea sa de a contracara efectele letale de cianur (Bhattacharya et al.,
2001.). Acesta a crescut valoarea DL50 pentru cianur (6,7 mg / kg) de cinci ori, o valoare
statistic echivalent cu cea constatat la soareci pretratai cu tiosulfat de sodiu i nitrit de
sodiu. Amestecul de acid alfa-cetoglutaric i tiosulfat de sodiu a crescut valoarea DL50 a
cianurii la 101 mg / kg. Adaosul de nitrit de sodiu la acidul alfa-cetoglutaric i tiosulfat de
sodiu a crescut valoarea DL50 a cianurii la 119 mg / kg. Spre deosebire de nitrit de sodiu, nu
induce formarea de methemoglobin. Reiese din aceste studii c administrarea de acid alfa
156
NH2
NH2
NH2
+ 2 CH3-COOH +[O]
NH2
+ CH3-COOH + H2O
NH
NH
157
159
Eprubeta
1
2
0.7
0.9
4
1.3
5
1.5
6
-
Concentraie, g
NaOH 0.1%
Fenolftalein 1% sol. alcoolic
H2SO4 0.1 N
FeSO4 2 %
70
90
110
130
4.3
4.1
3.9
3.7
1 pictur
2.0 agitare, 5-10repaus
1.0 agitare
150
3.5
5.0
HCl
Reactivi(ml)
-
3
1.1
=720nm
Metoda colorimetric pentru sulfocianur
Metoda Liebig se bazeaz pe determinarea sulfocianurilor din snge (aer) i urin; ionul
SCH- apare prin metabolizarea HCN sau n procesul de putrefacie. n mod fiziologic se
produc sulfocianuri n organism, nct la persoanele normale se gsesc urmtoarele condiii:
- n ser: la nefumtori pn la 2 mg sulfocianur/100ml;
la fumtori pn la 3 mg sulfocianuri/100 ml;
- n urin: la nefumtori pn la 15 mg sulfocianuri/litru;
la fumtori pn la 26 mg sulfocianuri/litru.
Se consider ca indice de expunere la compui ai cianului nivele sanguine peste 8 mg/100 ml
i eliminri urinare peste 30 mg/litru.
Cnd se urmrete CN- n produse cadaverice este necesar transformarea HSCN n HCN
prin oxidare cu acid cronic i separare prin distilare a HCN (matoda Chelle). Astfel, HSCN
formeaz complexul Fe(SCN)3 (reacia Liebig).
Reactivi
1. Acid triclor acetic 1%;
2. Nitrat feric 5%; se dizolv 12,5 g nitrat feric n 250 ml acid azotic 1 N.
3. Standard: sulfocianur (tiocianat) de potasiu 0,1% (aproximativ 1 ml = 1 mg).
4. Standard de lucru: se titreaz soluia stoc cu AgNO3 0,1 N i se calculeaz concentraia
exact de KSCN. Se dilueaz cu ap astfel, nct s se obin o soluie 1 ml = 25 g KSCN.
Se prepar extemporaneu din soluia stoc care se titreaz n aceeai zi.
Recoltarea probelor
Se recolteaz snge prin puncie venoas, se centrifugheaz timp de 5 minute la 3000
turaii/minut Se colecteaz urin n vas curat. Este indicat s se cerceteze sulfocianurile n
aer i n urin ct mai curnd dup expunerea probabil (pn la 24 ore).
Modul de lucru. Se pipeteaz 2 ml aer i se adaug 2 ml acid tricloracetic 10%, se
agit i dup 10 minute se filtreaz. Se pipeteaz 5 ml urin i se adaug 5 ml acid triclor
acetic 10%, se agit, dup 5 minute se filtreaz. La 2 ml filtrat (corespunznd la 1 ml ser sau
urin) se adaug 3 ml nitrat feric i se agit. n paralel se face un martor al reactivilor, cu 2
160
Eprubeta
1
2
0.4
0.8
4
1.6
5
2.0
6(M)
-
Conc.g
Ap distilat
Fe(NO3)3 5 % n HNO3 1 N
10
20
30
40
1.6
1.2
0.8
0.4
3.0 agitare 10 repaus
50
-
2.0
Reactivi(ml)
-
Reactiv (ml)
Filtrat de urin
Fe(NO)3 5 % n HNO3 1N
Ap distilat
Agitare, repaus 10 =470 nm
Eu
E0
Eprubeta
Proba
2.0
3.0
-
Martorul urinei
2.0
3.0
3
1.2
Martorul reactivilor
3.0
2.0
Calculul
- pentru ser: ES . A = CS, n g KSCN.;
- pentru urin: (EU E0) . A = CU, g KSCN.
Rezultatele se exprim n mg sulfocianur (KSCN) la 100 ml ser sau la litru urin. ntruct
proba luat n lucru reprezint 1 ml ser sau urin, rezultatele sunt:
mg sulfocianur/100 ml ser = CS . 0,1
mg sulfocianur/litru urin = CU
n cazul mai multor determinri, cnd se lucreaz n serie, pentru a nu se mai face
pentru fiecare prob i un martor al urinei, se procedeaz astfel: se lucreaz probele, se
citete extincia EP i api se adaug n fiecare prob 1 2 picturi Hg(NO3)2, i soluie
saturat i se citete EU.
5SCN- + Fe3+ Fe(SCN)3
Fe(SCN)3 + Hg(NO3)2 Hg(SCN)2 + Fe3+ + 2 NO3- + SCN-
161
Determinri curente
Cromatografia capilar cu detector cu captur de electroni a fost folosit la determinarea
acidului cianhidric din fumul de igar (Xu et al. 2006). Lindsay i OHare (2006) determin
amperometric acidul cianhidric din snge.
Bibliografie specific
Abeyasinghe, N. L., Perera, H. J. M., Weerasinghe, D. S. K. Case report - Death by
subcutaneous injection of cyanide in Sri Lanka. J. Forensic Legal Med., 18, 182-183,
2011.
Bhattacharya, R., Kumar, D., Sugendran, K., Pant, S. C., Tulsawani, R. K., Vijayaraghavan,
R. Acute toxicity studies of -Ketoglutarate: a promising antidote for cyanide
poisoning. J. Appl. Toxicol., 21, 495 499, 2001.
Drochioiu, G., Arsene, C., Murariu, M., Oniscu, C. Analysis of cyanogens with resorcinol and
picrate. Food and Chemical Toxicology, 46, 35403545, 2008.
Drochioiu, G., Mangalagiu, I., Avram, E., Popa, K., Dirtu, A. C., and Druta, I. Cyanide
reaction with ninhydrin: Evaluation of interference and mechanisms. Analytical
Sciences, 20, 1443 1447, 2004.
Drochioiu, G. Highly selective and sensitive reaction of cyanide with 2,2-dihydroxy-1,3indanedione. Analytical and Bioanalytical Chemistry, 372(5-6) 744 747, 2002;
Drochioiu, G. Fast and highly selective determination of cyanide with 2,2-dihydroxy-1,3indanedione. Talanta, 56(6) 1163 1165, 2002;
Drochioiu, G., Mangalagiu, I., Tataru, V. Specific spectrophotometric determination of
hydrocyanic acid in the environment. Analyst, 125, 939-941, 2000.
Drochioiu, G., Popa, K., Humelnicu, D., Murariu, M., Sandu, I., Cecal, A. Comparison of
various sensitive and selective spectrophotometric assays of environmental cyanide.
Toxicol. Environ.Chem., 90, 221-235, 2008;
Drochioiu, G., Oniscu, C., unel, V., Popa, K., Cozma, D. Cyanide assay based on its novel
reaction with resorcinol and picric acid. Eur. J. Min. Proc. Environ. Prot., 3(3) 291296, 2003;
Drochioiu, G., Mangalagiu, I. Assay of cyanide in biological materials using 2,2-dihydroxy1,3- indanedione. Pakistan J. Appl. Sci., 2(6) 658 660, 2002;
Drochioiu, G., Mangalagiu, I., Popa, K., Avram, Ecaterina, Molnar, Ramona, and Druta, I.
Novel reactions of cyanide with 2,2-dihydroxy-1,3-indanedione. Rev. Roum. Chim.,
50(1), 53 59, 2005
Drochioiu, G., unel, V., Grebinian, D., Vlahovici, A., Saiz, V., Murariu, M. Dosage des
ions cyanure totaux par linhibition de lactivit catalasique. Rev. Roum. Chim., 49(2)
121-125, 2004;
162
Drochioiu, G., Pui, A.,Dnac, R., Bsu, C., Murariu M. Improved spectrophotometric assay of
cyanide with picric acid. Rev. Roum. Chim., 48(8) 601-606, 2003;
Gill, J. R., Marker, E., Stajic, M. Suicide by cyanide: 17 deaths. J. Forensic Sci., 49, 826-828,
2004.
Hamel, J. A review of acute cyanide poisoning with a treatment update. Critical Care Nurse,
31, 72-82, 2011.
Lindsay, A. E., OHare, D. The development of an electrochemical sensor for the
determination of cyanide in physiological solutions. Anal. Chim. Acta, 558 , 158-163,
2006 .
Mihaescu, I. M., Drochioiu, G. Cyanide reaction with ninhydrin: the effect of pH changes and
UV-Vis radiation upon the analytical results. Rev. Roum. Chim., 54(10) 841-845,
2009.
Moore, S. J., Norris, J. C., Ho, I. K., Hume, A. S. The efficacy of alpha-ketoglutaric acid in
the antagonism of cyanide intoxication. Toxicol. Appl. Pharmacol., 82, 40-44, 1986.
Musshoff, F., Kirschbaum, K. M., Madea, B.An uncommon case of a suicide with inhalation
of hydrogen cyanide. Forensic Sci. Intern., 204, E4-E7,
DOI: 10.1016/j.forsciint.2010.05.012, 2011.
Nagasawa, H. T., Goon, D.J., Crankshaw, D. L., Vince, R., Patterson, S. E. Novel, orally
effective cyanide antidotes. J. Med. Chem., 50, 6462-64624, 2007.
Xu, J., Tong, H., Yan, X. Y., Du, S., Yao, Z., Liu, S. Sensitive determination of cyanide in
cigarette smoke by capillary GC with a microECD. Chromatographia, 64, 609-612,
2006.
163
Drogurile au fost consumate de vraci, amani, iniiai pentru a intra n planurile superioare
ale existenei, dup cum au afirmat acetia. Acestea pot ns fi folosite de laici, care,
necunoscndu-le valoarea adevrat i abuznd utilizarea lor ajung la epuizarea corpului,
degradarea sa i chiar la moarte. O carte interesant despre toxicologia medico-legal a
drogurilor a fost scris de mai muli specialiti sub redacia Castiglioni, S., Zuccato, E.,
Fanelli, R n 2011. Aceasta cuprinde ntre altele, metabolismul i excreia drogurilor folosite
de oameni (Manuela Melis, Sara Castiglioni, i Ettore Zuccato). Dintre droguri este studiat
intens cocaina i metaboliii si (Alexander L.N. van Nuijs, Lieven Bervoets, Philippe G.
Jorens, Ronny Blust, Hugo Neels i Adrian Covaci). Pentru depistarea drogurilor autorii
recomand spectrometria de mas i spectrometria de mas cuplat cu lichid-cromatografia
(Flix Herndez, Juan V. Sancho, and Lubertus Bijlsma). Prezena drogurilor n apa de but
sau n particolele de praf este, de asemenea discutat.
Ioduri duble. Reactivul Bourchardat (Wagner) este o soluie de iod- iodurat, KII2: 2
g de iod, 2 g iodur de potasiu se solv n ap distilat 100 ml. Reactivul Bourchardat d
precipitate colorate cu toi alcaloizii salifiai, cu excepia cafeinei. Precipitatele sunt solubile
n exces de iodur de potasiu i n alcool. Reactivul se pstreaz indefinit n sticle brune,
bine nchise.
Reactiv Drangendorff este iodobismutat de potasiu, K(BiI4)H2O: 5 g subnitrat de
bismut se dizolv n 40 ml ap distilat la care se adaug 10 ml acid clorhidric concentrat,
dup care se adaug 100 ml iodur de potasiu 40%. Reactivul este stabil numai n mediu acid
i precipit prin diluare cu ap, precipitatul redizolvndu-se prin acidulare. In timp
elibereaz iod, care se extrage prin agitare cu cloroform.
Reactivul Drangendorff d cu clorhidraii alcaloizilor precipitate amorfe, roiiportocalii, parial solubile prin nclzire i care reprecipit la rece. Complecii formai sunt
solubili n cloroform, aceton, acetat de etil, ciclohexanon etc., soluiile putnd fi folosite la
determinri colorimetrice.
Reactivul Marm (iodocadmiat de potasiu K2 (CdI4) : 5 g iodur de cadmiu se dizolv
ntr-o soluie cald de 10 g iodur de potasiu n 30 g ap, apoi se completeaz cu ap distilat
la 110 ml. Acest reactiv formeaz cu alcaloizii precipitate albe sau glbui, solubile n exces
de reactiv. Cafeina nu precipit, iar atropina nu precipit dect n soluii destul de
concentrate.
Reactivul Mayer (iodomercuriat de potasiu, K2HgI4): 13,52 g clorur mercuric, 48,8
g iodur de potasiu se dizolv n 1000 ml ap distilat. Reactivul Mayer d cu alcaloizii
precipitate albe pn la galben deschis, amorfe sau cristaline.
Reactivul Walzer (iodomercuriat de potasiu): la soluia de iodur de potasiu 10% se
adaug iodur de mercur solid, pn la saturare. Acest reactiv este mai sensibil dect
reactivul Mayer.
Cloruri ale metalelor grele i sruri duble. Clorura de aur (soluie apoas de diferite
concentraii: 5%, 10%, 30%, 40%) d precipitate de cloroaurai cu alcaloizii cu formula Au
Cl3HClAlc. de culoare galben sau alb. Clorur de platin (soluie apoas 5%) d
precipitate de cloroplatinat de alcaloizi, cu formula PtCl42HClAlc. Clorura de mercur
(soluie apoas 5%) formeaz cloromercurai ai alcaloizilor, care sunt precipitate albe. Sarea
lui Reinecke [Cr(NH3)2(SCN)4 NH4] H2O (4 g n 100 ml ap distilat) d precipitate cu
soluii clorhidrice de alcaloizi. Heteropoliacizii dau precipitate cu alcaloizii; datorit masei
lor moleculare mari se obin precipitate abundente, care pot fi folosite i pentru dozarea
gravimetric a alcaloizilor. Aceast metod este ns greoaie i nu se mai folosete. Se
prefer metodele instrumentale moderne.
Rectivul Scheibler (acid fosfotungstic): se dizolv 4 g wolframat de sodiu n 20 ml
ap, apoi se adaug 1 g acid fosforic 50% . Reactivul d precipitate albe cu alcaloizii.
Mai sunt i ali reactivi care au fost folosii n trecut, cu ar fi reactivul Schultze (acid
fosfoantimonic, 3 g corur de stibiu, 9 g fosfat acid de sodiu se dizolv n 100 ml ap
distilat) care formeaz precipitate albe cu alcaloizii nsau reactivul Sonnenschein (acid
fosfomolibdenic).
165
Aconitina
Atropina
Cafeina
Chinina
Cocaina
Codeina
Colchicina
Fizostigmina
Morfina
Nicotina
REACTIV
HAGER
precipit
numai
n
soluie
concentat
precipitat
galben numai
n
soluii
concentrate
precipit
numai
n
soluii
concentrate
precipitat
amorf
(1:40000)
precipitat
galben
(1 : 1000)
precipitat
galben
(1 : 225)
precipit
numai
n
soluii
concentrate
precipit
numai
n
soluii
concentrate
nu precipit
Precipitat
galben numai
n
soluii
REACTIV
MAYER
precipitat alb
n
soluii
diluate
REACTIV
DRAGENDORFF
precipitat galben
(1 : 40000(x)
REACTV
BOUCHARDAT
precipitat brun
(1:7000)
galben-rocat, trece
n galben intens
(1:01000)
brun-rocat
(1:3000)
nu precipit
nu precipit
precipitat
brun
numai n soluii
concentrate
precipitat alb
(1:125000)
precipitat rou
(1:50000)
rou brun
(1 : 140000)
precipitat brun
(1 : 50000)
(1 : 50000)
precipitat rou
(1:30000)
precipitat brun
(1:60000)
precipit
numai
n
soluii
concentrate
precipitat alb
(1: 5000)
(1:3000)
precipitat brun
(1:25000)
precipit
precipitat
rocat
(1:25000)
(1:2500)
rou - galben
(1:5000)
precipitat rou, trece
n alb-cenuiu (1 :
40000)
brun - rocat
(1:25000)
precipitat brun rocat
(1:50000)
precipitat alb
(1:2500)
166
brun
Papaverina
Pilocarpina
Stricnina
Teobromina
concentrate
precipitat
galben
(1 : 500)
precipit
precipitat
galben
(1 : 20000)
nu precipit
precipitat alb
(1:15000)
precipit
precipitat alb
(1:15000)
nu precipit
Precipitat
portocaliu
(1 : 10000)
precipit
precipitat
intens
(1 : 25000)
-
rou-
galben
precipitat
rounchis
(1 : 50000)
precipit
Precipitat
brunrocat
(1:50000)
precipitat
brun
numai n soluii
concentrate
OH
NO 2
HN
C6H4
O2N
NO2
OH
NO 2
NO2
ALCALOID
Atropina
Brucina
Chinina
Colcichicina
H2SO4
fr culoare trece
n
glbui i la cald n
brun
La cald albastruviolet
galben
Heroina
Dionina
Morfina
la cald purpuriu
Nicotina
Papaverina
la cald violetalbastru
Fr culoare,cu
KOH
trece n galben
Galben pal
Cocaina
Codeina
Pilocarpin
Stricnin
Picrotoxin
REACTIVI DE CULOARE
HNO3
rou- trece n galben
-
Reactiv Erdmann
-
galben-verzui
la cald albastru
albastru,cu KOH
trece n rou
galben, verde pal,
albastru
orange
rou trece n
brun nchis
n timp galben apoi
rou
albastru-verzui
galben verzui
rou orange trece n galben
rocat
glbui, trece n rou ntunecat
Galben
La cald trece n galben
168
Alcaloid
R.Frhde
Atropina
Brucina
Rou-brungalben
Chinina
Cocaina
Codeina
Colchicina
Heroina
Dionina
Morfina
Nicotina
Papaverina
Pilocarpina
Stricnina
REACTIVI DE CULOARE
R.Mandelin
R.Marquis
Rou,trece in
galben
Maroniu,la
cald verde
Rou
Galben
murdar,
la
cald
albastru
Galben
trece n
galben
verzui
Purpuriu
Verde, trece
n
albastru
Violet,trece
n
verde apoi
n
galbenbrun
n timp albroscat
Verde,
albastru,
la cald rou
viiniu
-
R.Lafon
Galben,
rou
La cald brun
(strlucitor)
n timp, rou, la
cald
portocaliu
Rou -carmin
trece
n
albastruviolaceu
Verde
smarald
Albastruverzui
trece n brun
Galben citrin
Galben itrin, la
cald
galbenbrun
Verde
Violet
rocat,la
cald trece n
albastruviolaceu
Verde
Galben trece
lacald n verde
Albastru,violet
murdar
Verde
Rocat, trece n
albastruviolaceu
Roucarmin,trece
n
violetalbastru
Albastru,
verzui, la cald
trece n brun
Verzui, trece
n albastru
Verde,
albstrui,
albastru
Rou trece n
orange
Galben,verde,
albastru
Violet,albastru
n timp glbui,
apoi rou
n timp,la cald
169
R.Wasiky
Rou
cireiu,
violet
Galben
Verzui,
albastru,
la cald violet
Rou
Rou
trece n rou
Galbenviolaceu
Picrotoxina
brun-verzui
-
Rou-violet
H3C
CH3
C6H5
Calea de administrare. Unii utilizatori freac praful de-a lungul liniei gingivale sau pe
un filtru de igar, care este apoi fumat i care amorete gingiile i dinii (fumuri de cacao).
O alt metod este depunerea pe o hrtie, rulare i nghiire (paraut sau bomba de zpad).
Frunzele de coca sunt de obicei amestecate cu o substan alcalin (cum ar fi varul) i
introduse ntr-un tampon, care este reinut n gur ntre gingie i obraz. Sucurile sunt
absorbite lent de mucoasa din interiorul obrazului i prin tractul gastro-intestinal atunci cnd
este nghiit.
Insuflarea pe nas este metoda cea mai comun de ingestie a pudrei de cocain n
lumea occidental. Totui, injectarea drogului ofer cele mai nalte concentraii n snge i n
cel mai scurt timp.
Mecanismul de aciune al cocainei. Farmacodinamia se refer la aciunea toxicului
asupra organelor i celulelor corpului. Aciunea cocainei implic relaia sa cu
neurotransmitori (este inhibat absorbia monoaminelor serotonin, dopamin,
noradrenalina). Se blochez proteina transportator de dopamina. Cocaina se leag strns de
transportatorul de dopamina cu formarea unui complex care blocheaza funcia
transportatorului i, astfel, dopamina se acumuleaz n fanta sinaptic. Expunerea prelungita
la cocain poate contribui la tulburri depresive
Cocaina este metabolizat, n principal n ficat, iar aproximativ 1% este excretat sub
form nemodificat n urin. Metabolismul este dominat de hidroliza esteric, astfel nct
metaboliii eliminai sunt benzoilecgonin, principalul metabolit, i ali metabolii n cantitati
mai mici, cum ar fi ester metilic al ecgoninei i ecgonina. Metabolii de importan minor
sunt norcocaina, p-hidroxicocaina, m-hidroxicocaina, p-hidroxibenzoilecgonina i mhidroxibenzoilecgonina.
170
9.3 Heroina
Heroina sau diacetilmorfina este un drog opioid sintetizat din morfin, care este un derivat al
opiului din mac. Este convertit metabolic la morfin n corp. Forma cristalin, alb,
considerat heroin pur este clorhidratul diacetilmorfinei. Aproximativ 87% din producia
mondial de opium i derivai ai acestuia, inclusiv heroin , pare a fi produs n Afganistan.
Exist 50 milioane de consumatori regulai de heroin, cocain i droguri sintetice.
Heroina este prescris ca analgezic puternic n UK i se administreaz subcutanat,
intramuscular sau intravenoas. Utilizarea sa include tratamentul durerii acute, cum ar fi n
traume fizice severe, infarct miocardic, durere post-chirurgical i dureri cronice, inclusiv n
stadiu terminal al cancerului.
Heroina este folosit ca drog de agrement pentru relaxare i euforia intens produs.
Totui, tolerana se dezvolt rapid, iar utilizatorii au nevoie de mai mult drog pentru a obine
aceleai efecte.
9.4 Metadona
Metadona este folosit n tratamentul dependenei de opiacee. Este un analgezic care a fost
produs n Germania in 1937. Dei seamn din punct de vedere chimic cu morfina sau
heroina, metadonaacioneaz asupra acelorai receptori opioizi ca i aceste medicamente i
are efecte similare. Metadona este, de asemenea, utilizat n calmarea durerii cronice severe,
avnd o lung actiune, efecte extrem de puternice i costuri foarte sczute.
O C 6H 5
CH3 CH2
CH3
C C CH2 CH N CH3 2
C6H5
Doze mai mari de metadon pot bloca efectele euforice date de heroin, morfin i
alte droguri similare.
173
174
coloraie violet (deosebire de morfin). Reziduul tratat cu 2-3 picturi reactiv Frhde d o
coloraie verde ce trece n albastr, iar la nclzire n roie viinie.
Reziduul de papaverin dizolvat la cald n anhidrid acetic i tratat cu cteva picturi
de acid sulfuric concentrat formeaz o culoraie verde-galben, fluorescent n ultraviolet.
N
N
CH3
Reacii microcristalografice
a. Reacia Roussin: se trateaz reziduul dizolvat n eter cu o soluie eteric de iod 2-3
%. Se prepar un lichid uleios rou-brun, din care, dup cteva ore, apar cristale aciculare
roii rubinii, transparente, de iod-nicotin. Hiosciamina, d, n aceleai condiii, cristale
brun nchis.
b. Reacia Dragendorff: peste o pictur de alcaloid baz se adaug o pictur de
reactiv Dragendorff , cnd se formeaz cristalele roii nchis pn la negru, cu aspect de:
"psri n zbor" vizibile la microscop. Sensibilitatea reaciei este de 1 g.
Cromatografie n strat subire:
Se execut ca la cocain. Rf. = 0, 57
Test fiziologic: Prin injectarea clorhidratului de nicotin n sacul limfatic al broatei,
se obine "poziia nicotinic" specific, variind n raport cu doza administrat.
176
177
Etanolul, CH3CH2OH
Toxicocinetic. Etanolul este imediat absorbit i distribuit n toate esuturile, fr
acumulare. Se elimin prin expiraie (3-7%) i urin (2-4%), restul este metabolizat n ficat,
succesiv la acetaldehid, acid acetic i bioxid de carbon. Oxidarea la acetaldehid se
realizeaz, la cantiti mici de alcool, sub aciunea alcooldehidrogenazei (ADH); la cantiti
mai mari de etanol, intervin sistemul microzomial de oxidare (MEOS i oxidaze cu funcii
mixte microzomiale) i catalaza (CAT sau peroxidaze). Datorit coninutului constant de
ADH din ficat, oxidarea etanolului are loc cu o vitez aproape constant de 8 g etanol/or.
CH3-CH2OH
ADH
CH3-CHO
ALDH
CH3-COO
NAD+ NADH
NAD+ NADH
CoA-SH
ATP
TCA
CH3-CO~SCoA
AMP + P
Sinteze
Biotransformarea etanolului
ADH = alcooldehidrogenaza; ALDH = aldehiddehidrogenaza; CoA-SH = coenzima A; NAD+, NADH = nicotinamidadenindinucleotid oxidat si redus; AMP = adenozinmonofosfat; ATP = adenozintrifosfat; P = fosfat anorganic;
TCA = ciclul acizilor tricarboxilici (ciclul Krebs)
Toxicodinamie. Etanolul are un efect deprimant asupra SNC. Aceast aciune ncepe
cu scoara cerebral i se continu pn la bulb. Inhibarea centrilor superiori, cu funcii de
coordonare i control, antreneaz i relaxarea centrilor inferiori, fapt ce explic efectul aparent
stimulator al buturilor alcoolice.
Etanolul acioneaz toxic prin molecula netransformat, prin acetaldehid i prin
creterea raportului NADH/NAD+.
CH3-CH2OH + NAD+
CH3-CH2OH + H2O2
ADH (citosol)
CAT (mitocondrie)
CH3-CH2OH + O2 + H+ + NADPH
MEOS
(microzomial)
CH3-CHO + NADH + H+
CH3-CHO + 2 H2O
CH3-CHO + NADP+ + 2 H2O
MDH
CH3-CH2OH
NAD+
Malat
Malat
CH3-CHO
NADH
Oxaloacetat
Oxaloacetat
Glutamat
Glutamat
Alfa-cetoglutarat
Alfa-cetoglutarat
NAD+
NADH
H2O
O2
TGO
TGO
Aspartat
Aspartat
CITOPLASM
MITOCONDRIE
179
Etilenglicolul, HO-CH2-CH2-OH
Lichid incolor, vscos, cu gust dulceag. Este relativ i miscibil cu apa, alcoolul etilic,
acetona, acidul acetic, glicerina i piridina. Este insolubil n eter etilic, CS2, hidrocarburi
halogenate, uleiuri i hidrocarburi aromatice. Este utilizat ca solvent i lichid antigel.
Concentraia maxim admisibil este de 274 mg/m3 aer.
Toxicocinetic. Ptrunderea etilenglicolului n organism se face pe cale digestiv i
numai accidental respiratorie. Se distribuie n toate esuturile. Se elimin 40 % nemodificat pe
cale renal, iar 60% se biotransform oxidativ, iniial la aldehid glicolic sub aciunea
alcooldehidrogenazei (ADH) cu vitez mic (ceea ce explic efectul antidotic al etanolului, ca
i la metanol) apoi parial la acid oxalic, trecnd prin acid glioxilic.
HOCH2-CH2OH
Etilenglicol
ADH
HOCH2-CHO
Aldehid glicolic
HOCH2-COOH
Acid glicolic
OHC-CHO
Aldehid glioxilic
OHC-COOH
Acid glioxilic
HCOOH
Acid formic
(Calea major)
CO2
HOOC-COOH
Acid oxalic
(Calea minor)
Biotransformarea etilenglicolului
Acidul oxalic formeaz cu calciul oxalat de calciu care obtureaz tubii renali i
afecteaz miocardul i alte organe.
Toxicodinamie. Toxicitatea etilenglicolului se datoreaz metaboliilor si, care sunt
mai toxici, i anume acidul glioxilic i acidul oxalic. Etilenglicolul conduce la edem cerebral.
Doza letal la adult este 100 g.
Leziunea principal este necroza tubular acut, iar pe plan metabolic, acidoza
metabolic. Intoxicaia acut determinat de ingerarea etilenglicolului debuteaz prin tulburri
digestive, apoi neuropsihice (de la euforie pn la com convulsiv), acidoz, manifestri
cardiovasculare (tulburri de ritm, insuficien acut cardiovascular) i insuficien renal
acut, adesea fatal.
Analiza toxicologic:
folosind metode gaz-cromatografice, spectrofotometrie n UV i vizibil;
180
181
SO3H
OH
HCHO + 2
? H2O +
SO3H
OH
SO3H
CH2
SO3H
OH
OH
CH
+[O] ?
OH
OH
HO
SO3H
OH
HO
SO3H
SO3H
SO3H
SO3H
SO3H
Reactivi(ml)
Standard de lucru(100 g / ml)
KMnO4 20%
Eprubeta
1
2
0.2
0.4
20
40
182
3
0.6
60
4
0.8
80
5
1.0
100
6
-
H3PO4 5 %
Na2SO3 sol. saturat
Acid cromotroforic
H2SO4 9 M
1.8
1.6
1.4
1.2
1.0
2.0
1.0 se agit
5.0 se mentin eprubetele 30 n BM n
fierbere, se rcesc imediat
pn la 10 ml
Calcul
Rezulatele exprimate n mg metanol/m3 aer:
mg, metanol /m3 aer = C/V
n care:
C = concentraia metanolului n g;
V = volumul de aer recoltat, n litri.
Normele republicane n vigoare prevd pentru alcoolul metilic CMA = 100mg/m3 aer.
Alcoolul etilic
1. Reacia Leben: se alcalinizeaz 2 ml soluie de analizat cu NaOH 1% sau Na2CO3 10%, se
nclzete uor i se adaug soluii Lugol (4 g iod i 4 g KI la 100 ml ap) pn la apariia
culorii galbene-portocalie. Se distruge excesul de iod cu NaOH 10% sau Na2CO3 10% cnd
apare opalescen i miros de iodoform, caracteristic, sau chiar precipitat galben cu forme
caracteristice la microscop (la concentraii mai mari de etanol):
C2H5OH + I2 +2 NaOH = CH3CHO + 2 NaI +2 H2O
CH3CHO + 3 I2 + 3NaOH = CI3CHO + 3 NaI + 3 H2O
CI3CHO + NaOH = CHI3 + HCOONa
Reacia este sensibil, dar nespecific, fiind dat de aceton i metiletilceton, precum i de
acetaldehid. Diferenierea cetonelor de etanol i acetaldehid se realizeaz, dac soluia de
analizat este alcalinizazt cu amoniac n loc de NaOH, dup care se adaug soluie Lugol. n
prezena etanolului i acetaldehidei apare un precipitat cenuiu-negru de iodur de azot, pe
cnd acetona, n aceleai condiii, dezvolt miros de iodoform.
2.Reacia xantogenailor: la 2 ml soluie de analizat se adaug o granul de KOH de agit i
se nclzete uor, se aciduleaz slab cu acid acetic !%, se adaug cteva picturi de sulfur
de carbon i 2-5 picturi sulfat de cupru 5%. Se formeaz iniial un precipitat negru de
xantogenat cupric, care trece prin dismutaie n xantogenat cupros, galben.
3. Reducerea bicromatului: se trateaz 2 ml soluie de analizat cu cteva picturi K2Cr2O7
5% i 1 ml H2SO4 conc., cnd se dezvolt o culoare verde (Cr3+), iar etanolul se oxideaz, n
funcie de condiiile de reacie, la acetaldehid sau acid acetic:
- la rece:
3 CH3CH2OH + K2Cr2O7 + 4 H2SO4 = 3 CH3CHO + Cr2(SO4)3 + K2SO4 + 7 H2O
- la cald:
3 CH3CH2OH + 2 K2Cr2O7 + 8 H2SO4 = 3 CH3COOH + 2 Cr2(SO4)3 + 2 K2SO4 + 11 H2O
Reacia este specific, fiind dat de toi alcoolii, ca alte substane organice i substane
reductoare.
183
piatr ponce. Se agit uor i se adapteaz la coloan de distilare Vigreux, care se continu
cu un refrigerent descendent, prevzut cu o alonj. Captul alonjei se introduce ntr-un balon
cotat de 25 ml, n care se gsesc 2-3 ml ap distilat. Se distil pn aproape de semnul
balonului, apoi se completeaz cu ap la semn. Distilarea dureaz aproximativ 25 minute.
Urin: se aduc 5 ml urin exact msurai ntr-un ntr-un balon de distilare de 300 ml i se
continu ca la snge.
Organe: se cntrete repede o cantitate de organe (n funcie de natura organului) se
mojareaz cu nisip purificat i se trece n balonul de distilare, relund de cteva ori cu ap, se
adaug acid picric i se continu cala snge.
b. Dozare (metoda Cordebard modificat de Banciu i Droc):
ntr-un Erlenmeyer de 100 ml cu dop rodat, se iau 5 ml distilat(n cazul sngelui i al urinei,
corespunde la 1 ml produs), se adaug 3 ml bicromat N/6,9 (msurai cu microbiureta) i 4
ml HNO3 conc. Se acoper balonul, se las n repaus 15 minute exact, se adaug 20 mlKI
2%. Dup 2 minute se titreaz iodul pus n libertate de excesul de bicromat, cu tiosulfat
N/23, n prezena soluiei de amidon sau de alcool polivinilic ( ultimul vireaz la rou la
incolor).
Calcul
1 ml bicromat N/23 = 0,0005 g etanol
g etanol/1000 ml snge (urin) = (10 n) x 0.5 = 10 n / 2
n care:
10 = ml ml bicromat N/23 (la care corespund 3 ml bicromat N/6,9 i care oxideaz 5 mg
etanol);
N = ml tiosulfat N/23 folosii la filtrare.
Observaii
1. Dac distilatul conine mai mult etanol dect ar putea oxida bicromatul, se ia in lucru un
alicot ??? mai mic.
2. Reactivii utilizai trebuie s fie p.a sau chimic pur s nu conin substane reductoare.
3. n cazul sngelui, rezultatele sunt corecte numai dac sngele nu a fost purificat. n cazul
sngelui coagulat, se lucreaz pe ser i rezultatul final se mparte cu 1,2 ; deoarece etanolul
este repartizat n cantitate mai mic n ser dect n sngele total.
4. n condiiile metodei, metanolul, aflat eventual n produsul biologic, este oxidat la rece
numai n proporie de aproximativ 15%. Depistarea metanolului n snge se face dup
tehnica indicat la metanol (v. Metanolul).
5. Se recomand ca dozarea s se execute pe dou probe paralele.
6. Din cauza scderii, n timp, a concentraiei de etanol, se recomand s se adauge 0,15% la
rezultatul analizei, pentru fiecare or de ntrziere. aceast corecie se face, neinnd seama
de primele dou ore i pe o perioad care s nu depeasc 5-6 ore (adic 7-8 ore) de la
recoltrea sngelui. Peste aceast limit, sigurana calcului este mai redus.
Bibliografie
G. Drochioiu, I. Mangalagiu, I. Dru, Elemente de teorie i practic toxicologic. Edit.
Demiurg, Iai, 2001.
185
M. Cotru, Implicaii ale consumului de etanol n industria chimic. M.I.Ch., Iai, 1983.
M. Proca, E. Butnaru, L. Agoroaei Lucrri practice de toxicologie. Universitatea de
medicin i farmacie Gr. T. Popa Iai, Centrul de multiplicare UMF, Iai, 1996.
186
Parametrii farmacocinetici
Micorarea i dispoziia medicamentelor n organism poate fi cuantificat. Concentraia
plasmatic este un parametru global, fiind o rezultant a tuturor etapelor circulaiei n
organism. Biodisponibilitatea definete absorbia la care se pot aduga alte fenomene, ce
intervin eventual ntre absorbie i ajungerea n circulaie. Distribuia n organism se msoar
prin volumul aparent de distribuie. Indicele care msoar procesul de epurare-metabolizare,
excreia - este clearance-ul. Timpul de njumtire este un parametru complex, care rezult
din distribuie i epurare.
Aciunea medicamentelor la nivel molecular i celular
Aciunea primar a medicamentelor se exercit asupra moleculelor i reprezint mecanismul
de aciune. Farmacoreceptorii sunt macromolecule proteice capabile s lege specific
substane active cu molecula relativ mic, formnd cu acestea complexe, care comand
anumite efecte biologice. Multe medicamente folosesc drept receptori macromolecule, care n
187
190
191
192
Dependena
Dependena medicamentoas, adicia sau toxicomania este o stare de intoxicaie cronic
caracterizat prin necesitatea constrngtoare de folosire a unor substane medicamentoase
sau toxice. Ea se caracterizeaz sub forma ei complet, prin patru trsturi definitorii:
-dependena psihic, adic necesitatea de ordin psihologic de a folosi un anumit
medicament sau toxic;
-tolerana, adic diminuarea progresiv a efectului la repetarea administrrii, respectiv
necesitatea creterii dozei pentru a obine efectul scontat;
-dependena fizic, care const n necesitatea de a continua folosirea substanei respective
pentru a evita tulburrile, uneori grave, care apar la ntreruperea administrrii i sunt
cunoscute sub denumirea de sindrom de abstinen;
-psihotoxicitatea.
Substanele capabile s provoace dependen au, de cele mai multe ori, aciuni
psihofarmacologice: euforizant, linititoare, stimulant psihomotorie, halucinogen.
Principalele substane cu potenial de dependen sunt: morfina, heroina i alte opioide,
amfetaminele, cocaina, alcoolul etilic, barbituricele i alte hipnotice, benzodiazepinele i alte
tranchilizante, canabinoidele (marijuana, hai) i, n msur mai mic, nicotina (tutunul) i
cafeina (cafeaua).
Dependena psihic este favorizat de beneficiul therapeutic: calmarea durerii, nlturarea
anxietii, de efectele psihice proprii substanei respective i de fenomenul de condiionare a
administrrii.O anumit reactivitate individual determinat genetic, ca i intervenia unor
factori de ordin social pot motiva, de asemenea, dependena. Morfina, heroina, alcoolul,
barbituricele, benzodiazepinele, cocaina, amfetamina au potenial mare de dependen
psihic; pentru canabinoide, tutun i cafea potenialul este relativ mic.
Administrarea repetat a unor medicamente sau toxice poate dezvolta tolerana i
dependena fizic. Procesul este favorizat de prezena continu a unei concentraii mari de
substan activ la nivelul esuturilor. Fenomenul prezint specificitate chimic i /sau
farmacodinamic. Tolerana i dependena sunt ncruciate, pentru diferitele opioide de tip
morfinic sau pentru alcool, barbiturice i n parte pentru benzodiazepinele tranchilizante.
Tolerana apare mai ales pentru efectele centrale cu caracter subiectiv, mai puin pentru
cele periferice. Doza letal este modificat diferit n funcie de categoria de substane, crete
mult pentru opioide, este puin sau total modificat pentru alcool, barbiturice i
benzodiazepine. Dup oprirea administrrii, sensibilitatea normal revine n cteva zile. Ca
mecanism, tolerana are obinuit o semnificaie farmacodinamic, se dezvolt progresiv
procese adaptative de sens contrar interveniei medicamentului sau toxicului respectiv. Uneori
contribuie i interferene de ordin farmacocinetic, ndeosebi creterea procesului de inactivare
metabolic, de exemplu prin autoinducia enzimatic produs de barbiturice.
Bolnavul care a folosit repetat morfin sau alte opioide asemntoare, barbiturice,
benzodiazepine, buturi alcoolice, prezint la ntreruperea administrrii un sindrom
characteristic, sindromul de abstinen, care marcheaz dependena fizic, oblignd la
continuarea administrrii. Sindromul de abstinen difer pentru diversele categorii de
substane capabile de a dezvolta dependen; se descriu de exemplu un sindrom de abstinen
193
Studii toxicologice
Intoxicaiile acute reprezint la ora actual o veritabil problem de sntate datorit
indicilor de morbiditate i mortalitate n continu cretere peste tot n lume. n SUA, n 2004,
intoxicaia medicamentoas a reprezentat a doua cauz dup accidentele de trafic. n Frana,
dup autori diferii, s-a constatat c mortalitatea imputabil unui accident terapeutic poate
varia de la 1% la 14%, punndu-se problema caracterului evitabil al evenimentului. Evaluarea
real este extrem de dificil datorit metodologiilor specifice a sistemelor de nregistrare a
maladiilor care difer n funcie de zona geografic.
Includerea medicamentului ntre cauzele etiologice devine tot mai pregnant deoarece
exist dou traiectorii distincte de abordare: 1) efectele imputabile direct agentului
farmacoterapic; 2) elementele secundare modului de utilizare a substanei medicamentoase.
n faa unei intoxicaii asistarea victimei presupune urmtorii pai:
a) stabilirea diagnosticului; b) evaluarea gravitii; c) instituirea terapiei complexe
simptomatice, evacuatorii / decontaminante, antidotice; d) determinarea necesitii msurilor
preventive.
Pentru a putea afirma diagnosticul de intoxicaie sunt necesare datele anamnestice
coroborate cu tabloul clinic, investigaiile de laborator, inclusiv analiza toxicologic, iar n
194
unele cazuri diverse teste diagnostice i terapeutice. Ideal ar fi ca toate aceste elemente s fie
n concordan cu toxicul / medicamentul i cu doza ingerat.
Intoxicaiile din tentativele criminale: apanajul organismelor specializate de anchet n
care unitatea medical este o verig foarte important.
Simptomatologia este, n general, extrem de variat depinznd direct de natura toxicului /
medicamentului i poate afecta toate aparatele i sistemele organismului uman. Investigaiile
biologice, prin anomaliile decelate, pot avea o real importan diagnostic permind
suspicionarea unei anumite clase de substane, fiind o reflectare direct a efectelor toxice,
uneori foarte utile att n plan evaluativ ct i terapeutic.
Analiza toxicologic are cert un mare impact diagnostic, prognostic, terapeutic i medicolegal. Ea trebuie focalizat de clinician pe baza datelor tabloului clinic. n urgen, analiza
toxicologic cantitativ este indispensabil atunci cnd condiioneaz strategia terapeutic:
administrarea antidotului, a chelatorului, a dozelor repetitive de crbune activat, instituirea
epurrii extrarenale (de exemplu: intoxicaia cu paracetamol, salicilai, digitalice, fenobarbital,
litiu, fier, metanol, etilenglicol, metale). n practic exist 4 situaii:
1. Intoxicaie cert cu substan cunoscut i simptomatologie concordant cu toxicul i doza;
2. Intoxicaie cert cu substan cunoscut dar cu tablou clinic neconcordant cu toxicul i
doza;
3. Intoxicaie sigur dup context dar cu toxic necunoscut;
4. Simptomatologie evocatoare pentru o posibil etiologie toxic n absena contextului i a
altor date.
Evaluarea gravitii este o etap fundamental pentru c ea determin strategia terapeutic
i de supraveghere. Sunt implicai numeroi factori: toxicul i mecanismul su de aciune,
criteriile clinice i paraclinice, tipul de intoxicaie, elemente de vulnerabilitate individual,
asocierea diverselor substane (de exemplu, medicamente psihotrope cu etanol) i prezena comorbiditilor.
Din punct de vedere terapeutic, n mod clasic, exist 4 piloni: tratamentul simptomatic,
evacuator, epurator i antidotic. Preluarea unui caz de intoxicaie acut comport cu prioritate
aplicarea terapiei simptomatice pentru c se realizeaz monitorizarea parametrilor vitali,
precum i a bilanului clinico-biologic iniial cu aplicarea n cazul etiologiilor incerte a
testelor diagnostico-terapeutice (de exemplu, glucoz, Flumazenil, Naloxon).
Intoxicaiile medicamentoase reprezint o problematic extrem de complex, avnd implicaii
multiple de ordin medical, socio-economic i etico-moral, care datorit extinderii alarmate a
cazurilor, necesit o atenie amplificat din partea tuturor celor angajai n actul terapeutic.
Incidena intoxicaiilor n populaia general este dificil de estimat datorit urmtoarelor
cauze: majoritatea intoxicaiilor se produc la domiciliu, gravitatea lor nu impune ntotdeauna
prezentarea i internarea ntr-o secie specializat, manifestrile clinice sunt atribuite altor boli
sau sunt dificil de difereniat de alte afeciuni prezente la acelai pacient. Intoxicaiile
reprezint 5-10 % din cauzele internrilor n seciile de terapie intensiv.
Cile de ptrundere a toxicelor n organism sunt: ingestie (75-80%), percutan, ocular,
inhalator (fiecare cu aproximativ 5%), parenteral (sub 1%). Cazurile acute reprezint 90% din
totalul intoxicaiilor, cele accidentale fiind prezente n aceeai proporie.
195
Medicamentele sunt implicate n aproximativ 55% din intoxicaiile acute severe la adult
i n 50% din cele pediatrice grave. Intoxicaiile accidentale medicamentoase sunt rezultatul
autoadministrrii i autodozrii neinformate a medicamentelor, erorilor n prescrierea acestora
de ctre medic, n dozarea lor de ctre asistente, prini, vrstnici, n prepararea i eliberarea
medicamentelor de ctre farmaciti. Cele mai frecvente cauze de intoxicaii intenionate sunt
consumul abuziv de alcool sau droguri i tentativele de suicid. La adult, cel mai frecvent sunt
incriminate (n ordine descresctoare a frecvenei) n cazurile acute grave asocierile
polimedicamentoase, etanolul, drogurile de abuz, anxioliticele, monoxidul de carbon,
asocierea alcool-medicamente, barbituricele, compuii organofosforici, benzodiazepinele,
ciupercile necomestibile i antidepresivele, iar la copil substanele caustice, benzodiazepinele,
distonocalmul, etanolul, antidepresivele triciclice, barbituricele, derivaii de petrol, ciupercile
necomestibile, drogurile de abuz, paracetamolul. Intoxicaiile copilului difer de cele ale
adolescentului i adultului prin: caracterul mai frecvent accidental, depistarea mai precoce,
toxicitatea mai mare la copil a aceleiai substane, cantitile ingerate de obicei mai mici, lipsa
frecvent a condiiilor patologice supraadugate, rspuns favorabil la tratament i capacitate
de recuperare mai mare. Mortalitatea este semnificativ mai mic la copii (0,5-2 %) fa de
aduli (aproximativ 5%). Medicamentele care determin cel mai frecvent mortalitate n
intoxicaiile acute sunt: analgezicele, antidepresivele, agenii cardiovasculari,
sedative/hipnotice/antipsihotice, anticonvulsivantele, antiastmaticele, antihistaminicele,
medicamentele coninnd fier (mai ales la copii).
COOCH 3
COOH
CONH 2
OH
OH
OCOCH 3
OH
salicilat de sodiu
salicilat de metil
acid acetilsalicilic
salicilamida
Etiologia otrvirii. Intoxicaiile acute au loc cel mai frecvent cu aspirin. ntrebuinarea
ndelungat i abuziv a derivailor salicilici poate genera fenomene de intoxicaie cronic.
Intoxicaiile voluntare (sinucideri) se produc cu aspirin, cu mare frecven, n
Europa i America i cu salicilat de metil n unele regiuni din Africa i Asia.
196
COOH
OH
acid salicilic
CONHCH2 COOH
OH
acid saliciluric
(acid 2-hidroxihipu
acid gentizuric
197
Mecanismul de aciune
Aciunea antipiretic-analgezic, antiinflamatoare-antireumatic a derivailor salicilici i
recomand n algii de diferite origini, stri febrile, reumatism articular (acut i cronic), stri
inflamatorii diverse.
Aciunea analgezic a medicamentelor de tip aspirin se explic prin deprimarea SNC, cu
ridicarea pragului de percepere a durerii, fr a afecta cortexul i a modifica psihismul, ca
analgezicele de tip morfin.
Aciunea antipiretic se realizeaz prin influenarea centrului termoregulator, rezultnd o
pierdere crescut a temperaturii corporale prin vasodilataie cutanat i stabilindu-se un
echilibru ntre producerea i pierderea cldurii echilibru dereglat n strile febrile.
Aciunea antiinflamatoare, se realizeaz n mare msur prin inhibarea prostaglandinelor
i congenerilor acestora; acelai mecanism st la baza capacitii de antiagregant plachetar al
aspirinei datorit creia este utilizat n tratamentul i prevenirea bolilor tromboembolice.
a) Prostaglandine, prostacicline, tromboxani
Prostaglandinele (PG) sunt compui biologici activi, care conin un ciclopentan i provin
din acizii polinesaturai cu 3, 4, 5 duble legturi i 20 de atomi de carbon, ca acidul
arahidonic.
Acid arahidonic
PGE2
Dup natura acidului gras polinesaturat, PG se divid n seriile 1, 2, 3, seria 2 provenind de
la acidul arahidonic, precursorul PG cel mai abundent la om. Dup structura ciclului pentanic,
PG se divid n seriile A, B, C, D, E, F numite i prostaglandine primare.
198
Acizii grai polinesaturai rezult prin scindarea fosfolipidelor din membranele celulare
sub aciunea fosfolipazei A2 activat de hormoni vasoactivi ca kinina. Prostaglandinele s
formeaz prin conversia acestor acizi grai polinesaturai, cu apariia intermediar a
endoperoxizilor ciclici (-OOH n C15) sub aciunea ciclooxigenazei (prostaglandin
sintetazei).
Capacitatea esuturilor de a converti acizii grai nesaturai n PG variaz ntre 1% i 75%,
dar ciclooxigenaza (PG sintetaza) este prezent n toate esuturile.
Prostaglandinele nu sunt depozitate n esuturi, ci sunt eliberate imediat dup sintetizare,
ca rspuns la diferii stimuli.
Degradarea enzimatic a PG se realizeaz rapid prin patru modaliti, cea mai important
fiind oxidarea la ceton n C15 sub aciunea prostaglandin-15 hidroxi-dehidrogenazei
(PGDH), cu formare de compui cu slab activitate biologic.
Printre inhibitorii sintezei PG se nscriu i agenii antiinflamatori nesteroizici de tip
aspirin. Ei inhib eliberarea PG din diverse esuturi, ca urmare a blocrii sintezei prin
inhibarea ciclooxigenazei (PG sintetazei).
Proprietatea de a inhiba aceast enzim este oarecum specific agenilor antiinflamatori
de tip aspirin, deoarece enzima nu este inhibat nici de corticoizii puternic antiinflamatori,
nici de iyomeri ai acidului salicilic lipsii de efect terapeutic. Inhibiia determinat de
aspirineste de tip competitiv ireversibil, n interreacia cu centrul catalitic al enzimei
intrnd n prima etap gruparea acetil, iar n etapa urmtoare, salicilatul eliberat prin
metabolizarea aspirinei.
Doza toxic de derivai salicilici prezint mari variaii individuale. Doze de 3 g/zi pot
determina fenomene toxice, n timp ce doze de 10 g/zi pot fi bine suportate. Doza toxic este
considerat 15 20 g aspirin la adult i 0,15 g/kg la copil. Doza letal de aspirin este
apreciat la 20 30 g, dar se citeaz cazuri care au supravieuit dup ingerarea a 60 g i chiar
130 g aspirin. Salicilatul de metil este cel mai toxic dintre derivaii salicilici: 4 ml (4,7 g) pot
determina moartea unui copil.
Printre reaciile adverse se nscriu manifestrile:
- digestive: greuri, vrsturi, anorexie, iritaia mucoasei gastrointestinale cu producerea
hemoragiilor digestive prin mecanisme diferite;
- neuropsihice i neurosenzoriale: euforie, bun dispoziie, agitaie psihomotorie,
cefalee, tremurturi, datorate excitrii cortexului i a centrilor subcorticali, prin efect direct
determinat de concentrarea salicilatului n celula nervoas i prin efect indirect, urmare a
epuizrii rezervelor de glucoz din esutul cerebral: hipoacuzie, zgomote n urechi, datorate
congestiei i hemoragiei la nivelul aparatului cochlear i a timpanului; reducerea cmpului
vizual, viziune colorat, consecinele vasoconstriciei vaselor retiniene;
- alergice: erupii cutanate, edeme, febr, n general benigne. La un numr restrns de
persoane, pot aprea, la cteva minute dup ingerarea unei singure pastile de aspirin,
fenomene de intoleran (hipersensibilitate) ca rinit cu secreie apoas abundent, edem
angioneurotic, urticarie, hipotensiune, colaps vasomotor.
Alte reacii adverse constau n perturbare de:
199
Simptomatologie
Intoxicaia acut cu aspirin i salicilat de sodiu se manifest prin:
- Tulburri digestive: vrsturi, arsuri epigastrice, diaree, melen;
- Modificarea echilibrului acido bazic: n faza iniial a intoxicaiei, salicilatul
stimuleaz centrii respiratori bulbari, determinnd hiperventilaie i polipnee cu alcaloz
respiratorie prin eliminare crescut de CO2, la care se adaug alcaloz metabolic provocat
de vrsturi. Pentru compensarea alcalozei, rinichiul elimin mari cantiti de bicarbonai de
sodiu i potasiu. n intoxicaia grav, salicilatul deprim centrii respiratori bulbari, provocnd
hiperventilaie cu acidoz respiratorie prin retenie de CO2, la care se adaug acidoz
metabolic determinat de acumularea de acizi organici (datorit inhibrii dehidrogenazelor
din ciclul Krebs) i de acizi fosforici i sulfuric (datorit insuficienei renale). Ionul solicitat
nu contribuie prin el nsui la acidoz, deoarece concentraia sa ionic este slab chiar la doze
toxice. n cazul salicilatului de metil, metanolul eliberat prin hidroliz nu contribuie la
agravarea acidozei, deoarece este n cantitate mic. n schimb, prin blocarea oxidrilor
celulare de ctre metanol, aprarea organismului mpotriva acidozei din intoxicaia salicilic
este sczut.
- Tulburri hidroelectrolitice (evideniate prin ionogram) : deshidratare extracelular
(pierdere de ap prin hiperventilaie, hipersudoraie, eliminare renal crescut) ;
hipernatriemie; hipopotasemie ( prin eliminarea K+ n urin sub form de bicarbonai i prin
scderea reabsorbiei sale, datorit alterrii renale).
- Tulburri vegetative: vasodilataie cutanat cu transpiraii i hipertermie;
- Tulburri neurosenzitive: cefalee, ameeli, surditate trectoare, scderea acuitii
vizuale, fotofobie, agitaie, delir, uneori halucinaii vizuale i auditive, com cu midriaz sau
mioz.
Pot aprea complicaii: insuficien renal acut, edem pulmonar acut, hemoragii
digestive. Moartea poate surveni prin colaps cardiovascular.
200
201
OH
OH
COOH
+FeCl3
Fe + 3HCl
COO
3
2. Soluia de analizat tratat cu ap de brom, formeaz un precipitat alb de tribrom derivat.
3. La nclzirea pe B.M. a reziduului de acid salicilic conc. se formeaz salicilat de metil cu
miros caracteristic.
OH
OH
COOH
CH3OH
COOCH3
-H2O
OH
COOH
COO
Fe3+
- 3H+
Fe
202
6 (M)
0,2
80
0,8
0,4
160
0,6
0,6
240
0,4
0,8
320
0,2
1,0
400
-
1,0
Eprubeta
soluie etalon
(1 ml =400 g)
conc. g
Ap distilat
Reactiv Trinder
5,0
'
Agitare: 10 repaus
= 540 nm
Calcul
Rezultatele se exprim n mg /100 ml snge sau mg /litru urin.
mg acid salicilic mg /100 ml snge = C/10
mg acid salicilic /1000 ml urin = C
n care "C" este concentraia n g de acid salicilic.
Interpretarea rezultatelor. n intoxicaiile acute cantitatea de acid salicilic gsit n
snge variaz ntre 20 i 100 mg%. Cantiti mai mari de 100 mg% arat o intoxicaie
salicilic foarte grav. n intoxicaii, cantitile de acid salicilic prezente n urin variaz
ntre 1-4 mg/ml funcie de diurez i tratament. n tratamente, salicilemia este de 5-20 mg%;
n intoxicaii acute uoare 25 - 50 mg%, iar n formele grave 50 - 100 mg%. Concentraia
letal este de 160 mg%.
Dozarea acidului salicilic n lichide gastrice. n cazul ingerrii de acid acetilsalicilic,
reacia cu reactiv Trinder este negativ sau slab pozitiv fr o hidroliz prealabil n mediul
alcalin.
Se iau n lucru 10 ml lichid gastric se adaug 10 ml ap distilat i 1 ml hidroxid de sodiu
40% . Se nclzete pe sit 5 minute. Se rcete la curent de ap rece dup care se ia 1 ml
hidrolizat, se adaug 4 ml ap distilat i se aduce la pH 5 cu acid clorhidric 10 %. Se agit
i se continu apoi lucrul ca la urin.
203
NHCOCH 3
OC2H5
OH
paracetamol
f enacetina
Fenacetina i paracetamolul sunt pulberi albe, cristaline, inodore, insipide sau cu gust uor
amar (paracetamolul). Sunt puin solubile n ap, solubile n alcool i cloroform.
Etiologia intoxicaiilor. Intoxicaia acut se datoreaz absorbiei masive n scop de
sinucidere sau prin confuzie. Intoxicaia cronic este urmarea absorbiei zilnice i ndelungate
a produsului sau a formelor sale medicamentoase.
Derivaii de anilin sunt absorbii rapid i complet din tractul gastrointestinal, apoi
distribuii uniform n toate esuturile. Fenacetina este metabolizat prin dezetilare la
paracetamol i mai puin, prin dezacetilare, urmat de 2-hidroxilare la p-fenetidin, respectiv
2-hidroxifenetidin i de asemenea, prin hidroxilare la nucleu, cu formare de
hidroxifenacetin. Toi metaboliii sunt conjugai cu acid glucuronic sau sulfuric.
Conjugarea paracetamolului cu glutationul este cantitativ nensemnat, ns asigur
inactivarea intermediarului reactiv, toxic, de tip chinonimin, produs prin N-hidroxilare. n
doze excesive de paracetamol, are loc depleia rezervelor de glutation, astfel nct
intermediarul toxic nu mai este inactivat prin conjugare, ci formeaz legturi covalente cu
constituienii hepatocitului, rezultnd alterarea acestuia.
Inductorii enzimatici de tip fenobarbital intensific activitatea oxidazelor cu funcii mixte
microzomiale, crescnd procentul de metabolit toxic i mrind hepatotoxicitatea
paracetamolului.
Fenacetina este analgezic, antipiretic i sedativ, iar paracetamolul are aciune
antipiretic superioar fenacetinei. Paracetamolul este antiinflamator, dar numai n doze
superioare celor necesare pentru analgezice. Aciunea antiinflamatorie redus, lipsa de iritare
gastric i neinfluenarea timpului de sngerare corespund cu slaba capacitate de a inhiba
prostaglandinele.
204
NHCOCH 3
NH 2
NH 2
OH
OC2H5
2-hidroxi-f enetidina
OC2 H5
OC2H5
p-f enitidina
f enacetina
NHCOCH 3
NHCOCH 3
OH
conjugare
cu acid glucuronic (60%),
acid sulf uric (20-30%),
cisteina si glutation (5%)
OC2 H5
OH
paracetamol
COCH3
N
COCH3
N
oxidaze cu functii
conjugare cu
glutationul
cu formare de
acid
mercapturic
mixte microzomiale
OH
paracetamol
OH
N-acetil-p-benzochinonimina
paracetamol
N-hidroxilat
legaturi
covalente cu
constituientii
celularu
206
Reziduul dintr-o capsul este tratat cu 2 ml HCl 20% i hidrolizat pe B.M. la fierbere, apoi se
adaug 10 ml ap i se filtreaz.
Identificare. Reacii de culoare:
1. Reacia cu H2SO4 i acetaldehid: reziduul din capsul este tratat cu 1 ml H2SO4 i 4-5
picturi acetaldehid, cnd apare o culoare roie.
2. Reacia indofenolului: la 2 ml filtrat, se adaug o pictur de fenol 1% i 2-3 picturi
soluie de hipobromit, cnd apare o culoare roie-nchis, care n mediul alcalin trece n
albastru.
3. Reacia de diazotare i cuplare: la 2 ml filtrat se adaug 0,5 ml HCl 10%, 0,1 ml NaNO2
1%, se agit, se las n repaus 10 minute, se adaug 2 ml uree 10%, se agit i dup 10
minute, se adaug 0,2 ml NED 0,1%, cnd apare o culoare violet.
4. Reacia cu FeCl3: 10 ml urin se trateaz cu 1 ml FeCl3 1% (proaspt preparat), cnd se
obine o culoare roie virnd n brun.
Dozare. Metoda colorimetric (reacia indofenolului): dup hidroliz acid, din fenacetin i
metabolitul su urinar N-acetilparaaminofenol, rezult paraaminofenol, care n prezena
fenolului i a hipobromitului formeaz indofenol
Reactivi: HCl 4 N; NaOH 0,2 N; Fenol soluie apoas 1% proaspt preparat; Soluie apoas
de hipobromit de sodiu: se amestec 3 ml ap de brom saturat cu 20 ml soluie Na2CO3;
Soluie etalon: se cntresc 0,1 g fenacetin i se aduc cu ap la 200 ml (1 ml = 0,5 mg).
Modul de lucru: ntr-o eprubet gradat se iau 1 ml urin, 1 ml ap distilat i 4 ml HCl 4 N.
Se fierbe pe baie de ap la 1000C timp de 45 minute. Se rcete i se aduce la 10 ml cu ap
distilat. Din aceast soluie-hidrolizat de urin- se ia 1 ml, se adaug 8 ml NaOH 0,2 N, 1 ml
fenol 1% i 1 ml soluie hipobromit. Se las la ntuneric 30 minute, apoi se citete extincia n
cuv de 1 cm la =630 nm fa de o prob oarb. n condiii identice se execut o scar etalon
cu concentraii cuprinse ntre 100-500 g/prob (0,2-1 ml soluie etalon completat la 1 ml cu
ap distilat).
Determinarea meprobamatului
Izolare. Meprobamatului se izoleaz din soluie apoas acid cu solveni organici(eter,
diclormetan, cloroform). Se mai poate izola i din mediu neutru i alcalin la pH = 10.
Izolare din mediu acid cu eter. Se aciduleaz 20 ml urin (lichide gastrice), ntr-o plnie de
separare, cu acid clorhidric concentrat pn la pH = 4 i extrage de dou ori cu cte 2o ml
eter. Extractele eterice reunite sunt splate cu 20 ml ap distilat, filtrate pe sulfat de sodiu
anhidru i evaporate la sec.
Izolarea din mediu acid cu diclormetan sau cloroform. 10 ml urin (2 ml ser) se aciduleaz la
pH 4 cu acid clorhidric concentrat i se extrage ntr-o plnie de separare cu 20.30 ml
diclormetan (agitnd 10-15 minute). Se separ faza organic, se spal de dou ori cu cte 15
ml ap distilat. Faza organic este filtrat pe sulfat de sosiu anhidru i se evapor la sec.
Izolarea din mediul alcalin cu diclormetan sau cloroform. 10ml urin (2 ml ser) se
alcalinizeaz la pH 10 cu amoniac 10% se extrage de dou ori cu cte 20 ml cloroform.
Extractele reunite se spal cu 20 ml ap distilat, se filtreaz pe sulfat de sodiu anhidru i se
evapor la sec.
207
208
HN
C2H5
CO
Fenacetina
OH
CH3
HN
CO
CH3
Paracetamolul
Izolare. Fenacetina se izoleaz din mediuu uor acid sau alcalin, iar paracetamolul din mediu
acid , cu solveni organici (eter etilic, diclor etan i cloroform).
1. Izolare din urin i snge: se aciduleaz 20 ml urin (2 ml ser) cu acid acetic 5% la pH 5-6
i se extrag de dou ori cu cte 50 ml cloroform (eter). Extractele organice reunite sunt
repartizate n capsule i evaporate la sec. Reziduul obinut este tratat cu 2 ml acid clorhidric
20% i hidrolizat pe baia de ap, la fierbere, timp de 15 minute. se adaug 10 ml ap i se
filtreaz. Identificarea se execut att reziduu, ct i pe filtrat sau direct pe urin.
B. Identificare
1. Reacii de culoare
- Fenacetina
a. Test preliminar: se adaug la 2 ml urin acidulat cu acid clorhidric 10%, 3 picturi nitrat
de sodiu 1% i 3 picturi soluie alfa-naftol 1% n hidroxid de sodiu 10% (preparat
proaspt). n prezena paracetamolului- metabolit al fenacetinei se dezvolt o culoare roie.
b. Reacia cu clorur feric: se adaug la 2 ml filtrat o pictur de fenol 1% i 2-3 picturi de
hipoclorit de sodiu 5% sau cloramin B 4%, cnd apare o culoare roie- violet, care n
mediu alcalin trece n albastru.
d. Reacia cu acid sulfuric i acetaldehid: se trateaz reziduul cu 1 ml acid sulfuric
concentrat i 4-5 picturi acetaldehid cnd se dezvolt o culoare roie.
c. Reacia indofenolului: se adaug la 2ml filtrat o pictur de fenol 1% i 2-3 picturi de
picturi de hipoclorit de sodiu 5% sau cloramin B 4%, cnd apare o culoare roie-violet,
care n mediu alcalin trece n albastru.
d. Reacia cu acid sulfuric i acetaldehid: se trateaz reziduul cu 1 ml acid sulfuric
concentrat i 4-5 picturi acetaldehid cnd se dezvolt o culoare roie.
e. Reacia de diazotare i cuplare: se adaug la 2ml filtrat, 0,5 ml acid clorhidric 10% i 0,1
ml nitrat de sodiu 1%. Se agit i se las n repaus 10 minute, dup care se adaug 2 ml uree
10%, se agit i dup 10 minute se adaug 0,2ml N-naftiletilendiamin (NKD) 0,1% cnd
apare oculoare violet. Reacia se preteaz i pentru dozare.
209
f. Reacia cu bicromat: se trateaz 1 ml filtrat cu 2-3 picturi bicromat de potasiu 5%, cnd se
dezvolt o culoare roi ribinie. n aceleai condiii, acetaldehida d o culoare galben, care
vireaz n verde.
- Paracetamol
a. Reziduul reluat cu 2-3 picturi clorur feric 1% d o culoare verde-albastr.
b. Reziduul tratat cu acid clorhidric 10% pentru hidroliz acid, d la adugare de bicromat
5% o culoare violet ce nu trece n rubiniu (reacia de difereniere de fenacetine).
c. Reziduul tratat cu 1-2 picturi acid sulfuric concentrat i 1-2 picturi alcooletilic, degaj la
fierbere, un miros specific de acetat de etil.
d. Reziduul tratat cu reactiv Liebermann (0,6 g azotit de potasiu 10 ml acid sulfuric conc.) se
obine o culoare galben.
2. Identificarea din corp delict (resturi de medicamente)
Se fierbe 0,1 g substan cu 1 ml acid clorhidric concentrat timp de 3 minute. Se dilueaz la
10 ml cu ap, se rcete, se filtreaz i se adaug o pictur bicromat de potasiu 0,1 N. n
prezena fenacetinei apare o culoare violet, care trece n rou-rubiniu, iar n prezena
paracetamolului, se dezvolt lent o culoare violet care nu vireaz n rou.
3. Cromatografia n strat subire (tehnica Bologh)
La 25 ml urin se adaug 10 g clorur de sodiu (pentru obinerea extragerii) i se aduce cu
hidroxid de sodiu 10% la pH 9. Se extrage de 3 ori cu cte 30 ml eter cu adaus de 1,5%
alcoolizoamilic. Fazele eterice se evapor la sec. Se reia reziduul cu 1 ml etanol. Se spoteaz
10 g din soluia etanolic, alturi de martori soluii etenolice de fenacetin, paracetamol,
p-fenetidin. Sistemul de migrare folositeste: cloroform : benzen : aceton (65 : 10 : 25).
Revelarea se ealizeaz prin: expunere 10 minute la vapori de iod, apoi pulverizarea cu iodur
de potasiu soluie 10% n amidon, cnd apare spoturi albastre violet; pulverizare cu soluie
clorur feric fericianur de poasiu (3 g : 0,15 g dizolvate n 30 ml ap), cnd apar spoturi
albastre violet pe fond albastru deschis. Rf-urile sunt: 0,81fenacetin; 0,41 paracetamol;
0,91 p-fenetidin.
Pentru diferenierea fenacetinei de fenazon, aminofenazon, acetanilid, se folosete
unsistem de migrare; aceton : cloroform (1 : 9). Relevarea se realizeaz prin pulverizarea cu
clorur feric 5% n aceton; dup nclzire uoar, apar spoturi roii-violet pe fond galben.
C. Dozarea
Metoda spectrofotometric (reacia indofenolului)
Principiu:
Dup hidroliz acid, din fenacetin i paracetamol (metabolitul su urinar) rezult paminofenol, care n prezena fenoluluii a hipocloritului, formeaz indofenolul de culoare
albastr ce se spectrofotometreaz la = 550 nm n cuva de 1 cm fa de martor.
HO
NH2 +
OH
2NaClO
-2NaCl
-2H2O
210
HO
Reactivi:
1. Acid clorhidric 4 N
2. Hidroxid de sodiu 0,2 N
3. Fenol soluie apoas 1 % (proaspt preparat)
4. Soluie apoas de hipoclorit de sodiu (se amestec 3 ml ap de clor saturat cu 20 ml
soluie carbonat de sodiu (2,2 g carbonat de sodiu anhidru la 20 ml ap).
5. Soluie standard: se aduc 0,1 g fenacetin la 200 ml cu ap .
1 ml = 500 g fenacetin.
Modul de lucru
ntr-o eprubet gradat se iau: 1 ml urin, 1 ml ap i 4 ml acid clorhidric 4 N. De fierbe pe
baia de ap la 100C timp de 45 minute i se aduce cu ap la 100 ml. Din aceast soluie
hidrolizat de urin se ia 1 ml, se adaug 8 ml hidroxid de sodiu 0,2N, 1 ml fenol 1% i 1 ml
hipoclorit. Se las la ntuneric 30 minute. Se citete extincia la spectrofotometru, la = 630
nm, n cuva de 1 cm, fa de un martor.
Curba de etalonare se ntocmete ntre 100 i 500 g/prob.
Eprubeta
Reactivi(ml)
Standard de lucru
500 g/fencetin/ml
Ap distilat
Acid clorhidric 4N
Se fierbe 45 pe BM. Se rcesc
Hidroxid de sodiu 0.2N
Fenol 1%
Hiploclorit de sodiu
Extincia
1
0.2
100
0.8
4.0
2
0.4
200
0.6
3
0.6
300
0.4
4
0.8
400
0.2
5
1.0
500
-
6(M)
1.0
1.0-agitare
1.0-agitare
1.0-agitare, 30 minute la ntuneric
=630nm
211
Bibliografie
Cotru, M. Toxicologie-principii generale, Ed. Junimea, Iai, 1978.
Cotru, M. Toxicologia substanelor organice, Bucureti, Ed. Ministerul Industriei Chimice,
1985.
Cotru, M., Proca, M. Toxicologie analitic, Bucureti, Ed. Medical, 1988.
Cotru, M., Popa, L., Stan, T., Preda, N. Toxicologie, Bucureti, Ed. Didactic i pedagogic,
1991.
Dnil, G., Cotru, M., Nechifor, M. Ghid de date toxicologice, Bucureti, Ed. Medical,
1984.
Drochioiu, G., Mangalagiu, I., Dru, I. Elemente de teorie i practic toxicologic, Iai, Ed.
Demiurg, 2001.
Drochioiu, G., Mangalagiu I., Dru I. Biochimie general, Iai, Ed. Demiurg, 2002.
Gofi, E., Ionic, F. Toxicologia medicamentului, Craiova, Ed. Medical Universitar, 2007.
Ionescu, D., Drgan, S., Dehelean, C. Elemente de toxicologie a medicamentului, Timioara,
Ed. Mirton, 2007.
Stroescu, V. Farmacologie, Bucureti, Ed. Big All, 1999.
Voicu, V. Toxicologie clinic, Bucureti, Ed. Albatros, 1997.
212
213
CH2 NH2
S
C
HO-H2C
OH
N
R CH NH2
+
C=O
OH
OH
HO-H2C
CH3
Piridoxamina
CH2 NH
SH
CH3
Ditiocarbamat
R CH
NH
C=O
OH
SH
H2O
R CH
NH
O=C
Detergenii
Detergenii sunt substane tensioactive ce conin n molecul un fragment hidrofil i unul
hidrofob. Interes toxicologic major prezint detergenii cationici (DL50 = 0,05 0,50 g/kg),
urmai de detergenii anionici (DL50 = 2 7 g/kg), n timp ce detergenii neionici sunt practic
netoxici (DL50 = 50 g/kg).
Detergenii cationici pot determina colaps (aciune ganglioplegic) i paralizie
respiratorie (aciune curarizant). Fiind substane tensioactive, detergenii faciliteaz absorbia
digestiv sau cutanat a substanelor insolubile, favoriznd producerea efectelor toxice
(cancerigene) ale acestora. Primul ajutor const n spltur gastric i purgativ salin.
Antidotul pentru detergenii cationici const ntr-o soluie de spun, 5 g n 20 ml ap, apoi
provocare de vrsturi.
In laboratoarele de chimie, biochimie, biologie i toxicologie se lucreaz curent cu
lauril sulfat de sodiu, SDS, care poate provoca intoxicaii grave i chiar deces.
Anilina, C6H5NH2
Anilina este un lichid incolor, uleios, care devine galben pn la brun la aer i la lumin. Are
un miros puternic, caracteristic. Este puin solubil n ap, dar solubil n solveni organici.
Concentraia maxima admisibil este de 5 mg/m3 aer.
Toxicocinetic. Anilina ptrunde n organism respirator, transcutanat i digestiv. Dup
absorbie, se distribuie n esuturile lipoide. Se metabolizeaz prin oxidare la
fenilhidroxilamin, care se izomerizeaz parial la p-aminofenol, excretat urinar ca sulfo- i
glucuronoconjugat. Faptul c biotransformarea anilinei conduce la metabolii comuni cu ai
nitrobenzenului explic efectele toxice asemntoare ale celor dou substane. O fraciune din
anilin se N-acetileaz.
214
Nitrobenzenul, C6H5NO2
Nitrobenzenul este un lichid uleios, d = 1,2, glbui, cu miros de migdale amare, volatil (p.f.
211oC), puin solubil n ap, solubil n solveni organici. Concentraia maxim admisibil este
de 5 mg/m3 aer.
Toxicocinetic. Nitrobenzenul ptrunde n organism respirator, transcutanat i, rareori,
digestiv. Este metabolizat la nitrozobenzen, fenilhidroxilamin i anilin sub aciunea
reductazelor NADH- i NADPH-dependente microzomiale, hidroxilare la nucleu conducnd
la compui fenolici in echilibru cu p-chinonmonooxima i p-chinonimina.
Din cantitatea absorbuit, 50% se elimin pulmonar nemodificat, 25% urinar ca p-aminofenol
i p-nitrofenol, ambii sulfo-i glucuronoconjugai.
Toxicodinamie. Principalele aciuni toxice ale nitrobenzenului i metaboliilor si
sunt:
Aciunea methemoglobinizant (methemoglobina se obine prin oxidarea Fe2+ din
hemoglobin la Fe3+). n mod normal, n organism exist un echilibru ntre MetHb existent
MetHb
+e
e
Hb
NADH
NADPH
NAD+
NADP+
Diaforaza
MetHb-reductaza (II)
G-SH
G-S-S-G
+e
Hb
MetHb
(Fe3+)
Actiune
direct
(Fe2+)
Actiune prin
metaboliti
Substante oxidante
(medicamente sau toxice)
Echilibrul methemoglobin-hemoglobin
216
NO
NO2
NHOH
NH2
Fenilhidroxilamin?
Anilin?
Reducere
Nitrobenzen
Nitrozobenzen
Oxidare
NO2
NO
NH2
OH
OH
OH
p- nitrofenol
p- nitrozofenol
p-aminofenol
NHOH
NH
p-chinonmonooxima
p-chinonimina
217
218
constitutive ale corpului. Dac se realizeaz acest lucru, are loc vindecarea. Dar, pentru a le
degrada, organismul trebuie s le cunoasc. n general, toate substanele, chiar i cele
alimentare obinuite, luate n cantitate prea mare devin toxice, deoarece organismul nu este
capabil sa le digere, s le transforme.
Pentru degradarea i asimilarea produilor rezultai, corpul face un efort care-l fortific
aa cum se ntresc muchii ca urmare al unui efort gradat continuu. Dac solicitrile depesc
posibilitile organismului, acesta, dimpotriv, slbete. Aceste substane se comport atunci
ca toxici.
Dac substanele chimice utilizate curent ajung n corp, acestea pot fi mai uor sau mai
greu de degradat, n funcie de asemnarea lor cu substanele naturale cunoscute. De anumite
substane organice, corpul nu se poate debarasa i acestea se depoziteaz, precum DDT n
grsimi, afectndu-le funciile lor specifice. In corp, apar astfel structuri strine care perturb
structural organismul (Bott, 1976).
Dup o concepie cibernetic, toate organismele vii se afl n echilibru nestabil cu
mediul nconjurtor. Organismul viu reprezint o entitate de sine stttoare, relativ
independent fa de mediul extern care prezint procese coordonate pentru a-i conserva
identitatea, structura proprie i funciile specifice. De aceea, o substan strin corpului
intervine n echilibrul organismului n mod pasiv, provocnd reacia acestuia, sau activ prin
reacia sa cu componentele moleculare ale acestuia.
Distingem astfel: a) substane benefice echilibrului organismului, cum ar fi apa pur,
aminoacizii eseniali, unele vitamine, etc.; b) substane i produse utilizate ca alimente i care
au un caracter relativ nociv numai n cantitate mare; c) medicamente, care, n doze ponderale,
readuc la normal echilibrul perturbat. ntre acestea se afl i remediile homeopatice care
reprezint soluii cu concentraii infinitezimale, unele chiar dincolo de limitele numrului lui
Avogadro, capabile s ofere corpului bolnav informaia de care are nevoie pentru
autoechilibrare; d) substane toxice, factori care au tendina de a rupe echilibrul dintre individ
(sau descendena sa) i mediul nconjurtor acetia putnd avea o natur fizic, chimic sau
chiar psihic.
Toxicul i poate manifesta aciunea n mod direct prin reacia sa cu unele componente
ale corpului (cianurile reacioneaz cu ionii Fe3+ din citocromoxidaza pe care o inactiveaz)
sau indirect, prin produii si de degradare (formaldehida i acidul formic provenii din
metanol sunt, la rndul lor, toxici).
De asemenea, unii toxici cu aciune lent, cum ar fi substanele cancerigene,
suprasolicit organismul, pn la epuizare energetic ntr-un proces de ndeprtare al acestora
sau a produselor lor de degradare. n acest caz, toxicii se manifest pasiv, iar organismul
uman sau animal acioneaz nespecific asupra lor, n timp ce acetia perturb funciile
organelor i esuturilor prin prezena lor sau prin produsele lor de degradare i compuii lor cu
moleculele existente n organism.
Otrvirea reprezint ansamblul de semne i simptome constituind o stare patologic
care se instaleaz dup ptrunderea unei otrvi n organism. Ca urmare se produce
dereglarea, alterarea sau chiar abolirea unor funcii vitale, uneori cu sfrit letal. Hans Selye
221
(1984) constat n cazul tuturor agresiunilor, inclusiv a intoxicaiilor, o reacie stereotip din
partea organismului afectat. A numit-o sindrom general de adaptare, deoarece aceasta
permite corpului s rspund activ factorilor din mediul extern. Sindromul general de
adaptare cuprinde mai multe faze, i anume: o faz de alarm, o faz de adaptare i, n fine,
una de epuizare, n care caz sistemele de protecie ale corpului sunt depite. n oricare din
aceste etape de rspuns la agresiunea toxicului, n funcie de intensitatea acestuia, animalul
sau omul pot muri. Toxicii cu aciune moderat, dar de lung durat determin o a patra faz a
sindromului general de adaptare: faza canceroas.
222
Bibliografie general
Aderjan, R., Hofmann, S., Schmitt, G., Skopp, G. (1995) J. Anal. Toxicol., 19, 163.
Aderjan, R., Skopp, G. (1998) Ther. Drug Monit., 20, 561.
Allen, D.L., Scott, K.S. , Oliver, J.S. (1999) J. Anal. Toxicol., 23, 16.
Al-Amri, A.M., Smith, R.M., El-Haj, B.M., Jumaa, M.H. (2004) Forensic Sci. Int., 140, 175.
Al-Amri, A.M., Smith, R.M., El-Haj, B.M. (2005) Anal. Bioanal. Chem, 382, 830.
Amass, L., Bickel, W.K. (1997) J. Anal. Toxicol., 21, 406.
Amass, L., Kamien, J.B., Mikulich, S.K., (2000) Drug Alcohol Depend., 58, 143.
Andraus, M. H., Siquera, M. E. (1997) J. Chromatogr. B, 704, 143.
Anostos, N., Barrett, N.W., Lewis, S.W., Pearson, J.R., Kirkbridge, K.P. (2005) J. Forensic
Sci., 50, 1039.
Armbruster, D.A., Scharzhoff, R.H., Hubster, E.C., Liserio, M.K. (1993) Clin. Chem., 39,
2137.
Bagheri, H., Es-haghi A., Rouini, M.R. (2005) J. Chromatogr. B, 818, 147.
Backer, R.C., Monforte, J.R., Poklis, A. (2005) J. Anal. Toxicol., 29, 675.
Balikova, M., Maresova, V. (1998) Forensic Sci. Int., 94, 201.
Balikova, M., Maresova, V., Habrdova, V. (2001) J. Chromatogr. B, 752, 179.
Barnes, A.J., Kim, I., Schepers, R., Moolchan, E.T., Wilson, L., Cooper, G., Reid, C.H.,
Hand, C., Huestis, M. A. (2003) J. Anal. Toxicol, 27, 402.
Barrett, C., Good C., Moore, C. (2001) Forensic Sci. Int., 122, 163.
Baselt, R.C. (2000) Disposition of toxic drugs and chemicals in man, (5th ed). Chemical
Toxicology Institute, Foster City, California, pp. 353356.
Bermejo, A.M., Seara, R., Dos Santos Lucas, A.C., Tabernero, M.J. , Fernandez, P., Marsili,
R. (2000) J. Anal. Toxicol., 24, 66.
Besacier, F., Chaudron-Thozet, H., Rousseau-Tsangaris, M., Girard, J., Lamotte, A. (1997)
Forensic Sci. Int., 85, 113.
Blanchet, M., Bru, G., Guerret, M., Bromet-Petit, M., Bromet, N. (1999) J. Chromatogr. A,
854, 93108.
Bogusz, M. J., Maier, R. D., Erkens, M., Kohls, U. (2001) J. Anal. Toxicol., 25, 431.
Bogusz, M. J. (2008) Opioids: methods of forensic analysis. In Forensic Science, Vol. 6:
Handbook of analytical separation, M. J. Bogusz Edit.. 2nd Ed., Elsevier Sci. Publ.,
Amsterdam, Boston, Heidelberg, London, New York, Oxford, Paris, San Diego, San
Francisco, Singapore, Sydney, Tokyo, pp.3-117.
Bogusz, M.J. (2000) Opioid agonists, in: M.J. Bogusz (Ed.) R.M. Smith (Series Ed.),
Forensic Science, Handbook of Analytical Separations, Vol. 2. Elsevier Sciences,
Amsterdam, 365.
Bogusz, M.J. (1997) J. Anal. Toxicol., 21, 246.
Bogusz, M.J., Maier, R.D., Driessen, S. (1997) J. Anal. Toxicol., 21, 346.
Bogusz, M.J., Maier, R.D., Erkens, M., Driessen, S. (1997) J. Chromatogr. B, 703, 115.
Bogusz, M.J., Maier, R.D., Krger, K.D., Kohls, U. (1998) J. Anal. Toxicol., 22, 549.
Bogusz, M.J. (2000) J. Chromatogr. B, 748, 3.
223
Bouquillon, A.I., Freeman, D., Moulin, D.E. (1992) J. Chromatogr., 577, 354.
Bourel, B., Fleurisse, L., Hedouin, V., Cailliez, J.C., Creusy, C., Gosset, D., Goff, M.L.,
(2001) J. Forensic Sci., 46, 596.
Bourel, B., Tournel, G., Hedouin, V., Goff, M.L., Gosset, D. (2001) J. Forensic Sci., 46, 600.
Campobasso, C.P., Gherardi, M., Caligara, M., Sironi, L., Introna, F. (2004) Int. J. Legal
Med., 118, 210.
Bora, T., Merdivan, M., Hamamci, C. (2002) J. Forensic Sci., 47, 959.
Brenneisen, R., Hasler, F., Wursch, D. (2002) J. Anal. Toxicol., 26, 561.
Brenneisen, R., Hasler, F. (2002) J. Forensic Sci., 47, 885.
Brooks, K.E., Smiths, N.B. (1996) J. Anal. Toxicol., 20, 269.
Broussard, L.A., Presley, L.C., Pittman, T., Clouette, R., Wimbish, G.H. (1997) Clin. Chem.,
43, 1029.
Bttcher, M., Beck, O. (2005) J. Anal. Toxicol., 29, 769.
Brewer, W.E., Galipo, R.C., Sellers, K.W. , Morgan, S.L. (2001) Anal. Chem., 73, 2371
Buchan, B., Walsh, J.M., Leaverton, P.E. (1998) J. Forensic Sci., 43, 395.
Cailleux, A., Le Bouil, A., Auger, B., Bonsergent, G., Turcant, A., Allain, P. (1999) J. Anal.
Toxicol., 23, 620624.
Cartier, J., Gueniat, O., Cole, M.D. (1997) Sci. Justice, 37, 175.
Casella, G., Wu, A.H.B., Shaw, B.R., Hill, D.W. (1997) J. Anal. Toxicol., 21, 376.
Castiglioni, S., Zuccato, E., Fanelli, R. (eds.) (2011) Mass spectrometric analysis of illicit
drugs in the environment. Wiley-Interscience Series on Mass Spectrometry.
Ceccato, A., Klinkenberg, R., Hubert, P., Streel, B., (2003) J. Pharm. Biomed. Anal., 32, 619.
Cengiz, S., Ulukan, ., Ates, I., Tugcu, H. (2006) Forensic Sci. Int., 156, 91.
Cheever, M.L., Armendariz, G.A., Moody, D.E. (1999) J. Anal. Toxicol., 23, 500.
Chen, X.H., Hommerson, A.L.C., Zweipfenning, P.G.M., Franke, J.P., Harmen-Boverhof,
C.W., Ensing, K. , de Zeeuw, R.A. (1993) J. Forensic Sci., 38, 668.
Chikhi-Chorfi, N., Galons, H., Pham-Huy, C., Thevenin, M., Warnet, J.M., Claude, J.R.,
(2001) Chirality, 13, 187.
Cirimele, V., Kintz, P., Majdalani, R., Mangin, P. (1995) J. Chromatogr. B, 673, 173.
Cirimele, V., Kintz, P., Lohner, S., Ludes, B. (2003) J. Anal. Toxicol., 27, 103.
Cirimele, V., Etienne, S., Villain, M., Ludes, B., Kintz, P. (2004) Forensic Sci. Int., 143, 153.
Cody, J.T., Valtier, S. (2001) J. Anal. Toxicol., 25, 466.
Cody, J.T., Valtier, S., Kuhlman, J. (2001) J. Anal. Toxicol., 25, 572.
Concheiro, M., de Castro, A., Quintela, O., Lopez-Rivadulla, M., Cruz, A. (2006) J.
Chromatogr. B, 832, 81.
Cone, E.J., Darwin, W.D. (1992) J. Chromatogr., 580, 43.
Cone, E.J., Dickerson, S., Paul, B.D., Mitchell, J.M. (1992) J. Anal. Toxicol., 16, 72.
Cone, E.J., Holicky, B.A., Grant, T.M., Darwin, W.D., Goldberger, B.A. (1993) J. Anal.
Toxicol., 17, 327.
Cone, E.J., Presley, L., Lehrer, M., Seiter, W., Smith, M., Kardos, K.W., Fritch, D.,
Salamone, S., Niedbala, R.S. (2002) J. Anal. Toxicol., 26, 541.
Cooper, G., Wilson, L., Reid, C., Baldwin, D., Spiehler, C.H. (2005) J. Forensic Sci., 50, 928.
224
Palleschi, L., Lucentini, L., Ferretti, E., Anastasi, F., Amoroso, M., Draisci, G. (2003) J.
Pharm. Biomed.Anal., 32, 329.
Papadoyannis, I., Zotou, A., Samanidou, V., Theodoridis G., Zougrou, F. (1993) J. Liq.
Chromatogr., 16, 3017.
Paradis, C., Dufresne, C., Bolon, M., Boulieu, R. (2002) Ther. Drug Monit., 24, 768.
Pelders, M.G., Ros, J.J.W. (1996) J. Forensic Sci., 41, 209.
Penson, R.T., Joel, S.P., Bakhshi, K., Clark, S.J., Langford, R.M., Slevin, M.L. (2000) Clin.
Pharmacol. Ther., 68, 667.
Pichini, S., Altieri, I., Pellegrini, M., Zuccaro, P., Pacifici, R. (1999) Mass Spectrom. Rev., 18,
119.
Pichini, S., Altieri, I., Pellegrini, M., Pacifici, R., Zuccaro, P. (1999) J. Liq. Chromatogr. Rel.
Technol., 22, 873.
Polettini, A., Huestis, M.A. (2001) J. Chromatogr. B, 754, 447.
Proca, M., Butnaru, E., Agoroaei, L. (1996) Lucrri practice de toxicologie. Universitatea de
medicin i farmacie Gr. T. Popa Iai, Centrul de multiplicare UMF, Iai.
Radcliffe, C., Maguire, K., Lockwood, B. (2000) J. Biochem. Biophys. Methods, 43, 261.
Rasmussen, K.E., Pedersen-Bjergaard, S., Krogh, M., Ugl, H.G., Grnhaug, T. (2000) J.
Chromatogr.A, 873, 3.
Reddy, M.M.K., Ghosh, P., Rasool, S.N., Sarin, R.K., Sashidhar, R.B. (2005) J.
Chromatogr. A, 1088, 158.
Robertson, J. (1999) Forensic examination of hair. Taylor & Francis, London.
Rohrig, T.P., Moore, C. (2003) J. Anal. Toxicol., 27, 449.
Rook, E.J., Hillebrand, M.J.X., Rosing, H., van Ree, J.M., Beijnen, J.H. (2005) J.
Chromatogr. B, 824, 213.
Rop, P.P., Fornaris, M., Salmon, T., Burle, J., Bresson, M. (1997) J. Anal. Toxicol., 21, 232.
Roux, C., Doble, P. (2005) Talanta, 67, 360.
Rothsteyn, Y., Weingarten, B. (1996) Ther. Drug Monit., 18, 179.
Sachs, H., Denk, R., Raff, I. (1993) Int. J. Legal Med., 105, 247.
Samyn, N., De Boeck, G., Verstraete, A. (2002) J. Forensic Sci., 47, 1380.
Schanzle, G., Li, S., Mikus, G., Hofmann, U. (1999) J. Chromatogr. B, 721, 55.
Scheurer, J., Moore, C.M. (1992) J. Anal. Toxicol., 16, 264.
Schmidt, N., Sittl, R., Brune, K., Geisslinger, G. (1993) Pharm. Res., 10, 441.
Schtz, H., Erdmann, F., Risse, M., Weiler, G. (2002) Arzneimittelforschung, 52, 716.
Scott, K.S., Oliver, J.S. (1999) Med. Sci. Law., 39, 77.
Seno, H., Hattori, H., Kurono, S., Yamada, T., Kumazawa, T., Ishii, A., Suzuki, O. (1995) J.
Chromatogr. B, 673, 189.
Sibley, A. (1996) Forensic Sci. Int., 77, 159.
Sharma, S.P., Purkait, B.C., Lahiri, S.C. (2005) Forensic Sci. Int., 152, 235.
Stromberg, L., Lundberg, L., Neumann, H., Bobon, B., Huizer, H., van der Stelt, N.W.
(2000) Forensic Sci. Int., 114, 67.
Shou, W.Z., Chen, Y.L., Eerkes, A., Tang, Y.Q., Magis, L., Jiang, X., Naidong, W. (2002)
Rapid Commun. Mass Spectrom., 16, 1613.
229
Skopp, G., Ganssmann, B., Cone, E.J., Aderjan, R. (1997) J. Anal. Toxicol., 21, 105.
Skopp, G., Klinder, K., Potsch, L., Zimmer, G., Lutz, R., Aderjan, R., Mattern, R. (1998)
Forensic Sci. Int., 95, 99.
Slawson, M.H., Crouch, D.J., Andrenyak, D.M., Rollins, D.E., Lu, J.K., Bailey, P.L. (1999)
J. Anal. Toxicol., 23, 468.
Smith, M.L., Shimomura, E.T., Summers, J., Paul, B.D., Nichols, D., Shippee, R., Jenkins,
A.J., Darwin, W.D., Cone, E.J. (2000) J. Anal. Toxicol., 24, 522.
Spiehler, V.R., DeCicco, L., McCutcheon, J.R., Kupiec, T., Kemp, P. (2004) J. Forensic Sci.,
40, 621.
Sporer, K. A. (2003) Strategies for preventing heroin overdose. Brit. Med. J., 326, 442-444.
Sporkert, F., Pragst, F. (2000) J. Chromatogr. B, 746, 255.
Staerk, U., Kulpmann, W.R. (2000) J. Chromatogr. B, 745, 399.
Staub, C. (1997) Forensic Sci. Int., 84, 295.
Svensson, J.O., Yue, Q.Y., Swe, J. (1995) J. Chromatogr. B, 674, 49.
Tagliaro, F., Smith, F.P. (1996) Trends Anal. Chem., 15, 513.
Tagliaro, F., Turina, S., Smith, F.P. (1996) Forensic Sci. Int., 77, 211.
Taylor, R.B., Low, A.S., Reid, R.G. (1996) J. Chromatogr. B, 675, 213.
Tharp, A.M., Winecker, R.E., Winston, D.C. (2004) Am. J. Forensic Med. Pathol., 25, 178.
Theodoridis, G., Papadoyannis, I., Tsoukali-Papadopoulou, H., Vasilikiotis, G. (1995) J. Liq.
Chromatogr., 18, 1973.
Thevis, M., Opfermann, G., Schnzer, W. (2003) J. Anal. Toxicol., 27, 53.
Thevis, M., Geyer, H., Bahr, D., Schanzer, W. (2005) Eur. J. Mass Spectrom., 11, 419.
Thurman, E.M., Mills, M.S. (1998) Solid phase extraction: principles and practice, John
Wiley & Sons, New York.
Tracqui, A., Kintz, P., Mangin, P. (1997) J. Forensic Sci., 42, 111.Trenerry, V.C., Wells, R.J.,
Robertson, J. (1995) J. Chromatogr. A, 718, 217.
Tyrefors, N., Hyllbrant, B., Ekman, L., Johansson, M., Langstrm, L. (1996) J. Chromatogr.
A, 729, 279.
Ugland, H.G., Krogh, M., Rasmussen, K.E. (2000) J. Chromatogr. A, 749, 85.
Van Thuyne, W., Van Eenoo, P., Delbeke, F.T. (2003) J. Chromatogr. B, 785, 254.
Walsh, S.L., Preston, K.L., Bigelow, G.E., Stitzer, M.L. (1995) J. Pharmacol. Exp. Ther.,
274, 361.
Wang, W.L., Darwin, W.D., Cone, E.J. (1994) J. Chromatogr. B, 660, 279.
Wasels, R., Belleville, F. (1994) J. Chromatogr. A, 674, 225.
Vidal-Trecan, G., Vareson, I., Nabet, N., Boisonnas, A. (2003) Drug Alcohol Depend., 69,
175.
Vinner, E., Vignau, J., Thibault, D., Codaccioni, X., Brassart, C., Humbert, L., LHermitte,
M. (2003) Forensic Sci. Int., 133, 57.
Wennig, R., Moeller, M., Haguenoer, J.M., Marocchi, A., Zoppi, F., Smith, B.L., de la Torre,
R., Carstensen, C.A., Goerlach-Graw, A., Schaeffler, J., Leibberger, R. (1998) J. Anal.
Toxicol., 22, 148.
Wey, A.B., Thormann, W. (2001) J. Chromatogr. A, 916, 225.
230
Wey, A.B., Caslavska, J., Thormann, W. (2000) J. Chromatogr. A, 895, 133.Whittington, D.,
Wey, A.B., Thormann, W. (2002) J. Chromatogr. B, 770, 191.
Wilkins, D., Rollins, D.E., Seaman, J., Haughey, H., Krueger, G., Foltz, R.L. (1995) J. Anal.
Toxicol., 19, 269.
Wright, A.W., Nocente, M.L., Smith, M.T. (1998) Life Sci., 63, 401.
Wu, W.S., Tsai, J.L. (1999) Biomed. Chromatogr., 13, 216.
Zezulak, M., Snyder, J.J., Needleman, S.B. (1993) J. Forensic Sci., 38, 1275.
Zuccaro, P., Ricciarello, R., Pichini, S., Pacifici, R., Altieri, I., Pellegrini, M., DAscenzo, G.
(1997) J. Anal. Toxicol., 21, 268.
231