FACTORII CARE INFLUENEAZ VITEZA UNEI REACII ENZIMATICE

1. Concentraia substratului

2. Temperatura mediului de reacie

3. pH-ul mediului de reacie

4. Concentraia enzimei

5. Efectorii enzimatici - activatori

- inhibitori

1
 EFECTORII ENZIMATICI DEFINIIE
Se numesc efectori enzimatici substanele care pot mri sau
micora activitatea catalitic a unei enzime, deci care pot
accelera sau respectiv diminua viteza unei reacii enzimatice.
Efectorii enzimatici pot fi activatori sau inhibitori.

2
 EFECTORII ENZIMATICI

1. Activatorii enzimatici

substane nespecifice;
natur anorganic sau organic;
capabili s accelereze viteza unei reacii enzimatice.

Tipuri de de mecanisme de activare enzimatic

1. Activarea prin aciunea protectoare a unor substane asupra enzimelor

2. Activarea prin favorizarea legturii dintre enzim i substrat
3. Activarea prin favorizarea trecerii unor enzime din starea inactiv
(zimogene, proenzime) n forma catalitic activ
4. Activarea enzimelor cu rol reglator prin adenozin monofosfat ciclic
(AMPciclic, AMPc).
5. Activarea prin control genetic

3
 Tipuri de mecanisme de activare enzimatic

1. Activarea prin aciunea protectoare a unor substane asupra

enzimelor:
Exemplu: cisteina i glutationul redus (GSH)
gruprile SH libere = aciune activatoare, protectoare a gruprilor SH
eseniale, situate n centrul activ al unor enzime;
unele vitamine: tocoferoli, filochinone, acid ascorbic protejeaz multe
enzime de aciunea toxic a peroxizilor lipidici care apar uneori n cursul
metabolismului.

Glutationul redus
(GSH)

4
2. Activarea prin favorizarea legturii dintre enzim i substrat.
Unii ioni metalici pot nlesni formarea complexului ES prin diferite mecanisme:
Exemple:
meninerea substratului n centrul catalitic al enzimei: ionii de magneziu (Mg2+)
n cazul pirofosfatazei, favorizeaz legtura dintre enzim i substrat;
Ali ioni metalici pot fi chiar cofactori enzimatici:
ATP (adenozin trifosfat) aza, fosfotransferazele, fosfohidrolazele
activate de Mg2+;
amilaza (de origine animal) activat de Na+ i anionul clorur, (Cl-);
tirozinaza, ceruloplasmina, citocrom oxidaza activate de Cu2+;
alcool dehidrogenaza, glutamat dehidrogenaza, carboxi-peptidaza,
anhidraza carbonic activate de Zn2+;
enzimele din procesul coagulrii - activate de Ca2+;
citocromii, peroxidaze, catalaza activate de Fe2+ sau Fe3+;
5
3. Activarea prin favorizarea trecerii unor enzime din starea inactiv
(zimogene, proenzime) n forma catalitic activ.
Mecanismul: hidroliza unor legturi peptidice specifice.
Are loc nlturarea unui inhibitor, i demascarea centrului catalitic.

Exemplu:
Proenzimele inactive (digestive) sunt convertite la enzime active prin
proteoliz limitat (pepsina, chimotripsina, tripsina, enzimele coagulrii
sngelui, fibrinolizei)

Tripsinogen Tripsin activ + Inhibitor

Activarea sa se face
(inactiv) autocatalitic, sub influena
(hexapeptid)
urmelor de tripsin sau sub
aciunea enterokinazei (EC:
3.4.21.9) din mucoasa
intestinal

6
4. Activarea enzimelor cu rol reglator prin adenozin monofosfat ciclic (AMPciclic, AMPc).
Exemplu: Mecanismul de activare enzimatic a protein kinazei A sub aciunea AMPc

Protein kinazele, enzime cu rol n fosforilarea unor protein-enzime din interiorul celulei.

NH2
O
HO P OH N
N
O Protein OH
OH N N kinaze
+ HO P OH O P O + ADP

O OH

HO P O CH2
Rest de serin, treonin O
Protein-enzim
sau tirozin din structura O fosforilat
proteic a unei enzime

OH OH
adenozin trifosfat (ATP)

7
Protein kinazele de tip A, C i G (enzime allosterice) care transfer grupri fosfat
de la molecula de ATP la gruprile OH a unor aminoacizi specifici (serin,
treonin, tirozin), din structura anumitor proteine

NH2
O
HO P OH N
N
O Protein OH
OH N N kinaze
+ HO P OH O P O + ADP

O OH

HO P O CH2
Rest de serin, treonin O
Protein-enzim
sau tirozin din structura O fosforilat
proteic a unei enzime

OH OH Produs de reacie:
adenozin trifosfat (ATP) protein-enzime n stare fosforilat =>
formele active ale acestor enzime !

8
Mecanismul de activare enzimatic a protein kinazei A sub aciunea AMPc

Enzima + AMPciclic Enzima n form activ + Subunitatea

(forma inactiv) (subunitatea catalitic) reglatoare

AMPciclic (AMPc) se formeaz din ATP prin activarea enzimei adenilat-ciclaza

NH2
NH2
O
N
HO P OH N N
N
O N
N N
P N
HO OH adenilat ciclaza
EC 4.6.1.1
5'
O
O CH2 + PPi
HO P O CH2 O
O
O
3'

O P O OH
OH OH
OH
adenozin trifosfat (ATP)
3,AMP
5 ciclic
AMP ciclic 9
 Enzime allosterice mecanism de aciune

Protein kinazele sunt formate din 4 subuniti :

- 2 subuniti catalitice care cuprind situsul activ;
- 2 subuniti reglatoare care au un centru de fixare pentru AMP ciclic

10
Enzima allosteric
Modul de aciune al protein kinazei A i al
reglrii sale allosterice de ctre AMPc
(mesager secundar intracelular)

Protein kinaza A activat de AMPc la

subunitile reglatoare, va cataliza diferite
reacii de fosforilare a unor enzime
(proteine)

Proteinele fosforilate intervin n

numeroase procese energetice, de
cretere i difereniere celular = >
efecte intracelulare

Genomul uman codific aproximativ 500 de

proteine (enzime) de tipul protein kinazelor.
Multitudinea acestor enzime permite reglarea
precis, a proceselor metabolice i fiziologice,
n funcie de esuturi i substrate specifice. 11
Schema general a formrii i scindrii legturii ciclice fosfodiesterice din AMPc

Adenilat ciclaza AMPc fosfodiesteraza

convertete ATP n AMPc + PPi hidrolizeaz AMPc la AMP
 Turnover-ul AMPc

Fosfodiesterazele

Adenilatciclaza
 EFECTORII ENZIMATICI

2. Inhibitorii enzimatici

Substane care prin prezena lor n mediul de reacie diminueaz sau

anihileaz activitatea enzimelor.
Studiul inhibiiei enzimatice - importan teoretic i practic
Din punct de vedere:
-Biochimic
studiul grupelor funcionale din centrul catalitic al enzimei;
studiul grupelor funcionale ce intervin n meninerea conformaiei active
specifice a enzimei.

- fiziologic - informaii privind mecanismele de reglare a proceselor fiziologice

- farmacologic, patologic i toxicologic, o serie de inhibitori enzimatici sunt

utilizai n toxicologie - ca antidoturi, i n patologie - ca medicamente care s
moduleze unele procese declanatoare de dezechilibre ce produc diverse
maladii.
14
 CLASIFICAREA INHIBIIEI ENZIMATICE
Inhibiie ireversibil
I. Dup cinetica reaciei enzimatice Competitiv
Inhibiie reversibil
Necompetitiv

II. Dup mecanismul inhibiiei Inhibiie prin exces de substrat Mixt

(noncompetitiv)
Inhibiie prin analogi structurali
ai substratului

Inhibiie prin ageni complexani

Inhibiie prin legare covalent a

inhibitorilor de enzime

Inhibiie alosteric

Inhibiie "feed-back"
(retroinhibiie)

Inhibiie prin control genetic

(represie enzimatic) 15
 CLASIFICAREA INHIBIIEI ENZIMATICE

Inhibiie ireversibil
I. Dup cinetica reaciei enzimatice Competitiv
Inhibiie reversibil
Necompetitiv

Mixt
(noncompetitiv)

16
 INHIBIIA IREVERSIBIL = INACTIVARE

otrvuri enzimatice sau otrvuri catalitice

Caracteristicile inhibiiei ireversibile:
legare covalent (deci puternic) de centrul catalitic al enzimei.
aciune lent, este necesar un anumit timp de contact dintre inhibitor
i enzim.

Nu este afectat de diluia mediului de reacie i nici de concentraia de

enzim.

inhibiie NESPECIFIC.

Exemple:
toate enzimele care au n centrul catalitic aminoacizi cu gruparea SH
vor fi inhibai ireversibil de anumii inhibitori.

enzimele care au n centrul catalitic serina, deci un aminoacid cu

gruparea OH vor avea ca inhibitori ireversibil ali compui.
17
 Exemple de inhibitori ireversibili cu proprieti alchilante:

Monoiod-acetamida este un agent inhibitor cu

proprieti alchilante pentru fosfataze.
Alchileaz gruprile SH din structura unor centri activi ai
enzimelor.

Enzim Monoiod-acetamid Enzim inactivat

18
 Diizopropil-fluorofosfat (DFP sau DIFP) - compus
organofosforic (pesticid).
Inhib prin fosforilare enzimele care au n centrul activ
serina.

Exemple: acetilcolinesteraza, chimotripsina.

DFP este un toxic nervos : inhib acetilcolinesteraza =>
blocarea transmiterii influxului nervos => paralizie.

Acetilcolinesteraz DIFP Enzim inactivat

19
Mecanismul de aciune al colinesterazei

Acetilcolina
Substrat
Centrul activ
al enzimei

20
Inhibiia colinesterazei sub aciunea compuilor
organofosforici

21
 INHIBITORII REVERSIBILI

Caracteristici generale:

n general, prin dializ se poate elimina inhibitorul;

se poate restaura activitatea enzimatic;
este un proces rapid;
nu este o inhibiie specific
competitiv
exist mai multe modaliti de inhibiie reversibil necompetitiv
noncompetitiv
(denumit i mixt)
kI
E + I EI

kI - constanta de inhibiie
22
 INHIBIIA COMPETITIV Caracteristici generale
inhibitorul se fixeaz pe acelai centru catalitic al enzimei;

inhibitorul intr n competiie pentru centrul activ al enzimei;

presupune o analogie de structur dintre substrat i inhibitor;

legtura dintre enzim i inhibitor este de aceeai natur cu cea dintre enzim
i substrat;

inhibitorul competitiv reduce numrul de molecule de enzim care leag

substratul;

se pot, deci, substitui reciproc n funcie de concentraia lor n mediul de

reacie;

deci inhibiia competitiv poate fi reversat prin creterea concentraiei

substratului;

din punct de vedere cinetic Vmax rmne constant, KM crete

23
 MECANISMUL INHIBIIEI COMPETITIVE

Reaciile dintre enzim (E), substrat (S) i inhibitor (I) n cazul inhibiiei competitive

24
 MECANISMUL INHIBIIEI COMPETITIVE

kI
E + I EI

[E] [I]
kI =
[EI]

1
i - competitiv
v
Vmax [S]
v=
[I]
fr inhibitor (1 + ) KM + [S]
kI
1
Vmax Ecuaia Lineweaver-Brk va avea forma:
0 1
1 1 1 KM [I] 1 1
-
KM
-
KM
[S]
v
=
Vmax
(1 + ) [S]
+
Vmax
kI
Vmax = constant; 1/Vmax = constant; KM crete 25
 Exemplu de INHIBIIE COMPETITIV

Inhibiia competitiv a succinat dehidrogenazei

COOH Succinat COOH

CH2 dehidrogenaza
CH
CH2 HC
COOH FAD COOH
FADH2
Acid succinic Acid fumaric

-
COO
CH2
CH2 COO -
CH2 COO -
CH2
COO - COO -
COO -
26
 INHIBIIA NECOMPETITIV
(UNCOMPETITIVE INHIBITION)
Caracteristici generale:
Formarea complexului activat (ES) are loc normal

Inhibitorul se leag n alt centru catalitic dect substratul

Inhibitorul se combin numai cu complexul (ES), rezultnd un complex inactiv (ESI )

Complexul inactiv ( ESI ) se formeaz urmnd un mecanism secvenial ordonat,

plecnd numai de la complexul (ES).

Complexul ( ESI ) fiind inactiv, are loc inhibarea reaciei enzimatice, nu se mai pot
forma produi finali de reacie.

Din punct de vedere cinetic, fiecare parametru Vmax i KM este micorat prin acelai
factor, [ I ] care depinde de concentraia inhibitorului i constanta reaciei
[1 ] de inhibiie.
Ki
Acest tip de inhibiie se ntlnete n cazul enzimelor
ce catalizeaz reacii ntre dou substrate. 27
 MECANISMUL INHIBIIEI NECOMPETITIVE

Reaciile dintre enzim (E), substrat (S) i inhibitor (I) n cazul inhibiiei necompetitive

28
 MECANISMUL INHIBIIEI NECOMPETITIVE

kI
ES + I ESI

Ecuaia Michaelis-Menten devine :

Vmax
[I]
. [S]
(1+ )
kI
v=
KM
+ [S]
[I]
1 (1+ )
Vmax kI

[I]
[1 ]
Vmax i KM - micorai prin acelai factor Ki 29
Exemple de inhibiie necompetitic:

- Acetazolamida medicament diuretic, acioneaz inhibnd necompetitiv

enzima anhidraza carbonic la nivelul rinichiului

anhidraza
carbonic
+
CO2 + H2O HCO3- + H

Exist mai multe izoforme ale

anhidrazei carbonice, fiecare avnd
repartizare intracelular diferit
(citosolic, mitocondrial, membranar,
etc) precum i localizare tisular diferit
Au fost dezvoltai inhibitori selectivi ai
acestor enzime, cu eficacitate diferit n
funcie de izoformia/esutul pe care
acioneaz

30
 INHIBIIA MIXT (denumit i NONCOMPETITIV)
(NONCOMPETITIVE INHIBITION)
Caracteristici generale:

Inhibitorul se poate lega de enzim direct, simultan cu legarea

substratului, dar se poate lega i cu complexul activat (ES)

Inhibitorul se leag n alt centru activ dect substratul (deci se poate lega
de enzim simultan cu substratul)

Aciunea inhibitorului nu poate fi reversibil prin creterea concentraiei

substratului

Din punct de vedere cinetic: scade Vmax i KM rmne relativ aceeai

+S ES

E
ESI E+P

+I EI
31
 MECANISMUL INHIBIIEI NONCOMPETITIVE

Reaciile dintre enzim (E), substrat (S) i un inhibitor (I) noncompetitiv

32
 MECANISMUL INHIBIIEI NONCOMPETITIVE

Ecuaia Michaelis-Menten devine:

Vmax
[I]
. [S]
(1+ )
kI
v=
KM + [S]

Exemplu: ionii unor metale grele:

Cu2+, Hg2+, Ag2+ i derivaii lor,
inhib unele enzime care au
grupri SH n centrul activ.
1
Vmax

Scade Vmax i KM rmne relativ acelai

33
Concluzie cele 3 tipuri de inhibiie enzimatic
 CLASIFICAREA INHIBIIEI ENZIMATICE

II. Dup mecanismul inhibiiei Inhibiie prin exces de substrat

Inhibiie prin analogi structurali ai substratului

Inhibiie prin ageni complexani

Inhibiie prin legare covalent a inhibitorilor de

enzime

Inhibiie allosteric

Inhibiie "feed-back" (retroinhibiie)

Inhibiie prin control genetic (represie enzimatic)

35
 Inhibiia prin exces de substrat

Cnd n mediul de reacie concentraia substratului este foarte mare,

n afar de complexul activat ES, se formeaz i complexul ESS inactiv sau
mai puin activ.

Efectul inhibitor al substratului este cu att mai pronunat cu ct

concentraia acestuia este mai mare

La concentraii mari de substrat, se

Viteza de depete capacitatea catalitic a enzimei
reactie i are loc un efect invers, de ncetinire a
vitezei de reacie.

E+S ES E+P

+S

ESS ES + S
[S]

36
 CLASIFICAREA INHIBIIEI ENZIMATICE

II. Dup mecanismul inhibiiei Inhibiie prin exces de substrat

Inhibiie prin analogi structurali ai substratului

Inhibiie prin ageni complexani

Inhibiie prin legare covalent a inhibitorilor de enzime

Inhibiie alosteric

Inhibiie "feed-back" (retroinhibiie)

Inhibiie prin control genetic (represie enzimatic)

37
 Inhibiia prin analogi structurali ai substratului
Exemple:

COOH
CH2 Inhibitorii de tip competitiv COOH
CH2 ai succinat dehidrogenazei CH2 COOH
COOH (malonat, oxalat, glutarat) COOH COOH

Acidul fluorocitric inhibitor al aconitazei

COOH COOH

CH2 F CH
HO C COOH HO C COOH

CH2 CH2

COOH COOH

acid citric acid fluorocitric

38
 CLASIFICAREA INHIBIIEI ENZIMATICE

II. Dup mecanismul inhibiiei

Inhibiie prin exces de substrat

Inhibiie prin analogi structurali ai substratului

Inhibiie prin ageni complexani

Inhibiie prin legare covalent a inhibitorilor de enzime

Inhibiie allosteric

Inhibiie "feed-back" (retroinhibiie)

Inhibiie prin control genetic (represie enzimatic)

39
 Inhibiia prin ageni complexani

Inhibitorii complexani = substane chimice capabile de a complexa metalul din

structura unor enzime (la unele metal-enzime, metalul se afl n centrul activ al
enzimei).

Exemple:

Ionul cianur pentru numeroase metalenzime:

succinat-dehidrogenaza (Fe2+)
citocromi (Fe2+)
citocromoxiaza (Fe2+, Cu2+)
Monoxidul de carbon fixeaz fierul din citocromoxidaz

Fluorurile inhib enzimele cu calciu i magneziu

EDTA (etilendiamino-tetracetat) poate complexa Mg2+ din structura a numeroase

enzime (ATP-aza, pirofosfataza).
40
Inhibiia prin legarea covalent a inhibitorilor cu enzimele

Este un tip ireversibil de inhibiie

Sunt compui care blocheaz gruprile funcionale de la nivelul
centrului activ al enzimei

Exemple:

-Agenii alchilani care blocheaz gruprile SH ale cisteinei din centrul

activ al unor enzime (ex: monoiodacetat)

- Compui care esterific gruprile OH ale serinei din centrul activ al

acetilcolinesterazei (ex: diizopropilfluorofosfatul-DIFP)

- Substanele care pot acetila gruprile NH2 ale lizinei din structura
enzimelor (ex: acidul acetilsalicilic acetileaz unele grupri NH2 din centrul
activ al ciclooxigenazei enzim din metabolismul acidului arahidonic)

41
 INHIBIIA ALLOSTERIC
Efectorii allosterici
Acioneaz asupra conformaiei spaiale a enzimelor de tip allosteric

ENZIME ALLOSTERICE
Termenul de allosteriam desemneaz proprietatea caracteristic a
unor enzime de a funciona prin variaii (allo) ale conformaiei
tridimensionale (steriam).

Caracteristici structurale
Sunt proteine complexe cu rol reglator n reaciile metabolice
Sunt formate din subuniti monomere identice (protomeri)
Structura cuaternar reprezint asocierea simetric a protomerilor
componeni
Sunt enzime care se pot combina cu mai multe substrate, avnd mai muli
centri activi
Enzimele allosterice pot adopta n mod reversibil mai multe stri
conformaionale distincte care difer prin:
- Numr de protomeri
- Distribuia protomerilor
- Afinitatea protomerilor pentru efectorii stereospecifici 42
 Enzimele allosterice au mai multe
situsuri de legare (cel puin 3 situsuri
catalitice)
- un situs de tip catalitic care realizeaz
transformarea propriu-zis a substratului, Reprezentarea schematic
i care se afl situat pe subunitatea a inhibiiei allosterice
catalitic a enzimei;
- mai multe situs-uri allosterice de care se
pot lega efectorii enzimatici (activatori
sau inhibitori), situai pe subunitatea
reglatoare a enzimei.

ntre situsul catalitic i cel allosteric

exist anumite interacii: efect cooperant.
Legarea inhibitorului allosteric la situsul
allosteric induce modificarea
tridimensional a moleculei proteinei
enzimatice

Centrul activ catalitic al enzimei devine

inapt pentru a fixa substratul
43
 Enzimele allosterice manifest o comportare cinetic diferit de cea
postulat n teoria Michaelis Menten.

Aspectul sigmoid este atribuit

structurii cu mai muli
protomeri, a existenei mai
multor situsuri de legare
pentru fiecare molecul de
enzim ntre care se manifest
efecte de cooperare.

44
 Inhibiia de tip feed-back (retroinhibiia)
Reprezint un caz special de inhibiie allosteric
Const n inhibiia activitii primei enzime de ctre produsul final al
lanului metabolic din care face parte:

E1 E2 E3 E4 E5
A B C D E F
-
Acumularea excesiv de produs final F n celule, determin printr-un mecanism allosteric,
inhibiia enzimei E1 care catalizeaz transformarea substanei A n substana B.
Exemplu: Hemul acumulat (n procesul de biosintez a hemoglobinei)
i poate inhiba propria biosintez.

Importana inhibiiei de tip feed-back

n reglarea metabolismului intermediar celular (enzima E1 se numete enzim
reglatoare de proces).
n meninerea unui echilibru dinamic ntre catabolism i procesele de biosintez.
Constituie o bun strategie metabolic a celulei n utilizarea precursorilor
necesari la biosinteza unor biomolecule
45
 Inducie i inhibiie enzimatic prin control genetic

F. Jacob i J. Monod, 1961

GEN STRUCTURAL = ansamblul de triplete nucleotidice din ADN

nuclear care codific biosinteza unei molecule de enzim (protein)

Transcrierea mesajului purtat de gena structural la ARN mesager

(ARNm) corespunztor este asigurat de un ansamblu nucleotidic care se
numete GEN OPERATOARE (operator) i care de obicei se gsete n
vecintatea GENEI STRUCTURALE deci la locul unde ncepe transcrierea la
ARNm.

La rndul su operatorul este controlat de o protein numit REPRESOR

a crui sintez este controlat de GENA REGLATOARE.

n vecintatea operatorului se gsete o regiune promotoare necesar

pentru nceperea transcrierii.
46
 Inducie i inhibiie enzimatic prin control genetic

1961, F. Jacob i J. Monod

Enzimele pot fi prezente n celul
n cantiti aproximativ constante
= exprimare constitutiv
(Ex: enzimele lanului respirator
mitocondrial)

Anumite enzime pot fi prezente n

mod obinuit sub forma unei
exprimri mai slabe (sau chiar s
nu fie deloc exprimate) dar a
cror biosintez s creasc
semnificativ (chiar de mii de ori)
n anumite condiii, n special
atunci cnd substratul lor este
prezent n exces = enzime
inductibile.

47
 Exemplu de inducie a activitii enzimatice, la Escherichia coli

Gen
reglatoare Promotor Operator Gene structurale

ARN
polimeraz
ADN

ARNm

Polipeptid

Protein
represoare
Lactoza

Prezena unui
inductor n
mediu -Galactozidaz Permeaz Transacetilaz
48
 Exemplu de inhibiie prin produs final biosinteza triptofanului

E1 E2 E3 E4 E5
Absena triptofanului (Trp) n celul induce sinteza enzimelor implicate n cile sale de biosintez (E1...E5)

Prezena triptofanului inhib sinteza (exprimarea) enzimelor implicate n biosinteza sa

49
Inhibiie i inducie enzimatic prin control genetic Importan practic

Unele medicamente pot induce biosinteza de enzime necesare propriei lor

metabolizri => Importan farmacologic i toxicologic- st la baza fenomenului
de obinui la medicamente i a toxicomaniei.

Inducia enzimatic st i la baza fenomenului de rezisten la medicamente.

Ca rspuns la lezrile celulare cauzate de expunerea la compui xenobiotici

(medicamente, compui toxici poluani), celulele elaboreaz mecanisme de aprare
adaptativ ce includ, ntre altele, i inducia unor gene specifice care codific n
special biosinteza unor enzime de biotransformare.

50
 CLASIFICAREA ENZIMELOR
CONFORM COMISIEI DE ENZIMOLOGIE (EC)

EC : 1 Oxidoreductaze
EC : 2 Transferaze
EC : 3 Hidrolaze
EC : 4 Liaze
EC : 5 Izomeraze
EC : 6 Ligaze

51
 Clasa 1
OXIDOREDUCTAZE EC: 1

52
OXIDOREDUCTAZE - Definiie i caracteristici generale
Catalizeaz procesele celulare de oxidoreducere, procese ce se desfoar
prin transport de hidrogen, electroni i oxigen de la un substrat donor la
acceptor.

Cofactorii oxidoreductazelor se pot diferenia n - transportori de hidrogen

- transportori de electroni
- transportori de oxigen.

Dehidrogenaze - catalizeaz (de obicei reversibil) transferul de hidrogen de la un

substrat donor de hidrogen (notat DH2) la acceptorul de hidrogen (notat A)

DH2 + A D + AH2

Denumirea sistematic:

-donor de echivaleni reductori : acceptor de echivaleni reductori oxidoreductaze.

53
 Oxidaze sau oxigenaze = catalizeaz scoaterea hidrogenului de pe un substrat (DH2)
utiliznd oxigenul ca acceptor.
Produi de reacie: apa (H2O) sau peroxidul de hidrogen (H2O2).

DH2 O2 DH2 O2
(Red)
Oxidaze Oxidaze
(Oxigenaze) (Oxigenaze)

D H2O D H2 O2
(Ox)

Oxigenazele - dou grupe:

A. Dioxigenaze ncorporeaz ambii atomi de oxigen n molecula substratului
(notat D):
D + O2 DO2

B. Monooxigenaze sau hidroxilaze catalizeaz ncorporarea unui singur atom

de oxigen n molecula de substrat (notat, n acest caz, DH), iar cellalt este redus la ap:

DH + O2 + AH2 D-OH + A + H2O

unde DH substrat donor de hidrogen; AH2 cosubstrat donor de hidrogen; D-OH este
substrat hidroxilat 54
 Transportori de hidrogen

- Coenzime nicotinice (coenzime piridinice)

- Flavin-enzime.
- Ubichinonele (coenzimele Q)
- Acidul lipoic

55
 COENZIME TRANSPORTOARE DE
HIDROGEN
COENZIME NICOTINICE (COENZIME PIRIDINICE)

Nicotinamid adenindinucleotid - NAD+ (n forma oxidat)

Nicotinamid adenindinucleotid fosfat -NADP+ (forma oxidat).

NH2
O
C
Nicotinamid N NADP+
N
NH2 posed o
+
N N grupare
N
O O fosforil n
Adenin
5' 5' plus, legat de
2' 3'
CH2 O P O P O CH2 C2 al restului
1' OH OH 4' O de riboz
OH OH
4' 1' legat de
O 3' 2' adenin
NAD+
esterificat cu
OH OH
H3PO4
NADP+
OPO3H2 56
 O NH2
C Nicotinamid Adenin
NH2 N
+ N
N
O O N N
5'
5'
2' 3' O CH2
CH2 O P O P
1' OH OH 4' O
OH OH
4' 1'
O 3' 2' esterificat cu
H3PO4
NAD+
OH OH

NADP+
OPO3H2

57
Cofactori cu structur flavinic- transportori de hidrogen.

Flavin mononucleotid FMN

Flavin adenindinucleotid FAD
O
H3C 5 N
10 4
Nucleul Structura flavin
6 3 NH izoaloxazin
7 2
mononucleotidului (FMN)
= izoaloxazin-ribitil-
9
8
H3C N N O
1

1'CH2
fosfat
2'CH OH Ribitil

3'CH OH
6,7 dimetil, 9 ribitil
4'CH OH
OH izoaloxazin = RIBOFLAVIN
5'CH2 O P OH (vitamina B2)
O
Riboflavin -
fosfat
58
Structura flavin adenindinucleotidului (FAD)
O
N Nucleul
H3C 5 4
6
10
3 NH
izoaloxazin
7 2
8 9
H3C N N O
1

CH2 Adenin

CH OH NH 2

N
CH OH N

CH OH OH
N N
OH
CH2 O P O P O CH2
O
O O

OH OH

Izoaloxazin-ribitil- fosfat - fosfat - riboz -

Adenin 59
 Structura flavin adenindinucleotidului (FAD
O
H3C 5 N Nucleul
4
6
10
3 NH izoaloxazin
7 2
9
8
H3C N N O
1
Adenin
1'CH2
NH2
2'CH OH Ribitil
N
N
3'CH OH
N N
4'CH OH OH
OH
5'CH2 O P O P O CH2
O O
O

OH OH

Izoaloxazin-ribitil- fosfat - fosfat - riboz - Adenin60

 Ubichinonele sau coenzimele Q
Structur: nucleu de benzochinon substituit cu: 2 gr. metoxi,
1 gr. metil i
1 lan poliizoprenoidic

O CH3
H3 C O 6 2 CH2 CH C CH2 H
1
n

H3 C O 5
4 3 CH n = 6 pentru ubichinonele de la levuri
3
n = 8 sau 9 pentru ubichinonele de la microorganisme
O
n = 10 pentru ubichinonele de la animale si om
2-decaprenil--5,6-dimetoxi-3-metil-1,4-bezochinona
61
 Acidul lipoic (acid tioctic) STRUCTUR CHIMIC

Acidul 6,8 ditio-octanoic

H2
8
C 6
1
7
H2C CH (CH2)4 COOH

5

S S
Acid -lipoic

H2 O
5 3

8
C 6
CH2 CH2 C
1

H2C CH OH
CH2 CH2
4 2
S S
Acid lipoic
62