Cultivarea microorganismelor-multiplicarea

in laborator a microorganismelor sau creterea

bacteriilor pe medii de cultur n condiii in vitro
Mediile de cultura-amestecuri de substante

care asigura cultivarea microorganismelor.

(permit cresterea si multiplicarea bacteriana)
Cultura microbiana-totalitatea

microorganismelor dintr-un mediu de cultura.

 izolarii in cultura pura a unui tip de

microorganism dintr-un amestec.

Identificarii microorganismului pe baza

proprietatilor de multiplicare.

 Contin substane nutritive (sursa de carbon,

donator si acceptor de hidrogen, minerale,

factori de crestere)

Asigura conditiile optime de desfasurare a

metabolismului bacterian prin:

- pH corespunztor
-umiditate corespunztoare
-putere ionica
-presiune osmotica
-asigura atmosfer corespunztoare
-aero/anaerobioza)
Sunt sterile

 Este asigurata de :
Subsante nutritive

-peptone
- infuzii sau extracte
- amestecuri de
proteine naturale( ser, sange defibrinat,
lichid de ascita, ou, lapte)
Agenti de solidificare
folositi pentru obtinerea mediilor solide pe
care se obtin colonii izolate.
Ca agenti de solidificare se folosesc Agaragar un coloid polizaharidic din alge marine
care incalzit la 900 in apa absoarbe apa in
volul de 50x volumul lui iar la 450 se solidifica
sub forma unui gel.Se mai foloseste gelatina.

 Alte componente
Indicatorii colorimetrici de Ph care evidentiaza

producerea de acizi prin degradarea

carbohidratilor( albastru de bromtimol)
Agenti selectivi: substante colorante,
chimioterapice care inhiba cresterea unor
specii bacteriene( neomicina,
polimixina)permitand dezvoltarea altora.
Agentii reducatori se folosesc in mediile
pentru cultivarea anaerobilor( cisteina,
tioglicolatul, pirogalolul)
Substante pentru teste biochimice( zaharuri,
polialcooli, am. ac., saruri anorganice: Nacl,
saruri de Fe)

Etape:
1. Se amesteca ingredientele in ordinea

din reteta
2. Se ajusteaza Ph-ul
3. Se repartizeaza in eprubete sau in
baloane
4. Se sterilizeaza prin autoclavare
5. Se controleaza pentru sterilitate ,
proprietati nutritive si eficienta selectiva.

Dup consisten:
- lichide (repartizate n eprubete)
- solide (geloza dreapt, nclinat, n

plac)
- semisolide (n eprubete)

Dup coninutul de substane nutritive:

Medii naturale: conin substane nutritive n forma

lor natural, fr a fi prelucrate n prealabil : mediul

cu bil, mediul cu lapte, mediul cu ou, ser de bou
coagulat
Medii artificiale:substante chimice

Dupa compozitie si utilizare

Medii complexe-cu o compozitie

cunoscuta numai cu aproximatie.

Medii sintetice: compuse exclusiv din
substante chimice pure(medii chimic
definite).Pot fi:
cu compozitie minimala( saruri, glucoza)
cu compozitie complexa( contin am.ac.,
baze purinice, pirimidinice, vitamine)

 Medii de utilitate generala

medii uzuale( simple)

2.
medii cu proteine native
Medii speciale
1.
selective
2.
de imbogatire
3.
pentru anaerobi
4.
pentru teste biochimice
1.

 Se prepara relativ simplu din ingredientele de

baza.
se folosesc pentru germeni
nepreteniosi:stafilococi enterobacterii etc
1) lichide:-bulion simplu

-apa peptonata
2) solide:-geloza simpl( bulion + agar-agar)

-agar Mc Conkey pt bacili Gram

negativi

-Levin (eozina si albastru de metilen)

-Muller Hinton pt. antibiograme

Se folosesc pentru cultivarea unor

microorganisme pretentioase( Streptococi,

Neisseria, Haemophilus)
La bulionul simplu sau agar se adauga
sange defibrinat de berbec 5%. Amestecul
se face la 450, mediul obtinut numidu-se
geloza sange,sau nutrient agar cu sange.
Cand amestecul se face la 70-80- 0C, se

obtine geloza chocolat ( continutul

globular trece in mediu) folosita la
cultivarea speciilor pretentioase.

Selective
Se folosesc la cultivarea bacteriilor din

produse pluricontaminate.
Contin agenti selectivi care inhiba

dezvoltarea unor specii, favorizand

dezvoltarea speciilor cautate si
evidentiindu-le unele caractere
definitorii.

 Mediul Chapman solid pt. Stafilococ

Mediul Leifson sau ADCL pt

enterobacteriacee( dezoxicolat de sodiu,lactoza,

rosu neutru)
Mediul Istrate-Meitert -pt. enterobacteriacee(bila
de bou, indicator albastru de bromtimol)
Mediul Muller Hinton cu antibiotice( vancomicina,
colistin, nistatin)+sange pt. gonococ si
meningococ
Mediul BSA( bila ) ph 8,4-9.pt. vibrion holeric
Mediul Tinsdale pt. b.difteric
Mediul Lwenstein-Jensen pt. cultivarea
micobacteriilor
Mediul Sabouraud pt. cultivarea levurilor
(Candida)

Sunt medii lichide care favorizeaza

multiplicarea bacteriilor care ne

intereseaza mai ales cand se gasesc in
cantitate mica-si inhiba flora nepatogena.
Exemple de medii de imbogatire:
Apa peptonata cu ph alcalin ( 8-9) pt.
vibrionul holeric.
Chapman lichid cu 15% NaCl.
Selenit acid de sodiu pt. Salmonella.
OCST( ou,cisteina,ser, telurit de K) pt.
difteric.

Lichide: bulion cu acid thioglicolic

Semisolide: Veillon
Solide: Nagler, Willis-Hobbs, geloza-

sange

Permit diferentierea bacteriilor pe baza

unor proprietati metabolice

TSI (glucoza, lactoza, zaharoza)=triple
sugar iron
MIU ( mobilitate, indol, uree)=mobilitate
indol uree
Simmons cu citrat=sursa de carbon