1

Istoricul dezvoltrii cunotinelor despre grupele de snge i Rh

factor . Determinarea grupei de snge i a Rh factorului.
Transfuzia de snge.
Grupa de snge este o combinare de semne imunologice i genetice
normale, determinate prin ereditate i reprezint o calitate biologic
individual. Noiunea de grup sanguin este utilizat pentru a caracteriza
sngele unei persoane n funcie de prezena sau absena unui antigen
(aglutinogen) pe suprafaa eritrocitelor.
Transfuzia de snge este o metod activ de tratament biologic, care const n
ntroducerea de snge sau componeni sangvini n sistemul circulator al
pacientului.
Istoricul problemei
Conform cronicarului Stefano Infessura (1492), de prima transfuzie sanguina
de la om la om a beneficiat Papa Inocentiu al VIII-lea. La recomandarea
medicului sau, Pontifului aflat in com i-a fost donat sngele a trei baieti de
zece ani. Copiii i pontiful au murit ins. Deoarece la acel moment nu se
cunostea despre circulaia sangvin sngele a fost administrat per os.
In secolul al XVII-lea a fost descoperita circulaia sanguin de catre Harvey,
iar acest lucru a declanat o serie de experimente transfuzionale pe animale.
Prima transfuzie reuita de sange da la animale la om a fost efectuata, in anul
1667, de catre Jean Baptiste Denis, medicul lui Ludovic al XIV-lea, care a a
transfuzat snge de berbec unui biat de 15 ani.Pacientul a supraveuit.
Prima transfuzie reuita de la om la om a fost comunicata de J.B. Blundell in
1818, care a transfuzat snge de la so unei paciente dup natere.
n 1900 bacteriologul din Viena Karl Landteiner a ntrodus conceptul de
grup sangvin i au identificat primele 3 grupe. Ceva mai trziu n anul 1902
Stwili, 1907 Janski i n 1910 Moss independent unul de altul au identificat
grupa a patra. Karl Landsteiner, Alex Wiener, Philip Levine i R.E. Stetson,
au descoperit in anii 1939-40 factorul rezus. n urmtoarele decenii s-au
descoperit numeroasele sisteme antigenice: M, N, L, K, Lewis, HLA etc.

Alexandr Bogdanov deschide primul Institut de Tranfuzie Sanguin n anul

1925, la Moscova.
n 1937 Bernard Fantus, director al Cook County Hospital din Chicago,
nfiineaz prima bank sanguin n Statele Unite.
Dunghern i Ghirfeld au descoperit n eritrocitele omului 2
aglutinogeni, marcndu-i pri A i B. n plazm se afl respectiv 2 aglutinini
i . Mai trziu a fost identificat i aglutinogenul O, care este un antigen
slab i e lipsit de importan practic.
Imunologia i henotransfuzia.
Transfuzia de snge este o gref de esut sangvin i se supune legilor
imunulogiei despre compatibilitatea i rejetul grefelor de esut sau organe.
Aglutinogenii sunt polipeptizi cu sediul n stroma eritrocitelor, dar mai
pot fi gsite n leucocite, sperm, saliv, suc gastric. Ei sunt termostabili,
suport temperatur de 1000timp de 24 ore i snt rezisteni la uscare.
Aglutinogenul poate avea cteva varieti A1; A2 n funcie de aglunabilitate
(fora de aglutinare). n prezent au fost identificai circa 7500 de antigeni
eritrocitari mprii n 9 sisteme, ns importan practic o au numai A i B.
Aglutininile i se gsesc n fracia gama a globulinelor plasmei i-s
mai puini termostabile, suportnd temperatura sub 600. Ele se mpart n
Naturale (cu care omul se nate) i Imune (care apar pe parcursul
ontogenezei, spre exemplu- aglutinine anti-rezus). Mai deosebim aglutinine
la rece, care -i manifest reacia de aglutinare la temperatura +40 - +160 i
aglutinine la cald activitatea maximal la temperatura +37 0 - +420. n afar
de aceasta se ntlnesc aglutinine complete, care aglutineaz eritrocitele n
mediu salin i coloidal, precum i incomplete, fiind active nuami n mediu
coloidal.
Eritrocitele umane pot conine ambii aglutinogeni, unul singur sau nici
unul, tot aa i n plasm pot fi ntlnite ambele aglutinine, una singur sau
nici una. n dependen de aceasta n prezent printre locuitorii globului

conform sistemului ABO, pot fi ntlnite 4 grupe sangvine: O (I) , ; A (II)

; B (III) ; AB (IV) O.
Deci n medicina practic termenul Grupa de snge ca regul,
reflect combinarea antigenilor eritrocitari a sistemului ABO i a anticorpilori
respectivi n serul sangvin.
Grupele de snge se motenesc prin eriditate conform legilor clasice
ale geneticii, rmnnd stabile pe tot parcursul vieii.
Frecvena dup grup:
I 33,5%;

II 37,8%;

III 20,6%;

IV 8,1%

Reacia de aglutinare e identic celei de imunitate, aglutinogenii fiind

antigeni, iar aglutininele anticorpi. Reacia de aglutinare are loc atunci,
cnd aglutinogenii eritrocitelor donatorului ntlnesc n plasma primitorului
aglutininele respective (A se ntlnete cu , B cu , regula lui Ottenberg).
Deci, conform acestei reguli sunt aglutinate numai eritrocitele
donatorului.
n corespundere cu regula Ottenberg este posibil transfuzia nu numai
a sngelui de aceieai grup.
Eritrocitele grupei O (I) nu conin nici un aglutinogen i nu are loc
aglutinarea nici cu un ser de alte grupe. Deci, sngele de grupa O (I) poate fi
transfuzat i la persoanele cu orice grup sangvin.
n serul sangvin de grupa AB (IV) nu sunt aglutinine, deaceea
eritrocitele altor grupe de snge nu vor fi aglutinate i respectiv persoanelor
de gr.AB (IV) poate fi transfuzat snge de orice grup.
Grupul O este numit donator universal, iar AB este primitor universal. Aceste
noiuni snt valabile n cazul unei diluii mari (1/20) a sngelui transfuzat n
masa receptoare.
Singele integru de grupa 0 (I) nu poate fi transfuzat recipientului de alta
grupa in volum mai mare de 500 ml din cauza existentei in 10% de cazuri a
donatorului universal periculos cu titru inalt de aglutinine care pot
hemoliza eritrocitele cu antigenele A si B.

Regula Ottenberg poate fi utilizat doar numai la transfuzia a 0,5 litri

de snge donator.
n cazul pierderilor masive de snge, cnd este necesar transfuzia unei
cantiti mai mare de snge, aglitininele plasmei donatorului nu sunt suficient
diluate n serul recipientului i astfel pot aglutina eritrocitele pacientului. Din
aceast cauz este necesar de a transfuza numai snge de aceiai grup.
Grupul sangvin conform sisemului ABO poate fi determinat cu ajutorul
reaciei de aglutinare.
n prezent sunt 3 metode (figura Nr. 1.) de determinare a grupei de
snge conform sistemului ABO:
- cu seruri standarte;
- cu eritrocite standarte (metoda cruciat);
- cu olicloni Anti-A i Anti-B (anticorpi monoclonali)

Figura Nr. 1. Metode de determinare a grupei de snge conform sistemului

ABO.

Determinarea grupei sangvine cu seruri standarte

n literatura occidental mai este conoscut ca metoda Beth-Vincent i

consta in determinarea aglutinogenelor sngelui investigat prin punerea in
contact a singelui investigat cu seruri-test de grupele O (I), A (II), B (III) n
dou serii diferite pentru fiecare grup. n ambele serii rezultatele trebuie s
coincid.
Se ia o farfurie alb sau o plac pe care se scrie numele persoanei,
sngele cruia se cerceteaz i de la stnga la dreapta la o distan de 3-4 cm
se scriu cifrele I, II, III, care indic serurile test.
O pictur de ser-test (0,1 ml) de grupa I, se aplic cu o pipet sub cifra
I i la fel cu diverse pipete se aplic ser-test de gr.II i III, respectiv la cifrele
II, III.
Apoi cu o baghet de sticl se recolteaz snge de la pacient i se
aplic cte o pictur mic de snge (de 5-10 ori mai mici dect cele de ser )
alturi de fiecare pictur de ser standart.
Fiecare pictur de ser test se amestec cu un beior de sticl. Se
aprecieaz rezultatele timp de 5 min.:
1. Dac aglutinarea cu serul test de grupa I, II, III n-a avut loc,
nseamn c eritrocitele sngelui cercetat nu conin aglutinogene i el
se refer la grupa O (I). (figura Nr. 2.)

Figura Nr. 2. Determinarea grupei sangvine O (I) cu seturi standarte pe o

farfurie alb standart.

Figura Nr. 3. Determinarea grupei sangvine O (I) cu seturi standarte pe o

suprafa improvizat.
2. Dac aglutinarea a avut loc cu serul test de grupa I i III, dar n-a avut
loc cu serul de grupa II, sngele cercetat e de grupa II (A). (figura Nr.
4)

Figura Nr. 4. Determinarea grupei sangvine II (A) cu seruri standarte.

Figura Nr. 5. Dterminarea grupei sangvine cu numai o serie de ser este

inadmisibil
3. Dac aglutinarea a aprut cu ser de grupa I i II i lipsete cu ser de
grupa III, sngele cercetat aparine grupei III (B). (figura Nr. 6.)

Figura Nr. 6. Determinarea grupei sangvine III (B) cu seruri standarte.

4. Prezena aglutinrii cu serurile celor 3 grupe mrturisete, c

eritrocitele conin aglutinogenele A i B, adic sngele aparine grupei
AB (IV). n asemenea cazuri este necesar cercetarea suplimentar cu
ser test de grupa IV (AB). Numai lipsa aglutinrii cu acest ser
permite de a face concluzia, c sngele cercetat este de grupa a IV
(AB).

Figura Nr. 7. Determinarea grupei sangvine IV (AB)cu seruri standarte.

Figura Nr. 8. Determinarea grupei sangvine III (B) cu o singur serie de

ser poate duce la o eventual eroare cu consecine grave.
Determinarea grupei sangvine se efectueaz n ncperile luminoase cu
temperatura aerului de 15-250C. Pentru a evita confundarea aglutinrii
adevrate cu ceea nespecific, se va ine cont de posibilitatea panaglutinrii i
pseudoaglutinrii.
Panaglutinarea la rece (figura Nr. 9.) se poate produce n caz de
utilizare a serurilor proaspete i de determinare a grupelor sangvine la o
temperatur mai joas de 17-180C. Ea survine mai trziu dect cea adevrat
i decurge lent (de la 5 pn la 15 min.). Fulgii de eritrocite sunt mai puin
stabili i se descompun n urma agitrii lamei de sticl sau dup adugarea
unei picturi de soluie fiziologic. Dezvoltarea panaglutinrii nespecifice,

10

poate fi cauzat nu numai de temperaturile joase, dar i de calitatea sngelui.

Figura Nr. 9. Panaglutinarea la rece.

Panaglutinarea n caz de infectare bacterial a sngelui cercetat a fost
descris n anul 1927 de Tomsen. Acest fenomen (fenomenul Tomsen) se
caracterizeaz prin aglutinarea sngelui cu seruri de toate grupele i cu serul
sngelui propriu. Acest fenomen poate avea loc la un ir de maladii: maladii
ale sngelui, splenomegalie, ciroz hepatic, maladii infecioase etc.
Este descris panaglutinarea i la persoanele sntoase, dar foarte rar
(0,07%). Fenomenul de panaglutinare are loc numai la temperatura camerei,
iar la temperatura aproape de corpul omenesc, de obicei nu se depisteaz.

11

Figura Nr. 10. Pseudoaglutinare (aglutinare fals)

Pseudoaglutinarea (aglutinare fals) const n formarea ficurilor de
eritrocite. Ele sunt nestabile i se descompun la adugarea picturii de soluie
fiziologic.
n toate cazurile de ndoial determinarea grupei sangvine trebuie
repetat.

Determinarea grupei sangvine cu ajutorul

eritrocitelor standarte (metoda ncruciat)
Metoda Simonin prevede determinarea aglutininelor sngelui investigat prin
punerea in contact a serului cptat din sngelui investigat cu eritrocite test
O,A,B.
Metoda este utilizat mai frecvent n laboratoare serologice i const n
determinarea prezenei sau lipsei n sngele cercetat a antigenilor A i B cu
ajutorul serurilor izohemaglutinante i deasemenea a anticorpilor i cu
ajutorul eritrocitelor standarte.
Eritrocitele standarte sunt pregtite din sngele donatorilor cu grupa
de snge cunoscut, se pstreaz la temperatura de 4-80C. Termenul de
valabilitate este de 2-3 zile.

12

Sngele pentru cercetare este colectat din ven ntr-o eprubet uscat,
este centrifugat i este lsat n repaos pe un timp de 20-30 minute pentru
delimitare n ser i eritrocite .
Pe o farfurie (plac) marcat n 6 godeuri se aplic cte 1 pictur mare
de ser al sngelui cercetat (0,1 ml) iar alturi de ele cte 1 pictur mic
(0,01 ml) de eritrocite standarte de grupele O (I), A (II), B (III) (cte 2 serii).
Picturile respective

sunt amestecate

cu beioare de sticl i sunt

supravegheate timp de 5 min, iar n picturile unde a avut loc aglutinarea

se adaog cte o pictur de soluie fiziologic apoi se determin rezultatul.
Rezultatele sunt apreciate numai dup analiz complex a 2 metode de
determinare a grupei sangvine: cu seruri standarte i cu eritrocite standarte.
Aprecierea rezultatelor reaciei cu eritrocite standarte are urmtoarea
particularitate: eritrocitele gr. O (I) sunt de control (n ele nu sunt antigeni, ce
face imposibil reacia specific de aglutinare cu orice ser).

Determinarea grupei sangvine cu ajutorul anticorpilor

monoclonali (oliclon Anti-A i Anti-B)
oliclonii anti-A i anti-B (figura Nr. 11.)

sunt utilizai pentru

determinarea aglutinogenilor eritrocitari i reprezint un praf liofilizat de

culoare roie (anti-A) sau albastr (anti-B), care se dizolv cu soluie
fiziologic nainte de cercetare.

13

Figura Nr. 11. Seruri ce conin anticorpilor

monoclonali (oliclon

Anti-A, de culoare roie i Anti-B, de culoare albastr)

oliclonii anti-A i anti-B (figura Nr. 12.) se aplic pe o plac alb cte
o pictur mare (0,1 ml) respectiv inscripiilor anti-A i anti-B.

14

Figura Nr. 12. Tehnica determinrii grupelor sangvine cu olicloni antiA i anti-B.
Alturi de aceste picturi se aplic cte 1 pictur mic (0,01 ml) de
snge cercetat. Dup amestecarea lor timp de 2-3 minute se urmrete dup
reacia de aglutinare:
1. Dac nu este aglutinare n ambele godeuri (anti-A i anti-B) sngele
cercetat aparine grupei O (I). (figura Nr. 13.)

Figura Nr. 13. Sngele investigat aparine grupei O (I ).

2. Cnd are loc aglutinarea numai n godeul cu nscripia anti-A, sngele
cercetat aparine grupei A (II). (figurile 14 i 15)

15

Figura Nr. 14. Sngele investigat aparine grupei A (II).

Figura Nr. 15. Sngele investigat aparine grupei A (II).

3. Cnd are loc aglutinarea numai n godeul cu inscripia anti-B, sngele
cercetat aparine grupei B (III). (figurile 16 i 17)

16

Figura Nr. 16. Sngele investigat aparine grupei B (III).

Figura Nr. 17. Sngele investigat aparine grupei B (III).

4. Dac are loc aglutinarea n ambele godeuri anti-A i anti-B sngele
cercetat aparine grupei AB (IV). (figurile 18 i 19)

17

Figura Nr. 18. Sngele investigat aparine grupei AB (IV).

Figura Nr. 19. Sngele investigat aparine grupei AB (IV).

18

n anul 1940 Landteiner i Viner au mai descoperit n eritrocite un

aglutinogen n afara sistemului ABO, care a fost numit rezus (Rh), deoarece
pentru prima dat a fost identificat n eritrocitele maimuei macaus rezus.
Descoperirea

acestui

aglutinogen

ilucidat

multe

fenomene

posttransfuzionale negative, precum i cauza avorturilor spontane i a

icterului hemolitic la nounscui de ctre femei cu (Rh-) rezus negativ.
S-a constatat c n dependen de aglutinogenul Rh toi oamenii se
mpart n 2 grupe: rezus pozitiv (Rh+) 85% i rezus negativ (Rh-) 15%.
De memorizat c n Azia, printre rasa mongoloid oameni rezus-negativ
numr doar circa 0,5%, deaceea cazurile de rezus-conflict printre ei snt
excluse.
n condiii normale nu exzist aglutinine antiRh, dar acestea pot aprea
prin izoimunizare
Anticorpii Anti-Rh (aglutininele imune) se formeaz n cteva
sptmni, deaceea prima transfuzie de snge Rh-pozitiv primitorului v-a
trece fr complicaii, precum i prima sarcin la o femeie rezus-negativ cu
un fat rezus-pozitiv se va termina cu bine.

Determinarea RH-factorului
Exist multe metode de determinare a Rh-factorului. n practica clinic
cel mai frecvent se utilizeaz 2 metode:
1. reacia cu Anti-D anticorpi monoclonali;

2. metoda expres de determinare a RH-factorului pe o suprafa fr

nclzire.

19

Vom atrage atenia la reacia cu Anti-D (Figura 20.) anticorpi

monoclonali (oliclon Anti-D).

Figura 20. Ser anti - D utilizat pentru determinarea factorului rezus.

Pe o plac se aplic o pictur mare de oliclon Anti-D (0,1 ml) i 1
pictur mic (0,01 ml) de snge cercetat, apoi se amestec cu un beior de
sticl. Dup reacie e necesar de urmrit timp de 2,5 5 minute.
Dac este aglutinare sngele cercetat este Rh(+) (Figura 21), iar dac
lipsete aglutinarea, atunci va fi Rh (-).

20

Figura 21. Sngele cercetat este Rh(+)

Hemotransfuzia
Hemotransfuzia reprezint utilizarea unei grefe de esut sangvin
colectate din circuitul sangvin al donatorului care este transferat n
circuitul sangvin al recipientului.

Metodele de transfuzie. Conservarea sngelui.

Exist 2 metode de transfuzie a sngelui: direc i indirect. Metoda
indirect prezint colectarea sngelui n vase speciale, conservarea i
pstrarea lui un timp oarecare n condiii speciale. n afara vaselor sangvine
sngele poate fi pstrat n 2 stri:
1. lichid, la temperatur supra 00; (Figura 22.)
2. solid, congelat, la temperaturi mult sub 00.

21

Figura 22. Mas eritrocitar pstrat n pung de plastic.

Stabilizarea sngelui n stare lichid poate fi cptat prin extragerea
sau distrugerea unui component al sistemului de coagulare a sngelui. Cei
mai rspndii conservani astzi snt: acidul citric i citratul de natriu, care
nltur ionii de calciu i zdrnicesc prima etap a procesului de coagulare
formarea trombinei. Pentru prelungirea viabilitii hematiilor sangvine pe
lng citrat n soluiile de conservare se mai adaog substane, care ptrund n
eritrocit i particip la metabolismul lui (glucoza, fosfat anaorganic ect.).
Pentru conservarea sngelui utilizat n circulaia extracorporal este
folosit heparina n proporii de 50 mg la 1 litru de snge.
Pentru stabilizarea sngelui se utilizeaz sol. citrat de sodiu de 6% n
raportul 10 ml de sol. la 100 ml de snge.
n condiiile contemporane mpestriate cu cutremure de pmnt,
incendii, naufragii, catastrofe auto, avio i feroviare, rzboaie permanente i
alte cataclisme se cer rezerve mari de snge conservat. Sub acest aspect
prezint interes metoda de conservare i pstrare a sngelui prin congelarea
la temperaturi ultrajoase (-19960) propus de ctre savantul sovetic
F.R.Vinograd-Finkel i american Smith (1956-1963). Esena metodei se

22

reduce la diminuarea total a metabolismului hematiilor sangvine la

temperaturi joase.
Pentru a prentmpina alterarea elementelor figurate la trecerea dintr-o
stare n alta snt folosii crioprotectorii.
Sngele conservat se pstreaz n fiole, flacoane cu respectarea
asepsiei la temperatura 4-60C n frigider. Inainte de hemotransfuzie indiferent
de termenul de pstrare trebuie determinat valabilitatea sngelui pentru
transfuzie. Aceasta se face prin examinarea lui imediat dup ce se scoate din
frigider, nainte de agitare. Sngele n fiol se depoziteaz n 3 straturi: la
fund stratul de eritrocite, deasupra lui un strat foarte subire albui de
leucocite i deasupra un strat strveziu puin glbui de ser. Sngele cu
chiaguri, cu plasma tulbure, cu fulgi i pelicule, colorat n rou n rezultatul
hemolizei eritrocitelor nu poate fi folosit pentru transfuzie.
n timpul pstrrii sngelui conservat (pn la 21 zile) el este supus
unor modificri eseniale: n sngele proaspt transfuzat hematiile triesc 60
zile (n condiii normale 110-120 zile) n proporii de 52%; n sngele
conservat hematiile triesc 60 de zile dup transfuzie, dar n proporie de
numai 25%. n timpul pstrrii n sngele conservat crete concentraia
acidului lactic (de la 20 la 150 mg/100 ml), pH-ul scade de la 7 la 6,68; crete
potasiul plasmei, bilirubina hemolitic.
In procesul pastrarii se formeaza microcheaguri cu dimensiunile de la 15 pina
la 200 mkm care includ fibrina si cellule sanguine. Numarul microcheagurilor
la ziua 21-a de pastrare atinge 100 000 in 1 mm3 si mai mult. In timpul
transfuziei o parte din microcheagurile cu dimensiunile de 10-160 mkm se
opresc in capilarele plaminilor si pot fi cauza insuficientei grave pulmonarocirculatorie i detres sindromului respirator.
n timpul pstrrii scade elasticitatea membranei eritrocitelor, ultimile pierd
proprietatea de a penetra prin capilarele cu lumenul de 2-3 ori mai mic decit
diametrul eritrocitelor, se diminueaz numrul leucocitelor i activitatea lor
fagocitar.
Peste 10-12 ore de la momentul conservarii singelui brusc scade numarul de
trombocite si proprietatile lor de adezivitate si agregabilitate. Peste 24 de ore
de pastrare a singelui in el nu se contin trombocite funcional active i scade
activitatea factorilor de coagulare (V si VIII .) n legatura cu care fapt sngele
nu poseda actiune hemostatica.

23

Toate cele enumrate ne conving, c transfuzia indirect dei e cea mai

rspndit metod nu e cea mai bun i confirm aforismul lui Arnold Tank,
c sngele cel mai bine se pstreaz n venele donatorului.
Efectele negative, caracteristice metodei indirecte, lipsesc n transfuzia
direct, care este indicat n toate cazurile de hemotransfuzie, dar mai ales:
1. dereglarea proceselor de coagulare fibrinoliz, hemofilie, sindromul
CID;
2. oc grav;
3. boala arilor;
4. intoxicaii grave pancreatit;
5. insuficien imunobiologic septicemia etc.

Felurile de hemotransfuzii. Pe lng transfuzia de snge proaspt sau

conservat mai deosebim urmtoarele tipuri de transfuzie de snge:
1. Autotransfuzie, care poate fi efectuat n mai multe variante:
b) Reinfuzie prin recoltarea sngelui revrsat n cavitatea peritoneal (la
bolnavele cu sarcin ectopic ntrerupt, la bolnavii cu ruptura splinei)
sau pleural (la bolnavii cu plgi a plmnului, diafragmei, cordului,
aortei). Sngele este recoltat din cavitate i reinfuzat prin intermediul
unei truse cu filtru.
c) Autohemotransfuzie sngele bolnavului luat cu cteva zile pn la
operaie, conservat prin adugarea citratului de natriu (4% - 10 ml la
fiecare 100 ml de snge), pstrat la temperatura +8 0 i transfuzat n
timpul operaiei.
d) Autohemotransfuzia sngelui supus iradierii cu raze ultraviolete sau
lazer n caz de sepsis, plgi imense, arsuri, etc.
2. Exsanguinotransfuzie, sub care subnelegem evacuarea parial sau
total a sngelui din vasele bolnavului (din artere i transfuzia

24

concomitent (n vene) a acelueai volum de snge de la donator.

Scopul acestui tip de transfuzie este nlturarea toxinelor ptrunse n
snge. Este indicat n caz de oc hemolitic posttransfuzional, icter
hemolitic la nou-nscui, alte intoxicaii.
3. Transfuzia sngelui cadaveric. S-a constatat, c dup moarte sngele
nu se coaguleaz din cauza procesului de difibrinare. V.N.amov i
M.H.Costiucov n experien au dovedit c sngele cadaveric poate fi
colectat n primele 8 ore dup moarte. Colectat n condiii sterile este
pstrat la temperatura de +40C fr nici un conservant i dup un
control bacteriologic poate fi transfuzat.
Pentru prima dat sngele cadaveric, colectat de la un bolnav n vrsta
de 60 de ani, decedat n urma insuficienei cardiace a fost transfuzat
unui tnr cu oc hemoragic (-i tiase venele de la mini) de ctre
ilustrul chirurg sovetic S.S.Iudin la 23 martie 1930 n clinica
Institutului N.V.Sclifosovski. Tnrul a primit 400 ml de snge
cadavric i peste cteva zile a prrsit clinica devenind sntos.
4. Transfuzia sngelui placentar, retroplacentar i colectat n urma
emisiei de snge n criza hipertonic sau insuficiena cardiac. n
prezent acest snge se utilizeaz mai frecvent pentru prepararea
substituienilor naturali mas eritrocitar, preparate de albumin etc.
Cile de administrare a sngelui. Cea mai frecvent cale
intravenoas, poate fi folosit ori care ven, dar de cele mai dese ori
cubitale. Cnd e necesar o transfuzie voluminoas i de lung durat se
efectueaz caterizarea venelor magistrale subclavicular, cav superioar,
inferioar, jugular i altele.
Calea intraosoas (n stern, calcaneu, substana spongioas a osului
iliac ect.) este rar folosit.

25

Intraarterial, intraaortal i intraventicular sngele poate fi

transfuzat n caz de reanimare sub presiunea de 180-200 mmHg.
Foarte rar n corpul cavernos al penisului (arsur total a pielii),
venele fontanelei mari la copii.
n dependen de scopul transfuziei i dimensiunile vasului transfuzia
poate fi executat n jet, n picturi frecvente, n picturi rare, etc.

Mecanismul de aciune a sngelui transfuzat

Aciunea sngelui transfuzat asupra organismului este variat i de cele
mai dese ori complex. Deosebim

aciune substituient, stimulatoare,

inactivant, imunobiologic i nutritiv.

1. Aciunea substituient se reduce la restabilirea volumului sngvin
circulant cu toate funciile sale: meninerea tensiunii arteriale,
transportarea oxigenului, restabilirea hematocritului i volumul
proteinic. n acest scop se aplic doze mari 1000-2000 ml, iar uneori
i mai mult.
2. Aciunea de stimulare se reduce

la creterea tonusului vascular,

ameliorarea regeneraiei sngelui i esuturilor, sporirea activitii

fagocitare,

mobilizarea

sngelui

din

depozite

ca

urmare

normalizarea funciei tuturor organelor i sistemelor. n acest scop se

vor transfuza doze mijlocii 250 ml de snge cu un interval de 3-5
zile.
3. Aciunea hemostatic se manifest prin micorarea sau chiar oprirea
definitiv a sangvinrii, mecanismul fiind aglomerarea de factori
hemostatici, ridicarea tonusului aparatului neuro-muscular al peretelui
vascular i stimularea produciei factorilor hemostatici n organism- n
acest scop se recomand doze mici (100-150 ml) de snge proaspt (cu
pstrarea pn la 24 ore, dup care trombocitele mor), sau mas
trombocitar.

26

4. Aciunea de inactivare se manifest prin diminuarea concentraiei

toxinelor, fixarea substanelor otrvitoare i eliminarea lor cu urina.
ns pentru un efect veritabil se efectueaz exsanguinotransfuzia cu
renovarea complet a sngelui.
5. Aciunea imunobiologic se bazeaz pe sporirea activitii fagocitare
a leucocitelor, fortificarea producerii

de anticorpi, restabilirea

reactivitii normale a organismului. n acest scop se aplic doze

mijlocii (250-300 ml) de snge proaspt (transfuzie direct) cu interval
de 2-3 zile.
6. Acinea nutritiv se reduce la restabilirea volumului de proteine,
cantitilor de microelemente, electrolii, lipide, glucoz, vitamine.

Indicaiile absolute pentru transfuzia de snge sunt:

- hemoragie acut (mai mult de 15% din volumul sngelui circulant- cu
instalarea anemiei acute);
- oc traumatic si hipovolemic;
- operaii complicate, nsoite de traumarea masiv a esuturilor i
hemoragie cataclismica intraoperatorie.
-

boala arsilor si socul combustitional

- hemoragia masiva si rapida care se poate solda cu deces fara scaderea

hemoglobinei mai jos de 25 g/l si a hematiilor pina la 1 mln.
Indicaiile relative:
- anemia: cu Hb sub 80%,, Ht < 30%, anemii neoplastice,anemii
secundare n cadrul leucozelor
- maladii inflamatorii cu intoxicaie grav;
- prelungirea hemoragiei, dereglri a sistemului de coagulare;
- diminuarea statutului imunologic a organismului;
- unele otrviri;

27

- procese inflamatorii cronice de lung durat nsoite de micorarea

proceselor de regenerare i a reactivitii.
- combustiile ntinse nsoite de anemie
n prezent n legtur cu faptul c exist substituieni sangvini ce
ndeplinesc funciile sngelui, principala indicaie relativ pentru transfuzie
sangvin este anemia i anume diminuarea hemoglobinei mai jos de 80 g/l.
Indicii

hemoglobinei

hematocritului

ca

crteriu

pentru

hemotransfuzie.
Hemoglobina sub 60 g/l: se administreaz eritrocite; peste 100 g/l eritrocite
nu administram; ntre 60-100 g/l :drept criterii de administrare vor servi
semnele de ischemie de organ in evolutie (hemoragie activ, hipovolemie).
Hematocritul (norma 0,4- 0,5 pentru brbai i 0,36 - 0,42 pentru femei).
Mrirea indicilor hematocritei indic despre micorarea VSC din cauza
pirderilor de plazm. Micorarea indicilor Ht este rezultatul pierederilor de
eritrocite. Micorarea Ht sub 0,3 este indicaie pentru hemotransfuzie.
Pierderea la 20% din VSC i micorarea Hb pn la 60 - 80 gram pe litrui a
hematocritei sub 0,3 este indicaie pentru hemotransfuzie

Contraindicaii la transfuzia sangvin

Absolute:
1. Insuficiena cardiopulmonar acut, nsoit de edem pulmonar;
2. Infarct al miocardului
n caz c persist o hemoragie

masiv sau oc traumatic, atunci

contraindicaii absolute nu exist i snge e necesar de transfuzat.

Relative:
1. Tromboze acute i embolii.
2. Dereglri grave a circulaiei cerebrale: contutii i comoii cerebrale.
3. Endocardit septic.

28

4. Viciile cardiace.
5. Miocardite i miocardioscleroze cu insuficien vascular gr. II, III.
6. Boala hipertonic gr. III.
7. Dereglri grave a funciei hepatice i renale.
8. Maladii alergice- astm bronsic, exema, edem Quinke.
9. Reumatism.
10.Tuberculoz acut i diseminat, TBC activ n stadiu infiltrativ.

Consecutivitatea aciunilor medicului

la transfuzia de snge:

1.

De a determina indicaiile i contraindicaiile pentru hemotransfuzie

i de a colecta anamneza transfuzional.

2.

De a determina grupa de snge i factorul rezus al recipientului.

3.

De a selecta sngele corespunztor dup grup i rezus i de a aprecia

macroscopic calitatea lui.

4.

De a verifica grupa de snge a donatorului dup sistemul ABO.

5.

De a efectua proba de compatibilitate individual dup sisitemul

ABO.

6.

De a efectua proba de compatibilitate individual dup rezus-factor.

7.

De a efectua proba biologic.

8.

De a efectua hemotransfuzia.

9.

De a ndeplini actele necesare. (Figura 23.)

n timpul transfuziei i cteve ore dup transfuzie se monitorizeaz pulsul,

tensiunea arterial, diureza, prezena reaciilor adverse i se complecteazo
protocolul hemotransfuziei. (Figura 24.)

29

Figura 23. Eticheta de pe fiecare flacon de snge transfuzat se lipete n

fia de observaie a pacientului.

Figura 24. Protocolul hemotransfuziei.

10. De a supraveghea pacientul dup hemotransfuzie.

30

Proba de compatibilitate individual

Pe o plac (farfurie) (figura 25.) sau n eprubet (figura 26.) se aplic o
pictur mare (0,1 ml) de ser sangvin de la recipient i 1 pictur mic (0,01
ml) de snge de la donator, apoi se amestec. Reacia se efectueaz la
temperatura 15-250C, rezultatele se aprecieaz peste 5 min. Dac aglutinarea
lipsete demonstreaz compatibilitatea sngelui donatorului i recipientului,
iar dac persist aglutinarea atunci sngele este incompatibil.

Figura 25. Proba de compatibilitate individual

Figura 26. Proba de compatibilitate individual

31

Proba biologic
La nceputul transfuziei se transfuzeaz 10-15 ml de snge, dup
aceasta transfuzia se stopeaz pe un timp de 3 minute. (Figura 27.) Dac
lipsesc semne clinice de complicaii sau reacii (tahicardie, dispnee,
hiperemie, dureri n regiunea lombar), atunci din nou se transfuzeaz 10-15
ml de snge i n decurs de 3 minute se supravegheaz bolnavul. n total se
repet procedura de 3 ori.

Figura 27. Proba biologic

Sngele i substituienii sngelui.
Snge integral proaspt
Prin fractionarea singelui integru obtinem urmatoarele componente:
1. Concentrat de eritrocite
2. Concentrat de trombocite, concentrat de trombocite deleucocitizat.
3. Plasma
Din plasma se obtin derivate:
1.Albumina
2.Crioprecipitat
3.Trombina

32

4.Imunoglobulina normala umana

5.Gamaglobulina anti RhD
6.Gamaglobuline imune specifice
7.Concentrate ale factorilor de coagulare si anticoagulare (factorul VIII, V,
IX, VII, antitrombina II, proteina C etc).
Este ideal s se utilizete sangele uman izogrup cu Rh compatibil care este cel
mai bun inlocuitor sanguin.
Snge integral conservat
Substitueni de snge naturali:
1. plazm: integral, defibrilat, congelat,uscat.
plasma liofilizata uscata la vid la -30
2. albumin uman.
3. soluia de globuline 6%.
4. masa eritrocitar.
Substituieni artificiali:
Soluii cristaline soluie izotonic de Na Cl, soluii Ringer-Locke, Hartman,
solutia glucozata 5% - sunt solutii izotonice care datorit presiunii oncotice
mici parasesc rapid patul vascular.
Soluii coloidale dextran, macrodex, poliglucin, reopoliglucin etc.
Gelatina este un substituient de origine animala care se obtine prin hidroliza
partiala a colagenului din piele, tesut conjunctiv si oase.
Dextranul este un polimer al glucozei obtinut din melas de zahar sub
actiunea unei bacterii. Se utilizeaza sub doua forme: dextran 70 i dextran 40
(greutatile moleculare medii ale celor doi produi fiind de 70.000 si respectiv
40.000). Actioneaz producnd o crestere a volumului circulant sangvin i
ameliorand astfel starea hemodinamica; durata efectului este de aproximativ
24 de ore.
Polivinilpirolidonul este un polimer sintetic obtinut prin condensarea
aldehidei formice si acetilenei cu amoniac. Utilizarea sa clinica este practic
abandonata datorita leziunilor hepatice grave pe care le poate produce.
Complicaii dup hemotransfuzie
Complicaiile duo hemotransfuzie se ntlnesc n aproximativ 10%
cazuri, cu o letalitate de 0,1 2%.
Clasificarea complicaiilor posttransfuzionale:
A. Dup timpul de apariie a rspunsului:
1) acut un rspuns neateptat la un pacient asociat cu transfuzia sanguin
aprut n primele 24 ore de la transfuzie;
2) tardiv un rspuns neateptat la un pacient asociat cu transfuzia
sanguin, aprut dup 24 ore de la transfuzie;
B) dup tip:
1 antigenice;

33

- hemoliza imunologic, determinat de incompatibilitate OAB sau aloanticorpi;

- hemoliza imunologic, determinat de incompatibilitate dup ali aloanticorpi;
- sindromul gref contra gazd;
2) alergice;
- purpura posttransfuzional;
- hipersensibilitate, anafilaxie;
- sindrom pulmonar acut, legat cu transfuzia;
3) pirogenice.
4) infecioase:
- infecie viral asociat cu transfuzia (HVB, HVC, HIV, alta);
- infecie bacterian asociat cu transfuzia;
- infecie parazitar asociat cu transfuzia (malaria, alta);
- hemoliza neimunologic;
5.) mecanice:
- suprancrcare circulatorie;
- embolie aerian;
6.) - hipocalciemia.
Procesul hemotransfuziei poate fi grevat de apariia unor complicaii cu o
larg gam de gravitate. Deosebim urmtoarele tipuri de complicaii
posttransfuzionale: accidente hemolitice precoce i tardive, purpura
posttransfuzionala,complicaii

anafilactoide,

reactii

febrile

(pirogene),

complicai infecioase. Accidente hemolitice acute se produc prin distrugerea

eritrocitelor donatorului de catre anticorpii primitorului: naturali sau
dobanditi. Cresc accidentele hemolitice prin allo-anticorpi imuni castigati
prin tmsfuzii anterioare sau prin sarcina (sistemul Rh, Kell, Kidd).ocul
hemotransfuzional reprezint un accident tipic hemolitic acut i se manifest
la nivel celular prin:distrugerea eritrocitelor donarului de ctre anticorpii
specifici naturali sau dodndii prin autoimunizare sau distrugerea
eritrocitelor recipientului n caz de hemotransfuzii masive.Gravitatea ocului
hemolitic depinde de concentraia anticorpilor n snge, de cantitatea i de
viteza de transfuzie a sngelui incompatibil. Deosebim urmtoatele faze ale

34

accidentului hemoloitic acut: faza de oc, care dureaz de la cteva ore pn

la 1 - 2 zile La debutul clinic al ocului hemolitic apar dureri puternice n
regiunile lombare, compresie toracic, cefalee, dispnee. Starea general a
pacientului se nrutete brusc. Pacientul are greuri, vomit, apare
hipertermia i frisonul. Pulsul devine frecvent, iar tensiunea atrerial scade,
dup cteva ore apare hemoglobinuria.Dac pacientul supraveuiete la 1-2
zile de la debut se instaleaz faza de anurie, care poate dura 7 14 zile, dac
pacientul nu decedeaz din cauza insuficienei renale acute ultimul trece n
faza de restabilire a funciei renale.n perioada de anurie se determin
indici avansai ai ureei sanguine, starea general a pacientului este grav,
progeseaz anemia i acidoza, apare un icter incipient. n cazuri grave se
instaleaz tabloul clinic al comei uremice:somnolen sau obnubilare, vome,
insuficien respiratoric.n caz de evoluie pozitiv diureza se restabilete
treptat i n mod lent funcia renal se restabilete, dar cu regret, de regul,
rmn sechele renale majore.
Tratamentul ocului hemolitic
n faza de debut: se recurge la stoparea hemotransfuziei, sngele rmas va fi
pstrat n frigider i ulterior se va efectua verificarea valabilitii ultimului.
Urgent se for ntreprinde msuri pentru combaterea ocului: se monteaz o
perfuzie intravenoas cu soluie de noradrenalin sau dopmin i
hidrocortizon, bicarbonat de sodiu,
Accidentele hemolitice tardive - apar la 3-21 zile dupa transfuzie printr-un
raspuns secundar. Clinic se manifesta prin anemie hemolitica autoimuna cu
reticulocitoza, cresterea bilirubinei indirecte si testul Coombs direct pozitiv.
Purpura posttransfuzionala - caracterizata prin trombocitopenie severa,
aparuta
prin
dezvoltarea
anticorpilor
antiplachetari.
Reactii anafilactoide - apar la primitorii care n-au IgA (incidenta 1:900 in
populatia generala) sau care au un titru IgA foarte scazut.
Reactii febrile - frison - sunt datorate prezentei de allo-anticorpi
antileucocitari si mai rar anticorpi anti HLA, faa de antigenele de suprafat
ale
limfo-citelor
donatorului.
Hepatita virala - cea mai frecventa complicatie posttransfuzionala, sub forma
de hepatita B 10% (care dupa 1990 a scazut considerabil prin profilaxie cu
imunoglobuline anti HBS0 sau nonA-nonB (hepatita C, A, E).

35

Infectia cu virus citomegalic (CMV) - rusul citomegalic este un rus herpetic

constatat la 10% din donatorii sanatosi, 50% din adulti prezinta anticorpi anti
CMV. Virusul se afla si in genomul limfo-citelor B. Poate determina
pneumopatii
interstitiale,
hepatite
grave,
meningo-encefalite.
Infectia cu virus Epstein-Barr - un rus herpetic care dupa 4-8 saptamani se
manifesta
ca
un
sindrom
mononucleozic.
Infectia cu virus SIDA - are frecventa de 1/1 250 000 - l 250 000. Testele de
depistare fiabile in 96% din cazuri, precum si perioada de pozitivare de 3 luni
a testelor face ca riscul SIDA la transfuzii sa nu poata fi inlaturat complet.
Sifilisul - stocarea sangelui la 4C omoara spirocheta. Concentratul
trombocitar este actualmente considerat susceptibil de transmiterea sifilisului,
deoarece
se
pastreaza
la
temperatura
camerei.
Malaria posttransfuzionala - incident de luat in considerare in tarile endemice
si
la
donatorii
care
au
trait
in
aceste
zone.
Hemovigilena este un ansamblu de proceduri standardizate de supraveghere
a incidentelor sau reaciilor adverse severe ce survin att la donator, ct i la
recipient (primitorul de produse sanguine) pe parcursul hemotransfuziei,
precum i supravegherea prin metode epidemiologice a donatorilor de
snge/componente sanguine. Serviciul de hemovigilent a fost organizat
conform ordinului N638 al MOS al RM din 07.09.2010.
Comitetul Naional de Hemovigilen are funciile urmtoare: dirijeaz i
monitorizeaz hemovigilena, propune strategia naional n acest domeniu,
examineaz rapoarte, inclusiv i totalizatoare, de nregistrare a reaciilor
adverse, examineaz reaciile i incidentele adverse severe, complicaiile
postransfuzionale realiznd anchete epidemiologice i studii privind factorii
implicai n producerea reaciilor, complicaiilor sau incidentelor adverse
severe.
Se ndeplinete de medicul responsabil de hemotransfuzie i se remite
Comitetului Transfuzioinal din IMS n primele 6 ore din momentul
constatrii.Comitetului Transfuzional al IMS va raporta reaciile
adverse/complicaiile posttransfuzionale nregistrate cu grad deseveritate 2 i
mai mare Centrului Naional de Transfuzie a Sngelui n primele 6 ore dup
nregistrrea acestora.Centrul Naional de Transfuzie a Sngelui va raporta
Comitetului Naional de Hemovigilen reaciile adverse/complicaiile
posttransfuzionale nregistrate n primele 12 ore din momentul recepionrii
informaiei.

36

Cuprins:
1. Istoricul dezvoltrii cunotinelor despre grupele de snge i Rh factor.
2. Imunologia i henotransfuzia.
3. Determinarea grupei sangvine cu seruri standarte
4. Determinarea grupei sangvine cu ajutorul eritrocitelor standarte (metoda
ncruciat)
5. Determinarea grupei sangvine cu ajutorul anticorpilor monoclonali
(oliclon Anti-A i Anti-B)
6. Determinarea RH-factorului.
7. Hemotransfuzia. Metodele de transfuzie. Conservarea sngelui.
8. Felurile de hemotransfuzii.
9. Cile de administrare a sngelui.
10.Mecanismul de aciune a sngelui transfuzat
11.Indicaii i contraindicaii pentru transfuzia de snge.
12.Consecutivitatea aciunilor medicului la transfuzia de snge.
13.Sngele i substituienii sngelui.
14.Complicaii dup hemotransfuzie.
15.ocul hemolitic.
16.Hemovigilena.
17.Cuprins