Medii de cultura

Medii de cultură: complexe

de substanţe care permit creşterea
şi multiplicarea bacteriilor
Scopuri :
- izolarea in cultura pură
- identificare
- diagnostic, tratament
- producerea industrială a unor substanţe
(prepararea vaccinurilor)
- controlul sterilităţii sau incărcăturii
microbiene a unor elemente de mediu (ap ă,
alimente)
Conditii

1. Surse de C, N, apă, substanţe minerale,

energie, substanţe nutritive, factori de
crestere
2. pH optim, temperatura optima
3. atmosferă corespunzătoare
(aero/anaerobioza)
4. sterile
Ingrediente:

Peptonă
Extracte sau infuzii de carne
Agenti de solidificare: agar
Indicatori de pH: turnesol, roşu fenol
Agenti selectivi
Zaharuri
 Clasificarea mediilor de cultură

După consistenţă: lichide

solide
semisolide
După provenienţă: naturale
sintetice
După compoziţie şi scop: simple
complexe
speciale
 Clasificarea mediilor de cultură

Medii complexe:
1. De utilitate generală:uzuale
2. Medii speciale :
selective
de imbogăţire
anaerobi
teste biochimice
 După conţinutul de substanţe
nutritive:

1.Medii naturale: conţin substanţe

nutritive în forma lor naturală, fără a fi
prelucrate în prealabil: mediul cu bilă,
mediul cu lapte, mediul cu ouă, ser de bou
coagulat
2. Medii artificiale:
A) Medii de bază – pentru germeni
nepretenţiosi
1) bulion simplu
2) geloza simplă – bulion + agar-agar (un
extract de alge care asigură consistenţa
solidă, nu are proprietăţi nutritive)
B) Medii compuse
1. Medii complexe: mediu de bază +
substanţe organice (sânge, ser, glucoză),
sunt folosite pentru cultivarea germenilor
pretenţiosi (geloza sânge)
2. Medii de îmbogăţire: conţin agenţi
selectivi, care inhibă dezvoltarea unor
bacterii si permit creşterea altora
 3) Medii speciale

- mediul Löwenstein-Jensen – pt. cultivarea

micobacteriilor
- mediul Sabouraud – pt. cultivarea levurilor
(Candida)
- mediul chocolat – neisserii, hemofili
4) Medii diferenţiale si selectiv-diferenţiale:

- indicator de culoare, +/- substanţe

selective (inhibă cresterea unor bacterii) +
zaharuri/polialcooli ;
- sunt folosite pentru izolare si identificare
(geloza lactozată, TSI, Leifson, Chapman)
 Medii lichide- bulion simplu

Categoria: Mediu de bază

Componente:macerat
de carne + peptonă +
NaCl 0,5%
Utilizare: pentru
germeni nepretenţioşi
 Geloza simpla
Categoria: mediu de bază
Componente: bulion simplu + agar-agar
 Geloza lactozata

Categoria: mediu diferenţial

Componente: geloză simplă
+ lactoză + albastru
bromtimol
Utilizare: studierea
fermentării lactozei
 Fermentarea lactozei pe geloză
lactozată
Bacteriile care
degradeaza lactoza
din mediu = lactozo
pozitive
Bacteriile care nu
degradeaza lactoza
din mediu = lactozo
negative
 Geloza sange

Categoria: mediu compus

Componente:
geloză simplă
răcită la 45°C +
sânge defibrinat
10-20%
 Geloza socolatie

Categoria:mediu special
Componente: geloză simplă
răcită la 60-80°C + sânge
Utilizare: cultivarea
neisseriilor, hemofililor
 Mediul Chapman

Categoria:mediu
selectiv şi diferenţial
(evidentiaza o proprietate
biochimica a tulpinii)
Componente:geloză
simplă + NaCl 7,5% +
manitol + roşu fenol
Utilizare:selectiv
pentru stafilococ

Mediu Chapman:descompunerea manitolului

Stafilococ manito-negativ (sus)
Staphylococcus aureus (jos)
 Medii folosite pentru
enterobacterii
(agar, lactoza, indicatori de pH)
Drigalski
Istrate
McConkey
Levine
 Mediul Levine

Categoria: Mediu selectiv

şi diferenţial
Componente:geloză
simplă + eozină + lactoză
+ albastru de metilen
Utilizare: cultivarea
enterobacteriilor (E.coli)
 ADCL (Leifson)

Categoria: mediu
selectiv şi diferenţial
Componente: geloză
simplă + săruri biliare +
lactoză + roşu neutru
Utilizare: cultivarea
shigelelor şi salmonelelor
 Mediul Muller - Hinton

Categoria: mediu special

Utilizare: efectuarea antibiogramelor
 Mediul OCST

Categoria: mediu de
îmbogăţire (favorizeaza
X bacteriilor, mai ales
cand acestea sunt in
concentratie mica)
Componente: ou +
cisteină + ser + telurit
de potasiu
Utilizare: cultivarea
bacililor difterici
 Mediul Sabouraud

Categoria: mediu special

Componente: geloză simplă+
maltoză/glucoză + antibiotice
Utilizare: cultivarea levurilor
Mediul Lowenstein-Jensen
Medii pentru anaerobi:

- Bulion cu acid thioglicolic (mediu lichid; la

suprafata se adauga ulei de parafina
- Tarozzi (mediu lichid, cu albus de ou; lasuprafata
se adauga ulei de parafina)
- Geloza Veillon (se obtin culturi in profunzimea
mediului, realizate prin incorporare)
- Tehnica Ott (se insamanteaza pe mediu solid,
agenti reducatori si se sigileaza cu parafina)
 Caractere de cultură

Se studiază aspectul macroscopic al

coloniilor bacteriene izolate
In mediu lichid se descrie:
- turbiditatea
- formarea de depozite
- culoarea
- suprafata

Medii lichide
- tulburare uniforma a mediului: E. coli
- tulburare + pelicula la suprafata: b. piocianic
- mediu limpede + pelicula: b. carbunos
- grunji: streptococul
Colonia= ansamblu localizat, alcătuit din
populatie pură de bacterii provenite dintr-un
singur parental.
Pe mediu solid se descrie:
- forma coloniei
- culoarea
- marimea
- consistenta
- suprafata
- emulsificabilitatea
- margini
- mirosul culturii
1. Coloniile de tip S (smooth)
- colonii rotunde
- margini regulate, bombate
- suprafaţa netedă, translucidă
- usor detasabile de pe mediu
- suspensionate în sol. saline produc
suspensii omogene (ser fiziol.)
- reprezintă forma normală pentru
majoritatea bacteriilor patogene, fiind
dotată cu calităţi optime de structură
antigenică si de patogenitate.
Staphylococcus aureus
Cultură pură
geloză simplă
Colonii S
pigment galben-auriu
2. Coloniile de tip R (rough)
- colonii neregulate
- plate, uscate
- suprafaţa zbârcită
- aderente la mediu
- în soluţii saline produc suspensii neomogene
(fenomenul de aglutinare spontană)
- este caracteristică, în general, bacteriilor
nepatogene, cu 3 excepţii: Bacillus anthracis,
Mycobacterium tuberculosis, Corynebacterium
diphtheriae
3. Forme intermediare: S-R , R-S
4. Coloniile de tip M
- aspect mucos
- foarte mari
- foarte bombate
- foarte lucioase
- cu tendinţă de curgere si de confluare
caracteristice bacteriilor care posedă
capsulă (de ex. Klebsiella)
KLEBSIELLA KLEBSIELLA
GELOZA-SANGE ADCL
COLONII MUCOASE COLONII
MUCOASE
5. Coloniile pufoase
- mucegaiuri

Aspergilus niger Candida albicans

6. Fenomen de căţărare
Proteus: pe medii simple creste sub forma
unui văl care acoperă toată suprafaţa
mediului (nu apar colonii)