Biomateriale i biocompatibilitate

Pocaznoi Ion., Verestiuc Liliana

Biomateriale pentru
ingineria tisular i organe
artificiale
Modulul 9
 Biomateriale pentru ingineria tisular i organe artificiale, 9
sl.2

CUPRINS scopul modulului nr.9

Biomateriale pentru inlocuirea si regenerarea tesuturilor biologice.

Ingineria tisular i scopul aplicaiilor medicale. Sarcinile tehnologiilor
ingineriei tisulare. Domeniile de aplicaii a utilizrii tehnologiilor din
ingineria tisular. Criteriile de aplicabilitate a materialelor tisulare
biocompatibilitatea. Hidroaxipatitul natural. Materiale pentru
chirurgia dentar. Autotransplanturile. Materiale pentru chirurgia
ortopedic.
VII.2. Tesuturi bioartificiale. Metodele i tehnologiile de obinere.
Noi directii in domeniul biomaterialelor pentru tesuturi.
 Biomateriale pentru ingineria tisular i organe artificiale, 9
sl.3

Scopul Ingineriei tisulare: Restabilirea funciei prin distribuirea

elementelor vii care devin integrate n corpul pacientului.
(Joseph P. Vacanti 1999).

Ingineria tisular:
Aplicaie terapeutic - esutul crete n corpul pacientului sau n afara
lui i ulterior este transplantat.
Aplicaie diagnostic - esutul este crescut in vitro i este utilizat
pentru testarea metabolismului n prezena unor substane
medicamentoase, toxicitatea i patogenitatea lor.
 Biomateriale pentru ingineria tisular i organe artificiale, 9
sl.4

ASPECTELE INGINERIEI TISULARE Colaborri:

Ingineria tisular: Ingineria tisular necesit
domeniu multidisciplinar care colaborare interdisciplinar ntre:
include: Inginerie,
- biologia, Chimie,
- medicina i Biologie celular,
- ingineria. Proteomica,
Clinicienii,
Scop: promovarea calitii vieii
umane prin: tiina materialelor,
Fizic,
- restabilirea,
Imagistic,
- meninerea sau ameliorarea
funciei esuturilor sau organelor. Genomic.
 Biomateriale pentru ingineria tisular i organe artificiale, 9
BAZA INGINERIEI TISULARE
1. Biomaterialele:
- materiale noi, neviabile care sunt
prevzute pentru organizarea
creterii i diferenierii celulelor n
procesul de formarea a unui esut
funcional (matrice, spongii -
sintetice sau naturale)
2. Celulele: Sursa, Diferenierea,
Purificarea.
- metode, protocoale, care trebuie s
asigure numrul necesar de celule, i
diferenierea lor n dependen de
esutul lezat (celule autologice, alogene,
xenogene, celule obinute prin inginerie
i prin manipulare imunologic).
sl.5
ASPECTE:
3. Biomoleculele: includ factori de cretere
sau genele lor, factori de difereniere i
proteine morfogenetice.
4. Aspectele de Design ingineresc:
- includ expansia celulelor pe structuri 2-D,
creterea esuturilor 3-D, bioreactore,
stocarea celulelor i esuturilor i
distribuirea lor.
5. Aspectul biomecanic: determin
proprietile esuturilor native;
identificarea unor proprieti minime
necesare esutului ingineresc,
semnalelor mecanice care influeneaz
esuturile ingineriei tisulare, eficacitatea
i sigurana acestor esuturi.
 Biomateriale pentru ingineria tisular i organe artificiale, 9
sl.6

6. Informatizarea pentru susinerea ingineriei tisulare: analiza secvenelor de gene i

proteine, analiza expresiei genice, expresiei proteinelor.
Analiza interaciunilor, analizarea cantitativ a celulelor i esuturilor, modelarea
tisular i celular, manufactura digital a esuturilor, sisteme automatizate de
asigurare a calitii, interfeelor.
FENOMENE n cazul bioesuturilor:
Bioactivitatea - reprezint aciunea pe care o exercit asupra activitii celulei
(respiraie, metabolism, difereniere, proliferaie) att materialul, ct i produsele
care apar la biodegradarea lui n organism.
Materialul sub acest aspect poate fi bioinert (care are o aciune minim asupra
celulelor (nu exist materiale absolut bioinerte)) pn la bio- sau citotoxic.
Bioactivitatea materialului depinde de componena chimic, viteza de degradare,
produsele care apar la degradare.
Adaptarea celulei la mediul nconjurtor este determinat de parametri fiziologici
(homeostaza intern): temperatur, pO2, pH, concentraia K i Na.
 Biomateriale pentru ingineria tisular i organe artificiale, 9
sl.7

Biocompatibilitate n cazul ingineriei esuturilor:

- Este o particularitate a biomaterialului care reflect posibilitatea coexistenei
lui cu biosistemul (organismul viu) prin pstrarea funciilor normale ale
esuturilor i posibilitii de regenerare (aprecierea biocompatibilitii poate fi
efectuat numai n experimente in vivo).
- Biorezisten este capacitatea biomaterialului de a rezista pentru o
perioad anumit de timp la contactul i aciunea esuturilor adiacente
exprimata prin meninerea proprietilor sale fizice, chimice i mecanice.
- Citochinele - un grup de proteine i peptide care sunt utilizate n organism n
calitate de componente semnal (similare hormonilor) care faciliteaza
comunicarea ntre celule i reprezint multiple proteine i glicoproteine de
dimensiuni mici, cu masa de 8-30 kDa.
 Biomateriale pentru ingineria tisular i organe artificiale, 9
sl.8

Citochinele utilizate n clinic:

Interferon a (Roferon, Alferon-N, Intron A) terapie antiviral
(chronic Hepatatis B and C), leucemiile.
Interferon b (Betaseron) scleroza multipl.
G-CSF (Neupogen) tratament de suport n transplantarea mduvei
osoase.
Interferon g (Actimunne) granulomatoza chronic.
Epo (Procrite) maladii renale.
GM-CSF, IFN-g, IL2, TNF au aciune toxic cnd sunt aplicate
sistematic.
 Biomateriale pentru ingineria tisular i organe artificiale, 9
sl.9

Problemele (intrebrile) inginerii tisulare:

Trebuie esutul pentru implantare s fie produs in vitro sau in vivo?
Ce tram (suport) trebuie utilizat?
Din care material trebuie sa fie produs, caracterisitca porilor,
capacitatea de resorbie, proprietile mecanice?
Cum sa fie produs?
Ce tip de celule trebuie s fie utilizate?
Sursa de celule?
Expandarea pn la numrul necesar fara s-i schimbe fenotipul?
Ce substane regulatorii sunt necesare pentru stimularea proliferrii
celulare i sinteza matricei pentru facilitarea diferenierii celulelor
stem?
 Biomateriale pentru ingineria tisular i organe artificiale, 9
N Vitro:
Producerea esutul definitivat in vitro prin
plasarea celulelor ntr-o matrice i apoi
implantarea n esutul corpului
recipientului.
Creterea grefelor in Vitro.
Avantaje:
- Evaluarea esuturilor pn la
implantare.
Dezavantaje:
- Pentru incorporare esutul trebuie sa
fie remodelat, fiindc nc nu este
posibil arhitectura de stres in vitro.
sl.10
N Vivo:
Se implanteaz in vivo biomatricea cu
sau fr celule n corpul uman pentru
a facilita regenerarea esutului in vivo
Creterea grefelor In Vivo.
Avantaje:
- Incorporarea i formarea sub
aciunea factorilor reglatori
intracorporali incluznd i aciunea
mecanic.
Dezavantaje:
- Deplasarea i degradarea sum
aciunea stresului mecanic in vivo .
 Biomateriale pentru ingineria tisular i organe artificiale, 9
sl.11

Celule i matrice necesare pentru ingineria tisular.

Connective Tissues
(Musculoskeletal) Mitoz Migrare Biosintez Contracie

Osul + + + +
Cartilajul articular - - - +
ligamente/ tendoane + + ? +
Discul Intervertebral ? ? _ +
Meniscul ? ? ? +
 Biomateriale pentru ingineria tisular i organe artificiale, 9
CERINE:
- Mitoza inadecvat necesit
celule din exterior.
- Migrarea inadecvat necesit
utilizarea unei rame, matrice.
- Biosinteza inadecvat necesit
anumite gene sau factori de
cretere.
sl.12
MATERIALE:
Naturale colagenul.
Matrice tisular acelular
(submucoasa intestinal, etc.)
Polimeri sintetici:
poliglucozide, polilactide.
Ceramice: biosticl: LiCaP,
Ag2O, SiCaP, sIcAPNa-300),
hidroxiapatite
 Biomateriale pentru ingineria tisular i organe artificiale, 9
sl.13

INGINERIA
Expandarea celular
TISULAR
Colectarea celulelor din corp
O matrice corespunztoare
cu factori de cretere i
citochine necesare

Reimplantarea esutului n
locul deteriorat

Aplicarea n cultur
celular
 Biomateriale pentru ingineria tisular i organe artificiale, 9
sl.14

Celule: - Hidrogel,
- Differeniate - Spongii,
- Stem adulte Celule Spongii nanostructurate
Spongii autoasamblate
- Embrionare - Spongii fabricate din
materiale solide.
Ingineria
tisula
-Plasarea Molecule mici.
dinamica a
celulelor, Factori de cretere,
Creterea masei Bioreactoare polipeptide
Semnale
transferabile, Acizi Nucleici (ADN,
Stimuli mecanici. ARN, oligonucleotide)
 Biomateriale pentru ingineria tisular i organe artificiale, 9
sl.15

CERINE FA DE CONFIGURAREA 3D A MATERIALULUI:

Pentru ca un material s regenereze un material destinat esuturilor
trebuie s: CERINE:
- stimularea creterii celulelor/differenierea,
- ofere taarea celulelor.
n TEHNOLOGIA medical este necesar:
- depozitarea matricei extracelulare.
Pentru utilizare ca un template pentru creterea esuturilor in 3D pentru
implantare: CERIN:
- resorbabilitate!
Pentru producerea medicamentelor insolubilitate!
 Biomateriale pentru ingineria tisular i organe artificiale, 9
sl.16

MATERIALE: POLIMERI NATURALI:

Polimeri sintetici: - Elastin,
Polyglycolic acid (PG): - Gelatin colagen,
- Highly crystalline, hydrophilic, byproduct is glycolic - Colagen fibrilar,
acid
- Amestecuri de colagen,
Polylactic acid (PLA):
- Fibrinogen.
Hydrophobic, temperatur joas de topire;
UTILIZRI:
Produs secundar - lactic acid
Polydioxanone (PDO):
Polimeri sintetici:
structur cristalin superioara, PGA, PLA and PLGA cei mai frecveni utilizai,
Polycaprolactone (PCL): PDO similar amestecului din Elastin -
Colagen, (limitat de memoria formei),
proprietate de policristal,
PCL - foarte elastic i se amestec frecvent cu
uor co-polimerizat, alte materiale,
Produs secundar de acid caproic acid Ofer caracteristici fizice la scal nanometric.
Amestecuri: PGA-PLA, PGA-PCL ,PLA-PCL , PDO- Polimeri naturali:
PCL
Collagen Type I & III + PDO: cel mai bun amestec
pentru vasele de snge.
 Biomateriale pentru ingineria tisular i organe artificiale, 9
CERINE FA DE MATRICE:
1. Matricea osoas demineralizat -
reprezint substratul organic al
esutului osos, compus din fibre de
colagen i substratul de baz glucido-
proteic.
2. Matricea osoas - din os compact,
demineralizat n soluie de acid
clorhidric, ulterior fiind pstrat n
soluie de alcool etilic.
sl.17
BIOREACTOARE:
celulele stem pot fi cultivate n
"margele,
diferentierea se poate produce n
margele de cultur n mediu definit -
de exemplu la os,
producia scalabil de celule stem
poate fi realizat n cultura 3D.
Avantajele Bioreactorului:
metod universal,
echipament automatizat,
reducerea timpului de cretere de la
(45 la15 zile),
road crescut (+500%) pentru
producie industrial.
 Biomateriale pentru ingineria tisular i organe artificiale, 9
sl.18

1.Ce este Nanotehnologia?

2.De ce se folosete nanotehnologia pentru ingineria tisular?
3.Cum nanotehnologia se aplic n ingineria tisular?
Cel mai uor material descoperit, metalul este din 99,9% de aer Cel
mai uor de material din lume - cu o densitate de 0,9 mg / cm.cub. -
aproximativ o sut de ori mai usor decat Styrofoam .
Aerographite
- conductor
 Biomateriale pentru ingineria tisular i organe artificiale, 9
sl.19
NANOTEHNOLOGII (PERSPECTIVE ZnO2 - aerografit
DE BIOMATERIALE):
Reele tetrapode ale oxidului de zinc (ZnO2) formeaz
o baz ideal pentru materialul robust - Aerographite.
(http://www.electroline.com.au/articles/55944-Aerographite-a-
conductor-as-light-as-air).
FUNCIILE COLAGENULUI n esut:
- Asigur rezistena esuturilor conjunctive la tensiune i
traciune
- Asigur plierea i extensibilitatea esuturilor conjunctive,
- Limiteaz micrile esuturilor i organelor de vecintate,
- Induce agregarea trombocitelor,
- Regleaz diferenierea celular,
- Suport pentru structurile suprajacente,
- Substrat pt. depunerea cristalelor de hidroxiapatit n esutul
osos.
 Biomateriale pentru ingineria tisular i organe artificiale, 9
sl.20

1.Nanotehnologia?
2.De ce se folosete nanotehnologia pentru ingineria tisular?
3.Cum nanotehnologia se aplic n ingineria tisular?
Inginerie tisulara si nanomateriale!
Scopul ingineriei tisulare i a medicinei regenerative:
- Dezvoltarea substituenilor biologici care insntoesc, menin sau
mbuntesc esutul deteriorat i funcionalitatea organului.
Nanotehnologia si bionanomaterialele pot imita proprietiile de suprafa
(incluznd topografia, energia, etc. ) esutului natural.
Nanomaterialele dispun de proprieti mai bune citocompatibile, mecanice,
electrice, optice, catalitice i magnetice fa de materialele convenionale.
Nano-esafoade biomimetice pentru mbuntirea ingineriei tisulare
vasculare, nanomaterialele de viitor pentru aplicatii ortopedice.
 Biomateriale pentru ingineria tisular i organe artificiale, 9
Scafold (matricea) - concept
central in ingineria tisulara!
- Furnizeaz structura suport pentru
aderarea i cresterea celulelor,
- Pot avea forme i compoziii diferite
(spum, fibre, reele, geluri)
- Pot fi obinute dintr-o gam larg de
materiale,
- Sunt uzual biodegradabile.
Polimeri naturali biodegradabili:
celuloza, chitina, chitosan,
dextran,colagen, gelatina, fibrina,
fibrinogen, cazeina, etc.
sl.21
Biomaterialele si nanotehnologia.
Un nanomaterial este orice forma de
material care este compus din parti
funcionale distincte cu dimensiuni
(macr una dintre dimensiuni)de ordinul
100 nm sau mai putin. (D.F.WilliamsThe
relationship between biomaterials and
nanotechnology,Biomaterials 2008, 29,1737-1738)
Dezvoltarea nanotehnologiei are o
mare influen asupra vieii, dar efectul
micro/nanodimensiunilor asupra
organismelor biologice nu este total
cunoscut.
Efectul nanodimensiunii materialelor
asupra organismelor vii:
- ne-specific,
- biointeractiv, i
- Include aspecte fizice.
 Biomateriale pentru ingineria tisular i organe artificiale, 9
sl.22

Criterii pentru utilizarea SUPERIORITI:

structurilor scaffold in ingineria
tisulara: Promoveaza adeziunea celular,
Creste proliferarea celular,
Retenia funciei celulei
difereniate,
Biodegradabilitatea,
Biocompatibilitatea,
nalt porozitate,
Raport mare suprafa/volum,
Rezisten mecanic,
Distribuie uniform i pori
Interconectai.
 Biomateriale pentru ingineria tisular i organe artificiale, 9
Natura bilaterala a nanomaterialelor
- Natura bilateral a
nanoparticulelor i
nanomaterialelor depinde de
dimensiunea lor i are efecte
pozitive i negative.
- Micro/nanoparticulele sunt
biointeractive cnd dimensiunea
determin rspunsul biologic. Sub
10 mkm se pot stimula inflamri a
esutului.
- Problem n expunerea pe termen
lung ori, n cazul unei cantiti mari
(osteoliza cauzat de abraziune n
ncheietutile artificiale).
sl.23
RISCURILE nanotehnologiei:
- Potenial uria de influenare
pozitiv a calitii vieii,
- Nanotehnologia este asociat cu
risc asupra sntii! Sunt efecte
adverse ale nanoparticulelor!
RISCURI:
GENERAREA NANOPARTICULELOR:
- Distribuia i aciunea n
organismul uman nu este
clarificat!
(prin inhalare, toxicologia i
patologia)!
 Biomateriale pentru ingineria tisular i organe artificiale, 9
sl.24

ANALIZA RISCULUI Ce valideaz

Riscul potenial al nanobiomaterialelor DEPINDE DE
expunerea esuturilor umane: BIOcompatibilitatea?
1. La miscarea nanoparticulelor in perioada :
- elaborrii lor (ruta pulmonar, dermic, oral sau ocular);
- dup implantare apar nano-particulele (eliberate Noi materiale descoperite,
medicament dendrimeri) ori, biomateriale- nanoparticule,
prin produi de degradare solubili sau insolubili. Noi dispozitive medicale,
2. Caracterizarea fizico chimic a nanobiomaterialelor:
Noi terapii prin inginerie
- Dimensiunea i distribuia dimensiunii,
tisular,
- Structura cristalin,
- Compoziia chimic, - permit lansarea pe pia a
tuturor produselor care intr n
- Energia de suprafa,
contact cu corpul, reprezentnd
- Biodegradare in vitro (ISO 10993),
un aspect important al
In vitro adsorbie de proteine, politicilor de sntate public.
Teste generale de biocompatibilitate.
Biomateriale pentru ingineria tisular i organe artificiale, 9
sl.25

Citoxicitatea
Hemocomp
Sensibilizare
atibilitate
EFECTUL
BIOLOGIC Imitare
Implantare
Genotoxicit Toxicitate Toxicitatea
ate subcronic sistemic
 Biomateriale pentru ingineria tisular i organe artificiale, 9
EVALUARE I TESTARE:
1. Cerine privind bunstarea animalelor,
2. Teste pentru Genotoxicty, cancerigen, i toxicitatea
pentru reproducere,
3. Selectarea testelor pentru interaciunile cu sngele,
4. Teste pentru citotoxicitate - n vitro. Metode,
5. Teste pentru efecte locale dup implantare,
6. Selectarea i calificarea materialelor de referin
pentru testri biologice,
7. Cadru pentru identificarea i cuantificarea
potenialelor produi de degradare,
8. Testare pentru iritare i sensibilizare,
9. Testare pentru toxicitate sistemic,
10. Prepararea materialelor de referin,
11. Identificarea i cuantificarea produselor de
degradare din polimeri.
sl.26
continuare
12. Identificarea i cuantificarea
produselor de degradare din ceramic,
13. Identificarea i cuantificarea
produselor de degradare din
acoperirile din metale i aliaje,
14. Stabilirea limitelor admisibile
pentru substane SOLUBILE
15. Caracterizarea chimic a
materialelor
16. Caracterizarea fizico-chimic,
mecanic i morfologic,
17. Principiile i metodele de testare
imunotoxicologic a dispozitivelor
medicale.
 Biomateriale pentru ingineria tisular i organe artificiale, 9
sl.27

Reprezentarea ierarhic a ANEXA

testrii biocompatibilitii
Relevan,
Cerere de materiale,
Rezultate clinice,
Rezultate clinice la VIVO,
Studiile pe animale n VIVO,
n sisteme de culturi
celulare n VITRO.
 Biomateriale pentru ingineria tisular i organe artificiale, 9
sl.28

Testele de biocompatibilitate recomandate ISO:

(depind de timpul de contact cu structura vie)
MATERIAL TIMP DE CONTACT
Ac sering 1 2 sec
Lentila de contact 10 sec
Tije / urub - os 12 ore 30 zile
nlocuire total de old 3 12 luni
Cristalin intraocular 30 ani
 Biomateriale pentru ingineria tisular i organe artificiale, 9
sl.29

Dinamica biocompatibilitii: Factori care afecteaza

biocompatibilitatea
- Un implant care astzi este oseointegrat, s-ar implanturilor:
putea ca mine sa nu mai fie, Chimia suprafeei,
- esutul gazd poate suferi mbatranire sau Topografia suprafeei,
mbolnavire,
Procesele de adsorbie la
- Materialul implantabil poate s sufere suprafa,
schimbri datorate fenomenelor de oboseal,
coroziune i uzur. Balana hidrofil/hidrofob,
Biocompatibilitatea nu este masurabil la modul Eliberarea de ioni,
absolut, evaluarea fiind relativ, deoarece, poate Interacii chimice la
fi comparat biocompatibilitatea unui material biointerfa,
cu a unui material de referin n condiii
Produii de degradare.
experimentale standard.
 Biomateriale pentru ingineria tisular i organe artificiale, 9
sl.30

Sistemul de parametri de care depinde biocompatibilitatea

TOXICITATE
Reacia
biologic la Biodegradare
implant

BIOCOMPATIBILITATE
Reacia Proiectul
chimic la (design)
implant
Sterilitate i
operaia
 Biomateriale pentru ingineria tisular i organe artificiale, 9
sl.31

Nanobiomateriale biocompatibilitate. Biosuprafaa determinant n

- Cyto- si genotoxicitatea particulelor
ultrafine TiO2, inhibiie celular.
- Testele depind de doza UF-TiO2 i de
dimensiuni (de la 20-250 nm),
- Nanoparticulele de Au (GNPs), 5-25
nm. GNPs se consider c pot detecta
cancerul, chiar n absena
funcionalizrii, induc rspuns celular
specific.
- Celule Lymfoblaste.
evaluarea bioperformanei
Suprafaa - prima interfa ntre
biomaterial / esut,
cel mai important factor pentru
succesul implantului.
Condiii dinamice din mediul biologic:
Schimbare continua a biosuprafetei -
la fiecare pas, materialul este
condiionat de componentele
fluidelor biologice.
 Biomateriale pentru ingineria tisular i organe artificiale, 9
sl.32

PARAMETRII BIOSUPRAFEEI: Nanobiomaterial : un

biomaterial compus din
Aria suprafetei - determin spaiul valabil pentru componente la scal
celulele care vor adera - integrare esut. nanometric (1 A = 1000
ARIE MAI MARE - creterea porozitii (n limita nm), de ordinul mai mic
n care rezistena permite) . dect 400-500 nm
Udarea biomaterialului.
Cristalinitatea:
- suprafaa hidrofil - benefic pentru majoritatea
biomaterialelor; - poate determina un
- ncurajeaz formarea unui film stabil fluid pe rspuns specific la
material, care va descuraja aderarea bulelor de gaz
i a bacteriilor, duntoare vieii implantului. proprietile mecanice i
- unghi de contact mic. termice;
- suprafa hidofob - face ca pictura de ap s - poate stimula
ude suprafaa pe o poriune ct mai mic,
activitatea celulelor.
- deci unghiul de contact s fie maxim.
 Biomateriale pentru ingineria tisular i organe artificiale, 9
sl.33

Pansament care poate fi aplicat Suporturi polimerice destinate

n zone cu arsuri grave sau pe ingineriei esutului adipos i
ulceraii (Iai) cartilaginos: colagen
sericina+HA/CS

http://superwomen.ro/producerea-
pielii-artificiale-umane-din-iasi-va-fi-
gata/#
 Biomateriale pentru ingineria tisular i organe artificiale, 9
sl.34

Surse de informaie:
1. http://ebooks.cambridge.org/ebook.jsf?bid=CBO9780511997839.
2. Biomaterials and regenerative medicine.// Edited by Peter X. Ma. Publisher:
Cambridge Universitz Press, 2015. Online ISBN:9780511997839.
3. Advanced Biocompatible Structures for Prospctive Bioengineering: Concepts and
Strategies, coordonatori Prof. Dr. Marieta Costache si Acad. Dr. Maya Simionescu.
//Editura Academiei Romane, ISBN 978-973-27-2317-3.