Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
VETERINARĂ CLUJ-NAPOCA
ŞCOALA DOCTORALĂ
FACULTATEA DE MEDICINĂ VETERINARĂ
TEZĂ DE DOCTORAT
CONDUCĂTOR ŞTIINŢIFIC
Prof. univ. dr. OVIDIU ROTARU
Prof. univ. dr. CONSTANTIN VASIU
CLUJ-NAPOCA
2011
CUPRINS
Teză Rezumat
Partea I Stadiul actual al cunoaşterii ............................................................ 9 5
Introducere .......................................................................................................... 10 5
Cap. I. Fenomenul radiaţiei electromagnetice de frecvenţă ridicată
(microundele)................................................................................... 11 6
1.1. Descrierea fenomenului de radiaţie electromagnetică de
frecvenţă ridicată (microundele)....................................... 11
1.2. Factorii care influenţează încălzirea cu microunde........... 16
1.3. Principiul de funcţionare al instalaţiilor cu microunde..... 23
1.4. Aplicaţii ale microundelor în condiţionarea alimentelor... 28
Cap. II. Analiza argumentelor pro şi contra utilizării microundelor în
condiţionarea alimentelor................................................................ 30
2.1. Argumente pro utilizării microundelor în condiţionarea
alimentelor........................................................................ 30
2.2. Argumente contra utilizării microundelor în
condiţionarea alimentelor................................................. 38
Cap. III. Stadiul actual al informaţiilor şi cercetărilor referitoare la
utilizarea microundelor în condiţionarea laptelui ca aliment......... 40
Cap. IV. Efectele căldurii asupra laptelui..................................................... 45
Partea a II-a Cercetări proprii............................................................................. 48 7
Cap. V. Motivaţia temei, obiectivele cercetării, materialul şi metodele de
lucru................................................................................................ 49 7
5.1. Motivaţia temei................................................................. 49 7
5.2. Obiectivele cercetării........................................................ 51 8
5.3. Materialele utilizate........................................................... 52 8
5.3.1. Materialul biologic.............................................. 52 8
5.3.2. Materiale fizice.................................................... 53 8
5.4. Metodele de lucru.............................................................. 54 9
5.4.1. Metoda aplicată pentru determinarea variaţiei
temperaturii laptelui tratat la microunde............. 54
5.4.2. Metoda aplicată pentru examenul organoleptic al
laptelui tratat la microunde................................. 54
5.4.3. Metoda aplicată pentru determinarea
principalilor parametrii fizico-chimici ai laptelui 56
5.4.4. Metodele aplicate pentru analiza diferitelor
tipuri de microorganisme din lapte...................... 57
5.4.5. Prelucrarea statistică............................................ 59
Cap. VI. Stabilirea efectelor tratamentului cu microunde asupra însuşirilor
senzoriale ale laptelui..................................................................... 62 9
6.1. Rezultatele cercetărilor privind efectele tratamentului cu
microunde asupra însuşirilor senzoriale ale laptelui........ 62 9
6.2. Discuţia rezultatelor......................................................... 64 10
6.3. Concluzii.......................................................................... 65
2
Cap. VII. Dinamica procesului de încălzire a laptelui în cuptorul cu
microunde....................................................................................... 67 11
7.1. Rezultatele cercetărilor privind dinamica procesului de
încălzire a laptelui în cuptorul cu microunde.................... 67 11
7.2. Discuţia rezultatelor.......................................................... 76 13
7.3. Concluzii........................................................................... 77
Cap. VIII. Evaluarea efectelor microundelor asupra marilor componenţi ai
laptelui............................................................................................ 79 14
8.1. Rezultatele cercetărilor privind marii componenţi ai
laptelui................................................................................ 80 14
8.2. Interpretarea rezultatelor.................................................... 106
8.2.1. Variaţia parametrilor analizaţi în timp................. 106
8.2.2. Determinarea valorilor critice pentru parametrii
monitorizaţi.......................................................... 110
8.2.3. Evidenţierea eventualelor interdependenţe între
parametrii monitorizaţi........................................ 119
8.3. Discuţia rezultatelor........................................................... 122 17
8.4. Concluzii............................................................................ 129
Cap. IX. Evidenţierea efectelor microundelor asupra microorganismelor
din lapte........................................................................................... 134 18
9.1. Cercetări privind efectele microundelor asupra numărului
total de germeni din lapte.................................................. 134 18
9.1.1. Rezultatele cercetărilor privind numărul total de
germeni din lapte................................................. 134 18
9.1.2. Determinarea valorii critice pentru N.T.G. ........ 137
9.1.3. Discuţia rezultatelor............................................ 144 19
9.1.4. Concluzii............................................................. 146
9.2. Cercetări privind efectele microundelor asupra speciilor
patogene de stafilococi coagulază-pozitivi
(staphilococcus aureus şi alte specii) din lapte.................. 148 19
9.2.1. Rezultatele cercetărilor privind stafilococii
coagulază-pozitivi inoculaţi în laptele crud.......... 148
9.2.2. Discuţia rezultatelor.............................................. 150
9.2.3. Concluzii............................................................... 150
9.3. Cercetări privind efectele microundelor asupra speciei
patogene de Escherichia coli pozitive la β- glucuronidază
din lapte............................................................................. 151 20
9.3.1. Rezultatele cercetărilor privind Escherichia coli
pozitive la β- glucuronidază inoculată în laptele
crud....................................................................... 151
9.3.2. Discuţia rezultatelor............................................. 153
9.3.3. Concluzii............................................................... 153
9.4. Cercetări privind efectele microundelor asupra
microorganismelor din lapte realizate prin aplicarea
analizei bacterioscopice...................................................... 154 20
3
9.4.1. Rezultatele cercetărilor privind analiza
bacterioscopică..................................................... 154
9.4.2. Discuţia rezultatelor.............................................. 159
9.4.3. Concluzii............................................................... 160
Cap. X. Concluzii şi recomandări.................................................................. 161 21
10.1. Concluzii............................................................................ 161 21
10.2. Recomandări...................................................................... 164 23
Bibliografie ......................................................................................................... 165
Listă lucrări
publicate .......................................................................................................... 181
Rezumat .......................................................................................................... 182
4
PARTEA I
STADIUL ACTUAL AL CUNOAŞTERII
INTRODUCERE
Atât detractorii laptelui ca aliment cât şi adepţii convinşi ai utilizării lui în acest
sens sunt nevoiţi să recunoască situaţia de necontestat care demonstrează fără drept de
apel că, laptele este cvasi indispensabil ca hrană într-o anumită perioadă a existenţei
oricărui individ uman pentru ca în continuare să reprezinte pentru mulţi dintre noi un
aliment agreabil şi necesar.
Că în lapte şi prin lapte, ca prin oricare alt aliment, se pot încorpora şi acţiona
numeroase pericole fizice, chimice şi microbiologice care expun consumatorul la riscuri
fizice, chimice şi microbiologice este cu siguranţă unicul argument ştiinţific fundamentat
cu care trebuie să fim de acord.
Pentru a clarifica realitatea kindunologică mai sus descrisă este din punct de
vedere ştiinţific necesară iniţierea de analize de pericol şi riscuri pe laptele ca aliment cu
scopul direct şi nemijlocit de a stabili o gestionare şi o comunicare corectă privind acest
aliment şi impactul său faţă de sănătatea, viaţa şi integritatea consumatorilor.
Teza "Efectele radiaţiilor electromagnetice de frecvenţă ridicată
(microundele) în condiţionarea laptelui pentru consum" cuprinde următoarele părţi
principale: introducere, studiu bibliografic, motivaţie şi obiective, cercetări proprii,
concluzii şi referinţe bibliografice.
Studiul bibliografic este structurat în 4 capitole în care: este descris fenomenul
radiaţiei electromagnetice de frecvenţă ridicată, sunt analizate argumentele pro şi contra
utilizării microundelor în condiţionarea alimentelor, este studiat stadiul actual al
informaţiilor şi cercetărilor referitoare la utilizarea microundelor în condiţionarea laptelui
ca aliment precum şi efectele căldurii asupra laptelui.
Partea de cercetări proprii cuprinde 6 capitole care descriu: motivaţia temei,
obiectivele cercetării, materialul şi metodele de lucru, investigaţiile întreprinse în vederea
atingerii obiectivelor propuse, rezultatele acestora precum şi concluziile desprinse şi
recomandările.
5
CAPITOLUL I. FENOMENUL RADIAŢIEI ELECTROMAGNETICE DE
FRECVENŢĂ RIDICATĂ (MICROUNDELE)
6
Fiercare sistem de microunde este alcătuit în mod normal din 3 componente de
bază: un generator de microunde numit magnetron care emite energie radiantă de
frecvenţă înaltă cu centre de încărcare pozitivă şi negativă ce îşi schimbă direcţia de
miliarde de ori pe secundă, un dispozitiv de dirijare a microundelor şi un spaţiu închis în
care are loc procesul propriu-zis (AMARFI şi colab., 1996).
PARTEA A II-A
CERCETĂRI PROPRII
7
5.2. OBIECTIVELE CERCETĂRII
8
tratată la microunde pentru 60 s şi t120 = 120 s, proba de lapte a fost tratată la microunde
pentru 120 s.
5.4. METODELE DE LUCRU
Proprietăţile organoleptice ale laptelui se examinează conform normelor legale
din STAS-ul 6345-61/1971.
Dinamica procesului de încălzire a laptelui tratat la microunde este studiată cu un
dispozitiv de măsurare a temperaturii de tip sondă electrică HEIDOLPH.
Evaluarea modificărilor marilor componenţi ai laptelui: grăsime, proteină, lactoză,
substanţă uscată, precum şi a densităţii, s-a realizat cu spectrofotometrul Lactoscope
FTIR, produs de firma Delta Instruments.
Efectele microundelor în gestionarea pericolelor-riscurilor microbiologice asupra
laptelui s-au determinat prin aplicarea stas-urilor corespunzătoare, iar în cazul analizei
bacterioscopice a pericolelor biologice s-au aplicat metode curente de colorare a
bacteriilor pe frotiuri.
În prelucrarea statistică a datelor s-au determinat următorii indici statistici: media
aritmetică (xm), abaterea standard (s), coeficientul de variaţie (V %), valoarea minimă
(xmin), valoarea maximă (xmax), diferenţa dintre aceste valori (D, D = xmax- xmin),
coeficientul de corelaţie liniară (r) şi t calculat.
9
În toate variantele, s-au urmărit modificările de aspect, culoare, consistenţă, miros
şi gust în funcţie de timpul de expunere la cuptorul cu microunde.
Miros / Smell
Culoare / Color
Consistenţă / Consistency
Aspect /Aspect
Fig. 1. Normograma laptelui tratat la microunde pentru cele 6 intervale de timp diferite
10
CAPITOLUL VII. DINAMICA PROCESULUI DE ÎNCĂLZIRE A
LAPTELUI ÎN CUPTORUL CU MICROUNDE
11
90
Fig. 2. Evoluţia termică a celor 3 centrii de încălzire în 250 ml lapte expus la microunde
100
90
Temperatura, °C / Temperature, °C
80 S-Zona
70 Suprafaţă/
Surface level
60
50 M-Zona
40 Mediană/
Median level
30
20
P-Zona
10 Profundă/Base
level
0
0 15 30 45 60 75 90 105 120
Timp, s/ Time, s
12
¾ Dezvoltarea procesului de încălzire a laptelui în operaţia de încălzire-fierbere
clasică
Doza de 250 ml lapte crud a fost tratată termic într-un recipient de inox la flacăra
unui aragaz. Determinarea temperaturii s-a realizat de la nivelul aceloraşi zone ale
recipientului ca şi în cazul microundelor: respectiv suprafaţă, zonă mediană şi
profunzime.
Evaluarea mediei temperaturilor înregistrate în laptele pus la fiert evidenţiază
următoarea configuraţie grafică (figura 4).
120
100
Temperatura, °C/Temperature, °C
600
80
60
60
40
30 120
45
20 15
0
0
0 100 200 300 400 500 600 700
Timp, s/Time, s
Fig. 4. Dinamica procesului de înălzire a laptelui (250 ml) prin procedeul clasic
13
CAPITOLUL VIII. EVALUAREA EFECTELOR MICROUNDELOR
ASUPRA MARILOR COMPONENŢI AI LAPTELUI
y1=a1+b1x
3.05 y2=a2+b2x
3 Punct critic/
Xm Grăsime, % / Xm Fat, %
Fig. 5. Obţinerea punctului critic, corespunzător valorii critice a mediilor aritmetice ale
valorilor concentraţiei de grăsime, y critic grăsime
14
y1=a1+b1x
Xm Proteină, % / Xm Protein, %
3.6
y2=a2+b2x
3.55 Punct critic/
3.5 Critical point
3.45
3.4
3.35
3.3
3.25
3.2
0 20 40 60 80 100 120 140
Timp, s / Time, s
Fig. 6. Obţinerea punctului critic, corespunzător valorii critice a mediilor aritmetice ale
valorilor concentraţiei de proteină, y critic proteină
y1=a1+b1 x
1.0335 y2=a2+b2 x
Xm Densitate, g/ml / Xm Density, g/ml
Fig. 7. Obţinerea punctului critic, corespunzător valorii critice a mediilor aritmetice ale
valorilor densităţii, y critic densitate
y1=a1+b1x
12.4
y2=a2+b2x
12.2
Xm Substanţă uscată, % / Xm Dry
Punct critic/
12 Critical point
11.8
11.6
11.4
11.2
11
substance, %
10.8
10.6
0 20 40 60 80 100 120 140
Timp, s / Time, s
Fig. 8. Obţinerea punctului critic, corespunzător valorii critice a mediilor aritmetice ale
valorilor concentraţiei de substanţă uscată, y critic substanţă uscată
15
y1=a1+b1x
5.3 y2=a2+b2x
Xm Lactoză, % / Xm Lactose, %
5.2
Punct critic/
5.1 Critical point
5
4.9
4.8
4.7
4.6
4.5
4.4
4.3
0 20 40 60 80 100 120 140
Timp, s / Time, s
Fig. 9. Obţinerea punctului critic, corespunzător valorii critice a mediilor aritmetice ale
valorilor concentraţiei de lactoză, y critic lactoză
În tabelul 1, sunt trecute valori critice ale parametrilor analizaţi.
Tabelul 1
Valorile critice y critic şi x critic obţinute de pe graficele anterioare
Nr. crt. Parametru y critic x critic, s
16
8.3. DISCUŢIA REZULTATELOR
17
CAPITOLUL IX. EVIDENŢIEREA EFECTELOR MICROUNDELOR
ASUPRA MICROORGANISMELOR DIN LAPTE
y1=a1+b1x
log (N.T.G.) pe ml / log (T.N.G.) in 1 ml
8.00E+00 y2=a2+b2x
7.50E+00 Punct critic/
7.00E+00 Critical point
6.50E+00
6.00E+00
5.50E+00
5.00E+00
4.50E+00
4.00E+00
3.50E+00
3.00E+00
0 20 40 60 80 100 120 140
Timp, s / Time, s
Fig. 10. Obţinerea punctului critic corespunzător valorii critice a N.T.G., y N.T.G.
18
9.1.3. Discuţia rezultatelor
Reducerea numărului total de germeni în urma tratării alimentelor la microunde a
fost pus în evidenţă şi în literatura de specialitate. Astfel, scăderea numărului de
microorganisme se poate explica prin faptul că datorită absorbţiei energiei emise de către
microunde, temperatura produselor creşte rapid, dezactivând microorganismele şi
determinând pasteurizarea sau sterilizarea acestora (GOLDBLITH et al., 1967; ROSÉN,
1972; FUJIKAWA et al., 1992; VALSECHI et al., 2004; DATTA et al., 2000;
HEDDLESON et al., 1994). De asemenea, în unele studii se precizează că unii compuşi
intermediari ai reacţiilor Maillard care au loc în timpul expunerii alimentelor la
microunde acţionează ca şi agenţi mutageni pentru unele bacterii (MAZZEI et al., 2009),
însă acest fapt este contrazis de alte studii (SHAZMAN et al., 2007).
În alte cercetări, distrugerea microorganismelor a fost atribuită efectelor
nontermale, datorită necesităţii atingerii unei temperaturi finale mai joase pentru această
distrugere. Pentru explicarea inactivării microorganismelor cu ajutorul microundelor pe
cale nontermală, se utilizează 4 teorii predominante: încălzirea selectivă, electroporeza,
ruperea membranei celulare şi cuplarea câmpului electromagnetic (CROSS et al., 1982;
FUNG et al., 1980; KOZEMPEL et al., 1998).
Deşi există o controversă în ceea ce priveşte moartea microorganismelor indusă
de către microunde, nu există nici un dubiu în legătură cu efectul distructiv al
microundelor asupra acestora, mai mult nici un patogen nu s-a raportat ca fiind rezistent
acţiunii microundelor (YAGHMAEE et al., 2005; DATTA et al., 2000).
19
9.3. CERCETĂRI PRIVIND EFECTELE MICROUNDELOR ASUPRA SPECIEI
PATOGENE DE ESCHERICHIA COLI POZITIVE LA β- GLUCURONIDAZĂ DIN
LAPTE
Ca şi în cazul patogenilor studiaţi anterior, numărul de germeni de Escherichia
coli pozitivă la β- glucuronidază pe 1 ml probă de lapte a fost imens în cazul probei
netratate la microunde, arătând o infestare masivă demonstrată de creşterea în gazon, ca
apoi sa scadă în totalitate pentru proba tratată timp de 15 s cât şi pentru restul probele
tratate timp de 30, 45, 60 şi 120 s la cuptorul cu microunde.
Scăderea semnificativă a speciilor patogene de stafilococi coagulază-pozitivi şi de
Escherichia coli pozitive la β- glucuronidază în urma acţiunii microundelor pe durate
diferite de timp este susţinută şi de către literatura de specialitate.
20
CAPITOLUL X. CONCLUZII ŞI RECOMANDĂRI
10.1. CONCLUZII
21
s-au obţinut valorile critice: 2,59 % pentru grăsime după 28,18 s de expunere la
microunde; 10,9 % substanţă uscată după 30,01 s; 3,27 % proteină după 32,09 s;
4,45 % lactoză după 32,96 s şi o densitate de 1,03 g/ml după 35,33 s.
valoarea medie a timpilor critici, calculată ca şi medie aritmetică, este de 31,71 s
şi reprezintă momentul de timp în care o probă de lapte supusă acţiunii
microundelor suferă primele modificări accentuate din punctul de vedere al
compoziţiei fizico-chimice.
evaluând interdependenţele dintre parametrii analizaţi prin determinarea
coeficienţilor de corelaţie liniară între diferitele perechi, putem spune că între unii
parametrii există o legătură semnificativă, cum este cazul substanţei uscate şi al
lactozei sau al substanţei uscate şi proteinei, dar între alţii nu există o corelaţie
puternică, deci ei nu se influenţează foarte mult unul pe celălalt, cum este cazul
subtanţei uscate şi al densităţii sau cel al grăsimii şi al densităţii.
22
intervalul optim de tratament s-a dovedit a fi între 15 şi 30 s, situaţie în care
integritatea şi viabilitatea bacteriilor este anulată, dar componentele laptelui nu au
suferit încă modificări semnificative.
10.2. RECOMANDĂRI
23