CONDITIILE DE TRANSPORTARE A INFECTIILOR SIST.

RESPIRATOR
Prelevate:
Exsudatul nazofaringean (tampon): tusa convulsiva, pneumonia,
Singe
Sputa
Exsudatul nazal
Picaturile Flugge prelevate pe placa tusita.
Metode transport:
Tusa convulsiva: Mediul Kuznetov (sol tampon fosfat, ph 7, 0.5% agar-agar, 0.2%carbune activat)
Virusurile care sunt izolati pe culturi de celule sal embrioni de gaina se transporta in medii de penicilina,
streptomicina, nistatina.
Mediul de glicerina 30 %
Solutie tampon fosfat
Sol NaCl 3 %
Bact anaerobi, Neiserii - Mediul Stuart (NaCl, agar-agar, tioglicita de Na, albastru de metileno)
CERINTELE MEDIILOR DE CULTURA
Sa asigure necesitatile nutritive si energetice ale bacteriilor
Sa contine substantele principale care participa la crestere: O, N, C, vitamine, saruri)
Umiditate optimala
Temperatura optimala, ph contastant
Sa fie izotonice,
Sterile,
Potential de oxido-reduce normal
Vizcozitate normala
Clasificarea:
1. Dupa provinienta
a. Naturala
b. Sintetice
c. Semisintetice
2. Dupa consistenta
a. Lichide
b. Solide
c. Semisolide determinarea mobilitatii
3. Dupa compozitia chimica
a. Mesii uzuale pt bacterii nepretentioase. Sterilizarea autoclave 120, 20 min
Apa peptonata
Bulion peptonat
Geloza
gelatina
b. complexe
i. medii elective (cresterea unor bacterii, sunt pretentioase)
bulion-ser
bulion-glucozat
geloza-singe streptococi
ser coagulat corinebacterium
ii. medii selective (stimuleaza cresterea unor mi/o si inhiba cresterea altor)
geloza-salina-srafilococi
geloza-alcalina-vibrioni
ploskirev-salmonela, shigela
iii. medii de imbogatire (selectiva), imbogatirea culturii patogene.
Muller - escherihea
Kaufman - salmonela
Bulion selenit salmonela, shigella,
Kitt-Tarozi anaerobi
Apa peptonata alcalina vibrini holera
iv. Medii difrential-diagnostice (studiez o anumita proprietate)
Endo : geloza+lactoza+fucsina+hiposulfit de Na
Levin: geloza+lactoza+eozina+albastru de metilen
Ploskirev:geloza+lactoza+rosu neturu+saruri de acizi biliari+verde de briliant
Olkenitski
v. Medii speciale pt anumite bacterii:
Finn, Popescu, Lowenstein-Jensen tuberculoza
INSAMINTARE:
1. Geloza-singe
a. Geloza lichifiata si racita pina la 45C repartizata in flacoane
b. Se aplica 5 % de singe defibrinat.
c. Geloza se amesteza
2. Geloze salina cu ou
3. Mediul Hiss consta in geloza, glucid si indicator Andrade
4. Mediul Kligler: geloza+lactoza+glucoza+indicator+sulfat de Fe (detectarea H2S)
5. Bulion peptonat:
a. extras de carne se dizolva
b. se aplica 10 g peptona si NaCl.
c. Se fierbe, se raceste, se filtreaza si se toarna in eprubete.
6. Geloza in panta
7. Geloza semilichida
DETERMINAREA CMI (concentratia mnima de inhibitie)
1. Intr-un sir de tuburi se face dilutia Antibioticului (256UA, 128UA, 64,321)
2. Se asauga in fiecare tub mi/o cu exceptia celui martor.
3. Termostat.
4. Rezultatul: CMI se determina in comparatie cu martorul
METODA DIFUZOMETRICA
Componente: rondele/discuri, antibiotic 6 diferite, mi/o
1. Cutia petri este inoculata cu suspensia bacteriana
2. In termostat 24h 37C
3. Se aplica rondelele cu antibiotic
4. Incubare 24h
5. Diametrul zonei de inhibitie este comparat cu diametrul standart pt fiecare antibiotic. Valorile sub acest
dimetro tulpina R si invers.
DETERMINAREA AB IN UMORILE ORGANISMULUI
1. Prelevarea probelor (LCR, singe) dupa 1 de administrare de AB
2. Incubare 24 ore pt excreti AB
3. In fiecare tub se aplica serul
4. Aplicam tulpini infectate
5. Incubare 24 h
6. CMI se determina in comparatie cu martorul
BACTERIOFAGUL.APPELMAN in mediu lichid
Titrarea: determ nr de fagi virulenti intr-o cultura.
1. In tuburi cu bulion peptonat se adauga suspensie de mi/o si fag
2. Incubare
3. Se filtreaza
4. Resultate: dilutia max a fagului care inca inca mai provoaca liza bacteriilor (mediul clar)
Scopul:
Tratamentul maladiilor
Fago-identificare -
Fagotipaj
METODA OTTO, FURT, FISHER
Metoda OTTO:
1. Pe geloza se aplica mi/o, fagi.
2. Incubare
3. Daca se aflau fagi omologi bacteriilor are loc liza.
Metoda FURT:
1. Geloza se aplica mi/o, fagi
2. Cutia se imparte in 4 sectoare, pe fiecare sector se aplica culturi.
3. Incubare
4. Lipsa cresterii intr-un sector indica prezenta fagului
Metoda FISCHER:
1. Geloza se aplica mi/o, fagi
2. Cutia se imparte in 10 sectoare, pe fiecare sector se aplica culturi.
3. Incubare
4. Lipsa cresterii intr-un sector indica prezenta fagului
Scopul: fago-indetificare, tratamentul maladiilor, fagotipaj
FAGOTIPAJ, FAGOIDENTIFICARE:
Fago-indetificare: indetif fagilor prin OTTO, FURT, FISHER
Fagotipaj: diferentierea tulpinilor S si R la diferiti fagi pt aceeasi scpecie. Marker epidimiologic
1. Geloza se aplica mi/o, fagi
2. Cutia se imparte in sectoare, pe fiecare sector se aplica culturi si fagi.
3. Incubare
4. Diametrul lizei celulare si compari cu diametrul standart.


REACTIA DE AGLUTINARE DIRECTA (RA):
1. pe lama (seroidentificare- identif Ag cu folosirea Ac cunoscuti)
componentele: anticorpi, suspensie bacteriana (Ag), solutie fisiolgica (NaCl)
tehnica: 1/10
citirea: peste 5-10 min,
a. reactia positiva: apar flocoane/conglumerate mari sau mici
b. reactia negativa: lichid tulbure
2. in tuburi (serodiagnostic identificarea Ac, cu folosirea Ag cunoscuti)
componentele: ser (Ac 1/100,1/200,), bacterii (Ag), sol.fiziologica NaCl
tehnica: in tuburi
citirea: (++++)
a. reactia positiva formeaza un sendiment sub forma de umbrela inversata
b. reactia negativa la fundul tuburilor se formeaza un sendiment sub forma de de buton sau inel.
REACTIA DE AGLUTINARE INDIRECTA/HEMAGLUTINARE INDIRECTA (RHAI)
componentele: eritrocite formalinizate (cal, iepure, gaina, berbec, om), suspensie bacteriana (Ag),
sol.tanina sau clorid de crom. Sol, fisiolgica NaCl
Tehnica: eritrocite formalinizate se trateaza cu sol clorid de crom sau tanina (pt a mari adsorbtia) si apoi se
adauga suspensia bacteriana.
citirea:
a. reactia positiva: se formeaza o umbrela inversata de culoare bruna la baza godeului de politer.
b. reactia negativa
REACTIA DE HEMAGLUTINARE INDIRECTA INVERSATA (RHAII)
Componente: eritrocite formalinizate, suspensie bacteriana, sol.talina sau clorid de crom si gamaglobulina.
Tehnica: 3 rinduri de godeuri (1 rind sol stabilizata, 2 rind ser imun omolog, 3 rind ser imun heterolog), se
aplica eritrocitele pregatite.
Citirea: are loc 30-40 min
a. Reactia positiva: formeaza flacoane si lichidul limpide
b. Reactia negativa: lichidul tulbure, opaciere.
REACTIA DE CO-AGLUTINARE
Componente: IgG (Ac) prin portiunea Fc + Proteina A S.auereus (Ag)
Tehnica: pe lama, serul cu IgG si suspensie stafilocica (protena A)
Citirea:
a. Reactia positiva: flacoane mari mici
b. Reactia negativa: tulbure
REACTIA DE LATEX AGLUTINARE
Componente: Ag fixate pe particule de latex, IgG (Ac)
Tehnica: pe lama
Citirea:
a. Reactia positiva: prezenta factorului reumatoid are loc hemaglutinare
b. Reactia negativa
REACTIA ANTIGLOBULINICA COOMBS (depistarera Rh)
Componente: singele la nou nascut (Ag), ser imun anti IgG (Ac)
Tehnica: pe lama (singele la nou nascut + ser imun anti IgG)
Citirea:
a. Reactia positiva: provoaca aglutinarea eritrocitelor care contine Ac anti-Rh
b. Reactia negativa: nu aglutineaza eritrocitele normale (adica care au Rh-)
REACTIA DE INHIBARE A HEMADSORBTIEI (RIHAds) (virusuri)
Componente: cultura celulare (infectate cu vrus), suspensie de eritrocite
Tehnica: se aplica eritrocite 0.5% 0.2 ml + cultura celulara cu vrus. Incubarea 20 min la diferite
temperaturi
Citirea microscop
a. Reactia positiva: vrus a intrat in alte eritrocite.
b. Reactia negativa

REACTIA DE INHIBARE A HEMAGLUTINARII (RIHA) (virusuri)
Componente: hemaglutinina (Ag) , suspensii de hematii(Ac)
Tehnica: diferite dilutii (1/10,1/20,1/30,.,1/640) aplicam hemaglutininas si suspensii de hematii.
Citirea
a. Reactia positiva: formeaza un sendiment de hematii in forma de buton
b. Reactia negativa: pelicula care tapeteaza fundul godeului.
REACTIA DE PRECIPITARE IN GEL:
Componente: agar-agar (geloza), Ac (ser imun)+ Ag (suspensie bacteriana)
Tehnica: se face in geloza diferite godeuri se aplica Ac, si in mijlocu gelozei se face un godeu unde se
aplica Ag.
Citirea:
a. Reactia positiva: unde se formeaza linii de precipitare
b. Reactia negativa
REACTIA DE PRECIPITARE IN LICHID
Componenta: ser imun (Ac) + bacterii (Ag)
Tehnica: intru-un tub se aplica ser imun, apoi se aplica Ag sa se prelinga pe peretii tubului si se amesteca.
Citirea
a. Reactia positiva: formarea unui inel alb- precipitarea
b. Reactia negativa
REACTIA IMUNOFLUORESCENTA DIRECTA (seroidentificare)
Componente: Ac (marcate cu fluorocromi) marcati specific pt fiecare Ag, Ag (material cultura pura,
biopsie)
Tehnica: se prepara frotiu, biopsia (Ag) apoi se aplica ser imun marcat cu fluorocromi (Ac). Peste 20 min
de incubare observar la microscop luminiscent.
Citirea:
a. Reactia positiva: se observa luminescente locala.
b. Reactia negativa
REACTIA IMUNOFLUORESCENTA INDIRECTA (serioidentificare si serodiagnostic)
Componente: Ag (biopsie, cultura), 2Ac (1 nemarcat cu fluorocrom, 2 anti IgG marcat cu fluorocrom)
Tehnica: Pe frotiu (Ag) se aplica 1Ac nemarcat. Se asteapta 20 min si se spala. Apoi se aplica al 2 Ac
anti IgG de la un animal. Se obsearva la microscop luminiscent.
Citirea:
c. Reactia positiva
d. Reactia negativa
REACTIA DE FIXARE A COMPLEMENTULUI (RFC)
Componente: sistemul Ag-Ac, Complementul (fixeaza IgG si IgM).
1. Etapa: Ac (serul imun), Ag (nu cunoastem)
2. Etapa sistemul hemolitic: Ag (hematii de berbec), Ac(nu cunoastem)
Tehnica: se amesteca Ag+Ac. Se incubeaza 1h 37C
Citirea
a. Reactia positiva:
1 Sistem: are loc fixare C cu Ag-Ac (daca se unesc)
2 Sistem: nu are loc hemoliza
b. Reactia negativa: formeaza hemoliza (sistem 2)
REACTIA DE BACTERIOLIZA (leptospirozele, holera)
Componente: Ag (celule bacteriene, hematii, vibrioni, leptospire), Ac (serul imul sau serul bolnavului),
Complement
Tehnica:
IN VITRO: dilutia cu Ag + Ac+ C. Incubeaza 2h 37C. se reinsaminteaza in geloza cite 0,1 ml. Se
incubeaza 2 h 37C. se mai face martor: Ag+ser fiziologic+C
IN VIVO: Ag+Ac se pune intraperitoneal la cobaie. Peste fiecare 10 ml se extrage lichidul peritoneal si se
examineaza microscopia pe fond negru
Citirea:
a. In vitro: se compara coloniile crescute cu martorul inseamna ca au fost lezate 50% de celule.
b. In vivo: nr bacteriilor scade treptat pina la disparitia lor.
REACTIA DE NEUTRALIZARE A EXOTOXINELOR IN VIVO
Componente: Ac (ser imun) + Ag (exotoxina)
Tehnica: Ac se amesteca cu Ag, apoi amestecu se incubeaza in termostat 2h 37C. apoi se introduce
intraperitoneal.
Citirea: daca animalele supravietuiesc exotoxina nu actioneaza asupra organismului.
REACTIA DE IMOBILIZARE A BACTERIILOR
Componente: Ac anti-bacterieni (serul imun) + Ag (suspensia bacteriana) + complemente.
Tehnica: intre lama si lamele se incubeaza, apoi se observa la microscop cu fond intunecat.
Citirea : 51-100% test pozitiv, 25-50% test slab pozitiv, <20 negativ.
TESTUL ELISA (RIE)
Componente:
a. RIE directa (metoda sandwich (seroidentificare): Ag (necunoscut) + Ac (ser imun)
b. RIE indirecta (serodiagnostic) Ag cunoscut+ Ac( necunoscut)
Tehnica
a. RIE directa: Ac+Ag, incubeaza 1h spala. Apoi se adauga Ac marcati cu enzime, se incubeaza 30min-
1h se spala, se adauga substrat cromogen si in 30 min se vede culoarea.
b. RIE indirecta: la fund se apunde Ag+Ac, incubeaza 1h, se spala. Se adauga Ag marcat cu enzima
(Anti-Ig sau protena A), se incubeaza, se spala. Apoi se adauga substratul cromogen
Citirea: dupa culoare.
TESTUL IMONOBLOT (seroidentificare)
Componente: Ac+Ag+enzime+substrat cromogen
Tehnica:
a. Ietapa: electroforeza in gel a probei de Ag.
b. II etapa: transf elctric al Ag pe membrana de nitroceluloza
c. III etapa: pe membrana sunt aplicati Ac contra Ag, apoi enzima care depisteaza Ac fixati. Si apoi
substratul cromogen.
Citirea: culoare
TESTUL OPSONO-FAGOCITARA (compararea intensitatii fagocitozei microbiilor de catre leucocite in prezenta
serului normal si imun).
Componente: microbi (Ag), leucocite, serul cercetat (Ac)
Tehnica: I eprubeta se aplica: microbi, leucocite, serul cercetat. II eprubeta se aplica microbi, leucocite,
serul de control. Ambele se incubeaza la 37C 20 min, apoi se fac frotiuri si se fixeaza dupa Romanovski-
Giemsa
Citirea: se urmareste nr de bacterii fagocitate in 50 de leucocite. N50 este indicele opsonofagocitar pt un
leococit. Marimea indicelui: cercetat/de control.
ALERGENII MICROBIENI.INTRADERMOREACTIA.
Alergeni- reactia de raspuns a organsimului dupa contact cu Ag.
Functii:
Diagnostic a unor infectii inaparente
Determinarea sensibilizarea organismului fata de medicamente
Depistarea imunitatii celulare
Are loc priin:
Primul contact contact direct cu Ag
Al doilea contact apare imunitatea fata Ag care a contactat
Metode:
1. Intradermoreactia
a. Dezinfecteaza locul cu alcool
b. Se injecteaza 0.1 ml de sol.alergenica.
c. Se observa pata rosie.
d. Testul Dick indentificarea scarlatinei
e. Testul Schick indentificarea difteriei
f. Testul Montaux indetificarea tuberculozei
DIAGNOSTICUL STAFILOCOCILOR
1. Prelevatele patologice: puroi, singe, LCR, urina, matere fecale, sputa.
2. Bacterioscopica:
a. Coloratia Gram: G+, coci in strugure de culoare albastra, imobili, necapsulati, nesporogeni.
3. Bacteriologica:
a. Mediul de izolare:
Bulion-peptnat turbiditate uniforma
Geloza-singe: Colonii S, bombate, opace, pigmentate auriu, alb sal galben cu hemoliza
Geloza-salina cu galbenus de ou: haloc opac
Chapman: au halou galben, manitol + pt S.aureus, manitol - pt cele alte
b. Mediul diagnostic-diferentiar: S.aureus
Coagularea laptele: +
Fosfataza: +
Fermentarea manitol: +
Testul O/F: fermentarea zaharilor +
Rezistent la novobiocina: S

4. Serologic: pt depistarea Ac anti-stafilolizine-alfa.
a. ELISA:
b. Latex-aglutinare
DIAGNOSTICUL STREPTOCOCILOR
1. Prelevatele patologice: exsudat oro-faringean, puroi, singe, LCR, sputa.
2. Bacterioscopica:
a. Coloratia Gram: G+, coci in lanturi de culoare albastra, imobili, necapsulati, nesporogeni, facultativ-
anaerob
3. Bacteriologica:
a. Mediul de imbogatire:
Bulion-glucozat (aerob): formeaza depozit la fund si pe pereti tubului.
Geloza-singe: colonii S, bombate, transparente sau translucide, cu zona de ,-hemoliza
(hemoliza) si -nehemolitici (apare verde)
Bulion Kitt-Tarrozzi (anaerob) cu 10-20% CO
2
:
b. Mediul diagnostic-diferentiar: S.pyogenes
Determinarea serogrului: R.precipitare, R.latex-aglutinare, R.coaglutinare. Grupul A, -
hemolitica
Testul de bacitracina: grupul A este S, grupul B este R.
4. Serologic: pt depistarea Ac anti-streptolizinei
Reactia Dick pt scarlatina
R.Neutralizare
DIAGNOSTICUL MENINGOCOCI
1. Prelevatele patologice: LCR, exsudatul nazo-faringean, singe
2. Bacterioscopica:
a. Coloratia Gram: G-, diplococi rosii, imobili, capsulati, nesporogeni.
3. Bacteriologica:
a. Mediul de imbogatire:
i. LCR
Geloza-ser/geloza-singe colonii S, cu margini netede, translucide.
Geloza-ciocolata
Mediul Mueller-Hinton
ii. Exsudat nazofaringean: pe medii cu adaus de antibiotic (lincomicina, vancomicina, ristomicina)
iii. Singe: medii lichide bulion-glucozat-singe
b. Mediul diagnostic-diferentiar:
Testul Catalazo +
Testul Oxidazo +
Scindeaza gucoza si maltoza fara producere de gaz
4. Serologic: depistarea Ac anti-meningococi
RA
RHAI
DIAGNOSTICUL GONOREIEI
1. Prelevatele patologice: sectretiile vaginale, secretiile uretrale, LCR, singe, puroi, tampon rectal
2. Bacterioscopica:
a. Coloratia Gram: G-, diplococi rosii, imobili, capsulati, nesporogeni.
3. Bacteriologica:
a. Mediul de imbogatire in atmosfera umeda cu 5-10 %CO
2
:
Geloza-ciocolata:
Mediul HYL
Mediul Thayer-Martin
b. Mediul diagnostic-diferentiar:
Oxidazo +
Scindeaza glucoza pina la acid
Serovariantele: co-aglutinare
4. Serologic: depistarea Ac anti-gonococica
RFC
ELISA
RIF
DIAGNOSTICUL ANTRAXUL
1. Prelevatele patologice: exsudatul carbuncul cutanat, sputa, materii fecale, LCR, singe.
2. Bacterioscopica:
a. Coloratia Gram: G+ albastru, bacili, capsulati, nesporulati
b. Coloratia Burri-Hins
3. Bacteriologica:
a. Mediul de imbogatire:
Mediu cu glicerina si cartof.
Bulion-singe: mari, rugoase, fara hemoliza
b. Mediul diagnostic-diferentiar:
Lichefiaza gelatina cu aspectul unui bradut intors
4. Serologic: depistarea Ac anti-antrax
Reactia intradermica cu antraxina
DIAGNOSTICUL BRUCELOZA
1. Prelevatele patologice: sputa, materii fecale, LCR, singe.
2. Bacterioscopica:
a. Coloratia Gram: G- rosu, bacili, necapsulati, nesporulati, imobili
3. Bacteriologica:
a. Mediul de imbogatire:
Mediu cu extract de ficat
Geloza D: mici, S, transparente, incolore,
Geloza cu eritritol
b. Mediul diagnostic-diferentiar:
Pruduce gaz (H2S) si ureaza
Nu fermenteaza zaharurile.
RA: depistarea Ag A si M.
4. Serologic: depistarea Ac anti-brucela
Reactia Burnet: reactia intradermica
Reactia Huddleson (RA pe lama)
Reactia Wright (RA pe tub)
RFC, Reactia opsono-fagocitara

DIAGNOSTICUL PESTEI
1. Prelevatele patologice: sputa, materii fecale, LCR, singe.
2. Bacterioscopica:
c. Coloratia Gram: G- rosu, bacili bipolar, capsulati, nesporulati
d. Coloratia Burri-Hins
3. Bacteriologica:
c. Mediul de imbogatire:
geloza-singe: colonii mici cu centru opac cu periferie transparenta.
Bulion-singe:turbiditate cu o pelicula superficiala.
d. Mediul diagnostic-diferentiar:
Fermentarea glucozei pina la acid.
4. Serologic: depistarea Ac anti-pestos
RHI cu eritrocite cu Ag F1
RFC
DIAGNOSTICUL BOTULISMUL
1. Prelevatele patologice: exsudatul carbuncul cutanat, sputa, materii fecale, singe.
2. Bacterioscopica:
e. Coloratia Gram: G+ albastru, bacili, capsulati, Sporulati
f. Coloratia Aujesky: spor subterminal, centru
3. Identificarea rpida:
R.N.
RHAI
R.Opsono-fagocitara (toxina botulinica are functia leucotxica, ea impede fagocitarea)
R.P.
ELISA
DIAGNOSTICUL GANGRENA GAZOASA
1. Prelevatele patologice: puroi, lichid seros, singe.
2. Bacterioscopica:
g. Coloratia Gram: G+ albastru, bacili, capsulati, sporulati, mobili
h. Coloratia Aujesky: sporul subterminal
3. Bacteriologica:
e. Mediul de imbogatire:
Mediul Kitt-Tarozzi
Mediul cu lapte
Mediul Wilson-Blair.
f. Mediul diagnostic-diferentiar:
Fermentarea lactozei
Produce hemoliza
Mediul Hiss
4. Serologic:
R.opsono-fagocitara



DIAGNOSTICUL TETANOS
1. Prelevatele patologice: puroi, lichid seros, singe.
2. Bacterioscopica:
i. Coloratia Gram: G+ albastru, bacili, capsulati, sporulati, mobili
j. Coloratia Aujesky: sporul terminal
3. Bacteriologica:
g. Mediul de imbogatire:
Mediul Kitt-Tarozzi
Mediul Zeiller
Mediul Weinberg
h. Mediul diagnostic-diferentiar:
Produce indol
4. Serologic:
R.opsono-fagocitara
RP
RHAI
ELISA
DIAGNOSTICUL DITFERIA
1. Prelevatele patologice: puroi, lichid seros, singe.
2. Bacterioscopica:
k. Coloratia Gram: G+ albastru, bacili,
l. Coloratia Neisser: granulatii de volatina
3. Bacteriologica:
i. Medii de transport:
Geloza-ser semilichida cu telurit de K
Mediul ou-cisteina-ser-telurit
j. Mediul de elective:
Mediul Loeffler: colonii S, mici, netede, opace, albe-cenusii
Geloza-singe
k. Medii selective
Mediul Clauberg: Colonii S/R mari, negre, cu aspecto floare de margarenta
Mediul Tinsdale: colonii negre cu halou brun
Mediul Bucin: colonii albastre
l. Mediul diagnostic-diferentiar:
Ureaza
Cistinaza +
Fermenteaza glucoza
4. Serologic:
R.N
PCR (gena TOX)
RA
RHAI
ELISA
Testul Schick



DIAGNOSTICUL TUSA CONVULSIVA
1. Prelevatele patologice: exsudat nazofaringean, particule tusite
2. Mediile de transport: Kuznitov (sol.tampon, carbune activat, agar-agar)
3. Bacterioscopica:
m. Coloratia Gram: G- rosii, bacili, microcapsulati, imobili
4. Bacteriologica:
m. Mediul speciale:
Mediu Bordet-Gengou: colonii S, mici, bombate, lucioase, cu aspecto de picatura de mercur,
hemolitice.
Geloza-cazeina-singe-carbune activat
n. Mediul diagnostic-diferentiar:
Oxidaza +
Nu fermenteaza glucidele
5. Serologic:
RA Ag capsulare, polizaharidice, fimbrial, lipopolizaharidic.
RFC
ELISA
DIAGNOSTICUL TUBERCULOZA
1. Prelevatele patologice: exsudat nazofaringean, LCR, sputa, singe
2. Mediile de transport: Kuznitov (sol.tampon, carbune activat, agar-agar)
3. Bacterioscopica:
n. Coloratia Gram: G+ albastre, bacili, necapsulati, imobili, acidorezistente
o. Coloratia Ziehl-Neelsen: bastonase galbene pe fond negru
4. Bacteriologica:
o. Mediul speciale:
Mediul Lowenstein-Jensen: colonii S, rugoase, opace de culoare crem-bej
Mediul Popescu
Mediul Finn (glutamato de Na)
p. Mediul diagnostic-diferentiar:
Ureaza +
Catalazo -
5. Serologic:
Reactia Mantoux intradermoreactia
DIAGNOSTICUL LEPTOSPIRA
1. Prelevatele patologice: LCR, sputa, singe
2. Mediile de transport: Kuznitov (sol.tampon, carbune activat, agar-agar)
3. Bacterioscopica:
p. Coloratia Giemsa, Microscopia fond negru, contrast de faza.
4. Bacteriologica:
q. Mediul speciale:
Mediul Korthof
Mediul Stuart
5. Serologic: RFC, RHAI,ELISA,



DIAGNOSTICUL SIFILIS
1. Prelevatele patologice: LCR, sputa, singe
2. Mediile de transport: Kuznitov (sol.tampon, carbune activat, agar-agar)
3. Bacterioscopica:
q. Coloratia Giemsa, Microscopia fond negru, contrast de faza, impregnate cu argint
4. Bacteriologica:
r. Mediul speciale:
Mediul: Mayer-Nelson
5. Serologic: RFC, RHAI,ELISA,


TEHNICA RECOLTARII APEI DIN ROBINET
1. Se sterilizeaza robinetul cu mesa de tifon imbibata cu lcool.
2. Se asteapta citeva secunde, apoi deschide robinetul.
3. Se asteapta 10 min.
4. In flacoane se adauga 10 mg hiposulfit de sodiu.
5. Apoi se recolteaza 500 ml de apa, in flacoane trebuie sa aiba 1 cm sub dop.
6. Pe flacon se indica data, ora si numele persoanei care a recoltat proba.
DETERMINAREA NTG IN APA nr total de germeni
1. Se pipeteaza 1 ml din apa si se aplica in cutii Petri sterile.
2. In cutii se toarna 5-7 ml geloza lichida si racita la 45C
3. Se omogenizeaza prin miscari si apoi se introduc in termostat cu capacul in jos.
4. Numararea se face pe funul cutiei marcind cu creionul fiecare colonie, daca sunt prea multe se foloseste o
formula.
Normativele NTG 1 ml:
Buna pt consumare: 100 mi/o
Dubioasa: 100-150 mi/o
Infectara: >150 mi/o
DETERMINAREA INDICELUI COLI (cantintea de E.coli in 1l de apa)
PRIN MEMBRANA FILTRANTA
1. Sterilizarea membranelor nitroceluloza
2. Se filtreaza apa.
3. Aceste membrane se incubeaza in termostat 24h.
4. Daca cresc colonii de culoare rosii-inchis cu luciu metalic sal roz cu centrul rosu.
5. Din colonii se ea si examineaza la microscop si se identifica specia.
PRIN METODA TITRARII
1. Apa se aplica bulion peptonat cu glucoza (mediul de imbogatire) cu indicator de pH si tuburi Durham pt
identificarea gazului
2. Pe mediul Endo se face replicarea
3. Identificarea pe culturi izolate. Determinarea oxidazei. Daca este oxidazonegativ si Gram negativ atunci
sunt E.coli. si fermenteaza glucoza pina la acid si gaz.
Normativele:
Potabila: colonii intre 2-3, titrul de 300
Poluata daca este mai mult.
TEHNICA RECOLTARII PROBEI DE AER
Se recolteaza in 5 punte (4 periferii si unu centru situate la 1.6m), se face ziua. Se recolteaza prin sedimentare sau
aspiratie.
Metoda sedimentarii
1. In puntele de recoltare se aplica:
Stafilococi: cutii cu geloza hiperclorurata cu lapte sau cu lapte si ou
Streptococi: cutii cu mediu Garro( geloza cu singe de iepure si violet gentiana)
Metoda de aspirare (Krotov, Diakenov)
1. Aspirator care contine membrane care aspira si particulele aspirate cad in cutii de cultura (250l) sau in
lichid (0.2 ml) (bulion peptonat,sol.NaCl)
2. Pt lichid se foloseste membrane nitroceluloze
NORMELE NTG
1. Sala de operatii: <500
2. Salon de spital: <3500
DETERMINAREA STREPTOCOCILOR
1. Se aspira cu aparatul Krotov 250 ml
2. Cutii cu mediul Garoo (geloza-singe de iepure imbibat cu violet de gentiana)
3. Apoi se insaminteaza 24 h 37C
4. Pe geloza singe formeaza colonii mici, punctiforme, albe cenusii, -hemolitici si -hemolitici
5. Pe mediul Garro- ei apar in lanturi, catalonegativi4
Normele:
Sala de operatii: 0
Sala de salon: <16
DETERMINAREA STAFILOCOCILOR
6. Cutii cu geloza hipoclorurata cu lapte sau lapte cu ou
7. Se aspira cu aparatul Krotov 250 ml
8. Apoi se insaminteaza 24 h 37C
9. S.patogeni cutii hipoclorurata cu lapte formeaza dimetro 2-3 mm inconjurata cu o zona de hemoliza clara.
10. S.patogeni cutiii hipoclorurata cu lapte si ou formeaza dimetro 2-3 mm inconjurata cu o zona transparenta cu
halou opac.
Normele:
Sala de operatii: 0
Salon de spital: <24