CAPITOLUL 4

Testele ADN n cercetarea filiaiei biologice

Motto: Orice copil are dreptul de a-i cunoate prinii (art.9)

Orice copii are dreptul ia un nume i o naionalitate (art.7)

(Convenia Naiunilor Unite cu privire ia Drepturile Copilului)

Primatul adevrului biologic n filiaie din perspectiva istoriei societii umane. Societatea uman a
evoluat de-a lungul timpului, iar, de la o epoc istoric la alta, s-au schimbat i mentalitile oamenilor cu privire
la rolul adevrului biologic n determinarea relaiilor lor sociale i de descenden biologic. n ntreaga lume
antic, copiii malformai sau ilegitimi erau omori fiind considerai un pericol pentru societatea respectiv.
Sofocle obinea n 450 .e.n., la Atena, medalia de aur a festivalului cu Oedip Rege, pies care nfiera adopia
datorit pericolului unor relaii incestuoase dintre copilul adoptat, Oedip, i propria sa mam. Cu toate acestea, n
466 .e.n., tot atenienii au fost cei care au promulgat o lege a adopiilor, prima de acest fel din lumea antic.
Legea permitea expunerea copiilor adulterini pe o mas, n plin agora, i garanta libertatea oricrei femei din
cetate s-i adopte.

Dup modelul grec, paternitatea nu era considerat nici n Roma antic un fapt biologic evident. Evidena
de ordin biologic era doar matern: Mater semper certe est, pater semper incertus est. Cum o eviden biologic
a paternitii nu era posibil, ceea ce conta era decizia de recunoatere a tatlui. Ritualul recunoaterii unui copil
n societatea roman consta n nchinarea nou-nscutului zeului Jupiter de ctre brbatul care se considera tatl
acelui copil.

mpraii romani cretini au interzis i au dispus msuri severe pentru combaterea infanticidului pe motive
de ilegitimitate, ncurajnd adopiile. Ct privete ritualul adopiei, acesta era identic cu cel al recunoaterii
copiilor biologici. Romanii refuzau s recunoasc copiii malformai, iar grecii recunoteau de preferin bieii.
Romanii nu adoptau numai nou-nscui, adopia unor tineri sau chiar aduli era un fapt curent, mai ales n
familiile aristocrate, unde legea sngelui nu era puternic, precum era onoarea familiei respective de a-i asigura
urmai demni s le duc mai departe numele. mpraii romani nu decideau succesiunea la tron numai prin
succesiune natural, ci i prin adopie. mpratul Augustus a fost fiul adoptiv al lui Cezar, iar n dinastia
Antoninilor toi suveranii, cu excepia lui Marc Aureliu, i-au adoptat succesorii.

Henri al II-lea, prin edictul su din 1556, obliga, sub pedeapsa cu moartea, ca toate femeile s i declare sarcina; scopul
edictului regal era de a proteja fetele necstorite de rzbunarea tailor acestora, care frecvent le omorau, dect s fac familia de
ruine. Fata care i declara sarcina era ajutat s primeasc o reparaie contra unei declaraii cu privire la identitatea
seductorului. In timpul marilor dureri ale facerii fata era ntrebat de numele seductorului, sub ameninarea cu moartea sau a
trsnetelor iadului n caz de minciun. Numele pronunat de fat era acceptat, iar, sub presiunea regelui i a bisericii, brbatul
incriminat era obligat s recunoasc i s ntrein copilul. Fr ndoial c abuzurile erau frecvente i muli inoceni au pltit
pentru ali culpabili.

/
prinii

cunoate
i

naionalitate vire ia
Drepturile

ane.
Societatea
i
mentalitile de
descenden
considerai un

Cretintatea nu a atribuit un primat absolut adevrului biologic pentru simplul motiv c lumea cretin
s-a nscut n cuprinsul civilizaiei greceti i romane. Doctrina cretin nu a acceptat procrearea n afara
sfintei cstorii, ns, pn n secolele XV-XVI, nu a acordat o importan prea mare relaiilor premaritale i
situaiei bastarzilor. n epoca medieval, n multe provincii franceze, faptul c o fat rmnea nsrcinat
nainte de a se mrita nu era considerat o catastrofa, ci mai curnd o calitate. Sarcina era privit ca o dovad
de nepreuit a fertilitii femeii respective.Dup Conciliul de la Trente, biserica i-a modificat poziia sa
tolerant, nfiernd aspru naterea bastarzilor. n acelai spirit vor aciona de acum ncolo i puterile laice
regale. Micrile protestante din secolele urmtoare au accentuat i ele aceste schimbri de atitudine n lumea
cretin. De atunci i pn n prezent, adevrul biologic n materie de filiaie - jure sanguinis - a reprezentat
un domeniu tabu n toat lumea cretin.

r a festivalului
dintre copilul ist
cei care au
unerea copiilor
adopte.

ologic
evident. tus est.
Cum o tere a
tatlui, i zeului
Jupiter

ifanticidul
ui pe entic cu cel
al
leii
recunoteau
r
aduli era un m
era onoarea aii
romani
nu
tugustus a fost
Aureliu, i-au

otiv
c
lumea
)tat
procrearea
mare relaiilor
)tul c o fat
ilitate. Sarcina

n ultimii ani ns, asistm la o reevaluare pe scar larg a reperelor tradiionale n materie de paternitate
i chiar de maternitate, repere care tind s se atenueze datorit apariiei unor personaje noi n constelaia
parental; donatorii anonimi de celule germinale, mamele surogat etc., concomitent cu educaia susinut i
pledoaria societilor modeme pentru reacceptarea social a filiaiei de suflet - jure soli.

Donatorul de sperm este, spre exemplu, un personaj foarte diferit de clasicul amant adulterin, pentru
faptul c el nu cunoate pe mama copilului. Muli donatori anonimi de sperm triesc ns cu frica
deconspirrii anonimatului, n timp ce alii sunt interesai s afle dac sperma lor a servit la conceperea unui
copil, dei in s i pstreze anonimatul i afirm c nu vor s ntlneasc copilul respectiv. Pentru motivele
expuse mai sus, Suedia a adoptat recent o lege care interzice anonimatul donatorilor de sperm, acceptnd
numai acei donatori care sunt dispui s i ntlneasc descendenii biologici, dac, bineneles, acetia o
doresc. i Consecina imediat a legii a fost reducerea semnificativ a numrului donatorilor suedezi.

Aspecte reflectate de statisticile medicale. Statisticile medicale apreciaz c, n 7-10% din familii, *
copiii nu sunt descendenii biologici ai tailor lor legitimi, de cele mai multe ori fiind vorba de primul r nscut
sau de ultimul nscut. n aceste familii, tatl se acomodeaz cu adopia involuntar, pentru ca un eveniment
de ordin medical, neprevzut, s releve incompatibilitile de ordin biologic: frecvent este | vorba de o simpl
testare a grupului de snge al copilului, n spital sau pentru actul de identitate, la | mpliifirea vrstei de 14 ani.

Un aspect recent remarcat, i deloc de neglijat prin amploarea raportrii, l constituie excluderile de la
paternitate realizate involuntar, de o serie de studii genetice ntreprinse pentru depistarea n mas [ a unor
maladii genetice cu transmitere ereditar. n prezent, n Statele Unite i Europa, screening-urile i genetice
prenatale efectuate de rutin pentru diagnosticarea defectelor metabolice evideniaz constant o | rat medie de
excludere de la paternitate de circa 10% - procentul este mai crescut n oraele portuare I (25-30%) i neglijabil
n comunitile mici nchise (~1%). Aceste excluderi intempestive reprezint o | problem de etic pe care o
ridic n general testrile genetice n practica medical modern.

Este important de tiut c, datorit performanelor noilor metode de analiz, genotiprile n scopul |
stabilirii unui pedigree vizeaz n prezent i alte aspecte dect cele clasice, interfernd adeseori cu domeniul
identificrilor de persoane n: probleme de imigraie, testarea paternitii in utero dup agresiuni I sexuale,
dispariii de persoane, catastrofe de mas, stabilirea descendenilor biologici n scopul aflrii | adevrului
istoric, solicitri ale societilor de asigurare, respectarea drepturilor omului etc.

Teste pentru emigrani. Primul caz rezolvat de ctre Sir Alee Jeffreys, descoperitorul amprentelor genetice i pionier al aplicrii
acestor teste n justiie, a fost un caz de imigraie datnd din 1985, cnd autoritile britanice au pus la ndoial identitatea unui copil pentru
care mama cerea repatrierea. Testele serologice fiind neconcludente, s-a recurs n acest caz la nou aprutele teste genetice. Coroborarea
profilelor ADN ale copilului, mamei sale i a unor rude paterne, tatl nefiind disponibil, a evideniat c maternitatea i paternitatea biatului
erau certe, permind repatrierea acestuia. n acelai an, autoritile britanice au respins ns jumtate din cele peste 12 000 de cereri de
reziden cu statut de emigrant n baza rezultatelor testelor ADN.
Identificarea lui Josef Mengele: doctorul Josef Mengele, supranumit ngerul moriipentru c a condus unele din cele mai oribile
experimente cu fiine umane n lagrele de concentrare naziste, s-a ascuns dup rzboi n America de Sud, sub o identitate fals. Autoritile
germane au fost informate n 1979 c acest personaj a decedat n urma unui atac de cord, motiv pentru care, civa ani mai trziu, au deschis
o anchet oficial pentru a investiga identitatea persoanei suspectate a fi fost Josef Mengele. ntruct existau mai multe dubii cu privire la
identificarea scheletului, s-a dispus efectuarea unui test ADN din respectivul material osos. Profilul obinut a fost comparat cu profilul ADN al
soiei lui Mengele i cu cel al fiului acestuia, concluzionndu-se c osemintele aparineau cu certitudine lui Josef Mengele. Urmare a reuitei
testelor genetice, autoritile germane au nchis cazul Mengele considerndu-l definitiv rezolvat.

n laboratoarele acreditate din Statele Unite, numrul de cazuri oficial nregistrate i testate n 2003 a fost de 354 011.
Volumul testrilor a crescut cu 3,9% fa de 2002 i cu 700% fa de 1984. Pentru cazurile nregistrate n 2003 au fost testate un
numr de 991 000 persoane (preluat din Annual Report Summary for Paternity Testing in 2003 - Prepared by the Parentage Testing
Standards Program Unit - October 2004 - www.aabb.org).

Cercetarea filiaiei - un domeniu n expansiune datorit amprentelor genetice. Determinarea

relaiilor de descenden biologic reprezint o solicitare n cretere n practica medico-legal a ultimilor 20 de
ani, motivat exclusiv de dezvoltarea tehnicilor performante de analiz molecular i aplicarea lor pe scar
larg. Volumul cel mai mare de testri pentru paternitate raportat la numrul de locuitori se nregistreaz
constant n Statele Unite.

Legislaiile referitoare la cercetarea filiaiei difer de la o ar la alta, de aceea nu exist statistici oficiale
pe plan mondial care s reflecte cu exactitate numrul global de solicitri ntr-o anumit perioad de timp.
Putem s ne facem ns o idee despre volumul actual al testelor de paternitate dac l corelm cu numrul
naterilor n afara cstoriilor - fenomen care a nregistrat i el o cretere simitoare n ultimele dou decenii.

Din Anuarul Eurostat publicat de Biroul de Statistic al Comunitii Europene reiese c n Uniunea
European media naterilor n afara mariajelor este n prezent de 24%, procentul fiind n medie mai mic dect
n S.U.A. (32%), dar diferind foarte mult de la o ar european la alta (tabelul 4.1).
Nateri n afara mariajului n procente din totalul naterilor (date publicate de Biroul de Statistic al Comunitii
Europene pentru 1996 i 1997 i de Anuarul Eurostat n 1999)

TABELUL 4.1

Rata cea mai ridicat a naterilor n afara cstoriei se nregistreaz n rile Americii Latine, aspect care
ns nu este reflectat nici pe departe ntr-un volum crescut al testrilor de paternitate - se apreciaz c
aproximativ 80% din nou-nscui sunt nregistrai cu tat natural.

Ce trebuie remarcat este c, dei n Statele Unite numrul testrilor de paternitate este foarte mare, mai
puin de 0,1% din cazuri ajung n instanele de judecat. Explicaia este dat de faptul c testarea se face de
regul la cererea prilor, n laboratoare genetice private, dar acreditate s efectueze investigaii de paternitate
de ctre Comitetul pentru Testarea Paternitii al Asociaiei Americane a Bncilor de Snge (.American
Association of Blood Banks - AABB). Acest organism monitorizez ndeaproape toate aspectele tiinifice i
tehnice legate de testarea filiaiei i elaboreaz standardele de analiz, acordnd anual pentru laboratoarele
americane i canadiene acreditrile oficiale de efectuare a testrilor.

Aspecte legislative n materie de filiaie n Romnia. La noi n ar, expertiza medico-legal pentru
filiaie se realizeaz att la solicitarea instanelor de judecat, ct i la cererea persoanelor. In majoritatea
expertizelor se solicit cercetarea filiaiei faa de tat, fie n cazul copiilor nscui n afara cstoriei, fie al
celor nscui n cadrul unei cstorii i, doar foarte rar, cercetarea filiaiei fa de mam - cazul schimburilor
de copii n materniti, pierderilor accidentale de copii, furturilor de copii, pruncuciderilor.

n legislaia romn, aciunea de tgduire a paternitii are un caracter personal, putnd fi pornit numai
de ot, n timp ce n alte legislaii acest drept revine i mamei copilului sau chiar procurorului. Aciunea se
prescrie n termen de 6 luni de la naterea copilului, n timp ce alte legislaii prevd termene de 1 sau 3 ani
dup atingerea vrstei majoratului. n Romnia, consacrarea expertizei medico-legale eredo-biologice ca
mijloc de probaiune n procesele civile avnd ca scop stabilirea filiaiei a avut loc n 1955. Decalajul pare
semnificativ fa de Germania (ar cu cea mai ndelungat tradiie din lume n ce privete testrile de
paternitate, efectuarea acestui tip de investigaii coinciznd practic cu descoperirea grupelor de snge de ctre
Karl Landsteiner, n 1899), sau Statele Unite (testrile de filiaie serologice au fost statuate aici din 1935). Nu
acelai lucru se poate spune dac ne referim la Frana, o ar a crei legislaie foarte restrictiv n materie de
cercetare a filiaiei nu a permis efectuarea de teste biologice dect ncepnd cu 1973.

Costurile testelor genetice de paternitate. Costurile testelor ADN este considerabil mai ridicat dect al
clasicelor teste serologice, deoarece tehnicile de analiz molecular necesit echipamente i reactivi de
laborator cu mult mai costisitori. La aceste costuri se adaug i cele legate de retribuirea unui personal nalt
calificat. Sistemele de asigurri medicale, fie ele de stat sau private, nu prevd nicieri n lume decontarea
acestui tip de investigaii. n aceste condiii, devine o realitate faptul c efortul financiar legat de efectuarea
unor teste ADN pentru cercetarea filiaiei este uneori foarte dificil de suportat de solicitani.

44

GENETICA JUDICIAR

Referitor la costul expertizelor de filiaie, trebuie spus c, n Romnia, testele reprezint o

problem exclusiv a solicitanilor, n timp ce, n alte ri, stabilirea unei paterniti este
considerat o problem social. Ori de cte ori mama nu are posibilitatea s suporte costul unei
investigaii serologice sau genetice n calitate de reclamant, statul este cel ce ordon testele i
suport costul acestora. Guvernul federal american, confruntat la sfritul anilor 1970 cu un
numr tot mai mare de copii cu statut ilegitim sau abandonai, a stabilit mecanisme legislative
foarte eficiente pentru identificarea tailor biologici, concomitent cu transferarea ctre acetia a
obligaiilor de ntreinere. Aa se explic numrul mare al solicitrilor de analize din partea
organizaiilor guvernamentale americane. n Europa, este binecunoscut faptul c rile
scandinave efectueaz n prezent un numr foarte mare de expertize de filiaie din raiuni ce in deopotriv de
legislaie i de aspecte sociale. Legiuitorii scandinavi au decis c este mai rentabil

44

GENETICA JUDICIAR

s identifice prin testare tatl biologic al unui copil, dect s ncarce bugetul de stat cu cheltuielile de
ntreinere i educaie ale respectivului copil, pn la vrsta majoratului. Dac inem cont de politica de
protecie social aplicat de rile scandinave, costurile unei testri, fie ea testare ADN, sunt neglijabile n
raport cu cele legate de ntreinerea unui minor.

Schimbrile operate n sistemele de testarea paternitii. Dup 1986, testele serologice clasice i
serotiprile HLA au nceput s fie nlocuite ntr-un ritm foarte rapid cu teste ADN. Astfel, dac ntre 1986 1988 s-au efectuat n Statele Unite teste ADN doar pentru 3% din cazurile de paternitate, n 1991 ponderea
acestor investigaii a crescut la 45%, iar n 1994 a depit 50% (American Association ofBlood Banks - 1994 Annual Report Summary for Parentage Testing).

ntre 1993-1998 s-a produs o schimbare de proporii, prin comutarea investigaiilor de la markerii
tradiionali (antigene eritrocitare, leucocitare, proteice i enzimatice) la sistemele de markeri ADN. Tot n
acest interval de timp s-au operat modificri importante n ce privete chiar sistemele de markeri i tehnicile
de analiz molecular - s-a trecut pe scar larg de la testele prin tehnica RFLP la aplicaiile PCR. Pentru a
cunoate datele i a caracteriza fenomenul, AABB i College of American Patologists (CAP) au monitorizat
selectarea sistemelor utilizate n testrile de paternitate ncepnd cu 1993 printr-un Program de Testare a
Paternitii (fig. 4.1).

Raportul din 1998 din cadrul programului a evideniat faptul c testele ADN (RFLP/PCR cumulat) au
fost utilizate n rezolvarea a 94% din cazuri. Testarea serologic, limitat cu precdere la grupele eritrocitare
cazuri i a urmrit doar s opereze rapid i ieftin o triere grosier
44ABO, a fost raportat numai pentru 6% din
GENETICA JUDICIAR
a cazurilor. Electroforeza proteinelor serice i enzimatice a disprut practic dup 1998 din bateriile de teste de
cercetare a paternitii efectuate n laboratoarele americane, n timp ce n laboratoare europene, mai
conservatoare, acest tip de teste nc se efectueaz. Serotiparea HLA n domeniul paternitii a cunoscut de
asemenea un declin major n ultimii 5 ani, fiind raportat numai la 3% din cazuri n 1998 i la 0,00085% din

Si

li

t
1

V. Utilizare

Fig. 4.1. Evoluia schimbrilor operate n tehnicile de investigare a paternitii n laboratoarele

americane (preluat dup Polesky H.F. & colab. - Systems reported by Laboratories participating in the
AABB/ CAP Parentage Testing Program: 1993-1998).

cazuri n 2003 (preluat din Annual Report Summary for Paternity Testing in 2003).
44

GENETICA JUDICIAR

S-a consemnat n ultimii ani i o cretere a varietii probelor biologice acceptate pentru testarea
paternitii, nregistrndu-se o tendin marcat de a se renuna la prelevatele de snge integral n favoarea
prelevatelor de saliv pe tampoane sau perii de broaj citologic sau a spoturilor de snge depuse pe
microcarduri impregnate. Din totalul probelor testate n 2003 n laboratoarele americane, tampoanele
salivare au reprezentat 91,57% din eantioanele prelucrate, n timp ce probele de snge integral numai
3,28% - o reducere semnificativ, de 61%, a probelor de snge fa de anul 2002.

Pe continentul european lucrurile au evoluat n ansamblu de o manier foarte asemntoare cu cele de

pe continentul american, dar ceva mai lent, fapt evideniat n rapoartele Comitetului de Testare a Paternitii
ce activeaz n cadrul International Society of Forensic Genetics (ISFG), organizaie care monitorizeaz
performanele de lucru ale laboratoarelor de profil din ntreaga lume.

n ntreaga lume, laboratoarele care efectueaz teste de paternitate sunt de civa ani ntr-o competiie
acerb de ordin economic i tehnologic datorit schimbrilor operate n sistemele de testare. Dac n Statele
Unite se raportau n 1978 un numr de 11 000 de testri, efectuate n 259 de laboratoare, statisticile din 2003
au indicat un volum de peste un sfert de milion de testri, efectuate n doar 44 de laboratoare, toate
acreditate i echipate cu tehnologii modeme de analiz molecular.

Markerii ADN utilizai n cercetarea filiaiei. Selecia sistemelor de markeri ADN utilizai pentru
investigarea filiaiei este an de an monitorizat i evaluat n dinamic dup rezultatele raportate de
laboratoarele specializate din ntreaga lume, care particip periodic la trialurile de verificare a
performanelor de lucru n testarea ADN a paternitii organizate de AABB sau ISFG.

Tehnicile de analiz molecular au suferit ntr-un interval foarte scurt de timp modificri importante, n
sensul renunrii la aplicaiile RFLP i la detecia radioactiv sau prin colorare cu sruri de argint, n
favoarea aplicaiilor PCR i a tehnicilor cu detecie fluorescent a produilor de reacie. Sistemele de
markeri ADN sunt de asemenea ntr-o continu schimbare, selecia acestora fiind condiionat de tehnicile
de analiz i, mai nou, de lansrile pe pia a kiturilor de analiz comerciale. Astfel, markerii de tip VNTR
multilocus au fost nlocuii la mijlocul anilor 90 de cei VNTR unilocus, pentru ca, n prezent, s fie
preferai markerii de tip STR.

Experii geneticieni din domeniu atrag atenia c, din necesitatea de a face fa rapidelor schimbri de
tehnologii din domeniul investigaiilor moleclare i pentru a-i eficientiza activitatea, unele laboratoare
limiteaz numrul de markeri ADN testai. Aceast tendin pune n primejdie enormul potenial al geneticii
judiciare modeme.

Pentru a fi selectai n investigarea filiaiei umane, markerii ADN trebuie s ndeplineasc urmtoarele

TABELUL 4.II

(Continuare Tabelul 4.11)

criterii:
1. Mod de transmitere ereditar cu respectarea obligatorie a legilor mendeliene (tabelul 4.II).
44Cromozom

Locus STR

GENETICA JUDICIAR

Alte sisteme de
analizai prin PCR

F13B. RENA4, D1S1171

D1S80

TPOX*. APOB, D2S410, D2S436, D2S1242, D2S1338

apoB

D3S1349, D3S1352, D3S1358*, D3S1359, D3S1744, ACPP

FGA (FIBRA)*, FABP, GABARB15

CSF1PO*. D5S373, D5S815, D5S818*

F13A1, ACTBP2 (SE33E FOLP23. D6S366. D6S502. D6S965

D7S460, D7S809, D7S820*, D7S1517, D7S1520

L1POT. LPL1. D8S306. D8S320. D8S323. D8S344. D8S347. D8S639, D8S1179*

9
10

D9S52
D10S89

11

TH01* rrcil), APOAIl, D11S554, UGB

12

VWA*. CD4. PLA2A1, D12S67, D12S391. D12S1090

13

D13S308, D13S317*

14

D14S306

15

FF.S/FPS. CYAR04 (P450), Penta E

D16S539*, D16S537

16
17

GC (PM), GYPA (PM)

DQ?
D7S8 (PM)

HBGG (PM)

D17S976
MBP, D18S51*, D18S535, D18S849

D17S5, YNZ22
LDLR (PM)

20

D19S253, D19S433
D20S85, D20S470

21

D21S11*. Penta D

18
19

markeri

22
X
Y
mtDNA

HPRTB. ARA, STRX1, DXYS156

Amelogenin*

DYS19. DYS385. DYS389a. OYS389b DYS390. DYS391. DYS392. DYS393.

DXYS156

Amelogenin*

HV1, HV2

Localizrile cromozomiale pentru principalii markeri ADN genotipai n scop de identificare (Date publicate de National Institute of Science
and Technolgy (SUA) pe site-ul www.cstl.nist.gov/div831/strbase).
* Loci inclui n sistemul 13 STR CODIS (Combined DNA Index System) al FBI.

2. Grad nalt de polimorfism - variante structurale multiple ale unei secvene ADN denumit i locus
ADN; tipuri de polimorfisme ADN: unilocus, multilocus, dialelic, hipervariabil etc.

3. Independen - localizarea pe cromozomi distinci a markerilor ADN din setul de analizat.

4. Grad nalt de heterozigozitate.

5. Distribuie cunoscut a alelelor n populaie - echilibru de tip Hardy-Weinberg, validat prin studii de
genetic populaional.

6. Genotipare uoar - n sensul detectrii prin tehnici uzuale a tuturor alelelor specifice unui locus
ADN.

7. Rata sczut a mutaiilor - de regul n jurul valorii de 0,2 x 10"3.

44

GENETICA JUDICIAR

Minisateliii VNTR (Variable Number of Tandem Repeats). Minisateliii de tip VNTR unilocus sunt
caracterizai printr-un grad nalt de polimorfism i heterozigozitate, lucru care le confer o nalt putere
discriminatorie n analizele de paternitate. n ciuda acestui fapt, utilizarea sistemelor de markeri VNTR unilocus
este din ce n ce mai limitat datorit preciziei sczute cu care se pot identifica alelele i frecvenei relativ mari
cu care se semnaleaz artefactele de amplificare de tipul amplificrii prefereniale - artefactele apar datorit
tendinei de amplificare a alelelor mai scurte n defavoarea celor lungi, rezultatul

final al analizei fiind prejudiciat prin absena unei variante alelice neamplificate corespunztor. n plus, markerii
VNTR necesit pentru analiz cantiti crescute de material genetic - ntre 5 ng pn la 250 ng ADN per prob
biologic. Tiparea locilor VNTR prin PCR a fost raportat doar pentru un numr limitat de loci avnd
dimensiunea alelelor mai mic de 3 000 de perechi de baze.

Se apreciaz c analiza a 3 sau 4 loci polimorfi de tip VNTR unilocus este de regul suficient pentru
investigarea unei filiaii, ntruct ofer o orientare clar cu privire la cazurile de excludere i pot confirma
paternitatea cu o probabilitate de 99%. ansa ca 2 indivizi nenrudii s aib aceeai combinaie de alele pentru
4 loci VNTR este apreciat statistic ca fiind de 1:1 milion. Pentru testarea paternitii se opteaz pentru seturi de
loci VNTR unilocus situai pe cromozomi diferii, astfel nct ntre loci s nu existe asocieri, iar transmiterea
alelelor s se fac independent, conform legilor mendeliene. Principalele caracteristici moleculare ale unui set
de markeri VNTR unilocus utilizai pentru cercetarea paternitii sunt prezentate n tabelul de mai jos (tabelul
4.III):
TABELUL 4.III

Localizare
cromozomial

Lungimea
unitii
repetitive (pb)

Nr.
alelelor

Intervalul de variaie
lungimii alelelor

D1S80

Ip36-p35

16

20

398 - 718

81

ApoB

2p24-p23

15

14

660 - 1020

77

D17S5

17p 13,3

70

13

170 - 1010

85

IgH

14q

50

11

370 - 870

74

Locus
VNTR

Heterozigozitate

(%)

D1S80 este unul dintre primii markerii VNTR utilizai n genetica judiciar. Unitile repetitive din structura D1S80 pot
prezenta mici variaii n ce privete compoziia n nucleotide, purtnd numele de secvene degenerate. Aceste variaii pot fi sesizate
de regul pe gelurile de electroforez, nefiind critice n detecia alelelor. Alelele frecvente n populaiile caucaziene sunt 18 i 24 prezena lor ntr-un genotip scade puterea de discriminare pentru acest locus.
ApoB este un marker localizat pe braul scurt al cromozomului 2 n vecintatea genei apolipoproteinei umane - gena prezint
la cptui 3 o regiune coninnd tandemuri repetitive alctuite din 11-16 pb (Knott, 1986, citat de Poltl & colab.). Markerul este larg
utilizat n testrile de genetic medical. Aplicaiile din genetica judiciar sunt mai limitate n prezent.

Microsateliii STR (Short Tandem Repeats). Secvenele de ADN repetitiv de tip STR, spre deosebire

TABELUL 4.1V

minisatelii, sunt de dimensiuni mult mai mici, lucru care le recomand pentru analiza PCR. Microsateliii
44
GENETICA
JUDICIAR
Caracteristicile structurale de baz ale 9 loci de tip STR
unilocus utilizai
curent n cercetarea paternitii (preluat dup GenePrint
tip STR unilocus au un grad mai sczut de polimorfism
i heterozigozitate,
de unde rezult i
Locus
STR
informativitatea

STR Systems Silver Stain Detection Technical Manual- Promega)

Nr. alelelor
lor
mai sczut. Dintre sutele
de tipuri
STR identificate
n genomulunitii
uman, pentru
Intervalul
de de
variaie
a
Lungimea
Localizare

de
profilul A a
de
paternii
prezumtiv
de conch.

alelelor
repetitive
cromozomial
practica medico-legal
sunt utilizate doar lungimii
sistemele
STR cu (1) localizare
unic, (pb)
(2) formate din tetra- i

295-327
4pb
10
pentarepetiii, (3) 5q33.3-q34
potenial mare de discriminare,
(4) minimum de artefacte
genetice (microvariante)
i

CSF1PO
THOl

11 p 15.5

179-203

4pb

TPOX

2p25.1-pter

224-252

4pb

(5)

minimum de artefacte de amplificare (stutter bands sau shadow bands"). Se apreciaz c analiza

combinat a 13 loci
STR are putere discriminatorie
foarte mare, stimat 4pb
n raport de datele populaionale
6p24.3-25.1
283-331
13
F13A01
0,99999999
FESFPS
vWA
(1996).

la

(Commisssion
Science, National Research4pb
Council - Statistical 8Issues
15q25-qter on DNA Forensic
222-250

12pl2-pter
139-167 National Academy Press,
4pb Washington D.C., 125-166).
8
The Evaluation
of Forensic DNA Evidence

16q24-qter
Validarea paternitii
se poate realiza prin264-304
investigarea unui set minim de4pb
9-10 loci STR (tabelul94.IV).

D16S359
D7S820

7ql 1.21q22

215-247

4pb

D13S317

13q22-q31

165-197

4pb

HPRTB

Xq26

259-303

4pb

12

LPL

8p22

105-133

4pb

F13B

1 q31q32.1

169-189

4pb

tat biol

Formularea concluziilor medico-legale n investigaiile ADN de filiaie

pentr
u un

Rezultatele testrilor ADN conduc la confirmarea sau infirmarea unei relaii de descenden biologic
cu un grad nalt de concluden.

Confirmarea paternitii se face prin studiul comparativ al profilelor ADN aparinnd persoanelor
testate, n care se urmrete dac au fost respectate legile clasice ale transmiterii caracterelor ereditare.
Conform acestor legi, un individ motenete n proporii perfect egale material genetic de la genitorii si. Prin
urmare, pentru un locus ADN, orice individ posed dou caractere genetice (alele, adic variante structurale
ale secvenei de tip STR): una de origine matern (alela matern) i una de origine patern (alela patern).
Atunci cnd ntr-o investigaie de paternitate, cu mama copilului prezumat ca fiind cert, profilul ADN al
copilului evideniaz, pe lng alelele materne, o serie de alele ce se regsesc n profilul brbatului prezumat
tat biologic, se poate vorbi de o confirmare a paternitii.

sein
vesti
regse: R
paternitat
Exc
evidenia
ne
de prezu
con<
prezumii
expert ai Ex
te
stare

car
e au Fc

Rezultatul final al unei testri ADN care valideaz paternitatea brbatului investigat n calitate de prezumtiv tat biologic se
exprim ntotdeauna n termeni de probabilitate.

Rezultatele genotiprii tr/'o-ului (mam-copil-prezumtiv tat) sunt introduse n formula lui Bayes
mpreun cu frecvena caracterelor genetice n populaia general (frecvena alelelor). Aplicarea formulei
conduce la obinerea indicelui de paternitate i a probabilitii de paternitate (prezentarea n detaliu a
principiilor i formulelor de calcul s-a fcut ntr-un alt capitol). Probabilitatea de paternitate reprezint n fapt
opinia expertului formulat n termeni statistici cu privire la posibilitatea existenei unei relaii de nrudire
biologic ntre copil i brbatul investigat.

Cercetarea paternitii este posibil i n condiiile n care nu se cunoate profilul genetic al mamei.
Analiza pornete tot de la premisa c un tat biologic transmite obligatoriu copilului jumtate dintre
caracterele sale genetice. Dac pentru setul de markeri ADN investigat alelele copilului se regsesc n

p
oate

pen
tru :
(regula O
m

arke
pu
in
2
formula
pr
markeri c
oba]
ondife c
profile
au o :
pentij
n 19
n
ba;
1998

44

GENETICA JUDICIAR

TABELUL

4.IV

jternitii (preluat
Nr. alelelor

10

profilul ADN al brbatului, relaia de nrudire este posibil i se formuleaz o concluzie de confirmare a
paternitii exprimat n termeni de probabilitate. n cazul testrii cuplurilor formate din copil i prezumtiv tat
este necesar uneori lrgirea bateriei de markeri ADN investigai pentru a se atinge gradul de concluden al
calculului statistic cerut de standardele de analiz n domeniu. Dac se observ c, pentru unii markeri, nici
una dintre cele dou alele specifice evideniate n profilul ADN al copilului nu se regsete n profilul
brbatului prezumat a fi tatl biologic, atunci respectivul brbat se exclude de la paternitatea copilului.
Excluderea de la paternitate se formuleaz atunci cnd apar neconcordane ntre caracterele genetice
evideniate n profilul ADN al unui copil i cele evideniate n profilul brbatului investigat n calitate de
prezumtiv tat biologic: alela patern din profilul copilului nu se regsete n profilul ADN al prezumtivului
tat Concluzia de non-paternitate sau de excludere de la paternitate formulat de ctre expert are valoare
absolut i nu necesit o exprimare statistic.

Expertul care se pronun pentru o excludere de la paternitate trebuie obligatoriu s prezinte criteriile
care au stat la baza formulrii concluziilor sale, specificnd numrul i tipul neconcordanelor evideniate.

Rezultatul final al unei testri ADN care nu valideaz paternitatea brbatului investigat n calitate de prezumtiv tat
biologic are valoare absolut i nu se exprim n termeni de probabilitate.

Formularea unei concluzii de excludere de la filiaia biologic necesit evidenierea de neconcordane

pentru minimum 3 loci din bateria de markeri ADN investigai - regula celor minime 3 excluderi (regula
celor minime 3 excluderi a nlocuit recent vechea regul de aur a celor 2 excluderi).

Observarea a dou neconcordane ntre profilul tatlui prezumat i cel al copilului, la nivelul a cel puin
2 loci AND, a constituit pn nu demult regula de aur a celor 2 excluderi, regul ce sttea la baza formulrii
concluziilor de non-patemitate. Studiile aprofundate cu privire la fenomenele mutaionale ale markerilor ADN
de tip STR i VNTR au demonstrat practic faptul c regula trebuie schimbat, n sensul c o concluzie de nonpatemitate necesit evidenierea unui numr mai mare de neconcordane ntre profilele studiate.

12

nden
biologic
nula lui
Bayes
and
Iicarea
formulei
persoanelor
ea
n ereditare,
detaliu a
erelor
itate
reprezint
la genitorii
si.
[iei
unei
relaii
adic variante 1
origine patern
letic al mamei.
fumat
ca fiind
Ijumtate
dintre
i/e se
prezumtiv
tat nn
seregsesc
regsesc

Observarea unei neconcordane la nivelul unui singur marker din ntregul set de markeri ADN
investigai impune de regul repetarea testrii, pentru a se depista eventualele erori de tehnic. Dac
neconcordana unic este n continuare observat i aspectul persist i dup lrgirea investigaiei prin testarea
unor markeri ADN suplimentari - n sensul c nu sunt observate noi neconcordane, atunci se poate

diagnostica cu un grad nalt de certitudine c este vorba de un fenomen mutaional la nivelul markerului
respectiv. Concluzia expertului va fi de confirmare a paternitii cu includerea n calculul de probabilitate a
ratei mutaiei detectate. Rata mutaiilor raportat pentru markerii ADN poate fi consultat n bazele de date,
situndu-se n general pentru markerii STR n jurul valorii de 10 -310-4.

Un studiu pe 500 de paterniti, efectuat de Walker i colab. ntre 1986-1993, a evideniat c, indiferent
de sistemul de markeri utilizai, serologici (inclusiv HLA) sau genetici, investigaiile de paternitate au o rat
medie a excluderilor de 35,6%. Rata excluderilor raportat la nivelul S.U.A. de ctre Comitetul pentru
Testarea Paternitii al AABB n perioada respectiv a fost ntre 27-30%, cu o medie de 28,3% n 1998
(Annual Report Summary for 1998 - Prepared for the Parentage Testing Standards Program Unit 1998 www.aabb.org). Rata de excludere n acest studiu a fost semnificativ mai mare pentru:

- vrste ale partenerilor foarte tinere: maximum nregistrat ntre 25-35 ani,

- testrile la cerere comparativ cu cele solicitate prin instan: 40% versus 21%,
copiii nscui n cadrul cstoriei comparativ cu cei nscui n afara cstoriei: 46% versus 32%
,

populaia de culoare: 41% la afro-americani versus 34% la caucazieni-americani,

- situaiile cnd unul dintre parteneri a suportat integral costul expertizei comparativ cu situaiile cnd
partenerii au suportat n mod egal costurile: 41% versus 14%.

Fenomenele mutaionale ale locilor STR i semnificaia lor pentru formularea concluziilor de
excludere n investigaiile de filiaie. Mutaiile de novo prin mecanism de slippage sunt tot mai des raportate
n investigaiile ADN efectuate pe locii STR. Pentru un set de markeri STR, mutaiile pot fi observate sub
forma unor necorespondene unicat sau necorespondene pentru doi markeri. Problema este dac
necorespondenele se datoreaz unor mutaii de novo sau unei non-patemiti veritabile.

n aceste cazuri problematice, calcularea indexului de paternitate pentru mutaii este vital. Una din
formulele cel mai des utilizate pentru calculul PI n cazul mutaiilor STR este cea propus de biostatisticianul
american Charles Brenner. Pentru un trio format din mam (M), copil (C) i prezumtivul tat (T) avnd
urmtorul profil pe locusul unde se suspicioneaz mutaia:
M PQ C
T

Q R

R S,

indexul de paternitate se calculeaz pornind de la formula consacrat:

PI = Pr(genotipurilor/considernd c T este tatl biologic)/Pr(genotipurilor/T nu este
tatl biologic),

dar la care ipoteza de lucru la numitor devine:

PI Mutaie = Prbrbatul cu genotipul RS s transmit alela R)/Pr(R),

unde fR = frecvena alelei paterne R n populaia general.

Dezvoltnd n continuare aceast ipotez:

PI Mutaie = Pr(R s fie transmis) x Pr(mutaie) x Prcreterii/descret.prin mutaie) x r(s)/Pr(R),

se ajunge la formula final:

PI Mu,a ie= (1/2) X H, * (1/2) X (l/10)s VfR,

CU!

unde ilocus = frecvena mutaiei respective n populaia general, s =

treapta mutaional (step).

Pentru

1, PI

Mutaie

Mlocm/^ R>

iar

pentru s = 2, PI Mutaie = Hlocus/40 fR

Concluzia n favoarea unei non-patemiti sau n favoarea unei paterniti, dar cu prezena mutaiilor de
novo, este foarte dificil de luat, impunnd lrgirea investigaiilor pe loci suplimentari sau alte categorii de
markeri ADN.

O problem aparte n cadrul fenomenelor mutaionale o constituie alelele nule. Mutaiile nu survin n
astfel de cazuri la nivelul markerului ADN, ci la nivelul situsurilor de legare a primerilor PCR. n consecin,
alela corespunztoare situsului de legare mutant nu poate fi pus n eviden (definiie preluatdup Annual
Report Summary for 1998 - Prepared for the Parentage Testing Standards Program Unit 1998). Dac se
folosesc primeri ce ocolesc situsul de legare mutant sau tehnici de secveniere, alela nul
poate fi evideniat. Profilul aparent homozigot datorat unei alele nule se modific ntr-unul de tip heterozigot
(fig. 4.2). n situaia unor alele nule, testele genetice de paternitate pot conduce la false concluzii de excludere
de la paternitate. Existena unei alele nule este presupus atunci cnd pentru un singur locus din toat bateria
investigat profilul homozigot al copilului nu are un corespondent n cel evideniat la brbatul testat.

Profil heterozigot

A2

Profil aparent homozigot

Alela nul (neevideniat)

A2

Fig. 4.2. Reprezentarea schematic a mecanismului prin care sunt generate alele nule. Primenii de amplificare
PC.R (>) nu se leag de secven datorit situsului mutant i nu genereaz alela corespunztoare.

Problema pseudo-excluderilor n investigaiile de filiaie

Fenomenul pseudo-excluderilor a fost raportat pn n prezent n urmtoarele circumstane:

 rezultate fals pozitive prin limitarea investigaiilor, decizie motivat de indicii statistici. Pragul
legal, conform cerinelor Comisiei de Testare a Paternitii din cadrul American Ass. of Blood Bank, de la
care se poate formula o prezumie de paternitate, este pentru un Indice de Paternitate Combinat (CPI) de
100, respectiv pentru o probabilitate de Paternitate (PP) de 99%. Acest nivel de rezoluie a fost posibil de
atins graie testelor genetice prin tehnica RFLP i PCR. Dac testarea se realizeaz pn la pragul de
probabilitate impus de standardele de acreditare ale AABB de 99%, ansa unui rezultat fals pozitiv este

r totui estimat la 2,3-2,6%. Dac ns pragul probabilitii de paternitate obinut prin testare se crete
la 99,9%, atunci procentul rezultate fals pozitive scade ntre 0,7-1,3%. Problema acestui procent aparent foarte
mic prognozat pentru rezultate fals pozitive se pune n special pentru situaiile n care se suspicioneaz c . un
alt brbat, nrudit cu cel testat, este tatl biologic al copilului;

rezultate fals negative datorate prezenei unor maladii genetice. Necunoaterea

fenomenelor aberante de segregare mendelian poate conduce la concluzii eronate de non-patemitate.
Fenomenul disomiei 16 uniparentale este un astfel de fenomen, cel mai frecvent din clasa disomiilor
uniparentale. Disomia 16 const n prezena la un individ a doi cromozomi, ambii provenii numai de la unul
dintre prini; individul prezentnd o disomie uniparental poate fi fenotipic normal, dar poate prezenta linii
celulare trisomice (zigot trisomic, zigot cu mozaic di- i trisomic). Primul caz de pseudo-excludere
s datorat fenomenului disomiei uniparentale 16 a fost raportat ntr-un caz la care testele au evideniat
excluderea prezumtivului tat pe sistemul haptoglobinic i pe un locus ADN (D16S309/Hinf I), amndou
situsurile de excludere fiind situate pe cromozomul 16 (Bein G. & colab. - Pseudo-exclusion fro

mpaternity due to maternal uniparental disomy 16 1998, Int. J. Legal Med. 111: 328-330). Aprofundarea
I investigaiilor pe nc ali 10 microsatelii i studierea setului de cromozomi prin cariotipare au diagnosticat I
la copil fenomenul heterodisomiei 16 uniparentale de origine matern. Pentru toi markerii localizai la I nivelul
cromozomului 16, copilul prezenta doar alelele de origine matern, cele de origine patern fiind I complet
absente. Cazul a atras atenia asupra necesitii selectrii n testele de paternitate a unor seturi I de markeri
polimorfi cuprinznd loci situai pe cromozomi distinci. Pornind de la acest caz s-a observat I c este necesar
includerea n criteriile de formulare a unei concluzii de non-patenitate i criteriul de I discordan observat la
loci situai pe cromozomi distinci;

rezultate fals pozitive la pacienii transfuzai. Recomandarea general este ca orice testare I
serologic s se fac dup cel puin 3 luni de la ultima transfuzie, pentru a se preveni potenialele erori I de
serotipare. Contaminarea cu leucocite a preparatelor de snge nu trebuie neglijat nici n cazul I genotiprilor,
mai ales c leucocitele sunt principala surs de ADN din snge. De aceea, n cazurile de I paternitate n care
prezumtivul tat sau copilul au primit transfuzii cu diferite preparate de snge, se I recomand evidenierea
profilelor ADN ale subiecilor investigai pornind de la prelevate tisulare, eantioane I de pr sau de saliv.
Compararea acestor profile ADN, etichetate profile de referin, cu profilul ADN I sanguin poate trana i o
eventual contaminare biologic pentru un individ transfuzat.
Cazuri speciale de testare a paternitii

Gemenii dizigoi rezultai prin superfecundare dipaternal. Fertilizarea simultan a dou ovule are ca
rezultat dezvoltarea unei sarcini gemelare dizigote. Fenomenul, denumit i superfecundaie, se poate produce
dup un eveniment copulator cu un singur partener (superfecundaie monopatemal) i, cu totul excepional, ca
urmare a dou evenimente copulatorii cu parteneri diferii (superfecundaie dipaternal). n multe culturi ale
lumii, dubla paternitate a gemenilor dizigoi a fost considerat un mit sau subiect fascinant de folclor pn la
apariia testelor serologice, eritrocitare i HLA. n total, circa 30 de cazuri de acest gen au fost raportate n
literatura medical, ns se apreciaz o cretere n viitor a acestor evenimente de fertilizare simultan mono- i
heteropatemal datorit toleranei crescute a libertinajului sexual, utilizrii pe scar tot mai larg a tratamentelor
de fertilizare cu medicamente inductoare ale ovulaiei i a procedeelor de fertilizare in vitro cu sperm de la mai
muli donatori. Rata general a heteropatemitii gemenilor dizigoi este estimat la circa 2,36%, adic 1
pereche din 40 de gemeni dizigoi, ns se apreciaz c investigaiile ADN vor permite o evaluare mai exact a
fenomenului superfecundaiei dipatemale. ntr-un caz recent, testele pe un set de markeri STR autozomali i
cromozomiali Y au reuit s traneze cu o probabilitate de 99,999957% paternitatea unor gemeni dizigoi de sex
masculin rezultai prin superfecundare accidental dipaternal, n timp ce testele serologice extinse i cele RFLP
s-au dovedit echivoce.

Organismele himer. Himerismul sanguin este un fenomen rar ntlnit la specia uman, ns
necunoaterea sa poate conduce la interpretarea eronat a unor investigaii de laborator. Exist un himerism
sanguin artificial, de tip tranzitoriu, rezultat n urma transplantelor de mduv alogen, i un himerism spontan,
de tip permanent, consecutiv anastomozelor sanguine intrauterine stabilite ntre gemenii plurizigoi. La indivizii
cu himerism sanguin spontan pot fi puse n eviden n snge mai multe populaii de celule derivate din dou sau
mai multe linii de celule-ou distincte. Himerismul sanguin spontan a fost pentru prima oar identificat la
donatorii de snge, cnd prin teste serologice uzuale s-au detectat mixturi de dou sau mai multe tipuri de celule

sanguine. Spre deosebire de investigaiile serologice, testele genetice pot identifica la organismele himere liniile
celulare germinale, de liniile celulare grefate i pot, de asemenea, distinge o himer de un mozaic celular rezultat prin erorile mitotice sau mutaiile unei linii

de celulare zigotice unice. Pentru indivizii prezentnd himerism sanguin, genotipul original se stabilete
investignd oricare tip de prob biologic a subiectului, exceptnd prelevatele de snge. Genotiparea
comparativ a gemenilor sau tripleilor himerici i a genitorilor acestora permite stabilirea cu exactitate a
constelaiilor alelice normale i himerice n astfel de cazuri.

Testarea in tero a paternitii dup o agresiune sexual declarat. Toate statele lumii au legi care
aprob ntreruperea cursului unei sarcini dac aceasta este consecina unei agresiuni sexuale. n acelai timp,
nici o legislaie nu face referiri la legalitatea unei decizii de ntrerupere a unei sarcini acolo unde femeia este cea
care agreeaz relaiile cu mai muli parteneri. Diagnosticul prenatal al paternitii prin tiparea ADN poate
rezolva la ora actual problemele pe care le ridic o sarcin nedorit, consecina unei agresiuni sexuale propriuzise sau a unei relaii extraconjugale etichetate ns drept agresiune sexual. Ins o investigare prenatal a
paternitii dup pretinse agresiuni sexuale ridic probleme de etic medical i genereaz i conflicte de ordin
legal (divor, violene intrafamiliale, infanticid etc.). n plus, testarea paternitii pe probe de lichid amniotic
ridic problema riscurilor medicale binecunoscute ale amniocentezei; din cauza acestor riscuri, cei mai muli
medici prefer s nu recurg la aceast manevr dect n caz de necesitate (diagnostic al unor maladii genetice
cu risc malformativ). Este deci preferabil ca, n cazurile n care sarcina nedorit nu este rezultatul unei reale
agresiuni sexuale, s se temporizeze testarea dup ; naterea copilului, asumarea riscurilor unei amniocenteze
nefind justificat de solicitarea femeii nici etic i nici legal. Pentru considerentele enunate mai sus, medicii
recomand ca etapa de diagnostic prenatal al paternitii s fe precedat obligatoriu de o etap clinic, de sfat
genetic i consult medico-legal.

Medicii care s-au ocupat de studiul unor astfel de cazuri au raportat o serie de trsturi clinice medicolegale sugestive pentru identificarea unor false acuze de viol:

- declararea tardiv a agresiunii sexuale - cu o ntrziere de circa 6 zile de la data evenimentului;

- declararea agresiunii doar la medic, rareori i la poliie (1 caz din 10);

- relatarea de ctre victim a unor evenimente neplcute legate de relaiile cu partenerul de via.

n funcie de decizia femeii de a avorta sau nu, materialul fetal poate fi examinat fe prin prelevare

I in tero prin amniocentez, fie dup vid-extracie. Profilul obinut din materialul fetal sau mixturi de .
material fetal cu esuturi placentare este ulterior comparat cu profilul matern i al prezumtivului tat biologic.
Sistemele de markeri unilocus STR sunt deosebit de performante pentru formularea unei concluzii de paternitate
sau non-patemitate chiar n cazul mixturilor biologice matemo-fetale.

Testarea paternitii legat de o serie de maladii genetice. Genotiparea ADN cu ajutorul markerilor
STR-PCR autozomali i gonozomali este un instrument valoros de diagnostic pentru excluderea sau confirmarea
unei relaii incestuoase suspectate a fi cauza unei maladii genetice. Incestul este, din nefericire, o problem
social nu tocmai rar ntlnit n lume. Este bine tiut c incestul poate genera maladii genetice grave. Acest
lucru este mai evident pentru bolile genetice cu inciden rar, dar poate fi ilustrativ i pentru o serie de maladii
genetice mai frecvente n populaie. Genetica medical i cea medico-legal se intersecteaz n astfel de
investigaii pentru a rezolva aceste cazuri speciale, ce necesit o abordare clinic i de laborator complex.
Clinicianul genetician poate diagnostica o afeciune punnd-o n legtur 1 cauzal cu o posibil cosanguinizare
incestuoas, dup cum medicul legist poate ndruma ctre investigaii I complexe de genetic medical subiecii
testai pentru relaii incestuoase. Pentru exemplificare, citm cazul unui sindrom ATR-X (a-talasemie cu retard
mintal sever X-linkat) diagnosticat clinic i confirmat [ paraclinic prin studiul incluziunilor de hemoglobin H n
eritrocite i prin detectarea mutaiei n gena XH2 (Xql3.3), la un nou-nscut de sex masculin, presupus a fi
rezultatul unei relaii incestuoase ntre o adolescent i bunicul su matern. Cercetarea relaiilor de filiaie
biologic a fost complex, efectundu-se prin genotiparea a 13 loci STR autozomali i a 5 loci STR specifici
cromozomului Y. Rezultatul a confirmat relaia de filiaie incestuoas cu o probabilitate de 99,99%, ns a
exclus cosanguinitatea drept cauz a transmiterii maladiei genetice n acest caz.Tehnologiile automate n
testarea ADN a paternitii. Cellmark Diagnostics, cel mai mare laborator de testare a paternitii din Europa,
aparinnd companiei AstraZeneca, a validat n 1998, n cadrul unui proiect intitulat STRident, un sistem
complet automatizat pentru investigarea filiaiei, care are capacitatea de a analiza 360 de probe de ADN pe zi,
echivalentul a 120 de cazuri de paternitate formate din trio-ul clasic mam-copil-tat. Prelucrarea probelor se
face complet automat, ncepnd de la prelevarea probelor din eantioane, extracie, PCR, secveniere automat,
i pn la citirea i interpretarea statistic a rezultatelor. Realizatorii proiectului recunosc ns c tehnologia STR
nu este suficient pentru investigarea unor cazuri de descenden biologic mai complexe. Performana celor de
la Cellmark Diagnostics pare oarecum incredibil i, pn n prezent, nu a fost egalat de nici un alt laborator
din lume. Proiectul are printre avantaje i capacitatea de a construi ntr-un timp extrem de scurt o baz de date
ADN.
Investigarea medico-legal a paternitii - Quo vadis

Legislaiile din ntreaga lume stipuleaz c este n interesul copilului s i cunoasc tatl biologic. Cu
toate acestea, tocmai acest drept fundamental al copilului este grav nclcat astzi de accesul nengrdit i
extrem de facil la testele ADN, efectuate uneori n condiii de legitimitate incert. Experii n genetic judiciar
i pun pe drept cuvnt problema implicaiilor legale ale acestui fenomen. n timp ce, pentru investigaiile de
filiaie solicitate prin instan, completul de judecat informeaz prile asupra consecinelor juridice ce decurg
dintr-o astfel de testare, stabilete custodia copilului i verific calificarea i acreditarea experilor n genetic
medico-legal, pentru investigaiile la cerere i efectuate n laboratoare private, numai analistul este responsabil
de rezultatele testrii sale. Urmare a costului destul de ridicat al expertizelor oficiale i a modificrilor
legislative operate de mai multe ri ale Europei de Vest, menite s faciliteze stabilirea paternitii n afara
instanelor de judecat (dar care sunt deosebit de restrictive n alte domenii, precum: adopiile, mamele
surogat, protecia embrionului) - s-a dezvoltat o arie cenuie a investigaiilor genetice de filiaie, localizat
predilect n sistemul privat. Cuplurile trimit frecvent prin pot mostre de fluid amniotic i saliv n laboratoare
private pentru astfel de testri la limita legalitii.

Testarea prenatal a paternitii nu este ilegal n prezent nicieri n lume, dar Organizaia Mondial a
Sntii, la iniiativa Societii Germane de Genetic Uman, a propus n 1997 un moratorium care recomand
exercitarea unui auto-control i o triere atent a cazurilor de acest gen, pentru a nu se lsa loc abuzurilor.
Germania, ara cu cea mai ndelungat tradiie din lume n ce privete testrile de paternitate, atrage astfel
atenia comunitii tiinifice internaionale asupra testrilor ilegale cu implicaii juridice evidente. n Statele
Unite, AABB a luat de asemenea atitudine mpotriva proliferrii testrilor la limita legalitii. Documentul
referitor la Standardele pentru Laboratoarele de Testare a Paternitii din 1998 reglementeaz strict condiiile
de efectuare a paternitii, condiionndu-le de obinerea consimmntului scris al fiecrei persoane testate,
indiferent dac metoda de prelevare este invaziv sau nu. Consimmntul scris poate fi direct sau indirect, prin
nscris oficial sau prin intermediul printelui sau tutorelui legal n custodia cruia se afl un minor sau o
persoan cu discernmntul abolit. Dac prinii au n comun custodia copilului; atunci ambii sunt obligai c
trebuie s consimt n scris la prelevarea de probe biologice. n caz contrar, prelevarea se consider ilegal i
aductoare de prejudiciu persoanei n cauz. Documentul mai precizeaz c principiul confidenialitii
rezultatelor trebuie respectat cu strictee de ctre expert, deoarece informaii cu privire la paternitate sau alte
tipuri de nrudiri pot fi speculate de rude i de anturaj pentru revendicarea unor drepturi materiale etc.

n prezent, tehnicile de investigaie genetic permit stabilirea celor mai diverse relaii de nrudire
biologic pornind de la cele mai diverse tipuri de probe biologice. Performanele de ordin tehnic i tiinifice nu
sunt aplicate ns de expertul n genetic judiciar dect n contextul strict al reglementrilor legale i al unei
etici profesionale fr cusur.

CAPITOLUL 5

'

Tehnicile, metodele de prelevare a probelor de la locul faptei

i utilizarea tehnologiei ADN n criminalistic i medicina legal
Investigarea locului infraciunii. Locul infraciunii este cel a crui examinare competent poate
permite identificarea suspecilor i a victimelor, probeaz sau nltur alibiurile, modul cum a fost svrit
fapta, descoper corpurile delicte, stabilete legturile sau asocierile dintre victim i suspect. Pentru
rezolvarea tuturor acestor complexe aspecte, trebuie avute n vedere anumite standarde, n special cele legate
de modul de colectare i conservare al probelor, pn la sfritul cercetrilor i stabilirea concluziilor. Cu ct
sunt mai judicios respectate aceste standarde, cu att sunt mai mari ansele unei rezolvri corecte a cazului.

Dei sursa rezolvrii corecte este dat de examinarea victimei, a suspectului, a locului infraciunii i a
probelor, uneori cazul poate fi rezolvat chiar n absena acestor 4 elemente, spre exemplu prin analiza
amprentelor digitale, a mrcilor mucate sau a unor urme de material biologic (pete de snge, saliv,
sperm) prin teste ADN. De ajutor pot fi uneori i investigaiile prezentate n mass-media i antrenarea
interesului public n caz.

Exist o anume succesiune a grijii pe care trebuie s o aib cel ce asigur calitatea activitii la locul
faptei:

- izolarea locului faptei (cteodat dificil n primele momente), rolul poliiei fiind acela de a stabili ce
persoane au acces aici, adic numai al acelora care pot aduce reale contribuii la elucidarea cazului;

- cutarea materialelor care au evident valoare pentru anchet, prin localizarea exact a acestora;

- colectarea, mpachetarea i etichetarea materialelor de prob, asigurndu-se ajungerea acestora ct

mai rapid la laborator;

- depozitarea i transmiterea la laborator s se fac n cele mai bune condiii (inclusiv prin refrigerare).

Odat ajunse la laborator, responsabilitatea se transfer omului de tiin; acesta va avea n primul

rnd n vedere:

- prevenirea oricrei contaminri, mai ales a probelor cu cantiti mici de material;

- criminalistul trebuie s fie capabil s demonstreze c prin procedurile cercetrii a prevenit contactul
a dou surse de probe;

- securitatea probelor trebuie asigurat notndu-se numele oricrei persoane care a putut avea contact cu
proba;

- oricare etap a cercetrii trebuie documentat, facndu-se referire la procedurile i operaiunile >
standard.

Metodele standard trebuie astfel scrise i prezentate nct s corespund diferitelor proceduri specifice
probelor examinate.

La locul faptei, evidenierea urmelor este acceptat n medicina legal i criminalistic drept o
preocupare primordial. Este de reinut c, cel mai adesea, aceste urme sunt greu evideniate, dar principiul
atribuit lui Edmund Locard, conform cruia cel ce comite o crim las n mod obligatoriu ceva la locul
faptei care nu se gsea nainte de comiterea ei, pe de o parte, iar, pe de alta, preia pe corpul su ceva din acel
loc care nu se gsea pe el, rmne o dogm a crei valoare este unanim acceptat i azi n

criminalistic. Urmele lsate de fptuitor la locul crimei se pot gsi pe diferite suporturi, iar cercetarea I
corpului i hainelor fptuitorului sau suspecilor poate descoperi elemente materiale caracteristice i I prezente
numai n locul nfptuirii infraciunii. Inutil s mai insistm asupra faptului c metodele de I descoperire a
acestor urme s-au amplificat i mbuntit n pas cu descoperirile tiinifice, odat cu I creterea abilitii
expertului de a le cuta. Numai un expert bine pregtit poate stabili din multitudinea I de materiale pe care le are
la dispoziie n cercetarea locului faptei dac i ct de extins poate fi I cercetarea pentru fiecare din variatele
tipuri de materiale suport al urmelor, ct de mare poate fi perspectiva I de valorificare a fiecrei urme, iar
ntreag aceast munc i, mai ales, reuita ei, n cazul n spe, I presupun o mare experien de specialitate.

Probele biologice cele mai obinuite sunt sngele, sperma, saliva, urina, fecalele, voma, resturile de I
esuturi, pr, oase sau dini; nmulirea germenilor bacterieni pe aceste probe diminueaz ansele unor I rezultate
corecte. Pstrarea dup prelevare a acestor probe se va face n anvelope vidate, ferite de I contaminarea cu alte
probe, acest ultim aspect realizndu-se prin prelevri cu instrumente separate (pensete, I bisturie, pipete etc.).
Respectarea cu strictee a acestor msuri va crete sensibilitatea i valoarea tiprii I ADN, inndu-se cont c n
special ADN mitocondrial este n mod particular compromis prin nerespectarea standardelor amintite. Cu ct
cantitile de material biologic sunt mai mici, cu att fiabilitatea probelor I este mai mic. Este de neles c cel
care realizeaz prelevrile va purta mnui i masc, spre a se evita 1 contaminrile.

Sngele, care reprezint cea mai obinuit prob biologic, se recolteaz uscat, n tifon sterilizat, dar, n
cazurile cnd este lichid, se pipeteaz, se introduce n eprubete sterile cu EDTA i este refrigerat n condiii de
vid.

Este de reinut c, uneori, materialul biologic este n cantitate att de mic, nct nu poate fi detectat dect
miroscopic, condiii n care locul prelevrii trebuie extrem de atent reinut, n vederea prelevrii ulterioare de
contraprobe.

Odat recunoscut proba biologic, izolat i ferit de orice contaminare, se face o descriere corect a
locului unde a fost identificat, folosindu-se de regul fotografia i msurtorile.

Urmtoarea etap este recoltarea i conservarea, etap care difer dup natura probei (biologic, chimic,
fizic). Va urma identificarea naturii probei respective, n general prin metode de laborator (microscopic, analiza
chimic etc.). Este de asemenea necesar descrierea obiectului de pe care a fost prelevat proba, caracteristicile
acesteia facndu-se prin compararea cu obiecte asemntoare.

Locul infraciunii trebuie protejat de poteniale substane periculoase, cum ar fi expunerea la radiaii,

substane chimice, contaminare biologic (n special microbian) sau explozii (cum se ntmpl n catastrofe).
Se va avea n vedere c nsui materialul de marcaj al probelor le poate altera.

Marcajul locului de prelevare a probelor este o etap important n identificare i prelevri ulterioare.
Marcajul presupune precizarea datei i orei n care a avut loc prelevarea, locul de prelevare i iniialele celui
care a efectuat aceast manoper. Se folosesc etichete standardizate.

Toate aceste msuri presupun un personal extrem de bine instruit, criminaliti profesioniti. Aceste
msuri trebuie avute n vedere i la transportul probelor ctre laboratoarele specializate.

n condiiile de nalt tehnologie actual, locul infraciunii este investigat i prin metode electronice i
baze de date computerizate.
P
Apare deci limpede c numai respectarea acestor reguli simple i nalt standardizate de cercetare a
locului infraciunii poate cpta o real valoare probatorie n instan, cu alte cuvinte demonstraia c proba
prezentat este cea recoltat de la locul faptei.

Cantitatea de material ce poate fi prelevat depinde de natura suportului, iar timpul n care urmele
biologice rmn pe suport variaz n funcie de natura acestora. Oricum, primordial este descoperirea

tre
ce d se
va

judicia
n gene
s fie j
avea ace
d
vastor
fi bine
p
prime pu
prelevi
urmtoa
saliv I n
-

ab
sorba
idp
entif
entru N
mental|
se afla

-3
pr
eleva
es
te
d<
colecti co
mpar
se
curi: nt
i
otde.
prii
acetii
Pi
chimii

n,
iar
cercetarea
caracteristice i
c metodele de
tifice, odat cu
din
multitudinea
extins poate fi
ite
fi
perspectiva
cazul n spe,

>ma,
resturile de z
ansele
unor
'idate, ferite de
parate (pensete,
valoarea tiprii
in
nerespectarea
ilitatea
probelor spre a
se evita

Tehnicile, metodele de prelevare a probelor de la locul faptei i utilizarea tehnologiei ADN

59

acestor urme care, de cele mai multe ori, nu sunt vizibile cu ochiul liber. Exist n criminalistic tehnici bine
puse la punct, prin care se ncearc recuperarea urmelor materiale de pe diferite suporturi, etapa urmtoare
fiind, bineneles, stabilirea surselor de origine a acestora, fie prin identificare, fie prin excludere.

n criminalistic, recuperarea urmelor materiale are la baz urmtoarele metode:

- scuturarea suportului deasupra unor recipiente curate;

- periajul, utilizat cnd scuturarea nu este eficient; acoperirea suportului cu un material lipicios;

- aplicrile vacuumatice;
tifon
sterilizat, i este
refrigerat

toate fi
detectat ierea
prelevrii

- splarea cu tampoane ude, utilizat n prelevarea multor urme biologice (snge, sperm), mai ales
pentru tiparea ADN;

- unele suporturi pot fi ridicate i cu mna (cu mnui);

- dizolvarea urmelor cu solveni i extragere ulterioar;

sscriere
corect

bei
(biologic, e de
laborator pe care
a fost toare.

erea la
radiaii,
se
ntmpl n ;ra.

vri

- aspirarea cu pipeta n cazul unor urme lichide bine vizibile sau absorbirea acestora cu material
absorbant.

Nu intrm aici n detalii de ordin criminalistic privind variatele metode de stabilire a naturii urmelor
prelevate. Odat identificate, recuperate i analizate aceste urme, se poate trece la etapa urmtoare, de
comparare, care poate duce la identificarea sau excluderea sursei. n privina ADN i nu numai, se au
ntotdeauna n vedere posibilitile de contaminare.

Pentru a avea valoare n justiie, trebuie ndeplinite mai multe condiii:

- munca s fi fost efectuat ntr-un laborator criminalistic acreditat, iar expertul s fie calificat;

- expertul s aib cunotin de toate circumstanele cazului;

- activitatea s nu fie umbrit de lipsa fondurilor.

Prima precauie care se impune const n nconjurarea locului faptei cu o centur prin care nu pot trece
dect persoanele avizate. Aceast zon reprezint un perimetru de securitate, n interiorul cruia nu se va gsi
nici o alt persoan n afara celor nsrcinate cu prelevarea probelor, precum i autoritatea judiciar creia i
este ncredinat rezolvarea cazului; toate aceste persoane vor purta inute de protecie, n general sunt folosite
salopete de unic folosin cu fermoar, astfel nct orice mbrcminte de dedesubt s fie perfect acoperit;
deasupra nclmintei se folosesc cizme uoare din material plastic, ceea ce va avea drept efect imposibilitatea
de a aduce n perimetrul de securitate materii strine. O calot special va fi purtat spre a se evita eventuale
fire de pr ce pot cdea de pe capul lucrtorului. Deasupra unei prime perechi de mnui se adaug o alt
pereche din folie plastifiat; acestea se schimb dup fiecare prelevare; n sfrit, masca aplicat pe figur este
indispensabil spre a evita picturi de transpiraie, saliv sau alte secreii.

La locul infraciunii, un rol important l au martorii. Astfel, la locul comiterii unei omucideri pot fi
identificate persoane care au vzut ultima oar victima, eventuale probleme medicale ale acesteia, starea sa
mental. Persoana care a descoperit prima victima poate face o descriere a locului i poziiei n care aceasta se
afla, dac mai era sau nu n via. Rudele victimei pot fi uneori martori importani n caz.

n cazurile de omucidere, corpul victimei este cea mai important pies a cazului. Examenul acesteia este
de competena medicului legist, dar acesta va colabora cu criminalistul n multe privine (fotografii, colectare
de probe etc.).

Activitile la locul faptei n caz de crim depind de felul morii. Scena crimei este mai nti j
securizat nainte de sosirea criminalistului i a medicului legist, de ctre ofieri de poliie, care culeg i primele
informaii ce vor fi furnizate anchetatorilor, criminalitilor i medicilor legiti. nainte ca acetia s-i nceap
activitatea, locul faptei trebuie ferit i de posibile pericole (explozii, substane chimice, gaze toxice, prbuire de
cldiri etc.).Fotografia locului faptei, a poziiei corpului victimei, evitarea contaminrilor prin purtarea de ctre
anchetatori a mtilor, costume de protecie, mnui i nclminte sunt msuri comune i cunoscute n astfel de
cazuri, indiferent c este vorba de omucidere, accident sau moarte neviolent. Acestea vor fi pstrate i dup
terminarea examinrii, pentru cercetri ulterioare.

Fiecare investigare a locului faptei depinde de felul morii i de ali numeroi factori, neexistnd dou
investigaii identice. Micarea corpului victimei trebuie astfel fcut nct s nu fie distruse urmele sau s se
contamineze probele.

Cu privire la mediul n care o crim poate fi comis, este de reinut c multe din aceste fapte se petrec n
jurul sau chiar n mediu acvatic; s-a dezvoltat chiar specialitatea criminalistic de investigator n mediul acvatic.
De fapt, problemele tehnice apar cnd este vorba de a extrage corpurile delicte sau cadavrele din ap. Prima
problem ce se pune este aceea de a localiza zona n care astfel de corpuri se gsesc n ap. Reconstrucia
corpurilor umane impune colaborarea cu antropologul. Fotografiile subacvatice n crime capt o mare
importan.

Alte mprejurri de producere a morii sunt utilizarea diferitelor arme de foc, existnd criminaliti
specializai n acest sens. De asemenea, s nu uitm decesele prin accidente rutiere sau aviatice.

Criminalitii disting n cercetarea locului crimei o arie primar i o arie secundar. Spre exemplu, dac
victima este n mijlocul unei camere, camera reprezint aria primar, tot ce se afl n jurul acestei camere fiind
considerat aria (zona) secundar. Victima nsi poate fi considerat corp delict i felul cum corpul este ridicat,
mpachetat i transportat este identic ca regul ce trebuie respectat cu acelea ce se refer la orice corp delict.

Corpurile extrase din ap trebuie considerate ca fiind, din punct de vedere al tiprii genetice, contaminate.
Spaiul limitat n care se afl victima unui accident rutier ngreuneaz cercetrile. Probleme complicate ridic
gsirea resturilor unor corpuri de victime n diferite stadii de putrefacie (uneori numai oase) dup diferite
perioade de timp de la deces, n locuri ascunse, fie n cldiri sau, mai ales, n mediul natural. Condiiile de
mediu n care aceste corpuri sunt descoperite trebuie atent studiate cnd se discut despre posibile contaminri
n cadrul tiprii ADN. Spre exemplu, n funcie de mediu, prile corpului victimei pot fi consumate de
vieuitoare din ap, iar pe uscat de diferite animale, aspect foarte important n cazul tiprii ADN.

Evident c prima problem care se pune pentru criminalist este de a se preciza dac decesul a survenit
acolo unde s-a descoperit cadavrul, iar dac nu, unde?

Tehnologiile recente folosite n managementul locului unde s-a produs o crim constau n folosirea
bazelor de date - inclusiv cele referitoare la ADN.

Este evident c cercetrile criminalistice avanseaz din punct de vedere tiinific extrem de rapid, iar
rspunsul la ntrebrile: cum s observi probele, prioritile, ridicarea i transportul acestora, au cele mai mari
anse de rezolvare corect dac criminalistul i medicul legist particip mpreun de la nceput la cercetarea
locului faptei.

Trebuie inut cont c locul faptei sau scena crimei nu reprezint un spectacol unde s miune ziaritii sau
tot felul de curioi. Chiar ptrunderea autoritilor judiciare i administrative n perimetrul cercetat este extrem
de limitat, atta timp ct au loc prelevrile, iar aceste persoane vor respecta regulile expuse. Medicul legist care
ptrunde n perimetru va avea aceeai inut adecvat, ndeplinindu-i misiunea specific (constatarea morii,
cauzele posibile, data morii i semnele de violen) sub supravegherea i n limitele admise de criminalist.

n activitatea sa, tehnicianul criminalist se servete de instrumentar steril, de unic folosin. Toate
probele vor fi nregistrate i filmate. Ele vor fi plasate n locuri precizate, dat fiind posibilitatea ordonrii unei
reconstituiri.

Pentru prelevrile medico-legale, trebuie s existe o trus special cu tot ce este necesar pentru o
prelevare corect (pense sterile, lame i eprubete pentru prelevri sanguine cu EDTA).

ea de
ctre
anoscute n
jstea vor f

Tehnicianul criminalist nu trebuie s aib idei preconcepute i s se abin de la orice comentariu. Orice
urm va fi atent identificat i descris (sarcin ce intr i n preocuprile medicului legist), nu trebuie date
verdicte (spre exemplu: iat o pat de snge), ntreaga activitate la locul faptei putnd dura ore ntregi de
munc.

neex
istnd ruse
urmele

ste

Tehnicile de prelevare vor avea la baz norme foarte stricte, utilizndu-se numai material steril,
principalul scop fiind evitarea contaminrilor; am amintit c mnuile vor fi schimbate dup fiecare prelevare.
Se va ncerca ca prelevarea materialului s se fac mpreun cu suportul su, dup ce a fost descris din punct de
vedere al formei, aspectului, culorii i mirosului.

fapte
se
investigato
r
delicte
sau
e
corpuri se
subacvatice

criminalit

Utilizarea profilului ADN n medicina legal i n justiie const n a demonstra c la o serie de locus-uri
VNTR profilul suspectului se potrivete cu ADN-ul obinut de la locul comiterii infraciunii. Utilizarea
profilului ADN se extinde asupra urmtoarelor domenii:

1.
expertiza filiaiei (tehnica se bazeaz pe faptul c alelele fiecrui locus minisatelit sunt
motenite independent dup sistemul mendelian, astfel nct, pe o pereche de cromozmi omologi pentru acelai
locus, VNTR-ul provenit de la mam este diferit de VNTR-ul provenit de la tat, ceea ce permite nu numai
identificarea individului, dar i a prinilor si). n plus, tehnica VNTR-PCR ofer posibilitatea de colorare a
benzilor de origine matern fa de cele paterne dintr-o pereche de benzi i uurina identificrii fragmentelor
caracteristice,

datice.

are
exemplu,
jurul acestei
lelict i felul
at cu acelea

2. stabilirea identitii urmelor biologice (snge, secreie vaginal, sperm, pr etc,),

tice,
contami- ne
complicate )
dup diferite
Condiiile de
le
contaminri
2
de
vieuitoare

3. identificarea speciei pentru diferenierea originii umane sau animale,

iac
decesul a

6. identificarea resturilor cadaverice ale victimelor catastrofelor,

au
folosirea

4. identificarea eantioanelor de snge prelevat pentru alcoolemie,

5. identificarea resturilor scheletice,

7. confirmarea sau infirmarea vinoviei n delicte sexuale,

8. confirmarea sau infirmarea vinoviei n omucideri,

9. redeschiderea unor cazuri nesoluionate sau verificarea unor condamnri eronate,

10. constituirea unor bnci de date cu amprenta genetic a delicvenilor.

Ca urmare a progreselor nregistrate de biologia molecular, prelevrile pentru cercetarea crimi nalistic
au cptat o importan primordial. Se va avea n vedere c orice persoan care a ptruns neprotejat n
perimetrul cercetat poate depune pe obiectele pe care le atinge celule epiteliale, care, identificate prin mijloacele
genetice medico-legale, pot falsifica datele anchetei. n msura posibilului, prelevatul va fi ridicat odat cu
suportul su i transportat imediat (protejat) n laborator. Se tie c expunerea la soare (raze UV), cldur sau
umiditate poate denatura proba ADN. Transportul se face n containere sigilate i n general conservarea se face
la o temperatur ce coboar lent pn la 4C, dar, dac se impune o conservare mai ndelungat, temperatura va
fi de -20C. Suporturile umede se cer uneori a fi uscate.

Respectarea regulilor expuse va asigura fiabilitatea rezultatelor pe care laboratoarele de specialitate le vor
furniza organelor judiciare.

Materialele care servesc la identificare prin aplicarea tehnologiei ADN sunt urmtoarele:

- snge prelevat de la persoane sau cadavre; se preleveaz 5-10 ml snge n tuburi de plastic pe EDTA,
iar adaos de heparin, conservat la 4C, transportul putndu-se face la ghea (fr congelare) sau chiar la
temperatura ambiant (n funcie de vechimea petei); 1 ml snge conine 30 micrograme ADN (hematiile
neavnd nucleu, cantitatea de ADN este mai mic), fiind necesari circa 20 microlitri snge pentm sondele
multilocus i cantiti mai mici pentru sondele monolocus; probele de snge prezint dezavantajul c nu sunt
omogene, cheagul fiind mai bogat n ADN;

secreia vaginal se recolteaz n trei probe, n tuburi de plastic care se pstreaz la loc uscat; se va avea
n vedere c secreia vaginal supus expertizei este de regul amestecat cu sperm, precum ifaptul c, n
timp, devine dificil identificarea chiar i prin sistemul ABO; separarea spermei de secreia I vaginal se face tot
prin incubarea eantionului n soluie SDS/proteaz K, enzima avnd proprietatea de I a liza celulele vaginale,
care sunt mai fragile, dar nu afecteaz nucleii spermiilor datorit marelui lui I coninut n legturi S-S. Punile
S-S din nucleul spermiilor pot fi disociate cu dithiotreitol, dup care I urmeaz centrifugarea; n interpretarea

rezultatelor trebuie avute n vedere eventualele cazuri de azoospermie I sau de viol neurmat de ejaculare; trei
microlitri de sperm conin circa 0,5 micrograme ADN (cantitate I suficient dac se utilizeaz sonde
multilocus); sondele unilocus pot fi folosite cu succes i pentru! identificarea mai multor participani la viol,
lucrndu-se pe cantiti de circa 200-500 ng ADN;

- petele de snge sau sperm trebuie s aib diametrul de cel puin 0,5-1 cm; probele se pstreaz I la loc
uscat;

- firele de pr se recolteaz cel puin 10-20 de fire cu rdcin, urmnd a fi ambalate n plastic I i inute
la uscat;

- fragmentele de organe (piele, muchi, os, viscere, provenind chiar de la cadavre combustionate) I
conin ADN, care, n astfel de condiii, este supus degradrii datorit condiiilor de mediu (umiditate, I
temperatur crescut) care favorizeaz nmulirea bacteriilor i, astfel, accelerarea autolizei i putrefaciei; I sub
aciunea exo- i endonucleazelor se produce hidroliza atipic a ADN-ului, rezultnd fragmente de I lungimi
variabile, susceptibile de a constitui surse de eroare n interpretarea rezultatelor. Utilizarea sondei I 33,15 a
evideniat o scdere pn la dispariie a fragmentelor lungi de ADN 15-25 kb, dar nu s-au pus I totui n
eviden benzi care s duc la concluzii eronate; oricum, n probele supuse aciunii factorilor I de mediu,
cantitatea de ADN scade; astfel, degradarea ADN-ului (ca i a altor fragmente tisulare) este I condiionat n mai
mic msur de timpul scurs de la deces (dovad este obinerea de fragmente ADN I de 3,4 kb de la mumiile
egiptene, de la creier, vechi de 7 000 de ani, i de la oase, de o vechime de pn I la 5 000 de ani); n cazul unor
persoane disprute, probele prelevate de la cadavru pot fi comparate cu I acelea provenite de la membrii
familiei, avnd n vedere transmiterea mendelian a caracterelor (amprentelor I ADN); referitor la conservarea
ADN n funcie de organul din care se execut prelevarea, s-a artat c I durata cea mai scurt de conservare
post-mortem este n ficat (24-36 de ore) datorit bogiei n ap i I enzime; din splin i glanda tiroid s-a putut
recolta ADN n condiii satisfctoare dup cinci zile, din I scoara cerebral, ganglionii limfatici i muchiul
psoas dup trei sptmni, iar din snge pn la patru I ani; din organe se preleveaz fragmente cubice de circa
2-3 cm3, n flacoane de plastic (fr adaos de I formol), evitnd pe ct posibil zonele putrefiate; conservarea se
face la 40C; ADN-ul se gsete n I cantitate mai mare n oasele spongioase (pentru testare sunt necesare 10 mg
de esut osos spongios) dect I n osul compact; aplicarea metodei amprentei genetice pe oase a dus la creterea
unui nou capitol n I identificare (arheologia molecular); cele mai bune rezultate n identificarea pe oase s-au
obinut prin I testarea ADN mitocondrial;

- unghii, saliv, sput i chiar urin;

- pulpa dentar din care se extrage ADN-ul cu greutate molecular convenabil, chiar de la dinii I care
au fost supui unor factori de mediu extrem de defavorabili pentru conservarea materialului biologic.

La fragmentele prelevate de la cadavre combustionate, s-au identificat n mod frecvent fragmente I

n
espe
(GTG)5 i mai rar (GaACA)4 i (GATA)4. Aceste fragmente sunt consecina denaturrii ADN la temperaturi I
ridicate. Alteori, inexplicabil, s-a constatat prezena unor situs-uri care au necesitat cantiti foarte mari I de
enzime pentru digestie.

m
unq

Expertul medico-legal i criminalistul trebuie s fie pregtii n specialitatea pe care o practic, ntruct,

I n caz contrar, rezultatele muncii lor nu vor putea fi luate n seam sau, n cel mai bun caz, vor crea dubii n
faa I instanei. Raportul lor va servi organelor de justiie i aprrii n hotrrea judectoreasc. O alt calitate
pe I care trebuie s-o mai aib expertul este aceea de a prezenta raportul su sub form inteligibil i pentru un
I

a
ctivi

a
ceea

d
e in

d
osai

v
a tr

p
roc<
cri
n
adn
ond
crin

a
ft

pr
n i i
con
nves
rec
i c
exp
ac
n re

d
ecic

nespecialist, iar, uneori, apare necesitatea ca el s vin personal n faa instanei pentru a prezenta rezultatele
muncii sale, ceea ce, de asemenea, presupune mult abilitate; dac nu posed aceste caliti, sau rezultatele
activitii sale prezint incertitudini, acestea cu siguran vor fi exploatate, fie de acuzare, fie de aprare. De
aceea, declaraiile sale reflectate n raport sau verbal sunt eseniale.

(i de
secreia
iprietatea de
marelui lui
[1,
dup
care
azoospermie
)N (cantitate
|es i pentru
LDN;

se pstreaz

[ite
plastic

nbustionate)
(umiditate,
putrefaciei;
ragmente de
zarea sondei
nu s-au pus iii
factorilor
isulare) este
nente
ADN
ime de pn
omparate cu
(amprentelor
|ar decla
s-a artat
iei n apdinii
i
incimaterialului
zile, din
n la patru
ir adaos de :
gsete
n
ngios)jent
dect u
fragmente
I nla
capitol
temperaturi
obinut prin 6i
foarte mari

kctic,
ntruct,
iea
dubii n faa alt
calitate pe l i
pentru un

Activitatea expertului medico-legal i a criminalistului este orientat n mod obinuit spre furnizarea de
informaii, ce vor putea fi utilizate ca probe n procesele penale, n context cu celelalte probe din dosar,
cntrindu-se cu mult atenie ponderea fiecreia dintre ele. nsi expertiza concretizat n raport va trebui s
conin relaii cu privire la valoarea ei absolut sau relativ, iar, n acest din urm caz, date procentualizate
privind fiabilitatea acestora, totul ntr-o form accesibil pentru nespecialist. Dac aceste condiii nu sunt
ndeplinite, proba poate fi respins. Aceste aspecte sunt cu att mai importante n investigaiile ADN, unde
convingerea expertului cu privire la rezultatele muncii sale trebuie exprimat n relaie cu ultimele cercetri n
domeniu i cu rezultatele similare n cazuri identice. Instanele pot decide n caz de dubii fie refacerea lucrrii,
fie ncredinarea ei unui alt laborator, n vederea comparrii rezultatelor. Bineneles c expertul se va recuza
sau va fi recuzat dac este implicat n caz. Instana poate fi i n situaia de a lua o decizie cnd datele cuprinse
n concluziile acuzrii difer de cele ale expertului parte. Apelarea la diferite laboratoare criminalistice
competente n cazul unor astfel de contradicii este absolut necesar, mai ales n cercetrile de vrf, cum sunt
cele n domeniul expertizei genetice.

Inutil s mai insistm asupra responsabilitii ce apas pe umerii expertului medico-legal i a

criminalistului n cazul omuciderilor. n acest sens, pregtirea i acreditarea experilor este de maxim
importan, la care se va aduga experiena dobndit de-a lungul anilor. Multe societi academice au introdus
grade de competen care asigur calitatea experilor n faa instanelor. Competena va fi acordat n baza unor
criterii standard i introducerea unui sistem monitorizat de garantare a competenei, aspect care se refer att la
persoana expertului, ct i la laboratoare.

Insistm asupra faptului c n raport expertul trebuie s fie clar, s nu lase loc la interpretri, iar, n
cazurile cnd nu pot fi date rezultate indubitabile, s enune marja de eroare, care poate fi pus fie n legtur
cu date incomplete, fie cu limita posibilitilor laboratorului sau chiar impus de limitarea datelor actuale
tiinifice. Pe de alt parte, este sancionat penal ntrebuinarea de promisiuni sau violene fa de expert (vezi
art. 266 C.P. al. 3)
Privitor la calitatea de expert oficial, legislaia penal din Romnia prevede o serie de reguli. Astfel, art.
119, C.P.P. arat: dac exist experi medico-legali sau experi oficiali n specialitatea respectiv, nu poate fi
numit expert o alt persoan, dect dac mprejurri deosebite ar cere aceasta;
cnd expertiza urmeaz s fie efectuat de un serviciu medico-legal, de un laborator de expertiz
criminalistic sau de orice institut de specialitate, organul de urmrire penal i instana de judecat se
adreseaz acestora pentru efectuarea expertizei. Cnd serviciul medico-legal ori laboratorul de expertiz
criminalistic sau institutul de specialitate consider necesar ca la efectuarea expertizei s participe sau s-i
dea prerea i specialiti de la alte instituii, poate folosi asisten sau avizul acestora (expert asociat).
Art. 120 C.P.P. prevede: organul de urmrire penal sau instana de judecat, cnd dispune efectuarea
unei expertize, fixeaz un termen la care sunt chemate prile precum i expertul, dac acesta a fost desemnat

de organul de urmrire penal sau instan; la termenul fixat se aduce la cunotina prilor sau expertului
obiectul expertizei i ntrebrile la care expertul trebuie s rspund i li se pune in vedere c au dreptul s
fac observaii cu privire la aceste ntrebri i c pot cere modificarea i completarea lor; prile mai sunt
ncunotinate c au dreptul s cear numirea i a cte unui expert recomandat de fiecare dintre ele, care s
participe la efectuarea expertizei; dup examinarea obieciilor i cererilor fcute de parte i expert, organul
de urmrire penal sau instana de judecat pune n vedere | expertului termenul n care urmeaz a fi
efectuat expertiza, ncunotinndu-1 totodat dac la efectuarea acesteia urmeaz s participe prile.

Expertul are dreptul (art. 121 C.P.P.) s ia cunotin de materialul dosarului necesar pentru efectuarea I
expertizei. n cursul urmririi penale cercetarea dosarului se face cu ncuviinarea organului de urmrire I
penal; expertul poate cere lmuriri organului de urmrire penal sau instanei de judecat cu privire la I
anumite fapte ori mprejurri ale cauzei; prile, cu ncuviinarea i n condiiile stabilite de organul de urmrire
penal sau de instana de judecat, pot da expertului explicaiile necesare.

Art. 122 C.P.P stabilete c dup efectuarea expertizei expertul ntocmete un raport scris; cnd sunt mai
muli experi se ntocmete un singur raport de expertiz, iar dac sunt deosebiri de preri, opiniile separate sunt
consemnate n cuprinsul raportului sau ntr-o anex; raportul de expertiz se depune la I organul de urmrire
penal sau la instana de judecat care a dispus efectuarea expertizei.

Art. 123, 124 i 125 ale C.P.P. se refer la prile constitutive ale raportului de expertiz, cnd se dispune
suplimentul de expertiz sau efectuarea unei noi expertize.

Art. 190 C.P.P. se refer la sumele cuvenite expertului, iar art. 319 C.P.P la cazurile i condiiile cnd
expertul poate rmne n sala de edin.
Principiile procedurale privind participarea expertului parte n cadrul expertizei medico-legale.

Poate participa la efectuarea expertizelor medico-legale n calitate de expert parte medicul legist care a
fost numit de ctre organul judiciar care a solicitat expertiza respectiv, numai pe baza acordului prealabil scris
al acestuia. Numele i calitatea expertului vor fi menionate n ordonana sau adresa de efectuare a expertizei
respective.

Expertul medico-legal desemnat de ctre organele judiciare la solicitarea prilor va fi ntiinat de ctre
instituia medico-legal, creia i revine sarcina de a efectua lucrarea medico-legal respectiv asupra datei de
efectuare a acesteia sau, dac aceast dat nu poate fi stabilit, expertul parte va nsoi persoana respectiv pe
baza unei nelegeri prealabile ntre cei doi.

Expertul parte are dreptul de a participa la examinarea persoanei, efectuat de ctre experii oficiali, poate
solicita motivat efectuarea unor investigaii suplimentare (aspect ce va fi consemnat n coninutul expertizei) i
va avea acces la toat documentaia medical, medico-legal i juridic din dosarul cauzei, n aceeai msur ca
i experii oficial desemnai.

n cazul expertizelor pe acte, expertul parte va lucra n paralel, dar separat, cu experii oficial desemnai,
avnd dreptul s ia cunotin de ntregul material probator din cazul respectiv. n aceste cazuri, expertul parte
nu va participa n mod direct la edinele comisiilor de expertiz medico-legal, dar poate accepta concluziile
acestora sau ntocmete un raport de expertiz propriu.

n cazurile supuse analizei comisiilor de control i avizare sau comisiei superioare de medicin legal,
expertul parte desemnat nu poate participa la edinele comisiei respective. El i poate exprima opinia separat,
iar aceasta va fi naintat organului judiciar care a solicitat avizarea.

Expertul parte poate solicita, contra cost, fotocopii ale oricror materiale cu caracter probator avute la
dispoziie de experii oficiali.
Rezultatele primite n urma investigaiilor i consulturilor de specialitate recomandate vor fi aduse de
ndat la cunotina expertului parte, care va senina de luare la cunotin pe adresa de efectuare a expertizei
sau acolo unde este posibil astfel sau i se va aduce la cunotin prin not telefonic primirea rezultatelor.

Experii oficiali sunt obligai s dea curs solicitrii expertului parte privind necesitatea examenelor de
specialitate; i pot nsui sau nu rezultatele lor. Expertul parte, dac apreciaz c o anume investigaie n plus
favorizeaz situaia prii obiectivnd adevrul, nu poate fi refuzat, cu att mai mult cu ct partea va dori s o
efectueze spre a-i aproba temeinicia; n caz contrar, expertiza oficial poate fi considerat neprocedural.

n cazul n care cere un anumit specialist, el trebuie s justifice solicitarea sa dac acesta este diferit de cel
ales de expertul oficial; el poate cere un alt specialist (pentru c cel indicat de expertul oficialpoate fi
considerat neobiectiv sau invers). Solicitarea i justificarea unei examinri i eventual a unui anume specialist
se face n coninutul expertizei, dup ce experii oficiali i fac solicitrile lor, deoarece, cu ct exist mai
multe investigaii i mai multe opinii, cu att expertiza devine mai obiectiv i pentru experii oficiali i
pentru cel al prii.

Expertul parte nu poate participa la discuiile comisiilor oficial desemnate i nici la elaborarea
concluziilor acestora.

Numele expertului parte va fi consemnat n scris, alturi de experii oficiali, n preambulul expertizei
respective. n coninutul expertizei se vor meniona toate solicitrile expertului parte privind necesitatea
examenelor de specialitate, pe care experii oficiali pot sau nu s i le nsueasc.

Dup ncheierea lucrrii medico-legale, nainte de obinerea avizului de expediie al medicului legist ef
sau al efului de laborator, expertiza medico-legal va fi pus la dispoziia expertului parte care, ntr-un
termen de maximum 2 sptmni de la luarea la cunotin, i va nsui sau nu olograf coninutul i

concluziile expertizei medico-legale n care a fost desemnat, sub semntur proprie, aplicat sub semnturile
experilor oficiali.

n cazul n care nu este de acord cu modul de finalizare al expertizei, inclusiv sub aspect procedural (nu a
fost fa la examinarea persoanei, i-au fost refuzate examinri de specialitate fcute de medicul desemnat de
el etc.), expertul parte i va expune opiniile proprii n mod separat, adresndu-le direct organului de justiie
care l-a desemnat.

Cele mai importante situaii n care sunt solicitai medicul legist i criminalistul sunt acelea n care este
necesar a se clarifica dac:

- a fost comis o crim?

- cine este autorul?

- dac acesta a lsat suficiente urme incriminatorii.

Fiecare din aceste probleme trebuie rezolvat numai de specialiti. Materialele biologice, fizice sau
chimice gsite pe victim sau la locul faptei pot servi la identificarea suspectului sau s probeze implicarea
sau prezena acestuia n acel loc. Caracteristicile individuale se gsesc n snge, sperm, saliv, amprente
digitale, pr, dini, materiale care servesc la identificare prin mijloace biocriminalistice, inclusiv prin
tehnologia ADN. Acestea sunt materialele pe care lucreaz criminalistul i, de rezultatele obinute, de
fiabilitatea lor, va depinde hotrrea instanei. Este necesar ca medicul legist i criminalistul s fie capabili a
demonstra competen, imparialitate i integritate, orice lucrare neputndu-se desfura dect sub directa lor
supraveghere, interpretnd faptele n lumina datelor tiinifice, unanim recunoscute n publicaii de
specialitate, iar rezultatele muncii lor trebuie puse la dispoziia comunitii tiinifice.

Trebuie remarcat faptul c expertul singur rspunde de cercetrile sale, chiar dac metodele standard
utilizate sunt acceptate de comunitatea tiinific. Justiia trebuie s se asigure c cercettorul este contient
de consecinele pe care le poate avea orice deficien care poate aprea pe parcursul cercetrii i acesta este
unul din motivele pentru care criminalistul trebuie s conduc personal fiecare etap a investigaiilor, inclusiv
de protecia probelor din punct de vedere al deteriorrii sau contaminrii; acest ultim aspect este vital cnd
suspectul este arestat i trebuie eliminat posibilitatea contractului a dou surse de provenien a probelor.

Un aspect deosebit de important este acreditarea laboratoarelor de criminalistic i medicin legal de

ctre foruri tiinifice unanim recunoscute, acreditare care presupune mai multe etape ce includ: prezentarea
unei documentaii privind echipamentele i personalul de laborator, vizitarea laboratorului de ctre persoane
desemnate n acest scop de ctre organismul care acrediteaz, care pot da indicaii i corecii privind unele
proceduri, iar, dup acordarea acreditrii, laboratorul urmeaz a fi continuu supravegheat n vederea
meninerii standardelor care au stat la baza acreditrii.

CAPITOLUL 6

Cromozomul Y - o nou perspectiv

n identificrile genetice
Cromozomul uman Y, definitoriu pentru sexul masculin, reprezint n arena geneticii medico-legale un
nou instrument de lucru pentru investigaiile criminale i cercetarea relaiilor de descenden biologic.
Statisticile din ntreaga lume indic faptul c majoritatea actelor criminale sunt comise de brbai: dup
statisticile oficiale acetia comit peste 99% din agresiunile sexuale i circa 93% din actele violente i omucideri
(statisticile poliiei britanice citate de Jobbling M. A., Pandya A., Tyler-Smith C. - The Y chromosome in
forensic analysis and paternity testing, 1997, Int J Legal Med 110:118-124). Orice urm lsat de un infractor
brbat la locul unei fapte va fi deosebit de informativ dac, n contextul investigaiei ADN, se are n vedere i
analiza markerilor ADN specifici cromozomului Y. Paternitatea unui descendent de sex masculin se poate, de
asemenea, stabili recurgndu-se la o analiz comparativ a profilelor cromozomilor Y aparinnd fiului i
prezumtivului tat.

Acumularea n ultimii ani a informaiilor cu privire la particularitile structurale i funcionale ale

cromozomului Y la nivel molecular a condus la detectarea i definirea primilor markeri ADN caracteristici
acestui cromozom, astfel nct, dup 1990, au fost raportate primele identificri de persoane avnd la baz
profilul Y-ului. Performanele obinute n identificri dup markerii cromozomiali specifici sexului masculin
sunt deja o realitate n serviciile de genetic judiciar. Beneficiul introducerii pe scar larg a genotiprilor ADN
pe cromozomul Y se afl n plin proces de evaluare la nivelul comunitii tiinifice, rmnnd doar o chestiune
de timp generalizarea acestui tip de investigaii. ncepnd cu 1996, n mai multe centre din Europa au fost
ntreprinse studii pentru caracterizarea markerilor cromozomiali Y, relevndu-se utilitatea acestor teste n
identificarea persoanelor de sex masculin i a relaiilor de descenden biologic pe linie masculin.
Scurt incursiune n metodele de investigare a cromozomului Y

Corpusculul fluorescent Y. n practica medico-legal i criminalistic din ultimele trei decenii,

investigarea cromozomului Y a reprezentat o practic limitat, servind exclusiv la identificarea sexului autorului
unei infraciuni sau a brbailor cu Y suplimentar. n orice laborator de genetic sau criminalistic, printr-o
metod simpl i de rutin, se poate detecta prezena sau absena cromozomului Y n celule (sanguine, ale
mucoasei bucale, spermatozoizi etc.). Dup tratare cu o substan specific, quinacrina, o parte din celulele care
conin cromozom Y (XY sau XYY) prezint n lumina fluorescent un corpuscul intens luminos - corpusculul F.
Corpusculul F este expresia citologic a cromozomului Y, mai exact a poriunii distale de pe braele lungi ale

cromozomului Y. Numrul punctelor fluorescente detectate ntr-o celul este egal cu numrul cromozomilor Y.

Dup ce, n 1961, Sandberg i colab. au descris sindromul 47,XYY, n numeroase coluri ale lumii s-a trecut
la cutarea febril a cromozomului crimei - denumirea respectiv aparine desigur presei netiinifice.
Sindromul 47,XYY a fost unul dintre cele mai controversate sindroame cromozomiale, deoarece efectul Y-ului
suplimentar a fost legat la vremea respectiv de comportamentul criminal i sociopat.Incidena sindromului n
populaia general se estimeaz a fi de 1,45 la 1 000 de nateri masculine, indivizii purttori ai acestei anomalii
prezentnd o dezvoltare sexual normal, inteligen medie sau subnormal, talie nalt, uoar asimetrie
facial, urechi mari, pectus excavatum i, deseori, anomalii osoase de tipul: dislocaiilor de genunchi,
sinostozelor radio-ulnare. Nu exist ns un fenotip i nici un comportament caracteristic brbailor cu Y
suplimentar.

Citogenetica prea s aduc n acea epoc o explicaie obiectiv a comportamentului aberant. Entuziasmul
celor care credeau n Y-ul criminal s-a stins ns repede atunci cnd studii tiinifice foarte ample, conduse de
Witkin H. i Mednick S., au demonstrat fr de tgad c nu exist nici o relaie direct ntre constituia YY i
comportamentul criminal. Dosarul Y-ului criminogen odat nchis, s-a diminuat i interesul criminalitilor
pentru investigarea cromozomului Y.

Cromozomul Y uman prezint un numr considerabil de variaii ale aspectului morfologic. Considernduse c anumite particulariti ale aspectului morfologic s-ar transmite ereditar, s-a mai vehiculat n epoca
respectiv ideea comparrii cromozomilor Y n baza acestui criteriu. Intr-un proces de paternitate judecat la
Curtea din Paris s-a solicitat o astfel de examinare a cromozomilor Y, ns rezultatele examinrii s-au dovedit
neconcludente. Compararea morfologic a cromozomilor Y poate avea relevan pentru stabilirea unei relaii de
descenden biologic doar n situaiile n care un brbat este purttorul unei anomalii cromozomiale Y; n
aceste cazuri, n general foarte rare, se poate obiectiva o relaie de descenden biologic prin detectarea
aceleiai anomalii la copiii de sex masculin ai brbatului respectiv.

Testul amelogeninei. Testele ADN utilizate n identificrile de persoane realizeaz de rutin i

diagnosticul molecular al sexului unei persoane, fr ns a investiga propriu-zis variaiile structurale
moleculare caracteristice cromozomului Y. Testul ADN care se efectueaz pentru determinarea sexului unei
persoane urmrete evidenierea unor secvene localizate n regiuni omologe pe cromozomii X i Y, n imediata
vecintate a genei amelogeninei - de unde i denumirea generic de test al amelogeninei.

Detectarea polimorfismului molecular al cromozomului Y. Cromozomul Y uman prezint variaii

structurale la nivel molecular denumite secvene polimorfe. Acestea sunt localizate n special pe braul lung al
cromozomului, fiind organizate n iruri de tandemuri repetitive. Secvenele polimorfe repetitive de pe
cromozomul Y au nceput a fi analizate nc din anii 1970, utiliznd tehnicile de lucru din perioada respectiv,
n principal tehnica RFLP. Datorit lipsei de sensitivitate i de randament a tehnicilor de lucru folosite, aceste

prime studii de genetic molecular pe cromozomul Y nu i-au gsit o aplicabilitate practic n identificrile
judiciare, rmnnd la stadiul de comunicri tiinifice n domeniul cercetrii fundamentale. Perfecionarea
tehnicilor de analiz genetic a fcut ns lumin n problema markerilor polimorfi ai cromozomului Y. Dup
1990, cnd genetica judiciar a nceput s fie dominat de analiza microsateliilor autozomali prin tehnica PCR,
s-a nceput i cutarea febril a unor markeri specifici cromozomului Y, api de a furniza informaii cu privire la
identitatea unei persoane de sex masculin ntr-o anchet judiciar sau un caz de paternitate. n 1992, a fost testat
i introdus n investigaiile ADN n cteva laboratoare primul marker cromozomial Y, denumit DYS19.

Caracteristici ale cromozomului Y. Proprietile cromozomului Y deriv din funcia sa de determinant

al dezvoltrii sexuale masculine. Existena unui cromozom Y alturi de un cromozom X asigur dezvoltarea
gonadelor masculine. Dac Y-ul lipsete sau este nefuncional, genele feminizante intr spontan n aciune n
timpul dezvoltrii embrio-fetale. n timp ce cromozomii autozomi i cromozomul sexual X se regsesc
perechi n genomul uman, cromozomul Y este unic, nepereche (de tip haploid).

La originea tuturor celor aproximativ 20 de miliarde de cromozomi Y prezeni n populaiile umane

modeme a fost un cromozom Y ancestral, aprut n urm cu aproximativ 37 000-41 000 de ani. De-a lungul
proceselor evolutive, cromozomul Y s-a redus n dimensiune, acumulnd mutaii, precum i diferiteclase de
elemente repetitive, transpozomii etc. Ca o consecin a specializrii sale funcionale, cromozomul I Y a pierdut
o serie dintre genele prezente la proto-cromozomii Y, omologi ai proto-cromozomilor X, i I a achiziionat de la
autozomi, prin translocaie, unele gene speciale implicate n spermatogenez.

Cromozomul Y modem a pstrat la capetele sale o serie de loci omologi cu ai cromozomului X, I

denumii regiuni pseudo-autozomale Yp i Yq (PAR - pseudoautosomal regions). La nivelul regiunilor I Yp i Yq
au loc mperecherile i recombinrile meiotice dintre cromozomii X i Y. ntre cele dou regiuni I

pseudo-autozomale, cea mai mare parte a cromozomului I Y (~50 Mpb) corespunde regiunii haploide
(nepereche) I i non-recombinunte Y-specifice (NRY - non recombin- I ing Y) (fig. 6.1).

PAR 1 (
2.6 Mb

Regiune
exceptat de la
recombinarea
meiotic

ul

PAR 2 f

Eucromatina 30 Mb

Datorit haploidismului su, cea mai mare parte a I

cromozomului Y nu particip la procesul de recombinare I
meiotic, iar consecina acestui tip de comportament din I meioz este c Yse transmite integral de la tat la fiu I n succesiunea generaiilor, cu
excepia celor dou mici I regiuni pseudo-autozomale
Yp i Yq. Aceast modalitate I de transmitere biologic a
cromozomului Y ar corespunde I n societate trasmiterii
Heterocromatina
lungimi
i motenirii numelui de familie, I de la tat la
polimorfe
descendenii si de sex masculin.

0,32 Mb

Y.

Fig. 6.1. Structura cromozomului

Polimorfismul cromozomului Y. Ca i restul I

materialului genetic uman, cromozomul Y acumuleaz I
gradual o serie de modificri structurale numite mutaii, I mrturii ale trecerii timpului i proceselor evolutive I
specifice tuturor organismelor vii. Polimorfismul ADN al cromozomului Y este un produs al mutaiilor care se
acumuleaz n succesiunea generaiilor.

Cromozomul Y prezint polimorfsme rezultate prin evenimente mutaionale relativ frecvente sau prin
evenimente mutaionale rare. Fiecare tip de polimorfism servete unui anumit tip de studii. Polimorfsmele
rezultate prin evenimente mutaionale relativ frecvente, de tipul minisateliilor i microsateliilor (STR), sunt
markeri de elecie pentru investigaiile criminale i cercetarea paternitii, n timp ce restul polimorfismelor sunt
utile studiilor populaionale, de evoluionism genetic i diagnosticului unor infertiliti masculine. Pe msura
acumulrii informaiilor privitoare la polimorfismul cromozomului Y, crete i interesul geneticienilor legiti de
a utiliza n anchetele judiciare i n filiaie markeri ai Y-ului, capabili s caracterizeze cel mai bine populaiile i
s rspund la ntrebrile legate de genealogie.

Tipuri de markeri ADN ai cromozomului Y. Cele mai importante tipuri de markeri polimorfi pe
cromozomul Y sunt:

Minisateliii sunt iruri de tandemuri repetitive, avnd unitatea repetitiv mai mare de 6 pb. Datorit
complexitii lor structurale, nu sunt utilizai de rutin n investigaiile de paternitate sau criminale, fiind ns
markeri utili pentru estimarea vrstei celor mai recente grupuri ancestrale de cromozomi Y.

Microsateliii (STR-Y - short tandem repetitive Y) - markeri polimorfi formai din tandemuri repetitive
scurte de dou, trei sau patru nucleotide (tabelul 6.1). Primul microsatelit descris pe cromozomul Y uman a fost
DYS19, constnd ntr-o repetiie de tetranucleotide (GATA).

Majoritatea locilor STR-Y sunt moderat polimorfi, avnd fiecare ntre 4 pn la 7 variante structurale
(alele). Exist un interes deosebit pentru gsirea unui numr ct mai mare de microsatelii pe Y. Lumea
geneticienilor se ntreab ci microsatelii urmeaz s mai fie descrii n viitorul apropiat la nivelul
cromozomului Y? Se pare ns c numrul locilor STR tetranucleotidici nu va depi cifra de 50-60.

Microsatelii descrii la nivelul cromozomului Y umanIntervalul de mrime al alelelor (pb)

(dup Santos F. R., Carvalho-Silva D., Pena S, 1999)

Unitatea repetitiv

DYS19*

174-210

(GATA)3(GGTA)n(GATA)n

DYS288

119- 123

(CA)n

DYS385*

360-412

(GAAA)n

DYS388

126-138

(ATA)n

DYS389A*

105-125

(GATA)n(GACA)6

DYS389B*

239- 263

(GATA)n(GACA)3(GATA)

DYS390*

191- 227

(GATA)4(GACA)(GATA)n (GACA)8(GATA)2

DYS391*

275- 295

(GATA)n(GACA)3(GATA)

DYS392*

236- 263

(ATT)n

DYS393*

108- 132

(GATA)n

DYS413 [YACnTj

192- 204

(CA)n

DYS425

198-207

trinucleotide

DYS426

94- 97

trinucleotide

TABELUL 6.1

*Loci inclui n haplotipul minimal de identificare

Microsateliii sunt caracterizai drept markeri ai evoluiei umane recente, deoarece au o rat de evoluie
prin mutaii foarte rapid, estimat la circa 2 x IO3 mutaii per locus i per generaie. Asocierea microsateliilor
cu markerii binari este informativ pentru studiile liniilor filogenetice paternale. Ei definesc haplotipuri n
cadrul haplogrupurilor.

Markerii bialelici (binari, polimorfisme SNP) reprezint un tip obinuit de variabilitate genetic
uman. Sunt denumii markeri binari, deoarece prezint de regul doar dou alele: alela ancestral i alela
derivat. Sunt generai prin substituirea unei singure baze nucleotidice sau printr-un eveniment mutaional
limitat, de tipul inseriei/deleiei unei nucleotide. Rata cu care survin aceste fenomene mutaionale este foarte
sczut - substituia unei baze apare cu o frecven de ordinul a 10~ 8 per locus i per generaie, n prezent, sunt
descrii njur de 29 de markeri binari pentru Y. Prin faptul c sunt bialelice, polimorfismele SNPs au un coninut
informaional sczut i, deci, investigarea lor n scop de identificare nu este avantajoas. Markerii bialelici sunt
ns valoroi pentru c pot defini haplogrupuri (linii monofilogenetice). Sistemele dinucleotidice au, din acest
punct de vedere, putere discriminatorie mare i sunt cei mai buni markeri care servesc la identificarea grupurilor
umane n strns corelare cu o anumit origine geografic. Studiile populaionale prin asocierea mai multor
markeri binari Y permit reprezentarea combinat a tuturor cromozomilor Y ntr-un arbore filogentic comun.
Markerii de tip SNPs ai cromozomului Y i gsesc utilizarea i n genetica medical pentru diagnosticul
infertilitilor masculine, unele deleii fiind corelate cu disfuncionaliti n spermatogenez.
Particularitile polimorfismelor STR-Y fa de polimorfismele STR autozomale

Spre deosebire de markerii STR autozomali, markerii de tip STR-Y se caracterizeaz prin transmiterea lor

dup modelul uniparental, lucru ce trebuie obligatoriu avut n vedere la interpretarea statistic a datelor despre
STR-Y.

Markerii STR-Y se dovedesc extrem de utili pentru compararea populaiilor strns nrudite, aspect
nu poate

fi

realizat cu ajutorul markerilor STR autozomali. Un studiu multicentric efectuat n Europa

care

evideniat faptul c profilele cromozomiale Y definite printr-un set de 7 loci: DYS19, DYS389I, I DYS389II,
DYS390, DYS391, DYS392, DYS393, au capacitatea de a discrimina majoritatea indivizilor I de sex masculin
dintr-o populaie. Puterea lor discriminatorie variaz ntre 74-90% n populaiile europene. I

Aceast capacitate discriminatorie nalt are potenialul de a identifica profilul cromozomial Y I specific
unui brbat i tuturor descendenilor sau ascendenilor si pe linie masculin. Necunoscndu-se I numrul de
linii paternale ntr-o populaie, nu se pot face ns aprecieri cu privire la numrul de profile I Y identice, fiind
imposibil formularea concluziilor de identitate bazate pe calculul statistic prin regula I produsului, ca n cazul
markerilor autozomali. In mod ideal, definirea profilelor Y ar trebui s se fac I utilizndu-se ct mai muli
markeri, astfel nct ansa identificrii unui individ ntr-o populaie s creasc I la 100%. Chiar n aceste
condiii, nu se poate opera o discriminare pe markerii de tip STR-Y la indivizii I care au o filiaie comun pe
linie masculin (exemplu: tat-fiu, nepot-bunic patern, frai buni, veri primari I cu bunic patern comun, nepotunchi-patem etc.).
Fenomenele mutaionale specifice markerilor STR ai cromozomului Y

Mutaiile markerilor STR-Y sunt o certitudine i ele trebuie avute mereu n vedere atunci cnd se I
studiaz descendena biologic pe linie masculin. Un haplotip cromozomial Y rmne de regul stabil I ntr-o
linie patern de-a lungul mai multor generaii.

Mutaiile de tip single-step sunt cel mai frecvent tip de mutaii observate pentru markerii STR-Y. I
Mutaiile se produc de regul n sensul adugrii unei repetiii dect al pierderii unei repetiii (raport I 10:4).
Datele raportate pentru mutaiile STR-Y sunt n concordan cu modelul mutaional i ratele I mutaionale
descrise pentru mutaiile microsateliilor autozomali. Rata medie a mutaiilor pentru locii I STR-Y este estimat
ntre 0,21 x 10~2 - 0,32 x IO2 per locus (DYS19 - 0,32 x io-2, fiind mai nalt dect I cea raportat pentru locii
STR autozomali (0,15 x 10~3).

Incidena mutaiilor pentru un set de 9 microsatelii Y, evaluat de-a lungul a 6 pn la 8 generaii, I este
estimat la 1,6% din cazuri. De remarcat c fenomenele mutaionale sunt de regul detectate numai I la nivelul
unui singur locus din setul celor studiai. In faa unei situaii n care nu exist o coresponden I perfect ntre

profilele Y ale descendenilor unei linii masculine, concluzia de mutaie versus concluzia I de non-nrudire
trebuie bine argumentat numai dup lrgirea investigaiilor, eventual i cu ajutorul I markerilor ADN
autozomali. Neconcordanele detectate pe mai muli markeri ntre dou profile Y nu sunt I de regul consecina
unor mutaii multiple, ci evidente n favoarea formulrii unei concluzii de non-nrudire I pe linie patern.
Investigarea agresiunilor sexuale cu ajutorul markerilor STR-Y

Pentru violuri i alte tipuri de agresiuni sexuale, investigarea markerilor STR-Y ofer o nou I perspectiv.
Se tie c la testele ADN uzuale cu markeri STR autozomali, cantitile mari de celule I epiteliale vaginale
prezente n proba postcoital au capacitatea de a inhiba frecvent amplificarea cantitilor I mici de ADN
provenit din spermatozoizii agresorului. Pentru mixturi de ADN avnd componentele I masculin/feminin n
proporie de 1:10 sau 1:5, sistemele autozomale permit detectarea cu ambiguitate a I componentei minore,
masculine. n aceste situaii, profilul ADN al agresorului devine extrem de dificil I de realizat, uneori chiar
imposibil. ntr-un mix ADN cu raia componentelor de 1:2000 (0,4 ng ADN I masculin n 800 ng ADN feminin),
profilul cromozomial Y al agresorului poate fi identificat cu succes. I Contrar analizei pe markerii ADN
autozomali, analiza STR-Y nu este inhibat de cantitile mari de I celule vaginale i nici nu necesit procedee
de extracie a ADN prin liz diferenial.Genotiparea STR-Y genereaz un profil ADN specific agresorului ntrun timp record i cu o rat mare de succes, minimiznd j arderile de ADN spermatic i riscul contaminrilor prin
manipulri multiple n laborator. Pentru cazurile de viol n grup, analiza microsateliilor Y permite determinarea
cu mai mult precizie a numrului de agresori sexuali brbai, dup numrul de profile Y evideniate n prob.

Mai trebuie adugat c genotiprile Y pot juca un rol deosebit i n investigarea altor tipuri de probe
judiciare constnd n amestecuri de produse biologice de origine diferit: snge-snge, snge-saliv etc., cu att
mai mult cu ct n aceste cazuri, extracia diferenial este imposibil de realizat.
Cercetarea paternitii cu ajutorul cromozomului Y

Potenialul polimorfismelor STR-Y pentru studiul relaiilor de descenden biologic este deosebit de
important datorit modului lor de transmitere exclusiv pe linie paternal. n ultimii ani, unele laboratoare au
inclus n testele ADN de paternitate i analiza markerilor STR-Y la cazurile cu progeni de sex masculin.
Utilizarea markerilor STR-Y rmne totui limitat obiectiv, deoarece testarea este rezervat exclusiv cazurilor
n care copilul este biat.

Nu trebuie uitat ns aportul preios pe care l aduce cercetarea markerilor cromozomiali Y n cazurile n
care tatl prezumtiv nu este disponibil pentru testare fiind decedat, disprut etc. n aceste cazuri, orice brbat
nrudit pe linie masculin cu tatl prezumtiv, un unchi paternal, un bunic paternal etc., poate participa la testare
furniznd informaii asupra constituiei moleculare a cromozomului Y patern i permind astfel creterea
gradului de concluden al unei investigaii. Obinerea unor rezultate corecte pentru cazurile deficitare este ns

strns condiionat de utilizarea unui set mai larg de markeri STR-Y. Cunoscnd rata medie a mutaiilor pe locii
STR-Y ca fiind estimat ntre 0,21 x IO 2 - 0,32 x IO-2 per locus, se poate deduce prin calcul matematic c o
singur alel STR-Y rmne nemodificat aproximativ 100 de generaii cu o probabilitate de 95%. Acest
interval de timp este suficient de mare ns pentru a permite comparaii ale liniilor de descenden masculin n
diferite contexte istorice.

Primul sex-scandal prezidenial din istorie investigat cu ajutorul cromozomului Y: Thomas Jefferson (1743- 1826), cel de-al
treilea preedinte american, a fost incriminat ntr-un jurnal din Richmond din 1802 ca avnd o relaie extraconjugal cu sclava sa,
Sally Hemings, relaie din care ar fi rezultat mai muli copii ilegitimi. ntr-un proces intentat n 1804, Jefferson a negat toate acuzaiile
ce i s-au adus, care de fapt erau mai mult de ordin circumstanial, fr o suinere cu probe obiective. Scandalul a fost declanat n
perioada alegerilor electorale, ns nu a avut efectul scontat, popularitatea lui Jefferson neftind afectat, drept care a i ctigat
alegerile prezideniale. Controversele pe seama acestei saga au alimentat o ntreag literaur pn n ziua de azi. Pentru un grup de
geneticieni, soluia a fost s compare cromozomii Y ai unor descedeni pe linie masculin apainnd celor dou familii, Jefferson i
Hemings. Cercettorii au analizat mai multe seturi de markeri polimorfici (n total 19) ai ADN cromozomial Y i au publicat rezultatele
cercetrilor lor n revista Nature nr. 27/1998. Haplotipul lui Thomas Jefferson nu a prezentat nici un punct comun cu cel al lui Tom
Woodson (n. 1790), primul fiu al sclavei Sally Hemings, concluzia geneticienilor fiind c preedintele nu a fost tatl biologic al acestui
copil. n schimb, ei au gsit o potrivire perfect ntre haplotipul Y-ului lui Jefferson i cel al lui Eston Hemings (n. 1808), cel de-al
cincilea fiu al lui Sally, probabilitatea ca aceast potrivire s apar ntr-o populaie fiind mai mic de 1%. Interesant este c nu acest
copil a fost obiectul scandalului de pres declanat n 1802, ci primul nscut al lui Sally Hemings. Din punct de vedere politic, verdictul
geneticienilor n cazul lui Thomas Jefferson a fost speculat de media n noiembrie 1998 n timpul audierilor preedintelui William
Jefferson Clinton pentru a motiva ntr-un fel relaia sa extraconjugal (dup cum se tie i n acest caz testul ADN a servit ca prob
obiectiv n susinerea acuzaiilor procurorilor). Episodul investigrii cromozomului Y a servit n final la demolarea imaginii unui erou
sacru al Americii, Thomas Jefferson, reamintind lumii c mai ales preedinii nu sunt dumnezei sau sfini, ci oameni, cu toate
slbiciunile i imperfeciunile care caracterizeaz o fiin uman.

Interpretarea genoptiprilor STR-Y. Formularea concluziilor de excludere

Ca i pentru alte sisteme de markeri ADN utilizai n genotipri, constatarea c un suspect prezint un
haplotip cromozomial Y diferit de cel al infractorului reprezint un bun motiv de a exclude suspectul respectiv.
Similar, n testele de paternitate, neconcordanele detectate pe unul sau mai muli loci ai cromozomului Y sunt n
favoarea unei concluzii de non-patemitate, cu o probabilitate a excluderii estimat I mai nalt dect pentru locii
analogi autozomali. Singura problem ce trebuie avut n vedere este I problema mutaiilor, ns numai pentru
cazurile de paternitate. Rata mutaiilor pentru microsateliii Y este I apreciat ca fiind suficient de sczut pentru
ca ea s nu reprezinte, ntr-adevr, o problem major. n I investigaiile de paternitate n care apar, ntre
genotipul Y al tatlui i copilului, neconcordane de tipul I unei diferene ntre alelele detectate, de o singur
repetiie i numai la un singur locus, obligatoriu trebuie I avute n vedere fenomenele mutaionale ale STR-Y
(one-step mutations) nainte de a se formula concluzii I de non-patemitate. Recomandarea este ca, pentru aceste
cazuri, genotiparea s fie lrgit, cu includerea I mai multor microsatelii sau minisatelii Y n setul de markeri
investigai i corelarea rezultatelor cu I profilurile obinute pe locii autozomali. Dac neconcordana detectat
continu s rmn un fenomen I singular, atunci ea este etichetat drept mutaie i concluzia se formuleaz n
favoarea paternitii.

re
marc

ha
plog

a
merin

Interpretarea rezultatelor n caz de coresponden perfect a genotipurilor Y

Pentru sistemele de markeri ADN autozomali, n caz de coresponden perfect a dou genotipuri,
singurul individ care poate avea un profil identic cu al unui suspect este teoretic doar fratele geamn - o situaie
extrem de rar; problema care rmne de rezolvat n caz de coresponden perfect a dou profiluri ADN o
constituie calcularea probabilitii de potrivire (match probability) - adic frecvena cu care se regsete
respectivul profil ADN ntr-o anumit populaie (fig. 6.2 i fig. 6.3). De aici i problema care apare mereu: ce
populaie trebuie s fie analizat pentru ca frecvena s fie estimat cu maximum de acuratee.
FRATELE PERSOANEI DISPRUTE

DYS438

DYS392 I

DYS437 | | DYS19
175

225

275

325

m
ater m
uli fi

3000

!]! ii:

2000
|

1000

____4_ _______M *

I_________________J t_____

A. A J

15 14

12
PROBA OE OS CADAVRU
r

re
zult

PowerPlex Y v1.4

125

75

m
ascul

nalt

PowsrPlex Y v1.4

OYS438

I DYS437 1 |
125

75

DYS19

175 225

dJ d

DYS392 |

275

325

tre
cute

300
200

100
0J!_____i_
12

AA
15

14

11

Fig. 6.2. Electroforegrama reprezentnd profilele ADN cromozomiale Y pentru proba de os provenit de la un
cadavru, comparativ cu proba de referin a prezumtivului frate al persoanei disprute la nivelul locilor STR-Y
DYS438, DYS437, DYS19 i DYS392 (cazuistica INML Bucureti).

a
ceasi an
c
aliza
antit

san
uspec
alize
I
pe
brbat,
car
pentru
profil F

FRATELE PERSOANEI DISPRUTE

DYS391
75

Ppwefplex Y V1.4
DYS389I
125

DYS439
175

DYS389II
22S

275

Fig. 6.3. Electroforegrama reprezentnd profilele ADN cromozomiale Y pentru proba de os provenit de la un cadavru,
comparativ cu proba de referin a prezumtivului frate al persoanei disprute la nivelul locilor STR-Y DYS391,
DYS389-I, DYS439 i DYS389-II (cazuistica INML Bucureti).

Aceleai consideraii trebuie fcute i se aplic n analiza ADNmt, unde toi descendenii pe linie matemal prezint secvene identice de
ADNmt, n afara cazului n care nu intervin mutaii. Polimorfismul nalt al regiunii non-codante mitocondriale i numrul mare de copii de ADNmt
dintr-o celul fac ca aceast analiz s fie extrem de util n investigaiile judiciare, mai ales cnd probele biologice sunt n cantiti foarte mici sau
extrem de degradate.

n general, exist puine raiuni pentru care s-ar tenta s se argumenteze pentru o identificare a suspecilor numai pe seama profilelor ADN-Y
sau ADNmt i ele au fost expuse mai sus. Totui, informaia pe care aceti markeri ADN o aduc, n sensul eecului de a realiza o excludere, este
extrem de preioas pentru continuarea unei investigaii medico-legale sau criminalistice.
Deducerea populaiei de origine dup genotipul Y

Prin compararea distribuiei diferitelor haplogrupuri cromozomiale Y n diferite populaii umane s-a remarcat existena unui grad nalt de
specificitate populaional a acestor haplogrupuri. Anumite haplogrupuri cu specificitate nalt au fost evideniate pentru populaiile din Africa SudSaharian, amerindieni, japonezi etc. n anumite populaii amerindiene de exemplu, circa 90% din indivizii de sex masculin aparin unui singur
haplogrup Y: haplogrupului 18. Diversitatea sczut a haplogrupurilor Y rezult din fluctuaiile n numrul de fii pe care fiecare brbat i are ntr-o
populaie: unii brbai au mai muli fii, alii au puini sau nu au deloc. Variaia aceasta natural poate fi exacerbat n anumite societi, trecute sau
prezente, datorit constrngerilor de ordin cultural i practicilor maritale. n aceste cazuri, analiza cromozomului Y are informaivitate sczut

pentru identificare.
i totui, tocmai gradul nalt de specificitate al haplotipurilor cromozomiale Y face ca acest tip de analize s fie deosebit de tentant n ncercarea de
a trage concluzii cu privire la originea etnic a unui brbat. n anumite cazuri, cnd frecvenele haplogrupurilor Y se cunosc deja, informaiile
furnizate de un profil Y pot orienta decisiv o investigaie judiciar

.Populaiile urbane n care investigatorii judiciari opereaz frecvent sunt ns mult mai amestecate i intricate ca origine dect populaiile pe
care i raporteaz studiile geneticienii antropologi. De aceea, localizarea unui haplotip Y ntr-un anumit grup etnic necesit o analiz prudent,
dictat de gradul mare de hazard al concluziilor i de consecinele alimentrii unor prejudeci rasiale. Dac haplotipul Y al unui suspect este
comparat cu cel al unei populaii de referin, trebuie avut n vedere i modul n care s-a constituit baza de date cu profile Y. Diviziunile etnice,
utilizate n mod curent n unele baze de date, cum ar fi cea a S.U.A. (caucazieni, hispanici, africani etc.), sunt deosebit de utile pentru proflele
ADN autozomale, ns nu sunt deloc recomandate pentru genotiprile cromozomiale Y.

Dac genotiparea cromozomului Y devine mai complex i bazele de date ADN-Y devin operaionale n tot mai multe pri ale lumii, pare
probabil c, n viitorul apropiat, toi infractorii brbai s i aib haplotipul Y nscris n ele. Pentru ca acest lucru s devin realitate este necesar s
progreseze deopotriv tehnologia actual de analiz, ct i studiile de genetic a populaiilor. Geneticienii legiti apreciaz c, ntr-un viitor nu
foarte ndeprtat, un haplotip Y suficient de detaliat va putea indica ofierilor de poliie populaia de origine i poate chiar i numele de familie al
infractorului care a lsat o urm biologic la locul unei fapte. Un astfel de scenariu, deocamdat la limita cu tiinifico-fantasticul, va pune pe
gnduri pe muli dintre indivizii certai cu legea cnd va deveni realitate.
Cromozomul Y - un cronicar modern al istoriei i civilizaiilor umane

Reunind rezultatele unor studii genetice ntreprinse pe ADN mitocondrial i pe cromozomul Y, cercettorii de la mai multe universiti din
Europa au obinut date extrem de interesante despre istoria populaiilor din diferite continente. n 1997, un grup de cercettori britanici care a
condus un studiu n Polinezia a pus n eviden cu ajutorul analizelor pe ADN mitocondrial descendena comun a tuturor polinezienilor dintr-un
mic numr de femei originare din Asia de Sud-Est sau Noua Guinee. Tot ei au identificat c aproximativ 30% din brbaii polinezieni au
cromozomi Y de tip european. Prezena acestui procent ridicat de Y European a fost explicat prin trecerea colonitilor europeni brbai prin
acele teritorii. Geneticienii sunt de prere c exist n lume multe locuri unde istoria veche este reprezentat de mituri i folclor i unde doar analiza
genetic modern poate oferi oportunitatea verificrii lor tiinifice.

Originea populaiilor modeme n Europa din perspectiva cromozomului Y a nceput s fie studiat dup 1996, n cadrul unui proiect foarte
larg, reunind 25 de laboratoare de genetic molecular de la universiti i institute de medicin legal din toat Europa i coordonat de European
DNA Profiling Group. Cercettorii au raportat rezultate extrem de interesante: ei au identificat, de exemplu, la populaiile scandinave, n special la
finlandezi i estonieni, anumite particulariti structurale ale cromozomului Y comune cu ale populaiilor mongole. Explicaia pe care au avansat-o
a fost aceea c populaiile studiate provin din descendeni de origine mongol care au migrat din Asia Central n nordul Europei la ncheierea erei
glaciare, acum 8 000-15 000 de ani. Cercetrile de genetic au venit, deci, s confrme ceea ce se presupunea de mult vreme, avnd ca punct de
plecare argumente de ordin lingvistic: originea comun a limbii acestor populaii nord-europene cu cele mongole.

Un alt studiu, ntreprins de aceast dat n populaiile din Peninsula Iberic, a identificat anumite particulariti structurale ale cromozomului
Y comune pentru populaia basc i catalan, i absente n restul teritoriului iberic. Cercettorii au concluzionat c aceste particulariti structurale
sunt consecina unor mutaii genetice survenite n urm cu aproximativ 1 000-3 500 de ani. Rezultatul studiului este extrem de interesant n
contextul n care populaiile basc i catalan vorbesc limbi complet diferite, iar bascii s-au considerat o populaie distinct, trind ntr-un izolat
geografic nc din perioada mezolitic. Concluzia studiilor prezentate a fost c mobilitatea geografic a brbailor este foarte mare n cadrul unor
fenomene cum sunt migraiile sau colonizrile, unde participarea elementului masculin este majoritar.

Concluzii asupra genotiprilor cromozomiale Y. Cromozomul Y uman servete n prezent ca material genetic de analiz n domeniul
medicinei legale, geneticii medicale i geneticii populaiilor.

Aplicaiile majore ale analizei STR-Y sunt:

- identificarea agresorilor sexuali brbai (test de screening n cazurile de viol pentru excluderea suspecilor, n locul protocolului de liz
diferenial; numai cazurile de neexcludere se prelucreaz mai departe);

- identificarea numrului minim de agresori sexuali n violurile comise n grup;

- identificarea agresorilor sexuali avnd descenden biologic patern comun (frai, veri, tat i fiu etc.), n agresiuni homosexuale, sexuale
sau cazuri de incest cu victime biei;

- identificarea celulelor epiteliale masculine n ej aclatele indivizilor vasectomizai;

- cercetarea paternitii pentru cazurile cu descendeni de sex masculin;

- stabilirea paternitii n cazurile n care lipsete prezumtivul tat sau nu exist date biologice despre acesta;

- studii de genealogie i antropologie.

In ultimii ani, un mare numr de markeri polimorfi au fost identificai i analizai pe poriunile nerecombinante ale cromozomului Y. Aceti
markeri includ: polimorfisme binare i de tip multi-alelic - microsatelii i minisatelii. Rezoluia acestor sisteme este suficient de ridicat pentru a
permite distingerea a doi brbai nenrudii biologic din populaiile europene.

Specialitii din domeniu sunt unanimi de acord c analiza polimorfismului cromozomului Y trebuie s intre n repertoriul de analize al tuturor
laboratoarelor de genetic medico-legal i criminalistic.

Interpretarea rezultatelor testelor STR-Y trebuie fcut cu mult atenie i innd cont de modul de transmitere i particularitile structurale i
mutaionale ale cromozomului Y. Investigaiile pe cromozomul Y au o serie de limitri, ce in n special de proprietile cromozomului Y.

Studiul markerilor cromozomiali Y a devenit din ce n ce mai accesibil comunitii genetice judiciare dup 2003, odat cu introducerea pe pia
a primelor kituri comerciale omologate STR-Y.

Exist o baz de date STR-Y la nivel european, organizat de cercettorii de la Universitatea Humboldt din
Berlin (Roewer & colab.). Baza de date conine peste 50 000 de haplotipuri caucaziene i este continuu
mbogit cu noi date. Puterea de discriminare a haplotipurilor Y va fi mult mbuntit ntr-o baz de date de
dimensiuni mari. Baza de date european va servi n viitor ca element de referin n noile studii de genetic
populaional pe cromozomul Y. Romnia s-a afiliat n 2003 acestei baze de date cu peste 100 de profile
cromozomiale Y realizate n urma unui studiu populaional efectuat de INML Bucureti n colaborare cu
Institutul de Medicin Legal a Universitii din Miinchen. CAPITOLUL 7

Noi markeri ADN folosii n genetica judiciar.

ADN mitocondrial
In laboratoarele performante de genetic judiciar s-a ajuns astzi s fie folosit un set de 16 locil pentru
identificri i este foarte probabil c progresul n domeniu va contiuna.

Tiparea de sex este dezvoltat prin punerea la dispoziie a unor kituri STR ce pot proba genul unui I
individ a crui prob ADN este cercetat. n plus, n cazurile cnd probele sunt extrem de degradate i 9 nu
pot da rezultate credibile prin utilizarea STR multiplex, ADN mitocondrial care se gsete ntr-un mai 9 mare
numr de copii n celule fa de ADN nuclear i, ca atare, mai rezistent la alterare devine azi din 9 ce n ce
mai folosit.

ntr-un alt capitol s-a discutat despre cromozomul Y care, i el, devine din ce n ce mai folositor, I atunci
cnd se ncearc obinerea de informaii asupra unor persoane de sex masculin (spre exemplu, n I viol) i cnd
sunt la dispoziie probe cu profil genetic diferit.

Se ncearc discriminri genetice n unele cazuri prin utilizarea unor markeri genetici alii dect cei I
umani sau pentru populaii umane de diferite rase. Ca atare, se poate presupune c, n viitor, tehnologia I ADN
va nregistra o mare dezvoltare, fiind capabil s rezolve i cele mai dificile cazuri n domeniul I
infracionalitii.

Nu este nevoie s insistm asupra importanei discriminrii de sex nu numai n viol, dar i n I catastrofe
de mas. La nceput, evident aceste aspecte s-au demonstrat prin folosirea metodei PCR, dar I azi o metod
folosit n stabilirea sexului este i sistemul amelogenin, combinat cu analiza STR.

Amelogenin este o gen ce cedeaz proteinele gsite n smalul dentar. Cromozomii X i Y conin I ntro foarte mare msur omologii de secven la locusul amelogenin. Exist seturi de primeri care I detecteaz
deleii (anomalii cromozomiale structurale neechilibrate, caracterizate prin pierderea unui I fragment
cromozomial), care sunt prezente numai n cromozomul X. Prezena unui singur vrf n diagram I indic
faptul c proba provine de la o femeie, n timp ce existena a dou vrfuri atest c proba provine I de la un
brbat.

t de 16 loci
Dei identificarea sexului prin metoda amelogenin este acceptat ca avnd calitatea de discriminare I a
sexului, ea nu este considerat pe deplin concludent, fiind descrise cazuri de eroare, iar, pentru I edificare,
metoda trebuie combinat cu markeri ai cromozomului Y.
Markerii
autozomali ADN, cum ar fi cele 16 seturi de loci STR, se disperseaz cu fiecare generaie, I ntruct
i
genul
informaia
genetic a oricrui individ provine jumtate de la mam i jumtate de la tat. De aceea, I n
unui
discriminarea
degradate de sex, este folosit att cromozomul Y, ct i ADN mitocondrial. Acetia trec din generaie I n
generaie
nemodificai (cu excepia unor cazuri de mutaie) i, astfel, capt valoare indubitabil n stabilirea I
i ntr-un
liniei
materne
mai vine sau paterne. De reinut c, n stabilirea provenienei materne sau paterne a probei, informaia I
genetic
azi din pentru fiecare marker se refer mai degrab la haplotip dect la genotip, deoarece investigheaz o I
singur alel. ntruct cromozomul Y i cromozomul X sunt fineai la acelai cromozom, calculul statistic I
privind probabilitatea aleatorie de potrivire nu implic rezultate certe. De aceea, haplotipul obinut din linia I
matern sau patern nu este capabil a diferenia net un individ, aa cum o face genotipul provenit din I markeri
autozomali,
care sunt nelincai i segreg separat din generaie n generaie.
iai folositor,

I exemplu, n

ADN
mitocondrial
ntruct
cromozomul(ADNmt)
Y i ADN mitocondrial joac un rol important n discriminarea de sex, ei capt o
importan primordial n genetica judiciar.

Cea mai mare parte a materialului genetic se afl n nucleul fiecrei celule. Cu toate acestea, mitocondria
Iii
care
este
localizat n citoplasm, avnd rolul de a furniza celulei energie, conine o cantitate mic de
dect cei
tehnologia n informaie genetic. Mitocondriile au deci material genetic propriu, distinct ca organizare i funcie fa de
domeniul genomul nuclear. n fiecare celul exist n medie 500 de mitocondrii, fiecare din ele coninnd ntre 2 pn la
10 molecule de ADN mitocondrial (ADNmt). nsumat, materialul genetic al mitocondriilor depete din
punct de vedere cantitativ materialul genetic nuclear, aspect deosebit de important n investigaiile genetice
judiciare pentru care testele pe markeri ADN nucleari nu ofer rezultate concludente.
l, dar i n
lei PCR, dar
aSTR.

ADNmt uman este o molecul de mici dimensiuni, cu structura circular dublu-catenar, compact,
avnd n componena sa 16 569 de perechi de nucleotide i posed 37 de gene menite a coda produsele
rezultate din procesele de fosforilare oxidativ.

; i Y
Dl
1021 bp
Al
conin primeri
D - loop
care rderea
402 bp-Dli
ClSecvena complet a nucleotidelor care alctuiesc ADNmt a fost raportat
anul
bp 1981
Bl de Anderson
Al- n437
unui 'n
^
r
IIV1
*
Colale. Cele dou catene ale ADNmt se deosebesc prin Matrice
coninutul n baze azotate, HV2
i anume una din ; catene
diagram roba
mitocondrial
este mai bogat n guanine (lanul greu), pe cnd cealalt are un coninut crescut n citozin (lanul uor).
provine

discrimi
nare , iar,
pentru

Regiunea necodant
Fig. 7.1. Organizarea regiunii non-codante
a cu secvenele
hipervariabile HV1 i HV2
ADNmt (dup Kirby L. T., Steighner R. J., Holland M.). Regiunea HV1 se gsete situat n
imediata vecintate a originii replicrii, iar HV2 n
interiorul regiunii D-loop.

ire generaie,
it. De aceea,
ADN
mitocondrial
din generaie ADNmt (fig. 7.1) este caracterizat printr-o deosebit economie n organizare, comparativ
cu ADN
circular dublu-catenar compact

n
nuclear, putnd fi mprit (arbitrar) n dou regiuni: codant i necodant.
stabilirea ;i,
informaia
/estigheaz o
cuiul statistic In regiunea codant s-au identificat 37 de gene, care, aa cum am artat, sunt responsabile de sinteza
inut din linia
unor variate molecule biologice implicate n procesele de producere a energiei celulare; de menionat c
provenit din ntre genele mitocondriale nu se afl intercalate secvene de ADN necodant, ca ntre genele nucleare.

Regiunea necodant a ADNmt, denumit i regiune de control, cuprinde un segment de aproximativ I 1

000 de perechi de baze, la nivelul cruia se afl localizate originea specific a replicrii ADNmt, I originea
transcripiei i bucla D (displacement loop-D loop). Regiunea de control prezint o serie del variaii structurale
ntre indivizii umani, denumite polimorfisme ADNmt, care sunt deosebit de utile n I identificri de persoane.
Variaiile structurale specifice regiunii de control sunt concentrate n trei regiuni I hipervariabile (HV):

- HV1: ntre poziia 16024-16365, 342 pb;

- HV2: ntre poziia 73-340, 268 pb;

- HV3: ntre poziia 438-574, 137 pb.

Investigarea polimorfismelor (variaiilor structurale) ale ADNmt din cadrul celor trei regiuni I
hipervariabile servete n prezent Ia identificarea judiciar

n nomenclatura secvenelor de ADNmt uman publicat de Anderson, fiecrei baze din structural ADNmt i
s-a atribuit un numr de ordine avnd ca punct de plecare originea replicrii lanului greu: I bazele nucleotidice
sunt astfel numerotate de la 1 la 16 569, n ordinea strict n care se succed pe lanul I greu. Prin convenie,
orice profil ADNmt uman obinut prin secvenierea regiunilor hipervariabile HV1/1 HV2 (opional i HV3) s-a
analizat prin raportare comparativ la secvena de referin Anderson.

n prezent, majoritatea laboratoarelor de genetic judiciar opereaz pentru analiza comparativ cui o
secven de referin modificat fa de secvena Anderson, care ncorporeaz o serie de incoveniente I n
raportarea profilelor ADNmt.
Transmiterea ereditar a genomului mitocondrial

n limita cunotinelor actuale, se admite c ADNmt are o transmitere ereditar exclusiv pe /iniei matern
i nu particip la procesele de recombinare n timpul replicrii celulare. Din acest punct del vedere, genomul
mitocondrial poate fi considerat, aa cum s-a mai spus, un haplotip.

Indivizii umani nrudii pe linie matern prezint molecule de ADNmt identice. Mamele transmit I
propriul ADNmt copiilor de ambele sexe, dar numai fiicele vor fi acelea care l vor transmite generaiilor I
urmtoare. n cazul n care o femeie are numai descendeni de sex masculin, genotipul ei mitocondrial I se va
elimina din populaie, deoarece brbaii nu pot asigura propagarea sa n succesiunea generaiilor. I

Ereditatea citoplasmatic, exclusiv matern, se explic prin faptul c spermatozoizii nu contribuie I cu

citoplasm la formarea zigotului.

Toate cele 200 000 de mitocondrii ale unui zigot aparin ovulului i, ca atare, celulele viitorului I organism
vor fi echipate numai cu mitocondrii materne. n concluzie, marea variabilitate a secvenelor I regiunii
necodante a ADNmt, precum i transmiterea ereditar exclusive pe linie matern a genomuluiI mitocondrial
permit discriminarea cu succes a indivizilor umani cu descenden biologic matern comunI (fig. 7.2).

Mutaiile genomului mitocondrial. ADNmt nu posed n structura sa sisteme eficiente de reparare, I

motiv pentru care erorile inerente replicrii, precum i leziunile produse accidental de ageni genotoxici,| rmn
frecvent necorectate i se acumuleaz sub form de mutaii. n genomul mitocondrial, mutaiile se I produc cu o
frecven de 5-10 ori mai mare dect n genomul nuclear, fiind rezultatul aciunii concurentei a mai multor
factori:

lipsa nveliului protector histonic face ca molecula de ADNmt s fie deosebit de vulnerabil lai
aciunea agenilor mutageni, dintre care unii (radicalii liberi de oxigen) sunt generai n cantiti marii chiar de
procesele metabolice mitocondriale;

Celula
Primul
globul
folicular
polar

Spermatozoid
la contactul cu
membrana
ovular
I /

' Nucleu blocat n

metafaza II I /
Ovocitul II
Granule
corticale
Zona
pelcida

/
/

Spaiul
perivitelin

Primul
polar

operare
ADN
Y
(enzima
care

Nucleul
spermatozoidului

globul
Celule
foliculare
Rotaia
fusului de
diviziune
Ovocit II

fidelitatea de
sczut
a
polimerazei
Spaiul
perivitelin
replicrii
Zona pelcida modificat
lrgit
ADNmt),
Fig. 7.2. Penetrarea ovulului de ctre spermatozoid n procesul fecundrii: numai nucleul spermatozoidului
accept
Granule corticale

intr n citoplasm ovocitului activndu-1, n timp ce echipamentul su mitocondrial rmne la exterior (dup
Bergeron J. i Herve J. C.).

mperecheri greite sau alunecri peste nucleotide, n procesul replicrii genomului mitocondrial;

- mutaiile de la nivelul regiunii necodante ADNmt, genereaz continuu mutaii neutre, denumite i
polimorfisme. Rata mutaiilor mitocondriale neutre per generaie este estimat la 0,027. Cunoaterea frecvenei
mutaiilor neutre pe liniile de descenden matern este de importan capital pentru utilizarea ADNmt n scop
de identificare.

Polimorfismele ADNmt necodant. Cel mai frecvent raportate sunt polimorfismele prin substituia sau
inseria unui nucleotid. Regiunea HV1 prezint mai multe situsuri polimorfe comparativ cu HV2 sau HV3: n
medie 4-5, fa de numai 34 la nivelul HV2 sau 2-3 la nivelul HV3. Cifrele difer de la o populaie la alta,
pstrnd ns aceleai proporii. n concluzie, analiza regiunii HV1 este mai discriminativ comparativ cu HV2 i
HV3.

ntr-o baz de date, secvenele polimorfe ale ADNmt, respectiv HV1, mpreun cu HV2 i HV3, provenite
de la doi indivizi nenrudii biologic, difer n medie prin 3>-A nucleotide. Aceste diferene sunt n general mai
mari pentru afro-americani (14,1), africani (13,1) i japonezi (9,97) i mai puin importante pentru caucazieni:
basci (3,15), nord-italieni (3,77), sardinieni (4,22), toscani (5,03), francezi (8,38) sau britanici (8,48). Datele din
literatura de specialitate sugereaz c, pentru europenii caucazieni, analiza combinat a regiunilor HV1, HV2 i,
mai nou, HV3, relev n medie 8 mutaii neutre fa de secvena de referin Anderson.

Testarea identitii genetice mitocondriale. n practic, raritatea unui profil ADNmt se exprim

n mod curent prin frecvena cu care profilul se regsete ntr-o baz de date considerat de
referin.Probabilitatea ca doi indivizi, selectai la ntmplare dintr-o populaie, s aib profile ADNmt
identice, poate fi estimat cu ajutorul probabilitii de identitate, dup formula:

P = x2

Unde: x = frecvena unui profil ADNmt ntr-o baz de date, iar P - probabilitatea de identitate (random
match probability).

TABELUL 7.1

P are valori cuprinse ntre 0,52% i 2,5%, n funcie de baza de date de referin (tabelul 7.1). Mrimea
bazelor de date este factorul limitativ pentru calculul P n cazul profilelor ADNmt. Un studiu multicentric
american, condus de FBI, a ncercat s elimine acest neajuns, compilnd datele din mai multe baze de date,
reprezentative pentru mai multe grupuri populaionale. Rezultatele studiului au demonstrat c toate
populaiile prezint un grad nalt de polimorfism la nivelul regiunilor hipervariabile ale ADNmt.
Mrimea bazei (N)

Diversitatea genetic

Caucazieni americani

604

0,996

0,52%

Afro-americani

149

0,998

0,89%

Africani

111

0,990

1,87%

Caucazieni francezi
Caucazieni austrieci

109
101

0,996
0,997

1,30%
1,28%

Hispanici americani

99

0,993

1,74%

Asiatici americani

58

0,992

2,50%

162

0,996

1,01%

Baza de date

Japonezi

Probabilitatea
identitate P

de

Tabelul arat grupurile populaionale, mrimea bazei de date (N - numr de indivizi), diversitatea I
genetic i probabilitatea de identitate. Se observ c n diferite populaii diversitatea genetic a ADNmt I
(echivalentul heterozigoiei) pentru analiza combinat a HV1 i HV2 este asemntoare, situndu-se n B jurul
valorii de 0,99.

n concluzie, un profil ADN mitocondrial poate fi raportat prin probabilitatea de identitate P atunci I cnd
baza de date de referin este destul de cuprinztoare i are o diversitate genetic ridicat (de peste I 99%).

Heteroplasmia ADNmt. Existena unui singur tip de ADNmt n toate celulele unui organism uman I face

ca genomul mitocondrial s fie considerat un genom de tip homoplasmic (monoclonal). Acest lucru I nu exclude
posibilitatea ca, uneori, datorit fenomenelor mutaionale, mai multe tipuri de ADNmt s fie I detectate la acelai
individ. La nivelul ADNmt uman, regiunea necodant este caracterizat printr-o rat I nalt a mutaiilor. Datorit
acestor mutaii, n celulele somatice ale unui adult se pot identifica mixturi I de mitocondrii, unele cu genom
normal i altele cu genom modificat prin mutaii. Termenul careB desemneaz coexistena ntr-un organism a
mitocondriilor cu genom normal i a mitocondriilor mutante I este cel de heteroplasmie.

Fenomenul heteroplasmiei la nivel mitocondrial este frecvent raportat n ultimii ani n domeniul I
identificrilor de persoane, heteroplasmia regiunii necodante a ADNmt fiind mult mai rspndit dect I s-a
estimat anterior. La ora actual, se admite c toi indivizii umani au la nivelul genomului mitocondrial Iun
oarecare grad de heteroplasmie mai mult sau mai puin detectabil. Organismul uman este compus din circa
trei miliarde de celule, fiecare dintre aceste celule coninnd mii de copii de ADNmt. Prezena aceluiai
genom mitocondrial n toate celulele unui organism adult ar fi un fapt oarecum surprinztor, dat fiind
cantitatea imens de material genomic mitocondrial cu particularitile sale morfologice i funcionale.
Indivizii heteroplasmici pot prezenta:
(1) ADNmt heteroplasmie la nivelul unui singur esut.
(2) ADNmt heteroplasmie ntr-un numr limitat de esuturi concomitent cu ADNmt homoplasmic n l
restul esuturilor.
(3) Dou tipuri de ADNmt homoplasmic, n proporii relativ egale, la nivelul tuturor esuturilor.
Frecvena heteroplasmiei ADNmt pare a fi mai ridicat n esuturile non-mitotice. Astfel, au fost

; raportai indivizi homoplasmici pentru celulele sanguine prezentnd nivele detectabile de heteroplasmie
[ n esuturile cerebrale. Fenomenul heteroplasmiei este raportat frecvent i n asociere cu diferite maladii
genetice mitocondriale.

Nivelele de heteroplasmie n firele de pr sunt mai mari dect n probele de snge, frecvena acestora
fiind estimat la 9,7%.

Cnd se lucreaz pe probe de snge, 2,6% din cazurile de mam-copil prezint heteroplasmie I
mitocondrial.

Testarea gemenilor a evideniat, de asemenea, heteroplasmii n 1,8% din cazuri; gemenii pot avea acelai
tip de heteroplasmie sau numai unul dintre gemeni prezint un profil heteroplasmie.

Tipuri de heteroplasmii mitocondriale. Varietile de heteroplasmii cel mai frecvent semnalate la

nivelul ADNmt necodant sunt: heteroplasmia punctiform (sau de poziie) i heteroplasmia prin modificarea
lungimii, de regul a unui lan homopolimeric.

Heteroplasmia punctiform se definete prin prezena n aceeai poziie i n proporii relativ egale a dou
nucleotide diferite. Dac prin secveniere, ntr-o anumit poziie a regiunilor hipervariabile ale ADNmt se
detecteaz simultan dou semnale - de exemplu A i T - atunci ADNmt este considerat heteroplasmie n
poziia respectiv. Condiia este ca semnalul secundar s aib aproximativ 40% din intensitatea semnalului de
baz. Prezena celor dou semnale desemnnd prezena a dou nucleotide diferite n aceeai poziie trebuie
obligatoriu confirmat printr-o analiz de secveniere de sens contrar (de regul, a lanului L a ADNmt).
Conform acestei definiii, heteroplasmiile intra-individuale punctiforme la nivelul ADNmt au o inciden
sczut i nu par s afecteze identificrile de rutin din laboratoarele de genetic judiciar.

Heteroplasmia de lungime apare prin modificarea numrului de nucleotide ce intr n structura unui lan
homopolimeric (poriune din lanul polinucleotidic, alctuit din nucleotide de acelai tip). Lanurile
policitozinice (poly-C strech) din ambele regiuni hipervariabile HV1 i HV2 prezint deseori
heteroplasmii prin modificarea lungimii, inseria unei nucleotide C reprezentnd varianta cea mai comun.
Aglomerrile de citozine n exces sunt uneori dificil de interpretat, raportndu-se frecvent numai poziia de
start a unei serii de citozine.

Exist o serie de loci unde polimorfismele mitocondriale, n special cele de lungime, sunt frecvent
raportate: HV2 - 304. 309. 315 (inseria unor baze C adiionale este frecvent); aceste observaii au condus
la un consens general n comunitatea tiinific judiciar, n sensul c aceste polimorfisme s nu fie utilizate
n interpretarea probelor pentru confirmarea identitii unor indivizi sau excluderea acesteia.

Heteroplasmia n 2 poziii simultan, cunoscut i sub numele de triplasmie, este rar ntlnit; dac se
suspicioneaz o astfel de triplasmie, ea trebuie evaluat i raportat ca atare numai n condiiile n care se
exclude posibilitatea unei mixturi de ADNmt provenind din surse diferite.

Dac mai multe poziii de la nivelul moleculei de ADNmt investigate prezint mixturi de baze
nucleotidice I (cel puin 2 baze pentru acelai locus), atunci cel mai probabil este vorba de o mixtur de probe
biologice i nu I despre un ADNmt cu heteroplasmii multiple. Cnd exist dificulti de interpretare datorit
unor artefacte, I exist posibilitatea coamplificrii ADNnc mpreun cu cele dou secvene HV1 i HV2 - unele
pseudogene. I ADNnc pot amplifica i se pot confunda cu ADNmt ca fiind heteroplasmii: pn n prezent nici o
pseudogen I omolog cu HV2 nu a fost identificat, dar 2 pseudogene prezentnd omologie structural cu
regiunea HVI au I fost descrise; oricum fiecare dintre aceste pseudogene are cel puin 20 de nucleotide diferite
fa de regiunea I HVI aparinnd ADNmt. n aceste condiii, un analist experimentat cu greu face aceast
confuzie, catalognd I ca heteroplasmie un produs de amplificare al unei pseudogene.
Raportarea fenomenului heteroplasmiilor n investigaiile medico-legale

Fenomenul heteroplasmiei, precum i rata cu care este raportat acest fenomen sunt n strns I legtur cu
diferitele definiii adoptate pentru a descrie fenomenul heteroplasmiei. Fenomenul heteroplasmiei I n regiunea
necodant a ADNmt a fost prima oar raportat n 1994, de ctre Forensic Science Servicies, I cu ocazia
identificrii rmielor familiei Romanovilor.
n poziia 16169 a ADNmt provenit din rmiele osoase ale putativului ar Nicolae al II-lea al Rusiei a fost detectat o
heteroplasmie punctiform. Analiza rmielor fratelui arului, marele duce Georgij Romanov, a evideniat identitatea secvenei sale
mitocondriale cu cea a arului Nicolae, inclusiv heteroplasmia punctiform din poziia 16169, singura diferen fiind proporia uor
diferit a celor dou nucleotide din mixtura heteroplasmic. Prezena heteroplasmiei ADNmt deopotriv I la ar i ducele Georgij a
crescut probabilitatea identificrii osemintelor respective ca aparinnd arului Nicolae al II-lea.

Se estimeaz c detecia heteroplasmiilor n practica de genetic judiciar este de circa 5% dintre I

cazurile investigate pentru ADNmt.

Detectarea unei poziii heteroplasmice prin secveniere mitocondrial necesit n general tehnici de I
secveniere cu rezoluie nalt, metode care nu se aplic de rutin n practica de genetic judiciar, I numrul
laboratoarelor abilitate s fac astfel de investigaii fiind limitat. Odat detectat o heteroplasmie, I nivelul
acesteia poate fi cuantificat prin procedee de integrare gravimetric a intensitii semnalelor I secvenelor.

Studiile ntreprinse de laboratorul FBI au precizat modalitile prin care se exprim heteroplasmia I n
probele judiciare, conducnd la o mai bun nelegere a fenomenului. Toate aceste informaii s-au putut I obine
datorit, n primul rnd, sporirii considerabile a performanelor tehnicilor de lucru n secvenierea I ADNmt n
ultimii ani.

Din punct de vedere al practicii medico-legale, compararea direct ntre dou secvene de ADNmt I
simplific ntr-o oarecare msur problema. Marea variabilitate a regiunii necodante a ADNmt uman nu I
permite dect n situaii extrem de rare ca doi indivizi, complet nenrudii biologic, s difere doar prin I unul sau
dou nucleotide. n cazurile n care apar aceste diferene minime, de numai una sau cel mult I dou nucleotide
ntre dou probe biologice, specialitii n analiz mitocondrial recomand a se avea n I vedere posibilitatea
existenei unei heteroplasmii.
Strategiile de lucru n analiza ADNmt

Metoda care s-a impus n prezent n investigarea polimorfismelor ADNmt const n amplificarea I PCR a
regiunilor de interes din ADNmt (HVI, F1V2 i, mai recent, HV3) i urmat de secvenierea I direct a
produilor de amplificare. Etapele unei analize ADNmt sunt: analiz vizual i prepararea I probelor n vederea
extraciei, extracia ADN, amplificarea PCR a regiunilor de interes, purificarea i Icuantificarea produilor de

amplificare, amplificarea de secveniere, purificarea produilor de secveniere, detecia automat a produilor de

secveniere i analiza datelor. Accentul cade n special pe etapele de extracie i PCR, care sunt eseniale n
obinerea de rezultate fiabile pentru secveniere. n prezent, un potenial neajuns al secvenierii ADNmt n scop
de identificare l reprezint nc tehnica n sine, extrem de laborioas. Pe viitor, se preconizeaz automatizarea
tehnicilor de analiz astfel nct s permit un randament nalt al secvenierii i s minimizeze erorile de
laborator i de interpretare.
Complexitatea analizelor mitocondriale

Analiza ADNmt reprezint cel mai laborios tip de investigaie ADN ce se efectueaz n prezent n scop de
identificare. Genotiparea mitocondrial se realizeaz la ora actual n laboratoarele ADN cu experien i
echipamente performante, iar numrul acestor laboratoare este nc redus. Spre exemplu, n S.U.A., doar 7
laboratoare sunt acreditate s efectueze n prezent acest tip de analize, din care doar unul singur aparine FBI.
ntre 1996-2001, numrul specialitilor n analize mitocondriale din acest laborator de referin al FBI a crescut
de la 4 la 12. Statisticile arat c rata comunicrii unor rezultate finale pentru tipri de ADNmt este de
aproximativ 1-2 cazuri/analist/lun (ntre 1996-1999 acest laborator al FBI a raportat aproximativ 150 de cazuri
de genotipri ADNmt).

Motivele acestui randament sczut de lucru sunt:

1)
probele biologice degradate sau n cantiti mici, necesitnd numeroase reacii PCR i adaptarea
permanent a protocoalelor de lucru, astfel nct s se obin suficient ADNmt pentru etapa de secveniere;

2) procedurile exhaustive necesare controlului contaminrilor;

3)
analiza prin secveniere automat a ambelor catene de ADNmt (H i L) i n amndou
regiunile hipervariabile.

Comisia ADN a International Society for Forensic Genetics recomand n recentul Guidelines for
mitochondrial DNA typing (2000) ca metodologia de lucru de rutin s cuprind, acolo unde este desigur
posibil, efectuarea secvenierii ADNmt n duplicat, precum i secvenierea obligatorie a ambelor catene ale
ADNmt (H i L), n scopul reducerii ambiguitilor de interpretare a secvenelor.
Avantajele i dezavantajele tiprilor mitocondriale

ADNmt, n general, nu poate servi ca unic element de identificare genetic al unei persoane, ntruct
indivizi aparent nenrudii pot avea acelai ADNmt printr-o descenden comun pe linie matern, situat
undeva n trecut, uneori la distan de cteva generaii. n contrast cu profilul mitocondrial, profilul ADN
nuclear are o putere discriminatorie foarte mare, astfel nct se poate aprecia c genotipul nuclear al unei
persoane este unic prin raportare la o populaie de ordinul milioanelor. Dac, totui, : analiza profilului ADNmt
Genotiparea ADNmt n genetica judiciar rmne o investigaie relativ limitat, rezervat numai cazurilor unde tiparea
ADNnc eueaz.

nu este att de discriminatorie, ea poate reprezenta unica soluie pentru cazurile unde genotiparea nuclear este
practic imposibil. n acest sens, analiza ADNmt i-a ctigat deja un loc important n aria identificrilor
medico-legale.

Candidate pentru mitotipare sunt urmtoarele tipuri de probe biologice:

1) firele de pr fr folicul pilos,

2) oasele i dinii degradai prin carbonizare, mediu acid, umiditate, nhumare prelungit,

3) alte tipuri de probe pentru care a euat tiparea cu markeri nucleari.

Analiza ADNmt este extrem de util pentru identificrile unde nu este posibil obinerea unor probe
biologice de referin pentru genotipare; n aceste situaii, orice rud de pe linia matern poate servi ca
element de referin n investigaie, deoarece toi motenesc aceeai secven a ADNmt. Din cauza
recombinrilor meiotice i a ereditii biparentale (diploide) a ADNnc, reconstituirea unui profil genetic
nuclear, pornind chiar de la rudele de gradul I ale unei persoane disprute sau decedate, nu este deloc o
misiune simpl, nici pentru cele mai performante laboratoare i experimentai specialiti, de aceea se prefer
n aceste situaii lucrul pe ADNmt.

Genotiparea ADNmt izolat din fire de pr. Cea mai mare parte a firelor de pr prelevate de la locul
unei crime sunt fire de pr czute n mod natural, care nu conin bulb pilos i, implicit, nici material genetic
nuclear. Singurul material genetic care se gsete n firul de pr fr bulb este cel mitocondrial. Analiza
ADNmt prin secveniere reprezint singura metod prin care se poate identifica donorul unui fir de pr fr
bulb.

TABELUL 7.11 I

Scalpul uman conine njur de 100 000-150 000 de foliculi piloi, aflai ntr-unul din cele trei stadii de
dezvoltare (tabelul 7.II, dup Linch i colab. 1998, Petraco i colab. 1988).
Descrierea stadiului de dezvoltare

Stadiile de dezvoltare ale

Anagen

- faza de cretere activ a prului capilar, cu durat

Proporia n care se regsesc foliculii piloi

80%

cuprins ntre 2 pn la 8 ani

Catagen
Telogen

faza de ncetare a activitii foliculului pilos

- faza de repaus, cnd firele de pr cad n mod natural

1%
20%

Rata de succes a genotiprilor. n prezent, nu se cunosc foarte exact factorii care influeneaz direct
rata succesului genotiprilor ADNmt n cazul firelor de pr. Rata de succes n genotiparea ADNmt din firele
de pr capilare este prezumat a fi cea mai mare pentru firele de pr aflate n faza de cretere (anagen). Dac
reuita genotiprii ar depinde n principal de stadiul de dezvoltare al firelor de pr, ansa obinerii unui profil
ADNmt ar trebui s fie mai mic dect media raportat n practic - 75% pentru fire de pr aflate n telogen
(aceste fire de pr sunt cele mai comune probe biologice prelevate n cazurile judiciare). S-a observat c
reuita genotiprii ADNmt este ceva mai ridicat pentru firele de pr provenind de la indivizii de sex masculin
(79% vs 71% - fire de pr provenind de la persoane de sex feminin). Pentru firele de pr de culoare nchis i
groase exist o uoar tendin de cretere a anselor genotiprilor comparativ cu firele de pr deschise la
culoare i subiri. Tratamentele cosmetice (colorani, ampon) nu par s influeneze genotiprile ADNmt, rata
medie a succesului fiind de 67-71% la analiza firelor de pr capilare prezentnd diferite tratamente cosmetice.

Studiile au evideniat faptul c localizarea specific a firelor de pr pare a influena direct rata
succesului: genotiparea ADNmt este raportat n procent de 75% pentru firele de pr capilare, urmat de 66%
pentru firele de pr pubian i 52% pentru firele de pr axilar.

Problema contaminanilor. Se cunoate faptul c probele de pr sunt contaminate n proporie de 85%

cu alte materiale biologice avnd cele mai diferite origini: saliv, snge etc. n cazurile n care probele de pr
nu sunt curate extrem de riguros de contaminani n etapele ce preced extracia ADN, sensibilitatea
deosebit a reaciei PCR permite coamplificarea contaminanilor alturi de ADN propriu firului de pr.
Coamplificarea contaminanilor poate duce la obinerea de rezultate eronate, n principalla excluderi eronate
ale suspecilor. Avndu-se n vedere aceast problem, probele judiciare reprezentate de fire de pr, cu sau fr
bulb, trebuie prelucrate cu mult rigoare. Procedeele de curare aa-zise clasice constau n principiu n
incubarea firelor de pr peste noapte n soluie salin, urmat a doua zi de mai multe splri cu alcool absolut.

Omogenitate versus heterogenitate la nivelul ADNmt. ntrebarea, la care nu exist pn n prezent un

rspuns clar, este dac apar variaii intra-individuale ntre secvenele de ADNmt provenite din fire de pr i
alte tipuri de probe biologice aparinnd aceluiai individ, i n ce proporie apar aceste variaii intraindividuale. Se argumenteaz c rata nalt a diviziunii specific celulelor foliculului pilos favorizeaz apariia
de mutaii n firul de pr n timpul vieii unui individ. Aceast ipotez ar putea explica incidena crescut a
heteroplasmiei raportat pentru firele de pr comparativ cu alte esuturi. Nu trebuie nici un moment pierdut
din vedere faptul c, n cazul firelor de pr, unele secvene de ADNmt etichetate heteroplasmice pot
reprezenta n realitate doar consecina unei banale contaminri. Optimizarea metodelor de secveniere i
procesarea simultan a lanurilor H i L mitocondriale ajut analitii s disceam aspectele menionate
anterior.

Deleiile ADNmt i corelarea lor cu vrsta. Deleiile genomului mitocondrial sunt detectate frecvent
la indivizii aduli. Ele apar mai frecvent n celulele bine difereniate cu rat mitotic joas, cum ar fi celulele
creierului. Deleiile cresc cantitativ i se acumuleaz cu vrsta, putnd servi la determinarea vrstei unui
individ. n prezent, studiile ncearc s coreleze fenomenul cu naintarea n vrst. Cea mai comun deleie a
ADNmt, observat pe preparte biopsice i autopsice, a fost cea raportat n poziia 4977, ea fiind un marker
util pentru mbtrnirea fiziologic. Astfel, un ADNmt prezentnd o deleie n poziia 4977 poate fi sugestiv
pentru un individ avnd vrsta biologic de peste 50 de ani. n afar de factorul vrst, deleia n poziia 4977
a mai fost corelat cu maladii degenerative de tipul parkinsonului, cirozelor hepatice sau cardiomiopatiilor.
Un factor exogen ce pare a influena proporia deleiilor ADNmt este expunerea la soare: proporia deleiilor
din celulele pielii expuse la soare este de 10 ori mai mare dect n ariile neexpuse.
Standardele de calitate ale analizei i bazele de date ADNmt

Bazele de date cu ADNmt uman sunt nc la nceputul constituirii lor, dar cantitatea de informaii care
se acumuleaz pe zi ce trece este impresionant. Ceea ce lipsete acestor informaii este un sistem unitar de
verificare a corectitudinii informaiilor la intrarea lor n bazele de date. Se cunoate c informaiile despre

secvenele de ADN uman introduse n bazele de date genomice sunt uneori eronate i c aceste erori sunt
destul de semnificative - apreciate la aproximativ 4% din totalul informaiilor unei baze de date. Pentru un
domeniu att de sensibil ca cel al geneticii judiciare, rezult clar necesitatea impunerii unor standarde de
calitate pe plan internaional care s caracterizeze cu acuratee profilele ADN n identificrile de persoane.
ADN mitocondrial uman, provenit din variate surse, a fost secveniat pe o scar larg n ultimii ani, iar
rezultatele au fost introduse n baze de date ce pot fi liber accesate pe internet.

Comunitatea tiinific consider la ora actual ca fiind imperios necesar stabilirea unui material
standard de referin pentru ADNmt de origine uman, menit s asigure controlul calitii rezultatelor.

78
GENETICA
JUDICIAR
Important
de subliniat pentru domeniul identificrilor
judiciare
este c, n prezent, datorit imensiunilor nc
reduse ale bazelor de date ADNmt n comparaie cu bazele de date ADNnc, pentru profilele mitocondriale nu se
fac aprecieri de ordin statistic. Prin convenie, expertul care face analiza Unei secvene ADNmt raporteaz de
cte ori aceast secven se regsete ntr-o baz de date, sugernd astfel frecvena relativ a respectivului profil
mitocondrial fa de secvenele cuprinse n respectiva baz de date. Specialitii din domeniu apreciaz c
tiprile de ADNmt efectuate pn n prezent nu sunt suficiente pentru a descrie toate variantele din populaia
uman; n fiecare zi, aproape 2/3 din noilemitotipuri raportate prezint secvene mitocondriale nemaintlnite.
La cele mai multe populaii din I ntreaga lume, cu excepia unor populaii restrnse i izolate ce prezint mai
mult interes antropologic, majoritatea genotipurilor mitocondriale au frecvene mai mici de 1% n bazele de
date. Cu excepia cazurilor n care avem de-a face cu un mitotip comun, este posibil ca ntr-o populaie s se
fac o excludere cu un procent ce depete 99% pentru un profil mitocondrial dat.

Se cunoate c incidena anumitor profle ADNmt poate fi pus uneori n legtur cu rasa sau un anumit
tip de populaie. De exemplu, n populaia alb caucazian, se descrie un mitotip ntlnit cu o frecven de
aproximativ 4% i care este extrem de rar pentru celelalte rase. Acest mitotip comun are o frecven relativ
asemntoare n mai multe din populaiile caucaziene din Europa: 3% austrieci, 4% britanici, 3,9% caucazieni
nord-americani. Aceast nrudire a polimorfismelor secvenelor de ADNmt poate sugera existena unei secvene
de ADNmt de tip european, provenit dintr-un strmo ancestral I matern comun, Eva european.
Date generale despre genotiprile mitocondriale

ADN mitocondrial (ADNmt) reprezint un valoros material genetic pentru genotipri n domeniul I
medicinei legale i antropologiei genetice. Principalele motive care au stat la baza transformrii testelor ADNmt
n instrumente de lucru ale geneticii judiciare pot fi enumerate succint:

1. marea variabilitate a secvenelor celor dou regiuni non-codante ale ADNmt, polimorfism datorat I unei
rate nalte a mutaiilor;

2. prezena ADNmt ntr-un numr mare de copii per celul comparativ cu genomul nuclear, lucru I ce face
posibil furnizarea de rezultate utile acolo unde analiza ADN nuclear eueaz (fire de pr fr I bulb,
schelet vechi, esuturi putrefiate);

3. trasmiterea ereditar haploid, exclusiv pe linie matern - model de transmitere ce permite compararea
i identificarea membrilor unei familii care au o descenden matern comun;

4. posibilitatea analizrii ADNmt prin amplificare PCR i secveniere automat direct.

n acest capitol s-au prezentat particularitile structurale i funcionale ale genomului mitocondrial,

78
GENETICA mitocondrial
JUDICIAR
fenomenele
de heteroplasmie, tehnicile de genotipare
n scop de identificare, interpretarea
rezultatelor n identificri, statistica referitoare la genotiprile ADNmt i rolul bazelor de date populaionale
ADNmt.

Aria genotiprilor mitocondriale

Prima testare ADNmt care a servit ca prob ntr-o instan pentru condamnarea unui criminal a fost
prezentat n Statele Unite, n septembrie 1996 - testele au demonstrat c profilul ADNmt al firelor de pr ale
suspectului corespundea perfect cu profilul firelor de pr gsite pe corpul victimei. De atunci, numrul
proceselor criminale i civile n care profilul mitocondrial reprezint un element probatoriu este n continu
cretere n ntreaga lume. Pretutindeni n lume crete i rolul jucat de ADNmt n identificarea victimelor
rzboaielor i genocidelor din gropile comune.

Probleme noi de identificare va ridica, desigur, aplicarea pe scar larg a tehnologiilor de reproducere
asistat; controversata tehnic de transfer de ovoplasm de la ovocitele donorului n ovocite umane la care se
pare c lipsete un factor citoplasmatic a condus la obinerea deja a unui numr de sarcini corespunztoare
duse la termen cu succes. n aceste cazuri, embrionul, amniocitele, placenta fetal i sngele acestor sarcini au
indicat o heteroplasmie a ADNmt rezultat de la donor i gazd.
Aceste lucruri trebuie avute n vedere pentru viitor de ctre analitii din domeniul identificrilor genetice. De
altfel, lezarea mitocondrial are impact asupra unei varieti de funcii ale celulei, de la producerea de energie,
la semnalarea intra- i intercelular, ceea ce poate cauza disfuncii tisulare, explicnd astfel, spre exemplu,
diferite afeciuni cardio-vasculare.
Polimorfismul unui singur nucleotid

Variaia de secven dintre indivizi ntr-un anume punct al genomului se exprim adesea ca polimorfismul
unui singur nucleotid (SNP). Acest polimorfism frecvent n genomul uman a fost utilizat n prognoza genetic a
bolilor. Exist probabil peste un milion de astfel de polimorfisme la un individ. De asemenea, este probabil ca
analiza SNP s fac parte n viitor din criteriile de difereniere individual. Deja au fost dezvoltate tehnologiile
de difereniere individual. Se cunoate deja un microcip ce detecteaz SNP, unde mai mult de 1 000 de SNP au
fost examinai simultan.

:
I

Interesul SNP n genetica judiciar are mai multe explicaii:

nu are multe artefacte, ceea ce face ca acest marker s aib potenialul de a discrimina
mai uor n cazul mixturilor sau al unor probe unice;

are un potenial de multiplicare mai mare ca al STR;

ir

78 - procesarea probei este mai uor automatizat,

GENETICA
JUDICIAR
ntruct
nu impune o separare bazat pe dimensiune;

- produsele PCR rezultate din SNP pot fi mai mici dect 100 de perechi de baze, ceea ce nseamn c
aceti markeri ar putea fi capabili s reziste la probe degradate de ADN mai bine dect STR, care are produi de
cte 300-400 de perechi de baze.

Totui, prin faptul c fiecare locus SNP posed numai dou alele posibile, sunt necesari mai muli markeri
pentru obinerea unei mari caliti discriminatorii. Analiza computerizat a artat o medie de 25- 45 de loci SNP
necesari pentru a produce echivalentul unei probabiliti ntmpltoare de potrivire ca al unui set de 13 loci
STR. Numrul necesar de SNP poate varia, deoarece, n practic, diferii loci SNP au o frecven alelic
diferit.

Datorit ratei sale mutaionale mici, el este folosit mai ales n studii populaionale. Cu toate acestea, n
viitor este posibil de detectat originea etnic a unui criminal prin analiza SNP dintr-un grup restrns, n plus, au
fost identificai un numr de markeri SNP ai cromozomului Y, ceea ce dovedete eventuala utilitate a markerilor
SNP n combinaia cu cei Y STR n genetica judiciar.
Polimorfismele de inserie ALU

Au servit n investigaiile populaionale. Elemente ALU (secvene/familie secvene scurte de 300 pb de

ADN repetitiv, dispersate n genom, recunoscute i clivate de enzima de restricie ALU) au fost gsite n
aproape un milion de copii n genomul haploid (5-10% din genomul uman) i pot fi gsite flancnd genele sau
nmnuncheate cu alte secvene repetitive.

Inseria unui element ALU ntr-un anume locus poate fi considerat un eveniment unic, dar, odat inserat,
este un marker genetic stabil i nu poate fi ceva de neglijat.

ALU este folosit ca potenial genetic informativ n studii populaionale (etnice, geografice).

Identificarea cu extrem de mici cantiti de ADN n probele recoltate de la locul faptei reprezint azi.o
ncercare a multor laboratoare de genetic judiciar dotate cu nalt tehnologie. Spre exemplu, se ncearc
obinerea de identificri pomindu-se de la o singur celul bucal sau de la celule rmase pe obiecte atinse de
degete. La locul crimei mai pot fi gsite insecte ce au putut fi n contact cu persoane suspecte. Spre exemplu,
ADN uman a putut fi extras din produse biologice (snge) consumate de unele insecte. De asemenea, unele
animale domestice (pisici, cini) pot fi suport de produse biologice umane (pr, snge). Au fost raportate cazuri
n care a fost detectat ADN uman i pe plante.

CAPITOLUL 8

78

GENETICA JUDICIAR

Interpretarea probabilistic a rezultatelor testelor ADN

n cazurile penale i civile

Pentru juriti, mai mult dect pentru medici, nelegerea unei tehnologii complexe cum este cea a testelor
genetice reprezint o operaie dificil. Dar, la aceast prim etap se adaug i dificulti suplimentare, atunci
cnd expertul prezint instanei concluziile unei investigaii ADN exprimate n termeni de probabilitate.

Exprimarea rezultatelor unei analize ADN n termeni biostatistici este o problem teoretic i practic de
importan vital, adesea ignorat sau tratat superficial. O afirmaie bazat pe probabilitate este, prin natura ei,
o afirmaie de cunoatere parial, de aceea este eronat ca aceast cunoatere parial s fie preluat ca atare i
transformat ntr-un verdict de cert vinovie, echivalent cu condamnarea unei persoane.

n materie de analiz a probelor biologice n scop de identificare (agresiuni sexuale, crime, paterniti),
legtura dintre un suspect i victim sau ntre un copil i prezumtivul tat nu poate fi fcut fr a se recurge la
date i calcule biostatistice. Exist un consens general n sistemele juridice din ntreaga lume asupra faptului c
o prob tiinific de tipul unui test ADN trebuie prezentat n instan de o manier probabilistic. Expertul
tiinific prelucreaz i exprim probabilistic rezultatele unei investigaii ADN pentru a evidenia fora
probant a respectivei analize. n sensul strict juridic, termenul de for probant a unui mijloc de prob
desemneaz valoarea acelei probe ca element de convingere. Termenul de for probant are n acest context
sensul de eficacitate, evideniind pertinena analizei tiinifice - aptitudinea acesteia de a demonstra ceva
obiectiv.

nelegerea probabilitilor i a evalurilor statistice ntmpin de cele mai multe ori serioase dificulti n
instan. Legile probabilistice care permit evaluarea i combinarea evenimentelor incerte, necunoscute, cu cele
certe, cunoscute, sunt adeseori contrare intuiiei unei persoane, fie ea de formaie juridic sau medical. n
general, n faa unui fapt cu grad de incertitudine, persoanele emit judeci pur intuitive, ns intuiia nu este
ntotdeauna un substitut al legilor probabilitii.

Evaluarea probelor tiinifice de tipul testelor ADN poate fi fcut uneori eronat, fie neintenionat,
datorit unui mod prea simplist de abordare, fie intenionat, datorit unui mod prea sofisticat de prelucrare i
argumentare, elaborat de aceast manier pentru a permite n final manipularea concluziilor. Manipularea
rezultatelor unui test ADN poate veni deopotriv din partea acuzrii sau a aprrii. Fr cunotine solide n
materie de probabiliti aplicate la identificrile de persoane, este o sarcin extrem de dificil pentru un
judector s neleag care din argumentele prezentate n instan sunt corecte i care sunt concepute eronat. De
aceea, atunci cnd expertul tiinific are sarcina s fac o interpretare biostatistic, este I obligatoriu ca el s
apeleze la un model de analiz care s garanteze gestiunea corect a informaiilor. I
Evaluarea rezultatelor unei investigaii ADN

1. Scopul principal al unei analize ADN este de a testa ipoteza prin care un anume individ este sursa I
unei probe biologice judiciare prelevate de ctre investigatorii criminaliti. Expertul tiinific are sarcina I s
verifice cu ajutorul unei baterii de teste genetice dac exist o asociere ntre respectiva prob biologic I
judiciar i proba de referin aparinnd individului catalogat de ctre investigator drept suspect. Trei I
concluzii posibile pot fi formulate n urma efecturii unei investigaii ADN:Profilele genetice sunt diferite, n
consecin provin din surse biologice diferite. n acest caz se formuleaz o concluzie de excludere. Acest tip
de concluzie se spune c are un caracter absolut - deci nu necesit analize sau discuii suplimentare.

2. Profilele genetice pot proveni din aceeai surs biologic, ntruct prezint similariti sau
concordane sau potriviri (termenul engl. = match) la nivelul tuturor markerilor investigai. n acest caz se
formuleaz o concluzie de probabilitate. Concluzia de probabilitate nu are un caracter absolut i, de aceea,
pentru formularea ei este necesar prelucrarea biostatistic a rezultatelor analizelor ADN.
Dou profile ADN pot prezenta similariti n urmtoarele circumstane:
Similaritatea este real - probele biologice investigate provin din aceeai surs (acelai individ).
Similaritatea este o coinciden - proba judiciar provine de la o alt surs dect cea real, ns, ntmpltor, cele dou
surse prezint aceleai caracteristici genetice la nivelul markerilor ADN investigai. Drept consecin, rezult o incriminare eronat
a unui inocent.
Similaritatea este accidental (eronat) - proba judiciar provine n mod real de la o alt surs dect cea considerat

suspect, ns, datorit unor erori de prelevare/testare/etc., se evideniaz caracteristici genetice similare ntre proba judiciar i
sursa suspect. Consecina o reprezint o incriminare eronat a suspectului.

3. Profilele genetice obinute n urma analizelor nu pot servi la formularea unor concluzii. Prin
urmare, analiza este catalogat ca fiind neconcludent (exemplu: profile incomplete datorit gradului avansat
de degradare a materialului biologic, profile relevnd mixturi de materiale biologice datorit contaminrilor
etc.). Rezultatele neconcludente nu au un caracter absolut, irevocabil. De cele mai multe ori ele necesit
repetarea investigaiei genetice pe aceleai probe biologice ori pe alte probe, schimbnd protocoalele i
tehnicile de lucru, n ncercarea de a obine rezultate concludente. Valoarea unui rezultat neconcludent n
instan este nul, dar, pentru investigatorii criminaliti, el poate furniza uneori o serie de indicii valoroase n
sensul orientrii investigaiei penale.
Controverse legate de calculul probabilitilor

Dac ntre dou profile ADN exist similaritate sau coresponden perfect (match - engl.), aceast
potrivire trebuie exprimat prin intermediul unui calcul de probabilitate. Calculul de probabilitate se poate
face cu ajutorul probabilitilor necondiionate sau condiionate. Probabilitatea necondiionat se exprim
prin: Probabilitatea ca un anume individ s aib un anume profil ADN, iar cea condiionat prin:
Probabilitatea ca un anume individ s aib acelai profil ADN cu al suspectului.

Diferena dintre valorile obinute pentru dou astfel de probabiliti poate f extrem de mare: de
exemplu, pentru un profil ADN calculat cu o probabilitate necondiionat, valoarea poate fi de 1/10 000 000,

n timp ce, calculat cu o probabilitate condiionat, valoarea poate f de 1/100 pentru un frate al suspectului,
sau de 1/10 000 pentru o alt persoan nenrudit biologic cu suspectul, dar care face parte din acelai grup
populaional.
Valoarea predictiv a testelor genetice cu ajutorul teoremei lui Bayes

Orice test medical are o valoare predictiv care poate fi formulat n termeni de probabilitate cu ajutorul
teoremei lui Bayes. Teorema este o propoziie matematic formulat n secolul al XVIII-lea de clugrul
britanic Thomas Bayes i se refer la probabilitile de tip condiionat.

Teoria probabilitilor lui Bayes a fost i este n mod constant propus ca ghid pentru interpretarea
elementelor probatorii. Dei nc nu unanim acceptat n comunitatea juridic internaional datorit
complexitii interaciunilor i variabilitii elementelor de prob ce intr n componena dosarului uneicauze
(indici tehnici, mrturii etc.), teorema bayesian este pn n prezent principalul mijloc statistic care permite
stabilirea unor legturi de cauzalitate, att n cazurile penale, ct i n cele civile. Utilizarea modelului
probabilistic Bayes n identificrile medico-legale nu este o noutate adus de testele ADN, metoda fiind
ntrebuinat pentru formularea concluziilor i n cazul analizelor grupelor de snge ABO. Cu toate acestea,
persist o antipatie general printre juriti i chiar printre experii din tiinele judiciare vis--vis de
abordarea bayesian. Faptul n sine nu are un temei concret, ci este consecina lipsei de familiaritate cu
metoda n cauz.
Regula produsului

Concluziile testelor ADN sunt prezentate n instan sub forma unui raport de probabilitate, iar I
calculul acestui parametru este de obicei realizat utiliznd o baz de date de referin cu frecvena I alelelor
detectate i regula produsului.

Regula produsului servete la calcularea frecvenei genotipurilor atunci cnd se iau ca referin I
populaii aflate n echilibru, de tip Hardy-Weinberg. n astfel de populaii, toate alelele care definesc I
genotipul unui individ pot fi tratate din punct de vedere statistic ca fiind independente, iar frecvenele I alelelor
pot fi multiplicate. Pentru anumite situaii particulare, cum sunt cele reprezentate de substructurile I
populaionale n care diversitatea genetic este mult limitat, prezumia de independen a alelelor i I locilor
investigai nu poate fi luat n consideraie. Prin urmare, specialitii n genetica populaiilor apreciaz c nici
regula produsului nu poate fi validat pentru aceste situaii particulare.
Regula multiplicrii probabilitilor i teorema lui Bayes
Teorema lui Bayes presupune formularea unor ipoteze despre ansa ca dou evenimente s se \
combine, pentru ca apoi s se calculeze probabilitatea producerii lor simultane.
Pentru oricare dou evenimente A i B, probabilitatea ca ele s aib loc n acelai timp, adic probabilitatea ca
att A ct i B s se produc simultan, este reprezentat de produsul probabilitii lui A n funcie de B,
multiplicat cu probabilitatea lui B:
Pr(A i B) = Pr(A/B)
Pr(B)

Formula este cunoscut sub numele de regula multiplicrii (produsului) probabilitilor. ntruct A i
B sunt simultane, ordinea n care survin evenimentele nu conteaz i atunci relaia se poate scrie i sub aceast
form: Pr(A i B) = Pr(B i A).

Aplicnd regula multiplicrii (produsului) probabilitilor la aceast relaie, rezult:

Pr(A/B) Pr(B) = Pr(B/A) Pr(A),

care conduce n final la
:

A) =

Pr(B/

Pr(A/B) Pr (B)
Pr(A)

formul denumit teorema lui Bayes.

Probabilitatea nu poate fi calculat dac evenimentul A nu are loc (pentru A = 0)
.

Probabilitatea condiionat de ipoteze

Metoda bayesian permite estimarea incertitudinii referitoare la existena (H) sau inexistena (nH) unui
eveniment n baza unei informaii nou aprute, E (evidence - engl.). E poate fi reprezentat de o informaie
tiinific obinut de expert n urma investigaiei de laborator (serologice, genetice etc.).

Informaia tiinific E se combin cu supoziiile anterioare unui eveniment (ipoteze sau probabiliti a
priori), pentru a se obine probabilitile privind existena (sau non-existena) respectivului eveniment
(probabiliti a posteriori).

Probabilitatea a priori este reprezentat de raportul ntre dou ipoteze de anterioritate:

Pr(H)/Pr(nH),

unde H este ipoteza ce reflect prezumia de vinovie (sau de paternitate), cunoscnd pe E, i nH este
ipoteza ce reflect prezumia de nevinovie (sau de non-patemitate), cunoscnd pe E (nH simbolizeaz
inversul ipotezei H, i anume c ipoteza H este fals).

Probabilitile a priori H sau nH nu pot fi cuantificate de ctre expert, deoarece cel care face investigaia
tiinific nu cunoate nimic despre eveniment, ci numai consecinele evenimentului, reflectate n E. Uneori,
experii adopt n mod arbitrar o poziie neutr referitoare la ipotezele de anterioritate, atribuind celor dou
ipoteze de anterioritate anse egale (exemplu: cazul testelor de paternitate, unde H = nH = 50%).

Probabilitatea a posteriori este reprezentat de raportul ntre dou ipoteze de posterioritate, H/E i
nH/E, reprezint de fapt ipotezele H i nH care s-au produs i au avut ca rezultat informaia E:
Pr(H/E)/Pr(nH/E)
n termeni matematici, evaluarea a dou ipoteze care se exclud reciproc, n cazul de fa H i nH, n funcie
de aceeai informaie tiinific (E), se poate realiza printr-un raport de probabilitate condiionat likelihood ratio (LR*):
Cuvntul likelihood este considerat n limba englez sinonim cu probability (probabilitate), dei, din punct de vedere al tiinelor

E) =

LR( /H)
/nH)

Pr(E
Pr(E

matematice, termenul likelihood presupune existena unei condiionri a evenimentului probabil, pe cnd termenul probability face
referire la probabilitile necondiionate. Cum limba romn nu posed un echivalent lingvistic al acestui cuvnt, traducerea cea mai
exact a lui likelihood ar fi rata probabilitii condiionate (de eveniment). Pentru simplificarea exprimrii ns se utilizeaz noiunea
de rat sau raport de probabilitate, cuvntul condiionat subnelegndu-se din context

CAPITOLUL 9
.
nlocuind n formula lui Bayes pe Pr(nH) = 1 prin urmare
:

Pr(H) (ipotezele de vinovie i nevinovie nsumate reprezint 100%,

Investigaiile genetice n
Pr (a posteriori)
Pr(H/E)

LR

Pr (a priori)

(E/H)
nH/E)

Pr(

E/nH)

Pr

Pr(H)

Pr(
---------- (teorema Bayes)

Pr(nH)

catastrofele
La 20 ianuarie 1992, aeronava
A320,mare
avnd 96de
de persoane
la bord, s-a prbuit la Mont SaincuAirbus
numr
victime
Odile, o regiune mpdurit din Munii Vosgi, la circa 30 km distan de aeroportul din Strasbourg.
Catastrofa a avut 87 de victime i 9 supravieuitori. n afara metodelor de criminalistic clasice, metodele de
identificare genetic au fost aplicate doar pentru 19 dintre victimele rmase neidentificate prin metodele
clasice de identificare (fig. 9.1).Fig. 9.1. Etapele identificrii n catastrofa aviatic de la Mont Saint-Odile i durata
investigaiilor

Catastrofele de mas sunt evenimente impresionante n primul rnd prin numrul foarte mare de
victime umane pe care le genereaz. Determinate de cauze naturale (cutremure, inundaii, alunecri de teren
etc.) sau condiionate de activitile umane (accidente feroviare, navale, aviatice, explozii n mediu industrial,
conflicte armate, acte de terorism etc.), catastrofele de mas se ntlnesc pretutindeni n lume, iar eforturile
depuse de echipele de investigatori nsrcinai cu cercetarea unor astfel de evenimente i identificarea
victimelor depesc de multe ori graniele naionale.

87 de victime de identificat
9

Identific
are morfologic
1
i odontologic
morfologic sptmn
4

{Identificare

care
ogic
v

Identifi
odontol

I Identificare
85
de
2 genetic
...12
exclusi
victime
exclusiv
5
sptmn identificate
7
sptmni

Metodologia identificrii medico-legale i criminalistice n catastrofe de mas

Prima etap const n izolarea perimetrului zonei, accesul nefiind permis dect persoanelor ce fac parte
din echipele de salvare, medici legiti i criminaliti. Se va asigura o paz sever a locului, iar cei ce ptrund
n perimetru vor fi autorizai i consemnai de cei ce rspund de aceast activitate (eful de obiectiv). Dup
executarea fotografiilor panoramice, zona se delimiteaz n ptrate (alteori radiar); aceste sectoare se
repartizeaz pe echipe mici.

Cadavrele sau fragmentele de cadavre sunt marcate cu coduri de identificare. Att cadavrele ntregi,
ct i resturile cadaverice sunt supuse cercetrii de ctre medicul legist i criminalist, completndu-se o fi
ce va cuprinde numrul de marcaj (care corespunde locului unde au fost gsite), descrierea mbrcminii i a
obiectelor personale, date de identificare. Procesul de identificare este divizat n: identificare pozitiv,
identificare prezumtiv i identificare prin excludere. Identificarea pozitiv a unei persoane este bazat pe
compararea informaiilor ante-mortem, cu informaiile culese post-mortem. Identificarea pozitiv include:
examinarea dentar, amprentele digitale i plantare i profilul ADN. n anumite circumstane particulare,
identificarea pozitiv poate fi fcut pe seama unor dovezi radiografice, cum ar fi: o configuraie particular a
sinusurilor frontale, a corpurilor vertebrale, pelvisului, dispozitive ortopedice sau dentare etc. Toate celelalte
tipuri de identificri sunt considerate identificri prezumtive: metoda vizual, antropometra, datele personale
(ras, sex, vrst, culoarea ochilor, a prului etc.), efectele personale.

La autopsie, diferitele probe biologice (snge, esut, pr) vor fi colectate pentru analiz. Cel mai
frecvent material utilizat pentru analiz este sngele sau fragmente musculare, dei orice fragment de esut
poate fi folositor, n multe cazuri avnd mare valoare recoltatul prin excoriere din mucoasa bucal (n cazul
cadavrelor ntregi).

n catastrofele n care predomin fragmente de corpuri umane, analiza ADN este esenial. Importana
acestei analize rezid n rezolvarea modului cum pot fi reunite fragmente dispersate. Acest aspect capt o
semnificaie aparte cnd ne referim la unele probleme religioase sau culturale, aspect cu care ne-am
confruntat i noi n cazul accidentului aviatic de la Baloteti.

ADN mitocondrial poate constitui o surs atunci cnd ADN nuclear este degradat, dei astfel vom
identifica numai linia matern.

Este de neles c tiparea ADN este esenial numai n cazurile cnd celelalte mijloace criminalistice
nu pot fi utilizate.

Este tiut c n catastrofele cu numr mare de victime unele resturi cadaverice nu prezint nici o
caracteristic individual. Resturi osoase sau esuturi moi nu prezint caractere ce pot fi recunoscute.

Evident c tiparea ADN nu poate fi aplicat oricrui material biologic uman descoperit la locul
catastrofei, aa cum se ntmpl n fragmentri rezultate n explozii de mare putere (spre exemplu, n actele
de terorism cu numr mare de victime). n alte cazuri, fragmentele umane pot fi supuse temperaturilor nalte
(carbonizri, incinerri), rezultnd astfel uneori chiar numai cenu.n astfel de cazuri, fragmentele aflate
ntr-un astfel de stadiu de degradare sunt, din punct de vedere tiinific, de neidentificat dac nu sunt gsite
resturi celulare viabile asupra crora s se poat aplica tehnologia ADN. n cazurile nefericite n care
fragmentele tisulare sunt mici i comune oricrui esut similar, se va proceda totui la recoltarea i
conservarea lor, cu precizarea locului de unde au fost prelevate din caroiajul teritoriului catastrofei, pentru
eventuale cercetri ulterioare.

Orice urme biologce sau suporturi ce au sau par a avea material biologic reclam msuri speciale de
prelevare, conservare i transport. Prin urme biologice se neleg snge, sperm, saliv, urin, fecale, vom,
orice esut (inclusiv os), dini etc. Precauiile privind prelevarea, conservarea i transportul sunt eseniale n
vederea eliminrii posibilitilor de contaminare ncruciat; contaminarea ncruciat poate aprea i atunci
cnd prelevrile probelor se fac cu acelai instrumentar. Aceste aspecte au aprut evidente mai ales dup
introducerea tiprii ADN n catastrofele cu numr mare de victime i capt o importan primordial i
pentru eventuale investigaii ulterioare. Trebuie inut cont c ADN mitocondrial este n mod particular
sensibil la contaminare, chiar cu cantiti extrem de mici de material strin, situaie care face ca rezultatele s
fie ndoielnice. Am insistat asupra acestor aspecte tocmai fiindc materialul biologic poate conine o mare
varietate de ageni patogeni. Despre mnuile sterile i masca ce trebuie s le poarte criminalistul am discutat
n alte pri ale lucrrii.

Certificarea decesului prin procesul de identificare a victimelor este important, ntruct se tie n toate
comunitile umane, indiferent de apartenena lor cultural sau religioas, c exist o aversiune general
pentru gropile comune. De aici i imperativul ntocmirii de certificate constatatoare ale decesului pentru
fiecare dintre victimele unei catastrofe, ca rezultat direct al proceselor de reconstituire i identificare medicolegal.

Pn n anii 1994-1995, investigaiile genetice au jucat un rol minor n identificrile victimelor n

catastrofe, ele fiind utilizate doar sporadic sau cu caracter excepional de ctre echipele de medici legiti i

criminaliti i numai n caz de eec al metodelor de identificare clasice. n 1997, Olaisen i colegii si, de la
Institutul de Medicin Legal al Universitii din Oslo, au raportat o schimbare paradigmatic a planificrii
rspunsului n catastrofele aviatice, prin utilizarea investigaiei ADN ca metod principal de lucru n
identificarea victimelor.

Principiile modeme de identificare prin investigaiile genetice permit la ora actual confirmarea
prezenei unui individ la locul dezastrului, chiar n cazul fragmentrii extreme a victimelor. Analiza ADN a
unui singur fragment de esut poate fi suficient pentru emiterea unui certificat de deces, lucru confirmat de
practica ultimilor ani. Victimele catastrofelor de mas neindentificate intr de regul sub incidena unor legi
naionale sau, dup caz, internaionale, privind persoanele disprute. Conform acestor legi, decesul unei
persoane disprute ntr-o catastrofa de mas i neidentificat este declarat prin hotrre judectoreasc dup
scurgerea intervalului de timp prevzut de actul normativ respectiv (n general n medie 7 ani).

Munca extrem de complex n procesul de identificare a victimelor n catastrofe a realizat o cotitur n

momentul introducerii investigaiilor ADN, pentru prima oar realizate, aa cum s-a artat, n anul 1992, cu
ocazia accidentului aviatic civil de la Mont Saint-Odile (Frana).
Principiile identificrilor genetice n catastrofe

Succesul identificrilor ADN depinde de existena probelor de referin, ntruct identificarea genetic
urmrete ca principiu compararea profilelor ADN obinute din rmiele umane prelevate din aria
catastrofei, cu profilele ADN de referin ale victimelor sau ale unor persoane strns nrudite biologic cu
victimele: prini, frai etc.
Profilul de referin este obinut din efectele personale ale victimei

Compararea ntre genotipuri este, n aceste cazuri, una direct, extrem de rapid i cu rezultate foarte
bune. Efectele personale (o periu de dini, un obiect vestimentar etc.) sunt utile mai ales n situaiile n care
nu se cunosc sau nu mai sunt n via rude apropiate ale unor victime, n situaiile particulare cnd ntre
victimele unei catastrofe se numr, de exemplu, doi frai sau dou surori. n accidentul aviatic al aeronavei
TWA Flight 800, petrecut n apropiere de Long Island (New York) n iulie 1996, compararea direct a
genotipurilor obinute din efectele personale a servit la identificarea cu succes a dou surori dup ce testele
ADN iniiale stabiliser c cele dou victime fetie erau copiii acelorai prezumtivi prini.
Profilul de referin rezult indirect din profilul persoanelor strns nrudite biologic cu victima

Cu ct este mai strns legtura de rudenie, cu att ansa unei identificri pozitive crete. Cea mai

strns relaie de nrudire genetic, exceptnd gemenii monozigoi, este cea dintre prini i copii: alelele din
profilul copilului, n absena unor mutaii, se regsesc n proporii perfect egale la cei doi genitori (fig. 9.2).

D3S1358 vWA

FGA

Fig. 9.2. Ilustrarea unei identificri prin analiza profilului genetic al membrilor unei prezumtive familii (dup J. Ballantyne - Suffolk
County Crime Laboratory, New York, investigatorul nsrcinat cu identificarea victimelor catastrofei aviatice TWA Flight 800 de la

Long Island - date publicate). Diagrama nfieaz electroforegramele pentru trei loci STR (D3S1358, vWA i FGA) aparinnd
unui fragment de esut uman recuperat n catastrofa aviatic TWA 800 i al prezumtivilor prini ai victimei; pe axa orizontal este
indicat mrimea alelelor (n pb), iar pe cea vertical intensitatea fluorescenei pentru alelele detectate. Pentru markerii investigai
este evident faptul c rmiele pasagerului pot aparine copilului biologic al celor doi prezumtivi prini. Raportul de
probabilitate (LR) combinat pentru cei trei markeri i pornind de la ipoteza c cei doi prini n cauz ar putea avea un copil cu
acelai profil cu al victimei a fost de 244 (0,25 x 0,5 x 0,5/0,000128) - numitorul reprezentnd frecvena genotipului victimei n
populaia general calculat pentru cei trei loci combinai).

Urmtoarea treapt de nrudire biologic important pentru o identificare indirect o reprezint fraii,
care pot avea n comun cu victima 50%, 25% sau 0% din alelele parentale.

In catastrofa aviatic de la Lockerbie (Scoia, 1988), un argument mpotriva utilizrii genotiprii a fost
acela c prelevarea de probe de referin ar reprezenta o traum suplimentar pentru rudele victimelor (J.
Gilchrist n Interpol International Criminal Police Rev. 1992). Echipele de geneticieni legiti din alte ri au
raportat tocmai contrariul celor enunate de autoritile britanice, i anume, c rudele victimelor au demonstrat
n multe situaii o mare disponibilitate de a dona snge pentru probele de referin. n catastrofa aviatic de la
Spitsbergen (Norvegia), autoritile ruse i ucrainiene au reuit s furnizeze legitilor norvegieni, n numai 14
zile, 139 de probe de referin pentru cele 141 de victime, demonstrnd c mobilizarea rudelor victimelor
poate fi de-a dreptul exemplar.
Raportul de probabilitate (LR) i gradul de nrudire

Pentru probele biologice unde se presupune c ar exista o posibil legtur de rudenie, se calculeaz
raportul de probabilitate (LR - likelihood ratio). LR estimeaz semnificaia unei nrudiri de ordin biologic,
descriind un raport ntre probabilitatea ca o presupus nrudire s fie real (rezultatul genotiprii unei probe de
esut uman evideniaz o serie de corespondene cu profilele referin ale rudelor prezumtivei victime) i
probabilitatea ca presupusa nrudire s nu fie real (rezultatele genotiprii reflect o coinciden cu totul
ntmpltoare ntre profilele unor indivizi nenrudii biologic). Numrtorul acestui raport necesit cunoaterea
frecvenei alelelor n populaia de referin pentru fiecare din locii ADN utilizai. Evident, cu ct
polimorfismul fiecrui locus este mai mare (nsemnnd alele mai numeroase i frecvene mai mici ale alelelor
respective n populaie), cu att scade i probabilitatea apariiei unor corespondene ntmpltoare ntre
profilele unor indivizi nenrudii biologic. Combinat cu alte circumstane ale incidentului (de exemplu, lista de
pasageri care informeaz asupra unui numr limitat de indivizi ca fiind posibile victime), un raport de
probabilitate LR >100 constituie un argument n favoarea unei identificri pozitive n catastrofele aviatice, n
timp ce un LR >106 echivaleaz aproape cu certitudinea unei identiti.
Tipuri de markeri ADN i metode recomandate pentru analiz

Markerii utilizai pentru genotipare sunt de tip minisatelii (VNTR) sau microsatelii (STR), iar numrul
de loci ADN necesari pentru realizarea unei identificri pozitive este variabil, fiind estimat la 4-5 markeri
VNTR i/sau 6-16 markeri STR. Minisateliii sunt o clas de markeri nu tocmai recomandai pentru
identificrile n catastrofele de mas, deoarece analiza acestora necesit: cantiti destul de mari i de bun
calitate de material genetic (ADN nedegradat, cu greutate molecular mare); n plus, prelucrarea minisateliilor

n laborator presupune un efort de ordinul sptmnilor (comparativ cu cel de ordinul zilelor, necesar
analizelor STR). Avantajul pe care l prezint minisateliii fa de microsatelii este gradul nalt de polimorfism
care i caracterizeaz: frecvena cu care o alel se ntlnete pe un locus VNTR la doi indivizi nenrudii
biologic este ntre 10 i 20%, n timp ce frecvena cu care aceleai alele se regsesc pe un set de 4 loci STR se
ridic la numai 17%. Sistemele multiplex modeme, alctuite din 12 pn la 16 markeri STR, i utilizarea pe
scar tot mai larg a analizoarelor automate, a modificat decisiv situaia n favoarea markerilor de tip STR.
Multiplexurile au avantajul c au ncorporate n ele i markerii pentru identificarea sexului: AMEL - marker
pseudo-autozomal tot de tip STR, situat pe cromozomii sexuali X i respectiv Y, n apropierea genei,
amelogeninei.

Dezastrul aviatic de la Waco-Texas, din aprilie 1993, a avut un numr de 61 de victime. Catastrofa de la Waco a fost
deosebit de distructiv datorit incendiului i exploziilor care au urmat prbuirii, alimentate de muniia aflat la bordul navei.
Recuperarea rmielor victimelor a fost mult ntrziat datorit carbonizrilor; 21 dintre victime au fost identificate prin
mijloacele clasice, iar restul de 40 au rmas s fie identificate prin investigaii ADN: amplificare genic pentru 4 loci STR
(qvadruplex PCR - HUMvWFA3, HUMTH01, HUMF13A1, HUMFES/FPS) i un PCR-sex test (AMEL). Din totalul celor 61 de
probe biologice prelucrate (multe dintre ele putrefiate sau arse) s-au obinut 50 de profile ADN complete, 6 profile pariale, 5
rezultate negative i 100% profile pentru determinarea sexului. Rezultatele genotiprilor au fost analizate dup o metod
analitic de tipul arborelui genealogic, fcnd posibil identificarea pozitiv a 26 dintre victime. Lipsa rudelor nu a permis
identificarea unui numr mai mare de victime, dei analizele genetice au furnizat profile ADN n proporie de 66-83%.

In catastrofa aviatic de la Spitsbergen, analiza unui set de 5 minisatelii caracterizai ca fiind extrem de
polimorfi a servit la confirmarea identificrilor obinute prin genotiparea STR i a ridicatsemnificativ valorile
LR. Datorit temperaturilor sczute (de sub 0C) i recuperrii rapide a rmielor, probele de la Spitsbergen
nu au fost degradate, autorii raportnd o rat de succes de 100% n genotiparea minisateliilor. ns nu n toate
catastrofele aviatice lucrurile se ntmpl la fel: spre exemplu, n incidentul aviatic de la Waco, cele mai multe
rmie recuperate prezentau grade avansate de combustie, iar n catastrofa TWA Flight 800 probele au fost
reprezentate de esuturi degradate i scheletizate ca urmare a submersiei prelungite n ocean. Pentru incidentele
de acest fel, analiza minisateliilor nu a reprezentat o opiune realist. Chiar i rata de succes a genotiprilor
markerilor STR a fost destul de sczut: 66-83% pentru cazurile de la Waco i 74% pentru TWA Flight 800.

Resursele tehnice i financiare alocate investigaiilor genetice n catastrofele de mas i

randamentul acestor analize

Tehnologia identificrilor ADN a evoluat extrem de mult n ultimii ani, ns, n ciuda performanelor
sale actuale, este nc o tehnologie costisitoare, mare consumatoare de timp i efort din partea specialitilor. Se
pune ntrebarea ct timp i ce resurse materiale trebuie alocate pentru acest tip de investigaii, tiind c, n
accidentele aviatice cu fragmentare mare sau combustia rmielor, rezultatele genotiprilor sunt adeseori i
ele neconcludente sau servesc doar la identificarea unui numr mic de victime. Dou cazuri n care s-au
efectuat puine investigaii genetice sau nu s-a fcut deloc apel la ele au fost recentele catastrofe aviatice

Pittsburgh USAir i Florida Everglades ValueJet, ambele soldate cu masive fragmentri i combustii.

Orict de performante ar fi la ora actual analizele ADN, ele nu pot egala nc, sub raportul economiei
de timp i al resurselor financiare alocate, metodele odontologice. Dintre toate metodele clasice de identificare,
identificarea odontologic este singura care mai pstreaz n prezent aceste avantaje, dar numai n condiiile
existenei unor evidene stomatologice ante-mortem. n Statele Unite i Europa de Vest, interesul pentru
alctuirea unor evidene stomatologice la nivel naional s-a manifestat n mod deosebit dup anii 70. Dac n
dezastrul de la Maryland din 1963 au fost identificate numai 12% dintre victime datorit paucitii
informaiilor stomatologice ante-mortem, dup anii 80, situaia s-a schimbat:

- n 1985, n accidentul aviatic Galaxy Flight 203 din Reno-Nevada, 59 de identificri dentare au fost
realizate n 2 ore i nc 7 a doua zi, cnd au sosit date suplimentare cu evidenele stomatologice ale
victimelor,

- n accidentul aviatic de la Mont Saint-Odile, 59 din cele 87 dintre victime au fost identificate pe
seama examenelor odontologice i morfologice.

Pentru situaiile n care evidenele stomatologice ale victimelor sunt incomplete, nu exist deloc (cazul
particular al copiilor foarte mici) sau obinerea acestora este extrem de anevoioas (de exemplu, n catastrofele
aviatice n care victimele sunt ceteni ai mai multor ri), investigaiile ADN rmn pilonul de baz al
procesului de identificare. De asemenea, n cazurile n care rmiele recuperate nu conin structuri dentare,
operaiile de reasociere a rmielor cad exclusiv n sarcina testelor genetice.
Perspectiva identificrilor genetice n catastrofele de mas

Pentru ca investigaiile genetice s fie adoptate ca metode de lucru de rutin n procesul de identificare n
diferite tipuri de catastrofe, va trebui ca randamentul analizelor s creasc n paralel cu scderea costului
tehnologiilor ADN. Poate c, n urmtorii ani, tehnologiile bazate pe microsisteme electromecanice (MEMS)
sau bio-chipuri ADN vor permite efectuarea pe scar larg de testri in situ, astfel nct genotiprile ADN s
nlocuiasc metodele clasice de identificare. Cert este c testele ADN ctig tot mai mult teren i tind s
devin modalitatea principal de lucru n arsenalul investigaiilor de identificare din catastrofele de mas. Din
aceast perspectiv, rspunsul i componena echipelor de intervenie n caz de catastrofe au fost deja revizuite
n multe ri ale lumii. Experii n genetic judiciar sunt n aceste ri o prezen atestat oficial, uneori cu
atribuii de lider n cadrul echipei multidisciplinare de investigatori. CAPITOLUL 10

Standardele de analiz n investigaiile genetice

Experii n domeniu sunt unanim de acord c testele ADN au un potenial informativ incomparabil mai
mare fa de cele serologice clasice, dar numai atunci cnd sunt efectuate i interpretate corect. Odat cu
internaionalizarea ariilor testrilor genetice, a aprut i necesitatea stringent a formulrii unor recomandri la
nivel internaional, care s reglementeze standardele de analiz ADN n cazurile judiciare sau de filiaie.

Acreditarea calitii unui laborator de tipare ADN este dovedit dac tehnologiile sunt realizate de ctre
un personal calificat, numai n acest mod rezultatele investigaiilor putnd fi considerate valabile.

Validarea acelorai metode implic reproductibilitatea celorlalte rezultate de ctre diferite laboratoare.
Asigurarea calitii rezultatelor tiprii ADN presupune, n afara personalului calificat, aceleai resurse de
documentare, controlul calitii reactivilor i echipamentului, controlul tehnic periodic al laboratoarelor i al
rezultatelor analizelor.

Chiar dac iniial calitatea rezultatelor era evaluat n raport cu experiena laboratorului n aceast
materie, astzi, majoritatea laboratoarelor de tipare ADN se raporteaz la aa-numitele standarde care privesc
obligativitatea de a recurge la metode de lucru i tehnologii unitare, evident rapid adaptabile la noile
descoperiri n domeniul biologiei moleculare.

Aadar, acreditarea se obine atunci cnd se poate demonstra respectarea unor standarde de nalt
calitate verificate i verificabile, pe baza crora au putut fi obinute rezultate fiabile.

Orice laborator de tipare ADN trebuie s respecte aceste standarde, prin aceasta obinndu-se
competena, ceea ce presupune, n acelai timp, o colaborare ntre laboratoare de acelai profil.

Standardele trebuie s aib n vedere att sntatea public, ct i drepturile omului. Ele au fost stabilite
n baza rezultatelor obinute de ctre laboratoarele performante. Standardele asigur, deci, cerinele de calitate
ale laboratoarelor, n esen, competena acestora.

n aceste standarde exist o terminologie folosit n mod unitar avnd o anumit semnificaie, cum ar fi:
recenzie administrativ, formular de control al amplificaiei, procedur analitic, audit, calibrare etc.

CODIS-ul (Combined DNA Index System) este pstrtorul profilului ADN al infractorilor condamnai al
mostrelor medico-legale i populaionale, sau al altora n relaie cu acestea. Este, de fapt, baza de date ADN a
infractorilor condamnai. Inutil de insistat asupra acestei baze de date. Am dat cteva exemple privind aceast
terminologie standardizat cu o semnificaie specific care permite personalului specializat i laboratoarelor
de criminalistic i medicin legal profilate pe investigarea ADN o colaborare eficient.

Programul ce asigur calitatea acestor laboratoare va trebui s aib n vedere un personal de nalt
calificare, sub o conducere competent, supuse periodic auditului i validrii.

n toate rile se insist n mod deosebit asupra unei permanente educri a personalului i a unor
controale care s probeze c acesta este la curent cu ultimele achiziii n domeniu.

Laboratoarelor de genetic judiciar li se vor asigura toate condiiile unei perfecte securizri menite a
evita orice contaminare, avndu-se n vedere ca, nainte de amplificarea PCR, probele ADN s fie duse n
spaii separate, acestea sub o strict eviden.

Toate laboratoarele de genetic judiciar vor utiliza metode i proceduri validate, numai astfel putnd fi
garantate acurateea rezultatelor i reproductibilitatea acestora. De asemenea, vor urma proceduri analitice
aprobate de conducerea laboratorului.Ele vor utiliza o aparatur adecvat metodologiei folosite, acest
echipament urmnd a fi pstrat n condiii adecvate.

Toate aceste msuri sunt consemnate ntr-o documentaie scris, considerat drept cluz a ntregii
activiti. Va fi pstrat o eviden strict a tuturor cazurilor avute n lucru.

ntregul personal al laboratoarelor de genetic judiciar va frecventa periodic cursuri pentru nsuirea
noilor cunotine n domeniu.

Orice rezultat discordant cu datele de literatur sau ancheta trebuie analizat i eventual corectat.

Laboratoarele de genetic judiciar sunt supuse unui control anual att n ceea ce privete organizarea,
ct i aparatura i personalul n vederea validrii, n continuare, a acestora.

Programele internaionale de monitorizare a investigaiilor de genetic judiciar. Numrul total al

laboratoarelor Uniunii Europene n care care se efectueaz teste ADN medico-legale este estimat la circa 150,
avnd peste 700 de experi n domeniu. Europa, spre deosebire de S.U.A., este compus din ri avnd sisteme
legislative i structuri medico-legale diverse ca mod de organizare i operare. n vreme ce cazurile judiciare
sunt investigate de regul n laboratoare oficiale aparinnd medicinei legale i poliiei, constelaia
laboratoarelor care efectueaz teste de paternitate este mult mai mare i include, de la caz la caz: laboratoare
aparinnd Ministerelor Jusiiei, servicii universitare de genetic, antropologie, laboratoare de imunologie sau
imunogenetic, servicii de hematologie, laboratoare de analiz private etc. n rile din nordul i vestul
Europei exist o tendin general de a concentra testrile ADN n cteva laboratoare principale, de regul
oficiale, spre deosebire de centrul i sudul Europei, unde tendina este de a dispersa investigaiile spre
laboratoare mici. Pentru armonizarea metodologiei de lucru i facilitarea schimbului de rezultate
transfrontalier, n perioada 1989-1999, Comisia ADN a Societii Internaionale de Genetic Judiciar (ISFG)
a elaborat o serie de recomandri privind standardele de lucru n domeniul testrilor ADN. Aceste recomandri
au fost adoptate n interval de numai civa ani, de o manier aproape unanim, de ctre toate statele europene
i de pe continentul american, iar progresul rezultat a fost semnificativ de la un an la altul, fapt reflectat de
rapoartele ISFG ntre 1994-1999.

De ce este att de important s existe standarde de analiz n genetica judiciar? Deoarece, n funcie de
un anume standard, se pot dezvolta programe de asigurare i control al calitii n domeniu. Standardele de
analiz odat adoptate de ctre un laborator garanteaz justiiei i publicului interesat c testele efectuate n
acel laborator sunt demne de ncredere. Experiena unui laborator i a experilor tiinifici sunt, de asemenea,
factori decisivi n derularea cu succes a unei investigaii genetice judiciare.

Contraexpertiza reprezint un principiu de baz n medicina legal i un drept recunoscut n majoritatea

legislaiilor europene. n anumite ri europene a devenit obligatoriu deja prin lege ca toate sistemele genetice
testate pentru un caz s poat fi efectuate n cel puin dou laboratoare distincte din ara respectiv, astfel nct
s existe posibilitatea obinerii a dou opinii tiinifice independente.

Bazele de date ADN sunt un alt aspect n care intervine standardizarea din perspectiva comparrii
rezultatelor i a schimbului de informaii, n condiiile n care politica social european favorizeaz
mobilitatea cetenilor ei.
Eforturile internaionale privind elaborarea de standarde comune

Standardele n materie de analize genetice medico-legale vizeaz n principiu dou aspecte: tehnic i
procedural.
Standardele tehnice cuprind:

sistemele genetice: tipul acestora, nomenclatura markerilor, nomenclatura alelelor, metodologia de

lucru, rata mutaiilor etc.;

metodele biostatistice pentru evaluarea rezultatelor;

modul de redactare al raportului de expertiz.

TABELUL 10.1
Criteriile ce trebuie ndeplinite de markerii genetici ADN utilizai n cercetarea filiaiei i investigaiile judiciare
(dup recomandrile AABB, ISFG i EDNAP)
Grad nalt de polimorfism

variante structurale multiple ale unei structuri de baz (tipuri de

polimorfisme: unilocus, multilocus, dialelic, hipervariabil)

Grad nalt de heterozigozitate

indicator fidel al populailor aflate n echilibru Hardy- Weinberger

Independent

Mod de transmitere ereditar, cu respectarea obligatorie a

legilor clasice mendeliene
Randament bun al genotiprii

localizarea pe cromozomi distinci a markerilor ADN din setul de

analizat
validat prin studii familiale

n sensul detectrii cu uurin prin tehnicile uzuale a tuturor alelelor

unui marker

Distribuie cunoscut a alelelor n populaie

validat prin studii de genetic populaional

Rata mutaiilor sczut

de regul n jurul valorii de 10~3

Anticipnd impactul major al aplicaiilor bazate pe tehnologia PCR, Comisia ADN din cadrul ISFG a
formulat ncepnd cu 1992 o serie de recomandri privind acest tip de genotipri (tabelul 10.1). Raportul
Comisiei din 1992 recomand, de altfel, tuturor laboratoarelor de genetic judiciar s adere la protocoalele de
analiz bazate pe tehnica PCR, deopotriv pentru investigaiile de filiaie i judiciare, i s adopte standarde de
lucru comune, n scopul facilitrii schimbului de informaii i al comparrii datelor ntre laboratoarele de
profil din ntreaga lume. Standardizarea investigaiilor genetice a vizat la acea dat urmtoarele aspecte:

- definirea termenului de locus genetic i alel pentru genotiprile medico-legale,

- nomenclatura markerilor genetici analizai,

- identificarea i raportarea alelelor fiecrui marker molecular cu ajutorul unor scri de mrime
standard {standard alelic ladder),

- rezolvarea problemelor legate de contaminare la tehnica PCR prin includerea obligatorie a

controalelor de calitate n protocoalele de lucru,

- reducerea erorilor de detecie a alelelor,

- mbuntirea randamentului PCR prin cuantificarea ADN supus analizei,

- interpretarea biostatistic n conformitate cu standardele n vigoare, stabilite i pentru sistemele de

markeri genetici tradiionali.
Genotiparea se poate realiza utiliznd metode manuale sau automate. Alele dintr-o baz de date sau incluse n testele de
identificare se denumesc prin comparare vizual cu o scar alelic sau prin msurare automat utiliznd etaloane alelice standard;
secvenierea nu este necesar. Coelectroforeza a dou probe de ADN poate fi utilizat pentru a determina dac dou dintre alelele
investigate se comport identic sau nu. Bazele din compoziia unui fragment ADN pot influena mobilitatea electroforetic. O
condiie pentru genotipare este ca rezoluia sistemului de electroforez s permit detecia i identificarea precis a tuturor
alelelor comune. Pentru unele sisteme cu variabilitate nalt se pot observa alelele cu 2 pb diferen fa de alelela comun cea
mai apropiat (exemplu: alelele 22, 22.2 i 23 ale locusului FGA sau o serie de alele aparinnd locusului ACTBP2). Genotiparea
manual a acestui locus trebuie s permit o reproductibilitate a deteciei alelei respective. Msurarea

automat a fragmentelor ar trebui s aib o marj de eroare a genotiprii mai mic dect jumtatea distanei dintre dou
alele, altfel ar rezulta o distribuie de tip continuu. Sistemul de separare i detecie a produilor de reacie poate influena numrul
de variante/alele detectate. De exemplu, unele laboratoare disting ntre alelele 9.3 i 10 ale locusului TH01, altele nu o pot face.
Acelai lucru este valabil i pentru variantele alelei 10 ale locusului FES, care poate prezenta la captul regiunii 5' o baz A sau
C. Aceste diferene ntre laboratoare sunt relevante n probleme de reproductibilitate a rezultatelor sau de schimb al rezultatelor.
Frecvena alelelor depinde de detectarea i definirea corect a unei alele ca entitate distinct. Ar trebui s fie clar, n orice caz,
dac variantele alelice au fost detectate sau nu. Aplicnd regulile menionate pentru locusul TH01, frecvena alelelor 9.3 i 10
ntr-o baz de date trebuie desemnat ntr-un fond comun 9.3/10. Pentru locusul FES, alela 10 include ambele variante, cu A i cu
C la captul terminal 5'. Dac variantele sunt detectate, ele trebuie desemnate 10 Ade sau 10Cyt (o notaie de tipul 10A sau 10C
preteaz la confuzii cu anodul sau catodul electroforetic). (Selecie din documentele publicate de Comisia ADN a ISFG).

Acurateea rezultatelor unui laborator n testrile ADN este apreciat prin procedee periodice de
control al calitii, n cursul crora expertul care reprezint laboratorul trebuie s dea asigurri c: o prob
biologic cunoscut este corect analizat, fr contaminare cu ADN extern, procedeul de analiz este bine
controlat i nici o abatere de la protocolul de lucru al laboratorului nu s-a produs. n controlul calitii se
include i etapa de interpretare a rezultatelor, verificndu-se calculul de probabilitate i gradul de acuratee cu
care s-au utilizat frecvenele alelelor n populaie.

Standardele de procedur nglobeaz urmtoarele probleme:

acreditarea laboratorului,

competena laboratorului,

acreditarea i autorizarea personalului,

metodele de arhivare,

randamentul testrilor.

Experii sunt de prere c progresele realizate pentru standardizarea tehnic sunt mai importante dect
cele de ordin procedural. Cea mai mare parte a laboratoarelor din Europa urmeaz recomandrile societiii
tiinifice ISFG, care joac astfel un rol activ n promovarea i implementarea standardelor tehnice la nivel
internaional. Exist n prezent o serie de grupuri de lucru europene axate pe probleme de testare a paternitii
i judiciare (English, German, Italian, Japanese, Spanish/Portugal Working Party) - nregistrate n cadrul
ISFG, care monitorizeaz an de an performanele de lucru ale tuturor laboratoarelor din aria european. n ce
privete evalurile statistice n investigaiile de filiaie, grupurile de lucm europene au ajuns la un anume

acord: majoritatea serviciilor ADN utilizeaz o valoare a priori P = 0,5 pentru calculul indexului de
paternitate (IP) i rezultatul se raporteaz sub forma probabilitii de paternitate (PP sau W). Acest tip de
acord lipsete ns pentru evalurile statistice n materie judiciar. Bordul ISFG a decis n 2000 stabilirea unei
comisii reprezentative internaionale care s se ocupe de problemele din domeniul investigaiilor de filiaie,
denumit Paternity Testing Commission (PTC), care include n prezent reprezentani din toate grupurile de
lucru europene de testare a paternitii, precum i reprezentanii omologi din cadrul AABB. Comisia i-a
nceput activitatea n ianuarie 2001 i s-a reunit de patru ori pn n prezent, ntreaga activitate fiind finanat
de ctre ISFG.

Consiliul Europei a formulat la rndul su o serie de recomandri i rezoluii privind standardizarea

sistemelor de investigaie ADN - ultima dateaz din iulie 2001 - menite s faciliteze colaborarea internaional
n materie civil i penal. A fost creat ncepnd din 1989 un grup de lucru care se ocup oficial de
standardizare la nivelul Uniunii Europene, denumit EDNAP (European DNA Profiling Group),i care reunete
reprezentanii tuturor rilor europene. n ciuda formulrii acestor recomandri i a activitii EDNAP,
investiiile pentru stadardizarea genotiprilor ADN n Europa nu au fost suficiente, mai ales c nu au fost
sprijinite cu fonduri speciale, nregistrndu-se n prezent un real decalaj fa de Statele Unite.
Recomandri specifice pentru domeniului testelor de filiaie elaborate de ISFG

Comisia pentru Testarea Paternitii (Paternity Testing Comission - PTC) din cadrul ISFG, avnd o
component reprezentativ la nivel internaional, a analizat ntre 2001-2002 situaia testrilor ADN de
paternitate pentru diferite ri din U.E. i S.U.A., raportat bineneles la sistemul legislativ al rii respective
i la tradiia efecturii acestui tip de analize. Comisia a concluzionat c o serie de recomandri de ordin
general, cu caracter minimal, trebuie s fie adoptate la nivel internaional de toate laboratoarele ce efectueaz
teste de paternitate, ceea ce nu exclude, desigur, adoptarea suplimentar a unor standarde specifice locale,
dac ele sunt cerute de o anumit legislaie sau organisme interne (vezi exemplul standardelor pentru testrile
de paternitate formulate de AABB n S.U.A.). Membrii Comisiei au opinat c adoptarea unor standarde
internaionale de calitate n testarea ADN a paternitii depinde de adoptarea unui anumit standard de calitate
la nivelul fiecrui laborator. Acest factor cheie, denumit standard de calitate al laboratorului (laboratory
quality standard), nsumeaz o serie de aspecte, precum: organizarea i managementul unui laborator,
personalul acestuia, calitatea sistemelor de markeri utilizai, performanele tehnice ale echipamentelor,
metodologia ntocmirii rapoartelor i a formulrii concluziilor investigaiei ADN. Comisia a decis s
recomande laboratoarelor ce efectueaz investigaii de filiaie adoptarea ca standard de lucru pentru un
laborator, standardul internaional privind msurtorile i testrile de laborator reprezentat de ISO 17025:1999
Norme generale privind competena n testare i calibrare a laboratoarelor ('General requirements for the
competence and calibration laboratories).

Cerinele ISO 17025 sunt formulate n termeni generali, iar anexa B a documentului cuprinde norme de
aplicare specifice pe domenii de activitate. Comisia pentru Testarea Paternitii a identificat n documentul
ISO 17025:1999 ariile care necesitau explicaii suplimentare i a elaborat o serie de recomandri specifice,
menite s clarifice aspectele legate de testrile ADN de paternitate. Spicuim din documentul PTC principalele
recomandri care se refer la:

- calificarea necesar conductorului unui laborator ADN i a experilor tiinifici (condiiile pot diferi
de la o ar la alta, ns ele trebuie definite clar i implementate pe plan intern): studii universitare de nivel

comparabil cu titlul de mater n Genetica Uman sau alt tip de educaie relevant, ntrunind ns un minimum
de 5-6 ani de studii universitare, 3 ani de specializare ntr-un laborator acreditat de testare genetic judiciar i
a paternitii i o experien documentat prin ntocmirea sub semntur proprie a cel puin 100 de rapoarte
acoperind toate aspectele majore ale testrilor judiciare i de paternitate;

- asigurarea efecturii de teste de confirmare ntr-un alt laborator sau de solicitare a unei opinii
independente cu privire la o testare atunci cnd este cazul; obligativitatea informrii clientului cu privire la
aceste posibiliti dac rezultatul testrii este contestat;

- msurile de siguran referitoare la prevenia contaminrilor cu produi PCR: obligativitatea separrii

ariilor de lucru, a definirii circuitului probelor i a procedeelor de monitorizare a contaminrilor;

- validarea metodelor de testare i stabilirea sistemelor genetice: laboratorul trebuie s utilizeze sisteme
de testare pentru care exist disponibile programe externe i/sau interne de verificare a performanelor de
lucru, date de genetic populaional i despre fenomenele mutaionale bine documentate;

- prelucrarea, comunicarea i transferul datelor, operaiuni ce trebuie verificate de o manier

sistematic: calculele manuale sau asistate de calculator se efectueaz obligatoriu n duplicat, fiind supervizate
de expertul tiinific i/sau conductorul laboratorului;

- definirea procedurilor de prelevare i conservare a probelor biologice, de utilizare a reactivilor i altor

materiale necesare;

- participarea obligatorie a laboratorului la minimum 2 programe de verificare a performanelor de

lucru n fiecare an: consemnarea calificativelor obinute, a observaiilor;

- formularea concluziilor de probabilitate cu ajutorul indexului de paternitate (paternity index - PI),

pornind de la principiul de calcul al ratei de probabilitate (likelihood rado - LR); pentru includerea altor
parametri, cum ar fi probabilitatea de paternitate (wahrsche inligkheit - W), este obligatorie specificarea
ipotezelor de lucru a priori (prezumiilor de la care se pornete).

Nici documentul ISO 17025 i nici recomandrile PTC nu fac referire la problema att de controversat
a erorilor de laborator. Eroarea de laborator nu este nici definit i nici precizrile cu privire la ceea ce
reprezint risc acceptabil sau inacceptabil nu sunt prezentate. Experiena a demonstrat ns c, dac se comit
erori cu ocazia programelor de verificare a performanelor de lucru, atunci rata erorilor n prelucrarea probelor
din servicul respectiv este mare i n practica curent, deci metodologia de testare trebuie cercetat ntr-un
mod critic. Odat ce un laborator ctig reputaia c furnizeaz rezultate ndoielnice, este extrem de dificil,
dac nu chiar imposibil uneori, s scape de aceast imagine. Neoficial, o rat a erorilor de 1 la 10 000 de

cazuri raportate poate fi considerat ca fiind acceptabil.

PTC a sugerat c ar fi de dorit n viitor stabilirea n fiecare ar de comitete naionale funcionnd sub
auspiciile unor agenii guvernamentale i nsrcinate cu monitorizarea genotiprilor ADN medico-legale i
implementarea standardelor de lucru internaionale. n S.U.A. a fost nfiinat un astfel de comitet naional prin
legea din 1994 privind Identificrile ADN de persoane, adoptat de Congresul American. A fost astfel creat
DNA Advisory Board (DAB), care formuleaz recomandri i principii de urmat pentru laboratoarele ADN,
pentru o mare varietate de probleme, inclusiv pentru standardele n testarea ADN i asigurarea calitii.
Membrii DAB sunt desemnai de ctre FBI dintre nominalizrile primite de la National Academy of Sciences
i alte organizaii tiinifice sau profesionale. Puterea acestui comitet naional este substanial, ntruct orice
agenie care solicit fonduri federale pentru dezvoltare n domeniul testrilor ADN trebuie s demonstreze c
accept standardele stabilite de ctre acesta. Cu toate acestea, acreditarea laboratoarelor ADN n Statele Unite
rmne un proces n care participarea se face pe baz de voluntariat. Pentru testrile de paternitate, programele
de acreditare i standardele sunt n prezent organizate i stabilite de ctre comitetul director al AABB.

Fa de recomandrile PTC, documentul referitor la Standardele pentru Laboratoarele de Testare a

Paternitii, elaborat n 1989 de AABB pentru testrile de paternitate n Statele Unite, face i urmtoarele
precizri cu privire la consimmntul persoanelor testate: consimmntul trebuie luat n scris, pentru fiecare
persoan, fie direct, fie indirect, prin nscris oficial sau prin intermediul printelui sau tutorelui legal n
custodia cruia se afl un minor sau o persoan cu discernmntul abolit. Dac prinii au n comun custodia
unui copil, atunci ambii trebuie s consimt n scris la prelevarea de probe biologice, indiferent dac metoda
de prelevare este invaziv sau nu. n caz contrar, prelevarea se consider ilegal i aductoare de prejudiciu
persoanei n cauz. Documentul mai precizeaz, de asemenea, c principiul confidenialitii rezultatelor
trebuie respectat cu strictee de ctre expert, deoarece informaii cu privire la paternitate sau alte tipuri de
nrudiri pot fi speculate de rude sau de anturaj pentru revendicarea unor drepturi materiale, n scop de antaj
etc.

Conform legislaiei americane i a majoritii statelor vest-europene, prezumtivul tat nu este obligat s
dea curs invitaiei pentru testarea paternitii, ns n caz de refuz decizia instanei poate fi formulat n
defavoarea lui. Conform legislaiei germane, prezumtivul tat este obligat s dea curs invitaiei

judectorului, n caz de refuz cel convocat fiind adus de ctre poliie. Legiuitorul german a formulat
ns obligativitatea participrii la testarea ADN pentru prezumtivii prini, ntruct prelevarea de probe
biologice se poate realiza i prin metode neinvazive, deci fr atingerea integritii fizice a unei persoane.
Trebuie spus c i alte legislaii fac precizarea c prelevarea de probe pentru testarea ADN a paternitii nu
contrazice prevederile constituionale ce garanteaz integritatea fizic a unei persoane.
Concluzii. Dei exist n unele ri europene legi privind standardele procedurale n tiinele medico-legale,
dezvoltarea i adaptarea acestora la noile cerine legate de testrile ADN se realizeaz ntr-un ritm mult mai
lent dect pe continentul american. Vor fi necesare eforturi considerabile mai ales pentru adoptarea
standardelor procedurale n multe ri din Europa, printre care i Romnia, i acest lucru va presupune ca toate
laboratoarele medico-legale s se conformeze unor controale interne i externe i unor reglementri/directive
naionale i internaionale. Operaiunea n sine presupune un demers birocratic i financiar nsemnat, de aceea
este de presupus c, n viitor, numrul laboratoarelor care vor efectua expertize ADN medico-legale va
diminua semnificativ tendina (nregistrat deja n ri precum Germania, Italia i Spania) pentru centrele de
testare n materie civil.CAPITOLUL 11

Bazele de date ADN

Analiza ADN este un mijloc de identificare comparativ extrem de eficient, iar, odat analizat o prob
biologic, rezultatul poate fi pstrat ntr-o banc de date. Posibilitatea obinerii de profile ADN cu ajutorul
reaciilor PCR multiplex a fost un factor cheie n reducerea costurilor i accelerarea testrilor, conducnd n
final la crearea unor baze de date ADN la nivel naional. Progresele tehnologice rapide nregistrate n
domeniul genotiprilor judiciare, avnd un suport informatic larg, au permis n ultimii ani crearea bazelor de
date ADN ca instrument de lucru extrem de preios n tiinele judiciare. Geneticienii legiti pot astfel compara
proflele probelor biologice pentru a detecta suspecii. O banc de date naional poate identifica cu uurin n
special pe infractorii care opereaz ntr-un teritoriu naional sau chiar internaional.

La 13 octombrie 1998, Biroul Federal de Investigaii (FBI) al Statelor Unite a inaugurat baza naional
de date ADN cu denumirea CODIS (Combined DNA Index System), ceea ce a dat posibilitatea celor 50 de
state din componena S.U.A. s aib acces la un sistem capabil de cercetare a profilului ADN, al infractorilor
de pe acest vast teritoriu. Sistemul poate fi asemuit cu baza de date privind amprentele digitale din cazierele
judiciare.

Premisa de la care se pornete n alctuirea unei baze de date este c anumite tipuri de infractori
recidiveaz de regul comind aceleai tipuri de acte infracionale. Se preteaz la stocare n banca de date
acele tipuri de infraciuni n care infractorii las urme biologice n urma comiterii unui act criminal: viol,
omor, tlhrie etc.

Prima baz de date ADN cu markeri de tip STR din lume a fost lansat n aprilie 1995 n Marea
Britanie. Pentru crearea acestei baze de date s-au utilizat profile alctuite din 6 markeri STR analizai cu
ajutorul unui multiplex PCR. Banca de date cuprindea deja n 1998 peste 300 000 de probe, servind la
depistarea a peste 20 000 de corespondene, preul de cost al unei operaiuni de nregistrare i comparare a
unei probe fiind de 42 de lire. Baza de date aparine Home Office (echivalentul Ministerului de Interne), iar de
administrarea ei se ocup Forensic Science Servicies. n momentul de fa, aceast baz de date, cea mai
cuprinztoare din lume, stocheaz circa 600 000 de profile ADN de la indivizi condamnai pentru diferite
infraciuni i de la unii suspeci.

Pe rnd, urmnd iniiativa britanicilor, i alte state europene i-au creat baze de date naionale: 1997 Olanda, 1998 - Austria, Germania, 1999 - Danemarca, Finlanda, 2000-2001 - Belgia, Frana, Norvegia,
Suedia, Elveia. Concomitent cu introducerea acestor baze de date ADN, statele respective au adoptat i
legislaia corespunztoare implementrii unor astfel de obiective. Deschiderea granielor n cadrul proceselor
de integrare european a condus i la creterea cotelor criminalitii transfrontalire, n special la proliferarea
cercurilor pedofile n unele ri ale Comunitii Europene.

Ca urmare, presiunea este n cretere pentru crearea de baze de date naionale n toat Uniunea
European. Mai mult, n 2002, forurile de decizie UE au decis s finaneze n urmtorii 5 ani crearea unei
Baze de Date ADN Pan-Europene, care s permit schimbul de profile genetice ntre rile membre.

Dup cum am amintit, n Statele Unite, toate cele 50 de state ale S.U.A. au baze de date cu amprentele
genetice ale celor condamnai dup 1992-1994, ajutnd la rezolvarea unor cazuri dificile de omor, tlhrii,
identificarea persoanelor disprute. Sistemul de nregistrare n US National DNA Databank

cuprinde un set de 13 loci STR - CSF1PO, FGA, TH01, TpOX, vWA, D3S1358, D7S820, D13S317,
D16S539, D18S51 i D21S11 - denumit CODIS. Presiunea legat de alctuirea unei baze de date a crescut n
urma arestrii unui suspect, presupus criminal n serie n baza unui test ADN.

Procurorul care a condus investigaiile a declarat presei c unul dintre obstacolele majore care a
determinat ntrzierea arestrii acestui-agresor sexual cu multiple condamnri la activ a fost inexistena unei
baze de date ADN. Aceasta n condiiile n care, la vremea respectiv, planurile pentru organizarea unei baze
de date existau, ns disputele pe marginea amendamentului pentru conservarea probelor biologice tergiversau
adoptarea legii. i decizia german de a crea o baz de date ADN pentru infractorii condamnai pentru crime,
agresiuni sexuale, tlhrie i alte infraciuni grave a fost mult ntrziat de problemele legate de protecia
informaiilor. Adoptarea legii n Germania s-a fcut tot sub presiunea unei serii de evenimente tragice, n care
au fost descoperite victimele-copii ale unor crime sexuale.

Valoarea unor astfel de bnci de date este indiscutabil. Astfel, pot fi rezolvate infraciuni sau crime
rmase cu autori necunoscui sau chiar pot fi salvate viei; dat fiind faptul c muli criminali comit crime n
zone geografice diferite, sistemul trebuie extins naional i internaional.

Probele recoltate pot fi conservate un timp n bnci, pentru ca, dup tiparea ADN, s fie nmagazinate n
bnci de date. Se nelege c valoarea unor astfel de date va crete de-a lungul anilor, prin mbogirea
informaiilor genetice odat cu ansele de depistare a infractorilor.

Strategia edificrii i valorificrii bncilor de date presupune obligaia institutelor medico-legale de a

furniza probe, seturi comune de markeri ADN sau seturi standard, ce pot fi comparate cu orice prob ce intr
n banc, i mijloace informatice (computere) standard, care s permit o comunicare rapid ntre laboratoare.

Tehnologia bncilor (bazelor) de date folosit n genetica judiciar presupune recoltarea unor probe
cunoscute de tipare ADN, introducerea rezultatelor n memoria computerului i, n fine, compararea cu
profilele ADN necunoscute recoltate de la locul faptei.

Bazele de date ADN, asemenea amprentelor digitale din cazierele judiciare din secolul trecut, se vor
mbogi pe msur ce recoltarea de probe de la infractori va deveni o operaie de rutin.

n Statele Unite, proiectul a debutat n 1990, n doar 14 state ajungndu-se azi ca numrul laboratoarelor

din America utilizatoare ale CODIS-ului s depeasc 100.

De-a lungul anilor, informaiile furnizate de profilul ADN a nceput prin introducerea n CODIS a RFLP
(restriction fragments length polymorphism), apoi PCR (polymerase chain reaction), bazat pe markerii HLADQA, Poly Marker i D1S80.

CODIS este mai degrab un sistem care furnizeaz datele necesare comparrii profilelor ADN, dect o
baz de date informative a delictelor i crimelor comise de-a lungul anilor.

Sensul primordial al CODIS-ului este tocmai acela de a defini potrivirea ntre dou sau mai multe
profile ADN ce provin de la poliie, ce nu puteau fi altfel discriminate.

Dat fiind faptul c numrul potrivirilor este corelat cu bogia de date a bncilor, treptat CODIS-ul i
crete importana.

n cele ce urmeaz vom exemplifica (dup Butler) felul cum informaia privind profilul ADN este
stocat n baza de date ADN a CODIS-ului, pentru un singur eantion.

Se observ c nu este vorba de o informaie personal care s poat fi folosit spre a corela un profil
ADN cu altul. Cele dou alele ale fiecrui marker STR sunt aezate n coloane separate, etichetate cu
valoarea 1 i valoarea 2. Pentru markerii homozigoi, valoarea 1 i valoarea 2 sunt identice (exemplu,
CSF1PO).
Informaia n zona model info, poate fi relaionat
Mostr
numai cu un singur individ
Categorie
cunoscut provenind din
laboratorul de genetic judiciar (tabelul 11.1). TABELUL 11.1
Mostra Info F 130

Tip de esut

1 marker

infractor condamnat valoare 1

snge valoare 2

AMEL

CSF1PO
D135317

10
11

10
14

D165539

11

D18551

14

D21511

28

16
30

D351358

16

17

D55818

12

13

D75820

D851179

12

14

FGA

21

22

THOl

TPOX

VWA

17

18

Atunci cnd n baza de date este identificat o potrivire genetic potenial, ea este furnizat
laboratoarelor care certific sau nu respectivul profil genetic; n caz de confirmare, se trece la strngerea
datelor privitoare la cel care a furnizat proba biologic prelevat de la locul faptei.

Se pot accepta mai multe nivele de informaii, ncepnd cu laboratoarele acreditate la nivelul unor
regiuni pn la nivel central.

n ceea ce privete nivelul convingtor de informaie n Statele Unite, este acceptat n prezent ca fiind o
probabilitate de potrivire de 1 la 100 de trilioane, furnizat de 13 markeri STR (short tandem repeat).

De asemenea, s-a impus s includ un numr minim de loci n componena profilului ADN, i anume 10
loci pentru CODIS-ul RFPL sau 13 loci pentru CODIS-ul STR.

Pentru ca o baz de date s poat fi considerat folositoare n genetica judiciar, astfel de criterii ar
trebui implementate n orice laborator de specialitate. De asemenea, este necesar s se asigure securitatea
datelor incluse n banca de date ADN i posibilitatea unor comparri rapide a datelor noi cu cele existente n
banc.

De fapt, calitatea superioar a datelor incluse n baza de date este asigurat dac se cere laboratoarelor
de genetic judiciar s foloseasc aa-zise ghiduri de asigurare a calitii, s supun controlului periodic
tehnicile i procedurile folosite, care confer fiabilitatea testelor i analizelor.

ntruct bncile de date ADN vor acumula din ce n ce mai multe informaii, este necesar ca, n paralel,
s se cldeasc un sistem de cutare rapid a unor informaii.

Mai mult dect att, deoarece kiturile STR folosite de laboratoare pot avea diferii primeri ce cupleaz
regiuni pentru aceiai loci, nu poate rezulta nici o alel, folosindu-se un singur set de primeri, ceea ce face s
apar o discrepan ntre rezultatele obinute cu acelai kit STR.Spre a iei din aceast situaie, sunt folosite
algoritmuri i criterii de potrivire, n aceasta constnd i capacitatea laboratoarelor de genetic judiciar de a
detecta microvariantele alelice.

n numeroase state unde laboratoarele de genetic judiciar sunt dotate cu tehnici de tipare ADN
modeme, legea oblig personalul implicat s recolteze snge sau saliv de la inculpai pentru cercetri
comparative. n acest mod au fost rezolvate multe cazuri rmase pn atunci cu autor necunoscut.

Util ar fi ca bazele de date naionale s comunice ntre ele pe plan mondial, dat fiind actuala amploare a
internaionalizrii fenomenului infracional. n acest sens i paralel cu activitatea laboratoarelor de genetic
judiciar, dar n folosul acestora, ar trebui iniiate studii populaionale menite s arate frecvena unor alele care
s permit aprecieri asupra raritii unui anumit profil ADN (frecvena unui singur locus al profilului ADN).

ntrebarea care se pune cu privire la bazele de date ADN este ct de cuprinztoare trebuie s fie acestea.
Pentru fiecare stat n parte exist legislaii care precizeaz tipurile de infractori ce pot fi inclui n baza
naional de date, cte probe poate cuprinde o baz de date, metodologia de identificare prin cutare n baza de
date i n ce mod informaiile furnizate de o astfel de baz de date pot constitui probe n faa instanei de
judecat. Cele mai restrictive sisteme legislative n domeniu prevd includerea n bazele naionale de date
numai a profilelor infractorilor condamnai pentru delicte sexuale i crime deosebit de grave.

Alte sisteme legislative permit alimentarea bazelor de date cu rezultatele obinute la toate cazurile
judiciare i chiar cu rezultatele testrilor din bncile de snge, din centrele de sfat genetic i de screening al
maladiilor genetice, rezultatele testelor de paternitate etc. Motivul invocat pentru astfel de politici extrem de
permisive este cel al necesitii efecturii unor estimri probabilistice corecte, avnd ca reper eantioane
populaionale ct mai reprezentative numeric.

Cutrile n bazele de date sunt realizate practic avnd la baz suporturi informatice specializate, ns
trebuie menionat c performana procesului de cutare depinde n mod direct de ordinul de mrime al datelor
existente n baza de date. Astfel, includerea n baza de date a profilelor alctuite dintr-un numr mai mare de
markeri crete numrul de repere n cutarea propriu-zis i, implicit, potenialul discriminatoriu al bazei de
date, chiar pentru mixturi, probe degradate i cazuri deficitare de filiaie biologic. Acest tip de avantaje
trebuie balansat n practic cu o serie de dezavantaje ce in de bugetul alocat testrilor pentru bazele de date
(profilele alctuite din seturi largi de markeri sunt destul de costisitoare), de compatibilitatea la nivel naional
i de timpul de rspuns ctre investigator.

Exist n prezent un consens general c bazele de date ADN ajut nemijlocit la accelerarea
investigaiilor criminale i soluionarea crimelor grave i, implicit, la eliminarea suspecilor inoceni. Crearea
bncilor de date suscit ns nc vii discuii cu privire la drepturile persoanelor al cror ADN este pstrat n
aceste baze, deoarece o analiz genetic poate n orice moment releva i alte date dect cele legate de
identificare - date legate de codul genetic - atentnd astfel grav la intimitatea biologic a unui individ uman.
De aici i temerea mprtit n mai multe ri din lume c materialul adunat n bncile de date ADN ar putea
fi oricnd folosit i n alte scopuri dect cele medico-legale.

Personaliti din domeniul dreptului i medicinei avertizeaz asupra pericolului utilizrii bazelor de date
ADN pentru alte scopuri dect cele viznd identificarea de persoane [138], Ei reclam tocmai faptul c bazele
de date pot fi utilizate pentru diferite cercetri de genetic fr a fi necesar s se cear consimmntul celor
cercetai. Implicaiile etice grave ale unor astfel de iniiative nu trebuie purtate ntre specialiti i factorii
politici de decizie n spatele uilor nchise, ci trebuie mediatizate publicului larg, chiar de ctre experii
tiinifici din domeniu.

Epilog

Quo vadis genetica judiciar?

Orice progres n tiin are la baz metodologia cercetrii. n perfecionarea metodologiei de cercetare
const ntreaga etic tiinific. S-a afirmat c n biologie tiina ncepe ca genetic i sfrete cu bioetic.
Afirmaia are la baz adevrul indubitabil c, n ultimele decade, genetica reprezint vrful cercetrilor n
biologie (vezi premiile Nobel pentru medicin). Ea a ptruns i n tiinele medico-legale i criminalistice,
odat cu folosirea ADN n identificare.

Genetica molecular este disciplina care nate cele mai mari sperane i care mobilizeaz pe glob circa 1
milion de biologi, biochimiti, medici i informaticieni pentru descoperirea secretelor moleculei de ADN.

ADN este n mod indubitabil cea mai important achiziie introdus n domeniul medicinei legale i
criminalistice, n ultimele decade. Identificarea ADN se situeaz pe primul loc n tiinele medico-legale i
criminalistice pe msur ce tehnologia avanseaz i, odat cu cercetrile n genetica molecular, va deveni,
dac nu a i devenit, cea mai important arm a justiiei mpotriva infracionalitii de toate tipurile. Nu exist
limite n a descoperi noi sisteme de markeri genetici pe care cercettorii s nu-i poat folosi i adapta n
genetica judiciar. Odat prins un infractor i profilul lui genetic confirmat, ali noi markeri ADN vor putea fi
folosii ca probe n justiie.

Un laborator modem de genetic judiciar va folosi n viitor noi i noi echipamente pregtite a rezolva
variatele probleme ale identificrii sau ale problemelor ridicate de spea respectiv. Controlul calitii
rezultatelor va rmne ntotdeauna un obiectiv al tiprii ADN n genetica judiciar. Sursa calitii testelor i
riscurilor de eroare va continua s fie n atenia att a cercettorilor, ct i a comunitilor de experi legiti i
criminaliti. Acreditrile vor crete nencetat n exigen i vor constitui o adevrat autoreglare a
laboratoarelor de genetic judiciar, paralel cu apariia unei legislaii adecvate n materie, totul avnd scopul
final ntr-o uniformizare metodologic naional i internaional. De altfel, n ultimii ani, observm
amploarea dezbaterilor tiinifice i creterea exponenial a calitii i cantitii de informaii ce se prezint n
congresele de specialitate.

Frapant n toate laboratoarele de genetic judiciar va fi automatizarea, care va deveni elementul

central de progres, avnd ca efect imediat scurtarea notabil a timpului de obinere a rezultatelor, efect a crui
importan este inutil a fi subliniat n actul de justiie.

Medicii geneticieni i legiti vor fi tot mai des chemai n instanele din ntreaga lume n calitate de
consilieri tiinifici, pentru a oferi date obiective despre ceea ce astzi denumim generic genetica violenei,
genetica deviaiilor sexuale, genetica inteligenei, genetica alcoolismului sau drogurilor sau despre practicile
eugenice pozitive.

Domeniul geneticii judiciare nu mai este unul inocent, chiar dac cei mai muli dintre specialiti

ncearc s ne asigure c o procedur de identificare furnizeaz exclusiv informaii legate de sexul unui
individ i regiunile sale non-codante. Tentaia de a examina regiunile codante ale ADN este astzi mai mare ca
oricnd innd cont de faptul c cercetarea genetic se dezvolt rapid i tehnologiile microarray sunt
disponibile deja n multe laboratoare.

Poliia din Marea Britanie recunoate c baza sa de date servete n prezent i unor studii tiinifice. La
Forensic Science Services din Birmingham se testeaz deja anumii markeri pentru determinarea culorii pielii,
ochilor i prului. A fost raportat deja descoperirea unei secvene de ADN care, n 85%

din cazuri, poate confirma dac persoana testat are prul de culoare rocat. Cercettorii sunt de
asemenea n cutarea unor markeri ADN pentru ras: ei au utilizat ca baz de cercetare probele ADN prelevate
de la criminalii arestai i au raportat o marj de eroare a testelor pentru identificarea rasei unui individ nu mai
mare 2-3%. Forensic Science Service ntreprinde n prezent la University College din Londra un studiu asupra
genelor care determin structura i aspectul feei unei persoane. Comentnd n presa britanic cercetrile
ntreprinse, directorul Serviciului ADN al acestei instituii a emis prerea conform creia, nu peste mult timp,
testrile ADN vor fi n msur s creeze adevrate portrete fizice ale infractorilor, pomindu-se de la orice tip
de urm biologic gsit la locul faptei.

Dat fiind amploarea pe care o ia astzi criminalitatea transfrontalier, este imposibil s nu insistm
asupra importanei bazelor de date. Uniformizarea metodelor de stocare a datelor, precum i standardizarea
metodelor de tipare ADN vor fi de natur a contribui major la reducerea numrului de autori necunoscui, mai
ales dac obligativitatea prelevrii de probe de la cei ce vin n conflict cu legea, indiferent de natura
infraciunii, se va generaliza, paralel cu dezvoltarea studiilor de genetic populaional. Markerii genetici
caracteristici unor anumite grupuri populaionale i vor gsi utilitatea mai ales n criminalitatea
transfrontalier, dublnd astfel fiabilitatea concluziilor de identificare din bazele de date. Cu ct va fi mai
mare numrul de markeri genetici pe care laboratoarele de genetic judiciar l vor avea la dispoziie, cu att
mai repede i mai precis acetia vor oferi rezultate mai exacte.

n probaiunea juridic, medicina legal i criminalistica trebuie s aduc o argumentare bazat pe

dovezi faptice provenite din surse competente, la care se adaug testele de verificare a dovezilor, acurateea
metodologiilor de lucru i concordana cu alte rezultate. Astfel, adevrul medico-legal devine unitar cu cel
juridic i, fiind bazat pe datele tiinei, devine probant. n medicina legal i criminalistic, principiile etice
constau n respectul pentru adevrul tiinific, singurul menit a nltura ndoielile. ncepnd cu cercetarea i
terminnd cu valorificarea tiinific a probelor, totul ar trebui s se bazeze pe tiina n motivarea sentinei.
Aceasta este singura cale de evitare a riscului de a grei, fiindc este mai uor a suporta o nedreptate, dect a
o crea (Scripcaru G.).

Dup cum este menionat n Declaraia Universal UNESCO asupra genomului uman, libertatea de
cercetare trebuie s in seama de principiile bioeticii, printre care se numr protecia individual care
decurge din confidenialitatea cercetrii.

Or, genele reprezint o proprietate individual i, ca atare, orice informaie genetic nu poate fi pus la

dispoziia publicului, adic a organelor de justiie care le solicit, fr consimmntul celui cruia aceste
informaii i aparin. n opoziie cu aceast concepie, se pune ntrebarea dac nu este cumva mai important ca,
atunci cnd cunoaterea de ctre justiie a unor date care aparin patrimoniului genetic individual este de
natur a nltura grave pericole ale mediului social, nu suntem ndreptii a accepta ca aceast informaie
genetic menit a stvili infracionalitatea n continu cretere i diversificare s ajung n minile organelor
de justiie.

Tehnologiile moleculare modeme cresc dramatic preocuprile n domeniul eticii care decurg din fiecare
test genetic ce are ca scop diagnosticul prenatal, al unor mutaii patogene, stabilirea paternitii sau
identificarea de persoane. Informaia genetic poate induce prejudicii n zona vieii familiale, sociale i
profesionale a unei persoane sau a sntii acesteia.

rile europene au legiferat sau discutat legi care au ca scop testarea ADN i bazele de date judiciare.
Dei actualele prevederi legislative europene interzic testarea regiunilor codante, precum i utilizarea bazelor
de date ADN judiciare n cercetarea genetic medical, acest lucru este greu controlabil n practic. De aici se
nasc o serie de probleme legate de capacitatea legilor prezente de a preveni abuzul utilizrii informaiilor
genetice.

Rmne ca bioetica, n continu dezvoltare n statul de drept, s ncline ntr-un sens sau altul aceast
sensibil balan a confidenialitii, orientndu-i limitele.

BIBLIOGRAFIE

1.

Akana A. & colab. - Sex identification of forensic specimens by polymerase chain reaction (PCR): two alternative methods
(1991) Forensic Sci Int 49:81-88
2. Allen R. - Parentage Testing in the United States: The Role of the American Association of Blood Banks (1998)
www.promega.com
3. Ambach E. & colab. - Superfecundation ADN Dual Paternity Pregnancy ending with Placental Abruption (2000) J Forensic Sci
45(1):181183
4. Anderson S. & colab. - Sequence organization of the human mitochondrial genome (1981) Nature 290:457465
5. Andrei D. - Stilurile europene de via (1999) 30-31 octombrie Curentul 16
6. Anslinger K., Rolf B Keil W. - Evaluation ADN application of the AmpFISTR profiler Plus PCR amplification kit in a Bavarian
population sample (2001) Int J Legal Med 114:278-280
7. Ayres K.L., Overall A.D.J. - Allowing for within-subpopulation inbreeding in forensic match probabilities (1999) Forensic Sci
Int 103:207-216
8. Baasner A., Schafer C Junge A., Burkhard R. - Polymorphic sites in human mitochondrial DNA control region se quences:
population data ADN maternal inheritance (1998) Forensic Sci Int 98:169-178
9. Ballantyne J. - Mass disaster genetics (1997) Nat Genet 15(4):329331
10. Bar W, Brinkmann B Budwole B., Carracedo A., Gill P, Lincoln R, Mayr W., Olaisen B. - DNA recommendations - further
report of the DNA Commission* of the ISFH regarding the use of short tandem repeat systems (1997) Int J Legal Med 110:175176
11. Bar W., Brinkmann B Budwole B., Holland M., Carracedo A., Gill R, Lincoln P.J., Mayr W., Morling N Olaisen B Schneider
P.M., Tully G. & Wison M. - DNA Commission of the International Society for Forensic Genetics: Guidelines for
Mitochondrial DNA Typing (2000) Int J Legal Med 113:193-196

12. Bein G. & colab - Pseudo-exclusion from paternity due to maternal uniparental disomy 16 (1998) Int J Legal Med 111:328-330
13. Brbrii L.E. - Testele ADN n practica medico-legal, 208-226, Curs de medicin legal - Dermengiu D. i colab. (2005)
Tehnoplast Company, Bucureti
14. Brbrii L.E., Constantinescu C., Rolf B., Hohoff C., Calistru R, Dermengiu D. - Allele frequencies of 13 short tandem repeat
(STR) loci in the Romanian population (2004) May Forensic Sci Int 141(2-3): 171-174
15. Brbrii L.E., Rolf B., Dermengiu D. - ,,Y-chromosomal STR haplotypes in a Romanian population sample (2003) Int J Legal
Med 117(5):312-315
16. Brbrii L.E., Constantinescu C., Popa M., Toroiman S., tefanescu D.T. - Genetic analysis of 6 STR loci for a Romanian
population sample (2003) Rom J Legal Med 11(1):512
17. Brbrii L.E. - Cromozomul Y - un nou mijloc de identificare n tiinele criminalistice (2002) Criminalistica 5:27- 29
18. Brbrii L.E. - Interpretation of DNA tests in penal cases: some considerations (2002) Rom J Legal Med 10(3-4):229- 237
19. Brbrii L.E. - International reccommended standards for genetic paternity testing (part I) (2002) Rom J Legal Med 10(2): 121126
20. Brbrii L.E. - International reccommended standards for genetic paternity testing (part II) (2002) Rom J Legal Med 10(3):222228
21. Brbrii L.E., Dermengiu D. - Parentage testing following an infanticide case using fetal DNA from archival fixed tissues
(2003) Progress in Forensic Genetics 9, Proceedings from the 19 th ISFG International Congress, International Congress Series
1239, Elsevier Science, 613-616
22. Beli V. & colab. - Tratat de Medicin Legal (1995) Edit. Medical
23. Beli V., Dermengiu D., Curc C. - The value ADN actual limits of DNA applications in forensic DNA medicine (1995) DNA,
vol.3, Tokyo
24. Bergeron J., Herve J.C. - Biologie cellulaire et molculaire. Hrdit et gntique humaine (1990) Sciences naturelles D, Hatier,
Paris
25. Brenner C. H. - Probable race of a Stain Donor (1996) Proceedings from the seventh International Symposium on Human
Identification, Promega Corp, 48-52
26.
Brenner C.H. - A note on paternity computation in cases lacking a mother (1993) Transfusion 33:51-54
28.
Brenner C.H. - Likelyhood ratios for paternity situations (1999) www.dna-view.comBrenner C.H. - Mutations in Paternity
(1999) Forensic Mathematics home page, http://dna-view.com
29. Brinkman B. - Overview of PCR-Based Systems in Identity Testing ( 1998) Forensic DNA Profiling Protocols - Methods in
Molecular Biology, vol. 98, Humana Press, Totowa, NJ, 105-119
30. Brinkman B. & colab. - Mutation rate in Human Microsatellites; Influence of the Structure ADN Length of the Tandem
Repeat (1998) Am J Hum Genet 62:1408-1415
31. Brinkman B. & colab. - The evidential value of STR - An analysis of exclusion cases (2001) lnt J Leg Med 114:173- 177
32. Brinkmann B. & Carracedo A. - (2003) Progress in Forensic Genetics 9, Excerpta Medica International Congress Series 1239,
Elsevier, Amsterdam
33.
Brinkmann B., Mayr W.R., Rand S. - Paternity testing - quo vadis? (1991) Blood Reviews 5(1):5154
34.
Brookfield J. - The effect of relatives on the likelihood ratio associated with DNA profile evidence in criminal cases (1994)
JFSS 34(4): 193-197
35. Brown T.A. - Genetics - A Molecular Approach (1992) Chapman & Hall, London, 280-310
36. Budwole B. & colab. - Mitochondrial DNA regions HVI ADN HVII population data (1999) Forensic Science lnt 103:23-35
37. Budwole B. & colab. - DNA Typing Protocols (2000) Biotechniques Books Publication
38. Butler J.M. - Forensic DNA Typing (2003) Academic Press
39. Campbell M., Machin D. - Medical Statistics - A commonsense approach (1993) John Wiley & Sons, Chichester, 35- 43
40. Carracedo A. & colab. - Reproducibility of mtDNA analysis between laboratories: a report of the European DNA profiling
group (EDNAP) (1998) Forensic Sci lnt 97:165-170
41. Cassiman J.J., Decorte R - Forensic Medicine ADN the PCR Technique (1993) J Med Genet 30:625-633
42. Cerri N. & colab. - Allele frequency distribution of 13 STR in an Italian ADN immigrant population sample (2003) Progress
in Forensic Genetics 9, Excerpta Medica International Congress Series 1239, Elsevier, Amsterdam, 137-144
43. Claytoon T.M., Whitaker J.P., Maguire C.N. - Identification of bodies from the scene of a mass disaster using DNA
amplification of short tandem repeat (STR) loci (1995) Forensic Sci lnt 76:7-15
44. Committee on DNA Forensic Science, Commission on DNA Forensic Science, National Research Council - Statistical Issues
The Evaluation of Forensic DNA Evidence (1996) National Academy Press, Washington D.C., 125-166
45.
Costa e Silva A.P. - The Legal Status of Children - comments on the (draft) Report on Principles Concerning the
Establishment ADN Legal Consequences of Parentage, prepared by the European Committee of experts on family law,
Paternity Testing Workshop of the ESWG-ISFG, Lisbon, 2002
46. Covic M. si colab. - Genetica Medical (2004) Edit. Polirom
47. Decorte R., Gilissen A., Cassiman J.J. - Allele frequency data for 15 STR loci (AmpF/STR SGM plus ADN profiler in the
belgian population (2003) Progress in Forensic Genetics 9, Excerpta Medica International Congress Series 1239, Elsevier,
Amsterdam, 219-222
48. Doutremepuich C. - Les empreintes gntiques en pratique judiciaire (1998) IHESI, Paris
49. Emery A.E.H., Mueller R.F. - Elements of Medical Genetics (1992) Churchill Livingstone, Logman Group, Edinburgh, 14
50. Evett I.W. & Weir B.S. -Interpreting DNA Evidence - Statistical genetics for Forensic Scientists (1999) Sinauer Associates Inc.

51.
52.
53.
54.
55.
56.

Publishers, Sunderland, Massachusetts

Evett I.W., Gill P.D., Scrange J.K., Weir B.S. - Establishing the robustness of short tandem repeat statistics for forensic
applications (1996) Am J Hum Genet 58: 398407
Evett I.W., Werrett D.J. - Bayesian Analysis of Single Locus DNA profile (1990) Proceedings for The International
Symposium on Human Identification, Promega Corporation, 77-91
Fabricius H.A. - New German Guidelines for Paternity Testing (2002) Paternity Testing Workshop of the ESWG-ISFG, Lisbon
Foreman L.A., Evett I.W. - Statistical analysis to support forensic interpretation for a new ten-locus STR profiling system
(2001) Int J Legal Med 114:147-155
Fung W.K., Hu Y.Q. - Statistic analysis - Encyclopedia of Forensic ADN Legal Medicine (2005) Elsevier, Academic Press
Geada H. & colab. - STR mutations in paternity investigations: a study of 1 year consecutive cases (2003) Progress in Forensic
Genetics 9, Excerpta Medica International Congress Series 1239, Elsevier, Amsterdam, 657-660

Gill P. & colab. - Identification of the remains of the Romanov family by DNA analysis (1994) Nat Genet 6:135-138Gill P. & colab. Report of the European Network of Forensic Science Institutes (ENFSI): formulation ADN testing of principles to evaluate STR
multiplexes (2000) Forensic Sci lnt 108:1-29
58. Gill P.D., Evett l.W. - Population Genetics of short tandem repeats (STR) loci (1995) Genetica 96( 1 2):6987
59. Goodwin W. - Mitochondrial, Enciclopedia of Forensic ADN Legal Medicine (2005) Elsevier, Academic Press
60. Guarducci S. & colab. - Practical application of DNA study for genetic analysis in complex situations involving presumed incest
as cause of Mendelian disorders (2000) Progress in Forensic Genetics 8, Elsevier, Amsterdam, 381-383
61. Guo W.S. & Thompson E.A. - Performing the exact test of Hardy-Weinberg proportion for multiple aleles (1992) Biometrics
48:361-372
62. Gusmao 1. & colab. - Genetic diversity on nine STRs loci in two northwest Iberian populations: Galicia ADN northern
Portugal (2000) Int J Leg Med 114:109-113
63. Hammond H. & colab. - In utero paternity testing following alleged sexual assault (1995) JAMA 273(22): 1774-1777
64. Henke L. & colab. - Usefulness of conventional blood groups, DNA-minisatelites, ADN short tandem repeat polymorphisms in
paternity testing: a comparison(1999) Forensic Sci lnt 103:133-142
65. Henke L., Hoffmann P.H., Henke J. - Use of DNA polymorphism in forensic paternity evaluation (1990) Zeitschr Rechtsmedizin
103(4):235-248
66. Holland M.M. & colab. - Mitochondrial DNA sequence analysis of human skeletal remains: identification of remains from the
Vietnam War (1993) Forensic Sci lnt 38: 542-553
67. Huckenbeck W, Rand S. - Serological findings ADN efficiency of DNA profiling in transfused patients ADN their significance
for identity ADN paternity tests (1994) Int J Leg Med 106:178-182
68. Huhne J., Pfeiffer H., Brinkmann B. - Heteroplasmic substitutions in the mitochondrial DNA control region in mother ADN
child samples (1998) Int J Leg Med 112: 27-30
69. Huhne J., Pfeiffer H., Waterkamp K., Brinkmann B. - Mitochondrial DNA in human hair shafts - existence of intra-individual
differences? (1999) Int J Leg Med 112:172-175
70. Huo Y. - How many STR markers are enough for paternity identification(2000) Progress in Forensic Genetics 8, Elsevier,
Amsterdam, 384-387
71. Inman K, Rudin N - An Introduction to Forensic DNA Analysis (1997) CRC Press
72. Ingvarsson S.& colab. - Population Studies ADN Validation of Paternity Determinations by Six Microsatellite Loci
(2000) J Forensic Sci lnt 45(3):692-694
73. Ionescu L., Sandu D. - Identificarea criminalistic (1990) Edit. tiinific, Bucureti, 9-122
74. Isenberg A.R., Moore J. - Mitochondrial DNA Analysis at the FBI Laboratory (1999) Forensic Science Communications vol.l,
no.2 (www.fbi.govl
75. Jeffeys A.J., Brookfield J.F.Y., SemmenofF R. - Positive identification of an immigration test-case using human DNA
fingerprints (1985) Nature 317:818-819
76. Jeffeys A.J., Wilson V, Thein S.L. - Hypervariable minisatelite regions in human DNA (1985) Nature 317:67-73
77.
Jeffreys A.J., Royle N.J., Wilson V, Wong Z. - Spontaneous mutation rates of new length alleles at tandem repetitive
hypervariable loci in human DNA (1988) Nature 332:278-281
78. Jehaes E. & colab. - Evaluation of a decontamination protocol for hair shafts before mtDNA sequencing^ 1998) Forensic Sci lnt
94:65-71
79. Jobbling M.A. - In the name of the father: surnames ADN genetics (2001) Trends Genet 17(6):353356
80. Jobbling M.A. - Surnames ADN genetic structure: a molecular analysis using Y-chromosomal DNA polymorphisms
(2001) Report for a Welcome Trust funded Project, www.leicester.ac.uk/genetics/
81. Jobbling M.A. - The Y Chromosome as a marker for the history ADN structure of human populations(2000) Report for a
Welcome Trust funded Project, www.leicester.ac.uk/genetics/
82. Jobbling M.A., Pandya A., Tyler-Smith C. - The Y chromosome in forensic analysis ADN paternity testing (1997) lnt J Legal
Med 110:118-124
83. Jumbelic M.I. - Mass Disasters - Role of Forensic Pathologist, Encyclopedia of Forensic ADN Legal Medicine (2005) Elsevier,
Academic Press,
84. Kayser M. & colab. - Characteristics ADN Frequency of Germline Mutations at microsatellite Loci from the Human Y
Chromosome, as revealed by direct Observation in Father/Son Pairs (2000) Am J Hum Genet 66:1580-1588
85. Kayser M. & colab. - Evaluation of Y-chromosomal STRs: a multicenter study (1997) Int J Legal Med 110:125-133
86. Kendrew J. - DNA typing - The Encyclopedia of Molecular Biology (1995) Blackwell Science Ltd., Oxford, 286-294
87. Kirby L.T. - DNA fingerprinting (1990) Stockton Press
88. Knibieler Y- Les pres aussi ont une histoire... (1987) Hachette, Paris
90. Knijff P. & colab. - Chromosome Y microsatellites: population genetic ADN evolutionary aspects (1997) Int JLegal Med
110:125-133

91.

Krawcazk M. - Statistical Inference from DNA Evidence (1999) DNA Profiling ADN DNA Fingerprinting, Birkhauser Verlag,
Basel, 229-224
92. Krawcazk M., Schmidtke J. - DNA Fingerprinting (1994) BIOS Scientific Publishers Ltd., Oxford, 61-75
93. Krawczak M., Schmidtke J. - Origin ADN maintenance of DNA polymorphism (1994) DNA Fingerprinting, BIOS Scientific
Publishers Limited, Oxford, 17- 60
94. Labrusse C., Cornu G. - Droit de la filiation et progrs scientifique - perspectives conomiques et juridiques (1982) Edit.
Economica, Paris
95. Lander E.S., Budwole B. - DNA fingerprinting dispute laid to rest (1994) Nature 37L735-738K
96. Lehrman S. - Prisoners DNA database ruled unlawful (1998) Nature 394:815
97. Levin B.C. & colab. A human Mitochondrial DNA Reference Material for Quality Control in Sequencing - Technical
Highlights Report, ww.cstl.nist.gov/div831 /biotech/1999
98. Lincoln P.J., Thompson J. - Forensic DNA profiling protocols (1998) Humana Press, Totowa, NJ
99. Ludes B. & colab. - Medico-legal investigations of the Airbus A320 crash upon Mount Sainte-Odille (1994) Forensic Sci Int
39:1147-1152
100. Ludes B., Mangin P. - Prsentation des rsultats (1992) Les empreintes gntique en mdecine lgale, Edit. Lavoisier, Paris, 107114
101. Maximilian C., loan D.M. - Genetica medical (1986) Edit. Medical, Bucureti, 49-76
102. Maximilian C. - Drumurile speranei (1989), Edit. Albatros, Bucureti
103. Maximilian C., Milcu S, Poenaru S - Fascinaia imposibilului (1994) Biotica - Editis, Bucureti
104. McKeown B. & colab. - Automation in Paternity Testing (2000) AstraZeneca Cellmark Diagnostics
105. McPherson M.J. - PCR - practical approaches (1992) Oxford University Press, Oxford
106. Meissner C., N. von Wurmb, Oehmichen M. - Detection of age-dependent 4977 bp deletion of mitochondrial DNA - a pilot
study (1997) Int J Leg Med 110:288-291
107. Midie A. & colab. - DNA typing in cases of blood chimerism (1999) Int J Leg Med 112:333-335
108. Milroy C.M. - Mass Disasters - Principles of Identification (2005) Encyclopedia of Forensic ADN Legal Medicine Elsevier,
Academic Press
109. Moraru L, Antohi S. - Introducere n Genetica Medical (1966) Edit. Medical
110. Morling N. & colab. - Paternity Testing Commission of the International Society of Forensic Genetics: Recommendations on
genetic investigations in paternity cases (2002) Report (draft) to the Paternity Testing Workshop of the ESWG-ISFG, Lisbon
111. Olaisen B. & colab. - Identification by DNA analysis of the victims of the August 1996 Spitsbergen civil aircraft disaster (1997)
Nat Genet 15(4):402^105
112. Panaitescu V., Nazat M., Rou M. - Identificarea victimelor n catastrofe (1996) Rev Med Legal (4)2:154-158
113. Panke E. & colab. - Stopping Parentage Tests Probability of paternity of 99%: Clinical Studies Show Potential for false Positive
Results (2000) Progress in Forensic Genetics 8, Elsevier, Amsterdam, 387-389
114. Parson W., Parson T.J., Scheitauer R., Holland M.M. - Population data for 101 Austrian Caucasian mitochondrial DNA d-loop
sequences: Application of mtDNA sequence analysis to a forensic case (1998) Int J Leg Med 111:124-132
115. Pfeiffer H., Huhne J., Ortman C., Waterkamp K., Brinkmann B. - Mitochondrial DNA typing from human axillary, pubic ADN
head hair shafts - success rates ADN sequence comparisons (1999) Int J Leg Med 112:287-290
116. Pfizinger H., Ludes B., Mangin P. Sex determination of forensic samples: coamplification ADN simultaneous detection of a Yspecific ADN X-specific DNA sequence (1993) Int J Leg Med 105:213-216
117. Piercy R., Sullivan K.M., Benson N., Gill P. - The application of mitochondrial DNA typing to the study of white Caucasian
genetic identification (1993) Int J Leg Med 106:85-90
118. Polesky H.F. & colab. - Systems reported by Laboratories participating in the AABB/CAP Parentage Testing Pro gram: 19931998 (2000) Progress in Forensic Genetics 8, Elsevier Science B.V, 609-611
119. Poltl R. & colab. - Comparison of German Population data on the ApoB-HVR locus with other Caucasian, Asian ADN Black
populations (1996) Forensic Sci Int 80;221
120. Popa M., Constantinescu C., Brbrii L.E., Dermengiu D. - Mitochondrial DNA genotyping - general principles ADN main
applications (2003) Rom J Legal Med 11 (3):41-49
121. Quirin Schiermeier - German sex killings prompt decision to create a DNA database (1998) Nature 392:749
Reeder D.J. (group leader) - DNA Technologies Group - Primary Research Efforts Highlights (2000) http://
www.cstl.nist.gov/div831/DNAtechRittner C., Rittner G., Schneider RM. - DNA ADN Legal Rights in Paternity Testing in
Germany (2000) Progress in Forensic Genetics 8, Elsevier, Amsterdam, 365-367
123. Rousselet F., Mangin P. - Mitochondrial DNA polymorphisms: a study of 50 French Caucasian individuals ADN application to
forensic casework (1998) Int J Leg Med 111:292-298
124. Saioth H. & colab. - The different mobility of complementary strands depends on the proportion AC/GT(1998) Forensic Sci Int
91:81-90
125. Saldeen A - A modified method for calculating the probability of paternity on the basis of the paternity index (1981)

Scandinavian Studies in Law- yearbook

126. Saldeen A - Jurimetrics ADN the ascertainment of paternity (1981) Anegvist & Wiksell International Publishers, Uppsala
127. Santos E.J.M. - Statistical Approaches ADN Methods in Population Genetics Using Microsatellite Data (1999) DNA Profiling
ADN DNA Fingerprinting, Birkhauser Verlag, Basel, 215-228
128. Santos FR., Carvalho-Silva D., Pena S. - PCR based DNA Profiling of Human Y Chromosomes (1999) DNA Profiling ADN DNA
Fingerprinting, Birkhauser Verlag, Basel, 133-152
129. Schlotter C. - Are microsatellites really simple sequences? (1998) Current Biol 8(4);322-329
130. Schlotter C., Zangerl B. - The Use of Imperfect Microsatellites for DNA Fingerprinting ADN Population Genetics (1999) DNA
Profiling ADN DNA Fingerprinting, Birkhauser Verlag, Basel
131. Schneider P.M. & colab. - Results of a collaborative study regarding the standardization of the Y-linked STR system DYS385 by
the EDNAP group (1999) Forensic Sci Int 102:159-165
132. Scripcaru C., Scripcaru G., Botez S., Furnic C. - Epistemologia, adevr judiciar i bioetic expertal (2005) Rev Rom Bioetic
3(1)
133. Scripcaru G., Scripcaru C., Covaliuc M. - Justiie, adevr tiinific i progres social (2004) Rev Rom Bioetic 2(2)
134. Seo Y. & colab. - Sequence polymorphism of mitochondrial DNA control region in Japanese (1998) Forensic Sci Int 97:155-164
135. Sieglova M. & colab. - Fatherless cases in our paternity expertise praxis (2000) Progress in Forensic Genetics 8, Elsevier,
Amsterdam, 369-370
136. Skorecki FR. & colab. - Y chromosomes of Jewish priests (1997) Nature 385:32
137. tefanescu D.T., Brbrii L. - Un mijloc de prob revoluionar/amprent genetic (2001) Dreptul seria III (9):98-107
138. Steighner R.J., Holland M. - Amplification ADN sequencing of Mitochondrial DNA in Forensic Casework (1998) Methods in
Molecular Biology, vol. 98: Forensic DNA profiling protocols, Humana Press, Totowa, NJ, 213-221
139. Steinlechner M. & colab. - Population genetics of ten STR loci (SGM plus) in Austria (2001) Int J Leg Med 114:288- 290
140. Steinlechner M. & colab. - Population genetics of ten STR loci (AmpFISTR SGM plus) in Austria (2001) Int J Legal Med 114:
288-290
141. Sullivan K.M., Hopgood R., Gill P. - Identification of human remains by amplification ADN automated sequencing of
mitochondrial DNA (1992) Int J Leg Med 105:83-86
142. Tagu D. - Principes des techniques de biologie molculaire (1999) INRA, Paris
143. Taroni F, Mangin P. - Linterprtation de la preuve scientifique: les juristes, les scientifique et les probabilits (1998) Mdecine
& Droit 30:6-15
144. Thomson A. & colab. - Validation of Multiplex STR Systems for the investigation of parentage an other Familial Relationships
(2000) Progress in Forensic Genetics 8, Elsevier, Amsterdam, 374-376
145. Trent R.J.- Forensic Medicine (1993J Molecular Medicine - An Introductory Text for Students, Churchill Livingstone, Logman
Group, Edinburgh, 179-192
146. Wagner G.N. & Froede R.C. - Forensic identification in mass disaster
147. Walker R., Coffey M., Kodali R. - Association of individual sociodemografic factors with paternity tests results (1994)
Advances in Forensic Haemogenetics no.5, Springer Verlag, Berlin, 23-25
148. Whitaker J.P. & colab. - STR typing of bodies from a mass disaster high success rate ADN characteristic amplification patterns
in highly degraded samples (1995) Biotechniques 18:670-677
149. Wiegand R, Lorente J., Brinkmann B. - DNA investigations on fetal material from paternity cases (1991) Int J Leg Med
103:276-279
150. Wilson M.R. & colab. - Validation of mitochondrial DNA sequencing for forensic casework analysis (1995) Int J Leg Med
108:68-74
152. Wilson M.R., Polanskey D., Replogle J., DiZinno J. & Budwole B. - A family exhibiting heteroplasmy in the human
mitochondrial DNA control region reveals both somatic mosaicism ADN pronounced segregation of mitotypes (1997) Hum
Genet 100:167-171
153. www.biologv.washington.edu/fingerprint - DNA 101- What is it? (1998)
154. www.cstlnist.gov/biotech/strbase - Brief Introduction to STR (2000)
155. www.fbi.pov/hq/lab/lab.home
156. *** - DNA recommendations - 1992 report concerning recommendations of the DNA Commission of the International Society
for Forensic Haemogenetics relating to the use of PCR-based polymorphisms (1992) Int J Legal Med 105:63- 64
157. *** - Men in genes - The how ADN Y of human evolution (1998) Welcome News (17Q4):24-26
158. *** - Y-Chromosome STRs www.cstl.nist.gov/strbase/v strs.htm
159. ***Annual Report Summary for 1998 - Prepared for the Parentage Testing Standards Program Unit (1998) www.aabb.org
160. ***World Health Organization - Proposed international guidelines on ethical issues in medical genetics(1997) Geneva

BC.U "M EMINESCU"IASI

Vladimir Beli

Ligia Brbrii

Prof. de Medicin Legal

Membru titular al Academiei de tiine
Medicale

Dr. n Medicin
Medic primar legist
Coordonator al Laboratorului
de Genetic al Institului Naional de Medicin
Legal
Mina Minovici

GENETICA JUDICIAR
t C. r
de la teorie la practic
'

418921
B.C.U.

IAI

EDITURA MEDICAL
Bucureti, 2007