1.

Introducere
Uleiul de masline este de obicei mai scump dect alte uleiuri comestibile, ceea ce l face un candidat
pentru alterare cu alte mai ieftine uleiuri. Prin urmare, diferite metode au fost dezvoltate pentru a
determina falsificarile care sunt comise. Unele dintre aceste metode bazate pe analiza calitativ a
uleiului de msline cum ar fi culoarea, trigliceride i acizi grai.
Mai mult, analiza calitativ a acizilor grai sau trigliceridele pot fi inadecvate, deoarece cele mai multe
uleiuri vegetale conin aceleai acizi grai sau trigliceridele (Maria & Robert,1987).
Din contr, analiza cantitativ a acizilor grai, trigliceride sau steroli pot fi utile pentru detectarea de
alterare ulei de msline.
Analiza cantitativ HPLC a trigliceridelor este considerat o metod puternic pentru detectarea de
alterare de msline(El-Hamdy & Perkins, 1981; Maria & Robert, 1987). Determinarea
de steroli din ulei de msline sau alt ulei vegetal este, de obicei, realizat prin cromatografie gaz-lichid
(GLC). Aceast analiz ar putea fi utilizata pentru a detecta prezena uleiurilor vegetale rafinate
n ulei de msline prin determinarea stigmastadiene sau / i campesterol, deoarece primul nu apare n
msline i mai trziu nu ar trebui s fie mai mult de 4% din totalul steroli. Cu toate acestea, folosind
stigmastadiene ca un indicator pentru falsificare uleiului de msline este de ncredere numai atunci cnd
concentraia lor este ntre 0.01 i 4 mg / kg (Regulamentul CE, 1991). Mai mult dect att, campesterolul
coninut n unele uleiuri de msline depete 4% stabilit prin regulamentul CE (Salvador, Aranda, si
Fregapane, 1998). Aceste dou fapte limiteaza utilizarea acestor dou steroli n detectarea prezenei
uleiurilor vegetale rafinate n uleiul de msline. Mai mult dect att, determinarea din aceste dou
steroli se realizeaz prin, izolarea de steroli prin TLC, separare de stigmastadiene de coloan cu alumin
i determinarea acestor derivai de sterol prin gaz cromatografie, folosind non-polar coloane capilare.
Cu toate acestea, izolarea sterolilor prin TLC i coloan de alumin sunt criticate pentru consumul de
timp i laborioas de lucru (Bohacenko & KOPICOV, 2001).
Utilizarea termo coloanei polar stabil este adecvat s se separe steroli, steroli metil i alcool ale
unsaponifiables sililai de uleiuri vegetale, fr nici o purificare suplimentar . Mai mult dect att,
aceast coloan a permis separarea componentelor care sunt considerate ca amprent de matrice
naturale.
Prin urmare, a fost folosit pentru a detecta prezena unor cantiti mici de coaj n ulei de msline,
folosind erthrodyol ca o amprent digital (Frega,Bocci, & Lercker, 1993).
Coninutul maxim de campesterol n ulei de msline, stabilite de Regulamentul Comisiei (CEE) nr
22568/1991 trebuie s fie de 64%, n timp ce cea a stigmasterolului trebuie s fie mai mic dect cea a
campesterol.
Pe de alt parte, nivelul acestor steroli n uleiuri vegetale depete cu mai mult de doua ori n ulei de
msline. Prin urmare, aceast proprietate a fost utilizat n acest studiu nca o nou metod pentru
determinarea concentraiei minime detectabile de alterare ulei de msline cu soia, porumb, bumbac i
uleiuri de floarea-soarelui de analiza GLC folosind termo stabil polar coloan.

2. Materiale i metode
2.1. Uleiuri vegetale
Probe de ulei de Floarea-soarelui, porumb, soia i semine de bumbac pure au fost achiziionate de la
pieele locale, verificanduse autenticitatea lor i utilizate ca adulterant. Doisprezece probe de ulei de
msline extravirgin i de uleiuri de msline virgine au fost obinute de la diferite piete de ulei de msline
n Iordania.
Amestecuri de ulei de msline i aceste uleiuri vegetale la nivel de 5%,10%, i 20% (g / g) s-au preparat.

2.2. Analiza Steroli

Cinci grame de fiecare din ulei de msline, uleiuri vegetale i pregtitele lor
amestecuri, au fost saponificate, i extrase conform metodelor european oficiale de analiz descris n
Regulamentele CEE 2568/1991. O soluie de nesaponificabile n hexan (10% greutate / volum) a fost
preparat. O parte alicot de 50 l din aceast soluie a fost evaporat i reziduul a fost silanizat cu un
amestec de piridin-hexamethyldilizane-trimethylchlorosilazane 9: 3: 1 (v / v / v) la 50 l/ mg de u
nesaponificabile (Gutierrez, Varona, i Albi, 2000). Silanizate nesaponificabile au fost analizate prin
cromatografie de gaz folosind Shimadzu cromatograf gaz (model 2010 Shimadzu Inc, Koyoto, Japonia)
furnizat cu split-splitless de port injector, ionizare cu flacr detector (FID) i integrator digital (Shimdzu
CR 7A). Un RTX-65 TG (Restek, Statele Unite ale Americii) coloan capilar (60 m 0,25 mm i.d; pelicul
Grosimea fost de 0,25 m i ingredientele active au fost cu 35% difenil, 65% dimetil polisiloxan) a fost
folosit.Gazul purttor a fost heliu la 1 ml / flux de coloan min i 1: 80 raport Split. Injectorarele i
detectoarele de temperaturile erau la 320 C. Temperatura Cuptor fost programat 200-300 C cu o rat
de 3 C / min.
Identificarea Peak din campesterol, sitgmasterol i b- sitosterol a fost efectuat de timpii de retenie ai
standardelor lor prevzute de Sigma Chemical Co (St. Luis, MO). Identificarea Peak din D5-avenasterol a
fost efectuat prin compararea timpului de retenie cu cele raportate n literatur (Frega, Bocci, si
Lercker, 1992).
3. Rezultate i discuii
Este bine stabilit faptul c campesterol i stigmasterol coninutul n instalaii uleiuri sunt mult mai mari
dect coninutul lor n ulei de msline.
De exemplu, procentul campesterol din seminele de bumbac, floarea soarelui,uleiuri de soia i porumb
sunt 6.4 - 14.15%, 5-13%, 15.8-24.2% i 16-24%, iar cea a stigmasterolului sunt 2.1-6.8%, 6-13%, 14.919.1% i 4.3-8.0%, respectiv (CAC, 2005). Pe de alt parte , procentul campesterol n steroli de ulei de
msline nu trebuie s depeasc 4%, iar procentul stigmasterol trebuie s fie mai mic dect cea a
campestrol (Regulamentul CE 2568, 1991). Prin urmare, aceste dou steroli ar putea fi utilizate ca
indicatori pentru a detecta falsificarea de ulei de msline cu uleiuri vegetale.
Figura. 1 prezint urmele GLC ale fraciunilor nesaponificabile de ulei de msline, porumb, soia, floarea
soarelui i bumbac . Urmele arat c campesterol, sitgmasterol, B sitosterol i D5-avenasterol au fost
bine separate. Aceste rezultate au fost de acord cu rezultatele altor muncitorii care au raportat c
aceast coloan polar este adecvat pentru fracionarea sterolilor, steroli i alcooli metilici ai suspensiei
(Frega colab., 1992).
Reproductibilitatea, definit ca deviaia standard relativ de timpul de retenie pentru 15 duplicate,
pentru campesterol, stigmasterol, b-sitosterol i D5-avenasterol fost mai mic de 2% .
Este bine cunoscut faptul c 4 steroli sus menionate reprezint mai mult de 95% din totalul sterolilor
din uleiurile de msline (Regulamentul CE, 1991), i n consecin ar putea fi reprezenta sterol total n
ulei de msline. Procentul din fiecare sterol a fost calculat n probele analizate ulei de msline iar cei
amestecat cu alte uleiuri vegetale prin mprirea domeniile lor de vrf de suprafeele totale de vrf ale
acestor 4 steroli i rezultatele sunt prezentate n tabelele 1 i 2. Este evident c studiati 4 steroli sunt
prezente n concentraii acceptabile stabilite prin Regulamentul CE (1991). Procentul de Campestrol a
fost comparabil cu cele ale altor date publicate, n timp ce cea a stigmasterol a fost uor mai mare
(Boggia, Evangelisti, Ross, Salvadeor, & Zunin, 2005; Bohacenko i KOPICOV, 2001; Salvador
Aranda, Gomez-Alonso, si Fregapane, 2000).
Pentru a evalua capacitatea de a detecta alterare ulei de msline cu uleiuri de porumb, floarea soarelui,
soia si seminte de bumbac amestecurile coninnd 5%, 10% i 20% din aceste uleiuri n ulei de msline
(proba nr 6, Tabelul1) au fost preparate i analizate pentru coninutul lor de steroli.

Rezultate n tabelul 3 arat c adugarea de 5-20% uleiuri vegetale la ulei de msline (proba nr 6T din
Tabelul 1) a determinat o cretere semnificativ n procente campesterol a probei mixte ulei de msline.
O astfel de cretere a variat de la 160% n cazul adugrii de 5% din floarea-soarelui ulei la 470% n cazul
adugrii de ulei de porumb 20%. Creterea stigmasterol ca urmare a procesului de amestecare a variat
de la 200% n cazul adugarea de 5% ulei de semine de bumbac la 500% n cazul adugrii de 20%
ulei de soia.
Procentul stigmasterol din steroli de ulei de msline trebuie s fie mai dect limita maxim acceptabil
pentru campesterol (4% din total steroli). n deosebire de campesterol, stigmasterol procent al
amestecuri nu a depit aceast limit. Prin urmare, campesterol putea fi utilizat ca indicator, dar nu
stigmasterol pentru a detecta falsificarea de ulei de msline cu aceste uleiuri vegetale la niveluri de
peste 5%.
Aceste rezultate sunt de acord cu cele raportate de Bohacenko i KOPICOV (2001), care a constatat c
coninutul campesterol i D7-stigamstenol ar putea fi folosite pentru a detecta falsificarea de ulei de
msline cu unele uleiuri vegetale la niveluri mici de 5%. Cu toate acestea, campesterol procent a unor
uleiuri de msline este mai mare de 4% stabilit prin Regulamentul CE (1991) aa cum sa observat n cazul
uleiului de msline Cornicabra (Salvador i colab., 1998). Acest fapt poate limita utilizarea procentului
campesterol pentru a detecta falsificarea ulei de msline cu uleiuri vegetale. Prin urmare, ambele
campesterol i stigmasterol procente au fost utilizate n acest studiu pentru a detecta alterare a de
msline cu aceste uleiuri prin msurarea Factorul autenticitate (Af), dup cum urmeaz.