Diagnosticul de laborator

Etapele diagnosticului virusologic:

1 orientarea diagnosticului
2 recoltarea produsului patologic
3 transportul produselor patologice
4 directiile diagnosticului virusologic
1. Orientarea diagnosticului:
- se iau date de la pacient, in cursul anamnezei
- ne intereseaza: data debutului simptomatologiei, date epidemiologice (contact
cu boli infectioase, transmisibile), calatorii in zone endemice, vaccinari
2. Recoltarea produsului patologic
- se face cu tampon steril dupa decontaminarea zonei de alti germeni
bacteriologici
Produse patologice
- sange: punctie venoasa aseptica pe anticoagulant: virusuri care disemineaza
viremic si agentii etiologici ai febrelor hemoragice.
- materiile fecale: 4-8 g in solutie de MgSO4. Se izoleaza enterovirusuri,
rotavirusuri, calicivirusuri
- secretii nazo faringiene
- spalatura nazofaringiana: tampoane sterile
- aspirat nazofaringian: speculum nazal
- lavaj traheobronsic: bronhoscopie
Se izoleaza: virusuri gripale A si B, paragripale, adenovirusuri, rhinovirusuri,
coronavirusuri, VRS, rujeolos, rubeolos, urlian
- LCR: virus rabic, arbovirusuri
- saliva: cu tampon steril; pentru virus rabic.
- lichid vezicular: colectare din vezicule, bule, pustule se face dupa dezinfectarea
prealabila a regiunii cutanate sau mucoase. Virusuri izolate: HSV1, HSV2, VZV
- urina: CMV, virus rujeolos
- tampoane vaginale, lavaj cervico-vaginal, tampon uretral: de la nivelul colului
uterin si uretrei. Virusuri izolate: herpetic, HPV; diagnostic uretrite, leziuni
veziculare
- biopsia tisulara: fragmente de organ
3. Transportul probelor recoltate
- rapid, la rece si sigur
- ambalare riguros corecta, etichetare cu semn biorisc, documentatie in legatura
cu agentul etiologic transportat
4. Directiile diagnosticului virusologic
a. izolare virala
b. demonstrarea prezentei virusului/componentelor sale
c. diagnostic serologic
a. Izolarea virusurilor:
Exista 3 sisteme de izolare: culturi celulare, OGE, animal de laborator
Izolarea pe culturi de celule determina efecte citopatice
Ex: Rabia da incluzii Negri in neuron.
Izolarea prin inoculare la animal de laborator:
Ex: Rabia produce modificari patognomonice in SNC.
b. Demonstrarea prezentei virusului/componentelor sale
- prin microscopie electronica
- prin detectie directa: a acidului nucleic sau antigenelor virale
- PCR
- ELISA: test imuno enzimatic
- reactia de imunofluorescenta
- neutralizarea efectului citopatogen: reactia de seroneutralizare
(enterovirusuri)
- inhibarea efectului viral: hemaglutinoinhibare - virusuri gripale
C. Diagnostic serologic
- pe proba unica de ser: anticorpi antivirali de tip IgM - ELISA de captura
- pe probe pereche de ser: proba 1 la debut si proba 2 la 2-3 saptamani - ELISA
tehnica indirecta (de competitie):
- seroconversia
- cresterea semnificativa a titrului de anticorpi intre cele 2 probe