Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
FIZICO-CHIMICE ALE
PROTEINELOR
Obiectivele:
Proprieti fizico-chimice
Masa
molecular
Solubilitatea proteinelor
Proprietile amfotere
Sarcina electric a proteinei
Denaturarea
intre
Masa molecular
a proteinelor
Masa molecular
a proteinelor
1.
2.
3.
4.
5.
Proprietile
electrochimice ale
proteinelor
Sarcina electric a
proteinelor
Proteinele prezint
polielectrolii amfoteri
Sarcina electric a
proteinelor
Sarcina electric a proteinelor
este determinat de 2 factori:
I. de componena AA
II. de pH mediului
CONCLUZIE:
A.
Proteina neutr
n mediu acid sarcina sumar va fi
pozitiv
n mediu bazic sarcina sumar va fi
negativ
Datorit acestui fapt la trecerea unui
curent electric n soluie, AA vor migra n
mediu acid spre catod(-), iar n mediu
alcalin spre anod(+).
Punct izoelectric
CONCLUZIE:
pHi
Pentrui
CONCLUZIE:
Sarcina proteinei
La un pH mai acid ca valoarea pHi
proteina capt o sarcin pozitiv
(cation) i migreaz spre catod(-);
la PH mai mare ca pHi proteina
capt o sarcin negativ i migreaz
spre anod(+)
Solubilitatea proteinelor
Proteinele
- substane cu proprieti
hidrofile
Solubilitatea variaz n limite mari:
- Proteinele globulare prezint
grade diferite de solubilitate,
- cele fibrilare sunt insolubile n
ap
Componena aminoacidic
Forma moleculei
Sarcina proteinei
Natura solventului
Temperatura solventului
pH-ul solventului
Solubilitatea
este influienat de:
Prezena srurilor metalelor
uoare NaCl, MgCl2, Na2SO4,
care:
1. la concentraii mici mresc
solubilitatea proteinelor
2. la concentraii mari scad
solubilitatea proteinelor i ele
precipit. Acest proces se
numete salifiere.
electric determin
respingerea moleculelor proteice
ncrcate pozitiv sau negativ.
membrana apoas care ndeprteaz
moleculele proteice una fa de alta
impiedicnd agregarea i precipitarea
lor.
Membrana hidric
Proprietile coloidale
i osmotice ale
proteinelor
Proteinele
sunt substane
macromoleculare,solubile, la dizolvarea
crora se formeaz soluii coloidale
proteice.
Spre deosebire de soluiile coloidale
obinuite, soluiile proteice nu necesit
prezena stabilizatorului. Soluiile
proteice sunt stabile i cu timpul nu se
precipit.
1.
2.
Proprietile optice
efectul Tindal - la iluminarea lateral a soluiei
proteice raza de lumin n ea devine vizibil,
formnd conul de lumin.
Acest efect de dispersie a luminii se explic prin
difracia razelor de lumin de ctre particulele n
soluie.
Capacitatea proteinelor de a dispersa lumina
este folosit:
la determinarea cantitativ a proteinelor prin
metoda nefelometric
la studierea microscopic a structurilor celulare.
Viscozitate mare
1.
2.
Proprieti osmotice
proteine
fiind macromolecule nu
difundeaz prin membrane
semipermiabile, pe cnd
micromoleculele trec prin
asemenea membrane. Acest
proces e numit dializ.
Proprieti osmotice
Incapacitatea
Proprietatea de a forma
geluri
Proteinele
geluri.
Moleculele proteinei interacioneaz ntre ele
formnd reele structurale n interiorul crora se
imobilizeaz apa.
Gelatinizarea are loc mai uor n sol. pr. fibrilare
Formarea de gel se observ la coagularea
sngelui (formarea reelei de fibrin).
La nvechirea gelurilor are loc sinerezisa
expulzarea apei, datoprit contraciei mol din
reea i eliminarea apei.
Formarea gelului
depinde de :
concentraia
soluiei (odat cu
creterea concentraiei);
temperatur (la scderea
temperaturii);
concentraia ionilor de hidrogen (n
punctul izoelectric se observ o vitez
maxim de formare a gelului);
prezena electroliilor (Ionul SO42contribuie n mod preferat la
transformarea solului n gel).
Xerogel
este
Denaturarea
proteinelor
Sub
Agenii denaturani
se
Trsturile proteinei
denaturate:
pierderea activitii biologice
micorarea solubilitii
schimbarea formei i mrimii
moleculelor
creterea reactibilitii unor grupe
pierderea capacitii de a se
cristaliza
Substanele ce pot
mpedica denaturarea
soluii
de glucide
glicerina
a. grai
Pentru a evita denaturarea proteina
se pstreaz la rece, n soluii
concentrate de sruri la un pH anumit
Renaturare (renativare).
-
FOLFING I REFOLDING
FOLDING
aranjarea
spaial corect de
novo a catenei:
Metodele de studiere a
componenei calitative i
cantitative a proteinelor
a)
Cromatografie
- este identificarea i separarea aminoacizilor.
Principiul:
Electroforeza
-
migrrii Pr
depinde de pH-ul
mediului; Pr fiind
electrolii amfoteri n
mediul acid ele posed
sarcin + i se mic
spre C, n mediul bazic
posed sarcin
-migreaz spre A.
Electroforeza
-
Electroforeza
SALIFIEREA
Salifierea
SALIFIEREA
Salifierea
Asupra
vitezei de precipitare
a proteinelor prin salifiere
acioneaz un ir de factori
ca: hidrofilitatea proteinei,
masa molecular, sarcina
electric; de aceea salifiere
diferitelor proteine are loc n
concentraii diferite de sruri.
De exemplu, albuminele se
precipit n soluie saturat
de sulfat de amoniu, pe cnd
globulinele - n soluie
semisaturat
Dializa proteinelor
Dializa
metoda de separare
i purificare a substanelor
macromoleculare de
substane micromoleculare
cu ajutorul membranelor
semipermeabile (celofan,
pergament etc.).
Prin porii acestor membrane
pot trece numai substanele
micromoleculare, ce au mas
molecular i dimensiuni
mici.
Membrana nu poate fi
traversat de proteine i alte
macromolecule.
Dializa proteinelor
Gel filtrare
Sitele
moleculare sunt
formate din granule de
gel polizaharidic inert
hidratat. Granulele
posed pori de diferit
diametru.
Micromoleculele cu
dimensiuni mici ptrund
prin aceti pori,
macromoleculele- nu.
Gel filtrare