1 Listeria

2 Taxonomie
Listeria exclus din fam Lactobacilaceae pt a forma fam Listeria-Bronchotrix
L.monocytogenes sp tip
L.ivanovii 2 subsp: L.ivanovii subsp ivanovii, L.ivanovii subsp londoniensis
L.innocua
L.seeligeri
L.welshimeri
L.grayi
L.monocytogenes i L.ivanovii patogene (DL50 la oareci, capacit de a crete n
splin/ficat de oarece)
L.monocytogenes patogen uman
L.ivanovii patogen animal
3 Descrierea genului
BGP nesporulai, neramif, regulai, scuri (0,5-2/0,4-0,5 m), izolai sau n scurte
lanuri
Filamente n culturi vechi sau R
Mobili (1-5 flageli peritrichi)
Mobile la 28C
Mult mai puin mobile la 37C
Nepretenios nutritiv
Colonii mici (1-2 mm dup 1-2Z la 37C), S, gri-bleu n lumin oblic (pe ANutr)
0-45C (optim la 30-37C); creterea apare la 4C n cteva zile
Facultativ anaerob
P crete n prez conc mari NaCl
Catalaz +
Oxidaz
Fermenteaz zaharuri (- gaz)
Teste VP i RM +
ESC hidrolizat n cteva ore
URE, GEL nehidrolizate
Nu prod H2S sau indol
Per cel con PG pe baz de ac meso-diaminopimelic i ac lipoteichoic, dar nu ac
micolici
Menaquinona major con 7 unit izopren
AG cel predom sunt ramif
4

9 Habitat natural
Larg rsp n mediu
Sol, mat vegetal degradat, ap, hran animale, carne pui proaspt sau
congelat, carne proaspt sau prelucrat, lapte crud, brnz, reziduuri abator,
purttori asimpt umani/animali
L.monocytogenes
Mamifere, psri, pete, crustacee, insecte
Habitat primar sol, mat vegetal degradat suprav i crete saprofit
Om 1
 8

9 Habitat natural
Larg rsp n mediu
Sol, mat vegetal degradat, ap, hran animale, carne pui proaspt sau
congelat, carne proaspt sau prelucrat, lapte crud, brnz, reziduuri abator,
purttori asimpt umani/animali
L.monocytogenes
Mamifere, psri, pete, crustacee, insecte
Habitat primar sol, mat vegetal degradat suprav i crete saprofit
Om
consum ap
consum alimente contaminate
Intr n mediul prelucrrii i producerii alimentelor
Abilit de a crete la 4C poate prod boal la persoane care au ingerat
alimente colonizate
10 Listeria monocytogenes
Caractere microscopice
BGP fini, lungime variabil
frotiu produs patologic: intra- sau extracelular
frotiu cultur: perechi/ lanuri scurte

Caractere de cultivare
optim: 20-37C, medii cu snge, glucoz, lichid de ascit, atm. microaerofil cu
5-10% CO2
colonii mici, transparente, -hemolitice, miros de lapte acidulat

Rezistena n mediul extern
foarte rezistent
pasteurizarea laptelui poate fi ineficient
11

12

13

14

15 Listeria monocytogenes
Factori de virulen
bacterii facultativ i.cel.
internalina
proteina p60
proteina ActA
lecitinaza
fosfolipaza C
listeriolizina O
16

17 Listeria monocytogenes
Patogenie
zoonoz ierbivore (consum furaje contaminate)
septicemie, encefalit
avort/ natere prematur bacterie gzduit n uter/ gl. mamare (L/ ani)
ingestie penetrare barier epitelial intestinal X enterocite translocare
intestinal Mf hepatice i splenice bacteriemie encefal, meninge,
endocard, placenta (uter gravid)

18 Semnificaie clinic L.monocytogenes

Aduli umani nafara sarcinii meningit, encefalit i/sau septicemie
Pacieni n vrst/pers cu condiii predispozante care scad imunitatea celular 2
 zoonoz ierbivore (consum furaje contaminate)
septicemie, encefalit
avort/ natere prematur bacterie gzduit n uter/ gl. mamare (L/ ani)
ingestie penetrare barier epitelial intestinal X enterocite translocare
intestinal Mf hepatice i splenice bacteriemie encefal, meninge,
endocard, placenta (uter gravid)

18 Semnificaie clinic L.monocytogenes

Aduli umani nafara sarcinii meningit, encefalit i/sau septicemie
Pacieni n vrst/pers cu condiii predispozante care scad imunitatea celular
(transplant, limfom, SIDA)
Pacieni fr cond predispozante (rar)
Tropism SNC inf severe, cu mortalit mare/sechele neuro
Femei gravide
Bacteriemie cu manif asem gripei placentit i/sau amniotit i inf ftului (p
traversa placenta) avort, ft nscut mort, natere prematur
Dg precoce prin detect L.monocytogenes n HC mamei
La natere detect bact n LCR, sg, lic amniotic, secr respir, placenta, tampon
cutanat, aspirat gastric, meconiu
BGP n ac prod = dg precoce
Infecii focale rare dup un episod bacteriemic
Listerioz cutanat primar bacteriemie veterinari, lucrtori abatoare
(contact es animal infectat)
Rar endocardit, artrit, osteomielit, abcese intra-abd, endoftalmit, inf
pleuro-pulm
Izbucn epid de gastro-enterit febril inf invazive
Pers fr fact risc predispozani cunoscui
Doz inf mai mare (109 UFC/ml)
Simpt ap rapid (~24h)
Portaj sntos tranzitoriu 2-20% animale i oameni
Nu exist portaj cervico-vaginal
19

20 Determinarea patogenitii
Inoculare i.perit oarece
Inoc mb corioalantoidian ou embrionat
Inoc conj iepure
Citotoxicitate cult cel

21 Listeria monocytogenes

Imunitate
mediat celular (activare Mf mediat de cel T, prin limfokine)
22 Recoltare, transport, conservare produse patologice
Sigurana n laborator
Nu a fost det doza inf pt listerioz; depinde de receptivitatea gazdei
Femei gravide!
Probe
Clinice
Probe din situsuri normal sterile: sg, LCR, lic amniotic, placent, fetal
Cultivare imediat la 37C sau conservate la 4C max 48h
MF/tampon rectal std epid privind rata portajului
Transp n med mbog/PALCAM la temp cam
Conservare la 4 C max 48h
Congelare pt conservare mai ndelungat
CC de rutin nu include detectarea Listeria
Alimente
Recolt aseptic n recip sterile, min 100g 3
 Clinice
Probe din situsuri normal sterile: sg, LCR, lic amniotic, placent, fetal
Cultivare imediat la 37C sau conservate la 4C max 48h
MF/tampon rectal std epid privind rata portajului
Transp n med mbog/PALCAM la temp cam
Conservare la 4 C max 48h
Congelare pt conservare mai ndelungat
CC de rutin nu include detectarea Listeria
Alimente
Recolt aseptic n recip sterile, min 100g
Pachete originale
ngheata .a. transp n container original i dezgheat imediat nainte de
nsmnare
Izolate
Transp culturi pe pant agar fr GLU
23 Diagnostic de laborator
Cultivare
Inoculare direct produse patologice din z norm sterile pe agar tripticaz-soia cu
5% sg berbec/cal/iepure
HC pe medii convenionale
Produse contaminate/alimente medii mbogire agar PALCAM (polimixin-
acriflavin-clorur Li-ceftazidim-esculin-manitol) 30C, 48h, microaerofil
Detectare rapid
Probe de alim
Teste imunologice (Ac mono) pt detect Listeria n bulion de mbog din alim
sp de gen
Sond ADN L.monocytogenes sp de specie
LCR, es (proaspt, bloc parafin)
PCR
24

25

26

27

28

29 Identificare
Identificare de gen
fr Gram
micri de rostogolire pe prep umed
cat+
hidrol ESC
Prod acid din D-GLU, VP+, RM+ sunt teste de confirmare

Dif de alte genuri
Streptococcus spp fr Gram, mob, cat
Erysipelotrix mob, cat, cretere la 4C
Lactobacillus imob, cat-


30 Identificare
Identificare de specie crucial (toate sp p contam alim!)
Hemoliza
L.monocytogenes, L.seeligeri z mic hemol, sub col
L.ivanovii z larg hemol
Test CAMP S.aureus productor de lizin/Rhodococcus equi
Prod acid din carbohidrai 4
 Lactobacillus imob, cat-


30 Identificare
Identificare de specie crucial (toate sp p contam alim!)
Hemoliza
L.monocytogenes, L.seeligeri z mic hemol, sub col
L.ivanovii z larg hemol
Test CAMP S.aureus productor de lizin/Rhodococcus equi
Prod acid din carbohidrai
L.monocytogenes D-XYL -, L-RAM (37C, 7Z, aerob)
Teste bioch miniaturizate
API Listeria DIM (arilamidaza)+ L.monocytogenes, -L.innocua
API Coryne id nivel de gen
Sond chemiluminiscent ADN pt confirm coloniilor
Tehnici de tipare
Serotipare - 13
Ag somatice (O) i flagelare (H)
Ag de serotipare sunt comune la m.m. specii
Tipare fagic
Completeaz posibilitile mici de discriminare prin serotipare

31

32

33

34 Serodiagnostic
Ac mpotriva Ag celulare integrale nu pot fi utiliz pt dg (r X L.monocytogenes cu alte
bact GP)
Pacieni cu listerioz confirmat prin cultivare nu au avut Ac detectabili
Ac anti-listeriolizin O pt dg listeriozei invazive sau gastroenterit febril
Testele serologice nu sunt recomandate
35 Sensibilitatea la antibiotice
In vitro
S la P, AM, G, E, TE, RIF, C
I la FQ
AG, SXT bactericide
Cef ineficiente in vitro


36 Evaluarea, interpretarea i raportarea rezultatelor
Col din sg, LCR sau alte situsuri normal sterile cu z f mic de hemoliz beta mob,
fr Gram, cat, ESC
Test CAMP nu este necesar de rutin
API Listeria
LCR de la pac pretratai
Val ex microscopic
PCR
37 Listeria monocytogenes
Tratament
AM (+ G)
AG crete act bactericid a P fa de L.monocytogenes
alergie la P SXT, macrolide

Epidemiologie
ri inds
zoonoz
5
 PCR
37 Listeria monocytogenes
Tratament
AM (+ G)
AG crete act bactericid a P fa de L.monocytogenes
alergie la P SXT, macrolide

Epidemiologie
ri inds
zoonoz
sursa de infecie - animale purttoare/ bolnave
transmitere
digestiv: alim gata de ingestie pstrate la frigider: varz, lapte, brnz, pate,
pui, curcan, ciuperci, porc, pete afumat (>103UFC/g)
direct (veterinari)
receptivitate maxim gravide, n.n., deficit al aprrii celulare (SIDA, hemopatii
maligne, neoplazii), ciroz etilic

Profilaxie
msuri nespecifice
nu exist vaccin pentru uz uman
38 Erysipelotrix
39 Taxonomie
Cndva inclus ntre bact corineforme
Actualmente n gr BGP nesporulai regulai (Listeria, Erysipelotrix, Lactobacillus)
2 sp
E.rhusiopathiae
E.tonsillarum
E.rhusiopathiae
Larg rspndit n natur
Portaj la dif animale
Agent al erizipelului porcin
Prod erizipeloid, o inf cutanat uman, de ob localiz la mini i degete
40 Descrierea genului
Orgs mezofile, fac anaerobe
BGP sc (0,2-0,5/0,8-2,5m), cu capete rotunjite, izolai/sc lanuri/filam lungi
neramif (60m)
Nesporulai, ne-a.a.r.
Imobili
Cresc pe medii complexe (pret nutritiv), ntr-o gam larg de temp (5-42C, optim
30-37C)
pH alcalin (6,7-9,2, optim 7,2-7,6)
P crete n prez conc mari NaCl (<8,5%)
Cat-
Ox-
Nu hidroliz ESC
Ferm slab GLU, fr gaz
VP, RM
Nu prod IND, nu hidroliz URE
Prod H2S pe TSI
41 Habitat natural
E.rhusiopathiae larg rsp n nat
Rezistent la cond nefav de mediu (temp sczute, pH alcalin)
Parazit mamifere, psri, pete; cel m frecv asoc cu porci
Contaminare frecv a apei i solului cu fecale i urin anim bolnave sau asimpt
E.tonsillarum ap; amigdale porci sntoi
42 Erysipelothrix rhusiopathiae 6
 VP, RM
Nu prod IND, nu hidroliz URE
Prod H2S pe TSI
41 Habitat natural
E.rhusiopathiae larg rsp n nat
Rezistent la cond nefav de mediu (temp sczute, pH alcalin)
Parazit mamifere, psri, pete; cel m frecv asoc cu porci
Contaminare frecv a apei i solului cu fecale i urin anim bolnave sau asimpt
E.tonsillarum ap; amigdale porci sntoi
42 Erysipelothrix rhusiopathiae

Caractere microscopice
BGP fin, nesporulat, imobil, cu tendin la decolorare

Caractere de cultivare
ASg, 35-37C, 5-10% CO2
colonii mici, transparente, -hemolitice
43

44

45 Erysipelothrix rhusiopathiae
Factori de virulen
hialuronidaza
neuroaminidaza
adezine
structur similar capsulei
46 Semnificaie clinic E.rhusiopathiae
Zoonoz
Multe anim (curcani, porci) sunt purt sn n tract digestiv/amigdale
Erizipel porcin acut/cronic
Inf cutanat
Artrit
Septicemie
Endocardit
Inf transm la om cel m frecv prin ingestie de material contaminat
ERIZIPELOID
Inoculare prin escoriaii cutanate, plgi, mucturi pe mini sau brae la indivizi
ce manevreaz anim sau produse animale
Boal profesional (vet, mcelari, pescari)
Celulit localizat care ap n 2-7Z n jurul locului de inoculare
Lez violacee i dureroas, indurat (edem), inflamat (fr supuraie), cu marg
bine delimit
Limfadenit regional, artrit adiacent
Diseminare i endocardit n sp la imunocompromii (progn rezervat)
Nu apare imunitate dup boal
47

48 Diagnostic de laborator
Recoltare, transport, conservare produse patologice
Biopsie (derm) din lez cut (antisepsie nainte de recoltare) bact localiz profund
n es s.c. de la marg lez
Exs din supraf lez nu este util
HC
Examen microscopic
Val redus
BGP lungi, subiri n es unui individ cu istoric concordant sugestiv pt erizipeloid
Detectare rapid
PCR specific de gen 7
 Recoltare, transport, conservare produse patologice
Biopsie (derm) din lez cut (antisepsie nainte de recoltare) bact localiz profund
n es s.c. de la marg lez
Exs din supraf lez nu este util
HC
Examen microscopic
Val redus
BGP lungi, subiri n es unui individ cu istoric concordant sugestiv pt erizipeloid
Detectare rapid
PCR specific de gen
Izolare
ASg/ACh, bulion tripticaz-soia, bulion Schaedler
35C, aerob sau n 5% CO2, 7Z
Col ap n 1-3Z, punctiforme (<0,1-0,5mm) ASg, 24h
48h 2 tipuri col: 1. mici, S, convexe, circulare; 2. mai mari, R, plate, mai opace,
cu contur nereg; hem
49

50 Diagnostic de laborator
Identificare
Fr Gram col ASg 24h
Bact GP, dar se pot decol uor i ap GN cu granulaii GP
Bacili/cb, uneori n sc lanuri (col S), filam (col R)
Id bioch
Cat-
LAC, H2S +
NIT, URE, ESC, GEL, XYL, MAN, MAL, SUC
API Coryne, VITEK
Dif de genuri nrudite
E.rhusiopathiae prod H2S
Listeria cat+, mob, ESC+, non hem
Difterimorfi, streptococi morfol celulei
Tipare
Nu este disponibil n lab clin
22 serovaruri (Ag somatice termostabile)
Maj izolatelor serovar 1, 2
Sensibilitatea la antibiotice
S - P, Cef, CM, IMI, TE, C, E, FQ
R AG, sulfonamide, VA
51 Erysipelothrix rhusiopathiae
Tratament
P, AM, Cefalosporine G3, FQ
nu este sensibil la VA

Epidemiologie
sursa de infecie gazda natural (zoonoz)
transmitere - direct
boal profesional
receptivitate crescut la alcoolici, persoane imunodeprimate

Profilaxie
msuri nespecifice
52 Lactobacillus
53 Lactobacillus
BGP fac anaerobi
90% flora vaginal normal a femeii adulte
107-108 UFC/g lichid vaginal
8
 receptivitate crescut la alcoolici, persoane imunodeprimate

Profilaxie
msuri nespecifice
52 Lactobacillus
53 Lactobacillus
BGP fac anaerobi
90% flora vaginal normal a femeii adulte
107-108 UFC/g lichid vaginal
Regleaz ecosistemul vaginal
Prezena lor scade incidena vaginozei bacteriene, gonoreei, ITU, HIV
Aderarea lactobacililor la cel epit vaginale previne inf tract urogenital prin
Excluderea atarii i a colonizrii vaginale cu alte microorgs
Prod acid lactic
Prod bacteriocine
Prod H2O2
54

55 Lactobacillus
Maj izolatelor cl sunt microaerofile, dar unii sunt oblig anaerobi
Rareori patogeni; pot avea rol benefic n trat vaginozei bacteriene i diareei
Pot prod endocardit, meningit n.n., corioamniotit, inf pleuropulm, bacteriemie
Pot fi implic n prod cariei dentare
Id lactobacili anaerobi la niv de sp extrem de dificil i rareori indicat (patogenitate
redus)
Suprainf cu Lactobacillus posibil doar la gazda imunocompromis

56 Lactobacillus
Identificare
Asp microscopic: BGP lungi, cu laturi paralele (~ Bacillus spp.)
Cat-
Prod acid lactic din GLU (GC)
Lactobacillus rhamnosus R la VA
L.acidophilus S la VA