'-,1.

-;-' ~" ,~,~"C-C,~'"

'" £~amenulcur(lclereiorculturqle ale microorganismelor 81 .IG'

J. V
".

6. EXAMENUL CARACTERELO R CUL TURALE ALE

MICROORGANISMELOR

Dezvoltareagermenilor in medii de cultura imbracaaspectevariate, Catevadintre

acesteaconstituiecaracterede identijicarepentru unelespecii microbiene.
Examinareacaracterelor de tultura ate microorganismelorse face in fiecare zi
odata saude mai multe orl pe zi ~i se noteazaobservatliletacute.
Pentrustabill rea cat mai exacta~i completaa caracterelorde 'cultura, germenii se
insamanteaza.pemeciii lichide ~i ,S'olide.

6.1.Caracterele culturilor microbiene dezvoltate in medii lichide

r- .
Oupa insamantarea germenufu.I izofat, in medii de cultura lichide staponare, se
umlaresc ~i se noteaza urmatoarele caractere:
~ momentul .aparitie~ culturii, prill observatii adecvate in raport cu rata de cre-'?terea
germenutul respectiv;
c{) gradul de cre!jlere dupa 0 perioada completa de incubw"e (de regula 48 are): sarac,
moderat, abundent, excesiv;
. turbiditatea:absenta,u~oara,moderata,densa;

... tipul turbidita{ii: uniforma,granutara,flocule\lta;

ciepozitul eelular: absent, neinsemnat, moderat, abundent;
te.\"turaciepozitului: fin, granulw', floculent, membranos;
r9 comportamentul depozitului la agitare: dezintegrare compJeta,incompteta;
. cre.,S'tereala supraj~ta mediului: absenta, sau prezenta; cre~tere inelara in jurul
peretelui tubului, pelicula de suprafata, subtire sail groasa, cu suprafata neteda,
granulara gall rugoasa, uscatasau umeda, aderenta sau neaderentade marginea tubului,

[.
.. dezintegrare completa sau incompleta prin agitare ;
culoareaculturii;
eventualaapari{ie a bulelor de gaz, ceeace denotaexistentaprocesuluitermentativ;
I C' ~ mirosul cululJii, .. "~, ~
[ Cre~tereabacterulor pe suprafala buhon~lul poatesa prezlnteurmatoareteforme:
1:
'
I
floculata,
in inelara,
mediilepelicLllara,membranoasa
bacteriile(vezi
lichide, pentrLI aerobefig.
se4.6 din lucrarea
intalnesc nr. 4),
urmatoarele
" aspecte:
- mediLl1este tLllbure omogen (de ex. in cazuls,tajUococului);
- mediulesteclarin celedouatreimist~perioare,
cu depozitgrunjossaunisipospe
peretii~i la funduleprubetei
(deex.incazuls..treptococului); --
- mediul esteclar, cu depozit floc<?nos
~i aderentJafundul eprubetei(de ex. la bacilul
antrayului);
- mediul prezintaun val subtireIa suprafata(de ex. la baciluldifteric);

.
\ )
t"-*~"T'" ~""'c~~~~ --~J' "'~

'"

82 Microbi%gie. Lucrari practice

.
:'"

- mediul prezintala supratata0 membranagroasa,rugoasa,plisatA,r~stul fiincl limpede .

(de ex. la bacilul tuberculozei);
- mediul prezinta la suprafata 0 membrana uscata, scuamoasa, Incretita (de ex. la
bacilul fiinului); ."
- mediul prezinta un inel aderent de peretii tubului (de ex. la baci/ul coli);
- mediul prezinta bule de gaz ~i un miros fecaloid (de ex. In cazul bacilului coli);
- mediul prezintaun miros de con ars (Ia bacilul tetanic);
- mediul poatefi colorat diferit, de ex. In verde albastrui la bacilul piocianic.

. Cre~tereadrojdiilor In mediu lichid mU~'1de mal/In conditii sta{ionare este asociata

cu tulburarea.n1ediului,formareade sedimentsau formareade vaal. In cazulln carese
produce tulburarea, se urmaresc caracterele specifice, respectiv lmitormitatea sau
formarea de flocoane. Cand se tormeaza vaal (sall pelicula) sllperficial, se descrill
caractereleacestuia; daca este subtire sau gras, culoarea, daca prezinta suprafata
neteda,l:utata, lucioasa. La formarea sedimentului se apreciazadaca este granular,
l:ompact,mucilagil1os.
. Prin cultivarea mucegaiurilor In medii lichide 1]1condi~ii sta{ionare se formeaza ,0
derma groasa,cutata ~i la suprafataacesteia se dezvolta miceliul caracterist~c.In - r-;;-
l:ondi~iide agitare,In locul coloniilor caracteristice,se formeazaperle albe spollgloase,
de dimensiunivariabile Intre 1-4min.

6.2. Caracterele culturilor bacteriene pe medii solidificate inclinat ~i drept -.. ;"~

{:';~;:l~
Mediile solidificate uti Iizate curent pentru cre~terea bacteriilor stint .,?;eloza~i gelatina. c-::;: c:f(~
"",::""
Dupa insamantarea bacteriilor pe ge/oza inclinata se noteaza: :,:-
. mornentu/ aparifiei culrurii; "
.
.. cg-raclul
de cre.'ftere:absent,sarac,moderat,abundel1t,
caracterul cre~.terii: discreta sau contluenta;
excesiv;

;
. Gc\'pec[u! tra~'eului de insamtin{are: subtire, gras, limed, llscat;
colorarea culturii ~i a mediului: microorg~nismele cromojore-pigmentul riimane
leg,1! la 1<'1Clll sintezei.ale
in celu!ei
celula; (p?re.te,
paracroml?f()re-pig'mentul ramane legal de
! structllrile super~ciale c,apsula).~i .cultura apare colorata~
c:rornopare,al caror pigment este ellmlnat In medlu, lar acesta se coloreaza
t;
~

I
. l:aracteristic;
modul de cre.'ftere:cultura se ,dezvoltanumai pe striuf de insamantare- culturi de
lip "0" (ohne hauch -tara val), pentru germenii imobili; cultura se dezvolta pe ""
, toata suprat'atamediului Inclil1at - culturi de tip "H" (hauch = val), pentru
l germeni mobili.
/. Pcntrll a determina cu certitudine caracterul mobil ~'au imobil, germenlll se
: II1Samanteaza
pe geloza inclinata, pornind de I~ lichidul de condensare,palla la jumatatea
mediullii inclillat. Locul opririi insamantarii se marcheazaCll creionul dermatograt: pe
suprat'clta
tubului. Dacagermenulestemobil, cultura va depa~ilimita de Insamantare,mai
Inuit sau mai putin, Inttinctie qe gradul de mobilitate. Cre~tereaunui germenimobil nu va
depa$ilimita de Insamantare; !
. !orflla marginiiculturii detip ,.H": mtreaga,ondulata,lobata,dintata,rizoida.

\
~ ~;c=:- ~ ~~T~ .~..- '~
~~.~
"
""I-

~
.
~Mjc!:Q~j~~CJgi:. ,t!!qra!:i pr~cti~e.
9,.\pectul coloniej: neteda (tip "S"; smooJh = n~ted); rugoQsa (tip "R"; rough
rugos). Aspectw colQ!1iei(de tip "S" sau "R")al unui microorganism este
= c,
'

determinat de factor! genetici care conditi9neaza capacitatea de sinteza a

po1izaharidel.or capsulare. Tranzitia coloniilor S<:=>R,In conditiil.e pastrarii
aceluia"i mediu de cul.tivare este rezultatul mutatiilor genetice. La randul I.or,
schimbarile conditiitor de cul.tivare (modificari ate compcozitiei mediului tlutritiv,
concemratia ~'lgaruluietc.) induc adeseaschimbari ale tipului colonial.
Co./()niile de tip "S" sum circulate, au marginea Intreaga, profilul convex, glint
umbonate sau ombilicate, au supratata neteda, lucioasa, mata sau stralucitoare. Pentru
microorganismele patogene, aparitia coloniilor de tip "S" este indiciul unor tulpini cu
I patogenitate crescuta, Ele corespund coloniei normaLe, tipice. Din aceste colonii, dupa
inoclliarea in mediul lichid rez",Ltaculturi care dau 0 turbidi~ate uniforma mediul",i.
('ofonii./e de tip "R" Gorespund ce1orlalte tipuri morfologice: neregulate, ~meboide,
ondulate, lobate, rizoide, radiare. PI:ofilullor este plat. Aparitia colonijlor de tip "R" este
caracteristica hllpinilor mai putin patogene, atipice sau anormale, a~a cum sunt cele
ob~inte prin pasaje succesive, pe 1J!1mediu artificial (modjficat)..
. Pe mediile cu .s',ingese Inregistreaza, de asemenea, deosebiri cululrale Insotite de
prezenta gall absenta hemolizei.
.La germenii, a~la~rob.i: msaman~ati In medill semisolid (geloza Vei!lon) In tuburi - -- - n
..
Weinberg se pot Imaln1 urmatoarele aspecte:
colonii mici lenticulare(forme imobile);

.. colonii pufoasedifuze (torme mobile);

clparitiabulelordegazIn masal"t}ediului;
fragmentarea~i rupereamediullli prin formareamasivade gaze;
. lichefiereapartiatasautotala a mediutui.

6.4. Caractcrele coloniilor de microfungi (drojdii ~i mucegaiuri)

. Coloniile apar~inanddrojdi.ilor pot fi de tipS, cu s\.lprafataneteda,lucioasasa\.1mata

~i de tip R, C\.Isupratata rugoasa. '

in tllnc~ielieforma, coloniile de drojdii suntin majoritate,circulare,lIneori

triunghiulare,stelate.Projil?-ilpoatefi convex,apl.atizat,bombat,conic, umbonat(colonii
careprezintfiin centrul col.oniei0 proeminenta),

. Coloniile de mucegaiuri pot fi extinse In Intreg\.IIspa~iual vasului de cutturfi (ex.

mucegaiurile illfuioare) sau apar circulare cu cre~tere radiala (Ia mlJcegaiurile
superioare,fungi imperfecti). Coloniile de mucegaiuri pot avea aspectediferite: ~
pastas, putos, catifelat, pot prezenta 0 coloratie specifica, pot secreta In mediu
pigmentj.

. Trebuie sllbl.iniatca acesteaspectecul.turaleale microorganismelormentionatemai

SllS sum conditionate de numero~ifactori: specia. microbiana, varsta culturii,
compozitiachrmicaa germenil.or,modul de diviziune a microbilor, calitateamediilor
de cultu-rfl,pH-ul mediului, umiditatea mediului, actiuneaunor factori inductori de
variabilitate (antibioticele, s\.lbstan~ele,
chimioterapeutice),actiunea bacteriofaguJ\.Ji
etc.

~f7

"~~~- ..
Caractere culturale
Aspergillus sp.
Aspergillus niger
Cladosporium sp.
Escherichia coli
Saccharomyces
cerevisiae
Candida
albicans
 Chlorella
prototheocoides