Biologie i farmacologie celular

Biologia celular ntr-o viziune

util studenilor n farmacie

PARTEA GENERAL

Introducere

Celula unitatea structural i funcional a organismelor vii

Cteva motive care s justifice interesul farmacitilor pentru biologia cellular

Organizarea i funcionarea structurilor celulare

Organizarea i rolul membranei celulare

Lipidele membranare
Proteinele membranare
Componenta glucidic a membranei
Funcionarea membranei ca sistem integrat

Organizarea i funciile nucleului

Organizarea i funcionarea organitelor celulare

Organite nedelimitate de endomembrane

Organite delimitate de endomembrane

Ribosomul
Citoscheletul

Microfilamentele

Filamentele intermediare

Microtubulii
Proteasomul
Apoptosomul
Mitocondria
Peroxisomul
Reticulul endoplasmic
Aparatul Golgi
Lizosomul

Principii ale funcionrii structurilor celulare i exploatarea lor n

farmacologie

PARTEA SPECIAL

Mecanisme celulare de aciune a medicamentelor

Medicamente cu acionare la nivelul membranelor

Medicamente cu acionare la nivelul nucleului
Medicamente cu acionare la nivelul structurilor citoplasmatice

esuturi de trecere a factorilor terapeutici

Sngele principalul esut de conducere a medicamentelor la int

Endoteliul cale i int farmacologic
Epiteliile digestive i implicarea lor n mecanismele farmacologice
Tegumentul i accesibilitatea sa pentru medicamente

ORGANIZAREA MOLECULAR
A MEMBRANELOR CELULARE
DE LA MOLECULE LA O STRUCTUR
FUNCIONAL

CONSIDERAII GENERALE ASUPRA

ORGANIZRII MOLECULARE A MEMBRANELOR

Ap:
Rezidiu uscat:
Substane minerale:
Substane organice:
Lipide:
Proteine:
Component glucidic:

20-30%
70-80%
~1%
~99%
40-50%
50-60%
1-10%

Aranjarea componentelor chimice n biomembrane

conform modelului mozaic fluid

Funciile membranei celulare

1. Funcie de barier
2. Funcie metabolic

Lipidele membranare
Aspecte generale
Definiia lipidelor
Problematica:
De ce lipide?
Care dintre lipide?
De ce bistrat?

Care dintre lipide?

Clasificri ale lipidelor:
1. Funcie de structura chimic global:
- fosfolipide
- colesterol
- glicolipide

70-75%;
20-25%;
1-10%.

Care dintre lipide?

Clasificarea fosfolipidelor:
1. n funcie de poliolul din structur:
- fosfogliceride (glicerofosfatide);
- fosfosfingozide (sfingofosfatide).
2. n funcie de X
X - colin fosfatidilcoline (PC);
20-25%
X - etanolamin fosfatidiletanolamine (PE); 20-25%
20-25%
X - serin fosfatidilserine (PS);
X - inozitol fosfatidilinozitoli (PI); ~1%
X - hidrogen acizi fosfatidici (PA); ~1%

Alte fosfolipide:
sfingomieline (SM);

20-25%

cardiolipine: 1,3-difosfatidil-glicerine.

Asimetria distribuiei lipidelor membranare

PC i SM foia extern a bistratului lipidic
PE, PS i PI foia intern a bistratului lipidic
Colesterolul echilibrat ntre cele dou foie
Glicolipidele foia extern a bistratului lipidic exclusiv

Mai mult eterogenitate

(a) n poziia 1 a glicerinei: un acid gras saturat (C14, C16, C18);
ordinea abundenei:C16 > C18 > C14.
(b) n poziia 2 a glicerinei: un acid gras nesaturat (C18:1, C18:2,
C18:3, C20:4)

De ce bistrat?
Structura cea mai simpl care rezolv problema separrii de mediu;
Posibiliti de asamblare spontan;
Tenacitate n refacerea structurii;
Confer proprieti fizico-chimice diferite celor doua fee ale membranei;
Asigur comportament independent, dar i solidar celor dou fee
ale membranei

Starea fizic i dinamica bistratului lipidic

- Proprieti fluide manifestate bidimensional

Micrile lipidelor n cadrul bistratului

1. Micri intramoleculare
2. Micri intermoleculare

Micrile intramoleculare
1. Micri de rotaie

109 rotaii/s

2. Micri de flexie

108 flexii/s

Micrile intermoleculare

1. Micri de translaie 107 schimbri direcie/s

2. Micri flip-flop

extrem de rare

Fluiditatea membranelor

Factori de reglare a fluiditii membranelor

Chimici

Fizici
- Presiunea
- Temperatura

- Intrinseci
- Extrinseci

Reglarea fluiditii membranelor

prin factori celulari intrinseci
Rolul acizilor grai nesaturai

Rolul colesterolului

Factori chimici extrinseci

de reglare a fluiditii membranelor

Fiziologici
Patologici
Terapeutici

Caracterul mezomorf al bistratului lipidic

Microdomenii de membran
Caveole
Plute lipidice

Rolurile lipidelor membranare

1. Rol structural asigur funcia de barier;
2. Roluri metabolice:
(i) Recunoatere i semnalizare intercelular (glicolipide)
(ii) Semnalizarea prin aciunea fosfolipazelor
- Fosfolipaza A1 (PLA1) elimin AG din poziia 1 a glicerinei;
- Fosfolipaza A2 (PLA2) elimin AG din poziia 2 a glicerinei;

C
A1

D
A2
B

- Fosfolipaza B (PLB) elimin ambii AG simultan;

- Fosfolipaza C (PLC) taie ntre glicerin i fosfat;
- Fosfolipaza D (PLD) scoate componenta X

Acidul arahidonic
surs de mesageri secunzi
(i) prostaglandine
1. Calea ciclooxigenazei:

(ii) prostacicline
(iii) tromboxani

2. Calea lipooxigenazei:

leucotriene

Cascada fosfoinozitidelor
fosfatidilinozitol (PI)
PI kinaz

ATP
ADP

fosfatidilinozitol-4-fosfat (PIP)
PIP kinaz

ATP
ADP

fosfatidilinozitol-4,5-bisfosfat (PIP2)
fosfolipaz C

(specific pentru fosfoinozitide PLC-)

diacilglicerol (DAG)

inozitol-1,4,5-trisfosfat (IP3)

PROTEINELE MEMBRANARE

PC

SM

PE

PS

Clasificarea proteinelor membranare

Funcie de poziia fa de bistrat
- periferice (extrinseci ) ~25%;
- integrale (intrinseci) ~75%.
ectoproteine

Proteinele extrinseci:
- ectoproteine;
- endoproteine.
?
protein
transmembranar

endoproteine

Proteinele intrinseci:
- transmembranare;
-?

Caracteristicile fizico-chimice
ale proteinelor periferice
Extractibile cu soluii saline, sau ageni chelatori;
Au caracter hidrofil;
Dup extracie nu poart lipide asociate i i pastreaz
solubilitatea n ap;

Caracteristicile fizico-chimice
ale proteinelor transmembranare
- se pot extrage din structura membranelor numai cu detergeni;
- rmn asociate permanent cu lipide;
- sunt insolubile n ap;
- au caracter amfifil.
Definirea domeniilor structurale
ectodomenii

domenii
transmembranare

1. ectodomeniu;
2. endodomeniu;
3. domeniu transmembranar.

Clasificare n funcie de numrul de treceri

prin bistratul lipidic:
1. unipas;
2. multipas.

endodomenii

Clasificare n funcie de orientarea lanului

polipeptidic fa de bistratul lipidic:
1. tip I NH2 terminal n ectodomeniu;
2. tip II NH2 terminal n endodomeniu.

Modaliti de structurare
a domeniului transmembranar

Proteinele membranei eritrocitare

Electroforeza n gel de poliacrilamid i n
prezen de dodecilsulfat de sodiu (SDS-PAGE)
-glicoforina: glicoprotein abundent; 30 kD;
migrare atipic; 131 aa; protein transmembranar,
uipas, tip I; ectodomeniu mare cu 16 lanuri glucidice;
endodomeniu mic; domeniu transmembranar cu 26aa;
funcie necunoscut.

- banda 3: funcia canal de schimb anionic (HCO3-/Cl-);

~100 kD; ~930 aa; protein transmembranar, multipas,
tip II; domeniul transmembranar cel puin 13 treceri n
helix prin bistratul lipidic (~50% din masa molecular);
endodomeniul mare, ~400 aa, ~40kD, poart gruparea
NH2-terminal; ectodomeniu mic, ~20 aa, doar 2 lanuri
glucidice.

Proteinele membranei eritrocitare

Citoscheletul asociat membranei reea de endoproteine,
grosime 5-10nm
spectrina: protein periferic (endoprotein); heterodimer,
form de bastona; echivalent n alte celule - fodrina.
cap

coad

ankirina: endoprotein globular ( ~ 8 x 9,5 nm); se leag la

spectrin n treimea caudal; echivalente n alte celule nectina,
syndeina.
banda 4.1: protein globular ( ~ 6 nm)
actina: protein globular ( ~ 5 nm); apare ca oligomer n nodurile
reelei citoscheletale asociate membranei.

Organizarea spaial
a citoscheletului asociat membranei

Mobilitatea proteinelor membranare

Rolul proteinelor membranare

Asigur funciile metabolice ale membranelor,
dar au i rol structural.
Transportori prin membran (canale, pompe,
conexoni);
Transportori cu membran (clatrin, caveolin);
Receptori (hormoni, factori de cretere, citokine
chemokine);
Molecule de adeziune (integrine, aderine);
Enzime (metaloproteinaze de matrice extracelular,
fosfolipaze);
Proteine de semnalizare;
Proteine structurale.

Componenta glucidic a membranei

1. glicolipide;
2. glicoproteine;
3. proteoglicani.

Generaliti asupra compoziiei glucidice a

glicocalixului
Monozaharide componente: Glc, GlcNAc, Gal,
GalNAc, Man, Fuc, acizi sialici (SA)
Glicolipidele: 1 lan oligozaharidic, neramificat
Glicoproteinele: mai multe lanuri, ramificate,
inserate N-, sau O-glicozidic
Consideraii structurale asupra secvenei
glucidice

Evidenierea glicocalixului
Metode nespecifice: rou de ruteniu

Evidenierea glicocalixului
Metode specifice: citochimie ultrastructural cu lectine

5, 10 ConA; 6, 11 WGA; 7, 12- RCA

Rolul componentei glucidice membranare

Rol de protecie a membranei
Particip la sarcina electric negativ a suprafeei
celulare
Necesare, dar nu neaprat suficiente funcionrii
receptorilor
Particip la fenomene de recunoatere celular:
Purttoarele antigenelor de grup sanguin
Extravazarea leucocitelor
Fertilizarea (fuzionarea spermatozoidului cu ovocitul)

Structurile glucidice purttoare ale

antigenelor de grup sanguin
Grupa O:

Fuc12Gal14Glc NAc

Grupa A:

Fuc12Gal14Glc NAc
13
GalNAc

Grupa B:

Fuc12Gal14Glc NAc
13
Gal

Diapedeza leucocitelor
n zonele inflamatorii

Etapele procesului de extravazare a

leucocitelor n zonele inflamatorii

REZUMAT

REZUMAT

microdomenii de membran; domenii de membran