Mediile de cultura:

suporturi materiale si nutritive care servesc la cultivarea bacteriilor

 amestecuri de substante care asigura cultivarea microorganismelor

Scopuri
 Izolarea in cultura pura
 Identificare
 Diagnostic, tratament
 Producerea industriala a unor substante (prepararea vaccinurilor)
 Controlul sterilitatii sau incarcarcaturii microbiene a unor elemente de mediu
(apa, alimente)
Conditii
• Surse de C, N, apa, substante minerale, energie, substante nutritive, factori de
crestere

• pH optim, temperatura optima

• Aero/anaerobioza

4. Sterile
Ingrediente
 Peptona
 Extracte sau infuzii de carne
 Agenti de solidificare: agar
 Indicatori de pH: turnesol, rosu fenol
 Agenti selectivi
 Zaharuri
Prepararea mediilor de cultura
 Amestecul ingredientilor: proportie, ordinea indicata
 Ajustarea pH-ului
 Repartizarea in recipiente adecvate
 Sterilizarea
 Controlul sterilizarii si al calitatii mediului

Clasificarea mediilor de cultura

Dupa consistenta: lichide, solide, semisolide

Dupa provenienta: naturale; sintetice
Dupa compozitie si scop: simple

1
 complexe
speciale
Clasificarea mediilor de cultura
 Medii complexe
 de utilitate generala: - uzuale
- cu proteine native
 Medii speciale
 selective
 de imbogatire
 anaerobi
 teste biochimice

Medii simple: Apa peptonata

Bulion simplu
Geloza simpla

Medii complexe: bulion sange

geloza sange
geloza chocolatie
Medii lichide- bulion simplu
Geloza simpla
 Categoria: Mediu de bază
 Componente: bulion simplu + agar-agar

Geloza simpla
 Categoria: Mediu de bază
 Componente: bulion simplu + agar-agar

Geloza lactozata
 Categoria: Mediu diferenţial Componente: geloză simplă + lactoză + albastru
bromtimol
 Utilizare: studierea fermentării lactozei

Geloza sange
 Categoria: Mediu compus
 Componente: geloză simplă răcită la 45°C + sânge defibrinat 10-20%

Geloza socolatie
 Categoria: Mediu special
 Componente: geloză simplă răcită la 60-80°C + sânge
 Utilizare: cultivarea neisseriilor, hemofililor

2
Medii folosite pentru enterobacterii
(agar, lactoza, indicatori de pH)
 Drigalski
 Istrate
 McConkey
 Levine

Bacteriile care degradeaza lactoza din mediu = lactozo pozitive

Bacteriile care nu degradeaza lactoza din mediu = lactozo negative

Mediul Levine
 Categoria: Mediu selectiv şi diferenţial
 Componente: geloză simplă + eozină + lactoză + albastru de metilen
 Utilizare: cultivarea enterobacteriilor (E.coli)

GENUL ESCHERICHIA
ADCL (Leifson)
 Categoria: Mediu selectiv şi diferenţial
 Componente: geloză simplă + săruri biliare + lactoză + roşu neutru
 Utilizare: cultivarea shigelelor şi salmonelelor

- Mediul BSA: vibrionul holeric

- Mediul Chapman : stafilococi
- Mediul Lowenstein-Jensen: bacilul TBC
- Mediul OCST: bacilul difteric
- Mediul Sabouraud: fungi
- Mediul Chapman

Mediul Muller - Hinton

 Categoria: Mediu special
 Utilizare: Efectuarea antibiogramelor

Mediul OCST
 Categoria: Mediu de îmbogăţire (favorizeaza X bacteriilor, mai ales cand acestea
sunt in concentratie mica)
 Componente: ou + cisteină + ser + telurit de potasiu
 Utilizare: cultivarea bacililor difterici

Mediul Sabouraud
 Categoria: Mediu special
 Componente: geloză simplă + maltoză/glucoză + antibiotice
 Utilizare: cultivarea levurilor

3
Mediul Lowenstein-Jensen
Medii pentru anaerobi:
- Bulion cu acid thioglicolic (mediu lichid; la suprafata se adauga ulei de parafina
- Tarozzi (mediu lichid, cu albus de ou; la suprafata se adauga ulei de parafina)
- Geloza Veillon (se obtin culturi in profunzimea mediului, realizate prin incorporare)

Tehnica Ott (se insamanteaza pe mediu solid, agenti reducatori si se sigileaza cu parafina)

Metode de insamantare
 Insamantare = punerea in contact a unei culturi bacteriene sau a unui produs
patologic cu mediile de cultura.
 Izolare = repicarea unei singure colonii pe alte medii de cultura cu scopul de a
obtine cultura pura
 Cultura bacteriana = totalitatea bacteriilor crescute in/pe suprafata unui mediu de
cultura

Tehnici de insamantare
 Tehnica insamantarii prin epuizare:
 Scop: obtinerea coloniilor izolate
 Insamantarea prin intepare (pe medii solide aflate in tuburi)
 Insamantarea in panza

Caracterele culturii microbiene

 In mediu lichid se descrie:
 Turbiditatea
 Formarea de depozite
 Culoarea
 Suprafata

 Medii lichide
- Tulburare uniforma a mediului: E. coli
- Tulburare + pelicula la suprafata: b. piocianic
- Mediu limpede + pelicula: b. carbunos
- Grunji: streptococul

Caracterele culturii microbiene pe medii solide

 Colonia= ansamblu localizat, alcatuit din populatie pura de bacterii provenite
dintr-un singur parental.
Pe mediu solid se descrie:
- forma coloniei - culoarea

4
- marimea - consistenta
- suprafata - emulsificabilitatea
- margini - mirosul culturii
 Colonii S (smooth)
 Colonii R (rough)
- Colonii M (mucoase)

HEMOLIZA
Clasificare – hemoliza pe geloza sange
 hemoliza β:
= streptococi β -hemolitici
 hemoliza  - incompleta, verzuie
 streptococi γ - nehemolitici,

ÎN MEDIU LICHID SE DESCRIE:

- TURBIDITATEA
- FORMAREA DE SEDIMENT
- FORMAREA DE PELICULĂ LA SUPRAFAŢĂ
- MIROSUL
- PIGMENTAREA

PE MEDIU SOLID SE DESCRIE:

- DIMENSIUNEA
- FORMA COLONIEI
- MARGINI
MARIMEA - CONSISTENTA
SUPRAFATA - EMULSIFICABILITATEA
- MIROSUL CULTURII
COLONII S (SMOOTH)
COLONII R (ROUGH)