IDENTIFICAREA BENZITURONULUI PRIN METODE OPTICE SPECTRALE

Iurie Tihon, Livia Uncu, Vladimir Valica, Liudmila Chirciu

Catedra Chimie farmaceutic i toxicologic
Summary
Optical spectral methods of identification of benzituron
The new chemical component from izotioureic derivative group is researched.
The elaborated methods for identification will be included in normative analytical
documents of quality of this substance.
Rezumat
Este cercetat un nou compus chimic din grupul derivailor izotioureici. Metodele
de identificare elaborate vor fi incluse n documentele analitice de normare a calitii
pentru aceast substan.
Introducere
n ultimii ani, s-au descoperit substane medicamentoase cu structur izotiureic
nu numai cu aciune hipertenisiv (profetur, difetur, metiferon) dar i cu aciune
antihipertensiv.
Benzioturonul,
ce
posed
aciune
farmacologic
vasodilatatoare,
antihipertensiv pronunat i de lung durat, datorit influenei directe asupra
musculaturii netede a peretelui vascular.
Materiale i metode
Pentru analiza spectral au fost utilizate spectrofotometre UV-VIS Perkin Elmer
Lambda-40 i Agilent Technologies 9500. Spectrele IR au fost determinate la
spectrofotometrul FT/IR-4100 TypeA.
Rezultate
Pentru identificarea Benzituronului au fost determinate spectrele UV a soluiilor
apoase n regiunea 190-320nm. Benzioturonul compui ce aparin grupului de compusi cu
structura izotioureica. Din punct de vedere a structurii chimice substana se prezinta ca
sare de anion anorganic de clorura(benzioturon) si partea organic de benzoilizotiureic.
Tabelul 1 Caracteristicile spectrale ale unor cromofori
Substana

Sisteme
cromofore
S

NH2+
NH2 Cl

-NH2
-SH
C6H5-

Tranzacia
electronica
Amina
Tiol
Fenil

n*
n*

Lungimea de
unda de
absorptie
195-200
220
198, 255

Electronii atomului de sulf sunt mai puin legai de nucleele lor proprii dect n cazul
electronilor de azot, deaceea tranzaciile electronice (n*) pe segmentul tiolic are loc n
intervalul 2202nm. Acest valoare de absorbie este bine pronunat pentru Benzioturon

pe aceasta valoare a lungimei de und se observ un punct de inflexiune care modific

curbura traiectoriei spectrului de absorbie. Acest punct de inflexiune este putin
observabil datorita moleculei de acid clorhidric care interfereaza si reactioneaza steric cu
strucrura izotiureic.
n molecula de Benzioturon este prezent structura aromatica fenilic care pe deplin
va influena manifestarea benzilor de absorbie din domeniul 200nm. Valoarea 200 nm nu
poate fi considerata drept analitica din considerente c acest domeniu este favorabil si
pentru molecula de ap.
Benzenul este format din trei sisteme cu electroni care condiioneaz apariia
efectului inductiv negativ i deplasarea legturilor duble aceasta calitativ fiind
demonstrat prin apariia n diapazonul de lungime de und lung a transferului de benzi
1
A1g1B2u i 1A1g1B1u i 1A1g1E1u . Electronii sunt mobili sunt implicai n tranziii
* care au loc n regiunea 180-200 nm. Tranziia elecronic n * ce deriv din
electronii neinplicai n legturi chimice este prezent in ambii compui datorit trecerii
unui electron dintr-un dublet n al atomilor de N (prezent n sistemul aminic) i
S(prezent n sistemul tiolic) pe un nivel * de antilegatur. Intensitatea abosorbiei este
influenat de conjugarea electronilor a grupelor grupelor auxocrome cu electronii de
legtur (C-S-; C=N) i antilegtur *
Spectrele soluiilor analizate au fost nregistrate n diapazonul 190-300 nm.
A

221nm

nm
Figura 1. Spectrul UV de absorbie al soluiei apoase Benzituron 20 g/ml
Alegerea solvenilor pentru pregtirea probei joac un rol important n stabilirea
texturei spectrului de absorbie care nsumeaz o totalitate de benzi ce se abpsorb de ctre
lumin la diferite lungimi de und. Pentru excluderea apariiei unor benzi inproprii
analitului este necesar; utilizarea solventilor de o inalt puritate; alegerea unui solvent
mai puin polar pentru a preveni interaciunile intramoleculare.
Ne-am propus ca s vedem efectul solvenilor organici asupra poziiei, intensitatea
i forma benzilor de absorbie n spectrele soluiilor de Benzituron de aceeai
concentraie 20 g ml-1

n acest caz cel mai favorabil ar fi alcoolul etilic (95g/v) i apa care sunt accesibil
costisitoare.
Spectrele IR pentru Benzituron au fost determinate la spectrofotometrul FT/IR4100TypeA (Germania) n regiunea 400-4000 cm-1 sub form comprimat . Pentru
aceasta 10 mg Benzituron se amestec 1 g bromura de sodiu. Spectrul IR al
Benzituronului este redat n figura 2. Pentru caracteristica benzilor de absorbie a fost
aleas regiunea 1700-400 cm-1, adic aa numita zona amprentelor degetale. Aici
caracterul spectrului se schimb chiar i la devieri nensemnate n structur. Benzituronul
are o caracteristic spectral individual.
n regiunea 1400-1450 cm-1 apare o absorbie puternic (1420.32-1454.06 cm-1),
cauzat de devieri de valen NH2+
i in regiunea 3300-3000 cm-1 sunt devieri
deformate a grupei - NH . In segmentul 1640-1690 cm-1 se vd clar devieri deformate a
grupelor C = N mai bine pronuntate cu banda 1639.2 cm -1. Prezena benzii de absorbie la
568.89 cm-1 este legat de devierile de valen ale grupei C-S. Benzile de intensitate
medie de la 2200-2300 cm-1, se datoreaz vibraiilor de deformare a grupei CH2

Figura 2 Spectrul IR de absorbie al Benzituronului

Poziia frecvenelor caracteristice n spectrul IR al Benzituronului este redat n
tabelul 2
Sistemul aromatic este indicat pe spectru prin aparitia benzilor de absorbtie la
1550.49 si 1639.2 cm-1. Banda 704.85 cm-1 confirma sistemul benzenic monosubstituit.
Rezultatele spectrelor IR ale Benzituronului demonstreaz structura acestei substane,
precum i utilizarea spectroscopiei IR pentru identificare.
Tabelul 2 Frecvenele caracteristice a Benzituronului n spectrul IR
maxime, cauzate de grupele, cm-1
Substana

Benzituron
Concluzii

Ciclu benzenic
1500-1600, 700

NH2+ ; NH
1400-1450,
3300-3000

- CH2
-CH2
1000-1100;
2200-2300

CS,C=N
550-580;
1640-1690

1. A fost cercetat spectrul UV de absorbie a Benzituronului, s-a artat specificul lui

i posibilitatea folosirii pentru identificare.
2. A fost cercetat spectrul IR de absorbie a Benzituronului, evideniind benzi de
absorbie, care deosebesc Benzituronul de alte substane i permit folosirea lor
pentru demonstrarea structurii i identificarea substanei.
Bibliografie
1. Liviu Roman, Marius Boji, Robert Sndulescu, Validarea metodelor de analiz
i control, Editura medical, 1998,283p.
2. Uncu L., Valica V., Cheptanaru Z. Analiza spectral a difeturului i profeturului //
Realizrile farmacologiei naionale n perioada anilor 1971-2001. - Chiinu.2001.- P. 208-210.
3. Douglas A.Skoog, F.James Holler, Timothy A.Nieman Principles of Instrumental
Analysis, Saunders Golden Sunburst Series

IDENTIFICAREA BENZITURONULUI PRIN REZONA MAGNETIC

NUCLEAR PROTONIC (1H) I CARBONIC (13C)
Iurie Tihon
Catedra Chimie farmaceutic i toxicologic
Summary
Identification of benzituron by 1H and 13 C nuclear magnetic resonance
In order to identify and confirm the sterical structure of Benzituron 1H and
NMR were used.

13

Rezumat
Metode de Rezonan Magnetic nuclear cu tehnica 1H protonic i 13 C
carbonic a fost utilizat pentru a elucida i confirma structura steric a Benzituronului.
Metode i materiale
Spectroscopia de Rezonan Magnetic Nuclear RMN se bazeaz pe msurarea
absorbiei radiaiei electromagnetice. RMN- Rezonana magnetic nuclear este o metod
analitic instrumental de nalt performan care permite identificarea structurii
compuilor organici de orice complexitate. Presupunerea i confirmarea scheletul
molecular se realizeaz cu ajutorul spectrelor RMN care ntrunesc semnalele de
rezonant ce rezult din interaciunea spinului nuclear a atomului analizat ntr-un cmp
magnetic cu o radiaie electromagnetic cu lungime de und mare (unde hertziene) i
energie mic. Ambiana chimica determinat de totalitatea nucleelor grupele funcionale
influeneaz absorbia radiaiei electromagnetice i coreleaz cu intensitatea deplasrii
chimice, respectiv cu structura chimic a compusului analizat. Aceast ambian chimic
perturb uor valoarea cmpului magnetic exterior cu care vine n contact. Electronii de
legtur dintre atomi produc un cmp magnetic care se opune cmpului magnetic
exterior, fenomen succedat de o ecranare magnetic dintre nuclee finisat cu blindaj.
Efectul de blindaj se manifest prin variaii locale ale intensitii cmpului magnetic, ceea
ce are drept consecin decalarea frecvenilor de rezonan n raport cu procesele similare
care se petrec n vid. Intensitatea i forma benzilor de rezonan din spectrogramele este
influenat de: natura solvetului deuterizat, sandardul intern, temperatura , intensitatea
cmpului magnetic.
Spectrele RMN a Benzioturonului au fost nregistrate la spectrometru de Rezonan
Magnetic Nuclear cu Transformare Fourer (RMNFT)
La formularea concentraiei soluiei de Benzioturon s-a luat n consideraie masa
molecular a substanei. Deoarece masele lor moleculare nu difer n ordinul de sute de
uniti de mas, ci doar numai n cteva zeci de uniti va fi de ajuns ca masa ambelor
substane pentru obinerea 1H spectru cu TF s fie 10 mg, iar pentru 13C specrul cu TF s
fie 50 mg.
Tehnica de lucru
Benzioturonul a fost recristalizat n aceton pentru a purifica substanele i exclude
prezena substantelor nrudite chimic.
Substana medicamentoas au fost uscate timp de 2 ore la o temperatur de 105 OC.
Probele de substane au fost dizolvate n ap deuterizat i filtrate printr-un filtru

Millipore 0.2 m sub vid. Soluiile obinute sunt transferate n tubul de sticl (produs de
Wilmad) de lungime 15 cm cu diametrul 5 mm; stratul soluiei de analizat este de 2-3 cm.
Tubul trebuie s fie curat i lipsit de impuriti paramagnetice altfel, acestea vor influena
frecvenele de rezonan, vor genera benzi de rezonan suplimetare care pot interfera cu
benzile principale ale substanei i implicit poziiile semnalelor n spectrele RMN. n
calitate de standard intern se adaug TMS(tetrametilsilanul) care este introdus in tubul cu
soluia de analizat. Tubul cu soluia de analizat este ataat intre polii magnetului, fiind
meninut in poziia vertical cu ajutorul tubului de intrare.
Rezultate
Spectrul de rezonan magnetic nuclear -1H-protonic ce conine semnale de
intensitate mare demonstreaz prezena abundent a atomilor de hidrogen n molecula
Benzituronului.
Pe spectru se observ patru semnale de rezonan cu raportul a intervalelor de integrare
(1:4:3:2) ceea ce arat prezena a 4 tipuri de atomi de hidrogen la diferite grupe
funcionale. Semnalul la 4.06 p.p.m.( ) care se prezint n form de diplet aparine
grupei metilenice(-CH2-). Zona de rezonan 4.56 p.p.m corespunde grupei aminice
(NH2) i iminice (NH), se prezint ca un semnal comun datorit suprapunerilor bezilor
de rezonan (2+1=3). Semnalele atomilor de hidrogen din 7.20; 7.21; 7.22; 7.24 p.p.m.
incluse n multiplet sunt atribuite atomilor de hidrogen din sistemul benzenic.
Fig.2 Spectrul de rezonan magnetic nuclear1H-protonica Benzituronului

Fig3. Spectrul de rezonan magnetic nuclear 13C carbonic Benzituronului

120
115
110
128. 86
129. 53

105
100
95
90
85
80
75
70
65
60
55

127. 82

30.30

50
45
40
35
30
25
20
155.83

15

135. 73

10
5
0

170

160

150

140

130

120

110

100

90

80

70

60

50

40

30

20

Spectru 13C carbonic a Benzituronului prezint 6 semnale de rezonan de diferit

intensitate. Benzile 2 i 3 sunt ngroate ceea ce denot suprapunerea semnalelor de
rezonan datorit existenei simetriei n molecula Benzituronului. Semnalul analitic din
zona joas de frecven a spectrului 30.03p.p.m. corespunde atomului de carbon din
grupa metilenic(-CH2-). Totalitatea semnalelor (n numr de 4 ) din regiunea 128.86;
129.53 i 128.86; 129.53 p.p.m. aparin atomilor simetrici de carbon(2,3,5,6) din entitatea
benzenic. Primul atom de carbon care este nesaturat i cuaternar este deplasat spre zona
de frecvena mai nalt a spectrului 135.73p.p.m. Atomul de carbon nr 3 din benzen este
identificat prin semnalul 127.82 p.p.m. Atomul de carbon incorporat n grupa funcional
carbaminic i va avea valoarea deplasrii chimice n zona de frecven cea mai mare.
Toate aceste semnale confirm prezena a 8 atomi de carbon n structura Benzituronului.
Concluzii
1. A fost cercetat spectrul 1H protonic i 13C carbonic a Benzituronului, s-a artat
specificul lui i posibilitatea folosirii pentru identificare.
2. A fost cercetat spectrul 1H protonic i 13C carbonic a Benzituronului, evideniind
benzi de absorbie, care deosebesc Benzituronul de alte substane i permit
folosirea lor pentru demonstrarea i confirmarea structurii sterice.
Fig. Confirmarea structurii sterice a Benzituronului prin rezonan
magnetic nuclear 1H-protonica i 13C carbonic.

Bibliografie
1. Boji Marius, R. L. (2003). Analiza i Controlul Medicamentelor. Cluj Napoca:
Intelcredo Deva.
2. Curea, C. B. (1983). Controlul Medicamentelor. Bucureti : Editura Didactic i
Pedagogic.
3. Dudley H. Williams, F. I. (1995). Spectroscopic Methods in Organic Chemistry.
London: McGraw-Hill Publishing Company.
4. Gzeresi Arpad, K. H. (1996). Analiza spectral n infraroie a substanelor
medicamentoase. Trgu Mure: Universitatea de medicin i famacie Trgu
Mure.
5. Livia Uncu, Vladimir Valica (2002). Analiza i Standardizarea Difeturului i
Profeturului i a formelor lor farmaceutice; Chisinau: Tez de doctor n tiine
famaceutice.
6. Robinson W. James, E. M. (2007). Undergraduate Instrumental Analysis . New
York : Marcel Dekker.
7. Skoog A.Douglas, H. F. (1998). Principles of Instrumental Analysis. Philadelphia:
Saunders College and Harcourt Brace College.