@DIAGNOSTICUL DE LABORATOR AL INFECTIEI PRODUSE DE STAFILOCOC

1. RECOLTAREA PRODUSELOR PATOLOGICE – materii fecale, lichid de varsatura,

probe de apa, exudat faringian si nazal.

2. DIAGNOSTICUL BACTERIOLOGIC

a. EXAMEN DIRECT

i. Intre lama si lamela – germeni imobili, uneori capsulari

ii. Pe frotiu fixat si colorat – coci gram +, sferici, nesporulati, uneori

incapsulati. Coloratiile cu albastru de metilen si MGG evidentiaza
aspectul citologic si relatia dintre fagocite si germeni

b. IZOLARE

In vitro – pe medii de cultura simple (bulion glucozat, geloza simpla) sau medii de
cultura hiperclorurate. Stafilococii sunt aerobi, facultativ anaerobi, iar incubarea
mediilor se face la 37C fara precautii deosebite.

c. IDENTIFICARE

i. Caractere de cultura

1. Medii lichide – tulbura uniform cu depozit moderat la fundul

tubului

2. Medii solide - pe mediile cu geloza – colonii de tip S, opace,

convexe, de aspect cremos, cu d=2-3mm, marginile coloniilor
sunt neregulate, suprafata lucioasa.

ii. Caractere morfologice – coci gram +, sferici, nesporulati,

necapsulati, asezati in gramezi neregulate.

iii. Caractere biochimice

- fermenteaza hidrati de carbon (glucoza, maltoza, lactoza, zaharoza), fermenteaza

manita cu producere de acid[Acidifierea mediului: virajul clorii indicatorului de
pH(rosu de metil) in galben]

- testul catalazei – stafi poseda o catalaza capabila sa transforme peroxidul de

hidrogen in oxigen si apa. Degazarea unor bule de gaz prezenta catalazei.

iv. Caractere serologice – teste de patogenitate

 1. In vitro – testul pigmentogenezei (staf. Citrini sunt
patogeni, cei albi sunt 20%patogeni, aurei sunt 80-
90%patogeni); testul hemolizei (cei hemolitici sunt
patogeni); testul fermentarii manitei (pe Chapman (NaCl,
manita, rosu fenol ca indicator)); testul coagulazei (aparitia
unui cheag de fibrina complet semnifica o reactie pozitiva)si
fibrinolizinei(pe un mediu alc din 7 parti geloza si una
plasma oxalata care se adauga la geloza topita si racita la
50C. Dupa insemantarea tulpinii izolate si incubarea la 37C se
observa o zona clara in jurul coloniilor prin secretia
fribrinolizinei, in cazul reactiei pozitiv).

2. In vivo – testul dermonecrotic si Dolman.

v. Lizotipia – determinarea sensibilitatii unei tulpini bacteriene la

actiunea litica a unor bacteriofagi.

DIAGNOSTICUL DE LABORATOR AL INFECTIEI PRODUSE DE STREPTOCOC

PIOGEN

1. RECOLTAREA PRODUSELOR PATOLOGICE – exudat faringian, nazal, sputa, lcr,

puroi, exudat pleural, secretie vaginala; se insemanteaza in cel mult 2 ore de la
recoltare

2. DIAGNOSTICUL BACTERIOLOGIC

a. EXAMEN DIRECT – 2 frotiuri, unul colorat gram, unul cu albastru de

metilen. Pe gram: coci gram pozitivi, sferici, in lanturi, nesporulati.

b. IZOLARE – in vitro – pe medii de imbogatire(Pickel), si complexe (bulion

glucozat si geloza sange)

c. IDENTIFICARE

i. Caractere de cultura – curs

ii. Caractere morfologice – coci gram pozitivi, sferici, in lanturi,

capsulati si nesporulati

iii. Caractere biochimice - testul sensibilitatii la bacitracina

(diferentiaza strp. betaH de grup A de cei betaH nongrupA); testul
CAMP (identificarea strept. De grup B); testul SXT ( diferentierea
strept. De grup A si B, de ceilalti strept. betahemolitici)

iv. Caractere serologice

d. ANTIBIOGRAMA – nope. Folosim penicilina

3. DIAGNOSTICUL SEROLOGIC

a. Raspuns imun umoral

b. Raspuns imun celular

@DIAGNOSTICUL DE LABORATOR AL INFECTIEI PRODUSE DE

GONOCOC

Bacterie exclusiv umana si intotdeauna patogena. Produce gonoree

1. RECOLTAREA PRODUSELOR PATOLOGICE

− Secretie uretrala si vaginala cu aspect purulent, opac, cremos, cu tenta

galbuie. Se transporta utilizand mediul Stuart.

2. DIAGNOSTICUL BACTERIOLOGIC

c. EXAMEN DIRECT – frotiurile efectuate din probele recoltate se fixeaza

chimic (alcool metilic) 2-10 minute si se coloreaza albastru de metilen si
Gram. Se evidentiaza coci Gram negativi, in diplo, reniformi, cu
concavitatile fata in fata.

d. IZOLARE – este germen pretentios, necesitand medii complexe (geloza –

sange/ ser/ ascita/ chocolat; mediul Muller-hinton) cu incubare in
atmosfera de CO2 5-10%.

e. IDENTIFICARE

i. Caractere de cultura – examinarea culturii dupa 24-28h pe geloza

sange: colonii de tip “S” mici, semitransparente, usor gri “in
picatura de roua”(virulente), altele mari, plate, uscate,
granulate(nevirulente)

ii. Caractere morfologice – se evidentiata coci gram negativi, in diplo,

reniformi, nesporulati

iii. Caractere biochimice – fermenteaza glucoza

iv. Caractere serologice – PCR – metoda de determinare a gonococilor

in urina.

f. ANTIBIOGRAMA – in terapie sunt indicate Penicilina, Tetracilina,

Kanamicina
@DIAGNOSTICUL DE LABORATOR AL INFECTIEI PRODUSE DE
PNEUMOCOC

Streptococcus pneumonie – conditionat patogen determina pneumonii,

infectii purulente, oculare, cutanate, abcese

1. RECOLTAREA PRODUSELOR PATOLOGICE

− Sputa, aspirat traheak, exudat faringian, nazal, sange, LCR, lichid pleural
etc.

2. DIAGNOSTICUL BACTERIOLOGIC

a. EXAMEN DIRECT – pe frotiu se evidentiaza coci in diplo, lancelati sau “in

flacare de lumanare”, gram pozitivi, capsulati, nesporulati, imobili

b. IZOLARE

− in vivo – necesita medii suplimentate cu ser, ascita, sange,

incubate la 37 grade C in atmosfera de CO2 5% (bulion cu infuzie
proaspata de carne de bou, bulion glucozat cu thioglicolat ca agent
reducator; iar pentru antibiograma Muller Hinton cu sange)

− in vitro – soarecele alb. Dupa 24-48h de la incubare =>

soarecele moare de septicemie, izolandu-se pneumococi in cultura
pura din cord, exudatul peritoneal si splina.l

c. IDENTIFICARE

− Caractere de cultura – tulbura mediile lichide; pe cele

solide de tip geloza sange => colonii asemanatoare streptococului
viridans: de tip “S”, mici, punctiforme, cu zona de hemoliza de tip
alfa.

− Caractere morfologice – se evidentiaza coci in diplo,

lanceolati sau “in flacara de lumanare”, grami pozitivi, nesporulati,
uneori in lanturi scurte.

− Caractere biochimice – pneumococii se diferentiaza de

streptococii viridans prin: fermentarea inulinei, biloliza si
sensibilitatea la optochimn

− Caractere serologice

d. ANTIBIOGRAMA
3. DIAGNOSTICUL SEROLOGIC

@DIAGNOSTICUL DE LABORATOR AL INFECTIEI PRODUSE DE MENINGOCOC

1. RECOLTAREA PRODUSELOR PATOLOGICE – lcr, sange, exudat faringian,

exudat seros, lichid petesial.

2. DIAGNOSTICUL BACTERIOLOGIC

a. EXAMEN DIRECT - din sedimentul obtinut la centrifugarea lcr, se fac

frotiuri si se obs: coci gram negativi, in diplo, reniformi, uneori capsulati,
imobili; polimorfonucleare in numar mare.

b. IZOLARE – pe medii complexe (geloza-sange/ser/ascita/chocolat), mediul

HYL, mediul muller-hinton, cu incubare in atm de CO2 5-10%

c. IDENTIFICARE

i. Caractere de cultura - pe mediile lichide tulbura uniform mediul;

geloza sange – colonii tip S, transparente, usor gri, fara hemoliza

ii. Caractere morfologice – coci gram negativi, in diplo, reniformi,

uneori capsulati, imobili;

iii. Caractere biochimice – fermenteaza glucoza si maltoza; nu

fermenteaza levuloza, lactoza si zaharoza; produce citocrom-
oxidaza

iv. Caractere serologice

d. ANTIBIOGRAMA – terapie cu eritromicina, penicilina, rifampicina

@DIAGNOSTICUL DE LABORATOR AL INFECTIEI PRODUSE DE E. coli, Klebsi

si Proteus

Diaree maligna a noului nascut(COLI), toxiinfectii alimentare (proteus),

pneumonie (klebsi) infectii urinare, intestinale, septicemii, apendicite, peritonite,
colecistote.

1. RECOLTAREA PRODUSELOR PATOLOGICE – materii fecale, urina, bila, sange,

puroi, alimente, sputa, exudat nazo-faringian, lcr

2. DIAGNOSTICUL BACTERIOLOGIC

a. EXAMEN DIRECT – frotiu gram – bacili gram negativi, drepti sau usor
incurbati, nesp, necap, mobili (coli si proteus), imobili (klebsi) + leucocite
polimorfonucleare
 b. IZOLARE – medii sintetice fara inhibitori (geloza glucozata 2%) si medii cu
inhibitori (Levine, Istrate-Meiter). Aceste medii pot fi incubate la 37 grade.

c. IDENTIFICARE

i. Caractere de cultura

1. Geloza simpla

a. E coli – curs (hint – trecere pe medii solide)

b. Klebsi – curs (hint – medii selective cu lactoza)

c. Proteus – determina pe mediile gelozate 2% fara

inhibitori, fenomenul de invazie sau de migrare: de la
locul insamantarii cultura se intinde pe toata suprafata
placii, sub forma unor valuri succesive.

ii. Caractere morfologice – frotiu gram – bacili gram negativi, drepti

sau usor incurbati, nesp, necap, mobili (coli si proteus), imobili
(klebsi)

iii. Caractere biochimice - curs pt coli si klebsi. Proteus –

fermenteaza glucoza cu producere de gaz in cantitate mica. Nu
fermenteaza lactoza si zaharoza. Produce hidrogen sulfurat, mobil
pe miu, ureaza pozitiv, indol variabil; citrat variabil.

iv. Caractere serologice

d. ANTIBIOGRAMA

i. E coli – sensibila la beta-lactamine, aminoglicozide, antibiotice cu

spectru larg, sulfamide, chimioterapeutice urinare

ii. Klebsi – se testeaza la cefalosporine de gen III, floxacine,

colimicina, gentamicina

iii. Proteus – se testeaza la beta-lactamine, aminoglicozide, floxacine

DIAGNOSTICUL DE LABORATOR AL INFECTIEI PRODUSE DE Salmonella

3. RECOLTAREA PRODUSELOR PATOLOGICE

4. DIAGNOSTICUL BACTERIOLOGIC

a. EXAMEN DIRECT
 b. IZOLARE

c. IDENTIFICARE

i. Caractere de cultura

ii. Caractere morfologice

iii. Caractere biochimice

iv. Caractere serologice

d. ANTIBIOGRAMA

5. DIAGNOSTICUL SEROLOGIC

DIAGNOSTICUL DE LABORATOR AL INFECTIEI PRODUSE DE Shigella

6. RECOLTAREA PRODUSELOR PATOLOGICE

7. DIAGNOSTICUL BACTERIOLOGIC

a. EXAMEN DIRECT

b. IZOLARE

c. IDENTIFICARE

i. Caractere de cultura

ii. Caractere morfologice

iii. Caractere biochimice

iv. Caractere serologice

d. ANTIBIOGRAMA

8. DIAGNOSTICUL SEROLOGIC

DIAGNOSTICUL DE LABORATOR AL INFECTIEI PRODUSE DE Klebsiella

9. RECOLTAREA PRODUSELOR PATOLOGICE

10. DIAGNOSTICUL BACTERIOLOGIC

a. EXAMEN DIRECT
 b. IZOLARE

c. IDENTIFICARE

i. Caractere de cultura

ii. Caractere morfologice

iii. Caractere biochimice

iv. Caractere serologice

d. ANTIBIOGRAMA

11. DIAGNOSTICUL SEROLOGIC

DIAGNOSTICUL DE LABORATOR AL INFECTIEI PRODUSE DE Proteus

12. RECOLTAREA PRODUSELOR PATOLOGICE

13. DIAGNOSTICUL BACTERIOLOGIC

a. EXAMEN DIRECT

b. IZOLARE

c. IDENTIFICARE

i. Caractere de cultura

ii. Caractere morfologice

iii. Caractere biochimice

iv. Caractere serologice

d. ANTIBIOGRAMA

14. DIAGNOSTICUL SEROLOGIC

DIAGNOSTICUL DE LABORATOR AL INFECTIEI PRODUSE DE Kock

15. RECOLTAREA PRODUSELOR PATOLOGICE

16. DIAGNOSTICUL BACTERIOLOGIC

a. EXAMEN DIRECT
 b. IZOLARE

c. IDENTIFICARE

i. Caractere de cultura

ii. Caractere morfologice

iii. Caractere biochimice

iv. Caractere serologice

d. ANTIBIOGRAMA

17. DIAGNOSTICUL SEROLOGIC

DIAGNOSTICUL DE LABORATOR AL INFECTIEI PRODUSE DE difteric

18. RECOLTAREA PRODUSELOR PATOLOGICE

19. DIAGNOSTICUL BACTERIOLOGIC

a. EXAMEN DIRECT

b. IZOLARE

c. IDENTIFICARE

i. Caractere de cultura

ii. Caractere morfologice

iii. Caractere biochimice

iv. Caractere serologice

d. ANTIBIOGRAMA

20. DIAGNOSTICUL SEROLOGIC

DIAGNOSTICUL DE LABORATOR AL INFECTIEI PRODUSE DE HEMOPHILUS

Meningita, pneumonie, bronsita acuta, orhiepidimita, endocardita

1. RECOLTAREA PRODUSELOR PATOLOGICE – sputa, exutat faringian, nazal, lcr,

secretie conjunctivala, otica. Tampoanele de recoltare trebuie imbibate in bulion
inainte ca proba sa fie recoltata si transportate rapid la laborator.
2. DIAGNOSTICUL BACTERIOLOGIC

a. EXAMEN DIRECT – pentru sputa, exudate, aspirate etc. coloratie gram;

test direct de umflare a capsulei cu ser de tip H.infuenzae;
imunofluorescenta cu ser anticapsular conjugat cu fluoresceina.

b. IZOLARE – se folosesc medii in care celulele sanguine au fost lizate printr-

o usoara incalzire (agar chocolat) sau digestie peptica (agar Fildes)

c. IDENTIFICARE

i. Caractere de cultura – pe medii lichide cu adaus de sange ->

tulburarea mediului in primele ore dupa insamantare, apoi are loc
limpezirea acestuia datorita autolizei; Pe medii solide cu ados de
sange sau produsi de sange (prin incalzire- mediul geloza
„chocolat” Levinthal, prin digestie peptica- mediul Fildes) determina
colonii foarte mici de tip „S”, neconfluente ( aspect de „picaturi de
roua”); Coloniile tulpinilor virulente, proaspat izolate, care contin
capsula, au aspect mucoid.

ii. Caractere morfologice - cocobacili gram -. (curs)

iii. Caractere biochimice – carbohidrati cu valoare de identificare:

glucoza, zaharoza, lactoza, xiloza, manitol si riboza.

iv. Caractere serologice

@DIAGNOSTICUL DE LABORATOR AL INFECTIEI PRODUSE DE Brucella

21. RECOLTAREA PRODUSELOR PATOLOGICE

22. DIAGNOSTICUL BACTERIOLOGIC

a. EXAMEN DIRECT

b. IZOLARE

c. IDENTIFICARE

i. Caractere de cultura

ii. Caractere morfologice

iii. Caractere biochimice

iv. Caractere serologice

 d. ANTIBIOGRAMA

23. DIAGNOSTICUL SEROLOGIC

@DIAGNOSTICUL DE LABORATOR AL INFECTIEI PRODUSE DE diferic

1. RECOLTAREA PRODUSELOR PATOLOGICE – exudat faringian, nazal, secretie

conj, vaginala

2. DIAGNOSTICUL BACTERIOLOGIC

a. EXAMEN DIRECT – col. Gram – bacili gram + la limita cu extremitati

maciucate

b. IZOLARE – coloniile suspecte se replica pe mediul Loffer

c. IDENTIFICARE

i. Caractere de cultura – pe Loffer – colonii albe, granulare in

“spermantet”

ii. Caractere morfologice

iii. Caractere biochimice – pe hiss – fermenteaza glucoza, maltoza,

levuloza. NU zaharoza; produce ureaza

iv. Caractere serologice

d. ANTIBIOGRAMA – penicilina, eritromicina, cloramfenicol

3. DIAGNOSTICUL SEROLOGIC

@DIAGNOSTICUL DE LABORATOR AL INFECTIEI PRODUSE DE

PSEUDOMONAS

1. RECOLTAREA PRODUSELOR PATOLOGICE - sange, lcr, lichid articular, urina

2. DIAGNOSTICUL BACTERIOLOGIC

a. EXAMEN DIRECT

b. IZOLARE – germeni nepretentiosi. medii uzuale (bulion nutritiv), selective

(istrate meiter)

c. IDENTIFICARE

i. Caractere morfologice – gram – bacili gram neg, drepti, nesp,

necap, izolati sau in lanturi scurte
 ii. Caractere de cultura – germeni aerobi, nepretentiosi. Pe agar
nutritiv dezvolta colonii de tip 1 (mari, bombate), tip 2(S) si tip 3 (R)

iii. Caractere biochimice – TSI si MIU – nu fermenteaza lactoza,

zaharoza; oxideaza glucoza; nu produhe H sulfurat, indol neg,
ureaza neg, mobilitate pozitiv.

iv. Caractere serologice

d. ANTIBIOGRAMA

3. DIAGNOSTICUL SEROLOGIC

@DIAGNOSTICUL DE LABORATOR AL INFECTIEI PRODUSE DE TREPONEMA

PALLIDUM

1. RECOLTAREA PRODUSELOR PATOLOGICE – prelevare din serozitati

nesangerande de la nivelul sancrilui, placilor mucoase, mai rar de punctie
ganglionara

2. DIAGNOSTICUL BACTERIOLOGIC

a. EXAMEN DIRECT

i. Pe preparatul proaspat, intre lama si lamela – apar sub forma

de filamente subtiri

ii. Coloratie gram – gram neg, se col. Roz palid; impregnatie

argentica – negre; col. Vago - violet

b. IZOLARE – nu in vitro; injectie intratesticulare la iepure => in 7-14d orhita

c. IDENTIFICARE

i. Caractere de cultura

ii. Caractere morfologice

iii. Tehnica imunofluorescentei directe – frotiu acoperit cu Ac anti-

TP marcati cu subst fluorescenta si diluati intr-un contracolorant
(albs de evans). Dupa spalare se examineaza la UV

iv. Tehnica imunofluorescentei indirecte

d. ANTIBIOGRAMA

3. DIAGNOSTICUL SEROLOGIC
Urocultura

Exudat faringian

coprocultura