Universitatea din Petrosani Facultatea de mine Specializarea: Ingineria si Protectia Mediului in Industrie

METODE DE SEPARARE PRIN

METODE CROMATOGRAFICE

COORDONATOR: Prof.univ.dr.ing.TRAISTA EUGEN

STUDENT: ICLANZAN RAUL -Nicolae

METODE CROMATOGRAFICE
Scopul metodelor de separare
Metodele de separare aplicate sistemelor chimice, au ca scop separarea sau mprirea unui amestec eterogen sau omogen n unitile sale individuale, n componente sau chiar n elemente. Diferitele metode de separare aplicate se bazeaz pe principii chimice i fizice fundamentale binecunoscute. n ultimul timp, domeniul n care se utilizeaz metodele de .separare a cunoscut o lrgire continu, elaborndu-se totodat noi metode de separare. Astfel, multe amestecuri care n trecut erau considerate imposibil sau foarte greu de separat sunt acum separate folosindu-se metode care au intrat n rutin. Ca exemplu pot fi amintii aminoacizii, pmnturile rare, izolarea a 10 pn la 40 de atomi ai elementelor transuraniene, izotopi, serii omoloage de molecule organice, mineralele din ap . Separarea poate fi considerata ca un pretratament al probei, prin care sunt ndeprtai componenii, care provoac interferene, pe parcursul determinrii. Aadar, este necesar s se determine fiecare component al probei care trebuie izolat cu ajutorul unui procedeu de separare. n consecin, se poate alege o metod de analiz care se bazeaz numai pe determinarea cantitii componentului prezent, n caz contrar, metoda aleas trebuind s in cont de posibilele interferene. Din acest motiv, metodele de separare confer o selectivitate sporit pentru metodele chimice i instrumentale obinuite. Procedeele de separare pot fi utilizate pentru purificare, identificare calitativ sau pentru determinare cantitativ.Aa dup cum s-a menionat, exist diferite procedee de separare, unele cunoscute de foarte mult timp (gravimetria i distilarea), n timp ce altele au fost elaborate recent (cromatografia de gaze i cromatografia n strat subire).

Cromatografia
Dintre toate metodele de separare, cromatografia are o poziie unic, putnd fi aplicat tuturor problemelor din toate domeniile tiinei, avnd o dezvoltare de-a dreptul exploziv n ultimii 30 de ani. Cromatografia prezint anumite trsturi comune tuturor metodelor cromatografice . Clasificarea cromatografiei. Cromatografia poate fi mprit n urmtoarele domenii generale: cromatografia de adsorbie, cromatografia de repartiie, cromatografia de excludere i cromatografia prin schimb ionic. Acestea nu trebuie confundate cu operaiile de laborator. De exemplu, repartiia poate fi fcut pe hrtie (cromatografia pe hrtie), ntro coloan (repartiia pe coloan, faza invers i cromatografia de gaze) sau n strat subire (cromatografia n straturi subiri). Principiul fundamental al repartiiei este acelai n toate aceste cazuri. Diferena const n maniera n care este executat, experimental, efectul de repartiie. n continuare, trebuie s se in seama de tipul fazelor prezente. Toate procedeele cromatografice implic o faz mobil, care trece peste o faz staionar. Aadar, solutul este distribuit ntre cele dou faze, motivul particular pentru modul n care are loc distribuia, reprezentnd cheia sistemului cromatografic.

Metode cromatografice
Cromatografia de absorbie pe coloan Cromatografia de repartiie pe coloan Cromatografia pe strat subire Cromatografia pe hrtie Cromatografia de lichide cu nalt presiune Cromatografia prin schimb ionic Cromatografia de gaze Distribuia solutului ntre o faza solid i o faz lichid pe o coloan Distribuia solutului ntre dou lichide pe o coloan Adsorbia sau repartiia pe n strat subire plan Repartiia pe o suprafa de hrtie plan Cromatografia de lichide pe coloan efectuat sub o presiune interioar ridicat Schimbul de ioni Distribuia unui solut gazos ntre un gaz i o faz lichid sau gazoas

Cromatografia de adsorbie i de repartiie. n tabelul 1.2 sunt prezentate tipurile combinaiilor de faze. n general, distribuia solutului ntre cele dou faze poate fi descris aa cum s-a artat n figura 1.1. Cazurile a) i b) din figura 1.1 sunt similare prin aceea c ambele implic interaciuni de suprafa. Acest tip de interaciune (adsorbie) este rezultatul forelor intermoleculare dintre atomii de la suprafaa solidului i moleculele solutului exterior, implicnd una sau cteva dintre urmtoarele combinaii: 1. Fore London, ntre toate suprafeele i moleculele adsorbite; 2. Fore electrostatice, ntre suprafeele polare i oricare din moleculele adsorbite sau ntre suprafeele monopolare i moleculele polare adsorbite; 3. Fore de transfer de sarcin, ntre donorii de electroni puternici i acceptori; 4. Formarea legturilor de hidrogen. Tabelul 1.2. Combinaii de faze n cromatografie Faza staionar Solid Solid Lichid Lichid Faza mobil Lichid Gazoas Lichid Gazoas
a)

Tipul procedeului folosit Absorbia, schimb de ionib); excludereb) Adsorbie Repartiie Repartiie

Aceste fore, care conduc la adsorbie fizic, sunt mai slabe dect cele aflate la speciile adsorbite pe cale ionic sau covalent. Acestea din urm conduc la chemosorbie i din punct de vedere al aplicaiilor cromatografice nu sunt la fel de potrivite ca adsorbia fizic. Adsorbanii prezint dou caracteristici importante: faptul c au o mare suprafa i o nalt porozitate. n unele cazuri, acestea sunt influenate de capacitatea absorbantului de a reine n prezena solventului. Repartiia este ilustrat n figura 1.1 c i d. n ambele cazuri, moleculele solutului se afl n echilibru la interfaa care separ faza mobil i faza staionar. n acest caz, solutul este distribuit pretutindeni n faza staionar prin repartiie i nu numai la suprafa, ca n cazul adsorbiei. Rezult deci, c solubilitatea n cele dou faze este o parte important a repartiiei. Dac sistemul ar fi static i nu dinamic, procesul ar fi, n general identic cu extracia cu solveni. Proprietile specifice i generale care influeneaz solubilitatea reprezint parametri importani n mprirea solutului ntre cele dou faze. Aadar, forele care controleaz adsorbia sunt i acelea care influeneaz solubilitatea. De exemplu, legturile de hidrogen, interaciunile dipol-dipol i procesele de transfer de sarcin ntre moleculele de solvent i de solut (procese intermoleculare) influeneaz solubilitatea. n plus, trebuie luate n considerare i interaciunile solut-solut i solvent-solvent (procese intramoleculare).

Figura 1.1. Transferul reversibil al solutului ntre faza staionar i faza mobil; S=solut n cadrul metodelor de repartiie, faza lichid staionar este inut pe coloan ori pe o suprafa plan prin intermediul unui suport inert. Este rezonabil s ne ateptm ca n unele cazuri, suportul inert s poat influena aciunea solutului i s acioneze ca un adsorbant. n mod similar, n adsorbie, adsorbantul poate s rein ceva din faza lichid mobil ca o faz staionar i s produc un efect de repartiie. Aadar, adeseori procesele cromatografice nu reprezint repartiii sau adsorbii pure.

Cromatografia de excludere. Cromatografia de excludere cuprinde acele procedee cromatografice n care separarea componenilor probei are loc conform mrimii moleculare. Unele dintre aceste metode au fost dezvoltate recent i n prezent este convenabil s fie mprite n dou tipuri: penetraia n gel i separarea pe site. La penetraia n gel, separarea are loc n funcie de mrimea moleculelor solutului. Prin aceasta metod pot fi separate att amestecuri de componeni cu mas molecular redus, ct i componeni cu mas molecular mare. Metoda a fost utilizat cu mare succes n separarea zaharurilor, polipeptidelor, proteinelor, lipidelor, asfalturilor, cauciucurilor butilice, polietenelor, polistirenilor, polimerilor siliconici etc. De asemenea, este posibil ca, dup o calibrare adecvat, s se determine masele moleculare ale diferiilor polimeri, cu lanuri lungi, dintr-un amestec. Suporii solizi (geluri) utilizai sunt formaiuni tridimensionale de lanuri de polimeri legate n cruce. Aceste geluri sunt capabile s se mbibe ntr-un anumit solvent i, pe msur ce structura gelului se umfl, cresc spaiile dintre lanurile de polimer. Pentru un anumit gel, va exista o mrime critic precis a unei molecule care poate s ptrund n interior. Moleculele mai mari vor trece nestnjenite prin coloan, n timp ce moleculele mai mici dect mrimea critic vor fi ntrziate, n mod difereniat, n funcie de mrimea lor. n afar de factorii de mrime (masa molecular, molecul liniar, molecul spiralat etc.) trebuie luat de asemenea n considerare i rolul factorilor de adsorbie, de repartiie i electrici.

Cromatografia prin schimb ionic. n cromatografia prin schimb ionic exist posibilitatea unui schimb de ioni reversibil ntre ionii dintr-o faz lichid (faza mobil) i o substan solid, insolubil coninnd ansambluri ionice (faz solid). Zeoliii pot aciona ca schimbtori de ioni. n mod obinuit, n zeolit, M este un ion de sodiu i poate fi schimbat cu ali cationi. (Acesta este principiul dedurizrii apei. Zeoliii sunt adesea folosii pentru a schimba ionii de Na+ cu ionii de Ca2+, Mg2+, Fe3+ i ali cationi multivaleni aflai n apa dur). Exist cteva tipuri de schimbtori de cationi i anioni naturali i sintetici n general, faza solid poate fi descris ca o matrice polimeric, o reea cristalin sau o substan natural modificat coninnd grupri fixe de ioni i contraioni mobili cu sarcin opus. Aceste faze solide sunt insolubile, permeabile, schimb ionii pe baze stoechiometrice i tind s prezinte o selectivitate bine definit pentru un ion fa de altul. Schimbtorii cationic schimb cationi. n timp ce schimbtorii anionici schimb anioni:
R CH M R CM H

(1.1) (1.2)

R OH Cl A

R Cl OH A

unde RC i RA sunt schimbtori cationici i anionici coninnd ansambluri de ioni negativi, respectiv pozitivi. Introducerea conceptului de schimb ionic a aprut n 1850 cnd a fost descris pentru prima oar schimbul ionic din sol. Totui, din punct de vedere al chimiei analitice, pentru chimistul analist schimbul ionic a devenit important de abia dup 1935. Atunci au fost sintetizai pentru prima dat schimbtori de ioni polimerici capabili s schimbe ioni. Aceti schimbtori aveau o nalt capacitate de schimb, erau penetrai rapid de ctre solveni, posedau stabilitate i ofereau rspunsuri reproductibile.

Cromatografia de gaze Cromatografia de gaze reprezinta acea tehnica cromatografica ce utilizeaza o faza mobila gazoasa si o faza stationara lichida sau solida. Este cea mai utilizata tehnica cromatografica, deoarece prezinta o serie de avantaje care i confera o adaptabilitate deosebita la problemele care pot apare n timpul analizei amestecurilor complexe de componente. Astfel, prin utilizarea unui gaz drept faza mobila se realizeaza un transfer de masa rapid ntre faza mobila si faza stationara, ceea ce permite stabilirea echilibrelor de distributie de multe ori ntr-un interval scurt de timp si obtinerea unor separari eficiente corelate cu timp de analiza redus. Vscozitatea scazuta a gezelor permite utilizarea unor coloane lungi si nguste si n consecinta cresterea numarului de talere teoretice. Faza mobila fiind un gaz inert, dupa separare componentele pot fi usor detectate deoarece faza mobila nu interfera la detectie. Daca este cazul, componentele separate pot fi analizate suplimentar prin metode spectroscopice cum ar fi spectrometria de masa sau spectrofotometria n IR.

Singurele limitari ale cromatografiei de gaze sunt determinate de volatilitatea prea scazuta sau instabilitatea termica a componentelor analizate. si aceste dezavantaje pot fi nsa limitate, de exemplu prin transformarea compusilor respectivi n derivati care sa aiba volatilitate mai mare. Tehnica se numeste derivatizare si este larg utilizata n cromatografia de gaze.

Comatografia de lichide Termenul de cromatografie de lichide este utilizat pentru a denumi o gama extinsa de sisteme cromatografice care au n comun faptul ca utilizeaza o faza mobila lichida. Comparativ cu cromatografia de gaze, cea de lichide are avantajul ca permite si analizarea probelor greu volatile sau instabile termic, iar faptul ca si faza mobila participa la separare ofera posibilitati suplimentare pentru realizarea unor separari eficiente. Cromatografia de lichide clasica a fost caracterizata de utilizarea unor coloane cu diametre mari, umplute cu particule de faza stationara de o granulatie fina si prin care faza mobila trecea sub influenta fortei gravitationale. Aceste sisteme, care se mai folosesc azi n separarile cromatografice lichid-solid, au permis realizarea separarii unor amestecuri complexe de substante n conditii foarte bune, nsa viteza de separare este mica iar analiza suplimentara a compusilor separati prin metode spectroscopice este mai dificila. Aparitia cromatografiei de lichide de nalta performanta (HPLC) a permis eliminarea acestor deficiente si chiar impunerea cromatografiei de lichide ca o metoda mai performanta de analiza dect cromatografia de gaze. Principalele avantaje ale cromatografiei de lichide de nalta performanta sunt: Capacitate de separare ridicata Viteza ridicata a separarii Posibilitatea monitorizarii continue a efluentului coloanei Realizarea unor analize repetate si reproductibile utiliznd aceeasi coloana Automatizarea procedurii analitice si a prelucrarii datelor.

Primul cromatograf de lichide modern a fost construit de Csaba Horvth la Universitatea din Yale n 1964 si a tehnica fost denumita cromatografie de lichide de nalta presiune (HPLC). n continuare, termenul care s-a impus a fost cel de cromatografie de lichide de nalta performanta. Prima separare realizata de grupul lui Horvth a fost cea a unor componente ale acizilor nucleici. Dezvoltarea extraordinara a acestei tehnici n ultimii zeci de ani se datoreste n mare masura faptului ca a permis analiza unor compusi care puteau fi separati foarte greu pe alte cai, de exemplu a biomoleculelor. Principalele tipuri de cromatografie de lichide sunt: cromatografia de adsorbtie lichid-solid (LSC) cromatografia de repartitie lichid-lichid (LLC) cromatografia ionica (IC) cromatografia prin excluziune (SEC)a