Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Ingineria genic
Ingineria genic poate fi definit drept ansamblu de metode i tehnici prin care este
posibil manipularea materialului genetic la nivel celular i molecular pentru a obine pe ci
netradiionale produi utili omului i genotipuri noi, avnd la baz tehnologia moleculelor
recombinate (hibride) de ADN.
Ingineria genic se profileaz ca direcie tiinific i tehnologic n anii '70. Apariia
ei a fost determinat, n primul rnd, de aprofundarea cunotinelor de genetic la nivel celular
i molecular, de dezvoltarea cunotinelor privind materialul genetic al organismelor vii, i
anume:
Ingineria genic
La repartiia ADN-ului este implicat ADN-ligaza, care poate lega unele fragmente de
restricie. Acestea i alte enzime stau la baza obinerii moleculelor recombinate de ADN
(fig.2).
Pentru transferul genelor de la unele organisme la altele sunt utilizai vectorii
(moleculele speciale de ADN ce transfer informaia genetic dintr-o celul n alta)
reprezentai prin plasmide, virusuri, liposomi, ADN mitocondrial i ADN cloroplastic.
Sistemele vectoriale, utilizate pentru transferul informaiei strine n celulele
(organismele) gazd, trebuie s corespund urmtoarelor cerine:
inofensivitatea vectorului;
Ingineria genic
Ingineria genic
aciunea restrictazelor.
metilarea ADN;
Ingineria genic
aciunea interferonului.
2. Realizrile ingineriei genice
Ingineria genic
Ingineria genic
mediul de cultur. Dintr-un litru de snge se poate extrage pn la 1 mkg (10-3 grame) de
interferon.
n 1980, savanii americani W. Gilbert i C. Weissmann i japonezul T. Taniguki au
produs interferonul uman cu ajutorul unor colibacili cu genomul modificat.
Celulele de E. coli nu pot transforma predecesorul interferonului n interferon activ, de
aceea, iniial, complexul de ADN, format dintr-o regiune nucleotidic reglatoare i o regiune
ce determin structura interferonului, este supus aciunii enzimelor de restricie, care taie
molecula de ADN aproximativ la frontiera acestor dou catene (genei interferonului nu-i
ajunge un triplet ATG). Codonul omis (ATG) este anexat prin sintez chimic.
Gena interferonului se ncadreaz n continuare ntr-un plasmid, care se transfer n E.
coli. Astfel, colibacilii sintetizeaz interferonul uman. Dintr-un litru de suspensie de E. coli
(circa 1011 celule) se pot extrage pn la 5 mg de interferon (adic de 5000 de ori mai mult
dect din 1 litru de snge).
Tehnicile de inginerie genic permit obinerea preparatelor hibride de interferon cu un
spectru larg de aciune.
c) Transferul de gene n celulele vegetale i animale.
Tehnicile de recombinare genetic permit transferul genelor importante n celulele de
plante i animale, iar n rezultat se obin plante i animale transgenice. Pentru transferul de
gene la plante sunt utilizate bacteriile Agrobacterium tumerfaciens (descoperite n 1907 de E.
Smith i C. Townsend), care provoac formarea unor tumori cancerogene (crown gall) pe
tulpinile unor plante (la speciile din 93 de familii de dicotiledonate).
Plasmidul Ti (tumor inducing) descoperit la A.tumefaciens cauzeaz tumori la plante
prin transferul unui segment de ADN (ADN-T) din plasmid n celulele vegetale.
Strategia pentru transferul genelor cu ajutorul plasmidului Ti n celula vegetal
include:
Pentru realizarea transferului de gene n celula vegetal este utilizat metoda culturilor
de celule i esuturi n vitro.
Firma american Monsanto comercializeaz deja plante transgenice (transformate)
de cartof, rezistente la gndacul de Colorado.
O realizare remarcabil n domeniul transferului de gene n celula animal o constituie
oarecii transgenici. Gena hormonului de cretere de la obolan a fost transferat prin
microinjecii n cele dou nuclee ale ovulului proaspt fecundat de la oarece (n fiecare
nucleu cte circa 600 copii ale genei hormonului de cretere).
Ovulele fecundate (170) au fost implantate n oviductul unei femele-receptor. n
consecin, s-au obinut 21 de oricei. La 6 dintre ei s-a constatat o cantitate mrit a
hormonului de cretere (de 100-800 de ori). Aceti oricei aveau o cretere mult mai rapid i
prezentau greuti corporale superioare animalelor-martor.
Ingineria genic