2.2. MATERIALE I METODE 2.2.

1 PRELEVAREA I PREGTIREA PENTRU ANALIZA MICROBIOLOGIC: Microbiologul trebuie s aleag pentru analiz un mediu cu o formul complex care s asigure o identificare rapid i sigur a eventualilor patogeni prezeni n proces. Pentru analiza microorganismelor prezente sunt necesare trei tipuri de mediu: mediu de mbogire; mediu cu agar de izolare selectiv; mediu agarizat pentru izolare selectiv.

I: Prelevatele se trec pe mediul de cultur de prembogire ap peptonat 1%. Se incubeaz ntre 6 - 8 h la 35C. II: 1ml din mediul de cultur de prembogire se inoculeaz n mediul de cultur mbogit bulion selenit (bulion selenit cu manitol pentru recuperarea cantitativ a organismelor stresate). III: Analiza se realizeaz n plci Petri n care: a) Din mediul de prembogire se inoculeaz pe medii de izolare nalt selective pentru urmtorii germeni G(-): Pseudomonas aeroginosa pe mediu CN (Cetrimid Acid Nalidixic) se incubeaz la 35C, timp de 24 - 48 h colonii galben fluorescente. Pentru Pseudomonas cepacia se folosete mediul CFC (Cetrimid Fucidin Cefaloridin) se incubeaz la 25C, timp de 24 48 h; Escherichia coli se incubeaz la 35C pe mediu de Levine, timp de 24 48 h. i pentru urmtorul germene G(+): Staphylococcus aureus pe mediu Chapman (rou fenol, manitol) i pe mediu nalt diferenial cu gelatina. Prezena lui este identificat prin formare de colonii galben intens pn la portocaliu colonii care formeaz pigmeni carotenoidici, iar n jurul coloniei se formeaz un halou galben mediul are n componen manitol. Pentru mediul cu gelatina, lichefiaz gelatina Saburand. b) Din mediul de mbogire cu bulion selenit se fac treceri pe medii nalt selective Wilson Blaire sau AVB (Agar Verde Briliant) IV: n paralel cu determinrile pentru enterobacterioze s-au efectuat inoculri pe mediu Czapek Dox sau Saburand. Pe mediu Saburand pentru drojdii se incubeaz 2 zile iar pentru mucegaiuri se incubeaz 5 zile. Pentru Candida albicans pn la 14 zile/ 37C. 2.2.2. METODELE DE ANALIZ a) Mediul Levine: Indicaii: izolarea i diferenierea Escherichia coli i Enterobacter, identificarea Candida albicans. Mediul corespunde indicaiilor metodelor standard pentru examinarea apei i apelor reziduale (1992) i United States Pharmacopeia XXIII (1995).

Tabelul 2.2.1.: Descrierea microorganismelor care apar pe mediul Levine: Colonii Microorganisme 2-3 mm diametru, cu reflexe verzi-metalice, Escherichia coli n lumina reflectat i centrul nchis la culoare pna la negru. 4-6 mm diametru, cu centrul maron-gri n Enterobacter lumina direct, fr luciu metalic n lumina reflectat. 2-3 mm semitransparente necolorate. colonii vrf de ac incolore sub form de pnz de pianjen sau pan rotunde i netede Salmonella i Shidella Stafilococi cuagulazo-pozitivi Candida albicans alte tipuri de Candida uneori i Nocardia

- Mecanism: Coloranii inhib dezvoltarea bacteriilor gram-pozitive asociate. Dup Weld (1952,1953) i Vogel & Moses (1957). Levine-EMB-agar se poate utiliza cu adaos de clorhidrat de tetraciclin, care inhib ntreaga flor asociat, la identificarea Candida albicans din prelevatele clinice de analiz. Levine-EMB-agar se poate folosi de asemenea la identificarea stafilococilor coagulazo- pozitivi care cresc sub forma caracteristic a coloniilor vrf de ac i care demonstreaz o bun concordan cu testul coagulazei. ( Menolasino et al. 1960). - Compoziia (g/litru): Pepton 10; lactoz 10; di-potasiu-hidrogen-fosfat 2; iozina galben 0,4; albastru-de-metilen 0,065;agar-agar 13,5. - Preparare: Se dizolv ingredientele la cald cu agitare uoar. Autoclavare (15min la 121C). Se toarn n plci. pH: 6,8-7,2 la 25C. Mediul de cultur este clar, maron rocat. Pentru culturi de Candida, dup autoclavare se adiioneaz cu 100 mg/litru clorhidrat de tetraciclin. Prin acest adaos mediul se coloreaz n albastru. -Utilizare i evaluare: Se inoculeaz bogat prin grupe de striuri perpendiculare nesuprapuse. Timp de incubare: 1 pn la 2 zile la 37C. Plcile cu clorhidrat de tetracicin vor fi incubate pentru cultura primar a Candidei ntr-o atmosfer de 10% de bioxid de carbon.[4] o Studiul bacteriilor din genul Escherichia coli: Bacteriile din genul Escherichia se ncaderaz n grupul bacteriilor coliforme. Dup definiia dat de ISO, coliformii sunt bacili Gram (-), nesporulai, aerobi sau facultativ anaerobi, capabili s se multiplice n prezena srurilor biliare sau a altor ageni de suprafa cu proprieti echivalente.

Coliformii fermenteaz lactoza cu producere de acid i gaz n 48 ore la temperatura de 3537C. Pe aceast baz, ei regrupeaz un numr de specii care au fost identificate cu ajutorul testului IMVIC i sunt: Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae i Koxytoca, Enterobacter cloacae i E. Aerogenes, Citrobacter freundii, C. Diversus (Levinea malonotica) i C. Amalonotica (Levinea amalonotica). Dezvoltarea metodelor taxonomice moderne genetice (hibridarea ADN/ADN), moleculare (studiile imunologice), a adus foarte mari transformri n clasificarea Enterobacteriaceaelor i n special a bacteriilor coliforme. Din punc de vedere fiziologic, bacteriile coliforme au fost mprite n dou grupe: coliformi fecali (CF) caracterizai printr-o cretere rapid (16 ore) n bulion nutritiv la 41C i care sunt incapabili s se multiplice la + 4C; sunt coliformi mezofili; coliformi nefecali (CNF) de origine acvatic sau teluric, care se manifest la 4C dup 2 4 zile; sunt coliformi psihrotrofi. Coliformii care produc mai frecvent gastroenterite acute i diaree sunt: Escherichia coli enterotoxicogene i Escherichia coli enterohemoragic, care printr-un mecanism de aderare la mucoasa digestiv i secreia unei enterotoxine (verotoxina) declaneaz stri de boal. Exist mai multe serotipuri de Escherichia coli, care produc infecii de origine alimentar, cel mai frecvent serotip fiind O157:H7, care produce o diaree simpl sau cu snge, cu febr, asociat cu un sindrom hemolitic i uremic. Principalele produse alimentare prin care se transmite boala sunt cele de origine bovin: carne tocat, lapte, brnzeturi. mpreun cu un alt grup de bacterii i anume cu streptococii fecali din grupul D (S.faecalis, S.faecium, S.durans, S.avium, S.bovis), au aceeai origine n tubul digestiv, fiind considerate bacteriitest de contaminare fecal sau bacterii indicatori igienico-sanitari. Aceste bacterii sunt utilizate ca indicatori datorit unor caracteristici i anume: se gsesc n materiile fecale la om i animale; sunt mereu prezente mpreun cu bacteriile patogene; exist n numr mai mare dect patogenii; au acelai comportament ca bacteriile patogene; se pun n eviden, se numr i se identific prin metode simple. n concluzie, se poate spune c TIA se produc prin toat filiera agro-alimentar, datorit faptului c toate produsele alimentare pot fi contaminate cu microorganisme patogene. n acelai timp, microorganismele productoare de TIA se ntlnesc n toate etapele: materii prime, transformare, transport, distribuie. Din aceast cauz, personalul care lucreaz n industria alimentar i care efectueaz

distribuia alimentelor trebuie s respecte cu strictee toate regulile legate de igiena alimentar. O importan deosebit o are i personalul medical, care, prin diagnosticarea precoce i utilizarea antibioterapiei adecvate, micoreaz riscurile mbolnvirilor grave. Consumatorii rmn ns persoanele cele mai importante care trebuie s fie informate asupra apariiei acestor accidente.[5] b) Mediul Agar Wilson-Blair: Agar selectiv introdus de Wilson i Blair (1927,1931) pentru izolarea i diferenierea Salmonella typhy i alte salmonele din prelevate clinice i din alte produse. Acest mediu este n acord cu recomandrile din Farmacopeea XXIII a Statelor Unite ale Americii (1995) i recomandrile APHA (1992) pentru examinarea alimentelor. Mecanism: Verdele Brilliant i bismutul inhib puternic flora bacterian asociat. Coloniiile de salmonele H2S pozitiv se nnegresc din cauza formrii de sulfur de fier. Reducerea ionilor de bismut la bismut metalic produce luciu metalic n jurul coloniilor. (Mac Conkey 1962). - Compoziie (g/litru): Extract de carne 5; pepton din carne 10; glucoz brilliant 5; fosfat disodic 4; sulfat de fier (II) 0,3; verde briliant 0,025; indicator bismut-sulfit 8; agar-agar 15. - Preparare: Se suspend 47,5 g/litru, se agit precipitatul obinut pentru realizarea unei suspensii uniforme, se toarn n plci n straturi groase (25 ml). pH: 7,4-7,8 la 25C. Mediul de cultur de aspect tulbure trebuie s fie gri-galbui ctre verde. Dac este maroniu trebuie aruncat. Mediul proaspt preparat este puternic inhibitor i este de aceea indicat n special n cazul prelevatelor foarte contaminate. Luciul metalic al coloniilor apare deobicei numai dup 48 de ore de la incubare. Dup o pstrare timp de 4 zile la temperatura de 4C, aciunea inhibitorie a mediului nu mai este la fel de puternic i n acest caz trebuie flosit la probele mai slab contaminate; n acest caz, luciul metalic apare dup o perioad mai scurt de incubaie. Tabelul 2.2.2. Descrierea microorganismelor care apar pe mediul Agar Wilson-Blair: Aspectul coloniilor Negre n centru, margini deschise la culoare nconjurate de un precipitat negru cu luciu metalic. Mici , verde spre brun, uneori mucoide Microorganisme Salmonella, cu excepia S. parathypi A. i S. pullorum Bacterii coliforme, Seratia, proteus i altele

Utilizare i evaluare: Inoculai dispersnd proba n strat subire sau prelevatul dintr-o

cultur de pe mediul de mbogire. Incubaie: pn la aproximativ 48 de ore, la 37C. Coloniile de Salmonella se nnegresc adesea dup 18 ore de incubaie, luciul metalic aprnd cteva ore mai trziu n funcie de ct de vechi este mediul. [4] o Studiul bacteriilor din genul Salmonella: Salmonele posed dou caracteristici care explic probabil marea lor rspndire: numrul mare de animale care pot fi gazda bacteriilor (om, mamifere, psri, reptile, insecte); capacitatea mare de supravieuire a salmonelelor n mediul nconjurtor. Rezervorul de salmonele este foarte larg, cuprinznd aproape toat lumea animal. Sunt n esen parazii intestinali ai animalelor vertrebrate. n majoritatea cazurilor, bacteriile sunt izolate de la animale cu snge cald, aparinnd subspeciei enterica. Din contr, se pot ntlni sue din subspecia salmae, arizonae i diarizonae la animalele cu snge rece. n cela mai multe cazuri ele sunt patogene, dar pot s fac parte din microflora intestinal normal a acestor animale. Din punct de vedere epidemiologic, salmonelele se pot mprii n trei grupe principale: prima grup cuprinde Salmonella serotip Typhi, Salmonella serotip Parathphi A, Salmonella serotip Paratyphi C, Salmonella serotip Sendai, care nu infecteaz dect omul i sunt responsabile de febra tifoid i paratifoid cu difuzie septicemic. Aceste serotipuri nu sunt patogene pentru alte specii de animale; a doua grup cuprinde serotipuri specific adaptate la diferite specii de vertrebrate ca S.serotip Gallinarum (psri), S. serotip Abortusovis (oi), S. serotip Typhisuis i S. seroti Choleraesuis (porc), S. serotip Abortusequi (cal) i S.serotip Dublin (bovine); cteva sunt patogene i pentru om (n special Dublin i Choleraesuis); a treia grup cuprinde majoritatea serotipurilor de Salmonella care nu prefer o anumit gazd i pot infecta omul i animalele. Cultivarea i identificarea salmonelelor: Lucrrile coordonate n Europa de Edel i Kampelmacher (1969) au dat posibilitatea stabilirii normelor internaionale, care permit cercetarea salmonelelor n urmtoarelor etape: precultivarea (6- 20 h); cultivarea n medii selective lichide (24 48 h); izolarea pe medii selective gelozate (24 48 h); identificarea biochimic i serologic. Precultivarea: Este o etap care permite bacteriilor stresate s recupereze potenialelor lor. Mediul cel mai

utilizat ( n afara prodeselor lactate) este apa peptonat tamponat. Incubare la 37C. Cultivarea: Mediile selective utilizate sunt: bulion cu tetrationat de sodiu i verde briliant (Mler Kauffmann); bulion selenit de sodiu (eventual cu cistin i novobiocina); bulion Rappaport Vassiliadis (RV 10) cu verde malachit i clorur de magneziu incubare la 43C. Izolarea: Dup cultivare se utilizeaz dou medii selective solidificate: geloz cu rou de fenol i cu verdele briliant; geloz Hektoen, geloz cu sulfit de Bismut, geloz XLD (xiloz, lizin, desoxiclorat). Van der Zee (1994) a utilizat pentru detectarea specific a S.enteritidis ap peptonat cu citrat de fier amoniacal, sau novobiocin-cefsulodina sau nitrofurontoina. Identificarea: Pentru identificare se pot utiliza diferite metode: analize biochimice; analize serologice; markeri epidemiologici pentru depistarea serotipului; tehnici imunologice; bacteriofagi; sonde nucleice care servesc la realizarea hibridrilor ADN/ADN sau ADN/ARN ribozomal. [5] c) Mediul Chapman: Are o concentaie ridicat de NaCl (7,5%), ceea ce inhib creterea a numeroase bacterii, altele dect reprezentantele genurilor Staphylococcus. Mediul Chapman ofer indicaii asupra aciunii tulpinii izolate asupra manitolului: utilizarea manitolului cu producere de acid se observ prin virajul roului de fenol coninut de mediu de la culoarea roie la cea galben. Termostatarea se realizeaz timp de 24- 48 h la o temperatur ntre 3037C. O variant a mediului Chapman (nr. 110 Merck) conine gelatin, a crei hidroliz este evideniat cu o pictur de sulfat de amoniu (soluie saturat) sau soluie de acid sulfosalicilic 20%. Deoarece acest mediu este puin specific, pe suprafaa sa se pot dezvolta i alte bacterii halofile, bacterii din genul Bacillus sau corynebacterii. [5] o Studiul bacteriilor din genul Staphylococcus aureus: Staphylococcus aureus se multiplic foarte uor n aerobioz, dar i n anaerobioz. Are

exigene n aminoacizi i vitamine. Este mezofil. Stafilococii coagulozo-pozitivi sunt microorganisme care formeaz colonii tipice pe suprafaa mediilor selective de cultur i care prezint reacia coagulaza-pozitiv, producerea de coagulaz fiind luat ca un criteriu principal pentru aprecierea enterotoxicitii. Determinarea numrului de stafilococi coagulozo-pozitivi: Se nsmneaz cte 1 ml din macerat i din primele 2 diluii n cte trei eprubete coninnd 10 ml mediu de mbogire. Se incubeaz la 370C timp de 48 ore. Se fac subculturi pe unul din mediile selective. Se determin numrul probabil de stafilococi coagulozo-pozitivi cu ajutorul tabelelor lui Mc Grady. Stabilirea numrului de stafilococi coagulozo-pozitivi: Se nsmneaz cte 0.1 ml din macerat i din diluiile efectuate pe unul din cele dou medii selective. Se incubeaz la 370C i dup 24- 48 de ore se numr coloniile caracteristice. Se selecioneaz cutiile Petri n care ncepnd de la 24 de ore de incubare au crescut colonii caracteristice. Se controleaz cteva dintre aceste colonii fcndu-se subculturi. Acestea se verific prin examen microscopic, reacia catalizei i prezena coagulazei. Pentru a determina numrul coloniilor de stafilococi patogeni se recomand controlul a cinci colonii caracteristice, dac pe mediul nsmnat se gsesc pn la cincizeci colonii suspecte sau zece colonii caracteristice, dac pe mediul nsmnat se afl mai mult de cincizeci colonii suspecte. Lund n considerare numrul coloniilor confirmate de staphylococi patogeni i numrul prezumtiv, se obine numrul stafilococilor la un gram de produs. d) Pentru mediile de cultur Cetrimid Fucidin Cefaloridin, Cetrimid Acid Nalidixic, antibioticele din clasa cefalosporinelor inhib flora de asociaie i permite dezvoltarea coloniilor caracteristice de Pseudomonas aeroginosa si Pseudomonas cepacia.[5] o Studiul bacteriilor din genul Pseudominas aeroginosa: Pseudominas aeroginosa d infecii respiratorii i infecii ale meningelui. Bacteriile din genul Pseudomonas pot provoca alterri diverse, dintre care proteoliza sau modificri de miros. Evaluarea lor cantitativ se realizeaz prin cultivare pe mediul Mead-Adams (CFC) sau pe geloz cu cetrimid. n industria alimentar o importan deosebit n controlul microbiologic o au suprafeele de lucru i aparatele de lucru, aparatele de procesare ale materiei prime pentru obinerea de produse finite. Un control riguros se aplic mainilor de tocat carne, dup malaxor, pe snec i pe rotile dinate. La personal se fac controale de 2 ori pe sptmn dup maini, iar lunar se face controlul

corpomicrobiologic. Omul este purttorul de baz pentru infeciile de portaj. [5] 2.2.3. DESCRIEREA MODULUI DE LUCRU: Probele au fost recoltate pe tot lanul de producie plecnd de la materii prime, producie pn la consumator. Din fabrica de producie s-au recoltat 6 probe din chipsuri dup urmtoarea schem:

Chipsuri Ap peptonat tamponat

M. Levine M. Selenit M. Cetrimid Acid Nalidixic Test negativ E. coli spp. M. Wilson Blaire Test negativ- Pseudomonas aeroginosa

Colonii-brun inchis cu luciu metalic Test negativ- Salmonella spp. Fig. 1

La toate probele recoltate de la fabrica de producie dup efetuarea analizelor microbiologice nu au fost depistate contaminri cu enteropatogeni. n paralel au fost recoltate probe de sanitaie din incubaie pe urmtoarele puncte de lucru: - Depozit chip-suri - Ambalare - Usctor - Prjitor Pentru fiecare punct de lucru s-au prelevat ase tampoane de sanitaie, care au fost prelucrate n minim 24 h de la recoltare. Tampoanele sterile au fost descrcate n ap peptonat tamponat steril i incubate la 350C timp de 24 h. Apoi s-au fcut inoculri pe medii de izolare (mediu Levine) pentru bacterii Gram negative din genul Escherichia coli spp. i pe medii de izolare nalt selective (mediu Cetrimid Acid Nalidixic)

pentru Pseudomonas aeroginosa i pe medii nalt difereniale (mediu Wilson Blaire) pentru Salmonella spp. i pentru bacterii Gram pozitive din genul Staphylococcus aureus pe mediu Chapman. Mod de lucru: Chips-urile au fost introduse n vase sterile cu ap peptonat tamponat dup care au fost incubate 24h la 35C. n continuare s-au fcut treceri pe mediu Levine (geloz eozin-albastru de metilen) pentru E.coli i pe mediu bulion Selenit pentru Salmonella spp. i au fost incubate peste noapte 24h la 35C. De pe mediu Selenit s-au fcut n continuare treceri pe mediu nalt diferenial Wilson Blaire dup care au fost incubate 18-48h la 35C. Testele de sanitaie: Probele s-au efectuat cu tampoane sterile de unic folosin prin tergerea unei suprafee cu dimensiune de 100 cm 2 din punctele de lucru deposit chip-suri, ambalare, usctor, prjitor. Pentru fiecare punc de lucru s-au prelevat ase tampoane de sanitaie, care au fost prelucrate n minim 24h de la recoltare. Tampoanele sterile au fost descrcate n ap tamponat steril i incubate la 24h la 35C. Apoi s-au fcut inoculri n medii de izolare pentru bacterii Gram negative E.coli spp., Salmonella spp., Pseudomonas aeroginosa i bacterii Gram positive Staphylococcus aureus. Prepararea mediilor de cultur: S-a lucrat pe medii de cultur Oxoid, medii cu proprieti nalt selective i difereniale specifice microorganismelor studiate: E.coli spp., Salmonella spp., Pseudomonas aeroginosa i Staphylococcus aureus. Mediile sunt prelucrate de firma productoare conform reetelor impuse de OMS, FDA i EPA. Ele sunt gata pregtite conform reetarului metodei pentru fiecare microorganism n parte astfel nct utilizatorului rmnndui sarcina de a reconstitui mediul n ap distilat steril la balon cotat dup cntrirea exact la balana analitic impus de reet i sterilizarea mediului la 121C timp de 15 min. Dup rcirea la aproximativ 45 - 50C se repartizeaz n condiii sterile n vase conice pentru mediile lichide, n eprubete i cu cutii Petri pentru mediile solide. Mediile astfel pregtite servesc n continuare la identificarea microorganismelor ncriminate n contaminare.

SCHEMA DE DIAGNOSTIC A PRODUSELOR DE ORIGINE VEGETAL

MATERIE PRIM: CHIPSURI DIN CARTOFI

PRELUCRARE: OMOGENIZARE, TRITURARE

IZOLARE

IDENTIFICARE

CARACTERE

CARACTERE

MICROSCOPICE

DE CULTUR

BIOCHIMICE

SEROLOGICE

PRAMETRII MICROBIOLOGICI

Escherichia coli

Pseudomonas aeroginosa

Salmonella spp.

Staphylococcus aureus

Fig.2

2.3. REZULTATELE EXPERIMENTALE:

 Nr. Crt.

Analiza microbiologic a materiilor prime: Proba analizat cartofi ulei arome Microorganismul identificat Pseudomonas Salmonella aeroginosa spp. Pseudomonas cepacia -

Tabelul 2.3.1. Analiza microbiologic a materiilor prime: Escherichia coli Staphylococcus aureus -

1 2 3

La indicatorii microbiologici analizai nu au fost depistate contaminri cu microorganisme din genul Enterobacteriozelor E. coli spp. , Salmonella spp., Pseudomonas aeroginosa i din genul microorganismelor Gram positive Staphylococcus aureus. Probele de sanitaie au fost pozitive la punctul de lucru dar aceasta nu prezint o contaminare cu microorganisme patogene ci numai cu germeni saprofii normali n toate mediile de lucru, prezena lor nu prezint pericol de contaminare patogen. Analiza microbiologic asepsie-utilaje, suprafee de lucru i microaeroflora incintelor: n urma testelor de sanitaie i prelucrarea acestora s-au obinut urmtoarele rezultate care sunt prezentate n tabelul de mai jos:

Tabelul 2.3.2. Analiza microbiologic asepsie

Proba analizat 1 2 3 4 5 6 1 2 3 4 5 6 1 2 3 4 5 6 1 2 3 4 5 6

E.coli spp. -

Salmonella spp. -

Teste de sanitaie Staphylococcus aureus -

Pseudomonas aeroginosa + + -

Depozit chipsuri

Ambalare

Usctor

Prjitor

Probele de sanitaie au fost positive la punctul de lucru dar aceasta nu prezint o contaminare cu microorganisme patogene ci numai cu germeni saprofii normali n toate mediile de lucru, rezena lor nu prezint pericol de contaminare patogen.

Analiza ncrcrii microbiene pe produsul finit:

Tabelul 2.3.3. Contaminarea de portaj cu microorganismele din genul : Escherichia coli spp. , Pseudomonas aeroginosa, Salmonella spp. i Staphylococcus aureus Nr. Crt. Proba analizat Escherichia coli Microorganismul identificat Pseudomonas Salmonella aeroginosa spp Staphylococcus aureus -

1 2 3 4 5 6

chipsuri cu sare chipsuri cu cacaval chipsuri cu barbecue chipsuri cu smntn chipsuri cu cabanos chipsuri cu pitzza

Produsul finit de la fabrica SF nu a prezentat contaminri de portaj cu microorganismele din genul: Escherichia coli spp. , Pseudomona aeroginosa, Salmonella spp., Staphylococcus aureus.

chipsuri cu sare WB

chipsuri cu cacaval WB

chipsuri cu barbecue WB

chipsuri cu smntn WB

chipsuri cu cabanos WB

chipsuri cu pizza WB

pe mediul WB (Wilson Blaire) nu au fost depistai patogeni din genul Enterobacteriozelor rspunztori de toxiinfeciile alimentare la om i de zoonoze la animale.

chipsuri cu sare Levine

chipsuri cu cacaval Levine

chipsuri cu barbecue Levine

chipsuri cu smntn Levine

chipsuri cu cabanos Levine

chipsuri cu pizza Levine

- pe mediul Levine nu au fost depistai patogeni din genul Enterobacteriozelor rspunztori de toxiinfeciile alimentare la om i de zoonoze la animale.

2.4.

CONCLUZII

Pe probele analizate din unitatea de procesare SF prezentate n experimetele anterioare s-au evideniat urmtoarele: o Pe testele de sanitaie efectuate la indicatorii microbiologici analizai nu au fost depistate contaminri cu microorganisme din genul enterobacteriozelor Escherichia coli spp., Salmonella spp., Pseudomonas aeroginosa i din genul microorganismelor gram positive Staphylococcus aureus. o Probele de sanitaie au fost pozitive la punctul de lucru: depozit chip-suri, dar aceasta nu prezint o contaminare cu microorganisme patogene ci numai cu germeni saprofii normali n toate mediile de lucru, prezena lor nu prezint pericol de contaminare patogen. o Microorganismele identificate nu prezint risc infecios pentru om i animal i nici posibilitatea de a favoriza infestarea cu microorganisme patogene. o n urma efecturii celor ase seturi de experimente pe chip-suri prelevate din unitatea de procesare SF nu s-au identificat germeni din genul Escherichia coli spp., Pseudomonas aeroginosa, Salmonella spp., Staphylococcus aureus.