Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Absolvent:
MAXIMIUC Andreea-Alexandra
Braov, 2016
1. GENERALITI
Laptele este un produs foarte valoros din punct de vedere nutritiv deoarece conine n cantiti
corespunztoare surse de C, N, substane minerale i factori de cretere.
Laptele are un pH de 6,5 (laptele de vac) i rH = 12-18, (domeniu favorabil activitii
microorganismelor facultativ anaerobe). Dac laptele se pstreaz, la suprafaa lui se acumuleaz
un strat de grsime astfel nct accesul aerului este oprit, are loc reducerea potenialului redox i
se pot dezvolta astfel bacteriile anaerobe.
Datorit compoziiei sale, laptele este un mediu excelent pentru dezvoltarea numeroaselor
microorganisme, dar bacteriile lactice au condiii favorizante.
1.2.
2. MICROBIOLOGIA LAPTELUI
Laptele, prin compoziia sa chimic, este un mediu propice pentru dezvoltarea tuturor tipurilor
de microorganisme: bacterii, drojdii i mucegaiuri. Imediat dup mulgere, laptele prezint
anumite proprieti bactericide determinate de prezena unor inhibitori, anticorpi, dezvoltarea
bacteriilor fiind frnat.
Totui condiiile improprii de obinere i prelucrare a laptelui pot conduce la o infestare
microbian ce determin o deteriorare a calitii laptelui.
Unele microorganisme sunt utilizate n procesele tehnologice de prelucrare a laptelui. Din
aceast categorie putem exemplifica bacteriile lactice (Lactobacillus lactis, Lactobacillus
acidophilus, Streptococcus termophilus, Streptococcus cremoris .a.). Alte specii de
microorganisme pot fi duntoare, de exemplu: bacterii coliforme, proteolitice.
Surse de contaminare primar a laptelui
Microorganismele care contamineaz laptele nc din mamel, pot proveni:
- pe care ascendent, prin canalul mamelonului (canalul papilar), majoritatea sunt saprofite
(specii ale genurilor Micrococcus, Corynebacterium, Streptococcus etc.) i mai rar patogene
(streptococi i stafilococi patogeni);
- i/sau pe calea descendent (endogen), pe calea circulaiei sanguine i se localizeaz n
mamel, determinnd leziuni ale acesteia denumite mamite sau mastite (Mycobacterium
tuberculosis, Brucella spp., Rickettsia spp, etc.)
Primele jeturi de lapte sunt mai poluate biologic, numrul de microorganisme descrescnd pe
msur ce mulgerea progreseaz.
Surse de contaminare secundar a laptelui
Sunt mai semnificative dect cele primare i destul de variate din punct de vedere cantitativ
i calitativ, depinznd de condiiile n care laptele se produce, se manipuleaz i prelucreaz.
Principalele surse de contaminare a laptelui din afara mamelei sunt: atmosfera adposturilor
sau spaiilor unde se mulg animalele, care conine multe microorganisme antrenate de praful
degajat de paiele de aternut, furaje, fecale, vehicule, bacterii sporulate: Clostridium, mucegaiuri,
enterobacterii etc.; animalul productor de lapte particule de fecale, de pmnt, de vegetale,
fire de pr, etc.
Mulgtorul poate contamina prin mbrcminte i mini murdare, prin inflamaii la nivelul
minilor sau naso-faringiene (surse sigure de transmisibilitate uman).
n cazul mulsului mecanic, o parte din microorganisme sunt adaptate, aflate n faza de
nmulire logaritmic, relundu-i activitatea imediat ce ajung n lapte.
O parte din microorganisme sunt reprezentate de bacteriile lactice adevarate i cele
pseudolactice din genurile Escherichia i Enterobacter.
Apa este o surs important de contaminare a laptelui, atunci cnd apa impur este folosit
pentru igienizarea mamelei, la limpezirea recipientelor i utilajelor care vin n contact cu laptele
putndu-l contamina cu cantiti mari de microorganisme. [21]
2.2.
Microorganismele prezente n lapte pot fi patogene sau parial patogene i toxicogene pentru
om, motiv pentru care trebuie prevenit prezena lor n lapte, sau dac sunt prezente, trebuie
distruse sau oprite n multiplicare prin diferite mijloace.
Acestea pot provoca diferite defecte de culoare, consisten, miros i gust sau creeaz
dificulti n tehnologia de fabricare a acestora. Pot avea i aciune benefic, fiind folosite la
fabricarea diferitelor produse lactate i pentru producerea aromei i modificri fizice dorite.
Microorganismele din lapte sunt reprezentate de bacterii, levuri, fungi, ricketsii, virusuri.
Clasificarea lor ine cont de implicaiile diferitelor microorganisme n modificarea nsuirilor
organoleptice i fizico-chimice ale laptelui i produselor din lapte, din care unele modificri sunt
dorite i altele nedorite i de introducerea unor mbolnviri la om, fiind sistematizate n patogene
i nepatogene. [2]
Microogranismele nepatogene
Microorganismele care acioneaz n principal asupra lactozei din lapte, sistematizate n:
Bacterii lactice homofermentative: Lactobacillus (L. lactis, L. bulgaricus, L. acidophillus),
Streptococcus ( S. thermophilus, S. cremoris);
Bacterii lactice heterofermentative: Lactobacillus (L. brevis), Leuconostoc, Clostridium, etc.
Microorganismele care acioneaz n principal asupra proteinelor din lapte: Bacillus (B.
subtilis, B. firmus, B cereus, etc.), Clostridium (C. Butyricum, C. perfingens), Pseudomonas,
Proteus, Serratia.
Microorganismele care acioneaz n principal asupra lipidelor din lapte: Pseudomonas,
Micrococcus, Penicillium, Staphilococcus.
Microogranismele patogene
Laptele este un excelent mediu de cultur i de protejare pentru mai multe microorganisme.
Periculozitatea acestor germeni depinde de gradul iniial de contaminare a laptelui cu aceti
germeni, de diluia lui ulterioar, de tratamentele la care este supus, de timpul scurs pn la
consumarea laptelui i de ali factori.
Laptele este un excelent mediu de cultura si de protejare pentru mai multe microorganisme.
Multe bacterii patogene importante (M.tuberculosis, M.bovis, Brucella, Rickettsia) ca si toate
virusurile, nu se inmultesc in lapte.
Periculozitatea acestor germeni va depinde de gradul initial de contaminare a laptelui cu acesti
germeni, de dilutia lui ulterioara, de tratamentele la care este supus, de timpul scurs pana la
consumarea laptelui si de alti factori. Ali germeni patogeni (S.aureus, S.pyogenes, E.coli s.a.) se
pot multiplica In lapte. La temperaturi mai mici de 10-12C, activitatea celor mai multi germeni
patogeni este inhibata; aceasta este ratiunea racirii laptelui imediat dupa obtinere si mentinerea la
temperaturi joase pana la tratarea lui termica.
Se iau dou cutii Petri sterile. Se transfer n fiecare cutie cu ajutorul unei pipete sterile 1 ml
prob, dac este lichid sau 1 ml suspensie niial n cazul altor produse (dfiluia 10-1);
Se iau alte 2 cutii Petri sterile. Se transfer n fiecare cutie cu ajutorul altei pipete sterile 1 ml
din diluia 10-1 (produse lichie) sau 1 ml din diluia 10-1 (alte produse). Dac este necesar se
repet procedura cu diluiile urmtoare, folosind o nou pipet steril pentru fiecare diluie
decimal. Se selecteaz numai etapele diluiilor critice (cel puin dou diluii decimale
consecutive) pentru inocularea plcilor Petri care vor da ntre 15 i 300 colonii pe plac;
Se toarn de la 12 - 15 ml agar pentru placa de numrare la 44 - 47 oC n fiecare plac Petri.
Timpul scurs ntre sfritul preparrii suspensiei iniiale (sau a diluiei 10-1 dac produsul este
lichid) i momentul cnd mediul este turnat n plci nu trebuie s depeasc 45 min;
Se amestec atent inoculul cu mediul prin rotirea plcii Petri i se las amestecul s se solidifice
prin lsarea plcilor Petri pe o suprafa orizontal rece;
Dup solidificare complet i numai n cazul n care se suspecteaz c produsul examinat
conine microorganisme ale cror colonii pot suprapopula suprafaa mediului, se toarn circa 4
ml mediu de acoperire la 44 - 47 oC pe suprafaa mediului de inoculare. Se las s se solidifice pe
o suprafa orizontal rece;
Se ntorc plcile pregtite cu faa n jos i se pun la incubator la 30 o1oC pentru 72h3h. Nu se
suprapun mai mult de ase plci pe coloan. Coloanele cu plci trebuie s fie separate unele de
altele i de pereii i partea superioar a incubatorului.
Numrarea coloniilor
Dup perioada de incubare (72h3h), se numr coloniile de pe plci, folosind dac este
necesar echipamentul pentru numrarea coloniilor.
Placa este mprit n 4, numrndu-se coloniile dintr-un sfert de plac. Dac mai putin de un
sfert de plac este acoperit cu extinderi, se numr coloniile din partea neafectat a placii i se
calculeaz numrul corespunztor pentru toat placa. Dac mai mult de un sfert de plac este
acoperit cu colonii, nu se ia n considerare numrtoarea.
Metoda de calcul
Pentru numrtoare se utilizeaz cutiile ce conin cel mult 300 de colonii i cel puin 15
colonii.
Numrul de microorganisme pe ml sau gram de produs, N, se calculeaz, ca medie ponderat
cu urmtoarea formul:
C
N =
(n1 + 0,1n2) x d
unde; C suma coloniilor numrate n toate cutiile reinute
n1 numrul cutiilor reinute la prima diluie
n2 - numrul cutiilor reinute la a doua diluie
d factorul de diluie corespunztor primei diluii
Celulele somatic (NCS) din lapte au origine exclusiv endogen (snge sau glanda mamar) i
ele provin din fondul celular al organismului, cuprinznd celule epiteliale i leucocite
(neutrofile,macrogage, limfocite, PMN) eritrocite. Numarul leucocitelor creste ca raspuns la
infecia bacterian, leziunilor tisulare i stresului acestea constituind o arm de aparare a
organismului mpotriva infeciilor.
NCS constituie i un element foarte important al strii de sntate a animalelor.
Identificarea laptelui mastitic (metoda cu reactiv CMT). Se poate depista laptele mastitic,
determinnd n mod indirect coninutul anormal de leucocite.
Interpretare conform Regulamentului Parlamentului European i al Consiliului nr.
853/2004/CE)
NTG maxim 100.000 germeni / ml
Celule somatice maxim 400.000 / ml
Interpretare conform Regulamentului Comisiei nr. 2073/2005/CE, cu
amendamentele ulterioare
Salmonella - Absent n 25 g;
Listeria monocytogenes - 100 cfu/g;
Enterotoxina stafilococic - Nedetectabil n 25 g;
Enterobacter sakazakii - Absent n 10 g.
3.2.
Gradul de contaminare al laptelui cu aceste bacterii se poate determina prin nsmnri pe medii
speciale, evideniind puterea lor fermentativ:
-bacteriile coliforme fermenteaz lactoza la 37C, cu producere de gaze;
-Escherichia coli fermenteaz lactoza la 44C, cu producere de gaze i formare de indol.
Escherichia coli - m 100 cfu/g M 1 000 cfu/g. [22]
3.3. Proba reductazei
Aceast determinare permite s se stabileasc n mod indirect gradul de contaminare, prin
msurarea activitii reductoare a laptelui, determinat de prezena bacteriilor.
Proba reductazei cu albastru de metilen const n urmrirea duratei n care are loc decolorarea
unei probe de lapte crud incubat la temperatura de 37C i colorat cu o solu ie apoas de
albastru de metilen.
Se apreciaza ca la temperatuta de 38-40 0C capacitatea reductazic superioar o au
lactobacilii, streptococcii i bacteriile coliforme. Dac probele se menin la 22 0C la reducere
particip i bacterii din genul Achromobacter, g. Bacillus, g. Enterococcus.
Tabelul 1. Aprecierea calitii laptelui n proba reductazic cu albastru de metilen
Durata decolorrii probei n minute
Metoda clasic
Metoda rapid
330
180
Numr bacterii
pe mL
Calitatea laptelui
Categoria
5x105
Bun
120-330
60-180
5x105 - 4x106
Satisfacatoare
II
20-120
8-60
4x106 20x106
Slab
III
20
20x106
Foarte slab
IV
Culoare prob
Numr de
bacterii la 1mL
lapte
Calitatea
laptelui
Categoria
Dup 1h
Albastru
5x105
Bun
Dup 1h
Albastru violet
5x105 - 4x106
Satisfacatoare
II
Dup 1h
Ros-alb
4x106 20x106
Slab
III
Dup 20 min.
Alb
20x106
Foarte slab
IV
splarea cu soluii cldue de carbonat de sodiu 2 %, fosfat trisodic 2,5 %, legarea cozii
animalului de piciorul acestuia, splarea instalaiilor de muls cu soluie alcalin la 45 0C i
cltirea din abunden cu ap cald, existena unor platforme de igienizare a glandei mamare i a
aparatelor de muls.
Echipamentele mulgtorilor trebuie s fie curate, prul acoperit, iar minile s nu prezinte
panariii i unghiile s fie tiate. Starea de sntate a personalului lucrtor este monitorizat
permanent.
Imediat dup muls, laptele este scos din adpost, deoarece mprumut foarte uor mirosul de
grajd i este rcit n instalaii speciale (4-5 0C), cu o prealabil filtrare a laptelui. n urma filtrrii
se rein impuritile ajunse accidental n lapte.
Colectarea, transportul i depozitarea se fac n condiii de maxim igien, pentru a beneficia
de o calitate ct mai bun a laptelui.
BIBLIOGRAFIE
1. Apostu, S., Microbiologia produselor alimentare, vol. II, Editura Risoprint, Cluj Napoca, 2006
2. Necula, V., Controlul produselor agralimentare de origine animal, Editura Universitii
Transilvania Braov, Braov, 2014
3. Puchianu, Gh., Criterii microbiologice de siguran alimentar i igien a prelucrriiAlimente de origine animal, Editura Universitii Transilvania, Braov, 2012
4. Puchianu, Gh., Microbiologie Special- Lucrari practice, Universitatea Transilvania, Braov,
2012
5. http://www.creeaza.com/familie/alimentatie-nutritie/Tehnologia-aprecierii-laptelui693.php