INSAMANTAREA

PRODUSULUI PATOLOGIC
PE UN MEDIU DE
CULTURA
 MEDII DE CULTURA

TEHNICI DE INSAMANTARE
 A. MEDII DE CULTURA

Def.: Reprezinta substratul biologic si energetic necesar

cresterii si dezvoltarii bacteriilor

Mediile de cultura
Artificiale ( pt bacterii )
Celulare vii ( in virusologie )
1. Culturi de cel. Eucariote
2. Oua embrionate de gaina
3. Animale de laborator
 MEDIILE DE CULTURA ARTIFICIALE
CONDITII
1. Sa fie nutritiv (sursa de: C, N, f. de crestere,
vitamine, saruri, proteine)
2. Sa asigure umiditatea ( apa suficienta )
3. Sa fie steril ( urmarim cresterea bacteriilor
insamantate)
4. Ph= 7,2-7,6
5. Osmolaritate ( NaCl 0,9%)
6. aerob / anaerob
Hrana, apa, caldura asig de mediul de cultura
Temperatura asig de incubator.
 CLASIFICAREA MEDIILOR DE CULTURA
IN FUNCTIE DE:

1.STAREA DE AGREGARE:
M. lichide: bulion simplu ( supa de carne de vita-
macerat-fiert-filtrat ) / apa peptonata (peptone+ apa
distilata+ NaCl)
M. solide: geloza simpla (bulion simplu + 20g/l agar-
agar = solidificare). Agar-agar se topeste la 80 grd; noi
incubam la 37 grd.
M. semisolide: geloza moale
 CLASIFICAREA MEDIILOR DE CULTURA
IN FUNCTIE DE:

2. SURSA INGREDIENTELOR:

Ingrediente de orig. animala: sg , lapte, bila

Ingrediente de orig. vegetala: soia, cartofi,

morcovi,orez

Ingrediente de orig. artificiala( industriale): vitamine

 CLASIFICAREA MEDIILOR DE CULTURA
IN FUNCTIE DE:

3.COMPLEXITATE :
Simple ( bulionul simplu, apa peptonata)
Complexe:

1. Elective
2. Selective
3. De imbogatire
4. Diferentiale
 CLASIFICAREA MEDIILOR DE CULTURA
IN FUNCTIE DE:

4. IN FUNCTIE DE UTILIZARE:
M. de transport: asig viabilitatea bacteriilor in timpul
transportului( CARRY-BLAIR, STUART)
M. de izolare: m. simple/elective/selective/de
imbogatire( p.p monobacteriene/ pp pluribacteriene)
M. de identificare: se folosesc m.diferentiale
M. pt testarea sensibilitatii: m. Mueller- Hinton
M. de conservare: pt stocarea unor culturi bacteriene
( frigider, congelator) M. Lowenstein - pt b. Koch
M. electiv: contine ingrediente care favorizeaza cresterea
unei anumite bacterii, fara a influenta cresterea florei de
asociatie
Exp: m. LOFFLER ( geloza + ser coagulat de bou ) b.
difteric creste in 12 h, restul bacteriilor cresc in 24 h
M. selectiv: contine ingrediente, care inhiba cresterea florei
de asociatie ( m. Lowenstein)
M. cu selectivitate redusa: m. MAC CONKEY( cu s.
biliare) inhiba cresterea b. G+ si permite dezv
enterobacteriilor
M. cu selectivitate medie: m.ADCL inhiba multiplicarea
b. lactozo + ( nepatog) si stim. cresterea b. lactozo
( patogene)
M cu selectivitate inalta: m.WILLSON- BLAIR inhiba
toate b. mai putin cresterea Salmonellei
M de imbogatire: - are un substrat ce stimuleaza flora
patogena si inhiba flora saprofita
- In general m. lichide bulion selenit - Salmonella
- folosit pt p.p care au un nr scazut de bact patogene
Exp.: m. CHAPMAN pt stafilococi
M. diferential: contine ingrediente ce pot fi modificate
vizibil sub actiunea metabolismului bacterian( diferentiaza
speciile in fctie de echipamentul enzimatic)
Exp.: a) m. AABTL pt enterobacterii( de explicat)
- Lactozo - : patogene, nu utilizeaza lactoza din mediu, raman
in culoarea initiala a mediului ( albastru-verzui )
- Lactozo + : nepatogene/ cond patog, utilizeaza lactoza,
modifica culoarea mediului ( galben )
b) m. geloza sange: diferentiaza speciile hemolitice ale
streptococului de speciile nehemolitice
Nehemolitice: bact cresc, culoarea mediului nu se
modifica ( gama )
Hemoliza totala: bacteriile cresc , in jur apare o zona
transparenta de hemoliza ( beta)
Hemoliza partiala: in jurul bacteriilor apare o zona verde
- hematii sparte, Hb modificata partiala pana la un
produs intermediar verde ( alfa)
 B. TEHNICI DE INSAMANTARE

Insamantare: punerea n contact a unei culturi bacteriene

sau a unui produs patologic cu mediile de cultura pentru a
obtine cresterea bacteriana
Colonie bacterian: aglomerare de bacterii vizibil cu
ochiul liber, format din multiplicarea unei singure bacterii
de pe mediul de cultur
Repicare: insamantarea unui fragment de colonie dintr-un
mediu de cultura pe un alt mediu de cultura
 Insamantare simpla pe m.lichid

Insamantare simpla pe m. solid ( geloza

inclinata)

Dispersia in pentagon m. solid- pt obt

colonii izolate ( daca distanta dintre bacterii
este suficient de mare atunci cresc colonii
dispersate )