Sunteți pe pagina 1din 38

Medii 

în bacteriologie
Dr. Georgiana Radu – Medic rezident Microbiologie Medicală, an II
Clasificare 
1. În funcție de tolerabilitate 
                          a. Uzuale/generale - permit creșterea unui nr. larg de specii bacteriene
                          b. Speciale – permit creșterea unei game restrânse de specii, uneori țintit pentru o sg. specie

2. În funcție de scopul utilizării


                           a. Medii de îmbogățire (întotdeauna lichide)
                           b. Medii de izolare:
                                   - uzuale, nediferențiale
                                   - diferențiale - diferențiază printr-un singur caracter grupe taxonomice sau tulpini
                                   - selective - inhibă unele grupe bacteriene, favorizând multiplicarea altora (Slab selective, moderat
selective, înalt selective). 
                            c. Medii de identificare
                                           1. Medii test (convenționale sau microtest)
                                           2. Medii multitest 
                            d. Medii de transport
3. În funcție de consistență: 
- lichide
- solide
 Clasificare - semisolide
-
continuare 4. În funcție de proveniență: 
- naturale
- sintetice
Indicatori de culoare
Indicator Zona de pH Virajul culorii (acid-
alcalin)
Albastru de bromtimol 6.0-7.6 Galben-albastru
Roșu neutru 6.8-8.0 Roșu-galben
Roșu fenol  6.8-8.4 Galben-Roșu
Fucsină acidă <7 Transparent - Roșu
intens
Mediile uzuale 
• Geloza simplă/Agar nutritiv standard – mediu de
cultură universal pentru bacterii nepretențioase. 
Conține extract de carne, peptone din carne, agar
(geloză) și apă distilată. 
Ø solid – pentru culturi 
Ø semisolid – pentru a testa motilitatea, depozitare pe
termen lung 
Agar TSA (Tripticase Soy Agar) - agar standard +
digestie pancreatică de cazeină, digestie papainică din
faină de soia, NaCl. 

•    Bulion nutritiv
Conține extract de carne, peptone, apă și NaCl.
 lichid – bacteriile cresc în tot volumul, produc
turbiditate. 
Mediu de îmbogățire.
 Mediile uzuale 

• Agar sânge - pentru bacterii pretențioase, care cresc puțin 


sau deloc pe geloză simplă.
Conține agar nutritiv standard/TSA + sânge defibrinat. 
Are și capacități diferențiale - hemoliza.

• Agar Mueller-Hinton - mediu pentru antibiogramă


Conține infuzie din carne de vită, cazeină, amidon solubil,
agar (geloză), apă distilată. 
Cazeina oferă bacteriilor aminoacizi, carbohidrați, Ca și P.
Medii speciale 
1. Bulion selenit – mediu de îmbogățire selectiv
pentru Salmonella spp. 
Conține selenit acid de sodiu, peptone, lactoză,
fosfați, apă distilată. 
- indicat pentru îmbogățirea salmonelelor direct
din prelevate patologice.
- shigellele nu sunt favorizate în aceeași măsură. 
- Inhibă organismele gram-pozitive. Bacilii
coliformi sunt inhibați doar 18 ore. 
- Se mai folosește ca mediu de transport
pentru Vibrio Cholerae, acesta supraviețuind 2-5
zile în aceste condiții. 

*Bacili coliformi = Echerichia, Enterobacter, Klebsiella,


Citrobacter
2. Bulion în sistem BD BACTEC 
- bulion special pentru hemoculturi (uneori și alte lichide de puncție)
- speciale pentru recuperat bacterii aerobe, anaerobe, levuri, mucegaiuri și
mycoplasme. 
- unele speciale pentru uz pediatric.
- produsul patologic se recoltează direct în flacon, iar acesta se incubează într-un
aparat special care funcționează și ca detector. 

Cum funcționează?
- bacteriile consumă nutrienții din mediu și produc CO2. CO2 reacționează cu o
vopsea specială aflată într-un senzor la baza recipientului. Aceasta modulează
cantitatea de lumină care trece prin senzor și este absorbită de materialul
fluorescent. 
- Fotodetectorii din aparat măsoară nivelul de fluorescență, acesta corespunzând cu
cantitatea de CO2 eliberată de bacterii, și îl interpretează conform unor algoritmi
presetați. 
 3. Agar Chocolat

- Încălzirea sângelui rupe eritrocitele


cu eliberare de nutrienți și inactivează
enzima care degradează NADP
(factorul V) din sângele de berbec. 

- Mediul este favorabil dezvoltării


unor bacterii exigente precum
Haemophilus, pneumococi, Neisserii.
Haemophilus influenzae Streptococcus pneumoniae
4. Agar MacConkey – mediu slab selectiv și
diferențial pentru izolarea enterobacteriilor.

Conține hidrolizat pancreatic de gelatină,


digestie pancreatică de cazeină și digestie
pepsică de țesut animal, LACTOZĂ, SĂRURI
BILIARE, NaCl, ROȘU NEUTRU, CRISTAL
VIOLET, agar, apă distilată. 

Sărurile biliare și cristal violetul - inhibă


creșterea bacteriilor Gram+
Lactoza – fermentarea lactozei acidifică mediul
Roșu neutru - virează din roșu în
galben/portocaliu în mediu bazic (pH 6.8-8)
SMAC – sorbitol
MacConkey
• Mediu înalt selectiv pentru
cultivarea EHEC O:157 H:7
• Lactoza din MacConkey este
înlocuită cu sorbitol 
• Majoritatea tulpinilor de E. coli
fermentează sorbitol, patotipul
O:157 H:7 nu. 
5. CLED - Cistină Lactoză Electrolit Deficient
• Mediu diferențial indicat pentru uroculturi și repicări de purificare a izolatelor
semnificative de pe medii selective pt enterobacterii. 
• Conține extract de carne, peptone, triptonă, LACTOZĂ, L-cistină,
ALBASTRU DE BROMTIMOL, agar, apă distilată. 

• Lactoza – bacteriile care fermentează lactoza vor acidifia mediul 


• Albastru de bromtimol - în mediu acid culoarea virează spre galben
• L-cistina – ameliorează calitățile nutritive ale mediului
• Absența electroliților - previne fenomenul de invazie al Proteus spp.

*Mediul AABTL – Agar-Albastru de bromtimol-Lactoză - L-cistina, și triptona


sunt înlocuite cu tiosulfat de sodiu.
Staphylococcus aureus pe CLED – colonii GALBENE
6. HEKTOEN
• Mediu selectiv diferențial pentru izolarea patogenilor enterici direct din materiile
fecale sau din bulion de îmbogățire. 
• Conține digestie peptică de țesut animal, extract de drojdie, SĂRURI BILIARE,
LACTOZĂ, ZAHAROZĂ, salicină, NaCl, tiosulfat de sodiu, citrat feric de amoniu,
ALBASTRU DE BROMTIMOL, fucsină acidă, agar, apă distilată. 

• Sărurile biliare - inhibă creșterea bacteriilor Gram pozitive


• Coloranții - sistem indicator de pH
• Lactoza – fermentarea ei acidifică puternic mediul
• Zaharoza – substrat nutritiv pentru bacteriile care nu folosesc lactoza (Salmonella) 
• Citrat feric de amoniu – suport pentru producerea de H2S
• Tiosulfat de sodiu – cu ajutorul fierului este transformat în H2S de unele bacterii
7. CHROMID – mediu selectiv și diferențial Salmonella 
• Se bazează pe proprietatea exclusivă a Salmonella de a utiliza substratele
cromogene. 
• Conține peptone, Bromo-6-Chloro-3-Indolyl caprylate (Magenta-caprylate),  5-
Bromo-4-Chloro-3-Indolyl b-D galactopyranoside (X-gal), Novobiocin,
Cefsulodin, săruri biliare, agar, apă distilată. 

Săruri biliare - inhibă Gram pozitivi


Magenta-caprylate – prin metabolizarea lui se obține culoarea violet a
culturilor
X-gal – agent de substituție pentru enzima b-D-galactozidază
Novobiocin - inhibă creșterea Proteus
Cefsulodin - inhibă creșterea Pseudomonas
Salmonella spp. pe
CHROMOID
8. YER – selectiv și diferențial pentru Yersinia enterocolitica

• Inițial descris ca alternativă la agar MacConkey

• Conține peptone, extract de drojdie, MANITOL, piruvat de Na, NaCl, sulfat de


Mg, deoxycolat de Na, ROȘU NEUTRU, cristal violet, agar, apă distilată. 

• Diferențiază între organisme care fermentează manitol și care nu. Utilizează


scăderea de pH pentru a colora coloniile manitol + în roșu. 

• Manitol - --> colonii transparente. 


9. Mediu Chapman 

• mediu selectiv pentru izolarea și enumerarea stafilococilor.


• utilizat și pentru diferențierea speciilor ce fermentează manitolul de cele ce
nu fermentează manitolul.

• Clorura de sodiu - inhibă creșterea majorității bacteriilor Gram (+) și a


bacteriilor Gram (-). 
• Manitolul - fermentarea manitolului induce acidifiere
• Roșului fenol (indicator pH) - devine galben în mediu acid
10. Mediu Baird-Parker
• Mediu moderat selectiv și diferențial pentru izolarea Staph. aureus
• Coloniile apar negre, lucioase, cu margine albă foarte subțire, înconjurată de o zonă mai
deschisă la culoare. 

• Conține digestie pancreatiză de cazeină, extract de carne, gălbenuș de ou, telurit


(mineral), extract de drojdie, piruvat de Na, L-glicină, clorură de Litiu, agar, apă distilată. 

• Piruvatul de Na - stimulează creșterea SA fără a scădea selectivitatea mediului


• Glicina și clorura de litiu - inhibă creșterea altor organisme în afară de SA
• Gălbenuș de ou – stafilococii care conțin lecitinază fac lipoliză și produc contur clar în
jurul coloniei
• Telurit – poate fi metabolizat de 100% dintre Stafilococii coagulazo+ care produc contur
clar, este toxic și duce la formarea coloniilor negre.
Mediul Loeffler – mediu
selectiv pt C. diphteriae
• Conține bulion nutritiv glucozat
cu pH 7,6 și ser normal steril de
bou.
• Se omogenizează ingredientele.
Se repartizează 5-6ml în tuburi
de 16/160mm.
• Se coagulează mediul în pantă
prin menținerea tuburilor
înclinate 30 min la 90 de grade
Celsius pentru a evita formarea
de bule prin încălzirea bruscă a
mediului.
Mediul
Lowenstein-Jensen
• Soluție de săruri amidon
• Soluție de verde malachit
• Omogenat integral de ouă

• Omogenizează, filtreză
aseptic prin 4 straturi de
tifon.
• Repartizează aseptic 6-8ml
în tuburi, coagulează în
pantă pe baie de nisip la 85
de grade C timp de 50 min.
• Verifică sterilitatea prin
incubare 48h la 37 de grade
C.
1. Saburaud
• Conține digestie enzimatică de cazeină, dextroză și agar (cloramfenicol și

Medii pentru gentamicină). 


• Sursă de aminoacizi și nitrogen pentru fungi și levuri. 

fungi 2. CHROMagar Candida


• Conține peptone, cloramfenicol, mix cromogen și agar. 
Medii de transport
1. Mediul Stuart – mediu de transport universal
- non-nutritiv, semisolid, care protejează numeroase microorganisme de efectele autolitice și de
efectele letale ale oxidării (gonococi, hemofili, Bordetella pertusis, shigele, salmonelle,
stafilococi, streptococi, pneumococi, Trichomonas vaginalis etc.)
- nu poate controla eficient înmulțirea coliformilor contaminanți din fecale.
- asigură supraviețuirea bacteriilor 24-72 de ore. 

Conține:
- tioglicolat de sodiu
- glicerolfosfat de sodiu
- clorură de calciu
- albastru de metilen
- agar, apă distilată
Conține:
2. Mediul Amies
- tioglicolat de sodiu
• bazat pe principiul mediului Stuart, ameliorat prin  - NaCl 3g + KCl
înlocuirea glicerolfosfatului cu o soluție tamponată de  +MgCl2
săruri anorganice care limitează multiplicarea coliformilor de  - Kh2PO4 + Na2HPO4
contaminare  - clorură de calciu
• se  introduce tamponul cu prelevat patologic în profunzimea  - Cărbune farmaceutic
neutru
mediului,  se retează tija la nivelul orificiului și se   
- agar, apă distilată
înșurubează capacul. 
Conține:
3. Mediul Cary-Blair - tioglicolat de sodiu
• pentru materii fecale  - NaCl 5g
+Na2HPO4
• bazat pe principiul mediului Stuart, ameliorat prin 
- clorură de calciu
înlocuirea glicerolfosfatului cu o soluție tamponată de 
săruri anorganice care limitează multiplicarea coliformilor de  - agar, apă distilată
contaminare.
Bibliografie 
1. Buiuc D și Neguț M: Tratat de microbiologie clinică. Ediția a III-a,
București, Editura medicală, 2017.
2. BD BACTEC - Automated Blood Culture System User's Manual

S-ar putea să vă placă și