MEDII DE CULTURA

suporturi materiale si nutritive care servesc la cultivarea bacteriilor amestecuri de substante care asigura cultivarea microorganismelor

Scopuri
Izolarea in cultura pura Identificare Diagnostic, tratament Producerea industriala a unor substante (prepararea vaccinurilor) Controlul sterilitatii sau incarcarcaturii microbiene a unor elemente de mediu (apa, alimente)

Conditii
1. Surse de C, N, apa, substante minerale, energie, substante nutritive, factori de crestere 2. pH optim, temperatura optima 3. Aero/anaerobioza 4. Sterile

Ingrediente
Peptona Extracte sau infuzii de carne Agenti de solidificare: agar Indicatori de pH: turnesol, rosu fenol Agenti selectivi Zaharuri

Prepararea mediilor de cultura

Amestecul ingredientilor: proportie, ordinea indicata Ajustarea pH-ului Repartizarea in recipiente adecvate Sterilizarea Controlul sterilizarii si al calitatii mediului

Clasificarea mediilor de cultura

Dupa consistenta: lichide
solide semisolide Dupa provenienta: naturale sintetice Dupa compozitie si scop: simple complexe speciale

Clasificarea mediilor de cultura

Medii complexe
de utilitate generala: - uzuale

- cu proteine native
Medii speciale
selective de imbogatire anaerobi teste biochimice

Medii simple: Apa peptonata Bulion simplu Geloza simpla Medii complexe: bulion sange geloza sange geloza chocolatie

Medii lichide- bulion simplu

Categoria: Mediu de baz Componente: macerat de carne + pepton + NaCl 0,5% Utilizare: pentru germeni nepretenioi

Geloza simpla
Categoria: Mediu de baz Componente: bulion simplu + agar-agar

Geloza simpla
Categoria: Mediu de baz Componente: bulion simplu + agar-agar

Geloza lactozata
Categoria: Mediu diferenial Componente: geloz simpl + lactoz + albastru bromtimol Utilizare: studierea fermentrii lactozei

Geloza sange
Categoria: Mediu compus Componente: geloz simpl rcit la 45C + snge defibrinat 10-20%

Geloza socolatie
Categoria: Mediu special Componente: geloz simpl rcit la 60-80C + snge Utilizare: cultivarea neisseriilor, hemofililor

Mediul Chapman
Categoria: Mediu selectiv i diferenial (evidentiaza o proprietate biochimica a tulpinii) Componente: geloz simpl + NaCl 7,5% + manitol + rou fenol Utilizare: selectiv pentru stafilococ

 Hemoliza

PROPRIETATI DE CULTURA

ATMOSFER A DE CO2 510%

Medii folosite pentru enterobacterii

(agar, lactoza, indicatori de pH) Drigalski Istrate McConkey Levine

Bacteriile care degradeaza lactoza din mediu = lactozo pozitive Bacteriile care nu degradeaza lactoza din mediu = lactozo negative

Mediul Levine
Categoria: Mediu selectiv i diferenial Componente: geloz simpl + eozin + lactoz + albastru de metilen Utilizare: cultivarea enterobacteriilor (E.coli)

GENUL ESCHERICHIA
E.COLI LEVINE E.COLI DRIGALSCHI

ADCL (Leifson)
Categoria: Mediu selectiv i diferenial Componente: geloz simpl + sruri biliare + lactoz + rou neutru Utilizare: cultivarea shigelelor i salmonelelor

E.COLI-ADCL

Fermentarea lactozei pe geloz lactozat

KLEBSIELLA GELOZA-SANGE COLONII MUCOASE

KLEBSIELLA ADCL COLONII MUCOASE

PROTEUS- INVAZIE

GENUL SALMONELLA

ADCL-H2S

HECTOEN

- Mediul BSA: vibrionul holeric - Mediul Chapman : stafilococi - Mediul Lowenstein-Jensen: bacilul TBC - Mediul OCST: bacilul difteric - Mediul Sabouraud: fungi

Mediul Chapman

Mediul Muller - Hinton

Categoria: Mediu special Utilizare: Efectuarea antibiogramelor

Mediul OCST
Categoria: Mediu de mbogire (favorizeaza
X bacteriilor, mai ales cand acestea sunt in concentratie mica)

Componente: ou + cistein + ser + telurit de potasiu Utilizare: cultivarea bacililor difterici

Mediul Sabouraud
Categoria: Mediu special Componente: geloz simpl + maltoz/glucoz + antibiotice Utilizare: cultivarea levurilor

Mediul Lowenstein-Jensen

Medii pentru anaerobi:

- Bulion cu acid thioglicolic (mediu lichid; la
suprafata se adauga ulei de parafina

- Tarozzi (mediu lichid, cu albus de ou; la suprafata se adauga ulei de parafina) - Geloza Veillon (se obtin culturi in profunzimea mediului, realizate prin incorporare) Tehnica Ott (se insamanteaza pe mediu solid, agenti reducatori si se sigileaza cu parafina)

Metode de insamantare
Insamantare = punerea in contact a unei culturi bacteriene sau a unui produs patologic cu mediile de cultura. Izolare = repicarea unei singure colonii pe alte medii de cultura cu scopul de a obtine cultura pura Cultura bacteriana = totalitatea bacteriilor crescute in/pe suprafata unui mediu de cultura

Tehnici de insamantare
Tehnica insamantarii prin epuizare:
Scop: obtinerea coloniilor izolate

Insamantarea prin intepare (pe medii solide aflate in tuburi) Insamantarea in panza

Caracterele culturii microbiene

In mediu lichid se descrie: Turbiditatea Formarea de depozite Culoarea Suprafata Medii lichide - Tulburare uniforma a mediului: E. coli - Tulburare + pelicula la suprafata: b. piocianic - Mediu limpede + pelicula: b. carbunos - Grunji: streptococul

Caracterele culturii microbiene pe medii solide

Colonia= ansamblu localizat, alcatuit din populatie pura de bacterii provenite dintr-un singur parental. Pe mediu solid se descrie: - forma coloniei - culoarea - marimea - consistenta - suprafata - emulsificabilitatea - margini - mirosul culturii

Colonii S (smooth) Colonii R (rough)

CARACTERE DE CULTURA
BACILLUS- GELOZA SIMPLA

CARACTERE DE CULTURA
BACILLUS GELOZA SANGE

GENUL CORYNEBACTERIUM

CORYNEBACTERIUM FLOARE DE MARGARETA

MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS PE MEDIUL LOWENSTEIN

PIGMENT

Pigment

HEMOLIZA
STAFILOCOC
- COMPLETA

- CALD-RECE (se clarifica la 4C)

STREPTOCOC
- INCOMPLETA

VERZUIE - COMPLETA

Clasificare hemoliza pe geloza sange

hemoliza :
= streptococi -hemolitici hemoliza incompleta, verzuie streptococi nehemolitici,

CORYNEBACTERIUM TINSDALE