Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
54
3.1. Acţiunea factorilor fizici şi chimici asupra microorganismelor
55
termofile
mezofile
psihrofile
psihrotrofe
56
Efectul letal al temperaturilor supramaximale stă la baza procesului de
sterilizare cu ajutorul căldurii, sterilizarea fiind determinată de nivelul
temperaturii şi de durata de acţiune. Astfel, timpul necesar unei sterilizări
eficiente poate fi scurtat prin ridicarea nivelului temperaturii, pe când
sterilizarea la o temperatură mai puţin ridicată presupune o durată mai mare de
timp.
Efectul temperaturilor subminimale asupra microorganismelor. În
general microorganismele sunt mai rezistente la acţiunea temperaturilor
subminimale decât cele supramaximale. Începând de la temperatura de 5ºC la
0ºC microorganismele mezofile şi termofile nu se mai înmulţesc. Acest lucru
stă la baza conservării produselor la rece.
Mecanismul acţiunii îngheţului asupra microorganismelor.
La temperatura de 0ºC apa începe îşi modifice starea de agregare de la
lichid la solid, respectiv să se cristalizeze. Cristalele de gheaţă formate, atât
cele intracelulare cât şi extracelulare, sunt nocive ducând la deshidratare şi în
final la lezarea structurii celulei.
Dacă îngheţul de face lent atunci, îngheaţă mai întâi apa extracelulară
determinând o creştere a presiunii osmotice extracelulare, ieşirea apei din
celula microbiană şi instalarea fenomenului de plasmoliză. Dacă îngheţul se
instalează rapid, cristalizează mai întâi apa intracelulară iar celula va fi distrusă
prin leziuni fizice.
Dacă coborârea temperaturii sub 0ºC, până la -300C, se face foarte
rapid atunci se înregistrează mai puţine celule distruse decât în cazul când
îngheţul survine lent. Principiul stă la baza conservării culturilor microbiene
prin liofilizare (procedeu de conservare a culturilor prin îngheţare rapidă la
-70ºC concomitent cu deshidratare rapidă sub vid).
57
3. Presiunea osmotică
Presiunea osmotică a celulei microbiene este uşor mai mare decât
concentraţia mediului de cultură. Acest lucru permite pătrunderea apei din
mediu în celulă cu scopul egalizării concentraţiilor. Dacă concentraţia
mediului extern este mai mare decât cea din interiorul celulei bacteriene,
(soluţia e hipertonică), are loc o ieşire masivă a apei din celulă, fenomen numit
plasmoliză. Dimpotrivă, dacă concentraţia externă este mai mică (se numeşte
hipotonică), apa năvăleşte în celulă, se umflă şi plesneşte, fenomenul numindu-
se plasmoptiză).
Concentraţia optimă care permite dezvoltarea microorganismelor este
cea a soluţiei izotonice, a cărei presiune osmotică este echivalentă cu a
mediului intracelular. Există şi microorganisme care pot rezista la presiuni
osmotice ridicate (sunt osmofile), ex: microorganismele halofile ( suportă
concentraţii mari de sare). Acestea, la rândul lor pot fi:
- halofile facultative, cresc la o concentraţie sub 2% NaCl, din această
categorie fac parte majoritatea speciilor microbiene;
- halofile obligate, care cresc numai la o concentraţie mai mare de 2% NaCl,
dar nu depăşesc 12%, ex microorganismele marine (Micrococcus
halodenitrificans).
- halofile extreme, pot creşte numai la concentraţii mai mari de 12% NaCl, ex:
Halobacterium.
In solurile sărăturate se întâlnesc specii halofile facultative apartinând genurilor
Micrococcus si Bacillus care poseda mecanisme adaptative la concentratii mari
de sodiu schimbabil, săruri solubile si pH puternic alcalin, reprezentanţii
genurilor fiind comuni pentru solurile normale cu pH neutru.
Microorganismele care trăiesc la concentraţii mari de zahăr, din
dulceţuri, gemuri, siropuri, se numesc zaharofile şi pot suporta concentraţii de
peste 50% zahăr.
58
bazează utilizarea lămpilor UV în sterilizarea aerului încăperilor, a sălilor de
operaţie şi a laboratoarelor farmaceutice.
Radiaţiile X şi γ aplicate în doze mari pot avea efect mutagen sau
microcid asupra microorganismelor. Acţiunea acestor radiaţii este ionizantă
prin faptul că lovesc anumiţi atomi ai celulei rezultând formarea de ioni,
radicali liberi. Acţiunea indirectă a radiaţiilor, asupra microorganismelor, se
manifestă prin intermediul ozonului şi a apei oxigenate, care se formează sub
influenţa lor.
Radiaţiile ionizante se pare că acţionează asupra ADN-ului, înlăturând
punţile de hidrogen dintre cele două catene cu legături mai stabile, blocând în
acest fel diviziunea. Pentru ca radiaţiile ionizante să acţioneze, ele trebuie să
atingă anumite puncte sensibile din celula microbiană: cu cât intensitatea
iradierii este mai puternică acest fenomen are şanse mai mari de a se produce
(“teoria ţintei”).
Radiaţiile au fost utilizate în sterilizarea alimentelor însă, au
dezavantajul că lasă un miros neplăcut acestora, de aceea metoda este puţin
utilizată.
Bacteriile şi alte microorganisme s-au dovedit mai rezistente la radiaţii
decât omul şi celelalte mamifere. Astfel DL la om este de 500r ( Rontgen); DL
la Escherichia coli 10 000 r; DL, la levuri este 30 000 r; DL la Paramecium
caudatum 300 000r. Cea mai rezistentă bacterie la radiaţii γ este Deinococcus
radiodurans. Aceasta dispune de un mecanism special de anulare a efectului
radiaţiilor. Bacteria suferă grave leziuni ale ADN, la fel ca celelalte organisme
vii, însă încetează de a se multiplica timp de 6 ore, interval în care remediază
aceste leziuni.
Tabelul 3.1
Agenţi chimici sterilizaţi de uz curent (după Grozav şi Trif,1990)
Denumirea substanţei Scop
Sublimat coroziv (sol clorură Dezinfecţia mobilierului de
mercurică) 1‰ laborator;
Dezinfecţia pipetelor
Formol soluţie 3-5% Dezinfecţie sticlărie, faianţă,
metal;
Inactivare culturi microbiene.
Fenol soluţie 5% Dezinfecţie sticlărie, faianţă,
metal;
Conservare seruri (0,5%)
Hidroxid de sodiu 2-3% Dezinfecţie mobilier,
pardoseli, cuşti animale
Alcool medicinal Dezinfecţie mâini
Cloramina sol 1-5% Dezinfecţie mobilier;
Dezinfecţie mâini
60
Dezinfectant cationic , sol 1- Dezinfecţie suprafeţe netede;
3‰ Dezinfecţie mâini
Apa oxigenetă Dezinfecţie mucoase
63
3.2.1.Metode bazate pe principiul biozei
Bioza este principiul prin care se asigura pastrarea functiilor vitale ale
celulelor, astfel alimentele conservate prin acest principiu îşi păstrează
proprietăţile vitale, inclusiv mecanismele de rezistenţă la infecţii. Pentru
microorganisme acest principiu asigură efecte microstatice, în acest sens viteza
de multiplicare a microorganismelor este diminuată datorită temperaturilor
scăzute de 4-50C si asigurarea ventilaţiei. Metoda se aplică fructelor şi
legumelor conservate în stare proaspătă, acestea păstrându-şi în depozite
capacitatea de respiraţie şi de maturizare (coacerea merelor sau a bananelor are
loc în silozuri) şi capacitatea naturală de rezistenţă la infecţii.
65
3.2.3. Metodele bazate pe principiul abiozei
Intrebari:
Intrebari autoevaluare:
1. Ce înţelegeţi prin temperatura optimă. Ce valori are pentru
microorganismele mezofile, dar pentru cele termofile?
2. Care este temperatura optima de crestere pentru microorganismele
patogene pentru om?
66
3. Explicaţi de ce celulele microbiene nu sunt distruse daca îngheţul
survine foarte rapid.
4. În ce condiţii are lor plasmoliza? Dar plasmoptiza?
5. Dati exemple de substante chimice care denaturează proteinele ?
6. In opinia dumneavoastra care ar fi cea mai sigura metoda de
conservare pentru legume. Argumentaţi?
7. Ce presupune marinarea?
67