Mycoplasma

Familia Mycoplasmataceae
1. Mycoplasma,
2. Ureaplasma

Microorganisme lipsite de perete celular rigid- consecinte:

rezistente la actiunea antibioticelor beta- lactam (mecanism de actiune pe perete

bacterian),

dimensiuni f. reduse, plasticitate, polimorfism,

existenta saprofitica- parazitica intracelular,

redusa rezistenta in mediul exterior,

necesitati deosebite pentru izolarea in cultura, in vitro, (precursori de acizi nucleici, steroli,
ser etc)

Semnificatie clinica:

1. Infectii respiratorii,

2. Infectii genito- urinare,

3. Infectii neo- natale,

4. Infectii sistemice la organisme imunodeprimate:

- Mycoplasma: artrite septice, bacteriemii (post transplant renal, post investigatii invazive genito-
urinare), abcese cerebrale, osteomielita etc.

Genul Mycoplasma, habitat, implicatii clinice:

M. pneumoniae- patogenitate neta si izolata exclusiv de la om:

- Pneumonie atipica primara, meningita, sindrom Stevens- Johnson, sdr. neurologice, leziuni
cutanate, artrite,

* M. hominis, M. orale, M. salivarium- specii izolate de la om si animale,

* Ureaplasma izolata din infectii de tract uro- genital, uretrita negonococica

Genul Mycoplasma- morfologie:

* Mare plasticitate: de la forme sferice la forme filamentoase,

- la exterior, celula bacteriana e delimitata de membrana citoplasmatica,

- M. pneumoniae prezinta la capatul filamentelor o extremitate in forma de maciuca, care se

termina cu un varf ascutit (aderare la epiteliul respirator),

- absenta componentelor caracteristice peretelui bacterian,

- echipament enzimatic complex,

 - slaba capacitate de sinteza a aminoacizilor si a precursorilor de acizi nucleici,

Genul Mycoplasma- structura antigenica:

M. pneumoniae:

- Ag major (gliceroglicolipide)- prezent in membrana celulara- raspunzator de reactia imuna din

RFC,

- Ag- componente proteice din membrana externa, cu rol in aderenta la celulele tesutului
respirator,

Genul Mycoplasma- patogenitate:

Mycoplasmele umane (M. pneumoniae, Ureaplasma) nu poseda exotoxina, endotoxina,

* M. pneumoniae- produce peroxizi-

- rol citolitic la suprafata celulei gazda,

- oprirea miscarii cililor din marginea in perie a celulelor respiratorii,

- desprinderea marginii in perie, citoliza

- Absorbtia are loc la nivelul receptorilor neuraminici ai celulelor epiteliale,

* Ureaplasma: oprirea migrarii spermatozoizilor- infertilitate secundara,

- lipsa antigenelor din peretele bacterian duce la stimularea scazuta a raspunsului imun.

Factori de patogenitate:

Specii cu importanta in patologia umana:

*Mycoplasma pneumoniae (infectii respiratorii):

citoaderenta de epiteliul respirator prin adezina P1,

ciliostaza, inflamatie cronica,

citotoxicitate: hidrogen peroxid, hemolizina,

stimuleaza limfocitele B si T, induc formare de autoanticorpi,

*Mycoplasma genitalum , Mycoplasma hominis (infectii tract genito- urinar):

- poseda o adezina MgPa, care faciliteaza aderarea la epiteliul genito- urinar,

*Ureaplasma urealyticum (infectii tract genito-urinar, inf. tract respirator inferior):

IgA- proteaza: implicata in mecanismul de producere a bolii,

- activitate urealitica.

Diagnostic bacteriologic:
Recoltare, tipuri de specimene clinice
 1. Secretii respiratorii: tampoane faringiene, nazale, sputa, aspirat traheal, aspirat bronsic,

2. Secretii urogenitale: tampoane uretrale, vaginale, sperma, secretii prostatice, urina etc,

* Tampoane din Dacron, alginat de calciu, poliester (bumbacul e toxic)

3. Fluide biologice (sange, LCR, lichid articular, lichid amniotic etc),

4. Biopsii de tesuturi (placenta, endometru), calculi urinari,

Transport IMEDIAT- medii de cultura pentru conservare si transport: Stuart, Mycotrans,

Shepard etc.

Conservare la 70C,

Diagnostic prin metode non-culturale:

Tehnici bazate pe detectie de Antigene:

- IF directa, ELISA:

- depisteaza M. pneumoniae doar la cantitati > 10^3-4 UFC/ 100l,

- sensibilitate redusa,

- cross reactivitate cu alte Mycoplasme saprofite,

- nu se recomanda pentru diagnostic.

- ELISA, Radioimunoprecipitare, imunodifuzie, imunoelectroforeza

Tehnici de biologie moleculara (PCR) pentru analiza ADN

- Pot reprezenta singurele tehnici de evidentiere a Mycoplasmei, Ureaplasmei in prelevatele

clinice,

- PCR: Sensibilitate inalta, chiar si sub tratament antibiotic, util in diagnosticul asocierilor
de patogeni necultuvabili (Chlamydii, Mycoplasme, Legionella etc.)

- Nu de rutina, scump, personal inalt calificat.

Proceduri de cultivare:

1. MEDII DE CULTURA: bacterii pretentioase, cu parazitism intracelular, necesita medii de cultura

imbogatite cu ser, factori de crestere/ extract de drojdie, substrat metabolic complex:

M. pneumoniae, M. hominis: Mycoscreen GU, Mycotrim GU (mediu bifazic/ agar- bulion,

metilen- blue, glucoza, arginina),

M. hominis, Ureaplasma: punerea in evidenta a ureazei cu reactive Shepard 10B broth

(culoare bruna), A8 agar, supliment antibiotic, ph mediu de cultura M.hominis=7.4 si ph
mediu de cultura Ureaplsma=6.4

2. CONDITII DE INCUBARE:

- 37C, in atmosfera cu 5- 10 % CO2- M. pneumoniae,

- 37C, atmosfera cu 95% N2 + 5% CO2, - M.hominis si Ureaplasma,

- M. hominis, Ureaplasma: crestere in 2-4 zile,

- M. pneumoniae: crestere in > 21 zile.

urmarire de 2X/ saptamana suprafata mediului agarizat pentru a surprinde aparitia

microcoloniilor.

Identificare:

1. Examinare prin microscopie optica (dimensiuni mici, dezvoltare intracelulara, lipsa peretelui
celular): nu da rezultate,

2. Proprietatile biochimice (fermentarea glucozei, hidroliza argininei sau ureei): determina

modificari de culoare a mediului lichid, in lipsa turbiditatii,

3. Caracterele de cultivare:

- Mycoplasma pneumoniae- aspect muriform (10 m- 200 m),

- Mycoplasma hominis: colonii mari, aspect de ou ochi prajit- 200- 300 m,

- Ureaplasma urealyticum: colonii mici 15- 60 m, dense, circulare, greu observabile cu

ochiul liber,

Tehnici pentru determinarea sensibilitatii la antibiotice:

Tehnici cantitative (CMI):

1. Microdilutii in agar,

2. Microdilutii in bulion,

3. Metoda E- test.

Tratament:

- Fluoroquinolone (levofloxacin, moxifloxacin, ciprofloxacin, ofloxacin),

- Macrolide (eritromicina, azityromicina, clindamicina),

- Tetracicline, doxiciclina

- Rezistente la peniciline si derivati

*Tratamentul anitibiotic nu elimina starea de purtator pentru Mycoplasma pneumoniae