Chimie Analitica - 2006

Chimie Analitic i Instrumental
Horea Iustin NACU Lorentz JNTSCHI
Academic Pres & AcademicDirect 2006
Horea Iustin NACU
Lorentz JNTSCHI
Academic Pres & AcademicDirect 2006
Chimie Analitic i Instrumental Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
Cuprins 0. Prefa..............................................................................................................................1 1. Informaia Analitic .........................................................................................................3 2. Proba ..............................................................................................................................25 3. Metode chimice de analiz - interferene cu analizele instrumentale ............................43 4. Metode electrochimice...................................................................................................59 5. Metode termice de analiz .............................................................................................87 6. Metode optice de analiz ...............................................................................................95 7. Spectrometria de absorbie n UV-VIS ........................................................................101 8. Spectrometria de absorbie n IR..................................................................................117 9. Analiza prin absorbie atomic (AA) ...........................................................................133 10. Spectrometria de emisie.............................................................................................145 11. Fluorimetria i spectrometria de chemiluminescen.................................................159 12. Nefelometria i turbidimetria.....................................................................................171 13. Refractometria i polarimetria ...................................................................................179 14. Spectrometria de fluorescen X (XRF) ....................................................................185 15. Metode cromatografice - privire de ansamblu ...........................................................201 16. Cromatografia de gaze (GC) ......................................................................................217 17. Cromatografia de lichide de nalt performan (HPLC) ..........................................235 18. Cromatografia ionic (IC)..........................................................................................253 19. Cromatografia planar (TLC) ....................................................................................261 20. Analiz spectral nuclear .........................................................................................271 21. Prelucrarea datelor rezultate din msurtori ..............................................................285 22. Anexe .........................................................................................................................307 23. Bibliografie ................................................................................................................319 24. Index ..........................................................................................................................321
Prefa
Prefa
Lucrarea intitulat Chimie Analitic i Instrumental abordeaz majoritatea metodelor i tehnicilor uzuale de analiz chimic instrumental. Se adreseaz studenilor Facultii de tiina i Ingineria Materialelor, ndeosebi studenilor seciilor de Ingineria Mediului n Industrie, Deformri Plastice i Tratamente Termice i tiina Materialelor, a cror pregtire presupune cunoaterea metodelor de analiz chimic i instrumental. Lucrarea conine capitole de pregtirea probelor pentru analiz, prelevarea i dizolvarea probelor, metode chimice i electrochimice de analiz, metode instrumentale de rezonan magnetic, lsnd ca metodele n faz solid [1] ca microscopia i difractometria s fie detaliate la alte discipline pe care acetia le frecventeaz pe parcursul studiilor. Materialul este prezentat ntr-o manier modern, punndu-se accent pe tratarea sistemic a conceptelor i legilor specifice chimiei i fizicii. Lucrarea i completeaz coninutul cu numeroase trimiteri la literatura de specialitate. Cluj-Napoca, August 2006 Horea Iustin NACU & Lorentz JNTSCHI
[1] Solak H. H. et al., Measurement of strain in AlCu interconnect lines with x-ray microdiffraction, Journal of Applied Physics, 86, 884, 15 July 1999. Chimie Analitic i Instrumental 1
Informaia Analitic Nici un efect a crui exactitate are o valoare mai slab de 10 % nu merit a fi cercetat - Walther Nernst (1864-1941), Chimist fizician german -
Informaia Analitic
Generaliti Se vorbete de o analiz chimic atunci cnd activitatea depus, de o persoan, grup sau organizaie, are drept rezultat cel puin o caracteristic chimic calitativ (adic o proprietate ce indic prezena sau absena unei specii chimice) sau cel puin o cifr care indic un coninut dintr-o specie sau material dat. Ansamblul de operaii i msurtori, plus condiiile experimentale, menite s dea, mcar n parte, compoziia fizico-chimic a unei "probe" din material, produs sau esut biologic, convenim s-l numim sistem analitic. Supunnd un material (numit prob) operaiilor unui sistem analitic, consumnd reactivi i materiale auxiliare (de exemplu detergeni), energie i manoper (lucrul efectiv), se obine rspuns la una din ntrebrile: Este prezent specia (caracteristica) X n prob? n ce cantitate este prezent specia X? A rspunde doar la ntrebarea (a) nseamn a face o analiz chimic calitativ iar a rspunde la ntrebarea (b) nseamn a executa o analiz chimic cantitativ. A rspunde la ambele ntrebri pentru toate speciile cunoscute constituie analiza complet. Dac se urmrete evoluia unei anumite mrimi analitice, n timp, spunem c se realizeaz monitorizare a acesteia. Deci, numim monitorizarea factorilor poluani, msurarea periodic, la intervale predeterminate de timp, a concentraiei unuia dintre factorii poluani ai mediului. Aadar,
O analiz fizico - chimic sau un procedeu de monitorizare se poate defini azi ca un proces de obinere a informaiei analitice la un pre de cost minim.
Caracteristici ca densitatea materialelor, distribuia lor granulometric sau puterea calorific (n cazul unui combustibil de exemplu) nu reprezint concentraii ale unor specii chimice. Determinarea acestora nu reprezint analize chimice fiind totui legate de anumite specii chimice. (De exemplu, substanele organice au proprietatea de a arde sau doar substanele cu molecule mari au vscozitate ridicat). Mrimile n cauz - puterea calorific sau vscozitatea - i alte asemenea caracteristici practice fac obiectul aa-numitor analize tehnice. S-a dovedit pe nenumrate cazuri practice c nelegerea i cunoaterea mai profund, pe baza datelor obinute prin analizele fizico-chimice, a fenomenelor din practic a dus la perfecionarea continu a performanelor organizaiilor (instituiilor guvernamentale sau
Chimie Analitic i Instrumental 3
firmelor private), ale produselor, materialelor sau tehnologiilor. De aceea, instrumentelor analitice (sau aparatelor cu care se execut msurtorile) li s-a asigurat pe plan mondial un loc important n tiin i tehnic, laboratoare de criminalistic, laboratoare clinice, n industria sau comerul de mare tonaj i nu n ultimul rnd n domeniul monitorizrii poluanilor mediului. mbuntirile au fcut instrumentele mai complexe, dar mai simplu de stpnit, de regul asistate de un calculator sau un microprocesor. De aceea, pentru studeni este astzi mai important s neleag principiul funcionrii metodelor de monitorizare, respectiv analiz, locul acestora n practica curent, utilitatea lor. Drept consecin, n cadrul practicii de laborator se are n vedere acomodarea cu cteva tipuri de analize, mai accesibile i nu de a nva modul de amplasare a butoanelor sau de manipulare concret a unui anumit instrument, chiar foarte modern, deoarece concepia acestora se afl ntr-o continu nnoire. Acomodarea cu un nou instrument dureaz, pentru o persoan instruit, un interval de ordinul sptmnilor sau cel mult al lunilor. Iar pn ce un student ajunge s lucreze efectiv, apare un nou instrument i mai modern - deci cel pe care l-a nvat n coal s-a perimat moral. Schematic, un proces prin care se obin analize chimice are o structur asemntoare cu un flux tehnologic i convenim s-l numim de aceea flux analitic. Simplificat la maximum acesta este prezentat n fig. 1. Se remarc faptul c rezultatul unui astfel de flux este o informaie, adic un rezultat nsoit de o eroare. Perturbaii
Material
Proces de analiz X1 X2 Xn Parametri fizico-chimici
Informaie
Fig. 1. Schema bloc a unui flux analitic
Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
Informaia Analitic
Analiza calitativ i cantitativ n trecut, rezultatele analizelor n medicin erau obinute n mod calitativ, de aceea, majoritatea diagnosticelor erau bazate pe simptoame i/sau examinrile cu raze X, dei era cunoscut faptul c multe boli fiziologice erau nsoite de schimbri chimice n lichidele metabolice [2]. Uneori erau utilizate teste pentru a detecta componenii normali sau anormali n diferite probe recoltate pentru analiz. Aceste teste n procedee prin intermediul crora a devenit posibil determinarea cantitativ a componenilor inclui [3,4]. Pe msur ce precizia a crescut i au fost stabilite proporiile normale, a devenit clar c rezultatele de laborator au putut fi folosite n scopul precizrii diagnosticelor [5]. n prezent, pentru examinarea medical general a unui bolnav sau pentru a diagnostica un ansamblu specific de simptoame este nevoie de o serie de analize cantitative ale unor probe recoltate din corpul omenesc. n viitor, astfel de probe se estimeaz c vor deveni din ce n ce mai numeroase, iar rezultatele analizelor vor putea fi la ndemna medicului, jucnd un rol esenial la stabilirea diagnosticului. n ultimul timp, peste dou miliarde de probe sunt executate anual n laboratoarele clinicilor medicale i acest numr crete mereu. Majoritatea acestor teste includ determinarea glucozei, ureei, proteinelor, sodiului, calciului, HCO3-/H2CO3, acidului uric i pH-ului [6-13].
[2] Joyce Michael A., Fraser Marie E., James Michael N. G., Bridger William A., and Wolodko William T., ADP-Binding Site of Escherichia coli Succinyl-CoA Synthetase Revealed by X-ray Crystallography, p. 1725, Biochemistry, Volume 39, Issue 1, January 11, 2000. [3] Clausen Tim, Schlegel Anja, Peist Ralf, Schneider Eva, Steegborn Clemens, Chang Yuh-Shin, Haase Andrea, Bourenkov Gleb P., Bartunik Hans D., and Winfried B., X-ray structure of MalY from Escherichia coli: a pyridoxal 5'-phosphate-dependent enzyme acting as a modulator in mal gene expression; EMBO J., 19, p. 831-842, 2000. [4] Ishikawa Kohki, Mihara Yasuhiro, Gondoh Keiko, Suzuki Ei-ichiro, and Asano Yasuhisa, X-ray structures of a novel acid phosphatase from Escherichia blattae and its complex with the transition-state analog molybdate; EMBO J., 19, p. 2412-2423, 2000. [5] Shewchuk Lisa, Hassell Anne, Wisely Bruce, Rocque Warren, Holmes William, Veal James, and Kuyper Lee F., Binding Mode of the 4-Anilinoquinazoline Class of Protein Kinase Inhibitor: X-ray Crystallographic Studies of 4-Anilinoquinazolines Bound to Cyclin-Dependent Kinase 2 and p38 Kinase, Journal of Medicinal Chemistry, p. 133-138, Volume 43, Issue 1, January 13, 2000. [6] Chakraborty Debashis, Chandrasekhar Vadapalli, Bhattacharjee Manish, Krtzner Ralph, Roesky Herbert W., Noltemeyer Mathias, and Schmidt Hans-Georg, Metal Alkoxides as Versatile Precursors for Group 4 Phosphonates: Synthesis and X-ray Structure of a Novel Organosoluble Zirconium Phosphonate, Inorganic Chemistry, p. 23-26, Volume 39, Issue 1, January 10, 2000. [7] Gabelnick Aaron M., Capitano Adam T., Kane Sean M., Gland John L., and Fischer Daniel A., Propylene Oxidation Mechanisms and Intermediates Using in Situ Soft X-ray Fluorescence Methods on the Pt(III) Surface, Journal of the American Chemical Society, p. 143-149, Volume 122, Issue 1, January 12, 2000. [8] Solak H. H. et al., Measurement of strain in AlCu interconnect lines with x-ray microdiffraction, Journal of Applied Physics, 86, 884, 15 July 1999. [9] Steger-Hartmann T., Lnge R., Schweinfurth H., Environmental Risk Assessment for the Widely Used Iodinated X-Ray Contrast Agent Iopromide (Ultravist), American Society, EESA, p. 274-281, Volume 42, Issue 3. [10] Chapman Wendy Webber, Fizman Marcelo, Chapman Brian E., Haug Peter J., A Comparison of Classification Algorithms to Automatically Identify Chest X-Ray Reports That Support Pneumonia, American Society, JBIN, p. 4-14, Volume 34, Issue 1. Chimie Analitic i Instrumental 5
Analiza mediului nconjurtor tiina mediului nconjurtor se ocup cu schimbrile chimice, fizice i biologice care au loc n mediul nconjurtor prin contaminarea sau modificarea naturii fizice i biologice a aerului, apei, solului, produselor alimentare i deeurilor [14-16]. Analiza acestora precizeaz msura n care aceste transformri au fost provocate de oameni, cum i n ce condiii, aplicarea tiinei i tehnologiei poate controla i ameliora calitatea mediului nconjurtor. n aer, metodele analitice au artat c aproximativ 15% din praful ce se depune i aproximativ 25% din particulele n suspensie aflate n aer reprezint poluani de origine natural. Procentajul exact variaz n funcie de regiunea din care se iau probele [17,18]. Studiul proceselor de ardere a combustibililor ca poluani ai aerului sunt de asemenea o preocupare foarte important. Automobilul a adugat o chiar nou categorie de particule poluante [19-21]. Dezvoltarea metodelor analitice de separare, identificare i determinare a furnizat informaii preioase privind prezena n aer a unor particule poluante ca: var, calcar i praf de
[11] Venezia A. M., Liotta L. F., Deganello G., Schay Z., Guczi L., Characterization of Pumice-Supported AgPd and Cu-Pd Bimetallic Catalysts by X-Ray Photoelectron Spectroscopy and X-Ray Diffraction; American Society, JCAT, p. 449-455, Volume 182, Issue 2. [12] Ohno Youichi, The Scanning-Tunneling Microscopy, the X-Ray Photoelectron Spectroscopy, the InnerShell-Electron Energy-Loss Spectroscopy Studies of M Te2and M3SiTe6(M=Nb and Ta), American Society, JSSC, p. 63-73, Volume 142, Issue 1. [13] Johnson Daniel J. D., Nugent Philip G., Tuddenham Edward G. D., Harlos Karl, Kemball-Cook Geoffrey, Crystallization and Preliminary X-Ray Analysis of Active Site-Inhibited Human Coagulation Factor VIIa (des-Gla), American Society, JSBI, p. 90-93, Volume 125, Issue 1. [14] Jackson Togwell A., West M. Marcia, and Leppard Gary G., Accumulation of Heavy Metals by Individually Analyzed Bacterial Cells and Associated Nonliving Material in Polluted Lake Sediments, Environmental Science & Technology, p. 3795-3801, Volume 33, Issue 21, November 1, 1999. [15] Bishop Gary A., Stedman Donald H., Hektner Mary, Ray John D., An In-Use Snowmobile Emission Survey in Yellowstone National Park, Environmental Science & Technology, p. 3924-3926, Volume 33, Issue 21, November 1, 1999. [16] Fernndez Pilar, Vilanova Rosa M., and Grimalt Joan O., Sediment Fluxes of Polycyclic Aromatic Hydrocarbons in European High Altitude Mountain Lakes, Environmental Science & Technology, p. 3716-3722, Volume 33, Issue 21, November 1, 1999. [17] Taran Y. A., Fischer T. P., Cienfuegos E. and Morales P., Geochemistry of hydrothermal fluids from an intraplate ocean island: Everman volcano, Socorro Island, Mexico, Chemical Geology, p. 51-63, Volume 188, Issues 1-2, 30 August 2002. [18] Aleinikoff John N., Wintsch Robert P., Fanning Mark C. and Dorais Michael J., U-Pb geochronology of zircon and polygenetic titanite from the Glastonbury Complex, Connecticut, USA: an integrated SEM, EMPA, TIMS, and SHRIMP study, p. 125-147, Volume 188, Issues 1-2, 30 August 2002. [19] Shi Ji Ping and Harrison Roy M., Investigation of Ultrafine Particle Formation during Diesel Exhaust Dilution, Environmental Science & Technology, p. 3730-3736, Volume 33, Issue 21, November 1, 1999. [20] Haefliger Olivier P., Bucheli Thomas D., and Zenobi Renato, Comment on "Real-Time Characterization of the Organic Composition and Size of Individual Diesel Engine Smoke Particles", Environmental Science & Technology, p. 3932-3932, Volume 33, Issue 21, November 1, 1999. [21] Reilly Peter T. A., Gieray Rainer A., Whitten William B., and Ramsey J. Michael, Response to Comment on "Real-Time Characterization of the Organic Composition and Size of Individual Diesel Engine Smoke Particles", Environmental Science & Technology, p. 3933-3934, Volume 33, Issue 21, November 1, 1999. 6 Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
Informaia Analitic
ciment, cocs i hidrocarburi policiclice aromatice provenite din cocsificare [22], oxizi de fier de la topirea minereurilor i fluoruri de la procesele metalurgice [23-25]. n tabelul 1 sunt prezentai civa dintre poluanii organici tipici din apele reziduale industriale: Tabelul 1 Componeni organici n apele reziduale industriale Domeniul Componente reziduale n apele uzate minerit, uzine de humus, praf de crbune, ageni de flotaie prepararea minereurilor turntorii cianuri, fenoli, gudroane, praf de crbune prelucrarea fontei i a ageni de umectare i lubrifiani, cianuri, inhibitori, hidrocarburi, oelurilor reziduuri de solveni prepararea crbunilor, humus, praf de crbune, cianuri, rodanine, fenoli, hidrocarburi, cocserii piridine bazice producia de crbune acizi grai, alcooli (n special metanol), fenoli lemn industria petrolier emulsii de uleiuri, acizi naftenici, fenoli, sulfonai past de lemn pentru metanol, cimol, furfurol, hidrai de carbon solubili, acizi fabricarea hrtiei lignosulfonici Viscoz i celuloz xantogenai, semiceluloze alcaline industria hrtiei acizi rezinici, polizaharide, fibre celulozice industria textil ageni de degresare i umectare, ageni de nivelare, apreturi, ageni de ncleiere, acizi grai, acid nitrolotriacetic (trilon), colorani spltorii detergeni, celuloz carboximetilic, enzime, ageni de nlbire, colorani, murdrii, proteine, snge, cacao, cafea, etc. industria pielriei i produi de degradare a proteinelor, spunuri, ageni de tanare, tanailor spun de calciu emulsionat, pr rafinrii de zahr zahr, acizi vegetali, betain, pectin fabrici de amidon compui solubili n ap pe baz de proteine, pectine, hidrai de carbon fabrici de produse lactate proteine, lactoz, acid lactic, emulsii de grsimi, ageni de splare i cltire fabrici de spun i glicerin, acizi grai, emulsii de grsimi grsimi fabrici de conserve componeni vegetali solubili fabrici de bere componeni vegetali solubili, reziduuri de bere, ageni de cltire fabrici de produse acizi grai i aminoacizi, alcooli, hidrai de carbon fermentate abatoare snge, componeni din carne solubili n ap i componeni emulsionai
[22] Swackhamer Deborah L., Schottler Shawn, and Pearson Roger F., Air-Water Exchange and Mass Balance of Toxaphene in the Great Lakes, Environmental Science & Technology, p. 3864-3872, Volume 33, Issue 21, November 1, 1999. [23] Wehner B., Bond T. C., Birmili W., Heintzenberg J., Wiedensohler A., and Charlson R. J., ClimateRelevant Particulate Emission Characteristics of a Coal Fired Heating Plant, Environmental Science & Technology, p. 3881-3886, Volume 33, Issue 21, November 1, 1999. [24] Emmrich Monika; Kinetics of the Alkaline Hydrolysis of 2,4,6-Trinitrotoluene in Aqueous Solution and Highly Contaminated Soils, Environmental Science & Technology, p. 3802-3805, Volume 33, Issue 21, November 1, 1999. [25] Paulson Anthony J., Balistrieri Laurie, Modeling Removal of Cd, Cu, Pb, and Zn in Acidic Groundwater during Neutralization by Ambient Surface Waters and Groundwaters, Environmental Science & Technology, p. 3850-3856, Volume 33, Issue 21, November 1, 1999. Chimie Analitic i Instrumental 7
Au mai fost puse n eviden asfalturi, solveni, monomeri sintetici, cauciucuri butilice i negru de fum. Ali poluani sunt: pulberea de cenu de la termocentralele electrice care utilizeaz crbune sau particule de zgur rezultate din diferite procese industriale [26,27]. Acestei liste complexe de poluani i se pot aduga poluani gazoi ai aerului i particulele datorate unei poluri locale sau accidentale. Apa este un sistem la fel de complex ca i aerul atunci cnd este analizat pentru determinarea componenilor poluani. Ca i n studiul aerului, chimia analitic a jucat un rol important n studiul polurii apei. Operaia de msurare este fundamental n analiz. O msurtoare simpl poate implica proprieti ca: mas, intensitate de curent, tensiune, volum sau timp [28-32]. Alte proprieti msurate n vederea unor analize chimice sunt: absorbia sau emisia de energie [33-35] rotaia optic [36], indicele de refracie [37], constanta de echilibru [38] constanta
[26] Bond T. C., Bussemer M., Wehner B., Keller S., Charlson R. J., and Heintzenberg J., Light Absorption by Primary Particle Emissions from a Lignite Burning Plant, Environmental Science & Technology, p. 3887-3891, Volume 33, Issue 21, November 1, 1999. [27] Gallego-Jurez Juan A., Riera-Franco De Sarabia Enrique, Rodrguez-Corral German, Hoffmann Thomas L., Glvez-Moraleda Juan C., Rodrguez-Maroto Jesus J., Gmez-Moreno Francisco J., Bahillo-Ruiz Alberto, Martn-Espigares Manuel, Acha Miguel, Application of Acoustic Agglomeration to Reduce Fine Particle Emissions from Coal Combustion Plants, Environmental Science & Technology, p. 3843-3849, Volume 33, Issue 21, November 1, 1999. [28] Martin Todd M., Gupta Ram B., and Roberts Christopher B., Measurements and Modeling of Cloud Point Behavior for Poly(propylene glycol) in Ethane and in Ethane + Cosolvent Mixtures at High Pressure, Industrial & Engineering Chemistry Research, p. 185-194, Volume 39, Issue 1, January 4, 2000. [29] Mussari Lelia, Postigo Miguel, Lafuente Carlos, Royo Flix M., and Urieta Jos S., Viscosity Measurements for the Binary Mixtures of 1,2-Dichloroethane or 1,2-Dibromoethane with Isomeric Butanols, Journal of Chemical & Engineering Data, p. 86-91, Volume 45, Issue 1, January 13, 2000. [30] Dunstan Dave E., Stokes Jason, Diffusing Probe Measurements of Polystyrene Latex Particles in Polyelectrolyte Solutions: Deviations from Stokes-Einstein Behavior, Macromolecules, p. 193-198, Volume 33, Issue 1, January 11, 2000. [31] Devireddy Ramachandra V., Barratt Paul R., Storey Kenneth B., Bischof John C., Liver Freezing Response of the Freeze-Tolerant Wood Frog, Rana sylvatica, in the Presence and Absence of Glucose. I. Experimental Measurements, American Society, CRYO, p. 310-326, Volume 38, Issue 4. [32] Lau Ka-Sing, Ngai Sze-Man, Multifractal Measures and a Weak Separation Condition, American Society, AIMA, p. 45-96, Volume 141, Issue 1. [33] Roncin Jean-Yves, Launay Franoise, Bredohl Harald, Dubois Iwan, The Vacuum Ultraviolet Absorption Bands of the Pink Afterglow Spectrum of Molecular Nitrogen Revisited at High Resolution, American Society, JMSP, p. 243-249, Volume 194, Issue 2. [34] Meng Q., Daniels-Race T., Luo Z., McNeil L. E., The polarization sensitivity of optical absorption in tensile strained GaAs/InAlAs double quantum wells, American Society, SPMI, p. 583-590, Volume 25, Issue 4. [35] Baldo M.A. et al., Very high-efficiency green organic light-emitting devices based on electrophosphorescence, Applied Physics Letters, 75, 4, July 5, 1999. [36] Peddle Derek R., Hall Forrest G. and LeDrew Ellsworth F., Spectral Mixture Analysis and GeometricOptical Reflectance Modeling of Boreal Forest Biophysical Structure, Remote Sensing of Environment, p. 288-297, Volume 67, Issue 3, March, 1999. [37] Kendrick Brent S., Kerwin Bruce A., Chang Byeong S. and Philo John S., Online Size-Exclusion HighPerformance Liquid Chromatography Light Scattering and Differential Refractometry Methods to Determine Degree of Polymer Conjugation to Proteins and ProteinProtein or ProteinLigand Association States, p. 136-146, Analytical Biochemistry, Volume 299, Issue 2, 15 December, 2001. 8 Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
Informaia Analitic
vitezei de reacie [39,40] energia de activare [41] sau cldura de reacie [42,43]. Orict de simple sau complexe ar fi aceste msurtori, sigurana, utilitatea, precizia, interpretarea i realizarea lor depind de analist, care trebuie s fie preocupat nu numai de efectuarea analizei, ci i de cum, de ce i unde se utilizeaz n final rezultatele obinute. Analistul are obligaia de a efectua determinri bazate pe procedee sigure, reproductibile i verificate.
[38] Ortiz T. M., Meyer B. A., and Razani A., Empirical Correlation of Equilibrium Separation Factors in the Pd-H2/D2 System with Temperature and Composition, Journal of Chemical & Engineering Data, p. 120123, Volume 45, Issue 1, January 13, 2000. [39] Dillingham Mark S., Wigley Dale B., and Webb Martin R., Demonstration of Unidirectional SingleStranded DNA Translocation by PcrA Helicase, Measurement of Step Size and Translocation Speed, Biochemistry, p. 205-212, Volume 39, Issue 1, January 11, 2000. [40] Laarhoven Lucas J. J. and Mulder Peter, -C-H Bond Strengths in Tetralin and THF: Application of Competition Experiments in Photoacoustic Calorimetry, The Journal of Physical Chemistry B, p. 73-77, Volume 101, Issue 1, January 2, 1997. [41] Mitchell T. E., Hirth J. P. and Misra A., Apparent activation energy and stress exponent in materials with a high Peierls stress, p. 1087-1093, Acta Materialia, Volume 50, Issue 5, 14 March, 2002. [42] Cedeo Fidel Oscar, Prieto Mara M., and Xiberta Jorge, Measurements and Estimate of Heat Capacity for Some Pure Fatty Acids and Their Binary and Ternary Mixtures, Journal of Chemical & Engineering Data, p. 64-69, Volume 45, Issue 1, January 13, 2000. [43] Dai Wenbin, Kojima Kazuo, and Ochi Kenji, Measurement and Correlation of Excess Molar Enthalpies of Carbon Dioxide + 2-Butanol and 2-Propanol Systems at the Temperatures 303.15 K and 308.15 K and at Pressures from 7.0 to 8.5 MPa, Journal of Chemical & Engineering Data, p. 6-10, Volume 45, Issue 1, January 13, 2000. Chimie Analitic i Instrumental 9
Procedeul analitic i alegerea unei metode de analiz Prima etap n realizarea unui procedeu analitic o constituie stabilirea obiectivului care se urmrete. Numai identificnd clar scopul propus, se poate imagina o cale logic care s conduc la rezolvarea corect a problemei [44,45]. Se pot pune mai multe ntrebri. De exemplu: Ce fel de prob este: organic sau anorganic? Ce informaie se caut? Care este precizia cerut? Este o prob mare sau una mic? Componenii de interes sunt majoritari n prob sau sunt constituenii minori? Ce obstacole exist? Cte probe trebuie s fie analizate? Exist echipament i personal corespunztor? O important sarcin care-i revine analistului este de a alege o metod analitic care s conduc la cea mai bun rezolvare a scopului urmrit [46]. Exist cazuri n care libertatea de alegere este limitat; analizele privind apa sau produsele farmaceutice trebuie s fie efectuate prin procedee aprobate de standardele legale [47]. Odat ce este definit obiectivul analizei, trebuie ca la alegerea metodei de analiz s se precizeze o serie de factori cum sunt: domeniul de concentraie, precizia i sensibilitatea cerute, selectivitatea i rapiditatea. n funcie de cantitatea aproximativ de substan care trebuie determinat dintr-o prob, metodele analitice se clasific ca n tabelul 2: Tabelul 2. Clasificarea metodelor analitice n funcie de cantitatea de determinat Metoda Mrimea aproximativ macro 100 mg Semimicro 10 mg Micro 1 mg Ultramicro 1 g Submicro 10-2g n conformitate cu aceast clasificare, metodele chimice se preteaz cel mai bine la determinarea macrocantitilor, iar metodele instrumentale pentru microcantiti.
[44] Srbu Costel, Jntschi Lorentz, Validarea i Evaluarea Statistic a Metodelor Analitice prin Studii Comparative. I. Validarea Metodelor Analitice folosind Analiza de Regresie, Revista de Chimie, Bucureti, p. 19-24, 49(1), 1998. [45] Nacu Horea, Jntschi Lorentz, Hodian Teodor, Cimpoiu Claudia, Cmpan Gabriela, Some Applications of Statistics in Analytical Chemistry, Reviews in Analytical Chemistry (Freud Publishing House), p. 409456, XVIII(6), 1999. [46] Baker G. L., Gollub J. P., Blackburn J. A., Inverting chaos: Extracting system parameters from experimental data, Chaos, p. 528, Vol. 6, No. 4, 1999. [47] Hatton Angela D. and Gibb Stuart W., A Technique for the Determination of Trimethylamine-N-oxide in Natural Waters and Biological Media, Analytical Chemistry, p. 4886-4891, Volume 71, Issue 21, November 1, 1999. 10 Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
Informaia Analitic
Noiuni fundamentale Procedeele de monitorizare, pentru a putea fi comparate cu alte metode de analiz, n vederea nlocuirii sau perfecionrii acestora, sunt individualizate prin caracteristici proprii, dintre care amintim pe cele mai frecvent utilizate: exactitatea, precizia, selectivitatea, sensibilitatea, limita de detecie, durata, costul. n afar de acestea mai exist i alte caracteristici, necesare doar specialitilor, care creeaz noi metode de analiz: analitii, o profesie care se dobndete doar prin pasiunea executrii de analize performante, zi de zi, o perioad de timp de ordinul anilor, indiferent de meseria de baz a celui ce o practic: chimist, fizician, medic, inginer, biolog sau geolog. Exactitatea Este msura ncrederii acordat msurtorii efectuate cu un mijloc de msur. Aceasta se refer la sistemul analitic, n ansamblu, indiferent de locul i timpul msurtorii. Exactitate a se msoar folosind un material (substan) zis etalon - n care ncrederea este deplin. Diferena dintre valoarea adevrat, adic aceea recunoscut unanim, i cea msurat o denumim eroare. Este esenial ca etalonul s fie recunoscut de toate laboratoarele interesate. Exactitatea este msurat i de corelaia ce exist ntre un standard i o prob, la msurtori repetate. n acelai timp, exactitatea estimeaz posibilitatea de apariie a erorilor sistematice. O comparaie intuitiv dintre exactitatea unei analize i trasul la int cu o puc scoate n eviden sensul exactitii (vezi fig. 2).
Fig. 2. Analogie ntre trasul la int cu o arm i o metod de analiz chimic: A - o metod exact; B - o metod precis dar inexact Evaluarea exactitii se face cu ajutorul valorii medii ( x ) a mai multor determinri (i) individuale, xi: x = xi i se exprim n procente ale abaterii acesteia fa de valoarea adevrat, A; urmeaz: Eroarea metodei (%) = 100 - Exactitate (%); Exactitate (%) = x 100/A
11
Precizia Gruparea analizelor individuale n jurul valorii medii se evalueaz prin precizie. Schia de mai jos ne permite s caracterizm dou trageri la int, una precis i alta imprecis (fig. 3). Noiunea de precizie este sinonim cu aceea de reproductibilitate i se exprim tot n procente utiliznd abaterea standard a mediei de selecie sx (sau RSD [48]): Precizia (%) = sx100/ x Prin definiie: sx = (x i -x) n(n-1)
2
unde xi reprezint valoarea numeric a unei analize, x - valoarea mediei tuturor analizelor, n fiind numrul de determinri i reprezint abaterea standard a mediei de selecie, o msur matematic a mprtierii rezultatelor n jurul mediei.
Fig. 3. Ilustrarea preciziei: A-tir precis analog cu o analiz chimic precis, B-tir imprecis analog cu o analiz chimic imprecis Selectivitatea Selectivitatea sau specificitatea este msura n care rezultatul unei analize este influenat de prezena unui alt component. De exemplu, pentru identificarea ionului Ni2+ avem la dispoziie un reactiv numit dimetilglioxim, ce nu reacioneaz cu nici un alt ion. Spunem c aceasta este o reacie specific (i deci metoda este selectiv). Cu alte cuvinte analiza nu este influenat de concentraiile altor ioni aflai n aceeai soluie. Selectivitatea indic, prin valoarea sa, interferena altor ioni (sau, mai general, a altor specii chimice). S notm cu y un semnal dependent de concentraie i fie n numrul de componeni de analizat, fiecare contribuind la cele n semnale diferite: y1, y2, ... , yn, printr-un sistem de ecuaii liniare de forma: y1 = 11C1 + 12C2 + ... + 1nCn y2 = 21C1 + 22C2 + ... + 2nCn
[48] RSD este prescurtarea din l. engl. a termenului relative standard deviation folosit n literatura de specialitate internaional. 12 Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
Informaia Analitic
... yn = n1C1 + n2C2 + ... + nnCn Spunem despre un proces de determinare analitic, care determin n componeni de concentraii C1, C2, ..., Cn, prin msurarea valorilor semnalelor y1, y2, ..., yn, c este total selectiv dac i numai dac elementele diagonalei principale a matricei coeficienilor supus transformrilor elementare, ii (i = 1..n), sunt diferite de zero. Sensibilitatea Dac nu exist interferene i singurul component de analizat are analiza bazat pe funcia y = f(c), numit i funcie de rspuns, exemplificat n fig. 4 pentru o specie oarecare, atunci panta acestei curbe indic chiar sensibilitatea, S:
S=
y c
Fig. 4. Funcie de rspuns
Aceasta depinde, n general, de totalitatea concentraiilor tuturor speciilor chimice ce nsoesc specia de determinat notate cj, care este denumit i matricea probei. Dac proba conine mai muli componeni care toi prezint interes i notm cu i pe unul dintre acetia, avem sensibilitatea Si:
y Si = ji c j ci
La funciile liniare, de forma y = a + bx, cea mai frecvent folosit mrime, n calitate de sensibilitate a analizei, este chiar coeficientul b - panta curbei - adic: S = b. n cazul existenei mai multor funcii liniare msurarea sensibilitii, Hn este chiar determinantul corespunztor coeficienilor funciilor de rspuns (vezi sistemul de ecuaii liniare precedent): Hn = det(), unde matricea coeficienilor ij Pentru analiza chimic instrumental trebuie gsite astfel de condiii experimentale sau de prelucrare a datelor, ca elementele de pe diagonala principal s fie maxime iar restul
egale cu zero sau ct mai mici. Sistemul are n acest caz o sensibilitate i selectivitate mare.
Cu creterea concentraiei, n general, curba de etalonare se aplatizeaz i sensibilitatea scade, de aceea, foarte mult. Din acest motiv componentul major se prefer, de regul, s fie
determinat prin diferen dup ce s-au analizat toate componentele minore. Limita de detecie
Limita de detecie (Cd), reprezint coninutul minim, sigur detectabil. n general, se poate reda sub forma funciei: Cd = f(0 + kdsfond). Valoarea coeficientului de discriminare kd se alege din considerente practice una dintre valorile: kd = 2...6, 0 reprezentnd media zgomotului de fond iar sfond simboliznd abaterea standard a semnalului de fond. n practic, din considerente statistice, cea mai obinuit modalitate de exprimare este aceea cu kd = 3 (fig. 5).
Fig. 5. Reprezentarea semnalului de fond i a calculului limitei de detecie. Valoarea coeficientului de discriminare preferat este 3 Rapiditatea
Se msoar n uniti de timp per analiz iar costul la preul unei analize incluznd: materialele, manopera, chiria laboratorului, amortizarea aparatelor (uzura mijloacelor fixe), costurile reactivilor folosii, energia i apa.
14
Informaia Analitic
Evidena analizelor
Activitatea de laborator este reflectat n registrele de analize. Acestea sunt registre, cu pagini numerotate, n care se trec toate rezultatele analizelor efectuate i semntura executantului sau a celui ce rspunde de analiza respectiv. n mod obligatoriu se nregistreaz data i ora primirii probei, numele celui ce a efectuat analiza, rezultatul, data i ora eliberrii buletinului de analiz. Caietele de laborator, folosite de fiecare co-participant la execuia analizei chimice, conin, pe zile: msurtori, cntriri, calcule etc. se numeroteaz de asemenea, pagin cu pagin, i se pstreaz n arhiv. Acelai sistem este valabil n cazul monitorizrilor cu deosebirea ca datele nu se mai pstreaz doar pe hrtie ci i n memorii ale calculatoarelor, n aa numitele baze de date, din care informaiile nu se pot terge niciodat. Pentru a se putea verifica rezultatele analizelor, n caz de litigii ulterioare referitoare la calitatea probelor ce fac obiectul analizei, fiecare laborator are obligaia de a lua o astfel de cantitate de proba de analizat nct pentru analiz s nu se foloseasc dect cel mult un sfert din cantitatea luat. De asemenea, are obligaia s pstreze restul probei un anumit timp (6 luni) astfel ca proba s nu-i modifice compoziia n acest timp. Probele este bine s fie pstrate n vase speciale, nchise i care se deschid n vederea unei noi analize numai n prezena tuturor prilor interesate. n cazul unor probe prelevate din mediu, concentraiile coborte fac practic imposibil acest deziderat. Buletinul de analiz este actul prin care este certificat compoziia sau calitatea oricrui material, primit pentru analiz de ctre un laborator. Comunicarea telefonic grbete adesea transmiterea informaiei dar nu poate constitui prob ntr-un eventual litigiu.
15
Standarde analitice
n vederea obinerii unor rezultate ale analizelor care s poat fi valabile pentru mai multe uniti (firme, instituii sau uniti economice) pe teritoriul unei ri sau al unui grup de ri, de regul analizele se fac prin metode verificate i adaptate la probe de o anumit categorie. De exemplu, cuprul din oel sau cuprul din prul uman se aseamn n principiu dar reetele difer din mai multe puncte de vedere. n prezent n rile avansate exist organizaii care studiaz i verific metodele de analiz pentru cele mai diverse grupuri materiale. Echivalentul acestora la noi este Institutul Romn de Standardizare. Cele mai potrivite metode sunt recomandate a fi utilizate n toate laboratoarele de acelai tip din ara respectiv. Aceste metode se denumesc metode standardizate i sunt publicate, existnd chiar n unele biblioteci. Acestea prevd toate operaiunile, modul de determinare a fiecrui component - inclusiv formula de calcul (fr a se da explicaii privind principiile) sau instrumentul necesar. Exist ns i standarde care se ocup cu aspecte comune mai multor metode de analiz cum ar fi luarea probei medii pentru diferite materiale, de exemplu probe de sol, de aer de ap, nisip, gru sau minereu. n cazul n care nu s-au elaborat nc reete standard, fiind vorba de un produs nou, analizele se fac pe baza unei norme interne stabilite de comun acord ntre productorul i beneficiarul respectivei analize. Colecia de metode unanim acceptate formeaz un sistem de standarde de analiz chimic i acestea sunt denumite diferit n funcie de ar. De exemplu, ASTM n SUA, DIN n Germania iar n ultimul timp, pentru Comunitatea European, standardele ISO.
16
Informaia Analitic
Tipuri de metode analitice
Metodele analitice de pot clasifica pe tipul i starea fizic a probei, scopul analizei, mrimea probei (tabelul 2) sau dup tipul metodei analitice. Dup acest din urm criteriu, metodele analitice se mpart n metode chimice i metode instrumentale. Metodele chimice se bazeaz pe diferite operaii chimice folosind sticlria uzual de laborator format din aparate simple. n general n aceste metode se msoar masa sau volumul. Metodele instrumentale implic utilizarea unui echipament complex, bazat pe principii electronice, optice sau termice. n aceste cazuri, se msoar diferite proprieti corelate cu compoziia probei. Cele mai bune rezultate se obin prin cuplarea tehnicilor chimice cu cele instrumentale [49]. Fiecare categorie de metode prezint avantaje i dezavantaje, i alegerea metodei sau complexului de metode trebuie s se fac minimiznd interferena dezavantajelor i maximiznd influena avantajelor asupra cerinelor concrete ale analizei de efectuat.
Avantajele metodelor instrumentale: determinarea este foarte rapid; pot fi utilizate
probe mici; pot fi cercetare probe complexe; prezint o sensibilitate ridicat; dau un grad mare de siguran rezultatelor msurtorilor.
Avantajele metodelor chimice: procedeele sunt simple i precise; metodele se bazeaz
n general pe msurtori absolute; echipamentul necesar nu este scump. Din prezentarea avantajelor, nu trebuie s se trag concluzia c metodele instrumentale le-au nlocuit pe cele chimice. n practic, metodele chimice constituie parte integrant dintr-o metod instrumental. Astfel, n orice analiz exist etape ca: prelevarea probelor; dizolvarea; schimbri n starea de oxidare; ndeprtarea excesului de reactiv; ajustarea pH-ului; adugarea de ageni de complexare; precipitarea; concentrarea; ndeprtarea impuritilor. Unele dintre aceste metode implic utilizarea metodelor de separare.
Dezavantajele metodelor chimice: uneori lipsete specificitatea; realizarea unei analize
ia de obicei un timp destul de lung; precizia scade odat cu micorarea cantitilor de prob (msurtori absolute); sunt lipsite de flexibilitate; sunt poluante pentru mediul nconjurtor.
Dezavantajele metodelor instrumentale: este necesar o etalonare iniial sau continu
a aparatului; sensibilitatea i precizia depind de aparatura sau metoda chimic de etalonare; precizia final se afl adesea n domeniul 5%; costul iniial i pentru ntreinerea echipamentului este ridicat; intervalul de concentraie este limitat (msurtori relative); n mod obinuit, necesit spaiu destul de mare; implic un personal cu o pregtire special.
[49] Bailey Nigel J. C., Cooper Paul, Hadfield Stephen T., Lenz Eva M., Lindon John C., Nicholson Jeremy K., Stanley Paul D., Wilson Ian D., Wright Brian, and Taylor Stephen D., Application of Directly Coupled HPLC-NMR-MS/MS to the Identification of Metabolites of 5-Trifluoromethylpyridone (2-Hydroxy-5trifluoromethylpyridine) in Hydroponically Grown Plants, Journal of Agricultural and Food Chemistry, p. 42-46, Volume 48, Issue 1, January 17, 2000. Chimie Analitic i Instrumental 17
Analiza cantitativ Analiza cantitativ este bazat pe msurarea unei proprieti care este corelat direct
sau indirect, cu cantitatea de constituent ce trebuie determinat dintr-o prob. n mod ideal, nici un constituent, n afar de cel cutat, nu ar trebui s contribuie la msurtoarea efectuat. Din nefericire, o astfel se selectivitate este rareori ntlnit. Pentru a proceda la o analiz cantitativ, trebuie urmate o serie de etape: 1. Obinerea unei probe semnificative prin metode statistice; 2. Prepararea probei; 3. Stabilirea procedeului analitic n funcie de: Metode: (chimice; fizice cu sau fr schimbri n substan); Condiii: (determinate de metoda de analiz aleas; determinate de substana cercetat); Cerine: (rapiditate, exactitate, costuri; posibilitatea de amortizare); 4. Evaluarea i interpretarea rezultatelor. Practic, dup natura analizei, exist 7 tipuri de metode de analiz: (1) gravimetrice; (2) volumetrice; (3) optice; (4) electrice; (5) de separare; (6) termice; (7) de rezonan. n general, (1) i (2) sunt metode chimice, iar (3-7) sunt instrumentale (bazate pe relaii ntre o proprietate caracteristic i compoziia probei). Adeseori, n analiz se cupleaz dou sau mai multe dintre aceste procedee de baz. O alt clasificare a metodelor de analiz se poate face dup implicarea componenilor n reacii chimice, n metode stoechiometrice i metode nestoechiometrice. Tabelul 3 conine unele metode tipice de msurare i categoria tip stoechiometric:
Tabelul 3. Metode analitice stoechiometrice (S) i nestoechiometrice (N) 1. GRAVIMETRICE - izolarea unui precipitat care poate fi cntrit 1.1 Ageni de precipitare anorganici (S) 1.2 Ageni de precipitare organici (S) 1.3 Electrodepunere (S) 2. VOLUMETRICE - reacia substanei de analizat cu o soluie standard 2.1 Titrri acid-baz (S) 2.2 Titrri de precipitare (S) 2.3 Titrri complexonometrice (S) 2.4 Titrri de oxidare - reducere (S) 3. OPTICE 3.1 ABSORBIE DE ENERGIE - atenuarea radiaiei de ctre o prob absorbant 3.1.1 Colorimetrie (N) 3.1.2 Spectrofotometrie n ultraviolet (N) 3.1.3 Spectrofotometrie n infrarou (N) 3.1.4 Msurarea reflectanei luminii reflectate de prob (N) 3.2 EMISIE DE ENERGIE - aplicarea unei energii suplimentare (cldur, lumin) i observarea emisiei fotonice 3.2.1 Emisia n arc - excitarea n arc electric (N)
18 Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
Informaia Analitic
3.2.2 Flamfotometria - excitarea n flacr (N) 3.2.3 Fluorescena - excitarea prin fotoni, observarea fotonilor emii (N) 3.2.4 Fosforescena - excitarea prin fotoni i observarea emisiei ntrziate de fotoni (N) 3.2.5 Chemiluminescena - observarea fotonilor eliberai dintr-o reacie chimic (N) 4. ANALIZA GAZELOR 4.1 Volumetria - msurarea volumului unui gaz (S) 4.2 Manometria - msurarea presiunii unui gaz (S) 5. ELECTRICE - msurarea parametrilor electrici n soluii 5.1 Poteniometria - msurarea potenialului unei celule electrochimice (N) 5.2 Conductometria - msurarea rezistenei unei soluii (N) 5.3 Coulombmetria - msurarea cantitii de electricitate necesare pentru a provoca o reacie (S) 5.4 Polarografia - caracteristica potenial-intensitate a unei soluii ionice n procese redox (N) 6. DE REZONAN - interaciunea radiaiei electromagnetice cu nucleele n cmp magnetic 6.1 Rezonana magnetic nuclear (N) 7. TERMICE - msurtori funcie de temperatur 7.1 Msurtori de proprieti fizice n funcie de temperatur (N) 8. ALTE METODE - specifice 8.1 Fluorescena de raze X - excitarea probei cu raze X i observarea razelor X emise (N) 8.2 Spectrometria de mas - msurarea numrului de ioni de mase date (N) 8.3 Refractometria - msurarea indicelui de refracie al probei (N) 8.4 Polarimetria - msurarea rotaiei luminii ntr-o soluie (N) 8.5 Dispersia optic rotativ msurarea rotaiei luminii n prob n funcie de lungimea de und (N) 8.6 Fotometria prin difuzia luminii - msurarea cantitii de lumin dispersat de ctre o suspensie (N) 8.7 Analize de radioactivitate - formarea de materiale radioactive i numrarea particulelor (N) 8.8 Absorbia radiaiilor absorbia radiaiilor emise de o surs de ctre proba reinut pe un suport (S) ntr-un procedeu analitic stoechiometric, constituentul ce trebuie determinat intr n reacie cu alt substan, conform unei ecuaii bine definite ntre reactani (Ri) i produii de reacie (Pj): iRi jPj Msurnd cantitatea oricruia dintre produii rezultai (Pj) sau cantitatea unui reactiv utilizat (Ri, i2) i aplicnd legea proporiilor definite se poate apoi calcula cantitatea constituentului de determinat (R1). ntr-un procedeu analitic nestoechiometric nu pot fi scrise reacii exacte, bine definite; n majoritatea cazurilor metodele nestoechiometrice se bazeaz pe msurarea proprietilor fizice care se schimb proporional cu concentraia constituentului de determinat.
19
Metode de separare
Adesea este necesar s se ndeprteze impuritile din prob nainte ca aceasta s fie supus analizei. Procedeele folosite pentru acest lucru sunt cuprinse sub titlul general de metode de separare. Metodele de separare se bazeaz pe fenomene fizice sau chimice i nu totdeauna sunt asociate doar cu separarea impuritilor [50]. Separarea componenilor dintr-un amestec poate avea o importan att calitativ ct i cantitativ, separarea poate fi util pentru purificare, pentru concentrarea unuia dintre componeni sau a tuturor. O clasificare a metodelor de separare este dat n tabelul 4. Sub aspect analitic, procedeele de separare sunt deosebit de importante, deoarece metodele de analiz sunt selective i conduc la rezultate corecte numai dac n prealabil s-au izolat constituenii probei [51]. Metodele de separare aplicate sistemelor chimice au ca scop separarea sau mprirea unui amestec eterogen sau omogen n unitile sale individuale, n grupuri, componente sau chiar n elemente [52].
Tabelul 4. Metode de separare Bazele metodei solubiliti diferite volatiliti diferite presiuni de vapori diferite solubilitatea diferit ntre dou faze proprieti de solubilitate funcie de temperatur cristalizare la temperatur ridicat diferene de densitate ntre substane i lichid mrimea substanei vs dispozitivul de filtrare osmoza - trecerea selectiv a unui sistem printr-o membran electroliza folosind electrozi ineri distribuia solutului ntre o faz solid i una lichid pe coloan distribuia solutului ntre dou lichide pe coloan adsorbia sau repartiia pe un strat subire poros plan repartiia pe o suprafa de hrtie plan cromatografia de lichide pe o coloan sub o presiune ridicat schimbul de ioni mrimea solutului mrimea solutului distribuia solutului ntre un gaz i o faz lichid sau solid
Metoda Precipitare Distilare Sublimare Extracie Cristalizare Rafinare zonal Flotaie Ultrafiltrare Dializ Electrodepunere Cromatografie de absorbie pe coloan de repartiie pe coloan pe strat subire pe hrtie lichide, nalt presiune prin schimb ionic cu site moleculare penetraia prin gel de gaze
[50] Utille J.-P., Boutron P., Separation of Racemic from meso-2,3-Butanediol, Cryo, p. 398-402, 38(4), 1999. [51] Oleinikova M., Muraviev D., Valiente M., Aqua-Impregnated Resins. 2. Separation of Polyvalent Metal Ions on Iminodiacetic and Polyacrylic Resins Using Bis(2-ethylhexyl) Phosphoric and Bis(2-ethylhexyl) Dithiophosphoric Acids as Organic Eluents, Anal. Chem., p. 4866-4873, Volume 71, Issue 21, 1999. [52] Ishii Y., Ryan A.J., Processing of Poly(2,6-dimethyl-1,4-phenylene ether) with Epoxy Resin. 1. ReactionInduced Phase Separation, Macromolecules, p. 158-166, 33(1), 2000. 20 Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
Informaia Analitic
separarea pe o suprafa plan n prezena unui cmp electric electroforeza zonal Standarde, reactivi i soluii etalon Este foarte important stabilirea de standarde sau de referine pentru orice fel de msurtoare. Astfel, standardul de baz n cazul msurrii unor proprieti fizice este o unitate de msur foarte precis definit. n chimie, standardul de baz poate fi o substan a crei
puritate a fost verificat. Deoarece standardele de baz nu sunt ntotdeauna accesibile, se
recurge la comparaii cu materialul de referin. Acestea sunt numite standarde secundare. Este de menionat c cuvntul standard se mai folosete n chimie i n alt context. Astfel, sunt stabilite standarde pentru coninutul de poluani admis n aer, de impuriti n alimente sau medicamente sau pentru reziduurile de pesticide n produsele agricole. n acest caz, pentru un analist se pune problema de a determina dac un produs a fost fabricat astfel nct s se ncadreze ntr-un anumit tip de standard. Standardele chimice au o contribuie major n succesul unei metode analitice. Alegerea materialului de referin pentru etalonare d calitatea msurtorilor. Trebuie ales nct s ndeplineasc urmtoarele condiii: s fie accesibil i la un pre convenabil; s aib o puritate cunoscut de cel puin 99%; s fie stabil n solventul utilizat; s fie stabil i nehigroscopic; s participe la reacii n proporii stoechiometrice; s posede o mas molecular mare. Numrul de substane ce satisfac toate aceste cerine este limitat. Totui, pentru majoritatea metodelor analitice este necesar un etalon chimic - standard de baz. De exemplu, la determinarea titrimetric (volumetric) a unei substane este necesar un volum
msurat de reactiv de concentraie cunoscut, cu ajutorul cruia se produce o reacie chimic
pn cnd reactivul ajunge ntr-o proporie stoechiometric (punct de echivalen sau stoechiometric) cu substana cercetat. O substan care ndeplinete condiiile amintite anterior poate fi considerat un
standard primar. Cu ajutorul acesteia se pot apoi prepara standarde secundare, care nu
prezint aceleai caliti ca i standardul primar, ns realizeaz cerinele minimale pentru determinrile pe care le efectum cu ajutorul lor. n principiu, pentru o analiz cantitativ sau calitativ instrumental trebuie utilizai reactivi de puritate analitic (pro analysis sau pentru analiz, prescurtat p.a.). Astfel de reactivi sunt furnizai de regul de ntreprinderi specializate (de exemplu Merck n Germania sau "Chimopar" Bucureti n Romnia). Odat cu coborrea limitei de detecie la diversele tipuri de analiz instrumental necesarul unor reactivi purificai a crescut nct astzi exist reactivi spectral puri (for spectroscopy n l. englez) sau reactivi cromatografici (for chromatography), mai puri dect cei p.a.
n unele cazuri nu avem reactivi suficient de puri. De aceea se pleac de la o alt substan pur, de exemplu un metal pur (purificat electrolitic, sau prin topire zonar) care se dizolv ntr-un acid de nalt puritate. Nu trebuie uitat c eticheta de pe sticl nu garanteaz, n mod infailibil, puritatea. Motivele sunt diverse: unele impuriti nu au fost determinate de fabricant, sau reactivul a devenit impur, dup primire, fie prin deschiderea sticlei (borcanului) ntr-un mediu poluat (de exemplu cu praf de un anumit metal) sau prin turnarea napoi n container a unei cantiti de reactiv de ctre o persoan neavizat. Dac reactivul procurat este sigur de calitate corespunztoare "regulile de aur" privind lucrul cu reactivi sunt urmtoarele: 1. nu se ine sticla deschis dect timpul minim necesar; 2. nici o foarte mic cantitate de reactiv nu se ntoarce napoi n sticl scoas afar o cantitate ceva mai mare de reactiv; 3. reactivii lichizi sau soluiile se vor turna prealabil din sticl ntr-un pahar i niciodat nu se va introduce o pipet direct n sticl. O atenie deosebit trebuie acordat dopurilor de la sticlele de reactivi pentru a nu fi impurificate n timpul transvazrii [53] reactivilor. dup ce a fost
[53] A transvaza - a trece prin turnare (manual sau instrumental) un lichid dintr-un vas n altul. 22 Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
Informaia Analitic
ntrebri de verificare
1. Poate o metod imprecis s fie exact? 2. Care sunt principalele caracteristici ale unei metode de analiz instrumentale? 3. Ce "produs" final rezult dintr-un flux analitic? 4. Valoarea adevrat a compoziiei probei etalon este necesar n cazul determinrii exactitii sau n cel al determinrii preciziei? 5. Ce denumire poart materialul supus unui proces analitic? 6. Care este produsul unui flux analitic? 7. Prin ce caracteristic a metodelor de analiz mbuntesc metodele de separare calitatea rezultatelor analizelor? 8. Presupunnd c funcia de rspuns este liniar, ce parametru al dreptei este reprezentativ pentru sensibilitate? 9. Ce mrime intervine n calculul preciziei n afara valorii medii a determinrii analitice respective? 10. Cum de poate defini limita de detecie a unei metode? 11. Ce denumire poart metoda de analiz care determin 1 g prob? 12. Indicai trei tipuri de metode de analiz chimic stoechiometrice! 13. Ce caracteristic a unei metode de analiz indic panta funciei de rspuns? 14. Dac media zgomotului de fond este ridicat, ce mrime caracteristic a unei metode de analiz este afectat? 15. Cum se procedeaz cu excesul, rmas dup analiz, din proba primit de ctre un laborator? 16. Ce reprezint o metod de analiz standardizat? 17. Ce nseamn reactiv p.a.? 18. Se poate face o analiz exact avnd la dispoziie doar un standard primar? Dar daca avem doar o substan standard secundar fara un standard primar? 19. Ce deosebire exist ntre caietul de laborator i registrul de analize de laborator?
23
Proba nceputul este partea cea mai important a unui lucru Platon (cca. 428-347 B.C.), n Republica, Cartea II
Proba
De cele mai multe ori, luarea unei probe, la o analiz fcut n laboratoarele didactice, const ntr-o cntrire sau o msurare a unui volum de prob cu care se ncepe lucrul n laborator. Trebuie s avem n vedere c practica din realitate este diferit. i anume, aceasta
poate constitui etapa cu care ncepe analiza n laborator dar originea eantionului adus la
laborator este alta - provenind din materialul de analizat. Unul din subcapitole va aborda i acest aspect. Pe de alt parte, etapa cu care se ncepe analiza chimic din laboratorul de analiz instrumental rmne cntrirea. Deci, ncepem acest capitol cu atenionarea c:
de calitatea i modul de ntreinere a balanei analitice - principalul instrument de cntrire - depinde exactitatea tuturor analizelor din acel laborator
Prelevarea probelor
Toate procedeele de analiz cantitativ includ cteva operaiuni de laborator comune. Acestea sunt: luarea probelor, uscarea, cntrirea i dizolvarea [54]. Dizolvarea este singura operaiune care nu este ntotdeauna necesar, deoarece exist unele metode instrumentale prin care msurarea se face direct pe prob [55]. Orice analist experimentat execut aceste operaiuni acordndu-le o atenie deosebit, deoarece este tiut c o pregtire adecvat pentru msurare este la fel de important ca i msurarea n sine. O prob trebuie s fie reprezentativ pentru toi componenii lundu-se n considerare i proporiile n care aceste componente sunt incluse n materialul de analizat. Dac materialul este omogen, prelevarea probei nu constituie o problem. Pentru materialele eterogene se impun msuri de precauie speciale pentru a obine o prob reprezentativ. O prob de mrime potrivit pentru laborator se poate alege ntmpltor sau se poate seleciona dup un plan elaborat n mod statistic, care n mod teoretic, ofer fiecrui component din prob o ans egal de a fi decelat i analizat. Exist instruciuni standardizate pentru orice material n ceea ce privete luarea probei. Principiul general, care va duce la o regul comun, este acela c proba medie trebuie s se compun dintr-un numr ct mai mare de poriuni mici, luate din diferite locuri ale materialului de analizat, alese n ordine ntmpltoare. De asemenea, pe ct posibil, extragerea probelor e bine s se fac mecanizat sau automatizat pentru a se elimina factorul subiectiv.
[54] Ungurean Mihaela, Jntschi Lorentz, Desulfuration of Gases. Chemical Methods, Oradea University Annals, Chemistry Fascicle, p. 19-24, VIII, 2001, ISSN 1224-7626. [55] Ungurean Mihaela, Jntschi Lorentz, Dicu Delia, Desulfuration of Gases. Electrochemical Methods, Oradea University Annals, Chemistry Fascicle, p. 25-30, VIII, 2001, ISSN 1224-7626. Chimie Analitic i Instrumental 25
Dar, aplicnd aceste precauii se obin de regul cantiti prea mari de material de analizat format din buci cteodat neomogene i diferite, n ceea ce privete compoziia, de la un punct la altul. Aceast prob reprezentativ, este sfrmat i mrunit nite scule specifice de exemplu concasoare sau mori i redus treptat pn la cantitatea trimis la laborator, care poate fi ntre 25 g i 1 kg. Aceasta, nainte de cntrire, se macin fin (50). n prepararea probelor se folosesc materiale dure i totodat pure ca agat, cuar, porelan, platin, Teflon sau polietilen. Acestea se spal n mod special. De exemplu, sticla se spal cu detergent apoi se umecteaz cu amestec cromic, se cltete cu ap apoi cu ap distilat i n final, se usuc fr tergere. Exist 3 metode de baz pentru colectarea probelor gazoase. Acestea sunt: prin expansiune ntr-un container din care proba poate fi ulterior evacuat; prin absorbie pe un suport i prin nlocuire cu un lichid. n toate cazurile, trebuie s se cunoasc volumele vaselor de colectare, temperatura i presiunea. n mod obinuit, vasele de colectare sunt confecionate din sticl i trebuie prevzute cu un orificiu de intrare i unul de ieire ce pot fi nchise i deschise, n mod convenabil. Pentru a elimina contaminarea probelor, se recomand iniial splarea containerului cu gazul din care se preleveaz proba. Concepia dispozitivului de prelevare a probei trebuie s permit ca acest procedeu s se execute cu uurin. Aerul este un amestec complex de diferite gaze. Studiul compoziiei aerului este o problem frecvent n studiul mediului [5659]. Compoziia sa real este dependent de mediul nconjurtor i de locul de unde se ia proba. n prezent, datorit polurii, multe eforturi sunt ndreptate pentru studiul i supravegherea calitii aerului. Exist mai multe modaliti pentru prelevarea probelor de aer. O metod preferat n cazul analizelor de mediu este metoda absorbiei prezentat n fig. 1. Pentru determinarea unor compui aflai n concentraii foarte coborte n probe
gazoase, de exemplu compui moleculari n stare de vapori dintr-o atmosfer poluat, se
obinuiete captarea acestora pe un suport solid, prin trecerea unui volum cunoscut din eantion peste o coloan (tubuor) care conine suportul respectiv. Un astfel de exemplu este prezentat n fig. 2 unde tubul (4x100mm), iniial nchis la cele dou capete (la flacr),
[56] Mendes Adlio M. M., Costa Carlos A. V., and Rodrigues Alrio E., Analysis of Nonisobaric Steps in Nonlinear Bicomponent Pressure Swing Adsorption Systems. Application to Air Separation, Industrial & Engineering Chemistry Research, p. 138-145, Volume 39, Issue 1, January 4, 2000. [57] Slawig T., Domain optimization of a multi-element airfoil using automatic differentiation, p. 225-237, Advances in Engineering Software, Volume 32, Issue 3, 15 December, 2000. [58] Davidson Gregg R., Use of SF6 to label drilling air in unsaturated, fractured rock studies: risk of overpurging, p. 1361-1370, Applied Geochemistry, Volume 17, Issue 10, October, 2002. [59] Liao Chung-Min, Chen Jein-Wen, Chen Jui-Sheng and Liang Huang-Min, A transfer function model to describe odor causing VOCs transport in a ventilated airspace with mixing/adsorption heterogeneity, p. 1071-1087, Applied Mathematical Modelling, Volume 25, Issue 12, December, 2001. 26 Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
Proba
conine mai muli adsorbeni, fiecare destinat unui anumit compus. Varietatea suporturilor folosite este limitat doar de imaginaia analistului.
apa manson de cauciuc
aer
apa
Fig. 1. Instalaie pentru probe de aer
Fig. 2. Modul de realizare al tubuoarelor folosite la reinerea analiilor din gaze pe suporturi solide, adsorbeni sau prin absorbie pe lichide fixate pe suport solid
De exemplu acestea pot fi diferite sortimente de crbune poros (activ), grafit, polimeri organici poroi avnd fixate prin legturi chimice diferite funciuni precum i adsorbeni mbibai cu soluii de reactivi sau chiar coninnd reactivi solizi. O pomp cu debit controlat asigur aspirarea unui anumit volum. Dup nchiderea cu capace etane tubuorul din sticl sau material plastic este transportat n laborator. Aici, compuii adsorbii sunt recuperai, fie prin extracie ntr-un solvent (de preferat CS2) fie prin desorbie termic, simultan cu
splarea, realizat cu un gaz inert. Marele avantaj al ultimei metode este acela c proba nu se
dilueaz nainte de introducerea n analizor (gaz cromatograf). Totul se realizeaz prin utilizarea unui mic cuptora, nclzit rapid la circa 300C, timp de cteva secunde. O alternativ la soluia tehnic de mai sus s-a materializat n existena unor tubuoare pentru retenie, de dimensiuni mici, care pot fi n ntregime introduse ntr-un injector cromatografic
modificat. n aceste cazuri, recuperarea compuilor se consider satisfctoare dac se face n
proporie de 60%. Acest tip de prelevare a probelor este specific igienei industriale i controlului polurii mediului. Ca exemplu reuit de prelevare a probelor pe suporturi solide putem da cazul determinrii aldehidei formice din aer. Aceasta provine din degradarea rinilor
ureoformaldehidice. n contact cu reactivul 2-hidroximetilpiperidin aceasta conduce printr-o reacie chimic la oxazolidine, combinaii stabile care pot fi ulterior desorbite i analizate. Luarea probelor din atmosfer este o problem dificil. Diferii factori cum sunt vntul, temperatura sau ploaia sunt variabili i greu de controlat. Luarea probelor din lichide pure sau omogene este direct i n mod uzual, se poate folosi orice dispozitiv sau vas care nu distruge puritatea sau omogenitatea. Prelevarea probelor din amestecurile lichide eterogene ridic unele probleme mai dificile. Procedeul ntrebuinat se selecioneaz n funcie de amestecul supus analizei, dac este o suspensie, o
emulsie, o mixtur de faze lichide nemiscibile sau un lichid coninnd reziduuri solide. Cnd
amestecul lichid este instabil (de exemplu o emulsie), dac conine componeni volatili, sau dac conine gaze dizolvate, intervin dificulti suplimentare [60]. n general, prile alicote [61] sunt prelevate la ntmplare de la diferite adncimi i din toate locurile din proba de lichid. Acestea pot fi analizate n mod separat sau pot fi combinate pentru a da o prob cu compoziie, n mod static, reprezentativ pentru proba original. Amestecurile de lichide nemiscibile sunt destul de frecvente n tehnic [62]. Cele mai cunoscute sunt amestecurile de ulei + ap i benzine + ap. Deversrile de produse petroliere accidentale sunt evenimente foarte neplcute pentru ecosisteme. Pentru aceste amestecuri separarea fazelor, msurarea raportului de amestecare i apoi analiza cantitativ a fraciilor separate sunt metode uzuale n analiza instrumental a lichidelor.
Extracia lichid - lichid prin coloane cu suport solid este una dintre cele mai moderne
metode de prelevare a probelor lichide, de exemplu n cazul analizei unor poluani ai apelor. Aceast metod, aprut relativ recent (uneori denumit extracia lichid-solid), a revoluionat o procedur de laborator mai veche, nc utilizat i azi - extracia cu solveni pentru separarea analiilor din probele lichide. Este o metod de separare dar totodat de concentrare a analitului. Este o tehnic folosit n cazul concentraiilor mici (cum este i cazul poluanilor) i const n trecerea unui volum cunoscut de prob, lichid sau n soluie, peste un cartu de extracie umplut cu adsorbent solid cu o compoziie care s favorizeze reinerea unor anumite clase de compui. Situaia ntlnit cel mai frecvent este prezentat n fig. 3 i parcurge 4 etape.
[60] Wassenaar L.I. and Koehler G., An On-Line Technique for the Determination of the 18O and 17O of Gaseous and Dissolved Oxygen, Anal.Chem., p. 4965-4968, 71(21), 1999. [61] alicot adjectiv feminin, termen matematic, din francezul aliquote; parte alicot = parte a unui tot, coninut n el de un anumit numr ntreg de ori; alicuante adjectiv, feminin, termen matematic, din francezul aliquante; parte alicuant = parte care nu intr de un numr exact de ori ntr-un tot; [62] Lu H., Matsumoto T., Gratzl M., Fine Chemical Manipulations of Microscopic Liquid Samples. 2. Consuming and Nonconsuming Schemes, Anal.Chem., p. 4896-4902, 71(21), 1999. 28 Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
Proba
Se folosesc coloane n form de sering (denumite cartue de extracie) cu dimensiunile de 5-10 cm care se supun, ntr-o prim, etap condiionrii adsorbentului prin tratare cu reactivi potrivii (et.I fig. 3). Apoi, n etapa II se toarn prin cartu soluia cu proba de analizat care, infiltrndu-se lent prin coloan, permite reinerea (extracia) selectiv a compusului sau compuilor de analizat (de exemplu pesticidele dintr-o ap). Urmeaz splarea compuilor nedorii, rmai nereinui n interstiiile coloanei (III). n final (etapa IV) are loc dizolvarea i totodat concentrarea ntr-un volum mic a analitului prin turnarea peste coloan, n mai multe poriuni mici, a unui solvent care dizolv substanele de analizat reinute, realiznd totodat i o concentrare a acestora. Introducerea probei Splare impuriti Splare analit
Condiionare
II
III
IV
Fig. 3. Principiul reteniei selective a analitului pe coloane prin extracie; se observ fixarea selectiv a analitului, n timp ce impuritile nu sunt reinute
n locul extraciei cromatografice n ultimul timp se utilizeaz discuri de extracie (0.5mm nlime, 25-90mm diametru). Dac sunt selective, permit extragerea analitului din volume apreciabile de soluie. Discurile sunt confecionate din granule de silice (SiO2 poros), pe care se gsesc legate chimic diferite faze staionare inspirate din LC i care sunt nglobate ntr-o reea poroas din Teflon sau din fibre de sticl. Acestea se introduc, n vederea extraciei, n plnii Bchner pentru vid. Recuperarea analitului se face n urma unui ciclu similar celui anterior. Apoi proba se injecteaz n instrumentul de analiz folosit. n prelevarea probelor de solide, dac solidul este omogen, orice poriune poate fi selectat ca fiind reprezentativ. Pentru un solid eterogen, trebuie pregtit un plan care s permit prelevarea statistic a tuturor seciunilor solidului. Luarea probelor se poate face manual sau n mod mecanic, cnd materialul de analizat are o mas mare. Nu este ntotdeauna posibil s se obin, n mod statistic, o prob reprezentativ. De exemplu, este evident o sarcin dificil s se determine compoziia suprafeei lunii. Pornind de la o cantitate limitat
de roci i praf, luarea probelor s-a bazat parial pe mrimea particulelor i parial pe starea lor fizic.
Mrimea particulei probei este un parametru important la prelevarea probelor dintr-o
substan solid, deoarece compoziia particulelor de diferite mrimi poate varia. n general, transformarea unei probe mari ntr-o prob de mrime convenabil pentru analiz cere mai nti, reducerea probei la o mrime de particule uniform i n al doilea rnd, reducerea
masei probei. O mrime de particule uniform se obine trecnd proba prin concasoare,
pulverizatoare, mori sau mojare. Poate fi utilizat de asemenea i sitarea pentru granule, sau pilirea pentru metale. Oricare ar fi procedeul ales, este necesar s se asigure ca prin aceste operaiuni s nu se contamineze proba. n cazul solidelor granulare (inclusiv n cazul monitorizrii poluanilor solului), probele se extrag din mai multe puncte, cu aa-numitele sonde (fig. 4), de la adncimi diferite sau, n lipsa lor, cu lopei conform schielor din fig. 5.
11/0,3
1/0,2
12/0,4
6/0,5
4/0,2
14/0,4
3/0,1
2/0,2
8/0,1
9/0,1
13/0,5
15/0,5
5/0,4
10/0,2
7/0,1
L/6
L/6
L/6
L/6
L/6
L/6
Fig. 4. Sond pentru luarea probei; poziie nchis, (b) poziie deschis
Fig. 5. Luarea probelor din grmezi, camioane sau vagoane. Cifra de sus indic ordinea iar cea de jos, adncimea de la care se ia proba
Reducerea prin metoda cuartrii, ilustrat n fig. 6, i 7, se realizeaz prin
urmtoarele etape: (1) Se macin proba la o granulaie prevzut, (2). Se amestec materialul obinut n grmad, (3). Se turtete cu ajutorul lopeii pn formeaz un strat n form de disc, de grosime egal (fig. 6). (4). Acesta se mparte n patru sferturi egale i se rein numai dou din sferturile opuse (v. fig. 7) de exemplu se rein sferturile I i III, restul - II i IV - se arunc. Dac proba este mai mare se repet operaiile 1 ... 4 att ct este necesar. Aceste operaii se pot realiza i mecanizat cu utilaje specializate. Cnd standardul prevede, se mai execut o mrunire final a probei i n laborator, pstrndu-se totui o proba martor i n unitatea care trimite eantionul, un timp suficient: 3 sau 6 luni.
30
Proba
Fig. 6. Aspectul grmezii de material granulat sau pulbere, din profil, nainte de a se aplica reducerea prin metoda cuartrii
Fig. 7. Ilustrarea metodei cuartrii (vezi textul)
n fig. 8 sunt prezentate 3 dispozitive de tiere pentru reducerea probei.
Fig. 8. Dispozitive de tiere pentru reducere a probei - zdrobitor, tietor transversal i paralel Uscarea i dizolvarea
Dup obinerea probei corespunztoare se hotrte dac analiza se va efectua pe proba ca atare sau dup ce aceasta a fost uscat. Majoritatea probelor solide conin cantiti variabile de ap datorate faptului c proba este higroscopic sau pentru c apa este iniial adsorbit la suprafa i se pierde necontrolat. Operaia de uscare se face n mod uzual prin nclzire ntr-o etuv, ntr-un cuptor cu mufl sau prin ardere la becuri Bunsen sau Meeker (fig. 9).
Fig. 9. Bec de gaz, plit electric i cuptor de uscare
31
ntruct pentru uscare se folosete cldura, este posibil ca n tentativa de uscare a probei aceasta s se descompun sau s piard substanele volatile. Ambele cazuri trebuie luate n considerare la efectuarea unei analize corecte. Dup ce proba a fost uscat, urmeaz de obicei cntrirea. Pentru aceasta se folosesc balane. Balanele sunt instrumente de msurare a masei; sunt de mai multe tipuri: balane tehnice (cu precizie de ordinul gramelor, folosite pentru cntriri de substane a cror mas depete 1 Kg), balane farmaceutice (cu precizie de la 1 la 10 mg, folosite pentru cntriri de substane a cror mas depete 100g), balane analitice (cu precizie de 0,1 mg, folosite pentru cntriri de substane a cror mas este sub 100g), balane electronice (permit nregistrarea variaiilor de mas n timp) [63]. Dup cntrirea probei, urmtoarea etap este dizolvarea. Dac proba este solubil n ap, nu exist probleme de dizolvare, dei cteodat proba poate s hidrolizeze lent n ap, formnd compui insolubili. Materialele organice sunt n mod obinuit dizolvate de solveni organici sau n mixturi de solveni organici i ap. Exist ns o varietate de procedee chimice i instrumentale care necesit un solvent de compoziie anumit. n alte cazuri nu mei este necesar etapa dizolvrii. Astfel, dac proba este excitat n arc sau n scnteie i este analizat energia radiant rezultat atunci se poate utiliza n mod direct o prob lichid sau solid. Dac se cere s fie analizat partea organic a amestecului din proba prelevat, atunci trebuie utilizai pentru dizolvare solveni organici i tehnologii specifice chimiei organice. Pentru probele anorganice, cazul cel mai frecvent n industrie, proba se dizolv ntr-un acid sau se topete cu un fondant. Dac se utilizeaz acizi, este important s se cunoasc proprietile chimice ale probei, dac este nevoie de acid oxidant sau neoxidant, dac procedeul aplicat trebuie s respecte restricii legate de tipul anionului din soluie, i dac dup dizolvare trebuie s se elimine sau nu excesul de acid. Situaii specifice: H2SO4 nu trebuie utilizat pentru probe ce conin Ba (BaSO4 pp. alb insolubil); HCl nu trebuie utilizat pentru probe cu Ag sau sruri de Ag (AgCl pp. insolubil). Selecionarea anumiilor acizi pentru a putea fi utilizai la dizolvare se realizeaz n funcie de proprietile lor chimice, dac sunt oxidani sau neoxidani. Acizii neoxidani folosii sunt HCl, H2SO4 diluat i HClO4 diluat. Acizii oxidani sunt: HNO3, H2SO4 fierbinte concentrat i HClO4 fierbinte concentrat. Dizolvarea metalelor prin intermediul acizilor neoxidani se bazeaz pe capacitatea metalelor de a nlocui hidrogenul. n acest caz, se ine seama de seria activitii chimice a
metalelor: Li, Ca, K, Ba, Na, Mg, Al, Zn, Fe, Cd, Co, Ni, Sn, Pb, H, Cu, Ag, Hg, Au.
[63] Jntschi Lorentz, Chira Ioan Ovidiu, Caiet de Lucrri practice de Chimia i Biochimia Poluanilor, U.T. Press, Cluj-Napoca, 113 p., 2000, ISBN 973-9471-46-3. 32 Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
Proba
Cele mai puternice condiii de oxidare se obin la utilizarea HClO4 fierbinte i concentrat, care dizolv toate metalele obinuite. Acesta este periculos datorit exploziilor pe care le poate provoca. Adeseori se obin avantaje din utilizarea unor combinaii de acizi. Cel mai familiar este apa regal (1:3 HNO3:HCl) n care HNO3 este un oxidant, iar HCl are proprieti de complexare i furnizeaz aciditate puternic. De reinut:
solubilitatea multor ioni metalici este meninut numai n prezena agenilor de complexare
Acidul fluorhidric, dei un acid slab i neoxidant, descompune rapid probele de silicai, cu formare de SiF4. El are o aciune superioar de complexare comparativ cu acidul clorhidric prin anionul su complexant, F-. Amestecul HNO3 cu HClO4 are o aciune de dizolvare mult mai energic, dar necesit o manipulare mult mai atent deoarece poate produce explozii puternice.
Tratarea cu fondani (tabelul 1) este mai eficace dect tratarea cu acizi din dou
motive. Primul, datorat temperaturii mai ridicate, necesare topirii (de la 300C pn la 1000C) face ca procesele de reacie s se desfoare cu o vitez mai mare. Al doilea avantaj este c n cazul fondanilor, n contact cu proba exist o cantitate mai mare de reactiv, ceea ce face ca reacia s fie nu numai rapid ci i mai deplasat spre formarea de produi.
Tabelul 1. Fondani uzuali Aplicaii (neoxidani) Fondant Aplicaii (oxidani) Silicai, fosfai, sulfai Na2CO3+KNO3 probe uor oxidabile: Sb, S, Cr, Fe Silicai, carburi de siliciu Na2O2 sulfuri, aliaje, metale insolubile n acizi: ferocrom, Ni, Mo, (fero)W Silicai, oxizi
Fondant Na2CO3 NaOH, KOH B2O3
n ultimul timp se mai utilizeaz n calitate de fondani H3BO3, boraxul calcinat (Na2B4O7), pirosulfatul de potasiu (K2S2O7), tetraboratul de litiu (Li2B4O7), trioxidul de dibor (B2O3) i tetrafluoboratul de litiu (LiBF4) sau diferite amestecuri ale acestora. Cu excepia pirosulfatului de potasiu, la care topirea se poate efectua i n creuzete de porelan, cuar sau chiar sticl termorezistent (Pyrex) restul fondanilor se utilizeaz n creuzete de platin, grafit sau platin-aur (95% Pt-5% Au). Ultimele dou materiale, nefiind udate de sticla rezultat, conduc la rezultate mai bune, n ceea ce privete omogenizarea topiturii i turnarea probei n forme mai ales pentru analiza prin fluorescen de raze X. Procedura practic este urmtoarea: se cantresc 5 g Na2CO3 (sau alt fondant) la 1 g prob. Fondantul cntrit se pune ntr-un creuzet de platin, se cntrete apoi proba pentru analiz peste acesta i se omogenizeaz totul cu o baghet. Se nclzete creuzetul treptat, pn la topire, i se menine n aceast stare pn la completa transformare a probei + fondant ntr-o soluie. n general, este suficient o perioad de 1/2 or. Proba rcit, se trateaz cu ap
fierbinte. Soluia rezultat, dei puternic alcalin, este corespunztoare pentru o ulterioar separare sau chiar analiz chimic.
Extracia cu solveni aflai n stare supracritic este o metod de extracie mai puin
obinuit dar care permite uneori realizarea unor performane inaccesibile celorlalte tehnici de extracie. Se aplic att probelor lichide ct i solide. Se tie c peste temperatura critic orice lichid atinge o stare n care nu exist deosebiri ntre fazele lichide i gazoase. Fiecare substan are pe digrama fazelor n coordonate presiune-temperatur, un punct critic. Valorile pc i Tc corespunztoare acestui punct conconstituie limita inferioar de la care exist starea supracritic. Cteva substane pot exista n stare supracritic chiar n condiii apropiate de temperatura mediului ambiant: CO2, N2O, CHClF2. Aceste substane nu pun probleme nici n ceea ce privete toxicitatea, nici coroziunea. Folosind aceste substane n stare supracritic se pot realiza extracii imposibil de realizat prin alte metode. n principiu, se lucreaz cu un recipient n form de tub, rezistent la presiune, n care se pune proba (solid sau o soluie) i apoi se introduce lichidul supracritic. Se poate lucra n dou variante. O prim variant este maniera off-line care const n depresurizarea fluidului - condiii n care acesta devine gaz i las analitul, mpreun cu alte impuriti, n forma unor picturi pe pereii vasului. Apoi urmeaz un procedeu de dizolvare extracie selectiv cu solveni clasici sau folosind un cartu de extracie cu suport solid unde se combin selectivitatea extraciei cu adsorbia. O a doua variant este maniera on-line, n care produsul extraciei este direct introdus ntr-o instalaie cromatografic n funciune - fie una cu fluide supracritice, fie de tip HPLC. Ultima variant se poate aplica doar cnd matricea probei nu interfer cu analitul. Caracteristicile de solubilitate ale solventului supracritic CO2 se pot modifica mai ales cu presiunea i temperatura. Dar ajustrile fine ale solventului supracritic (fluidului supracritic) se mai pot modifica i prin introducerea n amestec a aa-numitor modificatori organici (metanol, aceton), ntruct polaritatea CO2 supracritic are o valoare cobort, comparabil cu cea a hexanului (evident la 100atm i 35C). n rezumat, exist 4 posibiliti de a se modifica selectivitatea fluidului supracritic: Presiunea, Temperatura, Durata, Alegerea unor modificatori. Extracia cu fluide supracritice este o metod relativ costisitoare dar care se preteaz la automatizare i, n condiiile unui numr mare de probe, devine totui rentabil. n cazul
Proba
moleculelor mari - polimeri, componente biochimice ale organismelor naturale - metoda este extrem de eficace.
Luarea probei n cazul monitorizrii instrumentale
Dac metodele chimice constituie cheia nelegerii analizelor chimice n general, determinrile de componeni ai aerului sau apei necesit metode instrumentale pentru c acestea dau semnale electrice care sunt mai uor de prelucrat cu ajutorul calculatoarelor i mai simplu de automatizat.
Luarea probelor de ap
De la vechile metode ce utilizau gleata i sfoara (uneori folosite i astzi) n ultimul timp se pune tot mai mult problema eliminrii influenei umane prin prelevarea probelor automat cu ajutorul pompelor. Legat de luarea probei n vederea monitorizrii instrumentale, apar trei categorii de probleme: Localizarea monitorului fa de obiectivul monitorizrii; Poziia intrrii n monitor; Alegerea dispozitivului de prelevare.
Localizarea monitorului depinde de mai muli factori ca: reglementrile autoritilor
locale, accesibilitatea instrumentului ntreinere, existena unui sistem de service, ce tip de ap monitorizeaz instrumentul (apa ce intr ntr-o unitate sau o ap de suprafa). Trebuie avute n vedere, n vederea stabilirii mrimii i a formei staiei de monitorizare, regulamentele autoritilor locale. Tot acestea se au n vedere n selecia materialelor folosite, n evaluarea riscului de incendiu i mai ales n alegerea amplasamentului. Existena unei surse de tensiune i a unei linii telefonice n apropiere este de asemenea un considerent important n ceea ce privete alegerea locului de amplasare dar cel mai important considerent este totui tipul de informaie care se va produce. Uneori interesul este concentrat pe efectele poluante ale unei fabrici, caz n care este recomandabil monitorizarea poluanilor att n amonte c>t i n aval de unitatea urmrit. De asemenea, este firesc s se urmreasc att apa de intrare c>t i cea care prsete uzina (efluentul). Alteori, toat zona trebuie monitorizat i n acest caz este necesar instalarea unei reele de monitoare.
Poziionarea locului (gurii) de prelevare este de mare importan. n general acesta
trebuie s se gseasc la o distan de maximum 25m de monitor, deoarece altfel proba de ap poate fi afectat de diferena de temperatur, de aerul eliberat pe parcurs (care intr apoi n sistemul de analiz) sau de nmolul ce poate interfera cu coninutul n oxigen. Distana de la
suprafaa apei, pe vertical, depinde de tipul pompei folosite. Este preferat o adncime de 60
cm pn la 1m (evident de la nivelul suprafeei apei, dac este posibil) deoarece sub acest
nivel proba de ap va fi influenat de radiaiile solare, de flora bacterian precum i de substanele care plutesc n aer. Dac proba se extrage prea aproape de fund, acesta va fi afectat de sedimentele agitate de ctre curenii de ap. Distana de rm n prelevarea probei n vederea monitorizrii apelor de suprafa este de asemenea foarte important n obinerea unei probe reprezentative. Dac este prea aproape de rm aceasta va fi nisipoas iar dac e prea ndeprtat, sedimentarea pe conducta de aduciune poate ntrerupe colectarea probei.
Debitul trebuie s asigure o vitez a apei de 1-2m/sec pentru a se evita sedimentarea,
creterea algelor pe conduct sau nclzirea probei.

Alegerea dispozitivului de prelevare nu pune probleme. Acesta este de regul o
pomp. Alimentarea prin cdere (gravitaie) nu este recomandabil pentru c majoritatea senzorilor utilizai n monitorizare trebuie s fie curii de ctre curentul de ap, care este necesar s aib un debit suficient de mare. Desigur c pompa trebuie s fac fa cderii de presiune i s nu se corodeze n soluia monitorizat. Dac se respect condiiile amintite, tipul pompei este de mai mic importan. Aceasta poate fi plutitoare, subacvatic, montat pe rezervor, cu pistoane sau peristaltic. Pentru a se asigura siguran n funcionare aceasta trebuie curat i ntreinut frecvent. Cel mai des folosite metode de monitorizare a probelor de ap, din punct de vedere al proteciei mediului, sunt prezentate n tabelul 2 iar dispozitivul de prelevare trebuie s in cont, ntr-o oarecare msur, i de acestea.
Tabelul 2. Principalii analii din apele supuse monitorizrii i tipul metodei utilizate curent Analit Tipul metodei Absorbie atomic Ioni metalici Cromatografie ionic Cationi i anioni Ioni metalici, NH4+, NO2-, NO3- , SiO2 Colorimetrie sau metode chimice Spectrometrie de emisie, analiz Metale, P, S prin activare, fluorescen X Pesticide, substane cu P, S, ioni Metode cromatografice (de gaze sau lichide) metalici n soluii TOC (cont. total de carbon) i deficit Spectrometrie IR sau metode chimice de oxigen Electrozi ion selectivi pH Electrozi redox Potenial redox (rH) Luarea probelor de aer
Multe din principiile analizelor de aer se suprapun peste cele ale analizelor de ap. Locul de poziionare a punctului de prelevare trebuie de asemenea s in cont de
Proba
reglementrile locale i de posibilitile de intervenie, respectiv de lucrrile de ntreinere. n cazul aerului, rezultatele mai depind de direcia i viteza vntului, de gradientul vertical de temperatur, de topografia locului, de turbulena sau precipitaiile prezente. Studiile preliminare pentru formarea unei idei despre factorii ce trebuie avui n vedere sunt cel mai bine realizate pe staii mobile, iar prin monitorizare se realizeaz modele matematice pe baza crora se determin numrul optim de poziii ale staiilor de monitorizare. Poziia intrrii aerului n analizor trebuie s fie de aproximativ 3m de la sol respectiv 3m de orice structur excluzndu-se orice zone cu aer imobil (de ex. cele din vecintatea unui zid nalt). Cel mai important considerent n luarea probelor de aer este tipul de poluant monitorizat. Pentru aer cele mai importante analize includ: dioxidul de sulf (SO2), dioxidul de carbon (CO2), monoxidul i dioxidul de azot (NO, NO2), hidrogenul sulfurat (H2S), ozonul (O3), particulele n suspensie, acidul fluorhidric (HF) i hidrocarburile. Toate acestea sunt accesibile unor msurtori fizice n vederea monitorizrii. n tabelul 3 se prezint sintetic cteva dintre metodele preferate.
Tabelul 3. Principalele componente ale aerului supuse monitorizrii i tipul metodei Component Tipul metodei Absorbie atomic, fluorescen de raze X Metale Cromatografie ionic Ioni/aerosoli Coulometrie (electrochimic) SO2, H2S, CO Fluorescen n UV, luminescen SO2, Hg Chemiluminescen NO, NO2, O3 Electrozi ion selectivi HF, F-, pH Filtrare urmat de cntrire sau absorbia radiaiilor Pulberi n suspensie Cromatografie de lichide de nalt eficien Pesticide
37
1. Cu ce se preleveaz probele solide? 2. Ce instrument (aparat) servete n laborator pentru msurarea probelor solide luate ntr-o analiz chimic? 3. n cazul probelor solide trebuie uneori luate precauii suplementare pentru ca acestea sa fie reprezentative. Despre ce fel de probe este vorba? 4. Care dintre urmtoarele substane se folosete ca solvent n condiii supracritice: SO2, CO2, H2O? 5. n ce const metoda cuartrii? 6. n ce caz este util extracia lichid-lichid pe coloane cu suport solid? 7. Care este prima etap n utilizarea cartuelor de extracie pe suport solid? 8. Ce sunt discurile de extracie? 9. Ce exemplu de prob lichid eterogen apare frecvent n poluarea mediului? 10. Care este cea mai preferat metod de prelevare a probelor de poluani ai aerului? 11. Ce metod se prefer n cazul unor poluani aflai n concentraii coborte n probe lichide (ape)? 12. Numii trei tipuri de balane folosite la cntrirea probelor n laborator? 13. Ce metod instrumental se prefer n cazul analizei pesticidelor din ape? 14. Ce etap elimin influena asupra rezultatului analizei a coninutului variabil de ap din probele solide? 15. Ce parametrii importani trebuie menionai n cazul lurii probelor de aer? 16. De ce parametru important trebuie inut cont n cazul probelor solide? 17. Dai dou exemple de fondani uzuali i dou de fondani folosii n ultimul timp! 18. Ce se nelege prin dezagregarea unei probe n vederea unei analize? 19. De ce este periculos acidul percloric n calitate de reactiv pentru dezagregare? 20. La ce distan maxim fa de monitor trebuie s se afle gura pentru luarea probei de ap din mediu? 21. Care este metoda preferat n cazul polurii cu metale att n cazul apelor ct i n cazul aerului? 22. Ce metod este preferat pentru determinare NO, NO2, O3 n cazul monitorizrii polurii aerului? 23. Ce dispozitive se prefer pentru luarea probelor de poluani ai aerului?
38
Metode chimice de analiz - interferene cu analizele instrumentale Chimia ...este una dintre cele mai cuprinztoare ramuri ale tiinei, pentru simplul motiv c atunci cnd ne gndim la ea, totul este chimie. Luciano Caglioti, The two faces of Chemistry, MIT Press, Massachusetts, 1985
Metode chimice de analiz - interferene cu analizele instrumentale

La nceputurile analizelor chimice, aceste metode - gravimetria i volumetria - erau considerate singurele metode absolute. n aceste metode msurtorile permit calculul direct al masei de analit (dintr-o prob) fr a mai fi nevoie de etalonri, neaprat cu acelai analit. Restul metodelor - considerate relative - este format din majoritatea metodelor instrumentale i au nevoie, n vederea analizei chimice, de o comparaie a msurtorii, efectuate pe proba necunoscut, cu msurtori executate pe probe etalon - cunoscute. Realitatea este c i metodele chimice utilizeaz instrumente (balana analitic - azi balana electronic, biureta i pipetele - azi automate, baloanele cotate etc.), respectiv substane etalon - substane pure i cu compoziie cunoscut. Pe de alt parte, exist i metode instrumentale absolute. Este vorba de
metoda coulometric i metoda absorbiei radiaiilor (n cazul determinrii pulberilor n
suspensie din aer) care azi sunt recunoscute ca metode absolute. Metodele instrumentale au pstrat ns anumite similariti cu metodele chimice amintite, de exemplu cntrirea probelor cu balana - folosit pe larg n gravimetrie - sau aducerea soluiilor analiilor n baloane cotate - utilizat mult i n volumetrie. Considerm, de aceea, incomplet cunoaterea analizelor instrumentale fr un minim de cunotine legate de aceste metode.
Dac nu faci parte din soluie, faci parte din precipitat Steven Wright (Actor comic american)
Metode de precipitare i gravimetria
Procesul de precipitare este cunoscut de foarte mult timp ca un procedeu folosit pentru separare. Separarea prin precipitare se bazeaz pe diferenele ntre stabilitile
precipitatelor, n anumite condiii experimentale [64].
Nu toate reaciile de precipitare sunt cantitative. De exemplu Pb(II) poate fi precipitat sub form de PbCl2, la rece. Creterea temperaturii face s creasc foarte mult solubilitatea PbCl2. Adeseori sunt precipitate, filtrate i astfel separate grupe de ioni metalici. Un exemplu clasic este separarea ionilor metalici bazat pe solubilitatea sulfurilor (tabelul 1).
[64] Kekedy L., Chimie Analitic Calitativ, Ed. Scrisul Romnesc, Craiova, 1970. Chimie Analitic i Instrumental 39
Tabelul 1. Schema cu hidrogen sulfurat (1) Se adaug HCl diluat i se centrifugheaz (2) pp.1 I: (3) sol.2 I: cationii grupelor 2-5. La pH = 0.5 se satureaz cu H2S i se AgCl, centrifugheaz Hg2Cl2, (4) pp. II: HgS, PbS, Bi2S3, (7) sol. II: AsO2- i cationii grupelor 3-5. Se pp. PbCl2. CuS, CdS, As2S3, Sb2S3, As i se centrifugheaz; se ndeprteaz excesul splare, SnS2 + KOH, centrifugare de H+ i H2S; se adaug NH4Cl, NH3; se adaug prelucrare H2S; se centrifugheaz (5) pp. (6) sol. IIb: HgS2-, (8) pp. (9) sol. III: cationii gr. 4-5. IIa: HgS, AsO2-, AsS2-, III: NiS, + CH3COOH, se fierbe (ndeprtarea PbS, Sb(OH)4 , SbS2-, CoS, H2S); se centrifugheaz; se arunc Bi2S3, Sn(OH)6-, SnS3- Al(OH)3, reziduul; se evapor soluia; + H2O, CuS, CdS Cr(OH)3, NH4Cl, (NH4)2CO3; se centrifugheaz Fe2S3, (10) pp. IV: (11) sol. IV: Mg2+, MnS, BaCO3, SrCO3, K+, Na+ ZnS CaCO3, MgCO3 1 pp = precipitat; 2 sol. = soluie
n alte cazuri, scopul principal al precipitrii este purificarea. n orice caz, procedeele de analiz gravimetric i cele de separare prin precipitare sunt similare.
Gravimetria este o metod de analiz cantitativ bazat pe msurarea masei unui precipitat. Toate msurtorile pentru determinarea masei sunt efectuate n acest caz cu balana
analitic. O analiz gravimetric se realizeaz printr-o serie de etape experimentale: se cntrete exact proba ce trebuie analizat; se dizolv proba cntrit; printr-un procedeu adecvat se nltur speciile ce pot interfera n metoda aleas; se ajusteaz condiiile experimentale: pH, stare de oxidare, concentraie; se adaug agentul de precipitare adecvat (organic sau anorganic); precipitarea se face n soluii diluate la cald; se separ precipitatul prin filtrare; se spal precipitatul; se usuc, calcineaz i aduce la mas constant precipitatul; se calculeaz constituentul analizat din prob bazat pe stoechiometrie.
Procedeele electrogravimetrice se bazeaz pe o reacie electrochimic ntr-o celul de
electroliz care conine soluia probei, prin reglarea curentului i potenialului. Se depune specia de analizat pe catod, care se cntrete nainte i dup depunere.
Degajarea de gaze este de asemenea folosit gravimetric. Se nregistreaz pierderea
de mas a probei prin volatilizarea unei pri din prob.
40
Gravimetria
n gravimetrie analiza chimic se bazeaz pe cntrirea exact a unei substane solide, pure, provenite din analit, folosind procedee specifice. Este vorba, n primul rnd, de separarea prin precipitare a unui ion aflat ntr-o soluie rezultat din prob sau, mai rar, de ndeprtarea prin volatilizare a unei specii chimice devenite gaz la nclzire n tehnica denumit gaz-gravimetrie. Analiza gravimetric ncepe, ca orice analiz chimic cantitativ, cu cntrirea la
balana analitic (fig. 2) a unei mase de prob - solid sau lichid - care se supune mai nti
unor transformri chimice. Dup realizarea solubilizrii sau dezagregrii probei, n gravimetrie specia chimic analizat se izoleaz, de regul, printr-o operaie numit
precipitare. Evident, substana precipitat trebuie s fie una foarte greu solubil astfel nct n
soluia rmas (denumit soluie mum) s nu mai rmn dect o cantitate infim din aceasta. Cantitatea rmas n soluie trebuie s fie sub limita de sensibilitate a balanei analitice, deci o cantitate att de mic nct s nu mai poat fi sesizat de ctre balan i care, n consecin, nu modific rezultatul. Apoi, precipitatul se separ prin filtrare, urmat obligatoriu de o splare. Se obine, n final, compusul precipitat pur care, dup uscare sau uscare i calcinare, se cntrete. Cteva exemple de reacii cu formare de precipitate sunt: Ba + SO42- BaSO4 (pentru determinarea sulfatului), Ag+ + Cl- AgCl (pentru analiza argintului sau clorurii), Ca2+ + C2O42- CaC2O4 (pentru determinarea calciului). Gama reaciilor folosite este foarte diferit i de aici denumirea de metod chimic care se d gravimetriei. De exemplu, se pot folosi reactivi care reduc specia chimic solubil la un element pur - insolubil. Astfel, clorhidratul de hidroxilamin (NH2OHHCl) se poate folosi pentru reducerea Au, Se, Te la precipitate metalice din combinaii solubile ale acestora. Dintre metodele care au la baz ndeprtarea unei combinaii la nclzire, amintim reacia de volatilizare a silicei cu acid fluorhidric (reacia se execut ntr-un creuzet de platin sub ni): SiO2(s) + 4HF(l) SiF4(g) + 2H2O(l) (pentru analiza siliciului) Reaciile folosite n gravimetrie trebuie s ndeplineasc cteva condiii: S fie, n anumite condiii, cantitative, S rezulte combinaii bine definite, S aib loc cu vitez suficient de mare, Produsele reaciilor trebuie s fie uor filtrabile i s nu se redizolve n urma splrii.
2+
41
Dup filtrare i splare, se ndeprteaz apa prin uscare la etuv i, de regul, urmeaz o calcinare n cuptor - proces prin care compoziia chimic se poate modifica. Un exemplu simplu de analiz gravimetric l constituie determinarea ferului. Etape: 1. Se aduc prin calcinare creuzetele la pondere constant (2-3 probe paralele). 2. Se oxideaz soluia coninnd fer, provenit din solubilizarea unei mase de prob cunoscute, utiliznd oxidani potrivii: (Fe2+ Fe3+) 3. Se precipit hidroxidul de fer, Fe(OH)3 care se filtreaz i se spal. 4. Se calcineaz precipitatul ntr-un creuzet (rezult Fe2O3). 5. Se cntrete suma creuzet + Fe2O3. 6. Se calculeaz coninutul de Fe din prob din masa probei i masa de precipitat pur obinut. Referitor la ultimul punct se obinuiete, pentru lucrul n laborator, simplificarea calculului stoechiometric prin utilizarea unui factor gravimetric, deosebit de la o substan la alta. Acest factor se calculeaz nainte de analiz astfel nct imediat dup cntrirea final produsul dintre masa precipitatului i factorul gravimetric d direct masa analitului. Pe baza acestei mase se exprim rezultatul final al analizei. S considerm c avem de stabilit compoziia unei probe din specia A i masa acesteia se va determina pe baza cntririi unei mase de precipitat, mppt. Se poate scrie, pe baza celor afirmate anterior: mA = fmppt A din cele m grame de prob, cu care s-a pornit n analiz: %A = sau %A = f m ppt m 100 (3) mA 100 m (2) (1) unde f este factorul gravimetric. Cu ajutorul masei mA se poate exprima concentraia de analit
n cazul exemplului dat anterior - legat de determinarea gravimetric a ferului - lanul de transformri chimice poate fi ilustrat n fig. 1.
H+ Prob
Fe2+ (soluie)
O2-
Fe2+ (soluie)
Fe(OH)3
tC
Fe2O3
Fig. 1. Schema lanului de transformri chimice n determinarea gravimetric a ferului
42
Dac notm cu M Fe2O3 masa unui mol de oxid de fer (III) i cu MFe masa atomic a ferului
avem (v. fig. 1) corespondenele: M Fe2O3 . . . . . . . . 2MFe Mppt . . . . . . . . . . x _________________ x = mppt2MFe/ M Fe2O3 Se poate observa c n acest caz factorul gravimetric este: f= 2M Fe M Fe2O3 (4)
Analog se calculeaz pentru orice specie chimic analizat factorul gravimetric corespunztor.
Factorul gravimetric trebuie s fie ct mai mic pentru c astfel erorile analizelor sunt mai mici
Metodele gravimetrice sunt dificile i consumatoare de timp. ns, dac sunt executate de personal calificat, sunt cele mai exacte metode de analiz chimic cunoscute. Etaloanele materialelor folosite n analizele instrumentale sunt analizate prin astfel de procedee. n rezumat, succesiunea de operaii din cadrul analizelor gravimetrice este urmtoarea: 1. Cntrirea probei i dezagregarea; 2. Precipitarea; 3. Filtrarea; 4. Splarea precipitatului; 5. Uscarea; 6. Calcinarea; 7. Cntrirea; 8. Calculul.
Balana analitic
Instrumentul de msur utilizat pe larg n gravimetrie este balana analitic (fig. 2). Aceasta are o sensibilitate ridicat, care permite determinarea masei cu un numr mare de cifre semnificative (3-5 cifre). Puine instrumente fizice permit o astfel de performan. De asemenea permite msurarea precis a maselor cu o eroare 210-4g. De aceea, balana analitic se considera, pn la apariia etaloanelor comerciale, inima laboratorului de analize chimice. Fiind un instrument exact i precis, balana necesit n cadrul laboratorului analitic instrumental un plasament privilegiat, ntr-o ncpere fr circulaie, fr variaii mari de
temperatur i pe un suport ferit de vibraii. Balanele moderne au ncorporate greutile care
le menin exactitatea pe perioade mari de timp. Periodic toate balanele au nevoie de verificare
i atestare metrologic. Acestea se fac prin comparaie cu setul de greuti etalon existente n cadrul reelei naionale a serviciilor de metrologie.
Fig. 2. Aspectul unei balane analitice
Cteva reguli importante n ceea ce privete lucrul la balan sunt urmtoarele:

Nu se pun obiecte pe masa balanei dup aducerea acesteia la zero. Substanele pulverulente se vor cntri pe hrtie cerat, folii de plastic sau n fiole de
cntrire. Obiectele cntrite nu se ating cu mna ci se folosesc mnui, pensete sau cleti pentru a se preveni modificarea maselor datorit umezelii minii.

Obiectele calde se vor rci n prealabil la temperatura camerei. Materialele higroscopice se vor cntri rapid pentru a absorbi ct mai puin ap pe Cnd se fac mai multe cntriri paralele se vor folosi aceleai procedee de cntrire.
parcursul cntririi. Balana analitic este mult utilizat n analiza instrumental. n afar de cntrirea probelor n vederea analizelor aceasta mai este folosit pentru realizarea soluiilor etalon sau a probelor etalon sintetice, solide, folosite pentru comparaie n diversele instrumente analitice care vor face obiectul urmtoarelor capitole.
44
Metode chimice de analiz - interferene cu analizele instrumentale Aproape toate procesele chimice care au loc n natur, fie c este vorba de organismele animale fie de cele vegetale, sau de poriunea lipsit de via a pmntului..., au loc ntre substane aflate n soluie Wilhelm Ostwald (1853-1932), Chimist german
Volumetria
n volumetrie, denumit i analiz volumetric sau titrimetrie, concentraia analitului din prob se determin msurnd precis volumul de reactiv consumat - reactiv aflat sub form
de soluie. Operaia de msurare a volumului se numete titrare. Titrarea este operaia de adugare treptat, n poriuni mici, utiliznd o biuret, a
reactivului pn la terminarea reaciei, cnd se atinge aa-numita echivalen, adic reactivul cu care se titreaz este n cantitate echivalent cu analitul din prob. Reactivii folosii sunt soluii diluate a cror concentraie se exprim molar sau normal, de exemplu: 0,1molL-1 (sau 0,1M) respectiv 0,1eL-1 (sau 0,1N). n vederea utilizrii analitice, soluiei i se determin (sau calculeaz) titrul, notat T - adic masa, exprimat n grame, coninut ntr-un mililitru. Evident, reacia care are loc este una precis cunoscut i este cantitativ, iar concentraia reactivului (titrul) este de asemenea stabilit cu exactitate, nainte de efectuarea analizei. Reactivul utilizat poart i numele de titrant i se prepar fie cntrind la balana analitic o substan denumit etalon primar (care se aduce la un volum cunoscut), fie stabilindu-se coninutul exact al acestuia printr-o titrare fa de un alt etalon primar. n acest ultim caz vorbim de un etalon secundar. Punctul n care s-a consumat tot analitul se numete punct de echivalen. Calculul se face cunoscnd masa de prob, volumul de reactiv consumat pn la punctul de echivalen i stoechiometria reaciei. Ca i la metoda gravimetric, pentru a se mri viteza de calcul, se calculeaz n prealabil, pe baze stoechiometrice, un factor volumetric care nmulit cu volumul de echivalen d direct masa analitului. Stabilirea punctului de echivalen se realizeaz i cu ajutorul indicatorilor. Exist dou tipuri de indicatori: vizuali (tabelul 2) i instrumentali. Indicatorii vizuali pot fi chiar reactivii - dac sunt intens colorai (cazul KMnO4) - care-i modific prin reacie culoarea, sau sunt reactivi de culoare, adugai n cantiti mici, care interacioneaz cu excesul de titrant imediat dup echivalen. Acetia sunt foarte diferii n funcie de reacia utilizat i permit, prin schimbarea brusc a culorii indicatorilor, sesizarea atingerii echivalenei. De exemplu, n titrarea acido-bazic se poate folosi fenolftaleina sau albastrul de brom-timol. n titrrile care folosesc alte tipuri de reacii (v. mai jos) se folosesc ali indicatori. Folosirea unor instrumente pentru stabilirea punctului de echivalen se mai numete
titrimetrie instrumental. Teoretic, se poate folosi oricare din instrumentele care formeaz
45
obiectul prezentei lucrri dar, n realitate, se apeleaz doar la metodele puin costisitoare, pentru c avantajul principal al volumetriei este tocmai preul de cost cobort.
Tabelul 2. Indicatori de culoare bazai pe pH pH max [66] [65] 1 2,4,6-trinitrofenol, acid picric 0.6-1.3 2 timolsulfonftalein, albastru de timol 1.2-2.8 544.4 3 2,4-dinitrofenol, -dinitrofenol 2.4-4.0 4 tetrabromofenolsulfonftalein, albastru de bromfenol 3.0-4.6 436.6 5 rou de congo 3.0-5.0 520.2 6 p-sulfonat de dimetilaminobenzen, metiloranj 3.1-4.4 522.5 7 tetrabromo-m-crezolsulfonftalein, verde de bromcrezol 3.8-5.4 444.6 8 acid dimetilaminobenzen-o-carboxilic, rou de metil 4.2-6.3 530.4 9 dibrom-o-crezolsulfonftalein, purpuriu de bromcrezol 5.2-6.8 433.6 10 dibromotimolsulfonftalein, albastru de bromtimol 6.2-7.6 433.6 11 fenolsulfonftalein, rou de fenol 6.8-8.4 433.6 12 o-crezolsulfonftalein, rou de crezol 7.2-8.8 434.6 13 timolsulfonftalein, albastru de timol 8.0-9.6 430.6 14 di-p-dioxidifenilftalid, fenolftalein 8.3-10 553 15 ditimolftalid, timolftalein 9.3-10.5 598 16 acid m-nitrobenzenazosalicilic, galben de alizarin 10-12 550 17 nitramin, 2,4,6-trinitrofenolmetilnitramin 10.8-13 550
Nr Denumire
culoare soluie [67] [68] i/g r/g 0.04% aq i/g 0.1% alc g/b 0.4% aq b/r 0.04% aq r/o 0.1% aq g/b 0.1% aq r/g 0.1% alq g/p 0.04% aq g/b 0.5% aq g/r 0.05% aq g/r 0.05% aq g/b 0.04% aq i/p 0.05% alq i/b 0.04% alq i/g 0.1% alc i/o 0.01% aq
Reaciile chimice
Reaciile chimice pe care se bazeaz titrimetria trebuie s fie echilibre chimice, practic total deplasate spre dreapta. Aceste echilibre trebuie s se stabileasc rapid, deci vitezele de reacie trebuie s fie mari. Reaciile consacrate n volumetrie, care ndeplinesc condiiile amintite, sunt cele din categoria echilibrelor ionice (unde cu Ox i Red s-au notat formele oxidate i reduse ale partenerilor redox iar cu M i L s-au notat ionul metalic, respectiv ligandul):
Reacii acid-baz (ambele tari) : H+ + OH Reacii redox: Ox1 + Red2 Reacii de complexare: M + nL
H2O;
Red1 + Ox2; MLn.
n general constantele de echilibru ale acestor reacii trebuie s fie mai mari de 106. Reaciile de precipitare se utilizeaz, dar destul de rar. Cele care se aplic sunt cele care duc la precipitate cu produse de solubilitate mai mici de 10-10.
[65] valoarea de la care i valoarea la care se ncheie schimbarea culorii indicatorului; [66] lungimea de und (nm) la care are loc absorbia maxim i permite vizibilitatea maxim a schimbrii culorii indicatorului; [67] r = rou, g = galben, p = purpuriu, b = albastru, i = incolor, o = oranj, v = verde; [68] aq = soluie apoas; alc = soluie alcoolic; alq = soluie echivolumetric alcool+ap; 46 Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
Etaloane primare i secundare
Aa cum am amintit, pentru prepararea reactivilor folosii n titrri se utilizeaz substane etalon, primare sau secundare. Primele - etaloanele primare (denumite i substane standard, titrimetrice sau de referin) sunt reactivi activi din punct de vedere chimic, extrem de puri, stabili i care au o mas molecular ridicat. Din aceste substane, prin simpl cntrire urmat de dizolvare i aducerea la un volum cunoscut, se obin soluii cu titru cunoscut, care pot fi utilizate ca atare n analizele volumetrice. Exemple de astfel de substane sunt: carbonatul de potasiu (K2CO3), acidul oxalic, H2C2O42H2O, pentru titrrile acidobazice, iodatul acid de potasiu, KH(IO3)2, permanganatul de potasiu, KMnO4, iodul, I2, sulfatul fero-amoniacal, Fe(NH4)2(SO4)212H2O), pentru titrrile redox i complexonul III, respectiv acetatul de zinc, pentru cele complexometrice.
Etaloanele secundare sunt tot substane pure, reactive i totodat ieftine dar, pentru c
nu sunt stabile n contact cu atmosfera (absorb ap fiind higroscopice, pierd ap de cristalizare etc.), titrul soluiilor acestora se stabilete pe baza unor etaloane primare. Acestea sunt de multe ori preferate n cazul analizelor n serie. Dintre etaloanele secundare cele mai folosite amintim: NaOH, KOH, HCl, H2SO4, tiosulfatul de sodiu (Na2S2O35H2O).
Erori care intervin n msurarea volumelor
Metoda volumetric nu este la fel de exact ca metoda gravimetric n primul rnd datorit limitelor impuse de instrumentele pentru msurarea volumelor. Cum instrumentele uzuale nu permit evaluarea dect a 3 cifre semnificative, chiar lucrnd perfect, erorile vor fi de ordinul celei de-a treia cifre i n rezultatul final. Dac este vorba de concentraii sub 10% acestea sunt convenabile (de ex: 7.850,01%). Dar pentru a se obine rezultate de ncredere este necesar cunoaterea tuturor factorilor care duc la erori n msurtorile de volum indiferent de instrumentele folosite: pipete, biurete sau baloane cotate.
Eroarea de picurare (sau de pictur) se datorete faptului c volumul de reactiv
adugat n vasul conic din biuret nu poate fi mai mic de o pictur - anume ultima pictur nainte de schimbarea culorii. Aadar, eroarea de picurare este o eroare inevitabil n orice titrare. Valoarea acestei erori se exprim prin ecuaia: Eroare de picurare = p% = v 100 V (5)
unde v este volumul unei picturi (0.03 ml), iar V - volumul de reactiv utilizat pn la punctul de echivalen. Se poate observa c cu ct valoarea V este mai mare cu att eroarea de picurare, p%, scade. De aceea titrrile trebuie reglate astfel nct s se utilizeze aproape ntreaga scal a biuretei. De asemenea, prin folosirea unor orificii ct mai nguste ale
biuretelor i hidrofobizarea poriunii de la ieirea acestora, volumele picturilor pot fi i mai mult reduse.
Eroarea de curgere se datorete aderenei neuniforme a lichidului la pereii vaselor de
msurare a volumelor. n general, aceast eroare crete o dat cu murdrirea pereilor, dar i cu creterea raportului suprafa/volum. Prima cauz se ndeprtez prin tehnicile de curire a vaselor de laborator, astfel ca lichidul, practic, s nu adere la perei. Pentru a nelege factorii de care depinde a doua cauz, s considerm aria lateral, S, a lichidului dintr-o biuret, de raz r, pentru nlimea h. Aceasta este: S = 2rh iar volumul, V de lichid evacuat corespunztor acestei nlimi este: V = r2h Din aceste dou ecuaii eliminnd rh se obine: S= 2V 4V = r D (8) (7) (6)
39
40
2 Fig. 3. Eroarea de paralax crete citind incorect diviziunea: 1-corect; 2-incorect
Se poate observa c pentru a se realiza o suprafa mai mic, la acelai volum de titrare, este necesar un diametru ct mai mare al biuretei. De aceea biuretele nguste nu sunt avantajoase. n vederea diminurii acestei erori se ateapt 30s dup cderea ultimei picturi nainte de citire.
Eroarea de paralax (de citire) este eroarea care apare datorit poziiei nclinate a
biuretei sau a citirii incorecte, adic dintr-un unghi diferit de 90 fa de aceasta (fig. 3).
Eroarea de temperatur apare n laboratoarele n care nu se respect temperatura
pentru care sunt etalonate aparatele din sticl (20C). Acest lucru provoac o dilatare sau
48
contracie a sticlei i o dat cu aceasta se modific volumul msurat, V, fa de cel citit, V0, fiind coeficientul de dilatare volumic al sticlei (aceas eroare poate fi ndeprtat prin calcul): V = V0[1 + (t-20)] (9)
Eroarea de histerezis se datorete necunoaterii fenomenului de histerezis manifestat
de dimensiunile sticlei ca funcii de temperatur. Astfel, sticla o dat nclzit se dilat dar la rcire, nu mai revine la dimensiunile iniiale, pstrnd o dilatare remanent. Similar, la rcire sticla se contract dar, revenind la temperatura camerei, nu i recapt dimensiunile iniiale ci vasul are un volum mai mic. Acest lucru face ca citirile la baloane cotate uscate la cald, prin neglijarea acestui fenomen, s duc la erori nebnuit de mari. n consecin, aparatura de msurare a volumelor din sticl se va pstra, dup verificarea volumului, la o temperatur constant, nu se va usca n etuv i nu se va nclzi sau lsa n magazii nenclzite. De aceea i aparatura de msurarea volumelor trebuie periodic verificat metrologic pentru a se obine rezultate de ncredere.
Etapele analizei volumetrice
n majoritatea cazurilor metodele volumetrice parcurg urmtoarele etape: 1. Prepararea reactivilor. 2. Cntrirea probei, dezagregarea i aducerea la balon cotat a soluiei limpezi. 3. Pipetarea unei cote-pri (de exemplu 1/10 din coninutul balonului cotat) i tratarea fizico-chimic n laborator. 4. Titrarea n prezena unui indicator. 5. Calculul. Se remarc, dac comparm cu etapele metodei gravimetrice, c sunt mai puine etape. Metoda este mult mai rapid, mai ieftin dar mai puin exact. De multe ori cele dou metode se aplic simultan pe aceeai prob - un component se determin gravimetric iar altul volumetric - n filtratul rezultat dup precipitare.
Calculul n volumetrie
Calculul analitului se realizeaz pe baza volumului de echivalen. Pentru o mai bun nelegere vom prezenta calculul n dou etape: (1) calculul masei de analit din proba titrat i (2) calculul concentraiei de analit din proba supus analizei. n instruciunile standardizate de analiz chimic se prezint doar o singur formul care nglobeaz ambele etape ale calculului. Pentru nceput s prezentm factorul, notat F, utilizat adeseori n formulele de calcul. Acesta a fost introdus deoarece reactivii volumetrici ntlnii n practic nu sunt de
normalitate exact (sau de factor 1) - aa cum am dori s-i preparm. Astfel, n loc s obinem o soluie exact 0.1N de NaOH obinem, de exemplu, o soluie 0.115N adic o soluie
aproximativ normal (cu factorul 1.15). Trecerea volumului, V, msurat ntr-o titrare executat cu o soluie aproximativ normal, ntr-un volum teoretic, Vt, de soluie exact normal (0.1 N n exemplul de mai sus) se realizeaz cu ajutorul factorului F. Astfel, dac
inem cont c ambele volume conin aceeai mas de reactiv de titrare, mr, putem scrie: mr = VTr = VtTt aici putem exprima volumul Vt: Vt = V sau: Vt = VF
Deci,
factorul nmulit cu volumul de titrare transform acest volum ntr-un volum de normalitate exact
(10)
unde Tr este titrul soluiei n realitate (real) iar Tt - titrul teoretic al soluiei exact normale. De
Tr Tt
(11)
(12)
Calculul propriu zis al masei de analit n volumetrie se bazeaz pe legea echivalenilor i

anume: ntr-o reacie cantitativ numrul echivalenilor celor doi reactivi, 1 i 2, este egal. De aceea putem scrie: nE,1 = nE,2 (13) unde cu nE,1 i nE,2 am notat numrul de echivaleni din reactivii 1, respectiv 2. Dac considerm c reactivul 1 este titrantul fie volumul acestuia V, cu factorul F i normalitatea exact N. Ca urmare putem scrie: nE,2 = VFN unde cu nE,2 am notat numrul de echivaleni ai substanei de analizat, 2. De aici calculul masei analitului, mA se va putea face cunoscnd echivalentul gram EA al analitului: mA = nE,2EA = VFNEA cont de masa de prob, m, cntrit iniial. Astfel, exprimnd procentul din ntreg: %A = mA 100 m (16) (15) (14)
Calculul concentraiei procentuale de analit, %A, din proba de analizat se face inndu-se
inndu-se cont de cele amintite anterior, aceeai concentraie se poate exprima n funcie de datele titrrii: %A =
50
V F N EA 100 m
(17)
S-a obinut astfel una din formulele de calcul frecvent prezent n instruciunile de lucru standardizate. Uneori aceeeai relaie se scrie n funcie de titrul teoretic, T. Astfel se poate observa c VFNEA = VFT iar ecuaia precedent devine: %A = V FT 100 m (18)
O aplicaie n controlul analitic al apelor Alcalinitatea este o caracteristic a apelor care se determin utiliznd metode
volumetrice. n cazul unei ape alcalinitatea se poate evalua prin capacitatea acesteia de a neutraliza acizii. Sursa alcalinitii n cazul apelor naturale o constituie urmtorii ioni:
Bicarbonat (HCO3-); Carbonat (CO32-); Hidroxid (OH-).

Srurile altor acizi slabi cum ar fi: borai, silicai sau fosfai mai pot contribui doar accidental la alcalinitate. De asemenea cteva sruri ale unor acizi organici pot contribui de asemenea la aceasta, dar numai n apele poluate sau lipsite de aeraie i ntr-o msur foarte mic. Contribuia major la alcalinitate o are bicarbonatul. Alcalinitatea adus de ionii carbonat, CO32-, i hidroxid, OH-, poate deveni important doar atunci cnd activitatea algelor din ape este ridicat sau n apele industriale. De alcalinitate trebuie s se in cont n toate procesele de tratare a apelor potabile sau reziduale. Aceasta acioneaz ca tampon de pH n coagulare sau n procesele de dedurizare cu var i sod. Dup modul de evaluare a alcalinitii distingem: alcalinitatea fa de fenolftalein i
alcalinitatea total. Ambele se determin prin titrare cu un acid tare pn la virajul
indicatorului sau cu ajutorul unui pH-metru.

Alcalinitatea fa de fenolftalein se determin prin titrarea apei cu acid sulfuric pn
la pH-ul de viraj al indicatorului fenolftalein (8.3) marcnd tot hidroxidul i jumtate din carbonatul prezent, ceea ce se poate simboliza: OH- + 1/2CO32Alcalinitatea total se poate msura pn la pH-uri diferite (5.1; 4.8; 4.5 sau 3.7) n
funcie de coninutul de dioxid de carbon prezent. Aceasta reflect ntreaga alcalinitate dat de hidroxid, carbonat plus bicarbonat: OH- + CO32- + HCO3-. Valoarea de pH pn la care se face determinarea este urmtoarea:
30 mgL-1 CO2 - pH = 5.1 150 mgL-1 CO2 - pH = 4.8

150 mgL-1 CO2 - pH = 4.5 n cazul prezenei silicailor i fosfailor - pH = 4.5 Reziduuri industriale sau sisteme complexe - pH = 3.7
Reactivul folosit n titrare este soluia diluat de acid sulfuric. Una din reaciile care au loc este: OH- + H2SO4 = 2H2O + SO42care se termin la pH = 10. Dac se lucreaz n prezena indicatorului fenolftalein (iniial roz) care se decoloreaz la pH = 8.3 mai are loc i o parte (1/2) din reacia: 2CO32- + H2SO4 = 2HCO3- + SO42Continund titrarea pn la pH = 4.5 are loc conversia total a carbonatului dar i a tuturor ionilor bicarbonat existeni n acea ap, la acid carbonic: 2HCO3- + H2SO4 = 2H2CO3 + SO42Indicatorul uzual folosit n acest caz este metilorange-ul (viraj galben rou). Deoarece culorile sunt apropiate n spectru i pot fi mai greu sesizate vizual se folosete, mai recent, albastru de brom-fenol (albastrugalben) sau rou metil n amestec cu verde de bromcrezol, ale cror culori se modific cu pH-ul , dup cum urmeaz:
Verde deschis gri albstrui, pH = 5.1 Violet deschis gri, pH = 4.8 Roz deschis, pH = 4.5.
Pentru interpretarea rezultatului, n ceea ce privete specia chimic care determin alcalinitatea, se ine cont de cele 5 cazuri posibile - prezentate n tabelul 3.1. Rezultatul se prezint n funcie de caz. Se observ c pot exista situaii cnd anumii ioni pot lipsi.
Tabelul 3. Rezultate posibile n determinrile de alcalinitate Caz Rezultat OHCO32HCO31 alc.fft*.=0 0 0 =alc. tot. 2 alc.fft.=alc.tot. =alc.tot. 0 0 3 2alc.fft<alc.tot. 0 =2alc.fft. =alc.tot.-2alc.fft. 4 2alc.fft. = alc.tot. 0 =alc.tot. 0 5 2alc.fft. > alc.tot. =2alc.fft.-alc.tot. =2(alc.tot.-alc.fft.) 0 * alc.fft. = alcalinitate fa de fenolftalein; alc.tot. = alcalinitate total
52
1. Ce se nelege prin metod absolut de analiz chimic? 2. Ce este gravimetria? Ce instrument important folosete aceast metod? 3. n gravimetrie specia chimic se separ (izoleaz) de regul prin 4. Ce condiii trebuie s ndeplineasc reaciile folosite n gravimetrie? 5. Ce exemple de reacii de precipitare cunoatei? 6. Ce este factorul gravimetric? 7. Cum se calculeaz factorul gravimetric n cazul determinrii ferului sub form de Fe2O3? 8. Care sunt etapele analizei gravimetrice? 9. Care sunt etapele analizei volumetrice? 10. Ce este titrul real i ce este titrul teoretic? 11. Unde se amplaseaz o balan analitic n cadrul unui laborator? 12. Care sunt principalele reacii chimice utilizate n volumetrie? 13. Ce sunt etaloanele primare i secundare? 14. Ce se nelege prin factorul unei soluii i care este scopul utilizrii acestuia? 15. Ce tipuri de erori de msurare a volumelor sunt posibile n volumetrie?
53
Metode electrochimice Teoria ghideaz, experimentul decide Izaak M. Kolthoff (1894-1993), Electrochimist american
Metode electrochimice
Generaliti
O reacie redox provocat prin efectele curentului electric, ce are loc de regul prin intermediul unui electrod, ntr-o incint numit celul electrochimic, poart numele de
reacie electrochimic. Electrochimia, n general, implic folosirea unor reacii redox ce pot fi
realizate pe suprafaa electrodului cu ajutorul electricitii sau pot fi utilizate pentru producerea electricitii pe seama substanelor de analizat. Aceasta este originea denumirii metodelor de analiz din acest grup. Parametrii metodelor electrochimice - bazate pe astfel de reacii - sunt legai de cei ai legii lui Ohm: U = IR dar totodat i de parametrii electrolizei. Astfel, metodele electrochimice msoar una dintre mrimile:
potenialul de electrod, ; intensitatea curentului prin celul, I; cantitatea de electricitate scurs prin celul, Q = It; rezistena, R (sau conductana, 1/R) soluiei din celul; timpul de desfurare a procesului de electrod, t.
Oricare ar fi parametrul msurat, acesta poate fi corelat cu concentraia speciilor chimice din proba supus analizei. Studiul acestor corelaii a condus la clasificarea metodelor de analiz electrochimice n metode: poteniometrice (care msoar potenialul unui anumit electrod, ), amperometrice (msoar I), coulometrice (msoar Q = It) i metode
conductometrice (care msoar rezistena, R, respectiv conductana, 1/R). O singur metod
electrochimic msoar masa depus la unul din electrozi: electrogravimetria, iar altele timpul: cronoamperometria i cronopoteniometria. Unele dintre metode, care msoar tot curentul ns n condiii de tensiune variabil liniar, se denumesc voltamperometrice. Un caz particular al acesteia, care msoar curentul datorat polarizrii suprafeei unui electrod, poart numele de polarografie. O alt tehnic, care msoar curentul simultan cu modificarea ciclic a potenialului n timp, poart numele de voltametrie ciclic. Aceasta este cea mai utilizat metod n ultimul timp, pentru studiul reaciilor chimice redox n soluie, fie a proceselor ce au loc pe un anumit electrod. Toate metodele utilizeaz n procesul de msurare doi sau trei electrozi scufundai n electrolitul celulei, care funcioneaz cu sau fr diafragm. Doi electrozi pot fi identici, de exemplu n conductometrie sau n metodele difereniale sau diferii, n marea majoritate a metodelor. n acest caz, unul dintre electrozi, cel pe care se produce reacia, este considerat
electrodul de msur (sau de lucru), iar cellalt electrodul de referin. Se mai utilizeaz i
un al treilea, electrodul auxiliar, doar n cteva metode, dac este necesar.

Titrrile electrochimice utilizeaz msurtorile unor parametri electrochimici pentru
gsirea punctului de echivalen dintr-o analiz volumetric. Se folosete un parametru furnizat de ctre electrozii indicatori, sensibili la una din speciile chimice implicate n titrare, fie din titrant, fie din titrat. Msurtoarea propriu-zis este n acest caz volumul - electrozii servind doar pentru indicarea, respectiv gsirea volumului de reactiv ce a reacionat cantitativ cu analitul din prob.
56
Metode poteniometrice
n cadrul acestor metode, se determin potenialul electric la curent nul (fora electromotoare), E, ce apare spontan, ntre doi electrozi reversibili, unul fiind electrod de
msur, caracterizat prin potenialul acestuia, m i cellalt de referin (r). Acetia se afl
scufundai n soluia supus analizei chimice. Perechea amintit formeaz un ansamblu denumit celul electrochimic care are potenialul: E = |m - r| Uneori se interpun ntre electrozi i diafragme (nite corpuri poroase subiri, udate de electrolit) care mpiedic ptrunderea unor ioni nedorii dintr-o semicelul ntr-alta. La aceste metode curentul ce parcurge celula este practic nul i de aceea uneori se specific acest lucru iar denumirea utilizat este i poteniometrie la curent nul. Se cunosc dou metode principale: poteniometria direct i titrrile poteniometrice.
Poteniometria direct este mult folosit n practic ntruct semnalul se preteaz la o
prelucrare automat sau la o nregistrare continu. n aceast variant se nregistreaz n prealabil o curb (sau grafic), n coordonate: potenial de electrod - concentraie a speciei de analizat, i apoi, ntr-o a doua etap, se msoar potenialul de electrod din soluia supus analizei. Din curba nregistrat se obine, fie grafic, fie analitic, concentraia necunoscut. Aceast a doua etap n care se execut msurtoarea propriu-zis, din pcate, nu poate dura mult timp (pentru c suprafaa nu este stabil) fiind necesar, de obicei zilnic, o nou recalibrare a electrodului.
Titrrile poteniometrice, mai utilizate n laboratoare datorit simplitii, preului de
cost sczut, preciziei i a exactitii lor, sunt metode preferate n analize chimice, datorit durabilitii electrozilor, a varietii reaciilor pentru care se pot aplica precum i datorit posibilitilor de automatizare. Acestea sunt, n esen msurtori de volume, momentul citirii volumului de titrant fiind indicat de electrodul de msur. Celula const, n ambele cazuri, din paharul (vasul) de titrare plus ansamblul format de cei doi electrozi i soluie, electrozii fiind legai la un milivoltmetru aa cum se observ n fig. 1.
Fig. 1. Celul de msur; 1- electrod de msur, 2- electrod de referin

Reprezentarea electrozilor n cadrul textelor tehnice se face prin prezentarea formulelor chimice ale materialelor electrozilor obinuite n electrochimie, separate prin bare verticale, care simbolizeaz, fiecare, interfeele dintre materialele de electrod sau electrod soluie. n paranteze se prezint uneori i unii parametri fizici importani pentru buna funcionare a acestuia. Astfel, pentru un caz general, reprezentarea s-ar putea face n felul urmtor:
Electrod 1 | Soluie ionic | Electrod 2
Uneori unul dintre electrozi este separat de soluie printr-o diafragm. n acest caz interfaa este simbolizat prin dou bare verticale: ||. Este cazul electrozilor de referin unde prin aceasta se asigur compoziia constant a soluiei n contact cu electrodul, al crui potenial este meninut la aceeai valoare pe toat durata msurtorilor. Considernd, de exemplu, celula:
M | Mz+ || KCl (sat) | AgCl | Ag
n care electrodul indicator, cel din stnga, este un metal care are potenialul sensibil la ionii proprii, Mz+, electrodul de referin fiind, n acest caz, aa-numitul electrod de argint-clorur
de argint, aflat n contact cu o soluie saturat de ioni Cl- (n conformitate cu denumirea).
Acesta, dup cum se va arta n continuare, ar fi, n absena unei soluii saturate de KCl, sensibil la concentraia ionilor clorur, lucru evitat prin realizarea diafragmei i a contactului cu soluia saturat, a crei concentraie n Cl- este meninut automat constant.
Titrri poteniometrice
Aceste metode msoar o specie chimic pe baza unei reprezentri a potenialului unui electrod, n funcie de volumul, V, folosit pentru titrare, pe baza dependenei funcionale = f(V) - denumit i curb de titrare (fig. 2).
Fig. 2. Curbe de titrare poteniometric
Obiectivul titrrii este evaluarea volumului de echivalen. Curba poate fi explicat, n ceea ce privete forma, cu ajutorul ecuaiei lui Nernst:
= 0 +
RT [ Ox ] ln zF [ Red ]
unde este potenialul de electrod, 0 - potenialul normal standard, R - constanta universal a gazului ideal (8.310JK-1mol-1), T - temperatura absolut, z - numrul de electroni schimbai n reacia ce are loc pe electrod, F - numrul lui Faraday, n coulombi pe echivalent gram, [Ox] - concentraia (activitatea) formei oxidate (de exemplu n molL-1), [Red] - concentraia (activitatea) formei reduse (n aceleai uniti). Forma curbei se explic, iniial, prin prezena n exces a uneia din cele dou forme, de exemplu [Ox], n iar final, prin abundena celeilalte forme, [Red], aprut prin deplasarea echilibrului reversibil al reaciei de electrod: Ox + zeRed. Graficul obinut experimental este n general o curb logaritmic i are o form de S, redat n figura 2 (a) sau (b), forma depinznd de natura reactivului de titrare. n cazul (a), de exemplu, reactivul de titrare este un oxidant. Se lucreaz la curent nul, ceea ce nseamn n limbaj de specialitate la un curent foarte mic, apropiat de zero: 10-9-10-12A. Se msoar potenialul la fiecare adaos de reactiv. Determinarea potenialului se face cu milivoltmetre electronice (cu rezistena intern sau impedan mare), ceea ce asigur un curent mic, sau cu metode prin compensare (la curent practic nul al punii Wheatstone). n aceste metode procesul de electrod nu modific concentraia speciei chimice din soluie, dei o simte. Difereniala curbei de titrare n S este o curb cu maxim, ce permite mai precis gsirea echivalenei - cu condiia ca creterile de volum s fie mici (altfel maximul nu apare pe curb). Electrozii folosii pot fi, n principiu, oricare din electrozii sensibili la concentraie care vor fi reamintii, pe scurt, n cele ce urmeaz sau ali electrozi derivai din acetia.
Tipuri de electrozi Electrozii de spea 1-a: Metal, ion metalic sau M|Mz+; pe care are loc echilibrul de
electrod general: Mz+ + ze-
M. Cea mai bun reproductibilitate i stabilitate o are
electrodul de argint. Toi vor avea potenialul dependent de concentraia ionilor din soluia cu care este n contact direct, Mz+ - lucru uor de neles prin nlocuirea concentraiilor speciilor participante n ecuaia lui Nernst. n general: = 0 + RT ln M z + zF
Electrozii de gaz fac parte, n principiu tot din electrozii de spea I-a. ntre acetia un
loc cu totul aparte l ocup electrodul de hidrogen: (Pt)H2 | H+, (redat n fig. 3), cu echilibrul pe electrod:
H+(aq) + e-
1/2 H2(g) (1 atm ),
n acest caz hidrogenul molecular este dizolvat fizic ntr-un metal nobil Pt (sau Pd). Rolul platinei este dublu, de conductor inert i de catalizator. Electrodul propriu-zis este o plac din Pt (sau Pd) de 0.4-0.5mm, cu suprafaa de 1cm2 legat printr-un fir tot din Pt (Pd) fixat ntr-un tub de sticl. Pe plac se depune electrolitic Pt (platin poroas - neagr) din soluia de acid hexacloroplatinic, H2[PtCl6], timp de 1-2 minute, la o densitate de curent de 50-100mAcm-2.
Fig. 3. Electrodul de hidrogen - etalonul scrii potenialelor normale
Ecuaia potenialului de electrod se poate exprima:
= 0 +
RT H ln 1/2 F pH
+
2
Dar, cum n situaia considerat - standard - prin definiie se poate scrie:

activitatea aH+ = 1 molL-1 i presiunea pH2 = 1 atm,
n acest caz potenialul de electrod devine: = 0 Cum 0 se consider 0.000 voli, printr-o convenie fcut internaional, meninndu-se condiiile standard [69], msurtorile fa de acest electrod permit msurarea potenialului
normal de electrod, 0, direct. Dac se pstreaz constant presiunea hidrogenului, electrodul
poate fi utilizat i ca electrod de pH. De altfel, n caz de litigiu ntre laboratoare, acesta este electrodul cu care se efectueaz expertiza. Ali electrozi de gaz de mai mic importan sunt electrozii de oxigen, de clor etc. n care gazul respectiv se barboteaz peste o plac similar de platin.
Electrozii de spea a 2-a sunt formai prin asocierea a dou straturi: metal/sare greu
solubil a metalului respectiv, iar ultimul este n contact cu o soluie a unui anion al srii greu solubile. Cei mai utilizai sunt electrozii:
[69] condiii standard - T = 298K, activitatea ionilor activi 1 echiv./L, respectiv presiunea parial a speciilor gazoase 1 atm. 60 Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
De argint/clorur de argint, cu formula electrochimic:

Ag |AgCl | Cl-(aq)
avnd reacia de echilibru pe electrod: Ag(s) + Cl-(aq) i potenialul de electrod: = 0 + RT ln{1/[Cl-]} zF AgCl(s) + e-
Se observ c potenialul depinde logaritmic de inversa concentraiei ionului clorur. De calomel, care este format din contactul: mercur - clorur mercuroas i care are reprezentarea electrochimic:
Hg | Hg2Cl2 | Cl-
Este tot mai puin folosit datorit problemelor de legate de poluarea mediului. Evident c ambii electrozi sunt sensibili la ionii Cl-. n soluie la o concentraie constant a ionului clorur, potenialul acestora este, la temperatura camerei, practic o constant.
Electrozii de spea a 3-a sunt formai dintr-un metal, pe care se afl depuse dou
combinaii greu solubile, dispuse n straturi subiri succesive, n contact una cu alta (dintre care n contact cu metalul este o combinaie a ionului metalului-suport). Astfel de electrozi sunt sensibili i funcioneaz reversibil la cationul unui alt metal. De exemplu, un astfel de electrod este redat de lanul:
Pb | PbC2O4(s) | CaC2O4(s) | Ca2+(aq)
pe care are loc echilibrul ionic: Pb(s) + CaC2O4(s) Fazele solide (cele notate electrod al plumbului: = 0 + RT ln [Ca2+] zF
(s))
PbC2O4(s) + Ca2+(aq)+ 2e-
disprnd din expresia potenialului de electrod, din
considerente legate de teoria echilibrului chimic eterogen, se obine pentru potenialul de
Deci electrodul de spea 3-a amintit este sensibil la ionii de calciu.

Electrozii redox sunt electrozi compui din metale nobile scufundai n soluia a dou
specii chimice, aflate ntr-un echilibru reversibil una cu cealalt, o form fiind oxidat (Ox) iar cealalt redus (Red). Trebuie accentuat c ambele specii (Ox i Red) sunt solubile spre deosebire de cazurile precedente. O schem general de reprezentare a acestor electrozi este:
Pt | Ox; Red
sau mai concret, dac considerm un electrod ntlnit curent n practica de laborator, anume electrodul redox Fe(II)/ Fe(III) acesta se reprezint:
Pt | Fe2+; Fe3+
Potenialul de electrod se scrie fr nici o dificultate aplicnd ecuaia lui Nernst: = 0 + RT RT ln{[Ox]/[Red]} = 0 + ln{[Fe3+]/[Fe2+]} zF zF
Electrodul de referin utilizat n msurtorile celulelor formate cu toi electrozii amintii este electrodul de argint - clorur de argint. Rolul metalului (Pt) este doar acela de conductor inert.
Electrozii membrana ion selectivi. Un tip de electrod important i mult ntrebuinat n
tehnica zilelor noastre, din aceast categorie, este electrodul de sticl. Azi, n laboratoarele de analize, electrodul de hidrogen este practic complet nlocuit de acesta n msurtorile de pH (vezi fig. 4). Utilizarea sa se bazeaz pe faptul c potenialul existent la interfaa membran soluie este: H(1)+ H(2)+ Simbolurile (1) i (2) reprezint, respectiv: (1)- specia H+ de pe o parte a membranei (interiorul electrodului) iar (2)- aceeai specie n soluia de determinat. Expresia potenialului de membran este cea a unei pile de concentraie: = const. +
(2) RT a H+ ln (1) F a H+
Fig. 4. Electrodul de sticl
Considerndu-se activitatea a (2) (cea din interiorul electrodului de sticl) constant, se H+ poate scrie expresia final a potenialului electrodului de sticl:
0 st = st +
RT ln a (2) H+ F
unde primul termen - st0 - include toate constantele ce mai intervin n practic. O ecuaie similar se obine chiar dac electrozii interni i externi sunt diferii, caz mai rar ntlnit n practic. Acest electrod de sticl prezint unele neajunsuri i anume n medii puternic acide, sau puternic bazice, apar abateri mari de la ecuaia amintit. n aceste cazuri se recurge la alte tipuri de electrozi, sensibili tot la ionul H+, cum ar fi electrodul de antimoniu (stibiu) 62 Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
Sb|Sb2O3|H+ (un electrod de spea a 2-a) sau electrodul de wolfram (analog ca principiu de funcionare cu primul, doar oxidul care ia natere pe W fiind WO3).
Ali electrozi membran ion selectivi. Alturi de sticl (membrana din electrodul cu
acelai nume) exist numeroase alte membrane. Orice faz neapoas, prezentnd conducie ionic, interpus ntre 2 soluii apoase constituie o membran. Feele membranei trebuie sa aib un rol de schimbtor de ioni. Schematic, un electrod membran se reprezint conform schemei din fig. 5. Electrod de Soluie apoas a referin intern ionului (const.) Membran Soluie apoas a Electrod de (conductor ionului referin extern ionic) (msurat) Fig. 5. Structura unui electrod membran ion - selectiv n celula de msur
Asemntor cu electrodul de sticl sau considernd o pil de concentraie, potenialul de membran are, n general, expresia: = 0 + RT a 2 ln 1 F a
i conine suma tuturor potenialelor de la interfeele lanului pn la poriunile 2 i 1. Sunt comercializai numeroi ali electrozi selectivi pentru anumii ioni ca: Na+, K+, NH+, Cl-, S2etc. Cele mai bune rezultate le dau, deocamdat, electrodul monocristal din LaF3 pentru ionul F-, electrozii din pulbere presat din Ag2S, pentru Ag+ respectiv S2- i electrozii din precipitate impregnate n cauciuc siliconic, sensibili la ionii din precipitat. Un caz particular de electrozi membran sunt electrozii cu membran lichid. Lichidul este un schimbtor de ioni lichid, adic o soluie a unui electrolit organic, cu molecul mare, ntr-un solvent organic. Acesta se impregneaz ntr-un corp poros - inert i din cauza conduciei slabe nu poate avea o grosime prea mare. Membrana este plasat, n construcia electrodului ntre soluia de analizat i soluia apoas intern, cu compoziie fix, n care se gsete introdus un electrod de referin oarecare, care preia semnalul sau chiar un contact direct (fig. 6).
Fig. 6. Schema unui electrod membran ion selectiv
63
Dac ntre electrozii de lucru i de referin exist un curent impus, nu foarte mare (de civa microamperi), are loc o modificare a concentraiei speciei active, din cauza electrolizei. Titrarea se numete cu electrod polarizat. n fig. 7-stnga, se prezint curbele de titrare pentru un curent +i , i = 0 i -i, toate obinute cu acelai electrod. Cele trei curbe nu difer n mod esenial. Se observ c saltul se produce nainte de echivalen, pentru curba trasat n condiiile -i i dup acesta la cea cu curentul opus: +i.
Fig. 7. Curbe de titrare obinute pe acelai electrod la un curent impus
Folosindu-se doi electrozi indicatori identici dar polarizai n sens contrar (unul parcurs de un curent +i i altul de unul -i) prin reprezentarea diferenei de potenial (fig. 7dreapta) aprute aceti electrozi, n funcie de volumul de titrant V, se obine o curb de titrare al crui vrf indic punctul de echivalen. Metoda se numete titrare cu doi electrozi
polarizai, dar aceasta are un singur dezavantaj, anume necesit nregistrarea semnalului n
mod continuu deoarece, fiind foarte ascuit, vrful se poate pierde.

Serii electrochimice
Una din consecinele datelor prezentate n tabelul 8.1 este posibilitatea ordonrii elementelor n funcie de potenialul lor de reducere standard. Dac aplicm o astfel de ordonare pentru metale, de la starea de oxidare uzual a acestora la starea neutr electric se obine seria activitii electrochimice a metalelor. O astfel de serie este redat n fig. 8.8. Au Pt Ag Hg Cu (H) Pb Sn Ni Fe Zn Cr Al Mg Na Ca K 0 + Fig. 8. Seria activitii electrochimice pentru cteva metale uzuale De exemplu, E0(Zn2+,Zn) = 0.76V < +0.34 = E0(Cu2+,Cu) deci Zn are o tendin termodinamic de a reduce Cu2+ i este de ateptat ca reacia de mai jos s aib loc: Zn(s) + CuSO4(aq) ZnSO4(aq) + Cu(s) Msura cantitativ a desfurrii reaciei este dat de constanta de echilibru K. Cnd reacia a atins echilibrul, K = Q, unde Q reprezint raportul de echilibru adic raportul obinut prin nlocuirea n expresia K a datelor concrete (determinate practic) considernd pila
galvanic care funcioneaz pe baza reaciei. Aceasta la echilibru are diferena de potenial E = 0 ntre electrozi. nlocuind n ecuaia lui Nernst K = Q, E = 0, se obine: ln(K) = n F E0 R T
Relaia de mai sus permite s se calculeze contantele de echilibru din potenialele standard. De exemplu potenialul standard se obine (pe baza tabelului potenialelor standard prezentat n anexe) ca fiind E = E0(Cu2+,Cu) E0(Zn2+,Zn) = 1.1 V, de unde ln(K) = 85.6, K = 1.51037 >> 1 i reacia are loc practic complet.
65
Conductometrie Conducia curentului prin soluii
Metoda se bazeaz pe fenomenul de conducie a curentului electric manifestat de electrolii (care sunt conductori de ordinul doi) i pe faptul c fiecare ion contribuie n mod independent la conducia total (analog cu dou rezistene n paralel). Ca i n cazul metalelor, conducia respect ntru totul legea lui Ohm conform creia intensitatea curentului, I, este proporional cu potenialul U (respectiv cu fora electromotoare, FEM, notat de regul cu E) i invers proporional cu rezistena, R. Analitic legea se scrie: U = IR Rezistena unui conductor de seciune uniform variaz direct proporional cu lungimea sa, l i invers proporional cu seciunea sa, s aa nct: R = l/s unde este o constant numit rezistivitate (sau rezisten specific). Inversul rezistenei se numete conductan, 1/R iar inversul rezistivitii se numete conductivitate i se noteaz cu simbolul (lambda grecesc). Ecuaia precedent se poate scrie: R = (1/)l/s de unde: = (1/R)l/s Dac R se exprim n , l n m i s n m2, unitatea pentru conductivitate devine -1m1
sau (pentru c -1 = S, de la Siemens) unitatea de conductivitate este Sm-1 (siemens per
metru). Se mai folosesc adesea i uniti derivate din aceasta ca Scm-1 sau dSm-1. Se pune problema: care ion sau care substan conduce cel mai bine curentul? Kohlrausch (1876) a gsit potrivit pentru exprimarea calitii de a conduce curentul electric n soluii mrimea
conductivitate echivalent, simbolizat (lambda mare - n l. greac veche). Astfel, conform
definiiei: = 1000 /Cn unde cu Cn s-a notat concentraia normal a soluiei. S-a constatat c aceast mrime depinde de natura, dar i de concentraia soluiei, crescnd cu diluia. S-a adoptat de aceea conductivitatea echivalent la diluie infinit, simbolizat , care nu mai depinde de concentraie i permite evaluarea sau compararea contribuiei independente, la conducia total, a fiecrui ion. n tabelul 1 se prezint comparativ valorile conductivitilor echivalente ale ctorva cationi, notate + , respectiv a ctorva anioni, -, la diluie infinit. Se pot remarca
conductivitile ridicate ale ionilor HO- respectiv H+, comparativ cu ale celorlali ioni
monovaleni.
66
Tabelul 1. Conductiviti echivalente la diluie infinit pentru civa ioni frecvent ntlnii Cationul + (Scm-1) Anionul - (Scm-1) H+ 348.8 OH198.6 + K 73.5 Br78.1 NH4+ 73.6 I76.8 + Ag 61.8 Cl76.4 Na+ 50.1 NO371.5 2+ Ba 127.3 HCO344.5 Mg2+ 106.1 SO42160.0 Msurarea conductivitii
Msurarea rezistenei (i implicit a conductivitii) se face prin msurtori electrice. Iniial s-a lucrat cu curent continuu, dar tot Kohlrausch (1876) a propus utilizarea n acest scop a curentului alternativ, pentru c cel continuu ducea la o abatere mai mare a rezultatelor (fcnd metoda inexact) din cauza fenomenelor de la electrozi ce modificau curentul (fenomene denumite polarizri). Primele msurtori s-au realizat cu montaje n punte Wheatstone (vezi fig. 9), unde cu s-a notat celula a crei conductan (sau rezisten) urmeaz a se determina, iar R este o rezisten variabil ntr-un circuit de curent alternativ. Azi se lucreaz cu surse la care frecvena inversrii sensului curentului este mare (de circa 1000 - 2000 de ori pe secund) astfel nct polarizarea practic dispare, iar msurarea rezistenei se face tot prin metoda compensaiei.
Fig. 9. Montaj n punte Wheatstone pentru msurarea conductanelor
Fig. 10. Cteva tipuri comune de celule utilizate n conductometrie
Celulele utilizate sunt de forme diferite depinznd de concentraii. n fig. 10 se prezint cteva celule simple notate: util n laborator (stnga), utilizabil industrial (mijloc) i pentru cazul unor electrolii tari (dreapta), concentrai permind evitarea efectelor electrostatice (ale capacitii ce ia natere). Electrozii sunt confecionai din platin acoperit
67
cu negru de platin, depus electrolitic, dar pot fi i din argint sau oel inoxidabil pentru cazuri mai puin pretenioase. Se folosete, pentru diluie, ap pur, numit ap de conductibilitate, realizat prin redistilarea apei n aparate de sticl termorezistent sau, mai bine, din cuar. O alternativ pentru obinerea acestei ape este trecerea apei distilate peste dou coloane cu rini schimbtoare de ioni (una n forma R-H alta n forma R-OH). La 25C, conductivitile apei sunt urmtoarele:
pentru ap absolut pur, = 5.810-8 Scm-1 pentru ap de conductibilitate, = 1...1010-7 Scm-1 pentru ap distilat, = 1...1010-6 Scm-1
n practic nu se evalueaz R, l i s, pentru a se calcula ci se practic o etalonare a celulei cu o soluie de conductibilitate cunoscut precis. Se nelege c pentru o celul dat raportul l/s este constant i este cunoscut sub denumirea de constanta celulei - notat cu K. De aici, = K/R. Etalonarea se face de regul cu soluii etalon de clorur de potasiu, KCl, a crei conductivitate este cunoscut exact i acceptat unanim. De exemplu, msurnd rezistena unei celule care conine soluie de KCl 0.1N, se constat c aceasta are 3550. Conductivitatea soluiei KCl este cunoscut, fiind 0.01288 -1cm-1, la 25C. O soluie de conductivitate necunoscut introdus n aceeai celul d o rezisten de 4570. Care este conductivitatea a ultimei soluii? Rezolvare: Pentru KCl avem: R = 3550; =0.01288 -1cm-1 i de aici constanta celulei, K este: K = R = 0.012863550 = 45.65 cm-1. Pentru electrolitul necunoscut: = K 45.65 = = 0.009989 -1cm -1 R 4570
De exemplu, n tabelul 2 se prezint conductivitaile unor soluii de KCl. Se poate observa c acestea depind mult de temperatur. De aceea, o condiie esenial n vederea unor determinri de calitate este termostatarea celulei.
Tabelul 2. Conductivitile ctorva soluii de KCl T Conductiviti n Scm-1 C KCl 1N KCl 0,1N KCl 0,01N 15 0,09252 0,01048 0,001147 20 0,10207 0,01167 0,001278 25 0,11180 0,01288 0,001413
Dintre aplicaiile practice din laboratoarele de analize amintim determinarea puritii apei. Nu este vorba numai de urmrirea puritii apei rurilor n ceea ce privete poluarea
care, de regul, duce la creterea conductanei, ci de a se aprecia calitatea apei distilate, respectiv a celei deionizate, necesare n unele procese. Alte aplicaii sunt legate de bile industriale sau diverse tipuri de galvanizare, decapare sau splare, verificndu-se fie modificrile majore de concentraii, fie perfeciunea splrii. O aplicaie aparte, asupra creia se va reveni, este aceea de detector conductometric n analiza prin cromatografie ionic. n fine, cea mai cunoscut aplicaie este titrarea conductometric.
Titrarea conductometric
Dac ntr-o soluie de acid tare se adaug treptat o baz tare (de ex. NaOH) conductana soluiei se modific, la nceput scznd, din cauza antrenrii ionilor H+ provenii din acid ntr-o combinaie puin disociat - apa. Reacia: H3O+ + HO2H2O continu pn cnd neutralizarea este complet. Apoi, continund adugarea de baz, conductana soluiei crete din nou din cauz c excesul de ioni OH- are o contribuie ridicat la conductivitate. Forma curbei: conductan - volum de titrant, aa-numita curb de titrare conductometric, are forma (1) din fig. 11. Minimul corespunde punctului de echivalen, adic sfritului neutralizrii. Deci,
principala aplicaie a titrrii conductometrice este titrarea acizilor tari cu baze tari i invers
Se poate observa c titrarea continu prin determinarea ctorva puncte i dup punctul de echivalen iar ulterior se traseaz dreptele i, n final, din intersecia acestora se obine punctul de echivalen.
Fig. 11. Curbe de titrare conductometric n cazul unor reacii de neutralizare Titrantul se prefer s fie de circa 10 ori mai concentrat dect titratul pentru ca
variaia de volum s fie neglijabil i curbele s fie de la nceput nite drepte. Dac nu se poate realiza acest lucru este necesar o corecie a conductanei inndu-se cont de creterea
de volum. Cnd se titreaz acizi de trie moderat ca acizii acetic sau oxalic, variaia conductanei urmeaz curba (2) din figura anterioar. La nceput conductana este joas. Apoi are loc o scdere uoar dup care aceasta crete paralel cu (1). Dac acidul este foarte slab, cum este cazul acidului boric sau a fenolului, nu se mai poate observa poriunea iniial de scdere a conductanei, curba de titrare fiind asemntoare cu (3) din fig. 11. Dac ns titrarea se execut cu o baz slab, uneori intersecia este mai net din cauz c dup echivalen baza nu mai contribuie practic la conductan, obinndu-se o dreapt orizontal. Metoda se poate aplica i pentru sruri ca acetatul de sodiu cu un acid tare din motive lesne de neles - ionul acetat este de fapt o baz. Prin conductometrie se mai pot indica i titrri bazate pe reacii de precipitare (de ex. NaCl cu AgNO3). n acest caz, la nceput se obine o dreapt orizontal deoarece conductana precipitatului AgCl este practic nul, iar ionul clorur din soluie se nlocuiete, pe parcursul titrrii, cu ionul azotat care practic conduce la fel. La sfrit conductana va crete pentru c ambii ioni din excesul de AgNO3 contribuie la conducie. Printre avantajele titrrii conductometrice trebuie amintit faptul c se pot utiliza soluii diluate, amestecuri de acizi i baze i c se pot chiar analiza soluii colorate. Nu este necesar msurarea conductivitii (i nici etalonarea celulei) ci se msoar rezistena care se reprezint grafic n funcie de volumul de titrare. Totui pentru c reaciile sunt exoterme i
msurtorile sunt sensibile la variaiile de temperatur se recomand termostatarea vasului de titrare.
70
Coulometria
Se cunosc dou categorii de metode ce intr n aceast clas i anume coulometria la

potenial controlat (denumit i coulometrie poteniostatic) i coulometria la curent controlat (sau amperostatic). Ambele metode au la baz legea lui Faraday i ambele necesit
un circuit cu trei electrozi, redat schematic n fig. 12, adic cu un electrod de lucru (EL), un electrod auxiliar (EA) i un electrod de referin (ER) - de regul un electrod de argint/clorur de argint.
Fig. 12. Celul cu trei electrozi util n coulometrie
Fig. 13. Schia unei celule n coulometrie
Metodele se utilizeaz atunci cnd reacia necesar unei analize se petrece cu un randament de curent 100 %. De aceea, la analize de probe cu compoziia total necunoscut, metoda trebuie utilizat cu rezerve, ntruct se poate suprapune peste reacia de interes i una neateptat. Electrodul de lucru este n mod obinuit o sit cilindric de platin. n aceast variant electrodul secundar trebuie plasat ntr-un compartiment separat de restul celulei, prin intermediul unei frite poroase tot din sticl. Soluia trebuie deoxigenat, de regul prin barbotare de N2 (v. fig. 13), mai ales atunci cnd procesul chimic pe care se bazeaz determinarea este unul de reducere. De asemenea, soluia trebuie agitat.
Coulometria la potenial controlat (poteniostatic)
Potenialul electrodului de lucru se alege corespunztor platoului curbei polarografice, adic cel necesar descrcrii doar a speciei de analizat. Curentul iniial este de domeniul microamperilor 5A-100mA, iar curentul scade n timp. Se nregistreaz curentul n funcie de timp i acesta are n general aspectul din fig. 14. Intensitatea la momentul t, It, este dat de ecuaia: It = I0e-pt
unde I0 este curentul iniial; p - factorul de transfer, p = mS/V, S - suprafaa electrodului de lucru (n m2), V - volumul de soluie (n m3) iar m - coeficientul de transfer masic (n ms-1).
Fig. 14. Aspectul semnalului n coulometria la potenial controlat
Fig. 15. Ilustrarea micorrii duratei analizei
O celul bine aleas maximizeaz valoarea p prin utilizarea unui electrod cu o arie mare, a unei celule cu volum mic i cu un coeficient de transfer masic ridicat obinut printr-o agitare eficient a soluiei. Cu valori p maxime se obin durate de analiz minime, la aceeai arie de sub curbe (fig. 15). Calculul propriu-zis const n aplicarea legii lui Faraday i anume: Nr.moli = Q/(zF) unde Q = It reprezint numrul de Coulombi trecui iar z numrul de electroni schimbai n procesul de electrod. Q este aria de sub curba I = f(t) care este proporional cu concentraia speciei de analizat. De regul coulometrele moderne execut i integrarea ariei de sub curb. Msurtoarea se oprete cnd I < 0,1I0 unde I0 este curentul rezidual, adic curentul msurat n absena analitului. Analiza sistemelor multicomponente se poate realiza cnd E1/2 > 200mV, unde E1/2 este potenialul de semiund. Se schimb pur i simplu potenialul electrodului la noua valoare i se ncepe o nou msurtoare. n principiu:
metoda nu are nevoie de etalon primar fiind o metod absolut, una dintre puinele metode cunoscute pn n prezent n afara metodelor chimice - gravimetria i volumetria; n condiii optime, limita de detecie poate fi i mai cobort - pn la 10-8 mol/l
Coulometria la curent controlat (amperostatic)
Varianta aceasta se utilizeaz n titrarea coulometric unde reactivul se genereaz prin electroliz dintr-un precursor prezent n exces n soluie mpreun cu substana de analizat. De exemplu, o soluie de iodur, I- este un precursor pentru iod, (I2) utilizat adeseori pentru titrri iodometrice iar apa oxigenat, H2O2 un precursor pentru ionul OH- din titrrile acido-bazice. Se utilizeaz un electrolit de baz, iar oxigenul este ndeprtat prin barbotare de azot, mai ales dac se face apel la o reacie de reducere. Se utilizeaz n acest caz electrozi de dimensiuni reduse din platin att pentru EL ct i pentru EA iar EA se plaseaz ntr-o incint separat, printr-o frit, de soluia de analizat. Se aplic un curent fix un timp cunoscut n soluii agitate pn la virajul unui indicator. Curentul este din domeniul 10A-100mA.
Metode electrolitice (voltametrice)
Spre deosebire de metodele poteniometrice la care energia liber coninut n sisteme genereaz semnalul analitic, metodele electrolitice reprezint un domeniu al electrochimiei analitice n care o surs extern de energie este utilizat pentru a genera o reacie electrochimic care nu ar avea loc spontan, niciodat. Fora motrice aplicat din exterior poate fi uneori un curent, alteori un potenial. Cnd se aplic un potenial, semnalul analitic msurat este un curent. Din contr cnd se aplic un curent, semnalul valorificat analitic este o tensiune. Tehnicile prin care se aplic un potenial au fost denumite metode voltametrice iar cele n care se aplic un curent au fost denumite metode galvanostatice.
Introducere n polarografie Polarografia este o metod electrochimic - voltametric de analiz, bazat pe
obinerea unor curbe de variaie a curentului (continuu) n funcie de tensiunea aplicat pe doi electrozi, unul polarizabil iar cellalt nepolarizabil. Trebuie menionat c electrodul de lucru este n mod obinuit din mercur, avnd o suprafa extrem de mic, denumit electrod
picurtor (pictor) de mercur. Cellalt electrod (nepolarizabil) este alctuit fie din mercurul
aflat pe fundul celulei (avnd o suprafa mult mai mare), fie este un electrod de referin (din calomel). Pentru asigurarea conduciei necesare, se adaug i o aa-numit soluie de baz care este necesar s dea o concentraie ionic de cel puin 50 de ori mai mare dect a soluiei de analizat. n aceast tehnic, rspunsul care se msoar pe electrodul de lucru este rezultat dintr-o combinaie a transportului de mas, att prin difuzie, ct i prin convecie. Prin variaia continu i cu vitez constant a potenialului dintre cei doi electrozi, de la un potenial de start pn la unul final (adic asigurnd o variaie liniar), ionii din soluie vor migra spre electrodul avnd semnul contrar, iar pe suprafaa electrodului de mercur speciile cu potenialul de descrcare mai mic dect cel aplicat ntre cei doi electrozi se vor descrca (adic apar aanumitele specii electroactive). De aceea, la un moment dat, pe curbele I = f(U) se va observa un salt de intensitate, n form de S, care va fi direct proporional cu concentraia substanei de analizat. Curbele se mai numesc curbe polarografice iar acest salt se denumete und polarografic avnd aspectul din fig. 16. Curba se obine cu un aparat denumit polarograf (fig. 17) ce const din urmtoarele pri principale:
surs de potenial variabil pe domeniul +0.4-2.5V; un microampermetru nregistrator sensibil: 10-4-10-9A; electrodul pictor (o capilar din sticl cu diametru 0.05-0.1mm) i un rezervor de mercur
la care se leag capilara prin intermediul unui tub flexibil i transparent (fig. 18);
electrodul de referin (cu suprafa mare).

nregistrarea polarogramei duce de regul la mai multe unde caracterizate fiecare printr-un potenial de semiund E1/2 - o caracteristic calitativ legat direct de valoarea potenialului standard a reaciei redox ce are loc pe electrodul picurtor i o nlime a undei (v. fig. 16) - o caracteristic cantitativ legat direct de concentraia speciei de analizat. Dup cum se poate remarca din fig. 16, diagrama curent - potenial tipic polarografiei, prezint i nite oscilaii corespunztoare picturilor de mercur care picur dintr-o capilar. Unind maximele curenilor corespunztori fiecreia dintre picturi, rezult o curb tot n form de S. Curentul limit, atins n poriunea superioar a curbei amintite, a fost denumit i curent de
difuziune, din cauz c aici difuziunea are un rol principal la fluxul de material electroactiv n
acele puncte ale vieii picturilor.
I (A)
Mercur, Hg Electrod de referin Azot, N2
h2 A h1 U E
1/ 2 1
Soluia cu ionii de analizat Mercur, Hg
1/ 2 2
E (V)
Fig. 16. Una polarografic
Fig. 17. Schema unui polarograf
Fig. 18. Circuitul exterior al unui polarograf simplu
Pe schema din fig. 18 se observ sursa de potenial variabil redat prin cursorul C, ce se deplaseaz pe firul AB, ampermetrul A i rezistenele n serie, RS, respectiv n paralel, RP,
ce servesc aducerii n scar a curentului precum i cei doi electrozi, cel pictor, de pe care se desprind periodic picturi, i cel nepolarizabil, format din mercurul de pe fundul paharului, legate prin contacte n circuit.
Factorii ce determin nlimea undelor
Saltul de intensitate a curentului este modelat matematic prin ecuaia lui Ilcovi i anume: i d = 0.627zFD1/2 m 2/3 t1/6 C unde z este numrul de electroni schimbai n procesul de electrod, F - numrul lui Faraday, 96496 C, D - coeficientul de difuziune n cm2s-1, m - viteza de picurare n mgs-1, t - perioada de picurare n s, C - concentraia substanei n molL-1, 0.627 o constant de proporionalitate. n condiii fixate se poate remarca c: id = constC deci exist o relaie liniar ntre nlimea undei i concentraia substanei de analizat. Exist cteva neajunsuri ale aplicaiilor cantitative pentru aceast metod. Astfel, prin msurarea continu a curentului n timpul creterii picturii, apare o contribuie substanial a curentului capacitiv care nu mai depinde de specia de analizat, ci de matricea soluiei. Cnd mercurul se desprinde de la captul capilarei, n perioada iniial de formare a unei noi picturi, are loc o cretere rapid a ariei laterale a acesteia. Spre finalul vieii picturii, exist o cretere mult mai mic a suprafeei acesteia, ceea ce diminueaz contribuia modificrilor capacitive la curentul total msurat. Curentul care prezint interes al speciei active provenit din substana de analizat - curentul faradaic - scade cu rdcina ptrat a timpului (o dat cu creterea dimensiunilor stratului de difuziune Nernst). Scderea exponenial a curentului capacitiv este cu mult mai rapid dect a celui faradaic astfel c la finalul vieii picturii contribuia curentului faradaic este decisiv. Din cauz c peste acest fenomen se suprapune modificarea continu a potenialului, chiar i pe momentul desprinderii picturii (de exemplu, la o vitez de baleiaj de 2 mVs-1 i la o vitez de picurare de 4 sec, pe parcursul desprinderii picturii, apare o diferen de 0.8 mV ntre momentul desprinderii i momentul nceperii formrii unei noi picturi), exist o oarecare contribuie capacitiv a curentului la valoarea total a semnalului. De aceea, raportul semnal-zgomot caracteristic acestei metode nu permite msurarea unor concentraii mai coborte de ordinul 10-5-10-6M. Pentru o mai bun observare a curentului faradaic separat de cel capacitiv s-au introdus tehnicile puls-polarografice.
75
Tehnica puls-polarografic normal
Realizeaz o minimizare a efectelor zgomotului de fond, n special ale celui adus de curentul capacitiv. n puls-polarografia obinuit, fiecare nou pas ncepe de la aceeai valoare (o valoare la care nu exist curent faradaic) iar amplitudinea fiecrui pas consecutiv crete, fa de cel anterior, cu incremente mici (fig. 19).
Fig. 19. Principiul puls-polarografiei obinuite
Fig. 20. Variaia potenialului n cazul polarografiei cu und ptrat
Cnd pictura se desprinde din capilar, la intervale predeterminate de timp cu ajutorul unor lovituri (mecanice), provocate de un dispozitiv special, potenialul revine automat la valoarea iniial (aceeai) n vederea unui nou pas. Polarograma se obine, n acest caz, prin reprezentarea curentului msurat n funcie de timpul la care se petrece fiecare pas. n consecin aspectul curbei nu mai este msurat pe tot parcursul creterii picturii i este strict n form de S. Utiliznd pai de potenial foarte mici, i msurndu-se curentul doar spre sfritul perioadei de formare a fiecreia dintre picturi - cnd contribuia curentului faradaic este dominant (mai concret ultimele 50-100ms din viaa unei picturi - care poate fi n mod obinuit de 1-4s), prin aceast tehnic se asigur i un potenial aplicat constant, precum i o suprafa a picturii practic constant. Aplicarea puls-polarografiei a dus la o cretere a sensibilitii de pn la trei ori, adic la limite de detecie de 10-7-10-8M.
Polarografia cu und ptrat
Polarografia cu und ptrat sau puls-polarografia diferenial, este o variant i mai evoluat, n care fiecare pictur face obiectul a dou msurtori de curent diferite, una nainte de pulsul de tensiune - fiecare puls avnd de 50 mV - iar cealalt exact nainte de cderea picturii (fig. 20). Curentul determinat constituie diferena dintre curentul msurat la sfrit i cel msurat nainte de pulsul de tensiune. Apoi aceste diferene sunt reprezentate n funcie de valoarea medie a potenialului. Graficul diferenelor de intensitate msurate n
funcie de tensiunea amintit este mai puin afectat de zgomotul de fond, avnd forma unui pic - reprezentnd de fapt difereniala undei n form de S. nlimea picurilor obinute este parametrul cantitativ al semnalului iar poziia maximului cel calitativ, adic echivalentul potenialului de semiund. Limitele de detecie n aceast tehnic sunt de 10-8-10-9M din cauza discriminrii i mai bune a curenilor capacitivi de cei faradaici.
Voltametria ciclic
Const n aplicarea unui potenial care variaz periodic, ntre dou valori prefixate, cu o vitez cunoscut. n coordonate potenial catodic - timp, apar nite unde triunghiulare, aa cum se poate observa pe fig. 21. Curbele curent - potenial, redate n fig. 22 - numite
voltagrame ciclice - arat ca nite polarograme, fiind urmate apoi de curentul rezidual i apoi
de curentul rezultat din reacia care se petrece n sens opus, pe msur ce potenialul revine la valoarea iniial - urmrind curbele n ordinea t0, t1 i t2. Pentru o reacie reversibil curentul vrfului (picului) corespunde concentraiei analitului conform ecuaiei Randles-Sevcik: ip = (2.6910-6)z3/2 ACD1/21/2 unde ip reprezint curentul corespunztor picului (A), z - numrul electronilor implicai n semireacie, A - suprafaa electrodului (m2), D - coeficientul de difuziune (m2s-1), - viteza de baleiaj (Vs-1), C - concentraia n molL-1. Se poate observa i aici proporionalitatea dintre ip i concentraia analitului, exact ca n polarografia simpl.
Fig. 21. Aspectul variaiei potenialului n voltametria ciclic
Fig. 22 Forma semnalelor obinute n voltametria ciclic
77
Tehnica este utilizat frecvent, n ultimul timp [70], deoarece furnizeaz informaii privind viteza de transfer dintre electrod i analit, privind stabilitatea analitului n sistemul dat i de asemenea, permite estimarea potenialului normal redox (de reducere), r0. Pe fig. 22 se mai pot observa potenialele catodice i anodice de vrf (pic), notate Epc i Epa, precum i valorile curenilor, Ipc, Ipa - egali. Valorile Ipa, respectiv Ipc, reprezentate n funcie de C trebuie s dea o dreapt care trece prin zero, altfel indicnd suprapunerea peste fenomenul reversibil al unei adsorbii (fizice). Potenialul de reducere, r0 se poate calcula prin media dintre Epa i Epc: r0 = (Epa + Epc)/2.
Voltametria de redizolvare anodic
Numit i stripping voltammetry (n englez), este metoda bazat pe redizolvarea depozitului obinut ntr-o prim faz prin electroliz, dizolvare de regul anodic (dar mai rar i catodic) constituie un ansamblu de tehnici foarte sensibile, utilizate pentru determinarea urmelor de metale n mediul ambiant, datorit limitelor de detecie foarte joase i a preciziei relativ ridicate 1-2%; lucreaz n dou etape: 1. Prima etap este depunerea. Pe un electrod meninut la un potenial controlat, constant, scufundat ntr-o soluie agitat, se depune prin electroliz timp de 1-30 minute o fraciune din analitul electroactiv - de regul un metal (fig. 23). Acest electrod este constituit de cele mai multe ori dintr-o pictur de mercur suspendat (electrod de mercur nepicurtor) sau dintr-un electrod de crbune sticlos acoperit cu mercur. n urma electrolizei din soluia agitat se concentreaz metalul de analizat, rezultat din ionul Mz+, care formeaz cu mercurul un amalgam, M(Hg). 2. Urmeaz apoi a doua etap, redizolvarea. Se oprete agitarea i se micoreaz progresiv diferena de potenial dintre electrodul de mercur i cel de referin, msurndu-se curentul. Electrodul de mercur coninnd amalgamul - iniial catodul celulei - devine progresiv anod iar curentul la nceput crete apoi revine la zero spre sfrit (fig. 24). Aadar, reversibilitatea reaciilor redox duce la o redizolvare a analitului. Semnalul analitic l constituie, n acest caz, suprafaa curbei curent-tensiune obinute, din care se calculeaz, pe baza legii lui Faraday, cantitatea de metal din prob. n ultimul timp tehnica a mai fost combinat i cu polarografia cu und ptrat, care a asigurat o reversibilitate i mai bun a metodei. Anume, scderea tensiunii are loc n trepte, analog cu modalitatea de cretere a tensiunii n polarografia cu und ptrat. n mod cu totul similar are loc i msurarea curentului.
[70] Informaii se mai pot gsi la: http://www.epsilon-web.net/Ec/faq/faqtec.html#Cvrev 78 Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
Fig. 23. Aspectul evoluiei potenialului electrodului de lucru n cadrul voltametriei de redizolvare anodic
Fig. 24. Forma semnalului analitic n cadrul determinrii Zn i Cd prin voltametrie de redizolvare anodic
De exemplu pentru analiza unui amestec Cd, Zn cu potenialele de descrcare -0.40V, respectiv, -0.763V, variaia de potenial medie este redat pe fig. 23 (etapa I dureaz 5 min). Apoi, n urma etapei a II-a, prin modificarea n tensiuni se obin curbele din fig. 24.
Aplicaii
Polarografia i variantele sale sunt metode de analiz chimic att calitativ ct i cantitativ a amestecurilor de compui organici sau anorganici, cu condiia ca acetia s fie electroactivi. Limitele de concentraie la tehnica obinuit - cea n curent continuu - sunt 10-210-5molL-1, adic are un domeniu dinamic larg, i se caracterizeaz printr-o precizie de 1-3%. Aspectul unei polarograme pentru un amestec Cd2+, Zn2+ este redat prin curba 1 din fig. 25. Dac soluia conine i titan, mai apare o und redat prin curba 2 de pe aceeai figur.
Fig. 25. Aspectul polarogramelor amestecurilor de ioni: 1= Cd2+, Zn2+; 2= Ti3+, Cd2+, Zn2+
Fig. 26. Ilustrarea principiului metodei adaosului standard simplu i multiplu
n analiza chimic, se lucreaz printr-una din cele dou metode cunoscute metoda
curbei de etalonare sau metoda adaosului standard. n prima se utilizeaz o curb de
etalonare n coordonate semnal (nlimea undei) - concentraie, de regul alctuit pe baza a 5-8 puncte, obinute cu ajutorul unor soluii etalon. n a doua, se adaug ntr-un volum de soluie de prob, V, cunoscut precis, avnd concentraia necunoscut, Cx, un volum, v - mult
mai mic, dintr-o soluie etalon, cunoscut, de concentraie CCUN, a speciei de analizat. Aceast variant presupune o liniaritate pe un domeniu mai larg de concentraii. n metoda adaosului standard (simplu), iniial se msoar semnalul h0 n soluia de analizat i dup adaosul volumului v, noul semnal h1 corespunztor noii concentraii, de exemplu C1 - necunoscut. Deoarece avem o proporionalitate ntre semnal i concentraie (fig. 26) rezult: h 0 Cx = h1 C1 Aceasta provine att din soluia de analizat, necunoscut ct i din soluia etalon, cunoscut. Expresia pentru noua concentraie C1 se poate scrie: C1 = C x V + CCUN V V+v
nlocuind C1 n ecuaia precedent se poate exprima concentraia necunoscut Cx, printr-o expresie nu tocmai simpl dar practic dac se folosete un calculator. O metod mai sigur este metoda adaosului standard multiplu. Aceasta se bazeaz pe reprezentarea grafic a semnalului doar n funcie de concentraia cunoscut (v. fig. 26). n aceast metod se utilizeaz tot proporionalitatea semnal - concentraie mai ales atunci cnd domeniul liniar este larg. Prin introducerea de 1, 2 sau n volume, v, de concentraie cunoscut CCUN n volumul V al soluiei de analizat, cu concentraia Cx se vor crea noi concentraii C1, C2, ..., Cn, introduse din exterior, peste cea iniial, care se pot calcula astfel:
Cn =
nvCCUN V + nv
Semnalul, crescnd liniar cu concentraia, poate fi extrapolat, intersectnd axa negativ n punctul A (vezi fig. 26). Acest punct permite calculul concentraiei necunoscute Cx prin simpla comparaie a dimensiunii segmentelor AB cu un segment de pe axa pozitiv a concentraiei, Cn. De exemplu, dac Cx este egal ca lungime cu intervalul 0 - C3 atunci Cx=C3. Logica metodei se poate gsi n asemnarea triunghiurilor ADC i AEB din fig. 26. Aadar Cx va trebui exprimat n aceleai uniti cu concentraiile de pe scara Cn. Numrul mai mare de puncte asigur un plus de ncredere n liniaritatea metodei i o exactitate mai bun fiind vorba de o medie a mai multor determinri.
80
1. Care este ecuaia care red factorii de care depinde potenialul de electrod? 2. Ce electrozi de referin cunoatei? 3. Ce tip de electrod, dintre cele 4 tipuri cunoscute, este electrodul de argint - clorur de argint? 4. Din ce categorie de electrozi face parte electrodul de sticl? 5. Care electrod se folosete, n caz de litigiu, pentru evaluarea pH-ului? 6. De ce tip este un electrod de platin scufundat ntr-un amestec de ioni Ti4+, Ti3+? 7. Ce form are curba de titrare poteniometric? 8. Ce unitate se utilizeaz pentru exprimarea conductanei? 9. n ce tehnic se utilizeaz electrodul picurtor de mercur? 10. Cum se numete semnalul analitic n polarografie i ce caracteristici are? 11. Prin ce se deosebete voltametria ciclic de polarografie? 12. Ce mrimi fizice se nregistreaz n coulometrie? 13. Ce reprezint ecuaia lui Ilcovi? 14. Ce variante se pot utiliza pentru analiza cantitativ n polarografie? 15. Cnd se poate aplica metoda adaosului standard?
81
Metode termice de analiz Dac nu poi suporta cldura, nu gdila balaurul Scott Fahlman (specialist n tiina Calculatoarelor, n. 21 Mar 1948 [71]) - cu referire la Harry S. Truman
Metode termice de analiz

O metod general de analiz chimic instrumental este analiza termic adic metoda de estimare calitativ i cantitativ bazat pe efectul termic al unor fenomene chimice provocate experimental.
Metodele termice de analiz msoar diferenele relative ce apar, ntre o prob i un
anumit etalon, n ceea ce privete o anumit proprietate, o dat cu creterea temperaturii sau a diferenei de temperatur dintre prob i etalon, simultan cu nclzirea probei. n afar de faptul c orice fenomen chimic este nsoit de un efect termic, uneori mai mare alteori mai mic, substanele chimice nu sunt stabile termic n orice condiii. Mai precis, de la o anumit temperatur, n sus (sau, dup caz, n jos), substanele chimice sufer transformri fizico-chimice detectabile prin msurtori de temperatur (termometrie), iar prin determinarea altor parametri fizici msurai simultan cu schimbarea de temperatur, acestea pot fi analizate. Astfel, termic, se pot urmri unele fenomene fizice ca: topirea, cristalizarea, fierberea, sublimarea i vitrifierea (la polimeri, de exemplu) sau fenomene chimice cum ar fi diverse reacii de oxidare (ardere), descompuneri, deshidratri sau interaciuni fizice (chemosorbii).
Termometrie
Temperatura de topire a substanelor (respectiv cea de solidificare) sau cea de fierbere, fiind nite constante fizice, pot servi la determinarea puritii. Astfel, n cazul unei sinteze organice, punctul de topire este prima dovad c s-a obinut produsul dorit. n cazul aliajelor binare (formate doar din dou metale) curbele de rcire prezint nite schimbri de vitez de rcire ce permit determinarea compoziiei acestora. Determinarea temperaturii critice a soluiei formate din dou lichide diferite, parial miscibile, permite de asemenea determinarea compoziiei amestecurilor binare. De exemplu, dou lichide separate printr-o interfa (deci formnd dou faze) la nclzire lent formeaz, la atingerea unei anumite temperaturi, o singur faz. Aceasta se mai numete temperatur critic superioar a soluiei. Metoda servete n tehnic, de exemplu, la determinarea punctului de anilin al uleiurilor.
Punctul de anilin este temperatura la care volume egale de ulei i anilin formeaz
mpreun o singur faz transparent (omogen). Practic, cantiti mici de prob sunt introduse ntr-un tub capilar i observate, n timpul nclzirii cu vitez mic, la microscop.
[71] http://www-2.cs.cmu.edu/~sef/ Chimie Analitic i Instrumental 83
Punctul de rou, respectiv temperatura la care vaporii condenseaz, constituie o
metod de estimare a umiditii n cazul gazelor. O metod de analiz chimic cantitativ aproape general o constituie titrarea entalpimetric.
Titrarea entalpimetric Titrarea entalpimetric (denumit uneori i titrare termometric sau calorimetric)
este un procedeu aplicabil oricrei reacii cantitative. Se aplic atunci cnd nu exist un indicator optic al sfritului titrrii (fie de culoare fie de fluorescen) sau unul electrochimic. Metoda se poate utiliza chiar n lichide tulburi, colorate intens sau neomogene. n cursul titrrii trebuie s existe o coresponden unic T H. Astfel, n situaia cnd cldura degajat este H pentru un mol atunci pentru n moli efectul termic va fi nH. Dac se noteaz cu K constanta calorimetric a incintei termostatate avem: -T = n H K (1)
Astfel, utiliznd o biuret i un instrument sensibil la temperatur - un termocuplu sau un termistor - precum i un dispozitiv de nregistrare a acestui semnal, se poate realiza o analiz instrumental universal, la un pre accesibil (fig 1). Graficul obinut, n coordonate temperatur - volum de titrare, permite sesizarea sfritului reaciei, deci a volumului de echivalen (fig. 2). Msurndu-se volumul de soluie luat, valoarea H fiind cunoscut, se poate fie calibra vasul calorimetric (adic determina constanta calorimetrului K), cunoscndu-se numrul de moli N luai dintr-o substan etalon, n conformitate cu ecuaia prezentat anterior, fie cunoscndu-se constanta K s se determine, prin titrare, valoarea N.
Fig. 1. Un dispozitiv simplu

84
Fig. 2. Curb de titrare termometric

pentru titrare termometric Metoda poate fi aplicat chiar i n solveni organici, n soluii colorate sau n topituri,
fiind realmente o metod util atunci cnd alte alternative cad. n loc de flacon de titrare se poate utiliza un vas izolat termic: fie un vas Dewar (vas cu pereii dubli, vidat i argintat), fie un vas din polietilen plasat n mijlocul unui cub din spum polistirenic sau poliuretanic de dimensiuni 20x20cm. Acesta echivaleaz cu un termostat de calitate bun. Dispozitivele utilizate pentru msurarea temperaturii pot s fie un termocuplu legat la un poteniometru nregistrator sensibil, un termistor legat la un microampermetru sensibil, iar mai recent o rezisten electric, sensibil la temperatur, legat printr-o interfa adecvat la un calculator.
85
Analiza termogravimetric (TG i DTG) Termogravimetria (TG) se poate defini ca studiul schimbrii masei materialelor n
funcie de temperatur, de timp i ntr-o atmosfer dat. TG este o tehnic prin care se msoar masa probei o dat cu creterea temperaturii. Metoda este util n determinarea puritii probei precum i a concentraiilor de ap, de carbonai sau de substane organice din materiale, dar n general pentru studierea oricrei reacii de descompunere termic.
1
2 m 3
Fig. 3. Schema de principiu a nregistrrii curbelor T i TG
Fig. 4. Aspectul curbei termogravimetrice (TG) pentru oxalatul de calciu
Astfel, prin nclzirea (sau rcirea) cu vitez constant a unei combinaii sau a unui material, acesta poate suferi o serie de transformri att fizice ct i chimice care pot fi puse n eviden prin msurarea simultan a masei probei i a temperaturii acesteia. Modificrile masice nregistrate duc la nite reprezentri grafice numite termograme sau curbe
termogravimetrice (prescurtate TG) precum i la difereniale ale acestora (DTG) vizibile n
fig. 3. Aparatura utilizat este descris principial n aceeai figur. Se observ c proba se nclzete ntr-un cuptor, a crui temperatur se msoar, viteza de nclzire fiind controlat n aa fel ca temperatura s creasc continuu i, pe ct posibil, liniar. Simultan proba se cntrete.
Termogramele (curbele TG) constituie adevrate amprente pentru probe formate din
amestecuri complicate de substane, permind chiar analize cantitative de minerale prin utilizarea metodei adaosului standard. Un exemplu de termogram este prezentat n fig. 4, pentru oxalatul de calciu. Se poate observa cte un palier pentru fiecare compus care apare n urma transformrii termice. Primul salt corespunde pierderii apei, al doilea transformrii n carbonat iar al treilea descompunerii carbonatului n oxid de calciu i ap. Deci pe parcursul termogramei au loc reaciile: CaC2O4H2O CaC2O4 CaCO3 CaO + H2O 1 2 3 4
86
Analiza termodiferenial
Analiza termodiferenial (DTA) se bazeaz pe msurarea diferenei de temperatur dintre prob i o substan de referin, o dat cu nclzirea ntregului sistem. Metoda este sensibil la procese endo- i exotermice cum ar fi: tranziii de faz, deshidratri, descompuneri, reacii redox i reacii n faz solid. Curbele DTA, obinute n urma aplicrii metodei, nregistreaz diferena de temperatur, T, ce apare ntre prob i o substan de referin, de regul Al2O3, aflate ambele n acelai cuptor ntr-un proces de nclzire. Este o tehnic veche, introdus de W. C. Roberts-Austen nc din 1899. Se lucreaz, de exemplu, cu un termocuplu diferenial (vezi fig. 5).
Fig. 5. Schema de principiu a obinerii curbelor DTA
Fig. 5.6. Semnalul analitic n DTA
Astfel, proba i materialul de referin se afl ambele n aceleai condiii de temperatur T, fie n nclzire, fie n rcire sau pstrate la o valoare constant a temperaturii n timp. La o anumit temperatur doar proba sufer o transformare - ce decurge, n funcie de natura acesteia, cu absorbie sau cedare de cldur. Curba T - funcie de T constituie curba
termodiferenial sau DTA. Se pot pune n eviden fenomene exotermice (T<0) sau
endotermice, rezultnd o curb caracteristic pentru un anumit material (de ex. pmnturi, minerale, metale). Pentru cazul simplu cnd conductibilitatea termic a probei, k, coincide cu cea a probei etalon, inerte din punct de vedere al modificrilor de structur, sub aciunea temperaturii, ntre masa probei m i T se poate scrie ecuaia: T = m dH k dt (2)
unde dH/dt reprezint cantitatea de cldur degajat (respectiv consumat) de 1 mol substan n unitatea de timp, la un moment dat, t. n intervalul de timp t2 - t1, ct dureaz transformarea endotermic (vezi fig. 6) se poate scrie: m dH = k TdT dt (3)
87
Pentru transformarea de mai sus, rezultatul primei integrale - H - fiind o constant iar numrul de moli N = m/M, ecuaia se poate rescrie: N= k TdT H (4)
unde integrala reprezint chiar aria de sub curb (vezi poriunea nnegrit fig. 6). Deci, cunoscnd efectul termic al reaciei (H) i determinnd aria de sub curb, se pot realiza cu aceast tehnic analize cantitative, evalundu-se numrul de moli n dintr-o substan pe baza unei etalonri prealabile. Aparatele ce nregistreaz simultan curbele T, TG, DTG i ATD pe aceeai prob au primit denumirea de derivatografe.
Calorimetria diferenial
Este cunoscut sub prescurtarea DSC (de la differential scanning calorimetry); ofer aceleai informaii dar prezint cteva avantaje i anume factorii cum ar fi granulaia precum i pregtirea probei afecteaz mai puin curbele, iar exactitatea i precizia sunt mult mbuntite. Metoda mai aduce n plus i calitatea de a se putea determina capacitile calorice ale materialelor.
Calorimetria diferenial (DSC) msoar independent debitele de flux termic spre o
prob i spre un etalon, care se afl ambele la aceeai temperatur. Se determin apoi diferena dintre cele dou fluxuri termice i se reprezint grafic diferena dintre fluxurile termice, n funcie de temperatur. Tehnica a fost introdus n 1964 de Watson i ONeill. Se utilizeaz dou incinte calorimetrice, una coninnd proba i alta, materialul de referin, separate una de alta, dar meninute de dou dispozitive de nclzire separate (rezistene de platin), la aceeai temperatur. nclzirea, realizat electric, se nregistreaz. n acest fel proba care absoarbe cldur va necesita o nclzire suplimentar pentru a se realiza temperatura dorit - cea fixat printr-un program de temperatur prevzut dinainte. Fineea mai mare face posibile i alte aplicaii ca:
determinarea temperaturii de tranziie n polimeri, determinarea temperaturii de denaturare a proteinelor, identitatea a dou materiale - cauciuc, sol, asfalt, ulei, vopsea.
Toate acestea ale DSC apar pe lng aplicaiile curente ale analizei clasice ATD. Alte tehnici moderne sunt pe cale s devin metode curente. Astfel, n 1993 M. Reading a introdus tehnica DSC cu temperatur modulat. n aceast variant, n ambele incinte calorimetrice, creterea de temperatur urmeaz o modulare, adic o und ptrat, n
medie creterea de temperatur fiind liniar. Rspunsului i se aplic apoi transformata Fourier. Prin aceast metod se pot separa procesele reversibile de cele nereversibile crescnd rezoluia i sensibilitatea determinrilor n cazul tranziiilor vitroase. n 1998, un colectiv (condus de acelai autor) a introdus analiza calorimetric combinat cu microscopia cu efect
de cmp. Aici, vrful utilizat de microscopia cu efect de cmp pentru urmrirea topografiei
suprafeei este nlocuit cu o rezisten miniaturizat. Vrful baleiaz suprafaa probei rezultnd imaginea suprafeei - similar cu cea din microscopia cu efect de cmp. Vrfului respectiv i se mai aplic o modulare de cteva grade peste temperatura probei, prin curentul alternativ utilizat, acesta avnd frecvene de ordinul kHz - ilor. Datele permit, n afar de imaginea suprafeei, obinerea de informaii privind conductivitatea termic i difuzivitatea termic a probei.
89
1. Cum se pot defini metodele termice de analiz? 2. Ce metode termometrice putei aminti? 3. Ce mrimi se msoar n analiza termogravimetric i la ce poate servi metoda? 4. Ce deosebire exist ntre curbele DTG i DTA? 5. Care este etalonul cel mai utilizat pentru analiza termodiferenial? 6. De ce ntre dou fenomene termice n tehnica DTA curba este practic orizontal? 7. n ce const diferena dintre tehnicile DSC i DTA?
90
Metode optice de analiz tiina nu are patrie Louis Pasteur (1822-1895), Chimist i biolog francez
Metode optice de analiz

Generaliti
Metodele optice de analiz utilizeaz ca mijloc de excitare a substanelor (respectiv atomilor componeni ai moleculelor) radiaia electromagnetic, n vederea obinerii de informaii privind fie natura constituenilor fie cantitatea acestora. Se tie c radiaia electromagnetic este o forma a materiei specific, cu proprieti att de und ct i de particul (comportament dual). Componentele - electric i magnetic oscileaz perpendicular una pe alta dar i pe direcia de propagare. Caracteristicile cantitative ale luminii sunt:
lungimea de und a oscilaiei (), frecvena () legat de lungimea de und prin: = c/ unde c este viteza luminii, amplitudinea (A), polarizarea.
Orice raz de lumin poate fi asociat unui flux de fotoni (concepia corpuscular) fiecare foton avnd energia E i anume: E = h = hc/ n cm care se noteaz . Fasciculele de electroni i neutroni se supun acelorai legi dar masele particulelor fiind mai mari i lungimile de und sunt mult mai mici.
Intensitatea undei electromagnetice, I, este definit ca energia ce trece prin unitatea de
-1
(1)
Adeseori se folosete n locul frecvenei numrul de und, 1/, de preferin exprimat
suprafa i este legat de amplitudinea, A, prin ecuaia: I = A2c/8 (2) Interaciunea cu materia a diferitelor radiaii, pe diversele sale domenii spectrale, a constituit o surs bogat de informaii privind proprietile i compoziia chimic a materialelor dar i ale mediului ambiant. O mare parte din informaiile cantitative pe care le deinem la ora actual privind structura atomilor, moleculelor sau materialelor au fost obinute prin excitarea substanei cu o anumit form de energie electromagnetic - deci prin metodele spectrale (optice). De altfel i n metodele electrochimice, substanelor li se aplic din exterior energie electric sau sunt aduse n situaia de a reaciona i a emite energie.
Analog stau lucrurile i n metodele optice [72]. De exemplu, radiaia infraroie posed o energie potrivit pentru a face atomii moleculelor din aer s intre n vibraie. Cednd energie, lumina infraroie scade n intensitate. Energia nu dispare ci se transform treptat n
energie de agitaie termic - form spre care tinde orice energie furnizat materiei. Pe de alt
parte, lumina ultraviolet (UV), anume cea cu lungimi de und sub 200nm, are o energie potrivit pentru a excita electronii din atomii componeni ai moleculelor (covalente) din substanele aflate n stare gazoas n aer. Molecula excitat are un timp de via scurt, ~10-8s. Dup acest interval, aceasta revine la starea fundamental, n care a existat iniial, emind la rndul ei (cednd) energie, dar de ast dat n toate direciile. Aceasta este radiaia difuzat (mprtiat). Anumite molecule, ca dioxidul de sulf de exemplu, nu revin direct n starea fundamental deorece au nivele intermediare. Acestea, cnd revin din starea intermediar la starea fundamental, moleculele emit o alt lungime de und fa de lumina primit, n general mai srac n energie (deci de lungime de und mai mare). Spunem n acest caz c s-a emis o radiaie de fluorescen. Aadar n domeniul UV moleculele din aer absorb lumin din cauza salturilor electronilor din atomi pe nivele energetice mai nalte. Fa de alte domenii ale energiilor luminoase, substanele pot fi transparente. S presupunem c mergem pe biciclet pe o osea neted. Drumul are asperiti dar noi nu le simim pentru c, denivelrile fiind mult mai mici fa de diamentrul roilor, nu interacioneaz cu acestea. Dac coborm o vale i apoi urcm o pant uoar, o neregularitate cu raza de curbur mult mai mare dect diametrul roilor, de asemenea nu ne face s simim mare lucru. Dac ajungem cu bicicleta pe un drum cu denivelri de ordin de mrime apropiat de raza roilor, bicicleta ncepe s vibreze, i s piard din viteza de naintare (deci din energie). Cnd ajungem pe o poriune cu gropi mari, de 10-20cm nu mai putem nainta practic ntreaga energie imprimat bicicletei fiind pierdut. Similar se petrec lucrurile i n cazul energiei radiaiei electromagnetice transmise substanelor. Deci, faptul c o oscilaie de o anumit dimensiune este absorbit de atomii, respectiv electronii legturilor chimice din molecule, indic faptul c n interiorul acestora exist acelai ordin de mrime a tranziiilor energetice. Cnd energia radiaiei trece practic nereinut, nseamn c energiile puse in joc n molecula respectiv au cu totul alte ordine de mrime. Lumina (sau radiaia electromagnetic) mai nseamn i energie ce se transmite doar n buci, numite cuante de energie, i care pot fi calculate din lungimea de und: E = h = hc/ (3) Domeniul de lungimi de und fiind foarte larg, radiaia electromagnetic este foarte
[72] metode optice se consider cele care lucreaz n domeniul UV, vizibil i IR iar tehnicile care aplic tot principii optice dar n alte domenii (X, etc.) se consider metode spectrale. 92 Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
diferit. Dac ar fi s facem o comparaie ntre energiile radiaiilor IR i X, de exemplu, prima este ca un bulgre de vat aruncat cu mna iar a doua este, fa de prima, ca un obuz tras dintr-un tun. De aceea, pentru orice legtur chimic sau pentru orice energii implicate n moleculele substanelor exist un domeniu de energii (ale undelor electromagnetice) n care acestea vor interaciona cu substana respectiv. n funcie de natura interaciunii radiaiilor de natur luminoas cu substanele, metodele spectrale se pot clasifica n:
metode de absorbie (pe domenii diverse: raze X, vizibil, UV, IR, RMN etc), metode de emisie a radiaiei electromagnetice (tot pe diverse domenii), metode de fluorescen (UV, VIS, X etc), fosforescen sau luminescen, metode de difracie (cu raze X, cu electroni, cu neutroni), refractometria i interferometria, polarimetria, metode bazate pe difuzia luminii, metode combinate.
Domeniile spectrale la care ne-am referit anterior sunt prezentate n tabelul 1.

Tabelul 1. Domenii spectrale folosite n analizele instrumentale Denumirea Lungimi de und, domeniului Tipul Tipuri de tranziii spectrometriei n cm n mrimi uzuale spectral 102-103 1m-10m Radio RMN Reorientri de spin nuclear 10-1 1mm Microunde RES Reorientri de spin electronic 10-2 100m IR ndeprtat IR Rotaii moleculare 10-3-10-4 1m-10m IR apropiat IR Vibraii moleculare 400 -750nm Vizibil VIS Energii ale electronilor de valen 10-5 100-400nm UV apropiat UV Energii ale electronilor de valen 10-6 10 nm UV UV Energii ale electronilor interiori ndeprtat 10-7-10-8 1 nm (1) Raze X Rntgen Energii ale electronilor interiori (de raze X) 10-9-10-10 0.1-0.01nm Raze Gama Energii ale ale nucleonilor
Metodele optice dau i alte informaii valoroase privind substanele, de exemplu: compoziia (concentraii, componeni, faze), viteze de reacie, constante de echilibru, structuri ale combinaiilor (distane ntre atomi, ntre plane de atomi, energii de legtur). Contribuiile cruciale n progresul metodelor optice le-au adus:
Newton - 1696 - ce realizeaz primul descompunerea luminii albe cu ajutorul prismei; Wollaston - 1802 - i Fraunhofer - 1859 - care descoper spectrele de emisie respectiv de
absorbie;
Kirchhoff - 1859 - enun legea privind legtura ntre capacitatea de emisie i de absorbie
a luminii de ctre corpuri, lege ce-i poart numele;

Bunsen i Kirchhoff - 1860 - primul chimist, al doilea fizician, pun bazele spectroscopiei,
devenit astzi spectrometrie datorit msurtorilor electrice asociate;

Louis de Broglie - 1924 - intuiete existena dualismului corpuscul - und.
n ultimul timp, principalul progres a fost computerizarea instrumentaiei spectrometrice pentru toate tipurile de analize, lucru care a deschis noi perspective prelucrrii numerice rapide a semnalelor, ceea ce a condus chiar la noi metode (de exemplu extinderea aplicrii transformatei Fourier n analizele chimice) dar i utilizarea fibrelor optice, pentru dirijarea drumului optic, ceea ce a dus la micorarea dimensiunilor instrumentelor.
94
1. Ce este o cuant de energie? 2. Ce devine, n cele din urm, orice energie furnizat materiei? 3. Pe ce interval de lungimi de und se gsete domeniul de radiaii vizibile? 4. Cnd nu poate o radiaie interaciona cu materia, trecnd practic neabsorbit prin aceasta? 5. Ce sunt razele Rntgen? 6. n ce secol a aprut spectrometria de emisie? 7. Ce tranziii au loc n domeniile vizibil i UV? 8. Ce fel de tranziii au loc n cazul apariiei unui spectru IR? 9. Care radiaii au energie mai ridicat, razele X sau cele ? 10. Din ce domeniu spectral face parte metoda care se bazeaz pe modificri ale strii de rotaie a spinului electronic?
95
Spectrometria de absorbie n UV-VIS Nu poi nela legile naturii fr s fii pedepsit Honor de Balzac (1799-1850)
Spectrometria de absorbie n UV-VIS

Principii generale
Una dintre primele metode instrumentale aprute i utilizate frecvent n practica laboratoarelor de analize chimice din zilele noastre este metoda bazat pe absorbia luminii din domeniul vizibil (domeniu notat n literatura internaionala VIS). Se cunosc mai multe variante importante pentru aceast metod: colorimetria, fotometria i spectrofotometria.
Colorimetria, una dintre tehnicile extrem de mult utilizate n practica analitic,
reprezint varianta n care intensitatea culorii probei [73] se compar vizual sau instrumental,
n lumin alb, cu un set de soluii etalon - preparate n condiii absolut identice cu proba.
Aceasta este o metod subiectiv i mai puin selectiv, pentru c rezultatele depind mult de persoana care execut analiza. Se remarc faptul c sensibilitatea maxim a ochiului omenesc atinge maximul pentru domeniul 550-560nm (domeniul culorii verzi), lucru important cnd compararea probei cu etalonul se face vizual. n aceast tehnic se pot realiza msurtori, prin comparaie vizual, chiar n eprubet la lumina zilei, rezultnd analize chimice cu exactiti mai slabe dect 1%. Cu ct exist mai multe soluii etalon, pentru comparaie, cu att metoda este mai exact. Exist, dup cum am amintit i metode colorimetrice instrumentale, obiective, dar acestea sunt tot mai puin folosite. n schimb se folosesc aparate ieftine care utilizeaz metode colorimetrice bazate pe reacii executate pe hrtie de filtru, pe substane aflate n stare adsorbit pe suporturi granulare - n cazul gazelor - i chiar pe reacii de culoare n soluii.
Fotometria i spectrofotometria msoar instrumental lumina transmis de o soluie colorat [74] lucrnd cu o surs de lumin monocromatic. Cnd lumina incident este filtrat, prin filtre optice, avnd un spectru mai larg, avem de a face cu o fotometrie iar cnd
domeniul filtrat este mai ngust (utiliznd monocromatoare) vorbim de spectrofotometrie. n ultima variant, este posibil fixarea mai precis a lungimii de und la care se lucreaz. Cu ambele variante se poate chiar trasa un spectru de absorbie, adic o curb, obinut prin msurarea semnalului n funcie de lungimea de und a radiaiei incidente. n literatura de specialitate uneori se folosete pentru ambele metode i denumirea de metod colorimetric (sau chiar spectrocolorimetric), ceea ce uneori poate crea confuzii. n domeniul UV, ochiul
[73] a substanei de analizat sau a unei combinaii realizate intenionat. [74] mai precis, care absoarbe lumina pe acel domeniu. Chimie Analitic i Instrumental 97
omenesc nepercepnd lumina, se utilizeaz doar spectrofotometria. ntruct principiile sunt identice iar aparatele sunt n multe privine similare n cele dou domenii, n ultimul timp, n afar de aparatele dedicate domeniului VIS sau a celor pentru UV, de multe ori se utilizeaz un singur instrument pentru ambele intervale de lungimi de und, ceea ce a dus la denumirea din titlu. Construcia instrumentelor are n general dou variante anume spectrofotometrele
monocanal, cu un singur drum optic i cele comparative, prevzute cu dou canale. n
spectrometrele comparative printr-o singur msurtoare, proba etalon cu cea de analizat se compar utiliznd dou radiaii care-i au originea n aceeai surs (coerente). Schematic, un spectrometru de absorbie este redat n figura 1:
sursa de radiaie (S), monocromatorul (M), cuveta cu prob (P), detectorul (D), amplificatorul (A), nregistratorul (I). Fig. 1. Pri componente ale spectrofotometrului de absorbie (vezi textul)
Se observ (fig. 1) c radiaia incident, monocromatic, realizat cu ajutorul

monocromatorului M, trece prin cuveta cu prob, C, unde intensitatea scade fa de situaia n
care n locul probei de analizat se pune o aa-numit prob martor (sau prob oarb) - o prob de referin de concentraie zero. Apoi fascicolul cade pe detectorul D, unde semnalul optic este transformat n semnal electric. Semnalul rezultat, dup o amplificare, poate fi n final msurat i nregistrat. nregistrat nu mai nseamn astzi ntotdeauna preluarea semnalului cu un nregistrator ci mai degrab introducerea acestuia n memoria unui calculator urmnd de regul prelucrarea automat a datelor. Materialele din care se confecioneaz diferitele pri componente ale spectrofotometrelor sunt prezentate n tabelul 1.
Tabelul 1. Componentele unui spectrofotometru de absorbie n vizibil i n ultraviolet Domeniu Surs (lamp, bec) Monocromator (prisma) Cuv Detector spectral celul fotoelectric UV cu H sau D cuar/NaCl ( mic), reea dens cuar VIS filament: W sticl/cuar, reea medie sticl/cuar / fotomultiplicator
Se poate remarca faptul c detectorii sunt identici iar cuva de cuar permite lucrul n ambele domenii. Doar sursele difer. Prin nglobarea ambelor surse - lampa cu deuteriu i cea cu wolfram
98
acelai
instrument,
funcionnd
consecutiv,
s-a
reuit
realizarea
spectrofotometrelor UV-VIS.
Legea Lambert - Beer
Aceast lege reprezint legea de baz folosit n analizele sau determinrile spectrofotometrice. S considerm o radiaie incident monocromatic, Io, care cade pe o celul coninnd proba. Celula are lungimea l iar concentraia substanei ce absoarbe lumina, C. Conform schiei din fig. 2, intensitatea final, I, este mai mic dect cea iniial, Io n urma absorbiei luminii, la trecerea prin celul. I0 I
l solvent + solut Fig. 2. Absorbia luminii n cazul legii Lambert-Beer Dac lungimea l provoac o reducere cu un anumit procent a intensitii iniiale, Io, de exemplu cu 50%, un nou strat de lungime l, egal cu primul, va aciona, conform legii Lamber - Beer, n acelai mod, adic va diminua tot la jumtate noua radiaie incident. Se observ pe diagrama din fig. 3 c graficul punctelor corespunztoare dimensiunilor celulei 1l, 2l, 3l, se distribuie pe o curb exponenial. Aceast curb poate fi scris algebric ca o funcie: I = I0e-kl (1) unde k este o constant. Ecuaia precedent reprezint una din formele legii lui Lambert Beer. Prin convenie, se numete transmitan fracia transmis, I a intensitii, raportat la I0,
prin cuva cu soluie, T, adic: T = I/I0 iar legea Lambert - Beer mai poate fi scris i: ln(I/I0) = -kl sau, schimbnd semnul: ln(I0/I) = kl schimbat al transmitanei: A = -ln(T) fi scris: A = kl mediul colorat sau lungimea celulei. (6) unde A este absorbana, k - coeficientul de absorbie iar l - lungimea parcurs de lumin prin (5) Introducnd absorbana [75], A, n ecuaia precedent, legea Lambert-Beer mai poate (4) Convenim de asemenea s numim absorban, notat A, logaritmul natural, cu semn (3) (2)
[75] Unele lucrri mai vechi utilizeaz i termenul de densitate optic, n locul absorbanei i aceasta se noteaz cu D (din l. francez: densit optique). Chimie Analitic i Instrumental 99
Fig. 3. Forma exponenial a legii Lambert-Beer
Coeficientul de absorbie, k, s-a gsit c este proporional cu concentraia substanei care absoarbe lumina, C adic k = const.C. n funcie de diversele moduri de exprimare ale concentraiei, constanta k are valori diferite. n cazul exprimrii concentraiei n molL-1, aceast constant se numete coeficient molar de extincie (sau de absorban), simbolizat . n consecin forma cea mai utilizat dar i cea mai simpl a legii Lambert - Beer este: A = lC (7) Din examinarea ecuaiei precedente se poate observa c dac l=1cm i C=1molL-1, atunci avem: = A. Aadar, coeficientul molar de extincie reprezint absorbana unei soluii de concentraie 1 mol/l dac lungimea celulei cu prob este 1 cm. Legea este riguros respectat doar pentru o radiaie monocromatic. Deci, cu ct filtrul optic este mai ngust, ca domeniu spectral, cu att liniaritatea dreptei se respect pe un domeniu mai larg de concentraii. Dar un filtru cu domeniu spectral ngust las s treac puin lumin i performanele metodei sunt condiionate i de performanele detectorului. Domeniul de concentraii al metodei, pentru care se respect liniaritatea funciei A = f(C), de fapt al valabilitii legii Lambert-Beer, din nefericire nu este prea larg. n general, peste nivele de concentraie de 10-2 molL-1 curba de etalonare i modific panta (de regul aceasta scade). De aceea, metoda este adecvat mai ales pentru soluii diluate i nu este o
metod potrivit pentru analize de componente majore (adic substane aflate n concentraii
de peste 10%) din orice fel de probe.
100
Spectre de absorbie Spectrele de absorbie reprezint dependena semnalului de lungimea de und, .
Exist mai multe variante de prezentare dar cea mai utilizat este varianta reprezentrii
absorbanei n funcie de lungimea de und: A = f(). Celelalte variante, mai puin utilizate -
numite toate spectre de absorbie - sunt T = f(), log A = f(), = f() sau log = f(). Ultimele dou servesc n special pentru caracterizarea speciilor moleculare ntruct nu mai depind de condiiile experimentale n care se fac determinrile acestor spectre. Fiecare substan are un spectru de absorbie caracteristic, ca form general, ca domeniu spectral, ca numr de maxime (denumite picuri) precum i ca raporturi ntre intensitile diverselor picuri. Caracteristicile unui spectru sunt redate pe fig. 4. Poziia picului este caracterizat de valoarea sa maxim, max . Se numete maxim de absorbie att vrful ca atare ct i lungimea de und care corespunde maximului. Pot exista unul sau mai multe maxime de absorbie. Numrul de maxime precum i forma general a curbei, reprezint
caracteristica calitativ dup care se pot identifica substanele. De exemplu, n fig. 5 se afl
spectrul de absorbie n UV al benzenului, aflat n soluie. Maximele acestuia sunt inconfundabile i acesta poate servi, la nevoie, pentru identificarea sau analiza benzenului din soluii.
Fig. 4. Caracteristicile maximului de absorbie
Fig. 5. Spectrul de absorbie al benzenului n soluie
nlimea curbei i suprafaa ncadrat de curb reprezint caracteristici cantitative care servesc la determinarea concentraiei substanelor din probe. Pentru a se nelege modul de utilizare, pe fig. 6 se gsesc reprezentate spectrele de absorbie pentru mai multe concentraii (C1, C2, ... , C5) ale aceleiai substane n soluie, Co(NO3)2. Pentru lungimea de und max = 610nm, valorile absorbanei s-au notat A1, A2, ..., A5. Acestea au fost reprezentate n coordonate A, C i n conformitate cu legea Lambert-Beer, toate se nscriu pe o dreapt. Aceasta este curba de etalonare i servete la analiza cantitativ. Nu ntotdeauna punctele se
situeaz toate, n mod riguros, pe o dreapt deoarece intervin erori experimentale i din acelai motiv, n practic, dreapta nu trece exact prin origine.
Fig. 6. Utilizarea Legii Lamber-Beer n practica analitic. n dreapta - curba de absorbie la diferite concentraii ale soluiei apoase de Co(NO3)2. n stnga - curba de etalonare avnd un maxim de absorbie la lungimea de und, max = 610 nm Selectivitatea unui maxim de absorbie este dat de limea picului la baz (sau benzii
spectrale), notat X pe fig. 4, deoarece cu ct picurile sunt mai nguste se pot mai bine deosebi dou substane cu spectre avnd aspecte apropiate. Tot pentru a se evita suprapunerile, n cazul existenei mai multor maxime de absorbie, se prefer lucrul la maximele de absorbie cu lungimile de und cele mai mari.
102
Analiza chimic cantitativ Analiza chimic cantitativ n spectrofotometria de absorbie se bazeaz pe legea
Lambert-Beer. Se utilizeaz o curb de calibrare (etalonare): A = f(C), trasat pentru probe de concentraii cunoscute, n aceleai condiii cu cele de analizat, evident lucrndu-se cu aceeai celul i la o lungime de und ct mai riguros monocromatic. Se alege un domeniu de concentraii, pe care se pregtesc 5-8 probe cunoscute i, dup trasarea dependenei A = f(C), grafic (fig 7) sau analitic, se poate trece la analiza cantitativ. Domeniul pe care curba de etalonare este perfect liniar nu este foarte larg (de cel mult o decad de concentraii). De aceea metoda nu poate funciona dect strict pe domeniul pentru care a fost trasat i, cel mai corect, pe poriunea de la jumtatea dreptei. Se fac mai multe citiri. Cu ct eroarea la determinarea absorbanei este mai mic cu att eroarea de determinare a concentraiei va fi mai cobort. Panta curbei este decisiv n mrimea erorii. Dac aceasta este foarte mic, eroarea la determinarea concentraiei va crete. De aceea, soluiile foarte colorate duc automat la erori, datorit aplatizrii curbei la concentraii ridicate i ca urmare coninuturile nu pot fi determinate exact, recurgndu-se la diluri. Dac diluia este prea mare apare o cretere a erorii tocmai datorit dilurii, mai precis datorit limitelor determinrilor exacte ale volumelor, lucru ce trebuie avut n vedere. n concluzie, concentraiile soluiilor msurate
trebuie s fie relativ joase.
Fig. 7. Analiza cantitativ: pe baza valorii Ax, msurate, se calculeaz valoarea Cx
n afar de condiiile de mai sus mai trebuie inut cont de urmtoarele reguli practice, foarte importante pentru respectarea legii lui Lambert-Beer i totodat pentru obinerea de rezultate analitice corecte:
soluiile trebuie s fie limpezi (fr suspensii) i s nu fie fluorescente; n soluiile supuse msurtorilor nu trebuie s se petreac transformri fotochimice sau
reacii cu oxigenul din aer;
substana de analizat nu trebuie s dea asociaii, cu compoziii variabile, cu solventul;

punctele trebuie s se situeze ct mai riguros pe aceeai dreapt i prelungirea dreptei s

treac ct mai aproape punctul de coordonate (0,0);
absorbana msurat pentru proba necunoscut, Ax, trebuie, pe ct posibil, s se situeze pe

poriunea din mijloc a domeniului punctelor de etalonare.
Se mai poate utiliza legea lui Lambert-Beer i pentru determinarea concentraiei a dou specii diferite, de exemplu M i N, din aceeai soluie. n mod obinuit se utilizeaz dou lungimi de und diferite, 1 i 2 dar pentru oricare dintre acestea: Atotal = AM + AN. Cu alte cuvinte msurnd la 1 absorbana amestecului, notat A1 i la 2, absorbana A2, se obine: A1 = M1CMl + N1CNl respectiv, A2 = A2CMl + B2CNl (8) adic un sistem de dou ecuaii cu dou necunoscute - concentraiile CM i CM. Prin rezolvarea algebric a sistemului de ecuaii aprut, se pot obine valorile acestora, deci se pot calcula concentraiile necunoscute.
Analiza chimic calitativ se bazeaz pe compararea spectrelor de absorbie ale
substanelor sau materialelor n domeniul UV-VIS, adic 180-1100nm cu spectre cunoscute. Acest procedeu permite identificarea unui anumit numr de specii chimice, dar numai pentru acele substane care absorb n acest domeniu. n chimia organic, de exemplu, absorb n acest domeniu perechile de electroni de valen angajai n legturi i precum i perechile de electroni neparticipani. Pentru c n cursul acestor tranziii apar modificri ale polaritii legturii respective, aceste spectre au primit numele de spectre cu transfer de sarcin. Fiecare tranziie are asociat o lungime de und caracteristic (unde va aprea un maxim) i un coeficient molar de absorbie, , corespunztor. Acestea se datoreaz unor salturi ale electronilor de valen, adic a electronilor situai pe straturile exterioare ale atomilor angajai n legturi chimice. n fig. 8 s-au reprezentat schematic acele salturi ale electronilor de valen care dau spectrele electronice, comparativ cu nivelele implicate n spectrele de rotaie sau de
vibraie. Scara energiilor este logaritmic, diferenele ntre valorile numerice ale tranziiilor
electronice i celelalte tranziii fiind mult mai mari dect cele reprezentate pe figur. n substanele formate din molecule covalente se cunosc aa-numitele grupri
cromofore sau auxocrome, care sunt grupri de atomi care dau ntregii molecule calitatea de a
absorbi lumina - n cazul de fa, n domeniul UV-VIS. Legat de cele amintite anterior, o grupare cromofor reprezint locul din molecul unde-i au originea tranziiile electronice. Sa mai introdus i termenul de cromogen care constituie ansamblul dintr-un schelet molecular pe care se gsesc grefai mai muli cromofori. Pentru o serie de molecule, toate avnd legate acelai cromofor, poziia i intensitatea benzilor de absorbie rmn n mare aceleai (tabelul 2). Mai mult, dac o molecul conine mai multe grupe cromofore izolate, mai exact separate
ntre ele prin cel puin dou legturi simple, se poate observa suprapunerea efectelor individuale. Frecven P Q R
... 6 5 4 3 2 1 0 ... 6 5 4 3 2 1 0
+1
...
Transmisie
...
...
Legend: 0, 1, 2, ... - reprezint nivele de rotaie; , +1 - reprezint nivele de vibraie; Ramura P conine toate tranziiile cu J = -1: P(J) = S(+1,J-1)-S(,J) = - 2BJ; Ramura R conine toate tranziiile cu J = +1: R(J) = S(+1,J+1)-S(,J) = + 2BJ; Ramura Q conine toate tranziiile cu J = 0: Q(J) = S(+1,J)S(,J) = ; Ramura Q este permis doar pentru tranziii electronice n unele molecule diatomice (ex. NO) i molecule poliatomice neliniare.
Fig. 8. Diagram energetic corespunznd variantelor tranziiilor de rotaie, vibraie i electronice posibile pentru o molecul dat Tabelul 2. Cteva dintre cele mai intense grupri cromofore caracteristice moleculelor covalente coninnd azot:lungimea de und a absorbanei maxime i coeficientul de extrincie Denumirea Amin Oxim Nitro Azotit Cromoforul -NH2 =N-OH -NO2 -O-NO max (nm) 195 190 210 230 max (Lmol-1cm-1) 3000 5000 3000 1500
Cnd nu este posibil analiza unor specii chimice, direct, din cauza lipsei culorii acestora, se pot provoca reacii care dau compui colorai, prin apariia unor grupri
cromofore, pe baza crora se pot analiza anumite substane n prezena altora, realizndu-se
astfel, pe cale chimic, o selectivitate metodei. Dac un anumit compus nu absoarbe n domeniul vizibil, dar n urma unei reacii chimice, se introduce n molecul o grupare cromofor, n noua substan, aceast grupare va absorbi lumina, n vizibil sau UV i va putea fi analizat cantitativ. Aceast reacie este o
reacie de culoare. Cnd reacia de culoare este ea nsi una selectiv reacia poate servi i la
identificarea calitativ a compusului incolor.
105
Fig. 9. Aspectul punctului izobestic n cazul unui indicator acid-bazic Punctul izobestic, sau de egal absorban (fig. 9) este punctul de intersecie a unei
familii de curbe de absorbie ale aceleiai substane, n condiii fizice sau de mediu diferite (de exemplu la mai multe valori ale pH-uri diferite) i semnaleaz existena a dou specii chimice diferite, aflate n echilibru chimic una cu cealalt - indiferent de tipul reaciei chimice ce are loc. Numrul de puncte izobestice reprezint numrul de specii chimice, aflate n echilibru ntre ele, fiecare absorbind lumina la lungimi de und diferite. Lungimea de und izobestic este valoarea pentru care coeficientul molar de extincie, , este egal pentru ambele componente i fie M, respectiv N, aceste componente. Algebric, acest lucru se reflecta n expresia absorbanei la lungimea de und respectiv (): A = ([M] + [N])l, unde l este lungimea celulei; cum concentraia lor global este aceeai, fiind dat de suma: C = [M] + [N] = const., absorbana la punctul izobestic (), va fi: A = lC, adic tot o constant.
106
Instrumentaia
Aa cum s-a artat, orice spectrofotometru reprezint o reuniune de 4 pri componente distincte: (1) sursa, (2)sistemul dispersiv sau monocromatorul, (3) detectorul i
(4) nregistratorul. Ultimul, poate fi un simplu dispozitiv de citire a rezultatului nregistrarea
fcndu-se manual. Exist o gam foarte larg de spectrofotometre, deosebirea constnd n domeniul de lungimi de und acoperit, n puterea de dispersie a monocromatorului, n natura detectorului, n mediul optic traversat sau chiar n principiul de construcie al instrumentului n ansamblu.
Fig. 11. Curbe reprezentnd spectrele Fig. 12. Parcursul luminii ntr-un Fig. 10. Schia de principiu emise de cele doua tipuri monocromator cu reea concav i de lampi utilizate n UV- sensul de deplasare a reelei pentru a unei lmpi cu deuteriu VIS:1- Lampa cu filament selecia lungimii de und. F = fante, (D2). Pata de culoare incandescent de W; 2OP = oglinzi plane, OC = oglind cenuie indic punctul n Lampa cu deuteriu concav care are loc descrcarea Sursele luminoase cele mai obinuite utilizate n domeniul UV-VIS, sunt lampa cu incandescen prevzut de obicei cu filament incandescent de W - deosebindu-se de becurile
electrice obinuite prin aceea c zona de ieire a radiaiei este confecionat din sticl de cuar - i lampa cu deuteriu prevzut cu arc de descrcare n deuteriu, aflat la o presiune medie (ceea ce asigur un spectru continuu). O astfel de lamp, a crui punct de descrcare este zona cenuie din interiorul cutiei mari (fig. 10) permite obinerea unui spectru continuu pe domeniul 160-400nm, care se completeaz foarte bine cu spectrul becului cu incandescen (fig. 11). Un spectrometru prevzut cu ambele surse, poate acoperi tot domeniul UV-VIS (fig. 11). Razele de lumin trec prin aer, dar mai nou dirijarea acestora se face i prin fibre optice.
Sistemul dispersiv sau monocromatorul poate fi, n vizibil, un filtru colorat din sticl
sau material plastic transparent dar i un filtru cu interferen, iar n UV-VIS o prism confecionat din cuar sau, n ultimul timp, sisteme bazate pe reele plane sau concave cu circa 1200 trsturi per mm. Aceste reele sunt integrate n monocromatoare care permit extragerea unei zone nguste din spectrul UV-VIS, printr-o simpl deplasare a oglinzii (fig. 12).
Limea domeniului spectral care trece prin monocromator depinde mult de limea fantelor de intrare i ieire. Cele mai bune rezoluii se obin prin utilizarea unor oglinzi prevzute cu distane focale mari (0.2-0.5m).
Detectorul transform semnalul luminos n semnal electric. Acest dispozitiv d aadar
un semnal proporional cu intensitatea care iese din celula de msur. Intensitatea semnalului recepionat va depinde de lungimea de und - deci de lungimea de und selecionat prin poziia oglinzii - dar i prin deschiderea fantelor de intrare, respectiv de ieire, din monocromator. Acestea din urm, limiteaz domeniul spectral dar i intensitatea luminii, n ansamblu. De aceea fiecare modificare de deschidere a fantelor sau de lungime de und modific i intensitatea msurat de spectrofotometru. De-a lungul timpului s-au impus dou tipuri de detectori: tuburile fotomultiplicatoare i dispozitivele semiconductoare (care pot fi, la rndul lor, detectori cu transfer de sarcin CCD , n l. engl.- sau fotodiode cu siliciu - CID). Fotomultiplicatoarele - nite dispozitive ultrasensibile al crui domeniu liniar se ntinde pe 7 decade - au fost pn nu demult cele mai utilizate dintre acestea. Pentru spectrofotometrele de rutin, fotodiodele sunt cele mai utilizate. n ultimul timp au aprut detectoarele cu reelele de diode care constituie de fapt nite diode de dimensiuni mici nirate pe aceeai plac. n acest caz nu mai este nevoie de fanta de ieire, ceea ce a simplificat ntructva instrumentaia (fig. 13).
Fig. 13. Reprezentarea schematic a unui spectrofotometru cu reea de diode
Surs Monocromator Proba Detector 1 2 3 4 Fig. 14. Schema bloc a unui spectrofotometru monocanal. Prin prob (nr. 3) se nelege att proba de analizat ct i cea de referin
Spectrometrele monocanal, a cror schem bloc este prezentat n fig. 14, sunt cele
mai utilizate n aplicaiile de rutin. De regul n calea razei incidente se plaseaz succesiv proba martor sau de referin (care conine solventul plus eventual reactivii necesari pentru analiz) i proba de analizat. Pentru a se compensa i variaiile sursei luminoase se utilizeaz,
la instrumentele ceva mai sofisticate, sisteme split-beam bazate, de exemplu, pe o oglind semitransparent (v. fig. 15).
Fig. 15. Prezentarea schematic a unui spectofotometru UV-VIS, monocanal, cu sistem splitbeam; componentele principale sunt: 1- surs, 2 - monocromator, 3 - prob, 4 - detector
Din aceast categorie face parte i spectrometrul cu reea de diode (fig. 13) care are avantajul c permite recepia simultan a ntregii game spectrale ntr-un interval de timp de cteva milisecunde. Deosebirea const doar n ordinea prob-monocromator care-i schimb locul ntre ele. Rezoluia acestor spectrometre este limitat de dimensiunile microdiodelor care in locul fantelor de ieire. n sistemele cu dispozitive split-beam, raza care iese din monocromator este desprit n dou i una dintre aceste raze cade pe un detector care preia fondul (de exemplu, o fotodiod 1 pe fig. 15), iar cealalt, dup ce trece prin prob (respectiv prin proba martor), cade pe un al doilea detector, notat 2 (fig. 15). Semnalul final rezult prin diferena dintre semnalele date de cele dou detectoare i prelucrat pentru a se msura (sau nregistra) direct absorbana. Pe figura alturat se poate observa funcionarea alternativ a lmpii pentru domeniul vizibil (VIS) cu cea pentru domeniul UV.
Spectrometrele bazate pe comparaie (cu dublu canal) sunt cele mai performante
spectrofotometre cunoscute. n acestea, dup desprirea razei incidente, monocromatice n dou fascicule, una dintre acestea traverseaz proba iar alta, simultan sau secvenial, traverseaz celula de referin care conine proba martor. Se cunosc cel puin dou variante de astfel de montaje. n una dintre acestea (fig. 16), montajul folosete pentru desprirea fascicolului metoda amintit anterior, n cazul spectrometrelor monocanal - oglinda semitransparent - iar detectoarele (dou fotodiode) sunt montate n opoziie. Avantajul
const n faptul c rspunsul detectorului este meninut constant, n funcie de , prin reglarea automat a intensitii de intrare n monocromator (printr-un mecanism de feed-back).
Fig. 16. Schema de principiu a spectrofotometrului cu dublu fascicol prevzut cu oglind semitransparent i fotodiode
O alt variant (fig. 17) folosete pentru desprirea razei incidente, monocromatice, un disc rotitor prevzut cu o oglind n form de sector de cerc (dispozitiv denumit curent n literatura de specialitate chopper [76]). O jumtate de perioad oglinda reflect raza incident iar n cealalt jumtate, o transmite. Aadar, una dintre raze trece prin celula de msur iar cealalt prin cea de referin, fiind ulterior aduse prin montajul optic pe acelai detector - de ast dat un fotomultiplicator. Faptul c are loc amplificarea unui singur semnal compenseaz micile variaii parazite ale intensitii sursei. Circuitul de msur funcioneaz sincron cu rotaia chopper-ului; o perioad semnalul corespunde celulei de msur iar o alt o perioad, celei de referin.
Fig. 17. Schema de principiu a spectrofotometrului cu dublu fascicol prevzut cu chopper i fotomultiplicator
Aceste spectrofotometre se caracterizeaz printr-o vitez mare de baleiaj i prin aceea c pot msura mai mult de dou uniti de absorban.
[76] din l. engl., to chop - a tia n buci sau a toca, respectiv chopper - main de tocat 110 Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
Spectrometria fotoacustic
O variant indirect a spectrometriei de absorbie nu msoar lumina absorbit de ctre prob ci schimbarea strii termice a acesteia n urma procesului de absorbie. n fond este tot o msurtoare indirect a luminii absorbite, cu singura deosebire c mrimea msurat nu este una optic. Modificarea ce are loc n prob nu este doar termic, ci termodinamic, adic sunt implicai toi parametrii legai de temperatur, de exemplu, presiunea sau densitatea probei. Metodele fotoacustice fac apel tocmai la modificrile de presiune sau de densitate ale probei ca urmare a absorbiei luminii. De aceea nu are importan dac gazul, lichidul sau solidul supus msurtorii provoac o modificare a direciei luminii din drumul optic, de exemplu conine neomogeniti sau particule opace (fum, cea, pulberi n suspensie etc.), precizia metodei rmnnd neafectat. Dei, n principiu, se poate utiliza orice surs luminoas UV-VIS sau IR, n zilele noastre, sursele preferate au devenit laserele. Motivele principale sunt dou:
Semnalul fotoacustic, ntr-o prim aproximaie, este proporional cu creterea de
temperatur a probei, deci depind de energia absorbit, respectiv de pulsul de energie primit de ctre aceasta (ori laserele asigur intrarea unei mari cantiti de energie).
Pentru multe aplicaii, selectivitatea metodei depinde de lrgimea domeniului de lungimi
de und al sursei (de monocromaticitatea acesteia), iar laserele au acest domeniu extrem de ngust. Denumirea foto-acustic provine i de la faptul c modulaia sau frecvena pulsurilor radiaiei laser incidente este reglat n aa fel nct s cad n domeniul acustic. n acest fel, folosindu-se metodele de amplificare specifice semnalelor acustice, s-a reuit obinerea unor raporturi semnal-zgomot remarcabile i performane analitice pe msur. Principalele etape care se parcurg n orice instrument de spectrometrie fotoacustic sunt prezentate n fig. 18. Lumin Expansiune Und de Detecie Absorbie nclzire Rezultat (laser) termic presiune acustic Fig. 18. Schema-bloc a transmiterii informaiei n spectrometria fotoacustic Cu ajutorul acestei tehnici, soluiile de colorani pot fi analizate pe domenii liniare de
circa 10 ori mai largi dect msurnd absorbana optic la aceeai lungime de und (de ex.
la 523nm [77]) i s-au pus la punct metode pentru analiza fumului rezultat din motoarele Diesel (lucrndu-se la 800nm). De asemenea, s-a mai constatat c semnalul crete liniar cu energia pulsului de energie a radiaiei laser.
[77]Haisch C., Niessner R., Light and sound photoacoustic spectroscopy, Spectroscopy Europe, 14(5), p. 1015, 2002. Chimie Analitic i Instrumental 111
1. Prin ce se aseamn instrumentele din domeniile UV i VIS? 2. Ce este transmitana, absorbana i care este relaia dintre acestea? 3. Scriei una din formele legii lui Lambert-Beer. 4. Ce componente are un spectrofotometru monocanal simplu? 5. Metodele colorimetrice sunt recomandate pentru soluii concentrate sau diluate? 6. Prin ce se deosebesc metodele spectrofotometrice de cele colorimetrice? 7. Care este caracteristica calitativ i care este cea cantitativ, n cazul unui spectru de absorbie? 8. Ce condiii trebuie ndeplinite pentru o analiz cantitativ corect? 9. Cnd se poate aplica legea lui Lambert-Beer pentru analiza a dou componente diferite din aceeai soluie? 10. Descriei ce este un punct izobestic i explicai de ce apare acesta pe o familie de curbe de absorbie la aceleai coordonate (A, ). 11. Ce este o grupare cromofor i care este rolul su n determinarea maximelor de absorbie? 12. Care sunt cele mai rspndite tipuri de spectrometre de absorbie? 13. Ce dispozitive servesc la separarea celor dou raze n spectrofotometrele cu dublu fascicol? 14. Ce variant a spectrometriei de absorbie este adecvat pentru soluii concentrate i chiar pentru cele tulburi?
112
Spectrometria de absorbie n IR Toate modelele sunt greite; unele sunt folositoare George E. P. Box, statistician american [78]
Spectrometria de absorbie n IR
Introducere
Domeniul infrarou (IR) al spectrului undelor electromagnetice conine radiaii cu lungimi de und cuprinse ntre 0.8 i 1000m. La ora actual se cunosc i se aplic un grup de metode de analiz chimic care valorific semnalele obinute prin absorbia radiaiilor din acest domeniu. Domeniul amintit, poate fi divizat la rndul su n trei subdomenii: IRapropiat (ntre 0.8 i 2.5m), IR-mediu (ntre 2.5-25m) i IR-ndeprtat (peste 25m).
Domeniul mediu se mai numete i IR fundamental. Acesta este cel mai bogat n informaii i cel mai accesibil experimental. n vorbirea obinuit este domeniul IR care servete n mod curent att pentru analiza chimic ct i pentru recunoaterea calitativ a combinaiilor anorganice, organice sau naturale dar i n determinri de structur chimic. Domeniul IR apropiat, destul de srac n benzi de absorbie specifice anumitor legturi, are o importan mare tocmai n aplicaii cantitative ale lichidelor. Domeniul IR ndeprtat este nc n studiu. Ca i n alte domenii ale spectrometriei, n IR se determin transmitana dat de raportul intensitilor transmise, I, respectiv incidente, I0, adic: T= I0 (T<1). I (1)
Se mai poate exprima transmitana procentual: T% = 100T sau absorbana, A, definit de:
1 A = log T
(2)
Spectrul IR al unei substane este adesea o reprezentare grafic, n coordonate (T, ) unde cu s-a notat numrul de und [79] dat de ecuaia: = 1 (3)
Pe acest grafic de disting mai multe maxime mai nguste - linii - sau mai largi - benzi. Pe axa ordonatelor, n loc de T poate aprea T% sau A - absorbana - dar n mod obinuit se utilizeaz numrul de und n cm-1 (sau Kaysers) din necesitatea de a nu se apela la numere att de mari ca frecvenele - exprimate n Hz - sau lungimile de und - exprimat n nm.
[78] http://www.engr.wisc.edu/ie/faculty/box_george.html [79] numrul de und (notat uneori i ) se exprim prin relaia = /C unde este frecvena iar C viteza luminii; se observ c este proporional cu frecvena. Chimie Analitic i Instrumental 113
Exist la ora actual o diversitate de metode de analiz bazate pe spectrele IR. Astfel exist spectrometre bazate pe dispersie dup lungimea de und, sau bazate pe transformata Fourier, diverse analizoare industriale simple, nedispersive - ultimele specializate doar pe anumite combinaii chimice - precum i spectrometre de proces care fac analize, n mod continuu, pe anumite linii tehnologice de gaze sau lichide. n fine, exist spectrometre IR portabile care permit analiza unor poluani ai mediului. Absorbia n IR se datorete interaciunilor dintre radiaia electromagnetic incident
i anume componenta electric a acesteia, cu dipolii electrici ai unei molecule. Se admite
astzi c energia radiaiilor IR provoac o amplificare a energiei de vibraie a moleculelor datorit faptului c dipolul corespunztor legturii oscileaz cu o frecven apropiat cu cea
a componentei electrice amintite. Amintim c ntr-o molecul, n mod natural, atomii
componeni execut micri de vibraie de-a lungul legturii n timp ce molecula se rotete. O intensificare a micrii de vibraie duce la o alungire i simultan, la o slbire a legturii dar i la o intensificare a micrii de rotaie. n acest fel se explic de ce, n absena oricrui dipol permanent, nu apare nici un cuplaj cu unda electromagnetic i nu are loc nici o diminuare a intensitii radiaiei IR incidente. Sau, altfel spus, gazele monoatomice (gazele rare) i
substanele cu moleculele simetrice (ca de exemplu O2, N2, Cl2), avnd legturi nepolare, sunt perfect transparente la radiaiile din domeniu IR. n moleculele poliatomice posibilitile de
apariie ale spectrelor IR sunt mai mari deoarece aici vibraiile asimetrice pot duce, chiar n moleculele nepolare, la apariia unor dipoli electrici, iar posibilitile de apariie ale unor vibraii de deformare (de modificare a unghiurilor dintre legturi n afara celor de alungire) se mresc. Pe de alt parte, intensitatea unei benzi de absorbie n IR este proporional cu ptratul variaiei momentului dipolar al moleculei, datorit absorbiei. Se tie c n general grupele polare (C-O, C=O, C-Br etc.) genereaz benzi de absorbie mai intense dect cele slab polare (C-N, C=N, C-H etc.). Se mai tie din studiul fizic al spectrelor c energia mecanic total, a unei molecule izolate, poate fi aproximat [80] printr-o reuniune de trei termeni (toi cuantificai) corespunznd energiilor de rotaie, de vibraie i a electronilor de legtur - care se poate reda prin ecuaia: ETOT = EVIB + EROT + EELEC Despre micarea de vibraie am amintit cte ceva n aliniatele precedente. Energia de rotaie se refer la rotaia moleculei n jurul centrului de greutate i valorile cu care variaz
[80] n afar de cei trei termeni amintii, mai exist energia micrii de translaie (necuantificat) i energia nucleelor. Doar termenii amintii sunt ns importani pentru producerea spectrelor optice. 114 Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
aceast energie sunt cu mult mai mici dect n cazul vibraiei, care la rndul ei este mai mic dect cea a electronilor de legtur. Acetia din urm interacioneaz n special cu radiaia din domeniul UV-VIS. Cei trei termeni, care apar adesea simultan n spectre, sunt foarte diferii ca valoare energetic i se poate considera c cei trei variaz independent unii de alii. Aceast aproximaie este posibil pe baza teoremei Born - Oppenheimer, care permite o abordare simplificat a problemei [81]. Micarea de vibraie a unei legturi dintr-o molecul poate s fie asimilat unei deplasri asemnntoare cu un arc spiral - situat n direcia legturii. Micarea ritmic a acestuia, de-a lungul legturii, duce la creterea, respectiv scurtarea distanei interatomice. Totodat, poate s ia i aspectul unei deformri (sau ndoiri) a legturii, care implic deplasarea atomilor n afara axei dintre acetia. Numrul mare de legturi duce implcit la un numr mare de benzi. Amintim de asemenea, c experimental nu s-au observat spectre de linii pentru
compui n fazele condensate (lichid sau solid), n schimb sunt frecvente astfel de linii n
faz gazoas. Motivele sunt tocmai interaciunile dipol-dipol, dintre molecule aflate n faz condensat, precum i solvatarea reciproc ntre acestea, lucru care implic, foarte probabil, perturbaii ale nivelelor energetice ale legturilor chimice individuale. Pe de alt parte, lrgirea unei linii este invers proporional cu durata strii excitate. Aceast durat fiind mai scurt n strile condensate, liniile spectrale IR ale lichidelor i solidelor se lrgesc suplimentar, predominnd benzile de absorbie. ntindere () Deformare ()
Fig. 1. Cele dou tipuri de vibraii a unei legturi covalente polare implicate n absorbie IR
[81] Conform acestei teoreme deplasarea electronilor are loc independent de deplasrile nucleelor. Chimie Analitic i Instrumental 115
Bazele fizice ale spectrometriei IR
Modelul fizic acceptat, pentru a se putea reproduce teoretic vibraiile legturii covalente dintr-o molecul, se numete modelul oscilatorului armonic. Acesta const dintr-un ansamblu de dou mase, care se pot deplasa, fr frecare n acelai plan - mase simboliznd atomii - fiind legate ntre ele printr-un arc elastic. n conformitate cu legea lui Hooke [82], tria arcului este caracterizat de o constant de for, k (exprimat n Nm-1) simboliznd energia (n Newtoni) necesar pentru a mri distana dintre cei doi atomi cu 1m fa de poziia de echilibru. Termenul de oscilator armonic provine de la faptul c elongaia este proporional cu fora exercitat, dar frecvena, , este independent de aceasta. Relaia admis pentru frecvena de vibraie a oscilatorului armonic este: VIB = 1 k 2 (4)
unde k este constanta de for amintit iar este masa redus: = m1 m 2 m1 + m 2 (5)
n consecin, fiecare molecul biatomic are o constant de for specific. ns energia absorbit prin vibraie n loc s fie EVIB = Vh, ca n emisie, din cauz c n cazul sistemelor atomice i moleculare se respect legile cuantificrii (introduse prin mecanica cuantic [83]), ecuaia admis teoretic pentru energia de vibraie este: 1 EVIB = h V + 2 (6)
unde cu V s-a notat numrul cuantic de vibraie (care ia valori ntregi: V = 0, 1, 2, 3, , n). Ca rezultat, energiile asociate micrii oscilatoare de vibraie pot lua doar acele valori pentru care este satisfcut ecuaia de mai sus. Pentru V = 0 exist o energie a punctului zero, EVIB = h/2. Fa de acest punct, se obin o serie de nivele numite excitate trecndu-se de la V = 0 la V = 1, care poart numele de vibraie fundamental iar apoi la V = 2, 3, ... cnd apar
armonicile superioare.
Energiile implicate n micarea de vibraie a moleculelor sunt suficient de mari pentru ca agitaia termic s nu afecteze starea de energie vibraional n sensul apariiei vreunei excitri. De aceea la temperatura camerei este populat, practic, doar nivelul fundamental (cel pentru V = 0).
[82] Legea lui Hooke se refer la oscilaia unui resort elastic i se exprim: F=kx unde k este o constant de for iar x distana sau elongaia deplasrii. [83] n mecanica cuantic soluiile matematice apar prin rezolvarea ecuaiei lui Schrdinger iar soluiile prezentate n diferite lucrri reprezint aproximaii plauzibile. 116 Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
Cele mai frecvente tranziii de vibraie permise de regulile de selecie ale numrului cuantic de vibraie (V = 1) sunt aadar cele de la V = 0 (notat V0) la V1 [84]. Dac dorim o explicaie, cauza ar fi aceea c singurul nivel populat fiind cel fundamental, tranziiile pleac de la acest nivel oprindu-se, cu maxim probabilitate, la nivelul urmtor (V = 1). Astfel se constat experimental c benzile corespunztoare armonicelor superioare, dei teoretic posibile, au intensiti foarte mici. Dar din pcate vibraiile moleculelor nu sunt perfect armonice. De aceea forma curbei energiilor, la o observare mai riguroas, nu este o parabol, ca n cazul ideal (fig. 2) iar
distanele dintre nivelele energetice de vibraie nu sunt egale. De aceea a fost necesar
introducerea unui nou model, mai apropiat de perfeciune - modelul oscilatorului anarmonic. Acest model are ca rezultat o expresie matematic, denumit ecuaia lui Morse: 1 h22 1 EVIB = h V + V + 2 4D 2 E(fig. 8.3).
2
(7)
unde V este tot numrul cuantic de vibraie iar D reprezint energia de disociere a moleculei,
Fig. 2. Reprezentarea variaiei energiei i poziiile nivelelor de vibraie admind modelul oscilatorului armonic
Fig. 8.3. Variaia energiei n cazul acceptrii modelului oscilatorului anarmonic
S-a discutat pn n prezent despre modificarea energiei de vibraie prin absorbie. Simultan are loc ns i o modificare a energiei de rotaie. Doar n IR ndeprtat i n domeniul microundelor, la substane n faz gazoas, poate fi observat o absorbie de energie asociat cu modificarea doar a regimului de rotaie. n regiunea IR fundamental (2.5-25m sau 667-4000cm-1) se ntlnesc doar acele modificri ale energiei de rotaie care nsoesc
tranziiile vibraionale. Acestea poart de aceea numele de spectre de vibraie-rotaie.
[84] Regulile de selecie au fost la nceput impuse de constatrile experimentale. n ultimul timp, aceste reguli au o fundamentare teoretic (mecanic-cuantic) i nu mai sunt absolute. Adic chiar tranziiile interzise din vechile reguli, devin tranziii cu o probabilitate mic i corespund unor linii de intensitate sczut. Chimie Analitic i Instrumental 117
S-a constat experimental c nivelele energiei de rotaie nu pot lua orice valori ci doar anumite valori, potrivit unui numr cuantic rotaional, j. Ecuaia admis pentru energia de rotaie este: EROT =
j h2 2 j(j + 1) 8 I
(8)
unde j este numrul cuantic de rotaie, I - momentul de inerie al moleculei iar h - constanta lui Planck. Aceste micri se pot observa bine la gaze. La lichide i solide amorfe micrile de rotaie nu pot fi tratate ca mrimi cuantificate, dat fiind frecvena ciocnirilor moleculare. La solidele cristaline rotaia nu este, de regul, posibil.
Variaiile energiei de rotaie sunt cu mult mai mici dect ale celei de vibraie i n
consecin nivelele energetice de rotaie, pentru aceeai stare a energiei vibraionale, au valori extrem de apropiate. Dar pentru fiecare nivel de vibraie exist mai multe nivele de rotaie. Un tablou complet al tranziiilor energetice posibile trebuie s combine cele dou tipuri de nivele (fig. 4). Se poate remarca pe diagrama 4-c c variaia energiei de vibraie este hotrtoare n ceea ce privete poziia benzii n spectrul IR.
Regulile de selecie pentru tranziiile de rotaie, observate n spectrele IR, sunt j = 0 i j =
1, pentru moleculele poliatomice, i j = 1 pentru cele biatomice. Aceleai reguli rmn valabile i pentru tranziiile de vibraie-rotaie combinate - cazul cel mai frecvent ntlnit. De aceea, benzile IR sunt benzi cu structur fin, crora de cele mai multe ori li se nregistreaz doar conturul combinat (sau nfurtoarea). n stare gazoas aceast structur iese pregnant n eviden iar n acest domeniu analizele IR au posibilitile cele mai mari de aplicare practic.
j=4 j=3 V=1 j=2 j=1 j=0 j=4 j=3 j=2 j=1 j=0 V=1
j=4 j=3 j=2 j=1 j=0
V=0
V=0
a b c Fig. 4. Reprezentarea schematic a nivelelor: de vibraie (a) a poziiei relative pentru cele de rotaie (b) i a dispunerii nivelelor de vibraie-rotaie suprapuse, formate din a + b (c) Analiznd mai atent structura fin a spectrelor de vibraie-rotaie, se poate observa c acestea sunt compuse din trei tipuri de benzi care formeaz aa-numitele ramuri P, Q i R ale unui maxim din spectrul de absorbie n IR. Astfel s-a constatat c exist tranziii n care se
modific doar starea de vibraie (de la V = 0 la V = 1) n timp ce valoarea numrului cuantic de rotaie j rmne aceeai. Astfel de tranziii dau toate o singur frecven n spectrul de absorbie, notat cu Q, a crei explicaie (origin) este redat punctat pe fig. 5. j=4
E
j=3 j=2 j=1 j=0 j=4 j=3 j=2 j=1 j=0
V=1
V=0
R3
A
R1
R0
P1
P3
P4
seria R
Q
seria P
Fig. 5. Explicarea apariiei seriilor R , P i a liniei Q ale structurii fine a spectrelor de vibraie-rotaie datorate regulilor de selecie
De aceea aceast band este cea mai intens i apare doar la moleculele poliatomice
dar nu exist de loc la cele biatomice, fiind interzis. n cazul tranziiilor n care variaz
numrul cuantic de rotaie (de exemplu, de la j(V=0)=1 la j(V=1)=2, deci j = +1) apar o serie de linii de absorbie cu frecvene mai mari dect frecvena Q - notate n ordinea cresctoare a E cu R0, R1, R2, (chiar dac nivelele nu sunt echidistante). Totalitatea acestora formeaz
seria R a benzii. n fine, exist tranziii n care starea de rotaie scade cu o unitate (de
exemplu, de la j(Vo)=1 la j(V1)= 0, deci j = -1) care alctuiesc seria P a benzii spectrale - toate avnd frecvene mai joase - care se noteaz n ordine descresctoare a E cu P1, P2, P3, . Pe fig. 5 se prezint schematic corespondena dintre tranziiile de absorbie i liniile structurii fine a spectrelor de vibraie-rotaie n coordonate absorban - numr de und. Prezentm mai jos, pentru exemplificare, spectrul IR al metanului gazos (fig. 6) care ilustreaz convingtor existena celor trei ramuri P, Q i R ale unei benzi, care corespund doar vibraiilor C-H asimetrice.
119
Fig. 6. Spectrul IR al metanului ( Transmitana relativ vs. Numrul de und)
120
Aparatura
Primele instrumente comerciale pentru domeniul IR au aprut nc din anii 1940. Diversitatea extraordinar de aparate utilizate astzi n cele mai diferite domenii se poate mprii n trei categorii:
Fotometre nedispersive bazate pe filtre simple formate uneori chiar din gazele de analizat.
Aceste pot fi monocanal sau comparative.

Spectrometre bazate pe dispersia luminii (folosind prisme sau monocromatoare bazate pe
difracie i interferen) i care pot fi prevzute cu dou canale sau monocanal (cu sau fr chopper).
Spectrometre bazate pe transformata Fourier, care permit intrarea n celul a ntregului
domeniu spectral i care sesizeaz interferometric liniile caracteristice de absorbie. Aceste instrumente, datorit unei rezoluii mai bune i a rapiditii, datorate cuplrii cu calculatorul, n ultimul timp au devenit preferate.
Fotometrele nedispersive
Chiar dac nu permit obinerea unor spectre de absorbie, deci sunt inutile n ceea ce privete analiza calitativ, aceste aparate servesc doar pentru analize de amestecuri dinainte cunoscute (de exemplu CO, CO2 sau H2O, D2O) n procese industriale sau controlul mediului. Aceste analizoare sunt robuste, uor de utilizat i ieftine. Se pot analiza astfel sute de soluii formate din mai multe gaze sau lichide n controlul tehnologic sau al mediului ambiant. Un exemplu de aplicaie de acest tip este analizorul de CO i CO2 din gazele de eapament ale automobilelor - prezent practic n orice service auto. Acestea msoar absorbana la 2170cm-1 n cazul CO i la 2350cm-1 n cazul CO2. Una dintre numeroasele variante ale acestui analizor este cel prezentat n fig. 7.
C S L Chopp.
R D
N Fig. 7. Schema de principiu a unui analizor IR nedispersiv
Gazul circul prin celula C, de lungime L, avnd concentraia necunoscut. Lumina de la sursa S, filtrat de filtrul F, parcurge celula i cade pe detectorul D. Celula de referin, R, este umplut cu gazul de analizat ntr-o concentraie cunoscut iar celula de nul, N, este
umplut cu azot (N2 - care nu absoarbe n IR). Prin rotirea chopper-ului (Chopp.), de ctre motorul M, cu o frecven sincron cu alternana circuitului de msur, la detector vor ajunge, pe rnd, semnalul cu, i fr, absorbia substanei de referin. Evident, pe discul chopper-ului se pot monta mai multe celule de referin i filtre (pn la 6). Prin prelucrarea semnalului detectorului, n conformitate cu metoda adaosului standard, se poate evalua concentraia necunoscut.
Spectrometre bazate pe dispersie
Cu excepia celor destinate IR - apropiat unde componentele spectrometrului: sursa, mediul optic, celula sau detectorii sunt asemntoare cu cele pentru domeniul UV-VIS, n spectrometria IR apar componente din materiale diferite de primele. Deosebirea major este
aceea c monocromatorul este aezat dup celulele cu probe. Componente ale instrumentaiei n IR Sursele de radiaie IR sunt becul cu filament de W (pentru IR apropiat), tuburile
Nernst, lmpile Globar i filamentele Nicrom toate trei pentru IR fundamental i lmpile cu mercur la presiune ridicat pentru IR ndeprtat.
Tuburile Nernst constau din rezistene formate din tubuoare cu diametru de 2mm i
30cm lungime confecionate din amestecuri de oxizi ai pmnturilor rare (n special Y i Er) plus ZrO2. Domeniul spectral n care lucreaz este 0.4-20m.
Lmpile Globar (denumire comercial - GLOBAR care s-a ncetenit) sunt
rezistene care constau din nite baghete de 4mm diametru avnd 50cm lungime, confecionate din SiC. Sunt mai fragile dect tuburile Nernst.
Spiralele din srm Nicrom sunt sursele cele mai puin pretenioase. Stabile n timp,
rezistente n aer acestea dau o temperatur mai sczut i, n consecin, au o putere de emisie mai slab. Stratul de oxizi format pe suprafa asigur emisia radiaiei. Servesc drept surse n aparatele mai puin pretenioase.
Monocromatoarele pentru IR sunt construite pe aceleai principii cu cele din domeniul
UV-VIS i pot fi cu prism sau reea. Un dezavantaj al acestora este acela c nu pot fi confecionate din acelai material pentru tot domeniul IR. Exist materiale preferate doar pe anumite subdomenii ale IR-ului ca de exemplu: LiF (0.115-7m), CaF2 (0.125-10m) BaF2 (0.2-13.5m), NaCl (0.2-17m), KBr (0.2-26m) sau CsI (1-40m). De aceea se prefer selectarea cu prisme a unei poriuni i cu un monocromator se submparte domeniu pe subdomenii foarte nguste.
122
Detectorii utilizai n spectrometria de absorbie n IR sunt deosebii de restul
detectorilor folosii n UV-VIS. Acetia pot fi clasificai pe baza principiului care st la baza funcionrii n dou grupuri:
Detectori cuantici bazai pe efectul fotonilor asupra materialelor; Detectori termici care se bazeaz pe modificarea proprietilor fizice ale materialelor cu
temperatura.
Tc O O S C Ob F1 O R2 R1 O F2 O
A O C
O
A
Fig. 8. Schema de principiu a unui spectrometru cu reea. S - surs, O - oglinzi, C - cuve, A atenuatoare, F1, F2 - fante, R1,R2 - reele, Tc - termocuplu
Din prima categorie amintim detectorii fotovoltaici care constau dintr-un film fotoconductor (de exemplu un compus HgCdTe) depus pe un suport inert. Pentru a avea o sensibilitate bun detectorul este meninut la temperatura azotului lichid. Tot din aceast categorie amintim detectorii piroelectrici care constau din cristale plasate sub form de sandwich ntre dou armturi plane din care una este transparent. Sub efectul unei diferene de potenial, cristalul se polarizeaz comportndu-se ca un dielectric. Gradul de polarizare difer n funcie de intensitatea radiaiei termice primite. Semnalul dat de detector este liniar pe tot domeniul iar ineria termic este redus. Substanele folosite cu succes n acest tip de detectori sunt sulfatul de triglicin deuterat (DTGS) sau tantalatul de litiu (LiTaO3). Dintre detectorii termici, cei mai folosii n ultimul timp, amintim: termocuplurile, termorezistenele i detectorii pneumatici.
Termocuplurile, sunt dispozitive care se bazeaz pe generarea unei tensiuni electrice
ntr-un circuit coninnd dou jonciuni identice, formate din metale diferite (prin topire local). Cele dou jonciuni trebuie s se afle la temperaturi diferite (efect Peltier), condiii n care apare tensiunea amintit.
123
Termorezistenele sau bolometrele sunt alctuite dintr-un conductor sau semiconductor
care i modific rezistena cu temperatura. Cele cu semiconductori se mai numesc i termistori.

Detectorii pneumatici sunt termometre cu gaz foarte sensibile. Un astfel de detector
const dintr-o capsul metalic (cilindric) avnd un capt nchis cu o plcu metalic nnegrit iar la cellalt cu o plcu metalic flexibil. Radiaia IR cznd pe partea nnegrit, nclzind gazul din celul, provoac dilatarea acestuia. Ca urmare, gazul provoac o deplasare a membranei flexibile datorit mririi volumului incintei. Micarea poate fi sesizat prin includerea acestei membrane flexibile ntr-un condensator care, la rndul lui, este inclus ntrun circuit de msurare a capacitii.
124
Pregtirea probelor pentru analiz
Analiza prin spectrometrie de absobie n IR se poate aplica pentru gaze, lichide sau solide. Gazele se introduc n nite celule speciale unde proba se introduce cu precauiile necesare (cltire, evacuarea gazului precedent, vidare) sau prin diluare n aer. Lungimea acestor celule de gaz este mrit prin reflexii repetate (cu oglinzi) ajungndu-se la 5-20m n spaii de 0.5m. Lichidele pot fi studiate ca atare sau sub form de soluii. Dac sunt prea volatile, lichidele se pot analiza punnd o pictur ntre dou discuri, perfect lefuite, confecionate din cristale de NaCl, care ulterior se preseaz una de alta i se prind ntr-o ram nainte de introducerea n spectrometru. Soluiile cu concentraii ntre 0.05-10% se introduc n celule de grosimi 0.1-1mm care se introduc ca atare n spectrofotomerul IR. Evident solvenii trebuie s fie anhidrii, puri i transpareni n IR pentru domeniul de interes. Solvenii preferai pentru diluii sunt CCl4, CHCl3 i CS2. Solidele se analizeaz fie n soluii fie ca emulsii n ulei de parafin (denumit n literatura de specialitate dup produsul comercial NUJOL). Acesta absoarbe doar n trei benzi cunoscute. Se mai pot utiliza emulsii n KBr cristalin la o diluie de 1% (1mg substan la 99mg KBr). Pastila transparent obinut dup mcinare i presare se fixeaz ntr-o ram potrivit i se introduce n aparat n faa fascicolului IR.
125
Analize chimice de amestecuri multicomponente
Dac se pune problema analizei prin specrofotometrie IR a unui amestec de mai muli componeni, cunoscndu-se dinainte spectrul de absorbie individual al acestora, se poate realiza aceast determinare utiliznd legea Lambert- Beer. n conformitate cu legea amintit, dac componentele nu interacioneaz unele cu altele, se poate admite aditivitatea absorbanelor adic: absorbana unei substane aflate n amestec cu alta este aceeai cu cea care ar avea-o substana dac ar fi singur n celul. Datorit numrului mare de linii metoda este aplicabil i n domeniul IR, n special pentru amestecuri de gaze. Pentru exemplificare s considerm un amestec de trei compui, fiecare avnd o concentraie finit simbolizat CA, CB, CC. Pentru determinarea prin analiz a substanelor A, B i C se alege o cte o band caracteristic, diferit, pentru fiecare, cu maximele 1, 2 i 3. Chiar dac maximele sunt diferite la fiecare din cele trei lungimi de und, se constat c toate cele trei substane absorb lumina dar ntr-o msur foarte diferit. S notm cu A1, A2 i A3 absorbanele msurate pentru cele trei lungimi de und 1, 2 i 3. Evident, n virtutea celor amintite anterior, fiecare din cele trei absorbane msurate reprezint contribuia tuturor celor trei substane. Cunoscndu-se coeficienii molari de extincie pentru fiecare din cele trei
2 substane, la fiecare din cele trei lungimi de und (9 valori: 1 , 2 , 3 , , C , 3 ), se poate A A A C
scrie, n cazul unei celule cu lungimea l constant, pe baza existenei aditivitii absorbanelor urmtoarele ecuaii:
Pentru 1: 1 CA + 1 CB + 1 CC = A1/l A B C
2 Pentru 2: 2 CA + 2 CB + C CC = A2/l A B
Pentru 3: 3 CA + 3 CB + 3 CC = A3/l A B C
Se observ c a aprut un sistem de trei ecuaii liniare cu trei necunoscute anume CA, CB, CC (adic chiar concentraiile). Soluia se afl analitic:
1A 2 A 3A 1B 2B 3B 1C A1 CA 2C A 2 = CB 3C A 3 C C
1
(9)
Practic pot interveni mai mult de trei lungimi de und. Sistemul dei are n acest caz mai multe ecuaii dect necunoscute se poate rezolva i conduce la rezultate mai precise. n cazul anterior notnd matricea coeficienilor [], matricea absorbanelor [A] i matricea concentraiilor (necunoscutelor) [C], se poate scrie soluia sistemului precedent mai simplu astfel: [C] = []-1[A]
126
(10)
1. Care este domeniul de numere de und ai spectrometriei IR? 2. La ce servete domeniul IR apropiat? 3. Care dintre cele trei domenii IR: apropiat, mediu i ndeprtat este cel mai bogat n informaii structurale? 4. Ce mrime, notat cu T, se msoar n spectrometria IR? 5. Ce fel de micri de vibraie exist pentru o legtur covalent? 6. De ce moleculele H2, O2, N2 nu se pot analiza prin spectrometrie de absorbie IR? 7. Ce surse se utilizeaz n spectrometrele IR? Ce fel de celule se folosesc? 8. Ce tranziii determin structura fin a spectrelor IR? 9. Care sunt translaiile determinante pentru spectrul IR - fundamental? 10. Cum se pot analiza amestecurile multicomponente prin spectrometrie IR? 11. Ce modele servesc pentru descrierea teoretic a vibraiilor n spectrul IR? 12. Care sunt regulile de selecie pentru numerele cuantice de vibraie i rotaie? 13. Ce sunt fotometrele nedispersive i la ce servesc n analizele chimice? 14. Cum se prepar probele solide i lichide n vederea analizei prin spectrometrie IR? 15. Ce sunt detectorii pneumatici i pe ce principiu funcioneaz? 16. Prin ce se deosebesc monocromatoarele n IR fa de UV-VIS?
127
Analiza prin absorbie atomic (AA) Un truc vechi cteodat reuete pentru c nimeni nu se gndete la el Eugene ONeil (1888-1953), dramaturg american
Analiza prin absorbie atomic (AA)

Metoda analizei prin absorbie atomic (AA), introdus n analiza chimic din anul 1952 de ctre australianul A. Walsh [85], se bazeaz pe fenomenul cunoscut cu aproape o sut de ani nainte (1859) - descoperit de germanul G. R. Kirchhoff - i anume inversia liniilor
spectrale. Principiul, stabilit pe baze experimentale, se poate enuna sub form de lege fizic legea lui Kirchhoff - astfel: fiecare element chimic absoarbe acele radiaii pe care le poate emite n aceleai condiii, bine determinate, de temperatur i presiune. Primul instrument
folosit a fost o improvizaie pentru a se obine absorbia atomic n cadrul unui fotometru cu flacr (un spectrometru de emisie n care excitarea atomilor se realizeaz ntr-o flacr). Acesta, ca i celelalte instrumente care au urmat, msoar concentraia unui element dintr-o prob, prin determinarea absorbiei realizate de ctre atomii probei, adui ntr-o flacr sau, mai general, n faz gazoas (la o temperatur suficient de ridicat) asupra unei radiaii monocromatice furnizate de o surs extern. Evident c radiaia respectiv este astfel aleas nct s fie caracteristic unui anumit atom.
Spectrometrul de absorbie atomic msoar radiaia absorbit de atomii care rmn
n stare fundamental (neexcitai) n stare gazoas. Numrul acestora fiind de obicei mult mai mare dect a celor excitai, spectrometria de absorbie atomic (AAS [86]) este o metod caracterizat de o sensibilitate mult mai bun, cel puin pn la temperaturi de 5000K. Remarcm faptul c aparatura pentru absorbie atomic poate fi utilizat, la nevoie, i pentru lucrul n emisie.
Principiul metodei
Ionii din soluia de analizat, prin pulverizare (sau nebulizare) ptrund o dat cu gazul purttor ntr-o zon cu temperatura ridicat (de ex. o flacr) i devin atomi. Acetia trebuie adui ntr-o stare energetic potrivit n vederea favorizrii absorbiei i reducerii la minim a emisiei. Acest lucru se realizeaz n flcri cu temperaturi din domeniul 2000-3000K (obinute de exemplu folosind arztoare cu aer-acetilen). Modul n care se produc atomii metalici n stare gazoas este descris mai amnunit n continuare (fig. 1). La aspirarea soluiei ntr-o flacr se petrec, ntr-o succesiune rapid, urmtoarele etape:
[85] http://www.science.org.au/academy/memoirs/walsh2.htm [86] AAS = prescurtarea denumirii n l. engl., Atomic Absorption Spectrometry. Chimie Analitic i Instrumental 129
evaporarea solventului pn la un reziduu solid; vaporizarea solidului i disocierea n atomii componeni, care dau, ntr-o prim etap,
atomi n stare fundamental;

final, o parte din atomii de la punctul b) pot fi adui n stare excitat, prelund cldura din
flacr i devenind atomi excitai, care constituie ei nii surse de radiaii. Spectrul de emisie rezultant const din linii caracteristice mai ales ale atomilor dar i ale ionilor excitai care pot aprea (procesul 4 din fig. 1). O parte dintre atomi se pot transforma i n alte specii MO, MOH (procesul 5 pe fig. 1) cnd nu mai iau parte la procesul de absorbie atomic.
Fig. 2. Absorbia de rezonan este una din cele mai utilizate Fig. 1. Transformri posibile ale analitului n dispozitivul de linii n analiza chimic prin absorbie atomic atomizare (flacr) - zona cenuie
De aceea, pentru a se realiza o selectivitate bun, sursa de radiaii ce emite fascicolul care urmeaz s parcurg celula, trebuie s fie o surs monocromatic avnd o frecven egal cu cea a liniei de rezonan a atomilor din proba de analizat (vezi fig. 2). O astfel de tranziie are loc la trecerea unui electron de pe stratul de valen, dintr-un atom n stare fundamental, avnd o energie E0 (energie prin convenie luat egal cu 0) pn la primul nivel accesibil, de deasupra sa, E1. Aceast tranziie are loc ca urmare a absorbiei de radiaie electromagnetic monocromatic, adic corespunztoare unei cuante h = E1-E0. Absorbia, n urma creia apare tranziia de pe starea fundamental pe primul nivel de energie, se numeste absorbie de
rezonan i i corespunde o linie de rezonan, aceeai att n absorbie ct i n emisie.
Desigur, electronii pot trece prin absorbie i pe alte nivele de energie ns cu o probabilitate mai mic, adic dau linii mai puin intense. n emisie, tranziiile au loc n sens invers. Relaia dintre numrul de atomi excitai, N1, i cei aflai n stare fundamental, N0, este cunoscut din chimia fizic, sub denumirea: ecuaia lui Boltzmann i se poate scrie:
N1/N0 = (g1/g0)exp(-E/kT) stare fundamental,
(1)
unde N1 este numrul de atomi n stare excitat pe nivelul 1, N0 - numrul de atomi aflai n g1/g0 - reprezint raportul ponderilor statistice pentru starea excitat respectiv fundamental, mrimi ce depind de numerele cuantice ale nivelelor existente n fiecare atom n parte, E = h - variaia de energie a tranziiei, k - constanta lui Boltzmann, T - temperatura absolut n K. n mod obinuit raportul N1/N0 este subunitar. Se poate observa c N1/N0 depinde att de E ct i de T. O cretere a temperaturii i o scdere a valorii intervalului energetic, E, va conduce implicit la o mrire a raportului N1/N0. Calculele demonstreaz c, n cele mai favorabile condiii, doar o mic parte din atomi se gsesc n
stare excitat, lucru vizibil i din datele prezentate n tabelul 1, pentru cteva linii de
rezonan tipice.
Tabelul 1. Raportul dintre numrul de atomi din strile excitat, N1, respectiv fundamental, N0, la dou temperaturi, 2000, respectiv 4000 K Element E Lungime de und N1/N0 (eV) (nm) 2000K 4000K Na 2.1 589.0 9.86.10-6 4.44.10-3 K 2.93 422.7 1.91.10-6 6.03.10-3 Zn 5.79 213.9 7.31.10-6 1.48.10-7
Walsh a fost cel care a propus primul, pentru aceast metod, n calitate de surse de lumin, nite lmpi de construcie special denumite lmpi cu catod cavitar [87] (fig. 3) care emit un spectru atomic, format din linii, caracteristice materialului (metalului) din care este confecionat catodul. Cu ajutorul monocromatorului se selecteaz doar linia dorit, de obicei linia de rezonan a elementului respectiv.
Fig. 3. Lampa cu catod cavitar
n afara sursei, deosebit de toate sursele utilizate n celelalte metode optice, schema bloc a acestei metode (fig. 4) este cu totul analog spectrofotometriei de absorbie n general. Deosebirea este aceea c, n cazul absorbiei atomice, n loc de soluii lichide, probele se afla n stare gazoas ntr-o flacr i nu sunt constituite din molecule ci din atomi n stare fundamental. Lamp cu catod cavitar (surs) Flacr sau cuptor (celul) Monocromator Detector Fig. 4. Schema bloc a spectrometrului de absorbie atomic
[87] hallow cathode lamp n limba englez. Chimie Analitic i Instrumental 131
Legea absorbiei radiaiilor
Analogia cu metoda spectrofotometriei de absorbie merge mai departe i anume legea absorbiei radiaiilor n cazul unui fascicol incident, monocromatic este aceeai. Dac un fascicul incident, de intensitate I0, n urma trecerii prin stratul absorbant, de grosime l, devine un fascicul de intensitate I, relaia dintre I i I0 este dat tot de legea
Lambert-Beer scris diferit:
I = I0e-KlN
(2)
unde: K este coeficientul de absorbie atomic, l - lungimea flacrii, N - numrul de atomi, aflai n stare fundamental, din unitatea de volum. Analog cu cele nvate la spectrofotometria de absorbie, dac notm cu A absorbana: A = ln (I0/I) ecuaia de mai sus devine prin logaritmarea ambilor membri: A = KlN (4) Deci A, pentru un atom dat, pentru parametrii fizici ai sistemului optic constani i o flacr fix, este proporional cu N. Cum numrul de atomi din unitatea de volum N depinde de mai muli factori constani (debit, vscozitate etc.) dar mai ales de concentraia C a soluiei pulverizate n flacr, introducnd concentraia n locul numrului de atomi, N, ecuaia devine: A = kC (5) unde k este un coeficient constant, propriu fiecrui element la lungimea de und aleas i n condiiile unui instrument dat i ale unei flcri stabile. Relaia, liniar n coordonatele A-C, este util pentru analiza cantitativ propriu-zis i exploatat cu totul analog ca n spectrofotometria de absorbie UV-VIS. (3)
132
Aparatura
Schema de principiu, ilustrat anterior pentru spectrometrul de absorbie atomic (vezi fig. 4), poate fi completat cu mai multe amnunte (fig. 5). ntre electrozii lmpii cu catod
cavitar se aplic 400V i un curent de 10-40mA, foarte bine stabilizat, pentru a emite un flux
luminos de intensitate constant. Soluia coninnd proba etalon, sau cea de analizat, este transformat ntr-un aerosol fin, n interiorul unei incinte numite sistem de pulverizare, sau pulverizator (nebulizor). Aerosolul, amestecat intim cu amestecul de gaze, oxidant plus carburant, este condus apoi n flacr (fig. 5).
Fig. 5. Schem ilustrnd principul funcionrii analizorului prin AA
Se pot utiliza variate amestecuri carburant - comburant prezentate n tabelul alturat (vezi tabelul 2). Flacra sau cuptorul tubular din grafit - o variant mai puin frecvent folosit a metodei - n care se introduce proba, se extinde pe direcia sursei de lumin, respectiv a fantei monocromatorului. Acesta selecteaz un interval foarte ngust din spectrul luminos.
Tabelul 2. Tipuri de flcri n funcie de carburantul i comburantul folosit Flacr Elemente de analizat Aer + propan sau Li, Na, K, Mg, Ca, Mn, Fe, Co, Ni, Cu, Zn, Ga, As, Mo, Aer + oxid de carbon Ag, Au, Pb, Bi Aceleai ca mai sus dar Cr, Co, Au, Fe, Mg se determin Aer + acetilen mai bine n flacar aer - acetilen Aer + hidrogen sau Ca, Sn Oxigen + hidrogen Oxigen + acetilen Be, B, Al, Ti, V, Nb, Y, Sn, La i lantanide (flacr bogat n acetilen) Protoxid de azot Al, Si, B, Zr Acetilen (N2O + C2H2)
Atomii unui anumit element absorb doar lumina cu lungimea de und specific elementului respectiv. Tocmai aceste lungimi de und caracteristice sunt emise de surs i trecute prin flacr iar diminuarea, exprimat n unitai de absorban, este proporional cu numrul de atomi ai elementului de analizat, prezeni n flacra. Atomii celorlalte elemente
nsoitoare nu absorb lumina la aceeai lungime de und ci fiecare la alte valori ale acesteia. Acest lucru se asigur prin selectarea lungimii de und i cunoaterea elementelor nsoitoare.
Detectorul, de regul un foto-multiplicator, msoar intensitatea luminii monocromatice -
obinut dup parcurgerea unui monocromator. Metoda descris este o metod relativ, adic pentru etalonare se msoar mai nti cel puin o prob cunoscut (numit prob etalon). Operaia este denumit n mod curent
calibrare sau etalonare. Se lucreaz de cele mai multe ori prin metoda curbei de etalonare
sau prin metoda adaosului standard. Analiza chimic prin absorbie atomic este extrem de specific, lrgimea benzii de absorbie, fiind foarte ngust - de ordinul a 10-3nm - face aproape imposibile orice confuzii privind analitul. De aceea cu aceast metod se pot analiza 66 elemente metalice sau semimetalice, fiind puin recomandat pentru nemetale. Metoda analizei prin AA este principala metod de analiz a elementelor metalice minore din materiale sau din mediu, inclusiv poluarea organismelor cu acestea. Liniile specifice cad n
domeniul 190-850nm permind analize de ordinul microgramelor (g) iar n anumite cazuri
chiar a nanogramelor (10-9g) dintr-un mililitru de soluie. Sensibilitatea practic difer de la element la element i este acea concentraie ce d o crestere de 0.00434 uniti de absorban (aproximativ 1% din intensitatea luminii incidente). Aceasta se exprim n g/ml sau, ceea ce este acelai lucru, n ppm (pri per milion).
134
Probleme speciale
n practic apar totui interferene cu alte elemente din prob, de exemplu are loc formarea unor combinaii greu disociabile (Mg2P2O7, ZrO2 sau Ca3PO4 etc.) sau efecte legate de temperatura flcrii cu care se lucreaz - prea mare sau prea mic - ceea ce afecteaz numrul atomilor n stare fundamental. Acestea, indiferent de natura lor fizic, au cptat denumirea de efect de matrice. De aceea trebuie luate contramsuri. Toate aceste probleme se studiaz individual, folosind publicaiile de specialitate. Pentru a se asigura o limit de detecie ct mai joas, este necesar neutralizarea fluctuaiilor fondului. Pentru acest scop s-au pus la punct instrumente cu dublu fascicul, ale cror detectoare primesc alternativ semnale de la raza incident care, odat traverseaz proba (flacra sau cuptorul) i, alternativ, trece nemodificat sub form de radiaie de referin. n cazul atomizoarelor cu flacr efectul de matrice este mai redus. n cazul utilizrii cuptoarelor tubulare efectul devine foarte important datorit concentraiei mai ridicate a acesteia. Cele mai importante mijloace de corecie a fondului sunt cele bazate pe lmpi cu deuteriu i cele care utilizeaz efectul Zeeman.
Fig. 6. Instrument la care corecia fondului se face cu ajutorul unei lmpi cu arc de deuteriu
n cazul dispozitivelor cu lmpi cu deuteriu (fig. 6) flacra este traversat de lumina care iese din lampa cu catod cavitar amestecat cu raza emis de o lamp cu arc de deuteriu (250-350nm). Cu ajutorul unei oglinzi semitransparente i a unui chopper, amestecul celor dou raze este trimis alternativ prin flacr i pe un drum care ocolete flacra, constituind raza de referin. Detectorul primete, cu frevena dictat de chopper, att semnalul de referin ct i cel de msur, iar raportul celor dou raze se nregistreaz dup corecia de fond, sub form de absorban. Un alt mare avantaj al metodei analizei prin AA l constituie posibilitatea de a utiliza solveni organici pentru concentrarea probei. Acetia, prin posibilitatea lor de a extrage doar anumii ioni din soluie apoas, ntr-un volum mic, mresc i sensibilitatea i specificitatea metodei. Cei mai adecvai solveni par a fi esterii i cetonele alifatice.
Metode evoluate
Varianta denumit metoda cuptorului tubular (sau spectrometria de absorbie atomic fr flacr) utilizeaz un cuptora tubular (fig. 7), din grafit, nclzit electric, meninut n azot sau alt atmosfer inert la 2000-3000K dar pornindu-se de la temperatura camerei. Aceast variant prezint avantajul de a se putea lucra i pe probe solide, fr o dizolvare chimic a probei. Proba, soluie sau solid, se introduce n cuptor sau intr prin nclzire n drumul razelor din cuptor, utilizndu-se seringi micrometrice (ce msoar probe de ordinul l). Are loc consecutiv uscarea, calcinarea, evaporarea i msurarea absorbiei, obinndu-se limite de detecie de 10-10-10-13 g/prob.
Fig. 7. Cuptorul tubular din grafit, nclzit electric, permite volatilizarea probelor
n ultimul timp, n afar de achiziia datelor cu calculatorul, au aprut lmpile multielement, ce permit analize pe grupuri de elemente, nemaifiind necesar schimbarea lmpii cu catod cavitar, ci doar a lungimii de und din monocromator fiind mai uor de automatizat. De asemenea au aprut instrumentele cu dou drumuri optice, majoritatea instrumentelor avnd posibilitatea utilizrii ambelor variante - cu flacr sau cu cuptor tubular (fr flacr). n sfrit, utilizarea efectului Zeeman - despicarea liniilor spectrale atomice prin plasarea sursei n cmp magnetic - a mrit i mai mult selectivitatea metodei.
Metoda vaporilor reci. Elementele volatile, de mare interes n protecia mediului -
mercur, arsen, staniu, stibiu, bismut, seleniu - au dou proprieti importante pentru analiza lor chimic. Se reduc cu dificultate la elemente n flacr n schimb dau uor hidruri volatile. De aceea, nainte de introducerea n flacr a probelor coninnd aceste elemente, proba se supune unui proces chimic necesar transformrii elementelor chimice amintite n hidrurile
volatile respective. Acest lucru se realizeaz n nite accesorii denumite generatoare de

hidruri. n acestea, prin reacia cu borohidrur de sodiu sau cu clorur stanoas, n mediu
acid, se petrece transformarea elementelor amintite n hidruri care, conduse n flacr, la nclzire, se descompun termic. De exemplu, n cazul arsenului au loc reaciile:
NaBH 4 800 C As3+ AsH 3 As + 3 / 2H 2
o
Hidrura volatil este antrenat de gazul purttor ntr-un cuptora din cuar, plasat n flacr unde de fapt are loc i reacia de descompunere n atomi. n acest fel s-au obinut sensibiliti de 100 de ori mai bune, n cazul acestor elemente. n cazul particular al mercurului, care nu d o hidrur stabil, se utilizeaz nite celule speciale din care Hg nu mai are nevoie s fie transferat n flacr. Metoda, denumit metoda vaporilor reci, se aplic n dispozitive specifice n care reducerea are loc cu SnCl2.
137
Metoda fluorescenei atomice
Analog cu celelalte metode bazate pe fluorescen, lumina incident servete la excitarea probei n vederea obinerii radiaiei de fluorescen, reemis n toate direciile. Aceasta este separat de un alt monocromator i msurat. Fiind reemis n toate direciile, exist ntotdeauna o pierdere de semnal prin msurarea doar dup o direcie. Fluorescena, ca intensitate msurat n fotodetector, IF, va depinde n, afar de numrul de atomi n stare fundamental din flacr, i de intensitatea sursei luminoase incidente. Aadar, IF = kI0N, (6) unde k este o constant de proporionalitate, I0 - intensitatea sursei i N numrul de atomi din unitatea de volum (de flacr). Se prefer din acest motiv lmpile de descrcare cu vapori n cazul elementelor uor volatilizabile (de exemplu Zn, Cd, Tl). Metoda d rezultate bune mai ales la elementele cu linii de rezonan n UV, dup cum se poate constata din tabelul 3 radiaia UV fiind mai bogat n energie dect cea din vizibil. Din examinarea tabelului 3 se poate constata c pentru calciu este mai sensibil emisia, pentru magneziu sau mangan, absorbia atomic, iar pentru cadmiu sau zinc, fluorescena atomic.
Tabelul 3. Limite de detecie prezentate comparativ pentru AA, analiza prin fluorescen atomic i emisie atomic. Se remarc coborrea marcant a limitei de detecie pentru unele metale (Cd, Zn, Hg) n cazul fluorescenei atomice Element (nm) Limite de detecie (gmL-1) Absorbie Fluorescen Emisie Ag 328.1 0.0005 0.0001 0.002 Al 396.2 0.04 0.1 0.005 Ca 422.7 0.0005 0.02 0.0001 Cd 228.8 0.0006 0.000001 2 Hg 253.7 0.2 0.0002 40 Mg 285.2 0.0003 0.001 0.005 Mn 279.5 0.002 0.006 0.005 Zn 213.8 0.002 0.00002 50
138
1. Ce surs de radiaie folosete analiza prin absorbie atomic? 2. Care este principiul inversiei liniilor spectrale descoperit de Kirchhoff? 3. n ce stare se gsesc atomii probei n AA? 4. Ce linie este selectat, de regul, cu ajutorul monocromatorului? 5. Ce lege este utilizat pentru analiza cantitativ? 6. Cum se liniarizeaz legea lui Lambert-Beer? 7. Ce fel de metode se aplic pentru determinri cantitative prin AA? 8. Proba o dat adus n soluie se introduce n flacr prin intermediul unui dispozitiv ... 9. Pentru ce elemente se aplic, cu prioritate, metoda AA? 10. n ce domeniu de lungimi de und cad liniile folosite n analiza chimic prin AA? 11. Ce gaze se utilizeaz drept carburant n flacr? 12. Ce avantaje prezint cuptorul tubular n analiza prin AA? 13. Ce progrese recente au avut loc n analiza prin AA, n ultimul timp? 14. Ce posibiliti noi prezint utilizarea solvenilor organici pentru introducerea probei n AA? 15. Pentru ce elemente este avantajoas transformarea atomilor acestora n hidruri n vederea analizei ulterioare prin AA? 16. Ce avantaje prezint metoda fluorescenei atomice?
139
Spectrometria de emisie Opera noastr nu se adreseaz dect acelora care emit pe aceeai lungime de und cu noi Jean Cocteau (1889-1963), Journal dun inconu
Spectrometria de emisie
Introducere
Atomii sau ionii unui element, adui n diferite stri excitate, revin la nivele staionare mai coborte ca energie sau chiar n stare fundamental, emind radiaii electromagnetice, cu frecvene din domeniul UV, VIS i IR. Ansamblul acestor frecvene constituie spectrul de
emisie al speciei respective.
Avnd nivelele bine definite i distincte de la un atom la altul (cu foarte rare excepii),
spectrul de emisie va fi diferit - aadar va caracteriza calitativ fiecare atom - permind
identificarea i dozarea elementelor chimice. De aceea, n principiu, toate elementele chimice pot fi analizate cu ajutorul spectrometriei optice de emisie atomic (prescurtat OES [88] n literatura de specialitate), inclusiv elementele uoare. Nu acelai lucru se poate afirma despre spectrometria de emisie n flacr (flamfotometria), folosind flcri convenionale, care permite doar determinarea unui numr extrem de redus de elemente chimice. Totui n practic se utilizeaz metoda OES pentru determinarea a circa 70 de elemente chimice, majoritatea metalice. Spectrul de emisie al unui atom se obine prin excitarea termic a acestuia, dup aducerea n prealabil n stare de vapori, deci prin aducerea probei la o temperatur suficient de ridicat nct moleculele acesteia s disocieze n atomi, care emit apoi spectre caracteristice. Spectrele atomice ale elementelor sunt determinate de electronii de valen, fiind una dintre proprietile periodice. Fiind adui n stare gazoas, nainte de excitare, este indiferent ce tip de legturi chimice au existat nainte, n materialul de analizat. De aceea, analog metodei prin absorbie atomic, informaiile structurale nu se pot obine cu ajutorul acestui gen de analize chimice. Cea mai intens linie din spectrul de emisie este linia de rezonan, ce corespunde revenirii atomilor de la prima stare de excitare (sau nivelul cel mai sczut de excitare), la starea fundamental. Identificarea liniilor prin stabilirea lungimii lor de und, constituie baza analizei calitative, iar determinarea intensitii liniei, I, st la baza analizei cantitative. Ecuaia ce leag intensitatea, I, de concentraia elementului de analizat din prob, notat C, este: I = f(C), stabilit pe cale experimental.
[88] OES = Optical Emission Spectroscopy Chimie Analitic i Instrumental 141
10
Pentru a emite toate radiaiile posibile din spectru, atomul trebuie sa absoarb o energie cel puin egal cu potenialul de ionizare al su. Majoritatea elementelor au acest potenial sub 10eV. Valorile cele mai mici, din acest punct de vedere, le au elementele alcaline. Halogenii ns au poteniale de ionizare peste 10eV. De aceea, pentru aceeai
energie de excitare, sensibilitatea analizei spectrale va fi mai mare pentru elementele cu energia de ionizare joas i evident mai mic pentru cele cu energia de ionizare ridicat
(adic pentru cele situate n partea dreapt i sus a sistemului periodic - halogenii i celelalte nemetalele tipice). Elementele alcaline i alcalino-pmntoase se pot analiza i cu o aparatur spectral mai simpl i anume prin spectrofotometrie de flacr respectiv cu cea pentru absorbie atomic unde flacra este utilizat ca surs optic. Privind retrospectiv, spectroscopia optic de emisie atomic (OES), a permis descoperirea unor elemente noi, la vremea respectiv: Rb i Cs (ambele n 1860), Tl (1862) precum i a elementelor Ga i He. Ultimul dintre acestea, decelat mai nti n lumina venit de la Soare (1868), a fost identificat cu mult nainte de a fi fost izolat pe Pmnt (1895). Acestea sunt doar cteva dintre numeroasele contribuii ale spectrometriei la cunoaterea uman. Avantajele OES cantitative constau n sensibilitatea considerabil, rapiditatea excepional, reproductibilitatea bun, necesarul de cantiti mici de proba iar dintre dezavantaje amintim: eroarea de 2.5%, n cel mai fericit caz, exactitate relativ constant pe tot domeniul de concentraii i posibilitatea de a analiza corect doar elementele minore. De asemenea instrumentele pentru acest gen de analize sunt scumpe - constituind investiii serioase, pe termen lung, ale laboratoarelor de analize chimice instrumentale.
142
Instrumentaia
Aparatura, cunoscut sub denumirea de spectometru de emisie atomic, se compune din urmtoarele pri:
sursa de excitare: flacr, arc, scnteie, descrcare aureolar, plasm sau laser, sistemul de dispersie: prism, reea sau ambele, sistemul de receptie, msurare i nregistrare (fotomultiplicatori sau fotodetectori,
amplificatori, plac de achiziie, calculator),

sistemul optic de fante, fibre din sticl i lentile care asigur traiectoria razelor de lumin
prin instrument. Cel mai simplu spectrometru, cel cu prism, este prezentat schematic n fig. 1.
Fig. 1. Cel mai simplu spectrometru cel cu prism (L1, L2 = lentile)
Fig. 2. Suportul pentru prob n cazul spectrometriei n arc sau scnteie
Sursa spectral cea mai veche n OES, utilizat n variante perfecionate i astzi, o
constituie arcul electric - creat ntre doi electrozi de grafit (spectral pur) sau un electrod de grafit i unul de cupru (sau un alt metal pur, absent din prob) - a crui intensitate a curentului este de cteva zeci de amperi. Temperatura realizat se situeaz ntre 3000-6000K. Electrodul inferior este fasonat n form de crater, astfel nct s suporte proba (fig. 2), aflat fie sub form de fragmente metalice, fie sub form de pulbere, n amestec cu grafit i n ambele cazuri, presate n cavitatea micro-creuzetului. La apariia arcului electric, elementul de analizat din prob se volatilizeaz, transformndu-se n atomi sau ioni. Arcul n curent continuu este recomandat n analiza spectrelor atomice, iar cel n scnteie - provocat de un curent alternativ (avnd o energie de 20-50keV), care duce la temperaturi mai ridicate - pentru analiza spectrelor ionilor. Spectrometrele moderne sunt prevzute cu monocromatoare cu o reea curbat care localizeaz liniile spectrale pe acelai cerc cu cel cruia i aparine reeaua: aa-numitul cerc
Rowland, reprezentat n fig. 3. Lumina ptrunde spre reeaua curbat intrnd printr-o fant
situat pe acest cerc i ies printr-o alt fant situat tot pe cerc. Receptorii, astzi formai din minusculi fotoreceptori sau fotomultiplicatori, sunt plasai chiar n dreptul fantei de ieire.
10
Spectometrele cu vid, sunt instrumente la care drumul optic se realizeaz n vacuum i
se utilizeaz pentru determinarea elementelor a cror radiaie este absorbit de aer la presiunea normal: C, P, As, S.
Fig. 3. Cercul Rowland - se observ locul fantelor de intrare i de ieire Spectrometrul multicanal simultan are n drumul optic al radiaiei fiecrui element de
analizat cte o fant i un fotodetector. n aceast variant radiaia venit de la surs intr printr-o singur fant, fiind apoi dispersat prin reeaua concav bazat pe reflexie. Radiaia compus, incident, ajunge la o serie de fante de ieire care izoleaz, fiecare, linia selecionat de ctre utilizator pentru un anumit element. Fantele de intrare i cele de ieire se gsesc ambele pe acelai cerc Rowland - avnd raza de curbur egal cu aceea a oglinzii. Raza, dup ce trece prin cele dou fante, cade pe fotomultiplicatorul elementului respectiv care d un semnal de ieire - un curent - care este integrat pe o capacitate, rezultnd astfel o tensiune convertibil cu uurin n concentraie. Astfel de spectrometre moderne sunt denumite adesea
cuantometre. Instrumentele multicanal recente pot analiza simultan pn la 60 de elemente
chimice. Pentru a se rezolva interferenele aprute se msoar mai multe lungimi de und pentru acelai element i se realizeaz corecii de fond. O analiz de 25 de elemente dureaz, de la expunerea n analizor, graie mijloacelor de calcul moderne, circa 1-2 minute.
Spectrometrele secveniale funcioneaz similar, ns au numai dou canale de
msurare a intensiti pentru toate radiaiile emise de surs. Un canal este fix i msoar intensitatea radiailor emise de etalon sau de martorul din prob, iar altul, mobil, nregistreaz succesiv liniile pentru elementele de analizat. Acesta este un analizor mai lent dar totodat mai ieftin, avnd posibilitatea de a analiza un numr mai mare de elemente dect cel simultan. Acest analizor este avantajos n cercetarea tiinific, unde numrul de elemente chimice analizate poate fi foarte diferit.
144
Spectrometria de emisie cu descrcare aureolar (GD-OES [89]), provoac, n vidul
care mai conine urme de argon, o descrcare n arc -asemntoare celei din lampa cu catod cavitar (menionat la spectrometria de absorbie atomic). Denumirea provine de la aspectul de aureol pe care-l capt proba de analizat n calitate de catod n aceast surs (v. fig. 4). n timpul funcionrii, proba se corodeaz cu vitez constant, datorit arcului electric, pe msur ce analiza se efectueaz, permind n acest fel un numr mare de analize calitative a unor straturi subiri succesive din interiorul probei (piesei) paralele cu suprafaa. Cunoscnduse viteza de avansare a corodrii probei (n m/sec), aceast tehnic permite caracterizarea privind compoziia chimic n funcie de distan (n adncime) a materialelor compozite straturi obinute prin tratamente termice, galvanizri sau alte prelucrri ale suprafeele exterioare de pe piesele solicitate n condiii extreme, cele din maini. n mod surprinztor, proba poate consta i din pulberi sau chiar din materiale izolatoare.
Fig. 4. Sursa pentru obinerea descrcrii aureolare n GD-OES
Prin utilizarea radiaiei laser, n calitate de mijloc de excitare, n aa-numita

spectrometrie optic de emisie atomic cu laser, se elimin interferenele datorate electrozilor
din cadrul variantelor n arc sau scnteie. Se pot realiza microspectre locale, pe incluziuni sau zone care, observate la microscop, prezint aspecte diferite de restul probei. Se realizeaz
cratere de diametre 20-200m, din care se evapor circa 10-8-210-6g din prob. Zona
analizat se fixeaz n prealabil la un microscop. Sensibilitatea analizei prin aceast tehnic are de suferit tocmai datorit acestei mase reduse, fiind doar 0.05-1% dintr-un anumit element.
[89] GD-OES = Glow Discharge - Optical Emission Spectroscopy (l. engl.) Chimie Analitic i Instrumental 145
10
Analiza chimic calitativ Analiza calitativ spectral n funcie de scopul urmrit se mparte n: identificarea
componentului major, identificarea impuritilor i analiza complet. Semnificaia calitativ a liniei spectrale o d lungimea de und. Poziionarea pe plac a liniei spectrale se face de obicei prin intermediul spectrului fierului luat drept etalon. Acesta are circa 5000 de linii, cunoscute exact i tabelate, n ceea ce privete lungimea de und. De aceea, practic, se procedeaz astfel. Cu spectrometrul utilizat se nregistreaz spectrul fierului (folosind un arc obinut ntre un cui de fier i o bar de grafit). Pe aceeai plac sau mijloc de nregistrare se nregistreaz consecutiv spectrul probei studiate calitativ. Se proiecteaz pe acelai ecran spectrul fierului i spectrul elementului (amestecului) necunoscut (coninnd i fier). Prin msurarea distanelor reale dintre linii se evalueaz lungimile de und ale liniilor prezente i se identific elementul (elementele) prezent. Astfel, conform celor ilustrate n fig. 5 se msoar d1 i d2 i apoi se scrie ecuaia: d1 x 1 = d 2 2 1 De aici rezult prin calcul: x = ( 2 - 1)d1/d2 + 1 (1)
Fig. 5. Compararea spectrului ferului cu spectrul probei de analizat
Dup calculul valorii x se compar lungimea de und calculat cu valoarea tabelar a elementului presupus a fi prezent (vezi tabelul 1).
Liniile spectrale ultime sunt acele linii din spectrul unui atom care dispar ultimele, prin diluarea probei. Aceste linii confer analizei sensibilitatea cea mai mare. Drept regul
important, trebuie s reinem c n primul rnd, ntr-o analiz calitativ, se identific

elementul major i bazat pe aceasta se trece la identificarea elementelor minore, respectiv a
urmelor, prin comparaie cu cel major.

Tabelul 1. Linii spectrale persistente n arc electric Element Numr de und (cm-1) Element Numr de und (cm-1) Al 3961.5 Mg 2852.1 2795.5 Bi 3067.7 Li 6707.9 Co 3453.5 Mn 4030.8 2286.2 2576.1 4254.5 Cu 3247.5 Mo 3788.3 2136.9 2816.2 Fe 3719.9 Ni 3414.8 2382.0 2287.1 Analiza cantitativ. Intensitatea, I, a unei linii spectrale este dat de produsul dintre
numrul atomilor ce particip la tranziie, n, i energia fotonilor emii, h i anume: I = nh tranziiei este mai mic. n practic, se utilizeaz o ecuaie empiric de forma: I = aCb prin logaritmarea creia, n ambii membri, se obine ecuaia de regresie: log(I) = log(a)+blog(C) ceea ce n coordonate logI - logC reprezint o dreapt (vezi fig. 6). (4) (3) (2) Numrul n crete cu temperatura T i este cu att mai mare cu ct intervalul E al
Fig. 6. Aspectul curbei de etalonare n spectrometria de emisie atomic
Pentru diminuarea fluctuaiilor de fond, inerente oricrei surse, se mai utilizeaz i un

etalon intern. Acesta este o substan introdus n mod voit n prob. Substana - etalon intern
(martorul) trebuie s ndeplineasc cteva condiii:

s aib o concentraie constant n prob (etaloane), s se excite n aceleai condiii cu substana analizat, s aib o comportare identic la evaporare, s aib o puritate mare, s prezinte o autoabsorbie mic, s nu fie coninut n eantionul de analizat.
10
ntruct prin analiza cantitativ se determin de regul elementele minore, respectiv

elementele n urme, elementul major calculndu-se prin diferen, se prefer uneori drept
etalon intern chiar elementul major. Motivul este unul practic: la analizele de serie mare elementul major are o concentraie practic constant. Elementul din etalonul intern respect i el o ecuaie log I = f(log C) analog cu cel de analizat. Presupunnd c exist un efect de matrice, avem pentru un etalon intern de concentraie fixat, Ce: log(Ie) = log(ae) + belog(Ce) iar pentru elementul de analizat, x: log(Ix) = log(ax) + bxlog(Cx) Scznd membru cu membru i admind c be=bx=b se obine o ecuaie de tipul: log(Ix/Ie) = const + blog(Cx/Ce) unde const este 0. Curba de etalonare log (Ix/Ie) = f[log (Cx/Ce)], tot liniar, va duce la o precizie mai bun a rezultatelor analizelor cantitative dect cea care nu face apel la un element de referin din etalonul intern, datorit diminurii zgomotului dar i a efectului de matrice. Printre alte msuri de ameliorare a rezultatelor analizelor amintim c este mai indicat s se analizeze separat elementele puin volatile, cum ar fi de exemplu Al sau Si, i separat cele volatile, ca de exemplu: Cu, Fe, Mg, Mn, pentru a se putea obine, n condiii experimentale potrivite, de la caz la caz, valori mai ridicate ale raportului semnal-zgomot i, n consecin, precizii mai ridicate. n afar de etalonul intern, n substana supus analizei prin spectrometrie se introduce, tot prin omogenizare i un aanumit tampon spectral. Acesta este o substan pur care are rolul de a stabiliza viteza de evaporare a probei, reducnd influena matricei asupra rezultatelor i contribuind la reducerea fondului precum i la mrirea intensitii anumitor elemente. Exemple de astfel de substane sunt: GeO2, Mg(NO3)2, NiO i Na2WO4. n analiza spectral a silicailor, de exemplu, se determin Fe i Mn n prezena SrCO3 iar pentru elementele nevolatile se folosete drept tampon spectral oxidul de ytriu (Y2O3) . n cazul prezentat elementele Sr respectiv Y servesc totodat drept etaloane interne. (7) (6) (5)
148
Plasma cuplat inductiv
O contribuie major la succesul OES a adus-o introducerea spectrometrelor cu aanumitele tore pe baz de plasm de argon unde temperaturile ridicate permit practic excitarea oricrui element (T = 6000K). Tehnica, denumit complet : spectrometrie optic de emisie atomic cu plasm cuplat inductiv (ICP-OES [90]) este mult utilizat n ultimul timp. Este ns obligatorie dezagregarea prealabil a probei (aducerea acesteia n soluie) i apoi pulverizarea acesteia (ca aerosol) direct n argonul ce va intra n zona cald (plasm). Erorile sunt i aici de 3-5%. Sursa pentru acest tip de plasm const dintr-un dispozitiv, prezentat schematic n fig. 7 compus din trei tuburi concentrice, confecionate din cuar, fiecare deschis n partea dinspre zona cald (de regul orientat n sus).
Fig. 7. Plasma cuplat inductiv ia natere la trecerea unui curent de radiofrecven (27-50MHz) prin spirele conductoare
Curentul de argon, ce poart cu sine proba, sub form de particule fine (un aerosol), trece prin tubul central. Obinerea plasmei este realizat de cele dou sau trei nfurri ale unui tub de inducie prin care circul un curent de radiofrecven (27MHz) de mare putere (12KW). Un al doilea flux gazos tot de argon ionizat curge, cu un debit cuprins ntre 10 i 15 L.min-1, prin tubul intermediar i servete la meninerea plasmei. Gazul de protecie, care va deveni n partea superioar tot plasm, curge sub forma unui curent elicoidal, izolnd termic tubul de cuar exterior i dnd stabilitate plasmei. Iniial, plasma este pornit de o scnteie, realizat cu un dispozitiv auxiliar, apoi se autontreine. Plasma propriu-zis are o form inelar (toroidal), n care proba este introdus n partea central, rece, nclzindu-se pe msur ce se apropie i intr n contact cu zona cald (vezi fig. 7).
[90] ICP-OES reprezint, n literatura internaional, prescurtarea denumirii din l. engl.: Inductively Coupled Plama - Optical Emission Spectrometry Chimie Analitic i Instrumental 149
10
Introducerea probei (etaloanelor) se realizeaz dintr-o soluie, de regul apoas, de ctre un sistem de pulverizare denumit nebulizor similar celui utilizat n absorbia atomic sau spectrometria n flacr, cu deosebirea c debitul este mai mic (1Lmin-1). Un exemplu de pulverizator n domeniul plasmei cuplate inductiv este nebulizorul cu debit transversal schiat n fig. 8. Acesta creeaz un aerosol purtat de gazul purttor (tot argon) spre plasm - sursa ce emite liniile spectrale.
Fig. 8. Pulverizarea probei, prin efect Venturi, n spectrometria cu plasm
150
Fotometria de flacr
Aceast metod este o variant simplificat a spectroscopiei de emisie n care sursa de excitare este o flacr. n comparaie cu arcul electric, scnteia electric, laserul sau plasma, sursa n discuie, avnd temperatura mai cobort, are un singur avantaj: n flacr, existnd
un numr mic de atomi n stare excitat, spectrul are un numr mai mic de linii.
Din punct de vedere practic, metoda este important prin aceea c permite obinerea semnalelor analitice pentru elemente ca Na, K, Ca, Li - elemente dificil de analizat prin numeroase alte tehnici - utiliznd o aparatur relativ simpl i ieftin. Metoda prezint interes n analiza apelor unde coninutul Na+ i Ca2+ este esenial, concentraia acestora fiind cobort.
Fig. 9. Schema de principiu a spectrometrului cu flacr
n flacr (vezi fig. 9) cldura provine prin reacii de tipul: C2H2 + O2 2CO + H2 + Q' (reacie primar) 2CO + H2 + O2 2CO2 + H2O + Q" (reacie secundar) Fcndu-se bilanul cldurii degajate avem: Q = Q' + Q". Deci, suma pierderilor de cldur fiind Qp, cunoscnd masa, m, i cldura specific medie a amestecului de gaze de ardere, c, se poate evalua temperatura flcrii: T = 273 + Q Qp mc (8)
Pentru ca un amestec de gaze s poat servi drept surs spectral n flamfotometrie, trebuie s ndeplineasc condiiile:
s nu aib spectru propriu (sau cel puin acesta s fie ct mai redus), s funcioneze staionar (linitit), n volum limitat i redus n aer liber, s se preteze la o introducere uniform a probei, s nu elibereze gaze toxice.
151
10
Temperatura depinde de natura, dar i de raportul componenilor (carburantcomburant) care trebuie pstrat n limite optime i constante. Proba, dup dizolvare, este adus n flacr prin pulverizare, utilizndu-se un
pulverizator (sau nebulizor), iar picturile fine evaporndu-se brusc, provoac apariia ionilor,
respectiv a atomilor, care sufer excitri i dezexcitri repetate. Simultan cu acestea mai au loc fenomene de ionizare, asocieri de ioni, autoabsorbia i difuzia (mprtierea luminii). S explicm pe scurt fiecare din acestea. Ionii au alte nivele dect atomii. Apariia ionizrii micoreaz numrul atomilor, deci sensibilitatea metodei. Autoabsorbia const n utilizarea luminii emise pentru excitarea propriilor atomi, ceea ce micoreaz lumina emis i sensibilitatea i stabilitatea semnalului la concentraii mari. Acest lucru se petrece n zonele reci, deci strbtute obligatoriu de lumin. Difuzia este fenomenul de mprtiere a luminii ce d un semnal distorsionat n cazul prezenei acesteia n proba pentru analiz n timp ce lipsete din proba etalon. Numrul atomilor excitai crete cu temperatura datorit ecuaiei amintite la
spectrometria de absorbie atomic, lucru ce se poate observa i din tabelul 2, pentru cteva
elemente curent analizate prin spectrometria n flacr.

Tabelul 2. Creterea sensibilitii determinrii n funcie de temperatura flcrii Element , nm Nn - numrul atomilor Energia de Energia de excitai la valorile T excitare, eV ionizare, eV 2100 K 2500 K Li 670.8 9.5.10-5 5.10-4 1.85 5.4 -5 Na 589.0 2.3.10 1.5.10-4 2.10 5.14 K 766.5 3.6.10-3 1.5.10-3 1.61 4.34 Mg 404.4 1.1.10-7 1.7.10-9 4.35 7.64 Ca 422.7 2.3.10-7 3.2.10-6 2.93 6.11
Carburanii cei mai ntlnii n cadrul metodei sunt oxidul de carbon, hidrogenul, metanul, propan - butanul i acetilena iar comburanii pot fi aerul sau oxigenul. Se poate observa c sunt aceiai cu cei utilizai n AA pentru temperaturi joase (tabelul 2). Aparatura const, ca pri principale, din urmtoarele (fig. 9): un pulverizator pneumatic (2), cu ajutorul cruia soluia etalon sau, dup caz, de analizat coninut n paharul (1) este adus n arztorul (3) alimentat cu aer sau oxigen de la o surs (de exemplu un cilindru sub presiune) unde arde cu o flacr - (4) - gazul combustibil. Radiaia emis, mai exact spectrul emis, este monocromat cu ajutorul filtrului sau monocromatorului, care selecteaz lungimea de und dorit. Curentul fotoelectric ce ia natere n fotomultiplicator (5), este amplificat de un amplificator (6) i nregistrat (7).
152
Temperatura flcrii, reglabil ntre 1000-3000C, permite obinerea de rezultate analitice utile pentru alte 30 de elemente n afara celor amintite. Totui metoda se utilizeaz cu prioritate pentru metale alcaline i alcalino - pmntoase, care au toate energiile de excitare (i totodat de ionizare) cele mai coborte. Liniaritatea curbei de etalonare depinde de condiiile tehnice:
uniformitatea pulverizrii, temperatura flcrii (depinde de presiunea constant a gazelor i lipsa curenilor de aer), prezena elementelor nsoitoare (cationi dar mai ales anioni), autoabsorbia liniei spectrale analitice (mai ales la nivele de concentraie ridicat) i ionizarea, deci modificarea poziiei liniilor (lucru frecvent la concentraii mici).
Determinrile cantitative se efectueaz prin metoda curbei de etalonare sau cea a adaosului standard, descrise anterior.
Utilizarea spectrometrului cu dou canale (vezi fig. 11) permite ca erorile datorate fondului flcrii (ca variaii brute ale temperaturii, ale debitelor soluiei de prob etc.) s fie nlturate prin metoda etalonului intern, utiliznd dou canale simultan.
Fig. 11. Instalaie pentru aplicarea metodei etalonului intern
De exemplu, pentru determinarea sodiului (sau a potasiului) se utilizeaz drept etalon intern litiul. n jurul flcrii se plaseaz cele trei filtre plus fotodetectorii respectivi. Semnalul obinut pentru litiu este schimbat ca semn i nsumat cu semnalele celorlalte dou. Orice variaie de semnal pentru Li va compensa aceeai variaie nregistrat de fotocelulele pentru Na sau K - semnalul final depinznd doar de concentraia acestora, nu i de modificri ale fondului flcrii.
153
10
1. Care sunt domeniile de lungimi de und n care se pot obine linii spectrale n spectrometria de emisie? 2. Care sunt elementele pentru care nu este recomandat spectrometria de emisie? 3. Ce este un etalon intern i care este rolul su? 4. Care este cea mai veche surs spectral cunoscut n spectrometria optic de emisie optic? 5. Sub ce form se poate plasa proba n arcul electric? 6. Cum se introduce proba n spectrometria cu plasm cuplat inductiv? 7. Ce este spectrometria cu descrcare aureolar? 8. Care este fenomenul care genereaz plasma, cel mai frecvent? 9. De ce se utilizeaz sursa de excitare cu laser? 10. Ce avantaj prezint flacra n calitate de surs de excitare? 11. Ce este un tampon spectral? 12. Care este forma ecuaiei utilizate n analiza cantitativ? 13. Care sunt elementele pentru care metoda spectrometriei n flacr este recomandabil? 14. Cum se aduce proba lichid n flacr n aceast metod? 15. Ce fenomene secundare diminueaz semnalul n fotometria de flacr? 16. Ce factor mrete, pentru aceeai prob, numrul atomilor excitai?
154
Fluorimetria i spectrometria de chemiluminescen Nu putem vedea bine dect cu inima; esenialul este invizibil ochilor Antoine de Saint-Exupery (1900 - 1944 ), n romanul Micul Prin
Fluorimetria i spectrometria de chemiluminescen

Fluorescen, luminescen, fosforescen
Anumite combinaii chimice, aflate mai ales n soluie sau n stare solid, n urma excitrii moleculelor cu radiaii din domeniile vizibil i UV apropiat, reemit o parte din energia primit sub form de radiaie luminoas - adesea vizibil. Aceast reemisie se numete fluorescen. Maximul radiaiei de fluorescen este situat de obicei la o valoare a lungimii de und mai mare dect maximul picului radiaiei care a provocat excitarea, diferena de energie corespunztoare transformndu-se n cldur, fiind disipat n mediu. Simplificat, acest fenomen poate fi reprezentat conform schemei din fig. 1.
Excitare Fluorescen
Dezexcitare
Fig. 1. Schema procesului de apariie a fluorescenei. Radiaia incident are lungimea de und mai mic dect cea emis
Dup excitare, intensitatea luminii emise de ctre atomi, F, scade exponenial n timp respectnd o ecuaie de forma: F = I0 e k f t
unde F este radiaia de fluorescen produs de ctre o substan, I0 - intensitatea radiaiei incidente, kf - o constant caracteristic substanei (analog constantei de vitez) iar t - timpul. Trebuie fcut o distincie ntre fluorescen, care corespunde unei scderi rapide a intensitii luminoase emise i fosforescen - la care scderea n timp este cu mult mai lent. De aceea o specie molecular poate fi, deodat, att fluorescent ct i fosforescent. Pe de alt parte, luminescena este tot o reemisie de lumin dar aceasta are la origine energia unei reacii. Aceast energie nu se degaj sub form de cldur (ca n majoritatea cazurilor) ci sub form de energie radiant. De fapt o putem considera ca pe o excitare a electronilor cu ajutorul cldurii de reacie.
Timpul de via a unei specii moleculare excitate, 0, se definete chiar cu ajutorul
constantei de vitez kf din relaia precedent: 0 = 1/kf

11
Dup acest timp intensitatea rezidual nu reprezint dect 36.7% din cea iniial adic peste 60% dintre moleculele excitate au revenit la starea neemisiv. De aceea fluorimetria lucreaz n regim staionar - excitarea avnd loc pe tot parcursul msurtorii - pe cnd fosforescena, la care diminuarea intensitii n timp este mult mai lent, se studiaz doar dup ce a ncetat faza de excitare. Fluorescena, riguros vorbind, implic emisia de radiaie prin tranziia ntre dou niveluri care au aceeai multiplicitate (de exemplu singlet la singlet sau triplet la triplet). Dac tranziia are loc ntre dou niveluri de multiplicitate diferit, aceasta poart numele de luminescen. Metodele de analiz bazat pe fluorescen nu sunt general aplicabile oricror substane. Dar, toate metodele analitice bazate pe att pe fluorescen ct i pe i luminescen pe lng c sunt foarte specifice sunt i foarte sensibile. De exemplu, putem aminti c limita de determinare a unei metode fluorimetrice, pentru o anumit combinaie chimic, este de circa 1000 de ori mai cobort dect cea a unei metode prin absorbie n vizibil sau n ultraviolet. De aceea, din aceast categorie de metode exist cteva extrem de utile n analiza i monitorizarea unor poluani ai mediului. Dei am amintit la nceput c fluorescena apare n strile lichid i solid, anumite gaze, de exemplu aflate n atmosfera terestr, pot fi determinate cantitativ prin fluorescena indus de excitarea cu un puls de durat foarte mic (1sec) cu ajutorul unui laser de mare putere (dispozitiv cunoscut sub denumirea de lidar). ntruct nivelul radiaiei de luminescen nu este ntotdeauna foarte ridicat, exist dou tipuri de instrumente diferite: fluorimetre i spectrometre de chemiluminescen. Ultimele iau gsit aplicaii n domeniul analizelor N sau S din materiale precum i n monitorizarea NOx, H2S din aer precum i n studiile, respectiv analizele fenomenelor de mbtrnire a materialelor plastice.
156
Bazele fizice ale fluorescenei
Din punct de vedere fundamental, fluorescena compuilor moleculari (de interes pentru analiza chimic) se poate nelege ca o absorbie de radiaie UV-VIS urmat de o serie de tranziii energetice ntre ultimii orbitali ocupai, n starea fundamental a moleculei, i primii orbitali externi vacani. Iniial moleculele se afl n repaos, n starea fundamental, notat S0 (fig. 2). Dup absorbia unui foton incident electronii trec n starea S1 - prima stare de tranziie electronic, excitat. Apoi, foarte rapid (10-12s), are loc un proces denumit
conversie intern, prin care moleculele sufer rearanjri, fr a emite fotoni, timp n care
electronii ajung n starea caracterizat prin numrul de vibraie V0 a strii electronice urmtoare, S1. Abia apoi intervin tranziiile de fluorescen (timp de 10-9-10-7s) n urma crora moleculele revin pe unul din nivelele notate V0, V1, ... (stri energetice de vibraie caracterizate fiecare prin numrul de vibraie respectiv, Vi) - aparinnd nivelului iniial S0 [91].
V4 V3 V2 V1 V0 V4 V3 V2 V1 V0
S1
T1
Fosforescen
S0
S0
Fig. 2. Diagrame energetice prezentnd comparativ fluorescena i fosforescena. Sgeile scurte simbolizeaz conversii interne fr emisie de fotoni. S = singlet; T = triplet; V1 V4 = numere cuantice de vibraie i totodat notaii ale strilor de vibraie
Se poate observa (fig. 2) c moleculele pot pstra o parte din energia lor sub form de energie de vibraie. Acest exces de energie urmeaz a fi disipat n mediul nconjurtor prin coliziuni mecanice sau alte procese neradiative cunoscute sub denumirea de relaxare
vibraional. Se mai poate uneori totui produce i o emisie de fotoni, evident mai sraci n
energie, care stau la baza unei fluorescene situate n IR apropiat. Spectrul de absorbie i cel de fluorescen pentru diferii compui prezint (cu o bun aproximaie) o simetrie, unul reprezentnd aproape imaginea n oglind a celuilalt. Cum e i
[91] S0, S1, T1 ... reprezint stri electronice (nivele energetice), iar V0, V1, ...nivele energetice de vibraie caracterizate fiecare de un numr cuantic de vibraie uneori notat tot V0, V1,... . S i T sunt prescurtri amintind sensurile de singlet, respectiv de triplet. Chimie Analitic i Instrumental 157
11
firesc absorbia este situat la lungimi de und mai mici, respectiv n conformitate cu ecuaiile: E = h = hc/, la valori ale energiei, E, mai ridicate (fig. 3).
Fig. 3. Poziiile relative ale absorbiei i fluorescenei n cazul eozinei. Se remarc o zon de lungimi de und comun
Fosforescena, pe lng faptul c nsoete o reacie chimic, analog luminescenei, corespunde i unui mod diferit de revenire la starea fundamental. Dup faza de absorbie o dat cu transferul unui electron pe nivelul S1 (prima stare electronic excitat dup cea fundamental - o stare de singlet) are loc, dac relaxarea vibraional se produce suficient de lent, modificarea spinului electronului la o stare de triplet, notat T1 (fig. 2), ceva mai stabil (metastabil). Din acest motiv, revenirea la starea fundamental este ncetinit, deoarece implic o nou modificare de spin a acestui electron. Ca urmare, durata strii excitate n fosforescen poate fi de 108 ori mai mare dect n fluorescen. Se cunosc cteva reguli privind legtura dintre structura compuilor organici i fluorescena acestora:
Moleculele organice care nu absorb puternic lumina peste 200 nm n general nu sunt
fluorescente.
Moleculele care au banda de absorbie corespunztoare tranziiei: S0S1 (v. fig. 1),
localizat la = 250nm i pentru care absorbia luminii se datorete unei tranziii (') sunt fluorescente.
Substituenii - donori de electroni - grefai pe un sistem -delocalizat mresc ntotdeauna
absorbia luminii, intensificnd fluorescena. n acest sens, se pot aminti, de exemplu, funciunile: OH > OR > NH2.
Grupele funcionale puternic atragtoare de electroni (grefate la sistemul ') tind s
reduc fluorescena moleculei respective. n plus prezena, alturi de acestea, a unor grupri donoare de electroni, tinde s diminueze fluorescena (i nu s o intensifice).
158
n consecin, moleculele organice care au cel puin dou legturi conjugate i care conin i o band de absorbie la > 200nm, cu un coeficient de absorbie 103Lmol-1cm-1, prezint fluorescen i pot fi analizate fluorimetric. De exemplu, compuii moleculari ciclici cu sisteme conjugate (fig. 4), care mai posed grupri funcionale donoare de electroni, se preteaz foarte bine la acest tip de determinri.
Bifenil O
Fluoren NH2 N
Naftalina OH
Acetofenona Benzen Anilina Oxina Fig. 4. Diveri compui fluoresceni aromatici. Oxina (8-hidroxichinoleina) formeaz combinaii complexe fluorescente cu numeroi ioni metalici
Intensitatea fluorescenei
Semnalul analitic n fluorimetrie l constituie intensitatea fluorescenei, F. Valoarea acesteia depinde att de poziia punctului de unde este emis radiaia ct i de poziiile fantelor de intrare i ieire din celula de msur. Astfel, o parte a radiaiei incidente (excitante) este absorbit de ctre lichidul din celul nainte de a atinge punctul de emisie iar o parte a radiaiei de fluorescen, o dat emise, este absorbit de aceeai soluie, nainte ca aceasta s prseasc celula. Asadar, intensitatea radiaiei de fluorescen care atinge detectorul corespunde unui volum de soluie relativ mic prezent n spaiul delimitat de proieciile ferestrelor de intrare i ieire din celul. Fenomenul de diminuare a intensitii luminoase - numit impropriu filtrare intern se datorete mai ales suprapunerii pariale a spectrelor de fluorescen i de absorbie (fig. 3). n afar de absorbia propriu zis, denumit i diminuare prin culoare, mai pot interveni transferuri de energie de la molecule excitate la alte molecule sau la ioni strini din celul, n urma unor coliziuni sau formri de compleci. Acest fenomen se numete diminuare chimic. De exemplu, prezea oxigenului atmosferic provoac o diminuare suplimentar de fluorescen. De aceea, pentru soluii, se definete o mrime denumit randamentul fluorescenei, f, cuprins ntre 0 i 1 - un parametru independent de intensitatea sursei:
11
f = (Numrul de fotoni emii)/(Numrul de fotoni absorbii)
(1)
Se poate observa c aceast mrime reprezint fracia radiaiei incidente absorbite, care este reemis sub form de fluorescen. Cu ajutorul acesteia, n soluii diluate, se poate scrie o ecuaie a intensitii fluorescenei, F. n primul rnd trebuie s se in cont de factorii care determin absorbana, A, ct i de lungimea, notat cu b, a parcursului radiaiei de fluorescen prin celul. n consecin expresia intensitii fluorescenei se poate scrie: F = fI0Ab lungimea parcursului radiaiei de fluorescen prin celula de msur. nlocuind A avem: F = fI0lbC respectiv de soluie, ntr-o singur constant, K, obinem o ecuaie mai simpl: F = KI0C (4) Pe baza acestei ecuaii se poate gsi experimental o curb de etalonare n coordonatele F, C care este o dreapt (fig. 5 - stnga). Desigur c aceasta este valabil doar n soluii diluate, ntruct s-a constatat c poate suferi modificri accentuate la concentraii superioare (fig. 5 - dreapta) tocmai din cauzele amintite. F log(F) (3) unde C este concentraia molar a soluiei. nglobnd toate constantele care depind de celul, (2) unde cu I0 s-a notat intensitatea radiaiei incidente, A - absorbana soluiei (A = lC) iar b -
C log(C) 10 510-5 -5 -4 -3 -2 Fig. 5. Relaia liniar dintre intensitatea fluorescenei, F, i concentraia C. Domeniul liniar este relativ ngust iar la concentraii ridicate liniaritatea dispare
-5
160
Aparatura
Deoarece proba spus analizei emite radiaia de fluorescen n toate direciile, pe fotodioda sau fotomultiplicatorul instrumentului folosit cad doar radiaiile care vin n direcia acestuia, n timp ce restul se pierd. De aceea suprafaa senzorului care preia radiaia trebuie s fie ct mai mare. n general se msoar radiaia care prsete celula sub un unghi de 90
fa de radiaia incident. Pentru soluii cu absorban ridicat studiul se poate realiza i n
prelungirea fascicolului incident. Pentru soluii semiopace se preconizeaz o observare sub un unghi variabil ntre 90-180. Geometria fluorimetrelor poate fi sintetizat prin schema din fig. 6.
Surs Monocromator (1) - de excitare Celul
Unghiul: 90-180
Monocromator (2) F Detector - de emisie Fig. 6. Geometria unui spectrofluorimetru actual; unghiul preferat de observare a fluorescenei este 90; F = fanta Sursele optice ale fluorimetrelor actuale emit un spectru luminos continuu. Au devenit
uzuale urmtoarele lmpi folosite n calitate de surse:

Lmpile cu arc de deuteriu (190-400nm), Lmpile cu arc de xenon (200-850nm), Lmpile cu arc de wolfram (380-700nm).
Se mai utilizeaz i lmpile cu vapori de mercur care produc linii spectrale intense (la 254, 313 i 365nm). Acestea, pot fi izolate individual folosindu-se nite simple filtre optice. De asemenea au mai aprut surse cu laser heliu-cadmiu (325nm, 5-10mW) care de asemenea necesit un filtru optic i impun folosirea unor fotomultiplicatori. Constructiv se pot distinge dou tipuri de fluorimetre: (1) bazate pe determinarea raportului fluorescenelor i (2) spectrofluorimetre.
Fluorimetrele bazate pe determinarea raportului fluorescenelor (fig. 7) dup ce
selecteaz radiaia excitant optim, gsit prin ncercri preliminare, radiaia incident este desprit, de o oglind semitransparent, n dou raze: una care cade pe prob (aflat n celula de msur) iar cealt pe o fotodiod. Din celula de msur iese radiaia de fluorescen, care se observ la un unghi de 90 fa de cea incident. Un al doilea monocromator, denumit
de emisie, selecteaz radiaia dorit, de regul cea mai intens. Proba poate fi nlocuit cu un
etalon metrologic pentru reglaje. Folosirea celor dou fotodiode n opoziie elimin fluctuaiile de intensitate inerente oricrei surse bazate pe arc electric. Calculul concentraiei
11
necunoscute se face pe baza ecuaiei F = KI0C n care KI0 este o constant pentru orice pereche de valori C, F. Rezult: Cnec = Cet Fnec Fet
unde Cnec este concentraia probei necunoscute, Inec - intensitatea fluorescenei probei necunoscute, Cet - concentraia probei etalon, cunoscute i Iet - intensitatea fluorescenei pentru proba etalon - cunoscut.
Surs de xenon Oglind semitransparent Monocromator -1 Fotodiod1 Monocromator -2 Calcul raport Rezultat, F
Referin Prob
Fotodiod2
Fig. 7. Schema unui spectrofluorimetru cu doi detetectori care elimin deriva sursei Spectrofluorimetrele permit, pe lng cele amintite anterior la fluorimetre, obinerea
unor spectre de fluorescen. Fiecare din cele dou monocromatoare baleiaz ntreg domeniul spectral. Pentru fiecare valoare a radiaiei excitante exist un spectru de fluorescen separat. Pentru tot domeniul se obine o familie de spectre care caracterizeaz n mod unic o combinaie chimic sau un material fluorescent. Cu ajutorul acestora se pot seleciona condiiile optime de lucru pentru o determinare de rutin.
162
Aplicaii
Exist un numr mic de molecule care posed o fluorescen natural. Acestea pot fi analizate cantitativ prin fluorimetrie dac se dispune de substana pur (etalon). Numrul acestora este foarte mic (5-8% din total). Pe de alt parte, aa cum exist reactivii de culoare, exist i o serie de reactivi de fluorescen care duc, n urma unei reacii chimice, la produi fluoresceni. Din primul grup de metode amintim analiza hidrocarburilor policiclice aromatice din ape, n urma separrii acestora prin cromatografie. Tot n categoria acestui prim grup intr i determinarea aflatoxinelor - nite ageni cancerigeni prezeni n alimente dar i o serie de alte substane importante cum ar fi steroizi i vitamine. Din a doua grup de metode amintim determinrile unor cationi metalici cum ar fi Be2+ cu reactivul morin sau unii compleci ai metalelor trivalente cu oxina (8-oxichinoleina).
Determinarea dioxidului de sulf (SO2) prin fluorimetrie n UV
Se bazeaz pe excitarea moleculelor de SO2 din prob cu o lamp UV pulsatorie (avnd o frecven de 20kHz) cu < 214nm. Moleculele de SO2 emit prin excitare o fluorescen cu lungimea de unda de 214nm, foarte specific. Aceast metod st la baza celor mai performanre analizoare de SO2 permind determinarea 1ppb n aer. Mai mult, folosindu-se cuptoare de conversie oxidative prin care H2S este convertit la SO2 se pot construi analizoare att pentru SO2 ct i pentru H2S. O scem de principiu a analizorului pentru SO2 prin fluorescen n UV este prezentat n fig. 8.
Prob Lamp UV Evacuare
SO2
Filtru primar
Fotodetector de control Filtru secundar (214 nm) Semnal
Fotomultiplicator
Fig. 8. Schema de principiu a analizorului pentru dioxid de sulf bazat pe fluorescen n UV
163
11
Chemiluminescena
Exist reacii chimice care sunt nsoite de emisie luminoas. O astfel de substan este luminol-ul care poate reaciona cu ferul (II) i permite punerea n eviden a unor concentraii mici din acest element. O astfel de reacie este i cea utilizat pentru determinarea monoxidului de azot, NO n amestec cu dioxidul de azot, NO2. Aceti oxizi rezult prin arderea combustibililor la temperaturi ridicate n prezena azotului din aer i constituie poluani ai aerului. Metoda are la baz reacia de oxidare a NO cu ozon rezultnd, ntr-o prim faz, NO2* (adic o form excitat a dioxidului de azot) - o specie chimic luminescent. Pentru determinarea compoziiei amestecului NO plus NO2 se procedeaz astfel. Pe o fraciune cunoscut din proba de aer (1 pe fig. 8) tot dioxidul de azot este redus la monoxid i n urma reaciei cu ozonul se determin NO + NO2. Pe o alt fraciune, (2), se determin prin aceeai metod doar NO (NO2 prezent, nefiind n stare excitat, nu prezint luminescen). Apoi, prin diferen se determin NO.
Evacuare
Aer pur
Uscare (pe sit molecular)
Generator Ozon (O3)
NOx
(2) (1)
Etalon NOx
Prob V
Microprocesor
Mo Convertiz or
Filtru
NO
NOx
NOx
Fig. 8. Reprezentarea schematic a utilizrii metodei msurrii luminescenei pentru monitorizarea oxizilor de azot din aer
Un astfel de monitor NOx este prezentat schematic n fig. 8. Proba de aer este n prealabil filtrat pe un filtru i se desparte prin dou conducte. Pe drumul (1) exist o etuvconvertizor care conine o coloan umplut cu pulbere de molibden. La nclzire, Mo din coloan provoac reducerea doar pentru dioxidul de azot: NO2 + Mo NO + MoO3
164
Deci, pe drumul (2) gazul rmne nemodificat iar pe drumul (1) amestecul este convertit integral la NO. Apoi, fraciunile (1) i (2) intr n cele dou celule de luminescen, ambele alimentate cu ozon (O3) - produs de un ozonizator (inclus n instalaie). n celule au loc exact aceleai reacii: NO + O3 NO2* + O2 NO2* NO2 + h Luminescena este emis doar de dioxidul de azot proaspt obinut (fiind n stare excitat - notat *), aprut prin reacia amintit anterior, avnd lungimea de und = 1.2m (1200nm), situat n infraroul apropiat. Semnalele de la cele dou celule ajung alternativ la blocul fotomultiplicator B - durata fiind determinat de poziia chopper-ului (notat C). O perioad de timp se nregistreaz semnalul din celula NOx i o alt perioad, cel din celula NO (fig. 8). De aici semnalul este preluat de un microprocesor i transformat n concentraie rezolvndu-se ecuaia: F = KCNO (5) Pentru a se putea determina concentraia NO, pe baza semnalului F msurat, este necesar cunoaterea prealabil a valorii K. Aceast constant se determin, nainte de analiz, prin introducerea n cele dou celule a unui gaz-etalon, format din aer i un amestec cunoscut de NO + NO2 - coninut ntr-un cilindru sub presiune, legat la aparat. Dup evaluarea K se determin pe o prob necunoscut concentraia CNO i separat, CNO + CNO2 (notat in mod uzual NOx - fig. 8). n final, prin diferen se determin CNO2. Metoda servete att pentru monitorizarea NO i NO2 din aer ct i la determinri ale coninutului de azot cu ajutorul unor analizoare specializate de azot i sulf. n acestea din urm sulful se determin tot printr-o reacie de luminescen i tot n prezena ozonului: O3 + H2S H2O + SO2*; SO2* SO2 + h (luminescen n UV apropiat)
165
11
1. Ce este fluorescena? 2. Prin ce se deosebete fluorescena de fosforescen? 3. Ce este un reactiv de fluorescen? 4. Ce fenomen fizic st la baza luminescenei? 5. Ce avantaje i ce dezavantaje prezint metodele fluorimetrice? 6. Care fenomen este situat la lungimi de und mai mici, pentru aceeai substan, absorbia sau fluorescena? 7. Care sunt principalele reguli care guverneaz apariia fluorescenei? 8. Ce este intensitatea fluorescenei i care sunt factorii care o determin? 9. n ce coordonate se construiete o curb de etalonare n fluorimetrie? 10. Ce surse optice se folosesc n fluorimetrie? Dar n metodele prin luminescen? 11. Ce tipuri de instrumente analitice cunoatei n fluorimetrie? 12. Ce gaze, avnd mari implicaii n protecia mediului, se pot monitoriza prin metodele fluorescenei i luminescenei? 13. Ce metode generale de analiz prin fluorescen cunoatei?
166
Nefelometria i turbidimetria ntregul este mai mult dect suma prilor Aristotel (384-322 .e.n.)
Nefelometria i turbidimetria
Principii generale
Difuzia
luminii
reprezint
fenomenul
de
mprtiere
luminii
datorat
neomogenitilor mediului - indiferent dac este vorba de un mediu gazos, lichid sau solid. Att nefelometria ct i turbidimetria reprezint aplicaii analitice ale fenomenelor asociate difuziei luminii (fig. 1). Astfel, la trecerea luminii printr-un mediu dispers, heterogen (sistem coloidal), dac neglijm lumina reflectat, putem scrie innd cont de difuzia i absorbia luminii: I 0 = Ia + Id + I intensitatea luminii difuzate i I - intensitatea luminii transmise.
I0
(1)
unde s-a notat cu I0 - intensitatea luminii incidente, Ia - intensitatea luminii absorbite, Id -
I Turbidimetrie
Nefelometrie Id Fig. 1. Reprezentare schematic a fenomenului de difuzie a luminii i a tehnicilor bazate pe acest fenomen
Din punct de vedere al analizei instrumentale a apelor, prezint interes fenomenul de difuzie a luminii datorit solidelor suspendate n lichide (suspensii) sau lichide n lichide (emulsii). Intensitatea radiaiei difuzate de ctre particulele de dimensiuni mici (particule avnd diametrul mai mic dect /10, unde cu s-a notat lungimea de und a luminii incidente [92]) respect ecuaia lui Rayleigh [93]: Id = I0 k Nv 2 4R 2 (2)
unde Id este intensitatea radiaiei difuzate, I0 - intensitatea radiaiei incidente, N - numrul de particule din unitatea de volum, v - volumul unei particule, - lungimea de und a radiaiei, R - distana pn la observator iar k este o valoare dependent de unghiul sub care se privete
[92] Un astfel de sistem (coloidal) are dimensiunile particulelor n domeniul 10-6 - 10-9 m. [93] http://hyperphysics.phy-astr.gsu.edu/hbase/atmos/blusky.html#c2 Chimie Analitic i Instrumental 167
12
radiaia care prsete celula - coninnd un lichid cu indicele de refracie, n. Valoarea k se poate exprima: k=
2 9 n 2 -n1 2 (1 + cos 2) 2 2 n +2n1
(3)
unde cu n i n1 s-au notat indicii de refracie ai particulei respectiv ai mediului n care este suspendat particula. Se poate observa c relaia permite calculul valorii N cnd s-ar cunoate toi ceilali parametri. Cum N este proporional cu concentraia se poate trage concluzia c intensitatea luminii difuzate, Id, este proporional cu concentraia particulelor, respectiv cu cea a soluiei din care provin acestea. n afar de cele dou tehnici amintite exist i alte aplicaii importante ale difuziei luminii n evaluarea cantitativ a maselor moleculare ale substanelor macromoleculare (polimerilor) din soluie sau n analiza granulometric a pulberilor suspendate n lichide sau chiar n gaze.
168
Nefelometria Nefelometria este o tehnic de analiz instrumental bazat pe msurarea intensitii
luminii difuzate, Id datorate unei anumite specii chimice, greu solubil n mediul lichid i avnd o granulaie fin (sistem coloidal). Lucrnd la un unghi cunoscut, pe un amestec cunoscut de substane i ntr-un mediu cu indice de refracie constant, la o finee ridicat a particulelor (la o dimensiune apropiat de lungimea de und a luminii incidente) ecuaia lui Rayleigh devine: Id = I0Kcv2 (4) unde c este concentraia substanei n suspensie, v - volumul particulelor iar K o constant de proporionalitate. n vederea analizei chimice, evident, se recurge la o curb de etalonare liniar: Id = f(c). Unghiul de msurare depinde de fineea particulelor. Cnd aceasta este mic se recurge la un unghi de 45 sau 90. Cnd fineea este moderat se msoar lumina transmis, adic = 0 iar cnd particulele sunt foarte mari sau concentraia mai ridicat, se prefer unghiuri mari, adic se msoar deviaia napoi a luminii (retrodifuzia). Pentru a se putea aplica metoda, n prealabil se precipit ionii elementului de analizat. Acest lucru se realizeaz prin adaosul unui reactiv de precipitare, astfel nct s apar o combinaie greu solubil, dar ntr-o concentraie potrivit i anume ntreaga cantitate precipitat s ajung doar n perioada iniial de formare a precipitatului. Dup cum se tie, c condiia de apariie a unui precipitat MA, rezultat prin combinarea unui cation M+ cu un anion A-, este dat de produsul: [M+][A-] > KMA (5) unde KMA este produsul de solubilitate - o constant cunoscut pentru un compus greu solubil (la o temperatur dat). Evident, metoda se poate aplica pentru oricare din ionii care pot lua parte la o reacie de precipitare, de exemplu perechile de anion i cation: (SO42-; Ba2+), (Cl-; Ag+) sau (C2O42-; Ca2+) etc. Orice proces de precipitare depinde de mai muli factori ca: natura reactivilor, concentraia acestora, temperatura, pH-ul, viteza de adugare a reactivilor, agitarea i mediul de reacie. Este deosebit de dificil de reprodus ntocmai toate aceste condiii. Peste toate acestea, nu trebuie uitat c sistemul coloidal (microeterogen) aprut nu este stabil. Pentru a se stabiliza sistemul, se recurge la ncetinirea proceselor de difuzie - adic a deplasrii particulelor (ceea ce micoreaz probabilitatea ciocnirilor) prin mrirea viscozitii mediului. Pe de alt parte, alturi de electroliii din reactivii participani la reacia de precipitare, se mai introduce un electrolit tare care, prin sarcina superficial creat, va micora viteza de coagulare.
169
12
Turbidimetria Tubidimetria este tehnica nefelometric n care unghiul de observaie este zero - adic
msurarea se face n lumina transmis. Pentru aceste determinri pot fi folosite tot spectrofotometrele din domeniul vizibil dar sunt preferate instrumente specializate denumite
turbidimetre. Pn nu demult, se utilizau ca surse luminoase lmpi cu filament din W, dar
acestea consum o cantitate mare de energie. n locul acestora, la aparatele de astzi, se folosesc fotodiodele, care au o durat de via mai mare, consum mai redus de energie i sunt mai stabile. Unele aparate mai utilizeaz, de asemenea, tuburi bazate pe descrcri n gaze, cu xenon. Ultimele dou surse de lumin pot fi i intermitente (prin utilizarea unui chopper), reducnd i mai mult energia folosind n circuitul de prelucrare a semnalului un curent alternativ, care permite o mrire a stabilitii electronice. Frecvena pulsaiilor este n domeniul a 5-10Hz. Fereastra optic, se poate murdri dar acest lucru se poate compensa prin msurarea periodic a absorbiei n dou lungimi de und n ap pur, anulnd variaia. Unele instrumente includ sisteme de curire automat fie ultrasonice, fie mecanice - utiliznd un piston. Exist modele de aparate care combin sistemul de difuzie lateral (90) cu transmiterea direct a luminii. Aceste instrumente permit s se fac o distincie ntre lumina pierdut - datorit materialelor dizolvate n ap (dnd o tent colorat apei) - i particulele n suspensie. Ambele categorii de materiale contribuie la atenuarea intensitii razei incidente, dar numai particulele n suspensie provoac difuzia luminii. Lungimile de und ale luminii utilizate n practic se ntind de la domeniul vizibil la infrarou i ultraviolet (de exemplu, pentru msurarea clorofilei sunt utilizate radiaiile UV). Domeniul infrarou (IR) are avantajul c lungimile de und mari nu penetreaz mult sub suprafaa apei (fiind absorbite) ceea ce conduce la reducerea interferenei cu lumina natural. Transmisia IR este adecvat pentru distane reduse utilizate n instrumente pentru a msura difuzia lateral sau retrodifuzia pe o distan de civa centimetri. Filtrnd lumina, astfel nct s sesizeze doar lungimile de und necesare, se reduce n continuare efectul de interferen care apare n lumina natural. n adncul apei, lumina de la suprafa penetreaz puin astfel c se reduc influenele datorate luminii naturale. n domeniul concentraiilor mici mrimea msurat este analog absorbanei dar se numete turbiditate i se noteaz cu S (analog cu nnegrirea): S=lg I0 = klc I (6)
Se observ c legea este analog cu legea Lambert-Beer dar k este o constant empiric, l - lungimea parcursului prin stratul absorbant, iar c - concentraia. negrirea, S, este
de asemenea proporional cu concentraia, c. Metoda de lucru const tot n trasarea unei curbe de etalonare cu ajutorul unor soluii cu concentraii (turbiditi) cunoscute. Dimensiunile particulelor nu au n analiza turbidimetric o importan decisiv, ca n nefelometrie. Dac diametrul particulelor depete valoarea 0.1 nu mai este ns respectat liniaritatea. Reproductibilitatea metodelor turbidimetrice este de 5%. Cu toate acestea, uneori este o metod indispensabil mai ales n analiza apelor unde particulele n suspensie se determin pe aceast cale. Un exemplu edificator privind modul de aplicare a metodei turbidimetrice pentru determinarea concentraiei ionului sulfat dintr-o soluie apoas, utiliznd ca reactiv de precipitare clorura de bariu, va fi descris n cele ce urmeaz. Reacia pe care se bazeaz metoda este: SO42- + Ba2+ BaSO4 Pentru a se mri selectivitate acesteia, adic pentru a se evita interferene ale altor ioni prezeni n soluia de analizat, reacia se efectueaz n mediu acid. O prim etap este construirea curbei de etalonare. n baloane cotate de 100ml se introduc cantiti cunoscute de ion sulfat, pipetnd 2, 4, 8, 12 i 20 ml Na2SO4 0,2 gL-1. Apoi, n fiecare balon se mai adaug 20 ml soluie de electrolit (230g NaCl + 20ml HCl concentrat per litru) iar apoi se completeaz cu ap distilat la 60 ml. Se adaug apoi n fiecare balon cte 15 ml BaCl22H2O 10%, se omogenizeaz, se completeaz pn la semn cu ap distilat i peste exact 5 minute se msoar absorbana, folosind un filtru albastru, fa de o prob martor care nu conine sulfat de sodiu. Etapa urmtoare o constituie analiza propriu zis. 10ml de prob, supus analizei, eventual diluat n prealabil, se aduce ntr-un balon de 100ml, se adaug tot 20ml electrolit i se completeaz pn la 40ml cu ap distilat. Apoi se adaug 15ml de BaCl22H2O 10% i dup omogenizare se aduce la semn cu ap distilat. Se ateapt 5 minute i se msoar absorbana, n exact aceleai condiii. Se repet proba de 2-3 ori, i se calculeaz media citirilor absorbanei. Cu ajutorul acesteia, de pe curba de etalonare se determin concentraia probei necunoscute. Metoda turbidimetric, n afar de varianta direct, amintit anterior, se mai poate aplica i n alte dou variante. Una dintre acestea poart denumirea de cinetic turbidimetric. n aceast variant, se determin viteza reaciei, notat dx/dt unde cu x s-a notat concentraia produsului reaciei de precipitare. Pentru momentul iniial se poate scrie ( k este constanta de vitez iar cu [c]0 s-a notat concentraia iniial a ionului de analizat iar cu [R]0 concentraia iniial a reactivului de precipitare):
171
12
dx = k [c]0 [R]0 dt
(7)
De regul, n aceast variant se msoar viteza reaciei n momentul iniial, cnd concentraia x este joas, pn n momentul atingerii unei variaii de concentraii fixate x. n aceste condiii se poate scrie relaia aproximativ: x = k [c]0 [R]0 t (8)
Msurndu-se de fiecare dat timpul i absorbana, pn la atingerea unei valori fixate a acesteia, intervalul de timp t va fi proporional cu x, deci i cu concentraia ionului precipitat [c]0. Lucrndu-se pe soluii cunoscute, se construiete mai nti o curb etalon t = f(c). Msurnd i n cazul probei necunoscute intervalul de timp t, pn la atingerea aceleiai turbiditi (sau aceleiai absorbane, n cazul utilizrii unui spectrofotometru), n condiii absolut identice, se poate evalua din curba de etalonare proba necunoscut. O a doua variant foarte mult aplicat este titrarea turbidimetric. n aceast metod se msoar turbiditatea, S, n timpul adugrii cu vitez constant a soluiei coninnd reactivul de precipitare, ntr-un volum V. Se reprezint grafic curba S = f(V). Graficul are o form apropiat de cele reprezentate n fig. 2. Din discontinuitatea observat se determin volumul de echivalen, care permite calculul pe baza celor artate la metoda volumetric. Graficul arat diferit pentru c uneori excesul de reactiv provoac dizolvarea precipitatului format iniial iar alteori se micoreaz solubilitatea pe baza efectului ionului comun asupra solubilitii [94].
S S
Ve
Ve
Fig. 2. Dou variante ale aspectului curbelor de titrare turbidimetric; Ve reprezint volumul de echivalen Etalonarea aparatelor pentru analizele apelor naturale se face, n mod obinuit,
utiliznd formazina - un lichid tulbure, format prin amestecarea sulfatului de hidrazin cu o soluie de hexametilentetramin, (CH2)6N4. Acest amestec produce o suspensie fin format din particule cu diferite dimensiuni, similar ca distribuie granulometric cu cel care se
[94] Ionul comun introdus n soluie, datorit constanei produsului de solubilitate, micoreaz n general solubilitatea unui precipitat. 172 Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
formeaz n apele naturale tulburi. Amestecul este preparat sub form de soluie stoc egal cu 4000 FTU (formazine turbidity units - uniti de turbiditate - formazin), uniti cunoscute i sub denumirea de NTU - uniti de turbiditate nefelometrice [95]. Reeta de preparare este urmtoarea:
Se dizolv 10.0g hexametilentetramin (C6H12N4) n ap i se dilueaz la 100ml
(constituind soluia A).

Se dizolv, separat, 1.0g sulfat de hidrazin (N2H6SO4) n ap i se dilueaz tot la 100ml. ATENIE: Sulfatul de hidrazin este otrvitor i poate fi cancerigen. Se amestec 5ml soluie A cu 5ml soluie B. Se las s stea 24 ore la 253. Apoi se dilueaz la 100ml cu ap. Turbiditatea acestei
soluii n uniti de atenuare cu formazin (FAU) sau uniti nefelometrice de formazin (FNU) este 400. Aceast soluie se poate folosi aproximativ 4 sptmni, perioad n care este stabil. Condiia este s se pstreze la 253 la ntuneric. Pentru utilizare, soluia stoc este diluat la nivelul cerut, de la o valoare foarte sczut de 1-10NTU, pn la sute sau chiar mai mari. Absorbia i difuzia luminii n ap depind foarte mult de distribuia mrimii, formei i culorii particulelor n suspensie, care variaz de la alb cret la negru de noroi i este imposibil s calibrezi un instrument pentru a cuprinde toate aceste limite. ntr-adevr, una din problemele care apar la folosirea formazinei este c aceasta este un precipitat alb i poate exista un raport de 5:1, sau chiar mai mare ntre proprietile de reflexie i difuzie a formazinei i ale particulelor nchise naturale. Pentru a avea certitudinea msurrii corecte a turbiditii, este necesar s se calibreze senzorii ntr-un domeniu al suspensiilor care se potrivete cu apa de controlat, pentru a se evita erorile grosolane. Nivelele de turbiditate joas, msurate nefelometric prin intermediul difuziei la 90, acoper domeniul de la 0 la 100FTU (NTU). Valori mai mari, msurate prin absorbia direct, corespund domeniului de la 100 la 500FTU. Peste 500FTU, n mod natural, se consider sedimente n suspensie i se exprim n ppm sau mgL-1, valori cuprinse ntre 5-5000ppm pentru noroi i 100 la 100000ppm pentru nisip.
[95] Unitile FNU sau, mai recent NTU, reprezint uniti standardizate, introduse de USEPA i recunoscute de standardele europene ISO, mai concret ISO-70227 Chimie Analitic i Instrumental 173
12
1. Pe ce fenomen general se bazeaz att nefelometria ct i turbidimetria? 2. Ce mrime se determin n cazul nefelometriei i ce mrime n cazul turbidimetriei? 3. Care trebuie s fie relaia ntre diametrul particulelor i lungimea de und n cazul metodei nefelometrice? 4. Cnd este recomandat examinarea la unghiuri apropiate de 180 ? 5. n ce const titrarea turbidimetric? 6. Ce parametru se msoar n cinetica turbidimetric? 7. Cu ce reactiv se poate determina sulfatul din ape, tubidimetric? 8. Ce este formazina i la ce se folosete? 9. Cu ce ecuaie se aseamn ecuaia utilizat n turbidimetrie pentru analiza cantitativ?
174
Refractometria i polarimetria Toat fizica este fie imposibil fie trivial; este imposibil pn o nelegi, apoi, devine trivial Ernest Rutherford (1871- 1937)
Refractometria i polarimetria
Refractometria Indicele de refracie notat n la o temperatur dat i lucrnd cu lumin de lungime de
und, , fixat este o constant fizic important care caracterizeaz cu precizie o substan chimic deoarece mici cantiti de impuriti modific valoarea acestui indice. Msurtorile de indici de refracie se pot realiza rapid i cu cantiti mici de substan, aparatura fiind relativ ieftin. Se tie din fizic ce este refracia i indicele de refracie. Pe figura alaturat (vezi fig. 1) am reprezentat trecerea energiei radiante dintr-un mediu 1 ntr-un mediu 2. Fenomenul de schimbare a direciei de propagare caracterizat prin unghiul i, respectiv r, se numete refracie. n1sin(i) = n2sin(r) i 1(n1) 2(n2) r Fig. 1. Fenomenul refraciei i legea dup care se petrece Conform legilor refraciei empirice sin i/sin r = n reprezint indicele de refracie al mediului 2 n raport cu primul i este egal cu raportul vitezelor de propagare n cele dou
medii (n mediul mai dens cu vitez mai mic). Dac r = 90 raza se propag n mediul 2
perpendicular pe interfaa celor dou medii i se poate scrie: n2,1 = sin i. Aceast valoare i este denumit unghi limit sau unghi critic. Dac r > 90 asistm la o reflexie total adic raza nu trece n mediul 2. Dac mediul 1 este chiar vidul, n reprezint indicele de refracie absolut i: n = n1/n2 (1) n practica de laborator se determin indicele de refracie fa de aer. Indicele de refracie al unei substane fa de vid se numete indice de refracie absolut. Acesta se obine din cel msurat n aer prin nmulire cu 1.00027. Indicele de refracie variaz deci cu densitatea, temperatura i presiunea mediului. Pentru a elimina influena temperaturii i presiunii, deci a densitaii, d s-a introdus o nou constant de material refracia specific: r = (n-1)/d (Gladstone i Dale) (2)
175
13
O relaie mai adecvat pentru aceeai constant de material a fost dedus din teoria electromagnetic a luminii (Maxwell) avnd expresia: r= (n 2 1) (n 2 + 2) d (3)
numit tot refracie specific. Produsul dintre aceasta i masa molar a primit denumirea de
refracia molar - tot o constant de material - fiind utilizat astzi n caracterizarea fizico-
chimic a substanelor chimice (Lorenz-Lorenz): R= (n 2 1) M (n 2 + 2) d (4)
Aceasta este o funcie liniar de compoziia materialului (exprimat prin fracii molare) i, de exemplu, pentru o soluie coninnd n substane, se poate exprima: R = x1R1 + x2R2 + + xnRn. Pentru molecule organice exist o importan deosebit, diferitele poriuni structurale ale aceleiai molecule permind, pentru o anumit clas de substane, obinerea prin calcul din refraciile atomice, a refraciei molare. De asemenea pentru materiale sau soluii refracia molar poate fi suma produselor fraciilor molare cu refraciilor molare ale componenilor materialelor (soluiilor). Indicele de refracie se determin cu refractometre i interferometre. Interferometrele sunt ns mult mai precise dect refractometrele. Astfel n timp ce refractometrele dau indicii de refracie cu erori de 10-5 interferometrele msoar cu erori de 10-8. Metoda se aplic la determinarea gradului de puritate, pentru stabilirea compoziiei sistemelor binare i ternare (de exemplu 3 solveni organici) precum i la stabilirea unor structuri. Civa indici de refracie ai unor lichide sunt prezentai n tabelul 1.
Tabelul 13.1. Cteva exemple de indici de refracie Substana T C nD Hexan 20 1.37486 Ciclohexan 20 1.42623 Benzen 20 1.50110 Nitrobenzen 20 1.55319
Pentru amestecuri binare [96] de lichide, curbele de etalonare servesc frecvent la analize cantitative. Refracia fiind un fenomen legat de polarizabilitate, ntre indicele de refracie n i constanta dielectric, , exista o relaie simpl : n2 = important n determinrile structurale.
[96] Amestecuri formate doar din dou substane diferite, fiecare avnd un indice de refracie n specific. 176 Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
Determinrile indicilor de refracie se fac la linii de lungimi de und bine determinate notate uneori n literature de specialitate: D, d, F sau c fiecare liter reprezentnd o linie a unui element (linii Fraunhofer). De exemplu D este linia galben a sodiului cu = 589.3nm.
Fig. 2. Schema refractometrului Pulffrich
n fig. 2. se d principiul de funcionare al celui mai folosit refractometru:

refractometrul Pulfrich. n acesta (vezi fig. 2), se poate scrie relaia: sin 90/sin = N/n, unde
N este indicele de refracie al sticlei, n - indicele de refracie al lichidului i - unghiul de refracie la un unghi de inciden de 90. Se observ c n = N sin . Cum + ' = 90 avem, innd cont de valoarea din fig. 2:
n = N 1 sin 2 ' = N 2 sin 2
(5)
relaie cu care se poate calcula indicele de refracie msurat cu acest instrument. Un alt refractometru foarte rspndit este refractometrul Abbe.
177
13
Polarimetria
Studiul fenomenelor optice n lumin polarizat poart numele de polarimetrie. Practic se determin rotaia planului luminii polarizate n plan, ceea ce se numete unghi de rotaie. Unele substane optic active au proprietatea de a roti sau modifica planul de polarizare a luminii la trecerea luminii prin acestea. De exemplu n fig. 3c s-a ilustrat rotaia cu un unghi a planului unei raze ce vine spre noi dinspre planul hrtiei - fig. 3b - comparativ cu o raz de lumin nepolarizat - fig. 3a.
Fig. 3. Semnificaia unghiului de rotaie: a - raz de lumin nepolarizat, b - raz polarizat, c - rotaia optic cu unghiurile i -
Activitatea optic a substanelor cristaline este strns legat de structura lor cristalin. Alteori la baza rotaiei stau asimetriile moleculare. Astfel, prin topire sau dizolvare disprnd structura dispare i activitatea optic a substanelor cristaline. La alte substane activitatea optic este legat de structura lor molecular (chiral) i la acestea activitatea se pstreaz i n soluie (de exemplu la zaharoz). Dac rotaia are loc n sensul acelor de ceasornic substana o numim dextrogir iar unghiul de rotaie se consider pozitiv. La rotaia n sens opus denumirea substanei este de substan levogir iar unghiul se consider negativ. n afar de natura substanei unghiul de rotaie depinde i de lungimea de und a radiaiei, lungimea parcursului optic, de concentraie i temperatur. n cazuri excepionale variaz i cu timpul, caz n care vorbim de mutarotaie. Pentru face comparabile msurtorile de rotaie pentru diferite substane se fac raporturi ale unghiului msurat la lungimea drumului optic, la densitatea soluiei i se fac referiri la o concentraie convenional de 1g per ml solvent. Rotaia se numete n acest caz specific, se noteaz cu []t i are relaia de definiie: []t = /(ld) densitatea soluiei. De exemplu, la o concentraie de Cg/100ml solvent expresia rotaiei specifice devine: []t = 100/(lCd)
178
(6)
unde este unghiul de rotaie msurat, - lungimea de und, l - lungimea celulei, d -
(7)
Aceasta este o constant caracteristic a lichidelor i solidelor pure aflate n soluie. Valoarea , pentru o soluie (material) optic activ, este legat de concentraie printr-o ecuaie de forma: = a + bC + cC2 component sau amestec de componente optic active. Determinarea unghiului de rotaie se face cu ajutorul polarimetrelor (de exemplu de tip Mitscherlich) a cror reprezentare schematic este prezentat n fig. 4. (8) unde a, b, c sunt constante empirice. Aceasta face posibil analiza cantitativ a unui
Fig. 4. Componentele unui polarimetru
Polarimetria se utilizeaz ca mijloc de analiz cantitativ a substanelor optic active, zahr, uleiuri eterice, dar i pentru studii n domenii ca acoperiri metalice, coroziune, metalografie, mineralogie etc. Unele substane neoptic active reacionnd cu parteneri optic activi, pot fi analizai indirect din consumul ultimilor.
Elipsometria
Se bazeaz pe proprietatea filmelor foarte subiri, metalice, de a schimba starea de polarizare a luminii reflectate sub unghiuri mici (<90) dintr-o lumin polarizat n plan ntruna polarizat eliptic. Elipsometria determin polarizarea eliptic provocat de filmul subire. Acest studiu se efectueaz n timp, pe parcursul desfurrii procesului de electroliz, coroziune etc.
179
13
1. Indicele de refracie se msoar n lumin alb sau n lumin monocromatic? 2. La ce unghi de inciden se petrece reflexia total? 3. Care sunt cele mai cunoscute refractometre? 4. Cum se numete indicele de refracie ntre un mediu dat i vid? Prin ce se deosebete fa de cel determinat n aer? 5. Ce este refracia molar i la ce servete aceasta? Ce proprietate are refracia molar la soluii? 6. Ce relaie exist ntre indicele de refracie n i constanta dielectric a materialului ? 7. Cu ce aparate se poate determina indicele de refracie? Dar rotaia specific? 8. Ce msoar elipsometria? 9. Cum se calculeaz rotaia specific pentru o soluie, dup ce se msoar experimental unghiul de rotaie ?
180
Spectrometria de fluorescen X (XRF) Nemii, i nu numai ei, au darul de a face tiinele inaccesibile Johann Wolfgang von Goethe (1749-1832)
Spectrometria de fluorescen X (RXF)

Principiul metodei
Aceast metod este utilizat pe scar larg pentru determinarea calitativa i cantitativ a compoziiei chimice elementare a unei probe, mai ales pentru substane anorganice (minerale, ceramice, metale, soluri etc.) - n special n industrie. Tehnica se deosebete fundamental de difracia cu raze X. Aceasta din urm se bazeaz pe faptul c lungimea de unda a radiaiei X (sau raze Rntgen [97]) este de acelai ordin de mrime cu distanele dintre nodurile reelelor cristaline (atomice, metalice, ionice sau moleculare) i, ca o consecin a difraciei i interferenei, apar maxime ale intensitii razelor emergente, la anumite unghiuri.
Fig. 1. Schema modului de producere a semnalului (razelor X caracteristice) n analiza XRF
n fluorescena de raze X (XRF [98]) lucrurile se petrec altfel. Anume, au loc succesiv urmtoarele procese: 1. Electronii interiori ai atomilor probei sunt expulzai datorit ciocnirilor cu fotonii X ai sursei de raze X primare (fig. 1 i 4). 2. Electronii din straturile exterioare ocup locurile rmase vacante de pe straturile inferioare (K, L, M). 3. n urma tranziiilor care au loc, se elibereaz cuante de energie din domeniul razelor X care prsesc proba n toate direciile. Energia sursei de raze X este cuprins ntre 5 i 100keV. Razele X primare, cum se numesc radiaiile care provin de la surs (adesea un tub de raze X), sunt dirijate spre proba supus analizei. Radiaiile X caracteristice - specifice elementelor probei i reemise de ctre
[97] Denumirea de radiaie Rntgen se folosete mult n literatura internaional n onoarea fizicianului german K. Rntgen - descoperitorul acestor raze. [98] XRF este prescurtarea din l. engl. a denumirii internaionale: X-Ray Fluorimetry. Chimie Analitic i Instrumental 181
14
aceasta - prsesc eantionul, coninnd informaii care permit stabilirea compoziiei chimice a materialului [99] (solid sau soluie).
Fig. 2. Schia de principiu a funcionrii tubului de raze X (tub Rntgen)
Fig. 3. Spectrul tipic emis de un tub de raze X cu anticatod din molibden
Tubul de raze X, funcioneaz pe baza accelerrii ntr-un cmp de nalt tensiune (i
totodat n vid) a electronilor emii de ctre catod. Acetia izbind anticatodul (de multe ori anodul tubului), genereaz raze X specifice anticatodului, n interiorul acestuia. n funcie de natura probei, se lucreaz cu un anticatod potrivit - confecionat dintr-un metal care s nu fie coninut n prob (Cu, Fe, Co, Ni, Cr, Mo, Ag, Rh etc.). Dup cum am amintit, razele X primare sunt emanate n toate direciile ns prsesc tubul doar acelea care vin spre direcia ferestrei, confecionate din beriliu - un element cu caracter metalic, suficient de rigid, avnd un numr de ordine mic i de aceea la o grosime redus este practic transparent la raze X. Schia de principiu a unui astfel de tub este reprezentat schematic n fig. 2. Radiaiile X care prsesc tubul sunt de dou tipuri. O radiaie de fond - cu spectru larg, continuu - peste care se gsete suprapus un spectru caracteristic metalului anticatodului. Cznd asupra probei de analizat, fotonii X provoac la rndul lor apariia altor radiaii caracteristice, de ast dat ale probei supuse analizei. Din acest motiv, reamintim c nu se
folosesc tuburi cu anticatodul compus dintr-un metal care se gsete i n proba de analizat.
De exemplu radiaia care prsete un tub cu anticatod din Mo este prezentat n fig. 3 la diferite valori ale energiei acesteia. Se remarc lrgimea considerabil a domeniului de lungimi de und emise, comparativ cu domeniul celor caracteristice. Mecanismul apariiei radiaiei caracteristice este prezentat ceva mai n detaliu n fig. 4. Astfel, n urma coliziunii mecanice dintre fotonii X ai sursei primare cu electronii de pe
[99] Nu este neaprat necesar s fie fotoni X. Se pot obine spectre de fluorescen X i cu surse de electroni (tunuri electronice), surse de radiaii sau chiar de radiaii . Toate au un principiu similar. 182 Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
Spectrometria de fluorescen X (XRF)
straturile inferioare, mai sraci n energie, acetia sunt expulzai. Locurile vacante rmase dup plecarea electronilor (redate cu alb pe fig. 4), sunt ocupate de electroni aflai pe straturile superioare - mai bogai n energie. Diferena de energie este emis sub forma unei cuante care, pentru majoritatea atomilor din sistemul periodic, se gsete n domeniul razelor X. Doar elementele uoare Z = 1..5 nu au aceste tranziii n domeniul razelor X. n plus, spectrul de fluorescen X, cum se mai numete ansamblul liniilor produse n maniera amintit, nu depinde dect n foarte mic msur de natura combinaiei chimice n care se gsete atomul n proba de analizat.
Fig. 4. Tranziiile care provoac principalele linii utilizate n analiza prin FRX
Razele X primare care prsesc tubul de raze X, sunt dirijate apoi asupra probei de analizat. Aceasta, va emite aa-numita radiaie de fluorescen - caracteristic elementelor probei, fiind nsoit i de o radiaie continu care are un spectru larg datorit interaciunii electronilor cu cmpul electric al nucleului. Dac din punct de vedere calitativ, spectrul de raze X al probei este simplu (are 2 sau 3 linii principale) i n acesta foarte rar se suprapun dou linii de la doi atomi diferii, analiza
cantitativ, care utilizeaz valoarea intensitii radiaiilor X caracteristice, ntmpin cteva
dificulti majore. n primul rnd, excitarea atomilor din prob are loc doar ntr-un strat subire de la suprafaa probei, a crui grosime depinde de energia sursei (variind ntre cteva sute de microni la 1cm). De aceea orice neuniformiti ale suprafeei pot influena rezultatul. Apoi, unii atomi absorb doar anumite radiaii i acest lucru determin o influen a compoziiei chimice a probei asupra rezultatelor valorii intensitii msurate. Efectele de
matrice - denumire dat totalitii efectelor provocate de ctre elementele nsoitoare asupra
rezultatului analitic, pentru un element dat - fac necesare, n cazul analizelor cantitative,
14
precauii deosebite n pregtirea probelor. Spectrometrele cu dispersie dup lungimea de und lucreaz cel mai des n vid i mai rar n atmosfera format din amestecuri aer - metan, tocmai pentru a elimina efectele atmosferei. Exist dou posibiliti de analiz a semnalelor (msurate ca intensiti de radiaii X):
cu dispersie dup lungimea de und i cu dispersie dup energie.
Fiecare are avantaje i dezavantaje proprii. n prima variant, lungimile de und se analizeaz pe baza dispersiei realizate cu un dispozitiv optic - bazat pe difracie i interferen. A doua grup de metode selecteaz liniile analitice dup energia acestora. Ceea ce este comun tuturor este durata mic necesar analizei la elementele majore i de asemenea la elementele grele. La cele uoare, mai ales la concentraii joase, durata se poate mri considerabil comparativ cu precedentele. La analizoarele multicanal, o analiz complet, fr prepararea probei, dureaz 1-2min.
184
Aparatura pentru dispersia dup lungimea de und
Principiul acestei variante tehnice este ilustrat n fig. 5. Se observ prile principale ale instrumentaiei: sursa de excitare (1) - de fapt tubul de raze X primare - proba (2), pregtit cu o suprafa plana i de compoziie ct mai uniform, sistemul de analiz a lungimii de und i a intensitaii acesteia (3) care include i detectorul (4).
Gaz P-90
Fig. 5. Schia de principiu a instrumentului pentru analize chimice prin XRF (nu sunt reprezentate colimatoarele Soller)
Anod Izolator Fereastr Catod Fig. 6 Schia de principiu a contorului proporional
Sistemul de analiz a lungimii de und se compune din cristalul analizor (3) care se deplaseaz sincron cu detectorul (4), mpreun cu colimatoarele i fanta, situat mpreun cu cristalul (mai recent curbat - seciunea sa fcnd parte dintr-un cerc Rowland). Acest ansamblu are rolul de a separa linia analitic - caracteristic elementului de analizat. Dispozitivul poart denumirea de goniometru. Detectorul msoar fotonii X plecai din prob n urma tranziiilor amintite i care sunt numrai de un numrtor de impulsuri, iar acest numr este afiat digital sau introdus ntr-un sistem de procesare a datelor sub denumirea de intensitate, I. Fotonii razelor X (precum i ai altor particule radiante bogate n energie) pot fi numrai folosind urmtoarele tipuri de detectori:
Detectori cu gaze sau contoarele proporionale care nregistreaz un puls de curent rezultat
din colectarea perechilor ion-electron,

Detectorii cu semiconductori care ntregistreaz un puls de curent rezultat din formarea
perechilor electron - gol,

Detectorul cu scintilaii care numr pulsurile luminoase create atunci cnd o radiaie X
trece printr-un material fosforescent. Cel mai utilizat n spectrometrele cu dispersie dup lungimea de und - contorul
proporional (fig. 6) - este confecionat dintr-un tub umplut cu gaz P90 (90% Ar, 10% CH4)
avnd doi electrozi-conductori: un fir central i un tub din tabl, metalic. Fotonul X provoac ionizarea gazului iar electronul este accelerat de cmpul intens (500-700V) ce exist ntre anod (+) i catod (-). n deplasarea sa ctre polul opus, primul electron format provoac
14
ionizarea altor particule gazoase rezultnd electroni secundari i ioni. Acest fenomen, numit
descrcare n avalan mrete mult semnalul electric al pulsului de curent, care este
proporional cu energia razelor X respectiv invers proporional cu lungimea de und a acestora. Att razele emise de ctre tubul de raze X ct i cele emise de ctre prob sunt trecute prin nite colimatoare, alctuite dintr-un mnunchi de foi subiri de plumb (denumite colimatoare Soller), pentru a forma un fascicol de raze X paralele. Fascicolul de raze paralele cade sub un unghi pe cristalul analizor, unghi care poate varia pe parcursul realizrii analizei. Pentru orice unghi de inciden, cristalul analizor va reflecta intens [100] doar acele raze care respect ecuaia lui Bragg: n = 2dsin() (1) unde n este un numr ntreg din domeniu 1..n, - lungimea de und a radiaiei X incidente, d constanta reelei (fig. 7) iar unghiul de inciden al radiaiei X care vine de la prob (pe fig. 7, = 1 = 2). Prin modificarea orientrii cristalului, al crui unghi se cunoate cu ajutorul goniometrului (v. tabelul 1) se poate sesiza prezena unui anumit element deoarece la anumite
unghiuri (fixe) caracteristice doar pentru un anumit element, intensitatea radiaiei X, notat I, msurat de ctre detector, va prezenta picuri accentuate (vezi anexa 1).
Fig. 7. Reflexia razelor X pe planele formate de ctre atomii dintr-un cristal
Spectrofotometrele de raze X cu dispersie dup lungime de und pot fi construite n dou variante diferite:
Analizoarele secveniale la care ntreg sistemul cristal-detector se rotete sincron
parcurgnd mpreun toate unghiurile posibile. Astfel, semnalul va fi o curb cu mai multe picuri n coordonate: 2 - I. Aceste analizoare sunt preferate n cercetare pentru c pot analiza numeroase elemente. Prezint uneori dezavantajul c durata analizelor de acest fel este uneori prea mare.
Analizoarele multicanal sunt prevzute prin construcie cu mai muli detectori i msoar
[100] Este vorba de o difracie, n toate direciile i o interferen care poate fi constructiv, la unghiul care respect ecuaia lui Bragg, sau distructiv la celelalte 186 Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
simultan radiaia de fluorescen a probei, fiecare dintre perechile cristal analizor - detector fiind situate la un anumit unghi, , dinainte reglat, caracteristic doar pentru un anumit element. Ultima variant este preferat n analizoarele industriale unde probele au compoziii apropiate, iar analizele trebuie s fie rapide. Dezavantajul const n faptul c n cazul unor probe cu compoziie neateptat, mai ales dac conin alte elemente dect probele curente, se obin rezultate complet eronate.
Tabelul 1. Cteva cristale analizoare utilizate curent n XRF. Cu ct lungimea de und a elementului de analizat este mai mare cu att cristalul ales trebuie s aib o distan reticular mai mare Cristal Planul expus razelor Domeniu de d X (indicii Miller*) utilizare (nm) (nm) Topaz 303 0.015 - 0.15 0.1356 Fluorur de litiu 200 0.025 - 0.272 0.201 Siliciu 111 0.055 - 0.598 0.314 Acid oxalic 001 0.05 - 0.75 0.589 Mic 002 N/A 0.996 Sterat de plumb 001 6 -15 0.996 * Indicii Miller constituie cifre care definesc orientarea diferitelor fee plane ale unui cristal, n spaiu ( http://geology.csupomona.edu/drjessey/class/gsc215/minnotes5.htm sau http://www.gly.uga.edu/schroeder/geol6550/millerindices.html).
Instrumentele de analiz chimic cu dispersie dup lungimea de und sunt scumpe i constituie investiii pe termen lung ale laboratoarelor analitice.
187
14
Analizoarele cu dispersie dup energie
n aceast tehnic razele X primare cad pe suprafaa probei, analog cu tehnica

dispersiei dup lungimea de und, excitnd mai multe linii spectrale caracteristice
elementelor chimice din prob, conform acelorai legi fizice. Sursa de raze X poate fi ns diferit. Astfel, se pot utiliza direct tuburi de raze X obinuite, cu spectru larg, sau se pot folosi pe lng acestea filtre (de obicei foi subiri metalice) sau inte secundare (tot metalice) pentru a se obine o radiaie incident care poate fi denumit radiaie semi-monocromatic. n cazul celor cu int secundar (EDXRF) geometria preferat este cea din fig. 8. n cazul particular al instrumentelor portabile de teren, n special al celor utilizate pentru detecia n serie a acelorai elemente, se mai folosesc, n calitate de surse, izotopi radioactivi. De asemenea, se mai poate utiliza radiaia unor sincrotroane.
Fig. 8. Geometria preferat n EDXRF cu int secundar. Se remarc faptul c unghiurile dintre raze sunt de 90
Fig. 9. Modul de funcionare a detectorilor de Si dopai cu Li
Detectorii folosii cel mai frecvent sunt detectorii pe baz de semiconductori Si(Li adic formai din siliciu dopat cu litiu. Acetia nregistreaz un semnal avnd nlimea
proporional cu energia fotonului incident, n urma unei descrcri n avalan la care
particip electronul i golul aprut (v. fig. 9). La ptrunderea unui foton X n interiorul unui cristal, acesta provoac, n urma coliziunilor cu atomii componeni ai reelei, eliberarea unor fotoelectroni cu energie ridicat care i pierd, prin ciocniri, energia n urma unor interaciuni multiple. Aceste interaciuni promoveaz electroni din banda de valen n banda de conducie, lsnd n urma acestor promovri goluri n banda de valen. Perechile electron - gol sunt colectate de tensiunea nalt (-1000V), ceea ce duce la apariia unui puls de curent cu totul analog celui din contorul proporional. Colectarea sarcinilor este ns mai eficient dect ntr-un gaz. Un detector de acest tip se realizeaz din siliciu de nalt puritate n care, prin scufundare ntr-o sare de Li topit, sub un cmp electric, se introduc n reea atomi de Li, la temperaturi de 350-450C. Rolul litiului - un dopant de tip n - este acela de a evita descrcrile n avalan fr prezena fotonilor X, descrcri posibile datorit naltei tensiuni.
Aceti detectori opereaz la temperatur joas (77 K) folosindu-se un criostat cu N2 lichid. Modificndu-se tensiunea de alimentare a detectorului, n trepte egale, se schimb i valoarea energiei medii nregistrate. nlimile pulsurilor sunt separate electronic folosind un analizor de pulsuri. Se obine astfel un grafic intensitate n funcie de energie cu totul similar celui din metoda precedent. Un exemplu de rezultat analitic este prezentat n fig. 10.
Fig. 10. Spectrul de fluorescen X a unei probe etalon (NBS nr. 1571) folosind un analizor cu geometria din fig. 7 i int secundar de Mo
Pentru scopuri speciale se mai utilizeaz i ali detectori cum ar fi cei pe baz de semiconductori cu Ge(Li), CdZnTe sau HgI2. Dac pentru analizele cantitative se pot utiliza probele, practic fr nici o prelucrare, n cazul analizelor cantitative problemele sunt aceleai ca la metoda dispersiei dup lungimea de und, fiind necesare probe perfect plane, omogene i etaloane din aceleai materiale ca i cele supuse analizei. Avantajele metodei sunt: simplitatea instrumentaiei (de exemplu nu exist pri n micare), iar analiza cantitativ dureaz circa 30 secunde. n locul tubului de raze X de energie nalt, de dimensiuni mari, scump i mare consumator de energie se folosesc tuburi de raze X de putere mic, radioizotopi sau raze ionice. Analiza calitativ este foarte sensibil putnd merge, att pentru lichide ct i pentru solide, pn la ppm pentru toate elementele de la B la Al.
XRF cu reflexie total are la baz exact acelai principiu ca i analiza XRF cu
dispersie dup energie convenional, dar utilizeaz un aranjament geometric specific pentru a maximiza raportul semnal/zgomot. Astfel, cnd radiaia trece dintr-un mediu cu o densitate mai mic ntr-unul cu densitate mai ridicat, radiaia sufer o reflexie total dac unghiul de inciden este situat sub un anumit unghi critic (civa miliradiani n cazul razelor X). Razele
14
incidente, ptrund n suprafaa reflectant extrem de puin. Iluminnd proba cu o raz care este reflectat total, absorbia acesteia de ctre suport este mult redus. Acest lucru reduce zgomotul de fond. De asemenea, realiznd stratul de prob foarte subire se reduce i mai mult zgomotul de fond. Astfel, o prob format dintr-o micro-pictur de soluie (ntre 10 i 100l) este plasat pe un suport din silicagel. Prin evaporarea solventului, rezult un strat extrem de subire de substan - de civa nanometri. Apoi se face msurtoarea n maniera obinuit a dispersiei dup energie. Avantajele sunt urmtoarele: nu exist practic efect de matrice, limita de detecie coboar foarte mult pentru elemente cu numr de ordine, Z, mai mare de 13 (Al), se pot analiza simultan mai multe elemente, se obine un raport semnal/zgomot bun, analizele cantitative se pot realiza cu un singur standard intern, domeniul dinamic liniar este excelent, iar coninutul minim detectabil atinge ordinul ppb [101].
Microsonda cu raze X, denumit prescurtat i -XRF, este echivalentul microscopic al
analizei de fluorescen X cu dispersie dup energie convenional. n aceast tehnic, analiza are la baz localizarea excitrii probei pe o suprafa de dimensiuni micronice (sau chiar de dimensiuni mai mari), dar se poate totodat analiza compoziia integral a unui obiect de dimensiuni microscopice (o incluziune sau o impuritate ntr-un material, o granul de poluant, o celul etc.) Pentru a se obine imagini ale suprafeelor probei, acesteia i se poate aplica o micare de translaie astfel nct zona excitat, micronic, s baleieze o suprafa mai mare de pe prob. Se obin asfel imagini sau hri ale compoziiei chimice de pe diferitele zone ale suprafeei probei. Dezvoltarea acestei metode are cteva avantaje:
Fotonii de energii nalte (X sau ) pot penetra mai adnc suprafaa, comparativ cu alte
radiaii - cele electronice sau ionice - dnd informaii pertinente privind compoziia probei;
Imaginile se pot obine lucrnd n aer, cu o preparare minim a probei; Se pot analiza probe care nu sunt conductori; Construcia aparaturii este mult mai simpl dect n cazul microsondei electronice (unde
sunt necesare lentile).
[101] 1 ppb = o parte per miliard (109 pri). Din l. engl. part per billion. 190 Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
Aparate de analiz XRF care utilizeaz filtre
O a treia categorie de instrumente - utile aproape exclusiv pentru controlul proceselor industriale, n ceea ce privete concentraia unui singur element n materialul de analizat, din cadrul unei linii de fabricaie continu - folosete n locul cristalului analizor i al goniometrului nite filtre pentru raze X. Tehnica amintit are avantajul c este ieftin calitatea rezultatelor fiind ns net inferioar celor precedente. Metoda se bazeaz pe faptul c un element poate fi determinat msurnd o singur linie din spectrul su, cu condiia ca aceast linie s poat fi izolat din ansamblul de linii al spectrului probei, folosind o pereche de filtre. Acestea sunt de obicei discuri metalice, dar se pot utiliza pentru realizarea filtrului orice compui potrivii scopului. Plecnd de la acest principiu, metoda utilizeaz cele dou filtre pentru a se realiza separarea liniei amintite care provine din proba supus iradierii cu un tub de raze X primare. Se fac dou msurtori, utiliznd contoare de tip Geiger-Mller. Astfel, ntre prob i detector se intercaleaz dou filtre: (1) un filtru de transmisie cu rolul de a permite trecerea radiaiei caracteristice a elementului de analizat, dar nu i a celor cu lungimi de und mai mari; (2) un filtru de absorbie care este opac la radiaii cu lungimi de und mai mici dect cea a atomului de analizat.
191
14
Analiza chimic cantitativ
Pentru efectuarea analizei cantitative prin spectrometria de fluorescena a radiaiilor X, cea mai indicat metod este dispersia dup lungimea de und. i aici, trebuie realizat corelaia intensitilor msurate cu compoziia chimic. Intensitatea radiaiei X, emis de elementul excitat, este n funcie de concentraia acestuia n prob dar i de distribuia spectral a radiaiei primare i de fluorescen ce prsesc proba. n scopul de a diminua, elimina sau compensa devierea de la proporionalitate a radiaiilor de fluorescen, n funcie de concentraie, sunt cunoscute o serie de metode aplicate i n alte procedee de investigare a compoziiei chimice i anume: compararea cu o curb standard i trasarea curbei de calibrare; adugarea unui standard intern - un element diferit de elementul de analizat dar ales potrivit; adugarea unei cantiti cunoscute din elementul de dozat,diluarea probei; analiza cantitativ prin calcul. n continuare, se vor prezenta procedee de calcul aplicate la analiza prin fluorescena de raze X. Pentru determinarea concentraiilor unor elemente n probe de compoziie necunoscut, este necesar trasarea curbelor de calibrare. Acestea sunt obinute dintr-un numr de probe standard, pentru care, concentraia, C, a elementului cutat este cunoscut. Se msoar intensitatea, I, a probei standard, apoi pe baza unui program se traseaz curba de calibrare liniar sau ptratic pentru perechi de valori ale intensitii i concentraiei, folosind metoda celor mai mici ptrate. Pentru un element oarecare, i, expresia de calcul este: Ci = bi + miIi + miiIi2 (2) unde: Ci este concentraia elementului i cunoscut n procente, Ii - intensitatea msurat, bi fondul spectral, mi - coeficient al termenului liniar, mii - coeficientul termenului ptratic care este egal cu zero n aproximaia liniar. Odat stabilite valorile lui bi, mi i mii ale curbei optime, pe baza etaloanelor, acestea se stocheaz n memoria calculatorului. Apoi, calculatorul poate fi comandat s determine concentraia elementului x din proba necunoscut pe baza valorii Ix - msurate dup introducerea eantionului n analizor. Dac n probele supuse analizelor exist fluctuaii mari ale concentraiilor elementelor nsoitoare, trebuie s se in cont de efectul de matrice. Acesta nseamn s se ia n considerare efectul tuturor elementelor j (diferite de elementul i) care trebuie i ele analizate. Efectul de matrice const n :
absorbia radiaiei caracteristice a elementului i de ctre elementul j; excitaia secundar a radiaiei caracteristice a elementului i de ctre radiaiile caracteristice
ale elementului j;
creterea fondului radiaiei caracteristice, pentru un element i, datorit prezenei radiaiilor
altor elemente j, care sunt reflectate aproximativ sub acelai unghi. Primele dou efecte 192 Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
numite uzual, interaciuni - sunt luate n considerare prin valoarea coeficientului mi. Cel de al treilea efect, numit efect de suprapunere, este luat n considerare prin valoarea coeficientul de suprapunere, bij. Efectul de matrice poate fi modelat matematic cu ajutorul ecuaiei lui Lucas-Tooth i
Paine (preferat pn la apariia calculatoarelor moderne):
Ci = a i + bi Ii 1 + k ijI j j
(3)
unde: Ci este concentraia cunoscut a elementului; i, bij sunt coeficieni explicai mai sus; iar Ii i Ij sunt intensitile msurate pentru elementele i, respectiv j. n situaia n care coeficienii sunt stabilii pe baza unor msurtori efectuate pe un numr de probe standard, cunoscute precis prin analize chimice clasice sau prin cntrire, concentraiile Ci pot fi calculate, ntr-o a doua etap, cu ajutorul intensitilor brute, Ii, respectiv Ij, determinate pe probele necunoscute. n ultimul timp prin ptrunderea calculatoarelor pe scar larg, ecuaia preferat n analizoarele moderne a devenit ecuaia lui Sherman (vezi anexa 2) care ia n considerare att absorbia ct si intensificarea fluorescenei. O form simplificat a ecuaiei lui Sherman este cea a lui LaChance i Trail care folosete coeficienii alfa determinai experimental cu ajutorul unui set de probe etalon cunoscute:
Ci = R i 1 + ijC j i j
(4)
unde Ri este intensitatea relativ (adic Ri=Ii/I0 cu Ii valoarea msurat pentru elementul i pe o prob i I0 valoarea msurat pentru acelai element i, pur, Ci - concentraia elementului pentru care se face etalonarea iar Cj - concentraia tuturor elementelor, astfel nct:
C
j
=1
(5)
Prezenta metod de analiz chimic este una din cele mai evoluate tehnici, folosit astzi pe scar larg n industria metalurgic, industria cimentului, a silicailor, refractarelor sau n cea minier (metalifer i nemetalifer). n cazul elementelor carbon i sulf se prefer totui o analiz separat din cauza erorilor ce pot aprea cu frecven mai mare la cele dou elemente dar i a concentraiei mici n care se gsesc acestea n aliajele metalice. Metoda preferat pentru ultimele este combustia n oxigen urmat de detecia prin spectrofotometrie n IR (la lungimi de und diferite) sau absorbia consecutiv celor dou elemente n soluii apoase urmat de determinarea celor dou elemente prin titrri cu indicare instrumental de exemplu prin metode coulometrice.
193
14
Aplicaii
Marele succes al acestei metode de analiz provine din faptul ca eantioanele nu se distrug n urma analizei iar probele, n special cele metalice sau pulberile, nu necesit un tratament chimic prealabil. Natura probelor analizate poate fi foarte diferit: metale, aliaje, materiale ceramice sticl pulberi de orice tip. La nceput, metoda a fost preferat n industriile de mare tonaj (minier, siderurgic, ciment, ceramic, sticl etc.) dar n ultimul timp, datorit comoditii i ridicrii performanelor instrumentaiei, aplicaiile s-au extins i n alte domenii (fotografie, semiconductori, industria petrolier, geologie, papetrie, toxicologie sau controlul poluanilor mediului). n fine, cuplajul acestei tehnici cu microscopia electronic a condus la microanaliza X (sau microsonda electronic) care permite pentru probe care, n mod ideal sunt conductori, s se realizeze o adevrat cartografie a compoziiei chimice pe fiecare element macro- sau micro-structural din materialul studiat. Cu progresele recente n domeniul detectorilor, elementele analizate s-au extins astfel nct, cu anumite precauii, acestea pot fi determinate de la numrul atomic Z = 5 (B) la Z = 92 (U). n oricare din aplicaii analiza pe
elemente se face indiferent de natura legturilor chimice ale atomilor elementului respectiv
deoarece fenomenul de fluorescen se datoreaz electronilor interiori pe cnd legturile chimice, electronilor exteriori ai atomilor. Pentru a se analiza i tipurile de structuri dintr-un material s-au introdus analizoarele de fluorescen X i, simultan, de difracie de raze X, care dau att compoziia pe substane chimice (minerale, compui intermetalici) ct i pe elemente.
Probele
Probele destinate analizelor cantitative trebuie s aib suprafeele lefuite (netede) i se fac de obicei n form de discuri de diametrul 40 sau 20mm i o grosime mai mare de 2mm i de maximum 3cm. Aceste discuri pot fi din pulberi presate, de regul cu un liant, ales n aa fel nct s nu elibereze produi gazoi n vid (H3BO3) sau discuri turnate n cazul topiturilor aliaje metalice sau obinute din probe dizolvate prin topire cu fondani (de ex. Li2B4O7) i diveri aditivi n creuzete din platin i, n ultimul caz, turnate n forme din Pt cu 5%Au. Soluiile se pot i ele analiza n cuve speciale din material plastic i acoperite cu o foi din material plastic (Mylar) pentru a elimina efectele vidului. Pulberile se preseaz sub form de discuri utiliznd un liant anorganic (acid boric) sau organic (carboximetilceluloz), dup o prealabil omogenizare cu liantul respectiv. Liantul nu va depi 10% din compoziia discului (pastilei). Mediul suport mai poate fi constituit i din hrtie de filtru, filtre cu pori micronici sau chiar membrane schimbtoare de ioni.
194
1. Ce particule interacioneaz cu proba de analizat n analiza chimic prin XRF? 2. Cum se numesc n XRF radiaiile care poart informaii privind compoziia chimic a probei? 3. Ce fel de particule sunt accelerate n cmpul electric al tubului de raze X pentru generarea acestora? 4. Care sunt mrimile fizice care intervin n ecuaia lui Bragg? 5. Ce se nelege prin radiaia continu emis de tubul de raze X? 6. La ce servete cristalul analizor n dispersia dup lungime de und? 7. Ce fel de elemente chimice pot fi analizate prin XRF? 8. Dai cteva exemple de cristale analizoare! 9. Prin ce se deosebete instrumentaia metodelor cu dispersie dup lungimea de und fa de cele bazate pe dispersia dup energie? 10. Ce provoac un foton X ntr-un contor proporional cu gaz? 11. Care este rolul litiului n semiconductorul dintr-un contor pe baz de Si(Li)? 12. Ce avantaje prezint microsonda cu raze X? 13. La ce fel de determinri se preteaz metoda de analiz XRF care utilizeaz filtre? 14. Ce se nelege prin termenul interaciuni n XRF? 15. Care metod de calcul ine cont de interaciunile element-matrice n analiza chimic cantitativ prin XRF?
195
Metode cromatografice - privire de ansamblu Englezul e maestru n a folosi imediat ceea ce a descoperit; i ne mai mirm de ce ne-au luat-o inainte n toate Johann Wolfgang von Goethe (1749-1832)
Metode cromatografice - privire de ansamblu

Analiza chimic cromatografic este un domeniu mai recent al analizei instrumentale care include mai multe metode de separare i totodat de analiz a componenilor amestecului din prob. n toate variantele, separarea precede analiza i se realizeaz prin repetarea, de un numr mare de ori, a echilibrului de distribuie ntre dou faze. Una dintre faze este imobil i poart denumirea de faz staionar (aflat de regul ntr-un tub numit coloan) iar cealalt faza mobil - aflat n micare, se deplaseaz prin golurile primei faze. Separarea se petrece n coloana cromatografic, piesa cheie a ntregii metode. Faza mobil, denumit i eluent -
scurgndu-se continuu (deci cu vitez constant) prin interstiiile fazei staionare, adeseori poroase, poate provoca migrarea, cu viteze diferite, a celor n componeni ai amestecului de separat de-a lungul coloanei. Amestecul supus separrii se introduce sub form de soluie la nceputul coloanei, folosindu-se un dispozitiv de introducere a probei (de exemplu o microsering), i se afl iniial fixat ntr-o zon ngust de la nceputul coloanei. Splai de eluent, o parte din componenii probei migreaz apoi prin coloan cu viteze diferite. Acest lucru se datoreaz interaciunilor fizice specifice, dintre moleculele probei i faza staionar (desigur, nu orice molecul poate migra pe orice faz staionar). Efectul, este numit retenie i aceasta provoac o aa-numit migrare difereniat. Adic moleculele migreaz n grupuri, n fiecare grup existnd doar molecule de acelai fel. Aceasta face posibil sesizarea componenilor, pe rnd, la prsirea coloanei, de ctre un instrument, n grupurile respective - denumite uneori zone. Instrumentul amintit este un analizor fizico-chimic, sensibil la mai muli (n mod ideal la oricare) dintre componeni ce ies din coloan i care este plasat n eluent, imediat dup ieirea din coloan. Acest analizor, denumit detector este capabil s dea un semnal proporional cu masa sau cu concentraia soluiei de component n faza mobil. n consecin, dispozitivul, "marcheaz" trecerea fiecreia din substanele ce formeaz iniial proba, similar cu o fotocelul care nregistreaz trecerea concurenilor la sosire n atletism. Reprezentarea grafic a semnalului detectorului n funcie de timp poart numele de cromatogram.
197
15
Clasificarea tehnicilor cromatografice
S-au imaginat i realizat numeroase variante ale metodei cromatografice, diferind unele de altele n primul rnd prin natura fazei mobile, dar i a celei staionare. Astfel se distinge cromatografia de lichide (LC) cnd faza mobil este un lichid, cromatografia de gaze
(GC) cnd aceasta este un gaz sau cromatografia cu fluide supracritice la care faza mobil
este un lichid aflat peste temperatura critic. n cadrul cromatografiei de lichide se mai face distincie ntre cromatografia pe coloan deschis i cea pe coloan nchis Pe de alt parte, n cadrul fiecreia dintre acestea, distingem mai multe variante. n cadrul LC se disting, n funcie de mecanismele de separare: Cromatografia de adsorbie, una dintre primele tehnici utilizate, veche de mai bine un secol (vet, 1903), utilizat pentru separarea substanelor organice cu molecule de dimensiuni mici i medii pe adsorbeni, ca silicagel i alumin, folosindu-se, ca faze mobile, diferite amestecuri de solveni organici. Cromatografia ionic (de schimb ionic), care se petrece pe o faz staionar solid, poroas, format din materiale specifice - schimbtorii de ioni - substane cu o reea solid afnat, de natur organic sau anorganic, pe care se gsesc grefate, prin procesul de obinere, nite centre de schimb ionic. Cele mai rspndite sunt rinile schimbtoare de
ioni - organice - la care scheletul-suport este unul organic - un polimer poros. Pe aceste
centre are loc o reacie ionic sau o interaciune ntre substana din soluie (electrolit sau neelectrolit) i funciunea legat chimic de suportul solid, numit reacie de schimb ionic. Cromatografia de excluziune steric se desfoar pe faze staionare poroase dar cu porozitatea selecionat astfel nct s corespund dimensiunilor moleculelor supuse separrii. O parte dintre molecule intr prin pori, reuind s interacioneze cu suportul solid, prin fore de adsorbie foarte slabe, iar altele sunt excluse deplasndu-se practic nereinute odat cu faza mobil. Se obine astfel un soi de sit la scar molecular separarea moleculelor fcndu-se n funcie de dimensiune. Tehnica se mai ntlnete i sub denumirea de filtrare prin geluri sau permeaie prin geluri n funcie de natura apoas sau organic a fazei mobile. Cromatografia lichid-lichid (LLC), n care faza staionar este o faz lichid, nemiscibil cu cea mobil i imobilizat pe un suport solid, ntr-o coloan. Aici suportul solid este, cel puin principial, inert fa de componentele din prob. ntruct simpla impregnare a unui suport poros cu un lichid permitea splarea acestuia n timp, s-a recurs la legarea pe cale chimic a acestora de suport, obinndu-se nite faze cu totul specifice - faze staionare
legate chimic. Molecule organice de dimensiuni mici sunt, prin sintez, legate de suportul
poros, fenomenul de pierdere prin splare de ctre faza mobil, fiind practic anulat. Acest tehnic este cea mai rspndit devenind aproape sinonim cu cromatografia de lichide. Cromatografia pe coloan deschis sau cromatografia planar (PC), se refer la un grup de tehnici nrudite cu cele din LC, care au toate n comun faptul c faza mobil circul printr-un material poros dispus ntr-un plan i formnd un strat relativ subire, dar de compoziie asemntoare cu cele menionate la cromatografia pe coloan. Se disting: Cromatogafia pe hrtie, tehnic n care faza staionar este o hrtie poroas din celuloz (iniial o hrtie de filtru) care este irigat de solvent prin fore capilare - o tehnic, azi, de importn istoric. Cromatografia pe strat subire (TLC), n care faza staionar pulverulent este fixat de suportul plan (sticl, aluminiu, material plastic) cu un liant, formnd un strat subire (0.10.5mm) de asemenea irigat prin capilaritate. Cromatografia pe strat subire de nalt performan (HPTLC), n care faza staionar are granulaie extrem de fin ridicndu-se astfel eficiena separrilor dar i viteza acestora. Toate acestea se caracterizeaz prin simplitate, accesibilitate i pre de cost cobort, dar totodat prin performane ceva mai slabe dect cromatografia de lichide pe coloan sub presiune ridicat (HPLC) varianta modern a LC. n mod analog, n cazul cromatografiei de gaze (sau mai pretenios cromatografiei n faz gazoas), denumit prescurtat GC se disting urmtoarele tehnici: Cromatografia gaz-lichid n care faza staionar este un lichid nevolatil imobilizat pe un suport solid. Aici suportul poate fi unul granular, poros, situat ntr-o coloan n aa-numita cromatografie de gaze convenional sau chiar pe pereii coloanei, confecionat de dimensiuni capilare, n cromatografia pe coloan capilar. Cromatografia gaz-solid este analog cu cele discutate la cromatografia de adsorbie i la cea de excluziune steric cu deosebirea c schimbarea gazului nu modific selectivitatea. Faza staionar o constituie tot silicagelul sau alumina, respectiv sitele moleculare (nite silicai naturali sau sintetici) respectiv granulele de carbon poros. Metoda este extrem de important pentru separarea gazelor permanente (CO, CO2, O2, N2, gaze nobile etc.) Din punct de vedere istoric, evoluia cromatografiei a cunoscut o suit de progrese, care au adus-o din situaia iniial de metod de separare i purificare de laborator la o tehnic de separare i analiz chimic cu o arie de aplicare aproape universal. Iniial rusul vet, a introdus n 1903 cromatografia de lichide pe coloan (LC). Aceast metod a fost uitat mult vreme i abia dup 1930, anul descoperirii cromatografiei n strat subire pe alumin, s-a perfecionat metoda utiliznd coloana, o dat cu nevoile de separare i purificare a compuilor organici naturali sau sintetici implicai n biochimie. n 1941 enlezii Martin i Synge
15
descoper cromatografia de repartiie pe hrtie, reuind s separe cu ajutorul unui amestec de solveni care irig o band de hrtie de filtru (coninnd o pictur de prob) aproape toi aminoacizii, descoperire extrem de important pentru dezvoltarea ulterior a biochimiei. Doar n 1952 aceiai A. J. P. Martin and R. L. M. Synge [102] au nlocuit faza mobil lichid cu un gaz, realiznd pentru prima oar cromatografia de repartiie gaz-lichid. n aceast variant, detecia a fost realizat fizico-chimic, n efluentul gazos, dup ieirea din coloan, reuind astfel s mbunteasc marcant separrile. Din acest moment asistm la demarajul extraordinar al acestor tehnici, devenite azi cteva din principalele mijloace de analiz n chimia organic i biochimie, dar i n criminalistic, igien, controlul alimentelor, industria metalurgic etc. Din 1968 Halazs, (profesor la Franckfurt/Main), a pus la punct LC folosind un solvent sub presiune n calitate de faz mobil i detecie fizico-chimic n efluentul lichid, acesta fiind nceputul dezvoltrii cromatografiei de lichide sub presiune nalt (200 atm). Din 1980 s-a reuit i obinerea unor separri analitice performante bazate pe schimb ionic - prin introducerea eluenilor diluai i a supresorului ionic - datorate americanilor Hamisch i Schmall, tehnic care de atunci a primit denumirea de cromatografie ionic (IC). Azi se lucreaz nu numai cu cromatografe de laborator, analitice, ci i cromatografe de proces, dedicate analizelor automate ale proceselor industriale sau cromatografe preparative, destinate obinerii de substane pure n industria farmaceutic sau n biotehnologii.
[102] Cei doi au preimit premiul Nobel pentu chimie, vezi http://www.nobel.se/chemistry/laureates/1952/ 200 Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
Cromatograma: elementele acesteia i mrimi fundamentale
n orice tip de cromatografie detectorul d un semnal proporional, uneori cu concentraia, alteori cu masa componentului aflat n celula de msur, semnal ce poate fi nregistrat n funcie de timp. Diagrama semnal, funcie de timp sau de volumul de eluent se numete cromatogram. Pe cromatogram distingem o serie de maxime, numite picuri (peak = vrf n l. englez), care se produc deasupra liniei de baz sau a poriunii orizontale a curbei, paralel cu axa timpului. Aceasta apare ori de cte ori n detector nu apare nici un component, n afara eluentului evident.
Fig. 1. Elementele unei cromatograme
Oricare pic are, n cazul ideal, forma distribuiei normale Gauss. S considerm cea mai simpl cromatogram posibil: cazul introducerii unui singur component, ntr-un gaz, C, care conine urme de aer - aerul fiind un component inert. Aspectul acestei cromatograme este cel prezentat n fig. 1. Pe axa absciselor s-a considerat timpul (sau volumul) de eluent scurs, cu debit cunoscut, de la introducerea (injectarea) probei, iar pe cea a ordonatelor, semnalul detectorului - n uniti arbitrare. Distingem urmtoarele elemente de baz: Picurile cromatografice. n cazul prezentat n fig. 1, cele dou semnale sau vrfuri sunt denumite picuri. Acestea sunt semnalele valorificabile n analiza calitativ i cantitativ n toate metodele cromatografice. Primul pic, mai mic, corespunde unui component inert (aerul de exemplu n CG) - care nu este reinut de loc - iar cel de-al doilea, notat cu C, corespunde componentului (unic n cazul de fa) al probei considerate i este datorat moleculelor care se distribuie pe parcursul migrrii prin coloan ntre faza mobil i cea staionar i care, n consecin, ies mai trziu din coloan. Timpul mort, tM - este timpul n care un component, complet nereinut de ctre faza staionar, parcurge coloana i tuburile de legtur pn la detector. Acesta nu poate fi zero. n cazul CG timpul mort, de exmplu, este egal cu timpul de retenie al aerului: tM = tR (R = Retenie). Deci, cu alte cuvinte, reprezint timpul scurs de la injectarea (introducerea)
201
15
probei n coloan i apariia maximului de concentraie n detector, pentru componentul nereinut. Timpul de retenie, tR - o mrime caracteristic pentru fiecare component al amestecului separat de coloan - reprezint timpul scurs de la injectarea probei i apariia maximului de concentraie n detector [103]. De exemplu, n cazul prezentat anterior n fig. 1, acesta este distana de la axa ordonatelor (nceputul cromatogramei) pn la verticala prin vrful picului C. Acest timp, pentru un component i o coloan (plus condiii experimentale) date este constant, indiferent dac componentul respectiv este singur sau n amestec. Volumul de retenie, VR este volumul de eluent corespunztor timpului de retenie (legat de timpul tR prin intermediul debitului eluentului, Fe): VR = tRFe msurai pe coloane diferite, n cazul aceluiai component - este dat de diferena: t R' = t R - t M (2) Corespunztor exist i un volum de retenie ajustat, VR' = VR - VM unde VM este volumul
mort; acest volum mort este legat de debitul eluentului coloanei, Fe, prin produsul: VM =
(1)
Timpul de retenie ajustat, tR'- introdus n cromatografie pentru a se putea compara timpii
tMFe, i reprezint volumul golurilor din coloan plus volumul tuburilor de legtur de la coloan la detector.
[103] Simbolurile utilizate n continuare sunt cele recomandate de IUPAC - publicate n Pure&Appl. Chem. 65(4), 819, (1993) 202 Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
Cromatograme ideale i reale
Aspectul unui pic dintr-o cromatogram ideal este acelai cu curba obinut prin reprezentarea grafic a funciei de distribuie a erorilor (Gauss), a crei expresie, scris n coordonate carteziene x,y este:
y(x, , ) = 1 (x ) 2 1 x2 exp( ) ; y(x, 0,1) = exp( ) 2 2 2 2 2
(3)
unde - o constant - simbolizeaz media distribuiei; n cazul cromatografiei aceasta corespunde chiar timpului de retenie, iar - abaterea standard a distribuiei - tot o constant care reprezint distana pe axa absciselor de la maxim la punctul de inflexiune al curbei de eluie (fig. 1). Valoarea reflect chiar lrgirea picului la trecerea acestuia prin coloan. O expresie i mai simpl a acestei funcii consider c axa ordonatelor trece chiar prin maximul picului (= 0) iar = 1 (ec. 3). Ultima ecuaie este o curb simetric cu un maxim pentru xmax = 0 i ymax = 1/2 = 0.399 care mai are i dou puncte de inflexiune, pentru x = 1 i y = 0.242 adic ~60,6% din valoarea ymax. Limea picului la punctul de inflexiune este 2 pentru ecuaia (3) i evident =1 pentru reprezentarea funciei (4). Prin convenie, n cromatografie w1/2 simbolizeaz limea picului la jumtate din nimea sa [104] i w1/2 = 2.35 iar 2 poart numele de dispersia picului. Limea picului la baz notat w se msoar de fapt la 13.5% din nlime unde n mod riguros w = 4.
Picurile reale nu respect ntotdeauna forma gaussian din mai multe motive. Pe de-o
parte, coeficientul de distribuie K nu este constant la orice concentraie iar pe alt parte, mai exist i diferene ntre viteza eluentului transversal prin coloan i anume n vecintatea pereilor aceasta este practic zero pe cnd la mijloc este maxim.
Fig. 2. Picuri reale a cror apariie se datorete izotermelor de adsorbie; depirea domeniului liniar al coloanei atrage dup sine apariia asimetriilor
[104] w reprezint o prescurtare de al width = ltime - n l. englez. Chimie Analitic i Instrumental 203
15
Formele posibile pentru picuri depind de forma funciei CS = f(CM) adic de izoterma de adsorbie (desigur mecanismul nu este ntotdeauna acesta). Cnd izoterma este liniar (I) avem picuri simetrice. Cnd aceasta este convex (II) sau concav (III) avem picuri asimetrice (fig. 2). Acest asimetrie, ntlnit relativ frecvent, se evalueaz cu un factor de asimetrie (sau de trenaj), Ft. Acest factor se calculeaz prin raportul distanelor, de la dreapta y = xmax la cele dou ramuri, msurat la 10% din nlime, adic: Ft = b/a n cazul izotermelor convexe Ft > 1 iar n cazul celor concave (III pe fig. 2) Ft < 1, ultimele fiind extrem de rare.
204
Mrimi i ecuaii caracteristice unei coloane Factorul de retenie, RF reprezint raportul, subunitar, dintre vitezele de deplasare prin
coloan ale unui component i ale eluentului. Cum vitezele amintite se pot calcula din raportul spaiului parcurs n unitatea de timp, lungimea coloanei fiind notat LCOL, avem conform definiiei:
L col o t R = t M = Vn Rf = L col t R V o R tM
(4)
Coeficientul de distribuie, K (sau KD) este o mrime identic celei din extracie
(repartiia ntre faze) definit ntotdeauna prin raportul dintre concentraiile componentului n chestiune din fazele staionar, CS, respectiv mobil, CM. Conform definiiei (dup Nernst): K= CS CM (5)
n cazul cromatografiei de adsorbie acesta a fost denumit coeficient de adsorbie, n cazul cromatografiei de schimb ionic (denumit ulterior cromatografie ionic), coeficient de
distribuie ionic iar n cadrul cromatografiei de excluziune steric coeficient de difuziune. Factorul de capacitate, k (notat n tratate mai vechi k') se definete ca raportul dintre
numrul de moli distribuii ntre fazele: staionar, , respectiv mobil. Numrul de moli din faza staionar pot fi exprimai prin produsul CSVS iar din cea mobil CMVM unde C sau notat concentraiile molare i cu VS respectiv VM s-au notat volumele fazelor - staionar respectiv mobil - din coloan, volumul ultimei fiind egal numeric cu volumul mort al coloanei. Ecuaia de definiie pentru k este aadar: k= CS.V S C M.V M (6)
n ultimul timp a primit i denumirea de factor de separare. Acest factor este legat de timpul de retenie, respectiv de cel mort, printr-o ecuaie simpl: tR = tM(1+k) (7) Deci, cu ct factorul de capacitate este mai mare coloana reine mai puternic un
component iar timpul de retenie crete. Pe de alt parte din ecuaia anterioar se poate vedea
c dac k = 0 atunci tR = tM. Pentru determinarea practic a valorii k se exprim aceast mrime din ecuaia de mai sus, i innd cont de cele amintite anterior, anume: tR' = tR - tM se obine relaia de calcul: k = tR'/tM (8)
Retenia relativ, , a mai fost denumit i factorul de separare tocmai pentru c, cu
ct valoarea acestuia este mai mare cu att poziia picurilor pe aceiai cromatogram este mai
15
distanat - deci separarea pe coloana respectiv este mai net. S-a constatat c influena variabilelor experimentale este cu mult mai redus dac se utilizeaz pentru exprimarea reteniei aceast retenie relativ. Pentru calculul acesteia trebuie efectuat msurarea, att pentru componentele probei ct i pentru o substan considerat etalon (sau standard) a timpului (sau volumului) de retenie, n condiii absolut identice. De multe ori substana etalon este parte a probei i nu este adugat intenionat. Retenia relativ se poate exprima astfel: 2/1 = tR'/(tR')std = K2/K1 (9) unde K2 i K1 sunt coeficienii de distribuie (vezi expresia K de mai sus) ai substanelor 2 respectiv 1, iar cu 1 s-a notat substana etalon (standard). Substanele recomandate n calitate de substane standard n GC, n vederea calculrii reteniei relative, sunt n - alcanii.
Numrul de talere teoretice al coloanei, n. Conform teoriei talerelor migrarea unei
substane separate prin coloan se poate descompune teoretic ntr-o succesiune de deplasri prin dreptul a n mici incinte din interiorul coloanei n care au loc echilibre perfecte ntre fazele staionar, din incinte, i cea mobil. Similar cu distilarea pe coloane prevzute cu talere, aceste mici incinte ideale au fost denumite talere teoretice. Lungimea poriunii dintr-o coloan, ce corespunde unei asemenea incinte, pe parcursul creia se realizeaz un echilibru termodinamic, se noteaz cu H i poart numele de nlime echivalent a unui taler teoretic. Aceasta caracterizeaz performana coloanei i se poate calcula din raportul: H = Lcol/N (10) unde cu LCOL s-a notat lungimea coloanei iar cu N numrul de talere teoretice. Cu ct valoarea H este mai mare separarea este mai bun. Numrul n se poate calcula pe baza cromatogramei obinute experimental din limea picului la baz, wb, care dup cum se vede din fig. 1, este de 4 ori valoarea dispersiei curbei gaussiene care modeleaz matematic picul, ceea ce permite scrierea ecuaiei: wb = 4 (11) Valoarea numrului de talere teoretice N constituie de asemenea o msur a eficacittii (totale) a coloanei cromatografice utilizate ntr-o separare sau analiz concret. Pentru un component dat acest numr reprezint patratul raportului dintre timpul de retenie i deviaia standard asociat picului corespunztor: N = tR2/2 (12) La o examinare mai atent acest raport reprezint patratul numrului de picuri ce ar ncpea pe o cromatogram n intervalul corespunztor timpului tR, picurile fiind separate toate doar parial (de exemplu cele cu rezoluia RS = 0.75, aa cum se prezint pe fig. 3a. Se poate observa c, nlocuind din ecuaia (11), avem:
N = 16tR2/wb Aceeai ecuaie scris n funcie de limea picului la jumtate (w1/2) este: N = 5.54tR2/w1/22
(13) (14)
Se mai poate observa i c, cu ct valoarea n este mai mare, picurile sunt mai nguste (w1/2 scade). Deci, cu ct numrul de talere este mai mare cu att vor "ncpea" mai multe picuri pe aceeai cromatogram. ntruct se pot separa mai multe componente i separarea picurilor, dou cte dou, va fi mai net se consider coloana mai eficient. Observaie: mrimile tR i wb (respectiv w1/2) se vor exprima ntotdeauna n aceleai uniti - deci numrul de telere teoretice, N, este adimensional; de regul ambele mrimi (tR i wb) se exprim n mm, msurai direct de pe hrtia nregistratorului. Cum n timpul mort, tM nu poate iei din coloan nici un component al amestecului injectat, n cromatografie se mai utilizeaz o mrime: numrul efectiv de talere teoretice, Nef, considerat un numr mai apropiat de realitate dect cellalt (N) tocmai pentru c nu se mai ia n calcul timpul mort - practic timpul n care componentul nu se afl nc n coloan: Nef = tR'2/2 = 16(tR-tM)2/wb = 5.54(tR-tM)2/w1/22 funcie de numrul de talere teoretice, N: Nef/N = (tR-tM)2/tR2 unde, nlocuind tR din (7) i exprimnd apoi Nef din (16), avem: Nef = Nk2/(1+k)2 (17)
Rezoluia, simbolizat RS, este mrimea ce exprim gradul de separare a dou
(15)
Din ecuaia (13) se poate scoate wb i prin nlocuire n (15) se poate apoi exprima Nef (16)
componente date de pe o cromatogram. Pentru componentele oarecare A i B aceasta se exprim prin raportul RS =
t R t = R 2( A + B) w b
(18)
unde tR este diferena dintre timpii de retenie ai componentelor B i A adic tR = tR,B - tR,A, iar w1/2 reprezint limea medie a picurilor la baz, w1/2= (wA + wB)/2. Rezoluia mai poate fi exprimat datorit nevoilor practice i n variantele: RS = t R,B - t R,A 0.5 ( w B + w A ) (19)
Pentru dou picuri alturate RS = 1 iar pentru dou picuri complet separate RS = 1.5 (fig. 3). Rezoluia egal cu unitatea reprezint o separare de 98% ntre cele dou picuri. O alt expresie a rezoluiei se poate obine pe baza notaiilor: tR = tM(kB - kA); = B = tR,B/(N)1/2 = tM(1+kB)/(N)1/2; kB/kA = care nlocuite n expresia (19) duc (vezi anexa) la ecuaia:
15
N -1 k B RS = 4 1+k B
(20)
Fig. 3. Picuri cromatografice separate ntre ele cu diverse rezoluii
Aceast exprimare este important pentru c reflect cei trei factori de care depinde
rezoluia prin cele trei paranteze (fig. 4), n ordine: prima - eficiena, a doua - selectivitatea, i
a treia - capacitatea de separare a coloanei. n ultima ecuaie N se refer la ambele picuri considerate egale ca lime adic N = (NA + NB)/2.
Fig. 4. Compromisul realizat n orice separare cromatografic ntre: eficien - 1 vitez - 2 volumul probei - 3
Pentru o coloan i un sistem supus separrii date, ncercnd s mrim cantitatea de prob pierdem din rezoluie pentru c depim capacitatea de sorbie (ad- sau absorbie) a coloanei. n general suma dintre cantitatea de prob, eficiena coloanei (sau rezoluia) i viteza de separare este o constant. Considernd valori reduse (unitare) pentru fiecare dintre acestea ne putem imagina poziia noastr, n faa unei probleme de separare, ca pe un punct din interiorul unui triunghi echilateral, cu laturile 1 (redat n fig. 4). Suma paralelelor la cele trei laturi este ntotdeauna 1. Deci ntotdeauna facem un compromis: ca s ctigm n vitez, renunm la rezoluie i la cantitatea de prob sau ca s separm cantiti mari de prob va trebui s sacrificm att rezoluia ct i viteza. n analiza chimic este foarte important mai ales eficiena (proporional cu ptratul rezoluiei). De aceea, se va lucra ntotdeauna cu o cantitate minim de prob i cu viteza optim ncercnd prin modificarea naturii coloanei (compoziia fizico-chimic, lungimea, temperatura, viteza eluentului) sau a compoziiei fazei mobile (doar n LC) s modificm parametrii separrii a dou componente K, N, k i pentru a asigura separarea complet a amestecului de interes practic.
Ecuaia lui Van Deemter
Aceast ecuaie exprim contribuia diverilor factori la lrgirea zonei unui anumit component, n timp ce acesta migreaz prin coloan cu o vitez medie v. Iniial creat ca model matematic pentru GC, ecuaia poate fi generalizat pentru oricare tip de cromatografie, dup cum s-a constatat ulterior. Aceasta conine expresia analitic a valorii nlimii echivalente a talerului teoretic - H - n funcie de viteza liniar medie, v, a eluentului de-a lungul coloanei. Cea mai simpl i totodat mai cunoscut expresie este cea descoperit iniial de Van Deemter pentru cromatografia de gaze: H = A + Bv + C/v (21) unde A, B i C sunt, pentru o coloan dat, nite constante. Dar aceste constante au n realitate fiecare nite dependene funcionale ce in de natura fizic a fazelor staionar i mobil, de diametrul i de natura umpluturii, dar i de condiiile de operare: temperatur, presiuni etc. Graficul acestei ecuaii este o curb cu un minim (vezi fig. 5), adic o ramur a unei hiperbole ce trece printr-un minim. Se observ c nlimea talerului, H, are un optim pentru o vitez care se poate calcula. Anume, prin derivarea ecuaiei lui Van Deemter i egalarea cu zero a rezultatului derivrii, se obine:
v opt = C B
(22)
Fig. 5. Ecuaia lui Van Deemter
Prin nlocuirea valorii v cu vopt n ecuaia iniial se obine optimul pentru H (adic minimul):
H min = A + 2 BC
(23)
Pentru vopt se realizeaz deci eficiena maxim a coloanei. Valorile A, B i C se obin experimental din graficul construit n coordonate similare celei din fig. 5 sau prin calcul fcndu-se mai multe determinri de nlime a talerului teoretic H la diverse viteze medii ale eluentului. Termenul A, constant, legat de difuzia turbulent i implicit de geometria
15
umpluturii, este practic constant ntr-o coloan. Termenul B este legat puternic de difuzia longitudinal, deci mai ales de coeficientul de difuzie n gazul purttor - determinant, dar constant ntr-un montaj instrumental dat - iar temenul C de transferul de mas, aadar de cinetica procesului de fixare a componentului pe faza staionar, deci legat direct de natura fazei staionare, respectiv de specia molecular care migreaz prin coloan. Mrind viteza eluentului, n intenia de a grbi ieirea din coloan a componentului i a scurta analiza, de cele mai multe ori stricm separarea n ansamblu prin lrgirea excesiv a picurilor, deoarece echilibrul dintre CM i CS nu apuc s se realizeze, iar picul este splat de eluent mai departe prin coloan. Din contr, micornd viteza prea mult, apare o lrgire excesiv din cauza celor dou difuzii, mai ales a celei n faz gazoas, care de asemenea stric separarea. n cromatografia de lichide poriunile liniare cresctoare, de dup minim, au pantele mai puin abrupte datorit difuziei n faz lichid cu mult mai lent n lichide dect n cazul gazelor, de circa 1000 de ori. Astfel, contribuia primilor doi termeni din ecuaia lui Van Deemter este mult diminuat i n general lrgirea zonei n LC are valori mai mici. n cazul cromatografiei de gaze cu coloan capilar s-a demonstrat c eficiena coloanei exprimat prin nlimea talerului, H, este influenat de factorul de capacitate (sau de retenie) k precum i de raza coloanei capilare, r: H min = r 1 + 6k + 11k 2 3(1 + k) 2 (24)
Se poate remarca c valoarea H este cu att mai mic cu ct raza, r scade.
210
1. Care este semnalul exploatat att calitativ ct i cantitativ n cromatografie? 2. Care este prima metod cromatografic cunoscut (care are o vrst de circa 1 secol)? 3. Care din componenii amestecului din prob provoac punctul mort? 4. La ce servete timpul de retenie ajustat? 5. Ce se ntmpl cu timpul de retenie cnd factorul de capacitate, k, crete? 6. Care sunt principalele mecanisme de separare n cromatografie? 7. Care mrimi se utilizeaz practic pentru caracterizarea i compararea performanelor coloanelor? 8. De ce s-a introdus rezoluia? 9. Ce exprim ecuaia lui Van Deemter? 10. Care este termenul din ecuaia lui Van Deemter care determin forma de hiperbol. 11. Ce factori afecteaz rezoluia? 12. Ce parametru sacrificm n GC cnd mrim, simultan, att viteza ct i volumul de prob? 13. La rezoluia 1 picurile sunt complet separate? 14. Care sunt mrimile care influeneaz eficiena separrilor n cromatografia de gaze cu coloan capilar?
211
Cromatografia de gaze (GC) Ce odat a fost inventat, nu mai poate fi dezinventat Margaret Thatcher, chimist, Fost Prim Ministru a Marii Britanii
Cromatografia de gaze (GC)

Aceast tehnic cromatografic este printre cele mai rspndite i totodat este prima dintre metodele de analiz cromatografic aplicat pe scar larg n analizele chimice. Compuii amestecului supus separrii nu trebuie s fie neaprat gaze, ci pot s fie i lichide sau chiar solide volatile. Substanele de analizat se introduc n coloana de separare, la o temperatur potrivit, prin intermediul unui dispozitiv de introducere a probei. Singura restricie este temperatura de vaporizare care uneori poate fi mai mare dect temperatura de descompunere a substanelor de analizat. n aceste cazuri se poate recurge la alte tehnici cromatografice care au ca eluent un lichid sau fluid supracritic. De asemenea, se mai pot realiza, nainte de introducerea probei n cromatograf, nite derivai (compui noi), volatili, utiliznd anumite reacii chimice specifice, procedeu denumit derivatizare. Uurina cu care se pune la punct o analiz nou, sensibilitatea sa, posibilitatea de automatizare precum i largile posibiliti de aplicare sunt avantajele principale ale acestei metode. Printre domeniile n care GC i-a cucerit un loc de prim rang sunt: petrochimia, industria farmaceutic, protecia mediului, analiza aromelor, igiena i criminalistica.
Cromatograful de gaze
Instrumentul care realizeaz separrile i totodat analiza n GC poart numele de

cromatograf de gaze. Funcionarea acestuia se poate nelege urmrind schema din fig. 1.
Fig. 1. Schema de principiu a unui cromatograf de gaze
Schia prezint concis doar componentele principale. Astfel gazul purttor (eluentul), de exemplu hidrogenul sau heliul, prsete cilindrul sub presiune, 1, n care acesta se gsete iniial i ptrunde n coloan, la o presiune de intrare, cu ceva peste cea atmosferic (1-3atm), prin intermediul unui reductor 2. Apoi gazul se ramific (opional) prin dou conducte. O parte intr n coloan, n mod continuu iar cealalt ramur, direct n detector. Coloana 4, se
16
afl ntr-o etuv - termostat, 3, izolat termic i prevzut n exterior cu un dispozitiv pentru
introducerea probei (care de regul include i o microsering), notat S, etuv care mai este
dotat n interior cu un ventilator V i cu un dispozitiv electric de nclzire - termostatare, R. n coloana cromatografic se produce separarea probei. Aceasta se introduce n coloan doar dup ce instrumentul este n regim de funcionare continu i a fost adus la temperatura de lucru. Dup ce prsete coloana 4, gazul purttor intr, antrennd pe rnd componentele separate, n celula de msur din detector de unde iese n atmosfer sau se colecteaz separat.
Faza mobil n aceast tehnic este un gaz: hidrogenul, heliul, azotul sau argonul.
Aceasta poate fi eliberat, prin intermediul unor ventile i regulatoare de presiune, din cilindri de gaze presurizate, fie obinute din generatoare (cazul N2 sau H2) - direct n laborator. Gazul nu trebuie s conin urme de ap, oxigen sau dioxid de carbon care pot prejudicia fazele staionare. De aceea se mai intercaleaz filtre cu dublu rol: uscare, respectiv, reducerea oxigenului, dispozitive situate imediat dup sursa de gaz. n cazuri excepionale se pot utiliza i ali elueni cum ar fi CO2, Ne etc. Spre deosebire de cromatografia cu elueni lichizi, n GC
natura gazului are o importan minor asupra selectivitii separrii deoarece gazul,
practic, nu interacioneaz cu componentele probei sau cu suportul. Desigur c viteza optim nu este aceeai pentru toate gazele i se stabilete pe baza ecuaiei Van Deemter. Presiunea de la captul coloanei se regleaz cu ajutorul unui regulator de presiune i ventil ac.
Introducerea probei se realizeaz cu aa-numitele seringi micrometrice (fig. 2), n
cazul probelor care au volumele n domeniul 0.1-10l. Cu acestea, dup umplerea cu volumul de prob necesar, apsnd pistonul, se injecteaz coninutul prin cauciucul siliconic sau garnitura inelar a unui septum din dispozitivul de introducere a probei. Pentru gaze se folosesc fie seringi ceva mai mari, de 0.5ml, fie nite dispozitive speciale numite ventile
pentru introducerea probei.
Fig. 2. Aspectul unei seringi micrometrice folosite n GC Dispozitivele pentru injecie au rolul de a permite introducerea seringii i totodat, de
a provoca volatilizarea probei n curentul de gaz purttor ct mai aproape de intrarea n coloan. Aceste dispozitive sunt diferite n funcie de coloanele utilizate. De exemplu n coloanele cu umplutur i cele capilare, cu diametre de 530m - wide bore, se folosesc dispozitive cu volatilizare direct. Aceste dispozitive (fig. 3) au toate o inserie din sticl,
nclzit, introdus ntr-un tub prin care trece gazul purttor, aflat la o temperatur suficient de ridicat pentru a permite volatilizarea probei simultan cu injectarea acestuia. Captul de sus al dispozitivului din fig. 3, situat n afara cromatografului, conine un septum, adic o pastil din cauciuc siliconic care permite ptrunderea acului ascuit al seringii. Cellalt capt al dispozitivului este legat la coloana cromatografic prin intermediul unui racord filetat i a unei garnituri. Astfel, imediat dup injectarea probei, aceasta ptrunde n capul coloanei.
Fig. 3. Dispozitiv de injecie simplu folosit adesea n GC
Pentru coloane capilare, care au debitele mult mai mici iar volumele introduse n coloane deosebit de mici, introducerea cu o sering a probelor, direct, ar compromite coloana definitiv. De aceea se folosesc nite dispozitive speciale cu ajutorul crora doar o mic fraciune din prob, cunoscut, intr n coloan iar restul este evacuat n atmosfer. Dispozitivele se numesc split/splitless iar fraciunea de prob introdus efectiv n coloan reprezint 1/20 pn la 1/500 din volumul injectat cu seringa. Incinta termostatat n care se afl coloana, numit etuv-termostat, are temperatura reglabil ntr-un domeniu larg (40-450C) fiind foarte precis stabilizat (0.1C) i totodat ventilat, pentru o egalizare rapid a temperaturii. La anumite cromatografe, se pot executa i
programe de temperatur, adic nclziri controlate ale coloanei, n timp, pe parcursul
efecturii analizei. Are loc n acest fel o volatilizare treptat a compuilor - la nceput ies cei volatili care migreaz rapid i la urm, cei mai puin volatili care migreaz foarte lent mrind mult durata analizei. Programele se stabilesc prin ncercri experimentale.
215
16
Detectorii gaz cromatografici
Detectorii sunt instrumentele analitice propriu zise din gaz cromatografe, avnd rolul de a sesiza n mod continuu, rapid i cu o mare sensibilitate, componentele din proba supus analizei. n corpul detectorului zonele cromatografice care ies separate din coloan, coninnd de preferin moleculele unei singure substane, se transform n semnale electrice (picuri). Pentru a se putea compara, ca performane, fiecare detector este caracterizat de nite mrimi fizice: specificitate, sensibilitate, zgomot de fond, drift, limit de detecie, constant de timp, reactivitate, efect asupra probei i altele, comune multor metode analitice. De asemenea, unii detectori distrug proba iar alii o las nealterat, permind separarea fizic a acesteia. Despre sensibilitate i limita de detecie am amintit n cursurile introductive cteva lucruri eseniale valabile i aici. n orice gaz cromatograf trebuie s existe cel puin un detector universal care s permit nregistrarea sigur a tuturor componenilor. n afar de acesta mai pot exista i ali
detectori specifici, care mresc sigurana analizei componenilor de interes practic, deoarece
rspund doar la anumite tipuri de molecule.

Zgomotul de fond (fig. 4) apare din cauz c urmrindu-se ca metoda s fie ct mai
sensibil, lucreaz la limita unde interfer zgomotul electronic cu cel dat de detector. Att zgomotul de fond ct i driftul, de regul exprimat n variaia semnalului, timp de o or, sunt prezentate schematic pe fig. 4. Se observ c zgomotul de fond const n perturbaii minuscule ale liniei de baz avnd cauze multiple iar driftul este devierea liniei de baz ntrun timp dat (1 or) exprimat n unitile de msur uzuale ale semnalului nregistrat (mV, mA etc).
Fig. 4. Imaginea schematic a zgomotului de fond i a driftului Domeniul dinamic liniar al detectorului reprezint domeniul n care semnalul variaz
liniar cu concentraia (sau alteori cu debitul masei de component) ce trece prin detector. Acesta se msoar de la limita de detecie pn la nivelul superior de concentraie la care apar abateri de la liniaritate de peste 5%. Domeniul dinamic liniar se stabilete experimental prin
construirea curbei de etalonare n urma injeciei unor cantiti cresctoare de component. Exist mari diferene ntre metodele de detecie (tabelul 1) dar toate au domeniul liniar mai ridicat dect multe dintre metodele de analiz optice. Cei mai utilizai detectori sunt n practica curent detectorii cu un domeniu liniar larg, anume: detectorul bazat pe conductibilitate termic (TCD), detectorul cu ionizare n flacr (FID), detectorul cu fotoionizare (PID) i cel cu captur de electroni (ECD). Se observ de asemenea c cei patru detectori acoper mpreun un larg domeniu de concentraii motiv pentru care gaz cromatografele comerciale au n dotare cel puin doi din aceti detectori.
Tabelul 1. Limite de detecie i domeniul dinamic pentru principalii detectori utilizai n GC Detector Limit de detecie (gmL-1) Domeniul dinamic liniar FID - cu ionizare n flacr 10-12 107 -14 ECD - cu captur de electroni 10 104 -7 TCD - catarometrul 10 104 -14 NPD - cu emisie termo-ionic [105] 10 105 -11 FPD - flamfotometrici [106] 10 104 -12 PID - bazai pe fotoionizare 10 105 Constanta de timp reprezint viteza de rspuns a instrumentului din momentul intrrii
componentului n detector. Mai riguros, acesta reprezint timpul necesar rspunsului detectorului pentru a atinge 90% din valoarea limit final. Acest parametru include i ntrzierea datorat electronicii.
Reactivitatea include i posibilitatea reinerii de componente ale probei sau provenite
din aceasta prin degradare, prin adsorbie sau prin reacii chimice.
Efectul aspra probei poate fi distructiv sau nedistructiv. n ultimul caz proba separat
poate fi izolat. De exemplu, FID este un detector distructiv pe cnd TCD este nedistructiv.
Detectorul bazat pe conductibilitate termic (catarometrul)
Principiul a fost cunoscut i utilizat pentru analizoare de gaze nc din secolul trecut (XX). Catarometrul a rmas detectorul cel mai utilizat i n zilele noastre deoarece este simplu, nedistructiv, universal, are stabilitate bun precum i un domeniu larg de liniaritate (tabelul 1). Funcionarea sa se bazeaz pe diferena dintre conductibilitatea termic dintre component i eluentul gazos. Astfel fiecare gaz este caracterizat printr-o conductibilitate termic constant i diferit, de la un gaz la altul. Pentru detecie se utilizeaz de regul un montaj n punte Wheatstone. Curentul I, generat de sursa de tensiune Ui, se bifurc scurgndu[105] NPD reprezint prescurtarea (l.engl.) a denumirii: nitrogen and phosphorus detector deoarece acesta este specific pentru aceste elementeleN i P. Se mai numete i detector cu ionizare termoalcalin. [106] FPD = flame photometric detector (l. engl.) Chimie Analitic i Instrumental 217
16
se prin cele dou brae ale punii. Tensiunea de ieire U0 depinde de diferena dintre R1 i R2. Astfel se observ c dac R1 = R2 atunci U0 = 0. Rezistena este un filament metalic spiral (asemntor cu cel din becurile electrice) izolat electric fa de incint, prin care circul gazul purttor. Detectorul (fig. 5) are dou celule: una de msur, R1, creia i variaz rezistena n funcie de componentul intrat i alta - numit celul de referin, R2, prin care trece doar gazul purttor (a crei rezisten rmne constant). Volumul celulelor difer, fiind cuprins ntre 2.5-100l. Cea mai ridicat conductivitate termic dintre toate gazele o au hidrogenul i heliul. De aceea acest detector este preferat cnd gazul purttor este unul dintre acestea.
Catarometrul (TCD) este de altfel singurul detector capabil s analizeze gazele permanente: N2, O2, CO, CO2, CH4 etc., motiv pentru care nu lipsete aproape din nici un gaz -
cromatograf.
Fig. 5. Principiul de funcionare al detectorului catarometric Detectorul bazat pe ionizare n flacr (FID)
Acesta este unul din cei mai folosii detectori, n special datorit sensibilitii sale ridicate la compuii cu carbon, practic nelipsii din orice tip de gaz-cromatograf dedicat analizei substanele organice. Dei distruge proba, a fost detectorul care a consacrat definitiv cromatografia de gaze. Funcionarea sa are la baz modificarea conductibilitii electrice a gazelor n prezena unor particule ncrcate (de regul molecule ionizate). Dac la presiunea i temperatura ambiant un gaz aflat ntre doi conductori este un izolator foarte bun, n momentul cnd ntre cei doi electrozi apar particule ncrcate electric, n urma deplasrii acestora n cmpul electric creat, apare un curent electric. Ionizarea moleculelor probei este intensificat de prezena unei flcri de hidrogen, care arde n aer ntr-o incint, flacr ce atinge temperaturi ridicate (2000-2200C). Cele mai slabe semnale, care nu pot servi unei analize chimice, le dau substanele alctuite din moleculele covalente simple: N2, O2, CO, CO2, H2O, CS2, NH3, CCl4, SiCl4, oxizi de azot, He i alte gaze rare. De aceea gazul purttor n cromatografia de gaze este N2,
218
He sau Ar, condiii n care detectorul d un semnal de baz minim, foarte stabil. Schia
simplificat este prezentat n fig. 6.
Fig. 6. Principiul de funcionare al detectorului cu ionizare n flacr (FID)
Fig. 7. Schia de principiu a detectorului cu captur de electroni (ECD)
n momentul apariiei in flacr a unor molecule organice, de exemplu hidrocarburi sau derivai, ionizarea duce la un semnal (curent) specific fiecreia dintre acestea. Curentul se transform n tensiune pe rezistena cu valoare ridicat R. i aici debitele gazelor trebuie s fie riguros constante. Sensibilitatea FID la fluctuaiile debitului i ale temperaturii sunt ceva mai mici dect la detectorul bazat pe conductibilitatea termic. n gazul purttor provenit din coloan, se dilueaz cu hidrogenul i aerul necesare i eventual cu un alt gaz inert (N2, Ar). FID (fig. 6) este confecionat adeseori din oel inoxidabil iar ntre corpul metalic i placa cilindric pozitiv, de deasupra sa, se aplic un potenial de polarizare de 100-300V, continuu. Rspunsul detectorului, depinde de numrul de molecule ionizate ce apar n flacr. Cele mai stabile rezultate se obin pentru alcani. Pentru alte substane semnalul n general scade cu creterea numrului de heteroatomi din molecul. De aceea, aici este nevoie de un
factor de corecie specific pentru fiecare compus analizat. De regul se folosesc factori de
corecie relativi, adic raportul dintre arie i unitatea de mas a unui compus de referin i rspunsul, pentru unitatea de mas a speciei chimice analizate.
Detectorul cu captur de electroni
Gazul purttor este n acest caz azotul. La ptrunderea n detector, acesta este ionizat de ctre o surs - radioactiv (sunt suficieni civa mCi furnizai de o surs coninnd 63Ni). Gazul, trece apoi printre doi electrozi, ntre care se asigur o cdere de tensiune de o sut de voli (fig. 7), de regul ntre un electrod central, pozitiv i corpul electrodului - negativ.
219
16
n lipsa oricrei molecule organice n gazul purttor, exist un curent de baz redus datorat moleculelor de diazot (N2) - ionizate negativ. La apariia n detector a unei molecule organice M, care conine elemente electronegative (ca Cl sau F) - cu mare afinitate pentru electroni, aceasta va capta o parte dintre electronii radiaiei -. Va aprea, n consecin, o diminuare a curentului de recombinare a ionilor de semne contrare. Au loc aadar transformrile: N2 N2+ + e-, Curent de fond M + e- M-; M- + N2+ M + N2, Diminuarea curentului de fond Se produc deci picuri negative, ceea ce nu deranjeaz cu nimic rezultatul final analiza chimic. Fiecare particul - poate genera prin ciocniri ntre 100 i 1000 electroni termici. Acetia avnd o mobilitate ridicat vor fi colectai de anod nainte de a se putea recombina cu ionii pozitivi de diazot. De aici rezult sensibilitatea mare a metodei. Curirea detectorului se face prin scoaterea electrodului +, pe care se depun o mic parte dintre moleculele organice ionizate. Acest detector este unul selectiv, adecvat pentru detecia compuilor halogenai (pesticide), avnd o liniaritate a rspunsului aproximativ.
Detectorul bazat pe fotoionizare (PID [107]) Detectorul bazat pe fotoionizare (PID) este un detector deopotriv sensibil i specific
pentru hidrocarburi aromatice i cu heteroatomi (P i S) n molecul. Dispozitivul (fig. 8) se bazeaz pe capacitatea razelor UV de a ioniza moleculele organice, care prsesc coloana o dat cu gazul purttor. Analog cu metoda precedent, bazat tot pe ionizare, ionii produi sunt colectai pe doi electrozi, cel pozitiv fiind cel demontabil (permind astfel ntreinerea periodic). Deoarece fraciunea moleculelor ionizate este mic, PID se consider un detector nedistructiv i poate fi nseriat cu ali detectori. Lmpile UV cu energii cuprinse ntre 5.6 i 11.7eV pot furniza o selectivitate suplimentar, peste 10.6eV practic toate moleculele organice ioniznd.
[107] PID este prescurtarea de la denumirea n l. engl. Photoionization Detector 220 Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
Fig. 8. Principiul de funcionare al detectorului cu fotoionizare (PID); radiaiile UV sunt furnizate de o lamp situat n contact cu camera de ionizare
Ali detectori
Mai exist i ali detectori, de exemplu detectorul fotometric n IR (simplu sau bazat pe transformata Fourier), detectorul cu flamfotometru destinat pentru detecia specific a compuilor cu sulf i fosfor, detectorul bazat pe emisie atomic cu plasm cuplat inductiv sau detectorul cu ionizare termoionic (termoalcalin) - NPD - bazat tot pe o flacr, dar la care ntre flacr (cu hidrogen - aer) i arztor se introduce o pastil de sare alcalin, ceea ce provoac o cretere a intensitii semnalului de 100 de ori. Ultimul este un detector specific pentru azot i fosfor care este util, de exemplu, pentru analize de pesticide. Mai puin utilizai sunt detectorii cu absorbie atomic sau cel cu chemiluminescen. Dar cea mai spectaculoas intrare n domeniul detectorilor a realizat-o recent spectrograful de mas, care preia direct efluentul coloanei i n urma unei ionizri, fragmentele intr n spectrograful de mas propriu zis. Acest lucru a devenit posibil datorit calculatoarelor, care au permis prelucrarea volumului uria de date care se obin pe aceast cale. Cuplajul denumit GC-MS este chiar mai sensibil dect detectorul bazat pe fotoionizare n UV (vezi tabelul 1).
221
16
Coloanele gaz cromatografice
Coloanele sunt inima oricrui cromatograf de gaze i sediul separrii respectiv al corectitudinii rezultatului analizei chimice. Iniial au existat dou tipuri de coloane: (A) cu umplutur i (B) coloane capilare (fig. 9). Din anii 1990 a mai aprut un tip - coloanele
530m (whide bore) - care dei nu mai sunt coloane capilare, n adevratul sens al cuvntului,
pstreaz geometria i tipurile de umplutur ale coloanelor capilare. Subiectul este deosebit de vast i este tratat n cri de specialitate i chiar detaliat pe Internet la adresa: http://gc.discussing.info/gs/e_columns/stationary_phase.html#GasSolid
Coloanele cu umplutur -primele coloane cunoscute n GC - sunt confecionate din
tuburi (oel, sticl sau alte materiale), avnd diametre cuprinse ntre 2-8 mm - cel mai frecvent de 1/8 oli (3.18mm) sau oli (6.35mm) - i conin adsorbeni, site moleculare sau un suport inert pe care se gsete depus sau legat chimic un film subire dintr-o faz staionar. Raportul diametrelor coloanei i umpluturii trebuie s fie cuprins ntre 25 i 20. n ultimul timp au aprut i coloane cu umplutur de 1/16 oli. Umplutura coloanei const dintr-o anumit faz staionar - activ care se depune pe granulele umpluturii inerte i poroase, n afara coloanei (dup dizolvarea acesteia ntr-un solvent potrivit ales) prin amestecare urmnd apoi evaporarea solventului ntr-o etuv [108]. Doar apoi umplutura se introduce n coloan i coloana se monteaz n cromatograf, prin intermediul unor racorduri filetate. Debitul gazului purttor la aceste coloane este cel mai mare, fiind cuprins ntre 10 i 40mLmin-1. Astfel de coloane sunt din ce n ce mai puin utilizate.
Fig. 9. Cele dou tipuri de coloane, cu umputur - A i capilare - B; coloanele 530 m (wide bore) nu difer ca geometrie de cele capilare
[108] n zilele noastre sunt disponibile comercial majoritatea coloanelor necesare n analizele de rutin. 222 Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
Suportul poros (i totodat inert) este format dintr-un material solid, elaborat
industrial, de form preferat sferic i cu o granulaie ct mai uniform (de exemplu 60-80 mesh sau 80-100 mesh [109]). n raport cu suportul poros, faza staionar constituie doar 325%. Cele mai rspndite sunt confecionate din pmnturi diatomitice (de ex. diversele tipuri de Chromosorb) dar multe sunt fabricate din silice (de ex. Spherosil). Acestea se modific chimic prin silanizare pentru a deveni inerte.
Coloanele capilare sunt, la rndul lor, de cel puin dou tipuri: cu faz staionar depuse chiar pe peretele coloanei capilare (WCOT) sau cu faza staionar depus pe un suport solid, poros, aderent, format n prealabil pe peretele acesteia (SCOT) [110]. Au
diametre 0.1-0.35mm i lungimi ntre 5-100m, separarea durnd ceva mai mult dect la cele cu umplutur. Cu ct coloana este mai lung durata analizei crete. Coloanele capilare se confecioneaz n ultimul timp mai ales din sticl de cuar. n exterior acestea sunt mbrcate ntr-un polimer - poliamid - pentru a rezista mai bine la ocuri mecanice respectiv la coroziune (n acelai scop se mai folosete aluminiul). Coloanele sunt bobinate pe suporturi metalice avnd o form circular (fig. 10).
Fig. 10. Bobin de coloan capilar n forma care se folosete n gaz-cromatograf Coloanele WCOT conin faza staionar sub form de film subire n interiorul
capilarei, grosimea acestuia variind ntre 0.05-5m. Faza staionar poate fi depus fizic sau chiar legat chimic de grupele -OH ale silicei hidratate. Si aceste coloane sunt disponibile deja comercial pentru majoritatea aplicaiilor curente. Eficacitatea unei astfel de coloane poate atinge 150mii talere teoretice. nlimea echivalent a unui taler teoretic, H, n cazul acestor tipuri de coloane, are o expresie deosebit de ecuaia lui Van Deemter i a fost descoperit de Golay, anume: H= B + (CG + CL) v v (1)
[109] mesh - unitate anglosaxon de granulaie fiind numrul de ochiuri per inch ptrat. [110] WCOT = wall coated open tubular (column) nseamn coloan deschis cu faza staionar depus pe perete SCOT = support coated open tubular (column) nseamn coloan deschis acoperit cu suport( prescurtri n l. engl.). Chimie Analitic i Instrumental 223
16
unde termenul A lipsete iar CG este coeficientul de difuzie al speciei moleculare separate n faza gazoas, CL, fiind acelai coeficient pentru faza lichid. n acest caz Hopt se calculeaz cu ecuaia dat n seciunea Metode cromatografice - privire de ansamblu.
Coloanele 530m sau wide bore sunt confecionate tot din silice (SiO2) avnd lungimi
cuprinse ntre 5-50m. Le-am putea denumi coloane semicapilare deoarece pstreaz caracteristicile coloanelor capilare dar dimensiunile nu mai sunt apropiate de dimensiunea firelor de pr. Debitul prin aceste coloane atinge 15mLmin-1 (adic intr n domeniul celor cu umplutur), dar au performane superioare acestora.
Fazele staionare sunt i ele de mai multe feluri: polare, de exemplu polietilenglicoli,
nepolare de exemplu cauciucuri siliconice, intermediare i n sfrit cele cu puni de hidrogen sau cele specifice (de exemplu cele destinate separrii amestecurilor racemice). Fazele staionare sunt lichide sau solide. Fazele staionare lichide sunt formate din lichide nevolatile avnd o compoziie chimic foarte variat (peste 100 de tipuri). Pentru a se putea lega chimic numrul acestora a fost restrns la cele care pot, prin sintez, s duc la un film grefat pe partea intern a coloanei. La ora actual se pot distinge dou tipuri de compui preferai:
polisiloxanii i polietilenglicolii fiecare ntr-o varietate care s permit modificarea polaritii
acestora. Formulele acestora sunt ilustrate pe fig. 11.
R: CH3 (metil) (CH2)3CN (cianopropil) O Si (CH2)2CF3 (trifluoropropil) R HO CH2O H C6H5 (fenil) n n Fig. 11. Cele dou tipuri principale de faze staionare lichide folosite pe scar larg n GC: siliconice -stnga i polietilenglicolice - dreapta
Pentru separarea enantiomerilor (izomeri optici cu exact aceeai structur chimic) sau impus recent fazele staionare formate din ciclodextrine. Toate aceste faze au o temperatur minim i una maxim de utilizare, deoarece n partea de jos a acestor limite, echilibrele care au loc la retenie sunt deranjate, iar la partea superioar are loc un nceput de degradare a fazei care deranjeaz detecia, respectiv uniformitatea separrii.
Fazele staionare solide sunt constituite din diferii adsorbeni: silicagel sau alumin
(dezactivate cu sruri minerale), sticle poroase, sau polimeri poroi iar n ultimul timp chiar carbon poros. Acestea au diferite denumiri comerciale: Site moleculare, Porapak, Carbopak, PoraPLOT etc i sunt folosite mai ales pentru separri de gaze permanente sau compui foarte volatili H2O, hidrocarburi etc. Astfel de materiale se pot depune i pe pereii
224
interiori ai coloanelor capilare - coloane denumite n literatura internaional coloane PLOT (adic coloane deschise cu suport poros = Porous Layer Open Tubular, l. engl.).
Analiza calitativ i cantitativ n GC Analiza calitativ
n GC analiza calitativ se poate realiza fie pe baza utilizrii timpilor de retenie ajustai, tR' fie pe baza volumelor de retenie ajustate, VR' msurate experimental n cazul probei necunoscute i comparate cu valorile similare ale unor probe cunoscute. Deci pentru orice analiz calitativ este nevoie de substana pur, lucru nu ntotdeauna accesibil. De aceea cuplajul cu spectrometria de mas a depit acest neajuns, devenind una dintre cele mai bune tehnici de analiz calitativ. n cazul LC eluentul, un lichid, este necompresibil i n consecin, debitul acestuia nu se va modifica la nceputul coloanei fa de sfritul acesteia. n cazul CG, ns, presiunile iniial, pi i cea final, pf, fiind diferite, este necesar introducerea unei corecii a volumului de retenie msurat, cu ajutorul unui factor, j, numit factorul de corecie corespunztor cderii
de presiune. Acesta se poate calcula din ecuaia dat n cele ce urmeaz, fr deducie:
3 (p 2 -1) j= . 3 2 (p -1)
(2)
n care cu p s-a simbolizat raportul presiunilor, iniial (pi) respectiv final (pf), adic p = pi/pf. Cu ajutorul acestei mrimi semnale de retenie din diverse condiii experimentale se pot face comparabile n analiza calitativ prin CG.
Volumul de retenie corectat, VR0 definit prin produsul:
VR0 = jVR unde j este factorul de corecie de mai sus iar VR - volumul de retenie.
(3)
Volumul de retenie net, VN, este volumul de retenie ajustat dar corectat i pentru
cderea de presiune: VN = jVR' volumul de retenie simplu mai ales cnd nu se mai recurge la alte tehnici [111].
Volumul de retenie specific, Vg. Prin mrirea cantitii de faz lichid staionar, fie
(4)
Aceste volume sunt utilizate cu precdere n analiza calitativ fiind mai sigure dect
prin utilizarea unei cantiti (grosimi) mai mari fie prin utilizarea unei coloane mai lungi, crete volumul de retenie. Pentru a se lua n considerare i acest factor se definete volumul
de retenie specific (exprimat de regul n mL/g) cu ecuaia de definiie:
Vg = 273VN/(TcmL)
(5)
[111] Amintim c se practic, pentru o mai mare siguran, cuplajul GC cu spectrometria de mas. Chimie Analitic i Instrumental 225
16
unde Tc este temperatura absolut a coloanei, VN - volumul de retenie net al componentului i mL - masa fazei staionare lichide din coloan. Dar pentru c toi aceti parametri depind, n mare msur, de o serie de condiii experimentale ca temperatura, debitul gazului purttor, cantitatea de faz lichid etc, pentru identificarea substanelor se recurge n ultimul timp la utilizarea indicilor de retenie Kovts. Aceti indici, notai n continuare cu I, sunt practic independeni de factorii amintii. Astfel, pentru orice substan de analizat calitativ se caut o pereche de n-alcani care dau picuri situate ca timp de retenie unul nainte, altul dup substana amintit. Din cele trei valori tR' msurate se calculeaz valorile I. Indicii de retenie Kovts exprim retenia relativ a unei
substane oarecare, fie cunoscut, fie necunoscut, raportat la cea a unor alcani normali, luai drept substane de referin (sau etalon). Formula de calcul, propus de autorul metodei,
pentru indicii amintii este:

I = 100 log t 'R,X - log t 'R,n log t 'R,n +1 - log t 'R,n + 100n
(6)
unde tR,X', tR,n' i tR,n+1' sunt timpii de retenie ajustai pentru substana necunoscut X respectiv alcanii cu n respectiv n+1 atomi de carbon. Valoarea n se alege astfel ca tR,n' < tR,X' < tR,n+1' adic, n aa fel ca timpul de retenie al substanei necunoscute s fie cuprins ntre timpii de retenie ai celor doi alcani. De exemplu, benzenul are timpul de retenie cuprins ntre cel al n-hexanului i al n-heptanului (ca i cum ar avea cam 6,5 atomi de carbon). Schimbnd condiiile experimentale se schimb tR', respectiv VR', dar niciodat valoarea indicilor de retenie I. Metoda se bazeaz pe faptul c practic nu exist substan chimic separat prin GC creia s nu i se poat asocia o pereche de n-alcani care au timpul de retenie, unul mai mare i altul mai mic dect substana respectiv. Pentru seria omoloag a alcanilor este respectat ecuaia: log(tR') = an + b (7) unde a i b sunt nite constante numerice gsite pe cale experimental, care sunt aceleai pentru o coloan i condiii fizico-chimice date. Se observ c n formula valorii I, termenul b se va reduce i factorul a se va simplific. Astfel, indicele Kovts, I, va depinde doar de numrul aparent de atomi de carbon ai substanei respective - constant. Experimental se procedeaz astfel: dup cteva ncercri preliminare se injecteaz mpreun cei doi alcani, cu Cn respectiv Cn+1 mpreun cu substana de analizat, X iar dup msurarea pe cromatogram a valorilor tR' pentru toate trei picurile componentelor amestecului, prin nlocuirea acestora n formula precedent sau pe cale grafic, se obine indicele Kovats, I (v. fig. 12).
Fig. 12. Calculul grafic al indicelui Kovts (I = 100nx) Analiza cantitativ
n anumite condiii (pe poriuni liniare ale rspunsului detectorului, condiii experimentale identice etc.), suprafaa dintre linia de baz i curba picului cromatografic semnalul analitic - este proporional cu cantitatea de component injectat. Deci, pe
domeniul liniar al detectorului, oricare ar fi acesta, exist relaia:

Masa injectat = K(Aria picului)
unde K este o constant numeric. Aceast proprietate poate servi pentru construirea unei
curbe de etalonare fiind general valabil att n cazul GC ct i n celelalte tehnici
cromatografice. Se poate i aici aplica metoda adausului standard, mai ales la domenii liniare largi. Pentru valori tR' mici, cnd picurile sunt i ascuite i nguste, se poate utiliza n locul ariei nlimea sa - cu rezerva unei pierderi din precizia determinrii. Amintim n cele ce urmeaz cteva practici de baz legate de analiza cantitativ folosind ariile picurilor.
Metoda factorului de rspuns
Cnd se dovedete c detectorul rspunde la fel de bine pentru fiecare component al amestecului, aria relativ a picurilor este proporional cu cantitatea diverselor componente. Aceast condiie este ndeplinit extrem de rar. De exemplu, sensibilitatea detectorului bazat pe conductibilitatea termic a gazelor depinde de natura substanelor iar a celui bazat pe ionizarea n flacr are rspunsul dependent de numrul de atomi de carbon din molecul. Pentru aceste cazuri este necesar ca toi componenii analizai s aib determinai n
prealabil cte un factor de rspuns, F. Factorii de rspuns se obin cu ajutorul formulei:
F=
C X/ CS A X/ A S
(8)
unde cu CX i CS s-au notat concentraiile componentelor X respectiv a substanei etalon (standard), S, iar AX i AS sunt ariile picurilor corespunztoare acestora. Semnificaia fizic a factorului de rspuns este aceea c indic de cte ori este mai mare raportul concentraie per semnal analitic n cazul unui component al probei fa de etalonul ales.
16
Metoda standardului (etalonului) intern
De multe ori apar fluctuaii neateptate n condiiile experimentale de la o prob la alta. Pentru evitarea surprizelor de acest gen (i a erorilor aferente analizelor) se utilizeaz, analog cu alte metode instrumentale, un standard intern, diferit de substana de analizat. Acesta este o substan pur cunoscut, introdus intenionat n amestecul care constituie proba, i totodat aflat pe cromatogram n vecintatea componentelor de analizat, de fiecare
dat n aceeai cantitate. Motivul introducerii este tocmai acela c raportul dintre ariile unui
pic oarecare i standardul intern este constant, indiferent de debitul gazului sau al altor perturbaii uoare ale condiiilor experimentale, tocmai datorit asemnrii fizice dintre substana etalon i prob. Analitic, concentraia necunoscut se calculeaz, n acest caz, n funcie de standardul intern (pentru deducie vezi Anexa) i proba cunoscut: C X,N = A X,N A SI,S C X,S A X,S A SI,N (9)
unde CX,N este concentraia substanei X n proba de analizat (necunoscut), CX,S concentraia substanei X, ce urmeaz a fi analizat, n proba etalon (cunoscut), AX,N - aria picului substanei X n proba de analizat, ASI,N - aria picului corespunztoare standardului intern din proba necunoscut, ASI,S - aria picului standardului intern n proba etalon. Se observ c raportul ASI,N /ASI,S, apropiat de unu, corecteaz micile abateri care apar la analiza probei necunoscute n timpul cromatografierii, n raport cu proba cunoscut, de concentraie CX,S (denumit prob etalon i executat pe o alt cromatogram, separat). Ariile ce intervin n raportul amintit se refer la aceeai cantitate din aceeai substan - standardul intern - coninut att n proba necunoscut ct i n cea cunoscut.
Determinarea ariei picurilor Determinarea ariei picurilor i.e. semnalul analitic al metodei - se poate realiza prin
mai multe procedee, multe dintre acestea mai mult de importan istoric: 1. Metoda triangulaiei bazat pe aproximarea picului cu un triunghi i calcularea ariei prin nmulirea limii picului la jumtate din nlimea sa, w1/2, cu nlimea acestuia, h (picul se consider gaussian). 2. Metoda planimetrrii, se bazeaz pe msurarea ariei propriu zise. 3. Metoda integratorului - utilizeaz un aparat, numit integrator, ce d un semnal proporional cu aria de sub pic.
228
4. Ce pri ale cromatografului se gsesc n etuva termostat? 5. Cu ce dispozitive se poate introduce proba ntr-un cromatograf de gaze? 6. Ce este un septum i unde se gsete acesta n GC? 7. Denumii doi dintre cei mai utilizai detectori n GC. 8. Pe ce principiu funcioneaz catarometrul? 9. Ce componente nu pot fi analizate prin FID? 10. Care sunt mrimile preferate n analiza calitativ prin GC? 11. Ce carburant alimenteaz flacra din detectorul cu ionizare n flacr? 12. La ce componente este cel mai sensibil detectorul cu fotoionizare? 13. Pe ce principiu funcioneaz detectorul cu captur de electroni? Cine provoac n acest caz ionizarea componentelor separate? 14. De cte tipuri sunt coloanele gaz cromatografice? 15. Care sunt cele mai importante faze staionare solide? 16. Care sunt cele mai importante clase de faze staionare lichide? 17. Ce este ecuaia lui Van Deemter i la ce servete? 18. De ce s-a introdus indicele de retenie Kovacs pentru analiza calitativ? 19. Ce este factorul de rspuns n cromatografia de gaze?
229
Cromatografia de lichide de nalt performan (HPLC) Este uor s inventezi lucruri uimitoare; dificultatea const n a le perfeciona pentru a le da o valoare comercial T. A. Edison (1847-1931)
Cromatografia de lichide de nalt performan (HPLC)

Introducere
Cromatografia de lichide de nalt performan (HPLC [112]) acoper azi, n proporie aproximativ 80%, analiza substanelor moleculare: organice, organo-metalice i anorganice inclusiv compuii foarte polari sau labili termic precum i compuii cu mas molecular ridicat (naturali sau sintetici). De aceea, mpreun cu cromatografia de gaze constituie un punct de sprijin important n analizele chimice moderne. Dei eficacitatea coloanelor nu o egaleaz nc pe cea din GC, prin faptul c se poate modifica, pe lng faza staionar, i faza mobil, cromatografia de lichide (LC) face posibile separri i analize uneori imposibil de realizat prin alte tehnici. Cuplajul cu spectrometria de mas a transformat, n ultimul timp, aceast metod n principalul mijloc de analiza a compuilor moleculari naturali sau
sintetici, constituind unul din pilonii pe care se sprijin chimia sintetic actual i pe care s-a
dezvoltat biochimia i biotehnologia modern.
Fig. 1. Prezentarea schematic a unui cromatograf de lichide (HPLC) modern
Metoda constituie o evoluie a unei metode mai vechi, cromatografia pe coloan clasic, care servea n primul rnd la izolarea preparativ a compuilor naturali. Prin introducerea pompelor i n consecin, lucrndu-se la presiuni tot mai ridicate (200atm), dezvoltarea unor faze staionare performante, de dimensiuni tot mai mici (recent constituite din granule de faze staionare sferice, cu diametre 2-5m), n coloane tot mai scurte (3-10cm) s-a ajuns, ncepnd cu anul 1969, la configuraia actual (fig. 1). Se poate observa c din
[112] HPLC este prescultarea denumirii internaionale: High Performance Liquid Chromatography (l. engl.) Chimie Analitic i Instrumental 231
17
rezervoarele coninnd unul sau mai muli solveni pompa (sau pompele), alimenteaz coloana cu eluent (de regul un amestec de doi sau mai muli solveni). n imediata vecintate a coloanei se introduce proba, automat, prin intermediul unui ventil cu by pass [113]. n coloana aflat ntr-o etuv termostat, are loc separarea propriu-zis. Efluentul coloanei intr ntr-un detector de unde componentul, dac este separat complet, poate fi colectat i izolat, cu ajutorul unui colector de fraciuni. Semnalul este nregistrat fie cu un nregistrator, fie direct n memoria unui calculator. n esen, un cromatograf analitic HPLC are structura din fig. 2 unde nu s-a mai prezentat colectorul de fraciuni, interesant doar din punct de vedere preparativ. Se poate observa asemnarea cu GC singura deosebire major constituind-o sursa de eluent - pompa. n cele ce urmeaz se vor prezenta cele mai importante aspecte deoarece volumul de informaii publicate este deosebit de amplu, un mare numr de date existnd chiar pe reeaua Internet [114]. Solvent Pomp Injector Coloan Detector nregistrator Fig. 2. Schema bloc a unui cromatograf HPLC
[113] Este vorba de un ventil cu 6 ci prevzut cu o bucl cu volum cunoscut [114] http://hplc.chem.shu.edu/NEW/HPLC_Book/index.html 232 Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
Pompe pentru HPLC
Pompa este considerat una dintre cele mai importante componente ale HPLC deoarece permite realizarea unui debit constant al eluentului prin ntreg sistemul: injector, coloan, detector mrind deosebit de mult viteza separrii. ntr-un cromatograf de lichide pot exista una sau mai multe pompe, fiecare furniznd o presiune care poate atinge 20mii kPa (cca. 200atm). Presiunea deosebit este necesar deoarece coloana are o umplutur de finee mare i, n lipsa presiunii, debitul ar fi nepractic de mic. Exist n uz dou tipuri principale de pompe, clasificate astfel n funcie de debit:
pompe cu presiune constant (i debit variabil) i pompe cu debit constant.
Pompele cu presiune constant sunt mai simple (a se citi ieftine) i nu prezint pulsaii n funcionare (care nu ar permite obinerea unei linii de baz netede). Acestea, prezint dezavantajul c debitul trebuie frecvent modificat pentru a se menine ct mai constant, ceea ce la separri de durat pune probleme, deoarece prin obturarea coloanelor debitul se modific continuu. Se nelege c orice modificare de debit (datorit viscozitii sau temperaturii eluentului i a structurii umpluturii) afecteaz timpul de retenie i totodat semnalul detectorilor, n majoritate sensibili la concentraie. Pompele cu debit constant nu mai prezint dezavantajele de mai sus. De-a lungul timpului s-au selecionat dou variante: pompele cu piston (alternative) i pompele de tip
sering (cu deplasare pozitiv). La primele, cele mai utilizate, micarea du-te-vino a
pistoanelor i a supapelor cu bil permit o funcionare indefinit dar presupun existena unor
atenuatoare de pulsaii - dispozitive care s elimine micile variaii de debit. Acestea constau
dintr-o alternan de mai multe rezistene, de exemplu tuburi subiri i capaciti - care pot fi incinte cu perei elastici, fie chiar manometre. Pompele cu presiune constant, asemntoare cu o sering dar avnd o capacitate mai mare, pompeaz continuu pe toat durata separrii, pistonul deplasndu-se cu o vitez liniar constant dar dup fiecare curs este necesar oprirea debitului i reumplerea cu solvent a corpului pompei. Dei solvenii utilizai se degazeaz pentru a se reduce efectele corozive ale oxigenului, datorit presiunilor ridicate la care se lucreaz, coroziunea este totui deosebit. De aceea aceste pompe (corpul, cilindrii, garniturile i supapele) se execut din materiale rezistente la coroziune: safir, agat, teflon sau aliaje speciale.
233
17
Sisteme de introducere a probei
n cazul HPLC injecia probei trebuie fcut ntr-un timp ct mai scurt, pentru a nu deranja regimul dinamic al eluentului prin coloan i detector. Dificultatea provine de la presiunea ridicat la care lucreaz coloana (20mii kPa). Sistemul cel mai utilizat n cromatografele de lichide este ventilul cu 6 ci, numit i ventil de introducere a probei, prevzut cu bucle interschimbabile (fig. 3).
Proba (soluie) Coloana Ieire exterioar Pompa Bucla Pompa Bucla Coloana Ieire exterioar Proba (soluie)
Fig. 3. Ventilul pentru introducerea probei (cu 6 ci); lucreaz n dou etape: A - alimentarea buclei cu proba; B - dup o rotire cu 60 n sensul acelor de ceasornic, antrenarea probei din bucl n coloan
Deoarece eluentul ader la perei, pentru completa ndeprtare a sa n momentul alimentrii buclei cu prob, este necesar injectarea prin bucl a unui volum de cel puin de trei ori volumul acesteia, nainte de comutarea pe analiz. Bucla lucreaz n dou etape. Etapa A (fig. 3-A) n care bucla este umplut cu prob cu ajutorul unei seringi sau n alt mod. Apoi are loc comutarea pe analiz (fig. 3-B) cnd prin rotire cu 60, n direcia acelor de ceasornic, manual sau automat, bucla este parcurs de eluentul de la pomp i coninutul acesteia este antrenat n coloan. Volumul probelor pentru coloane obinuite (25cmx4.6mm) este de 1050l. Evident aceste ventile sunt confecionate din materiale rezistente la coroziune i la solveni (oel inoxidabil, tantal, teflon etc).
234
Coloanele n LC
Locul n care se petrece separarea propriu-zis i - n funcie de calitatea acesteia - se mrete sau micoreaz raportul semnal/zgomot, este coloana cromatografic. Dei muli autori denumesc coloana piesa cea mai important dintr-un cromatograf, acesta din urm, fiind format dintr-o serie de componente, rezult c fiecare compartiment n parte, contribuie separat la obinerea rezultatului analitic. Pentru un practician din domeniul LC ns, locul unde acesta intervine efectiv i unde se concepe logic separarea este ntr-adevr coloana.
Corpul coloanei i mecanisme de separare
Materialul din care se confecioneaz corpul coloanei n LC trebuie s asigure acesteia rezistena mecanic adecvat presiunilor nalte (20mii kPa) precum i rezistena la coroziune fa de faza mobil. n majoritatea cazurilor a fost preferat oelul inoxidabil 316 lucios. Acesta rezist la majoritatea solvenilor, excepie fcnd doar srurile halogenilor, n special n soluie puternic acid. Alte alternative o constituie coloanele compozite: sticl sau plastic n interior - oel inoxidabil sau material plastic n exterior.
Fig. 4. Aspectul coloanelor din LC: coloan analitic (stnga), semipreparativ (dreapta)
Din punctul de vedere al geometriei (fig. 4), aceste coloane sunt cilindrice, iar dimensiunile depind, n primul rnd, de dimensiunea granulelor i porozitatea umpluturii. Astfel diametrul coloanelor variaz ntre 0.3-5cm iar lungimea poate fi ntre 3-25cm. Pentru scopuri preparative, n cazul unor componente necunoscute, se utilizeaz chiar diametre mai mari. Cu ct umplutura este mai fin, cu att coloana este mai scurt. Pentru a se reine eventualele impuriti sau componeni care nu pot prsi coloana (fiind reinui practic ireversibil) se folosesc adesea precoloane care, fiind de dimensiuni mai mici (acelai diametru i lungimi de 0.4-1cm), pot fi nlocuite mai des, evitndu-se astfel scoaterea prematur din funcie a coloanei principale. Pentru a nu fi antrenat faza staionar n afara coloanei, aceasta este blocat la capete de dou discuri metalice, poroase, avnd diametrul porilor ntre 0.510m. De asemenea pentru a nu se lrgi prea mult prin coloan zona cromatografic (cu diluarea ce are loc simultan), tot volumul mort ale acesteia (goluri n coloan, tubul de aduciune de la injector, tubul de evacuare spre detector) trebuie redus la minim. Se cunosc pn n prezent mai multe mecanisme de separare prin coloane, care depind mult de fazele mobil i staionar. Mai exact, depind de natura fenomenului fizico-chimic pe
17
care se bazeaz retenia difereniat i separarea. Metodele LC (HPLC) se pot clasifica, dup mecanismele principale amintite, astfel: cromatografie de adsorbie, cromatografie de repartiie, cromatografie ionic, cromatografie de excluziune steric. Fiecare dintre aceste variante este preferat n cazul unor grupuri de substane, asemntoare structural (vezi fig. 7), neexistnd din pcate un mecanism universal. Se disting dou moduri de realizare a cromatografiei de repartiie: Cromatografie de repartiie direct (sau cu faze normale - clasic); Cromatografia de repartiie cu faze inversate - metoda preferat n zilele noastre - pe care se realizeaz cele mai numeroase separri. n primul caz faza staionar este format dintr-un lichid polar iar faza mobil dintrun solvent organic nepolar iar n al doilea, situaia se inverseaz: lichidul imobil este nepolar iar faza mobil este un amestec de solveni polari. De exemplu, una dintre cele mai rspndite
faze inversate este cea staionar - silicagel, iar cea mobil - un amestec ap, metanol, acrilonitril (sau tetrahidrofuran). O separare reuit pe o astfel de faz este prezentat n fig. 5. 1. Izoproturon 14. Simazin 2. Profam 15. Bromacil 3. Propazin 16. Cianazin 4. Terbutilazin 17. Atrazin 5. Linuron 18. Carbaril 6. Propanil Coloan: Supelcosil (SiO2) 7. Prometrin LC-ABZ, 25x4,6cm; 8. Fenamifos Granulaia: 5m, t = 40C; 9. Fenitrotion Eluent: 10 pn la 90% 10. Cafein acetonitril n ap 0.5%/min; 11. Metamitron Detector: UV la 225nm; 12. Fenuron Debit: 1mLmin-1; 13. Metoxuron Fig. 5. Separarea unor pesticide prin HPLC
Cromatografia ionic (IC) are mai multe variante. Cea mai frecvent ntlnit astzi
folosete n calitate de faz mobil solveni apoi diluai de electrolii iar ca faz staionar schimbtori de ioni. Metoda va fi descris ntr-un capitol separat datorit implicaiilor actuale n analizele de ape legate de protecia mediului. O alt variant denumit cromatografie prin
perechi de ioni folosete faze staionare capabile s fixeze anumii ioni care fixeaz ioni de
semn contrar (perechi de ioni). Acest mecanism se prefer n cazul substanelor ionice sau ionizabile.
n fine, mai exist cromatografia de afinitate, o variant considerat uneori un mecanism separat, se bazeaz pe afinitatea extrem de specific a unor molecule cu alte molecule fixate pe suport. Dei este vorba de interaciuni coordinative sau alte afiniti de natur biochimic dintre suport i componentele de separat mecanismul poate fi asemnat cu adsorbia sau chiar cu schimbul ionic dar mult mai specific. Suportul este materialul pe care ligandul este fixat (ideal este ca acesta s fie rigid, stabil i s aib o suprafa mare). De exemplu agarul este cel mai cunoscut suport, de asemenea se mai folosete celuloza, dextranul i poliacrilamida. Ligandul este fixat pe gelul de agaroz fiind un polimer al D-galactozei i al 3,6-anhidro-L-galactozei i poate fi folosit la o presiune de 1atm i ntr-un interval de pH de la 4 la 9. Avndu-se n vedere complexitatea problemei i diversitatea acestor perechi de faze mobile i staionare, vom limita n cele ce urmeaz discuia doar la cele mai utilizate dintre acestea pentru domeniul analizei poluanilor mediului. n funcie de componentele de separat i tipul de mecanism preferat, faza mobil se alege folosind schema din fig. 6. Caracter Cromatografie ionic (IC) Ionic cu perechi de ioni Ap cu faz invers Neionic cu faz polar legat <2000 lichid-solid (CLS) Polar excluziune steric Proba Solveni organici CLS Nepolar IC excluziune steric Ap Excluziune steric > 2000 Schimb ionic Solveni organici Interaciuni hidrofobe Fig. 6. Tipurile de mecanisme de separare cunoscute n LC Mas molecular Solubil n
237
17
Faza staionar Silicagelul (SiO2) este considerat materialul cel mai important utilizat ca faz
staionar. Acesta a devenit, n ultimii 20 de ani, doar suportul adevratelor faze - fazele chimic legate - ceea ce nu schimb importana sa. Silicagelul s-a obinut la nceput n form granular, neregulat, apoi n form sferic (fig. 7).
O - Si O - Si O - Si O - Si O - Si O - Si O - Si Fig. 8. Aspectul schematic al unei Fig. 7. Aspectul granulelor de silicagel folosite granule sferice cu faz staionar chimic legat pe suprafaa suportului frecvent la umplerea coloanelor din HPLC Indiferent de form, granulaia trebuie s fie uniform (se elimin partea fin) pentru c astfel caracteristicile curgerii eluentului sunt mult mbuntite. Obinerea silicagelului sferic se face plecnd de la soluii coninnd silicat de sodiu dar i ali compui hidrolizabili ai siliciului (tetraclorur de siliciu, silicat de etil etc.). De la acetia, printr-o reacie cu apa urmat de o pulverizare i apoi de o sinterizare, procese vizibile pe fig. 9, se obin granule cu aspect sferic.
OH 2 HO Si OH 1
Compui ai Si(IV): Si(OEt)4], SiCl4, Na2SiO3.
OH
SiO2 coloidal (Sol)
3-10m
Fig. 9. Schema procesului de obinere a silicagelului cu granule sferice
Puritatea sa avansat este o condiie a bunei funcionri a materialului n LC deoarece prezena unor ioni metalici modific structura determinnd apariia unor centre de adsorbie
puternice i de aici apariia unor cozi ale picurilor. Silicagelul are o structur tridimensional cu o reea de baz, tridimensional, format din legturi Si-O-Si iar pe suprafaa porilor sau cea exterioar mai prezint grupe silanol, Si-OH. Punile de oxigen apar ntre atomii de siliciu cu ocazia polimerizrii acidului silicic, Si(OH)4. n ultimul timp a mai aprut un tip de faz staionar cu performane ridicate. Este vorba de coloanele monolit, realizate din aceleai materii prime i printr-o tehnologie asemntoare din punct de vedere chimic cu cea din fig. 9. Coloana este format direct n tubul rigid (metalic), de unde i numele. Aceasta nu mai are granule dup cum se poate observa din fig 10. Prin noua tehnologie, s-au obinut coloane cu performane superioare fa de cele umplute cu granule.
H O Si I O Si II H O Si III H
Fig. 10. Aspectul la microscopul electronic al coloanelor monolit
Fig. 11. Principalele tipuri de grupri silanolice superficiale
Exist trei tipuri de grupe silanol superficiale I- legate, II- reactive i III- libere (v. fig. 11) cu tria relativ I < III < II. n funcie de tehnologia de obinere difer i porozitatea intern, suprafaa specific, rezistena la compresiune i polaritatea. Silicagelul este considerat, n general, un material puternic polar. Grupele funcionale de pe suprafa au un caracter acid (pKa pentru grupele silanol este similar fenolului). Pentru a se reduce cozile picurilor pe care le dau centrele de adsorbie puternice, silicagelul se poate dezactiva, de exemplu prin adaos controlat de ap (3-8% ap). Cteva mrci de silicagel comercial sunt prezentate n tabelul 2.
Tabelul 2. Cteva dintre cele mai cunoscute tipuri de silicagel pentru HPLC Diametrul Suprafaa pH-ul n Tipul Marca porilor specific suspensie 10% particulelor Zorbax 300 30 39 5.4 Sferice Vydac TP 32 82 4.1 Sferice Hypersil 12.5 149 8.2 Sferice Spherisorb 8 190 7 Sferice Polysil 6 245 6.5 Neregulate LiChrosorb 10 297 6.7 Neregulate Rosil 8 357 8.4 Sferice Rsil 6 433 8.0 Neregulate
239
17
Se poate observa c suprafaa specific scade cu creterea diametrului porilor iar pHul acestora se situeaz n domeniul 5.4-8.4.
Ali adsorbeni mult mai puin utilizai sunt alumina, oxidul de zirconiu, crbunele
macroporos, polimerii poroi (de ex. spuma poliuretanic).

Fazele staionare chimic legate au aprut n urma ncercrilor mai puin eficace de
utilizare a unor faze staionare lichide depuse pe un suport poros solid - permeabil pentru eluent (a fost preferat kieselgur-ul sau pmntul diatomitic - n esen tot SiO2 dar cu pori mari i o suprafa mult mai mic. Deoarece n toate aceste ncercri faza staionar era splat de pe suport de ctre eluentul n micare i n felul acesta deranja funcionarea detectorului, s-a recurs la soluia crerii unor faze care s fie fixate prin legturi chimice - mult mai puternice dect cele fizice. Aspectul unei faze staionare chimic legate poate fi imaginat ca n fig. 8, adic catenele legate alctuiesc o adevrat pdure de molecule care se comport fizic asemntor unui strat subire, aderent la suport (imposibil de dizolvat) dar cu o valoare a factorului de capacitate k mai favorabil. Dac gruprile silanol Si-OH de pe suprafaa silicagelului sunt puse n situaia de a reaciona cu anumii derivai organometalici, se poate realiza sinteza unor faze chimic legate. Cele mai stabile legturi sunt cele care au la baz apariia structurilor legate prin intermediul unei puni: Si-O-Si. Obinerea acestora se realizeaz prin reacii de condensare [115] la care particip grupele silanol - superficiale, efectuate n prezena unor clorsilani. Un exemplu este reacia: SiOH + ClSi(CH3)2R -HCl Si-O-Si(CH3)2-R unde cel mai frecvent R = C8H17 sau C18H37. Prin astfel de reacii (astzi se cunosc mai multe variante) suprafaa silicagelului se acoper cu un strat monomolecular de dimetil-alchilsiloxan nepolar. Pentru se mri i mai mult stabilitatea s-a recurs la soluia legrii radicalului de hidrocarbur R prin intermediul mai multor legturi cu suprafaa silicagelului. Stratul de hidrocarbur grefat de suport se comport ca un strat foarte subire, uniform, de lichid nepolar dar mult mai stabil. Aceste faze stau la baza cromatografiei cu faze inversate. Polaritatea acestor faze se poate regla prin legarea n cadrul unor catene laterale ale radicalului de hidrocarbur R, de exemplu a unor funciuni aminopropil, cianopropil, benzil, crendu-se astfel o mare diversitate de faze staionare.
[115] Prin reacii de condensare se neleg procesele prin care se leag dou molecule mai mari, eliminndu-se o molecul mic (HCl). 240 Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
Faza mobil
Faza mobil sau eluentul n LC nu reprezint un mediu inert ca gazul purttor din GC. De aceea alegerea fazei mobile se face aici n perfect concordan cu faza staionar. Astfel faza mobil difer destul de mult n funcie de tipul interaciunilor componentelor separate cu faza staionar din coloan. Singurele caracteristici generale sunt urmtoarele: (1) faza mobil trebuie s aib o viscozitate cobort, (2) aceasta trebuie s dizolve bine componentele, (3) nu trebuie s afecteze funcionarea coloanei i (4) trebuie s permit funcionarea detectorului. Unii elueni provoac migrarea unui anumit component mai repede prin coloan. Se spune c acetia au o trie relativ mai mare sau, altfel spus, au o putere de eluie mai ridicat. Aceast denumire provine de la faptul c factorul de capacitate, k, este mai mare i de aceea componentul migreaz mai repede. Dar totul depinde de trio-ul component - faz mobil - faz staionar. Astfel, pe o faz staionar polar, folosind o faz mobil nepolar, se vorbete de cromatografie de repartiie normal (sau cu faze directe). Din contr, pe o faz staionar nepolar utilizndu-se o faz mobil polar se vorbete de cromatografie de repartiie cu faze inverse (sau inversate). n acest ultim caz au devenit uzuale fazele mobile formate din amestecuri metanol - ap care n cromatografia de repartiie sunt considerate printre fazele mobile mai puin tari.
Tabelul 3. Cteva faze mobile (monocomponente) utilizate n cromatografia de repartiie n ordinea triei lor relative n LC de repartiie cu faze normale Faze normale Solveni Faze inversate Hexan Benzen Triclormetan Clorur de metilen Eter etilic Acetat de etil Acetonitril Metanol Ap
Pe o faz staionar polar, amestecul metanol-ap face parte dintre cei mai tari elueni cunoscui. n tabelul 3 se prezint civa dintre cei mai ntlnii solveni i ordinea n care crete tria lor relativ, n cele dou tipuri de cromatografie de repartiie. n cromatografia ionic (IC) se folosesc soluii diluate de electrolii ca: NaOH, NaHCO3, HCl, iar n cea de excluziune steric solveni simpli - evident compatibili cu polimerii, separai unii de alii dup dimensiuni. O alt cale de mbuntire a separrilor existent n LC (cale inexistent n GC) este
folosirea gradienilor de eluie. De exemplu, n GC, prin modificarea eluentului gazos nu se
17
constat nici o mbuntire a calitii separrii, n sensul mririi selectivitii. n HPLC, din contr, solventul are o contribuie important n procesul de separare, dar nu trebuie neglijat importana decisiv a cuplului faz mobil - faz staionar. Dei unii compui sunt reinui slab prin coloan, ieind destul de repede, cei reinui puternic ies din coloan dup un timp
cteodat nepractic de lung, lucru care determin diluarea n eluent a componentul n urma
parcurgerii coloanei, aceasta micorndu-se calitatea analizei. De aceea s-a recurs la introducerea treptat peste primul solvent (eluent), a unui al doilea solvent mai tare sau a celui de-al treilea, ceea ce n limbajul de specialitate se numete gradient de eluie (sau de concentraie). La ora actual soluia la care s-a recurs n practic const, n general, dintr-un sistem de ventile electromagnetice care permite intrarea solvenilor n aceeai pomp, prin intermediul unei camere de amestecare aflate la joas presiune. Este posibil i un alt montaj n care fiecare solvent are pompa proprie, comandat de un dispozitiv de control al debitului. Aceti solveni intr n camera de amestec i de aici n coloan. Gradienii de faz mobil pot fi foarte diferii n practic dar formele principale sunt cele descrise n fig. 12.
Timp Fig. 12. Cteva din cele mai cunoscute forme de gradieni de faz mobil
242
Concentraie
Detectori
Tehnica HPLC s-a dezvoltat o dat cu perfecionarea detectorilor. Am amintit c

detectorii n cromatografie sunt instrumente analitice specializate, situate la ieirea eluentului
dintr-o coloan i care pot nregistra continuu substanele separate de ctre aceasta. Deci detectorii constituie acea parte a instrumentaiei care permite s se observe modul cum decurge separarea prin coloan fr a se vedea componenii propriu zii ci doar semnalul lor. ntruct coloanele de separare performante au capaciti de ncrcare mici, sistemul de detecie trebuie s fie unul foarte sensibil. Totodat, pentru c n LC volumul de prob este de ordinul microlitrilor (8-10l), volumul detectorilor trebuie s fie de volum apropiat pentru a se putea sesiza n mod continuu picul cromatografic. n calitate de instrumente se poate utiliza, n principiu, oricare dispozitiv de analiz chimic cunoscut, pentru probe lichide, precum i orice combinaii de instrumente fizice. De exemplu, n ultimul timp, combinaia dintre un detector refractometric i unul bazat pe difuzia luminii este extrem de eficace n analiza polimerilor n amestec cu monomeri sau oligomeri dintr-un material. Exist chiar posibilitatea creterii sensibilitii deteciei printr-o reacie chimic n urma adugrii, cu un debit controlat, a unui reactiv potrivit. Tehnica se numete
derivatizare i se poate practica chiar nainte de introducerea probei n coloan, dar i dup
ieirea din coloan a componentelor separate. Metoda a fost utilizat pn n prezent n special legat de metodele spectrofotometrice (colorimetrice) sau fluorimetrice i mai ales pentru analiza unor amestecuri de compui numeroi avnd aceleai funciuni reactive (de exemplu aminoacizi). Caracteristicile detectorilor sunt asemntoare cu ale celorlalte instrumente analitice i oarecum similare cu cele descrise la metoda GC.
Detectori spectrofotometrici n UV-VIS
Acest grup de detectori sunt cei mai folosii detectori pn n prezent, att n LC, ct i n HPLC. Pentru a putea fi utilizai, compuii separai cromatografic trebuie s fie colorai adic s absoarb lumina pe domeniul de lungimi de und al detectorului. Pe de alt parte, eluentul trebuie s fie practic transparent pentru acelai domeniu spectral. Legea fizic pe baza creia funcioneaz aceti detectori a fost prezentat - este vorba de legea Lambert-Beer (A = lC). Deci unitile vor fi uniti de absorban, adimensionale. De aceea limita de detecie sau zgomotul de fond se prezint n cazul acestor detectori n AUFS (prescurtare de la Absorbance Units Full Scale = uniti de absorban raportate la ntreaga scal, l. engl.). Astfel n cadrul instrumentelor actuale sensibilitatea este de 0,001 AUFS cu zgomotul de fond de 1%.
17
Motivul principal al popularitii acestor detectori este acela c numeroasele substane organice, anume cele care conin legturi duble (electroni ), respectiv au grefate funciuni organice cu electroni neparticipani, absorb lumina n UV-VIS. Este vorba de toate hidrocarburile olefinice i aromatice precum i derivaii tuturor hidrocarburilor cu diferite funciuni organice (=C=O, =C=S, -N-O, -N=N-, -NH2). ntre acestea se includ i numeroasele combinaii de interes biologic ca enzime, acizi nucleici etc. Un mare avantaj al acestor detectori este faptul c sunt insensibili la micile variaii de debit i temperatur. Celula de detecie face parte dintr-un spectrofotometru i are un volum extrem de mic, de 8-10l, respectiv un diametru interior de 1mm la o lungime a celulei de10 mm. Construcia acestora este ilustrat n fig. 13. Efluent
Lumin
Fig. 13. Celula unui detector bazat pe spectrofotometrie de absorbie n UV
Se pot distinge i n cazul acestei clase de detectori mai multe tipuri de detectori.
Detectorii monocromatici au fost primii utilizai, fiind mai ieftini deoarece lucreaz
doar la o lungime de und. Modelul cel mai rspndit se compune dintr-o surs luminoas cu deuteriu sau cu vapori de mercur, un monocromator care separ un domeniu ngust (de ex. linia 254nm a mercurului) i un detector. Schema bloc a unui astfel de detector este prezentat n fig. 14.
Detectorii policromatici mai frecvent utilizai n cromatografele HPLC moderne
permit i selectarea lungimii de und la care se lucreaz, dar chiar pot nregistra electronic absorbana celulei la mai multe lungimi de und simultan. Acest mod de lucru d o mai mare siguran analizei, n sensul c permite stabilirea puritii, adic dac picul constituie un semnal dat de o singur substan sau de un amestec (ceea ce se cunoate sub numele de stabilirea puritii picului). Aceti detectori conin celula amintit montat ntr-un
spectrofotometru cu reea de diode.
SursMonocromatorCelulnregistrator
Fig. 14. Schema bloc a unui detector HPLC spectrofotometric Detectori refractometrici Detectorii refractometrici, au la baz legile refraciei luminii. Principiul de
funcionare al acestor detectori are la baz legea lui Fresnel - de transmitere a luminii prin medii transparente avnd un indicele de refracie dat. Astfel, un fascicul luminos (mono sau policomponent) trece printr-o celul cu dou compartimente unul coninnd doar eluentul pur iar cellalt faza mobil care prsete coloana (fig. 15).
La coloan
Eluent pur
Evacuare
Efluent plus component
Fig. 15. Principiul de funcionare al unui detector refractometric
Diferena dintre indicii de refracie pentru soluiile aflate n cele dou compartimente vor fi practic nule, atta timp ct din coloan iese doar eluentul pur, dar diferit n momentul n care n eluent mai apare un component separat - antrenat de ctre eluent din coloan. n momentul ieirii unui component are loc o deplasare a poziiei fascicolului emergent din detector - deplasare care este proporional cu concentraia i sesizat de ctre detectorul D. n cazul acestui tip de detector sunt posibile i picuri negative, ceea ce face necesar aducerea liniei de baz la jumtatea scalei lucru care, pe lng sensibilitatea relativ cobort (10-5molL-1), constituie un dezavantaj. Acest detector este universal, dar nu poate fi utilizat n cromatografia cu gradieni deoarece, n acest caz, compoziia eluentului la intrarea n coloan difer de cea de la ieire i se modific continuu, neexistnd o linie de baz. De asemenea fenomenul este foarte sensibil la temperatur (0.0001C) fiind necesar termostatarea, att a detectorului ct i a coloanei.
Detectorii conductometrici
Acest tip de detectori se utilizeaz cu precdere n cromatografia pe schimbtori de ioni (v. cap. 18) i sunt sensibili la ioni anorganici sau organici inclusiv acizi organici. Sunt
17
aadar detectori specifici. Sunt suficient de sensibili (500pg-1ng). Principiul de funcionare este descris schematic n fig. 16. Tehnic este vorba de o celul miniaturizat cu totul analog unei celule conductometrice.
Faz mobil
Faz mobil plus prob
Fig. 16. Principiul de funcionare pentru celula conductometric Ali detectori
Pe lng cei amintii, mai rspndii, n practica analitic se mai ntlnesc i ali detectori prezentai schematic n tabelul 4. Dintre acetia o meniune special trebuie fcut pentru cei bazai pe spectrometria de mas i FT-IR [116], care au permis determinri calitative uneori imposibil de realizat prin alte variante de detecie n lipsa etaloanelor cunoscute.
Tabelul 4. Ali detectori utilizai n LC Limita de Detectori LC Caracteristici detecie [117] Sensibilitate 10-10M Fluorimetrici 1-10pg Este necesar uneori derivatizarea Electrochimici Sensibilitate 10-10M 10pg = 1ng (Amperometrici) Compui oxidabili sau reductibili Bazai pe Necesare coloane capilare 100pg - 1ng Spectrometria Necesar pulverizarea de Mas (MS) Pre de cost ridicat FT-IR 1g Pre de cost ridicat Difuzia luminii 10g Adecvai pentru macromolecule Activitate optic 1ng Pentru substane optic active Electrozi ion Doar pentru ioni sau compui 10ng selectivi ionizabili Fotoionizare 1pg - 1ng -
Disponibilitate comercial Da Da Da Da Da Nu Nu Nu
Aceti detectori permit ca, pe baza unei baze de date format din spectre cunoscute, s se obin compuii cei mai apropiai (3 dintre acetia), din toate substanele chimice cunoscute, care ar putea fi prezeni n prob.
[116] FT-IR reprezint prescurtarea denumirii, n l. engl. a Spectrometriei n IR cu transformat Fourier. [117] Limita de detecie se calculeaz prin cantitatea de substan injectat care d un semnal de 5 ori mai mare decr valoarea a zgomotului de fond pentru o substan cu masa molar de 200 gmol-1 injectat n 10l pentru o coloan normal i n 1l pentru coloane capilare. 246 Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
1. Care este locul HPLC n analizele instrumentale moderne? 2. Descriei prile componente ale unui cromatograf LC. 3. Cte tipuri de pompe se utilizeaz n HPLC? 4. Care este metoda cea mai folosit pentru introducerea probei n HPLC? 5. Care sunt principalele mecanisme de separare n LC? 6. Prin ce se deosebete faza mobil n LC fa de GC? 7. Ce avantaj aduce utilizarea gradienilor de eluie? 8. Care este rostul unei precoloane? 9. Care sunt cele mai importante mecanisme de separare i care dintre acestea este cel mai utilizat n practica curent? 10. Ce fel de grupri funcionale de pe suprafaa silicagelului determin apariia unor cozi? 11. Cum se realizeaz fazele chimic legate pe silicagel? 12. Ce reprezint tria relativ a eluentului? 13. Cnd se folosete gradientul de eluie? 14. Ce dezavantaje au detectorii refractometrici? 15. Pentru ce substane se preteaz detectorii conductometrici?
247
Cromatografia ionic (IC) Nu spune niciodat oamenilor cum s fac un lucru; spune-le ce s fac i ei te vor surprinde prin ingeniozitatea lor George S. Patton Jr. (1885-1945), general american
Cromatografia ionic (IC)

Separarea prin schimb ionic
Utilizarea cromatografiei ionice a aprut datorit necesitilor de a analiza amestecurile de anioni, cationi sau compui polari - lucru dificil sau imposibil de realizat eficient prin celelalte variante ale cromatografiei de lichide. Aceast variant a cromatografiei de lichide de nalt presiune se bazeaz pe utilizarea coloanelor cu schimbtori de ioni respectiv a materialelor rezistente la agresivitatea acizilor, bazelor sau srurilor - substane a cror soluii apoase care servesc drept elueni. Schimbtorii de ioni sunt materiale solide - derivai ai unor polimeri reticulai (poroi), obinui prin legarea de catenele hidrocarbonate, ramificate, ale unor grupe funcionale aa cum sunt reprezentate schematizat n figura 1.
SO3- H+
CH2N+R3 HO-
Fig. 1. Cele dou tipuri principale de rini schimbtoare de ioni
Granulele de rin se solvateaz cu ap tinznd spre un volum limit maxim. Prin spaiile dintre catenele unui cationit pot ptrunde prin difuziune n faz lichid doar molecule neutre sau cationi, anionii fiind exclui. Ptrunderea n granule a ionilor de semn contrar este ngreunat i de un alt efect, numit efectul Donnan de membran, care apare pe suprafaa granulei i provoac o selectivitate a acesteia la ptrunderea ionului, n funcie de dimensiunile acestuia. Mai exist i un al treilea mecanism util n cazul substanelor neionice sau a celor ionice dar cu gruparea ionic identic dar cu geometria moleculei diferit - difuzia
prin granule. Analog stau lucrurile ntr-un anionit, cu deosebirea c de ast dat sunt exclui
cationii.
249
18
Dac pe o coloan umplut cu un cationit (vezi fig. 1-stnga) se introduce un amestec de doi ioni, s zicem cel format din sodiu i potasiu, acetia vor fi fixai pe rin, elibernd o cantitate echivalent de ioni hidroniu. Fenomenul chimic care are loc se poate scrie: R-H + Na+ R-H + K+
+
R-Na + H+ R-K + H+
Pompnd un eluent prin coloan, de exemplu o soluie diluat de acid clorhidric, ionii H din acid, fiind n concentraie mai mare, vor deplasa ionii fixai, prin echilibre ionice similare spre o poriune inferioar: R-Na + H+ R-K + H+ R-H + Na+ R-H + K+
iar acetia se vor putea fixa din nou, puin mai jos, pe alte centre de schimb din coloan. Procesul se repet ionii migrnd de sus n jos prin coloan. Deoarece gruprile funcionale -SO3- au o afinitate ceva mai mare pentru ionii de potasiu dect fa de cei de sodiu, primul grup de ioni (sau prima zon) care va iei din coloan va fi cel format din ionii de sodiu i abia dup un timp va iei grupul coninnd ionii de potasiu. Astfel se realizeaz separarea celor doi ioni. Similar stau lucrurile cu amestecuri mai complicate, uneori fiind necesare coloane mai lungi. ntruct cu ct diametrul granulelor este mai mare zonele sunt mai largi i, totodat, separarea mai de durat iar granulele se deformeaz mecanic, n timp mai uor, ulterior rina a fost aplicat sub form de pelicul subire pe un miez de sticl sferic, eficacitatea separrii i fiabilitatea coloanelor crescnd foarte mult.
Fazele mobile n IC sunt simple - soluii apoase diluate de acizi sau baze i doar cnd
este necesar, se mai adaug o concentraie cobort de metanol pentru a se facilita dizolvarea moleculelor puin ionizate n ap. Pentru separarea cationilor se utilizeaz ca faze staionare cationii (schimtori de cationi) i drept elueni, soluii de acizi, iar pentru separarea bazelor se folosesc anionii (schimbtori de anioni) i ca elueni soluii de baze, de exemplu, o soluie de hidrogenocarbonat de sodiu. Structura acestora este de cele mai multe ori diferit de a schimbtorilor de ioni obinuii (fig. 1) i va fi tratat mai detaliat n continuare.
250
Detecia
La prsirea coloanei ionii nu pot fi detectai suficient de sensibil, conductometric, n mod direct, deoarece au concentraii coborte i sunt coninui n eluentul format dintr-un electrolit - cu o concentraie comparabil sau chiar mai mare. De aceea s-a recurs la
supresorul ionic. Acesta a fost realizat pentru prima dat de un grup de cercettori american,
n 1975 (H. Small i colab.) iar iniial a constat dintr-o coloan-supresor, plasat n continuarea celei de separare, cu rolul de a transforma eluentul (un acid sau o baz tare) n ap. De exemplu, pentru eluentul amintit anterior - acidul clorhidric - coloana supresor este umplut cu o rin schimbtoare de anioni, avnd o capacitate de schimb mare (de tipul celei din fig. 1-dreapta) cu o formul general: R-OH. Prsind coloana de separare eluentul, coninnd acid clorhidric diluat, va ptrunde n coloana supresor unde se va petrece reacia: R-OH + (H+ + Cl-) R-Cl + H2O prin care acidul utilizat drept eluent se transform n ap - un neelectrolit. ntre timp, srurile se transform n hidroxizii corespunztori: R-OH + (Na+ + Cl-) R-OH + (K+ + Cl-) R-Cl + (Na+ + OH-) R-Cl + (K+ + OH-)
Apa fiind practic neionizat va permite detecia sensibil a hidroxizilor - total ionizai - ce au aprut din zonele formate iniial din cele dou sruri. Schema unui cromatograf ionic este reprezentat n fig. 2a iar n fig. 2b este redat distribuia concentraiilor speciilor ionice la ieirea din prima coloan, n punctul A (fig. 2a). Pe aceeai figur este prezentat conductan i la ieirea din supresorul ionic, n punctul B.
(a) (b) Fig. 2. Schema de principiu a cromatografiei ionice (IC) -(a) i a modului de aciune a supresorului ionic -(b). Aici RH este coloana de separare iar ROH, coloana supresor
18
Semnalul (n S adic micro-Siemens) este cel care ar fi dat de ctre un detector conductometric dac ar fi plasat n punctele A respectiv B. Deoarece i eluentul este format din ioni care conduc curentul, nainte de supresor semnalul va fi mai slab. Deci, cea de a doua cromatogram (fig. 2b) este chiar semnalul detectorului din IC. Dac se urmrete separarea a doi anioni, de exemplu Cl- i Br-, eluentul ar putea fi, nu un acid ci o baz diluat, de ex. NaOH, sau NaHCO3. n cazul acesta separarea se va realiza pe coloane de anionii i eluentul ar fi de exemplu NaOH, la ieirea din coloana de separare avem n eluentul folosit zonele separate ale srurilor anionilor supui analizei, adic NaCl i NaBr. Supresorul utilizat n acest caz va fi format dintr-o rin de forma R-H n exces pe care se va petrece reacia: R-H + (Na+ + OH-) R-Na + H2O n afar de detectorul conductometric se mai pot utiliza i alte tipuri de detectori cum ar fi cei amperometrici sau voltametrici.
252
Supresorul electrochimic Supresorul electrochimic (sau autosupresorul) din cromatografele ionice recente, a
nlocuit mica coloan cu schimbtori de ioni cu membrane schimbtoare (fig. 3) avnd aceeai compoziie i, n plus, schimbul ionic este accelerat prin electrodializ. n acest fel s-a mrit viteza procesului i s-a micorat volumul mort. Mai mult, a crescut durata de funcionare a detectorului. De exemplu n fig. 3 se prezint shematic principiul de funcionare a unui astfel de supresor electrolitic pentru cazul ieirii din coloan a oricror anioni, notai pentru simplitate cu X. Eluentul care a ieit din coloana de separare trece prin spaiul ngust dintre dou membrane. Dup transformarea eluentului n ap n interiorul supresorului electrolitic, iar a componenilor ionici separai n acizi, datorit membranei care, de ast dat este una cationic (RH), soluia intr n detector iar ulterior alimenteaz spaiul dintre membrane i cei doi electrozi: unul, pozitiv (+), respectiv cellalt, negativ (-). Fenomenul de electrodializ este redat mai detaliat n fig. 4. la canal Eluent la canal Membran semipermeabil Detector Recirculare
+ Fig. 3. Amplasamentul supresorului electrochimic la ieirea din coloan
Fig. 4. Principiul supresorului electrolitic bazat pe membrane schimbtoare de ioni n IC
Se poate observa cum membrana schimbtoare de cationi, R-H, permite transferul catonilor H+ (dinspre polul +) i Na+ (spre polul -) dar nu permite transferul anionului Xdatorit efectului Donnan. Tot datorit acestui efect nu traverseaz membrana nici ionul OH-. n detector intr, n cazul separrii unui amestec de anioni X-, respectiv Y-, doar acizii HX respectiv HY total disociai n ap. n consecin n detectorul conductometric, din cauza
lipsei de conducie a apei pure, raportul semnal/zgomot este mult mbuntit.
18
Aplicaii
Una din cele mai importante aplicaii este analiza speciilor anorganice, cum ar fi analiza cationilor i anionilor din ape, soluii sau fluide biologice dar i pentru analiza unor poluani (cum ar fi ionul NH4+ din apele naturale). Alte aplicaii imediate sunt analiza bilor de galvanizare sau a lichidelor de natur apoas coninnd sruri: sucuri de fructe, fluide industriale, alimente etc. Metoda permite i analiza unor specii organice polare cum ar fi acizii sau aminele.
254
1. Care component a instrumentaiei este sediul separrii cromatografice n cromatografia ionic? 2. Ce semnificaii au simbolurile GC, LC respectiv IC? 3. Care sunt eluenii folosii n IC? 4. Ce faze staionare utilizeaz cromatografia ionic? 5. Ce rezult din reacia RH + Na+ + Cl- ? Dar din reacia ROH + Na+ + Cl-? 6. Ce efect are supresorul ionic asupra deteciei? Ce rezultat are acesta asupra semnalului? 7. Ce detector se utilizeaz cu precdere n cromatografia ionic? 8. Care este dezavantajul supresorului ionic cu schimbtori de ioni, care a fost nlturat prin introducerea celui cu membran schimbtoare (electrochimic)? 9. Cu ce tehnic se pot analiza anionii Cl- i SO42- din ape?
255
Cromatografia planar (TLC) Adevrul pur i simplu este rareori pur i niciodat simplu Oscar Wilde (1854-1900)
Cromatografia planar (TLC)

O variant mai simpl a LC
Cromatografia planar (PC) ntlnit adesea sub denumirea de cromatografie n strat subire este cea mai simpl i ieftin dintre toate metodele cromatografice cunoscute. Mai este denumit i cromatografia de lichide a sracului. n literatura de specialitate se utilizeaz mai multe denumiri (cu prescurtrile asociate acestora). Pe lng termenul consacrat - cromatografia planar (planar chromatography - PC [118]) se mai ntlnesc denumiri ca cromatografia n strat subire de nalt performan (high performance thin layer chromatography - HPTLC) sau cromatografia de lichide planar (planar liquid chromatography - PLC).
Poziia final a frontului la eluie
Probe
Etalon Linie de start
1 2 0 Fig. 1. Placa cromatografic i poziiile relative ale spoturilor n aceast variant a cromatografiei de lichide, separarea nu mai are loc ntr-o coloan nchis ci pe o faz staionar similar, granular (poroas) dispus ntr-un strat subire, formnd un plan (fig. 1). Acest strat denumit subire, se realizeaz dintr-un adsorbent cu grosimi cuprinse ntre 100-250m i poate fi simplu sau legat adeziv de un plan rigid, fiind pe tot parcursul separrii n contact cu o faz gazoas - mai mult sau mai puin saturat cu vapori de eluent. Primul caz a fost mult utilizat n trecut n cazul aa-numitei cromatografii pe hrtie unde faza staionar consta dintr-o band de hrtie de filtru, confecionat din celuloz pur, sau, extrem de rar, prin folosirea unor plci din materiale ceramice sinterizate poroase. Cellalt caz mult mai utilizat (chiar n zilele noastre) face apel la straturi subiri realizate dintr-un adsorbent pulverulent (silicagel, celuloz, alumin, poliamid sau derivate ale acestora) dispuse n straturi subiri pe plci rigide din sticl sau, pe folii flexibile din aluminiu,
[118] Din l. englez Chimie Analitic i Instrumental 257
19
poliester sau alte materiale inerte fa de sistemul pe care are loc separarea. Se mai poate recurge i la straturi formate pe baghete de sticl sau tuburi din sticl. Obinerea straturilor subiri se realiza la nceput n laborator, pornindu-se de la o suspensie apoas a adsorbentului pulverulent (10-40m) mpreun cu un liant anorganic (de exemplu ghips, SiO2-coloidal) sau organic (amidon, carboximetilceluloz), iar pentru aplicare se foloseau nite dispozitive mecanice simple. Straturile subiri mai pot include i indicatori de fluorescen care n lumin UV fac posibil vizualizarea spoturilor substanelor care absorb n acest domeniu prin stingerea fluorescenei, adic prin apariia unor spoturi ntunecate pe fond luminos. Straturile subiri pot fi achiziionate gata preparate de la firme productoare specializate (Camag, Cole-Parmer etc.).
Aplicarea probei
Pentru a se putea demara procesul de eluie, n prealabil pe placa cu strat subire se aplic proba. Acest lucru se realizeaz cu seringi sau micro-pipete, dar i alte dispozitive specializate (fig. 2), astfel nct s se obin aliniate, pe linia de start (fig. 1), mai multe spoturi de probe, respectiv de amestecuri etalon - supuse simultan separrii. ntruct probele se aplic din soluii diluate (1-2%), n anumii solveni, pentru a se evita interferena acestora n procesul de eluie, plcile se usuc nainte de introducerea n amestecul de solveni. Astfel se pot supune separrii probe care se concentreaz pe zone nguste (de lungime i lime preselectate) asigurndu-se o eficien mrit separrii.
Migrarea eluentului
Are loc prin coloana deschis, care acioneaz cu totul analog celei nchise (vezi LC), are loc sub aciunea forelor capilare i provoac migrarea difereniat a componentelor amestecului de separat. Acest lucru se realizeaz n urma simplei scufundri (manuale) a plcii cromatografice n eluentul potrivit. Din acest moment, eluentul irignd prin capilaritate stratul poros migreaz ascendent prin stratul subire, provocnd separarea. Timpul de separare variaz ntre 3 i 60 min. Nu este totui exclus utilizarea unor dispozitive mai sofisticate de alimentare cu solveni (minipompe) - fcndu-se uneori apel chiar la gradieni de concentraie (v. par. 16.5 n cazul LC). Se poate de asemenea practica migrarea eluentului pe orizontal sau descendent. Se poate elua o plac chiar de mai multe ori sau se poate evapora solventul n timpul migrrii, n acest fel mrindu-se eficiena pe seama timpului de separare. Pentru realizarea separrii (eluiei) se utilizeaz camere de developare. Cteva dintre cele mai utilizate dintre acestea se prezint n fig. 3. Formele preferate sunt cele
paralelipipedice sau cilindrice (pahare), prevzute cu un capac i eventual cu un dispozitiv de fixare a plcii plane (hrtie sau strat subire) i pot fi saturate cu amestecul de solveni din tanc, pentru a se mri viteza de eluie. Camerele paralelipipedice (fig. 3N) se numesc camere de tip N (normale) iar cele subiri (fig. 3S) poart numele de camere de tip S (sandwich). Ultimele prezint avantajul unui volum mai redus al fazei gazoase avnd o vitez de saturare mai mare i o durat a procesului de separare cu ceva mai mic.
Fig. 2. Aparatul Linomat: aplic probele n form de benzi pe straturile subiri
N S Fig. 3. Cteva dintre cele mai uzuale camere cromatografice n PC
Eluia are loc dup introducerea plcii n camera cromatografic, pn cnd amestecul de solveni atinge o nlime final, fixat de obicei ntre 5 i 18 cm, sau un anumit timp stabilit, n prealabil, prin ncercri preliminare. Solvenii utilizai se aleg n funcie de proprietile de eluie ale substanelor supuse separrii (analizei). Natura acestora depinde nu numai de substanele implicate dar i de mecanismul de separare propus, respectiv de faza staionar avut la dispoziie. Dup eluie, placa se scoate, se usuc i dac spoturile nu se vd, se trece la
vizualizarea acestora (operaie numit uneori revelare). Pentru aceasta, placa fie se scufund
ntr-un reactiv, fie se pulverizeaz cu acesta sau se introduce ntr-o atmosfer coninnd gaze reactive i chiar ntr-o etuv, la cald, cnd spoturile devin vizibile n urma unor reacii chimice (avnd un aspect apropiat celor din fig. 4).
Fig. 4. Aspectul plcilor i al spoturilor la vizualizare: n lumin UV (stnga) n lumin vizibil (dreapta)
19
Doar apoi se poate trece la etapa analizei propriu-zise. Reactivii de culoare pot fi generali, ca de exemplu acidul sulfuric la cald (120C), care determin carbonizarea majoritii substanelor organice, sau specifici, cnd acetia reacioneaz doar anumite substane sau funciuni organice. O alt variant de a face spoturile vizibile, preferat tot mai mult n ultimul timp, este folosirea unor straturi subiri fluorescente (spre exemplu materialul pulverulent conine ZnS fluorescent). Prin examinarea cromatogramelor eluate i uscate n lumin UV, se vor observa spoturi nchise la culoare sau colorate, pe fond fluorescent - luminos. Atunci cnd chiar substanele separate sunt fluorescente nu mai este nevoie de fondul fluorescent i este suficient o plac obinuit, observat n lumin UV, spoturile devenind luminoase pe un fond ntunecat (fig. 4). O variant i mai modern, foarte eficace de vizualizare, folosind tot lumin UV, const n utilizarea unor plci cu straturi subiri coninnd amestecuri de luminofori. n acest caz plcile au o culoare compus (de regul lumina emannd din trei substane luminescente avnd culori diferite). Cum fiecare luminofor emite la o alt lungime de und, iar substanele separate absorb diferit lumina, fiecare component de pe plac va avea, n consecin, o alt culoare. n acest caz detecia este mai sigur pentru c nu difer doar poziia relativ a spotului respectiv pe plac ci i culoarea.
260
Faze mobile i faze staionare
Analog cu cromatografia de lichide, respectiv cu varianta HPLC [119], n PC sunt posibile mai multe mecanisme de separare: (1) cromatografia de adsorbie, (2) cromatografia de repartiie (cu faze directe i cu faze inversate), (3) cromatografia de schimb ionic i (4) cromatografia de excluziune steric. Aceleai faze staionare (silicagel, alumin, celuloz sau derivai ai acestora) se utilizeaz n granulaii fine (<40m) dar fr prile extra fine (<1m). n ultimul timp ctig tot mai mult teren fazele chimice legate, pentru separri n cromatografia de repartiie cu faze inversate (solveni polari i faze staionare nepolare). Ca i n HPLC, se utilizeaz tot silicagelul silanizat avnd grefate grupri alchilice coninnd 8 sau 18 atomi de carbon - echivalente cu o pelicul subire de faz nepolar depus pe granulasuport.
Fazele mobile sunt adesea amestecuri de 2 pn la 5 solveni ct mai diferii ca natur
chimic, alei prin ncercri preliminare. Pentru straturi subiri din silicagel (cele mai utilizate) prezentm o list cu 10 solveni extrai din 8 grupe de selectivitate (propuse de Snyder, un cercettor american care a clasificat solvenii organici n funcie de mai muli parametri structurali i fizici), care difer ntre ele prin structura chimic: eter etilic (grupa I), izopropanol i etanol (II), tetrahidrofuran (III), acid acetic (IV), diclormetan (V), acetat de etil i dioxan (VI), toluen (VII) i cloroform (VIII). Hexanul este un solvent considerat complet nepolar i este recomandat a fi introdus n amestecuri pentru aducerea spoturilor n domeniul considerat optim, de Rf = 0.2-0.8 dac mai este necesar.
[119] HPLC = High Performance Liquid Chromatography Chimie Analitic i Instrumental 261
19
Analiza chimic prin PC Analiza calitativ
Fiecare compus separat prin PC este caracterizat (calitativ) de parametrul de retenie denumit Rf (o prescurtare de la termenul din l. engl.: retardation factor). Acesta se calculeaz astfel: Rf = (Distana parcurs de componentul dat, i)/(Distana parcurs de frontul solventului) sau Rf = xi x0
unde cu xI, respectiv cu x0, s-au notat distanele parcurse de componentul dat, respectiv de frontul solventului, pn la oprirea cromatogramei. Toate mrimile calculate pentru o coloan
nchis au o mrime corespondent i n PC. De exemplu parametrul de retenie R devine Rf
(f de la front): Rf = t x v 1 = = 0 = x0 v0 t k + 1
unde v reprezint viteze de migrare, t - timpi de migrare iar k factorul de capacitate. De aici, implicit: k= 1 1 Rf
Comparndu-se valorile Rf ale spoturilor etaloanelor cu cele ale substanelor din proba de analizat (lucru realizat de cele mai multe ori vizual) se spune c se face analiza calitativ. Aceasta este cea mai util aplicaie a metodei PC. Se pot identifica pesticide din ape, sol dar i alte substane pentru scopuri tiinifice i tehnice cu o sensibilitate mult mai bun dect n eprubet. Desigur c sensibilitatea atins este inferioar celei din HPLC. De aceea, n aplicaiile analitice de performan, cu toat simplitatea i preul de cost sczut, PC nu poate nlocui ntotdeauna HPLC. Tot n scopul realizrii analizei calitative se poate practica i cromatografia
bidimensional. n aceast variant (fig. 5), se utilizeaz o plac ptrat, iar spotul (unul
singur) se aplic ntr-unul dintre coluri, de exemplu: n dreapta-jos. Se elueaz cu un amestec de solveni 1, avnd loc o prim separare. Apoi, dup oprire se usuc placa. Se rotete placa cu 90 i se ncepe o nou irigare a acesteia folosind un alt amestec de solveni, 2. Doar apoi placa se vizualizeaz i se compar cu o plac etalon - pe care avem un amestec similar dar cunoscut.
262
Aplicare
Eluia 1 Rotire
Solvent 1 Eluia 2
Aspect final
Solvent 2 Fig. 5. Modul de executare a cromatografiei n strat subire bidimensionale

Analiza cantitativ poate ncepe dup efectuarea separrii i vizualizrii sau prin
executarea unei msurtori asupra unui parametru fizic (radioactivitate) proporional cu concentraia substanei din spotul de interes analitic. Metodele practicate pe scar larg sunt
densitometria prin transmisie sau reflexie a spotului (spoturilor), respectiv mai recent
scanarea. Densitometria se poate realiza n lumin vizibil sau UV, n ultimul caz fiind posibil i msurarea radiaiei de fluorescen. Semnalul msurat servete la construirea unei curbe de etalonare din semnalele msurate pentru diferitele spoturi, coninnd cantiti cresctoare de component, aplicate, alturi de proba necunoscut, pe aceeai plac. Se prefer
metoda curbei de etalonare n reflexie (adic prin msurarea reflectanei) deoarece domeniul
liniar al metodei este destul de ngust i adesea curba de etalonare este neliniar. Motivul principal pentru care rezultatele analizei cantitative prin PC sunt inferioare HPLC sunt neuniformitile stratului subire care contribuie n mod hotrtor la mrirea raportului semnal/zgomot, notat S/N. Astfel, conform fig. 6, unde H este nlimea picului (semnalului) analitului iar hn - limea domeniului n care variaz zgomotul de fond (intervalul 2). S/N = H 2H = h n /2 h n
H
Fig. 6. Ilustrarea mrimilor care afecteaz raportul semnal/zgomot
263
hn
19
O variant mai simpl dar mai laborioas de analiz cantitativ const n splarea zonei corespunztoare analitului de pe suport ntr-un pahar, folosind un solvent adecvat i apoi determinarea, cu o alt metod instrumental, a concentraiei soluiei rezultate. Evaluarea cu ajutorul foto-densitometrelor este pn n prezent cea mai utilizat metod. n aceste instrumente, placa cromatografic cu stratul pe ea, se deplaseaz odat cu suportul (de regul n direcia developrii), prin faa fantelor sistemului optic de iluminare, respectiv de msurare a intensitii luminii reflectate. Schema unui astfel de dispozitiv se poate observa pe fig. 7.
F
O
W D P MC Hg
Fig. 7. Reprezentarea schematic a unui densitometru
Pe aceast figur se pot remarca posibilitatea de utilizare a unei lmpi cu incandescen - cu halogen - (W), pentru determinri n domeniul vizibil (400-800nm), a unei lmpi cu deuteriu (D) pentru spoturile care absorb n UV (190-400nm) sau a unei lmpi UV cu intensitate mai ridicat (cu xenon sau cu vapori de mercur), notat Hg, pentru spoturile fluorescente. Lumina monocromatic care prsete monocromatorul MC se reflect pe oglinda O, se reflect pe placa cu strat subire P iar lumina reflectat este receptat pe fotomultiplicatorul F. Semnalul obinut este nregistrat de nregistratorul I, care poate fi chiar un calculator. Dup nregistrare, densitogramele se evalueaz cantitativ, fie prin msurarea nlimii picurilor, fie a suprafeei acestora. Oricare dintre mrimile msurate poate constitui semnalul analitic. Trasarea graficului semnal analitic n funcie de cantitatea de substan din spot, duce la o curb de etalonare. n cazul determinrilor de fluorescen acest grafic este liniar. Un exemplu de determinare cantitativ din domeniul controlului polurii mediului l constituie determinarea seleniului din ape. n acest caz nainte de aplicarea probei pe plac, aceasta se supune unei reacii chimice numit derivatizare. Derivatizarea seleniului se poate realiza cu 2,3-diaminonaftalin (DAN). Compusul rezultat este fluorescent. Pe fig. 8a se prezint densitograma unei probe de ap coninnd seleniu derivatizat. Se poate observa c reactivul de derivatizare, DAN, apare separat pe aceeai plac alturi de compusul rezultat cu seleniul din ap. Repetndu-se separarea cu mai multe probe cunoscute se obin picuri cu
nlimi diferite (fig. 8b). Limita de detecie este pentru aceast metod de 250fg Se. Reprezentarea grafic a nlimilor duce la curba de etalonare (fig. 8c).
500 y = 9.2941x R2 = 0.9928 400 Cantitate Se, g 300 200 100 0 0 10 20 30 40 50 Inaltime, mm
a b c Fig. 8. (a) Aspectul unei densitograme a compusului fluorescent al seleniului DAN (1,2diaminonaftalin); (b) Densitograme rezultate din msurtorile de fluorescen ale produsului derivatizrii seleniului din probe de ap cu 1,2-diaminonaftalin, n cantiti cresctoare (1fg=10-12g); (c) Aspectul unei curbe de etalonare n PC Metoda PC este simpl i ieftin dar, ca precizie i exactitate, este adesea inferioar HPLC. n calitate de metod semicantitativ, PC este o metod competitiv i n lipsa unei aparaturi performante (de exemplu HPLC) rmne uneori singura alternativ. O analiz
semicantitativ poate rspunde la ntrebarea: Este prezent specia X ntr-o concentraie mai mare dect o concentraie limit, C? De foarte multe ori rspunsul la aceast ntrebare este
suficient n practica curent. Dar pentru monitorizarea automat a coninutului de poluani din ape sau sol, pentru expertize sau pentru controlul alimentelor, doar metoda PC nu este suficient.
Intensitatea fluorescenei
265
19
1. Cu ce dispozitive se aplic probele pe placa cu strat subire n PC? 2. Care adsorbeni se utilizeaz cu frecven maxim n PC? 3. Ce metode de separare cromatografice sunt aplicabile n PC? 4. Pe ce baz se realizeaz migrarea fazei mobile prin stratul subire de adsorbent, n varianta clasic? 5. Ce sunt camerele de developare i de cte tipuri sunt acestea? 6. Unde se pot aplica probele pe plcile cromatografice n variantele unidimensional i bidimensional? 7. De ce s-au introdus straturile subiri fluorescente? 8. Cum se pot observa componentele incolore pe placa cromatografic dup eluare? 9. Ce este valoarea Rf? 10. Cum se realizeaz analiza calitativ n PC? 11. Care este cea mai exact variant de analiz cantitativ n PC? 12. Ce este o densitogram i la ce servete n analiza chimic?
266
Analiz spectral nuclear A vedea lumea pentru un moment ca ceva bogat i ciudat este propria recompens a multora o descoperire Edward M. Purcell, din lectura de decernare a premiului Nobel (11 Dec. 1952) pentru descoperirea RMN
Analiz spectral nuclear

Rezonan magnetic nuclear Rezonana este fenomenul de oscilaie cu aceeai frecven a doi oscilatori care
transfer energie. n acest caz oscilatorii se numesc cuplai. Fenomenul rezonanei magnetice nucleare se bazeaz pe proprietatea nucleelor de a prezenta moment magnetic. Nu toate nucleele ns posed moment magnetic. Se preteaz la o rezonan magnetic acele nuclee care au moment magnetic [120,121]. Practic se poate obine rezonana magnetic nuclear prin aplicarea unui cmp electromagnetic de frecven variabil i observarea frecvenei la care nucleele magnetice intr n rezonan cu cmpul indus. Nucleele magnetice posed un moment unghiular de spin m care are o valoare cuantificat dup formula: m = I(I + 1) h 2 (1)
unde I este numrul cuantic de spin (numit simplu spin) poate lua valorile I = 0, , 1. Valoarea numrului cuantic de spin I d numrul de orientri (stri) ale momentului
magnetic al nucleului fa de o ax oarecare nI:
nI = 2I + 1
unghiular.
(2)
Fiecare orientare a momentului magnetic se numete component a momentului

Valorile orientrilor momentului magnetic al nucleului sunt notate cu mI (numite stri de spin sau stri) i sunt date de relaia:
mI = I, I-1, ..., -I iar valorile componentelor momentului unghiular sunt: I = mI h 2
(3)
(4)
Dintre elementele chimice, elemente cu numr cuantic de spin I = sunt 1H, 13C, 19F,
31
P. 14N are I = 1, iar 12C i 16O au numrul cuantic de spin I = 0.
[120] Cerichelli Giorgio, Mancini Giovanna, Role of Counterions in the Solubilization of Benzene by Cetyltrimethylammonium Aggregates. A Multinuclear NMR Investigation, Langmuir, p. 182-187, Volume 16, Issue 1, January 11, 2000. [121] Luchetti Luciana, Mancini Giovanna, NMR Investigation on the Various Aggregates Formed by a Gemini Chiral Surfactant, Langmuir, p. 161-165, Volume 16, Issue 1, January 11, 2000. Chimie Analitic i Instrumental 267
20
Starea cu mI = se noteaz cu sau n timp ce starea cu mI = - se noteaz cu sau . Componenta momentului magnetic pe axa Oz, notat z este proporional cu componenta momentului unghiular de spin nuclear pe aceast ax: z = mI h 2 (5)
unde este un coeficient de proporionalitate numit raport giromagnetic al nucleului. Acesta depinde strict de tipul nucleului considerat i valorile sale pentru cteva nuclee sunt redate n tabelul 1.
Tabelul 1. Valorile raportului giromagnetic i factorului nuclear gI pentru cteva nuclee 1 2 13 14 nucleu 1n H H C N -3.826 5.586 0.857 1.405 0.404 gI -1.83108 2.68108 4.10107 6.73107 1.94107
Momentul magnetic se exprim adesea prin factorul nuclear gI (tabelul 5.1), corelat cu raportul giromagnetic i magnetonul nuclear N prin relaia: gI =
h , N = 5.05110-27 JT-1 N 2
(6)
cnd relaia (5) devine: z = gImIN valorile negative indic c momentul magnetic i spinul sunt antiparaleli. ntr-un cmp magnetic B exterior cele 2I+1 orientri ale nucleului au energii diferite, date de: EI = - zB = - gImINB Adesea se folosete n notaii frecvena Larmor L: L = (8) (7) Valorile pozitive din tabelul 1 indic un moment magnetic paralel cu spinul iar
B 2
(9)
cnd ecuaia (8) devine: EI = -mIhL dou stri mI = n prezena cmpului magnetic B este: E = E- - E = 2hL = hL de energie E este nul (relaia 11).
(10)
Considernd un nucleu cu spin I = diferena de energie E care apare ntre cele (11)
n absena cmpului B (B = 0) frecvena Larmor L se anuleaz (relaia 9) i diferena
Relaia (11) arat c un nucleu cu spin I = va ncepe s rezoneze n prezena cmpului magnetic B atunci cnd este bombardat cu o radiaie cu frecvena = L. Condiia: = L se numete condiie de rezonan. Frecvena Larmor L a nucleelor la cmpuri B folosite n mod uzual se situeaz n domeniul radio (L10-1m) i din acest motiv RMN este o tehnic de radiofrecvene. Un spectrometru RMN const dintr-un magnet care poate produce un cmp intens i uniform i una sau mai multe surse de radiaie electromagnetic de radiofrecven. Proba se rotete n interiorul magnetului cu aproximativ 15 Hz, pentru ca toate moleculele s fie supuse la acelai cmp mediu (fig. 1). (12)
Fig. 1. Schema bloc a unui spectrometru RMN
Frecvent se folosesc magnei supraconductori care opereaz la temperatura heliului lichid (4K). Acetia asigur cmpuri magnetice intense, care asigur cteva avantaje: simplific forma spectrelor i permite interpretarea lor mai uoar (vezi Structura fin); viteza de preluare a energiei este mai mare ntr-un cmp mai intens datorit a doi factori: la cmpuri mari este mai mare diferena mai mare de populaie ntre strile de spin (proporional cu B); energia fiecrui foton absorbit este mai mare (proporional cu B);
269
20
Deplasarea chimic
Electronii atomilor prezint un spin electronic. Acesta interacioneaz la rndul lui cu cmpul B aplicat pentru a da momentul unghiular electronic, notat B. Acest cmp suplimentar, manifestat local pe fiecare nucleu se exprim prin: B = - B (13) unde se numete constant de ecranare pentru nucleul studiat. De obicei este pozitiv, dar poate fi i negativ. Ceea ce se manifest asupra nucleului Bloc este diferena dintre cmpul aplicat i cmpul magnetic suplimentar: Bloc = B + B = (1-)B n prezena cmpului Bloc frecvena Larmor corespunztoare este: L = (1-) (14)
B 2
(15)
ceea ce face ca frecvena Larmor L s fie diferit pentru acelai tip de nuclee situate n nconjurri diferite (dup cum se tie distribuia sarcinii electronice a atomului considerat depinde puternic de electronegativitile elementelor i gruprilor direct nvecinate. Aceste frecvene de rezonan diferite se exprim uzual prin mrimea numit deplasare chimic. Se definete deplasarea chimic ca diferena dintre frecvena de rezonan a nucleului studiat i un standard de referin. Standardul de referin pentru protoni 1H este rezonana protonilor din tetrametilsilan, Si(CH3)4, notat TMS. Motivul acestei alegeri este c TMS se dizolv fr
reacie n multe lichide [122-124].
Pentru alte nuclee se folosesc alte standarde de referin [125-128]. Pentru

13 31
13
C se
folosete ca standard frecvena de rezonan a C din TMS [129], iar pentru P frecvena de rezonan a 31P din H3PO4 85% soluie apoas [130].
[122] Gerritz Samuel W., Andrea M. Sefler, 2,5-Dimethylfuran (DMFu): An Internal Standard for the "Traceless" Quantitation of Unknown Samples via 1H NMR, Journal of Combinatorial Chemistry, p. 3941, Volume 2, Issue 1, January 11, 2000. [123] Shapiro Yury E., 1H NMR Self-Diffusion Study of Morphology and Structure of Polyvinyl Alcohol Cryogels; American Society, JCIS, p. 453-465, Volume 212, Issue 2. [124] Wild J. M.; Artifacts Introduced by Zero Order Phase Correction in Proton NMR Spectroscopy and a Method of Elimination by Phase Filtering, American Society, JMRE, p. 430-436, Volume 137, Issue 2. [125] Shao Chaoying, Miyazaki Yoshinobu, Matsuoka Shiro, Yoshimura Kazuhisa, Sakashita Hirofumi, Complexation of Borate with Cross-Linked Polysaccharide Anion Exchanger: 11B NMR and Adsorption Properties Studies, Macromolecules, p. 19-25., Volume 33, Issue 1, January 11, 2000. [126] Sham Simon, Wu Gang, Solid-State 25Mg NMR Study of Inner-Sphere Mg2+ Binding Complexes, Inorganic Chemistry, p. 4-5, Volume 39, Issue 1, January 10, 2000. [127] Drew Mark, Orton Edward, Krolikowski Paul, Salvino Joseph M., Kumar N. Vasant, A Method for Quantitation of Solid-Phase Synthesis Using 19F NMR Spectroscopy; Journal of Combinatorial Chemistry, p. 8-9, Volume 2, Issue 1, January 11, 2000. [128] Gaare Kristin, Effects of La Exchange on NaY and NaX Zeolites As Characterized by 29Si NMR, The Journal of Physical Chemistry B, p. 48-54, Volume 101, Issue 1, January 2, 1997. [129] Orendt Anita M., Facelli Julio C., Bai Shi, Rai Amarjit, Gossett Michele, Scott Lawrence T., BoerioGoates Juliana, Pugmire Ronald J., Grant David M., Carbon-13 Shift Tensors in Polycyclic Aromatic 270 Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
Diferena ntre frecvena de rezonan a standardului i frecvena de rezonana a unui anumit nucleu crete cu intensitatea B a cmpului magnetic aplicat.
Deplasrile chimice sunt redate pe o scar relativ adimensional, numit scara ,
definit astfel: =
0 106 0
(16)
unde 0 este frecvena de rezonan a standardului. Din perspectiv experimental este important de tiut la ce deplasare relativ fa de referin va rezona un nucleu cu o deplasare chimic cunoscut. Cum frecvena de rezonan nu depinde numai de imediata vecintate a atomului, domeniul tuturor valorilor posibile de deplasare chimic ale unui nucleu dintr-o grupare formeaz un interval de deplasri chimice posibile. n fig. 2 sunt redate aceste intervale de deplasare chimic posibil ale nucleului de hidrogen 1H pentru cteva grupri, iar n fig. 3 sunt redate intervalele de deplasare chimic posibil ale nucleului de carbon 13C pentru cteva grupri frecvent ntlnite.
Fig. 2. Domeniul de deplasri chimice ale 1H n diferite grupri funcionale
Fig. 3. Domeniul de deplasri chimice ale 13C n diferite grupri funcionale
Un exemplu de spectru este redat n fig. 4, pentru etanol. Existena deplasrii chimice justific apariia semnalelor n spectru. Atomii de hidrogen, avnd diferite ecranri electronice
Compounds. 8. A Low-Temperature NMR Study of Coronene and Corannulene, The Journal of Physical Chemistry A, p. 149-155, Volume 104, Issue 1, January 13, 2000. [130] Osegovic John P., Drago Russell S., Measurement of the Global Acidity of Solid Acids by 31P MAS NMR of Chemisorbed Triethylphosphine Oxide, The Journal of Physical Chemistry B, p. 147-154, Volume 104, Issue 1, January 13, 2000. Chimie Analitic i Instrumental 271
20
pentru diferite poziii n molecul, furnizeaz semnale diferite. Nici protonii aceleiai grupri nu sunt scutii de discriminare, dup cum se vede din spectru. n acest caz fiecare atom d cel puin o linie n spectru, unii atomi producnd chiar dou linii.
Fig. 4. Spectrul 1H-RMN al etanolului cu atomii care furnizeaz semnalul n spectru ngroai
Integrarea numeric a spectrului permite determinarea cantitativ a gruprilor n molecul. Din acest punct pn la identificarea structurii moleculare nu mai este dect o problem de reconstrucie grupare cu grupare a ansamblului molecular [131]. Dei constanta de ecranare este responsabil pentru deplasarea chimic, este dificil de calculat aceasta. Formal, constanta de ecranare se poate considera ca suma a 3 contribuii: = loc + mol + sol ce formeaz restul moleculei iar sol este contribuia moleculelor de solvent. (17) unde loc este contribuia electronilor atomului studiat, mol este contribuia grupelor de atomi
[131] Pfrommer Bernd G., Mauri Francesco, and Louie Steven G., NMR Chemical Shifts of Ice and Liquid Water: The Effects of Condensation, Journal of the American Chemical Society, p. 123-129, Volume 122, Issue 1, January 12, 2000. 272 Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
Structura fin
Scindarea rezonanelor n linii individuale (fig. 4) se numete structura fin. Fiecare nucleu magnetic contribuie la cmpul local al altor nuclee i modific astfel frecvena lor de rezonan. Intensitatea interaciunii produs de un nucleu asupra altui nucleu este proporional cu produsul celor doi spini i este exprimat prin constanta de cuplaj scalar
J i se msoar n hertzi. Constanta de cuplaj este independent de intensitatea cmpului
aplicat i este o aciune reciproc a celor dou nuclee, adic dac nucleul A scindeaz linia de rezonan a nucleului B cu constanta de cuplaj JAB atunci i nucleul B scindeaz linia de rezonan a nucleului A cu aceeai valoare absolut JAB. Pentru a exprima constante de cuplaj ntre nuclee cu deplasri chimice semnificativ diferite se folosesc litere deprtate n alfabet (de exemplu A i X) iar pentru constante de cuplaj ntre nuclee cu deplasri chimice apropiate se folosesc litere apropiate n alfabet (de exemplu A i B). Fie un sistem AX pentru care spinul are aceeai valoare I(A) = I(X) = . Datorit interaciunii spin-spin cele dou stri (+ i - ) vor da linii diferite n spectru pentru fiecare nucleu (A i X). Aceste perechi de linii sunt centrate pe deplasarea chimic a fiecrui nucleu (fig. 5).
Fig. 5. Efectul cuplajului spin-spin asupra unui spectru AX i intensitatea diferit a cuplajelor spin-spin n spectrele AX i AX2
Pentru un sistem AXn (AX2, AX3, ...) la care nucleele au acelai spin I(A) = I(X) = scindarea este tot un dublet, deoarece grupul de nuclee echivalente nX rezoneaz ca un singur nucleu. Diferena cu cazul ilustrat n fig. 5 este redat n fig. 6, i anume intensitatea semnalului este de n ori mai mare dect n specia AX. n spectrul AX2 specia A va scinda n 3 semnale cu raportul IA:I'A:IA = 1:2:1. De fapt semnalul I'A este rezultatul suprapunerii a dou semnale IA aa cum se poate observa din fig. 5. Schema distribuiei intensitii semnalului n scindrile de cuplaj spin-spin respect distribuia dat de triunghiul lui Pascal. Astfel, n nuclee echivalente cu spinul rezoneaz cu
20
un nucleu sau grup de nuclee echivalente dup o schem de scindare i suprapunere a intensitilor ca cea reprezentat n fig. 6a i analog pentru nucleele cu I = 1 (fig. 6b) [132].
Fig. 6. Cuplaje spin-spin scindri i suprapuneri pentru semnalul lui A din AmXn
Formulele de calcul pentru seriile din fig. 6 pot fi obinute cu ajutorul MathCad cu formulele: N0,0 = 1; n := 1,2..5; k := 0,1..4; Nn,k+1 = Nn-1,k + Nn-1,k+1 pentru I = i respectiv: M0,0 = 1; n := 1,2..5; k := 0,1..8; Mn,k+2 = Mn-1,k + Mn-1,k+1 +Mn-1,k+2 pentru I = 1 cnd se obin matricele: 1 0 0 N= 0 0 0 i 0 1 1 1 1 1 0 0 1 2 3 4 0 0 0 1 3 6 0 0 0 0 1 4 0 0 0 0 0 1
n mod analog se rezolv i scindarea i deplasarea semnalului ce provine de la X din AmXn, cu deosebirea c schema Pascal se aplic de aceast dat pentru m.
[132] Ylihautala Mika, Vaara Juha, Ingman Petri, Jokisaari Jukka, Diehl Peter, 14N and2H NMR Study of the Mesophases of Cetyltrimethylammonium Bromide in Formamide, The Journal of Physical Chemistry B, p. 32-38, 101(1), 1997. 274 Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
Nuclee echivalente
Un grup de nuclee sunt echivalente chimic dac i numai dac: sunt legate printr-o operaie de simetrie a moleculei; au aceleai deplasri chimice. Nucleele sunt echivalente magnetic dac i numai dac: sunt echivalente chimic; au interaciuni spin-spin identice cu oricare alte nuclee magnetice din molecul. Diferena ntre echivalena chimic i echivalena magnetic este ilustrat de moleculele CH2F2 i H2C=CF2. n ambele molecule protonii sunt echivaleni chimic. Totui, n CH2F2 protonii sunt echivaleni magnetic. n H2C=CF2 protonii nu sunt echivaleni magnetic (fig. 7).
F H C C H F H Fig. 7. Geometria moleculelor de CH2F2 i H2C=CF2
F F C
Nucleele de
19
F sunt magnetice i au spin I = . Datorit prezenei legturii duble,
orientarea spinilor este cea prezentat n fig. 8 i simetria magnetic este anulat. Astfel, nucleul de H se va afla cis fa de nucleul de F i nucleul de H va fi cis fa de nucleul de F ceea ce va face ca scindarea semnalului nucleului de H s fie diferit de scindarea semnalului nucleului de H. Alt situaie este relativ la protonii din R-CH3 (fig. 8). H R C H H Fig. 8. Geometria gruprii R-CH3 Dei cele trei nuclee sunt diferite din punct de vedere magnetic, practic nu se va nregistra nici o scindare n spectrul RMN datorit rotaiei rapide a grupei CH3 n jurul legturii R-C, ceea ce va media diferenele.
275
20
Aplicaie: interpretarea unui spectru RMN
S considerm spectrul 1H-RMN din fig. 9.
Fig. 9. Interpretarea unui spectru 1H-RMN
Algoritmul de interpretare al spectrului este urmtorul:
se analizeaz structura fin a spectrului

Pentru spectrul din fig. 9 se constat c primul grup de scindri (la =3.4) este format din n = 4 linii situate la cuplaj spin-spin egal. Ea provine (conform schemei din fig. 6a) de la o scindare ntr-un cmp provenit de la n-1 = 3 nuclee de hidrogen echivalente. Al doilea grup de scindri (la = 1.2) este format din n = 3 linii situate la cuplaj spin-spin egal. Ea provine (conform schemei din fig. 6a) de la o scindare ntr-un cmp provenit de la n-1 = 2 nuclee de hidrogen echivalente. Cele dou grupe sunt nvecinate: AH2-BH3.
se analizeaz deplasrile chimice

Se compar valorile din fig. 9 cu valorile prescrise n fig. 2, i se ine seama c valena maxim este 4. Rezult c nucleele A i B sunt de carbon i atomul A este legat de un nucleu nemagnetic i care produce mrirea deplasrii chimice a gruprii -CH2- de la 2.3 la 3.4 (srcire n electroni a nveliului electronic). Acesta este oxigenul.
se reconstituie structura molecular innd seama de saturarea legturilor

Structura ce rezult din aplicarea pailor anteriori pentru spectrul din fig. 9 este -O-CH2CH3. Se ine seama c nu mai apar alte deplasri n spectru (de exemplu pentru prezena unui atom de hidrogen legat de oxigen) aa nct se completeaz structura molecular cu grupri care deja au semnal n spectru, adic CH2 i CH3. Structura molecular cea mai probabil este deci: CH3-CH2-O-CH2-CH3. O problem care s-ar putea pune este cum se modific forma spectrului din fig. 9 dac se aplic un cmp magnetic B de 10 ori mai intens. Dup cum s-a demonstrat, n acest caz deplasrile chimice rmn aceleai (ec. 16), tot aa cum rmn neschimbate i constantele de cuplaj spin-spin. Ceea ce ns se modific este frecvena de rezonan (nereprezentat n spectrul din fig. 9).
Tehnici RMN n puls i bidimensionale
Metodele moderne de detectare a separrilor energetice ntre strile de spin nuclear folosesc o variant modificat de spectrometrie RMN, numit RMN de puls [133,134]. n loc s se aplice o radiaie electromagnetic de frecven variabil pentru a nregistra rezonanele se aplic o stimulare energetic puternic, care excit spinii nucleari pe strile superioare, dup care se nregistreaz radiaia emis de spinii nucleari n timp ce ei revin pe starea fundamental. Un spectru RMN conine o mulime de informaii, iar dac sunt prezeni mai muli protoni, el este foarte complex, i frecvent se poate acoperi structura fin a diferitelor grupe de linii. Complexitatea spectrului se reduce dac se folosesc dou axe pentru reprezentarea datelor, cu rezonanele diferitelor grupe plasate la poziii diferite pe a doua ax de date. Separarea aceasta este posibil cu ajutorul RMN bidimensional. Studii de relaxare [135] de spin n tehnica RMN n puls au artat c un experiment de ecou de spin refocalizeaz spinii care sunt ntr-o nconjurare constant. Dac 2 spini se gsesc n nconjurri cu deplasri chimice diferite, ei sunt refocalizai i se obine o singur linie. Aceasta nseamn c se pot elimina deplasrile chimice din spectru, rmnnd doar scindrile i suprapunerile. Studii de decuplare [136] au artat c se pot ndeprta efectele cuplajelor spin-spin. Combinarea celor dou tehnici face ca cu ajutorul transformatei Fourier s se separe cuplajul de spin ntr-o dimensiune i deplasarea chimic n cealalt dimensiune a reprezentrii spectrului [137]. Lucrrile moderne de RMN folosesc spectroscopia de corelaie (COSY), n care se alege secvena de pulsuri n funcie de timpii de relaxare [138].
[133] Schwartz J., A graduate description of pulse RMN (time domain), J. Chem. Edu., 65, 752, 1988. [134] Schwartz J., A graduate description of pulse RMN (time domain), J. Chem. Edu., 65, 959, 1988. [135] Wink J., Spin-net relaxation times in 1H-RMN spectroscopy, J. Chem. Edu., 66, 810, 1989. [136] Sanders J. K. M., Hunter B. K., Modern NMR spectroscopy, Oxford University Press, 1987. [137] King R. W., Williams K. R., Fourier transform in chemistry. Part 4. RMN: Bidimensional methods, J. Chem. Edu., 67, A125, 1990. [138] Haworth O., Special edition of RMN spectroscopy, Chemistry in Britain, 29, 589, 1993. Chimie Analitic i Instrumental 277
20
RMN n faz solid
n mod uzual tehnicile RMN se aplic n faz lichid, cnd proba este dizolvat ntr-un solvent corespunztor. Exist situaii ns cnd dizolvarea poate fi un inconvenient major. Astfel, multe specii sunt de interes n faz solid i este important de determinat structura i dinamica lor n faz solid [139]. Polimerii sintetici sunt un astfel de caz, cnd din RMN n faz solid se pot obine informaii asupra structurii moleculelor, conformaiei acestora i micrilor diferitelor pri ale lanului [140]. Substane anorganice ca zeoliii folosii ca site moleculare i catalizatori selectivi pot fi studiate cu ajutorul RMN n faz solid cnd se obin informaii de natur structural care nu pot fi obinute din difracia de raze X [141]. Principala dificultate n aplicarea RMN n faz solid este slaba rezoluie a semnalului probelor solide i prezena benzilor formate prin suprapunerea a foarte multe linii. Faza solid n general nu permite rotaia molecular care s absoarb energia transmis n puls (excepie fac cristalele plastice n care moleculele continu s se rostogoleasc). Din acest motiv, timpii de relaxare spin-reea sunt foarte mari iar timpii de relaxare spin-spin sunt foarte mici. Pentru c benzile sunt largi, realizarea saturrii necesit puteri foarte mari de radiofrecven. Comparativ, dac RMN n puls la lichide folosete surse de radiofrecven de civa wai, RMN n puls pentru solide necesit puteri de civa kilowai [142].
[139] Fyfe Colin A., Lewis Andrew R., Investigation of the Viability of Solid-State NMR Distance Determinations in Multiple Spin Systems of Unknown Structure, The Journal of Physical Chemistry B, p. 48-55, Volume 104, Issue 1, January 13, 2000. [140] Fuchs Beate and Scheler Ulrich, Branching and Cross-Linking in Radiation-Modified Poly(tetrafluoroethylene): A Solid-State NMR Investigation, Macromolecules, p. 120-124, Volume 33, Issue 1, January 11, 2000. [141] Ebsworth A. V., Rankin D. W. H., Cradock S., Structural methods of inorganic chemistry, Blackwell Scientific, Oxford, 1992. [142] Li Y., Wolters A. M., Malawey P. V., Sweedler J. V., and Webb A. G., Multiple Solenoidal Microcoil Probes for High-Sensitivity, High-Throughput Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy, Analytical Chemistry, p. 4815-4820, Volume 71, Issue 21, November 1, 1999. 278 Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
Rezonana electronic de spin
i nivelele electronice se scindeaz n cmp magnetic. n mod analog cu relaia (8) se obine nivelul energetic al unui spin electronic n cmp magnetic: Ee = gemsBB (18) unde ge este factorul electronic i are valoare de constant universal, ge = 2.00232, B este magnetonul Bohr B = 9.2740210-24JT-1 iar ms este orientarea momentului magnetic al
electronului (numite stri de spin sau stri) i are valorile ms = . Starea cu ms = se
noteaz cu sau n timp ce starea cu ms = - se noteaz cu sau (fig. 10).

Fig. 11. Schema bloc a unui spectrometru RES
Fig. 10. Nivelele de spin electronic n cmp magnetic
Aa cum arat ecuaia (18), aplicarea cmpului magnetic B va duce la despicarea nivelului energetic al orbitelor electronice (fig. 10) i separarea ntre cele 2 nivele este: E = Ee() - Ee() = geBB (19) Dac o prob n cmp magnetic este expus unei radiaii electromagnetice, rezonana va avea loc cnd h = E. Rezonana electronic de spin (RES) se aplic moleculelor ce conin electroni impari [143] Se aplic o radiaie electromagnetic de frecven fix (radiaie monocromatic) i se variaz intensitatea cmpului magnetic B. Uzual se folosesc radiaii electromagnetice cu frecvena de 10GHz (1010Hz) i cmpuri magnetice cu o intensitate de 0.3T. Pentru o radiaie cu frecvena = 1010Hz, lungimea de und este = c/ = 3cm, i radiaia este n domeniul microundelor. Din acest motiv, RES este o tehnic de microunde (fig. 11). Tehnicile de rezonan magnetic prezentate necesit o aparatur sofisticat i condiii de lucru deosebite i din acest motiv n sinteza i caracterizarea de noi compui deseori se efectueaz o analiz preliminar a
topologiei moleculare prin studii de corelaie [144].
[143] Subramanian S., Murugesan R., Devasahayam N., Cook J. A., Afeworki M., Pohida T., Tschudin R. G., Mitchell J. B., Krishna M. C., High-Speed Data Acquisition System and Receiver Configurations for Time-Domain Radiofrequency Electron Paramagnetic Resonance Spectroscopy and Imaging, American Society, JMRE, p. 379-388, Volume 137, Issue 2. [144] Diudea Mircea, Gutman Ivan, Jntschi Lorentz, Molecular Topology, Nova Science, Huntington, New York, 332 p., 2001, ISBN 1-56072-957-0, http://www.nexusworld.com/nova/1271.htm. Chimie Analitic i Instrumental 279
Prelucrarea datelor rezultate din msurtori Dac torturezi datele suficient, acestea i vor mrturisi aproape totul Fred Menger [145]
Prelucrarea datelor rezultate din msurtori

Nimic nu este mai intolerabil dect s-i admii ie nsui propriile tale erori Ludwig van Bethoven (1770 - 1827)
Valori medii i erori Medii
Dac se repet de n ori o msurtoare, fcut asupra aceleiai probe, obinndu-se rezultatele Xi, se observ c valorile individuale sunt diferite. Conform conveniilor matematicii, rezultatele msurtorii respective constituie o variabil aleatoare [146]. Pentru a exprima rezultatul unei variabile de acest tip, practica cea mai acceptat este aceea de a se prezenta, n locul tabelului valorilor individuale obinute experimental, una din valoarile
medii.
Fie X o mulime de n valori x1, x2, , xn. Pentru calculul valorii medii, cei mai folosii indicatori n practica prelucrrii statistice a datelor sunt urmtorii:
Media Aritmetic, AM(X), dat de:
n
AM(X) =
x
i =1
n x1 + x 2 2
(1)
De exemplu pentru dou valori x1 i x2: AM(X) =
Media Geometric, GM(X), obinut din expresia:

GM(X) =
n
x
i =1
Xi > 0
exp(AM(ln(X))
(2)
n cazul unui ir de dou valori x1 i x2 media geometric se calculeaz: GM(X) = x1 x 2
De notat c pentru n par, expresia pentru GM poate fi nedeterminat, atunci cnd produsul xi este negativ.
Media Armonic, HM(X), dat de:
HM(X) = n
n
x
i =1
1
i
= 1/AM(1/X)
(3)
[145] http://www.emory.edu/CHEMISTRY/faculty/menger.html [146] alea = zar n l. latin Chimie Analitic i Instrumental 281
21
n cazul unui ir de dou valori x1 i x2 media armonic se calculeaz: HM(X) =
2 1 1 + x1 x 2
Media Eulerian, EM(X), se calculeaz dup ecuaia:
EM(X) =
x
i =1
2 i
= AM(X 2 )
(4)
iar n cazul unui ir de dou valori x1 i x2 media eulerian se calculeaz: EM(X) =

Mediana, m(X), este numrul:
X ( n ) + X ( n +1) 2, pentru n par 2 m(X) = 2 X n +1 , pentru n inpar ( 2 )
2 x1 + x 2 2 2
(5)
aici nsemnnd c X este ir ordonat ale valorilor xi adic valorile sunt aranjate prealabil ntr-o ordine cresctoare ( permutare a irului de numere 1..n). n general, M(X) semnific oricare dintre valoarile medii menionate (1-5).
Moda X reprezint valoarea din ir care respect condiia ca frecvena sa de apariie fi sa fie
maxim: X = {X i |f i = sup{f j ,1 j n}} Anumite relaii statistice fac apel la aceast valoare. Trebuie menionat c valorile medii nu dau aceeai valoare dar ntotdeauna acestea sunt poziionate astfele nct: min(X) HM(X) GM(X) AM(X) EM(X) max(X) fiind toate egale ntre ele doar pentru irul banal: X1 = ... = Xn. Media aritmetic AM(X), armonic HM(X) i eulerian EM(X) sunt cazuri particulare (p = 1, p = -1, i respectiv p = 2) al mediei putere (sau Hlder) PM(X):
1 n PM(X,p) = X i p n i =1
1/ p
(6)
(7)
(8)
Mediile artimetic AM(X), armonic HM(X) i geometric GM(X) sunt cunoscute sub numele de mediile pitagorice, datorit proprietii acestora ilustrate de figura 1.
282
Figura 1. Mediile aritmetic A, armonic H i geometric G prinse de triungiul lui Pitagora
n fapt, n relaia (7) mai exist un termen (s-l numim termen central), i anume media aritmetico-geometric AGM(X), definit recursiv de relaiile (9): AGM(X,0) = ( AM(X), GM(X) ); AGM(X,k+1) = ( AM( AGM(X,k) ), GM( AGM(X,k) ) ), k 1; AGM(X) = AGM(X,) i cei doi termeni din definirea recursiv a AGM(X) converg unul spre cellalt i spre valoarea limit AGM(X) cnd k. Cu AGM(X), relaia (7) devine: min(X) HM(X) GM(X) AGM(X) AM(X) EM(X) max(X) Legat de termenul central AGM(X), n 30 mai 1799 Gauss a descoperit c: AGM(1,2) = 2 1 dt 2 (1/ 4) 0 1 t 4 = (2)3/ 2 (11) (10) (9)
unde funcia este extensia funciei (n) = (n-1)! la numere reale (numit forma integral Euler), i anume acea funcie care respect relaia (x) = (x-1)(x-1):
(x) = t x 1e t dt
0
(12)
Eroarea
Presupunnd c msurtorile se fac asupra unei probe cunoscute, cu valoarea adevrat A, se poate exprima pentru fiecare determinare individual o eroare absolut (individual) notat i definit prin relaia: i = X i - A este o valoare medie, se exprim eroarea absolut a acesteia (), analog: = X -A i poart numele de eroare medie. (14) (13) Aceasta poate fi negativ (cnd A>Xi), zero sau pozitiv. i n cazul n care variabila
283
21
Erorile se pot clasifica n funcie de proveniena lor n erori ntmpltoare (provocate de numeroase cauze minore si imposibil de controlat), erori sistematice care se evalueaz n raport cu o valoare adevrat (acceptat pe baza unui etalon de referin) i erori grosolane provocate de greeli mari (scparea probei pe jos, erori de calcul etc.). Pentru a se putea observa mai bine semnificaia dimensiunii erorii n raport cu valoarea msurat se mai utilizeaz o alt mrime - eroarea relativ, notat adeseori . Aceasta se calculeaz independent de semn i se exprim prin relaia: = XA A (15)
unde cu X s-a o valoare msurat notat fie xi fie X . De exemplu, cnd X = 2A se poate vedea c = 1. Pentru a se putea exprima raportul care exist ntre valoarea erorii relative () i cea adevrat (A) n pri din 100 se recurge i la o exprimare procentual prin eroarea relativ
procentual notat (%), care este legat de prima prin: (%) = 100.
284
Prelucrarea datelor rezultate din msurtori Atta timp ct legile matematicii se refer la realitate, acestea nu sunt sigure; cnd acestea sunt sigure, nu se refer la realitate Albert Einstein (1879-1955)
Cifre semnificative i rotunjirea rezultatelor
Orice msurtoare sau rezultat experimental trebuie nregistrat sau prezentat cu un

numr corect de cifre semnificative. Acest rezultat - numr este totodat un indicator al
preciziei analizei chimice iar un numr prea mare de cifre ar da o imagine falsa asupra rezultatului. Prin definiie, numrul de cifre semnificative reprezint numrul de cifre dintr-un
numr, n afar de zerourile din faa sau de la coada numrului respectiv. De exemplu,
numrul 2.718 are 4 cifre semnificative iar 96.496 are 5 cifre semnificative. Dar, numrul 0.31910 are doar 4 cifre semnificative (deoarece primul i ultimul zero nu seconsidera semnificative) sau numrul 0.000408 are trei cifre semnificative (zero dintre 4 i 8 nefiind n faa sau la coada numrului respectiv se consider). Una dintre sursele de confuzie o constituie adesea zerourile din coad. De aceea se prefer scrierea sub form exponenial cnd se prezint mai clar numrul de cifre semnificative. De exemplu dac un numr rezultat dintr-o msurtoare este scris:
210-3 - nseamn c acesta are o singur cifr semnificativ, 2.010-3 - nseamn c acesta are dou cifre semnificative (doi i zero), 2.0010-3 - nseamn c acesta are trei cifre semnificative.
Dac nu se specific nimic, precizia se consider 1 din numrul respectiv, adic incertitudinea se refer la ultima cifr scris. Cnd se efectueaz calcule exist procedee de calcul a incertitudinii rezultatului prezentate n cele ce urmeaz ntr-un capitol special dedicat propagrii erorilor prin calcule. n astfel de cazuri, dup efectuarea obinuit a calculului se va rotunji rezultatul la numrul necesar de cifre semnificative n conformitate cu rezultatul evalurii acestor erori:
n cazul adunrii i scderii exist o regul mai simpl, anume rezultatul trebuie s aib
acelai numr de cifre semnificative cu cel mai imprecis numr implicat n calcul.
De exemplu, 14.72 + 1.4331 - 0.0235 = 16.13 pentru c primul numr 14.72 este cel mai imprecis.
n cazul nmulirii i mpririi numrul de cifre semnificative trebuie determinat n

prealabil. Acest numr se propag prin calcule ca i cum s-ar propaga eroarea. Rezultatul calcului poate fi sintetizat prin regula: precizia rezultatului nu poate fi mai bun dect
rdcina ptrat din suma ptratelor erorii relative.
21
De exemplu dac o msurtoare are drept rezultat 52.3 uniti oarecare nseamn c eroarea este de 0.1 uniti ceea ce ar corespunde unei erori relative de 0.1/52.3 adic de 0.00191. Dac intenionm s ridicm acest numr la ptrat se va obine eroarea relativ, = 1.410.00191. Dar cum 52.32 = 2735.29, eroarea relativ calculat corespunde de fapt unei erori absolute de 2735.250.00271 = 7.4 = 10 uniti Aadar, limita preciziei acestei determinri este 10 iar rezultatul se va prezenta 2.74103. Dar cum n practic acest mod de a proceda este incomod se poate renuna la aceast cale. Dar se va ine cont c rezultatul trebuie s aib cel mult acelai numr de cifre
semnificative cu cele dou cifre supuse nmulirii. Sau i mai bine se poate urma regula de
rotunjire a rezultatului la acelai numr de cifre semnificative cu cea mai imprecis dintre cantitile implicate n calcule. Referitor la rotunjiri, dac dup ultima cifr semnificativ mai apare un numr mai mare ca 5, aceasta se va rotunji prin adaus, dac aceasta este o cifr mai mic dect 5, rotunjirea se face prin scdere. Cnd ultima cifra este exact 5 se execut rotunjirea n funcie de cifra precedent acesteia. Dac precedenta este impar se rotunjete prin adaus iar dac cifra precedent este par, prin scdere, pentru a se media efectele rotunjirilor.
286
Prelucrarea datelor rezultate din msurtori Nu pot dovedi nimic cu statistica dect adevrul. GEORGE CANNING Om de stat englez (1770 - 1827)
Elemente de statistic
Prelucrarea datelor rezultate din msurtori prin analize instrumentale este foarte strns legat de statistica matematic prin caracterul aleator [147] al acestora. Exist dou ramuri ale statisticii aplicate, statistica descriptiv i statistica inductiv.
Statistica descriptiv este utilizat pentru descrierea naturii datelor experimentale. Statistica inductiv este util n practic pentru ca datele nregistrate conform
statisticii descriptive s poat cpta un sens practic, anume o afirmaie, o prezicere sau o decizie referitoare la a cestea. Deci, rezultatele se comunic n conformitate cu regulile statisticii descriptive iar utiliznd statistica inductiv se interpreteaz n final rezultatele. Prin natura msurtorilor instrumentale acestea implic apariia unor erori. Acestea se deosebesc i prin implicaiile statistice ale acestora:
Erorile sistematice: Indic faptul c metoda nu se poate aplica fr o prealabil corecie; Sunt caracterizate prin aceea c erorile msurtorii au aceeai mrime i acelai sens. Erorile ntmpltoare: i au originea n limitele metode (performanele tehnice) care duc la o lips de precizie
a acestora;
Pot fi tratate i prelucrate statistic; Erorile grosolane: Nu au soluie i implic repetarea analizei (cu evitarea respectivei erori).
Statistica asociaz oricrui eveniment [148] o anumit frecven de apariie, adic un numr care indic ct de des se produce acel eveniment. Probabilitatea este limita spre care tinde o frecven la un numr foarte mare sau infinit de ncercri. De exemplu, dac aruncm o singur dat un zar (cu feele numerotate de la 1 la 6) probabilitatea de apariie a unei fee este 1/6. Deci, din cele 6 evenimente posibile - apariia uneia dintre cele 6 cifre - apariia unei anumite fee, s zicem a cele cu cifra 2, este un eveniment. Practic, dup un numr foarte mare de ncercri, frecvenele de apariie vor fi foarte apropiate de probabilitile de apariie al fiecreia dintre fee, lucru ilustrat n fig. 1.
[147] Caracter aleator se atribuie unui fenomen ntmpltor sau supus legilor hazardului. [148] Se poate asocia msurtoarea instrumental care duce la un rezultat cu un eveniment aleator. Chimie Analitic i Instrumental 287
21
6 Frecventa de aparitie
6, %: 100 /6 5, %: 100 /6
1, %: 100 /6 2, %: 100 /6
5 4 3 2 1 1 1.5 2 2.5 3 3.5 4 4.5 5 5.5 6
1-6: 100% 4, %: 100 /6 3, %: 100 /6
Fig. 1. Probabilitile de apariie a unuia dintre numerele de pe feele unui zar cu 6 fee (1/6)
Valoare medie (eveniment)
Fig. 2. Frecvena de apariie a mediei numerelor de pe feele a dou zaruri
Dac considerm c aruncm dou zaruri deodat, probabilitatea de apariie a valorii medii pentru cele dou zaruri (aruncate tot o singur dat) este un alt eveniment avnd probabilitatea ilustrat pe fig. 2. De exemplu apariia feelor 6 pe ambele zaruri are probabilitatea 1/6 la fiecare zar, deci (1/6)2= 0.028. Se poate observa c n acest caz lucrurile se schimb, aprnd un maxim la 3.5. Dac mrim numrul de zaruri foarte mult, curba probabilitii de apariie a valorii medii ieite tinde ctre distribuia normal a lui Gauss. Aceasta are forma din fig. 3. Funcia din matematic (aici distribuia Gauss) amintit are expresia:
P ( x,, ) =
(x ) ) 1 exp( 2 2 2
2
(16)
unde x ia valori pe domeniul [-, +] iar valorile i sunt constante pozitive.

0.1
0.08
0.06 N( x , 0 , 5 ) 0.04
N(x,0,)
x
0.02
15 10 5 0 x 5 10 15
Fig. 3. Aspectul unei distribuii normale Gauss N(x,0,5) - adic = 0 i = 5, graficul din stnga i N(x,0,) cu -12 x 12 i 1 9 - adic = 0, graficul din dreapta)
n statistic P(x, , ) mai poart denumirea de densitate de probabilitate. Aceast distribuie mai poate fi simbolizeaz N(x,,) pentru o reprezentare prescurtat iar uneori notaia N(,) se folosete pentru a exprima faptul c o anumit funcie are proprietile amintite mai sus. Valoarea constant poart numele de valoare medie (sau medie), reprezentnd media tuturor evenimentelor iar poart numele de deviaie (sau abatere) standard - o msur a mprtierii valorilor x n jurul mediei. Pentru un numr finit de msurtori (evenimente), adic n condiiile unor variaii pur ntmpltoare valorile acestor constante, media () i deviaia standard () se calculeaz astfel:
x
i =1
; = 2 ; 2 =
(x
i =1
(17)
unde xi este o determinare individual iar n reprezint numrul total de determinri.

Cazul numrului mare de msurtori
Dac considerm o msurtoare instrumental, n presupunerea c se face un numr foarte mare de msurtori (n>100), se obine adesea o distribuie a rezultatelor n jurul mediei apropiat de distribuia normal. O reprezentare idealizat pentru o rezultatul unei analize instrumentale cu media 12 g i abaterea standard de = 4 g este redat n fig. 4.
0.12
0.12 0.1 0.08
P ( x)
0.06 0.04 0.02 0 0 0 4 8 12 x 16 20 24 g 24 3
0 -3 -2 -1
Fig. 4. Aspectul distribuiei unui rezultat analitic x, cu media = 12g i abaterea standard de = 4g; valoarea funciei pentru x= - punctele de inflexiune ale graficului acesteia
Se constat c valorile delimiteaz nite suprafee ale ariei de sub curb (v. fig. 4), anume ariile corespunztoare:
1 conin 68% din toate datele; 2 conin 95.5% din toate datele; 3 conin 99.7% din toate datele.
n concluzie pentru seturi mari de date:
21
se poate utiliza curba de distribuie normal pentru a se prezice ct de probabil are loc un
anumit eveniment;
aceast distribuie furnizeaz o metod util pentru controlul de calitate industrial, unde de
regul se ntlnesc seturi mari de date.
Cazul numrului redus de msurtori
Pentru caracterizarea unor seturi reduse de date se folosesc alte mrimi - media de
selecie, notat x , i dispersia de selecie, s2:
x = x i /n , s 2 =
i =1
(x
n i =1
n 1
, s = s2, s2 = 2n/(n-1)
(18)
Cuvntul selecie scoate n eviden faptul ca din infinitatea posibil (teoretic) de msurtori s-au ales doar o parte - care poart numele de selecie (eantionare). Deosebirea fa de cazul numrului mare de msurtori este adesea minor i de multe ori se renun la cuvntul selecie pentru mai mult simplitate. Acest caz este cel mai frecvent ntlnit n practic. n cazurile msurtorilor analitice instrumentale apar, n mod firesc, urmtoarele ntrebri:
Proba de analizat este reprezentativ pentru ntreaga populaie? Cu alte cuvinte valorile se
distribuie n jurul mediei pur ntmpltor sau aceast distribuie este deviat - termen utilizat de statistic pentru a indica un factor cu influen semnificativ (vezi Anexa V).
Dac am realizat o selecie nentmpltoare sau deviat din mulimea tuturor analizelor
posibile, diferenele observate afecteaz rezultatul semnificativ sau nu. Pentru a se putea verifica statistic apariia unor valori sau rezultate deviate, n afara mediei de selecie i a deviaiei standard de selecie menionate anterior, se mai utilizeaz:
numrul de grade de libertate df (in locul valorii n), abaterea standard a mediei de selecie
s x , coeficientul de variaie CV, abaterea standard relativ RSD: 100 s x s sx , CV = x , RSD = (19) x x n *: Trebuie s acordm o atenie mare numrului de grade de libertate (df) a crui importan este major n cazul seleciilor mici. Astfel, ng = n - (numrul de parametrii calculat din datele seleciei). De exemplu, dac se fac 10 msurtori la calculul s2 se folosete un singur parametru calculat din datele seleciei - media. Deci avem 10-1 = 9 grade de libertate, adic df = 9. n cazul unei regresii bazat pe ecuaia y = ax + b unde a i b se calculeaz din datele seleciei vom aplica acelai principiu, adic df = 10 - 2 = 8. df = n-1*, s x =
ntreaga problem a lumii n care trim este aceea c nebunii i fanaticii sunt ntotdeauna att de siguri pe ei, iar oamenii detepi att de plini de ndoieli Bertrand Russell (1872 - 1970), filozof britanic 290 Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
Teste de verificare a ipotezelor statistice
Una dintre numeroasele aplicaii practice ale statisticii matematice este verificarea ipotezelor. S consideram o repartiie unidimensional cu densitatea de repartiie: f(X, 1, 2, ) (20) care depinde, n afar de variabila aleatoare X = {x1, x2, , xk}, de unul sau mai muli parametrii constani, i. n anumite cazuri practice trebuie verificat dac parametrii repartiiei cercetate (de exemplu msurtorile efectuate) au anumite valori ateptate. n ali termeni, aceasta nseamn a verifica dac se respect o anumit distribuie, evident asupra creia neam fixat, sau dac se modific unul din parametrii i ai distribuiei (20) n urma unei intervenii experimentale. De exemplu, trebuie verificat dac rezultatele date de un anumit instrument de monitorizare are o distribuie normal (sau de alt tip). n limbaj statistic, un astfel de test recurge la verificarea ipotezei de zero - n general o afirmaie n care credem i pe care sperm, dup caz, ca testul s o confirme sau sa o infirme. n cazul de fa aceasta se formuleaz astfel: H0: parametrul 1 al repartiiei cercetate ia valoarea 0. Aceast ipoteza are o singur alternativ, H1: parametrul 1 ia o valoare diferit de 0, fr ns a preciza ce valoarea ia parametrul respectiv n realitate. De asemenea prin testul respective nu se poate gsi ce alt distribuie s-ar potrivi cel mai bine pentru rezultatele experimentale obinute. S-au un alt exemplu tipic este cel al unui cercettor interesat de faptul c viteza de reacie a unui ofer depinde de consumul de alcool. n acest caz, notndu-se cu 1 timpul mediu de rspuns la auzul unui semnal sonor, dup ce oferii au consumat alcool, iar cu 2 timpul mediu de rspuns n lipsa consumului de alcool, ipoteza de zero implic faptul c parametrul 1-2 este zero iar formularea se face astfel: H0: 1-2=0 (sau H0: 1=2) cu alternativa H1: 1-20
Ipoteza de zero este o ipoteza a lipsei diferenelor ntre parametrii caracteristici ai populaiilor sau ntre mrimile comparate prin testare, care adesea se sper s fie infirmat.
Cuvntul de zero din denumirea ipotezei de zero simbolizeaz tocmai faptul c prin respectiva ipotez se admite lipsa oricrei diferene. n cazul menionat mai sus, dac datele experimentale vor indica o diferen destul de mare ntre cele dou medii, adic este adevrat faptul c alcoolul are o influen asupra mediei vitezei de reacie, atunci ipoteza de zero poate fi respins i, implicit, admis ipoteza alternativ, cea n care crede cercettorul, H1.
Observaie
291
21
Dac testul statistic se refer la unul dintre parametrii i ai legii de probabilitate f(X, 1, 2, ), atunci testul se numete parametric. Dac se refer la o lege de probabiliti f se numete test de concordan. Se numete eroare de ordinul I probabilitatea de respingere a unei ipoteze adevrate. Probabilitatea de a se produce o astfel de eroare este mic dar exist ntotdeauna i este propus de ctre experimentator. Aceasta se noteaz cu i (0,1). Se numete eroare de ordinul II probabilitatea de a se admite o ipotez fals. Aceasta se noteaz cu . Se numete putere a testului, probabilitatea de a se respinge o ipotez fals i se noteaz cu , iar = 1 - fiind principalul criteriu pentru compararea diferitelor teste statistice.
Testul t - compararea a dou medii
Testul t este unul dintre cele mai cunoscute i utilizate teste statistice bazat pe o distribuie cunoscut n statistica matematic, distribuia t [149]. Una dintre aplicaii const n compararea a dou medii. Fie X o variabil aleatoare care const n rezultatele unei msurtori instrumentale nemodificate (1) i modificate (2) asupra unei probe. S considerm c aceast msurtoare urmeaz legea normal N(x, , ) n care ambii parametrii i sunt necunoscui. Ipoteza de zero admis pentru aceast caracteristic este aceea c ambele metode duc la acelai rezultat mediu, adic H0: m1 = m2 iar ipoteza alternativ H1: m1 m2, unde cu m1 respectiv m2, s-au notat valorile medii obinute experimental n cazurile amintite. Seleciile empirice (adic rezultatele concret msurate) n cele dou cazuri se vor nota: S1={x1', x2', ..., xn'} i S2={x1", x2", ..., xm"} unde n poate s difere de m. Mediile valorilor experimentale m1 i m2 i dispersiile de selecie s12 i s22 corespunztoare celor dou selecii S1 i S2 se vor calcula astfel: m1 = xi'/n; m2 = xi"/m; s12 = (n-1)-1(xi'-m1)2; s22 = (m-1)-1(xi"-m2)2; urmtoarei valori t care delimiteaz domeniul critic (pe baza datelor experimentale): t exp = m1 m 2
2 2 s1 s 2 n m
(21)
pe care le considerm selecii din dispersii diferite - necunoscute. Testul t recurge la calculul
(22)
Dac texp < t,/2, unde reprezint numrul gradelor de libertate iar coeficientul de risc (quantila) atunci se admite ipoteza H0. n caz contrar se accept ipoteza alternativ, H1
Precizri
[149] Vezi un manual didactic de statistic, de exemplu: Potra G. T., Probabiliti i Statistic Matematic. Procese Stochastice, Transilvania Press, Cluj-Napoca, 2003, p.111. 292 Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
Valoarea - numrul gradelor de libertate - se calculeaz cu ajutorul ecuaiilor: 1 c2 (1 c) 2 s2 , c= 1 = + n n 1 m 1

2 2 s1 s 2 + n m
(23)
Valoarea - coeficientul de risc - se fixeaz n tehnic pe valoarea = 0.05 acceptabil n majoritatea cazurilor obinuite (deci, /2 = 0.025), care implic o probabilitate procentual de a accepta o ipotez fals de 5%. Dac dispersiile se consider egale, = n'+n"-2. Numrul de determinri (n' si n") trebuie s fie mic, ntre 5-30 determinri. Valoarea t,/2 se va scoate din tabele disponibile n majoritatea crilor specializate n statistic sau se calculeaz folosind o aplicaie ce posed nucleu de calcul statistic (ca Excel). Se d mai jos o poriune redus dintr-un astfel de tabel (tabelul 1).
Tabelul 20.1. Valori ale funciei de repartitie t (Student) 4 5 6 7 8 9 10 t,/2; = 0.05 2.776 2.571 2.447 2.365 2.306 2.262 2.228 Definiii Quartila (sau cuartila) este una din cele 3 valori care mpart un set de date ordonat
strict n 4 pri egale, astfel nct fiecare parte s reprezinte o ptrime din populaie. Valorile quatilelor aparin setului de date. Astfel, prima quartil (notat Q1), quartila inferioar, taie superior cele mai mici 25% dintre valorile irului de date, i se mai numete percentila 25; a doua quartil (notat Q2),
mediana, taie datele n dou, i se mai numete percentila 50; a treia quartil (notat Q3),
quartila superioar, taie inferior cele mai mari 25% dintre valorile irului de date (i taie superior cele mai mici 75% dintre valorile irului de date), i se mai numete percentila 75. Diferena dintre quartila superioar i quartila inferioar se numete domeniu interquartilic.
Quantila a k-a din m este acea valoare a lui X=x1...xn (xk) care corespunde frecvenei
cumulative k/m. Dac m = 4 atunci quantila se numete quartil iar dac m = 100 se numete
percentil. Teste de eliminare a rezultatelor ndoielnice
Uneori, dup efectuarea unor msurtori, prin examinarea vizual a rezultatelor pare evident c unul sau dou dintre rezultate se abat mult de la grupul de valori obinute i putem fi tentai (pentru a obine un rezultat ct mai bun) s le eliminm. Dar pe ce baz (riguroas) se poate face acest lucru? Privind lucrurile statistic, pentru eliminarea acestora, se poate admite c probabilitile de apariie ale datelor ndoielnice sunt mai mari dect cele admise
21
teoretic. n fig. 5 se prezint o ilustrare a cazului probabilitii anormale pentru astfel de valori ndoielnice.
0.12 0.12 0.1 0.08 P ( x) 0.06 0.04 0.02 0 0 0 4 8 12 x 16 20 24 g 24 3
Date ndoielnice
0 -3 -2 -1
Fig. 5. Situaia probabilitii datelor ndoielnice
Practic, eliminarea acestor rezultate se bazeaz pe aplicarea unor metode statistice recunoscute internaional. Prezentm dou astfel de metode. O prima metod, este denumit regula a erorilor uriae. Conform acestei metode dac se poate calcula deviaia standard a unei msurtori, s, cu ajutorul acesteia, se va putea calcula parametrul M conform relaiei: M = |suspectul-media|/s (24) n continuare, dac M > 4 punctul se respinge iar dac M 4 nu. Metoda amintit (regula erorilor uriae) este un test statistic grosolan dar care se bazeaz de fapt pe distribuia statistic t descris n cele ce urmeaz. O a doua cale, mai riguroas, este aanumitul test Q (sau testul Dixon) pentru care se presupune c se cunoate media i deviaia standard iar datele se consider distribuite
normal. Testul trebuie aplicat o singur dat pentru un rezultat ndoielnic considerat prea
mare (prin simpl inspecie vizual a datelor) i o singur dat pentru altul prea mic (fa de tot ansamblul msurtorilor). Testul const n calculul parametrului Q, dup ecuaia: Qexp = |Xa-Xb|/R (25) unde R este domeniul rezultatelor msurtorii (de exemplu, dup ce am aezat rezultatele n ordinea cresctoare iar X1 este cel mai mic i Xn, cel mai mare, R = Xn-X1), Xa este rezultatul suspect iar Xb este rezultatul cel mai apropiat de Xa (dar nesuspectat). Dup calculul Qexp punctul se elimin cu o siguran de 90% dac valoarea Qexp este mai mare dect valoarea corespunztoare din tabelul cu valori critice (tabelul 2).
Tabelul 2. Valori de decizie pentru testul Q (Dixon) corespunztoare intervalului de ncredere cu probabilitatea (sigurana) de 90%* n 3 4 5 6 7 8 9 10 Q 0.94 0.76 0.64 0.56 0.51 0.46 0.44 0.41 *Desigur, valorile din tabel se modific cu probabilitatea considerat dar cu ct sigurana crete (95 sau 99%), cu att punctul se elimin mai rar.
Prelucrarea datelor rezultate din msurtori Nu este sigur c totul e nesigur Blaise Pascal (1623-1662)
Regresia n analiza instrumental
Termenul de regresie a fost introdus n statistic de englezul Fisher cu ocazia prelucrrii matematice a datelor msurtorilor nlimii populaiei. S-a observat c dac ambii prini sunt mai nali, copii acestora au nlimi mai mici, regresnd spre o valoare medie. Evident, acelai lucru s-a observat i dac ambii prini au nlimea sub medie adic copii vor
regresa spre nlimi mai mari, adic tot spre medie.
Dac ntre caracteristicile Y (de ex. concentraia unui anumit component), X1, X2, ..., Xn (de exemplu semnale) studiate simultan pentru un anumit tip de probe (din mediu, sau materiale supuse analizei chimice) se constat c exist o legtur foarte strns, apropiat de una funcional, se poate aplica analiza de regresie [150]. Aceasta permite aflarea unei ecuaii
de regresie - o funcie care nlesnete calculul uneia din caracteristicile amintite (de exemplu
concentraia uneia din specii pe baza celorlalte mrimi msurate) cu erori evaluabile. Cu ct numrul de puncte (n spaiul multidimensional) este mai mare cu att mai mare va fi ncrederea n ecuaia stabilit. Din cauza erorilor ntmpltoare, care apar practic ntotdeauna, legtura dintre factorii ce afecteaz semnalul analitic este una statistic (mai precis stochastic). De aceea, se ncearc stabilirea prin procedee de interpolare a valorilor Y din distribuia Y(X1, X2, ..., Xp) realizndu-se o apropiere de legtura funcional (ideal) de la cea statistic (real). Aadar printr-o astfel de analiz se gsete un model matematic util n practic, aparent fr un suport fenomenologic (un anumit model fizic). Totui, rezultatele cele mai bune se obin atunci cnd
se ajunge la o concordan perfect ntre modelul fizic considerat i cel matematic. De
exemplu, legea Lambert-Beer n cazul metodelor spectrofotometrice prin absorbie, asigur suportul fizic pentru valabilitatea ecuaiilor liniare. Dup forma matematic a modelului se pot distinge modele liniare i modele
neliniare. Dup numrul de variabile independente implicate se disting modelele
monovariabile Y=Y(X) i modelele multivariabile Y=Y(X1,X2,...,Xp). Chiar i n cazul regresiei liniare se poate dezvolta conceptul de dependen liniar, acesta evolund pn la dependena liniarizabil. Conform acestui concept o ecuaie de regresie este liniar dac dependena funcional ntre variabilele considerate poate fi adus la o form liniar. Conform acestui principiu, toate ecuaiile de regresie: y = alog(x)+b; y = alog(log(x))+b; y = a(1/x)+b; y = aex+b (26)
[150] sinonim cu empirical modelling, curve fitting sau forecastig Chimie Analitic i Instrumental 295
21
sunt dependene liniarizabile i li se asociaz tot modelul liniar de regresie: y = az+b, unde
noua variabil independent z se obine, dup caz, z = log(x), z = log(log(x)), z = 1/x respectiv z = ex. De asemenea, o alt extensie a modelului liniar de regresie se obine atunci cnd factorul eroare acioneaz asupra ambelor variabile implicate n regresie. n acest caz formulele pentru validarea parametrilor regresiei capt o alt form [151].
Regresia liniar
Este frecvent aplicat n practica analizelor instrumentale, consider valabil, pentru datele msurate, modelul: y = + ; = b0 + b1x (27) unde x, y sunt caracteristicile msurate de analist (adesea y este o concentraie a unui analit iar x un semnal analitic), este caracteristica estimat de model pentru y, este eroarea relativ iar b0 i b1 sunt coeficienii care se estimeaz cu ajutorul modelului. O tratare mai general a metodelor de estimare a parametrilor este prezentat n anexe. n cele ce urmeaz ne vom limita la cazul mai frecvent ntlnit adic la regresia liniar bidimensional (neponderat). De la bun nceput trebuie amintit faptul c n acest caz se fac precizrile:
Erorile variabilei y nu depind de cele ale variabilei x (singura care este afectat de eroarea
experimental),
Toate probele etalon (standardele analitice) contribuie n mod egal la eroarea final dat de
analiza de regresie. Se va nota n continuare: i = yi - i; i2 = (yi - i)2
reziduale (totdeauna pozitive), i2:
(28)
Cantitatea i se numete eroare rezidual. A obine minimul sumei ptratelor erorii i2 = minim este obiectivul regresiei liniare simple prin metoda celor mai mici ptrate. Prin acest mod de tratare matematic a problemei se fac urmtoarele presupuneri simplificatoare (fr de care modelul gsit i pierde valabilitatea): (29)
erorile datorate regresiei provin exclusiv din erorile ntmpltoare care afecteaz semnalul
analitic msurat (y);
erorile ntmpltoare ale variabilei y sunt cam de acelai ordin de mrime i au o distribuie
normal;
[151] H. Nacu, L. Jntschi, T. Hodian, C. Cimpoiu and G. Cmpan, Some Applications of Statistics in Analytical Chemistry, Rev. Anal. Chem., 18(6), 409-456 (1999). 296 Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
erorile mrimii msurate sunt independente de valorile x (Atenie! Valorile erorilor nu

valorile y);
erorile valorilor probelor etalon (xi) sunt distribuite normal fiind neglijabile n raport cu
semnalul msurat yi. Conform algebrei liniare, valoarea minim a membrului stng din ecuaia (29) se afl prin rezolvarea sistemului de ecuaii cu dou necunoscute (b0 i b1):
n 2 i = 0 , k = 0,1 b k i =1
Folosind (27) i (28) se obine c: i2 = yi2 + nb02 + b12xi2 - 2b0yi - 2b1xiyi + 2b0b1xi mprind cu n i trecnd la medii (M(X) = X/n): M(2) = M(y2) + b02 + b12M(x2) - 2b0M(y) - 2b1M(xy) + 2b0b1M(x) (x,y), iar b0 i b1 sunt variabile necunoscute, calculabile din impunerea (30). Derivnd expresia (32) i folosind (30) se obine:
(30)
(31) (32)
n cazul de fa valorile medii M() sunt valori cunoscute, calculabile din irul de date
M( 2 ) M( 2 ) = b0-M(y)+b1M(x) = 0 =b1M(x2)-M(xy)+b0M(x) = 2b 0 2b1

Soluia obinut prin rezolvarea sistemului (33) pentru necunoscuta b1 este: b1 = M(xy) M(x)M(y) ; b0 = M(y) - b1M(x) M(x 2 ) M(y 2 )
(33)
(34)
De aici (34) rezult i b0.
297
21 Credei pe cei care caut adevrul; ndoii-v de cei care l-au gsit Andre Gide (1869-1951)
Propagarea erorilor
Pe parcursul unui proces de monitorizare sau de execuie al unei analize chimice de laborator rezultatele msurtorilor instrumentale, semnalele analitice sunt supuse unor calcule matematice care au drept rezultat rezultatul final al analizei, de exemplu concentraia de poluant sau, mai general, a speciei chimice evaluate. Erorile rezultatelor provocate de ntregul proces analitic (ncepnd cu luarea probei si terminnd cu ultima msurtoare efectuat) se propaga prin aceste calcule afectnd rezultatul final printr-o modificare a erorii. nelegerea i deprinderea legilor propagrii erorilor prin calcule reprezint de fapt obiectivul prezentului subcapitol. Menionm de la nceput c propagarea se refer att la erorile ntmpltoare ct
i la cele sistematice.
n general, s notm cu y o funcie calculat n cadrul unei analize chimice i convenim c x1, x2, ... , xm sunt argumentele acestei funcii i anume semnale analitice, respectiv constante, msurate experimental. Notm de asemenea erorile argumentelor funciei 1, 2, ... , m. Pentru funcia: y = y(x1, x2, ... , xm) erorilor argumentelor ct i de valorile argumentelor, adic: y = y(1, 2, ... , m, x1, x2, ... , xm) (36) Prezentarea in extenso a tratrii matematice a propagrii erorilor prin calcule, pentru cazul cel mai general, (prezentat, de exemplu, pe http://www.itl.nist.gov.div989/handbook/) fiind prea voluminos pentru spaiul din prezenta lucrare vom prezenta o variant simplificat. Pentru nceput s considerm ipoteza plauzibil i << xi i n acest caz erorile pot fi tratate ca nite difereniale, adic i = dxi. Conform algebrei liniare rezultatul aproximativ [152] va fi: dy = i (35) va trebui calculat o nou eroare, pe care o notm y, care va fi funcie att de dimensiunile
y y ; err(y) = err(x i ) x i x i
(37)
n acest caz se poate observa gsirea erorii rezultatului are la baz calculul derivatelor pariale ale funciei y, din ec. (35), n raport cu toate variabilele acesteia i pe nmulirea rezultatului derivatei cu valoarea erorii variabilei i corespunztoare. Suma acestor produse va da chiar valoarea rezultatului.
[152] Se renun la diferenialele de ordin superior. 298
S considerm n cele ce urmeaz cteva exemplificri prin cazuri mai des ntlnite n practic.
Eroarea la adunare sau scdere
S considerm cazul sumei valorilor A i B, rezultatul fiind y. n acest caz pentru orice calcul de forma y = A + B eroarea rezultatului va fi: y = A+ B (38) De ce? Pentru c se ia n considerare ntotdeauna cazul cel mai nefavorabil. n cazul adunrii sau scderii, dei erorile ar putea s se anuleze reciproc (n cazul cel mai fericit) este totui posibil s aib acelai sens si sa se cumuleze. De aceea se ia n considerare cazul nefavorabil. Evident c de aici, n cazul adunrii amintite, eroarea relativ va fi: y = y/y = (A + B)/(A+B) (39) Cum adesea msurtoarea instrumental repetat duce la valori ale incertitudinii (exprimat ca deviaie standard de selecie a mediei notat sy) avem inndu-se cont de o proprietate a dispersiei (dispersia sumei a doua variabile independente este suma dispersiilor): sy = (sA2 + sB2)1/2 rezultatul y = 15 + 1200 = 1215 iar apoi se va calcula eroarea asociat acestuia:
s y = 0.52 + 102 = 10,01
(40)
Dac de exemplu A = 15 cu sA = 0.5 i B = 1200 cu sB = 10 se va afla mai nti
Deci, rezultatul final se va scrie: y = 1215 cu sy = 10.01 (de exemplu y = 1215 310) fiind exprimat n uniti fizice specifice instrumentului utilizat. Eroarea relativ se va exprima: y = 10.01 = 0.0082 1215
n cazul unei diferene, mai concret n cazul citirii volumului unei msurtori de
reactiv cu biureta, unde se face o scdere ntre dou citiri - prima, cea iniial (1) i a doua, final (2) - calculul se face, evident, identic (V = V1 - V2; V = V1 + V2). Dac considerm un caz i mai complicat, de exemplu: y = a + b - c, cu incertitudinile respective notate sy, sa, sb, sc se va calcula incertitudinea rezultatului din ecuaia:
2 2 s y = sa + s 2 + sc b
(41)
(42)
iar eroarea relativ, pentru cel mai fericit caz: y = sy a +bc (43)
299
21
Se observa c valoarea erorii relative depinde mult de valoarea rezultatului final. O

valoare mic a rezultatului duce automat la erori relative mari. De exemplu, s considerm
cazul unei diferene de volum mici. Dac avem, ntr-un prim caz, o eroare de citire de 0.02 ml la un volum total de 40 ml, msurat prin diferen, nseamn c eroarea relativ a msurtorii de volum este: V = V 0.02 + 0.02 0.04 = = = 0.01 sau 0,1% V 40 40 V 0.02 + 0.02 0.04 = = = 0.1 sau 1% V 4 4
Dac cu aceeai biuret msurm, ntr-un alt caz, doar 4 ml atunci: V =
Sau, cu alte cuvinte, n acest ultim caz se face o eroare de 10 ori mai mare. De aceea
trebuie evitate msurtorile care implic obinerea unor concentraii foarte mici chiar dac
sunt obinute prin diferene ale unor cifre mari. n cazurile monitorizrii poluanilor mediului aflai, prin natura lor, n concentraii joase ne putem de aceea atepta la valori extrem de mari ale erorilor.
Eroarea unui produs
S considerm cazul erorii aprute prin calculul unui produs: y = x1x2. Aici, eroarea rezultatului se va calcula, n urma aplicrii ecuaiei (37): y = 1x1 + 2x2 iar eroarea relativ: y = y y 1 2 + x1 x 2 (44)
(45)
Se poate observa c eroarea relativ n cazul unui produs va fi dat de suma erorilor
relative ale variabilelor. Eroarea unui ct
i n cazul unei mpriri regula de mai sus rmne valabil. S considerm calculul unei concentraii, C = m/V, unde m este masa si V volumul. Considernd derivatele funciei C = C(m,V) = m/V:
m 1 m m = 2 = ; m V V V V V
(46)
300
i ntorcndu-ne la ecuaia (37) lund semnul + tot din considerarea cazului cel mai nefavorabil [153] (sau aplicarea modului - mai corect): 1 m + V 2 V V
C = m
(47)
Eroarea relativ va fi:

C = C m V = + C m V
(48)
Pentru cazul n care intervin att nmulirea ct i mprirea, anume y=a*b/c cu erorile respective sa, sb, sc eroarea se va calcula:
s s s sy = a + b + c a b c
2 2 2
(49)
Eroarea unei exponeniale
S considerm exponeniala y = ab (a > 0, b -1,0). Aplicnd ecuaia (37) se va obine pentru eroare:
y = a
b b b a + b a b = a a b ln(a) + b a b = a b ( a ln(a) + b ) a a b a
(50)
Trecnd la dispersii: b b s y = a b (s a ln(a) + s b ) = y(s a ln(a) + s b ) a a Eroarea relativ:

y = sy y = s a ln(a) + s b b a
(51)
(52)
[153] n urma derivrii n raport cu variabila V, termenul al doilea ar avea semnul -. Considerand cazul cel mai nefavorabil (erorile actioneaz n acelai sens) am scris semnul + n loc de -. Chimie Analitic i Instrumental 301
Anexe
Anexe
Anexa 1: Ecuaia lui Bragg
Razele care interfer dup difracie, sunt prezentate pe fig. 1 cu notaiile 1 i 2. Raza notat cu 3 pe aceeai figur este o construcie ajuttoare egal ca lungime cu raza 1 dar deplasat astfel nct intersecia cu planul de atomi s se afle pe aceeai vertical cu raza interseia razei 2 cu planul superior de atomi. n felul acesta, dup cum se poate observa mai clar pe fig. 2, diferena de drum optic dintre cele dou raze se poate afla ducnd verticale din punctul A pe razele incident i emergent de pe planul al doilea de atomi (cu alte cuvinte trasnd segmentele AD i AB, egale). Se poate remarca c diferena de drum este suma DC + CB. Triunghiurile ADC i ABC fiind egale DC = CB.
2 1 3 3 A 2
D d C
Fig. 1. Difracia i interferena pe dou planuri consecutive de atomi dintr-un cristal
Fig. 2. Construcie ajuttoare pentru obinerea ecuaiei lui Bragg. Razele 2 i 3 sunt aceleai cu cele de pe fig. 1
n triunghiul ABC se poate scrie, n conformitate cu definiia sinusului: sin = CB CB = AC d
unde d este distana dintre planele de atomi (AC = d). De aici: CB = dsin. Dar DC = CB = dsin. Deci, diferena de drum DC + CB se poate scrie: DC + CB = 2dsin. Se mai cunoate din fizic condiia de interferen constructiv - diferena de drum ntre cele dou raze s fie un numr ntreg de lungimi de und (n). Scriind aceast condiie: 2dsin = n am scris tocmai ecuaia lui Bragg, folosit mult att n XRF ct i n difracia cu raze X.
303
22
Anexa 2: Ecuaia lui Sherman
Cnd o radiaie primar ptrunde prin suprafaa unei probe dintr-un material, are loc o interaciune ntre aceasta i atomii din acel material. n final, radiaia incident este absorbit dar, totodat, ia natere, aa cum s-a artat, o radiaie de fluorescen. Pe drumul su ctre exterior radiaia de fluorescen, emis de ctre un anumit atom, ntlnete ali atomi (de acelai fel sau strini) avnd loc tot attea interaciuni. Radiaia care intr n detector este rezultatul tuturor acestor interaciuni. Absorbia radiaiei primare ct i absorbia sau intensificarea celei de fluorescen poarta denumirea comun de efect de matrice. Asupra acestei probleme, de loc simple, s-au aplecat de-a lungul timpului mai muli autori [154,155]. Ecuaia admis astzi drept cea mai adecvat poart numele de ecuaia lui Sherman [156]. Fr a prezenta deducia, considernd unghiurile de inciden (1), respective a celui sub care prsete proba radiaia de fluorescen (2), cele prezentate pe fig. 3, expresia propus de Sherman pentru intensitatea radiaiei de fluorescen este urmtoarea:
2
Ii =
S C g (E i ,Ii )i (E) i i 4sin1 (E) + (Ei ) sin1 sin 2
Proba
(E) = Cii (E)

i
Fig. 3. Unghiurile de inciden - pentru radiaia primar 1, respectiv a celui de ieire 2 - pentru radiaia de fluorescen unde : Ii este intensitatea observat pentru linia caracteristic a elementului i, E - energia radiaiei incidente, Ei - energia liniei caracteristice a elementului i msurat, S - aria suprafeei iradiate a probei, Ci - concentraia elementului i n prob, gi - o constant de proporionalitate caracteristic elementului i, 1 - unghiul dintre suprafaa probei i radiaia X - incident, 2 unghiul dintre suprafaa probei i detector, - unghiul solid al radiaiei care ptrunde n detector, (Ei, Ii) - rspunsul instrumentului la energia Ei a liniei caracteristice pentru elementul i, i(E) - coeficientul de absorbie masic al elementului i la o valoare a energiei radiaiei incidente E, (E) coeficientul total de absorbie al probei pentru energia radiaiei incidente E, (Ei) - coeficientul total de absorbie al probei la valoarea energiei liniei caracteristice a elementului i.
Ulterior Sherman a dezvoltat ntr-o alt lucrare [157] teoria a sa pentru a putea exprima intensitatea radiaiei X emise dintr-o prob cu mai multe elemente, supuse unei iradieri cu o surs de radiaie policromatic. Perfecionarea ulterioar teoriei lui Sherman de ctre Sharaiwa i Fujino [158] a dus la o expresie mai general, cunoscut n literatura de
[154] von Hamos, L., Arkiv. Math. Astron. Fys. 31a, 25, 1945. [155] Gillam, E., Heal, H.T., British Journal of Applied Physics, 3, p. 353-358, 1952. [156] Sherman, J., ASTM Special Tech. Publ. No. 157, 1954. [157] Sherman, J., Spectrochim. Acta. 7, 283, 1955. [158] Shiraiwa, T., Fujino, N., Japanese Journal of Applied Physics, 5(10), p. 886-899, 1966. 304 Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
Anexe
specialitate tot sub denumirea de ecuaia lui Sherman fiind folosit pentru etalonarea majoritatii spectrometrelor de raze X moderne.
Anexa 3: Deducerea expresiei alternative pentru ecuaia rezoluiei (RS)
Rezoluia poate fi scris ca un produs de trei factori, fiecare dintre acetia avnd n componena lor o mrime fizic specific: (1) eficiena coloanei - exprimat prin numrul de talere teoretice (N), (2) capacitatea coloanei - exprimat prin factorul de capacitate (k) i (3) selectivitatea coloanei - exprimat (pentru o pereche de substane) prin mrimea cu acelai nume - selectivitatea notat . Se pornete de la binecunoscuta relaie de definiie a rezoluiei pentru dou picuri alturate, corespunztoare substanelor A i B, i se folosete tR = tM(1+k), cnd rezult RS = t R t R,B t R,A t M (k B k A ) = = w 4 4 (1)
Pe de alt parte, picurile adiacente fiind apropiate se poate face aproximaia:

= B
(2)
Dac se mai ine cont i de definiia numrului de talere teoretice (N): N= t2 R,B 2 B (3)
exprimat n funcie de picul al doilea (cazul cel mai nefavorabil) se poate scrie consecutiv: 2 = B t2 R,B N , = t R,B N (4)
Dar tR,B se mai poate scrie tR,B = tM(1+kB) i (4) devine: = t M (1 + k B ) N (5)
nlocuind n (1): RS = N kB kA N kB kB kA = 4 1+ kB 4 1+ kB kB (6)
cu scopul de a separa cei trei factori amintii la nceput. mprind apoi numrtorul i numitorul celui de-al treilea factor la kA i nlocuind n expresia aprut raportul kB/kA cu
coeficientul de selectivitate , se obine ecuaia final:
RS =
N kB 1 4 1+ kB
(7)
305
22
adic ceea ce era de demonstrat. Primul factor depinde de eficiena coloanei, al doilea de
capacitatea coloanei iar ultimul de selectivitatea coloanei. Cu ct acetia vor fi mai mari
fiecare cu att rezoluia unei separri va fi mai bun. Se poate remarca faptul c influena factorului de capacitate pare redus. Acest lucru este adevrat n cazul coloanelor gaz-cromatografice cu umplutur obinuit cnd k are valori cuprinse ntre 5 i 100. n aceste condiii raportul k/(1+k) este foarte apropiat de 1 i ntradevr contribuia factorului de capacitate a coloanei asupra rezoluiei este neglijabil. Dar, la coloanele capilare unde k ia valori cuprinse ntre 0.1 i 5 datorit micorrii accentuate a volumului fazei staionare, efectul factorului de capacitate devine important. Acest efect este mai clar observat de pe graficul din figura 4. k/(1+k) 1
k 10 5 Fig. 4. Dependena raportului k/(1+k) din ecuaia rezoluiei RS n funcie de valoarea factorului de capacitate (k) Cu alte cuvinte, la coloanele capilare, valorile factorului de capacitate (k) coborte vor determina diferene mult mai mari n rezoluii, fa de cazul valorilor k ridicate. Aadar, la valori k mici (retenii reduse) separrile vor fi superioare datorit unor diferene mai pronunate ntre rezoluii, lucru datorat i factorului de capacitate. n rezumat rezoluia trebuie ntotdeauna privit ca o ecuaie de tipul:
Rezoluia ~ [Eficien][Capacitate][Selectivitate]
306
Anexe
Anexa 4: Deducerea formulei de calcul a concentraiei necunoscute prin metoda standardului intern
Anumite substane pure, cunoscute, pot avea timpul de retenie foarte apropiat de cel al substanei de analizat datorit unor interaciuni cu suportul asemntoare. Acestea pot fi adesea utilizate n calitate de standard intern. Conform acestei variante se cromatografiaz dou probe: prima, folosind proba necunoscut la care s-a adugat o cantitate fixat de standard intern (fig. 5-stnga), i a doua, folosind o cantitate cunoscut din substana de analizat la care s-a mai adugat aceeai concentraie cunoscut de standard intern (fig. 5dreapta). Se fac urmtoarele convenii de notare: CX, E = concentraia cunoscut din substana X (substana de analizat) n proba etalon, AX, E = aria msurat a picului corespunztor substanei X de concentraie cunoscut, CS, E = concentraia standardului intern n ambele probe (identic), AS, E = aria picului standardului intern n cazul probei etalon, AS, N = aria picului standardului intern n cazul probei supuse analizei.
SEMNAL DETECTOR X, N
SEMNAL DETECTOR
X, E
TIMP
TIMP
Fig. 5. Cele dou probe executate pentru o analiz prin metoda adausului standard a substanei X; proba I (stnga) este obinut pe o prob necunoscute (X, N) iar proba II (dreapta) este obinut folosind o prob etalon - cunoscut (X, E); n ambele cazuri este prezent standardul intern, cunoscut, n aceeai cantitate
Detectorii gaz cromatografelor raspunznd liniar iar substanele fiind apropiate ca structur, rezult ca C este proporional cu A sau C/A = constant. Scriind acest lucru pentru proba I (fig. 5 - stnga) i pentru proba II (fig. 5 -dreapta): CX,N A X,N CS,N AS,N CS,N AS,N CX,E A X,E CS,E AS,E CS,E AS,E
CX,N =
A X,N ,
CX,E =
A X,E
Dar, CS,E = CS,N deoarece am folosit aceeai concentraie n ambele experimente. nlocuind CS,N cu CS,E obinem pentru concentraia necunoscut relaia: CX,N = AS,E A X,N CX,E AS,N A X,E
n care literele au semnificaiile precizate anterior.

22
Anexa 5: Selecii deviate i nedeviate
n practic se consider lucreaz ntotdeauna cu selecii (eantionare) din mulimi. De exemplu realiznd o analiz instrumental se face o selecie din mulimea tuturor analizelor executabile pe o prob, s zicem n numr de peste 100. Dar, de regul, se execut 3-5 probe. Selecia executat este deviat sau nedeviat (vezi fig. 6) n funcie de aspectul graficului frecvenelor obinut practic fa de mulimea ansamblului ntregii populaii. Se observ ca o selecie deviat difer de una nedeviat.
Ansamblul populaiei ntreg ansamblul Frecven femei brbai
Frecven
Selecia deviat
Selecia nedeviat
nlime
Fig. 6. Distribuia unei populaii statistice i aspectul Fig. 7. Un exemplu de deviaie este cel introdus pur i simplu prin evaluarea unei selecii nedeviate i a uneia deviate; se observ c media unei selecii nedeviate este practic identic separat a nlimii femeilor i brbailor fa de ansamblul populaiei cu a ntregii populaii din care s-a fcut selecia
Un exemplu edificator n acest sens este nlimea oamenilor (v. fig. 7). Se tie c nlimea populaiei umane are o valoare medie ntlnit cu o frecven maxim. n practic apar selecii deviate datorit unui factor de influen. De exemplu n analizele instrumentale apar deviaii n jurul limitei de detecie sau a valorilor ndoielnice n jurul valorii medii. Apariia deviaiilor nu este ntotdeauna un lucru nedorit. Acestea pot apare datorit unei reale influene a unui factor (o dat prezent i alteori absent) asupra a dou submulimi ale populaiei per ansamblu lucru care trebuie constatat experimental. Dar alteori deviaiile pot aprea datorit unor luri incorect a probei (care devine nereprezentativ). i acest ultim caz este bine s fie pus n eviden pentru o mai mare siguran.
308
Anexe
Anexa 6: Ecuaii de regresie [159]
Cel mai cunoscut model matematic de estimare a parametrilor ecuaiilor de regresie este cel fundamentat de Kolmogorov prin minimizarea riscului, un model cunoscut sub denumirea de metoda celor mai mici ptrate: K(X, Y, B) = ( y y ) = ( b 0 + b1x y )
2 2
(8)
unde X,Y,B sunt vectorii coloan ai variabilei independente, variabilei dependente respectiv a coeficienilor. Au fost dezvoltate i alte metode de estimare a parametrilor, bazate pe alte funcii de pierdere (sume de reziduuri) dup cum urmeaz: 1. R. Fisher, 1912, metoda verosimilitii maxime: F(X, Y, B) = (1 exp((y y) 2 2) ) = (1 exp((b 0 + b1x y) 2 2) ) 2. J. Newman, A. Wald, metoda minimax:
NW(X, Y, B) = y y
(9)
(10)
3. Bayes, 1750, metoda probabilitii aposteriori maxime:

0, y y < D(Y Y) 2 NW(X, Y, B) = D(Y Y) 2 1, y y
(11)
n cazul multidimensional se fac conveniile: xT=(x0,x1,...,xp), x0=1; X=(x1,x2,...,xN); Y=(y1,y2,...,yN); =(1, 2, ..., N); BT=(b0,b1,...,bp) iar valoarea estimat este: y = bi x i
i =0 p
(12)
Minimiznd ptratele erorilor K(X,Y,B)=min avem: K(X, Y, B) = ( y y )

2
p = bi x ij y j = min j=1 i = 0
N
(13)
n cazul de mai sus, soluia dat de algebra liniar sistemului de ecuaii:
b k
p bi x ij y j = 0, k = 0, p j=1 i = 0
N
(14)
este, dup aranjarea sumelor:
b x
i i=0
j=1
k j
N x ij = x k y j j j=1
k = 0, p
(15)
dat de ecuaia: B = CZ-1 (16)
[159] H. Nacu, L. Jntschi, T. Hodian, C. Cimpoiu and G. Cmpan, Some Applications of Statistics in Analytical Chemistry, Rev. Anal. Chem., 18(6), 409-456 (1999). Chimie Analitic i Instrumental 309
22
unde:
Z = (zik ) 0i p = ( x k x ij ) 0i p i CT = (c k )0 k p = ( x k y j )0 k p j j
0 k p j=1 0 k p j=1 N N
(17)
Mai concret, dac n urma unei determinri prin analiza spectral [160] dac avem p probe, fiecare avnd cte r constitueni i determinm semnalele pe q canale (de exemplu lungimi de und diferite), semnalele depinznd liniar de concentraii, vor duce la ecuaia: R = CST+E unde: R - matricea semnalelor (rspunsurilor) pe canalele considerate n numr de q pentru fiecare din cele p probe (dimensiune pq); C - matricea concentraiilor celor r componeni n probe (dimensiune pr); S - matricea sensibilitilor (dimensiune qr); E - matricea erorilor - cu aceleai dimensiuni cu R (pq). Deoarece n ultimul timp achiziia datelor se face n laboratoarele de analize aproape exclusiv cu ajutorul calculatoarelor, pentru analiza chimic cantitativ metodele bazate pe algebra liniar multidimensional i statistica multiliniar au devenit aplicaii curente. Odat stabilii, coeficienii i erorile ce afecteaz rezultatele semnalelor pe baza ecuaiilor de regresie, n analiza chimic se parcurge drumul invers, ecuaiile de regresie devenind ecuaii de calibrare (corespondentul multidimensional al curbei de calibrare n dou dimensiuni). Tot ecuaii de regresie se obin i prin implementarea modelelor de decizie multiliniare din domeniul inteligenei artificiale. Ecuaiile i modelele de regresie au cptat o utilizare tot mai frecvent odat cu dezvoltarea instrumentaiei analitice computerizate. n acest domeniu sunt nelipsite curbele de calibrare. O noutate n analiza de regresie multiliniar (multifactorial) este analiza
componentelor principale. Dei aceasta se apropie mai mult de analiza factorial, se nrudete
(18)
foarte mult cu regresia multiliniar. Ca principiu al metodei, este o regresie liniar repetat de un numr de ori egal cu numrul de componente principale considerat. La fiecare iteraie se determin coeficienii componentei considerate avnd ca date de intrare XK: caracteristica principal K, YK: reziduul provenit din iteraia pentru componenta principal (K-1) i ca date de ieire YK+1 , reziduul provenit de la regresia YK dup XK i vectorul de coeficieni BK al componentei principale K.
[160] D. Lorber; K. Faber and R. Kowalski, Anal. Chem., 1983, 55, 643 310 Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
Anexe
Este de preferat analiza componentelor principale n locul regresiei multiliniare att din considerente teoretice [161] ct i practice. Dintre considerentele teoretice, cel mai important este c vectorii BK, K = 1, 2, ... sunt ortogonali n spaiul multidimensional al componentelor principale. Dintre considerentele de natur practic [162], (1) nu este obligatoriu precizat la nceput numrul componentelor principale, numrul acestora putnd s se modifice fr ca componentele principale deja calculate s fie afectate de acest lucru; (2) este mult mai uor de interpretat fiecare component n parte, prin proiecia sa n planul corespunztor; (3) nu sunt afectate corelaiile de serie ntre irurile de date prin aplicarea regresiei liniare repetate n locul regresiei liniare multiple. n optimizare, atunci cnd numrul seturilor de date depete numrul coeficienilor, modelul de optimizare ne conduce la un sistem de ecuaii de regresie. n acest caz se minimizeaz suma erorilor generate de fiecare ecuaie n parte pentru a obine un sistem determinat de ecuaii, de unde, pe acelai principiu algebric enunat la regresia multiliniar, se deduc coeficienii. n continuare, ecuaia de regresie obinut este folosit pentru a da interpretri cantitative ale fenomenului studiat prin intermediul parametrului optimizat. Dezvoltarea softurilor a dus la o explozie pe piaa de programe specializate de prelucrri statistice. Majoritatea acestor programe au implementate rutine pentru calculul regresiilor de diferite feluri:
GraFit, Data Analysis and Graphics Program, Erithacus Software Ltd. Slide, Slide Write Plus for Windows, Advanced Graphics Software Inc. MathCad, MathSoft Inc., Collabra Software Inc. Excell, Microsoft Corporation, Soft Art Dictionary and Program. Statistica, Statistica for Windows, StatSoft Inc. Surfer for Windows, Software Package, Golden Software.
[161] V. Centner, i colab., Anal. Chem.; 1996, 68, 4851-4858. D. Jouan-Rimbaud, B. Walczak, R.J. Poppi, O.E. de Noard and D.L.Massart; Application of Wavelet Transform to Extract the Relevant From Spectral Data for Multivariate Calibration, Anal. Chem., 1997, 69, 43174323. O.Stainback, S.Newmann, B.Cage, J.Saltiel, S.C.Miller, N.S.Dalal; Anal. Chem.; 1997; 69; 37083713. [162] Massart D.L., Vandeginste B.G.M., Deming, S.N., Michotte Y., Kaufman L., Chemometrics: a Textbook, Elsevier, Amsterdam, 1988. Brereton R.G., Chemometrics: Applications of Mathematics and Statistics to the Laboratory; Ellis Horwood; Chichester; 1990. Jalliffe I.T., Principal Component Analysis, SpringerVerlag; New York, 1986. Meloun M., Mlitky J., Forina M., Chemometrics for Analytical Chemistry, vol I: PC-Aided Statistical Data Analysis, Ellis Horwood, Chichester, 1992. Chimie Analitic i Instrumental 311
22
Anexa 7: Constante universale
Mrime viteza luminii n vid sarcina elementar constanta Faraday constanta Boltzmann constanta Rydberg gazelor ideale
Simbol c e F=NAe k R=NAk h NA u me mp mn 0 0 a0 =0e2c/2h R=mee4/8h3c02 g G
Valoare 2.99792458108 1.60217710-19 9.6485104 1.3806610-23 8.31451 6.6260810-34 6.022141023 1.6605410-27 9.1093910-31 1.6726210-27 1.6749310-27 8.8541910-12 410-7 5.2917710-11 7.2973510-3 1.09737105 9.80665 6.6725910-11
Unitate de msur ms-1 As Asmol-1 JK-1 JK-1mol-1 Js Mol-1 Kg kg kg kg A2s2J-1m-1 JA2s4m-1 m cm-1 ms-2 Nm2kg-2
constanta Planck numrul lui Avogadro unitatea atomic de mas masa electronului masa protonului masa neutronului permitivitatea vidului permeabilitatea vidului raza Bohr constanta structurii fine constanta Rydberg R acceleraia standard gravitaional
constanta gravitaional
312
Anexe
Anexa 8: Domeniile de frecven ale radiaiilor i legtura cu substana
micri
tipul radiaiei
>1m
radio rotaie molecular microunde
1m 1mm 10-3m infrarou ndeprtat
vibraie molecular
10-5m
infrarou apropiat rou verde Violet ultraviolet
excitare electronic
10-6m = 1m 700nm 700-620nm 560-510nm vizibil 450-400 10-7m
10-8m Ultraviolet de vid excitarea miezului electronic 10-9m = 1nm 10-10m = 1 raze X 10-11m 10-12m = 1pm excitare nuclear Raze raze cosmice 10-12-10-13m <10-14m
313
22
Anexa 9: Electronegativitatea elementelor
Conform definiiei date de Oxford Paperback Encyclopedia [163]:
electronegativitatea este o msur a abilitii unui element de a acapara electroni & cel mai electronegativ element este Fluorul iar cel mai puin este Cesiul.
Nu exist o metod de msurare i formul unic care s dea expresia electronegativitii (elng), exist ns mai multe scri de elng calculate pe baza altor mrimi msurabile, cum ar fi potenialul de ionizare sau afinitatea pentru electron [164]. Diferite valori calculate pentru elng elementelor se pot gsi pe Internet, unele dintre ele prezentate direct n sistemul periodic al elementelor [165-167. n tabelul urmtor sunt redate valori ale elng calculate pe baza scrii de elng a lui Pauli: [168]
Atom Elng Atom Elng Atom Elng Ac Ag Al Ar As At Au B Ba Be Bi Br C Ca Cd 1.1 1.9 1.5 2.2 2 2.2 2.4 2 0.9 1.5 1.9 2.8 2.5 1 1.7 Cl Co Cr Cu Cs F Fe Fr Ga Ge H Hf Hg I In 3 1.9 1.6 1.9 0.7 4 1.8 0.7 1.6 1.8 2.1 1.3 1.9 2.5 1.7 Ir K Li Mg Mn Mo N Na Nb O Os P Pa 2.2 0.8 1 1.2 1.5 1.8 3 0.9 1.6 3.5 2.2 2.1 1.4
Atom Elng Atom Elng Pb Pd Pt Ra Rb Re Rh Ru S Sc Se Si Sn 1.9 2.2 2 2.2 0.9 0.8 1.9 2.2 2.2 2.5 1.9 1.3 2.4 1.8 1.8 Sr Ta Tc Te Th Ti Tl U V W Y Zn Zr 1 1.5 1.9 2.1 1.3 1.5 1.8 1.4 1.6 1.7 1.2 1.6 1.4
La-Lu 1.0-1.2 Po
Np-No 1.4-1.3 Sb
[163] ***, Oxford Paperback Encyclopedia, Oxford University Press, http://www.xrefer.com, /entry/214768 [164] ***, Wikipedia, The Free Enciclopedia, http://www.wikipedia.org, /wiki/Electronegativity [165] http://www.phs.princeton.k12.oh.us/departments/science/ldusch/electronegativity.htm [166] http://stjohns-chs.org/science/genchem/tables/electronegativities.html [167] http://www.webelements.com/webelements/properties/text/image-flash/electroneg-allen.html [168] http://www.ticalc.org/archives/files/fileinfo/190/19049.html 314 Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
Bibliografie
Bibliografie
1. *** Compendiu de Lucrri Practice: Metode fizico-chimice de analiz, Ed. Lumina, Chiinu, 1993. 2. *** Engineering Statistics Handbook, disponibil pe Internet la site-ul: http://www.itl.nist.gov.div989/handbook/ 3. C. Luca, Al. Duca, Al. Crian, Chimie Analitic i Analiz Instrumental, EDP, Bucureti, 1983. 4. C. Pumnea, I. Dina, Fl. Sorescu, M. Dumitru i T. Niculescu, Tehnici Speciale de Analiz Fizico-Chimic a Materialelor Metalice, Ed. Tehnic, Bucureti, 1988. 5. D.J. Pietrzyk, i C. W. Frank, Chimie Analitic, Ed. Tehnic, Bucureti, 1989. 6. E. Cordo, Analiz Instrumental, Univ. Babes-Bolyai, Cluj-Napoca, 1988. 7. E. Selin Lindgren, X-ray Fluorescence Analysis - Energy Dispersive, n Encyclopedia of Analytical Chemistry Editor - Robert A. Meyers, John Wiley & Sons Ltd, Chichester. ISBN 0-471-97670-9 - publicat i pe Internet. 8. F. Rouessac, A. Rouessac, Analyse Chimique, Methodes et techniques instrumentals modernes, 3e edition, Masson, Paris, 1997. 9. G. Niac i O. Horovitz, Chimie-Fizic - ndrumtor pentru lucrri de laborator, lito. Institutul Politehnic Cluj-Napoca, Cluj-Napoca, 1982. 10. H. Nacu, L. Jntschi, T. Hodian, C. Cimpoiu and G. Cmpan, Some Applications of Statistics in Analytical Chemistry, Rev. Anal. Chem., 18(6), 409-456 (1999). 11. H. Nacu, Metode i Tehnici de Analiz Instrumental, Ed. U.T.PRES, Cluj-Napoca, 2003. 12. http://207.189.173.115/webdoc3.htg/Docs/00326405.pdf 13. L. Jntschi, Metrologia i monitorizarea mediului, Amici, Cluj-Napoca, 2003, 148 p., ISBN 973-85727-2-X. 14. L. Roman, M. Boji, R. Sndulescu, Validarea Metodelor de Analiz Instrumental, Ed. Medical, Bucureti, 1998. 15. L. Tovissi i V. Vod, Metode Statistice, Ed. Stiinific i Enciclopedic, Bucureti, 1982. 16. Lupu, F. Grigorescu, L. Lupu, Analiza Instrumental n Metalurgie i Construcii de Maini, Ed. Tehnic, Bucureti, 1986. 17. M. I. Baritz i P. Iordache, Msurarea i Metrologia Mrimilor Fizico-Chimice, Univ. Transilvania Braov, 1995. 18. M. Medeleanu i M. Milea, ndrumtor de Lucrri: Metode Spectroscopice n Chimia Organic, Universitatea Politehnica Timioara, 1998.
23
19. M. Pleniceanu, M. Isvoranu, C. Spnu, Chimie Analitic, Reprografia Univ. Craiova, 1998. 20. Potra G. Teodor, Probabiliti i Statistic Matematic. Procese Stochastice, Transilvania Press, Cluj-Napoca, 2003. 21. S. Gocan, Cromatografia de nalt Performan, p. I-a - Cromatografia de Gaze, Ed. Dacia, Cluj-Napoca, 1998. 22. S. Gocan, Cromatografie de nalt Performan, p. II-a, Cromatografia de Lichide pe Coloan, Ed. Risoprint, Cluj-Napoca, 2002. 23. T. Hodian, H. Nacu, I. Haiduc, C. Cimpoi, Chimie Analitic, Ed. Quo Vadis, ClujNapoca, 1997. 24. T. Hodian, I. Haiduc, C. Cimpoiu, Chimie Analitic, Cartimpex, Cluj-Napoca, 1999. 25. W. Francisc, F. Winter, I. Lazu, I. Menessy i F. Marx, Metode de Investigaie i de Analiz din Chimia Solidului, Univ. Politehnic Traian Vuia, Timioara, 1983.
316
Index
Index
- de cuvinte cheie -
Definiii abatere standard a mediei de selecie: 12 absorban: 99, 113 analiz fizico-chimic: 3 analiz semi-cantitativ: 265 capacitate de separare: 208, 305 coeficient de distribuie: 205 conductivitate echivalent: 66 conductivitate: 66 constante universale: 312 cuartil: 293 deplasare chimic: 271 domeniu interquatilic: 293 eficien: 208, 305 electronegativitate: 314 eroare: 283 exactitate: 11 factor de capacitate: 205 factor de corecie corespunztor cderii de presiune: 225 factor de retenie: 205 factor de separare: 205 frecven Larmor: 270 indici Miller: 187 intensitatea undei electromagnetice: 91 lime medie a picurilor la baz: 207, 305 limit de detecie: 14 mrimi cromatografice corectate: 225 median: 293, 282 medii: 281 nuclee echivalente: 273, 275 numr de cifre semnificative: 285 numr de talere teoretice: 206 numr de und: 113 numr efectiv de talere: 207, 305 obiectivul analizei: 10 percentil: 293 precizie: 12 quantil: 293
quartil: 293 randamentul fluorescenei: 159 rapiditatea: 14 retenia relativ: 205 rezisten specific: 66 rezistivitate: 66 rezoluie: 207, 305 rotaie specific: 178 selectivitate: 12, 211, 309 sensibilitate: 13 serie electrochimic: 64 specificitate: 12 standarde analitice: 16 standarde de referin: 270 stoechiometrie: 19 structura fin: 273 substane standard de baz, primar, secundar: 21 termogravimetrie: 86 timp de via al unei specii moleculare excitate: 155 transmitan procentual: 113 transmitan: 113 ntrebri, probleme a lumii n care trim: 291 analiza chimic de amestecuri multicomponente prin IR: 126 analize cantitative prin spectometria de fluorescen X: 189 conductibilitate electric a substanelor: 66 cromatografie de afinitate: 237 de separare: 208 de verificare pentru examen: 23, 38, 53, 81, 90, 95, 112, 127, 139, 154, 166, 174, 180, 195, 211, 229, 247, 255, 266 efect de matrice: 304 electrod de calomel: 61 eantionare: 290, 308 folosire formazin: 173 informaie analitic: 3, 10 luare probe de ap: 35 pompe cu presiune constant: 237
317
cuvinte cheie
procedeu analitic: 10 speciale n absorbia atomic: 135 standard: 23 teorema Born - Oppenheimer: 115 tratare matematic date: 295 Legi, principii, relaii, ecuaii adaos standard simplu i multiplu: 79 Bayes: 309 Boltzmann: 130 Born - Oppenheimer: 115 Bragg: 186, 303 concentraie procentual de analit: 50 conductivitate: 66 curent n funcie de timp n poteniostatic: 71 Dixon: 294 echivalenilor: 50 eroare de picurare: 47 Euler: 283 Faraday: 71 Fisher: 295, 309 Fresnel: 244 Gauss: 288 Gladstone i Dale: 175 Golay: 223 Hooke: 116 Ilcovi: 75 Kirchhoff: 129 Kolmogorov: 309 LaChance i Trail: 193 Lambert-Beer: 101, 102 Larmor: 268 Lorenz-Lorenz: 176 Lucas-Tooth i Paine: 193 Maxwell: 176 Miller: 187 Morse: 117 Nernst: 58, 59, 62, 65 nivele energia de rotaie: 118 Ohm: 66 potenial de electrod: 60 potenial electrodul de sticl: 62 poteniostaticii: 71 proporii definite: 19 puls-polarografie: 76 Randles-Sevcik: 77 Rayleigh: 167
318
reacii stoechiometrice: 19 refracie: 175 retenie selectiv: 36 Sherman: 189, 304 van Deemter: 209, 214 Wald: 309 Walsh: 129 Noiuni introductive polarografie: 73 spectrometria de absorbie n infrarou: 113 baze fizice ale spectrometriei n infrarou: 116 spectrometrie de emisie: 141 cromatografie de lichide de nalt performan: 231 calculul mediilor: 281 calculul erorilor: 283 teoria erorilor: 285, 298 statistic: 287 teste statistice: 291 ecuaii de regresie: 294 Mrimi abatere standard a mediei de selecie: 290 abatere standard relativ: 290 cantitate de electricitate scurs prin celul: 54 caracteristici unei coloane: 205 coeficient de variaie: 290 conductana soluiei din celul: 55 conductivitate echivalent: 66 constante universale: 312 cromatografice corectate: 225 cuant de energie: 92 deplasare chimic: 270 dispersie de selecie: 290 eroare relativ procentual: 284 eroare relativ: 284 fundamentale n cromatografie: 201 intensitate de curent prin celul: 55 Magnetonul lui Bohr: 275 medie de selecie: 290 numr de grade de libertate: 290 potenial de electrod: 55 putere calorific: 3 randamentul fluorescenei: 159
Index
rezistena soluiei din celul: 55 sensibilitate a analizei: 13 timp de desfurare a procesului de electrod: 55 turbiditate: 170 vscozitate: 3 Metode i tehnici alegerea metodei de analiz: 10 analiza termodiferenial: 87 analiza termogravimetric: 86 analiz spectral nuclear: 267 calcul al mrimilor de selecie: 290 calorimetria diferenial: 88 chemiluminescen: 164 chimice i instrumentale: 10, 17, 39 clasificate n funcie de cantitatea de determinat: 10 colorimetria: 97 comparare a dou medii: 292 conductometrie: 66 coulometria amperostatic: 72 coulometria la curent controlat: 72 coulometria la potenial controlat: 71 coulometria poteniostatic: 71 coulometria: 71 cromatografice: 197 cromatografie de gaze: 213 cromatografie de lichide a sracului: 257 cromatografie de lichide de nalt performan: 231 cromatografie de repartiie: 236 cromatografie ionic: 236, 249 cromatografie n strat subire bidimensional: 263 cromatografie n strat subire: 257 cromatografie pe hrtie: 257 cromatografie planar: 257 cuartrii: 31 cuptorului tubular: 136 de separare: 20 electrochimice: 55 electrolitice: 73 eliminare a rezultatelor ndoielnice: 293 elipsometrie: 179 etalonului intern: 228
evaluare a erorii: 298 exact vs. precis dar inexact: 11 extracie cu solveni aflai n stare supracritic: 34 extracie lichid - lichid prin coloane cu suport solid: 33 factorului de rspuns: 227 fluorescen atomic: 138 fluorescen: 155 fosforescen: 155 fotometrie de flacr: 151 fotometrie: 97 gravimetrie: 39, 41 indicatori de culoare: 46 luminescen: 155 msurarea conductivitii: 67 monitorizarea mediului: 35 nefelometrie: 169 optice de analiz: 91 plasma cuplat inductiv: 149 polarimetrie: 178 polarografie: 73 poteniometrie direct: 57 poteniometrie: 57 precipitare: 39 proiectare monitorizare i analiz chimic: 4 refractometrie: 175 regresie: 295, 309 Rezonana electronic de spin: 279 Rezonan magnetic nuclear: 267 RMN bidimensional: 277 RMN n faz solid: 278 RMN n puls: 277 schema cu hidrogen sulfurat: 40 spectrofotometrie: 97 spectrometrie de absorbie atomic fr flacr: 136 spectrometrie de absorbie atomic: 129 spectrometrie de absorbie n infrarou: 113 spectrometrie de emisie: 141 spectrometrie de fluorescen X: 181 spectrometrie fotoacustic: 111 standarde de analiz chimic: 16 standardizare: 16
319
cuvinte cheie
standardului intern: 228, 307 stoechiometrice i nestoechiometrice: 18 supresorul electrochimic: 253 termice de analiz: 83 termogravimetrie: 86 termometrie: 83 titrare conductometric: 69 titrare entalpimetric: 84 titrare poteniometric: 58 titrimetria: 44 topire cu fondani: 33
tratare cu acizi: 32 turbidimetrie: 170 vaporilor reci: 136 verificare a ipotezelor statistice: 291 voltametrie ciclic: 77 voltametrie de redizolvare anodic: 78 voltametrie: 73 volumetrie: 45
320

Chimie Analitica - 2006

Încărcat de

Informații document

Titlu original

Drepturi de autor

Formate disponibile

Partajați acest document

Partajați sau inserați document

Opțiuni de partajare

Vi se pare util acest document?

Este necorespunzător acest conținut?

Drepturi de autor:

Formate disponibile

Chimie Analitica - 2006

Încărcat de

Drepturi de autor:

Formate disponibile

Chimie Analitic i Instrumental

Horea Iustin NACU Lorentz JNTSCHI

Academic Pres & AcademicDirect 2006

Chimie Analitic i Instrumental

Horea Iustin NACU

Academic Pres & AcademicDirect 2006

Chimie Analitic i Instrumental Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI

Proces de analiz X1 X2 Xn Parametri fizico-chimici

Fig. 1. Schema bloc a unui flux analitic

Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI

Chimie Analitic i Instrumental

Fig. 4. Funcie de rspuns

Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI

Chimie Analitic i Instrumental

Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI

Tipuri de metode analitice

Chimie Analitic i Instrumental

Chimie Analitic i Instrumental

Fig. 1. Instalaie pentru probe de aer

Mrimea particulei probei este un parametru important la prelevarea probelor dintr-o

Reducerea prin metoda cuartrii, ilustrat n fig. 6, i 7, se realizeaz prin

Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI

Fig. 7. Ilustrarea metodei cuartrii (vezi textul)

n fig. 8 sunt prezentate 3 dispozitive de tiere pentru reducerea probei.

Fig. 9. Bec de gaz, plit electric i cuptor de uscare

Chimie Analitic i Instrumental

Fondant Na2CO3 NaOH, KOH B2O3

creterea algelor pe conduct sau nclzirea probei.

Chimie Analitic i Instrumental

Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI

Metode chimice de analiz - interferene cu analizele instrumentale

Metode de precipitare i gravimetria

de mas a probei prin volatilizarea unei pri din prob.

Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI

Metode chimice de analiz - interferene cu analizele instrumentale

Chimie Analitic i Instrumental

Fig. 1. Schema lanului de transformri chimice n determinarea gravimetric a ferului

Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI

Metode chimice de analiz - interferene cu analizele instrumentale

Fig. 2. Aspectul unei balane analitice

Cteva reguli importante n ceea ce privete lucrul la balan sunt urmtoarele:

Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI

Chimie Analitic i Instrumental

Red1 + Ox2; MLn.

Metode chimice de analiz - interferene cu analizele instrumentale

Etaloane primare i secundare

Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI

Metode chimice de analiz - interferene cu analizele instrumentale

Calculul propriu zis al masei de analit n volumetrie se bazeaz pe legea echivalenilor i

Metode chimice de analiz - interferene cu analizele instrumentale

Bicarbonat (HCO3-); Carbonat (CO32-); Hidroxid (OH-).

indicatorului sau cu ajutorul unui pH-metru.

30 mgL-1 CO2 - pH = 5.1 150 mgL-1 CO2 - pH = 4.8

Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI

Metode chimice de analiz - interferene cu analizele instrumentale

Chimie Analitic i Instrumental

un al treilea, electrodul auxiliar, doar n cteva metode, dac este necesar.

Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI

Fig. 1. Celul de msur; 1- electrod de msur, 2- electrod de referin

Fig. 2. Curbe de titrare poteniometric

electrod general: Mz+ + ze-

M. Cea mai bun reproductibilitate i stabilitate o are

1/2 H2(g) (1 atm ),