Mitocondria

Definiie
Structur, ultrastructur
Funciile mitocondriei

 Mitocondria este:
un organit celular
delimitat de un sistem de dou membrane
avnd ca funcie de baz producerea de ATP.

Carl Benda (1903) - mitos: fir, a; khondrion: granul.

 Microscopia optic
evideniat prima dat de Richard Altmann (1890);
coloraii uzuale:

Hematoxilin feric Regaud

granule negre

Verde Janus B colorant

vital

 Microscopie n fluorescen

Mitocondrii marcate cu MitoTracker Green

Ultrastructura mitocondriei
Spaiu
intermembranar
Matrix

Membran
mitocondrial
Criste
extern i
intern

Ultrastructura mitocondriei

Distribuie:
Numr i form foarte
variabile n aceeai celul,
datorit plasticitii
Volum relativ:
5% - uzual
20% - hepatocite
30% - miocardocite

O mitocondrie marcat fluorescent

(sgeat) se deplaseaz ntr-o celul
vie pe o distan de 6,6 m n 33 sec.
(B Trinczek et al., J Cell Sci 112:2355, 1999)

Metodologia studierii mitocondriei

Funciile mitocondriei

Postulatele teoriei chemiosmotoice (P. Mitchell, 1961)

Premiul Nobel n chimie, 1978

Funciile mitocondriei

Postulatele teoriei chemiosmotice (P. Mitchell, 1961)

1 Lanul respirator este transportor de protoni

2 ATP sintaza produce ATP prin disiparea gradientului
protonic

Teoria chemiosmotic

3 Membrana mitocondrial intern conine

transportorii ce asigur traficul metaboliilor
4 Pe ci nespecifice, membrana mitocondrial intern
este practic impermeabil la protoni i, n general, la
ioni

legturi fosfoanhidrice
Adenin

Riboz

Energie

Energie

Adenin

fosfat
anorganic

Riboz

De unde provine energia necesar

funcionrii ATP-sintazei ?
Spaiu intermembranar

Sinteza ATP

Hidroliz ATP

ATP sintaza (F0F1 ATP-aza)

- 500 kD
- Structur de b de tob (trunchi,
gt i cap)
- Cel puin 9 proteine (2 autonome)
- Partea transmembranar (F0): canal
protonic
- Gtul i capul (3 + 3 + 1 +
+ 1 + 1): ATP sintaza
-Funcionarea presupune rotirea
subunitii F1 ce cuprinde 3 situsuri
catalitice
- Fiecare din situsurile catalitice trece prin
trei conformaii succesive: deschis, lax,
strns

F0 ATPaza

H Noji et al., Nature 386:299, 1997

Cum este realizat gradientul protonic?

Lanul transportor de electroni (respirator)

Lanul transportor de electroni (respirator)

I. Complexul NADH
dehidrogenazei
-

III. Complexul
citocromilor b-c1

- 500 kD
- Cel puin 8 proteine
(una autonom)
- Funcioneaz ca dimer (2x500 kD)
- 3 centre hemice; 1 centru fier-sulf
- Transfer e- de la CoQ la citocrom c

800 kD
22 proteine
(7 autonome)
1 centru flavinic
Cel putin 5 centre
fier-sulf
Preia e- de la NADH
i i transfer
ubiquinonei (CoQ)

IV. Complexul citocrom oxidazei

(citocromilor a-a3)
-

300 kD
9 proteine (3 autonome)
Funcioneaz ca dimer (2x300 kD)
2 citocromi, 2 centre cu Cu2+
Transfer e- de la citocrom c la oxigen,
cu producerea de ap

Metan

O
X

Metanol

I
D
A

Formaldehid

R
E
Acid formic

Dioxid de carbon

Adaptare dup Molecular Biology of the Cell 4th Ed.,

Bruce Alberts, Garland Science, 2002

De unde provine
energia necesar
meninerii
gradientului de
protoni ?

ARDERE

Eliberare
exploziv
a energiei

OXIDARE BIOLOGIC

Eliberare
treptat a
energiei

Adaptare dup Molecular Biology of the Cell 4th Ed., Bruce Alberts, Garland Science, 2002

Citocromul c

dehidrogenaz

Complexul
b-c1
citocrom
oxidaz

Direcia fluxului de electroni

Adaptare dup Molecular Biology of the Cell 4th Ed., Bruce Alberts, Garland Science, 2002

Potenialul redox (mV)

Energia liber (kcal/mol)

ubiquinon

PAUZ

Molecule transportoare de electroni

forma oxidat

forma redus

nicotinamid

Nicotinamid
Adenin
Dinucleotid
(Phosphate)

Riboz

Riboz

Adenin

Adenin

Riboz

Adaptare dup Molecular Biology of the Cell 4th Ed.,

Bruce Alberts, Garland Science, 2002

Riboz

Fosfat lips din

NAD

Molecule transportoare de electroni

forma oxidat

Flavoproteine: FAD, FMN

Citocromi

Ubiquinona

forma redus

Cuplarea lanului respirator de

fosforilare
Cuplarea chemiosmotic (cuplarea lanului
respirator cu fosforilarea din ATP sintaz)
este esenial pentru producerea ATP;

De unde provin
electronii de
nalt energie ai
NADH + H+i
FADH2?

Ciclul Krebs

Cine furnizeaz combustibilul ciclului Krebs?

Adaptare dup Molecular Biology of the Cell 4th Ed., Bruce Alberts, Garland Science, 2002

Decarboxilarea piruvatului
Complexul piruvat-dehidrogenaz
- localizat n matricea mitocondrial
- 24 subuniti E1, 24 E2 i 12 E3
- legtura dinte gloicoliza anaerob
i fosforilarea oxidativ

Glicoliza
anaerob

-se desfoar n citosol

- profit net: 2 mol. ATP
- rezult 2 mol. piruvat

 oxidarea acizilor grai

- se desfoar n matricea mitocondrial

- acizii grai intr sub form de Acil-CoA
- rezult Acetil-CoA

Decuplarea lanului respirator de

fosforilare
Cuplarea chemiosmotic (cuplarea lanului
respirator cu fosforilarea din ATP sintaz)
este esenial pentru producerea ATP;
mpiedicarea acestei cooperri conduce la
disiparea sub form de caldur a energiei
acumulate n gradientul protonic;
Decuplantul fiziologic, termogenina,
asigur protecia termic a organismelor.

Funciile mitocondriei
A. Funciile membranei mitocondriale externe
1.
2.
3.
4.

Permeabilitate controlat (porine)

Acil-CoA sintaza
Utilizarea acizilor grai
Carnitin-aciltransferaza I
n ciclul Krebs
Inactivarea aminelor biogene
(monoaminoxidaza)

Funciile mitocondriei

B. Funciile compartimentului intermembranar

1. Compartiment tampon (microclimat adecvat
funcionrii mitocondriei)
2. Adenilat kinaza (ATP + AMP = 2ADP)
3. Nucleozid fosfokinaze

Funciile mitocondriei

C. Funciile matricei mitocondriale

1. Ciclul acidului citric (ciclul acizilor tricarboxilici,
ciclul Krebs)
2. -oxidarea acizilor grai
3. Biosinteza proteinelor
4. Replicarea i transcrierea ADN mitocondrial

Funciile mitocondriei
D. Funciile membranei mitocondriale interne
1. Transportul de metabolii

Adaptare dup Molecular Biology of the Cell 4th Ed., Bruce Alberts, Garland Science, 2002

Funciile mitocondriei
D. Funciile membranei mitocondriale interne
2. Lanul transportor de electroni (lanul respirator)
3. Producerea de ATP
4. Cooperarea dintre lanul respirator i ATP sintaz

Originea mitocondriei
Teoria endosimbiotic;
Argumente:
Prezena cardiolipinei n
membrana intern;
Prezena porinelor n
membrana extern;
ADN propriu, circular;
Ribozomi 70S, sintez
proteic sensibil la
cloramfenicol, insensibil la
cicloheximid;
Capacitate proprie de a se
divide.

Importul proteinelor n mitocondrie

Adaptare dup Molecular Biology of the Cell 4th Ed., Bruce Alberts, Garland Science, 2002

Mecanismul importului

Adaptare dup Molecular Biology of the Cell 4th Ed., Bruce Alberts, Garland Science, 2002

Mitocondria i apoptoza

B Desagher S et al., Trends Cell Biol 10:369, 2000

Rezumat

Mitocondria este un organit deosebit, structurat pe baza unui

sistem dublu de membrane;
Cele patru componente ultrastructurale coopereaz la asigurarea funciei sale eseniale: producerea de ATP;
Aceast cooperare este sintetizat prin postulatele teoriei chemiosmotice;
Funcia respiratorie este asigurat de cele trei complexe enzimatice ale lanului transportor de e-, plus CoQ i citocrom c;
Alimentarea cu e- a lanului respirator o face ciclul Krebs prin
NADH i FADH2;
Disiparea gradientului protonic realizat de lanul respirator asigur energia pentru producerea de ATP;
Cuplarea/decuplarea lanului respirator cu fosforilarea reprezint mecanismul de comutare: ATP/cldur;
Biogeneza mitocondrial nu presupune producerea de novo a
organitului.