Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Utilizare:
Mediul Phenylalanine Agar se foloseste pentru diferentierea bacteriilor din speciile Proteus si Providencia de alte Enterobacteriacee pe baza deaminarii
fenilalaninei.
Sumar:
Mediul Phenylalanine Agar este o modificare a mediului folosit initial de catre Ewing si colaboratorii. Speciile Proteus, Providencia si Morganella
deamineaza fenilalanina si formeaza acidul fenilpiruvic prin actiune enzimatica.
Principiu:
Extractul de drojdie furnizeaza nutrientii esentiali necesari cresterii microorganismelor. Clorura de sodium mentine echilibrul osmotic. DL-fenilalanina
este substratul enzimei deaminaza care transforma fenilalanina in acid fenilpiruvic. Adaugarea de cateva picaturi de clorura ferica confera o culoare
verde indicand un rezultat pozitiv al testului.
Formula*:
Ingrediente in grame pe litru
Extract de drojdie 3.0
Clorura de sodiu 5.0
DL-fenilalanina 2.0
Fosfat disodic 1.0
Agar 15.0
pH final (la 25oC) 7,3 + 0,2
* Formula ajustata sa satisfaca parametrii de performanta
Pastrare si stabilitate:
Flaconul nedeschis se pastreaza la 22-30oC. In conditii optime mediul are o perioada de valabilitate de 5 ani. La deschiderea pentru prima data a
flaconului notati data pe eticheta, in locul specificat pentru aceasta. De fiecare data dupa ce luati cantitatea de mediu necesara reinchideti ermetic
pentru a evita hidratarea.
Instructiuni de preparare:
1. Suspendati 26 grame de pulbere de mediu in 1000ml apa distilata
2. Amestecati complet
3. Fierbeti sub agitare frecventa pentru a dizolva complet pulberea. Nu incalziti excesiv.
4. Distribuiti in eprubete si sterilizati prin autoclavare la 121 oC (presiune de 15 lbs) pentru 15 minute.
5. Permiteti mediului sa se raceasca, in pozitie inclinata.
Controlul calitatii:
Aspectul mediului deshidratat – Culoare galben deschis, pudra care curge.
Aspectul dupa preparare – Gel de culoare portocaliu deschis, usor opalescent.
Raspunsul Culturii – caracteristicile culturii dupa 18-24 ore la 35-37 oC.
Organisme (ATCC) Crestere Deaminarea fenilalaninei
Enterobacter aerogenes (13048) luxurianta -
E. coli (25922) luxurianta -
Proteus vulgaris (13315) luxurianta +
Proteus mirabilis (25933) luxurianta +
Providencuia alcalifaciens (12013) luxurianta +
Standardele de performanta ale acestui mediu sunt in conformitate cu standardelor NCCLS de asigurare a calitatii pentru medii de cultura
microbiologica, preparate.
Procedura:
1. Eprubetele sunt inoculate cu o cantitate mare de inocul apoi incubate aerobic la 35+2 oC timp de 18-24 ore.
2. Dupa perioada de incubare, adaugati cateva picaturi de solutie apoasa de clorura ferica 10%.
Interpretarea rezultatelor:
Aparitia culorii verde indica un rezultat pozitiv al testului.