Sunteți pe pagina 1din 63

MEDII DE CULTURA

suporturi materiale si nutritive care servesc la cultivarea bacteriilor amestecuri de substante care asigura cultivarea microorganismelor

Scopuri
Izolarea in cultura pura Identificare Diagnostic, tratament Producerea industriala a unor substante (prepararea vaccinurilor) Controlul sterilitatii sau incarcarcaturii microbiene a unor elemente de mediu (apa, alimente)

Conditii
1. Surse de C, N, apa, substante minerale, energie, substante nutritive, factori de crestere 2. pH optim, temperatura optima 3. Aero/anaerobioza 4. Sterile

Ingrediente
Peptona Extracte sau infuzii de carne Agenti de solidificare: agar Indicatori de pH: turnesol, rosu fenol Agenti selectivi Zaharuri

Prepararea mediilor de cultura


Amestecul ingredientilor: proportie, ordinea indicata Ajustarea pH-ului Repartizarea in recipiente adecvate Sterilizarea Controlul sterilizarii si al calitatii mediului

Clasificarea mediilor de cultura


Dupa consistenta: lichide
solide semisolide Dupa provenienta: naturale sintetice Dupa compozitie si scop: simple complexe speciale

Clasificarea mediilor de cultura


Medii complexe
de utilitate generala: - uzuale

- cu proteine native
Medii speciale
selective de imbogatire anaerobi teste biochimice

Medii simple: Apa peptonata Bulion simplu Geloza simpla Medii complexe: bulion sange geloza sange geloza chocolatie

Medii lichide- bulion simplu


Categoria: Mediu de baz Componente: macerat de carne + pepton + NaCl 0,5% Utilizare: pentru germeni nepretenioi

Geloza simpla
Categoria: Mediu de baz Componente: bulion simplu + agar-agar

Geloza simpla
Categoria: Mediu de baz Componente: bulion simplu + agar-agar

Geloza lactozata
Categoria: Mediu diferenial Componente: geloz simpl + lactoz + albastru bromtimol Utilizare: studierea fermentrii lactozei

Geloza sange
Categoria: Mediu compus Componente: geloz simpl rcit la 45C + snge defibrinat 10-20%

Geloza socolatie
Categoria: Mediu special Componente: geloz simpl rcit la 60-80C + snge Utilizare: cultivarea neisseriilor, hemofililor

Mediul Chapman
Categoria: Mediu selectiv i diferenial (evidentiaza o proprietate biochimica a tulpinii) Componente: geloz simpl + NaCl 7,5% + manitol + rou fenol Utilizare: selectiv pentru stafilococ

Hemoliza

PROPRIETATI DE CULTURA

ATMOSFER A DE CO2 510%

Medii folosite pentru enterobacterii


(agar, lactoza, indicatori de pH) Drigalski Istrate McConkey Levine

Bacteriile care degradeaza lactoza din mediu = lactozo pozitive Bacteriile care nu degradeaza lactoza din mediu = lactozo negative

Mediul Levine
Categoria: Mediu selectiv i diferenial Componente: geloz simpl + eozin + lactoz + albastru de metilen Utilizare: cultivarea enterobacteriilor (E.coli)

GENUL ESCHERICHIA
E.COLI LEVINE E.COLI DRIGALSCHI

ADCL (Leifson)
Categoria: Mediu selectiv i diferenial Componente: geloz simpl + sruri biliare + lactoz + rou neutru Utilizare: cultivarea shigelelor i salmonelelor

E.COLI-ADCL

Fermentarea lactozei pe geloz lactozat

KLEBSIELLA GELOZA-SANGE COLONII MUCOASE

KLEBSIELLA ADCL COLONII MUCOASE

PROTEUS- INVAZIE

GENUL SALMONELLA

ADCL-H2S

HECTOEN

- Mediul BSA: vibrionul holeric - Mediul Chapman : stafilococi - Mediul Lowenstein-Jensen: bacilul TBC - Mediul OCST: bacilul difteric - Mediul Sabouraud: fungi

Mediul Chapman

Mediul Muller - Hinton


Categoria: Mediu special Utilizare: Efectuarea antibiogramelor

Mediul OCST
Categoria: Mediu de mbogire (favorizeaza
X bacteriilor, mai ales cand acestea sunt in concentratie mica)

Componente: ou + cistein + ser + telurit de potasiu Utilizare: cultivarea bacililor difterici

Mediul Sabouraud
Categoria: Mediu special Componente: geloz simpl + maltoz/glucoz + antibiotice Utilizare: cultivarea levurilor

Mediul Lowenstein-Jensen

Medii pentru anaerobi:


- Bulion cu acid thioglicolic (mediu lichid; la
suprafata se adauga ulei de parafina

- Tarozzi (mediu lichid, cu albus de ou; la suprafata se adauga ulei de parafina) - Geloza Veillon (se obtin culturi in profunzimea mediului, realizate prin incorporare) Tehnica Ott (se insamanteaza pe mediu solid, agenti reducatori si se sigileaza cu parafina)

Metode de insamantare
Insamantare = punerea in contact a unei culturi bacteriene sau a unui produs patologic cu mediile de cultura. Izolare = repicarea unei singure colonii pe alte medii de cultura cu scopul de a obtine cultura pura Cultura bacteriana = totalitatea bacteriilor crescute in/pe suprafata unui mediu de cultura

Tehnici de insamantare
Tehnica insamantarii prin epuizare:
Scop: obtinerea coloniilor izolate

Insamantarea prin intepare (pe medii solide aflate in tuburi) Insamantarea in panza

Caracterele culturii microbiene


In mediu lichid se descrie: Turbiditatea Formarea de depozite Culoarea Suprafata Medii lichide - Tulburare uniforma a mediului: E. coli - Tulburare + pelicula la suprafata: b. piocianic - Mediu limpede + pelicula: b. carbunos - Grunji: streptococul

Caracterele culturii microbiene pe medii solide


Colonia= ansamblu localizat, alcatuit din populatie pura de bacterii provenite dintr-un singur parental. Pe mediu solid se descrie: - forma coloniei - culoarea - marimea - consistenta - suprafata - emulsificabilitatea - margini - mirosul culturii

Colonii S (smooth) Colonii R (rough)

CARACTERE DE CULTURA
BACILLUS- GELOZA SIMPLA

CARACTERE DE CULTURA
BACILLUS GELOZA SANGE

GENUL CORYNEBACTERIUM

CORYNEBACTERIUM FLOARE DE MARGARETA

MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS PE MEDIUL LOWENSTEIN

PIGMENT

Pigment

HEMOLIZA
STAFILOCOC
- COMPLETA

- CALD-RECE (se clarifica la 4C)

STREPTOCOC
- INCOMPLETA

VERZUIE - COMPLETA

Clasificare hemoliza pe geloza sange


hemoliza :
= streptococi -hemolitici hemoliza incompleta, verzuie streptococi nehemolitici,

CORYNEBACTERIUM TINSDALE