ANALIZA CANTITATIVA A HIDROCLOROTIAZIDEI SI

DETERMINAREA UNUI PREPARAT FARMACEUTIC PRIN

METODA HPLC
Articol original aplicat pe 30 Iunie 2014.
Analiza cromatografica a hidroclorotiazidei (HCT) a fost realizata printr-o
procedura simpla de inalta performanta, cromatografia lichida (HPLC), care a fost
dezvoltata pentru determinaea HCT din comprimatele farmaceutice folosind diferite
faze mobile in anumite proportii. Studiile cromatografice ale varietiei semnalului de
detectare HPLC dependent de faza mobila, rata de curgere, lungimea de unda si
temperatura coloanei au fost analizate pentru a gasi conditiile optime
experimentale pentru determinarea HTC. Tehnica dezvoltata HPLC a fost aplicata cu
success in cadrul analizei cantitative a HCT din comprimatele comerciale cu o medie
de refacere de 94,96+/-1,004%
1. INTRODUCERE
Hidroclorotiazida, prin abreviere HCT, HCTZ sau HZT, apartine clasei tiazidelor
droguri care actioneaza prin inhibarea abilitatii rinichilor de a retine apa. Acest
fapt conduce la scaderea volumului sangvin rezultand scaderea aportul de sange
catre inima si scaderea debitului cardiac si, prin alte mecanisme, se crede ca scade
tensiunea vasculara periferica. HCT este folosita in principal pentru tratamentul
hipertensiunii ateriale, insuficienta cardiac, edem simptomatic, diabet insipid,
acidoza tubulara renala si pentru a preveni formarea de calculi renali.
Din punct de vedere chimic, hidroclorotiazida este 6-cloro-3,4-dihidro-2H1,2,4-benzotiadiazina-7-sulfonamida-1,1-dioxid. Formula chimica a HCT este
C7H8ClN3)4S2 si structura sa se poate vedea in Schema 1.
Multe articole publicate au fost dedicate determinari HCT in diferite fluide
biologice si formulari farmaceutice, folosind numeroase tehnici de analiza
instrumentala incluzand spectofotometria , cromatografia, cromatografia lichida cu
detectare UV, HPLC si metode electrochimice. Cu toate acestea, niciun articol
special nu a fost dedicate analizei HCT prin HPLC folosind o faza mobila care contine
metanol : apa (50 : 50 v/v %), alta faza mobila si studiul conditiilor asa cum sunt
communicate in literatura. In plus, aceasta munca a fost depusa pentru a analiza
substanta HCT astfel incat sa se poate dezvolta o metoda HPLC precisa,
reproductibila, eficace si sensibila pentru determinarea HCT din comprimatele
farmaceutice.
2. PARTEA EXPERIMENTALA
2.1 Aparatul

Determinarile cromatografice au fost facute folosind sitemul HPLC (cu

detector UV-Vis si prelevare automata) UltiMate 3000 (Thermo Scientific Dionex,
Statele Unite) cu sistem manual de injectare de 20 microL si coloana C18 (5
microm), conectat la un computer Dell Optiplex 3010 (China). Cromatogramele au
fost printate cu un HP laser jet Pro 200 color M251n, Hewlet-Packard development
company, l.p. (China). Pentru injectarea volumelor de ordinul micro-litrilor de solutie
standard si a prelevarilor de substanta HCT comerciala studiata s-a folosit
micropipeta ajustabila Oxford (Irlanda).

2.2 Materiale si reactivi

In general, toti solventii pentru HPLC erau de grad de puritate HPLC si
substantele chimice erau folosite fara alte purificari suplimentare. Hidroclorotiazida
a fost preparata ca solutie stoc potrivita pentru studiile HPLC. Metanol HPLC filtrat la
gradul 0,2 microni (Fisher Scientific, produs Trinidad, New Jersey) a fost folosit ca
faza mobile. Ca solvent pentru solutia standard de hidroclorotiazida, comprimate de
hidroclorotiazida ,s-a folosit apa, iar apa din faza mobila a fost mereu distilata
pentru a indeplini conditiile studiului cromatografic.
2.3 Conditii HPLC
Faza mobila a reprezentat initial un amestec de metanol, apa si acetonitril.
Rezultatele au aratat ca H2O : MeOH (50 : 50 v/v %) a fost cea mai potrivita faza
mobila pentru determinarea cromatografica a HCT. Conditiile de lucru au fost dupa
cum urmeaza: rata de curgere 1mL/minut, temperatura coloanei 30 grade C,
lungimea de unda a detectorului 254 nm,

volumul de injectie 20 microL, coloana HPLC C-18 (5 microm). Volume egale (10
microL) din solutia preparata si prelevari au fost injectate in coloana. Timpul initial
de curgere al HPLC a fost de 5 min. Ca rezultat, 2,83 minute a fost ales ca timp
optim pentru operarea tuturor determinarilor cromatografice pentru substanta
hidroclorotiazida.
2.4 Prepararea solutiei stoc
Hidroclorotiazida ( Qassim Pharmaceutical Plant Buraydah, Spamico
Addwaeih, Buraydah, Arabia Saudita) solutie stoc de concentratie 1 x 0,001 mol/L a
fost preparata prin dizolvarea volumului potrivit de HCT in apa distilata intr-un
flacon de 50 mL. Aceasta solutie a fost tinuta la intuneric. Concentratiile mici de
solutii standard de substanta HCT au fost preparate prin diluarea solutiei stoc
folosind apa distilata printr-un proces de analiza.
2.5 Prepararea comprimatului simplu
Continutul din comprimatele de HCT disponibile comercial (Monizide 25 care
contine 25 mg HCT, Jordanian Pharmaceutical Manufacturing Co., Jordan) au fost
procurate din farmaciile locale din Arabia Saudita. 10 tablete cu un continut de 250
mg HCT fiecare au fost alese si dizolvate in apa distilata, apoti transferate intr-un
flacon de 50 de mL. Solutia a fost tinuta pana cand s-a prods dizolvarea complete a
HCT apoi a fost filtrata pentru a indeplini cerintele studiului HPLC. Toate prepararile
si masuratorile cromatografice s-au facut la temperatura camerei (25 grade C).