RECOLTAREA I PRELUCRAREA PRODUSELOR PATOLOGICE

-Recoltarea corect a produsului patologic trebuie organizat i controlat de medic.

-Produsul patologic este o prob n care se presupune existena unor microorganisme.
-Produse normale care prezint modificri n caz de boal sunt: sngele, materiile
fecale, lichidul cefalo-rahidian (l.c.r.)
-Produse care apar numai n infecii sunt: puroi, sput, exudat peritoneal, exudat
articular, etc.
Prelevrile se obin de la subieci: bolnavi, convalesceni, purttori sntoi, cadavre,
din alimente, ap, sol, aer.
Reguli generale de recoltare a produselor patologice:
1-n raport cu natura infeciei i a produsului patologic recoltat, pentru fiecare boal infecioas este
important s se tie: de unde, cnd, cum, ct produs trebuie recoltat.
2-prelevarea se efectueaz steril, aplicnd metodele de asepsie i antisepsie.
3-produsul trebuie etichetat corespunztor i este nsoit de un bilet pe care se noteaz: numele i
prenumele pacientului, vrsta, diagnosticul, data, locul recoltrii, natura produsului, examinri cerute,
tratament prealabil cu chimioterapice, numele persoanei care a recoltat.
4-produsul se va ambala corespunztor, n recipiente bine nchise, uneori chiar cu dop de cauciuc sau
de plut, uneori fiind protejate n cutii de lemn sau de metal, pentru a preveni deteriorarea lor sau
accidente cu contaminarea omului i a mediului. n cursul transportului spre laborator se asigur
condiii de temperatur corespunztoare (37C pentru neisserii patogene, sau 4C, n lzi izoterme sau
recipiente speciale pentru virusuri).
5-nsmnarea se face ct mai repede dup recoltare, dac este posibil chiar la patul bolnavului (pentru
gonococ, meningococ).

A -Recoltarea produselor patologice din tractul respirator:

1-Secreia faringian se recolteaz cu un tampon faringian steril, care poate fi format
fie dintr-o tij (metalic sau de lemn sau de plastic) cu un capt nvelit n vat i
introdus ntr-o eprubet steril de sticl sau de plastic (se prefer tampoanele
faringiene din plastic, sterile, de unic utilizare i cu mediu de transport, de exemplu:
mediul Stuart, mediul Amies);
-Recoltarea se face dimineaa nainte de mncare, nainte de splarea dinilor i nu
este precedat de gargarisme cu antiseptice. Pacientul deschide larg gura i se
recolteaz cu tamponul secreii de pe peretele posterior al faringelui i amigdale.
-Secreia faringian se poate recolta n faringite, angine, scarlatin, difterie, infecii
respiratorii virale.
-Secreia faringian se nsmneaz pe medii de cultur (de exemplu, pe mediul agar
snge sau geloz snge pe care se pot evidenia streptococii beta-hemolitici).

Tampon faringian steril cu mediul Stuart

Tampoane faringiene sterile cu i fr mediul Amies

Tampon cu secreie faringian recoltat pe mediul Amies

Recoltarea secreiei faringiene

Secreie faringian nsmnat pe

agar snge (geloz snge)

Secreii faringiene nsmnate pe

agar snge (geloz snge)

2-Secreia nazal se recolteaz folosind cte un tampon pentru fiecare fos nazal,
n rinite, sinuzite.

Tampoane sterile

Tampoane cu secreii nazale

3-Sputa se recolteaz dimineaa cnd bolnavul i face toaleta broniilor, nainte de

mncare, dup cltirea gurii cu ser fiziologic steril; -este important s se recolteze
secreia din bronii i nu saliva. Sputa se poate recolta n: bronit, bronhopneumonie,
pneumonie, tuberculoz pulmonar.

Recipient steril de unic utilizare

Recipient cu sput

4-Secreiile traheo-bronice se pot recolta prin cateter (aspiratele traheo-bronice);

microorganismele se evideniaz: n frotiu, prin nsmnare pe medii de cultur.
5-Uneori este necesar s se recolteze secreia conjunctival (de exemplu, n
conjunctivite), secreia otic (n otite) folosind tampoane sterile.

Tampon cu secreii conjunctivale

(ochiul drept i ochiul stng)

Tampon cu secreie otic

BRecoltarea produselor patologice de la nivelul tractului digestiv:

1-Lichidul de vrstur: se recolteaz n gastro-enterite acute, toxiinfecii
alimentare, etc.

2-Materiile fecale se introduc ntr-un coprorecoltor steril de unic utilizare, prevzut

cu un capac de care este ataat o spatul. Se recolteaz 2-3 g de materii fecale.
-din materiile fecale se pot efectua examinri bacteriologice, virusologice,
parazitologice, biochimice.
-coprocultura se face n scopul cultivrii bacteriilor (pe medii de cultur), de exemplu,
n salmoneloze, dizenterie, holer, gastro-enterite, enteroviroze etc.
-materiile fecale se pot recolta: din scaun de emisie spontan sau cu tampon rectal de
la copiii mici sau cu sonda Nelaton direct din rect sau din scaun dup purgaie salin.

Coprorecoltor steril cu mediul Cary Blair i

coprorecoltor cu materii fecale recoltate pe
mediul Carry Blair - pentru coprocultur

Coprorecoltor steril fr mediul Cary Blair i

coprorecoltor cu materii fecale (fr mediul
Carry Blair) - pentru examen coproparazitologic

Coproculturi pe mediul Mac Conkey (colonii lactoz pozitive: culoare roie)

Coprocultur pe mediul Hektoen:

colonii lactoz pozitive (culoare portocalie: E. coli) i
colonii negre (Salmonella enterica serovar. enteritidis)

Coprocultur pe mediul Levine (EMB-Agar):

colonii lactoz pozitive i lactoz negative, colonii negre

Coprocultur pe mediul Shigella Salmonella:

colonii negre (Salmonella enterica serovar. enteritidis)
i colonii lactoz pozitive - roii

3-Bila: se recolteaz dimineaa; gura se cltete cu ser fiziologic steril i apoi se

recolteaz bila cu o sond special.
Din bil se pot face: examinare bacteriologic (bilicultur), examinri parazitologice,
biochimice etc.
Bilicultura se recomand n colecistopatii sau pentru detectarea purttorilor de
Salmonella.
C Recoltarea produselor patologice de la nivelul tractului uro-genital:
1-Urina se recolteaz prin metoda jetului ntrerupt (din jetul mijlociu): dup toaleta
organelor genitale externe, se elimin prima poriune de urin, miciunea se ntrerupe
i apoi se recolteaz urina ntr-un recipient steril. Recoltarea prin sond se folosete
numai n cazuri speciale; puncia vezicii urinare se face numai n blocul vezical.
Urina se prelucreaz n laborator pn la 1 or dup recoltare.
Urocultura (nsmnarea urinei pe medii de cultur pentru izolarea bacteriilor) se
practic n infeciile cilor urinare (cistite, cistopielite, dar i n salmoneloze,
leptospiroze, tubrculoz etc.), cnd se face o urocultur cantitativ (se determin
numrul de bacterii per mililitru de urin, dup ce urina se nsmneaz pe medii de
cultur i se dezvolt colonii bacteriene). Prezena a 100 000 UFC / ml urin este
semnificativ pentru diagnosticul de infecie urinar.

Recipiente cu urin

test pentru
urocultur

Test pentru efectuarea sumarului de urin: stripuri URISTIK

(stripul se introduce n urin i modificarea culorilor de pe strip se poate aprecia calitativ cu ochiul liber
prin comparare cu un etalon, ns de obicei se exprim cantitativ prin citirea valorilor la un aparat)

2-Secreia uretral:
-se recolteaz secreia uretral de la brbai pentru diagnosticul de gonoree i a altor
uretrite.
Cu ansa bacteriologic sau cu un tampon subire steril este prelevat pictura de
secreie ce apare la nivelul meatului urinar;
-produsul patologic se nsmneaz pe medii de cultur; se face frotiu.

Tampon cu secreie uretral

Recipient cu sperm

3-Secreia vaginal, secreia de la nivelul colului uterin (cervix): se recolteaz pentru

diagnosticul infeciilor genitale la femei (preparat nativ, frotiu, nsmnare pe medii
de cultur).

Tampoane sterile fr mediul Amies i cu mediul Amies pentru recoltarea de secreii

vaginale i cervicale

Tampon cu secreie vaginal recoltat pe mediul Amies

Preparat nativ efectuat din secreie vaginal:

filamente miceliene, levuri, leucocite, celule epiteliale

D. Recoltarea sngelui:
Sngele este recoltat prin puncie venoas: din vena plicii cotului.
Sngele recoltat se utilizeaz pentru a efectua:
- examen bacteriologic: hemocultura. Hemocultura const n cultivarea bacteriilor din
snge n condiii de aerobioz i anaerobioz; se efectueaz n septicemii (sngele se
recolteaz n perioada de ascensiune termic sau frisoane cnd microorganismele se
gsesc n numr mare n snge), n salmoneloze, bruceloz, tuberculoz, endocardite
bacteriene, etc.
- examen serologic (testarea anticorpilor)
- examinri virusologice, parazitologice
- examinri hematologice i biochimice.
Se aplic garoul deasupra plicii cotului, pacientul nchide i strnge pumnul, dup
care se palpeaz vena cu degetul. Tegumentul trebuie dezinfectat local prin aplicarea
cu un tampon cu alcool iodat i apoi cea mai mare parte a iodului este ndeprtat prin
friciune cu un tampon steril mbibat n alcool etilic de 70; apoi vena nu se mai
palpeaz i se face puncia venoas. Acul este introdus perpendicular n ven i se
simte un spaiu gol apoi acul este orientat oblic (n sus, de-a lungul venei) i se
preleveaz steril 8-10 ml snge n sering sau n vacuete al cror capac de cauciuc este
strbtut de ac. Se ndeprteaz garoul i pacientul desface pumnul nainte de
scoaterea acului din ven la terminarea recoltrii.

10

Vacuete pentru recoltarea sngelui

Holder cu ac steril unde se ataeaz

vacuetele

ETAPELE RECOLTRII SNGELUI N VACUETE

1. garou aplicat deasupra
plicii cotului

2. palparea venei plicii cotului

(pumnul este nchis i strns)

4. acul steril fixat n holder

i introdus n vena plicii cotului

5. introducerea vacuetei
i recoltarea sngelui

11

3. dezinfecia zonei plicii

cotului

6, scoaterea garoului
(pumnul se desface)

7. scoaterea acului i
dezinfecia zonei dup recoltare

- Recoltarea sngelui pentru hemocultur

Pentru efectuarea hemoculturii, sngele se introduce n recipiente cu medii
speciale, n aerobioz i anaerobioz
Recoltarea sngelui se poate efectua:
1 - n sistem deschis: se recolteaz sngele cu seringa de la pacient i apoi se
introduce n recipiente cu medii speciale i se incubeaz la 37C;
2 - n sistem nchis: se utilizeaz un set de transfer de unic utilizare prin care,
sngele din vena plicii cotului se transfer direct n recipiente cu medii speciale i se
incubeaz la 37C.

Recoltarea sngelui n sistem nchis cu un set de transfer de unic utilizare

12

Metode de efectuare a hemoculturii:

1) Metoda clasic: se introduce sngele n medii de cultur lichide din recipiente sterile,
cu dop nurubat. Proporia dintre cantitate de snge i cantitatea de mediu este de 10%.
Metoda Castaneda (cu mediu bifazic) se utilizeaz pentru Brucella; incubare n
atmosfer de CO2 .
2) Metoda automat pe aparatul BacT ALERT
Se utilizeaz recipiente cu medii speciale pentru subiecii aduli, precum i pentru uz
pediatric, n care se introduce sngele. Dac subiecii (copii, aduli) au fost tratai n
prealabil cu chimioterapice, mediile conin carbon pentru neutralizarea
chimioterapicului. Recipientele se introduc n aparatul BacT ALERT.

Flacoanele de cultur BacT/alert conin medii de cultur lichide care recupereaz

majoritatea speciilor bacteriene (bacterii obinuite i pretenioase, fungi, mucegaiuri).
Fiecare flacon conine un senzirLES (senzor emulsie lichid) ce detecteaz producerea
de CO2 , ca indicator al creterii bacteriene. Citirea se face la fiecare 10 minute, prin
reflectometrie cu afiaj pe monitor, semnal luminos sau sonor.
Microorganismele metabolizeaz substratele din mediul de cultur, determin
producerea de CO2 i culoarea captorului sensibil la gaz (CO2) vireaz de la albastruverde la galben.
Sistemele BacT/ALERT permit detectarea de microorganisme aerobe i
microaerofile (BacT/ALERT SA) sau anaerobe (Bact/ALERT SN) n snge la
subiecii suspeci de bacteriemie sau fungemie, netratai cu chimioterapice.
Sistemele BacT/ALERT permit detectarea de microorganisme aerobe, microaerofile
(BacT/ALERT FA) sau anaerobe (Bact/ALERT FN) n snge la subiecii suspeci
de bacteriemie sau fungemie, tratai cu chimioterapice.
Sistemul BacT/ALERT PF permite detectarea de microorganisme aerobe,
microaerofile i anaerobe din snge la copii.
Toate flacoanele conin medii de cultur complexe. Flacoanele care detecteaz
microorganismele anaerobe (BacT/ALERT SN i BacT/ALERT FN) i
BacT/ALERT PF conin Carbon activ n cantiti diferite.
Proporia de snge recoltat / mediu de cultur este de 10% la aduli. De la copii se
recolteaz 2-5 ml de snge.
n sistem automat pozitivarea hemoculturii este semnalat de aparat.

13

Hemocultur: snge recoltat de la subieci aduli (netratai cu chimioterapice) n recipiente cu

medii complexe pentru aerobioz (BacT/ALERT SA) i anaerobioz (BacT/ALERT
metoda automat pe aparatul BacT ALERT

SN)

Hemocultur: snge recoltat de la subieci aduli (tratai cu chimioterapice - BacT/ALERT FA i

BacT/ALERT FN - n stnga) i de la copii (tratai sau netratai cu chimioterapice - BacT/ALERT

PF - n dreapta) n recipiente cu medii complexe pentru aerobioz i anaerobioz metoda automat
pe aparatul BacT ALERT

14

2) Metoda semiautomat: SIGNAL Blood Culture System

Dup pozitivarea hemoculturii, sngele se nsmneaz din flaconul pentru aerobi pe

medii de cultur pentru bacterii aerobe, microaerofile i pe medii de cultur pentru
fungi; din flaconul de anaerobioz se nsmneaz pe medii de cultur pentru
anaerobi, cu atmosfer fr oxigen.
Din flaconul de hemocultur se nsmneaz - prin picurare - pe medii de cultur,
folosind ace de transfer sterile.

15

Ac de transfer

G. Secreia purulent:
-se recolteaz din colecii nchise prin puncie, folosind un ac gros montat la sering;
-se recolteaz din plag dup curarea acesteia cu soluie salin fiziologic steril,
apoi se elimin prima cantitate de secreie care iese i se recolteaz urmtoarea
folosind un tampon steril subire sau ansa bacteriologic.
-se nsmneaz pe medii de cultur n aerobioz, dar i n anaerobioz; se face
frotiu.

Tampon steril cu
mediul Amies

Secreie purulent din abces

recoltat pe mediul Amies

16

Secreie purulent din abces nsmnat pe mediile:

-agar snge (geloz snge): colonii de tip S, opace, cu pigment auriu i hemoliz complet;
-mediul Chapman: colonii de tip S, manitol pozitive (de culoare galben) i cu pigment auriu
(Staphylococcus aureus).

F. Exudate din seroase (lichid pleural, peritoneal, sinovial)

-se recolteaz de obicei pe anticoagulant (citrat), prin puncie dup asepsie local.
-se nsmneaz pe medii de cultur n aerobioz, dar i n anaerobioz; se face
examen citologic, frotiu.
Lichid sinovial purulent
recoltat prin puncie cu seringa
pentru examinare n aerobioz

Lichid sinovial nsmnat n aerobioz

pe mediul Chapman (colonii de tip S, opace, mari,
manitol pozitive, cu pigment auriu: Staphylococcus aureus)

17

Lichid sinovial purulent recoltat pentru examinare n anaerobioz

E. Lichidul cefalo-rahidian (l.c.r.)

-aspect clar, incolor.
-se recolteaz de ctre medicul clinician, n meningite (aspect: opalescent sau
purulent, uneori sanguinolent), prin puncie lombar (la nivelul L3-L4) sau
suboccipital.
-l.c.r. se transport ct mai repede la laborator;
-se realizeaz un examen citologic, frotiuri, se nsmneaz pe medii de cultur;
-dac se suspecteaz meningita cu meningococ, l.c.r. se nsmneaz chiar la patul
bolnavului pe medii meninute anterior la 37C; se transport repede la laborator, la
temperatura de 37C;
-l.c.r. este un bun mediu de cultur i se poate incuba ca atare, la termostat.
H. Fragmente de esuturi
-se recolteaz prin puncie sau biopsie; se examineaz bacteriologic (frotiu i
nsmnare pe medii: adenocultur, medulocultur), dar i histologic.
I. Produse de necropsie (fragmente de organe, snge, urin, fragment de intestin pentru
recoltarea coninutului intestinal, lichide din caviti)
-recoltarea se face n recipiente sterile, aplicnd metodele de asepsie i antisepsie.

18