2/15/2010

IMUNOGLOBULINELE (ANTICORPII)

ANTICORPII. RASPUNSUL IMUN

STRUCTURA I PROPRIETILE Ig
UNITATEA DE STRUCTUR a Ig (monomerul) este
constituit din 2 lanuri glicoproteice (catene) identice
uoare L (Light) i 2 catene grele H (Heavy), legate ntre
ele prin puni disulfidice.
Exist 2 tipuri de catene L i , identice ntr-o molecul
de Ig.
Se disting 5 clase de lanuri H: , , , , , ce corespund
celor 5 clase (izotipuri) de Ig: Ig G, Ig A, Ig M, Ig D, Ig E.
n componena lanurilor se disting regiuni variabile
(aminoterminale) i regiuni constante (carboxilterminale).

Ig prezint glicoproteine din fracia -globulinelor.

Se disting Ig membranare (BCR) i Ig solubile
(secretate) Ac ca atare.
Ac sunt molecule glicoproteice produse de
plasmocitele derivate din limfocitele B activate de
Ag. Ac circul n snge i ptrund n esuturi. Sunt
eficieni contra bacteriilor, toxinelor microbiene i
virusurilor n poziie extracelular.
Ac au proprietatea de a recunoate i a se combina
cu Ag complementar, att in vivo, ct i in vitro.

Regiunile variabile ale catenelor L i H formeaz o cavitate

tridimensional - centrul activ (paratopul) al moleculei de Ig, care va
reaciona specific cu determinanta antigenic (epitopul) Ag
corespunztor, constituit din 5-7 AA sau 3-4 reziduuri glucidice.
Regiunea variabil constituie fragmentul Fab (antigen binding) al
moleculei de Ig.
Regiunea constant corespunde fragmentului Fc (constant,
cristalizabil). Este purttor de receptori i responsabil de activitatea
biologic a Ig:
- Transportul transplacentar al unor Ig (Ig G)
- Fixarea pe diferite celule (mastocite, bazofile, fagocite, limfocite,
etc.)
- Capacitatea de a fixa complementul
- Capacitatea de fixare a proteinei A a stafilococilor
- Definete clasele i subclasele de Ig (specificitatea antigenic a
catenei H)

2/15/2010

Monomerul de Ig este constituit din 2

fragmente Fab i unul Fc. ntre ele se afl zona
balama, responsabil de flexibilitatea moleculei
de Ig.
Numrul paratopilor determin valena Ig. Ac
cu 2 sau mai muli paratopi se numesc Ac
complei, cei cu un singur paratop Ac
incomplei.

Ig G, Ig D i Ig E sunt monomeri, Ig A din ser monomeri,

din secretele mucoaselor dimeri, Ig M sunt pentameri.
Proprietile claselor de Ig
Ig G (4 subclase IgG1, IgG2, IgG3, IgG4) reprezint 75%
din ansamblul Ig serice. Constanta de sedimentare -7S,
greutatea molecular-150kDa. Sunt unicele Ig capabile s
traverseze bariera placentar. Fc al IgG are centre de
fixare a complementului (activarea C pe cale clasic), a
macrofagelor i neutrofilelor (rol n opsonizare), a
proteinei A a stafilococilor. Perioada de semi-via 21 zile.
Manifest activitate opsonizant, antibacterian, antitoxic,
antiviral.

2/15/2010

Ig M 5-6% din totalul Ig. Pentamer. Constanta

de sedimentare-19S, greutatea molecular900kDa. Se distrug sub aciunea mercaptoetanolului sau cisteinei. Semi-viaa 5 zile.
Fixeaz si activeaz complementul pe cale
clasic. Nu traverseaz placenta, prezena Ig M la
nou-nscut denot infecie intrauterin. Sunt
primele care apar dup un stimul antigenic
primar i indic un proces infecios acut.
Monomeri de IgM constituie BCR pe B-limfocite.

Ig A 15% din totalul Ig. CS -7S, GM 160 kDa. Bogate

n glucide. Se disting 2 subclase: IgA1 (93%) i IgA2 (7%).
Semiviaa 6 zile, nu traverseaz placenta, nu activeaz
complementul pe cale clasic.
- Ig A serice (monomeri) 6% din totalul Ig serice.
Agregate de IgA pot activa complementul pe cale
alternativ.
- Ig A secretoare (sIg A) saliv, lacrimi, colostrum, lapte,
secreii gastro-intestinale, nazale, bronhice. Dimer.
Asigur protecia mucoaselor, blocnd ataarea
bacteriilor i virusurilor de receptorii mucoaselor.

2/15/2010

Ig D 0,2% din totalul Ig. CS 6,5S, GM 170 kDa.

Semi-viaa 3 zile. Rolul receptor pentru Ag (BCR) pe
LB; posibil particip la eliminarea limfocitelor B care
produc autoAc (Ac autoreactivi).
Ig E 0,002 - 0,01%, CS 7,9S, GM 185 kDa. Semiviaa
2-3 zile. Nu traverseaz placenta, nu fixeaz
complementul. Termolabile (inactivate la 56C n 30
min). Se pot fixa pe suprafaa mastocitelor i bazofilelor,
determinnd degranularea lor cu eliberarea unor amine
vazo-active (oc anafilactic, dereglri alergice). Eficiente
n afeciuni parazitare (opsonizarea helminilor i
artropodelor) .

Anticorpii sunt efectorii principali ai imunitii

umorale, iar limfocitele Tc i macrofagele
activate ale imunitii celulare.
Imunitatea umoral este eficace contra
bacteriilor non-invazive (extracelulare),
virusurilor libere i contra toxinelor.
Imunitatea celular intervine n special contra
paraziilor intracelulari (bacterii, virusuri) i
celulelor proprii modificate (tumorale)

RASPUNSUL IMUN UMORAL /IMUNITATEA UMORALA

Reprezint o form a imunitii achiziionate asigurat de Ac. Are
funcia de a neutraliza i elimina microbii extracelulari i
toxinele microbiene. In acest proces particip Ag, CPA,
limfocitele T4, limf B.
Fazele rspunsului imun umoral:
I.
Intalnirea Ag cu limfocitele B. Are loc in organele limfoide
secundare.
Dac Ag patrunde direct n snge, intlnirea are loc n splin
Dac Ag penetreaz prin tractul respirator n amigdale i
esutul limfoid asociat bronhilor i mucoaselor
Dac Ag penetreaz n tractul intestinal plcile Peyer, foliculii
solitari
Dac Ag patrunde prin tegument intlnirea are loc n esutul
limfoid asociat tegumentului.

RSPUNSUL IMUN
RI este un proces complex, indus de ptrunderea unui
Ag. Are loc n organele limfoide secundare i prevede
implicarea mai multor celule (CPA, limfocite T, B, .a.) i
substane solubile (citokine).
Consecinele unui rspuns imun:
- Imunitate (umoral, celular)
- Hipersensibilitate (imediat, tardiv)
- Memorie imunologic
- Toleran imunologic
- Paralizie imunologic

Etapele unui rspuns imun

1. ntlnirea Ag cu CPA, T-, B-limfocite. Are loc n organele
limfoide secundare.
2. Recunoaterea specific a Ag, asigurat de limfocitele B i
T nave prin receptorii pentru Ag (BCR, TCR). BL pot
recunoate epitopi superficiali conformationali ale
moleculelor de Ag native. TL recunosc doar epitopi
lineari din Ag proteice prezentate de CPA
in asociatie cu moleculele CMH
3. Activarea, proliferarea i diferenierea T sau B
limfocitelor n celule efectoare i celule B sau Tmemorie. Coordonarea acestor procese este asigurat
de contacte celulare directe i de citokine, eliberate de
diverse celule
4. Realizarea efectului (neutralizare, opsonizare, liz, etc)

- II. Recunoaterea epitopilor unui Ag de ctre receptorul

specific (BCR) de pe suprafaa B limfocitelor naive (selecia
clonala) i activarea lor.
- Limf B nave recunosc epitopii prin intermediul moleculelor de
Ig M i Ig D (BCR) de pe suprafata lor, capabile s lege epitopi
omologi cu forma complementara.

2/15/2010

Antigenele T-independente (polizaharide, LPZ) la

fixarea lor pe BCR activeaza direct limf B.

Primul semnal activator reprezinta interactiunea BCR cu epitopul Ag

corespunzator. Semnale secundare intervin ulterior (ex.:fixarea pe limf B
a fraciei C3d a complementului). Astfel limf B naiv este activat, fiind
capabil sa produc cantitati mari de molecule CMH II, molecule costimulatoare i receptori pentru citokinele produse de limf Th.

Dac limfocitul B a fost activat de un Ag T-dependent,

stimularea proliferrii se va produce numai prin
interaciunea dintre limfocitul B activat si limfocitul Th
activat de acelai Ag. Limf B i limf T au aceeai
specificitate antigenic, doar ca LB recunoate epitopi
nativi (conformationali), iar L Th recunoate fragmente
peptidice ale acestui Ag.
Producerea limf Th are loc de asemenea n organele
limfoide secundare (zonele timo-dependente), unde
limfocitele TCD4 naive interacioneaz cu peptidul
antigenic de pe CPA, urmnd proliferarea i
diferenierea lor n limf efectoare (Th1, Th2),
productoare de citokine. Th2 migreaz spre foliculii
limfoizi, unde are loc ntlnirea lor cu limf B activat.

La interactiunea BCR/Ag T-dependent (proteine), limf B naiv se

comporta ca o CPA (inglobarea Ag, degradarea lui, selectarea
peptidelor antigenice si prezentarea pe suprafata celulara a
complexului peptid/CMH II pentru a fi recunoscute de limf
TCD4).

III. Proliferarea limfocitelor B activate si

diferentierea lor
Dup activarea limf B de un Ag T-independent
urmeaza proliferarea lui intr-o clona de celule
identice (expansiunea clonala) i diferenierea n
plasmocite, care vor sintetiza si secreta Ac din
clasa (izotipul) Ig M, memoria imunologica
lipseste.

Complexul TCR/CD4 de pe limf Th

recunoate complexul peptid/CMH II de pe
limf B activat.
Ulterior se formeaza alte legaturi costimulatoare. Astfel limf Th devin capabile
sa secrete citokine: IL- 4, 5, 10, 13, care vor
actiona asupra limfocitul B activat .

2/15/2010

Aceste citokine induc proliferarea limf B

activate, stimuleaza diferentierea lor in
plasmocite secretoare de Ac Ig M cu paratopul
(centrul activ) identic cu BCR de pe limf B (2000
Ac/sec sintetizate de un plasmocit).
Sub influena citokinelor produse de limf Th
unele LB pot s se diferenieze n plasmocite
secretoare de Ig din alte clase (IFN IgG2; IL-4
Ig G4, IgE; TGF beta- IgA).

Plasmocitele rmn n organele limfoide periferice, iar

Ac secretai ptrund n circulaia sangvin. Unele
plasmocite migreaz spre mduva osoas, continund
s produc Ac mult timp (luni, ani), chiar dup
eliminarea Ag.
In caz de infectie a mucoaselor, plasmocitele se vor
afla la nivelul mucoaselor (n Lamina propria),
producand Ac (sIg A) care vor fi transportati la
suprafata mucoaselor.

O parte din LB activate se transform n celule

memorie. Limf B memorie nu secret Ac, ele
circul prin snge i supravieuiesc mai multe luni
sau ani fiind gata sa reacioneze la o ptrundere
repetat a Ag.

2/15/2010

IV. Efectul interaciunii dintre Ag i Ac in vivo

depinde de natura Ag i de tipul de Ac i se poate manifesta prin:
- Opsonizarea bacteriilor i intensificarea fagocitozei
- Activarea complementului pe cale clasic determinnd citoliz
(inclusiv bacterioliz)
- Neutralizarea toxinelor, enzimelor
- Inhibiia adeziunii bacteriilor, virusurilor (IgA)
- Neutralizarea virusurilor extracelulare
- Imobilizarea bacteriilor si protozoarelor
- Citotoxicitatea mediat celular anticorp-dependent (celulele
acoperite de Ac sunt distruse de celulele K)

Rspunsul umoral primar la primul contact cu Ag

I faz de laten dureaz 4-7 zile, pn la apariia primilor Ac.
In acest timp are loc recunoaterea, degradarea Ag,
diferenierea T,B limfocitelor
II faz logaritmic Titrul Ac crete, atingnd max n a 10-15
zi. Iniial are loc producerea Ig M, peste 4-5 zile - IgG sau alte
izotipuri de Ig (prin comutatie de clasa sub influenta
citokinelor produse de Th).
III faz de producere maxim a Ac Durata variaz n funcie
de Ag
IV faz de diminuare a titrului de Ac (declin) n cazul Ag
proteice dureaza sptmni, Ag polizaharidice luni, Ag virale
ani)

Rspunsul umoral secundar (la un contact

repetat cu acelai Ag).
Este asigurat de LB-memorie
- Perioad de laten scurt (ore)
- Ascensiune rapid a titrului Ac
- Titru maxim de Ac meninut o durat mai
mare
- Afinitate crescut a Ac fa de Ag
- Producerea anticorpilor Ig G.

2/15/2010

Serul sangvin obinut de la un organism imunizat

cu un Ag conine o mare varietate de molecule
de Ac, produi de diferite clone de LB. Acetia
sunt Ac policlonali.
Ac monoclonali sunt absolut identici. Se obin
prin fuzionarea LB cu o celul tumoral.
Hibridomul obinut se multiplic ca o celul
tumoral i secret Ac omogeni, identici cu BCR.
Servesc la detectarea receptorilor de pe
suprafaa celulelor, tratament etc.

RASPUNSUL IMUN CELULAR (Imunitatea celular) - IC

Rolul IC este de a elimina microbii care pot supravieui n
vacuole fagocitare sau n citoplasma celulelor infectate.
Acest tip de imunitate este asigurat de limfocitele T.
Principalii efectori ai IC sunt limfocitele Tcitotoxice (Tc)
derivate din limf TCD8 (T8), care au capacitatea de a
distruge celulele infectate cu virus sau tumorale i de a
liza macrofagele infectate cu bacterii facultativ
intracelulare. Ambele tipuri de limfocite (TCD8 naive si
Tc) poseda TCR si molecule CD8.

Macrofagele activate reprezint ali efectori ai IC. Ele

sunt atrase n focarul infecios, apoi activate, devenind
capabile s distrug bacteriile intracelulare.
Celulele K i NK particip de asemenea la realizarea
citotoxicitii (nu sunt angajate imun).
Limfocitele TCD4+ participa indirect la dezvoltarea
raspunsului imun celular, deoarece n urma
recunoaterii Ag vor produce un numr mare de
citokine care vor aciona asupra diferitor celule:
monocite, limfocite TCD8, TCD4, celule NK, etc.

2/15/2010

Dezvoltarea rspunsului imun celular

I etapa Prezentarea Ag LT nave. Procesul are loc n
organele limfoide periferice (OLP).
CPA profesioniste (macrofage, celule dendritice) capteaza
Ag (ex.: celule infectate cu virus sau celule tumorale).
In cursul fagocitozei unele proteine virale pot fi
transferate din fagosome in citoplasma, unde ele vor fi
fragmentate de catre proteasome. Dupa asamblarea cu
moleculele CMH I, complexul peptid /CMH I este scos la
suprafata CPA (peste 250.000 complexe per celula).
CPA cu limfa sunt transportate in ganglionii limfatici,
unde ele vor fi capabile sa prezinte Ag limfocitelor TCD8
nave.

II etapa Recunoasterea epitopilor Ag de catre TCR

unui LT CD8 naiv si activarea lui.
Limf T8 nave vor recunoaste peptide asociate cu CMH I de pe
suprafata CPA care au captat celule infectate cu virus.
Epitopul trebuie sa corespunda cu TCR de pe limfocitul T8,
iar CMH I va recunoaste situsuri de pe CD8.
Aceaste interactiuni, precum si alte legaturi moleculare
intre CPA si limf T8, participa la activarea limf T8 nave
(costimulare). Citokinele eliberate de CPA se implica de
asemenea.

III etapa Proliferarea limfocitelor T8 (expansiunea

clonala) si diferentierea lor.
Dupa activare, sub influenta unor citokine eliberate
de limf Th1 (in special IL-2), are loc proliferarea limf
T8 si diferentierea lor in celule efectoare Tc, capabile
sa lupte cu infectia intracelulara sau celulele
tumorale.
Proliferarea ncepe la 2 zile de la activarea
limfocitelor i se produce rapid (peste o sptmn
dup infectare pn la 10-20% din toate limf din OLP
pot fi specifice pentru un Ag. N 1:106 ).
Diferentierea in celule Tc are loc in paralel cu
proliferarea.

2/15/2010

Celulele efectoare Tc prsesc OLP i migreaz

spre tesutul infectat, unde, recunoscnd Ag,
vor elimina infecia.
Unele limfocite T se difereniaz n limfocite T
memorie, durat de via lung, inactive
funcional, dar sunt gata s reacioneze rapid
la o nou expoziie la acelasi microb (rspuns
celular secundar)

IV. Realizarea efectului IC

Citotoxicitatea este rezultatul contactului specific
direct dintre clona de Tc i inta lor (celule
infectate cu virus sau bacterii intracelulare,
celule tumorale). Celulele infectate prezint pe
suprafaa sa peptide antigenice asociate cu
moleculele CMH I, fiind recunoscute de ctre TCR
i CD8 de pe limf Tc.

Reacia citotoxic ncepe printr-un contact

membranar dintre Tc i celula-int. Apoi
limfocitele Tc elibereaz perforine care se
insereaz n membrana celulei-int, formnd
pori. Paralel, limf Tc secret enzime
(granzime) care penetreaz n citoplasma
celulei prin pori, inducnd apoptoza ei.

IFN produs si secretat de Th1 este un activator

puternic al macrofagelor, stimuland capacitatea
lor de a distruge patogeni intracelulari. De
asemenea, citokinele mentionate activeaza limf
Tc si celulele NK, promoveaza proliferarea limf
T4, stimuleaza producerea opsoninelor
(intensificarea fagocitozei), activeaza
neutrofilele, stimuleaza cresterea productiei de
monocite in maduva osoasa, etc.

10

2/15/2010

Memorie imunologica Capacitatea

sistemului imun de a elabora raspuns mai
rapid, mai intens si mai eficace la intalniri
repetate cu acelasi Ag.
Toleranta absenta raspunsului imun la
antigene proprii (self). Este determinata de
inactivarea si eliminarea limfocitelor
autoreactive in procesul de maturizare a
limfocitelor T si B.

CITOKINELE
Citokinele sunt molecule care permit diferitor
celule s comunice ntre ele n producerea
unei reacii.
Citokinele reunesc un grup heterogen de
molecule: interleukine (IL), limfokine,
monokine, interferoni (IFN), factori de
stimulare a coloniilor (CSF), factori de necroz
a tumorilor (TNF), etc.

Citokinele permit celulelor Sistemului Imun s se

multiplice i s se diferenieze (ex.: IL-2 este un
factor de cretere al TL, iar IL-4 stimuleaz BL i
diferenierea lor n plasmocite productoare de
Ig E)
Citokinele sunt glicoproteine care acioneaz
asupra celulelor prin intermediul receptorilor
membranari, care nu sunt ntotdeauna activi.
Expresia lor poate fi indus de o alt citokin (ex.:
IL-1 induce receptorul pentru IL-2 pe T i BL)

Receptorii citokinelor sunt prezente i pe

alte celule ale organismului. Astfel ele ar
putea servi la comunicarea ntre Sistemul
Imun i alte sisteme ale organismului, ca
SNC i sistemul endocrin.

11

2/15/2010

12