Mannitol Salt Agar (Chapman Solid)

Descriere
Mannitol Salt Agar, recomandat de Chapman, este un mediu utilizat pentru izolarea stafilococilor din prelevate
contaminate. Este selectiv prin cantitatea ridicata de clorura de sodiu, care inhiba majoritatea speciilor, exceptie
facand speciile halotolerante (ex. Vibrio spp.). Majoritaea tulpinilor de S.aureus fermenteaza manitolul producand
colonii galbene, caracteristica ce poate fi observata si la unele specii de stafilococi coagulaza-negativi. Degradarea
manitolului de S. aureus produce acizi care schimba culoarea mediului de la rosu la galben. Este necesar confirmarea
S. aureus si prin alte teste: coagulaza, proteina A, DN’ aza, termonucleoza, aglutinare latex. Acest mediu este
recomandat de European Pharmacopeia.

Compozitie g/litru
- extract de carne de vita 1.0
- peptona echilibrata 10.0
- clorura de sodium 75.0
- D- manitol 10.0
- Agar No.2 12.00
- rosu fenol 0.025

Agarul este agentul de solidificare. Peptona si extractul de carne de vita asigura azotul,vitaminele, mineralele si
aminoacizii esentiali pentru crestre.Manitolul(carbohidrat) este sursa de energie ,iar rosu fenol este indicatorul de pH.
Clorura de sodiu inlocuieste esentialul de electroliti pentru transport si balanta osmotica.

Aspect: Placi cu mediu solid de culoareroz-rosu, omogen, suprafata neteda.

pH: 7.4 ± 0.3

Mediul este steril si grosimea mediului este de 4 mm. Placile sunt marcate cu numar lot si data expirarii.

Metoda de reconstituire
Se cantaresc 108 g de pulbere si se dizolva intr-un litru de apa deionizata. Se asteapta 10 min pentru absorbire, se
amesteca si se sterilizeaza la autoclav pentru 15 min la 121ºC. Se raceste la 47ºC inainte de turnarea in placi Petri.
In conformitate cu European Pharmacopeia se incubeaza aerob la 30ºC-35ºC pentru 18-72 ore. Produsul mai poate fi
folosit si pentru alte determinari la 37ºC pentru 48 ore.

Depozitare: Placi Petri, in ambalajul original care nu afost deschis: intre 2ºC- 8ºC, la intuneric,pana la data expirarii;
dupa deschiderea ambalajului -pana la 7 zile
Incubare: In conformitate cu European Pharmacopeia se incubeaza aerob la 30ºC-35ºC pentru 18-72 ore.
Produsul mai poate fi folosit si pentru alte determinari la 37ºC pentru 48 ore.

Interpretarea cresterii microorganismelor dupa insamantare pe M.S.A

Organism Dim coloniei(mm) Culoare Altele
S. aureus 1.5- 2.0 Galben
Alti stafilococi 1.0- 1.5 Alb sau galben Unii fermenteaza manitolul
S.epidermis 1.-1.5 roz-rosu fara
halou
E.Coli Absenta
cresterii

Tulpini de referinta pentru controlul calitatii mediului:

-S. aureus (crestere foarte buna) ATCC 25923
-Escherichia coli (absenta cresterii) ATCC 25922
-S.epidermis (crestere foarte buna ) ATCC 25922