CURS TEORETIC

Ecotoxicologie. Noiuni generale.

Ocrotirea mediului ambiant este una din problemele actuale ale contemporanietii. n ultimul timp se explic eforturile mari pentru rezolvarea acestei probleme, ns tempurile mari de dezvoltarea a industriei, transportului i a unor ramuri ai gospodriei steti nainteaz problemele noi complicate pe calea ocrotirii mediului nconjurtor de la poluani. Pentru a nelege pericolul contaminrii antropogene al mediului nconjurtor, este suficient de amintit c n urma arderii tuturor tipurilor de combustibil n atmosfer anual se expulzeaz peste 200 mln tone de CO 2, peste 700 mln tone de SO2. Formarea n atmosfer a H2SO4 din SO2 i vapori de ap este cauza apariiei ploilor acide i a altor poluri ce atac toate formele de via. Sporirea anual a poluanilor de tipul sus -numit alctuiete circa 5 %. Alt tip de poluare este cauzat de utilizarea pe scara larg a agrochimicatelor. Anual n sol se ntroduce peste 500 mln tone de ngrminte minerale i aproximativ 3 mln tone de pesticide. Odat cu sporire productivitii gospodriei steti din cauza formelor i metodelor imperfecte a utilizrii agrochimicatelor se aduce o mare daun a mediului, deoarece aproape 1/3 din ngrminte se spal cu apele de suprafa n bazinele acvatice. Unele pesticide nimeresc nu numai vtmtorilor gospodreti steti, dar atac i plantele i animalele, snt periculoi pentru sntatea omului. Printre substanele ce contamineaz mediul nconjurtor, se poate evidenia grupa ecotoxicanilor, ce prezint un pericol considerabil pentru organismele vii. n ea intr substanele care sunt strine organismelor vii- xenobioni, ce posed proprieti toxice sau ce le dobndesc n procesul transformrii lor n mediul nconjurtor sau n urma interaciunii cu organismele vii. Ctre ecotoxinanii ce compun aa numita duzin murdar se refer metalele grele i compuii lor (Pb, Hg, Cd, Ni, .a) , petrolul i produsele petroliere, radionuclizii, pesticidele persistente i erbicidele de tipul DDT, 2,4,5-T, pentoclorfenolul, unele produse chimice larg utilizanile (difinili policlorai .a), deeurile toxice ale uzinelor chimice metalurgice. n ultimul timp se acord o mare atenie grupei supercotoxicanilor ce se deosebesc de ecotoxicanii ordinari prin faptul c aciunea toxic se manifest la concentraii foarte mici, ce se msoar nu prin mg/kg-ul masei organismului, ci n micrograme i nanograme. Din aceast grup fac parte dibenzopara-dioxini poli-clorai, dibenzofuranii, unii derivi ai lor. Aceste substane au fost detectate sub form de impuriti n unele erbicide pe baza 2,4,5-triclorfenolului, pentaclorfenolului i ali compui policloraromatici. Au fost detectate deasemenea ntre produsele arderii a polimerilor n compoziia crora intr clorul (ex. policlorvinilul). Importana proteciei mediului nconjurtor contra poluanilor va crete pe viitor, deoarece, volumul total mondial al produciei industriale n ultimii decenii se dubleaz fiecare 15 ani, iar capacitile energetice se dubleaz i mai rapid- fiecare 12 ani. Pe baza aceasta s-a calculat, c sarcina tehnogen asupra mediului n diverse forme de manifestare, inclusiv i poluarea mediului ctre anul 2000 va spori de 2-3 ori, n cazul dac nu vor fi perfecionate metodele de protecie a mediululi nconjurtor, de poluare.

Poluarea intensiv a mediului cu compui chimici a dat natere la un ir de probleme ecologice complicate. Poluarea mediului ca urmare a creterii necontenite , matabelor gigantice i urmrile grave pentru mediul nconjurtor, se cerceteaz ca unul din factorii ecologici indendeni, ce posed o aciune nociv asupra plantelor, animalelor, omului i biosferei n general. Ecotoxicitatea i scopurile ei. Una din direciile tiinifice interdisciplinare, ce se ocup cu cercetarea pericolului contaminrii mediului nconjurtor de pe poziii ecologice cu scopul proteciei organismelor vii de la contaminare cu substane nocive din mediul extern, se ocup toxicologia ecologic sau ecotoxicologia. Ecotoxicologia ca termen, se stabilete o direcie tiinific independent, a fost introdus n 1969, cnd pe lng Comitetul tiinific Internaional legat de problemele ocrotirii mediului nconjurtor a fost organizat o comisie special pe problemele ecotoxicologiei. Comisia a formulat direciile cercettorilor pe problemele ecotoxicologiei i a adoptat pentru prima determinare oficial, conform creia ecotoxicologia prezint o direcie tiinific interdisciplinar, ce cerceteaz aciunea compuilor chimici toxici prezeni n mediul nconjurtor asupra organismelor vii i populaiile lor, ce intr n componena ecosistemelor, de la microorganisme pn la om. Ulterior, a fost precizat sfera intereselor tiinifice ale ecotoxicologiei. n 1978 a fost primit determinarea mai precis a ecotoxicologiei care este utilizat pn n prezent: ecotoxicologia - o direcie tiinific interdisciplinar, legat de efectele toxice ale compuilor chi mici asupra organismelor vii, n preponderen asupra populaiilor organismelor i biocenozelor, ce intr n componena ecosistemelor. Ea studiaz izvoarele apariiei compuilor nocivi n mediul nconjurtor, rspndirea i transformarea n mediu, aciunea asupra organismelor vii. Omul, evident reprezint treapta superioar n irul intelor biologice. O particularitate a ecotoxicologiei , ce rezult din definiia propus mai sus, este faptul, c spre deosebire de toxicologia medicinal tradiional, ea cerceteaz efectele toxice asupra organismelor individuale, att i asupra populaiilor organismelor. Alt particularitate a ecotoxicologiei este legat de faptul, c n timpul cercetrii efectelor toxice la nivel de populaie crete importana mediului exter n ca un factor activ, ce influeneaz la comportarea ecotoxicantului i manifestarea de ctre proprietilor toxice. Alturi de termenul de ecotoxicologie uneori se utilizeaz tot cu acest sens i ali termeni, de exemplu, toxicologia mediului nconjurtor, ocrotirea mediului ambiant i ocrotirea sntii .a. n fosta URSS ntrebrile de baz a ecotoxicologiei i gseau reflectarea n programele de lucru pe aspectele ecologice i igienice a ocrotirii mediului nconjurtor ndeplinite de diferite departam ente, inclusiv Academia de tiine, Ministerul Sntii.a. n programele corespunztoare se prevedea:

Cercetarea rspndirii i transformrii ecotoxinelor n sol, ap, atmosfer, plante, animale i lanurile trofice n general, ce se termin cu omul; Cercetarea mecanismulului toxicitii i elaborarea criteriilor de nocivitate a ecotoxinelor; Elaborarea bazelor igienice de reglementare a acumulrii ecotoxinelor n mediul nconjurtor; Elaborarea metodelor de analiz a ecotoxinelor n obiectele mediului extern, metodelor de diagnostic, tratamentul i profilaxia afeciunilor.

Direciile tiinifice prioritare , ce asigur executarea programelor sus-numite sunt urmtoarele: 1. Cercetarea izvoarelor de acumulare ecotoxinelor i cercetarea transformrilor l or n ecosisteme abiotice. 2. Cercetarea bioaccesibilitii ecotoxinelor bioacumulrii i metabolismului n organismele vii. 3. Cercetarea aciunii toxice ale ecotoxinelor i produilor transformrii lor n mediul nconjurator. Rezultatele practice ale cercetrilor conform direciilor indicate constituie elaborarea recomandanilor i efectuarea msurilor juridice, tehnologice, medicale sanitoro -igienice pentru controlul i controlarea nivelului polurii. La baza elaborrii msurilor i recomandrilor igieni ce a factorilor nocivi din mediul nconjurtor, care includ stabilirea rolului cantitativ CMA (concentraia maxim admisibil) a ecotoxicanilor n aer, ap, sol i produse alimentare. Sursele de baz ale polurii mediului nconjurtor cu substane chimice:

Termoelectrocentralele, ce polueaz atmosfera cu substane toxice n urma combustiei; CO2, oxizii de sulf, produse ale arderii incomplete a hidrocarburilor, funingin, ce sunt purttori de hidrocarburi policiclice cancerogene; Deeurile toxice ale ntreprinderilor chimice, petroliere, metalurgice ce ptrund n atmosfer cu produsele gazoase, n bazinele acvatice cu ape reziduale i n sol i n timpul nmormntrii deeurilor solide.

Diferite tipuri de transport ce funcioneaz pe combustibil pe baza petrolului i gaz natural. Gazele de eapament conin CO2, oxizii de azot .a. produse, n special particulele de Pb din fondantul antidetonant de tetraetil de Pb;

Producia i utilizarea substanelor radioactive; Utilizarea mijloacelor chimico-farmaceutice, adaosurilor chimice la produsele alimentare (conservani, colorani).

Capacitatea ecotoxinelor de a rspndi la distane mari n biosfer depinde de proprietile chimice, fizico-chimice, aa ca volatilitatea, solubilitatea, capacitatea de a fi absorbii de sol, stabilitatea la hidroliz, fotoliz i descompunere de microorganisme. Suma valorilor nalte ale proprietilor sus-numite se caracterizeaz prin persisten i indic capacitatea ecotoxinelor un timp ndelungat de a-i pstra proprietile toxice. n dependen de nivelul polurii putem evidenia trei grupe de baz: 1. Poluarea local 2. Poluarea regional cronic 3. Poluarea global La poluri locale, de regul, se refer expulzrile singulare ale substanelor toxice n mediul extern n urma exploziilor, incendiilor, calamitilor naturale. Urmrile a unor astfel de poluri cel mai des se manifest ntr-un punct geografic concret, matabul perderilor poate fi enorm. Exemplu : Incendiul ntr-o cldire administrativ cu 18 etaje n oraul Binhampton (New York). Peste 2 sptmni dup incendiu s-a constatat c toate ncperile au fost contaminate cu policlordibenzo -ndioxini i policlordibenzofurani (dioxini i furani). S-au vrsat 800 l de ulei din transformatorul din subsolul cldirii, piroliza-dioxinii i furanii, prin sistema de ventilare s-a contaminat ntreaga cldire.

Din cauza lipsei metodelor de purificare radical de compui sus-numii i aciunii toxice nalte compuilor s-a hotrt de nimicit cldirea cu ngroparea ulterioar ntr-un loc ndeprtat.Cheltuelile pentru construirea casei-20 mln dolari, iar pentru nimicire-100mln. n urma polurilor cronice regionale se nelege,de regul, admisia de lung durat n mediul extern a ecotoxinelor n cantiti considerabile. Ca urmare se petrece poluarea unei zone mari,de exemplu a unui bazin acvatic. Aa situaii, de regul, apar n legtur cu funcionarea unor mari ntreprinderi industriale, instalaii energetice .a. La un aa tip de poluare pot fi evideniate dou grupe de poluani: 1. Puin toxici, ce sunt admii n mediul nconjurtor n cantiti relativ mari. 2. nalt toxici, ce se admit n cantiti relativ mici. n urma polurii globale poluanii se admit n mediul nconjurtor n cantiti mari i un timp ndelungat, acionnd asupra unui enorm teritoriu. De exemplu, n urma transferului global atmosferic a ecotoxinelor, DDT-ul a fost descoperit n zpada Antarctidei i Groenlandei. O grup separat de ecotoxine de nivel global reprezint CO 2 i fenolii, prezena crora n atmosfer tot timpul crete. Aceste substane nu posed o aciune direct asupra biotei, ns ele pot schimba parametrii fizici ai atmosferei (nivelul radiaiei, temperaturii), la care sunt acomodate toate organismele vii. Ecotoxicanii i organismele vii. Interaciunea ecotoxicanilor cu organismele vii se ncepe, de regul, de la procesul de absorbie, contactul cu memebranele celulare i transferului prin membran. Ulterior decurge metabolismul, bioacumularea sau excreia. Procesele sus-numite de interaciune aecotoxicanilor cu organismele vii se unesc sub noiunea de bioaccesibilitate, adic capacitatea de a ptrunde n organism cu transformrile biochimice posibile ulterior. Cercetnd absorbia ecotoxicanilor pe suprafaa celulei, se consider c afinitatea ecotoxicanilor cu substratul n mediul extern (sol, aer, ap) trebuie s fie mai mic, dect cu suprafaa celulei. De regul, ecotoxicanii formeaz complexe mai slabe cu compuii din membrana celular, dect cu substanele, ce intr n compoziia solului. ns unele tipuri de sol pot aa puternic s interacioneze cu ecotoxicanii, nct decurge procesul de dezactivare a lor. Deaceea capacitatea de absorbie a ecotoxicanilor n raport cu diferite substraturi naturale i intelor biologice este una din proprietile importante ale nocivitii lor. O alt proprietate important a ecotoxicanilor ce caracterizeaz bioaccesibilitatea lor este solubilitatea n ap i fazele lichide organice (solveni organici, uleiuri). Pentru ptrunderea prin membran celular raportul solubilitii n ap i solveni organici nepolari la substanele anumite e nevoie s posede aa numitul bilan hidrofil-lipofil, adic ntr-o anumit cantitate s se dizolve i n ap i n solveni organici nepolari. Bioacumularea substanelor nocive poate decurge i n procesul respiraiei, legat la hidrobioni cu filtrarea unei cantiti mari de ap prin branhii la peti, iar la animalele terestre aerul prin plmni. Organele de respiraie ca urmare devin acumulatori de ecotoxicani. De rnd cu afeciunea general a organismelor este nevoie s atragem o deosebit atenie la aa numitele organele i esuturile "critice", n care se acumuleaz cantitatea predominant a ecotoxicanilor, de exemplu clororganici n gonadele molutelor i a petilor, cadmiului i mercurului n rinichii mamiferelor, dibenzodioxinelor i furanilor policlorai n esuturile adipoase, florurile i alte substane

radioactive n galnda tiroid a mamiferelor, metalele grele i elementele transuranice n ficatul animalelor. O importan deosebit posed bioacumularea n diferite verigi ale lanului trofic. n rezultatul cercetrilor s-a constatat c coeficientul de bioacumulare DDT la plantele terestre 0,1, la insecte 3, viermi 70, roztoare 100. Pe cnd coeficientul de bioacumulare a ecotoxicanilor calculat la hidrobioni este de cteva ordine mai mare: la crustacee 10 3, molute i plancton 104, la peti 105 . n rezultatul cercetrii afeciunii cu DDT a unui lac din SUA s-a constatat c concentraia lui n ap era de 0,014 mg/l, n zooplancton 5 mg/kg, n petii de talie mic pn la 10 mg/ kg, n peti de talie mare pn la 200 mg/kg, iar n psrile ce se hrneau din acest lac 2500 mg/kg, adic de 10 mln pri mai mare dect n apa lacului. Capacitatea organismelor de a concentra cantiti mari de substame nocive poate fi utilizat pentru controlul polurii mediului nconjurtor prin metoda bioindicaiei. Adic cnd unele specii de organisme sunt capabile ntr-un termen relativ scurt de a acumula cantiti mari de ecotoxicani, ei pot fi utilizai n calitate de bioindicatori ai polurii. Bioindicatorii renumii ai aerului sunt lichenii. Bioindicarea - una din perspective direcii de control a ecotoxicanilor n mediul extern i n mbinare cu indicarea chimic poate fi utilizat pentru elucidarea calitativ i cantitativ a nivelului de poluare a mediului extern cu ecotoxicani. Dup ptrunderea n organism ecotoxicanii interacioneaz cu sistemele fermentative i se supun transformrilor metabolice. Dei unii ecotoxicani sunt polari, anume compuii lipofili reprezint cel mai mare pericol pentru organismele vii, deoarece solubilitatea lor ridicat n lipide mpiedic posibilitatea excluderii lor din organism cu apa sau alte lichide polare, care ndeplinesc deobicei funciile de excreie. nvingerea acestei bariere se efectueaz de un sistem special fermentativ, care transform ecotoxicanii nepolari lipofili n compui hidrofili, care pot fi evacuai din organism cu lichidele excretoare. ntre reaciile de baz a metabolismului, care deobicei decurg la prima stap a biotransformrii aa ca oxidarea, reducerea, hidroliza, .a. Un loc deosebit l ocup complexul fermentativ localizat n reticolul enndoplasmatic celular i care se numete monooxigenez microsomic. Baza sistemului fermentativ sus-numit reprezint hemoproteina citocrom P-450, ce posed o mulime de forme, care metabolizeaz majoritatea compuilor chimici nepolari, utilizai n farmaceutic , gospodria steasc i alte ramuri ale industriei i care sunt ecotoxicani.

Scurt istoric, definiia i obiectivele disciplinei Ecotoxicologia s-a conturat ca tiin n perioada 19501960 ca rspuns la o necesitate social major: intensificarea polurii, fenomen care devenea o ameninare pentru sntatea oamenilor dar i pentru economia i perenitatea biosferei. Referitor la definiia ecotoxicologiei sunt numeroase discuii ntre specialiti. Renne Truhautrenumit toxicolog (1961)a fost primul savant care a dat definiia ecotoxicologiei, afirm c ecotoxicologia este extensia natural a toxicologiei la efectele ecologice ale poluanilor. El a combinat ecologia tiina care studiaz interaciunile ce determin distribuia i abundena organismelor cu toxicologia tiina care se ocup cu studiul efectelor nefaste ale substanelor asupra organismelor vii.

Conform Ramade (1977) ecotoxicologia studiaz modalitile de contaminare a mediului de ctre agenii poluani naturali i artificiali produi de activitatea uman, mecanismele de aciune i efectele asupra vieuitoarelor care populeaz biosfera. n anul 1978, Butler a dat o alt definiie, preciznd c ecotoxicologia este ramura toxicologiei care studiaz efectele toxice ale substanelor naturale sau artificiale asupra organismelor vii care constituie biosfera (animale, vegetale, terestre, acvatice), inclusiv interaciunea substanelor toxice cu mediul fizic n care organismele vii exist. n anul 1993, Callow afirm c ecotoxicologia este ramura stiintei care se ocupa cu protejarea sistemelor ecologice faa de efectele adverse ale substanelor chimice sintetice. O definiie mai simpl dar i mai sugestiv a fost dat de Walker si col., n anul 1996: ecotoxicologia este stiina care studiaz efectele dauntoare ale substanelor chimice asupra ecosistemelor. n anul 1994, Forbes meniona: ecotoxicologia este domeniul de studiu care integreaz efectele ecologice i toxicologice ale poluanilor chimici asupra populaiilor, comunitilor ecosistemelor cu soarta acestora n mediu (transport, dezintegrare). Ultima i cea mai ampl definiie a ecotoxicologiei a fost dat de renumitul savant ecolog academician Ion Dediu care a pus bazele tiinifice ale ecotoxicologiei acvatice n R. Moldova. n lucrarea sa Enciclopedie de Ecologie (2010) autorul definete noiunea de ecotoxicologie ca: Compartiment al ecologiei care studiaz efectul influienei substanelor toxice asupra organismelor vii. Form de cunoatere a aciunii diverselor substane i componente din aer, ap, sol etc. asupra organismelor vii. Constituie baza pentru elaborarea unor msuri de protejare a componentelor mediului uman i vegetalo-animal din mediul ambiant. Conform aceluiai autor ecotoxicologia poate fi denumit i ca studiul influienelor factorilor poluani (toxici) asupra mediului. n R.Moldva cercetri n domeniul ecotoxicologiei n prezent se efectueaz n cadrul Institutului de Ecologie i Geografie i Institutul de Zoologie (Laboratorul de Hidrobiologie i Ecotoxicologie, condus de prof. Elena Zubcov). Ecotoxicologia are trei obiective majore (Forbes, 1994): obinerea de date despre evaluarea riscului i a managementului mediului; cunoaterea cerinelor legale de obinere i dispersare n mediu a substanelor chimice;

elaborarea de principii (empirice sau teoretice) pentru a mbogi i mbunti cunotinele referitoare la comportamentul i efectele substanelor chimice n sistemul viu. n cadrul obiectivelor de mai sus sunt abordate aspecte precum: distribuia poluanilor n mediu, cu identificarea dispunerii substanelor chimice n diferitele compartimente ale mediului nconjurtor; cinetica poluanilor (modalitatile de ptrundere, depozitarea n mediu, transformrile n mediu);

efectele poluanilor asupra organismelor vii, respectiv definirea tabloului efectelor nocive la nivel individual (disrupii ale structurii i funciei biochimice, moleculare i fiziologice) precum i la nivel

populaional (modificarea numrului de indivizi, modificarea frecvenei genelor, modificarea funciei ecosistemului). nregistrarea toxicitii individuale a substanelor toxice: doza, concentrtii cu teste standard sau prin sisteme complexe; evaluarea hazardului sau riscului pentru un anumit toxic (pe baza datelor despre toxicitate); evaluarea potenialului general de tulburri n ecosistem; elaborarea msurilor de terapie; luarea de msuri preventive fat de risc i analiza acestora.

CURS TEORETIC "Celula unitatea de baz a organismelor vii

n cazul cnd conversm despre toxicitatea mediului este necesar de a deosebi cteva aspecte: aciunea toxic asupra animalelor, unor specii de plante i insecte, reprezentanii inferiori ai lanului trofic (bacteriile, algele microscopice) i ecosistemului n general. Cu alte cuvinte , toxicitatea unor sau altor factori ai mediului ambiant trebuie s fie cercetat la nivel de organisme, populaii i ecosisteme. n orice caz este necesar de cunoscut mecanismele elementare ale efectelor toxice. Procesele susnumite nu pot fi stabilite la rndul su fr a cunoate aciunea toxicanilor i asupra proceselor intracelulare. Din care cauz este necesar de cunoscut structura celulei. Celula reprezint unitatea de baz stuctural-funcional a organismului. Ea este determinat de mediul extern, de membrana plasmatic care limiteaz i regleaz difuzia ionilor din mediul extern n interiorul celulei i invers. La baza acestei funcii se afl unele particulariti ale permiabilitii membranei. S-a stabilit prezena n membrab a unor pori cu dimensiunile (raza) circa 8 . S-a stabilit prezena fermenilor grupei fosfatazelor i un ir de ali fermeni, care scindeaz substanele i care ulterior ptrund n form degradat n protector, delimitnd coninutul intern al celulei reprezint capacitatea ei ctre o regenerare rapid n urma unor leziuni mici. Structura celulei

Membrana plasmatic se gsete la exteriorul citoplasmei i are rolul de a proteja i de a media schimburile de substane. Citoplasma este substan fundamental a celulei care ocup spaiul dintre membrana plasmatic i membrana nucleului. Reticolul endoplasmatic - reprezint o structur complicat sub form de plas compus dintr-o sistem de canale, vacuole limitate de membrane. Pentru fiecare tip de celule este caracterictic un anumit tip de reticol endoplasmatic. S-a stabilit c reticolul endoplasmatic rugos particip activ la biosinteza

proteinelor, posed funcii secretoare. Mai puin este cunoscut despre funciile reticolului endoplasmatic neted. Este cunoscut c pe membrana lui se efectueaz sinteza glicogenului i a lipidelor. Ambele tipuri de reticol endoplasmatic snt capabile de a acumula n canale, vacuole produse ale sintezei: substane proteice -n reeaua granulat i grsimi -n reeaua neted. Toate aceste substane ulterior se transport la diferite formaiuni ale celulei. Transportul se realizeaz pe calea interaciunii elementelor reticolului endoplasmatic cu formaiunile celulei- membrana nuclear, mitocondriile i aparatul Golgi, sau decurge datorit separrii de la canalele unor granule i bule. Reticolul endoplasmatic reprezint un sistem circular al celulei, prin care decurge transportul diferitor substane din exterior n citoplasm. Ribozomii - posed o form rotunjit cu diametru de 150-350 . Majoritatea ribozomilor n citoplasma se afl n membranele granulare ale reticolului endoplasmatic. Plus la aceasta, un numr mare de ribozomi se afl n lichidul citoplasmei. Ribozomii este organitul celular obligator n fiecare celul. n ribozomi are loc biosinteza proteinelor. Aparatul Golgi (sau dictiozom)- este un organit celular gsit la majoritatea eucariotelor, situat n centrul celulei. Este format din nite sculei aplatisai suprapui( cisterne),dilatai la capete i nconjurai de micro- i macrovezicule, generate de aceste cisterne. Forma dictiozomilor variaza de la o celula la alta( n strile patologice au un aspect granulos). Sunt delimitai de o membran simpl. n celulele animale se afla un singur ansamblu de dictiozomi, iar n celula vegetal se afl mai multe ansambluri de dictiozomi. Particip la stocarea polizaharidelor, modificarea proteinelor nou-sintetizate n reticolul endoplasmatic, sortarea proteinelor cu diverse destinaii celulare, prelucrea i stocarea proteinelelor i lipidelelor care "curg" dinspre R.E. Mitocontriile- sunt organite celulare ntlnite n toate tipurile de celule. Ele mai sunt denumite i uzine energetice, fiindc ele conin enzimele oxido-reductoare necesare respiraiei. Mitocondriile au forma unor vezicule alungite, sunt organite sferice, ovale sau sub forma de bastonae, ei sunt formai dintr-o membran dubl, un sistem de cisterne i tubuli, stroma (matrix). Lizozomii - particule mici de form rotund, situate n citoplasm. Fermenii ce se conin n lizozomi snt capabili s scindeze compui, importani din punct de vedere biologic- proteine, acizi nucleici, polizaharide. Totalitatea lizozomilor le putem numi "sistem digestiv" al celulelor, deoarece particip la digestia tuturor tipurilor de substane, care ptrund n celul. Plastidele - oraginte specifice celulelor vegetale, n care se petrece sinteza diferitor substane i n primul rnd fotosinteza. Nucleul - este un organit celular, specific celulelor eucariote, ce conine materialul genetic i care coordoneaz toate procesele intracelulare. Particip la pstrarea materialului genetic, coordonarea reaciilor chimice din citoplasm, coordonarea diviziunii celulare. Sumnd cele spuse mai sus intra formaiunile intracelulare (nucleu, mitocondrii, ribozomii, .a.) exist o delimitare strict "a muncii". "Specialitatea" mitocondriilor const n oxidarea substanelor organice i sinteza ATP-ului, n care se acumuleaz energia, eliberat n urma oxidrii substanelor organice. Datele despre compoziia elementar a celulei se propun n tabel 1. Din 104 elemente din sistemul periodic n compoziia celulei s-au detectat 60.

Tabel 1 . Coninutul elementelor chimice n celul. (%) Oxigen 65-75 Magneziu 0,02-0,03 Carbon 15-18 Natriu 0,02-0,03 Hidrogen 8-10 Calciu 0,04-2 Azot 1,5-1,3 Fer 0,01-0,15 Kaliu 0,15-0,4 Zink 0,0003 Sulf 0,15-0,2 Cupru 0,0002 Fosfor 0,2-1 Iod 0,00001 Clor 0,05-1 Fluor 0,00001

Tabel 2. Coninutul compuilor chimici n celul (%) H2O 75-85 Proteine 10-20 Lipide 1-5 Glucide 0,2-2,0 Acizi nucleici 1-2 ATP 0,1-0,5 Substane anorganice 1-1,5

Din elementele chimice, ce intra n compoziia celulei C, H, O, N intr i n compoziia proteinelor, lipidelor, glucidelor, adic n compoziia compuilor organici. Celelalte elemente se afl n celul parial n compui organici: S -intr n componena multor proteine, P-parte component a acizilor nucleici, ATP, Fe -intr n componena moleculei de hemoglobin, Mg -n componena clorofilei, Cu -n componena unor fermeni cu funcie oxidativ, I - n molecula tiroxinei, Co -n componena vitaminei B12 .a. Funciile celulei

Totalitatea transformrilor care au loc n celul, n urma schimbului de materie i energie cu mediul, constituie metabolismul celular. Excitabilitatea este rspunsul specific dat de celul la aciunea diferiilor factori de mediu. Micarea presupune deplasarea activ a unor constituieni celulari precum i curenii citoplasmatici care antreneaz coninutul celular. Semipermeabilitatea este nsuirea membranei plasmatice de a fi permeabil pentru ap i anumite substane i impermeabil pentru substane care au dimensiuni mari. Semipermeabilitatea membranelor plasmatice este controlat de fore pasive i active. Astfel avem forele pasive : difuzia, osmoza i turgescena, iar forele active sunt: polarizarea electric, fagocitoza (la celulele animale pinocitoza).

Raportul ecotoxicologiei cu alte tiinte Pentru ntelegerea ecotoxicologiei sunt necesare cunotine temeinice de chimie organic i anorganic, biochimie, chimie analitic, toxicologie, ecologie. De asemenea este necesar cunoaterea unor metode de calcul statistic. Cele mai mari interferene ale ecotoxicologiei se contureaz cu toxicologia general i toxicologia mediului. Toxicologia are ca scop: -protejarea omului/animalelor (privite ca individ) faa de expunerea la toxice. Ecotoxicologia are ca scop: -s protejeze populaiile i comunitaile diferitelor specii de efectele duntoare ale expunerii la substane toxice. Toxicologia se ocup cu: -preluarea, absorbia, difuziunea, excreia substanelor toxice de ctre organismele individuale. Ecotoxicologia se ocup cu: -cinetica poluailor n mediul abiotic (aer, ap, sol/sedimente) i mediul biotic (lanul trofic); -studiul transformrilor i biotransformrilor substanelor chimice. Importan major att pentru toxicologie ct i pentru ecotoxicologie prezint relaia dintre cantitatea de substan chimic la care organismul este expus i natura i gradul efectelor nocive consecutive (relaia doz/rspuns, ce constituie baza pentru estimarea hazardului i riscului prezentat de substanele chimice din mediu). Ecotoxicologia a fost asimilat o perioad cu toxicologia mediului. n spaiul anglo-saxon se consider oarecum sinonime. Toxicologia mediului este ramura toxicologiei care studiaz soarta, comportamentul i efectele substanelor chimice asupra mediului. Este mult asociat cu studiul substanelor toxice din mediu de origine antropogen (dei include i substane chimice naturale). Este divizat n dou subcategorii: -toxicologia sntii mediului (studiaz efectele adverse ale toxicelor asupra omului); -ecotoxicologie (studiaz efectele substanelor toxice din mediu, dar inta o constituie ecosistemele i constituenii lor, fauna i flora). Toxicologia mediului abordeaz n mod limitat problemele de poluare i anume: -modul prin care si exercit aciunea fiziopatologica asupra organismelor int, n special mamifere (om); -mecanismul de aciune pe plan celular i molecular. Ecotoxicologia, diferit de Toxicologia mediului, abordeaz efectele polurii per ansamblu asupra ecosistemelor, cu scopul de a le proteja n totalitate i nu pe componente izolate.

CURS TEORETIC Transformrile metabolice

Ptrunznd n mediul ambiant substanele pot s se descompun fotochimic, s se oxideze sau s reduc, hidrolizeze. ns procesele cele mai diverse i active decurg n biot. Aceasta se explic prin faptul c sistemul biologic poate produce energie prin intermediul proceselor metabolice ordinare catalizate de fermeni. n sistemele nebiologice totul depinde de iradierea solar i energia termic i n majoritatea cazurilor reaciile decurg n lipsa catalizatorilor. DDT a fost sintetizat pentru prima dat n 1873, dar rspndire larg n calitate de insecticid a obinut n mijlocul anilor 40 ai secolului XX. Pn la acest timp, DDT nu a fost accesibil nici pentru organism. n prezent multe organisme sunt capabile de a transforma DDT-ul n derivaii lui. Poate aprea ntrebarea unde i cum organismul a elaborat aceast funcie. Cea mai bun ipotez aste c n condiiile naturale n care coexist toate organismele se conin un ir de compui toxici. Supravieuirea organismului depinde de capacitatea lui de a nvinge aciunea acestor substane toxice. Deaceea cu timpul sau dezvoltat aa sisteme, care dau posibilitatea organismului de a modifica aceti compui astfel nct s devin inofensivi pentru el.Tabloul general de modificare a compuilor n organismele superioare. Direcia general este transformarea substanei exogene ntr-o substan cu o polaritate mai ridicat i interaciunea ulterioar a derivatului obinut cu un fragment polar, care uureaz eliminarea substanelor inutile organismului. Plantele nu posed un sistem excretor asemntor cu cel al animalelor, ns mecanismul de protecie poate include legare substanelor strine organismului de unele molecule de hidrai de carbon i acumularea lor n locurile care nu sunt legate cu metabolismul plantelor. Microorganismele, probabil, sunt capabile de a descompune muli din aceti xenobioni pn la CO2 i ap.

FERMENII

Fermenii sunt substane proteice care acioneaz ca catalizatori biologici. Ei sunt att de efectivi nct majoritatea reaciilor de fermentare degurg cu o vitez de 108-1011 ori mai mare dect reaciile corspunztoare nefermentative. Cu toate c mecanismul aciunii catalitice a fermenilor nc nu e destul de clar, dar se tie c configuraia poriunilor active acord specificitate i orienteaz substratul n direcia convinabil pentru reacie. Compusul sau substratul care interacioneaz cu fermentul se leag de centrii activi ai fermentului. n multe cazuri aproape de substrat se leag deasemenea i cofermentul sau gruparea prostetic. Conform sensului cunoscut cofermentul servete ca substrat, ns cofermenii adesea sunt legai de fermeni foarte puternic, regenereaz i n continuu particip la procesele catalitice. Un aspect important al activitii catalitice a fermentului se manifest prin aceia c el nu numai micoreaz energia de activare a reaciei concrete i sporete viteza reaciilor comparativ cu procesele necatalizate, dar i accelereaz decurgerea multor reaciei concrete i sporete viteza reaciilor comparativ cu procesele necatalizate, dar i accelereaz decurgerea multor reacii chiar i la valorile neutrale al pH i temperatura camerei, care n lipsa catalizatorului deobicei decurg numai n condiii extremale la temperaturi nalte i mediu acid sau bazic. Pentru a marca fermentul la denumirea reaciilor catalizate se adaug sufixul -"aza". De exemplu dehidrogenaza acest ferment catalizeaz

extragerea din molecul a atomilor de H2, iar metiltranferaza este fermentul ce transform grupa metilic.

Procese metabolice Reacii de oxidare, reaciile oxigenazei: Hidroxilarea aromatic

Hidroxilarea alifatic

O- dezalchilarea eterilor aromatici

N hidrixilarea aminelor aromatice

Formarea N oxizilor din derivaii aminelor teriare alchilice i aromatice

Dezaminarea oxidativ

Epoxilarea

Desulfatarea

Reaciile dehidrogenazei oxidarea alcoolilor n aldehide sau cetone

oxidarea aldehidelor n acizi carboxilici

Reaciile oxidazei oxidarea monoaminei

Oxigenaza este un ferment ce catalizeaz reacia oxigenului elementer cu substratul, n procesul cruia unul din atomii oxigenului interacioneaz cu alt acceptor, n special hidrogenul, formnd apa:

NADPH (nicotinamidadeninnucleotidfosfat, forma redus)- un component celular obinuit, ce acioneaz ca donor de hidrogen. Aa oxidare des se numete "oxidaze cu funcii combinate" sau "fermeni microsomici". Ei au fost extrai n fond din ficatul organismelor superioare, dei se conin i n alte esuturi. Fermenii se combin ntr-un sistem care poart denumirea de reticol endoplasmatic neted. n cazul distrugerii celulelor acest sistem se descompune n microsome. Procesul complex de oxidare este complicat. Ea presupune stadiile consecutive cu participarea fermenilor i n multe cazuri include citocromul P450. Acest component specific reacioneaz cu substratul reactant i oxigenul molecular. Citocromul P450 este inclus n lanul important de reacii, ce protejeaz celula de substane exogene prin intermediul procesului de oxidare. Una din particularitile reaciilor catalizate de fermeni const n aciunea specific a fermenilor ctre substrat. Probabil, altfel este situaia cu oxigenazele, sintetizate de organismele superioare, deoarece n sisteme microsomice reacioneaz grupe ce difer puternic n structura sa. Snt date, c compuii cu o polaritae mai mic sunt mai reactani, dei aceasta nu este unica condiie pentru decurgerea reaciei. Aceasta se explic c n diferite esuturi se poate afla un ir de fermeni ce conin citocromul P450 cu o selectivitate diferit ctre substrat. E nevoie de remarcat, c exist i alt variant a unei din aceste reacii. Uneori la ntroducerea grupei hidroxil n inelul aromatic n el pot avea loc unele deplasri ale altor substitueni. De exemplu, la hidroxilarea inelului benzenic a moleculei 2,4-D atomul de clor din poziia patru poate s deplaseze n poziia 3 sau 5.

Aa tip de regrupare se numete NIH- deplasare. O alt particularitate a acestui complex de fermeni, n special n organismele superioare, const n aceea, c activitatea lor poate fi cauzat, de multe substane, asupra crora ei acioneaz. De exemplu, dac hrnim obolanul cu policlorbefenil, DDT sau fenobarbital, atunci putem observa dou manifestri primare, n primul rmd, creterea sistemului membranic ce conine aceti fermeni, n al doilea rnd, creterea activitaii specifice a fermentului n esut. Acest fenomen , numit proces de inducie aduce la creterea general a capacitii organismului concret de a transforma complexul exogen. Fermenii

dehidrogenazei nltur hidrogenul. Exemplele de mai sus elucideaz oxidarea alcoolilor pn la aldehide, care la rndul su se oxideaz pn la acizi carboxilici. n urma acestei consecutiviti se formeaz compui tot mai polari, ultimul din care e capabil s disocieze cu formarea ionului ncrcat negativ. Reacia cu participarea oxidazei se deosebete de reacia cu participarea oxigenazei prin faptul c n ea oxidarea este legat cu participarea oxigenului molecular, care particip n calitate de acceptor de electoni. Reacii de reducere

Reacii reversibile a dehidrogenazei, reducerea cetonelor pn la alcooli.

Nitroreductaza, reducerea nitrocompuilor aromatici pn la amine.

Dehidroclorarea, eliminarea clorurii de hidrogen.

Declorarea prin reducere, substituirea Cl cu H.

Cetonele pot fi reduse pn la alcooli, iar grupa nitro pn la amine. Deoarece multe substane, fiind poluani ale mediului ambiant, se refer la compui clorurai, e nevoie de remarcat c unui ir de organisme i este caracteristic reacia de declorare prin reducere sau dehidroclorare. Un proces foarte important este transformarea DDT-ului n derivatul lui DDE n urma reaciilor de dehidroclorare.

HIDROLAZELE

Aceti fermeni catalizeaz reaiile de hidroliz. Exemple de aa reacii sunt propuse mai jos: Reacii cu participarea hidrolazei.

Esterii acizilor carboxilici

Amide

Fosfaii

Fermenii ce catalizeaz esterii acizilor carboxilici sunt larg rspndii n organismele vii. Ei sunt casificai dup clasele substanelor asupra crora acioneaz i ataarea lor ctre inhibitori:

1. Arilesterazele hidrolizeaz esterii aromatici; 2. Carbixilesterazele hidrolozeaz, n fond, esterii alifatici; 3. Holinesterhidrolazele acioneaz efectiv asupra esterilor holinei; 4. Acetilesterazele se aseamn cu fermenii din prima grup, ns ele diferit reacioneaz la aciunea inhibitorilor. Amidele deobicei hidrolizeaz cu o vitez mai mic, dect esterii acizilor carboxilici. Reaciile conjugate n majoritatea reaciilor cercetate mai sus, catalizate de fermeni, n molecula substanei intr un substituent cu o polaritate mai pronunat. n organismele superioare, plante se formeaz metabolii i mai polari pe calea combinrii cu substanele endogene sub form de compui conjugai. Aceste reacii sunt catalizate de tranferaze, ce tranfer substituentul n alt compus:

Dou tipuri de reacii conjugate de baz sunt propuse mai jos: Reaciile conjugate

Formarea -D-glucoronidelor

Sulfatarea

n cazul transferului acidului glucoronic din molecula donor acid uridindifosfoglucuronic (UDFG) n substane acceptoare pe calea reaciei fermentative se formeaz glucoronidele. Grupe funcionale, ce primesc aceast parte a moleculei donor, pot fi alcoolii alifatici, aromatici i acizii carboxilici. Acizii mercapturini se formeaz dup un lan mai complicat de reacii consecutive. La prima etap compusul exogen sau metabolitul lui interacioneaz cu glutationul- un tripeptid important, care intr n compoziia multor celule. Hidroliza ulterioar a dou grupe aminoacidice duce la formarea unui aminoacid n compoziia cruia intr sulful-cisteina, care ulterior se acetileaz cu formarea acidului mercapturic. Reaciile conjugate pot decurge cu halogenurile, fosfaii, epoxizii i alchenele. O alt reacie important a fenolilor i a alcoolilor alifatici const n formarea acidului sulfuric. n acest caz moleculadonor este 3'-fosfoadeno-5'-fosfosulfat (FAFS). Plantele sunt capabile deasemenea de a forma compui conjugai cu proteinele.

Clasificarea substanelor toxice i a intoxicaiilor Clasificarea substanelor cu efecte toxice se efectueaz pe principiile:

structur/proprietate chimic efectul su asupra sntii omului i a mediului degradare/dezintegrare rspndire.

n tabelul 1 este prezentat topul celor 20 de substane toxice i periculoase realizat de Agenia pentru Protecia Mediului din America din cele 275 de substane considerate importante pentru sntatea oamenilor i a mediului.

Tabelul 1 Substane toxice i periculoase (sursa Agenia de Protecia Mediului USA, 2003)

Nr. crt. 1 2 3 4 5

Substana Arsen Plumb Mercur Clorur de vinil Bifenil policlorurai (PCBs)

Sursa, proveniena Lemnul tratat Vopseluri, benzin Arderea crbunilor Utilizarea industrial a plasticului Impermeabilizarea instalaiilor electrice

6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20

Benzen Cadmiu Benzo(a)piren

Benzin, industrie Baterii Incinerare deeuri

Hidrocarburi policiclice Combustie aromate Benzo(b)fluorantren Cloroform DDT Aroclor 1254 Aroclor 1260 Tricloroetilen Carburani Purificarea apei, industrie Pesticide Plastice Plastice Solveni

Dibenzen(a,h)antracen Incinerare Dieldrin Crom hexavalent Clordan Hexaclorobutadien Pesticide Vopseluri, ageni anticorozivi Pesticide Pesticide

Care este efectul toxinelor asupra oamenilor? Formaldehida este un bun exemplu al unei substane chimice larg utilizate care este un sensibilizator puternic al sistemului imunitar. Fiind folosit la produse din plastic, lemn, lipici, la impermeabilizare, concentraia de formaldehid n aerul din spaiile interioare poate fi de sute de ori mai mare dect cea din aerul exterior. Unii oameni sufer de ceea ce se numete sindromul rului de cldiri: dureri de cap, alergii, oboseal cronic, cauzate de o slab ventilare a aerului interior contaminat cu fungi, monoxid de carbon, oxid de azot, formaldehid i alte substane chimice toxice eliberate din covoare, materiale utilizate pentru impermeabilizri, plastice, materiale de construcii i alte surse. Substanele teratogene sunt substane chimice sau ali factori care produc anomalii n timpul dezvoltrii i creterii embrionare. Unii compui care altfel nu sunt periculoi pot cauza probleme tragice n aceast etap sensibil a vieii. Se consider c cel mai rspndit teratogen din lume este alcoolul. Cosumarea de alcool n timpul sarcinii poate duce la un sindrom care presupune apariia mai multor simptome: anomalii craniofaciale, ntrziere mental, probleme de comportament. Alergenii sunt substane care activeaz sistemul imunitar. Unii alergeni acioneaz direct ca antigeni, fiind recunoscui ca substane strine de celulele albe din sistemul sangvin i stimuleaz producerea unor anticorpi specifici (proteine care recunosc i se leag de celule sau substane chimice strine

organismului). Ali alergeni acioneaz indirect prin legarea i modificarea chimic a substanelor strine astfel nct ele devin antigeni i determin un rspuns imun. Neurotoxinele sunt o clas special de substane care atac n mod specific celulele nervoase neuronii. Sistemul nervos este aa de important n coordonarea i reglarea activitii organelor nct ntreruperea acestor activiti cauzeaz numeroase daune. Modul de aciune al neurotoxinelor poate diferi. Substanele precum plumbul i mercurul omoar celulele nervoase i provoac daune neurologice permanente. Anestezicele (eterul, cloroformul) i hidrocarburile clorinate (DDT, Dieldrin, Aldrin) rup membrana celulei nervoase necesar pentru activitatea nervilor. Substanele organofosforice (Malation, Paration) i carbamaii (carbaril, zeneb, maneb) inhib enzima acetilcolinesteraza care regleaz transmiterea semnalului ntre celulele nevoase i esuturi sau organe. Majoritatea substanelor neurotoxice prezint toxicitate acut i foarte mare. n prezent mai mult de 850 de compui sunt considerai neurotoxici. Substanele carcinogene sunt substane care cauzeaz cancerul celule invazive cu cretere necontrolat care duc la apariia de tumori maligne. Rata cancerului a crescut n majoritatea rilor industrializate n secolul XX, n SUA fiind acum a doua cauz care duce la deces. n anul 2000 de exemplu au murit mai mult de jumtate de milion de oameni. Substanele mutagene sunt ageni chimici i fizici care distrug sau altereaz materialul genetic (ADN) din celule. Acest lucru poate duce la apariia de malformaii la nou nscui dac acioneaz i produc daune n timpul creterii embrionare sau fetale, iar dac acioneaz n timpul vieii pot determina apariia unor tumori. Atunci cnd daunele se produc n celulele reproductive (sexuale) sunt transmise generaiei urmtoare. Celulele au mecanisme de reparare care detecteaz i refac materialul genetic deteriorat, dar unele modificri survenite pot fi ascunse sau nu pot fi reparate.

Riscurile biologice generate de impactul antropic asupra ecosistemelor

Riscurile biologice generate de impactul antropic asupra ecosistemelor sunt practic de dou tipuri: directe (rezultnd o cretere direct a pericolelor biologice pentru om, animale i plante) i mediate (rezultnd dintr-o cretere a pericolelor biologice pentru om, animale i plante datorit unor procese n care este implicat solul). In cele ce urmeaz de vor folosi urmtoarele definiii: daun - deteriorare fizic sau vtmare adus sntii oamenilor sau pagub adus unei proprieti sau mediului nconjurtor pericol - sursa potenial de daune risc - combinaie a probabilitii de inciden a unei daune i gravitatea acestei daune pericole biologice - (inhalare, ingestie sau contact cu ageni biologici duntori), respectiv patogeni sau alergeni.

ageni biologici duntori - microorganisme sau produse ale lor care produc boli ale omului, animalelor sau plantelor. Scenariile de expunere luate n considerare sunt:

pericole care se refer la sigurana omului; pericole care se refer la mediul nconjurtor (faun, flor, sol, ap, aer); pericole care se refer la sntatea i creterea plantelor de cultur.

Riscurile biologice directe ale activitilor economice sunt cele care rezult din subprodusele industriei alimentare, din activitatea de gestionare a deeurilor organice pentru realizarea de composturi destinate ameliorrii solurilor i mai ales din activitatea de utilizare efectiv a amelioratorilor de sol rezultai prin compostarea diferitelor deeuri organice.

URS TEORETIC Exemple de transformri metabolice. Cinetica.

n lecia precedent au fost descrise un ir de reacii, prin intermediul crora organismele transform compuii exogeni. Pentru o substan cu o structur cunoscut ntr-o msur oarecare este posibil de presupus tipurile transformrilor biologice. Pentru o substan sunt posibile un ir ntreg de transformri posibile, iar nivelul de cunotine al proceselor sus-numite n prezent nu este suficient pentru presupunerea precis a reaciilor, care prevaleaz n organismul dat. Deaceea informaia precis despre procesele descompunerii metabolice a compusului dat n organismele vii este nevoie de obinut pe calea experimental. Deobicei pentru aceasta utilizeaz compuii, marcai cu izotopi radioactivi i ulterior cerceteaz metaboliii, care se formeaz n organism. Pe schema de mai jos noi propunem reaciile transformrii metabolice pentru paration (insecticid fosfororganic). n organism decurg un ir de reacii, n acela rnd i oxidarea, n urma crora parationul se transform n paraoxon, un compus cu mult mai toxic n comparaie cu cel iniial. n rezultatul reaciilor de hidroliz se formeaz etanolul i p-nitrofenolul i n sfrit, fosfatul. Metoda de determinare a toxicitii parationului p-nitrofenolului n urin. Transformrile metabolice ulterioare constau n reducerea nitrogrupelor pn la aminele corespunztoare. Etapele principale ale transformrilor metabolice sunt propuse i pentru insecticidul carbaril, derivat al acidului carbaminic. Un ir de reacii succesive ne ilustreaz obinerea conjugailor sulfat i glucoronid, cauzate de formarea grupelor hidroxilice n urma hidrolizei grupei funcionale carbomatice sau hidroxilrii nucleului naftalinei. Este demonstrat faptul formrii derivailor dioxinei, ceea ce ne d posibilitatea s presupunem c se formeaz un compus intermediar epoxid, care nc nu a fost eliminat.

Etapele transformrii metabolice ale parationului

Reaciile descompunerii metabolice a carbariului

DDT este un compus nsemnat pentru mediul nconjurtor i se consider c el este foarte stabil n ceea ce privete descompunerea metabolic. ns, conform reaciilor propuse pe desenul de mai jos, DDT totui se descompune pe un ir de derivai. n fond, decurg reaciile de eliminare a atomilor de clor din molecule, ca de exemplu, transformarea DDT n DDD, sau eliminarea HCl cu formarea DDE nesaturat. S-a constatat c DDE este un compus mai toxic dect DDT, plus la toate el metabolizeaz i descompune cu o vitez mai mic. Aceste trei exemple nu pretind la descriere complet a tuturor tipurilor de reacii consecutive. De exemplu, n unele sisteme microbilogice n urma descompunerii DDT se formeaz CO2 i H2O, ns consecutivitatea precis ale reaciilor nc nu este stabilit. Este nevoie de subliniat faptul, c aproape orice compus organic poate metaboliza n organism i deseori n urma unor reacii metabolice consecutive complicate se formeaz un ir de metabolii. Gradul de acumulare a metaboliilor n organism depinde de vitezele relative de formare a lor i metabolizrii ulterioare sau excluderii din organism. Metabolitul se acumuleaz n organism, dac viteza formrii lui este ralativ nalt, iar reaciile ulterioare decurg cu o vitez mai mic.

Cinetica Factorul principal, ce determin gradul pericolului ptrunderii substanei n mediul natural este viteza descompunerii lui n metabolii cu o structur mai simpl. Deaceea este necesar de cercetat cile utilizrii cineticii chimice pentru estimarea vitezei transformrilor metabolice. E de dorit, n ideal, de a avea posibilitatea calculrii vitezei de descompunere a substanei, bazndu-se pe datele despre structura lui i proprietile sistemei n care ea se supune metabolizrii. ns cunoaterea proceselor sus-numite nu a atins nc nivelul necesar i depinde, n fond, de cercetarea lor experimental. Cercetrile cinetice tradiionale de obicei includ cercetarea dependenei vitezei reaciei de concentraia substanei reactante.

Reaciile descompunerii metabolice ale DDT

Pe baza analizei acestor date este posibil de determinat legea, ce d posibilitatea de a calcula viteza reaciei, reeind din concentraiile iniiale ale reagenilor separai. Cercetnd comportarea poluanilor n mediul extern, principalul este de a stabili viteza descompunerii substanei date i prezicerea caracterului dependenei acestei viteze de concentraia lui i ali parametri ai mediului extern.

Legile vitezei i modelele cinetice

Sisteme omogene. Pentru procesul, ce degurge ntr-o singur faz (n gaz sau soluie), ca n cazul procesului de hidroliz studiat mai sus, viteza reaciei este determinat de frecvena ciocnirilor efective particulelor reactante. Legea vitezei se exprim prin relaia: viteza descompunerii (-dc/dt) = k [A]n[B]m ordinul reaciei este egal cu suma indicilor (n+m+...). n multe cazuri, reaciile sunt de ordinul nti sau aproximativ primul ordin: viteza descompunerii =kc

Aceasta are loc din cauz, c numai o singur substan posed concentraie limitat, iar ali componeni sunt n exces. Relaia dintre concentraia iniial C0 i concentraia C1 peste un interval de timp t, dup iniierea reaciei se descrie de urmtoarea relaie: Ct = C0e-kt sau lgCt = lgC0 - kt Analiza datelor experimentale deobicei const n reprezentarea graficului dependenei logaritmului concentraiei Ct de timp. Cum poate fi vzut din relaia propus, se obine o linie dreapt cu o nclinare egal cu k, separnd un fragment egal cu lgC0. Deaceea dac cercetrile experimentale corespund acestei relaii liniare, atunci reacia este de ordinul nti i putem determina constanta de vitez din desenul de mai jos. Pentru reaciile de ordinul nti viteza depinde liniar de concentraie cu unghiul de nclinare egal cu constanta de vitez. n fiecare unitate de timp reacoineaz cantiti egale de substan independent de concentraia ei.

Dup dependena vitezei de temperatur putem determina energia de activitate a reaciei concrete. Forma integral a ecuaiei lui Arenius: lnk = -(Ea/RT) + lnA legea constant de vitez k cu temperatura; astfel, graficul dependenei logaritmului constantei de vitez a reaciei de valoarea invers a temperaturii (1/T) ne d posibilitatea de estimare a energiei ei de activare Ea din desenul de mai jos.

n ecuaie R- constanta universal a gazelor. Profilul energetic al reacviei propus pe desen ilustreaz noiunea de energie de activare ca o mrime a barierei energetice, care trebuie s fie nvins de reageni n procesul reaciei. E clar c cu ct este mai mare energia de activare, cu att este mai mic constanta de

vitez. Prin intermediul acestei relaii pot fi prezise vitezele reaciilor la diferite temperaturi, n cazul dac energia de activare Ea a fost determinat mai nainte. Reaciile heterogene Pentru a evidenia relaiile ntre viteza reaciei i concentraiei, la timpul dat de procese putem s studiem un model simplu al reaciei fermentative. Schema cea mai simpl a reaciei catalizate de ferment (sistema Mihaelis-Menten) are forma:

unde S -substana (substratul), E- fermentul, ES- complexul fermentului cu substratul i P- produsul final. Fermentul regenereaz n urma reaciei i se particip din nou n procesul sus-numit. Trei valori k reprezint constante ale vitezei de formare a complexului de ctre ferment i substrat i descompunerea complexului cu formarea produsului reaciei. Viteza decurgerii acestei reacii la diferite temperaturi este determinat de mrimea Ea:

viteza micorrii concentraiei de substrat sau formarea produsului (v) = k2Et[S]/Km+[S] = Vmax[S]Km+[S]

Km -constanta pseudoechilibrului reaciei de formare a complexului fermentului cu substratul, Et concentraia total a fermentului m sistem. n cazul saturaiei totale a suprafeei accesibile a fermentului (sunt ocupate toate locurile active) se observ viteza maxim a reaciei Vmax, egal cu k2Et. Forma mai general a acestei relaii este: viteza = k1c/k2+c unde k1- viteza maxim,obinut la ridicarea concentraiei, k2- o constant a pseudoechilibrului, ce indic la capacitatea substanei de a interaciona cu suprafaa fermentului. Spre deosebire de sistemul omogen suprafaa fermentului poate fi saturat; n acest caz viteza reaciei este maxim. Dac concentraia substratului este foarte mic (*S+<<Km), atunci reacia este aproximativ de ordinul nti: V = (Vmax / Km)[S] n acest caz constanta vitezeide ordinul nti este egal cu Vmax / Km. n cazul concentraiei mai nalte dup atingerea vitezei maxime (Vmax) reacia se descrie de cinetica ordinului zero (viteza reaciei nu depinde de ridicarea ulterioar a concentraiei). Astfel, dac cercettorul este coenteresat n extrapolarea rezultatelor cercetrii a unei sisteme pe alta, este necesar de a preciza tipul modelului cinetic,adevrate pentru condiiile n mediul nconjurtor. De exemplu, dac ntr-un sistem concret cu o cantitate anumit de substan se detect viteza optim a descompunerii n sistema cu o concentraie mai nalt de aceeai substan. Rspunsurile la ntrebarea dat, probabil, vor fi diferite, n dependen de tipul modelului cinetic acceptat.Dac n sistemele cercetate reacia este de primul ordin, atunci, viteza reaciei este direct proporional cu concentraia substanei. ns, dac cercetm un sistem eterogen, atunci nainte de a face presupunere oarecare este nevoie de tiut tipul dependenei vitezei de concentraia substanei date ntr-un diapazon larg.

Semiperioada. n relaiile ce descriu stabilitatea substanei n sol sau alte probe biologice, des se ntlnete membrul t1/2 - semiperioada substanei. Termenul de "semiperioad" nseamn perioada de timp, necesar pentru descompunereasau dispariia a jumti de substan n procesul cercetat. Este important de-a nu confunda noiunea de semiperioad pentru procesul de ordinul nti. n ultinul caz semiperioada e constant i nemijlocit e legat cu constanta de vitez: t1/2 =0,693/k Dei procesele cinetice n condiiile naturale se pot aproxima pn la cinetica de ordinul nti este puin probabil, c ele corespund reaciilor monomoleculare i deaceea valorile obinute experimentale ale semiperioadelor deobicei depind de concentraie.

Factorii de toxicitate Factorii de toxicitate reprezint totalitatea condiiilor de care depinde toxicitatea unei substane sau gradul su de nocivitate. Ei pot fi grupai n dou grupe: factori de toxicitate dependeni de substan i factori de toxicitate dependeni de animal. Principalii factori de toxicitate din aceast categorie sunt reprezentai de proprietile fizico-chimice ale substanei, de tipul de asociere i doz. Natura chimic tipul combinaiei: organic sau anorganic (ex. compuii anorganici ai arsenului sunt mai toxici dect compuii organici); valena (ex. derivaii arsenului trivalent sunt mai toxici dect derivaii arsenului pentavalent; clorura mercuric este mai toxic dect clorura mercuroas); greutatea atomic i molecular (toxicitatea crete n paralel cu greutatea atomic i molecular, ex. alcoolul butiric, cu GM 74, este mai toxic dect alcoolii propilic (GM 60), etilic (GM 46), sau metilic (GM 32); structura chimic: substituirea unor atomi sau grupuri de atomi ntr-o molecul modific uneori toxicitatea. Ex. introducerea halogenilor n molecula hidrocarburilor determin creterea toxicitii: metanul (CH4) este inert, pe cnd clorura de metilen (CH2Cl2) i tetraclorura de carbon (CCl4) sunt foarte toxice; fixarea unui atom de oxigen pe gruparea aminic scade toxicitatea, formndu-se aminooxizi. izomeria: izomerii levogiri sunt mai toxici dect cei dextrogiri; izomerii para sunt mai toxici dect cei meta i dect cei orto; izomerul gamma al hexaclorciclohexanului este mai toxic dect ceilali. Starea de agregare i mrimea particulelor Starea lichid favorizeaz absoria, crescnd gradul de toxicitate. Substanele gazoase, datorit absoriei rapide, n special pe cale respiratorie, au un grad crescut de toxicitate. La toxicele solide, toxicitatea depinde de forma sub care se gsesc, amorf sau cristalin (cele amorfe, fiind mai solubile, sunt mai uor absorbabile i, ca urmare, mai toxice). Pesticidele fine, datorit dispersiei avansate, sunt mai toxice. Solubilitatea

Substanele solide care nu se solubilizeaz n ap sau lipide sunt lipsite de toxicitate. Absorbia i difuziunea toxicelor este influenat de coeficientul de partaj (coeficientul de repartiie lipide/ap). Cel mai bine se absorb moleculele care au coeficient de partaj mediu. Pentru substanele hidrosolubile toxicitatea este proporional cu gradul de solubilitate: arseniii, mai solubili, sunt mai toxici dect anhidrida arsenioas; srurile de bariu solubile sunt mai toxice dect sulfatul de bariu insolubil. Pentru toxicele care ptrund pe cale cutanat, toxicitatea depinde att de liposolubilitate, ct i de hidrosolubilitate. Concentraia Influena acestui factor este vizibil la substanele gazoase. Prezint o deosebit importan produsul C T, care constituie constanta lui d`Haber (C=concentraia; T=durata de aciune). Concentraia influeneaz i toxicitatea substanelor care se prezint sub form de soluie (ex. acidul sulfuric concentrat este coroziv, iar cel diluat 23% este o limonad acid cu utilizare terapeutic). Starea de ionizare Forma ionizat a substanelor nu se absoarbe dect n foarte mic msur sau deloc. Starea de ionizare depinde de pH-ul i pK-ul substanei. Formula lui Henderson-Hasselbach stabilete relaia dintre gradul de ionizare (pH) i constanta de disociere (pK): pK acizi = pH + log CiCni pK baze = pH + log CniCi unde:pK = constanta de disociere Cni = concentraia componentei neionizate Ci = concentraia componentei ionizate De exemplu, barbituricele i alcaloizii se gsesc n form ionizat sau neionizat n funcie de pH i pK. Pentru barbiturice, creterea pH-ului determin trecerea de la forma liposolubil la cea hidrosolubil (ionizat) i scade gradul de absorbie. pH-ul sczut, din stomac, favorizeaz existena formei liposolubile (neionizat) i astfel absorbia. Pentru alcaloizi, creterea pH-ului determin trecerea din forma hidrosolubil (ionizat) n forma liposolubil (neionizat). Absorbia se face bine n condiiile de pH din duoden. Solventul Solventul influeneaz toxicitatea fie prin aciunea toxic proprie (ex. solvenii pesticidelor), fie prin favorizarea absorbiei (situaie care se ntlnete atunci cnd nu se administreaz antidoturi nespecifice sau purgative adecvate, de exemplu: lapte, purgative uleioase n intoxicaia cu pesticide organoclorurate, organofosforice, fosfor etc.). Originea n funcie de originea toxicelor (vegetal, animal, mineral, industrial) se pot ntlni situaii specifice care influeneaz toxicitatea. Astfel, la toxicele vegetale, toxicitatea este influenat de prile plantei

care sunt consumate (de obicei toxicul se concentreaz n rdcini, semine), de stadiul vegetaiei (principii toxici se gsesc n cantiti mai mari n anumite faze ale vegetaiei, de exemplu glicosizi cianogenetici, n porumb, n faza de lapte), de factorii pedoclimatici i meteorologici (n condiii de secet, n regiunile de step, n unele plante se concentreaz glicosizi cianogenetici). La toxicele minerale, toxicitatea poate scdea prin nvechire (ex. cianura de potasiu). Asocierile de substane pot modifica activitatea acestora n sensul creterii sau reducerii toxicitii. Asocierile pot fi sinergice (cresc toxicitatea) sau antagonice (reduc toxicitatea). Asocierile sinergice sunt de mai multe tipuri: -prin nsumare (ex. cocaina i adrenalina); -prin potenare (ex. compuii organofosforici cu substanele parasimpatico-mimetice); -prin favorizarea absorbiei (ex. toxicitatea compuilor pe baz de fosfor crete dac raia este bogat n lipide). Asocierile antagonice diminueaz toxicitatea prin efectele de ordin fizic, chimic sau farmacodinamic care se produc. Antagonismul poate fi reversibil sau ireversibil. Un caz particular l constituie antidotismul. De exemplu: taninurile precipit alcaloizii; compuii colinergici sunt antagonizai de atropin; intoxicaia cu cupru poate fi prevenit prin administrarea de molibden i invers; cianura de potasiu n combinaie cu glucoza este transformat n cianhidrin, produs netoxic. Doza este unul dintre factorii de toxicitate cei mai importani. Caracterizarea toxicologic a unei substane administrate stabilete prin: doza maxim tolerat (D.M.T.) cantitatea cea mai mare de substan care este suportat de organism fr s apar fenomene toxice; doza letal (D.L.) cantitatea minim de substan care provoac moartea unui animal adult; Datorit variaiilor individuale s-au introdus i valorile: doza letal zero (D.L.0) cantitatea de substan care determin fenomene toxice grave, dar nu letale; doza letal 50 (D.L.50) cantitatea de substan care produce efecte letale la 50 din 100 animale de experien n 24-48 ore; doza letal 100 (D.L.100) cantitatea de substan care produce efecte letale la toate animalele folosite n experimentul acut de toxicitate; dozele letale 75 i 25 sunt rar folosite; doza minim letal (D.M.L.) cantitatea minim de substan care omoar un singur animal din lot; doza letal cert (D.L.C.) cantitatea de substan care produce moarte animalelor n orice situaie. Substanele toxice care ptrund pe cale respiratorie sunt caracterizate prin:

 concentraia letal a toxicului n atmosfer (C.L.) corespunde aproximativ dozei letale i se exprim n ppm (mg/m3); concentraia letal 50 (C.L.50) cantitatea de toxic (mg/m3 aer) care produce moartea a 50% din animalele de experien n decurs de 4 ore; concentraia letal 100 (C.L.100) cantitatea minim de toxic (mg/m3 aer) din aerul respirat de animalele de experien care provoac 100% mortalitate. n cazul medicamentelor se raporteaz DL50 la DE50 (doza terapeutic efectiv 50) i se obine indicele terapeutic (I.T.). Dac indicele terapeutic este mai mare sau egal cu 10, medicamentul respectiv nu prezint pericol la doze uzuale, iar dac este mai mic de 10, este necesar s fie folosit cu precauie. Datorit diferenelor mari ale dozelor toxice, Hodge i Sterner au clasificat substanele dup DL50 (exprimat n mg/kg) n administrarea oral la obolani (clasificarea este acceptat i n prezent), astfel: -extrem de toxice (sub 1 mg/kg); -foarte toxice (1-50 mg/kg); -moderat toxice (50-100 mg/kg); -puin toxice (500-5000 mg/kg) -practic netoxice (5000-15000 mg/kg); -relativ lipsite de toxicitate (peste 15000 mg/kg). Dozele toxice variaz n funcie de specie (dac se consider doza toxic 1 la cine, aceasta va fi 2-5 la suine, 5 la ovine, 10 la cabaline, 12-15 la taurine), vrst (la animalele tinere doza scade cu 1/81/4 din doza pentru un animal adult). Factorii de toxicitate dependeni de animal sunt: specia, rasa, vrsta, greutatea corporal, sexul, gradul de plenitudine a tubului digestiv, regimul alimentar, starea de ntreinere, starea de sntate, predispoziia, sensibilitatea individual. Speciile reacioneaz diferit la aciunea toxicelor. De exemplu, caii i cinii sunt mai puin sensibili la morfin dect omul; morfina acioneaz analgetic la om i cine, dar excitant la pisic; erbivorele sunt sensibile la aciunea toxicelor metalice; caii sunt mai sensibili la digital; bovinele sunt mai sensibile la cloroform; cinii sunt sensibili la srurile de mercur, la cantarid; pisicile sunt sensibile la fenol, benzol; iepurii sunt rezisteni la atropin; oile pot consuma brndua de toamn; vacile sunt sensibile la brndua de toamn; cabalinele sunt sensibile la fenotiazin; rumegtoarele mici sunt sensibile la cupru; psrile sunt rezistente la cantarid; feriga mascul produce intoxicaii grave la cabaline, dar nu i la rumegtoare. Rasa influeneaz evident toxicitatea. n general, rasele perfecionate sunt mai sensibile dect cele primitive (excepie: oile din rasa Merinos sunt mai rezistente la intoxicaia cu cupru). obolanii albi sunt mai rezisteni dect obolanii cenuii; rasa Friz este mai sensibil la gosipolul din turtele de bumbac dect rasa Jersey; cinii de ras Chaw-chaw tolereaz morfina i sunt rezisteni la barbiturice. Animalele foarte tinere i cele senile sunt mai sensibile la aciunea toxicelor. La animalele mai tinere se explic prin metabolizarea mai lent din cauza activitii sczute a unor sisteme enzimatice (de

conjugare cu sulfatul, cu acidul glucuronic, de acetilare). La animalele senile, deficitul de metabolizare se datoreaz afectrii morfofizologice a principalelor organe de metabolizare (ficatul i rinichii), afectare generat de vrst. n cadrul aceleiai specii, un animal mic necesit o cantitate mai mare de toxic pentru a rspunde n acelai mod cu unul mai mare, deoarece procesele de ardere i de eliminare sunt mai mari. Femelele sunt mai sensibile. Gradul de toxicitate se coreleaz cu metabolizarea. Astfel, de exemplu, stricnina la obolanii femele este detoxifiat mai lent n microzomii hepatici dect la obolanii masculi; parationul este metabolizat mai rapid n paraoxon (metabolit foarte toxic) la femele, comparativ cu obolanii masculi. Diferenele de sensibilitate i metabolizare apar la pubertate, ceea ce conduce la presupunerea c sunt dependente de hormonii sexuali. n spijinul acestei ipoteze vin i constatrile c prin castrare masculii devin mai sensibili la aciunea toxicelor i c administrarea de testosteron femelelor duce la mrirea rezistenei acestora. Absorbia i, deci, toxicitatea, sunt cu att mai mari cu ct tubul digestiv este mai gol. Coninutul alimentar influeneaz toxicitatea prin interaciunea cu substanele, determinnd fenomene fizice de absorbie sau solubilizare, precum i fenomene chimice ca precipitarea i neutralizarea (exemple: solubilizarea fosforului de ctre substanele grase, precipitarea alcaloizilor de ctre taninii alimentari). Regimul alimentar poate proteja fa de toxice sau poate accentua toxicitatea. Regimul hipoproteic, prin scderea sintezei enzimelor microzomale de detoxicare prin aport redus de azot, crete toxicitatea organocloruratelor, organofosforicelor, erbicidelor (diuron, monuron). Regimul hiperproteic protejeaz ficatul animalelor (de exemplu, a celor care au fost tratate cu cantiti mici de aflatoxin) i detoxificarea se face mai rapid. Att regimul lipsit de lipide ct i cel hiperlipidic scad activitatea enzimelor microzomale (de exemplu, a celor care metabolizeaz hexo-barbitalul), crescnd toxicitatea. Regimul hiperglucidic crete toxicitatea pesticidelor prin influena negativ asupra digestiei i absorbiei aminoacizilor, dar are un efect benefic n intoxicaiilor cu uree, cianuri. Aportul vitaminic influeneaz toxicitatea datorit rolului de cofactori ai enzimelor de metabolizare a toxicelor. Vitamina B2 protejeaz organismul mpotriva efectului cancerigen al dimetilaminoazobenzenului, deoarece reductaza care-l detoxific este dependent de vitamina B2; vitaminele complexului B au efect protector n intoxicaia cu plumb. Aportul mineral influeneaz toxicitatea n unele cazuri. Regimul alcalin crete toxicitatea lupinului, regimul declorurat favorizeaz absorbia bromurilor, aportul de seleniu scade toxicitatea mercurului, carena n calciu favorizeaz intoxicaia cu tetraclorur de carbon, crete toxicitatea plumbului, aportul de factori lipotropi cresc capacitatea detoxifiant a ficatului. Animalele cu leziuni organice, n special hepatice, datorit reducerii vitezei de metabolizare i renale, datorit reducerii ratei de eliminare, sunt mai sensibile. Deshidratarea crete sensibilitatea la compuii hidrosolubili de plumb, seleniu, datorit scderii ratei de metabolizare n microzomii hepatici, fr s scad cantitatea de proteine microzomale. Predispoziiile individuale sunt determinate de starea sistemului nervos i a sistemului neuro-endocrin. De exemplu: oboseala, distonia neurovegetativ cresc sensibilitatea la aciunea toxicelor; tiroidectomia crete sensibilitatea iepurelui la arsenobenzol, suprarenalectomia crete

sensibilitatea obolanilor la morfin, veratrin (suprarenala intervine n producerea de glutation care este un factor important n oxido-reducere, deci detoxifiere). Hipo sau hipersensibilitatea individual pot fi congenitale sau ctigate. Hipersensibilitatea congenital (idiosincrazie) este de ordin individual sau familial i reprezint susceptibilitatea exagerat a unor indivizi la anumite substane ca: sulfamide, antibiotice, iod, ioduri, chinin. Se datoreaz unor deficiene enzimatice i se manifest sub form de erupii cutanate, cistite, corize. Hipersensibilitatea dobndit (anafilaxia) se datoreaz unui proces de imunitate dobndit n urma introducerii n organism a unor cantiti mici, dar repetate de toxice vegetale (ricin) sau animale (veninuri) care au proprieti antigenice. Exist i substane neproteice (arseno-benzenii, antipirina, coloranii azoici) care se cupleaz cu proteinele i le confer acestora proprieti antigenice. Se manifest clinic prin reacii epidermice sau intradermice, edeme, rinit, astm, dureri articulare, induraii limfonodulare, periartrite, inflamaii viscerale. Cea mai grav manifestare este ocul anafilactic care poate s apar la cteva minute de la administrarea substanei i, n plus fa de simptomele precizate anterior, se constat pierderea cunotinei, colaps, moarte. Hiposensibilitatea congenital este legat de specie, ras, factori genetici i individuali. De exemplu, hiposensibilitatea iepurelui la atropin, hiposensibilitatea puilor la cantarid. Aceste specii dispun de mecanisme enzimatice care distrug toxicul. Hiposensibilitatea dobndit este consecina diferitelor mecanisme, precum obinuina (apare ca urmare a administrrilor repetate fenomenul de mitridatism, care determin formarea n tubul digestiv a unor bariere de absorbie, de exemplu pentru arsen, sau se produce o adaptare la toxic, de exemplu celula nervoas se adapteaz la morfin), filaxia (reprezint protecia organismului fa de o substan sub aciunea altei substane, de exemplu, sparteina este filactizant fa de veninul de viper), imunitatea (se instituie fa de toxicele cu proprieti antigenice: ricina, veninul de arpe, veninurile animale).

Lecia 5. Microorganismele din sol. Atragem o deosebit atenie la transformrile metabolice ce decurg n prezena microorganismelor din dou motive: 1-efectueaz unele reacii, care nu decurg in organismele superioare; 2-funcioneaz n sol, acest colector al majoritii substanelor toxice din mediul nconjurtor, n special acelor, ce posed solubilitate redus. Varietatea populaiilor microorganismelor din sol pentru a-i descompune, sunt factorii de baz n meninerea circuitului carbonului n biosfer i micorarea nivelului polurii. Ruperea lanului aromatic Microorganismele cauzeaz majoritatea, dac nu toate, tipurile reaciilor cercetate mai sus reaciile oxigenazei, hidroliza .a. ns capacitatea lor de a ataca inelul aromatic este unical. Despre alte sisteme, capabile de a efectua procesul de mai sus, de exemplu de plante, este prezent doar informaie fragmentar. Tendina de baz a proceselor metabolice n organismele animalelor soperioare const n micorarea complicitii moleculei, ntroducerea n ea n cazul necesitii substituenilor polari i ulterior ridicarea solubilitii n ap prin intermediul conjugrii nc pn la excluderea din organism. Dac nu ar fi fost mecanisme de transformare a acestor compui aromatici, am putea fi ateptat acumularea lor n mediul extern. Pentru punerea inelului benzenic de microorganisme este necesar, ca inelul aromatic s posede

minimum doi sunstitueni hidroxili n poziiile orto- sau para-. Acei substitueni se pot ntroduce n inel n urma reaciilor oxigenazei sau oxidrii duble, n urma crora n inelele aromatice se introduc doi atomi de oxigen. Ruerea inelului decurge deasemenea n cazul participrii fermentului deoxigenazei, ce asigur n dependen de tipul fermentului concret scindarea orto- sau para-.

Scindarea orto- i meta- a picocatelinei cu diferite deoxigenaze Unele exemple a proceselor de scindare meta- se propun pe reaciil de mai jos. n reaciile consecutiveacizii dicarbonilici formai n urma ruperii inelului aromatic, se transform n compui, capabili de a se include n procesele metabolice naturale din organism, n urma crora se transform n CO2. La diverse specii de microorganisme s-a constatat posibilitatea i decurgerea reaciilor de scindare a inelului aromatic. Deobicei, se constat, c aa procese sunt selective, deaceea diversitatea transformtilor deferitor clase de compui de ecosistema din sol este determinat de diversitatea populaiilor de microorganisme din sol, dar nu de universalitatea unei oarecare specii de microorganisme. Aciunii microbilor se supun deferii compui aromatici, inclusiv bifenilul i compuii cu nucleele condensate - naftalina, fenantrenul, antrcenul.

Exemple a diversilor procese de meta- scindare Apare ntrebarea : "de ce pentru microorganismele din sol este important aceast capacitate specific?" Va fi nevoie de amintit, c doi biopolimeri cei mai rspndii- celuloza i lignina sunt componeni a esuturilor lemnoase . Lignina reprezint un polimer cu structur complicat, coninnd civa compui aromatici, unii din ei sunt reprezentai mai jos:

S-a calculat, c anual1,51010 t de CO2 se transform n lemn. Deaceea pentru meninerea circuitului carbonuluin biosfer este important ca s fie prezent un oarecare mecanism de transformare a ligninei invers n CO2. Reaciile de metilare Pentru activarea metabolic normal majoritatea organismelor trebuie s transforme fragmente de molecule cu un atom de carbon. Aa fragmente reprezint des grupe metilice. De exemplu, aminoacidul metionina este scindat de microorganisme pe calea adiiei grupei metilice la homocistein. Nu demult sa demonstrat, c microorganismele pot utiliza reaciile de metilare pentru transformarea metalelor n compui metalorganici. O importan deosebit este capacitatea unor microorganisme de a transforma ionii de hidrargium n metil- i dimetilhidrargium

Organismele, capabile de a efectua aceste reacii n procesele sale metabolice utilizeaz transmetilarea, formnd aa compui ca metanul. n aceste sisteme pot reaciona i metalele. Pentru activitatea vital a

microorganismelor rspunztoare de aceste reacii este necesar mediul reductor. Metilhidrargiumul se formeaz la valorile p, destule pentru creterea organismelor ns insuficiente pentru formarea sulfidului de mercur (p- capacitatea oxido-reductoare a mediului extern concret, p =-lg[e]). E necesar de remarcat, c viteza formrii dimetilhidrargiumuluide cteva mii de ori este mai joas dect viteza formrii metilhidrargiumului. ns dimetilmercurul este o substan volatil i se poate evapora din mediul acvatic, n care ea s-a format. Alte organisme sunt capabile din nou s transforme metilmercurul n mercur elementar. Importana acestor reacii n determinarea comportrii mercurului n mediul ambiant n mod schematic este reprezentat pe desen: Circuitul biologic al hidrargiumului

Majoritatea transformrilor decurg n sistemele microbice. E nevoie de evideniat i ali doi factori: 1mercurul elementar este destul de volatil i uor se evapor din mediul acvatic; 2-dimetilmercurul n procesele fotochimice se poate descompune pn la mercur elementar i hidrocarburi. Importana proceselor de metilare ne putem nchipui, doar clarificnd rolul biologic al metilmercurului, n special n comparaie cu mercurul neorganic. Metilmercurul aproape complet se absoarbe de organism i n mod nensemnat se elimin din el. n urma aciunii asupra organismului cu metilmercur chiar i n concentraii joase, coninutul ei n esuturi poate s creasc. Mercurul neoragic , mportriv, foarte slab se absoarbe de organism. Metilmercurul se distribuie n toate esuturile pe cnd mercurul elimentar se acumuleaz, n special, n ficat i rinichi. Metilmercurul este neurotoxic foarte puternic. Astfel, n urma reaciilor de metilare orice form de mercur, ptrunzind n mediul ambiant, se poate transforma n metilmercur, care ulterior se poate concentra n organisme. Mercurul determinat n pete se afl sub form de metilmercur. Din cauza imposibilitii determinrii acestor transformri au aprut probleme serioase de poluare a mediului cu mercur. n cteva cazuri problema a devenit acut n urma intoxicrii i decesul oamenilor. mercurul, de obicei, este considerat relativ inert: potenialul de reducere a mercurului este destul de pozitiv, ce indic la stabilitatea ei la oxidare i formarea formei ionice. Dac compuii mercurului i se formeaz, c mercurul din mediul extern nu va poseda activitate biologic deosebit. Capacitatea microorganismelor de a transforma mercurul n metilmercur schimb complet perspectiva dat. Contrafactorul sau confermentul ce particip la transferul grupei metilice la ionul de mercur, este metilcorinoida- substan, ce conine vitamina B12. Din confactorii biologici ce transport grupele metilice, aceasta este unicul confactor, care transfer grupe metilice sub forma de CH3- . Pe baza cunoaterii condiiilor decurgerii procesului de metilare putem, ntr-o msur oarecare de a clarifica capacitatea altor metale de a participa la reacia dat. Staniul, paladiul, platina, aurul, argintul i taliul deasemenea se pot supune metilrii, pe cnd plumbul, cadmiul i zincul nu sunt capabili de a participa la reacia dat. Aceast concluzie se bazeaz pe faptul c alchilii plumbului, cadmiului i zincului n soluii apoase sunt nestabile e deasemenea prin aceea, c vitamina B12 nu transfer grupele metilice la elementele date. Evident c posibilitatea acestor metale de a participa n procesele metabolice i a se transforma n compui metalorganici e nevoie de luat n consideraie n cazul preuirii importanei lor poteniale pentru mediul extern.

Adaptarea

La unele organisme superioare viteza transformrilor metabolice a substanelor exogene se ridic n urma aciunii a unora din ei asupra organismului. Aa o reacie a organismului a obinut denumirea de inducie i e cauzat de creterea activitii fermenilor, ce se ocup cu metabolismul substanelor exogene. o reacie analoago s-a observat la populaiile microorganismelor din sol: viteza descompunerii chimicatului dat poate crete, dac proba de sol n prealabil de prelucrat tot cu aceea substan. O astfel de cretere a vitezei de descompunere poate urma dup sine micorarea intervalului de timp pm la apariia activitii microorganismelor i creterea vitezei de descompunere a compusului. Aceasta nu este un fenomen general, deoarece el se observ nu pentru substanele cercetate. ns n unele cazuri reacia de rspuns a organismului poate fi considerabil. Fenomenul reaciei de rspuns a organismelor este cercetat incomplet

Comportarea toxicelor n organism (toxicocinetica) Cile uzuale de ptrundere a toxicelor n organism sunt cele naturale: calea digestiv: consum de plante toxice, de ap cu coninut de substane toxice, de furaje contaminate cu toxice sau toxine; calea respiratorie: pentru toxicele volatile, toxicele gazoase, toxicele sub form de aerosoli; calea cutanat i a mucoaselor aparente: tratamentul cutanat cu substane potenial toxice, contactul accidental; Cile parenterale constituie mai rar ci de ptrundere a toxicelor. Pe aceste ci intoxicaiile se pot produce prin supradozarea medicamentelor, administrarea pe ci neuzuale, injectarea frauduloas. Majoritatea intoxicaiilor se datoreaz ptrunderii pe ci multiple. Absorbia toxicelor reprezint trecerea acestora din mediul extern n snge sau limfa circulant. Absorbia substanelor toxice, cu toat varietatea structural a acestora, este guvernat de legi comune. Ea presupune transportul prin membrane, proces guvernat de anumite legi. Absorbia se face prin difuziune simpl (transport pasiv) i transport activ. Difuziunea simpl are la baz permeabilitatea selectiv a membranei i se produce, n general, fr consum de energie, reprezentnd cel mai frecvent mecanism de transport prin membrane biologice. Dintre toxicele care se absorb prin mecanismul difuziunii simple se pot meniona: halogenii, derivaii gazoi ai sulfului, azotului, fosforului, arsenului, sulfura de carbon, alcoolul etilic, eterul etilic, fenolul, tetraclorura de carbon etc.. Transportul activ se realizeaz mpotriva gradientului de concentraie, cu consum de energie. n toxicologia clinic, transportul activ este prezent doar pentru un numr restrns de toxice absorbabile pe cale digestiv i excepional, pentru cele care ptrund transcutanat sau pe cale pulmonar. Prin transport activ se absorb: fluorurile, cloraii, nitriii, nitraii, stibiul, plumbul, cuprul, cromul. Absorbia substanelor toxice se face difereniat, n funcie de segmentul tubului digestiv. Mucoasa oral are rol limitat n absorbie datorit tranzitului rapid. Prin contact mai ndelungat prin gargarisme, badijonri, s-ar putea produce intoxicaii. Mucoasa sublingual este

cea mai propice absorbiei. Substanele care se absorb pe aceast cale (de exemplu, cocaina, nicotina, cianura de potasiu) evit bariera hepatic i detoxificarea lor este limitat. Mucoasa esofagian nu prezint importan pentru absorbia toxicelor. Doar la psri, dac este lezionat mucoasa ingluvial, este posibil absorbia i, ca urmare, intoxicaia. Mucoasa prestomacelor este propice absorbiei. Absorbia este dependent de pH-ul mediului i de pKul substanei. Aa cum s-a mai precizat, relaia dintre pH i pK este favorabil absorbiei atunci cnd predomin componenta neionizat (ecuaia lui Henderson-Hasselbach). De exemplu, amoniacul din rumen se gsete predominant sub form ionizat, absorbia lui fiind redus. n condiii de aport crescut de uree, n urma hidrolizei acesteia, rezult cantiti crescute de amoniac care determin creterea pH-ului ruminal i, ca urmare, creterea concentraiei componentei neionizate, deci a absorbiei, ceea ce duce la apariia fenomenelor clinice de intoxicaie. Mucoasa gastric permite absorbia anumitor toxice. Absorbia este posibil pentru componentele neionizate i este, ca i n cazul absorbiei din prestomace, dependent de pH i pK. La un pH puternic acid se absorb acizii slabi, dar nu se absorb bazele tari. Absorbia n stomac este influenat i de coninutul gastric. Astfel, acidul clorhidric precipit srurile metalelor grele, transform parial cianurile n acid cianhidric, neutralizeaz unele substane bazice, precipit unele emulsii etc.. Coninutul gastric dilueaz toxicul. n cazul n care stomacul este lipsit de furaje, unele toxice, datorit efectului lor iritant, provoac voma i astfel se produce expulzarea toxicului. Mucoasa intestinal, datorit suprafeei mari i a vascularizaiei bogate, are mare capacitate de absorbie. Cea mai eficient este mucoasa intestinului subire, dar la ierbivorele monogastrice se realizeaz absorbia i n intestinul gros. Mucoasa rectal este propice pentru substanele biologic active, absorbia se face pe cale sanguin i pe cale limfatic, evitndu-se bariera hepatic. Absorbia prin mucoasa intestinal este influenat de pH i pK (se absorb bine componentele neionizate), de motilitatea intestinal (diareea reduce absorbia, constipaia o favorizeaz), de componentele coninutului intestinal (mucina reduce absorbia; srurile biliare cresc absorbia substanelor hidrosolubile prin formarea de micelii i scad absorbia dac dau produi insolubili cu substanele din alimente; prin prezena n cantiti mari, srurile biliare scad gradul de absorbie, influeneaz pH-ul, motilitatea intestinal, fluxul sanguin), de starea fiziologic i morfologic a mucoasei digestive (substanele chelatante, mobiliznd calciul i magneziul membranar, cresc permeabilitatea mucoasei digestive i scad selectivitatea fa de moleculele mari; modificrile congestive sau trofice accelereaz absorbia). Calea respiratorie este o cale sever de intoxicaie, deoarece absorbia toxicelor se face rapid, detoxificarea este diminuat, toxicele ocolind bariera hepatic. Excepie fac toxicele activate hepatic (ex. parationul). Pe cale respiratorie se absorb toxicele volatile (cloroformul, eterul), toxicele gazoase (oxidul de carbon, acidul cianhidric, bioxidul de sulf, hidrogenul sulfurat, amoniacul), produii care sublimeaz, particulele fine de aerosoli (mai mici de 5 ), pulberile metalice ncrcate electric. Mucoasele cilor respiratorii anterioare (nazal, traheal, bronhic) au importan redus pentru absorbie. n general, toxicele sunt expulzate prin tuse, strnut. Totui, contactul repetat poate duce la

intoxicaie (de exemplu, se pot absorbi srurile alcaline ca iodura de sodiu, salicilatul de sodiu). Pulmonul are o mare capacitate de absorbie datorit suprafeei mari, structurii i vascularizaiei sale. Absorbia toxicelor prin pielea intact este dificil datorit structurii acesteia i datorit stratului hidrolipidic. Pielea este considerat o barier fiziologic fa de particulele i moleculele chimice strine. Exist, totui, dou posibiliti pentru ptrunderea toxicelor n capilarele din derm i de aici n circulaia general i anume transepidermic (pentru substanele liposolubile cu coeficient de partaj mare) i transfolicular (din sebum n glandele sebacee sau foliculul pilos i de aici n derm). Absorbia transcutanat este favorizat de masaj (prin comprimarea foliculilor), de transpiraie (prin dizolvarea toxicelor de pe tegument), de eroziuni (prin descoperirea circulaiei limfatice a corionului), de solvenii organici, substanele keratolitice, detergeni. Transcutanat se pot absorbi substanele gazoase i volatile (hidrogenul sulfurat, oxidul de carbon, bioxidul de carbon, aldehida formic, acidul cianhidric), o serie de substane organice (hidrocarburile alifatice lichide de la C6 la C10; hidrocarburile aromatice, ciclice, terpenice; alcoolii, esterii: acetaii, butiraii; fenolii; solvenii clorurai; insecticidele organofosforice, insecticidele organoclorurate; alcaloizii lichizi: nicotina etc.), substanele minerale (direct sau dup transformarea n contact cu acizii grai din sebum srurile de taliu, unele sruri de mercur, de plumb, bismut, iodurile alcaline). n general, substanele cu greutate molecular mare traverseaz greu pielea, pe cnd toxicele cu greutate molecular mic, liposolubile, neionice i nepolare, strbat pielea mai uor. Seroasele pleural, peritoneal, sinovial, datorit structurii lor (epiteliu parenchimatos subire), permit absorbia lichidelor introduse n cavitile pe care le cptuesc. Mucoasa conjunctival permite absorbia toxicelor, iar acestea ptrunznd n circulaie dau efecte generale. O serie de alcaloizi (cocaina, atropina, pilocarpina), insecticidele organofosforice (parationul), acidul cianhidric traverseaz mucoasa conjunctival dnd fenomene de intoxicaie. Placenta este permeabil pentru gazele i lichidele volatile (cloroform, eter, alcool), pentru unele substane hidrosolubile (chinin, antibiotice, morfin), pentru unele substane liposolubile (benzen, corticosteroizi, organoclorurate etc.), metale grele. Trecerea se face prin difuziune simpl sau prin transport activ, n funcie de natura substanei i/sau de structura placentei. Efectele traversrii placentei sunt fenomenele toxice, avorturile, malformaiile. Calea intravenoas permite absorbia rapid a toxicelor, substanele evitnd barierele gastrice i intestinale. Calea subcutanat. Substana fiind introdus n esutul hipodermic, prin difuziune, ajunge n circulaie i i exercit efectul toxic. Calea intramuscular asigur absorbia mai rapid a substanelor dect cea subcutanat. Din muchi, datorit vascularizaiei bogate, prin difuziune, substanele ajung n circulaie. Cel mai rapid se absorb substanele hidrosolubile. Calea intrarahidian. Pentru realizarea absorbiei, substanele trebuie s strbat bariera hematoencefalic, aceasta depinznd de coeficientul de disociere (substanele puin ionizate sau neionizate o strbat mai uor) i de liposolubilitate (substanele liposolubile sunt avantajate). Dup absorbie, toxicele se distribuie n cele trei mari spaii lichidiene ce constituie 70% din greutatea organismului: spaiul vascular (5%), spaiul intercelular (15%) i spaiul intracelular (50%).

Dup ptrunderea toxicelor n torentul sanguin sau n limfa circulant, acestea rmn n aceste faze fie sub form liber (dizolvate n lichidul plasmatic), fie fixate pe eritrocite (de ex. plumbul), fie legate de proteinele plasmatice (vehicule plasmatice). Legarea la proteinele plasmatice depinde de natura substanei i de specia animal. Tipurile de legturi sunt: Van der Waals (labile), ionice, covalente (foarte puternice). Cantitatea de toxic legat depinde de concentraia toxicului, afinitatea pentru locurile de fixare, capacitatea de cuplare disponibil a proteinelor plasmatice. S-a constatat o competitivitate pentru locurile de cuplare ntre toxicele din acelai grup: acizii slabi ntre ei, bazele slabe ntre ele. Toxicele bazice dispun de mai multe locuri de cuplare dect cele acide. Dac n organism ptrunde o substan toxic care are capacitate mai mare de cuplare dect una ptruns anterior, cea din urm va elibera centrii de cuplare i apare sub form liber. Aceast situaie poate determina fenomene toxice (de exemplu, warfarina este cuplat masiv cu albuminele plasmatice, dar o substan acid o poate deplasa i trece n circulaie). Capacitatea de cuplare pe proteinele plasmatice este mai redus la animalele tinere sau la cele suferinde de afeciuni hepatice. Cuplarea pe proteinele plasmatice are i dezavantaje i anume ntrzie biotransformarea i eliminarea toxicelor (de exemplu, cazul dieldrinului, benzenului, barbituricelor, dicumarolului etc.) n organismul animal toxicele se gsesc libere i cuplate, ntre cele dou forme existnd un echilibru dinamic. Difuzarea n esuturi se face sub form liber, partea cuplat reprezentnd molecule prea mari pentru a iei din patul vascular. Difuziunea depinde de natura substanei, mrimea particulelor, vascularizaia regiunilor corporale, localizarea receptorilor asupra crora acioneaz. Difuziunea poate fi uniform n toate esuturile, sau electiv (determinat de diferenele de permeabilitate ale membranelor celulare), iniial n organele care corespund proprietilor lor fizico-chimice, apoi avnd loc redistribuirea la sediul aciunii. Unele fraciuni ale substanelor toxice care au difuzat se fixeaz pe receptorii tisulari unde i exercit aciunea biologic, iar alte fraciuni se depoziteaz provizoriu sau, mai rar, definitiv n organe i esuturi. Dup Keberle, 1971 (citat de Cotru, 1978), substanele foarte liposolubile (anestezicele, hipnoticele, sedativele) realizeaz concentraii mari n organele bogate n lipide i bine vascularizate (creier, mduv); substanele lipofile bazice se concentreaz n pulmoni, rinichi, suprarenale; substanele lipofile slab acide se concentreaz n ficat; bazele puternice i compuii puternic hidrofili realizeaz concentraii superioare celor sanguine n ficat, rinichi, suprarenale. Depozitarea substanelor toxice se poate face n esutul adipos (insecticidele organoclorurate, solvenii organici), n proteinele tisulare, pe grupri sulfhidrice (bismutul n rinichi, arsenul n piele i ficat, mepacrina n ficat, pulmoni), n esutul osos (plumbul, stroniul, bariul, calciul, fluorul, fosforul), n piele (aurul, argintul). Cunoaterea locurilor de depozitare prezint importan pentru stabilirea diagnosticului. Astfel, modificrile morfo-funcionale din anumite organe se explic prin tropismul toxicelor pentru acestea. Din punct de vedere toxicologic, cunoaterea sediilor de depozitare permite determinarea calitativ i cantitativ a toxicelor exogene din diferite organe i, n felul acesta, stabilirea diagnosticului (arsenul n intoxicaia acut se gsete n tractusul digestiv, iar n intoxicaia cronic n oase i sistemul nervos; plumbul n intoxicaia acut se gsete n ficat i rinichi, iar n intoxicaia cronic n pr, saliv etc. practic n toate organele). Din depozite, substanele toxice se pot elibera lent, mai ales cnd sunt cuplate cu proteinele celulare sau brusc (de ex. toxicele liposolubile n caz de slbire rapid a animalelor sunt puse n circulaia general i determin fenomene clinice).

Acumularea este un fenomen caracteristic toxicelor cu toxicitate mic, dar care se elimin lent sau greu. Se realizeaz prin ptrunderea repetat n organism a unor doze subtoxice, care prin acumulare realizeaz doza toxic i declaneaz manifestrile clinice. Cauzele acumulrii sunt rezistena la biodegradare, stocarea material i fiziopatologic (nsumarea efectelor dozelor mici, administrate repetat). Dintre toxicele care prezint fenomenul de acumulare se pot cita: compuii organoclorurai (DDT, Aldrin, Dieldrin), glicosizii cardiotonici digitalici, anticoagulantele orale etc. Sediul fixrii substanelor toxice poate corespunde aciunii biologice (de exemplu, anestezicele n esutul nervos, arsenul n piele) sau s nu corespund acesteia (stricnina i nicotina n ficat, digitoxina n tubul digestiv). Deci, repartiia substanelor exogene n organism nu reflect aciunea lor specific, fixarea fcndu-se n mod preferenial pe receptori (Valette, 1972, citat de Cotru, 1978). Biotransformarea (metabolizarea) este reprezentat de conversia enzimatic a toxicilor n metabolii mai polari, mai uor excretabili i mai puin toxici (Cotru si colab., 1991). Biotransformarea substanelor exogene a aprut odata cu trecerea vieuitoarelor la mediul terestru. Organismele acvatice nu posed sisteme metabolizante pentru xenobiotice, deoarece ele excret compuii liposolubili direct n ap prin toat suprafaa corpului. La organismele terestre metabolizarea este indispensabil deoarece substanele liposolubile sunt reabsorbite la nivel tubular renal. Fr metabolizare viaa biologic a acestor substane ar fi de ordinul zilelor sau chiar al anilor ( de ex. etanolul ar necesita pentru eliminare 24 de zile). Organismul animal are posibilitatea de a metaboliza aproape toate structurile chimice cunoscute. Toi compuii exogeni, toxici sau netoxici, sufer metabolizare, cu excepia a dou categorii: compuii puternic polari (acizii i bazele tari, minerali i organici) i unii compui nepolari (eter etilic, dieldrin etc.). Prin biotransformare polaritatea unui compus crete. Metaboliii polari strbat mai greu barierele membranare lipoidice, reabsorbia tubular renal fiind redus. Biotransformarea are aadar rolul de a mri polaritatea i, indirect, de a reduce toxicitatea xenobioticelor. Metabolizarea substanelor toxice, precum i a unor substane xenobiotice este influenat de numeroi factori endogeni i exogeni. Factorii endogeni sunt diveri: genetici, fiziologici (vrsta, sexul, alimentaia), starea de sntate, ritmul circadian. Factorii exogeni cuprind factorii farmacodinamici i de mediu. Diferenele de metabolizare, care apar frecvent ntre specii i chiar n cadrul speciei, se datoreaz factorului genetic. Studiul polimorfismelor genetice a permis elucidarea a numeroase aspecte legate de absorbia i metabolizarea substanelor xenobiotice. De exemplu, biotransformarea compuilor cumarinici, respectiv hidroxilarea aromatic, se realizeaz sub aciunea enzimei 7-cumarin hidroxilaza. Activitatea enzimei (moli/or/g ficat) difer de la o specie la alta: 1,0 la iepure, 0,5 la cobai, 0,3 le pisic, 0,0 la obolan i la oareci, astfel putndu-se explica toxicitatea selectiv a raticidelor cumarinice. Diferenele de metabolizare din cadrul aceleiai specii se datoreaz polimorfismelor genetice. Aceste aspecte au fost studiate la om, formnd o nou ramur a farmacologiei, farmacogenetica. Polimorfismele genetice transspecifice se divid n: polimorfismul enzimelor de metabolizare a

substanelor exogene, boli ereditare ale metabolismului, rezisten ereditar la medicamente sau alte substane xenobiotice (Feigold, 1971, citat de Cotru, 1978). Capacitatea de metabolizare este dependent de vrst (animalele tinere au o capacitate mai sczut de metabolizare datorit dezvoltrii incomplete a echipamentului enzimatic parametabolic), sex (la masculi, metabolizarea prin intermediul enzimelor microzomale hepatice este mai rapid; la femele biotransformarea microzomal hepatic este mai redus, iar la cele gestante glucuronoconjugarea este redus la jumtate), alimentaie (carenele proteice, vitaminice, influeneaz negativ posibilitile de detoxifiere). Integritatea funcional a ficatului i rinichilor, are o influen marcant asupra metabolizrii toxicelor. Exist diferene individuale de la o zi la alta i chiar de la o or la alta n cursul aceleiai zile. Metabolizarea substanelor xenobiotice este influenat de ritmul circadian al funciei nervoase, al excreiei urinare, al concentraiei plasmatice de hormoni. Interfereaz competitiv cu substanele xenobiotice n procesul de metabolizare prin utilizarea acelorai enzime. Ca urmare, metabolizarea substanelor toxice este ntrziat sau chiar inhibat. Fenomenul de inhibiie enzimatic este complex, el datorndu-se inhibiiei competitive a acelorai enzime sau a cofactorilor, inhibiiei sintezei enzimelor, ncetinirii activitii enzimelor. Inhibiia duce la intensificarea efectelor toxice. Dintre substanele inhibitoare se pot cita: medicamente (cloramfenicolul, morfina, acidul paraaminosalicilic), poluani (insecticide organofosforice, tetraclorura de carbon etc.). Factorii de mediu influeneaz activitatea enzimatic, rezultnd astfel diferene de metabolism. Frigul, fiind un factor de stres prin axul hipofizo-suprarenalian, determin creterea activitii enzimelor microzomale hepatice. De exemplu, n condiii de temperatur sczut hidroxilarea acetanilidei se produce de dou ori mai intens. Presiunea atmosferic sczut reduce capacitatea organismului de metabolizare a substanelor xenobiotice. Zgomotul, factor de stres, crete capacitatea de metabolizare. Astfel, este intensificat evident hidroxilarea 2-naftilaminei. Radiaiile ionizante exercit o aciune complex, de activare n general a metabolismului substanelor xenobiotice, dar de diminuare a oxidrii microzomale prin inhibarea formrii NADPH. Condiiile de confort habitual: disconfortul influeneaz negativ activitatea citocromului P450, a hidroxilazelor (de exemplu, cea care metabolizeaz anilina) etc.. Eliminarea toxicelor din organism. Din organism se elimin produii metabolizai i fraciunile netransformate. Substanele toxice prezint, n general, electivitate pentru o cale de eliminare, dar se pot elimina i simultan pe mai multe ci. Nu se poate stabili o legtur ntre calea de ptrundere a toxicului i organul de eliminare (de exemplu, atropina administrat subcutanat poate fi gsit n stomac; mercurul aplicat pe piele se regsete n intestin). Viteza de eliminare a toxicelor depinde de calea de administrare, de proprietile fizico-chimice, de fixarea pe proteinele plasmatice i tisulare, de metabolizrile suferite, de calea de eliminare, de starea funcional a cii de administrare. Eliminarea reprezint ndeprtarea din snge, limf, lichid interstiial, celule, esuturi, a toxicilor i/sau a metaboliilor polari i ionizai. Calea, viteza, durata, gradul eliminrii variaz n funcie de o serie de factori fizico-chimici i biologici. Nocivitatea unui toxic este cu att mai mare cu ct eliminarea sa este mai lent. n general, eliminarea se realizeaz pe cile: renal, digestiv, pulmonar, transcutanat.

Calea digestiv prezint importan redus. Trebuie s se fac diferen ntre expulzarea prin vom i fecale a substanelor insolubile sau mai puin solubile, sau a celor care nu au fost absorbite i eliminarea substanelor care au ptruns n circulaia general. Eliminarea se poate face prin saliv (alcaloizi: chinina, stricnina; metale: mercurul, plumbul, bismutul; iodul), suc gastric (morfina, halogenii), bil (numai produii cu greutate molecular peste 400 kDa, srurile metalelor grele: plumb, mercur, crom, nichel; arsenul; alcaloizii). Calea renal este calea major pentru majoritatea toxicelor. Pe aceast cale se elimin substanele toxice cu greutate molecular mai mic de 150 kDa. Eliminarea se realizeaz prin filtrare glomerular, resorbie tubular sau secreie tubular. Filtrarea glomerular este un proces de ultrafiltrare pasiv a unei cantiti de ap i substane solvite, cu greutate molecular mic, polare, nelegate la proteine. Depinde de presiunea hidrostatic a sngelui i de presiunea proteinelor sanguine. Resorbia tubular reprezint rentoarcerea n tubii renali din circulaie, prin proces pasiv, a unor cantiti mari de ap, substane anorganice ionizate, unele substane neionizate liposolubile, acizi i baze slabe nedisociate. Secreia tubular const din transportul activ din capilarele sangvine n tubi mpotriva gradientului de concentraie. Prezint specificitate i se face cu consum de energie. Prin rinichi se elimin majoritatea srurilor metalice, iodurile, nitraii, nitriii, alcaloizii, pesticidele. Determinarea concentraiilor din urin are pentru unele toxice valoare de diagnostic. Calea pulmonar este cea mai rapid cale de eliminare. Eliminarea se face prin epiteliul alveolar, prin secreie bronhic sau nazal. Viteza de eliminare depinde de gradul de volatilitate. Pe aceast cale se elimin substanele gazoase (hidrogenul sulfurat, oxidul de carbon), metaboliii gazoi, substanele volatile (alcoolul, eterul, cloroformul, esenele vegetale). Pielea constituie o cale de eliminare pentru toxicele gazoase, volatile i pentru unele substane solide. Astfel, pe aceast cale se elimin alcaloizii, compuii de arsen, metalele grele, iodurile, bromurile, camforul. Glanda mamar reprezint o cale de eliminare pentru compui volatili (alcool, eter), baze organice (alcaloizi: cafein, morfin, chinin, antipirin), acizi (acid acetil salicilic, acid barbituric), pesticide, aflatoxine, ioni minerali (plumb, mercur, arsen, iod, brom), cloralhidrat.

URS TEORETIC Microorganismele din sol (Partea II)

Viteza descompunerii n sol

Pentru determinarea vitezei descompunerii compusului n ecosistemul din sol, el deobicei se introduce n sol peste un anumit interval de timp se cerceteaz probele de sol i se determin cantitatea remanent a substanei. Aceste cercetri pot fi situate n laborator, iar uneori n condiiile de cmp, mai apropiate la condiiile naturale i concomitent admit posibilitatea determinrii experimentale a temperaturii, coninutului de umeditate i ali parametri. Importana acestor cercetri depinde de precizia metodelor analitice i n special de eficacitatea extragerii substanei din probele din sol. ntr-un ir de lucrri s-a cercetat dependena vitezei de descompunere a substanei de concentraie i pe un ir de parametri s-a artat, c la micorarea concentraiei viteza descompunerii proporional crete. Dei pentru concentraia dat valorile de descompunere des corespund cineticii de ordinul I, s-a stabilit o lege a vitezei satisfctoare pentru un interval larg de concentraii des este complicat. Aceasta nu este uimitor, dac lum n consideraie complexitatea proceselor de descompunere, care decurge n sistemele din sol. O parte de substan poate s fie descompus de microbi, o alt parte - n urma reaciei, catalizate de nsi suprafaa solului i n sfrsit, reaciile de descompunere pot decurge i n soluii. Pentru fiecare din proces poate fi stabilit legea vitezei, ns datele experimintale generale corespund tuturor acestor procese. Pentru o cercetare mai detaliat a unor astfel de situaii este necesar de efectuat un lucru experimental considerabil. Asupra vitezei de descompunere a compuilor n sol sub aciunea populaiilor microorganismelor din sol sau n urma repartizrii substanei substanei dup profilul solului, ce determin concentraia real din sol, influeneaz un numr mare de variabile. Ali factori influeneaz nemijlocit asupra reaciilor descompunerii chimice. Un factor anumit poate aciona asupra unui sau asupra tuturor acestor procese. Aa o caracteristic a solului, ca coninutul n el a substanelor organice, poate influena asupra dezvoltrii populaiei de microbi i posed o influen hotrtoare la capacitatea substanelor de a se absorbi corespunztor de a se descompune n sol. Umeditatea din sol poate aciona cum asupra absorbiei, aa i asupra speciei de microorganisme. La determinare vitezei descompunerii chimice a substanei aste important i mrimea pH-ului solului. Asupra oricrui proces cinetic ntotdeauna influeneaz i temperatura. ns ridicarea temperaturii de obicei aduce la creterea vitezei procesului, ns pentru sistemele biologice se observ temperatura optim. Creterea sau micorarea temperaturii de la cea optim aduce la micorarea activitii sistemei. E greu de determinat, cum caracteristicile de absorbie a substanei n sol acioneaz asupra vitezei lui de descompunere. Substanele care slab se absorb i care pot s se difuzeze pe tot profilul solului snt prezente n locul dat n concentraie mai joas. Dac cercetm sistema cu mecanism heterogen de descompunere, de exemplu un sistem fermentativ, atunci viteza descompunerii substanei la micorarea concentraiei ei proporional crete. n cazul absorbiei puternice substane poate fi reinut de suprafaa solului aceasta poate aduce la creterea vitezei de descompunere sau, din potriv, a transfera substana ntr-o form inaccesibil pentru unele procese de descompunere, de exemplu la descompunerea cu participarea populaiilor microorganismelor din solo. Mediul nconjurtor poate fi aerob sau anaerob i acest fapt va fi hotrtor pentru decurgerea reaciei, deoarece caracteristicile lor se deosebesc radical n dependen de mediu. n tabelul de mai jos sunt propuse rezultatele unor cercetri experimentale de descompunere a unui ir de substane. Viteza descompunerii se exprim n timp, necesar pentru descompunerea a 50 % din substana iniial.

Viteza descompunerii unor pesticide n sol

Pesticide Fenoxiacizii

t1/2a, 24 ore

Modul cercetrii

2,4- D pH 4,3 pH 5,3 pH 6,5 pH 7,5 Ureele diuron diuron fenuron Compuii fosfororganici diazon pH 4,3 pH 5,5 pH 6,7 pH 8,1 Hidrocarburile clorurate DDT DDT DDT Triazine atrazin simazin

20 9,5 29 84

De laborator, concentralia iniial 80 mg/kg

530-780 212 69

n cmp De laborator >>

7,7 22 41 24

De laborator, concentraia iniial 20 mg/kg

3837 240 33

n cmp n cmp (n subtropice) De laborator (n condiii anaerobe)

130 130

Laborator n cmp

a- timpul de descompunere a 50 % de substan Este necesar de remarcat, c t1/2 spre deosebire de perioada de semidescompunere a izotopului radioactiv nu este o valoare constant pentru compusul dat. Cu toate acestea mrimea dat ne d anumite indicaii la capacitatea de descompunere a compuilor de diferite clase. De exemplu, casa hidrocarburilor clorurate este considerabil mai stabil n sol n comparaie cu compuii altor clase, dei n condiiile anaerobe repede se descompun chiar i DDT. Viteza de descompunere n subtropice este mai mare, dect n regiunile cu clima moderat. Pentru vitezele de descompunere a dou triazine propuse n tabel nu este o deosebire esenial. Deaceea orice concluzie despre viteza descompunerii lor n condiiile date sunt necesare s fie demondtrate experimental reconstruind situaia concret. Din datele despre aciunea pH-ului solului la descompunerea compusului fosfororganic i 2,4-D rezult, c primul compus este mai stabil la pH circa 5,3 i mai stabil la pH 7,5. Compuii fosfororganici, probabil, se descompun cu o vitez cu mult mai mare, dect compuii altor clase propui n tabel. Dac aceast generalizare i este adevrat, este necesar de reinut, c unii compui din clasa deat pot fi mai stabili dect cei propui n tabel. Prezana bifenililor policlorai n mediul extern din punct de vedere ecologic este foarte periculos, ceea ce se demonstreaz de rezultatele experimentale, propuse pe desenul de mai jos. Din datele despre viteza descompunerii unui ir de izomeri ai bifenililor policlorai rezult, c o influen hotrtoare asupra vitezei de descompunere n solul dat posed caracteristicile moleculare n solul dat posed caracteristicile moleculare ale substanelor.

Viteza descompunerii izomerilor bifenilpoliclorurai n sol (mg/kg)

Izomerii. Izomerii mai clorurai se descompun cu o vitez minim. Izomerii care coninea patru dau mai muli atomi de Cl practic nu se descompuneau timp de 15 luni. ns sunt i excepii, aa s-a observat c vitezele de descompunere a izomerilor cu doi atomi de Cl totui se deosebesc ntre ele. 4,4diclorbifenilul este tot aa de stabil la descompunere, ca i unii izameri cu trei atomi de Cl. Determinarea factorilor, ce influeneaz asupra descompunerii substanei n sol prezicerea vitezelor de descompunere prezint o problem complicat din cauza prezenei a unui numr mare de variabile. Problema i mai mult se complic cnd ncercm s extrapolm rezultatele dintr-o regiune n alta. Aa o extrapolare devine necesar atunci, cnd n condiiile de cmp dateler experimentale putem obine ntrun loc anumit , dar de a prezice comportarea posibil a aceleeai substane este necesar n alt parte, care se deosebete prin tipul solului, temperatura mediului, natura precipitaiilor atmosferice i ali factori meteorologici. Putem efectua unele analize aproximative, ns pentru majoritatea sistemelor reale nu este alt alternativ, dect extrapolarea cercetrilor experimentale n condiiile corespunztoare. Este evident, c e necesar de a efectua un numr mare de cercetri experimentale pentru a determina modul de descompunere a substanei n sistemele date pentru a poseda de posibiliti mai mari n ceea ce privete presupunerile ulterioare.

Aciunea toxicelor asupra organismului (toxicodinamica) Substanele toxice acioneaz n momentul ptrunderii, n timpul difuziunii, n timpul eliminrii sau la distan, prin intermediul sistemului nervos vegetativ. Dei aciunea toxicelor, n general, se repercuteaz asupra ntregului organism, toxicele prezint electivitate pentru anumite esuturi sau organe (de exemplu, toxice renale: mercurul; toxice hepatice: fosforul, tetraclorura de carbon; toxice nervoase: alcaloizii; toxice cardiace: glicosizii cardiotonici etc..

1. Aciunea toxicilor la nivel de esut, organ, aparat, sistem

1.1. Aciunea toxicelor asupra sistemului nervos

Sistemul nervos este afectat de orice toxic. Substanele toxice acioneaz asupra sistemului nervos central (stricnina, brucina etc.), asupra sistemului nervos periferic (curarizantele) sau asupra sistemului nervos vegetativ (pesticidele organofosforice, atropina etc.). Chiar n cadrul aceleiai componente a sistemului nervos exist predilecie pentru diferite etaje, de exemplu: amfetamina pentru scoara cerebral; pentetrazolul, lobelina pentru bulb; stricnina pentru neuronii Renshaw din mduv; curarizantele pentru filetele motorii ale terminaiunilor nervoase, iar cocaina pentru filetele senzitive.

De asemenea, simurile pot fi afectate selectiv (alcoolul metilic afecteaz acuitatea vizual, streptomicina acuitatea auditiv). Aciunea asupra sistemului nervos poate fi excitant (stricnina, brucina) sau deprimant (eterul, cloroformul, barbituricele).

1.2. Aciunea toxicelor asupra aparatului cardiovascular

Substanele toxice i exercit aciunea asupra sngelui, vaselor i cordului. Aciunea asupra sngelui se manifest fie prin scderea coagulabilitii (warfarina, oxalaii, hirudina), fie prin creterea coagulabilitii (veninul de viper). Elementele sangvine pot suferi o serie de modificri sub aciunea toxicelor. Eritrocitele pot suferi modificri morfologice (anizocitoz, poichilocitoz sau apariia de granulaii bazofile, n intoxicaia cu plumb), numerice (poliglobulie real oxidul de carbon, arsenul; hemoconcentraie fosgenul; hipoglobulie prin blocarea hematopoezei fosforul, plumbul; hipoglobulie prin hemoliz saponinele, veninurile; prin hemaglutinare ricinul, crotonul), modificri ale hemoglobinei (transformarea hemoglobinei n carboxihemoglobin oxidul de carbon; n methemoglobin nitrai, nitrii; n cianhemoglobin acidul cianhidric; n hematoporfirin benzenul, plumbul). Leucocitele sufer modificri numerice i anume, leucopenie n intoxicaiile cu benzen, iperit, albastru de toluidin, uretan; agranulocitoz n intoxicaiile cu acid arsenios, dinitrofenoli, piramidon, cloramfenicol. Aciunea asupra vaselor sanguine se manifest prin vasodilataie (nitraii) sau vaso-constricie (alcaloizi din secara cornut, butenolidul). Funcia cordului poate fi stimulat sau deprimat. Stopul cardiac este n sistol (intoxicaiile cu glicosizi) sau n diastol (intoxicaii cu nicotin).

1.3. Aciunea toxicelor asupra aparatului respirator

Toxicele acioneaz asupra aparatului respirator local, central sau reflex. Substanele iritante, prin excitarea terminaiunilor nervoase, determin reflexe motorii (strnut, tuse, bronhoconstricie), reflexe secretorii (hipersecreie, congestie, edeme), fenomene astmatiforme. Aciunea central se exercit asupra centrilor respiratori din bulb (aciune excitant sau deprimant). n marea majoritate a cazurilor, aciunea asupra aparatului respirator se manifest clinic prin asfixie. Se ntlnete asfixia prin lips de aer (edemul glotei, bronhospasm, astm bronhic veninurile, gazele iritante; contracia tetanic a muchilor respiratori stricnina; paralizia muchilor respiratori Conium maculatum), prin paralizia centrilor bulbari (atropina, Colchicum autumnale, barbituricele etc.). Indirect, unele toxice determin asfixie prin incapacitatea de fixare a oxigenului pe hemoglobin (nitraii, nitriii, oxidul de carbon, cloraii) prin anoxie tisular datorit inhibiiei sistemului de respiraie celular (cianurile).

1.4. Aciunea toxicelor asupra aparatului digestiv

Aparatul digestiv cu anexele sale se resimte atunci cnd toxicul a ptruns pe cale oral. Prin contactul direct se produc: catar, congestie, ulcere, necroze. Cu implicaii grave asupra organismului este aciunea unor toxice asupra ficatului, cu producerea degenerescenei granulare sau a cirozei (fosforul, plumbul, tetraclorura de carbon, aflatoxinele etc.).

1.5. Aciunea toxicelor asupra aparatului uro-genital

Cel mai afectat organ este rinichiul, deoarece este organ de eliminare i parial de metabolizare. Toxicele acioneaz difereniat asupra segmentelor nefronului: cantarida asupra glomerulului, cromul asupra poriunii anterioare, mercurul i uraniul asupra poriunii intermediare. Substanele toxice produc congestie renal (nitraii, nitriii), hemoragie (cantarida, terebentina), degenerescen (mercurul, ochratoxina, aflatoxinele). Aparatul genital este uneori afectat de substanele toxice, de exemplu, sulfochinoxalina determin degenerescena ovarului, toxina F2-zearalenona produce sindromul estrogenic la femele i degenerescena testiculelor la masculi, nitraii i nitriii provoac edem placentar.

1.6. Aciunea toxicelor asupra pielii i produciilor pielii

Toxicele provoac congestie prin eliberare de histamin, vezicaii datorit creterii permeabilitii locale. Clinic, aciunea asupra pielii i produciilor acesteia se manifest ca fotodermatoze (fenotiazina, unele plante toxice, rubratoxinele), alopecie (acetatul de taliu).

1.7. Aciunea toxicelor asupra fenomenului de termoreglare

Termoreglarea este rezultanta activitii centrilor termoreglatori cefalici i medulari, a musculaturii cardiace i scheletice i a intensitii depurrii cutanate. Perturbarea termoreglrii determin hipotermie (marea majoritate a toxicelor) sau hipertermie (prin travaliu muscular sau modificarea fosforilrii oxidative: toxicele convulsivante erbicidele dinitrofenolice).

2. Aciunea toxicelor asupra componentelor celulare i subcelulare 2.1. Aciunea toxicelor asupra nucleului

Unele toxice, precum benzidina, alfa-naftilamina, cromul, determin codificarea anormal a ADN-ului, fapt care conduce la formarea unui ARN mesager modificat i, respectiv, la sintez proteic anormal. Halogenii acioneaz att asupra sintezei ADN-ului, ct i inhibant asupra maturrii celulei. Neurolepticele produc leziuni nucleare ireversibile i modificri ale componentelor citoplasmatice.

2.2. Aciunea toxicelor asupra citoplasmei

Prin aciunea asupra componentelor citoplasmatice, toxicele produc perturbri ale proceselor metabolice. Metabolismul glucidic este frecvent afectat. Astfel, unele substane (albastrul de metilen, naftalina, nitrofuranul, fenacetina, sulfamidele) acioneaz asupra glucozo-6-fosfat-dehidrogenazei necesar oxidrii glucozo-6-fosfatului n prezena coenzimei NADP, aceasta fiind o cale pentru producerea anemiei hemolitice. O alt categorie de substane oxideaz sau reduc NADP-ul, orientnd metabolismul glucidic pe calea ciclului Krebs (cale catabolic, cu eliberare de energie, care determin creterea tonusului esuturilor contractile i creterea excitabilitii fibrelor nervoase i musculare) sau pe calea pentozelor (cale anabolic, calea sintezei, care duce la hipertermie, la somn). Orientarea depinde de raportul NADPH/NADP. Dac raportul este supraunitar, metabolizarea se face prin ciclul Krebs, iar dac este subunitar, pe calea pentozelor. n acest mod orienteaz metabolismul glucidic substanele cu aciune asupra neuronilor, nevrogliilor, musculaturii striate. Fenotiazinele, barbituricele, eterul etilic orienteaz metabolismul glucidic spre calea pentozelor. O serie de toxice majore acioneaz asupra hemoglobinei. Aciunea methemoglobinizant este caracteristic azotailor, azotiilor, sulfamidelor, hidrogenului sulfurat, unor derivai ai DDT-ului, derivailor nitrai i aminai ai fenolului. Aceste substane determin oxidarea fierului bivalent la fier trivalent, care este incapabil s fixeze oxigenul,producndu-se astfel anoxie. Oxidul de carbon transform hemoglobina n carboxihemoglobin. n hialoplasma celulelor musculare, toxicele pot suprima activitatea ATP-azic, mpiedicnd transformarea energiei chimice n energie mecanic (de exemplu, halotanul are aciune inotrop negativ).

2.3. Aciunea toxicelor asupra mitocondriilor

Toxicele din aceast categorie interfereaz cu procesele metabolice din ciclul Krebs i din lanul respirator, cu formarea ATP-ului, cu schimbarea de membran. Astfel, n ciclul Krebs mpiedic formarea acetilcoenzimei A din piruvat, deci formarea citratului, inhib oxidaiile NAD-dependente (de exemplu, fenotiazinele), inhib dehidrogenaza succinic i acil CoA dehidrogenaza (de exemplu, clorpromazina). Interferena n lanul respirator se realizeaz prin aciunea asupra enzimelor care particip la oxigenarea celular (de exemplu, cianurile, hidrogenul sulfurat, actinomicina, derivaii fenotiazinici inhib citocromii). Consecina perturbrii respiraiei mitocondriale este diferit n funcie de activitatea metabolic, anoxie dac metabolismul glucidic se realizeaz pe calea pentozelor sau acidoz, dac se

realizeaz pe calea ciclului Krebs. Formarea ATP-ului este perturbat de tetraclorura de carbon, glucozizii digitalici, tetracicline. n consecin, impieteaz asupra fosforilrii oxidative. De asemenea, prin reducerea sintezei de ATP, toxicele pot determina tulburri de sintez, modificri ale permeabilitii membranelor i, ca urmare, umflarea mitocondriei (de exemplu, diureticele mercuriale, barbituricele, cloroformul). Alte substane cu potenial toxic (barbituricele, halogenii, nitrofenolii), prin formarea de legturi bogate n energie, duc la blocarea funcional a mitocondriilor.

2.4. Aciunea toxicelor asupra lizozomilor

Aciunea asupra lizozomilor este drastic, ireversibil. Tulburrile determinate de aciunea toxicelor asupra lizozomilor sunt graduate, de la modificarea permeabilitii pentru ap i electrolii, pn la eliberarea de enzime hidrolitice cu degradare celular sau necroz celular. Eliberarea enzimelor litice se produce n condiii de anoxie i acidoz celular. Din aceast categorie de toxice fac parte toxicele hepatice (tetraclorura de carbon), sulfatul de streptomicin, 2-4 dinitrofenolul, digitalina.

2.5. Aciunea toxicelor asupra reticulului endoplasmatic

Aciunea asupra reticulului endoplasmatic se traduce prin vacuolizare (tetraciclinele), prin hipertrofie, care nu este patologic pn la un punct (fosforul, DDT-ul, fenobarbitalul, alcoolul etilic), prin aciune inhibant asupra unor enzime, precum glucuroniltransferaza (novobiecina), fapt ce duce la hepatit toxic cu eliberare de bilirubin.

2.6. Aciunea toxicelor asupra membranelor celulare i intra-celulare

Toxicele acioneaz asupra fosfolipidelor, gruprilor SH, care sunt de cea mai mare importan pentru structura membranelor celulare, rezultnd modificarea permeabilitii i, ca urmare, intoxicaia celulei. Datorit rolului lor n controlul schimburilor, n transportul activ i pasiv, aciunea malefic a toxicelor asupra membranelor este deosebit de grav.

3. Mecanisme de aciune a toxicelor 3.1. Mecanisme enzimatice primare

Numeroase mecanisme de aciune se bazeaz pe inhibiia unor sisteme enzimatice. Inhibiia se realizeaz prin: denaturarea apoproteinei, fixarea pe gruprile active ale apoenzimei, pe gruprile specifice sau nespecifice activitii enzimei, fixarea pe centrul activ al enzimei, fixarea n locul gruprii prostetice, inhibarea funciei de donor sau acceptor a coenzimei, imobilizarea ionilor activatori. Inhibiia, n funcie de cantitatea inhibitorului, se clasific n inhibiie reversibil, atunci cnd exist un echilibru ntre enzim i inhibitor, dup nlturarea inhibitorului inhibiia fiind oprit, sau ireversibil cnd inhibitorul este n exces i enzima nu i poate relua activitatea nici dup ndeprtarea inhibitorului. n funcie de specificitatea pentru activitatea enzimei, a gruprilor blocate, inhibiia poate fi specific (dac substana reacioneaz cu o grupare activ, esenial funciei enzimei) sau nespecific (dac substana precipit sau denatureaz proteinele sau se fixeaz pe grupri comune mai multor enzime, dar care nu constituie centri activi: NH2, OH, SH). Inhibiia nespecific. Inhibiia nespecific, prin denaturarea i blocarea enzimelor, este mecanismul de aciune a fenolului, o unor metale grele, a acizilor i bazelor tari. Prin blocarea unor grupri reactive (de exemplu SH) acioneaz substanele oxidante: ferocianur, arsenul, unele metale grele (mercurul, plumbul), agenii alchilai (iodoacetat, bromacetat). Inhibiia specific. Se realizeaz prin competiia inhibitorului cu substratul, pe care l mpiedic s se uneasc cu enzima, prin blocarea substratului, prin competiia cu gruparea prostetic, blocarea activatorilor, astfel: Competiia inhibitorului cu substratul: compuii organofosforici intr n competiie cu acetilcolina pentru centrul activ al colinesterazei i anume pentru centrul esterazic (electropozitiv), blocndu-l; ca urmare, acetilcolina nu este hidrolizat i se acumuleaz; carbamaii au efect competitiv asupra acetilcolinei tot prin competiie pentru centrul esterazic, dar complexul carbamatacetilcolin-esteraz este mai labil; curara i curarizantele de sintez acetilcolin competitive (dimetil tubocurarina) mpiedic transmisia neuromuscular prin deplasarea acetilcolineiamoniul cuaternar ocup centrul activ anionic (electronegativ) al enzimei. Blocarea substratului. Sistemele enzimatice funcioneaz numai dac substratul trece succesiv de la o enzim la alta, sustragerea dintr-o etap dereglnd lanul metabolic. De exemplu, acidul arsenios mpiedic formarea acidului difosfogliceric datorit combinrii sale cu fosfogliceroaldehida sub aciunea enzimei dehidrogenazei triozofosfailor; acidul fosfoarsenogliceric care rezult se descompune spontan, privnd de substratul lor enzimele urmtoare din lanul glicolizei. Competiia cu gruparea prostetic. De exemplu, ionul cian inhib enzimele a cror grupare prostetic au structur porfirinic, ca citocromoxidaza, enzim cu rol n lanul respirator, formnd ciancitocromoxidaza, ceea ce duce la hipoxie i anoxie tisular. Blocarea activatorilor. Pentru activare, enzimele necesit ioni metalici, care fac parte din structura enzimei (de exemplu, fierul din citocromoxidaz) sau care acioneaz ca simpli catalizatori (de exemplu, cobaltul pentru arginaz, manganul i zincul pentru fosfataza alcalin, fierul pentru peptidaz, manganul pentru carboxilaz, zincul pentru aldehidoxidaze etc.). Unele toxice blocheaz ionii prin cuplare sau chelatare (de exemplu, fluorul complexeaz magneziul necesar activitii

enolazei care este implicat n transformarea acidului 2-fosfopiruvic n acid 2-fosfoenol-piruvic; sulfura de carbon, ditiocarbamaii reacioneaz cu gruprile NH2 libere ale proteinelor i formeaz compui care dau complexe neionizabile cu ionii bivaleni necesari activitii unor enzime, precum manganul i zincul pentru fosfataza alcalin, cuprul pentru dehidrogenaze, zincul pentru hidroxilaze).