IZOLAREA BACTERIILOR

MEDIILE DE CULTURĂ

 Mediul de cultură reprezintă substratul nutritiv folosit pentru creșterea și

multiplicarea microorganismelor în condiții artificiale
 Mediile de cultură ajută la obținerea microorganismelor în stare pură,
permițând identificarea lor, studiul unor proprietăți caracteristice, prepararea
de antigene, vaccinuri și alte produse patologice
 Condiții pe care trebuie să le îndeplinească mediile de cultură:
 Să ofere substanțele plastice și energetice necesare fiecărui microorganism;
 să aibă un ph optim;
 Să asigure cerințele de aerobioză sau anaerobioză;
 Să aibă un anumit grad de umiditate;
 Să fie stabil;
 Să fie sterile;
 Să se pastreze ferite de contaminare .
 În prepararea mediilor de cultură se respectă următoarele etape:
 Stabilirea rețetei;
 Verificarea ph-ului;
 Filtrarea mediului pentru îndepărtarea sărurilor alcalino-pământoase;
 Repartizarea in recipiente adecvate;
 Sterilizarea.
CLASIFICAREA MEDIILOR DE CULTURĂ

a. după consistență:
 Medii lichide (apa peptonată, bulionul)
 Medii solide (geloza)
b. După proveniență:
 Medii naturale (lapte, bilă, ser, cartof)
 Medii artificiale (carne și organe de pește, făină de pește, mazăre,
soia, drojdie)
 Medii sintetice (substanțe chimice)
 Medii semisintetice
c. După compoziție și după utilizare:
 Medii uzuale sau simple:
- lichide: bulionul, apa peptonată
- Solide: geloza simplă (bulion + agar-agar)
 Medii complexe- medii simple cu adaos de lichide organice sau zaharuri,
folosite pentru cultivarea speciilor mai pretențioase sau evidențierea unor
proprietăți:
-mediul geloză-sânge- folosit pentru evidențierea fenomenului de hemoliză
-medii elective- asigură cu precădere dezvoltarea unui germen în raport cu alți
germeni (m.Loeffler- bacilul difteric)
-medii selective- selectează un anumit germen, conținând substanțe
bacteriostatice pentru flora de asociație:
 M. Loewenstein Jensen- bacilul Koch
 M. Chapman- stafilococi patogeni
 M.Tinsdale, m.Gudel-Tietz- b.difteric
 Medii pentru izolarea enterobacteriilor: Istrate-Meitert, Leifson, Mac-
Conkey, Levine, Wilson-Blair
 M. PPLO- pt.izolarea mycoplasmelor
 Medii de îmbogățire:
 M.OCST- bacilul difteric
 M.Chapman
 M.Picke- streptococul β-hemolitic de grup A
 Medii diferențiale-m. Drigalski
 Medii ce pun în evidență proprietăți biochimice:
 M .politrope (TSI, MIU, MILF)
 M. Hiss
 M. Simons
 M. cu fenilalanină
 M. cu lizină
 M. cu esculină
 Medii pentru cultivarea bacteriilor anaerobe: m. Veillon, m.Willis-Hobbs
 Medii pentru cultivarea fungilor- m.Sabouraud
ÎNSĂMÂNȚAREA
PRODUSELOR PATOLOGICE
ȘI IZOLAREA ÎN CULTURĂ
PURĂ
 Însămânțarea reprezintă introducerea
produselor patologice pe medii de
cultură potrivite, pe suprafață sau în
profunzime, cu scopul obținerii de
culturi microbiene pure.
 Reguli corecte de însămânțare:
- Folosirea instrumentarului steril
- Flambare orificiilor recipientelor ce conțin
mediile de cultură
- Nu se vorbește, nu se tușește, ușile și
ferestrele trebuie închise
 Se folosesc medii de cultură lichide și
solide, întotdeauna însămânțările de pe
mediile lichide fiind urmate de
însămânțări pe medii solide
IZOLAREA ÎN CULTURA PURĂ
 Colonia- o populație microbiană
formată din indivizi proveniți
dintr-o singură celulă (clonă)
 Cultura pură- se obține preluând
cu ansa o singură colonie și
însămânțând-o pe un mediu de
cultură adecvat
 Izolarea reprezintă operația prin
care se separă
microorganismele dintr-un
produs în care se găsesc mai
multe specii, în vederea
identificării fiecăreia